Alfa Amilasa

PRACTICA DE LABORATORIO
N°01
DETERMINACION DE LA ACTIVIDADA AMILOLITICA DE LA ALFA AMILASA
I.INTRODUCCIÓN
Las enzimas son compuestos de naturaleza proteica que tienen la propiedad de

acelerar las reacciones químicas sin modificar la constante de equilibrio del
sistema. Su actividad es afectada por diversos factores:• Concentración de
sustrato• pH• Concentración de enzima• Temperatura• Inhibidores• Fuerza
iónica, constante dieléctrica, etc. Concentración del sustrato.- A mayor
concentración del sustrato, a una concentración fija de la enzima se obtiene la
velocidad máxima. Después de que se alcanza esta velocidad, un aumento en
la concentración del sustrato no tiene efecto en la velocidad de la reacción.
Concentración de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato disponible, un
aumento en la concentración de la enzima aumenta la velocidad enzimática
hacia cierto límite. Temperatura.- Un incremento de 10°C duplica la velocidad de
reacción, hasta ciertos límites. El calor es un factor que desnaturaliza las
proteínas por lo tanto si la temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su
actividad. PH.- El pH óptimo de la actividad enzimática es 7, excepto las enzimas
del estómago cuyo pH óptimo es ácido. Presencia de cofactores.- Muchas
enzimas dependen de los cofactores, sean activadores o coenzimas para
funcionar adecuadamente. Para las enzimas que tienen cofactores, la
concentración del cofactor debe ser igual o mayor que la concentración dela
enzima para obtener una actividad catalítica máxima.
II.OBJETIVO
 Conocer la actividad enzimática del alfa-amilasa.

 Conocer cómo afecta las distintas condiciones en que actúa la enzima alfa –
amilasa.
III.REBICION BIBLIOGRAFICA
 http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis206.pdf
IV.MATERIALES Y MÉTODOS.
 Agua destilada
 Pipetas de 5 ml
 Plumón indeleble
 6 tubos de ensayo
 Material para baño maría
 Vaso de precipitación.
4.1REACTIVOS
 Almidón bufferado al 1°/°
 PH 6.9
 HCL:0.05
 NaCL 0.1M
 Solución yodada
 Alfa amilasa
 Benedict cualitativo
 Cloruro de sodio 0.1 m
III.PROCEDIMIENTO.
ETAPA SISTEMAS DE INCUBACION
Tubo de ensayo
IA IIA
Solución de almidón bufferado al 1% 5ml 5ml
Cloruro de sodio 0.1 M 1ml 1ml
Agua destilado 4ml 3ml
Colocar ambos sistemas de reacción en baño maría a 37°C por 5 minutos luego
agregar alfa amilasa .sometiendo a incubación a 37°C por 15 minutos
IV.RESULTADOS
TABLA N° 01: Evaluación de sustrato residual de la actividad amilolitica de la alfa
milasa
I II
Color inicial incoloro incoloro
Color final Azul violácea marrón
Rx enzimática(si/no) no si
sustracto abundante escaso
CONCUSION:
HCL PH desnaturalización de la enzima
 Forma nativa
 Forma desplejada
 Perdida de tridemensional
 Perdida de centro activo
 Se tiene la reacción : perdida de su función como enzima
EVALUACIÓN DE SUSTRATO RESIDUAL
TUBOS DE ENSAYO
I II
HCL 0,5N 5ml 5ml
De los tubos I y IIDE LA ETAPA 0,5ml 0,5ml
“A”transferir a
Solución yodada (IK y 10k) 0,5ml 0,5ml
RESULTADO
TABLA N° 02: determinación de los productos formados de la actividad amiolitica de la
alfamilasa
I II
Color inicial Celeste Celeste
Color final celeste Celeste/rojo ladrillo
Rx enzimática(si/no) no si
Producto formado ausencia Presencia
CONCLUSION:
Almidón con reacción con el yodo coloración azul violácea

I2 internaliza en la estructura del almidón
Formación de un complejo coloreado

DETERMINACION DE LOS PRODUCTOS DE LA REACCION
TUBOS DE ENSAYO
I II
De los tubos I y II etapa “A” transferir 1ml 1ml
a
Benedict cualitativo 5ml 5ml
Someter los contenidos en los tubos a ebullición por 10 minutos .Al termino del tiempo
mezclar uniformemente .Observar el color de los contenidos en ambos sistemas de 1
reacción .Anotar y sacar conclusiones
RESULTADO
Azúcar reductor
 Agente reductor reduce a otra molécula dona e- (pierde e-)

 Agente oxidante oxida a otra molécula recibe e- (gana e-)
CONCLUSIÓN
Almidón no fue transformado en su totalidad
V.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 Bohinski , Robert 1991 bioquimica 5°edicion editorial addinson –wesley

iberoamericana Argentina
 http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis206.pdf
VI.ANEXOS
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE AGRONOMIA
TEMA:
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD AMILOLITICA DE LA ALFA AMILASA
ALUMNOS:
-SAAVEDRA BARRETO ANA MELBA
PROFESOR:
TRUJILLO– PERU
2018

Alfa Amilasa

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Alfa Amilasa

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Alfa Amilasa

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

PRACTICA DE LABORATORIO

Las enzimas son compuestos de naturaleza proteica que tienen la propiedad de

 Conocer la actividad enzimática del alfa-amilasa.

HCL PH desnaturalización de la enzima

Almidón con reacción con el yodo coloración azul violácea

Formación de un complejo coloreado

 Agente reductor reduce a otra molécula dona e- (pierde e-)

 Bohinski , Robert 1991 bioquimica 5°edicion editorial addinson –wesley

DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD AMILOLITICA DE LA ALFA AMILASA

-SAAVEDRA BARRETO ANA MELBA

También podría gustarte