Manual de Destrezas I - 3ra Edicion Enero 2009
Manual de Destrezas I - 3ra Edicion Enero 2009
Manual de Destrezas I - 3ra Edicion Enero 2009
Recinto Metropolitano
Facultad de Ciencias y Tecnologa
Departamento de Ciencias Naturales
Manual de Laboratorio
Biologa 1103:
Laboratorio de Destrezas I
3ra Edicin
(2009)
Agradecimientos:
Tabla de Contenido
Pgina
Agradecimientos
Tabla de Contenido
Reglas de Seguridad
Informes de Laboratorio
10
13
19
33
46
62
71
81
Ejercicio 8: Cromatografa
90
Ejercicio 9: Espectrofotometra
94
101
Apndice
113
PRONTUARIO
I. Ttulo y Nmero del Curso: Laboratorio de Destrezas I (Biol. 1103)
Cdigo y Nmero: Biol. 1103
Crditos: 3
Horas contacto: 3 horas semanales
II. Descripcin del Curso: Desarrollo de destrezas y tcnicas bsicas de
laboratorio. Se da nfasis a las reglas de seguridad, sistemas de medicin,
mtodos estadsticos y el uso adecuado de equipos de laboratorio y de recursos
electrnicos de informacin. Se utiliza el mtodo cientfico para la solucin de
problemas del rea de biologa. Se requiere someter informes de laboratorio
siguiendo formatos cientficos establecidos. ( Requisitos: Se recomienda
matrcula simultnea con el curso Biol. 1101).
III. Objetivos Terminales y Capacitantes
Al terminar el curso, se espera que el estudiante pueda:
1. Aplicar las reglas de seguridad al trabajar en el laboratorio.
1.1 Aplicar las reglas de seguridad en el laboratorio.
1.2 Localizar los materiales y equipo de seguridad en el laboratorio.
1.3. Aplicar la informacin general que aparece en las hojas de
seguridad para materiales de laboratorio.
2. Aplicar las destrezas de trabajo en equipo en las experiencias de
laboratorio.
2.1
Conocer la importancia del trabajo en equipo.
2.2
Desarrollar conductas de cooperacin.
2.3
Utilizar la comunicacin como principal herramienta de trabajo.
2.4
Reconocer las aportaciones individuales.
3. Valorizar la utilidad del pensamiento cientfico en la solucin de
problemas.
3.1 Definir el concepto del mtodo cientfico.
3.2 Explicar los pasos utilizados por los cientficos para formular una
hiptesis.
3.3 Disear un experimento o protocolo experimental para corroborar
4
una hiptesis.
3.4 Distinguir entre un grupo experimental y uno control.
4. Organizar datos cientficos utilizando el anlisis estadstico.
4.1 Construir tablas y grficas para presentar y organizar
informacin.
4.2 Interpretar la informacin presentada en tablas y grficas.
4.3 Analizar los resultados de un experimento aplicando conceptos
estadsticos tales como frecuencia, promedio, mediana y moda.
5. Solucionar problemas que conlleven la aplicacin de los sistemas de
medidas.
5.1 Distinguir entre las unidades bsicas de volumen, masa, longitud,
temperatura, tiempo y energa de los sistemas de medidas ingls y
mtrico.
5.2 Aplicar equivalencias matemticas para convertir entre unidade
de medida.
5.3 Utilizar adecuadamente los materiales e instrumentos de medida
de uso comn en el laboratorio de biologa.
6. Seleccionar los materiales y equipo que se requieren para desarrollar
un experimento.
6.1 Describir los usos y las aplicaciones de los materiales y los equipos
que se usan en el laboratorio.
6.2 Evaluar la utilidad de cristalera y otros implementos o
instrumentos de medicin.
6.3 Utilizar adecuadamente los instrumentos de medida de uso comn
en el laboratorio de biologa.
6.4 Manipular adecuadamente la instrumentacin relacionada con el
curso.
7. Usar las bases de datos en la bsqueda e interpretacin de
informacin cientfica.
7.1 Aplicar la informacin cientfica en la preparacin de informes de
laboratorio.
7.2 Preparar presentaciones orales o escritas usando la informacin
obtenida de las bases de datos.
IV. Contenido
A. Medidas de seguridad; Cmo preparar un informe de laboratorio
B. Aplicacin del pensamiento cientfico
C. Manejo e interpretacin de datos
D. Uso de sistemas de medidas
E. Uso del microscopio
F.
G.
H.
I.
J. Espectrofotometra
K. Cambios en pH por actividad metablica
L. Uso de recursos electrnicos de informacin
M. Presentaciones orales
V. Actividades
VI. Actividades de Avalo
Pre y Post Prueba
Cuestionario sobre cumplimiento de objetivos
VII. Libros de Texto
Campbell, NA and JB Reece. 2005. Biology. 7th ed. Benjamin Cummings.
Menlo Park, California, USA.
Solomon, EP, LR Berg, and DW Martin. 2005. Biology 7th ed. Brooks/Cole
Thomson Learning. Belmont, CA
Tillery, BW, ED Enger and FC Ross. 2001. Integrated Science. McGraw-Hill
Higher Education. New York, New York.
VIII. Recursos
Lecturas Suplementarias
Recursos Audiovisuales
Scientific Method- Jaguar Educational 2002 (20 min.)
The Big Picture: Distributions, Variations and Experiments Insight Media
Recursos Electrnicos
http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?contents.html
IX. Evaluacin
A. Instrumentos de evaluacin
Informes de laboratorio
100 puntos
Asistencia y participacin
100
100
Examen final
100_
Total 400 puntos
B. Curva:
90 100%
80 89
70 79
60 69
menos de 60
X. Bibliografa
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas.
Lawson, AE. 1995. Exploring the living World: A Laboratory Manual. McGraw-Hill,
Inc. New York.
Morgan, JG and ME Brown Carter. 2002. Investigating Biology. Benjamn
Cummigs. Menlo park, California.
Seidman, LA and C J Moore. 1999. Basic Laboratory Methods for
Biotechnology:Textbook and Laboratory Reference. Prentice-Hall, Inc. Upper
Saddle River, New Jersey.
Reglas de Seguridad
Objetivos:
1. Aplicar las reglas de seguridad en el laboratorio.
2. Localizar los materiales y equipo de seguridad en el laboratorio.
3. Aplicar la informacin general que aparece en las hojas de seguridad para
materiales de laboratorio.
Introduccin
El Laboratorio de Destrezas I te ofrece la oportunidad de familiarizarte con el
equipo, los materiales y algunos de los mtodos que se utilizan en el estudio de
la biologa. Para que puedas aprovechar al mximo cada una de tus experiencias
de laboratorio, es necesario que adoptes y practiques unas medidas de
seguridad que tienen el propsito de protegerte cuando ests en el saln de
laboratorio. Estas medidas generales sern presentadas de forma audiovisual al
inicio del curso, discutidas por tu instructor de laboratorio antes de comenzar
cada ejercicio y repasadas cada vez que sea necesario. Es imprescindible que
leas el ejercicio de laboratorio antes de llegar al laboratorio, para que te
asegures de que entiendes todas las instrucciones del experimento que llevars a
cabo.
Por tu seguridad, es necesario que:
1. uses una bata de laboratorio mientras ests dentro del saln y gafas de
seguridad o espejuelos, al manejar compuestos qumicos o especmenes
vivos o preservados. Dependiendo del experimento, en algunas ocasiones
se te requerir utilizar otro equipo de seguridad.
2. te abstengas de comer, beber, fumar o aplicarte cosmticos durante la
sesin de laboratorio.
3. conozcas la ubicacin y uso correcto del equipo y materiales de seguridad
{manta, extintores contra incendios, duchas de seguridad, botiqun de
primeros auxilios, duchas para ojos y hojas de seguridad de los materiales
(Material Safety Data Sheets o MSDS)}, entre otros.
4. puedas interpretar el cdigo de rotulacin de los reactivos, de acuerdo
con su peligrosidad, manejo y riesgos.
5. te vistas adecuadamente (faldas o pantalones largos, zapatos cerrados y
cabello recogido).
6. mantengas los libros y otros materiales personales fuera del rea de
trabajo, pero no en el piso.
7. mantengas el equipo dentro del saln de laboratorio.
8. leas las etiquetas de los reactivos y materiales que vas a utilizar y le
preguntes sobre su uso al instructor en caso de dudas.
9. rotules adecuadamente todos tus materiales con el nombre del reactivo y
tus iniciales, as como con otra informacin que tu instructor te provea.
10
Informes de Laboratorio
Una parte importante del desarrollo cientfico es la divulgacin de los hallazgos.
Mediante esta divulgacin, conocemos lo que otros han hecho y podemos
fortalecer nuestra gestin como cientficos. La base de la divulgacin es el
informe tcnico o informe de laboratorio. A travs de este informe puedes
resumir lo que hiciste para contestar, al menos, cinco preguntas clave:
11
12
13
Introduccin
El mtodo cientfico es la manera sistemtica y racional que usan los cientficos
para disear experimentos, recopilar informacin y comprobar ideas; se trata
bsicamente del modo de hallar respuestas a interrogantes. El mtodo cientfico
incluye los siguientes pasos:
1. Observacin
Al realizar observaciones se puede hacer uso directo de los sentidos o utilizar
instrumentos que aumentan la percepcin normal de los sentidos. Las
observaciones deben ser exactas o libres de errores, ya sean del investigador
(error humano) o del instrumento (error instrumental). Las opiniones y
emociones no deben influir en lo que se observa. Se debe mantener un registro
escrito o grabado de todas las observaciones que se realizan.
2. Definicin del problema
Durante las observaciones o el estudio cuidadoso de la literatura cientfica,
surgen preguntas que son tomadas en consideracin. Estas preguntas
constituyen el problema que el cientfico tratar de resolver. La investigacin
cientfica requiere una mente inquisitiva y la habilidad para cuestionarse por qu
y cmo ocurren las cosas. Cada pregunta o problema puede contestarse con
experimentos bien planificados. Una investigacin exitosa nos lleva a nuevas
investigaciones y nuevos conocimientos.
3. Formulacin de la hiptesis
Cuando la informacin que tenemos a mano no es suficiente para darnos una
explicacin del problema, es necesario proseguir con la experimentacin.
Usando su propio pensamiento y razonamiento creativo, el cientfico formula, en
forma de aseveracin, una explicacin tentativa o solucin al problema. Esta
aseveracin se conoce como una hiptesis. Aunque la hiptesis pareciera ser
una solucin razonable a la luz de los hechos conocidos, no puede ser aceptada
hasta que se sustente por una base amplia de evidencia. El investigador no slo
14
debe tener buena imaginacin para generar una hiptesis, sino tambin una
mente abierta para modificarla, si la evidencia falla en sostenerla. La hiptesis
es, entonces, una posible contestacin a una pregunta sobre la naturaleza,
basada en observaciones, lecturas, intuicin cientfica y los conocimientos del
cientfico.
4. Recopilacin de informacin relacionada con el problema
El cientfico trata de resolver cada aspecto del problema. Antes de emprender
un experimento, el investigador debe hacer uso de todos los datos disponibles.
Conocer esta informacin impide que haya duplicacin y repeticin del trabajo ya
hecho. Hay que buscar intensamente informacin en la literatura cientfica
encontrada en bibliotecas, centros de investigacin, Internet y otras fuentes.
5. Experimentacin
El experimento que se lleve a cabo para explicar un fenmeno o resolver un
problema debe disearse. Un experimento es una investigacin conducida
bajo condiciones muy estrictas en la que se controlan todas las variables menos
la que se quiere estudiar. Una variable es un evento o condicin que est
sujeto a cambio. Un experimento diseado correctamente utiliza un grupo
control y un grupo experimental. El grupo control representa la situacin
normal o natural en el experimento y se utiliza para comparar los cambios
ocurridos en el grupo experimental. El grupo experimental es aqul al que se le
aplica la variable.
6. Anlisis de resultados
Los datos o resultados obtenidos en la experimentacin se organizan y analizan
con honestidad y objetividad para determinar si la hiptesis formulada es
correcta o incorrecta. Durante el anlisis se infieren conclusiones y se establecen
posibles fuentes de error en el experimento.
En general, la experimentacin va dirigida a postular teoras y leyes o principios.
Una teora es una explicacin que tiene un alto grado de confiabilidad; es una
hiptesis respaldada por un gran nmero de observaciones y experimentos. Las
teoras estn sujetas a comprobacin. Una teora sirve generalmente como base
para experimentacin adicional. Una teora explica con sencillez el porqu de las
observaciones.
Cuando una teora ha generado predicciones que por mucho tiempo han sido
comprobadas una y otra vez, y es aceptada, se convierte en una ley o principio
cientfico. Una ley describe algn aspecto de la naturaleza.
15
Ejercicios de Laboratorio
Parte I- Actividad de Aprendizaje Cooperativo:
A. Los estudiantes formarn grupos o equipos de trabajo de
aproximadamente 5 (cinco) a 6 (seis) personas.
B. Cada grupo nombrar un lder y un relator o anotador. Este ltimo
tomar notas de la actividad de su grupo.
C. Los integrantes de cada grupo llevarn a cabo un torbellino de ideas o
brain storming relacionado a la siquiente pregunta: Qu palabra
viene a tu mente cuando piensas en el mtodo cientfico? El relator
anotar esta palabra. Al finalizar esta tarea habr muchas palabras (no
oraciones) relacionadas al mtodo cientfico.
D. Luego de esto el lder de cada grupo establecer un perido de cinco
minutos para que cada miembro construya o elabore una definicin del
concepto del mtodo cientfico con la sopa de palabras surgidas del
torbellino de ideas.
E. Los miembros de cada grupo leern su definicin del concepto mtodo
cientfico.
F. Luego llegarn a un consenso sobre la mejor definicin y se anotar
en la pizarra .
16
17
Preguntas:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Qu es una hiptesis?
Qu es un experimento?
Cul es la relacin entre una hiptesis y un experimento?
Qu es una variable?
Cul es la diferencia entre un grupo control y un grupo experimental?
Por qu son las teoras ms aceptadas que las hiptesis?
En un experimento para investigar la funcin del ncleo de la clula, un
cientfico le removi el ncleo a una ameba mediante microciruga. La ameba
dej de dividirse y en pocos das muri. A base de los resultados de este
experimento,
a. Cul fue una posible hiptesis planteada por este
cientfico?
b. Cul es una funcin del ncleo, de acuerdo con los
resultados?
8. Considera usted que el mtodo cientfico tiene limitaciones?. Explique su
contestacin.
9. Construye un diagrama donde ilustre los pasos de mtodo cientfico.
10. Identifica en la Internet dos recursos sobre el mtodo cientfico, provea sus
direcciones.
Recurso Audiovisual
Pelcula The Scientific Method
Referencias
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas.
Lawson, AE. 1995. Exploring the living World: A Laboratory Manual. McGraw-Hill,
Inc. New York.
18
19
Introduccin:
La estadstica puede definirse como un mtodo de recopilacin, organizacin y
anlisis de datos numricos u observaciones. El objetivo principal de la
estadstica es presentar los datos en forma sencilla, til y comprensible.
A. Representacin de Datos Experimentales
Toda investigacin cientfica genera datos. Si la investigacin es extensa, la
cantidad de datos puede ser tan grande como para hacer difcil su interpretacin.
Una manera sencilla para organizar e interpretar los datos es mediante la
construccin de tablas y grficas. Las tablas y grficas nos permiten observar
claramente grupos de datos. Al estar organizados, se nos hace ms fcil
establecer relaciones o tendencias, comparar entre diferentes grupos de datos y,
hasta predecir de forma razonable una relacin entre dos o ms variables.
Al recopilar datos tomando medidas en un laboratorio, generalmente
comparamos dos o ms datos o grupos de datos. Los datos se representan por
una variable, que puede ser peso (p), longitud (l), temperatura (T) o tiempo (t).
Por lo general, dentro de un estudio estos datos estn relacionados, de modo
que llamamos al dato que depende de otro la variable dependiente. Por otra
parte, el dato que no depende de otro se conoce como la variable
independiente. Por ejemplo, si estuvisemos midiendo el peso de un animal
segn pasa el tiempo, ciertamente el peso depender del tiempo. Por esto el
peso es la variable dependiente y el tiempo es la variable independiente.
1. Preparacin de tablas:
Las tablas (cuadros) nos ayudan a observar mejor un resumen de los datos
obtenidos. Una tabla es una representacin grfica de los datos relacionados
con las variables que estamos estudiando. Por ejemplo, si queremos demostrar
cul es la relacin entre la edad y el consumo de caloras de un beb, podemos
tener la siguiente informacin: El consumo diario promedio de caloras durante
el primer mes de vida fue de 2,000 caloras; durante el segundo fue de 2,500
20
caloras; durante el tercero fue de 2,800 caloras; durante el cuarto fue de 3,100
caloras; durante el quinto, fue de 3,200 caloras; durante el sexto y el sptimo,
fue de 3,500 caloras; durante el octavo fue de 3,000 caloras; durante el noveno
fue de 2,800 caloras; durante el dcimo fue de 2,000 caloras; durante el
undcimo fue de 1,700 caloras y; durante el duodcimo fue de 1,600 caloras. A
pesar de que la informacin est presentada claramente, se nos hace un poco
difcil apreciar si existe o no un patrn o una tendencia entre los datos.
Con el fin de manejarla ms efectivamente, la informacin del ejemplo se puede
organizar en una tabla. En este ejemplo, solamente tenemos dos variables, que
son el tiempo de vida (edad) del nio y el promedio del consumo diario de
caloras. La manera ms sencilla de organizar esta informacin es formando una
tabla con dos columnas (de arriba a abajo), en la que cada columna corresponde
a una variable. La tabla contendr tantas filas como datos individuales
tengamos.
Al construir una tabla debemos siempre procurar que los datos en una fila se
lean de izquierda a derecha, excepto si se espera que sumen al final. Los
nmeros deben ser ordenados de menor a mayor, para facilitar la lectura de la
informacin. Adems, las columnas deben estar rotuladas con el nombre de la
variable y la unidad (que debe mantenerse igual a lo largo de toda la tabla), y la
tabla debe tener un ttulo que sea descriptivo de la informacin que contiene.
Los datos del ejemplo podran presentarse como aparece en la Tabla 2.1.
Tabla 2.1 Consumo calrico
promedio para bebs de
1 a 12 meses
Edad
(meses)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
Consumo promedio
diario (caloras)
2,000
2,500
2,800
3,100
3,200
3,500
3,500
3,000
2,800
2,000
1,700
1,600
21
2. Preparacin de grficas
Dependiendo de la naturaleza de la tabla, sta se puede traducir en otro tipo de
representacin conocido como una grfica. Las grficas ms comnmente
usadas son los histogramas (grficas de barra o bar charts), las grficas de
distribucin porcentual (pie charts) o las lneas (curvas).
Las grficas de barra se utilizan preferentemente cuando la informacin que
tenemos puede ser agrupada en grupos discretos de magnitud similar. Agrupar
esta informacin nos puede dar una idea de la variabilidad presente en la
poblacin. Un ejemplo de este tipo de informacin podra ser el siguiente.
Un investigador desea conocer el coeficiente de inteligencia (CI) de los
estudiantes de nuevo ingreso a uno de los recintos de la Universidad
Interamericana de Puerto Rico. De los archivos de la Universidad, el investigador
extrae al azar los expedientes de 110 estudiantes de nuevo ingreso. Los CI de
esos estudiantes estn presentados en la Tabla 2.2.
Tabla 2.2 CI de 110 estudiantes
154
131
122
100
113
133
119
115
117
110
115
103
103
121
109
128
93
90
105
118
85
108
108
136
115
100
100
114
123
126
105
111
127
108
106
150
130
87
89
108
118
104
127
94
115
97
135
108
139
133
110
113
112
82
114
119
104
147
134
117
119
91
137
101
107
112
121
125
103
89
110
122
123
124
125
115
113
128
85
113
143
80
102
132
96
129
83
142
112
120
107
108
111
100
97
111
131
109
145
93
135
98
142
127
106
110
101
110
116
123
22
23
f
17
14
12
4
5
5
3
La agrupacin por frecuencias permite una interpretacin rpida de los datos que
se han obtenido. En este ejemplo, podemos interpretar que:
- existe una mayor frecuencia en los intervalos que van del 100 al
119.
- la frecuencia en los extremos tiende a disminuir.
Una vez agrupada, esta informacin se puede representar en un histograma o
bar chart. Para preparar dicho histograma, usamos como datos la frecuencia
para cada CI y el valor del CI segn aparecen en la Tabla 2.4. Para preparar el
diagrama, entonces colocamos la frecuencia en el eje vertical (eje de y) y el
intervalo de clase en el eje horizontal (eje de x). La escala en cada eje debe
reflejar los valores de cada rengln.
Para determinar la altura de cada barra en el histograma, tomamos como punto
de referencia la frecuencia de cada intervalo de clase, colocando un punto en el
lugar que representa la frecuencia. El ancho de la barra se derivar del ancho
del intervalo de clase. Un histograma de los datos podra lucir como aparece en
la Figura 2.1.
24
Frecuencia
Histograma de CI
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
8084
9094
100104
110114
120124
130134
140144
150154
Intervalo de clase
25
2%
5%
7%
8%
11%
16%
24%
80-89
90-99
100-109
110-119
120-129
130-139
140-149
150 ms
27%
Cuadrante I
Recuerda que cada eje representa la recta numrica, teniendo el valor de cero
en la interseccin de las rectas. En el eje de x, hacia la derecha estn los
nmeros positivos y hacia la izquierda estn los nmeros negativos. En el caso
del eje de y, hacia arriba estn los nmeros positivos y hacia abajo estn los
nmeros negativos.
El plano cartesiano, que consiste de un nmero infinito de puntos, divide el plano
donde se dibuja en cuatro regiones llamadas cuadrantes. A cada punto le
corresponde un par ordenado (x,y) = (abscisa, ordenada) = (variable
independiente, variable dependiente). Cada cuadrante se distingue por tener los
signos particulares de cada uno de los ejes que lo forman. Cuando nuestros
datos son positivos, como en el ejemplo que aparece a continuacin, podemos
presentar los datos grficamente usando solamente el primer cuadrante.
Cada grfica va acompaada de una tabla. Los datos tabulados se trazan
(plot) en la grfica. Por ejemplo, consideremos un experimento en el que se
contaron levaduras por un perodo de 10 das. Los datos del experimento
aparecen en la Tabla 2.6.
Tabla 2.6 Nmero de clulas de
levadura en cada da
Da
Nmero de clulas de
levadura
0
20
1
28
2
40
3
55
4
63
5
70
6
70
7
62
8
62
9
50
10
30
Al construir la grfica de lnea, debemos identificar las variables, rotular los ejes,
establecer los intervalos (que deben ser regulares) y ubicar los puntos dentro del
cuadrante. Por ltimo, una grfica de este tipo debe tener un ttulo y una
leyenda que ayude en su interpretacin.
Una grfica de los datos de la Tabla 2.6 podra lucir como aparece a
continuacin.
27
Nmero de clulas
10
Tiempo (das)
28
X
donde
CI
n
n=nmero de individuos y
suma de todos los CI.
Entonces, X =
12,539
113.99
110
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
29
Procedimiento:
1. Mide el largo (en milmetros) de cada una de 200 semillas. Cuando hayas
medido la primera semilla, colcala dentro de un tubo de ensayo y rotula el
tubo con el tamao de la semilla. Si la segunda semilla vara en tamao,
colcala en un segundo tubo, de manera que al finalizar tengas varios tubos
en los que las semillas sern del mismo tamao.
2. Determina el nmero de semillas en cada tubo para establecer la frecuencia
de semillas de cada tamao.
3. Prepara una Tabla con informacin sobre la distribucin de tamao de las
semillas.
4. Organiza los datos sobre el tamao de las semillas en frecuencias agrupadas.
Debes decidir cuantos intervalos usaras.
5. Prepara un histograma con los datos sobre el tamao de las semillas.
6. Analiza los datos recogidos para determinar las siguientes medidas de
tendencia central:
a. promedio (media)
b. mediana
c. moda
Preguntas o Problemas:
A. El peso de unas ratas alimentadas con una dieta rica en protenas fue
determinado por siete (7) semanas. Los resultados aparecen a continuacin.
Tiempo
(semanas)
1
2
3
4
5
6
7
Peso
(gramos)
25
32
43
51
60
68
73
Dibuja una grfica que represente los datos de peso para las ratas en este
experimento.
30
Factor de
estrs
73
47
40
37
20
12
Peso (libras)
15
26
68
121
182
249
(t=0)
(t=1)
(t=2)
(t=3)
(t=4)
(t=5)
Expectativa
de vida (aos)
70.9
73.2
74.8
77.5
78.6
79.1
E. Opcional.
A continuacin te incluimos una lista de los platos principales del restaurante de
Wendy's y de las caloras correspondientes a cada uno.
Papa
Papa
Papa
Papa
Papa
Papa
asada, plain
asada con tocineta y queso
asada con brcoli y queso
asada con queso
asada con chili y queso
asada con sour cream y cebollines
Sandwich
Sandwich
Sandwich
Sandwich
Sandwich
250
510
450
550
600
500
Big Classic
de pollo empanado
de pollo a la plancha
Chicken Club
de pescado
570
450
290
520
460
Cheeseburger doble
Jr. Cheeseburger
Jr. Cheeseburger Deluxe
Jr. Cheeseburger Deluxe con tocineta
590
320
390
440
280
290
90
450
Frosty
Hamburger
Hamburger con todo
Hamburger doble carne
Hamburger Jr.
Loncherita
578
350
440
520
270
270
Ensalada Caesar
Ensalada Garden Deluxe sin aderezo
Ensalada de pollo a la plancha sin aderezo
Ensalada pequea, sin aderezo
Taco, sin aderezo
160
110
200
60
640
32
1.
Completa la tabla:
Clases
0 99
100 199
200 299
300 399
400 499
500 599
600 699
Frecuencia
Referencias
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual, Appendix B: Statistics.
http://homepages.gac.edu/~cellab/contents.html
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual, Appendix C: Graphs.
http://homepages.gac.edu/~cellab/contents.html
33
Introduccin:
Todos los mtodos que se utilizan en biologa conllevan la toma de medidas que
permiten realizar observaciones cualitativas y cuantitativas sobre lo que estamos
estudiando. Las observaciones cualitativas son descripciones no numricas de
un objeto de estudio. Por ejemplo, la forma o el olor de un objeto son medidas
cualitativas. As, decimos que una hoja tiene forma irregular o que un
compuesto qumico tiene un olor metlico. Por otra parte, las medidas
cuantitativas son aquellas descripciones numricas de las caractersticas de un
objeto. Entre estas caractersticas estn el tamao, el peso, la extensin y el
volumen de un objeto. El resultado de un experimento depende grandemente
de la precisin y exactitud de las medidas que tomamos. En este curso
utilizars instrumentos y materiales que te permitirn apreciar los cambios en los
sistemas que estudiars mediante la medicin de sus caractersticas. En este
ejercicio aprenders el uso y manejo de algunos de estos instrumentos.
Sistemas y Unidades de Medida
Para llevar a cabo observaciones cuantitativas, es importante conocer los
sistemas de medidas. En Puerto Rico se usan mayormente el sistema ingls
(United Status Customary System USCS) y el sistema mtrico (Systeme
Internacional d Units SI). El sistema USCS se utiliza en el campo de la
ingeniera y, a menudo, en nuestra vida cotidiana. Las unidades utilizadas en
este sistema incluyen los galones y cuartillos (para medir volumen), las pulgadas,
pies, yardas y millas (para medir longitud o distancia) y las libras o quintales
(para medir masa). Sin embargo, el SI es el que ms se utiliza en el mundo
cientfico. Este sistema es el que se utiliza en la mayora de los pases para la
investigacin y el comercio. Este sistema tiene la ventaja de que utiliza un
sistema de notacin decimal, que se puede expresar en base 10 y se puede
aprovechar la notacin exponencial. Esto es de gran utilidad cuando expresamos
cantidades muy grandes o muy pequeas. En este sistema, la unidad bsica
para medir masa es el gramo (g), para la longitud es el metro (m), para
temperatura es el grado Celsius o centgrado (C) y para el volumen es el
34
litro (L). A pesar de que su uso cotidiano es limitado y de que en Puerto Rico
utilizamos el sistema USCS, es necesario que te familiarices con ambos sistemas
para convertir cifras entre uno y otro sistema. Ms an, la comunidad cientfica
utiliza otros trminos para referirse a ciertas unidades dentro de ambos sistemas.
Adems, es importante que te familiarices con los trminos y prefijos
relacionados con estas unidades (Tabla 3.1).
Tabla 3.1: Prefijos comunes usados en el sistema mtrico (SI)
Prefijo
Smbolo
Significado
picop
10-12
nanon
10-9
micro
10-6
milim
10-3
centic
10-2
decid
10-1
decada
101
hectoh
102
kilok
103
megaM
106
gigaG
109
Cuando tomes una medida, es necesario hacerlo con precisin y exactitud.
Adems, en algunas ocasiones ser necesario que estimes un valor. Para lograr
este fin, las unidades bsicas pueden ser fraccionadas. De esta manera,
podemos tomar medidas de cifras menores que la unidad bsica. La siguiente
informacin resume las unidades bsicas del sistema mtrico:
A. Longitud
El metro (m) es la unidad bsica del SI para medir longitud. La longitud en el
laboratorio se mide usualmente con cintas mtricas, reglas, o micrmetros.
Los micrmetros son usados para medir con precisin las distancias o
longitudes muy pequeas, como por ejemplo, dentro del microscopio.
Si hay alguna longitud que sea menor a un metro, entonces es conveniente
utilizar medidas ms pequeas que el metro. Con este fin, el metro se divide
en 10 partes iguales. Cada una de estas partes representa una dcima (1/10)
parte de un metro, y se conoce como decmetro (dm). Cada dm a su vez
puede ser dividido en 10 partes y cada fraccin de estas se conoce como
centmetro (cm). El metro puede subdividirse an ms. Estas fracciones del
metro aparecen en la Tabla 3.2.
35
metro
decmetro
centmetro
milmetro
micrmetro
(micrn o
micra)
nanmetro
angstrom
m
dm
cm
mm
m
1
10
100
1,000
1,000,000
Qu fraccin
del m
representa?
--1/10
1/100
1/1,000
1/1,000,000
nm
1,000,000,000
10,000,000,000
1/1,000,000,000
1/10,000,000,000
Smbolo
gramo
miligramo
mg
1,000
1/1,000
microgramo
1,000,000
1/1,000,000
36
C. Volumen
La unidad bsica para medir el volumen es el litro (L), que es equivalente a
un decmetro cbico (dm3). El volumen de un objeto puede medirse utilizando
diversas tcnicas. Si el objeto es lquido, su volumen puede ser medido con
matraces, probetas, buretas, pipetas y micropipetas. Al igual que con otras
medidas, el litro puede ser subdividido en unidades ms pequeas. La Tabla
3.4 presenta las fracciones del litro que ms se utilizan en biologa.
Tabla 3.4 Unidades de volumen
Unidad
Smbolo
Cuntos hay en Qu fraccin
1 L?
del L
representa?
litro
L
1
--mililitro
mL
1,000
1/1,000
microlitro
L
1,000,000
1/1,000,000
D. Tiempo
La unidad bsica para medir el tiempo en el SI es el segundo (s). El
segundo se puede dividir en dcimas, centsimas y milsimas de segundo
(milisegundo).
E. Temperatura
La temperatura es una medida de la intensidad de calor de un cuerpo. Para
medir la temperatura de un objeto se usa comnmente un termmetro, que
utiliza la escala Fahrenheit (del USCS), la escala Celsius o centgrado (del SI),
o ambas. La Tabla 3.5 presenta algunas temperaturas usuales para
fenmenos conocidos.
Tabla 3.5 Ejemplos de temperaturas aproximadas
Ejemplos
Temperatura
Temperatura
aproximada, C aproximada, F
Agua hirviendo
100
212
Hielo
0
32
Caf caliente
80
176
Temperatura de
25
77
saln (con aire
acondicionado)
Nevera
4
39
Parte ms fra del
-5
23
congelador
Tanto la escala Fahrenheit como la escala Celsius toman como referencia los
puntos de congelacin y de ebullicin del agua. En la escala Centgrado, la
37
F = (C X 1.8) + 32
F. Energa
Una de las unidades para medir energa es la calora (cal), utilizada en el
USCS. Una calora es la cantidad de calor necesaria para aumentar la
temperatura de 1 gramo de agua en un grado centgrado.
Toma de medidas
A lo largo de tu experiencia como estudiante de biologa ser necesario tomar
medidas de diversos objetos para hacer observaciones relacionadas con los
mismos. El resultado de los trabajos experimentales depender de tu habilidad
al tomar esas medidas. Adems de tomarlas correctamente, es necesario que
las interpretes adecuadamente. Parte de esa interpretacin debe considerar la
incertidumbre al tomar las medidas.
Usualmente una regla de un metro est dividida en centmetros y a veces en
milmetros. Si medimos el largo de una hoja con esta regla (el metro), que est
dividida en centmetros, podemos leer que la hoja mide ms de 3 pero menos de
4 cm. Estamos seguros de que la hoja mide algo ms de 3 cm. En el lenguaje
cotidiano decimos que la hoja mide 3 cm y pico, pero en las ciencias es
necesario precisar la medida exacta de la hoja. Para tener una mejor precisin
al tomar la medida, es necesario que aproximemos (o estimemos) ese pico. Si
el metro solamente est graduado en centmetros, ser necesario estimar o
aproximar el nmero de milmetros adicionales a los 3 cm que son seguros.
Midiendo a nuestra mejor capacidad, si el objeto llega al punto exacto entre 3 y
4, podemos decir que el objeto mide 3.5 cm. En esta cifra, el valor de 3 cm es
seguro. La incertidumbre en esta medida est en el ltimo lugar decimal. Esto
quiere decir que la hoja mide, con certeza, entre 3.1 y 3.9 cm y el 0.5 cm
medido es incierto. En una segunda medida de la misma hoja, o si otra persona
mide la misma hoja, puedes determinar que mide 3.4 cm, en lugar de 3.5 cm.
Esta variacin en las medidas, que es normal, se conoce como precisin. La
variacin en la medida se minimizara si el metro estuviese dividido en
milmetros.
38
39
Paso 1: Convertir de mg a g.
Paso 2: 1 g=1,000 mg
Paso 3: 500mg X
1g
0.5g
1,000 mg
40
Ejercicio de Laboratorio
A. Medidas de Longitud
Materiales:
metro
calculadora
reglas de 6 y 12 pulgadas graduadas en centmetros
objetos de diversos tamaos (dados, cajas de fsforos, cajas
y mesa)
Procedimiento:
1. Observa el tamao de los objetos disponibles para medir.
2. Identifica la regla o metro que contiene la unidad (metro o centmetro)
ms apropiada para medir los objetos.
3. Mide en centmetros el largo, ancho y altura de tres cajas de diferente
tamao. Calcula el rea de cada cara de las cajas (rea = largo X
ancho) y el volumen (volumen = largo X ancho X altura) del objeto.
4. Calcula el rea superficial de cada caja, sumando las medidas de rea
de cada lado.
5. Calcula la proporcin del rea superficial al volumen para cada caja
(rea superficial/volumen).
6. Compara las proporciones rea superficial/volumen de las tres cajas.
Qu concluyes?
B. Medidas de Volumen
Materiales:
Procedimiento:
1. Familiarzate con envases de medicin tales como vasos (beakers), y
probetas de diversas capacidades.
2. Determina el volumen de agua necesario para llenar un vaso de
laboratorio hasta la medida ms alta que refleja la escala. Anota esta
medida de volumen de agua.
3. Vierte el agua que mediste en el vaso en una probeta adecuada.
Anota el volumen que mide la probeta y compara este volumen con el
volumen medido en el vaso. Determina si hay diferencias entre ambas
medidas e identifica cul envase te permite leer con mayor precisin el
volumen.
41
Procedimiento:
1. Utilizando una balanza, determina el peso de una hoja de papel de tu
libreta y el peso de la libreta de laboratorio.
2. Utilizando una balanza, determina el peso de un vaso de laboratorio de
100 mL.
3. Mide 50.0 mL de agua con una probeta y transfirelos al vaso que ya
pesaste.
4. Determina el peso de 50 mL de agua dentro del vaso previamente
pesado. Conserva este vaso y el agua para la prxima actividad.
5. Calcula la densidad (masa/volumen) del agua y compralo con la densidad
del agua (1g/ml).
D. Medidas de temperatura
Materiales:
termmetro
vaso de laboratorio con capacidad para 100 mL con 50 mL
de agua
hielo
plancha para calentar
guantes protectores
Procedimiento:
El propsito de esta seccin del ejercicio es que te familiarices con la escala
del termmetro disponible en el laboratorio. SEGURIDAD: El termmetro
42
Preguntas o Problemas
A. Usa las tablas de conversin que aparecen en el texto y al final de este
ejercicio para efectuar las siguientes conversiones:
1. 425 g = ____ kg
2. 0.5 ml = ____ L
3. 3.5C = ____ F
4. 20F = ____ C
5. 33 cm = ____ mm
6. 1.78 m = ____ pies
7. 36 pulgadas = ____ cm
8. 85 mL = ____ L
9. 75F = ____ C
10. 60 pulgadas = ____ m
11. Si contamos con 1 L de solucin de almidn y necesitamos dividir esa
cantidad en cuatro partes iguales, de cunto volumen ser cada porcin?
12. Si tienes 625 L de una solucin de NaOH y quieres aadirle agua hasta
llegar a 1.0 mL, cunto volumen de agua necesitas aadir al tubo?
13. Un pediatra determin que la temperatura de un beb es de 102.2F. Si
se define la fiebre como cualquier temperatura sobre 37.5C, podemos
decir que el beb tiene fiebre?
B. Subraya la cantidad mayor de cada uno de los siguientes pares. Si ambas
cantidades son iguales, subraya ambas cantidades.
1.
2.
3.
4.
5.
250 g, 0.23 kg
100 mL, 0.1 L
10C, 10F
1.0 g de agua, 1.0 mL de agua
30 mL, 300 L
43
44
Factores de conversin
1 pie = 12 pulgadas
1 metro = 39.37 pulgadas = 1.1 yardas
1 mL = 1 cm3
Referencias
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual.
http://homepages.gac.edu/~cellab/contents.html
Vodopich, DS y R Moore. 1999. Biology: Laboratory Manual. WCB McGraw-Hill,
Boston, Massachusetts.
http://www.unc.edu/~rowlett/units/
45
Introduccin
Muchos organismos vivientes o sus partes son muy pequeos para ser
observados a simple vista. Por tal razn, existe una serie de hallazgos biolgicos
que se han realizado gracias a la invencin del microscopio. El microscopio es
un instrumento que se compone de un sistema de lentes cncavos y convexos
que enfocan la luz que pasa a travs del espcimen, produciendo una imagen
magnificada. Adems de los lentes, el microscopio tiene un sistema para
iluminar el objeto examinado.
Existen diversos tipos de microscopios, entre los que se encuentran el microcopio
de luz visible, de luz polarizante, de luz ultravioleta y electrnico. Los
microscopios de utilizan ampliamente en la investigacin y cada uno tiene su
aplicacin particular.
Los microscopios de luz utilizan lentes que enfocan los rayos de luz y magnifican
la imagen del objeto observado. La iluminacin del microscopio proviene de una
lmpara ubicada en la parte inferior (base) del microscopio. Existen diferentes
clases de microscopios de luz. Los microscopios que usars en este curso son
microscopios compuestos, que se llaman as porque utilizan dos o ms lentes. El
microscopio de diseccin o estereoscopio (Figura 4.1) est diseado para el
estudio de los objetos a baja magnificacin, cuando se puede observar el objeto
en su totalidad.
Otros microscopios se utilizan para observar estructuras pequeas, ya que este
tiene una capacidad de magnificacin mayor. Dependiendo de la naturaleza del
objeto bajo estudio, usualmente es necesario o conveniente teir las estructuras
que queremos observar, para distinguirlas de su entorno. La tincin tambin
ayuda a distinguir estructuras celulares internas. Una desventaja del proceso de
tincin es que requiere que el objeto se fije de alguna manera a la laminilla.
Esto casi siempre resulta en la destruccin o muerte del organismo.
46
47
48
Lentes
oculares
Revlver
Brazo
Platina
Tornillo macromtrico
Tornillo micromtrico
Base
50
Revlver
Objetivos
Pinzas
Platina
Tornillo macromtrico
(de ajuste grueso)
Tornillo
micromtrico
(de ajuste fino)
51
Condensador
Diafragma
Fuente de luz
52
53
Tipos de microscopios
El microscopio de diseccin o estereoscopio permite observar objetos
enteros que sean muy grandes u opacos para ser observados por el microscopio
de luz visible. Tambin se utiliza para ayudar a realizar disecciones, es decir,
separacin de las estructuras de un organismo. Generalmente es binocular y
tiene dos fuentes de iluminacin para la observacin estereoscpica. Tambin
posee un solo tornillo de ajuste de foco (grueso). La magnificacin mxima de
un microscopio de diseccin depende del modelo y la marca.
El microscopio de campo oscuro (darkfield) se utiliza para observar
organismos que no pueden teirse con tintes comunes. En este tipo de
microscopio existe un disco opaco, que impide el paso de luz hacia la parte
54
central del condensador, de modo que solamente la luz difractada por el objeto
llega a los objetivos. De esta forma, los objetos se observan brillantes sobre un
campo oscuro. La magnificacin mxima de un microscopio de campo oscuro es
de 1,000 a 2,000X.
El uso de un microscopio de contraste de fase permite un examen detallado
de estructuras dentro de organismos vivos sin necesidad de teir el organismo.
Tambin permite un mayor contraste entre objetos con mayor espesor o
densidad. El microscopio de fase contiene condensadores y objetivos especiales
coordinados, capaces de controlar la luz que pasa a travs de las diferentes
partes del espcimen bajo estudio. Un disco anular (ver Figura 4.8) hace que los
rayos de luz que pasan a travs del espcimen sean difractados (desviados) de
una manera diferente y viajan por diferentes trayectorias antes de llegar al
ocular. Esto hace que percibamos la imagen con distintos grados de brillantez u
oscuridad, lo que produce un efecto tridimensional. La magnificacin mxima de
un microscopio de fase es de 1,000 a 2,000X.
ms corto que la luz visible, lo que permite observar objetos de menor tamao.
Para hacerlo, se utilizan tintes especiales, que son invisibles al ojo humano bajo
luz visible pero que son fluorescentes bajo luz ultravioleta. Este microscopio
tiene una utilidad particular, ya que puedes distinguir partes especficas del
objeto que observas, ya que la parte teida muestra fluorescencia sobre un
fondo oscuro (no teido). La magnificacin mxima para un microscopio de
fluorescencia es similar al microscopio de luz visible.
El microscopio electrnico es el que brinda mayor magnificacin, por lo que
tiene utilidad para observar objetos pequeos (de 0.003 M), tales como virus u
otras estructuras subcelulares. Esto se debe a que utiliza electrones (y no luz)
para visualizar los objetos. En lugar de utilizar lentes de cristal para enfocar, se
utilizan imanes (lentes electromagnticos) para enfocar el haz de electrones, que
viaja a travs de un vaco hacia el espcimen. La capacidad de magnificacin de
un microscopio electrnico es de 200,000 a 400,000X. Existen varios tipos de
microscopio electrnico, entre los cuales los ms utilizados son el de transmisin
y el de rastreo.
En el microscopio electrnico de transmisin, el rayo de electrones pasa a
travs de un corte muy fino del espcimen y de un objetivo electromagntico
antes de ser proyectado a una placa o pelcula fotogrfica. La imagen que se
observa resulta de la absorcin selectiva de electrones por diferentes partes del
objeto observado. En el microscopio electrnico de rastreo (scanning), los
rayos de electrones son dirigidos hacia el objeto bajo estudio y reflejados de la
superficie del objeto a una placa fotogrfica. Como los electrones no atraviesan
el objeto, no es necesario cortarlo finamente y se puede observar en detalle los
contornos del objeto. Los microscopios electrnicos tienen la desventaja de que
no permiten la observacin de organismos vivos y, como no usan luz visible, los
objetos o estructuras solamente se aprecian en blanco y negro. En los libros de
texto usualmente se colorean por computadora las imgenes para enfatizar sus
diferencias.
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
palillos de dientes
laminilla con la letra e
laminilla con hilos coloreados
laminillas y cubreobjetos
laminillas de depresin
vaselina
pipetas Pasteur y bulbos
agua estancada (PROVISTA POR LOS ESTUDIANTES)
especmenes de animales pequeos (PROVISTOS
POR LOS ESTUDIANTES)
microscopios
micrmetros oculares y de platina
56
pinzas finas
Procedimiento
SEGURIDAD: Las laminillas y cubreobjetos estn hechos de vidrio, por lo que
debes tener precaucin para no cortarte con ellos. En caso de accidente, debes
notificarlo a tu instructor inmediatamente. Tambin debes recordar descartarlas
en los envases apropiados al final del ejercicio.
A. Inversin de la imagen
Debido a la posicin de los lentes en el microscopio, la imagen que se observa
est invertida. Para demostrar esta situacin, utiliza una laminilla con la letra
e.
1. Observa a simple vista la laminilla y dibuja lo observado.
2. Coloca la laminilla en la platina en la misma direccin en que la observaste a
simple vista. Enfoca con el objetivo de rastreo (4X). Para enfocar, coloca el
lente de 4x completamente perpendicular a la platina. Gira lentamente el
tornillo macromtrico mientras observas a travs del microscopio hasta que la
imagen sea clara. Ajusta la imagen con el tornillo micromtrico. Dibuja la
imagen observada.
3. Mientras observas a travs del microscopio, mueve la platina hacia la derecha,
la izquierda, arriba, abajo, al frente y atrs. Describe la direccin en que se
mueve la imagen.
B. Enfoque con lentes de baja y alta potencia
1. Luego de enfocar la laminilla con la letra e utilizando el lente de 4X y sin
subir o bajar la platina, cambia el lente objetivo al 10X para observar la misma
imagen. sta debe permanecer bastante enfocada. De no ser as, ajusta la
imagen con el tornillo micromtrico. Dibuja la imagen.
2. Cambia ahora al objetivo de alta potencia (40X o 43X). Enfoca con el botn
micromtrico, si es necesario. Dibuja la imagen que se observa en el campo
de visin (el rea vista a travs del lente ocular del microscopio). Describe si
observas alguna diferencia entre las imgenes de 10X y 40X.
C. Profundidad de foco
1. Obtn una laminilla fija con hilos de colores.
2. Usando el objetivo de baja potencia (10X), localiza el punto donde los tres
hilos se cruzan.
3. Determina el orden de los hilos en tu laminilla (de arriba hacia abajo)
57
x (0.01) mm
y
Recuerda que la unidad final para la medida del espacio ocular es en
micrmetros, m.
6. Calcula el rea del campo de visin para cada objetivo de tu microscopio,
usando la siguiente frmula: rea = r2. Recuerda que el r= dimetro.
7. Determina el dimetro (en mm) del campo de visin para cada uno de los
objetivos de baja potencia (10X) y alta potencia (40X o 43X) de tu
microscopio.
1 espacio ocular
58
Preguntas o Problemas
A. Preguntas sobre el microscopio
1. Completa la siguiente Tabla calculando la magnificacin total de la imagen
observada al utilizar los lentes mencionados.
Tipo de lente
Magnificacin
lente ocular
Magnificacin
lente objetivo
Magnificacin
total
Rastreo
Baja potencia
Alta potencia
Inmersin en aceite
2.
3.
4.
5.
59
10.
Referencias
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Benjamin Cummings.
Menlo Park, California.
Mader, SS. 1998. Biology: Laboratory Manual. WCB McGraw-Hill. Boston,
Massachusetts.
Vodopich, DS and R Moore. 1999. Biology: Laboratory Manual. WCB McGrawHill. Boston, Massachusetts.
61
Introduccin
Manejo de reactivos lquidos
Los experimentos biolgicos que efectuars en este curso te requerirn la
medicin y transferencia de cantidades especficas de soluciones. El grado de
precisin que tengas al hacer dichas mediciones y transferencias determinar el
xito de las tcnicas. Para llevar a cabo la tarea de medir y transferir lquidos se
utilizan aparatos conocidos como buretas, pipetas, probetas y matraces
volumtricos. Las buretas, matraces volumtricos y pipetas son usados cuando
se requiere gran exactitud y precisin; las probetas son utilizadas ms
frecuentemente en la mayora de los experimentos de este curso.
Tanto las probetas (o cilindros graduados) como las pipetas se pueden usar para
medir diferentes volmenes. Las probetas son dispositivos en forma de cilindro
que estn graduados (marcados) a intervalos regulares y a los que se le aade el
lquido a ser medido por gravedad (echamos el lquido de otro envase o fuente
dentro de la probeta, hasta alcanzar el volumen deseado). La diferencia ms
significativa entre probetas es la capacidad (las ms comnmente usadas tienen
capacidad de 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500 y 1,000 mL).
Las pipetas son otros dispositivos usados frecuentemente para medir volmenes
de lquidos. A diferencia de las probetas, las pipetas requieren, por su diseo, la
aplicacin de succin, que hace que el lquido suba a travs del cilindro que
compone la pipeta (algo similar a lo que ocurre con un sorbeto). Existe una gran
variedad de pipetas, con capacidad que vara desde fracciones de mililitros hasta
50 mL. Las pipetas tambin tienen diversas aplicaciones. Las pipetas que ms
se usan en experimentos biolgicos son:
a. pipetas volumtricas se utilizan para medir un volumen especfico y
no est graduada con volmenes intermedios. La pipeta usualmente tiene
un rea ensanchada en el cilindro y una marca que identifica su
capacidad.
62
63
64
66
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
regla
microtubos
lquidos (leche, agua,
agua con colorante vegetal)
arena
tierra
madera
semillas
gradillas
gotero
balanza electrnica
esptulas
tubos de ensayo
Procedimiento:
A. Manejo de balanza
Sobre la mesa de trabajo encontrars varios objetos de peso conocido y una
balanza electrnica. Con estos materiales:
1. Determina el peso de varios slidos disponibles en el saln. Si vas a pesar
arena, tierra o madera, recuerda utilizar un envase plstico.
2. Coloca un envase de vidrio sobre la balanza y determina su peso. Determina
el peso de 30 mL y de 50 mL de varios tipos de lquido.
B. Medicin de lquidos
Sobre la mesa de trabajo encontrars varios vasos, probetas y pipetas y
micropipetas de distintos tamaos. Tambin encontrars matraces conteniendo
volmenes conocidos de algunos lquidos.
1. Usando una de las pipetas serolgicas y el bulbo, mide 5.0 mL de uno de los
lquidos disponibles.
2. Transfiere el lquido a una probeta de 10 mL y mide el volumen con la probeta.
3. Repite el procedimiento con una pipeta serolgica y el llenador
correspondiente.
4. Compara la facilidad y rapidez de succin de cada llenador.
5. Repasa el funcionamiento de una micropipeta con tu instructor de laboratorio.
Ajusta la micropipeta para medir 1,000 L de volumen.
67
68
Preguntas o Problemas
A. Entre los siguientes pares, subraya cul es la cantidad mayor. Si ambas
cantidades son iguales, subraya ambas.
1.
2.
3.
4.
5.
1,000 L, 1.2 mL
40 mL, 0.40 L
25 mg, 0.25 g
volumen de una gota de una pipeta de 10 mL, volumen de una
gota de una pipeta de 1.0 mL
1 mL de agua, 1 gramo de agua
3.
Referencias
Boyer, RF. 1993. Modern Experimental Biochemistry. Benjamin Cummings.
Menlo Park, California.
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
69
70
Introduccin
A menudo en el laboratorio de biologa se requiere el uso de soluciones de
diversos compuestos. Aunque muchas de estas soluciones se pueden adquirir
comercialmente, siempre es conveniente aprender a prepararlas, pues esto
facilita a menudo el intentar experimentos nuevos o procedimientos de
investigacin. En la preparacin de soluciones se utiliza preferiblemente el
sistema mtrico, pues ste ayuda a uniformar los informes de laboratorio. En
este laboratorio utilizaremos medidas de masa y volumen para preparar las
soluciones. Para determinar la concentracin de las soluciones ya preparadas, se
usarn expresiones matemtica que nos permiten estos cmputos.
Una solucin es una mezcla homognea de compuestos en la que un compuesto,
el soluto, est en menor proporcin que el otro, el disolvente (tambin
conocido como solvente). Aunque el solvente universal es el agua, existen
otros solventes orgnicos que tienen gran utilidad en los estudios biolgicos. La
concentracin de una solucin nos dice cunto soluto hay disuelto en un
volumen determinado de disolvente. En el caso de las soluciones, la
concentracin se expresa comnmente en gramos, miligramos o microgramos
por mililitro o litro (por ejemplo g/L, mg/mL o g/L), porcentajes (% p/p, %
p/v o % v/v), y molaridad (moles/L, o M). Menos frecuentemente se usan las
expresiones partes por mil (ppt 0/00) o partes por milln (ppm). La exactitud
con la que preparemos nuestras soluciones ser el factor determinante en la
confiabilidad de los resultados que obtengamos.
Preparacin de soluciones
Antes de preparar una solucin de concentracin conocida, es necesario conocer
cul es la concentracin final de soluto deseada y cul es el estado en que se
encuentra el soluto. Hay que determinar si el soluto est en estado slido o si
est disuelto. En segundo lugar, es necesario determinar cunto volumen de
solucin prepararemos y, a base de ese volumen, cunto soluto hay que aadir
para alcanzar la concentracin deseada. Finalmente, hay que determinar el tipo
71
x g glucosa 0.25 L
- multiplicando cruzado, tenemos que
(x g) (1 L) = (25 g) (0.25 L)
- despejando por x, determinamos que
xg=
(25 g) (0.25 L)
= 6.25 g
1L
25 g glucosa
1L
(25) (250)
X
X 250 mL =
= 6.25 g glucosa
1 L de solucin 1,000 mL
1,000
Paso 2. Preparar la solucin.
a. se pesan 6.25 g de glucosa en un envase adecuado y se transfiere el
slido a un matraz volumtrico de 250 mL.
72
500 mL X
0.85 g
= 4.25 g NaCl
100 mL
73
72.06
H 12 (1.008 g/mol) =
12.096
O 6 (16.00 g/mol) =
96.00
180.156 g/mol
500 mL X
(0.1 M)(0.3L)
= 0.03 L = 30 mL solucin madre
(1.0M)
Concentracin
0.1 M
0.05 M 50 mM
x =1/4
0.025 M 25.0 mM
75
x = 1/8
0.0125 M 12.5 mM
1/8 x = 1/16
0.00625 M 6.25 mM
76
2 mL
2 mL
Dilucin
,
0.05 M
Solucin
madre, 0.1 M
2 mL
Dilucin
1/4,
0.025 M
2 mL
Dilucin
1/8,
0.0125 M
Dilucin
1/16,
0.00625 M
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
77
Procedimiento
1. Prepara 100 mL de una solucin de azul de metileno al 0.01% (solucin
madre).
2. Rotula 6 tubos de ensayo del 1 al 6.
3. Transfiere 10 mL de la solucin al 0.01% de azul de metileno al tubo #1.
4. Transfiere 9 mL de agua destilada a cada uno de los restantes cinco tubos.
5. Prepara una serie de diluciones 1/10 a partir de la solucin de azul de
metileno que se encuentra en el tubo #1. Utiliza una pipeta diferente para cada
transferencia. Recuerda mezclar el contenido de cada tubo antes de transferir al
siguiente.
Resultados
1. Completa la Tabla 6.1.
Tabla 6.1. Concentracin de azul de metileno.
Tubo
nmero
Dilucin
Concentracin de
azul de metileno,
%
1
2
3
4
5
6
Preguntas o Problemas
A. Cuntos gramos de azul de metileno se necesita para preparar 150 mL de
una solucin al 2% p/v?
B. Utiliza una tabla peridica para calcular el peso molecular de:
1. Na2CO3
2. NH4Cl
3. CaCl2
4. MgSO4
78
79
Referencias
Heidcamp, WH. 1996. Cell Biology Laboratory Manual (Appendix J)
http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?appds/appd-j.html
80
Introduccin
Las estructuras de las clulas de los organismos vivientes estn compuestas por
molculas orgnicas (molculas que contienen carbono) de diversa naturaleza.
Muchas de estas molculas se enlazan con otras molculas, formando
estructuras moleculares de gran tamao, que contienen miles de tomos de
carbono. Por esta razn es comn que se les llame macromolculas.
Las macromolculas estn compuestas de subunidades pequeas llamadas
monmeros, los cuales se unen mediante reacciones de condensacin que
tambin generan agua. Al unirse muchos monmeros se forma un polmero.
Los polmeros pueden romperse por el proceso de hidrlisis.
Los cuatro grupos de macromolculas biolgicas principales son:
carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nuclecos. La estructura bsica
y funcin de cada tipo de macromolcula es similar en todos los organismos.
Carbohidratos
Los carbohidratos son un grupo de substancias que se caracterizan por tener una
proporcin de Carbono:Hidrgeno:Oxgeno de 1:2:1. Los carbohidratos ms
sencillos son los monosacridos, compuestos por una unidad de azcar. Los
monosacridos tienen de 3 a 7 carbonos; los ms comunes son la ribosa (5 C),
la deoxiribosa (5 C), la glucosa (6 C), la galactosa (6C) y la fructosa (6 C). Los
monosacridos se unen entre s mediante enlaces glucosdicos para formar los
polisacridos.
Al enlazarse las molculas de glucosa se pueden formar uno de tres polmeros
principales: almidn, glucgeno y celulosa. El almidn es la forma de
almacenar glucosa en las plantas y el glucgeno es la forma de almacenar
glucosa en los animales. La celulosa es una molcula estructural, que forma las
fibras presentes en la madera y en las paredes celulares de las plantas.
Lpidos
Los lpidos se destacan por su poca solubilidad en agua. Esta caracterstica se
debe a que contienen cadenas largas de carbono enlazadas a tomos de
hidrgeno. Los lpidos incluyen las grasas neutrales (grasas y aceites), los
fosfolpidos, los esteroides y las ceras. Las grasas neutrales se componen de
una molcula de glicerol y tres molculas de cidos grasos. stas representan
81
82
83
Reactivo
Apariencia
original del
reactivo
Cambio que
indica prueba
positiva
Azcares
reductoras
Benedict
azul
verde, anaranjado
o rojo
Almidn
Iodo
amarillo mbar
azul o violeta
intenso
Lpidos
Sudn IV
rojo
color rojo se
solubiliza con
lpidos
Protenas
Biuret
azul
prpura o violeta
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
reactivo de Lugol
vasos de laboratorio
reactivo de Biuret
reactivo de Sudn IV
pipetas de 5 y 10 mL
reactivo de Benedict
lpices de cera
parafina
solucin de glucosa al 5%
goteros
suspensin de almidn
aceite
soluciones desconocidas
solucin de gelatina
84
Procedimiento
Antes de comenzar el laboratorio, lee cuidadosamente el procedimiento para
cada seccin y prepara un diagrama de lo que debers colocar en cada tubo para
cada prueba. As ahorrars tiempo a la hora de hacer las pruebas y de analizar
los resultados.
A. Prueba de Benedict
1. Llena hasta poco ms de la mitad un vaso con agua y calienta con la plancha
hasta que el agua hierva. SEGURIDAD: Maneja los vasos y la plancha calientes
con guantes resistentes al calor.
2. Mientras el agua hierve, rotula ocho tubos de ensayo del 1 al 8.
3. Aade 5.0 mL del reactivo de Benedict a cada tubo.
4. Aade 10 gotas de la solucin de glucosa al 5% al tubo 1, 10 gotas de
extracto de macerado de papa al tubo 2, 10 gotas de extracto de macerado de
cebolla al tubo 3, 10 gotas de solucin de gelatina al tubo nmero 4, 10 gotas de
solucin de albmina de huevo al tubo nmero 5, 10 gotas del primer
desconocido al tubo nmero 6, 10 gotas del segundo desconocido al tubo
nmero 7 y 10 gotas de agua al tubo nmero 8.
5. Coloca cuidadosamente los ocho tubos en el bao de agua hirviendo y calienta
por 5 minutos.
6. Utilizando una pinza, remueve los tubos del agua hirviendo y deja enfriar a
temperatura ambiente. Mezcla suavemente. Anota el color de cada tubo.
B. Prueba de Iodo
1. Rotula ocho tubos de ensayo del 1 al 8.
2. Aade 2.0 mL de suspensin de almidn al tubo nmero 1, 2.0 mL de
extracto de macerado de papa al tubo nmero 2, 2.0 mL de extracto de
macerado de cebolla al tubo nmero 3, 2.0 mL de solucin de gelatina al tubo
nmero 4, 2.0 mL de solucin de albmina al tubo nmero 5, 2.0 mL del primer
desconocido al tubo nmero 6, 2.0 mL del segundo desconocido al tubo nmero
7 y 2.0 mL de agua al tubo nmero 8.
3. Aade 3 gotas de reactivo de Lugol a cada tubo y mezcla.
4. Observa si hay cambio en color y anota los resultados.
C. Prueba de Sudn IV
1. Aade 30 gotas de agua y 30 gotas de Sudn IV a cada uno de seis tubos de
ensayo.
85
86
Resultados
Completa la siguiente Tabla.
Resultado de Prueba
Solucin o Benedict
mezcla
Albmina de
huevo
Yodo
Sudn
IV
Posible
composicin
Biuret
Glucosa al
5%
Macerado
de papa
Macerado
de cebolla
Suspensin
de almidn
Aceite para
ensalada
Gelatina
Desconocido
____
Desconocido
____
Desconocido
____
87
Preguntas o Problemas
A. Preguntas sobre el ejercicio
1. Cul crees que es la composicin de tus desconocidos?
2. De cul tipo de macromolcula estn compuestas las enzimas?
3. Ilustra la estructura general de un aminocido e identifica la porcin de
dicha estructura que brinda a la molcula sus propiedades particulares.
4. A qu se debe que el yodo reaccione con el almidn pero no con la
glucosa?
B. Preguntas sobre razn y proporcin
Una proporcin consiste de dos razones unidas por un signo de igualdad.
a c
Existe una propiedad que asevera que toda proporcin de la forma cumple
b d
con que ad = bc.
1.
Escribe una proporcin para cada una de las siguientes, utiliza la
variable x para representar a la cantidad desconocida. Utilizando la
propiedad, resuelve cada proporcin.
a. Si 3 lbs. de chinas cuesta $.90, cunto cuestan 10lbs?
b. La razn de varones a mujeres en una universidad es de 7 a 5.
Cuntas mujeres hay si estudian 5600 varones?
c. Un carro viaja 165 millas en 3 horas. Cunto viajar en 8 horas si
se mantiene a la misma velocidad?
d. Dos ciudades en el mapa estn a 7 pulgadas de distancia y su
distancia real es de 420 mi. Halla la distancia entre las ciudades que
estn a 4 pulgadas de distancia.
e. Una caja de 2 libras de semilla para grama se supone que cubra un
rea de 2,500 pies cuadrados de patio. Cuntas cajas de semilla
necesitars para cubrir un rea de 8,750 pies cuadrados de patio?
f. Un poste de 9 pies de altura da una sombra de 15 pies. Halla la
altura del rbol de mang que tiene al lado si ste tiene una sombra
de 40 pies.
g. Una barra de metal se expande de pulgada por cada 12F de
aumento en temperatura. Cuanto se expandir si se expone a una
temperatura de 48F?
h. Si 8 kilmetros equivalen aproximadamente a 4.8 millas, A cuntos
kilmetros equivalen 12 millas?
i. Si dos cuartillos de pintura cubren un rea de 225 pies cuadrados,
cuntos pies cuadrados cubrirn 2 galones? (1 galn = 4 cuartillos)
88
Referencias
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders Collage
Publishing. Fort Worth, Texas.
89
Ejercicio 8: Cromatografa
Objetivos:
1. Aplicar la tcnica de cromatografa de capa fina en la separacin de
pigmentos fotosnteticos.
2. Identificar en un sistema de cromatografa la fase estacionaria y la fase mvil.
3. Explicar la base terica de la separacin de componentes en sistemas de
cromatografa de capa fina y papel.
Introduccin
La fotosntesis es el proceso mediante el cual la energa de la luz solar se
convierte en energa qumica. Durante este proceso, la clorofila, un pigmento
localizado en las membranas tilacoides de los cloroplastos, atrapa la energa de
la luz solar y la utiliza para formar compuestos de alta energa, ATP y NADPH.
Esta energa es luego utilizada en las reacciones del ciclo de Calvin, en las que se
forman carbohidratos a partir de CO2.
Existen diferentes tipos de pigmentos fotosintticos. El pigmento fotosinttico
ms abundante en la naturaleza es la clorofila A, que es el pigmento verde que
inicia las reacciones dependientes de luz. La clorofila B es un pigmento accesorio
que posee un color verde-amarillo. Adems de la clorofila, las plantas poseen
otros pigmentos accesorios llamados carotenoides. Hay dos tipos de
carotenoides, las xantofilas (pigmentos amarillos) y los carotenos (pigmentos
anaranjados). Dentro de los carotenos se encuentra el -caroteno, el -caroteno
y el licopeno, un pigmento rojo presente en los tomates y en los pimientos rojos.
Durante este ejercicio, separars los diferentes pigmentos presentes en un
extracto de hojas de plantas, mediante la tcnica conocida como cromatografa
de capa fina (thin layer chromatography o TLC). La cromatografa es utilizada
para separar los componentes presentes en una mezcla. Esta separacin se
logra por la diferencia en afinidad que tienen los componentes de la mezcla por
el disolvente (fase mvil) o por la capa de slice o silica (fase estacionaria). Los
pigmentos que tienen mayor afinidad por la fase estacionaria se desplazarn ms
lentamente.
En una cromatografa de capa fina, la mezcla que deseamos separar se coloca
sobre la fase estacionaria, que puede ser papel, slice u otra sustancia. Luego la
fase estacionaria se pone en contacto con la fase mvil. Entonces, la fase mvil
se comienza a mover sobre la fase estacionaria. Mientras esto ocurre, los
componentes que tienen menos afinidad con la fase estacionaria migran con la
fase mvil, con la que tienen mayor afinidad. Al detener el tiempo de contacto
entre ambas fases, los compuestos que migraron con la fase mvil
eventualmente se quedan unidos a la fase estacionaria, pero permanecen
ubicados en un lugar distinto a su origen. El resultado (el cromatograma)
90
Rf =
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
mortero y masa
arena
acetona
vasos de laboratorio
embudos
papel de filtro
placas de slice
goteros
iso-octano-acetona (SEGURIDAD: Este disolvente es
inflamable y no debe usarse cerca de llamas)
cmaras de vidrio con tapas
tubos capilares
lpiz de grafito
reglas
91
4. Utilizando un tubo capilar, coloca tres gotas del extracto de hojas sobre la
placa de slice o papel de filtro en el lugar marcado con lpiz. Espera que la gota
se seque y repite la aplicacin hasta cinco veces sobre la gota original.
5. Utilizando una pipeta Pasteur de vidrio, aade suficiente disolvente
(petroleum-eter-acetona) para cubrir el fondo de la cmara de cromatografa.
Tapa la cmara inmediatamente.
6. Coloca la placa de slice o el papel de filtro dentro de la cmara con los
pigmentos hacia el fondo. Tapa la cmara y permite que la cromatografa se
desarrolle hasta que el disolvente est a 1 cm del borde superior de la placa de
slice.
7. Saca la placa de la cmara e inmediatamente marca con un lpiz el borde
hasta donde lleg el disolvente. Permite que el cromatograma se seque
completamente.
8. Identifica los pigmentos obtenidos por su color caracterstico (clorofila
verde, clorofila verde-amarillo, caroteno anaranjado, xantofila
anaranjado-amarilloso).
9. Determina el Rf para cada componente que hayas logrado separar.
SEGURIDAD. Deposita el disolvente usado en el recipiente rotulado
para descartar desperdicios qumicos orgnicos.
Preguntas o Problemas:
A. Ejercicios sobre la tcnica de cromatografa de capa fina.
1.
2.
3.
4.
92
Referencias
Brum, GL, E McKane and G Karp. 1994. Biology: Exploring Life. John Wiley
and Sons, New York.
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Eberhard, C. 1985. General Biology Laboratory Manual. Saunders College
Publishing. Fort Worth, Texas.
Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual.
http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?contents.html
93
Ejercicio 9: Espectrofotometra
Objetivos:
1.
2.
3.
4.
Introduccin
La tcnica de espectrofotometra nos permite determinar la cantidad de material
o concentracin de un preparado biolgico. Esta tcnica se basa en el hecho de
que las sustancias absorben luz. Esta luz, que proviene de una fuente de luz
ubicada dentro del instrumento llamado espectrofotmetro, incluye la luz
visible (la que podemos detectar con nuestra vista) y dos tipos de luz invisible (la
luz ultravioleta y la luz infrarroja). Estos tipos de luz difieren entre s en cuanto a
su largo de onda. La luz ultravioleta (UV) tiene largos de onda de 230 a 380
nm, la luz visible tiene largos de onda de 380 a 750 nm y la luz infrarroja (IR)
tiene largos de onda mayores de 750 nm.
La luz que incide sobre una sustancia puede ser absorbida o transmitida por la
sustancia. Mientras ms luz es absorbida por la sustancia, menos luz es
transmitida. Las sustancias tienen capacidad de absorber (o transmitir) luz a
diferentes largos de onda. Existen sustancias que absorben luz de un largo de
onda correspondiente a la luz ultravioleta y otras que absorben luz de un largo
de onda correspondiente a la luz visible. Por ejemplo, una solucin de la base
nitrogenada adenina absorbe luz a 260 nm, mientras que una solucin del
aminocido triptfano absorbe luz a 280 nm. Puedes referirte a un texto de
biologa para informacin adicional sobre sustancias biolgicas que absorben a
otros largos de onda, como por ejemplo, los pigmentos fotosintticos.
La capacidad de absorber luz a determinados largos de onda tambin se puede
utilizar para determinar la concentracin de diversas sustancias en solucin. En
general, a mayor concentracin de una sustancia, mayor ser la cantidad de luz
absorbida (absorbancia). Por ejemplo, cuando tratamos ciertas soluciones de
protenas con sales de cobre, se forma un complejo de color azul-prpura, que
absorbe a 550 nm. En este tipo de prueba, bajo condiciones especficas y en un
rango de concentracin particular, la intensidad del color formado es
proporcional a la cantidad de protenas.
Dependiendo de la sustancia bajo estudio, podemos llevar a cabo pruebas
directas o indirectas en las cuales, mediante la deteccin de la absorbancia,
podemos determinar la concentracin de la sustancia. En ambos tipos de
pruebas se puede relacionar la concentracin de soluciones conocidas del
94
95
Ejercicio de laboratorio
Materiales
y equipo:
agua destilada
solucin madre de albmina de suero bovino (20 mg/mL)
solucin de albmina de suero bovino (desconocido)
pipetas serolgicas de 1 y de 5 mL
micropipetas
papel de lente
5 tubos de ensayo de 10mL
gradillas
reactivo de Biuret
10 cuvetas para espectrofotmetro
papel de grfica
espectrofotmetro
agitador mecnico
96
1 mL
Solucin
desconocida
1 mL
Dilucin
,
1 mL
Dilucin
1/4,
1 mL
Dilucin
1/8,
Dilucin
1/16,
98
Preguntas y Problemas
A. Preguntas sobre el ejercicio
1. Tienes alguna lectura de absorbancia sobre o menor que las de los
estndares? De ser as: explica a qu se debe y qu haras para que la
lectura se encuentre dentro de la curva de calibracin.
2. Qu haras para detectar 0.5mg/mL de protenas?
B. Busque en Internet referencias que indiquen para que se utiliza la
espectrofotometra en el campo de la biologa y la medicina.
C. Problemas sobre grficas
Utiliza papel cuadriculado para trazar las grficas representadas por las
siguientes tablas. Recuerda utilizar una escala adecuada.
1. Un empleado monta x equipos, entonces el pago por hora es y.
Nmero de
equipos
montados
0
1
5
10
Pago por
hora ($)
9
9.25
10.25
11.50
Porciento de Msica
producida en
cassettes
1
(1991)
3 (1993)
5 (1995)
50
38
26
99
Renta por
Da
24
20
13.33
Referencias
1- Heidcamp, WH. 1995. Cell Biology Laboratory Manual, Appendix G:
Spectrophotometry.
http://www.gac.edu/cgi-bin/user/~cellab/phpl?contents.html
100
Introduccin
El pH es la medida de la concentracin de iones de hidrgeno (H+) presentes en
una solucin y nos permite determinar el grado de acidez o alcalinidad de una
sustancia. La expresin matemtica que describe el pH es la siguiente:
pH = - log [ H+ ]
Como la concentracin de H+ est siempre entre 0 y 1 (es un decimal), el
logaritmo es negativo. Sin embargo, como tomamos el inverso de ese logaritmo,
el pH siempre es positivo. La escala de pH va de 0 a 14, y todas las sustancias
caen dentro de la escala. Se establece que una sustancia es cida si tiene un
pH<7; es neutral si tiene pH=7; y es alcalina si tiene un pH>7.
Es de importancia vital para un organismo el mantener control de su pH, pues
solamente en un pH ideal pueden llevarse a cabo las funciones celulares
necesarias. En los organismos el pH se mantiene dentro de los lmites normales
por la accin de sustancias amortiguadoras. Estas son sustancias capaces de
absorber pequeas cantidades de iones de H+, cuando el pH baja, o de liberar
iones de H+ cuando el pH sube. La accin de las sustancias amortiguadoras
permite as el buen funcionamiento de las clulas.
En el ejercicio de laboratorio de hoy podrs determinar cmo la actividad
metablica de algunos organismos afecta el pH del ambiente en el cual se
encuentran. Como modelo de estudio se utilizarn peces de agua dulce. A
medida que los peces respiran, generan CO2. Una vez en el agua, el CO2 afecta
el pH de la misma ya que se forma cido carbnico.
CO2 + H2O H2CO3 H+ + HCO3
En este laboratorio utilizars una tcnica que se conoce como titulacin para
determinar ese efecto. La titulacin se define como el anlisis de la composicin
de una solucin de concentracin desconocida midiendo el volumen
necesario para reaccionar con el volumen de otra solucin de concentracin
conocida.
101
Ejercicio de laboratorio
Materiales:
vasos de laboratorio
placas Petri
bureta
metro de pH
botellas de lavado con agua destilada
agua alcalinizada (pH 9.0)
agua
NaOH 2.5mM
dos peces (goldfish) por grupo
probetas de 50 mL
solucin de fenolftalena
soluciones calibradoras para pH (pH=4.0, 7.0 y 9.0)
embudo pequeo
102
Electrodo
2. Lava el electrodo usando una botella con agua destilada. Seque el electrodo
con papel toalla.
3. Calibra el metro de pH.
a. Presiona la tecla CAL.
b. Presiona la tecla CLEAR para remover la calibracin que pueda estar en
la memoria del metro.
c. Vuelve a oprimir la tecla CLEAR para confirmar la remocin de la
calibracin.
d. Introduce el electrodo del metro de pH en el amortiguador standard de
pH=4.0.
e. Presiona la tecla READ. El resultado del pH es desplegado
continuamente en la pantalla, mientras que el auto-eye parpadea.
espera a que el parpadeo cese, lo que indica que el metro tiene una
lectura estable. El valor de pH debe aparecer en la pantalla del metro.
103
104
Resultados
1. Completa las Tablas 10.1 y 10.2.
Tabla 10.1. Medidas de pH
Vaso
___ min
___ min
Control
pH
___ min
___ min
___ min
EXP 1
EXP 2
105
Volumen total
del organismo
Volumen
NaOH
requerido
para cambio
en pH
RRR
RRO/mL
Control
EXP 1
EXP 2
Preguntas y Problemas
A. Preguntas sobre la actividad de laboratorio
1. Prepara una grfica que represente el cambio en pH a travs del
tiempo.
2. Segn tus resultados experimentales, qu relacin existe entre el
volumen de un organismo y su RRO/mL?
3. Qu esperaras que pase si el agua no hubiese estado alcalinizada? Y
hubiese estado amortiguada?
4. Menciona dos sustancias amortiguadoras presentes en una clula.
5. Cules son los iones que se forman cuando el agua se disocia? Es el
agua una sustancia amortiguadora?
106
Referencias
Campbell, NA and JB Reece. 2005. 7th ed. Biology. Pearson-Benjamin
Cummings. San Francisco, California.
Vodopich, DS and R Moore. 1999. Biology: Laboratory Manual. WCB McGrawHill. Boston, Massachussets.
107
Apndice
EJEMPLO INFORME DE LABORATORIO
Nota: Los nombres, resultados y referencias de este modelo son
ficticios.
Ttulo: Efecto de los ejercicios aerbicos en el pulso
Autores: Corazn Prez, Alma Carrera y Mario Pulso
Resumen: Con el fin de completar un estudio comparativo de la intensidad de
los ejercicios, se midi el efecto de caminar, trotar, nadar, correr y subir
escaleras en el pulso de 24 estudiantes de entre 18 y 20 aos de edad. Los
estudiantes fueron identificados de entre un grupo de voluntarios con peso y
estatura normal, quienes comenzaron a hacer uno de varios ejercicios sin
calentamiento previo. Se midi electrnicamente el pulso de los estudiantes en
reposo (antes de comenzar el ejercicio) y a los 5, 10 y 15 minutos de estar
ejercitndose. Todos los ejercicios resultaron en un aumento en el pulso, con un
aumento mayor para los estudiantes que subieron escaleras.
Introduccin:
Por mucho tiempo hemos sido conscientes de la importancia de mantener una
buena condicin cardiovascular. Una manera recomendada para lograr esta
buena condicin es hacer ejercicios aerbicos por un perodo de 20 minutos o
ms diarios por lo menos tres das a la semana. Existen muchas opciones de
ejercicios aerbicos para lograr esa condicin. Sin embargo, existe
incertidumbre sobre cul ejercicio es ms eficiente en lograr un aumento el pulso
de la persona que se ejercita. El propsito de este estudio fue comparar los
efectos de cinco tipos de ejercicio (caminar, trotar, nadar, correr y subir
escaleras) sobre el pulso.
Materiales y mtodos:
Un grupo de 28 adultos jvenes de entre 18 y 20 aos fue seleccionado al azar
de entre los 80 miembros del club Los ciclistas de Cupey. Todos los
participantes tenan peso y estatura promedio e informaron gozar de buena
salud. Los participantes fueron asignados al azar en uno de siete grupos. Los
voluntarios asignados al grupo 1 no se ejercitaron, los del grupo 2 caminaron, los
del grupo 3 trotaron, los del grupo 4 nadaron, los del grupo 5 corrieron, los del
108
caminar
60
90
110
115
trotar
58
95
95
98
nadar
61
90
90
95
correr
62
100
105
110
subir
escalera
59
110
114
120
ninguno
58
60
58
59
bicicleta
estacionaria
63
120
115
118
109
140
120
caminar
100
trotar
80
nadar
60
correr
40
subir
20
ninguno
0
0
10
15
pedalear
110
111