I.

OBJETIVOS.

Diferenciar los grupos microbianos presentes en una muestra ambiental.

Investigar y explicar los cambios observables en la columna a travs del

tiempo.

Explicar los procesos fisiolgicos de los microorganismos y su relacin

con la fuente de energa suministrada.

II.

MARCO TERICO

2.1.

Columna de Winogradsky
Bacterias y Archaeas (procariotas), exhiben una diversidad
metablica tan sorprendente que difcilmente podremos encontrarla
en animales, plantas, hongos u otros organismos "superiores"
(eucariotas). Los procariotas, literalmente, mantienen su sistema
biolgico utilizando y reciclando, una y otra vez, todos los elementos
minerales necesarios para su soporte vital.
Dos famosos microbilogos fueron pioneros en el estudio de estos
procesos: Sergei Winogradsky (1856-1953) y Martinus Willen
Beijerinck (1851-1931). En contraste con los estudios sobre cultivos
puros de otros microbilogos como Louis Pasteur o Robert Koch,
estos investigadores se centraron en estudiar las relaciones entre
diferentes tipos de microorganismos en comunidades mixtas.
La columna de Winogradsky es una demostracin clsica de cmo
los microorganismos ocupan "microespacios" altamente especficos
de acuerdo con sus tolerancias medioambientales y sus necesidades
vitales (requerimientos de carbono y energa) y que, adems, ilustra
cmo diferentes microorganismos desarrollan sus ciclos, y la
interdependencia que llega a existir entre ellos (las actividades de un
microorganismo permite crecer a otro y viceversa). Esta columna es
un sistema completo y autnomo de reciclamiento, mantenido slo
por la energa de la luz.
La columna de Winogradsky permite reproducir un ecosistema
natural. En una primera instancia, los microorganismos estn
mezclados, pero al estabilizarse y exponerse a la luz, los diferentes
tipos microbianos proliferan y ocupan distintas zonas donde las
condiciones ambientales favorecen sus actividades especficas. Esto
permite analizar cmo diferentes microorganismos realizan sus roles
interdependientes: la actividad de un microorganismo permite el
crecimiento de otro y viceversa. Estas caractersticas, sumadas a
que es un sistema auto reciclante y al uso de la luz como fuente de
energa, indican que la columna de Winogradsky es un excelente
modelo de ecologa microbiana.

La columna de Winogradsky es un sistema acutico en el que se

ayuda a los microorganismos a establecerse en regiones
diferenciadas segn su metabolismo, y constituye un modelo de
ecosistema, similar a los tapetes microbianos que se hallanen aguas
dulces o saladas, donde proliferan microorganismos del medio
acutico y delos sedimentos. Esta tcnica fue desarrollada
inicialmente por el microbilogo ruso Sergei Winogradsky(18561953), quien us la columna para estudiar los microorganismos del
suelo. La columna de Winogradsky es un sistema que permite
observar en el laboratorio el proceso evolutivo de los
microorganismos, es decir, el proceso de adaptacin a los diferentes
ambientes empleando diferentes estrategias para la obtencin de
energa. Una vez que se prepare la columna y se exponga a la luz
solar, se desarrollar una sucesin de comunidades bacterianas
interrelacionadas metablicamente, de un modo similar a lo que
ocurre en la naturaleza, que se podrn observar fcilmente por su
distinta coloracin. Adems, la columna es un sistema anxico en
miniatura que puede usarse como suministro a largo plazo de
bacterias para cultivos de enriquecimiento.
Para la realizacin de esta prctica se usar agua estancada
procedente de un laguna, aunque tambin podra usase agua de mar
si se quisiera prepara una columna marina. Y se estudiar el ciclo del
azufre, no obstante podra enfocarse la prctica para otros ciclos
biogeoqumicos equivalentes (nitrgeno,carbono u otros elementos)
2.2.

Microorganismos de la columna de Winogradsky

Una vez establecida la columna, se pueden diferenciar tres zonas
caractersticas en base a su concentracin relativa de oxgeno: 1)
zona aerbica, es la ms superficial, dispone de una alta
concentracin de oxgeno; 2) zona microaerfila, inmediatamente
debajo de la anterior, con una menor concentracin de oxgeno; 3)
zona anaerbica, que constituye el lecho de lodo.
Las algas y cianobacterias forman una capa superficial de color
verde brillante, y al producir oxgeno ayudan a mantener la aerobiosis
en la zona superior de la columna.
Mientras que, en el fondo de la columna, las bacterias reductoras del
sulfato producen sulfuro, que provoca el crecimiento de bacterias
rojas y verdes del azufre (fottrofos anoxignicos). De modo que se
establecen dos gradientes en la columna, uno de oxgeno y otro de
sulfuro de hidrgeno (H2S).
Las bacterias quimiorganotrofas crecen a lo largo de toda la
columna, los microorganismos aerobios y microaerfilos en la parte
superior, los anaerobios en las zonas donde hay sulfuro de
hidrgeno.

Figura 1. Esquema de una columna de Winogradsky tpica

2.3.

Zonas de la Columna de Winodragsky

Zona aerbica: esta es la parte de la columna ms rica en
oxgeno y ms pobre en azufre. El agua de la parte superior de la
columna contiene abundantes poblaciones de microorganismos
aerobios, que aparecen normalmente en hbitats acuticos ricos
en materia orgnica (estanques poco profundos, arroyos, etc.).
Suelen ser microorganismos flagelados, lo que les permite
moverse y establecerse en nuevas reas, as como
microorganismos
fotosintticos:
algas
(diatomeas)
y
cianobacterias filamentosas. El oxgeno que producen estos
productores primarios difunde desde la superficie, creando
condiciones similares a las que existen en un lago con
sedimentos ricos en nutrientes.

Zona microaerfila: es la zona en la que solapan ambos

gradientes, el de oxgeno y el de sulfuro de hidrgeno. Aparecen
bacterias oxidadoras del azufre como Beggiatoa, Thiothrix o
Thiobacillus, que usan como fuente de carbono la materia
orgnica, y oxidan el H2S que llega por difusin desde las capas
inferiores a azufre elemental. La reaccin qumica que se lleva a
cabo es la siguiente (reaccin de Bunsen):
. Son,
por lo tanto, microorganismos mixtrofos. Estos gneros
acumulan grnulos de azufre en sus citoplasmas por oxidacin
del H2S. Si se deja evolucionar el sistema, cuando la
concentracin de H2S es muy baja, los grnulos de azufre
elemental intracitoplasmtico presentes en estas bacterias
empiezan a desaparecer por oxidacin total a sulfat o

Zona anaerbica: esta zona contiene H2S (procedente del

fondo), en la zona anaerbica superior predominan las bacterias

fotosintticas anaerobias, y en la columna se observan una serie

de bandas de colores rojo y verde:
Bacterias rojas no del azufre: Rhodospirillum, Rhodomicrobium o
Rhodopseudomonas, son bacterias anaerobias fotoorgantrofas,
que slo pueden realizar la fotosntesis en presencia de una
fuente de carbono orgnico. Forman una capa de color rojoanaranjado. Las bacterias verdes no del azufre son termfilas y,
por lo tanto, no crecen en la columna a temperatura ambiente.
Bacterias rojas del azufre (Chromatium, Thiospirillum, Thiocapsa,
forman una capa de color rojo-prpura) y bacterias verdes del
azufre (Chlorobium, Pelodyctium). Estas bacterias son
fotolittrofas y realizan una fotosntesis anoxignica, no producen
oxgeno ya que no utilizan H2O como elemento reductor sino
H2S, generando en este proceso sulfatos. La reaccin que tiene
lugar es la siguiente: 2 H2S + CO2 [CH2O] + H2O + 2 S. Estos
microorganismos aparecen como zonas de crecimiento en el lodo
de la columna, pero tambin pueden desarrollarse en el agua si
los fottrofos oxignicos son escasos.
En la zona anaerobia ms profunda, de color negro intenso,
aparecen microorganismos capaces de realizar respiracin
anaerbica y fermentacin.
Bacterias reductoras del sulfato (BRS): Desulfovibrio,
Desulfobacter, Desulfotomaculum o Desulfomonas. Usan el
sulfato, u otras formas parcialmente oxidadas de azufre como el
tiosulfato, y generan grandes cantidades de H2S en el proceso.
Bacterias fermentadoras: utilizan la celulosa del papel aportado
como fuente primaria para su metabolismo, aparecen las
bacterias del gnero Clostridium. Son anaerobias estrictas, y no
empiezan a crecer hasta que el oxgeno desaparece del
sedimento. Estas bacterias degradan la celulosa hasta residuos
de glucosa y, a continuacin, fermentan la glucosa para obtener
la energa que necesitan, produciendo una serie de compuestos
orgnicos simples (etanol, cido actico, cido lctico, cido
succnico, etc.) como productos finales de esa fermentacin.
Estos compuestos orgnicos sern, a su vez, respirados por las
bacterias reductoras del sulfato. Cuando la celulosa se agote,
usarn la materia orgnica producida por el resto de bacterias.
Tambin pueden aparecer bacterias metanognicas que generan
CH4, que se observa como burbujas de gas en el fondo de la
columna.

Figura 2.

III.

MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

3.1.

MATERIALES

5 Frascos translcidos de vidrio (mermelada)

Papeles celofn (verde, amarillo, negro, rojo y transparente)
Laminas porta objetos

3.2.

PROCEDIMIENTO

IV.

Pabilo
Agua de la Laguna de ahuinpuquio
Lodo de la Laguna de ahuinpuquio (500 g por botella)
1 balanza
4 g. de CaCO3
4 g. de CaSO4
4 g. de CaHPO4
Papel peridico
1 esptula
1 varilla

Semana 0: Empezamos a construir la Columna de Winogradsky,

Recolectando la muestra de lodo, retirar las piedras y restos de
tamao grande. Colocamos la mezcla en un recipiente, hasta la
tercera parte, compactar para eliminar las burbujas de aire.
Mezclamos las sales con agua del estanque. Esta mezcla de sales
se debe adicionar hasta una altura cercana al borde del recipiente (3
cm por debajo del borde). En la mezcla adicionamos lentamente
para no re suspender la muestra. (El recipiente debe estar
ligeramente inclinado y luego adicionar lentamente la mezcla). Con
la varilla de vidrio eliminamos las burbujas de aire generadas.
Colocamos lminas portaobjetos a diferentes niveles de la columna,
las lminas deben estar sujetadas por fuera de la columna.
Registramos y dibujamos la imagen final de la columna. Una
columna debe estar cubierta con papel de color verde, otra de color
rojo, otra de color amarillo, otra con color oscuro. Incubamos a
temperatura ambiente, por las noches exponer a una fuente
luminosa blanca para que evitar un excesivo descenso de
temperatura.
Semana 1: Cambiamos las lminas portaobjetos por otras nuevas,
observamos y anotamos los cambios que se produjeron en esta
semana, posteriormente se tomaron pequeas muestras (agua y
lodo) para ser observadas en el microscopio.
Semana 2: En esta semana no pudimos observar el avance de la
Columna de Winogradsky.
Semana 3: Observamos y anotamos los cambios que se produjeron
en esta semana, posteriormente se tomaron pequeas muestras
(agua y lodo) para ser observadas en el microscopio.
RESULTADOS

Tabla 1. Reporte de observaciones fsicas para cada una de las columnas de

Winogradsky.

SEMANA N 1
COLUMNA

ZONA DE LA
COLUMNA

OBSERVACIONES

No desprendi olor
Presencia
de
burbujas

Se desarroll oxidacin

Sedimentacin del lodo.

En la parte superior se
observa el agua de manera
translucida.

No desprendi olor
Presencia
de
algunas
burbujas,
menor
en
comparacin al color rojo

Sedimentacin del lodo.

En la parte superior se
observa el agua de turbia

algunas

ROJO

AMARILLO

VERDE

No desprendi olor
No hay presencia de burbujas

Se desarroll oxidacin
Sedimentacin del lodo.
En la parte superior se
observa el agua de manera
translucida.

No desprendi olor
Presencia de burbujas
Superficie grasosa

Se desarroll oxidacin
Sedimentacin del lodo.
En la parte superior
observa el agua turbia

No desprendi olor
No hay presencia de burbujas

NEGRO

TRANSPARENTE

se

Sedimentacin del lodo.

En la parte superior se
observa el agua de manera
translucida.
Se
observaron
manchas
negras en el lodo.

SEMANA N 2
No se realiz ninguna actividad
SEMANA N 3
COLUMNA

ZONA DE LA
COLUMNA

OBSERVACIONES

El agua ha disminuido en la
parte superior
Presencia
de
algunas
burbujas en la parte superior
En la parte superior va
aumentando
en
color
naranjado
Sedimentacin del lodo.
No se desarroll oxidacin

Parte superior aceitosa

ROJO

AMARILLO

VERDE

Sedimentacin del lodo.

Presencia de burbujas en la
parte superior y en el lodo
En la parte superior se
observa el agua de turbia
No se desarrolla oxidacin

Desprendi un olor a agua

estancada
Presencia de burbujas
Presenta una nata grasosa

El agua tiene un color

verdoso
Se desarroll oxidacin
Sedimentacin del lodo.
Presencia de burbujas en el
lodo

Superficie grasosa de color

naranja intenso
Se observa burbujas

NEGRO

Se desarroll oxidacin
El agua ha disminuido
considerablemente
Sedimentacin del lodo.
El lodo tiene un color negro
intenso

TRANSPARENTE

No desprendi olor
Presencia
de
algunas
burbujas
El
color
naranja
va
aumentando

Sedimentacin del lodo.

En la parte superior se
observa el agua turbia
En el lodo el color negro se
va haciendo mas intenso

Tabla 2. Reporte del tipo de microorganismos observados en cada una de las

columnas
SEMANA N 1

COLUMNA

ZONA DE LA
COLUMNA

TIPOS DE
ORGANISMOS
OBSERVADOS
Cianobacterias
Protozoos

ROJO

MORFOLOGIA
Espiroquetas
Vibrios
Cocos
Flajelados

AGUA

Bacterias
LODO

Vibrios
Cocos
Espirilos

ESQUEMAS

AMARILLO

Bacterias
Cianobacterias
Protozoos

Espirilos
Espiroquetas
Flajelados

Bacterias

Espiroquetas
Vibrios
Cocos

AGUA

LODO

Bacterias
Cianobacterias
VERDE

Cocos
Espirilos
Flajelados

AGUA

Bacterias

Cocos
Espirilos

Bacterias

Cocos
Espirilos
Espiroquetas

LODO

NEGRO

LODO

Bacterias

Cocos

TRANSPAR
ENTE
AGUA

V.

DISCUSIN DE RESULTADOS:

En el fondo de la columna, la celulosa y el azufre estimulan el

crecimiento de bacterias especficas. Algunas degradan la celulosa
liberando glucosa, que es tanto una fuente de carbono como una fuente
de energa, por medio de fermentacin. Se crea un ambiente anxico y,
a lo largo de la columna, se establece un gradiente de oxgeno donde el
fondo es anaerobio y la superficie aerobia.

En la semana 3, en la columna de color transparente se observ un

color negro que se iba haciendo intenso debido a presencia de
bacterias sulfato reductoras; sucede lo mismo en una investigacin
realizada en Bolivia; Aislamiento y cultivo de bacterias sulfato reductoras
acidfilas para la Produccin de Sulfuro Biogentico para la precipitacin
de metales pesados; donde se estudiaron muestras de lodo a travs del
establecimiento de columnas de Winodragsky transparentes en las
cuales observaron separacin de fases, en la que la parte inferior torn
un color negro lo que demuestra actividad sulfato reductora por la
formacin de precipitado negro de sulfuro.

En el caso de la columna de color negro, la zona inferior, de color negro

intenso, denota la presencia de microorganismos reductores de sulfato,
caso de los gneros. La coloracin es debida a la precipitacin de
sulfuro de metales pesados (hierro, manganeso), tal y como describe de
forma parcial la siguiente reaccin qumica:

Los sulfuros producidos por esta compleja comunidad microbiana, bajo

condiciones anxicas, son fuente de electrones para las bacterias
fotosintticas rojas y verdes del azufre. Las bacterias rojas del azufre,
mayoritarias en este tipo de modelo experimental, comprenden un grupo
de microorganismos anaerbicos, parcialmente sensibles a la presencia
de oxgeno molecular y sulfuro de hidrgeno. Producen compuestos
orgnicos reducidos a partir del dixido de carbono.

Observando las columnas, excepto en las de color negro y rojo; en la

parte superior de la columna, cuando la produccin de sulfuro de
hidrgeno no es muy abundante, se desarrolla toda una variada
comunidad microbiana caracterizada por cianobacterias y microalgas,
que determinan la produccin de oxgeno en su entorno ms inmediato.

La parte superior de las columnas, el agua contiene abundantes

poblaciones de bacterias de diferentes tipos. Son organismos aerobios
que se encuentran habitualmente en los hbitats acuticos ricos en
materia orgnica (estanques poco profundos, arroyos contaminados,
etc). Suelen ser flagelados, lo que les permite moverse y establecerse
en nuevas reas. Puede desarrollarse tambin microorganismos
fototrficos variados procedentes directamente del agua o del barro
utilizados originalmente en el montaje de la columna. La superficie del
barro puede presentar en esta zona un ligero color castao. Esta es la
parte de la columna ms rica en oxgeno y ms pobre en azufre.

VI.

CONCLUSIONES

Se reconoci a los microorganismos aerobios, realizadores de

fotosntesis oxigenica (es decir utilizando oxigeno) , oxidadores de
azufre, degradadores de celulosa, productores de H2S,
realizadores de fotosntesis anoxigenica (caractersticos de la
zona anaerobia ya que carecen de oxigeno); los cuales estn
distribuidos en la columna dependiendo de la presencia de sus
nutrientes respectivos.
Observacin de las columnas despus de 3 semanas donde se
not ms claramente cambio de color del agua que vara segn el

color que fue forrado, hubo mayor oxidacin, y se not

descomposicin o actividad microbiana que le da olor y dems
caractersticas fsicas.
muestra de color rojo: no hay desprendimiento de olor, se
observa la presencia de burbujas en la parte superior en la
sedimentacin de lodo se observ un color anaranjado.
muestra de color amarillo: se observa turbidez y la
presencia de burbujas en la parte superior y en el lodo, no
hay oxidacin.
muestra de color verde: en esta muestra se observa la
oxidacin, turbidez, burbujas en la parte superior y en la
sedimentacin el cambio de color a marrn desprendiendo
un olor a agua estancada.
muestra de color negra: en esta muestra se observa
burbujas en el agua disminuyendo en mayor cantidad,
existe oxidacin en la que se observa puntos blanco hubo
cambio de color naranja a negro intenso.
muestra de color transparente: se observa turbidez,
oxidacin acompaada de burbujas en la parte superior no
desprende mucho olor y el color negro va aumentando.

En la parte inferior de las columnas, las bacterias degradan la

celulosa a glucosa y, a continuacin, fermentan la glucosa para
obtener la energa que necesitan, produciendo una serie de
compuestos orgnicos simples (etanol, cido actico, cido
succinico, etc) como productos finales de esa fermentacin.
Se pudo ver el ciclo del azufre en estos gradientes ya que por
ejemplo las bacterias oxidadoras de azufre convierten al mismo
de formas ms complejas a formas ms simples para su consumo
por otras especies, identificando tambin as interrelaciones de
protocooperacion, comensalismo, cometabolismo y muchas ms
que a falta de tiempo y estudios no se pudo determinar, es decir
en este ecosistema se pudo concluir los beneficios nutricionales
de los microorganismo cuando se relacionan entre s.
El oxgeno se difunde desde la superficie, creando condiciones
similares a las que existen en un lago siendo el oxigeno y la
materia orgnica el principal nutriente de la zona aerobia de ah
que mediante procesos se difunda hacia el interior, as mismo los
sedimentos de esta columna son de acido sulfhdrico, siendo este
componente junto con materia orgnica el mayor aporte de
nutrientes en la zona anaerobia.
Los microorganismos trabajan entre s para desarrollarse en
ptimas condiciones y esto es demostrado en esta columna
donde se vio que se da el ciclo de azufre, que comienza como
cido sulfhdrico, luego se transforma a sulfatos, y finalmente a
azufre elemental, este proceso se difunde a travs de la columna
y provee de nutrientes especficos a cada estrato, es decir los
microorganismos trabajan entre s para desarrollarse y modificar
en su beneficio el ambiente al que se exponen.

VII.

Todo el acido sulfhidrico fue desplazado hacia la parte inferior por

accin de los microorganismos formando sedimentos, y de ah
que mediante las interelaciones este fue subiendo para nutrir a
los dems microorganismos, tambin se elimino el oxigeno de la
parte inferior por parte de las bacterias anaerobias facultativas
que ayudo a que anaerobias estrictas se desarrollen (sinergismo)
y se lo llevo hacia la parte superior elevando la concentracin de
oxigeno y as se obtuvo el componente para la fotosntesis de las
bacterias fotosintticas.
La parte superior de la columna de agua puede contener
abundantes poblaciones de bacterias de diferentes tipos. Son
organismos aerobios que se encuentran habitualmente en los
hbitats acuticos ricos en materia orgnica (estanques poco
profundos, arroyos contaminados, etc).

CUESTIONARIO

1. Cul es la funcin del de agua del estaque, las cuatro sales, papel?

El papel se aade como fuente de celulosa y como fuente de carbono en

el fondo de la columna para permitir la hidrlisis anaerobia.
Las sales son fuente azufre, para permitir la transferencia de oxgeno:
Una fuente de azufre: yeso (sulfato de calcio)
Suplemento de carbonato de calcio: cscaras de huevo

2. Por qu se emple columnas cubiertas con papeles de diferentes

colores y una columna sin cubrir?
La seleccin de microorganismos fototrficos no depende solamente de
las longitudes de ondas de la luz sino de los niveles de irradiacin
usados. Las bacterias sulfurosas verdes y azules son fototrficas, por lo
que pueden ser enriquecidas selectivamente en un medio mineral en la
presencia de H2S, condiciones anaerbicas y luz. Las bacterias azules
no sulfurosas pueden ser aisladas de manera similar, cambiando el H2S
por un donador de electrones apropiado. La irradiacin de luz aplicada
tambin afecta significativamente el enriquecimiento y el aislamiento
subsecuente de bacterias fototrficas
3. Indicar qu procesos metablicos se desarrollaron, principalmente en
cada una de las zonas de las columnas. (referir en base a los anlisis
semanales)
En la parte inferior de la columna donde se encuentra el lodo se
desarroll el proceso de fermentacin, algunas bacterias degradan la

celulosa liberando glucosa, que es tanto una fuente de carbono como

una fuente de energa.
Tambin en la parte inferior se desarrolla la reduccin del sulfato
(respiracin anaerbica) es un proceso energtico relativamente pobre
usado por muchas bacterias Gram negativas (Proteobacterias gamma) y
por organismos Gram positivos relacionados con Desulfotomaculum o
con la archaea Archaeoglobus. Como producto final metablico se
obtiene sulfuro del hidrgeno (H2S).
Quimiolitotrofa, Algunas bacterias oxidan compuestos reducidos de
azufre; tambin en la zona inferior donde se encuentra el lodo.
Y en la parte superior de la columna donde se encuentra el agua
estancada muchos microorganismos son capaces de usar la luz como
fuente de la energa. De stos, Cyanobacteria y las algas son
particularmente significativas porque son oxignicas, usando agua como
donador de electrones para la transferencia del electrn durante la
fotosntesis.
La parte superior de la columna de agua contiene abundantes
poblaciones de bacterias de diferentes tipos. Son organismos aerobios
que se encuentran habitualmente en los hbitats acuticos ricos en
materia orgnica (estanques poco profundos, arroyos contaminados,
etc). Suelen ser flagelados, lo que les permite moverse y establecerse
en nuevas reas. Puede desarrollarse tambin microorganismos
fototrficos variados procedentes directamente del agua o del barro
utilizados originalmente en el montaje de la columna. La superficie del
barro puede presentar en esta zona un ligero color castao. Esta es la
parte de la columna ms rica en oxgeno y ms pobre en azufre.

4. Empleando la columna de Winogradsky Es posible estudiar grupos de

arqueobacterias de un determinado ambiente?. Proponga un ejemplo
Si es posible ya que las arqueobacterias representan cerca del 20% del
total de la biomasa de la tierra y que presentan la capacidad de existir en
una gran variedad de hbitats, son organismos que sobreviven en
condiciones ambientales extremas; y la columna de winodragsky podra
Un ejemplo podra ser las metangenas: son anaerobias obligadas,
tienen un metabolismo que puede usar el H2 como fuente de energa y
el CO2 como fuente de carbono para su crecimiento, ya que estas se
pueden encontrar en pantanos, y en suelos muy profundos.

BIBLIOGRAFA

Brock Biologa de los microorganismos. 10 edicin (2003). J. Parker, J.M.

Martinko, M.T. Madigan. Pearson Education.
Manual Prctico de Microbiologa. 3 edicin (2005). R. Daz, C. Gamazo, I.
Lpez-Goi. Elsevier-Masson.
Presccot, L. M., Harley, J. P., D.A. 1999. Microbiologa. Cuarta edicin. Mc
Graw Hill Interamericana. Mxico.
Davis, B. D., Dulbecco, R. 1978. Tratado de Microbiologa. 2da. Edicin. Ed.
Salvat Editores. Espaa.
http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioBiodiversidad.htm