INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS

PRCTICA N1: AISLAMIENTO Y

Integrantes:
Aduna Aguilar David

Grupo: 6IM1
Equipo: 1
Fecha de entrega: 28 de Septiembre del 2016
OBJETIVO
Aislar microrganismos con actividades especficas de fuentes naturales en
base a criterios de seleccin primaria.

DISCUSION
Las levaduras constituyen la causa Nuestras muestras de Manzana,
ms comn de alteracin de frutas y Tuna, Papaya & Meln fueron las que
jugos, pues tienen azcares pudieron pasar nuestros criterios de
fermentables y elevada acidez 1. Las seleccin primaria con el crecimiento
muestras presentadas al laboratorio de levaduras viables en ambos
para estos aislamientos son frutas medios (SDA & PDA).
cuyas caractersticas comunes son la
El almidn es la fuente de carbono
presencia moderada equitativa de
idnea en las fermentaciones
azucares as como los niveles de
industriales. En la mayora de los
acidez; Para su crecimiento el medio
casos y dadas las propiedades fsico-
SDA (Sabourand Dextrose Agar) es
qumicas de esta molcula, para que
escogido como una medida de
pueda ser utilizada se requiere su
presin de seleccin debido a que
hidrlisis previa o simultnea. Las
favorece el crecimiento de
amilasas son enzimas que hidrolizan
hongos/levaduras por sobre el de las
molculas de almidn dando diversos
bacterias debido a su alto contenido
productos incluyendo dextrinas y
de glucosa (4% o 40g/L) y un medio
progresivamente pequeos polmeros
ligeramente acido (pH 5.5) esto es
compuestos por unidades de glucosa.
debido a que los microorganismos
Las amilasas pueden ser sintetizadas
(en su mayora) en presencia de
de diversas fuentes incluyendo
cidos orgnicos, empiezan a inhibir
plantas, animales y
su transporte celular y actividad 4
microorganismos.
enzimtica, deteniendo su
crecimiento y ayuda a la proliferacin El medio C-AL (Castaeda-Almidn)
de los hongos2. Una vez obtenidos es un medio que proporciona una
las cepas y comprobado que estas selectividad por la fuente de carbono
cepas sean levaduras con ayuda de utilizado que es el almidn, las cepas
la tincin de azul de algodn, se que sean capaces de empelar este
resiembran en un medio ms medio generaran un halo de
selectivo como el PDA (Potato hidrolisis, estos microorganismos son
Dextrose Agar) debido a que la capaces de producir amilasas
infusin de papa favorece el produciendo dextrinas y unidades de
desarrollo exuberante de hongos y glucosa, estas molculas pueden
levaduras, mientras que el desarrollo emplearse para su propia fuente de
bacteriano es inhibido con el energa o de otros microorganismos
agregado de cido tartrico3. con los que forme consorcios. La
muestras a trabajar fueron arroz y
papa, la primera seleccin entre Halfilos moderados:
ambos es un mtodo visual en donde, Crecimiento optimo en medios
en donde el medio que fueron entre 5 y 20% de NaCl
cultivados ambos presento turbidez, Halfilos extremos:
la muestra con mayor turbidez se Crecimiento optimo en medios
asocia con la que presenta un mayor entre 20-30% de NaCl
crecimiento y en la prctica fue la
muestra de arroz, el cual fue Sin embargo hay microrganismos que
transferido en al medio solido C-AL pueden tambin se clasificados como
en donde se presentaron 4 colonias halfilos dbiles (2-5% de NaCl) y los
diferentes, una de ellas fue la aislada halo tolerantes, que habitualmente
presentada en el reporte, una viven mejor sin sal.5
segunda cepa (Bacillos) no Para el desarrollo experimental se
presentaba actividad amilo ltica, pero deban aislar microrganismo
presento crecimiento, esto puede ser amilolticos halfilos y proteolticos
explicado por la degradacin del halfilos. Lamentablemente las
almidn de otras cepas permitiendo muestras de jamn, papa, tortilla,
su crecimiento, la tercera y cuarta cecina, carne y arroz tradas para
cepas (Bacilos & Cocos) estaban en ambos tipos de microrganismos no
consorcio, debido a que no se presentaron la cantidad suficiente de
pudieron purificar y determinar cul sal para el desarrollo de estos tipos
cepa era la que presentaba la de microrganismos, y por lo tanto al
actividad (o si ambas presentaban sembrar estas muestras en medios
actividad enzimtica) no sern salinos con una concentracin de 8%,
presentadas en la entrega de no pudieron crecer debido a que no
aislados. eran halo tolerantes ni haloflicos.
La sal comn en elevada Una propuesta para este tipo de
concentracin es considerada microrganismos pudo ser aguas
generalmente como un inhibidor del saladas (tales como agua de mar, y
crecimiento microbiano. Sin embargo, arena de playa) as como muestras
existe una gran cantidad de de camarn, crustceos, peces
microorganismos, llamados halfilos, marinos, etc. Donde las
que son capaces de vivir en concentraciones salinas son ms
presencia de altas concentraciones altas., otra alternativa que se pudo
de sal. haber empleado seria cultivar el agua
No todos los microorganismos residual trada para microrganismos
halofilicos tienen los mismos degradadores de fenol, sembrar y
requerimientos de sal, por lo que se observar si haba algn
pueden clasificar en 2 tipos de microrganismos halfilo.
halfilos propiamente dichos. El criterio de seleccin para estos
medios es el crecimiento en
concentraciones moderadas de sal.
Siendo un hidrocarburo aromtico el produccin de cidos orgnicos. La
fenol (en trminos de papa no fue una buena eleccin
biorremediacin), el fenol se deriva debido a su composicin.
de compuestos como el hidroperxido
Se observ el crecimiento de dos
de cumeno, acido benzoico y cloro
hongos procedentes del tomate y
benceno. De masa cristalina incolora
manzana en el medio Foster, tambin
o ligeramente amarilla rosada, de
se observ el vir de color en el
fuerte olor caracterstico, custico y
medio debido a una acidificacin, lo
toxico. Soluble en agua y en
cual nos indica un positivo o un falso
solventes orgnicos como ter,
positivo a produccin de cidos
alcohol y acetona. Tanto en su
orgnicos. Al resembrar en medio
produccin, y en su uso como materia
Foster ms carbonatos para la
prima en diferentes procesos
confirmacin de que son productores
productivos (refinera de petrleo,
de cidos orgnicos observamos que
resinas sintticas, manufactura de
estos hongos no fueron capases de
explosivos), es vertido en aguas
solubilizar al carbonato; por lo cual se
residuales, lo que implica hacer
atribuye el vire del indicador en el
medidas preventivas en su descarga
medio Foster a una carboxizacin del
a alcantarillados, como a cuerpos de
sustrato.
agua.7
Recordemos que le medio Foster es
Las aguas residuales de diferentes
selectivo para la deteccin de mohos
procesos industriales pueden variar
y levaduras su contenido elevado de
entre 10mg/L y 3000mg/L, incluso
nutrientes y dextrosa ayudan a la
hasta 4000mg/L. Se logr el
proliferacin de este tipo de
aislamiento de un consorcio de
microorganismos y el bajo pH evita el
microorganismos degradadores de
crecimiento de bacterias [8] adems la
fenol en un medio liquido
presencia de fosfatos obliga a que los
mineralizado con una concentracin
hongos produzcan cidos orgnicos
de 4000mg/L. lo cual nos indica
para la solubilizacin de estos. [9]
segn lo descrito anteriormente que
se trata de microorganismos con alta El criterio de seleccin primaria para
degradacin de este compuesto lo este microorganismo es la
que los hace muy eficientes y tiles concentracin de glucosa y el pH en
para procesos de biorremediacin.2 el medio. As como la solubilizacin
de carbonatos.
No se logr el aislamiento de
microorganismos productores de Se logr el aislamiento de un
cidos orgnicos en las muestras microorganismo proteoltico de
presentadas (tortilla, tomate, papa), cecina. Basndonos en que la carne
atribuimos esto que tal vez la tortilla es rica en protenas y en este caso se
no se incubo de manera adecuada trata de carne con una concentracin
para permitir la propagacin de alta de sales se pretenda el
hongos tales como Aspergillus el cul
tiene como caracterstica la
aislamiento de microorganismos m. Consultada el 07/09/16 a
proteolticos haloflicos. las 16:30hrs
4. Revisin sobre
El medio en el que se sembr es rico microorganismos amilolticos
en casena lo cual nos da una buena (En lnea) Disponible:
fuente de nitrgeno adems de ser un https://www.academia.edu/967
cultivo enriquecido debido a la adicin 7563/Revisi
de extracto de levaduras. %C3%B3n_sobre_microorgani
En este medio se observ un halo de smos_amilol%C3%ADticos.
hidrolisis, lo que revela que el Consultada el 07/09/16 a las
microrganismo es capaz de producir 18:30hrs.
proteasas que catalizan la hidrlisis 5. Los microorganismos halfilos
de los enlaces peptdicos de la y su potencial aplicado en
casena. biotecnologa, Inmaculada
Meseguer Soria, Facultad de
Las proteasas neutras muestran Farmacia y Bioqumica, Elche
actividad optima en pH cercanos a la Espaa, UNMSM 2004.
neutralidad, tal como el que ofrece el 6. Estudio Bioqumico y
medio de 7.2. Molecular de las Proteasas
CONCLUSION: Vacuolares de Candida
glabrata. Q.F.B Yuliana
Para aislar microorganismos es Betancourt Cervantes, Instituto
necesario un medio selectivo. Politcnico Nacional, seccin
Los criterios de seleccin primaria de Estudios Posgrado e
se basan en anlisis cualitativos Investigacin, Enero 2009.
(Crecimiento microbiano). 7. NOVA - Publicacin Cientfica
Los criterios de seleccin EN CIENCIAS BIOMDICAS -
dependern de las caractersticas ISSN: 1794-2470 AO - Vol.9
del microorganismo a aislar. No. 15 - ENERO - JUNIO DE
2011: 1-112.Adaptacin de
bacterias a diferentes
BIBLIOGRAFIA: concentraciones de fenol en el
1. Manual de Microbiologa de los laboratorio: aspectos
Alimentos, Capitulo 4, pg. 40- esenciales para un proceso de
46. biodegradacin. Gustavo
2. Pgina Web: Echeverri Jaramillo
http://www.britanialab.com.ar/e 8. Medios de cultivo bacteriologa
sp/productos/b02/sabouraudgl general.
uagar.htm. Consultada el http://www.dibico.com/fichast/1
07/09/16 a las 16:30hrs 090.pdf. Consultado 07/09/16
3. Pgina Web: 17:30 hrs.
http://britanialab.com.ar/esp/pr 9. cidos orgnicos producidos
oductos/b02/papaglucoagar.ht por Rizobacterias que
solubilizan Fosfatos.
 http://www.redalyc.org/pdf/573/ amilolticos de manantiales
57316076007.pdf. Consultado termominerales de Paipa e
06/09/16 20:15hrs Iza
10. Aislamiento y caracterizacin .http://javeriana.edu.co/biblos/t
de microorganismos esis/ciencias/tesis249.pdf.
termoflicos anaerobios, consultado 06/09/16 20:00hrs
lipolticos, proteolticos y