INFORME MICROBIOLOGA DE SUELO

FIJACIN BIOLGICA DE NITRGENO

KATTERINE PAEZ DIAZ

C.C. 1069731674

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

TECNOLOGA EN PRODUCCIN AGRCOLA
FUSAGASUG
2015

INFORME MICROBIOLOGA DE SUELO

FIJACIN BIOLGICA DE NITRGENO

KATTERINE PAEZ DIAZ

C.C. 1069731674

PRESENTADO A:
SONIA AGUIRRE
TUTOR
LAGUANDIO BANDA SNCHEZ
TUTOR DE PRCTICA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

TECNOLOGA EN PRODUCCIN AGRCOLA
FUSAGASUG
2015

INTRODUCCIN
Los microorganismos fijadores de nitrgeno no constituyen un grupo taxonmico
homogneo, la nica caracterstica que comparten es la presencia de la enzima nitrogenasa
(Zehr J.P. y col., 1998).
Dichas bacterias comprenden organismos fototrofos, como bacterias pertenecientes a la
familia Rhodospirillaceae, Clorobiaceae y Cianobacteriae; organismos quimio auttrofos,
como bacterias de los gneros Thiobacillus, Xanthobacter y Desulfovibrio y organismos
hetertrofos como las bacterias pertenecientes a la familia Frankiaceae, al grupo
Rhizobiaceae y a los gneros Azotobacter, Enterobacter, Klebsiella y Clostridium (Sprent
J. y Sprent P., 1990). Estos organismos pueden realizar la fijacin biolgica de nitrgeno ya
sea independientemente (a excepcin de las rizobiceas) o estableciendo relaciones
simbiticas con otros organismos. Son estas formas simbiticas, concretamente las
establecidas entre las rizobiceas y las leguminosas, las que antiguamente eran
aprovechadas para la renovacin de los suelos mediante la prctica de la rotacin de
cultivos; hoy en da sin embargo, desde la aparicin de la revolucin verde en agricultura,
esta prctica se ha sustituido por la utilizacin de fertilizantes qumicos a pesar del elevado
coste energtico y ambiental que supone. Para poder disminuir la dependencia a
fertilizantes nitrogenados que est adquiriendo la agricultura mundial se han propuesto
varias alternativas que abarcan desde la modificacin gentica de las plantas a la
optimizacin y mejora de la fijacin biolgica de nitrgeno (Vance C.P., 2001).

OBJETIVOS
Comprobar los beneficios de la Fijacin Biolgica de Nitrgeno atmosfrico
Demostrar el papel que cumplen los microorganismos en la fijacin de nitrgeno, y
con esto informar este proceso tan importante.

HIPTESIS DE INVESTIGACIN
Las plantas pueden tener la capacidad de fijar el nitrgeno y aprovecharlo de varias
formas?

MARCO TERICO
Las leguminosas constituyen la familia de plantas con flores ms numerosa despus de las
gramneas, con unos 700 gneros y 14000 especies. La nodulacin es una caracterstica de
las leguminosas en general, pero existen gneros que no forman tales estructuras (en la
subfamilia Papilionoideae, donde se incluyen alfalfa, soja, juda garbanzo, se dan ndulos
en un 95% de los individuos examinados, en la Caesalpinioideae no se ha encontrado
nodulacin en un 67% de los miembros estudiados). Si se tiene en cuenta que ms del 50%
de las leguminosas no han sido examinadas respecto a si nodulan o no, se llega a la
conclusin de que este tema necesita mayor atencin.
Muchas de las plantas que no nodulan en su ambiente natural quizs pudieran hacerlo si las
condiciones fueran otras. La cantidad de nitrgeno fijado depende de la cepa o estirpe de
bacteria, de la planta hospedadora y de las condiciones ambientales. El empleo de las
leguminosas en la agricultura aparece junto con el de los cereales, ya en registros
arqueolgicos, y el reconocimiento de que fertilizan el suelo y que tienen, por tanto, gran
inters para la cosecha siguiente, se manifiesta en algunos de los escritos ms antiguos de
griegos, romanos, chinos y civilizaciones precolombinas. Las estimaciones recientes
indican que contribuyen en la actualidad con ms de la mitad del nitrgeno fijado por
sistemas biolgicos, con un aporte anual superior al de fertilizantes qumicos. Las
leguminosas se utilizan para forraje, fertilizacin de pastizales, obtencin de aceites y grano
para el consumo y como abono verde (prctica muy extendida en regiones tropicales y
subtropicales). Aproximadamente los dos tercios del nitrgeno total se encuentran en la
parte area de la planta, de forma que si sta se retira como heno, por pastoreo, o por
cosecha de la semilla, ir en perjuicio del suelo disminuyendo la cantidad de nitrgeno que
va a parar a l.

Inoculacin

La inoculacin de leguminosas con microbios adecuados es de gran importancia para el

desarrollo de stas. Un criterio de seleccin es que el rizobio forme ndulos en las races de
la planta hospedadora bajo un amplio espectro de condiciones ambientales, muestre
capacidad de competir con ventaja sobre otros rizobios no deseados, sobreviva y se
multiplique en el suelo, tenga resistencia a pesticidas, desecacin, etc. Se han obtenido
resultados muy satisfactorios cuando se inocula el suelo directamente y a continuacin se
siembra la semilla. Otra posibilidad para obtener simbiosis efectivas Rhizobiumleguminosa consiste en seleccionar las plantas a fin de reducir su especificidad simbitica,
lo que les permitir asociarse con cepas nativas del suelo.

Protenas especficas de la nodulacin

Las protenas sintetizadas por la planta en respuesta directa a la infeccin radicular y

formacin del ndulo se conocen como "protenas ndulo-especficas" y tras la propuesta
de un investigador se las ha llamado nodulinas. La leghemoglobina es la protena que da a
los ndulos su color rosado, y es la nodulina mejor caracterizada hasta el momento. Los
estudios que emplean mutantes de Rhizobium sugieren que hay muchos tipos de seales
envueltas en la expresin de los genes de las nodulinas. Las tecnologas emergentes del
ADN recombinante y la manipulacin in vitro ofrecen una gran promesa en relacin a la
mejora de plantas, stas podran aportar unos mtodos nuevos de seleccin, propagacin e
hibridacin, y tambin la capacidad de insertar genes forneos directamente en el genoma
vegetal. El empleo del cultivo celular como herramienta de seleccin ofrece la promesa ms
inmediata para la incorporacin en programas de cruzamientos ya existentes. Los genes
extraos podran ser fuentes de variacin importantes para caracteres heredables de forma
simple, tales como resistencia a herbicidas o a enfermedades, si se pudieran transferir con
todos los sistemas de control intactos, por el contrario, los caracteres cuantitativos tales
como rendimientos y fijacin de nitrgeno, sern ms difciles de cambiar utilizando
cualquier procedimiento que afecte a un reducido nmero de genes. La mejora vegetal ser
necesaria para traspasar los productos de las manipulaciones genticas no convencionales
del laboratorio a la produccin agronmica.

CUESTIONARIO
1. Que es una simbiosis
Rta// Cuando dos o ms especies viven en contacto ntimo y obtienen beneficios mutuos de
su interrelacin, donde la simbiosis casi siempre es de carcter obligatorio para que el
simbionte realice ciertas funciones vitales. Existe la simbiosis en la cual los dos organismos
se benefician de su relacin (simbiosis mutualista) y aquella donde un integrante se
beneficia sin afectar al otro (simbiosis parastica) Las micorrizas (figuras a y b) (asociacin
de raz y ciertos hongos), constituye un ejemplo de simbiosis de tipo mutualista, donde el
hongo aporta nutrientes que la planta por s mima no podra alcanzar y a su vez, la planta
brinda al hongo parte de sus fotosintatos para que pueda desarrollarse.

Figura a

Figura b

Fuente: Snchez de P., M. 2006

Entre los mecanismos por los cuales un simbionte favorece a otro estn:

Incremento en la velocidad de crecimiento.

Provisin de factores de crecimiento

Estimulacin de la actividad metablica

Aporte de fuentes carbonadas

Aporte de nutrientes que en forma natural se encuentran en muy baja disponibilidad

Incremento en la superficie de exploracin y aporte de agua

Generacin de CO2 para la fotosntesis o de O2 para alguna actividad aerbica.

2. Porque es importante en la agricultura?

Rta// Estos microorganismos contribuyen en la formacin del suelo ya que participan en la
degradacin de la materia orgnica y en los ciclos de elementos como el carbono,
nitrgeno, oxgeno, azufre, fsforo, hierro, entre otros. Estas sustancias aportan a la
fertilidad del suelo y son utilizados por los seres vivos en su metabolismo. Adems, muchos
de estos microorganismos viven alrededor de las races de las plantas e influyen en su
crecimiento, y tienen gran importancia para los cultivos agrcolas como las leguminosas y
algunos forestales. El crecimiento de las plantas es estimulado por estos microorganismos
del suelo que ayudan a absorber nutrientes y las protegen o evitan el ataque de
microorganismos patgenos.
3. Como se transforman el nitrgeno atmosfrico en las plantas para incorporarlo y
utilizarlo en su metabolismo?
Rta// El nitrgeno es uno de los minerales fundamentales para las plantas, y si bien el 80%
de la atmsfera est compuesta por N2, ste no es fcilmente asimilable por los organismos.
Si bien en la agricultura es costumbre utilizar fuentes de nitrgeno qumico, existen
microorganismos que son capaces de utilizar el nitrgeno atmosfrico. A travs de mtodos

biolgicos. Ciertas bacterias y cianobacterias tienen la capacidad de llevar a cabo una

reaccin qumica mediante la cual el nitrgeno atmosfrico es transformado en amonaco.
En el suelo, el amonaco es transformado en nitritos y posteriormente en nitratos por
diferentes tipos de bacterias que actan en cada paso. Las plantas slo pueden absorber el
nitrgeno del suelo disuelto en agua en forma de nitratos, y lo utilizan para formar las
protenas. Los animales en cambio, consumen nitrgeno al ingerir las protenas de las
plantas, cuyos aminocidos participan en la formacin de las propias protenas. Cuando las
plantas y animales mueren o eliminan desechos, los microorganismos descomponedores
transforman los compuestos nitrogenados en amonaco. En esta etapa las bacterias
convierten el amonaco en nitratos y una pequea parte en nitrgeno atmosfrico, con lo
cual se completa el ciclo.

4. Porque es necesario menor adicin de fertilizante nitrogenado en algunas especies

de leguminosas?
Rta// Las leguminosas muestran una amplia diversidad tanto morfolgica como de hbitats
y ecologa, encontramos desde formas herbceas anuales hasta rboles tropicales. Muchas
leguminosas son noduladas por los rizobios. La fijacin de nitrgeno en la simbiosis
rizobio-leguminosa es de considerable importancia en agricultura, porque causa un

aumento significativo del nitrgeno combinado en el suelo. Dado que la carencia de

nitrgeno suele darse en suelos desnudos y sin abonar, las leguminosas noduladas ofrecen
una ventaja selectiva en tales condiciones y pueden crecer bien en zonas donde no lo haran
otras plantas. Es por ello que leguminosas arbustivas y arbreas se emplean como plantas
pioneras en la reforestacin de zonas ridas y semiridas. Por el inters que estas bacterias
representan para la agricultura, emplendose como inoculantes (bio-fertilizantes) para los
cultivos se han realizado investigaciones extensas sobre este sistema simbitico, incluyendo
estudios sobre la diversidad y la taxonoma de los rizobios. Rhizobium fue la primera
bacteria producida a gran escala y se ha aadido como inoculante durante 105 aos a
diversos cultivos agrcolas, con xito en muchos casos. Por otro lado, el uso indiscriminado
de fertilizantes nitrogenados en agricultura ha ocasionando graves problemas de
contaminacin. No todo el fertilizante que se aplica lo aprovecha la planta sino que en una
cuanta importante acaba en lagos y lagunas. La fijacin biolgica de nitrgeno es la opcin
natural de fertilizacin qumica.
5. Como los microorganismos asociados inducen el crecimiento de las plantas al
producir sustancias promotoras, protegerlas de la sequa o de los patgenos?

Rta// los microorganismos protegen a las plantas de los patgenos aumentando su defensa
o induciendo la produccin de sustancias antimicrobianas. La materia que forma parte del
planeta sufre numerosas transformaciones al ser utilizada por los seres vivos. Algunos
minerales son asimilados por los organismos fotosintetizadores (como plantas y
cianobacterias) que los incorporan a sus estructuras y rganos y utilizan para cumplir
distintas funciones metablicas. A su vez, cuando un ser vivo se alimenta de otro, incorpora
esos elementos qumicos a travs de la cadena alimentaria, y en algn momento retornan al
ambiente, ya sea al agua, suelo o aire como parte del ciclo de la materia

MATERIALES Y MTODO

Semilla de frijol (Phaseolus vulgaris )

Frascos de plstico con tapa
Tierra
Lavandina (hipoclorito de sodio )
Agua hervida

1. Material vegetal semilla de frijol (Phaseolus vulgaris) es la especie ms conocida

del gnero Phaseolus en

la familia Fabaceae.

Es

una

especie anual nativa

de Mesoamrica y Suramrica, y sus numerosas variedades se cultivan en todo el

mundo para el consumo, tanto de sus vainas verdes como de sus semillas frescas o
secas.
2. Se esterilizo la mitad de la tierra durante 30 minutos, luego de este tiempo se
procedi a filtrar con una tela.
3. Se hicieron agujeros en los frascos para permitir que le agua drenara.

4. Se esterilizaron 8 de las 12 semillas con cloro al 20 % durante 20 minutos luego se

lavaron con agua desinfectada.
5. Se sembraron 12 semillas de frijol el da 11 de abril del 20015 en los frascos dos
semillas por cada tratamiento.
6. En este procedimiento no se hizo uso del inoculante.
7. Se procedi a sembrar de la siguiente manera:
Tratamiento 1: Siembra de semilla estril y tierra no estril
Tratamiento 2: Siembra semilla estril y tierra estril
Tratamiento 3: Siembra semilla no estril y tierra no estril
Se procedi a regar las plantas con agua hervida fra durante el proceso del cultivo
EVIDENCIAS Y RESULTADOS

Tratamiento 1: Siembra de semilla estril y tierra no estril

Sema del 11 de abril al 18 de abril
PLANTA 1

PLANTA 2

GERMINACION :

GERMINACION :

La raz scotisa se da el da 15 de abril

La raz scotisa se da el da 15 de abril

El entorno comprometedor y la prevencin El entorno comprometedor y la prevencin

propia sedan el da 17 de abril

propia sedan el da 17 de abril

Semana del 20 de abril al 28

FASE VEGETATIVA :
FASE VEGETATIVA :
Se presenta el brote de hojas (dos) estas no Se presenta el brote de hojas (dos) estas no
llegan a la etapa e floracin. Brote 20 abril
llegan a la etapa e floracin. Brote 20 abril
Semana del 30 abril al 5 mayo

Esta semana presenta ms crecimiento de al

ancho de hojas, en el meristemo apical de
vstago brotan 3 hojas pequeas. Tome
medidas proced a retirar de las frascos para
observar la raz y su ndulos

Esta semana presenta ms crecimiento de al

ancho de hojas, en el meristemo apical de
vstago brotan 3 hojas pequeas. Tome
medidas proced a retirar de las

frascos

para observar la raz y su ndulos

Ancho hoja : 5cm

Ancho hoja : 7cm

Alto planta : 14cm

Alto planta : 13 cm

Poca nodulacion

Poca nodulacion.

Tratamiento 2: Siembra semilla estril y tierra estril

Sema del 11 de abril al 18 de abril
PLANTA 1

PLANTA 2

GERMINACION :

GERMINACION :

La raz scotisa se da el da 15 de abril

La raz scotisa se da el da 15 de abril

El entorno comprometedor y la prevencin El entorno comprometedor y la prevencin

propia sedan el da 17 de abril

propia sedan el da 17 de abril

Semana del 20 de abril al 28

FASE VEGETATIVA :
Se presenta el brote de hojas (dos) estas no
llegan a la etapa e floracin. Brote hojas 22
abril

FASE VEGETATIVA :
Se presenta el brote de hojas (dos) estas no
llegan a la etapa e floracin. Brote hoja 22
abril

Semana del 30 abril al 5 mayo

Esta semana presenta ms crecimiento de al

ancho de hojas, en el meristemo apical de
vstago brotan 3 hojas pequeas. Tome
medidas proced a retirar de las frascos para
observar la raz y su ndulos

Esta semana presenta ms crecimiento de al

ancho de hojas, en el meristemo apical de
vstago brotan 3 hojas pequeas. Tome
medidas proced a retirar de las

frascos

para observar la raz y su ndulos

Ancho hoja : 8cm

Ancho hoja : 9cm

Alto planta : 23cm

Alto planta : 22 cm
Presentan mejor concentracin de clorofila y
mayor nodulacion que el tratamiento uno

Presentan mejor concentracin de clorofila

y mayor nodulacion que el tratamiento un

Tratamiento 3: Siembra semilla no estril y tierra no estril

Sema del 11 de abril al 27 de abril
PLANTA 1

PLANTA 2

GERMINACION :

GERMINACION :

La raz scotisa se da el da 25 de abril

La raz scotisa se da el da 25 de abril

El entorno comprometedor y la prevencin El entorno comprometedor y la prevencin

propia sedan el da 27 de abril

propia sedan el da 27 de abril

Semana del 28 de abril al 30

FASE VEGETATIVA :
Se presenta el brote de hojas se marchitan

FASE VEGETATIVA :
Se presenta el brote de hojas se marchitan

DISCUSIN DE RESULTADOS.
En los tratamiento uno y dos se pudo observar los ndulos que son los que proporcionan el
nitrgeno que necesitan las plantas para crecer a esto se debe que el tratamiento numero
dos creciera ms la planta puesto que presenta mayor nodulacion que le tratamiento uno.
Se cre la fijacin simbitica que es la caracterstica esencial para la formacin de tejido
nodular, en las races de las leguminosas una vez que han sido infectadas por un tipo de
Rhizobium especfico de leguminosa.
En el tratamiento tres al marchitar observe la raz y no tena nodulacion, esto puede darse
por que en si la leguminosa no pueden fijar el nitrgeno solo cuando crecen en presencia de
un suministro limitado de nitrgeno y oxgeno. Es decir se crea una conexin entre bacteria
y planta.
Los organismos que llevan a cabo la fijacin del nitrgeno utilizan el NH3 para producir
los componentes nitrogenados (protenas, cidos nucleicos, pigmentos de sus tejidos. el

exceso de nitrgeno fijado puede excretarse al suelo u otros medios en los cuales crece el
organismo que fija este elemento.
Lo que trata de decir esto es que la fijacin de nitrgeno causa que el suelo pueda adquirir
nutrientes y permite el crecimiento de otros organismos incapaces de fijar el nitrgeno, es
decir que gracias a esta fijacin se puede colonizar el suelo de una manera fcil.

CONCLUSION.
Los microorganismos son muy importantes ya que sin ellos la fijacin del nitrgeno no
sera posible, son las bacterias las que proporcionan tal proceso que es en gran suma
benfico, queda claro que gracias a algunas bacterias y muchos de los procesos en los que
se encuentra

inmiscuidas hay vida en la tierra se le da importancia de conocer

microorganismos. Como en el trabajo que realizamos se identific el factor para que la

planta pueda ser fijadora de nitrgeno y con esto sea de ayuda para cultivar.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/203015/moduloexe/leccin__13.html
http://www.biblioweb.tic.unam.mx/libros/microbios/Cap8/
http://www.bosquesmediterraneos.com/wp-content/documentos-pdf/fijacionbiologica-nitrogeno.pdf

ANEXOS
ANEXO 1: FOTOGRAFAS SEGUIMIENTO ENSAYO Y COSECHA DE PLANTAS
Esterilizacin tierra

Esterilizacin semillas

Agujeros frascos

Siembra

Germinacin

Fase vegetativa

Raz