Curva Tipo de Azucares Reductores

CURVA TIPO DE AZÚCARES REDUCTORES
INTRODUCCION 0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙

𝑋 0.4 𝑚𝐿 𝑋 = 2𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
Los carbohidratos pueden clasificarse ya sea en
azucares reductores o no reductores. Los azucares 2𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 2 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟒 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
reductores, que son los más comunes, tienen la
capacidad de funcionar como agentes reductores debido Tubo 4: 0.8 mL de glucosa al 0.0005 M
a que están presentes en la molécula grupos aldehídos
libres o potencialmente libres como en las formas 0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙
hemiacetálicas cíclicas. Este grupo aldehído es oxidado 1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
fácilmente a ácido carboxílico en pH neutro por enzimas
y agentes oxidantes moderados. Esta propiedad se 4𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 4 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟖 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
utiliza para detectar y cuantificar monosacáridos,
Tubo 1: 1 mL de glucosa al 0.0005 M
especialmente glucosa, en fluidos biológicos como la
sangre y la orina.
0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙
𝑋 1 𝑚𝐿 𝑋 = 5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
Los grupos aldehído y cetona de los monosacáridos 1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙
pueden reducirse por medios no enzimáticos (con
hidrógeno o NaBH4) o con enzimas para producir los 5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 5 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟏𝟎 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
alcoholes de azúcar correspondientes.
OBJETIVOS Tubo Absorbancia µmoles Azúcar Reductor

1 0.097 1
Este experimento tiene por objeto obtener una curva de 2 0.195 2
calibración, mediante la cual se puedan transformar las 3 0.566 4
lecturas de absorbencia obtenidas en los experimentos 4 1.084 8
de cinética enzimática, en micro moles de azúcar 5 1.314 10
reductor, para de esta manera obtener la actividad de la
enzima invertasa en unidades internacionales.
1.6
RESULTADOS y = 0.1381x - 0.0391 1.314
1.4
R² = 0.9951
Calculo µmoles de azúcar reductor 1.2 1.084
ABSORBANCIA
1
Tubo 1: 0.1 mL de glucosa al 0.0005 M
0.8
0.566
6
0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥10 𝜇𝑚𝑜𝑙 0.6
𝑋 0.1 𝑚𝐿 𝑋 = 0.5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎
1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 0.4 0.195
0.097
0.5𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 0.5 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟏 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹. 0.2
0
Tubo 2: 0.2 mL de glucosa al 0.0005 M 0 2 4 6 8 10 12
MICROMOLES DE AZUCAR REDUCTOR
0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙
1000 𝑚𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 Gráfica 1: Absorbancia vs µmoles de
azúcar reductor
1𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑔𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 + 1 𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑓𝑟𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠𝑎 = 𝟐 𝝁𝒎𝒐𝒍 𝑨. 𝑹.
Tubo 3: 0.4 mL de glucosa al 0.0005 M

DISCUSIONES
1
Al inicio del experimento, se preparó una serie de tubos Posteriormente leyó la absorbancia de cada solución
que contenían una solución de Glucosa-Fructosa obtenida en el espectrofotómetro, las cuales se
0.005M y Sacarosa 0.2, cada tubo con diferentes realizaron a 540 nm, la finalidad de estas mediciones es
concentraciones, también se les adiciono regulador de obtener la concentración de cada solución en base a la
acetatos y agua. Posteriormente se agregó 3,5 DNS y absorbancia que presentaron. Como se observa en la
se calentó para favorecer la reacción, ya que la reacción gráfica 1 de absorbancia vs µmoles de azúcar reductor,
se da a una temperatura aproximada de 92 ° C, se se tiene una relación directamente proporcional, lo que
colocaron los tubos en un baño con hielo y se dejó nos indica que al aumentar la concentración de glucosa
desarrollar color (imagen 1). en la solución, aumenta la absorbancia.
CONCLUSIONES
 Los azucares reductores tienen un protón ácido,

el cual es responsable de reducir a otras
sustancias.
 La glucosa actuó como azúcar reductor en la
práctica.
 La absorbancia y la concentración de µmoles de
azúcar reductor guardan una relación
directamente proporcional.
Imagen 1: colores obtenidos para las diferentes BIBLIOGRAFÍA

concentraciones de glucosa (de izquierda a derecha:
Testigo, T1, T2, T3, T4, T5).
1. E. Conn Eric, “Bioquímica fundamental”,
Universidad de California, Editorial Limusa, 2001,
La reacción producida entre el azúcar reductor México D.F, Páginas consultadas: 53 -54.
(Glucosa) y el 3,5 DNS, produjo una reducción en 2. Voet Donald, “Fundamentos de Bioquímica”,
presencia del grupo reductor de la Glucosa, el cual es el Editorial Médica Panamericana, 2ª Edición, 2007,
grupo aldehído, este grupo es reductor debido a que Madrid, España.
tiene un protón que puede perder fácilmente (protón
ácido), para que la reacción anterior se efectué, el 3,5
DNS debe encontrarse en pH básico, debido a que el
3,5 DNS estando en su pH ácido es insoluble en agua,
al estar en medio ácido, pierde un protón (del ácido
carboxílico) y se vuelve un anión, el cual es soluble en
agua, además, el medio alcalino promueve el equilibrio
de la fructuosa contenida en la disolución con la
glucosa, . El producto obtenido de la reacción anterior
es el D-Glucanato, 3 nitro, 5 amino salicilato y el 3
amino, 5 nitro salicilato.
- - -
Reacción entre Glucosa y 3,5 DNS (desprotonado)

para producir D- Glucanato.

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INTRODUCCION 0.005 𝑀𝑜𝑙 1𝑥106 𝜇𝑚𝑜𝑙

OBJETIVOS Tubo Absorbancia µmoles Azúcar Reductor

Tubo 3: 0.4 mL de glucosa al 0.0005 M

 Los azucares reductores tienen un protón ácido,

Imagen 1: colores obtenidos para las diferentes BIBLIOGRAFÍA

Reacción entre Glucosa y 3,5 DNS (desprotonado)

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