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    ADN Saliva

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    Adriana Raíces
    Este documento describe el procedimiento para extraer ADN de saliva. Se añaden soluciones salina, detergente y limpiador de lentillas a la muestra de saliva para romper las membranas celulares y separar el ADN de las proteínas. Luego se añade alcohol, haciendo que el ADN precipite en la interfase entre el alcohol y la muestra acuosa. Finalmente, se recoge el ADN precipitado usando una aguja curva.

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    ADN Saliva

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    Adriana Raíces
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    Este documento describe el procedimiento para extraer ADN de saliva. Se añaden soluciones salina, detergente y limpiador de lentillas a la muestra de saliva para romper las membranas celulares y separar el ADN de las proteínas. Luego se añade alcohol, haciendo que el ADN precipite en la interfase entre el alcohol y la muestra acuosa. Finalmente, se recoge el ADN precipitado usando una aguja curva.

    Descripción original:

    Extracción de ADN de la saliva

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    Este documento describe el procedimiento para extraer ADN de saliva. Se añaden soluciones salina, detergente y limpiador de lentillas a la muestra de saliva para romper las membranas celulares y separar el ADN de las proteínas. Luego se añade alcohol, haciendo que el ADN precipite en la interfase entre el alcohol y la muestra acuosa. Finalmente, se recoge el ADN precipitado usando una aguja curva.

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    ADN Saliva

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    Adriana Raíces
    Este documento describe el procedimiento para extraer ADN de saliva. Se añaden soluciones salina, detergente y limpiador de lentillas a la muestra de saliva para romper las membranas celulares y separar el ADN de las proteínas. Luego se añade alcohol, haciendo que el ADN precipite en la interfase entre el alcohol y la muestra acuosa. Finalmente, se recoge el ADN precipitado usando una aguja curva.

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    1.

    1 EXTRACCIN DE ADN DE SALIVA

    En la saliva hay numerosas clulas, por tanto, es un buen


    material para obtener ADN.

    Importante
    Material y reactivos
    Haz un esquema o resumen
    del procedimiento antes de Vaso de plstico Tubo de ensayo
    realizar la prctica. transparente Agua potable
    Pipetas de 5 y 10 mL Disolucin de
    Traga saliva antes de
    enjuagarte la boca para evitar Cuchara de plstico lavavajillas al 25 %
    que las enzimas de la saliva Aguja enmangada Disolucin de sal comn
    interfieran en el proceso. curvada al 5 %
    Vaso de precipitados Lquido limpiador para
    El alcohol tiene que estar fro, lentillas
    djalo en la nevera el da
    anterior a la prctica o en un
    bao de hielo unas horas antes.
    2 Procedimiento

    Aadir por este orden:

    1
    1. 5 mL de solucin salina.
    2. 5 mL de solucin de lavavajillas.
    3. 3 mL de limpiador para lentillas

    Agitar suavemente. Si se forma espuma


    retrala con una esptula.

    La funcin del detergente es romper la


    membrana plasmtica y nuclear, tambin
    facilita la separacin entre el ADN y las
    protenas. La sal aporta iones y crea un
    medio hipertnico que contribuye a la
    ruptura de las cubiertas nucleares. El
    limpiador de lentillas es un proteoltico.
    Pon 20 mL de agua en un
    vaso de plstico (dos
    cucharadas) y enjuaga la boca
    con esta agua durante medio
    minuto. Devuelve el agua al
    vaso. 5
    3
    4
    Introduce una aguja enmangada
    curva y muvela de un lado a otro en
    Aade 10 mL de alcohol fro
    la zona de la interfase entre el alcohol
    sobre la muestra con mucho
    Deja reposar unos minutos, en y la muestra, las hebras de ADN se
    cuidado, dejndolo caer sobre las
    la interfase se acumularn unos irn enrollando en la aguja.
    paredes del vaso de precipitados.
    hilos blancos que son las hebras Pon algunas de las hebras en un
    Deben quedar dos fases
    de ADN. porta y obsrvalas con el microscopio.
    separadas.
    El ADN precipita en la
    interfase alcohol-agua.

    1 de 2
    Cuestiones y dibujos
    Lee detenidamente el procedimiento y completa la siguiente tabla:

    Accin Causa
    El detergente desorganiza la membrana al
    Detergente Rompe la membrana plasmtica y formar una emulsin con los lpidos.
    nuclear. Facilita la separacin entre
    ADN y protenas

    Contenido muy alto de iones, los cationes


    Disolucin salina Crea un medio hipertnico, el agua se Na+ se unirn a las cargas negativas del ADN.
    desplazar desde el ncleo al citoplasma y
    de este al medio externo, se romper la
    membrana nuclear y la membrana
    plasmtica, el ADN quedar libre. La sal
    aporta iones
    Todos son proteolticos
    Lquido limpia lentillas, Lisa las protenas que contaminan el ADN,
    zumo de pia o es un paso imprescindible, cuanto mejor se
    ablandador de carnes haga mayor ser la calidad del ADN
    obtenido.

    El ADN es soluble en agua pero insoluble en


    Permite ver y recoger el ADN porque ste es alcohol. La sal aadida con el tampn
    Alcohol
    insoluble en alcohol y precipita. proporciona cationes Na+ que se unen a las
    cargas negativas del ADN provocando cambios
    fisicoqumicos en ste, su densidad disminuye y
    asciende hacia la interfase donde precipita.

    Dibuja las hebras que has observado al microscopio.

    En la fotografa pueden observarse las


    hebras de ADN en un tubo de ensayo con
    alcohol.

    Es importante recordar que el ADN no


    procede directamente de la saliva sino de
    las clulas del epitelio bucal que se
    desprenden y pasan a la saliva.

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