UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N.

1 GENERALIDADES OBJETIVOS: Conocer y poner en practica las normas bsicas de bioseguridad impartidas en el laboratorio clnico Adquirir destreza en la lectura del frotis de sangre perifrica y conocer su forma de reporte

FUNDAMENTO: NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO CLINICO El bacterilogo cada da tiene mas exigencias en su profesin para dar un resultado de ptima calidad, pero de igual manera es un riesgo mayor que corre con la manipulacin de las muestras que tiene que procesar. or ello es de gran inters conocer el con!unto de normas y procedimientos que garantizan el control de los factores de riesgos fsicos, qumicos y biolgicos que pudieran afectar al personal "inculado al laboratorio clnico o a los miembros de la comunidad. #ormas bsicas de bioseguridad que debe cumplir un traba!ador en el laboratorio son$ %a"arse las manos con agua y !abn &o el antisptico necesario' antes de iniciar cualquier procedimiento, despus de terminado el procedimiento &sobre todo si manipul material y(o especmenes de carcter infeccioso' e incluso en el momento de abandonar el rea de traba!o. %impiar y desinfectar pre"iamente el rea de traba!o as no se "alla a traba!ar con materiales de carcter infeccioso. )na "ez limpia, debe la"arse nue"amente las manos. En los mesones no se debe colocar material personal que sir"a de "e*iculo infeccioso como bolsos, c*aquetas, libros, etc. )tilizar el equipo de proteccin para todo tipo de proceso$ +ata, uniforme, guantes, gorro, tapabocas, zapatos de suela no deslizable.

,odo el material a colocarse debe estar estril en el momento de uso y una "ez termina el procedimiento debe descartarse aquel material que es descabale y desinfectar y(o esterilizar las prendas contaminadas mediante procesos adecuados. #o se debe lle"ar la ropa de laboratorio fuera de este y debe tenerse a la mano otra bata o !uego de ropa limpioestril para salir del mismo El personal no debe introducir ni consumir alimentos en las reas del laboratorio. #o se debe guardar comida ni bebidas en los refrigeradores ni en ninguna de las zonas de traba!o. ,ampoco se debe permitir la aplicacin de cosmticos ni el uso de anillos dentro del laboratorio. .e recomienda que las damas aseguren por detrs su cabello, de forma tal que no entren en contacto con superficies contaminadas. #o pipetear con la boca, usar ayudas mecnicas tales como dispensadores, bulbos y(o pipetas automticas. E"itar la exposicin a gases, "apores y aerosoles por medio de la campana de gases y extraccin, especialmente con sustancias "oltiles y toxicas )tilizar las diferentes cabinas de seguridad para traba!ar tanto elementos infecciosos como txicos. Cada laboratorio debe tener un equipo de emergencia para derrames con el fin de neutralizar reacti"os cidos, bases y sol"entes cuando estos se derramen, e instruir a los empleados sobre su uso. Cada laboratorio debe tener materiales y reacti"os necesarios para realizar los procesos de desinfeccin y esterilizacin necesarios #o permitir la entrada de ni/os y animales a las reas de traba!o Autorizar el paso a reas del laboratorio, solo a las personas que *ayan sido informadas sobre los posibles riesgos y que satisfagan los requisitos que se exigen para entrar ,erminado el proceso tcnico se deben la"ar las manos ba!o las condiciones de asepsia que tenga estandarizadas el laboratorio )na "ez terminada las labores el estudiante debe recoger todo el material de traba!o, descartar cada material en su sitio y condicin apropiada, limpiar y desinfectar nue"amente los mesones, de!ar las sillas deba!o de los mismos, ordenar el sitio de traba!o, asegurarse que las lla"es de gas, agua y otros estn perfectamente cerradas y la"arse las manos antes de abandonar el sitio de traba!o Cada laboratorio de acuerdo con su perfil ocupacional, "a agregando normas a sus traba!adores con el fin de garantizar su seguridad en el laboratorio %as agu!as y las !eringas usadas antes de descartarlas debe pasar por el 0uardin1 nunca "uel"a a colocar la agu!a en su funda, y deben ser incineradas

Al manipular muestras biolgicas utilizar guantes siempre y con muc*a precaucin, marcar correctamente todos los reacti"os que se utilicen. PRACTICA: ANALISIS DE EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA FROTIS DE SANGRE PERIFERICA El frotis de sangre perifrica es un modelo e"aluati"o de las diferentes lneas sanguneas que sir"e para "alorar el funcionamiento general de la m2dula sea a tra"s de sus componentes celulares, lo cual implica la e"aluacin de las lneas eritrocticas, leucocitaria y megacarioctica, determinando anormalidades en forma, tama/o, color e inclusiones citoplasmticas, dando una medida cuantitati"a y cualitati"a de los elementos que lo conforman El 3. es un refle!o del buen funcionamiento de la m2dula sea y de los diferentes factores que influyen en la presencia de clulas maduras en calidad y cantidad normal en el te!ido sanguneo. Es necesario realizar una e"aluacin acertada para poder conducir con acierto los *allazgos patolgicos. ara un buen examen del 3. es necesario realizar un buen extendido de sangre perifrica realizado con muestras de sangre obtenidas por puncin "enosa y(o capilar SIN ANTICUAGULANTE MATERIALES Y EQUIPOS: Aceite de inmersin 4icroscopio %minas de coleccin.

PROCEDIMIENTO: Esco!a una lamina y enfquela en el microscopio En un aumento de ba!o poder &56x' y mirando el cuerpo del extendido, esco!a 56 campos microscpicos uniformes y *omogneos donde los eritrocitos se encuentren bien distribuidos para la obser"acin de la morfologa de glbulos ro!os, glbulos blancos y plaquetas 7ealizar el informe de forma correcta teniendo en cuenta lo siguiente$

VALORACION DE GLOBULOS ROJOS: %os glbulos ro!os que no presentan anormalidades se informa como$ NORMALES EN MORFOLOGIA. En aquellos 3. en los que se encontramos anormalidades se reporta cada patologa.

ANISOCITOSIS:

El trmino anisocitosis implica presencia de clulas de diferente tama/o, para e"aluarla se tiene en cuenta el n8mero de estas en el promedio de 56 campos y se reporta as$ NORMAL 6-9 A<E LIGERA : - 59 5:.5 - 5= MODERADA 5: - ;6 5=.5 - >6 MARCADA 4ayor de ;6 4ayor de >6.5

%os contadores automatizados actuales nos informan el grado de dispersin en tama/o en el e!e ? de los glbulos ro!os contados, utilizando el *istograma de frecuencias de *emates calcula el A<E &anc*o de distribucin de eritrocitos' o 7<@. or lo tanto, un A<E mayor de 59,9 &"alor normal encontrado para nuestra poblacin' podra relacionarse con anisocitosis, si esta acompa/ado de AC4 disminuido, podramos pensar en anisocitosis con microcitosis, y si esta aumentado este AC4, la relacionaramos con macrocitosis. .e debe tener cuidado con estas apreciaciones, ya que en la practica se puede obser"ar el A<E aumentado por causas diferentes a la anisocitosis, como es el caso de poiquilocitosis con microesferocitosis, esquistocitos, anulocitos, leptocitos, debido a que estas clulas son de menor tama/o y pueden tener un registro en "olumen menor que en un discolito, llegando incluso a ser menores de ;6 f. ,ambin se puede encontrar un AC4 aumentado por el dimetro de o"alocitos, eliptocitos, sin necesidad de *ablar de clulas macrocticas, o detectar el A<E aumentado con un AC4 normal en pacientes con anemias dimorfas, en los que "amos a encontrar poblaciones tanto de micro como de macro en el 3. . %a importancia es corroborar los resultados que arro!an los equipos con la obser"acin minuciosa del 3. ara e"aluar la intensidad de micro y macrocitosis se tiene en cuenta los siguientes parmetros$ .e informa por cruces dependiendo de la cantidad de glbulos ro!os microcticos o macrocticos en un promedio de 56 campos. ara realizar la macrocitosis y la microcitosis con el AC4 tenemos en cuenta los siguientes parmetros$ INDICE 4icro$ AC4 &fl' NORMAL 6 -9 =5 - BB LIGERA (+) : - 59 =6 - C6 MODERADA (++) 5: - ;6 :B - :6 MARCADA (+++) 4ayor de ;6 4enor de :6

4acro$ AC4 &fl'

=6 - BB

566 - 56=

56B - 5>6

4ayor de 5>6

POIQUILOCITOSIS: Dablamos de poiquilocitosis cuando encontramos "ariaciones en la forma de los glbulos ro!os. .e informa como ligera, moderada o marcada con presencia deEE y se especifica a expensas de que esta dada y en que intensidad cada una. NORMAL 6 -9 LIGERA (+) : - 59 MODERADA (++) 5: - ;6 MARCADA (+++) 4ayor de ;6

E!emplo$ moderada poiquilocitosis con presencia de codocitos &FF' y eliptocitos &F' El anterior dato se obtiene del promedio de cada una de las diferentes formas y el "alor total de la poiquilocitosis ser la sumatoria de todas. .e tendr en cuenta tanto la sumatoria de todas las clulas de diferente forma como el dato indi"idual de cada una de las formas. Es necesario corroborar todo dato de los equipos con la obser"acin del 3. . or e!emplo, los esferocitos, a pesar de tener un tama/o menor que los discocitos, el "olumen es muy seme!ante a estos, por lo tanto no afecta el AC4. En la siguiente tabla se obser"a las diferentes formas con la nomenclatura estandarizada y su relacin con el AC4$
FORMA ANORMAL Esferocito Acantocito <repanocito Codocito %eptocito Eliptocito Equinocito Esquistocito G"alocito Anulocito Estomatocito <acriocito NORMAL 6 6 6 5 5 5 5 5 5 5 5 5 LIGERA (+) 5 -9 5 -9 5 -9 > -9 > -9 > -9 > -9 > -9 > -9 > -9 > -9 > -9 MODERADA (++) : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 : - 59 MARCADA (+++) 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 4ayor de 59 RELACION CON EL VCM #o afecta #o afecta <isminuye <isminuye <isminuye Aumenta #o afecta <isminuye Aumenta <isminuye <isminuye <isminuye

HIPOCROMIA:

.e considera los glbulos ro!os *ipocrmicos, cuando su contenido de *emoglobina es inferior al normal. %a carencia de *emoglobina se"era o marcada, por lo general, trae como consecuencia que los glbulos ro!os se deforman producindose formas anormales y carentes de *emoglobina, como los codocitos, anulocitos, y leptocitos entre otros. ara e"aluar la *ipocroma se debe contar diez campos, sacar el promedio de glbulos ro!os *opocrmicos y compararlo con la tabla que presenta a continuacin$ INDICE DC4 &pg' NORMAL 6-9 >B - ;; LIGERA &F' : - 59 >= - >C MODERADA &FF' 59 H ;6 >: - >9 MARCADA &FFF' 4ayor de ;6 4enor de >I

POLICROMATOFILIA:

)n aumento en la policromatofilia obser"ada en 3. es refle!o de una medula sea en estrs que esta respondiendo a la *ipoxia generada por la no disposicin de oxigeno en los te!idos. Estos glbulos ro!os policromticos del estrs tienen un tama/o superior a los policromticos de respuesta medular normal. %a policromatofilia se relaciona directamente con reticulocitos re"elados con la coloracin supra"ital. Gbser"amos policromatofilia en anemias *emolticas congnitas o adquiridas, anemias deficitarias en tratamiento. ara informar la policromatofilia se debe contar diez campos, sacar un promedio y comparar con la siguiente tabla INDICE 7eticulocitos &J' NORMAL 6. H 5.9 6.9 H 5.9 LIGERA &F' 5.: H >.9 5.: - I MODERADA &FF' >.: H ;.9 I.5 - : MARCADA &FFF' 4ayor de ;.: 4ayor de :

NORMOBLASTOS: .in importar el estado de maduracin, su informe se realiza en porcenta!e en 566 clulas blancas contadas INCLUSIONES ERITROCITARIAS: 1. PUNTEADO BASOFILO:

El punteado basfilo fino se obser"a generalmente en trastornos caracterizados por la alteracin en la biosntesis de la *emoglobina como en los sndromes diseritropoy2ticos, *emoglobinopatias. El punteado basfilo grueso se obser"a en procesos txicos como en intoxicaciones por plomo, no obstante, cualquiera de los dos fino o grueso se puede encontrar indiscriminadamente en cualquiera de los casos mencionados. 2. CUERPOS DE HO ELL ! JOLLY: %os obser"amos en todas las anemias *emolticas gra"es, anemias diseritropoy2ticas. )n peque/o n8mero de estas inclusiones aparece tras la esplenectoma, la asplenia congnita, en la mielofibrosis a"anzada y en la eritroblastosis fetal ". ANILLOS DE CABOT: El anillo por lo general se encuentra asociado a otras inclusiones como el punteado basfilo. #. CUERPOS DE PAPPENHEIMER: .on indicati"os de alteraciones en la eritropoyesis, especialmente en la obser"ada en las anemias sideroblsticas, talasemias, alco*olismo gra"e y otros procesos diseritropoy2ticos. %o podemos obser"ar tambin en los sndromes postesplenectoma $. PARASITOS INTRACELULARES: Dablamos especialmente de lasmdium vivax y falciparum. .e informan como positi"o, de!ando explicita la especie del Plasmdium %as inclusiones eritrocitarias deben ser informadas indi"idualmente por cruces en los campos obser"ados as$
INDICE C.DoKell - !olly C. appen*eimer unteado basfilo Anillos de cabot NORMAL 6 6 6 6 LIGERA &F' 5-> 5-> 5-> MODERADA &FF' ;-9 ;-9 ;-9 MARCADA &FFF' 4ayor de : 4ayor de : 4ayor de :

FENOMENO DE ROULEAUX:

El fenmeno de rouleaux , o pilas de monedas, se obser"a frecuentemente en *iperproteinemias &mieloma m8ltiple' y macroglobulinemias, tambin se puede obser"ar en enfermedades inflamatorias crnicas. %a "aloracin del fenmeno de rouleaux &promedio en diez campos' y como lo indica la siguiente tabla$ NORMAL 6 LIGERA &F' 5-9 MODERADA &FF' : - 59 MARCADA &FFF' 4ayor a 59

AUTOAGLUTINACION:

%a autoaglutinacin, es pro"ocada especialmente los autoanticuerpos tipo crioaglutininas, se detecta desde el momento de realizar el extendido, ya que se presenta un grado de dificultad al extender la sangre y en los bordes *ay e"idencia clara de aglutinacin. .e informa como paciente autoaglutinado sin tener en cuenta la intensidad. VALORACION DE GLOBULOS BLANCOS: 5. .e debe realizar la apreciacin de cantidad en 56x, obser"ando campos donde los glbulos ro!os apenas se toquen entre si. .e cuentan 56 campos, se saca promedio y el resultado se multiplica por ;66. Este es un mtodo indirecto pero que no se compara con la exactitud de su recuento en cmara de neubauer. Este clculo le da un n8mero aproximado de leucocitos pero nunca de un "alor numrico en su informe. .in embargo la obser"acin en 56x le sir"e como parte de su control de calidad, ya que la apreciacin de n8mero disminuida, aumentada o normal se debe relacionar directamente con el recuento total de leucocitos. >. .e debe dar el reporte del recuento diferencial incluyendo clulas inmaduras, las cuales se informan en orden, de la ms inmadura a la ms madura. ;. En cuanto a las anormalidades, a medida que se realiza el recuento diferencial se obser"a la morfologa de clulas encontradas y se anota cualquier tipo de alteracin en su morfologa. <entro de las principales anormalidades tenemos$ FENOMENO DE PELGER ! HUET O PSEUDOPELGER% HUET:

Anormalidad en los 4#, los cuales se encuentran *iposegmentados. Dablamos de perder cuando todos los 4# son *iposegmentados y de pseudopelger cuando algunos 4# presentan segmentacin normal. .e considera como precursor de un proceso mieloide agudo MACROPOLICITOS: .on 4# *ipersegmentados y de mayor tama/o. %os macropolicitos obedecen a un proceso megaloblstico GRANULACIONES TOXICAS& VACUOLAS TOXICAS Y CUERPOS DE DOHLE:

%as granulaciones toxicas son grnulos *ipertrofiados, especialmente de los neutrfilos. %as "acuolas txicas se encuentran en neutrfilos y monocitos. %os cuerpos de <o*le no son exclusi"os de los 4#, tambin se pueden encontrar en los monocitos, pero se encuentran con mayor frecuencia en los neutrfilos. %a presencia de estas inclusiones indica *iperacti"idad celular, se encuentran en condiciones txicas como escarlatina, septicemia, neumona, quemaduras y exposiciones a drogas citotxicas LINFOCITOS ATIPICOS:

.e debe anotar su presencia en porcenta!e del total de los linfocitos contados en el recuento diferencial. .e considera normal encontrar *asta un ;6J de los linfocitos atpicos en la poblacin de adultos. .e sugiere que cifras menores a un ;6J no se informan. El porcenta!e se saca tomando como un 566J el porcenta!e total de linfocitos y a partir de estos se saca el porcenta!e de los linfocitos atpicos encontrados as$ 99 linfocitos totales B linfocitos atpicos 99 LLLLLLLLLLLLLLL 566J B LLLLLLLLLLLLLLL ? ?$ 5:J El porcenta!e de linfocitos atpicos es de 5: J .M %G. %E)CGCM,G. #G 7E.E#,A# #M#0)#A A#G74A%M<A< .E M#3G74A# NORMALES EN NUMERO Y MORFOLOGIA

VALORACION DE PLAQUETAS:

1.

ara el clculo de las plaquetas se realiza un recuento indirecto, obser"ando 56 campos, sacar el promedio y se multiplica por >5.666, y concluir si las plaquetas estn aumentadas, disminuidas o normales. .e considera normal encontrar entre C y >5 plaquetas por campo donde los glbulos ro!os apenas se toquen entre si.

>.

ara las caractersticas morfolgicas y tintoriales, a medida que "aya realizando el recuento analice si las plaquetas tienen la agrupacin, caracterstica, grnulos y color adecuado. ;. ara anisocitosis a medida que "a *aciendo el recuento cuente cuantas plaquetas grandes obser"a y saque el porcenta!e de las plaquetas grandes. or e!emplo$ En 56 campos obser"o I96 plaquetas y de las I96, >= son plaquetas grandes. I96 LLLLLLLLLLLLLLLLLLL 566J >= LLLLLLLLLLLLLLLLLLLL ? ?$ :J .i se obser"a un porcenta!e 4ayor al ;6J, se informa la presencia de 4acroplaquetas. .i da ms del 9J y menos del ;6J con aumento del n8mero total en el recuento se informa presencia de anisocitosis plaquetaria. .M %A. %AN)E,A. #G 7E.E#,A# #M#0)#A A#G74A%M<A< .E M#3G74A NORMALES EN NUMERO Y MORFOLOGIA

CUESTIONARIO: 5. El recuento de leucocitos por milmetro c8bico se calcula teniendo encuenta$ "olumen del rea contada, numero de clulas contadas y la dilucin empleada1 como se realiza este clculo para obtener el resultado final. >. 7ealice un cuadro comparati"o teniendo encuenta las circunstancias fisiolgicas y patolgicas que se presentan en una leucocitosis y leucopenia diferenciando cada una de las clulas$ #eutrfilos, eosinfilos, linfocitos, basfilos y monocitos

;. Cuales son los "alores de referencia de cada uno de los parmetros que conforman el cuadro *emtico normal, teniendo encuenta el sexo y la edad de los pacientes

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. 2 SISTEMA RENAL OBJETIVOS: <eterminar el comportamiento de cada uno de los parmetros que conforma un cuadro *emtico, en las diferentes patologas del sistema renal Conocer las caractersticas de las generaciones del cuadro *emtico automatizado Mdentificar los coeficientes de "ariacin entre la tcnica manual y electrnica Mnterpretar los *istogramas y dispersogramas en sus parmetros normales y sus "ariaciones frente *allazgos *ematolgicos.

FUNDAMENTO: Al *ablar de tipo de tecnologa utilizada para realizar el cuadro *emtico, es usual emplear el trmino generacin, para agruparlos de forma acorde con el grado de automatizacin in*erente al equipo$ 7M4E7A 0E#E7ACMG#$ Cuadro *emtico manual .E0)#<A 0E#E7ACMG#$ Cuadro *emtico semiautomatizado ,E7CE7A 0E#E7ACMG#$ Cuadro *emtico automatizado1 presenta grficos de *istogramas de glbulos ro!os, plaquetas y un recuento diferencial de glbulos blancos en tres partes

C)A7,A 0E#E7ACMG#$ Cuadro *emtico automatizado, con perforacin de tapa, entrega graficas de *istograma para glbulos ro!os y plaquetas y un informe de dispersograma para glbulos blancos, a los que agrupa en cinco tipos de clulas.

Estos equipos automatizados para recuentos celulares *an sido dise/ados teniendo en cuenta algunas propiedades de las clulas, entre otras$ .on malas conductoras de la electricidad ,ienen "ariedad de tama/os ,ienen una densidad caracterizable y diferente para cada una Cada una refracta la luz con una intensidad diferente ,ienen una composicin citoqumica diferente y caracterizable para cada una %a relacin n8cleo-citoplasma es diferente para cada clula. ,eniendo en cuenta estas propiedades, se *an "enido desarrollando desde 5B9: diferentes principios que permiten contar y medir partculas, las casas comerciales emplean para el dise/o uno o "arios de estos, unos mas utilizados que otros, dado los altos costos de algunos. En nuestro medio encontramos los siguientes$ Mmpedancia elctrica <ispersin y absorcin de luz

%a tecnologa que utiliza radiofrecuencia o luz electromagntica de alta frecuencia constituye la base para la fabricacin de equipos de cuarta y quinta generacin. INFORME GRAFICO 1. HISTOGRAMA:

.on graficas de frecuencias de "ol8menes celulares representados en el e!e ? graficado contra un numero relati"o representado en el e!e O1 por ser relati"o no tiene un equi"alente numrico real. El e!e ? se expresa en fl. En condiciones normales, en el informe se obser"an cur"as cnicas o cnca"as, que en su mayora son modales, excepto la de plaquetas. HISTOGRAMA DE GLOBULOS ROJOS:

%a cur"a normal de glbulos ro!os es cnica, modal y se encuentra representada en tama/os de :6 a 556 fl, con un pico o cur"a secundaria modal de plana a ligeramente cnca"a con muy poca altura que llega a >66 fl. Algunas alteraciones mas frecuentes de la cur"a de eritrocitos son$ <esplazada a la izquierda <esplazada *acia la derec*a Cur"a bimodal A<E aumentado Arranque extenso en O Aumento de pico secundario HISTOGRAMA DE GLOBULOS BLANCOS: %os glbulos blancos se agrupan formando tres cur"as claramente definidas y estas configuran la arquitectura normal del *istograma de glbulos blancos. Cur"a de linfocitos cnica$ 96 H 566 fl Cur"a de mononucleares plana a cnca"a $ 566 H 596 fl Cur"a de granulocitos cnca"a$ 596 H ;=6 fl

Algunas de las alteraciones mas frecuentes son$ Arranque extenso en O )nin con granulocitos )nin con linfocitos )nin con mononucleares Aumento cnico con p2rdida de arquitectura Aumento cnico sin p2rdida de arquitectura Cur"a cnica modal <istribucin no normal a la derec*a HISTOGRAMA DE PLAQUETAS: %a cur"a normal de plaquetas es cnica, sin distribucin normal y con una representacin amplia en tama/os que "a de > a >6 fl, dado que el recuento de plaquetas se realiza en la dilucin mayor, la misma de glbulos ro!os, el equipo realiza un doble recuento de plaquetas, disminuyen de esta forma el coeficiente de "ariacin. Algunos equipos grafican el doble recuento donde muestran si *a existido o no coincidencia en los mismos. Algunas de las alteraciones que se presentan en el recuento de plaquetas son$ #o arranque en O

Extendida >9-;6 fl Aumento celular en la terminacin ,ope recto Conformacin de bloques Cur"as negati"as

2. DISPERSOGRAMAS: %os dispersogramas son otro tipo de representacin grafica utilizada para el recuento diferencial de glbulos blancos, donde se mezclan diferentes tecnologas y tienen en cuenta diferentes propiedades de los grupos celulares. En estos sistemas "emos interactuar "olumen, refraccin, conducti"idad, opacidad celular y absorcin de luz. %as clulas se grafican seg8n su dispersin en un cubo, teniendo en cuenta algunas de las propiedades indi"iduales de los grupos celulares. .e trata de un anlisis tridimensional de las clulas, donde las diferentes casas comerciales utilizan mnimo tres parmetros que *acen coincidir con las propiedades especficas celulares, permitiendo de esta forma su clasificacin en cinco grupos$ neutrfilos, eosinfilos basfilos, linfocitos y monocitos. As mismo permite sospec*ar con un alto grado de certeza la presencia de clulas diferentes a las mencionadas. %a interpretacin del dispersograma es mas sencilla comparada con la del *istograma, ya que al ubicar las cinco poblaciones celulares, el grado de coincidencia de los tres parmetros debe *aber sido total1 por lo tanto el grado de confiabilidad es mas grande y las clulas inmaduras, as como a las anormales y las consideradas como no blancas se ubican en zonas no establecidas. %as alteraciones de los dispersogramas se relacionan con aumento o disminucin de los cinco tipos de glbulos blancos que reporta o con la aparicin de clulas que obedecen a diferentes patologas, sean malignas o no. Aumento de neutrfilos Aumento de eosinfilos .ospec*a de granulocitos inmaduros .ospec*a de blastos de la lnea mieloide resencia de clulas "ie!as Aumento de linfocitos .ospec*a de blastos de la lnea linfoide .ospec*a de linfocitos atpicos Aumento de monocitosP

.ospec*a de blastos de la lnea monoctica .ospec*a de n8cleos de normoblastos .ospec*a de gametocitos de lasmdium .ospec*a de macroplaquetas.

PRACTICA: CUADRO HEMATICO AUTOMATI'ADO PROCEDIMIENTO: Analice los casos clnicos lle"ados por el profesor con los resultados de Cuadro *emtico automatizados impresos Anote los parmetros que encuentre anormal y normal en la parte numrica como *ematocrito, *emoglobina, plaquetas e ndices corpusculares. Mnterprete resultados teniendo en cuenta los "alores de referencia. Analice los *istogramas y dispersogramas, informe si concuerdan con el caso clnico y los datos numricos <e acuerdo a todo lo anterior, como estara el extendido de sangre perifrica. 7ealice un diagnstico del caso clnico y anote las posibles causas de su alteracin.

CUESTIONARIO: 1. Nue condiciones debe tener la muestra para ser utilizada en un equipo para la realizacin de un cuadro *emtico automatizado

>. Nue parmetros calcula el equipo directamente y en que dilucin. Cuales parmetros son arro!ados de forma indirecta ;. Como es el comportamiento de cada uno de los parmetros del cuadro *emtico en las patologas del sistema renal como$ %itiasis. Mnsuficiencia renal. 0lomerulonefritis. .ndrome nefrtico y nefrtico.

I. como se graficaran los *istogramas y dispersogramas en cada una de las patologas mencionadas. 9. Nue parmetros posee un paciente diabtico con dilisis peritoneal

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. " SISTEMA RESPIRATORIO OBJETIVOS: Mdentificar morfolgicamente los reticulocitos mediante una coloracin supra"ital e interprete los resultados. Conozca el procedimiento para determinar los eosinfilos en moco nasal y determine cuando son caractersticos como patologa del sistema respiratorio 7ealizar la "elocidad de sedimentacin globular y determinar en unidades de longitud y tiempo la propiedad que tienen los glbulos ro!os en formar pilas de monedas.

PRACTICA: RECUENTO DE RETICULOCITOS& RECUENTO DE EOSINOFILOS EN MOCO NASAL Y VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR FUNDAMENTO: RECUENTO DE RETICULOCITOS

%os reticulocitos son eritrocitos !"enes que representa de 6.9 a 5.9J de los eritrocitos totales, se forma cuando se pierde el n8cleo del normoblasto ortocromtico. .u tama/o "aria de 56 a 59ul. ,ienen una "ida media de dos das en medula sea, de all salen a la circulacin donde requieren de un dia para con"ertirse en clulas ro!as maduras. .u nombre pro"iene de que contiene una red de material basfilo$ acido ribonucleico &7#A' ribosomal y dems organelas citoplasmticas que se precipitan, obser"ndose como grnulos amorfos intracelulares que se ti/en de azul profundo con colorantes supra"itales como el azul de cresilo brillante. .u abundancia en la circulacin perifrica es un ndice de la acti"idad eritropoy2tica. As pues, se encuentran cifras altas en los primeros das de "ida, despus de una perdida de sangre o *emorragia y despus de tratar la anemia carencial con sustancias especificas &"itamina +5> en la anemia perniciosa, acido flico con la anemia megaloblstica o *ierro en la anemia ferrop2nica por la deficiencia de *ierro'. En general, la intensidad de la respuesta reticulocitaria en estas condiciones es directamente proporcional a la gra"edad de la anemia. Coloreado con Krig*t, el reticulocito se identifica por una basoflia difusa llamada policromatoflia y por poseer un tama/o ligeramente ms grande que el eritrocito maduro. MATERIALES Y EQUIPOS: ,ubos de ensayo +a/o 4aria a ;CoC ipeta pasteur ortaob!etos limpios Aceite de inmersin 4icroscopio Colorante Azul de Cresilo +rillante .angre "enosa con E<,A

PROCEDIMIENTO: Colocar en el tubo de ensayo dos gotas de sangre pre"iamente mezclada Agregue dos gotas de colorante azul de cresilo brillante &filtrado' y mezcle sua"emente Mncube en el +a/o 4aria a ;CoC durante 56 a 59 minutos. Al finalizar este tiempo mezcle bien el contenido del tubo

7ealice un extendido en lamina un poco mas delgado y de!e secar al ambiente Coloque el extendido en la platina del microscopio y enfoque en ba!o poder &56?' para localizar el rea donde los eritrocitos no estn superpuestos ase el ob!eti"o a 566? cuidadosamente y agregue una gota de aceite de inmersin Mnicie el conteo. %as clulas ro!as toman una coloracin griscea "erdosa. El 7#A presente en los reticulocitos se colorea de azul intenso. El retculo puede ser abundante o escaso dependiendo del estado de desarrollo de la clula. El mas !o"en muestra mayor cantidad de 7#A. +usque el rea mas adecuada para realizar el recuento, donde los glbulos ro!os estn separados y se tengan 566 *emates por campo, se cuentan los reticulocitos encontrados en diez campos microscpicos obser"ados.

ara calcular los reticulocitos corregidos, se tienen "alores ideales de Db para$ Dombres$ 59 g(dl 4u!eres$ 5I g(dl #i/os$ 5> g(dl 3ormula$ 5. Db del paciente >. 7eticulocitos en J ;. Db ideal HB ()*+,-., X / 0, 1,.+*234*+.45 HB +0,)3 E!emplo$ &Dombre' 5. D+$ = g(dl >. 7eticulocitos$ =J ;. Db ideal$ 59 g(dl 6 7803 X 6/ 0, 1,.+*234*+.45 1$ 7803 9 #.2 / ,omando este "alor se puede *allar el ndice de reticulocitos, el cual indica el ndice de eritropoyesis en medula sea. Con el "alor de los reticulocitos corregidos los relacionamos con un factor de correccin, para saber si la respuesta medular compensa la destruccin.

H,:4734;+-) 7803 1= ! 11 > ?@ M,-41 0, >

F)*.41 0, *411,**+<1.$ 2.= 2.$

E!emplo$ Db del paciente$ = g(dl 7eticulocitos corregidos$ I.>J 3actor de correccin$ >.6 por el rango de Db esta entre C H B I.> ( >.6 Q >.5 &normoproliferati"a' V)341 0, 3) ,1+.14(4A,5+5: 6.> > -9 9 o mayor O.1) B41:) 0, 4;.,-,1 ,3 IPR ,5: 7eticulocitos corregidos en J sobre periodo de maduracin en medula sea es de > das. I(>Q> E3 IPR: 4ayor de ;$ Mndica aumento de la acti"idad eritropoytica 4enor de >$ Mndica escasa acti"idad CALCULOS: 7eticulocitos en J$ N2:,14 0, 1,.+*234*+.45 *4-.)045 %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% X 1== N2:,14 0, H,:).C,5 *4-.)045 1=== MO Dipoproliferati"a #ormoproliferati"a Diperproliferati"a

P)1) *)3*23)1 345 1,.+*234*+.45 );5432.45 345 0).45 1,D2,1+045 54-: 5. 7+C(ml >. 7eticulocitos en J ;. 7elacin a 5666 07 3ormula$ E!emplo$ 5666 07LLLLLLLLLLLLLLLLL J de reticulocitos 7+C(ml LLLLLLLLLLLLLLLLL ?

5. >.C66.666(ml >. =J ;. 5666 07 5666 07 LLLLLLLLLLLLLLLL =J de reticulocitos >.C66.6666 7+C(ml LLLLLLLLLLLLLLLL ? ?$ >5.:66(ml Aalores normales$ I6.666 y C6.666 ( ml Este "alor es importante en las anemias *emolticas y en pacientes con tratamiento de anemias carenciales

P41*,-.)E, 0, 1,.+*234*+.45 *411,7+045: ,iene por ob!eto establecer los reticulocitos reales teniendo en cuenta la concentracin de clulas ro!as en sangre perifrica, ya que la "olemia del paciente afecta su n8mero. En otras palabras esta correccin debe *acerse cuando se encuentra un *ematocrito por deba!o del establecido como normal, aplicando la siguiente formula$ / 0, 1,.+*234*+.45 *411,7+04 Q$ J de reticulocitos ? *ematocrito del paciente ---------------------------------Dematocrito normal .e acoge un "alor medio del *ematocrito para *ombres de I9J y para mu!eres del I>J. O.1) B41:) 0, *411,**+<- ) ()1.+1 0,3 0).4 0, HB: .e tiene en cuenta que solo se realiza si la Demoglobina es menor de 55 g(dl. Constituye un ndice indirecto de la eritropoyesis en medula sea y son de gran "alor para$ Conocer la eficacia de la eritropoyesis Clasificar las anemias en regenerati"as o arregenerati"as Conocer lo antes posible, la eficacia de un tratamiento con Dierro, Aitamina +5> y Acido flico.

=;5,1F)*+4-,5: El recuento se puede efectuar en sangre capilar

.e recomienda repetir el conteo cuando se obtienen "alores por encima del ;J %os extendidos coloreados pueden guardarse por >I *oras sin afectar los resultados %a relacin sangre(colorante no tiene que ser exactamente igual. ara me!ores resultados use una mayor proporcin de sangre cuando el paciente tenga un *ematocrito ba!o. A/ada una menor cantidad de muestra cuando el *ematocrito sea inusualmente alto El tiempo de coloracin de los reticulocitos no es critico, pero no debe ser menor de 56 minutos %a presencia de altos ni"eles de glucosa en sangre y el uso de *eparina como anticoagulante pueden producir, en los reticulocitos, una coloracin plida. Es extremadamente importante que la sangre y el colorante se mezclan bien antes de realizar los extendidos.

VALORES DE REFERENCIA: V)341 1,3).+F4: Dombres y 4u!eres$ 7ecin nacido$ En dos semanas es igual al adulto 6.> H >J >.6 - :J

I-.,1(1,.)*+<-: El conteo de reticulocitos es una *erramienta diagnostica importante puesto que es el refle!o de la cantidad de clulas ro!as efecti"as "iables que se producen en la medula sea. .u utilidad real es conocer la capacidad de respuesta de la medula en aquellos casos en los cuales *ay disminucin de las clulas en sangre perifrica y es necesario que la medula aumente su produccin para as compensar el dficit de dic*as clulas. Esta informacin es de fundamental importancia en el diagnostico de anemias por falla en la produccin &anemia aplsica' o por aumento en la destruccin &anemia *emoltica'. VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR: %os eritrocitos poseen una carga electrosttica negati"a en su membrana, lo cual genera fenmenos de repulsin que lle"an a mantener los glbulos ro!os suspendidos, conser"ando su indi"idualidad. Esta fuerza de repulsin se denomina potencial zeta. En condiciones normales si se coloca la sangre en un tubo "ertical, las clulas, debido a la fuerza de la gra"edad caen por que son ms densas que el plasma.

.i la carga electrosttica disminuye, por alguna causa, los eritrocitos producen mayor cantidad de pilas de monedas que aumentaran la masa de la partcula y en consecuencia, la "elocidad de sedimentacin. %a "elocidad de sedimentacin se expresa como la distancia en milmetros que recorren los eritrocitos al caer por unidad de tiempo, generalmente una *ora. %a sedimentacin se puede determinar por mtodos manuales o automatizados. El mtodo manual recomendado por el comit Mnternacional de Estandarizacin en *ematologa, es el de @estergreen y entre los mtodos automatizados esta el Coulter Retafuge y el Aes-matic. METODO DE ESTERGREEN

MATERIALES Y REACTIVOS: .angre "enosa anticuagulada con E<,A ,ubo de @introbe Agu!a de asteur .oporte para "elocidad Seringa de > ml

PROCEDIMIENTO: 4ezclar sua"emente la sangre, por in"ersin, durante un minuto para *omogenizar la muestra %lenar el tubo @introbe con la ayuda de agu!a asteur y una !eringa teniendo en cuenta que no queden burbu!as, que la sangre no este *emolizada y que quede exactamente *asta la marca cero &6' Colocar en el soporte especial y de!ar 5 *ora, al cabo de la cual, se lee en escala descendente, la cantidad de mm c8bicos que descendi.

.e da lectura en mm(*ora. VALORES DE REFERENCIA: Dombres$ 6 H 56 mm(* 4u!eres$ 6 ->6 mm(*

Estos "alores son constantes entre los 56 y 96 a/os EOSINOFILOS EN MOCO NASAL

.e realiza mediante un frotis de sangre perifrica de la mucosa del cornete inferior, usando un *isopo1 obtenida la muestra se colorea con @rig*t o 0iemsa y se realiza un conteo celular diferencial. .i la cantidad de leucocitos es adecuada se *ace el recuento diferencial de 566 clulas. 4#. .i la cantidad de leucocitos es excasa, los eosinfilos se deben reportar los obser"ados en 56 campos microscpicos y en este caso se reporta por campo. %os eosinfilos en el moco T >6(campo confirman la alergia %os neutrfilos aumentados estn relacionados con las infecciones bacterianas agudas %os linfocitos sugieren procesos infecciosos de tipo crnico

CUESTIONARIO: 1. En que patologas encontramos eosinofllia en moco nasal.

>. Mnforme los resultados obtenidos en la clase, realice con este resultado, una correccin de reticulocitos con un *ematocrito de >=J y *alle el M 7 3. Nue se entiende por des"iacin reticulocitaria. 4. Nue factores influyen en la eritrosedimentacin. 5. Como realiza usted una A.0 por puncin capilar.

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. # SISTEMA DIGESTIVO OBJETIVO: Mdentificar que parmetros son caractersticos de un cuadro *emtico manual que identifique la salmonelosis y la apendicitis FUNDAMENTO: SALMONELOSIS %a salmonelosis es un con!unto de enfermedades producidas por el gnero microbiano Salmonella. #o todas las especies, cepas o serotipos reconocidos tienen igual potencial patognico. %os principales agentes etiolgicos corresponden a Salmonella typhi, Salmonella paratiphi, Salmonella thyphimurium y Salmonella enteritidis>.

.on bacilos 0ram negati"os, anaerobios facultati"os de la familia Enterobacteriaceae. .e encuentran fundamentalmente asociados a la flora intestinal y, por ello, a aguas y alimentos que *ayan contactado con material fecal. roducen grandes cantidades de gas durante la fermentacin de az8cares, y lle"an a cabo una fermentacin cido mixta, produciendo gran cantidad de productos cidos y gases. Aparecen escalofros , cefalea, nuseas, anorexia, tos y diarrea o estre/imiento. %a fiebre es prolongada y "ara de ;=,9UC a I6UC. Entre un >6I6J presentan dolor abdominal. APENDICITIS Es la inflamacin del apndice, ubicado en el ciego, que es la porcin donde comienza el intestino grueso. #ormalmente los casos de apendicitis le"es se pueden curar sin ciruga, sin embargo, la mayor parte de ellos requieren de un procedimiento quir8rgico llamado apendicectoma o laparotoma en caso de apendicitis con extirpacin del apndice inflamado. En casos sin tratamiento, el ndice de mortalidad es ele"ado, principalmente debido a una peritonitis y un s*ocV sptico cuando el apndice inflamado se rompe PRACTICA: CUADRO HEMATICO MANUAL MATERIALES Y REACTIVOS: .angre total con E<,A 4icro*ematocritos ,abla de lectura o reglilla Cubetas orta cubetas ipeta de .al*i ipeta de glbulos blancos ,ubos de 5; x 566 mm 0radilla, pipeta de 9 ml, pipeteadores ipetas automticas, puntas azules y amarillas ,apones de cauc*o Cmaras de #eubauer Ca!as de petri, papel filtro 7eacti"o de <rabVin 7eacti"o de ,urV Estndar o patrn de *emoglobina

Aceite de inmersin Colorante de @rig*t .olucin +uffer, agua destilada 4icrocentrfuga Espectrofotmetro 4icroscopio

PROCEDIMIENTO: 1. MEDICION DEL HEMATOCRITO: %lenar el capilar con sangre bien mezclada *asta las >(; partes aproximadamente %impiar el exceso de las paredes del capilar con toalla absorbente .elle bien la parte inferior del capilar con plastilina Colquelo debidamente calibrado en la 4icrocentrfuga y tenga en cuenta el numero correspondiente en esta Cierre bien y coloque a centrifugar de 9 a 56 minutos entre 5666 y 9666 rpm respecti"amente Cuando la microcentrfuga pare, lea el 4icro*ematocrito en la tabla y obtenga el "alor directamente y reporte en porcenta!e.

2 MEDICION DE LA HEMOGLOBINA: renda el espectrofotmetro y espere a que alcance la temperatura adecuada para su funcionamiento .er"ir en un tubo de ensayo de 5; x 566, 9 ml de <rabVin, con ayuda de un pipeteador 4ezcle cuidadosamente la sangre por in"ersin unas ;6 "eces para obtener una buena *omogenizacin de la muestra %lene la pipeta de sal*i con 6.6> ml con ayuda de la boquilla o con >6 ul utilizando la pipeta automtica, teniendo la precaucin de limpiar bien con una gasa las paredes externas de la pipeta cuando finalice el llenado Colocar la pipeta *asta el fondo del tubo y deposite la sangre, soplando bien, en!uagar la pipeta con el reacti"o en la parte superior &e"itando la formacin de espuma'. ,ape y mezcle muy bien el tubo por in"ersin <e!ar en reposo por 56 minutos para que se produzca la *emlisis total de las clulas ro!as y se complete bien la reaccin ,ransfiera la solucin a las cubetas del espectrofotmetro y lea a 9I6 nm, usando como blanco el reacti"o de <rabVin

,ome nota de la absorbancia de la muestra y del estndar

" RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS: A. DILUCION EN TUBO: 4ezclar la muestra de sangre con E<,A y mzclela sua"emente por in"ersin unas tres "eces ,omar >6 ul de sangre y depostela en un tubo que debe contener ;=6 ul de liquido de turV &dilucin 5(>6'. 4ezcle por in"ersin <e!e el tubo en reposo al menos por 9 minutos repare la cmara de #eubauer con su laminilla, completamente limpios ,ome el tubo con la sangre diluida, mzclelo nue"amente y con la pipeta de 6.5 ml deposite 5-> gotas entre cmara y laminilla <e!e en reposo por = minutos la cmara para que sedimente la preparacin. ara e"itar que se seque coloque sobre el mesn papel filtro *8medo, encima de la cmara y tpela con una ca!a de petri .eque por deba!o la cmara, mntela con muc*o cuidado en el carro del microscopio 7ealice el recuento en los I cuadrantes grandes de los extremos

B. DILUCION EN PIPETAS DE BLANCOS: 4ezclar la muestra de sangre con E<,A y mzclela sua"emente por in"ersin unas tres "eces %lene la pipeta con la muestra de sangre *asta la marca 6.9 exactamente, *aga uso del pipeteador %impie las paredes extremas de la pipeta para que no contamine el liquido diluente Aspire el liquido de ,urV *asta la marca 55 exactamente .u!ete la pipeta entre los dedos pulgar e in dice, desprenda el microaspirador y agite la pipeta en forma *orizontal, durante ; minutos para obtener *emlisis total de las clulas ro!as <escartar las I primeras gotas de la dilucin, para eliminar el contenido del capilar que no contiene leucocitos %lene la Cmara de #eubauer controlando la gota que sale de la pipeta 7ealice el recuento en los I cuadrantes grandes de los extremos

#. EXTENDIDO Y COLORACION:

7ealizar el frotis y de!arlo secar Cubrir con el colorante de @rig*t y de!arlo actuar por 5 minuto .in la"ar agregar buffer fosfato o agua destilada, soplando *asta que aparezca una escarc*a metlica. <e!ar actuar de ; a 56 minutos %a"ar con agua corriente limpiando la superficie posterior del frotis <e!ar secar la preparacin $. RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS: ,otalmente seco el extendido enfquelo en ob!eti"o de ba!o poder &56?' para localizar el cuerpo del extendido %ocalizada esta rea del extendido pase a 566?. agregue una gota de aceite de inmersin 7ealice el recuento en sentido que al mo"er el carro no se repitan clulas *aciendo un zigzag sobre el cuerpo del extendido Cuente 566 leucocitos y "aya estableciendo un diferencial de cada una de las clulas usando un sistema manual de recuento, aunque tambin existen los tabuladores mecnicos.

CUESTIONARIO: 1. Nue parmetros son caractersticos del cuadro *emtico frente a las patologas tratadas en clase. 2. Nue dilucin se realizara en el caso de una leucocitosis y cual seria su procedimiento.

3. Con que patologas podemos encontrar similitud teniendo encuenta los mismos parmetros del cuadro *emtico de las patologas tratadas.

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. $ SISTEMA HEPATOBILIAR OBJETIVOS: <eterminar la funcin plaquetaria mediante pruebas de tamiza!e que requieren una detallada *istoria clnica, manifestaciones *emorrgicas y e"aluacin del riesgo *emorrgico. 7ealizar el recuento de plaquetas por el mtodo directo e indirecto <eterminar la importancia del recuento de plaquetas en los procesos de coagulacin

PRACTICA: RECUENTO DE PLAQUETAS

FUNDAMENTO: HEMOSTASIA PRIMARIA En la *emostasia primaria inter"iene los "asos sanguneos y las plaquetas para detener la *emorragia. %os "asos lesionados contribuyen por medio de constriccin y secrecin de una "ariedad de mediadores bioqumicos que afectan todos los pasos subsecuentes de la *emostasia. %as funciones de las plaquetas consisten en ad*erirse a las reas lesionadas de las paredes de los "asos sanguneos, agregarse mediante la ad*esin entre si y tambin secretar las sustancias almacenadas en sus grnulos. %as sustancias secretadas ayudan a atraer y acti"ar a unas plaquetas que se adicionan al agregado y ayudan al crecimiento del te!ido nue"o el cual repara permanentemente la *erida. .e requiere de la superficie de las plaquetas agregadas para las reacciones de la *emostasia secundaria. %as pruebas de laboratorio para la e"aluacin de la *emostasia primaria incluyen un conteo de la plaquetas, e"aluacin de la funcin plaquetaria medidas como el tiempo de sangra &prueba de tamiza!e', la prueba de la agregacin plaquetaria &prueba especializada' y la prueba de retraccin del coagulo &procedimiento clnico poco usado'. TIEMPO DE SANGRIA El tiempo de sangra es una medicin in "i"o de la funcin de las plaquetas. Existen "arios factores que afectan el tiempo de sangra, los cuales incluyen el n8mero de plaquetas, su funcin y la integridad "ascular. En 5B56, <uVe describi el mtodo de tiempo de sangra como una peque/a incisin en el lbulo de la ore!a &"alor normal de 5 a ; minutos' y relaciono la prolongacin de este tipo de *emorragia con trombocitopenia. 4as tarde MAO modifico esta prueba para *acerla mas fidedigna y establece una tcnica estandarizada que incluye tres aspectos fundamentales$ Rona apropiada de la cara "olar proximal del antebrazo resin por encima del antebrazo a I6 mm Dg para conseguir una presin constante, creando estasis "enosa. %a "enostasia producida por la presin *ace que los "asos permanezcan llenos de sangre +istur &simplate' que permita una incisin de 9 mm de longitud y 5 mm de profundidad.

METODO ESTANDARI'ADO IVY:

%a *emorragia pro"ocada en la piel, al lesionar peque/os "asos, se detiene por la constriccin de estos &"asoconstriccin' y por la formacin del tapn plaquetario en el sitio de la lesin. MATERIALES: ,ensimetro Cronometro %ancetas desec*ables &.implate' apel de filtro Algodn repodine

PROCEDIMIENTO: Colocar el tensimetro, en el tercio superior del brazo, ele"ndolo a una presin de I6 mm Dg. Esta presin es mantenida durante la prueba .eleccionar un rea de la parte extrema del antebrazo, libre de "enas y cicatrices %impiar con prepodine esta zona y de!arla secar 7ealizar una incisin *orizontal con el .implate, que realiza dos incisiones &estandarizadas' de 5 mm de profundidad por 9 mm de longitud. &la direccin de la incisin en el antebrazo tiene un efecto sobre el resultado. .e registran tiempos ligeramente mas largos cuando la incisin es *orizontal que cuando es "ertical' oner en marc*a el cronometro Cada ;6 segundos limpiar la sangre con papel filtro, tener cuidado de no tocar el sitio de la lesin <etener el cronometro en el momento en que la *emorragia cese y retirar el tensimetro.

V)341,5 N41:)3,5: 5 a B minutos OBSERVACIONES: El tiempo de sangra es mas corto en ni/os recin nacidos que en adultos1 tiende a ser mas prolongado en mu!eres y disminuye con la edad El tiempo de sangra es in"ersamente proporcional al numero de plaquetas, al "olumen de las paquetas y al *ematocrito &la anemia aumenta el tiempo de sangra y la eritrocitosis lo disminuye'

acientes con recuentos de plaquetas inferiores a 96.666lmm; no se les debe practicar la prueba acientes que estn recibiendo tratamiento a base de acido acetil saliclico deben esperar mnimo de siete a nue"e das de ser suspendido el medicamento para poder realizarle la prueba %a prueba de tiempo de sangra es ordenada prequirurgicamente para determinar el riesgo de *emorragia perioperatoria y posoperatoria. .in embargo, esta prueba mide la formacin adecuada del tapn plaquetario en el sangrado superficial de la piel y no necesariamente en los rganos internos Estudios realizados recientemente *an demostrado que el tiempo de sangra no es confiable cuando se usa como una prueba de tamiza!e para e"aluar el riesgo de sangrado excesi"o perioperatorio. )n tiempo de sangra anormal puede lle"ar a posponer innecesariamente una ciruga, a realizar pruebas adicionales, y posiblemente, a un tratamiento inapropiado para normalizar el tiempo de sangra .e demuestra una "ez mas, que una prueba 8nica no reemplaza una buena *istoria clnica ni el estudio integral prequir8rgico, dentro del contexto clnico y de lgica medica. <esde el punto de "ista tcnico, el tiempo de sangra es muy difcil de controlar a no ser que se utilice un mtodo estandarizado.

RECUENTO DE PLAQUETAS %as plaquetas representan fragmentos citoplasmticos deri"ados de los megacariocitos. Estn rodeados por la clsica membrana celular de doble capa lipdica que contiene di"ersos receptores y fosfolpidos funcionalmente importantes. %as plaquetas en circulacin no se ad*ieren unas a otras, ni a la superficie endotelial, pero pueden ser estimuladas a agregarse por "arios mediadores, !ugando un papel importante en la *emostasia. ara ello forman nudos en la red de fibrina, liberan substancias importantes para acelerar la coagulacin y aumentan la retraccin del coagulo sanguneo. En las *eridas las plaquetas aceleran la coagulacin, y adems al aglutinarse obstruyen peque/os "asos, y engendran substancias que los contraen. El recuento de plaquetas se realiza en sangre perifrica, las plaquetas se obser"an con una tonalidad le"emente basofila lo cual permite detallar una zona central granular llamada cronomero y una zona perifrica mas clara denominada *ialomero. MATERIALES Y EQUIPOS: .angre con E<,A

Gxalato de amonio al 5J o Citrato de sodio al ;.=J ipeta de 0lbulos ro!os Cmara de neubauer %aminilla de cuarzo 4icroaspirador Ca!a de petri apel filtro %aminas Colorante de Krig*t Agua destilada Aceite de inmersin 4icroscopio

PROCEDIMIENTO: METODO INDIRECTO: 7ealizar extendido de sangre perifrica Colorear el frotis con colorante de Krig*t <e!ar secar la coloracin rimero obser"ar en ob!eti"o de 56? para buscar la zona ideal asar a ob!eti"o de 566?, colocar aceite de inmersin Mdentificado el sitio donde se obser"an 566 glbulos ro!os por campo, contar las plaquetas en 56 campos microscpicos y sumar el numero total, sacar el promedio di"idiendo por diez %uego el resultado lo multiplicamos por una constante que es >5.666 y el resultado se da en mm;. .i el resultado es muy ba!o contar en >6 campos.

METODO DIRECTO: 4ezcle cuidadosamente la sangre anticuoagulada por in"ersin, por lo menos ;6 "eces, con el fin de obtener una muestra *omognea %lene la pipeta con la muestra de sangre *asta la marca 5.6 exactamente, *aga uso del microaspirador Elimine el exceso de sangre de las paredes extremas de la pipeta para no contaminar la solucin diluente. Aspire el liquido diluente *asta la marca 565 exactamente .u!ete la pipeta entre los dedos ndice y pulgar, desprenda el microaspirador y agite la pipeta en forma *orizontal durante tres minutos

<e!e reposar la pipeta durante 56 minutos si esta traba!ando con oxalato de amonio al 5J con el fin de lograr *emlisis total de los glbulos ro!os En caso de traba!ar con citrato de sodio al ;.=J omita este paso Agite sua"emente <escarte las primeras I gotas, para eliminar el liquido del capilar e inmediatamente llene la cmara de neubauer en ambos lados Coloque la cmara en ambiente *8medo por 56 minutos. El ambiente *8medo se logra cubriendo la cmara con una ca!a de petri que lle"ara ad*erido un disco de papel filtro *umedecido con agua Coloque la cmara en el microscopio. Enfoque con ob!eti"o de I6? y obser"e el llenado de la cmara, no deben existir agregados plaquetarios Cuidadosamente enfoque el cuadrado central %as plaquetas se reconocen como estructuras peque/as, opacas, redondas o alargadas a "eces con prolongaciones, que son inmediatamente retractiles El numero esta determinado por el conteo de los >9 cuadrados en que se subdi"ide el cuadrado central, descartando las plaquetas que tocan las lneas derec*a e inferior.

CALCULO: El n8mero de plaquetas por mm; se calcula de acuerdo a$ Aolumen del rea contada$ 6.5 mm; &5 x 5 x 6.5' <ilucin utilizada$ 5$566 #umero de clulas contadas

laquetas por mm; Q #6 de clulas contadas ? 5 ? dilucin laquetas por mm; Q #6 de clulas contadas ? 56 ? 566 laquetas por mm; Q #6 de clulas contadas ? 5666 VALORES DE REFERENCIA: E% rango normal para el recuento de plaquetas es de )nidades clsicas$ 596.666 a I96.666 ( mm; OBSERVACIONES: Correlacione el numero de plaquetas obser"adas con el recuento obtenido en cmara, usualmente se obser"an de = H >6 plaquetas indi"iduales por campo con ob!eti"o de lato poder

Gbser"e el tama/o de la plaqueta circulante. 3recuentemente se pueden obser"ar en ba!o porcenta!e, algunas plaquetas con tama/o mayor &macroplaquetas' .e debe tener especial cuidado con las soluciones diluentes, estn no deben estar contaminadas, pues tanto las partculas como las bacterias pueden simular plaquetas %a limpieza de las cmaras y de las pipetas es extremadamente importante en este procedimiento %os lquidos diluentes se deben mantener refrigerados y filtrar antes del uso .i obser"a agregados en el recuento, el procedimiento debe repetirse #o se debe reportar el recuento de plaquetas <irecto sin confrontarlo con el extendido de sangre perifrica coloreado con Krig*t %a diferencia del n8mero de plaquetas entre los cuadrados centrales de la cmara no deben ser mayor de 56 plaquetas.

CUESTIONARIO: 5. En que circunstancias patolgicas y fisiolgicas podemos encontrar trombocitosis y trombocitopenia 2. Nue es el "olumen medio plaquetario, anc*o de distribucin de las plaquetas y plaquetocrito. Aalores de referencia. 3. Explique bre"emente la prueba de agregacin plaquetaria.

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. G SISTEMA CARDIOVASCULAR OBJETIVO:

7ealizar la determinacin del tiempo parcial de tromboplatina tisular y el tiempo de protombina, como medio para "alorar la coagulacin sangunea en un paciente. PRACTICA: PT Y PTT FUNDAMENTO: HEMOSTASIA SECUNDARIA %a *emostasia secundaria esta dada a partir de las protenas plasmticas implicadas en la coagulacin sangunea y que circulan como "ariantes inertes *asta que se acti"an por exposicin a las superficies cargadas negati"amente &"a intrnseca' o al factor tisular &"a extrnseca'. Estas superficies y el 3, &factor tisular' son normalmente subendoteliales y extrnsecas a la sangre. .in embargo cuando los "asos se lesionan las protenas de la coagulacin de la sangre se exponen al te!ido subendotelial y a las plaquetas acti"adas. Esto inicia la acti"acin de las protenas de la coagulacin. El orden de acti"acin es secuencial a manera de cascada. %a secuencia se inicia con los factores menos concentrados en la sangre y contin8a *asta el factor ms concentrado, el fibringeno. %os factores dependientes de "itamina W &MM, AMM, M?, ?' son zimgenos y cuando se acti"an se con"ierten en proteasas. Estas proteasas forman comple!os sobre una superficie fosfolipdica con un cofactor &3,, A u AMMM' y sustrato. Aunque originalmente el proceso de coagulacin se di"idi en "a intrnseca, "a extrnseca y "a com8n, actualmente existe amplia e"idencia de que *ay gran interaccin y retroalimentacin entre las protenas de estas "as. %a "a extrnseca parece ser la ms importante en el inicio de la cascada, pero el sistema intrnseco es responsable de ampliar y sostener la coagulacin. %as pruebas de laboratorio de la *emostasia secundaria pueden di"idirse en dos grupos$ pruebas de deteccin y pruebas especiales. %as pruebas de deteccin estn dise/adas para probar la integridad general de la "a intrnseca, extrnseca y com8n. %as ms comunes de tales pruebas incluyen el tiempo de protrombina &, ', el tiempo de tromboplastina parcial acti"ada &,, a' y el tiempo de trombina &,,'. Algunos laboratorios prefieren agregar otras pruebas a sus perfiles de deteccin antes de realizar pruebas confirmatorias. .i las pruebas de deteccin son anormales, se practican pruebas especiales para identificar la anormalidad especfica, como anlisis del fibringeno, pruebas con mezclas para e"aluar deficiencias de factor, tiempo de reptilasa, prueba de deteccin del factor ?MMM, prueba de <mero <, entre otras. TIEMPO DE PROTROMBINA (PT)

Cuando se a/ade calcio y un extracto mstico al plasma, el facto AMM reacciona con el factor mstico y se forma un producto que con"ierte el factor ? a su forma acti"a el factor ?a, este a su "ez reacciona con el factor A, con el calcio y con los fosfolpidos para formar la protrombina en trombina. Entonces la trombina con"ierte el fibringeno en fibrina. %a "elocidad de formacin de la fibrina depende de los factores A, AMM, ?, MM y M por lo cual, esta prueba es empleada para medir la acti"idad total de estos factores. MATERIALES Y REACTIVOS: 7eacti"o de ,romboplastina Agua destilada lasma control normal lasma citratado del paciente +a/o 4aria ;C6C ,ubos de "idrio de 5>mm x C.9 cm 4icropipetas graduadas de 566 y >66 microlitros ipetas "olumtricas de 5,> y 9 ml Cronmetros

PROCEDIMIENTO: recalentar a ;C6C los tubos de ensayo ara la reconstitucin y conser"acin del reacti"o debern seguirse las instrucciones indicadas por el fabricante recalentar a ;C6C 6.> ml de reacti"o por cada prueba. E"itar la e"aporacin del reacti"o no de!ndolo a ;C6C por un tiempo superior a :6 minutos 7ealizar por duplicado cada prueba iniciando con un control normal ipetear o.5 ml de plasma en el tubo correspondiente Mncubar el plasma > H ; minutos mnimo y mximo 9 minutos ipetear 6.> ml de reacti"o preincubado y simultneamente disparar el cronometro arar el cronometro en el momento de la formacin del cuagulo

RESULTADOS E INTERPRETACION: El control normal debe dar un ,iempo de rotrombina & ,' en 56.9 y 5;.9 segundos que corresponde a un M#7 de 5.6. El cual esta prolongado cuando existe deficiencia congnita adquirida de los factores A, AMM, ? o protrombina, cuando el fibringeno esta por deba!o de 566 mgJ y cuando aparecen

productos de degradacin de fibringeno o de fibrina o *ay *eparina. En la policitemia el , puede estar prolongado como consecuencia de una desproporcin plasma ( anticoagulante. E% , es la prueba mas com8nmente usada para controlar la terapia anticuoagulada oral con antagonistas de la "itamina W para el tratamiento y la pre"encin tanto de trombosis "enosa como de tromboembolismo arterial. %a medicacin debe controlarse regularmente con , para pre"enir la sobreanticoagulante y el riesgo del sangrado. %a estandarizacin de la prueba de , se *a *ec*o con la introduccin de patrones internacionales de tromboplastina y con la definicin de una escala internacional de acti"idad anticoagulante. En 5B=; la G4. adopto un sistema de normalizacin del , para permitir la estandarizacin internacional del control anticoagulante oral. %os "alores de los pacientes se informan en trminos de la relacin internacional &M#7'. Este sistema tambin *a sido recomendado por el Comit Mnternacional de ,rombosis y Demostasis &MC,D' y por el Comit Mnternacional para Estandarizacin de Dematologa &MC.D'. FARMACODINAMICA DE LAS DROGAS CUMARINICAS: %a sntesis de factores de coagulacin "itamina W dependientes &MM H AMM H M? H ?' en el *gado puede ser in*ibida por deri"ados de la I- *idroxicumarina y la indandiona. #ormalmente la Aitamina W cataliza la carboxilacin de los residuos de acido glutmico en los factores de coagulacin MM, AMM, M? y ? as como en los in*ibidores naturales de la coagulacin protena C y protena .. %os residuos modificados de acido glutmico &acido-gama-carboxi-glutmico' son necesarios para la interaccin, mediada por calcio, de estas protenas con fosfolpidos cargados negati"amente. %os antagonistas de la "itamina W bloquean indirectamente la formacin de residuos de acidogamacarboxiglutamico, lle"ando a la liberacin en la circulacin de proteinas inmodificadas llamadas MAWA & rotenas induced by "itamina W absebce ( antagonist'. %as MAWA no tienen acti"idad funcional fisiolgicamente importante, pero pueden afectar la determinacin del , efectuada con algunos reacti"os de tromboplastina. RELACION NORMALI'ADA INTERNACIONAL (INR):

ara obtener una escala uni"ersal de acti"idad anticoagulante oral la G4. y el M.,D H MC.D *an recomendado con!untamente que el , debiera con"ertirse a M#7. or definicin el M#7 es la relacin de , que se *abra obtenido si se *ubiera usado la reparacin Mnternacional de 7eferencia de la G4.. En la prctica el M#7 del plasma de un paciente se deri"a de la relacin de , y del ndice de .ensibilidad Mnternacional &M.M' de la tromboplastina. El M#7 se calcula usando la siguiente formula$ M#7$ & , ACME#,E'M.M & , #G74A%' %a G4. *a propuesto que los fabricantes de tromboplastina indiquen la sensibilidad de cada lote de reacti"o con el M.M correspondiente y que proporcionen una tabla de con"ersin en trminos de los resultados de ,. Es importante tener en cuenta las "ariaciones que pueden causar imprecisin del M#7, estas incluyen$ imprecisin en la calibracin del M.M por un mtodo anunciado, estimada en aproximadamente 9J. Aariacin entre laboratorios en la relacin mediada para el ,, estimada en aproximadamente CJ para M.M de 5.6 y de BJ para M.M de >.6. %a "ariacin biolgica del M#7 de un paciente estimada en aproximadamente =J,. ara tromboplastina con un M.M de 5.6 parece posible limitar la "ariacin total en el M#7 de un paciente de 55 a 5;.9J. ara tromboplastinas con un M.M de >.6 a >.9 puede obser"arse una "ariacin ms grande de *asta >:J. or lo tanto no se recomienda utilizar para , tromboplastinas que tengan un M.M superior a >.9. Entre las ms importantes "ariables pre-prueba estn, pronta centrifugacin, minimizacin de los efectos de en"e!ecimiento de la muestra, adecuada tcnica de congelacin y descongelacin, presencia de *eparina, anticoagulante usado para el plasma, entre otros. ara efectos prcticos de unificacin de resultados, se recomienda informar el resultado de , as$ 7esultados en segundos del paciente, control normal en segundos1 e M#7, correspondiente al resultado del paciente. .e considera prolongado un , cuando el M#7 sea superior a 5.;. TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA TISULAR

Cuando se a/ade calcio y cantidad suficiente de fosfolpidos plaquetarios al plasma, se acti"an todos los factores de la coagulacin necesarios para la formacin de protombinasa intrnsica, esta acti"a la protombina y la trombina as formada con"ierten el fibringeno en fibrina. MATERIALES Y REACTIVOS: 7eacti"o para ,, Agua destilada Cloruro de calcio 6.6>9 4 lasma control normal Cronmetros +a/o 4aria a ;C6C ,ubos de "idrio de 5> mm x C.9 cm 4icropipetas graduadas de 566 microlitros ipetas "olumtricas de 5.> y 9 ml

PROCEDIMIENTO: recalentar a ;C6C los tubos de ensayo ara la reconstitucin y conser"acin del reacti"o debern seguirse las instrucciones indicadas por el fabricante 7ealizar por duplicado cada prueba iniciando con el control normal Calentar a ;C6C un "olumen suficiente de cloruro de calcio 6.6>9 4 <isponer 6.5 ml de reacti"o en cada tubo A/adir 6.5 ml de plasma al tubo correspondiente e incubar de ; a 9 minutos A/adir 6.5 ml de cloruro de calcio 6.6>9 4 precalentado a ;C6C simultneamente poner el cronometro en marc*a arar el cronometro en el momento de la formacin del coagulo.

VALOR NORMAL: 2$ ) "$ 5,7 INTERPRETACION: El ,, esta prolongado en las deficiencias congnitas o adquiridas de uno o mas de los factores ?MM, ?M, ?, M?, AMMM, A, protombina y fibringeno. Esta prolongado si el fibringeno es inferior a 566 mgJ1 cuando aparecen productos de degradacin de fibringeno o de fibrina. uede estar prolongado en presencia de anticuerpos antifosfolpido anticoagulante l8pico. En indi"iduos normales que no tienen *istoria *emorrgica ni alteraciones de los factores de coagulacin ocasionalmente se encuentra un ,, ligeramente prolongado.

El ,, es la prueba mas com8nmente usada para controlar terapia anticoagulante con *eparina. %a *eparina tiene una "ida media de aproximadamente I *oras, requiere de antitrombina MMM como cofactor para poder inacti"ar las proteasas de serina acti"adas &3actor ?MMa, ?Ma, M?a, ?a y MMa', su efecto anticoagulante es inmediato, dato que se debe tener en cuenta cuando se este monitorizando un paciente *eparinizado. FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ANTICUAGULANTE DE LA HEPARINA IN VIVO <estruccin plaquetaria y liberacin del factor plaquetario I ,ipo de *eparina roporcin de difusin en el espacio extra"ascular 7esistencia del paciente despus de una trombosis 4edicamentos que interfieren$ Antibiticos, nicotina, glucosa 9J en agua, anti*istamnicos.

FACTORES QUE AFECTAN IN VITRO ,iempo de recoleccin %iberacin del factor plaquetario I por recoleccin o centrifugacin inadecuada Anticoagulante &citrato u oxalato' <osificacin incorrecta ruebas utilizadas para monitorizar Mnstrumentos

CUESTIONARIO: 5. Mnterprete las causas por el cual se presentan las siguientes alteraciones$ , anormal y ,,a normal , anormal y ,, anormal , normal y ,,a anormal

>. En que consiste el ,iempo de ,rombina &,,' y su "alor normal 3. 4. En que consiste la prueba del <mero <. Cuales son los in*ibidores naturales del proceso de fibrinolisis y por quX

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. >

SISTEMA GENITAL OBJETIVOS: <eterminar la clasificacin sangunea en relacin con sistema A+G y el sistema 7D, efectuando pruebas que identifique el tipo sanguneo de cada uno de los pacientes. Conocer la importancia de las clulas %E como diagnstico para el %upus Eritematoso .istmico Mdentificar la existencia de una incompatibilidad sangunea teniendo en cuenta el sistema A+G y el sistema 7* Conocer los parmetros de un cuadro *emtico en las patologas relacionadas al sistema genital como el DMA, Derpes tipo M y MM, .filis, #eisseria gonorr*oeae Candida, C*lamydia trac*omatis, 0ardnerella "aginalis, Airus del papiloma *umano, 4icoplasma, entre otras.

FUNDAMENTO: LUPUS ERITEMATOSO SISTEMICO Es una enfermedad inflamatoria crnica de causa desconocida, que afecta a todas las edades, pero con mayor frecuencia a adultos entre los 5= y 96 anos y a ambos sexos, con predominio del sexo femenino en una proporcin de un *ombre por cada 56 a 5> mu!eres. Esta es una enfermedad de todos los rganos y sistemas, primordialmente las articulaciones, m8sculos y piel, pero tambin aunque en menor grado, de estructuras internas como los pulmones, ri/ones y cerebro. Existen tres tipos de lupus, la forma localizada o discoide, la forma generalizada o sistmica y el lupus secundario a medicamentos o lupus por frmacos. <e todos ellos, la forma sistmica es la mas frecuente. %a forma discoide es tambin llamado lupus benigno, porque en el B6J de los casos se limita a afectar solamente la piel. El lupus por frmacos, desaparece al suspender el medicamento causante. El %E., es una enfermedad donde loa anticuerpos atacan y destruyen los te!idos de nuestro propio cuerpo, produciendo lesiones en todas las estructuras, aunque en grado y extensin "ariables en cada paciente. %os antgenos en esta enfermedad, son substancias propias, se les denominan auto-antgenos y de aqu el nombre de la enfermedad auto-inmune como tambin se le *a dado al %E.. <ado a que estos auto-antigenos son desconocidos como propios en los pacientes con esta enfermedad, se produce una respuesta auto-inmune, como resultado de la enfermedad. El cuerpo se

*ace alrgico as mismo, con la produccin de gran cantidad de anticuerpos agresores. DIAGNOSTICO: .e realiza el examen de clulas del %upus eritematoso &E%' se utiliza primordialmente para diagnosticar el %upus eritematoso sistmico &%E.'. V)341,5 N41:)3,5: %a ausencia de clulas %E es normal. S+7-+B+*)04 0, 345 1,523.)045 )-41:)3,5: <e un 96 a un C9J de los pacientes con %E. tienen un examen positi"o. Algunos pacientes con artritis reumatoidea, con esclerodermia y con sensibilidad a los medicamentos, tambin muestran un examen de clulas de lupus eritematoso positi"o. GRUPOS SANGUINEOS El grupo sanguneo es cada uno de los di"ersos tipos en que se *a clasificado la sangre de las personas en relacin con la compatibilidad de los *emates y suero de otro indi"iduo que la recibe. Estos grupos son cuatro, seg8n la clasificacin que *izo %andsteiner, clasificacin *oy uni"ersal y se denominan$ G, A, +, A+. .e caracterizan por las diferentes combinaciones de dos aglutingenos existentes en los glbulos ro!os y de dos aglutininas contenidas en el suero. FACTOR RH: El factor 7* es un aglutingeno encontrado en 5BI6 por %andsteiner y @einer, en los glbulos ro!os en unos primates &4acacus r*esus' y que tambin existe normalmente en el =9J de los *umanos, que por esta causa se denomina 7* positi"os. %a sangre de estos transfundida a los 7* negati"os &59J', pro"oca en el suero de estos 8ltimos la formacin de anticuerpos, que en sucesi"as transfusiones pueden destruir los glbulos ro!os del donante 7* positi"o, in"alidando as la transfusin y creando efectos ad"ersos. ,ambin en el embarazo un feto 7* F puede pro"ocar en la madre 7* H la produccin de aglutininas que podrn ser la causa de la enfermedad *emoltica de los recin nacidos. El factor 7* esta constituido por un comple!o de seis antgenos fundamentales, formado por tres pares de genes alelos$ C*& D0& E,. El antgeno de mayor poder sensibilizante es el D, le siguen en importancia el , y el E.

)n grupo sanguneo es una forma de agrupar ciertas caractersticas de la sangre que dependen de los antgenos presentes en la superficie de los glbulos ro!os y en el suero de la sangre. %as dos clasificaciones ms importantes para describir grupos sanguneos en *umanos son los antgenos y el factor 7*. %as transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden desembocar en *emlisis, anemia, fallo renal, s*ocV y muerte. LOS ANTIGENOS: %as personas con sangre del tipo A tienen glbulos ro!os que expresan antgenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antgenos + en el suero de su sangre. Anlogamente, las personas con sangre del tipo + tienen la combinacin contraria, glbulos ro!os con antgenos de tipo + en su superficie y anticuerpos contra los antgenos A en el suero de su sangre. %os indi"iduos con sangre del tipo G no expresan ninguna de los dos antgenos &A o +' en la superficie de sus glbulos ro!os, pero pueden fabricar anticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo A+ expresan ambos antgenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos. A causa de estas combinaciones, el tipo G puede ser transfundido sin ning8n problema a cualquier persona con cualquier tipo A+G y el tipo A+ puede recibir de cualquier tipo A+G HERENCIA DEL TIPO ABO: %os grupos sanguneos son *eredados de los progenitores. .on controlados por un solo gen con tres alelos$ O& A& B El alelo A da tipo A, el B da tipos + y el alelo + da tipos G, siendo A y + dominantes sobre i. As las personas que *eredan dos alelos ii tienen tipo G1 AA o Ai dan lugar a tipo A1 y ++ o +i dan lugar a tipos +. %as personas A+ tienen ambos fenotipos debido a que la relacin entre los alelos A y + es de codominancia. or lo tanto, es prcticamente imposible para unos progenitores A+ el tener un *i!o con tipo G. HERENCIA DEL FACTOR RH: El factor 7* es *eredado de la misma forma, con la diferencia de que *ay dos alelos y el 7* es dominante. %os alelos son 7* F y 7* H

FRECUENCIA: %a distribucin de los grupos sanguneos en la poblacin *umana no es uniforme. El ms com8n es GF, mientras que el mas infrecuente es A+-. Adems, *ay "ariaciones en la distribucin en las distintas subpoblaciones *umanas. TIPO FRECUENCIA =+ #=/ A+ "#/ B+ @/ O? >/ A? G/ AB+ "/ B? 2/ AB? 1/

PRACTICA: HEMOCLASIFICACION INVERSA Y DIRECTA DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO ABO %as pruebas utilizadas para establecer la *emoclasificacin sangunea relacionada a los di"ersos grupos sanguneos, apro"ec*an las caractersticas inmunolgicas que expresa cada indi"iduo de acuerdo a su particular codificacin gentica. En dic*as pruebas se e"idencian los antgenos y(o anticuerpos del grupo sanguneo, de acuerdo a su comportamiento in Aitro. En cuanto al sistema A+G se in"estigan tanto antgenos o aglutingenos como los anticuerpos o isoaglutininas naturales. %oa glbulos ro!os utilizados en estos procedimientos poseen en la membrana los antgenos, adems nos facilitan la "isualizacin de la reaccin como si fuesen los indicadores del punto final de la *emoaglutinacin. %a *emoaglutinacin se considera la reaccin de Ag H Ac de mayor utilidad en el laboratorio de inmuno*ematologa, por lo que se *ace indispensable recordar las caractersticas y las condiciones que modifican dic*a reaccin, para poder determinar con claridad los requerimientos ptimos que permitan obtener la mayor constante de equilibrio en cada prueba especifica y en esta forma se asegure la confiabilidad y contribucin exitosa de los procedimientos empleados en el estudio de los grupos sanguneos. MATERIALES Y REACTIVOS: .uero Anti A, Anti +, Anti A,+ 0lbulos ro!os A, + y G ,ubos de ensayo .olucin salina 6.=9J ipetas pasteur

Centrifuga 4uestra de sangre con E<,A .uero del paciente %aminas del paciente alillos

PROCEDIMIENTO 1. HEMOCLASIFICACION DIRECTA: A. MI.404 ,- .2;4: 4arque los tubos con Anti A, Anti +, Antti A,+ %a"ar los glbulos ro!os del paciente ; "eces consecuti"os en solucin salina y preparar una suspensin final al ;J en dic*a solucin. Adicionar$ A 2 74.)5 ? ? 1 G4.) B ? 2 G4.)5 ? 1 G4.) AB ? ? 2 G4.)5 1 G4.)

R,)*.+F4 )-.+?A R,)*.+F4 )-.+?B R,)*.+F4 )-.+ AB GR ()*+,-.,

4ezclar cada tubo y centrifugar 59 H ;6 segundos 7esuspender sua"emente los botones celulares y obser"ar aglutinacin

G.M,MAG$ Aglutinacin con cualquier antisuero. 7eacciones positi"as ;F o IF de aglutinacin. #E0A,MAG$ %a presencia de una suspensin uniforme de 07 &G' 1. HEMOCLASIFICACION DIRECTA: B. MI.404 ,- 3):+-): 4arcar tres laminas portaob!eto como A, + y A+ Adicionar$ A 2 74.)5 ? ? 1 G4.) B ? 2 G4.)5 ? 1 G4.) AB ? ? 2 G4.)5 1 G4.)

R,)*.+F4 )-.+?A R,)*.+F4 )-.+?B R,)*.+F4 )-.+ AB GR ()*+,-.,

4ezclar cada preparacin con un palillo 7otar manualmente cada lamina Gbser"ar aglutinacin y registrar los resultados

G.M,MAG$ %a aglutinacin fuerte de los glbulos ro!os en presencia de cualquier anticuerpo A+G. %as reacciones positi"as muestran ;F de aglutinacin #E0A,MAG$ %a presencia de una suspensin uniforme &G' de glbulos ro!os. 2? HEMOCLASIFICACION INVERSA: PRUEBA INVERSA EN TUBO: 4arcar tres tubos como A, +, G Adicionar$ A 2 G4.)5 1 G4.) B 2 G4.)5 1 G4.) 1 G4.) O 2 G4.)5

S2,14 ()*+,-., GR A GR B GR O

Mncubar de 9 H 59 minutos a temperatura ambiente 4ezclar cada tubo y centrifugar por 59 H ;6 segundos Al terminar la centrifugacin obser"ar el sobrenadante para e"idencia la presencia de *emlisis. 7esuspender los botones celulares y obser"ar aglutinacin.

G.M,MAG$ Aglutinacin y(o *emlisis #E0A,MAG$ )na suspensin *omognea de eritrocitos. HEMOCLASIFICACION: SISTEMA RH (A7 D) En el sistema 7*, existen "arios antgenos$ <, C, c, E, e1 sin embargo, de rutina, solo se determina la presencia del Ag < en los eritrocitos y de acuerdo a su presencia o ausencia se dice que un indi"iduo es 7* < positi"o o 7* < negati"o. MATERIALES Y REACTIVOS: .uero Anti < ,ubos de ensayo

.olucin salina 6.=9J ipetas pasteur Centrifuga 4uestra de sangre con E<,A %aminas portaob!etos alillos Albumina +o"ina

PROCEDIMIENTO: 1. P12,;) 0+1,*.) ,- 3):+-): 4arcar dos laminas como < y control Adicionar$ D 2 G4.)5 ? 1 G4.) C4-.143 ? 2 G4.)5 1 G4.)

S2,14 A-.+?D A3;J:+-) B4F+-) 22/ S)-71,

4ezclar con palillos cada preparacin 7otar manualmente las laminas y obser"ar aglutinacin.

G.M,MAG$ Aglutinacin de glbulos ro!os #E0A,MAG$ )na suspensin uniforme de glbulos ro!os OBSERVACIONES: .i la preparacin de glbulos ro!os con alb8mina al >>J presenta aglutinacin, la prueba no se puede interpretar. %a desecacin en los bordes de la preparacin, no se debe confundir con aglutinacin. 2. P12,;) 0+1,*.) ,- .2;4: %a"ar los glbulos ro!os del paciente tres "eces con solucin salina y suspenderlos del ; H 9J 4arcar dos tubos como < y control Adicionar S2,14 A-.+ D A3;J:+-) B4F+-) )3 D 2 G4.)5 ? CONTROL ? 2 G4.)5

22/ GR ()*+,-.,

1 G4.)

1 G4.)

4ezclar sua"emente y centrifugar durante 59 -;6 segundos 7esuspender el botn celular y obser"ar aglutinacin

G.M,MAG$ %a aglutinacin de los glbulos ro!os con anti-< #E0A,MAG$ )na suspensin uniforme de los glbulos ro!os con anti-< OBSERVACIONES: .i en el control se obser"a aglutinacin, la prueba no se puede interpretar, *asta realizar mas anlisis. DETERMINACION DEL A7 DEBIL Consiste en determinar la "ariante < dbil en una muestra pre"iamente tipificada como 7*$ < negati"o %a determinacin de la "ariante < dbil, solo se realiza a muestras que por el mtodo manual usual *an resultado < negati"as. MATERIALES Y REACTIVOS: .uero Anti < ,ubos de ensayo .olucin salina 6.=9J ipetas pasteur Centrifuga 4uestra de sangre con E<,A %aminas portaob!etos alillos Alb8mina +o"ina +a/o 4aria a ;C6C

PROCEDIMIENTO: %a"ar los eritrocitos a tipificar ; "eces con solucin salina y suspenderlos al ; H 9J 4arcar dos tubos con < y Control Adicionar$ D CONTROL

A-.+ ! D A3;J:+-) B4F+-) GR ()*+,-.,

2 G4.)5 ? 1 G4.)

? 2 G4.)5 1 G4.)

4ezclar e incubar los tubos a ;C6C durante 59 H ;6 minutos, seg8n las especificaciones del fabricante Centrifugar 59 H I9 seg 7esuspender los botones celulares sua"emente y obser"ar la presencia de aglutinacin. .i el tubo con anti H <, los eritrocitos estn fuertemente aglutinados, pero no en el tubo control, registrar la prueba como < positi"a y no realizar la fase siguiente con el suero de Coombs .i las clulas no son aglutinadas o los resultados son dudosos, la"ar los eritrocitos ; "eces con abundante solucin salina. <ecantar la ... Adicionar$ D 1 G4.) CONTROL 1 G4.)

S2,14 0, C44:;5

4ezclar y centrifugar 59 H ;6 seg 7esuspender sua"emente cada botn celular, examinar para aglutinacin y registrar el resultado teniendo en cuenta la escala de intensidad. .i *ay aglutinacin en el tubo de prueba con anti H <, entonces el resultado es < positi"o. .i el resultado es negati"o, adicionar$ D 1 G4.) CONTROL 1 G4.)

CI323)5 *4-.143 0, C44:;5

- L)5 *I323)5 *4-.143 0, C44:;5 54- GR O RH D (45+.+F4 5,-5+;+3+K)045 *4- )-.+ D 7epetir la centrifugacin por 59 H ;6 seg. %a aglutinacin en este punto refle!a la presencia de suero antiglobulina libre y confirma que la reaccin era realmente #egati"a

OBSERVACIONES: .i se presenta aglutinacin en cualquier fase de la prueba en el tubo control, no se puede realizar la lectura.

CUESTIONARIO: 1. 7ealice un cuadro con los parmetros normales del cuadro *emtico para recin nacido, ni/os de 5 mes, lactantes y ni/os mayores

2. Nue es el 3enotipo +ombay 3. 7ealice una tabla de compatibilidad entre los grupos sanguneos, teniendo en cuenta para cada grupo el 7* &-' y el 7* &F'..

4. Nue parmetros son caractersticos del cuadro *emtico frente a las patologas del sistema genital

RESULTADOS DEL LABORATORIO GRUPO NO: %%%%%%% INTEGRANTES:

HEMOCLASIFICACCION ABO: D+1,*.) ,- 3):+-)

D+1,*.) ,- .2;4
ANTI? A AB ANTI?B ANTI

I-F,15) B

7esultado de la muestra analizada$ 0rupo$LLLLLLLLLLLL

RESULTADOS DEL LABORATORIO

H,:4*3)5+B+*)*+<- RH:

D+1,*.) ,- 3):+-) A-.+ ! D C4-.143

D+1,*.) ,- .2;4 A-.+ ! D C4-.143

H,:4*3)5+B+*)*+<-: A7 D DEBIL

D C,-.1+B27)*+4+-:,0+).) F)5, C44:;5 C,323)5 *4-.143 0, C44:;5 R,523.)045 0, 3) :2,5.1) )-)3+K)0):

CONTROL

RH: %%%%%%%%%A7 D 0I;+3: %%%%%%%%%%%%

ANALISIS:

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA

UNIDAD N. 6 SISTEMA ANDROGINECOLOGICO. OBJETIVOS: Mdentificar por medio del laboratorio las pruebas que son diagnosticas para un sndrome antifosfolpido <iferenciar un dengue *emorrgico de un dengue clsico utilizando los parmetros diagnsticos del cuadro *emtico Adquirir destreza en el recuento de las plaquetas por el mtodo directo e indirecto Clasificar las p8rpuras de acuerdo a su fisiopatologa e identificar las pruebas de laboratorio que ayudan a su diagnostico

FUNDAMENTO: SINDROME ANTIFOSFOLIPIDO El sndrome antifosfolpido es una enfermedad auto-inmune en la que el cuerpo produce grandes cantidades de anticuerpos antifosfolpidos. %os fosfolpidos son un tipo de grasa especial que contiene el fosfato que constituye las paredes externas de las clulas del cuerpo. %os anticuerpos antifosfolpidos atacan a los fosfolpidos. Esto ocasiona di"ersos problemas incluyendo un aumento en la coagulacin de la sangre. %a cardiolipina es un tipo de fosfolpido y puede desarrollarse anticuerpos anticardiolopinas especficos. %a enfermedad es aproximadamente dos "eces mas frecuente en mu!eres que en *ombres. 0eneralmente se caracteriza por lo siguiente$ ,rombosis H cogulos de sangre en arterias o "enas &especialmente en las piernas', cogulos en los "asos sanguneos del sistema ner"ioso central &cerebro y medula espinal' puede pro"ocar accidentes cerebro"asculares ,rombocitopenia erdida del embarazo &especialmente perdidas repetidas'

En el embarazo puede afectar tanto a la madre como al bebe. En mu!eres con el .A3, los riesgos pueden ser los siguientes$ Accidentes cerebro"asculares Cogulos sanguneos Dipertensin

%a muerte del feto Aborto espontneo recurrente 7etardo del crecimiento intrauterino #acimiento prematuro

El .A3 puede ser primario si no acompa/a alguna enfermedad autoinmune o secundario cuando se presenta en el contexto de un %E.. El .A3 primario o secundario, los anticuerpos antifosfolpidos *an sido descritos en una amplia "ariedad de desordenes, sean estos reumticos, inducidos por drogas, malignidad o infecciones. LABORATORIO: .on de utilidad para el diagnostico de esta entidad pruebas reagnicas, inmunolgicas y coagulomtricas. El anticoagulante l8pico se determina mediante pruebas que ponen de manifiesto de forma indirecta la presencia de anticuerpos dirigidos contra la fraccin fosfolipdica del comple!o acti"ador de la protrombina. Mnicialmente se utilizan pruebas que puedan e"idenciar alteraciones de los tiempos de la coagulacin, mediante la prolongacin del tiempo parcial de tromboplastina & ,,', tiempo de Caoln y tiempo de "eneno de "bora de 7ussel. .i algunas de estas pruebas es anormal, se repite utilizando una muestra en el cual el plasma del paciente se mezcla con la de un su!eto normal. .i el paciente tu"iese dficit de alg8n factor de la coagulacin, la prueba debera normalizarse, caso contrario ante el anticoagulante l8pico, permanece prolongado. As mismo la presencia del A% se confirma con la normalizacin de la prueba al a/adir plaquetas o un exceso de fosfolpidos. %a determinacin del A%, debe *acerse en plasma pobre en plaquetas, adems estas pruebas carecen del "alor si el paciente se encuentra en tratamiento anticoagulante. P12,;)5 1,)7C-+*)5: A<7% &F' con 3,ALA+. &-' P12,;)5 +-:2-43<7+*)5: Anticuerpos anticardiolipinas &por tcnica de E%M.A' Msotipos Mg0 e Mg4 P12,;)5 *4)7234:I.1+*)5: rolongacin del tiempo parcial de tromboplastina & ,,' rolongacin del tiempo de Caoln rolongacin del tiempo de "eneno de "bora de 7ussel.

El *ec*o de que un ;6J no coexisten los anticuerpos anticardiolipinas y el anticoagulante l8pico *ace necesario la realizacin de estas pruebas, con la finalidad de poder identificar los posibles pacientes con este sndrome. CRITERIOS DIAGNOSTICOS: El diagnostico del .A3 se basa en el cumplimiento de criterios clnicos y de laboratorio. M)-+B,5.)*+4-,5 *3C-+*)5: ,rombosis arteriales y ( o "enosas Abortos y ( o muertes fetales a repeticin ,rombocitopenia )lceras en piernas Anemia *emoltica

P)1L:,.145 0, 3);41).41+4: AAC H Mg0 &titulo medio H alto' AAC H Mg4 &titulo medio H alto' A% &F' .e requiere de un criterio clnico y uno de laboratorio. Adems la prueba para AA3 debe ser positi"a por lo menos en dos ocasiones, separadas mas de tres meses. DENGUE Enfermedad infecciosa tropical transmitida por el mosquito Aedes aegypty, caracterizada por fiebre y dolor intenso en las articulaciones y m8sculos, inflamacin de los ganglios linfticos y erupcin ocasional de la piel. Es producida El dengue es endmico en algunas zonas de los trpicos y *an aparecido epidemias en pases tropicales y templados. Carece de tratamiento especfico y de "acuna. Con frecuencia tiene una e"olucin de seis a siete das, pero la con"alecencia es larga y lenta. El dengue *emorrgico, es una forma mas gra"e del dengue y puede ser mortal si no se trata adecuadamente. %a fiebre puede durar de ; a 9 das &rara "ez mas de C das, y suele ser difsica'. Cefalea intensa, mialgias artralgias, dolor retroorbital, anorexia, alteraciones del aparato gastrointestinal y exantema rubeliforme. En algunos casos aparece tempranamente eritema generalizado.

En la seccin correspondiente al dengue *emorrgico se presentan un incremento en la permeabilidad "ascular, manifestaciones *emorrgicas y ataque de rganos especficos. En cualquier momento durante la fase febril pueden aparecer fenmenos *emorrgicos de poca intensidad, como petequias y epistaxis. En las personas de piel oscura la erupcin a menudo no es "isible. %a recuperacin puede acompa/arse de fatiga y depresin duradera. .on frecuentes las linfoadenopatas. %as epidemias tienen carcter explosi"o, pero la tasa de letalidad es muy ba!a, siempre que no aparezca el dengue *emorrgico. LABORATORIO: Mnicia leucopenia con linfocitosis relati"a1 con menor frecuencia se obser"an trombocitopenia &menor de 566.666 plaquetas por mm;' e incremento de las aminotransferasas. D,-72, *4:J- (*3L5+*4) Y %eucopenia o leucocitosis Y ,rombocitopenia D,-72, H,:411L7+*4 Y ,rombocitopenia &menos de 566.666(mm; ' Y Extra"asacin de plasma manifiesta por cualquiera de los siguientes signos$ - Dematocrito inicial situado un >6J o ms por encima del correspondiente a esa edad, sexo y poblacin. - <escenso mayor del >6J del *ematocrito despus del tratamiento o signos *abitualmente asociados a la extra"asacin de plasma como derrame pleural u otros derrames serosos, o *iperproteinemia El diagnostico diferencial incluye todas las enfermedades epidemiolgicamente importantes incluidas ba!o los episodios febriles "ricas transmitidas por artrpodos, sarampin, rubola y otras enfermedades febriles sistmicas. Con tcnicas auxiliares en el diagnostico pueden utilizarse las pruebas de in*ibicin de la *emoaglutinacin, fi!acin del complemento. E%M.A, captacin de

anticuerpos Mg0 e Mg4, as como las de neutralizacin. El "irus se asla de la sangre por inoculacin de mosquitos o por tcnicas de culti"o celular de mosquitos o "ertebrados, y despus se identifican con anticuerpos monoclonales con especificidad de tipo. PERIODO DE TRANSMISIBILIDAD: #o se transmite directamente de una persona a otra. %os enfermos suelen infectar a los mosquitos desde el da anterior *asta el final del periodo febril que es, en promedio, de unos cinco das. El mosquito se "uel"e infectante de = a 5> das despus de alimentarse con sangre, y as continua durante toda su "ida. PERIODO DE INCUBACION: <e ; a 5I das, por lo com8n de C a 56 das. MEDIDAS PREVENTIVAS: Educacin de la poblacin respecto a medidas personales tales como destruccin de los criaderos y proteccin contra la picadura de mosquitos de acti"idad diurna, incluso el empleo de mosquiteros, ropas protectoras y repelentes. PRACTICA: CUADRO HEMATICO MANUAL Y RECUENTO DE PLAQUETAS CUADRO HEMATICO MANUAL MATERIALES Y REACTIVOS: .angre total con E<,A 4icro*ematocritos ,abla de lectura o reglilla Cubetas orta cubetas ipeta de .al*i ipeta de glbulos blancos ,ubos de 5; x 566 mm 0radillas ipeta de 9 ml ipeteadores ipetas automticas

untas azules y amarillas ,apones de cauc*o Cmaras de #eubauer Ca!as de petri, papel filtro 7eacti"o de <rabVin 7eacti"o de ,urV Estndar o patrn de *emoglobina Aceite de inmersin Colorante de @rig*t .olucin +uffer, agua destilada 4icrocentrfuga Espectrofotmetro 4icroscopio

PROCEDIMIENTO: 1. MEDICION DEL HEMATOCRITO: 2 MEDICION DE LA HEMOGLOBINA: ". RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS: A. DILUCION EN TUBO: B. DILUCION EN PIPETAS DE BLANCOS:

#. EXTENDIDO Y COLORACION: $. RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS: G. RECUENTO DE PLAQUETAS MATERIALES Y EQUIPOS: .angre con E<,A Gxalato de amonio al 5J o Citrato de sodio al ;.=J ipeta de 0lbulos ro!os Cmara de neubauer %aminilla de cuarzo 4icroaspirador Ca!a de petri

apel filtro %aminas Colorante de Krig*t Agua destilada Aceite de inmersin 4icroscopio

PROCEDIMIENTO: A. METODO INDIRECTO: B. METODO DIRECTO: CUESTIONARIO: 1. 7ealiza un cuadro comparati"o con las diferentes p8rpuras mencionadas en clase. 2. Nue son las clulas C<; y C<I y como se realiza su recuento.

;. cuales son los "alores de referencia y en qu patologas se encuentran notablemente disminudas y cuales son los "alores para predecir la e"olucin de la patologaX I. Clasificar las p8rpuras de acuerdo a su fisiopatologa e identificar las pruebas de laboratorio que ayudan a su diagnostico

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. @ SISTEMA ENDOCRINO OBJETIVOS: Mdentificar las diferentes anemias teniendo en cuenta su fisiopatologa y su diagnostico en el laboratorio por medio de casos clnicos y extendido de sangre perifrica Estandarizar los mtodos utilizados para reportar los mtodos utilizados para reportar anormalidades celulares buscando unificar criterios en los sistemas de informacin de los resultados.

FUNDAMENTO: ANEMIAS %a anemia es un trastorno frecuente de la sangre que ocurre cuando la cantidad de glbulos ro!os es menor que lo normal, o cuando la concentracin de *emoglobina en sangre es ba!a. %a anemia a menudo es un sntoma de una enfermedad ms que una enfermedad en si misma. En general, se desarrolla debido a la presencia de uno de estos factores$ erdida excesi"a de sangre o *emorragia roduccin insuficiente de glbulos ro!os <estruccin excesi"a de glbulos ro!os

Q2, *)25) 3) )-,:+)M 0eneralmente, la anemia puede ser causada por "arios problemas incluyendo los siguientes$ Mnfecciones Ciertas enfermedades Ciertos medicamentos %a mala nutricin %a prdida de sangre

Existe anemia cuando la concentracin de *emoglobina en los eritrocitos y el "olumen globular &*to' estn por deba!o de los "alores normales. V)341,5 -41:)3,5 0, H,:4734;+-) Dombre$ 5I-5= g(dl 4u!er$ 5>-5: g(dl 7ecin nacidos$ 5:.9-5B.9 g(dl #i/os$ &"aria con la edad' 55.>-5:.> g(dl S+7-45 A 5C-.4:)5 0, 3) )-,:+) .e debe a la disminucin del aporte de oxigeno a los te!idos %os principales signos de un paciente anmico son$ 5. >. ;. I. 9. fatiga "rtigo desmayos cefalea palpitaciones

3sicamente los signos son$ 5. >. ;. I. palidez generalizada presin arterial ba!a fiebre ligera edema en algunos casos clnicos

CLASIFICACION DE LAS ANEMIAS ,eniendo en cuenta el A<E &anc*o de distribucin eritrocitaria' A7$ 56 -59J ,eniendo en cuenta el AC4 &"olumen corpuscular medio' A7$ =6 H 566 fl ANEMIAS MICROCITICAS HOMOGENEAS

A<E #G74A% O AC4 <M.4M#)M<G 1. ,alasemias 2. Anemias secundarias a enfermedades crnicas

ANEMIAS MICROCITICAS HETEROGENEAS

A<E A)4E#,A<G O AC4 <M.4M#)M<G 1. Anemia ferrop2nica 2. Algunas anemias *emolticas de tipo inmune ANEMIAS MACROCITICAS HOMOGENEAS

A<E #G74A% y AC4 A)4E#,A<G 1. 2. 3. I. 5. Anemia megaloblstica Anemias aplasia Anemias *emolticas Demoglobina .. resencia de aglutininas fras ANEMIAS NORMOCITICAS HOMOGENEAS

AC4 #G74A% O A<E #G74A% 1. 2. 3. 4. 5. 6. Anemias secundarias a enfermedades crnicas Demoglobina s, c acientes transfundidos acientes en quimioterapia &%%C' Demorragias Esferocitosis *ereditaria ANEMIAS NORMOCITICAS HETEROGENEAS

AC4 #G74A% O A<E A)4E#,A<G 1. <eficiencia de *ierro, "itamina b5> o folatos 2. Anemia sideroblstica 3. acientes transfundidos PRACTICA: ANALISIS DE EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA ANALISIS DE CASOS CLINICOS CUESTIONARIO: 5. Daga un paralelo entre las diferentes anemias, teniendo en cuenta$ etiologa, manifestaciones clnicas, parmetros de laboratorio.

2. Nu tipo de dilucin le *aran a la muestra de un paciente con anemia aplsica. Explica el procedimiento con un e!emplo. ;. Nu tipo de anemias requieren pruebas complementarias para su diagnstico, especifique la prueba y el ob!eto de la misma.

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. 1= BANCO DE SANGRE& SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y PERIFERICO OBJETIVOS: Conocer el procedimiento de las pruebas de compatibilidad y adquirir destreza en la realizacin del Coombs directo e indirecto Mnterpretar cada uno de los resultados y tomar decisiones en las incompatibilidad de las pruebas

FUNDAMENTO: ANTIGLOBULINA HUMANA O DE COOMBS %a prueba de antiglobulina o de Coombs, es un procedimiento necesario en el traba!o cotidiano de todo +anco de sangre, para demostrar la presencia de anticuerpos incompletos de grupos sanguneos, de significacin clnica, fracciones del complemento o algunos antgenos de los eritrocitos. %os anticuerpos incompletos, usualmente Mnmunoglobulina 0 &Mg0', son capaces de unirse a las clulas ro!as, pero no de aglutinarlas cuando estn suspendidas en solucin salina, por las caractersticas de su molcula, el tama/o muy peque/o1 sin embargo cuando se agrega otro anticuerpo, anti Mg 0, la aglutinacin se *ace posible. Este anticuerpo Mg 0 en si, es el suero antiglobulina. %a prueba tiene una utilidad clnica muy amplia1 es imprescindible cuando se trata de establecer la naturaleza inmune de di"ersas situaciones como$ una reaccin transfusional, la enfermedad *emoltica del recin nacido, una anemia *emoltica relacionada con drogas o con mecanismos autoinmunes. 3orma parte de estudios pretransfusionales que deben realizarse tanto al donante como al receptor, como las pruebas de compatibilidad y la deteccin e identificacin de anticuerpos inesperados. El principio de la prueba de la antiglobulina es demostrar anticuerpos incompletos, Mnmunoglobulina 0, o complemento, mediante el suero antiglobulina, el cual contiene un anticuerpo anti Mg 0 y ( o un anticuerpo anticomplemento.

El suero antglobulina se prepara a partir de colonias diferentes de cone!os inmunizados con globulinas *umanas. %os animales se inyectan con Mg 0 o betaglobulinas, altamente purificadas, las cuales act8an como inmunogenos y pro"ocan una respuesta de anticuerpos contra esas globulinas *umanas$ anticuerpos anti Mg 0 o anticuerpos contra el complemento. %a prueba de la antiglobulina se *ace mediante dos formas, la prueba directa y la prueba indirecta1 son mtodos similares, pero se diferencian en la reaccin de sensibilizacin de las clulas ro!as, es decir la unin entre antgeno y su correspondiente anticuerpo. En la prueba directa se demuestra esa sensibilizacin in "i"o, en la prueba indirecta in Aitro. PRACTICA: COOMBS DIRECTO E INDIRECTO COOMBS DIRECTO .e usa para demostrar in "i"o la cobertura de los eritrocitos con globulinas. Es 8til en la in"estigacin de anemias *emolticas autoinmunes, *emlisis inducida por drogas, eritroblastosis fetal, reacciones aloinmunes contra eritrocitos recientemente transfundidos. MATERIALES Y REACTIVOS: 4uestra de sangre con anticoagulante E<,A ,ubos de ensayo .olucin salina al 6.=9J Centrifuga ,apones de cauc*o Centrifuga 0radillas ipeta pasteur .uero de Coombs

PROCEDIMIENTO: %a"ar los eritrocitos ; "eces con .. y suspenderlos del ; H 9J 4arcar dos tubos como C< y control Adicionar$ CD 2 G4.)5 1 G4.) CONTROL 2 G4.)5 ?

S2,14 0, C44:;5 GR ()*+,-.,

GR O (45+.+F4

1 G4.)

T):;+I- (2,0, 1,)3+K)1 52 *4-.143 )0+*+4-)-04 045 74.)5 0,3 GR 0,3 ()*+,-., A 045 74.)5 0, SS Centrifugar 59 H I9 seg 7esuspender los botones celulares sua"emente y obser"ar la presencia de aglutinacin 0raduar la aglutinacin 6, 5F, >F, ;F, IF. .i el resultado es negati"o, adicionar$ CD 1 G4.) CONTROL 1 G4.)

CI323)5 *4-.143 0, C44:;5

7epetir la centrifugacin de 59 H I9 seg %a aglutinacin en este punto refle!a la presencia de suero antiglobulina libre y confirma que la reaccin era realmente negati"a.

OBSERVACIONES: .i se presenta aglutinacin en cualquier fase de la prueba en el tubo control, no se puede realizar la lectura. V)341 -41:)3: %a ausencia de aglutinacin &falta de agrupacin de clulas' es lo normal. S+7-+B+*)04 0, 345 1,523.)045 )-41:)3,5: )n examen de Coombs directo positi"o indica anticuerpos contra los glbulos ro!os, los cuales a su "ez pueden indicar la presencia de una de las siguientes condiciones$ Anemia *emoltica autoinmune sin otra causa subyacente Anemia *emoltica inducida por medicamentos Eritroblastosis fetal 4ononucleosis infecciosa Mnfecciones por 4icoplasma .filis %eucemia linfoctica crnica u otro trastorno linfoproliferati"o %upus eritematoso sistmico u otra condicin reumatolgica

7eaccin a transfusin como la ocasionada por unidades de sangre de compatibilidad inadecuada Esta prueba tambin es anormal en algunas personas sin que exista una causa clara, especialmente en personas de edad a"anzada. Dasta el ;J de las personas que estn *ospitalizadas sin un trastorno sanguneo conocido tendrn un resultado anormal en el examen de Coombs directo.

COOMBS INDIRECTO <etecta anticuerpos *acia los glbulos ro!os en la circulacin. Es importante para la determinacin de la compatibilidad entre dador y receptor en el caso de transfusiones de sangre. <etecta tambin la presencia de anticuerpos anti 7* en la madre durante el embarazo. E"al8a la necesidad de administrar inmunoglobulina 7* &Ag <'. Ayuda a confirmar el diagnostico de anemia *emoltica. MATERIALES Y REACTIVOS: .uero problema 4uestra de sangre con anticoagulante E<,A ,ubos de ensayo +a/o 4aria a ;C6C 4icropipetas Alb8mina +o"ina .uero de Coombs .olucin salina al 6.=9J Centrfuga 0radillas ipetas pasteur

PROCEDIMIENTO: .eparar el suero del paciente con el que se "a a realizar la prueba %a"ar los eritrocitos del paciente ; "eces con .. y suspenderlos del ; H 9J 4arcar dos tubos como CM y Control Adicionar$ CI 2 G4.)5 2 G4.)5 CONTROL 2 G4.)5 2 G4.)5

GR P)*+,-., S2,14 0,3 ()*+,-.,

Centrifugar 59 H I9 seg 7esuspender los botones celulares sua"emente y obser"ar la presencia de aglutinacin .i el resultado es negati"o, adicionar$ CI CONTROL A3;J:+-) B4F+-) 2 G4.)5 ? S432*+<- 5)3+-) )3 ? 2 G4.)5 =.6$/ Mncubar a ;C6C por >6 minutos <espus de la incubacin los glbulos ro!os se la"an tres "eces con .. al 6.=9J En el ultimo la"ado descartar la .. al 6.=9J *asta que quede la muestra en las paredes del tubo. Adicionar. CI 2 G4.)5 ? CONTROL ? 2 G4.)5

S2,14 0, C44:;5 S432*+<- 5)3+-) )3 =.6$/

Centrifugar 59 H I9 seg 7esuspender los botones celulares sua"emente y obser"ar la presencia de aglutinacin 0raduar la aglutinacin 6, 5F, >F, ;F, IF. .i el resultado es negati"o, adicionar$ CD 1 G4.) CONTROL 1 G4.)

CI323)5 *4-.143 0, C44:;5

7epetir la centrifugacin de 59 H I9 seg %a aglutinacin en este punto refle!a la presencia de suero antiglobulina libre y confirma que la reaccin era realmente negati"a.

V)341 -41:)3: %a ausencia de aglutinacin &falta de agrupacin de clulas' es lo normal. S+7-+B+*)04 0, 345 1,523.)045 )-41:)3,5:

,est positi"o indica la presencia de anticuerpos circulantes contra los glbulos ro!os En la embarazada con sangre 7* negati"o, un test con titulo positi"o alto significa que el feto puede desarrollar la enfermedad *emoltica del recin nacido.

CELULAS CONTROL DE COOMBS Cuando las pruebas de la antiglobulina, directa e indirecta, dan negati"as, es necesario "erificar el reacti"o antiglobulina. )na manera fcil es, a partir de la prueba negati"a, poner la suspensin en contacto con eritrocitos G 7*F, sensibilizados con anti < conocidos como clulas control de coombs y leer de nue"o. MATERIALES Y REACTIVOS: ,ubos de ensayo Antisuero anti < 0lbulos ro!os G 7*F, la"ados y suspendidos al ;-9J en solucion salina al 6.=9J PROCEDIMIENTO: %a"ar tres "eces glbulos ro!os GF Colocar = a 56 gotas de suspensin de glbulos ro!os G positi"os Colocar la misma cantidad de antisuero anti < al tubo Mncubar a ;CoC por ;6 minutos %a"ar de 9 a : "eces en solucin salina 6.=9J 7esuspender al ;-9J en solucin salina 6.=9J robar estos glbulos ro!os con una gota de suero de Coombs y buscar aglutinacin Este control dura I-9 das a IoC

INTERPRETACION: %a lectura con las clulas control de Coombs deben dar positi"as, no mayor de dos cruces. Es importante recordar que una prueba de la antiglobulina negati"a, sin control, puede interpretarse como una prueba negati"a, falsa. PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

Cuando a un paciente se le "a a realizar una transfusin de cualquier componente que contenga glbulos ro!os, se debe clasificar para los sistemas A+G y 7* &Ag <' y buscar el componente del mismo grupo A+G y 7* &Ag <'. Adems debe realizarse pruebas de compatibilidad, entre el suero o plasma del receptor y los eritrocitos del donante. %a prctica consiste en buscar 5 unidad de sangre compatible. 7ecolectar una muestra de sangre del receptor en tubo seco para obtener suero y en tubo con E<,A para la"ar glbulos ro!os .eparar el suero del receptor %a"ar los eritrocitos del receptor tres "eces con solucin salina y resuspenderlos del ;-9J <isponer de los tubos pilotos la bolsa pro"eniente del donante %a"ar los glbulos ro!os pro"enientes de los pilotos del donante tres "eces con solucin salina y resuspenderlos del ;-9J El procedimiento que se describe a continuacin se debe realizar para cada una de las unidades a transfundir 4arcar dos tubos uno con el numero de la bolsa y el otro como autocontrol Adicionar$

FASE SALINA: S2,14 1,*,(.41 GR 04-)-., GR 1,*,(.41 PRUEBA CRU'ADA 2 G4.)5 1 G4.) ? AUTOCONTROL 2 G4.)5 ? 1 G4.)

Centrifugar ;6 H I9 seg Gbser"ar la presencia de *emlisis en el sobrenadante. 7esuspender los botones para obser"ar aglutinacin1 si existe graduarla seg8n la escala %a presencia de *emlisis o aglutinacin, constituye una prueba cruzada incompatible, una suspensin *omognea de eritrocitos se considera como una prueba cruzada compatible en la 3ase .alina o inmediata.

FASE ALBUMINA: A3;J:+-) ;4F+-) PRUEBA CRU'ADA 2 G4.)5 AUTOCONTROL 2 G4.)5

Mncubar 59-;6 minutos a ;C6C

Centrifugar ;6 H I9 seg Gbser"ar la presencia de *emlisis en el sobrenadante. 7esuspender los botones para obser"ar aglutinacin1 si existe graduarla seg8n la escala %a presencia de *emlisis o aglutinacin, constituye una prueba cruzada incompatible, una suspensin *omognea de eritrocitos se considera como una prueba cruzada compatible en la 3ase de Alb8mina %a"ar tres "eces con .. y decantar bien el sobrenadante en el ultimo la"ado

FASE DE COOMBS: S2,14 0, C44:;5 PRUEBA CRU'ADA 2 G4.)5 AUTOCONTROL 2 G4.)5

Centrifugar ;6 H I9 seg 7esuspender los botones para obser"ar aglutinacin. .i existe, graduarla seg8n la escala %a presencia de *emlisis o aglutinacin, constituye una prueba cruzada incompatible, una suspensin *omognea de eritrocitos se considera como una prueba cruzada compatible en la 3ase de Coombs .i el resultado es negati"o, adicionar$ PRUEBA CRU'ADA 1 G4.) AUTOCONTROL 1 G4.)

CI323)5 *4-.143 0, C44:;5

Centrifugar ;6 H I9 seg Gbser"ar aglutinacin y registrar los resultados %a presencia de *emlisis o aglutinacin, confirma que la prueba era realmente negati"a en la fase de Coombs y que se *a traba!ado correctamente. &Este es un control interno que no se informa'.

OBSERVACIONES: En algunos centros se emplean medios diferentes a la alb8mina para disminuir el potencial R1 entre ellos estn la solucin salina de ba!a fuerza inica &%M..', el olietilenglicol & E0' y el olibreno de ba!a intensidad &%M '. ara cada uno existen protocolos que se deben seguir cuidadosamente El autocontrol debe permanecer negati"o siempre

.e deben registrar los resultados para cada unidad. .i la prueba es incompatible la unidad no se debe trasfundir, se debe buscar otra unidad de sangre y realizar las pruebas cruzadas correspondientes.

CUESTIONARIO: 1. Nu es un +anco de .angre

2. Nu tipos de +anco de .angre existen 3. Nu es un donante y cuales son los criterios para proteger al donante 4. Nu es el receptor y cuales son los criterios para proteger al receptor 9. <efina$ 3lebotoma teraputica. <onacin autloga. Demaf2resis. 7eceptor especifico. <onacin dirigida. <onacin Aoluntaria

:. Cuales son las pruebas fsicas y de laboratorio que se realizan antes de la donacin C. Cuales son las condiciones que se deben tener en cuenta para que la flebotoma sea un xito. 8. Cuales son los criterios de autoexclusin de un paciente 9. Cuales son los parmetros postdonacin 10. Enumere algunas reacciones ad"ersas a la donacin 55. Cuales son los componentes que conforma la sangre total 12. Cuales son las pruebas de laboratorio que se le realiza a cada unidad de sangre. 5;. Cuales son las alteraciones *ematolgicas de acuerdo a la etiologa de las meningitis.

RESULTADOS DEL LABORATORIO GRUPO N= %%%%%%% INTEGRANTES:

1. H,:4*3)5+B+*)*+<- R,*,(.41: H,:4*3)5+B+*)*+<- ABO: H,:4*3)5+B+*)*+<- RH: D+1,*.) ,- 3):+-) A-.+ D C4-.143

I-.,1(1,.)*+<-: G12(4: %%%%%%%%%% RH:%%%%%%%%%%% 2. H,:4*3)5+B+*)*+<- D4-)-., (;435)): H,:4*3)5+B+*)*+<- ABO: D+1,*.) ,- 3):+-) D+1,*.) ,- .2;4 I-F,15)

ANTI? A AB

ANTI?B

ANTI

ANTI? A AB

ANTI?B

ANTI

H,:4*3)5+B+*)*+<- RH: D+1,*.) ,- 3):+-) A-.+ D C4-.143

I-.,1(1,.)*+<-: G12(4: %%%%%%%%%% RH:%%%%%%%%%%% ". P12,;) C12K)0): P12,;) C12K)0) F)5, S)3+-) F)5, A3;J:+-) F)5, 0, C44:;5 CI323)5 *4-.143 0, C44:;5 I-.,1(1,.)*+<-: %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% A2.4*4-.143

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. 11 SISTEMA INMUNE OBJETIVOS: <iferenciar las leucemias agudas de las crnicas teniendo en cuenta sus *allazgos principales Mdentificar las leucemias mieloides y linfoides morfolgicamente por medio de las caractersticas de las clulas inmaduras Conocer los parmetros citoqumicos que complementan el diagnostico de las anemias

FUNDAMENTO: LEUCEMIAS AGUDAS .e caracterizan por la presencia de clulas blsticas y leucocitos inmaduros en sangre perifrica y en medula sea, casi siempre en estas leucemias "a *aber anemia, leucocitosis, aunque algunos pacientes pueden presentar n8meros normales o ba!os y casi siempre se presenta trombocitosis. El promedio de "ida de un paciente con leucemia aguda sin tratamiento es de ; meses. %a posible curacin de la leucemia aguda se lle"a a cabo mediante la destruccin mxima de clulas cuando la enfermedad se acaba de diagnosticar. %as leucemias agudas se di"iden en %eucemias mieloides agudas y %eucemias linfoides agudas.

Esta clasificacin se basa en las caractersticas morfolgicas de las clulas tenidas con Krig*t, en E. o en medula sea y con la tincin citoqumica de las clulas blsticas. %a clasificacin reciente de la G4. propone enfatizar en los rasgos genticos comunes en los signos y sntomas clnicos una e"aluacin adicional, de los blastos leucmicos mediante anlisis molecular y citometra de flu!o. LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA: %a FAB clasifica 3) LMA 0, 3) MO ) 3) M> A 3) LLA 0, L1 ) L". En cualquiera de las categoras para definir las leucemias agudas debe de *aber mayor de ;6J de blastos. 4G$ Con diferenciacin mnima o +lastos mieloides indiferenciados 45$ %4A sin maduracin 4>$ %4A con maduracin 4;$ %eucemia promieloctica aguda 4I$ %eucemia mielomonoctica aguda 49$ 49a$ %eucemia monoblstica aguda 49b$ %eucemia monoctica aguda 4:$ %eucemia eritroide aguda 4C$ %eucemia megaloblstica aguda LEUCEMIA LINFOIDE AGUDA: %a %%A se di"ide en 3A+ %5 &ni/os', %> &ni/os mayores y adultos' y %; &pacientes con leucemia secundaria al linfoma de burVitt' %a %5, %> y %;, se diferencian en la morfologa, el tama/o, la cantidad de nucleolos y la apariencia del citoplasma. <el :6 H C6J de los pacientes *ay leucocitosis, en el >9J *ay leucopenia. En el 3. casi el 566J son linfoblastos y linfocitos. %os blastos no tienen bastones de Auer y tienen de 5 a > nucleolo, *ay granulocitopenia, aunque en la %> pueden *aber clulas inmaduras de tipo mieloide, *ay anemia y trombocitosis. TINCIONES CITOQUIMICAS: Ztiles para la diferenciacin de las leucemias. %as tinciones refle!an la composicin qumica de las clulas mediante el uso de reaccin de color sin da/ar la clula. %as tinciones citoqumicas son$

.udan #egro + 4ieloperoxidasa Acido peryodico de sc*iff & A.' #aftol A.-< cloracetato #A.<CA Esterosol 3osfatasa acida 3osfatasa alcalina ,<,$ <esoxinucleotidil transferasa ,erminal Antgeno CA%%A Mnmunoglobulina de superficie

LEUCEMIAS CRONICAS: LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA: Existe un aumento de clulas blsticas en el 3. y medula sea y se disminuye el espacio para 0+, 07 y N, esto puede producir infecciones, anemia y *emorragias, dolor en los *uesos. El n8mero de clulas blsticas en la sangre y en la medula sea y los sntomas, determinan la fase de la enfermedad. .e presentan en pacientes mayores de 96 anos. Existe una traslocacin gentica de > cromosomas, el B y >> que se conoce como el cromosoma 3iladelfia, aunque se presenta en pacientes de 96 a :6 anos, tambin pueden *aber presentaciones infantiles y !u"eniles. %os *allazgos ms comunes al inicio de la enfermedad son$ aumento de los 0+ y crecimiento de bazo y menos frecuente crecimiento del *gado, anemia, cansancio y sangrados. En muc*os casos los pacientes son asintomtico y se diagnostica la enfermedad de manera accidental al realizar un cuadro *emtico. ETAPAS DE LA LMC: 5. 3ase crnica >. 3ase acelerada ;. 3ase blstica <e recada LEUCEMIA LINFOIDE CRONICA:

acientes mayores de 96 a/os, se caracteriza por aumento de linfocitos en el numero y estos son normales. Com8nmente es diagnosticada por casualidad, cuando se realiza un cuadro *emtico. En general es una enfermedad asintomtica pero algunas "eces puede presentar debilidad, sudoracin nocturna, fiebre sin infeccin, perdida de peso, aumento en las infecciones. %a enfermedad "aria en algunos pacientes, a"anza rpidamente y en otras puede durar 56 a >6 a/os sin presentar problemas. %os linfocitos son normales, pero no son capaces de combatir infecciones. %a %%C progresa con lentitud, en las primeras etapas de la enfermedad no *ay sntomas a medida que pasa el tiempo, los linfocitos se reproducen cada "ez ms y empiezan aparecer sntomas. El pronstico depende de la etapa en la que se encuentra el paciente, la edad del paciente y su estudio de salud en general. ETAPAS DE LA LLC: Etapa G Etapa M Etapa MM Etapa MMM 7efractaria

MATERIALES Y REACTIVOS: Aceite de inmersin 4icroscopio %minas de coleccin.

PROCEDIMIENTO: 5. repare la lmina entregada por el profesor de medula sea o extendido de sangre perifrica para la obser"acin en el microscopio. En un aumento de ba!o poder &56x' y mirando el cuerpo del extendido, obser"e los campos microscpicos uniformes y *omogneos donde los eritrocitos se encuentren bien distribuidos para la obser"acin de la morfologa de glbulos ro!os, glbulos blancos y plaquetas. Mdentifique en 566 ? las clulas inmaduras y maduras realizando un diferencial de 566 clulas 7ealice el reporte de la lamina entregada y analice los resultados

>. Analice los casos clnicos entregados por el profesor e informe el tipo de leucemia y la razn por la cual da su diagnostico. CUESTIONARIO: 5. %a %4A seg8n 3A+ esta clasificada de la 4G a la 4C, defina cada una de ellas, teniendo en cuenta sus caractersticas principales para su diferenciacin. 2. %a %%C seg8n 3A+ esta clasificada de la %5 a la %;, defina cada una de ellas, teniendo en cuenta sus caractersticas principales para su diferenciacin. ;. Nue es la reaccin leucemoide I. 7ealiza un cuadro comparati"o con las tinciones citoqumicas, identificando el tipo de leucemia para la cual es diagnostico cada tincin. 5. Daga un esquema de los lina!es que conforma la *ematopoyesis &eritroide, linfoide, monoctica, mieloide y megacarioctica'.

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA FACULTAD DE SALUD PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO CORRELACION CLINICA HEMATOLOGIA UNIDAD N. 1" SISTEMA HEMATOPOYETICO OBJETIVOS: Mdentificar las neoplasias del sistema inmune. Enfermedad de DodgVin y no DodgVin <iferenciar cada una de las mielodisplasias Elaborar un caso clnico de las enfermedades tratadas en el curso de *ematologa

FUNDAMENTO: LINFOMAS: #eoplasias del sistema inmunitario &clula + o ,', que por lo com8n nacen en el ganglio linftico CAUSA: <E.CG#GCM<A E+A &+)7WM,' ENFERMEDAD DE HODGNIN:

%a Enfermedad de DodgVin corresponde a un linfoma maligno con caractersticas inmunitarias y linfocticas 8nicas. En esta enfermedad, los sitios primarios de afeccin tisular son los ganglios linfticos. <esde el punto de "ista *istolgico se caracteriza por la presencia de clulas de 7eed-.temberg, que son clulas multinucleadas aparentemente deri"adas de los macrfagos. %a Enfermedad de DodgVin presenta los siguientes subgrupos$ Con predominio de linfocitos Con celularidad mixta Esclero nodular <epresin de linfocitos CLINICA: %infoadenopata indolora .ntomas sistmicos &b' fiebre T ;=[c sudores nocturnos perdida de peso rurito %esin pulmonar&adenopata' INMUNES: Alergia e *ipersensibilidad ,rastorno de inmunidad celular Citoquinas. trastornos inmunes *umoral(cell PROBLEMAS POCO FRECUENTES Mnfiltrado pulmonar Derpes zoster .epsis post-esplenectoma 4ononucleosis infecciosa

PREDOMINIO DE LINFOCITOS 56J Etapa i el C6J de los pacientes Ataca ganglios axilares ESCLEROSIS NODULAR

I6 a C6 J de los pacientes Adems de cell de reed s. 4u!eres !"enes. 0anglios axilares inferiores 0anglios supracla"iculares 0anglios mediastnicos C6J limitada

CELULARIDAD MIXTA ;6 a 96 J 3recuentes en ni/os y ancianos 7elacionado siempre con E+A DEPLESION DE LINFOCITOS 4enos frecuente Ancianos y enfermedad a"anzada .ntomas sistmicos El linfoma de +urVitt &+%' tambin est relacionado con la inmunosupresin en su!etos con .M<A, y a la malaria en los casos de endemia de +%. Este 8ltimo fenmeno explica los *allazgos originales de +urVitt, donde los factores climticos estn ligados a la etiologa de la endemia de +%, ya que la temperatura y la altitud condicionan el crecimiento y distribucin de los mosquitos que transmiten la malaria. ,odos los casos de +% estn tambin marcados por la presencia de traslocaciones cromosmicas especficas, las cuales producen la acti"acin del c-myc proto-oncogene. %a mayora de stos comprenden una traslocacin recproca entre el cromosoma =, en cerca del c-myc loci, y el loci de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas en el cromosoma 5I. PRACTICA: CUADRO HEMATICO MANUAL MATERIALES Y REACTIVOS: .angre total con E<,A 4icro*ematocritos ,abla de lectura o reglilla Cubetas orta cubetas ipeta de .al*i

ipeta de glbulos blancos ipeta de glbulos ro!os ,ubos de 5; x 566 mm 0radilla, pipeta de 9 ml, pipeteadores ipetas automticas, puntas azules y amarillas ,apones de cauc*o Cmaras de #eubauer Ca!as de petri, papel filtro 7eacti"o de <rabVin 7eacti"o de ,urV 7eacti"o de amonio al 5J o Citrato de sodio al ;.=J Estndar o patrn de *emoglobina Aceite de inmersin Colorante de @rig*t .olucin +uffer, agua destilada 4icrocentrfuga Espectrofotmetro 4icroscopio

PROCEDIMIENTO: 1. MEDICION DEL HEMATOCRITO: 2. MEDICION DE LA HEMOGLOBINA: ". RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS: ). DILUCION EN TUBO: ;. DILUCION EN PIPETAS DE BLANCOS: #. EXTENDIDO Y COLORACION: $. RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS: G. RECUENTO DE PLAQUETAS CUESTIONARIO: 3. <e cada uno de los siguientes temas ample su fundamento a. Enfermedad de no DodgVin

b. 4ielodisplasias c. 4ononucleosis infecciosa 4. Daga un paralelo entre los estados de *emoconcentracin por causas fisiolgicas y por causas patolgicas. 9. Mn"estigue un caso clnico mencionados en esta gua. de cualquiera de los temas