RESUMEN El NUCLEOLO

El primero en observarlo fue Fontana en el año 1781 pero el que le dio este nombre fue Valentín
quien trabajo con Purkinje que uso el termino nucléolo que significa pequeño núcleo. El nucléolo
presento una afinidad por los procedimientos de tinción y técnicas microscópicas de la cromatina
nuclear y por la este se mostró diferente en diversas células. Debido a esto se las clasificó, aunque no
tomando en cuenta su tamaño. Esta clasificación clasificación se basó en la afinidad nuclear a los
colorantes ácidos (real) o básicos (falso). Un procedimiento de Unna -Pappenheim llego a demostrar
que los nucléolos básicos también eran reales. En conclusión, el nucléolo era básico por la presencia
de ARN.

En 1934 McClintock propuso que la cromatina ubicada en la constricción secundaria organizó el

nucléolo. En 1960 se estableció que el nucléolo es el sitio de la transcripción de ARN ribosómico y
biosíntesis del ribosoma.

Primero fue el ADN o el ARN

Se piensa que fue primero el ARN, ya que este fue el que precedió al ADN y a las proteínas como el
medio inicial de almacenamiento de información fundamental según Walter Gilbert.

1. EL NUCLEOLO

Es una estructura no membranosa densa localizada en el núcleo, sólo se observa en la interfase

porque luego llega a disiparse durante la división celular. Además, contiene ARNr con proteínas en
cantidades grandes. No posee una membrana que lo limite o divida del resto de las estructuras. El
nucléolo se encarga esencialmente de la transcripción del ARN de los ribosomas por la polimerasa I
para luego procesarlo y llevar a cabo el ensamblaje de los componentes que darán lugar a nuevos
ribosomas.

1.1. ESTRUCTURA DEL NUCLEOLO

Está formado por varios componentes básicos que lo agrupamos en dos zonas: amorfa y densa, pero
también puede estas acompañada de otras estructuras como son vacuolas o intersticios conectadas
entre sí y con heterocromatina asociada.

PARTE AMORFA O NUCLÉOLOPLASMA: Corresponde a las áreas adielectricas y contiene ADN.

PARTE DENSA O NUCLÉOLONEMA: Área densa donde a su vez se dividen en tres regiones:

COMPONENTE GRANULAR (CG): Constituye la parte externa en la cual se encuentran ensambladas

las demás zonas fibrilares para constituir el nucléolo. Además, contienen gránulos de
ribonucleoproteinas en distintas fases de maduración. Se encuentra rodeado de heterocromatina; se
piensa que este ADN compactado puede tener un papel en la transcripción del ARN ribosomal y
también se da el ensamblaje de dichos ribosomas.

COMPONENTE FIBRILAR DENSO (CFD): Constituye la parte interna del nucléolo ya que el
procesamiento del pre-ARN ribosomal 45S ocurre en el componente fibrilar el cual es denso y el
proceso se extiende hasta el componente granular.Es en esta región en donde ocurre el ensamblaje
de los ribosomas.Luego de que culmina este proceso de ensamblaje del ARN ribosomal con las
proteínas necesarias, estos productos son exportados al citoplasma.

CENTRO FIBRILAR (CFs): Se encuentra rodeado por la zona fibrilar densa seguida de la zona granular.
En esta última región es donde se produce el procesamiento inicial del transcrito primario del pre-
ARNr-45S (el corte del transcrito primario en trozos más pequeños). Las células que poseen alta
síntesis de ribosomas poseen un número bajo de centros fibrilares, mientras que las células con
metabolismos reducidos (como los linfocitos) poseen centros fibrilares de mayor tamaño. Existen
casos puntuales, como en las neuronas con un metabolismo muy activo, cuyo nucléolo posee un
centro fibrilar gigante.

1.2. MORFOLOGIA DEL NUCLEOLO

FORMA: En general poseen una forma irregular aproximadamente esférica, pero varia en diferentes
tipos de células eucariotas.

LOCALIZACIÓN: Los nucléolos suelen encontrarse en el centro del núcleo o ligeramente desplazados
hacia la periferia. Se encuentra en la mayoría de las células eucariotas excepto de los
espermatozoides y en los núcleos de segmentación de los anfibios.

TAMAÑO: Varía de acuerdo a las especies de animales o vegetales, pero en un promedio general
llegan a medir entre micrómetro (µm) Dicho tamaño usualmente se refleja en la actividad habitual
dentro de la célula, el cual es la biogénesis de los ribosomas.

NÚMERO: El número de nucléolos por núcleo celular es bastante variable, dependiendo del tipo de
célula estudiado.

2. Relación entre las estructuras y funciones del nucléolo

2.1. Cromatina asociada al nucléolo

Estructura del cromosoma similar a una constricción secundaria del cromosoma metafásico. Posee
proteínas semejantes a las del nucléolo. Solo en cromosomas 13,14,15,21 y 22.

2.2. Amplificación Genética

En ovocitos de muchas especies de anfibios, moluscos, insectos y gusanos. Realizan esto para
acumular sustancias de reserva. El doble helicoide sufre un corte en una sola hebra (corte
haplotonico). Se llegan a formar hasta 1000 nucléolos.

3. Ciclo del Nucléolo

3.1. Etapas del ciclo del nucléolo

-Desorganización profasica. - Su forma se hace irregular, disminuye su tamaño disminuye su

habilidad tintorial.

-Transporte metafásico y anafásico. - El nucléolo pierde su individualidad y su material está disperso

en el nucléolo.

-Reorganización telofásica. - Cuerpos prenucleolares presentan reacciones citoquímicas propias del

nucléolo interfásico.

3.2. Alteraciones inducidas en el ciclo nucleolar

-Bloqueo de la desorganización. - Los fármacos inhibidores como Bromuro de Etidio, actinomicina,

3`desoxiadenosina.

-Bloque de reorganización. - Evita la fusión de cuerpos prenuclerares.

3.3. Otras conductas del nucléolo durante la división celular

Existen ciertas conductas atípicas en el nucléolo que no corresponden a anomalías o tratamientos

funcionales:

-Nucléolo no desaparece en la profase y queda visible como un cuerpo redondeado.

-Los cuerpos prenucleolares aparecen en el citoplasma.

 4. FUNCIONES
4.1. BIOGENESIS DE RIBOSOMAS

Una de las más importantes funciones del nucléolo es la biosíntesis de los ribosomas desde sus
componentes de ADN para formar ARN ribosomal. Está relacionado con la síntesis de proteínas dado
que, a mayor cantidad de nucléolos, mayor será la síntesis proteica. Además, investigaciones
recientes, han descrito al nucléolo como el responsable del tráfico de pequeños segmentos de ARN.
El nucléolo, además, interviene en la maduración y el transporte del ARN hasta su destino final en la
célula

4.1.1. TRANSCRIPCIÓN Y PROCESAMIENTO DEL ARNr: Para garantizar que las células sean
capaces de tener esa gran cantidad de transcripciones, las secuencias de DNA que
codifican el rRNA se repiten cientos de veces. Los nucléolos contienen más de 300
proteínas y un gran número (aproximadamente 200) de ARN nucleolares pequeños
(ARNsno) que intervienen en el procesamiento del pre-ARNr. Al igual que los ARNsn de
los espliceosomas, los ARNsno están unidos a proteínas, formando RNPsno. Algunos
ARNsno son los responsables de la fragmentación del pre- ARNr en productos 18S, 5.8S y
28S.
4.1.2. GENES DE ARNr: En el hombre, los cromosomas 13, 14, 15,21 y 22 presentan una
constricción secundaria denominado organizador nucleolar cuyo ADN contiene los genes
para tres de los cuatro ARNr. Del ADN del organizador nucleolar se transcribe un ARNr
precursor, largo de 45 s que se corta en componentes menores que dan por resultados
los tres ARNr de 18s, 5.8s y 28s.Un cuanto, del ARNr, es del 5s, se transcribe fuera del
organizador nucleolar.

Los ARNr 5,8S, 18S y 28S son transcritos como una única unidad en el nucléolo por la ARN polimerasa
I, dando lugar a un ARNr precursor 45S. Este pre-ARNr 45S es procesado y da lugar al ARNr 18S de la
subunidad ribosómica menor (40S) y a los ARNr 5.8S y 28S de la subunidad ribosómica mayor (65S).
El ARNr 5S, que también forma parte de la subunidad ribosómica 60S, se transcribe fuera del
nucléolo por la ARN polimerasa III. Estos genes de ARNr están distribuidos entre miles de nucléolos,
originándose en total cerca de 1012 ribosomas por oocito.

4.1.3. TRANSCRIPCIÓN DEL ARN PRE RIBOSÓMICO: En nucléolos aislados de ovocitos del tritón
Triturus, Miller y Beaty, en 1969, observaron con el microscopio electrónico la unidad de
transcripción del RNA precursor del RNAr. Esta unidad, denominada antiguamente
cistrón, corresponde a un gen de copias múltiples, que forma el organizador nucleolar.
Posteriormente, esas unidades de transcripción nucleolares han sido observadas en
muchas especies. Cada una consiste en dos segmentos de DNA que, en total, miden 7-8
μm de longitud. Un segmento es mudo es decir no se transcribe y mide 3-4 μm; el otro
segmento se transcribe y mide unos 4.5 μm. La fosforilación de la proteína nucleolina
activa la transcripción al liberar la H1. Una vez completas, las cadenas constituyen el RNA
pre ribosómico, que es el primer transcrito y que dará lugar a tres de los RNAr.
4.1.4. TRANSFORMACIÓN DEL ARN PRE RIBOSÓMICO EN LOS ARN RIBOSÓMICOS: Todos los
RNA originados en el nucléolo provienen del transcrito primario de 45 S, que debe sufrir
un procesamiento.

El RNA de 45 S se transcribe en pocos minutos por los organizadores nucleolares. Posiblemente esto
ocurra en el centro fibrilar, de donde pasaría inmediatamente a formar las fibrillas
ribonucleoproteínas que constituyen la parte fibrilar del nucléolo

A continuación, este RNA experimenta una serie de cambios, principalmente metilación activa en las
ribosas, pérdida de bases no metiladas y ruptura de la cadena, para dar lugar a los otros tipos de RNA
mencionados.
Las proteínas sufren también algunos cambios. En estos procesos de splicing intervienen complejos
de ribonucleoproteínas, como los referidos en el RNAhn, incluidos varios RNA denominados RNAsno
y proteínas

4.1.5. INTESIS DEL PRECURSOR DE RNA RIBOSÓMICO: El precursor del RNA ribosómica es el
ARN nucleolar (ARNn) el cual es una molécula de ácido ribonucleico, sintetizado y
localizado en el núcleo de las células eucariotas, a partir de la transcripción del ADN
formado por una secuencia de entre 100 a 300 nucleótidos y considerándose el
precursor del ARN ribosómico.
4.1.6. PROCESAMIENTO DEL PRECURSOR DEL RNA RIBOSOMICO: En los seres humanos, la
subunidad grande o mayor contiene moléculas de RNA 28S, 5.8S y 5S, y la subunidad
pequeña o menor una molécula de RNA 18S. Varias nucleasas cortan tres de estos RNAr
(los 28S, 18S y 5.8S) en una transcripción única primaria (llamado pre-RNAr). El grupo
metilo se transfiere por medios enzimáticos de la metionina a nucleótidos en los pre-
RNAr. Cuando se añade la metionina [14C] a células de mamífero cultivadas por un corto
periodo, una fracción considerable de la radiactividad incorporada se halla en una
molécula de RNA 45S, con una longitud de unos 13 000 nucleótidos. Los RNA 45S se
cortan en moléculas pequeñas que entonces se convierten en las moléculas RNAr 28S,
18S y 5.8S.
4.1.7. SÍNTESIS Y PROCESAMIENTO DEL RNAR 5S: Un RNAr 5S, de unos 120 nucleótidos de
largo, es parte de la subunidad ribosomal grande o mayor, sea de procariotas o
eucariotas. Un gran número de genes idénticos, separados de los otros genes de RNAr y
localizados fuera del nucléolo, codifica en los eucariotas a las moléculas de RNAr 5S.
Después de la síntesis, el RNAr 5S se transporta al nucléolo para unirse con otros
componentes que participan en el ensamble de las subunidades ribosomales. Los genes
para RNAr 5S son transcritos por la RNA polimerasa III. La RNA polimerasa III difiere de
las otras polimerasas en que puede unirse a un sitio promotor situado dentro de la
porción transcrita del gen blanco.
4.1.8. ROCESAMIENTO DEL ARN RIBOSOMICO: Evidencias recientes sugieren que los nucléolos
también poseen un papel más general en la modificación del ARN y que varios tipos de
ARN entran y salen del nucléolo en estadios específicos de su procesamiento. La
modificación de otros ARN pequeños, como el de la partícula de reconocimiento de la
señal, tiene lugar en otro lugar dentro del nucléolo.
4.1.9. EL PAPEL DE LOS RNAsno: El procesamiento del pre RNAr se completa con la ayuda de un
gran número de RNA nucleolares pequeños (RNAsno) que se agregan con proteínas
particulares para formar partículas llamadas RNPsno (ribonucleoproteínas nucleolares
pequeñas). Se descubrió una clase diferente de RNAsno presente en baja concentración,
estas se pueden dividir en dos grupos con base en su función y similitudes en su
secuencia nucleotídica. Los miembros de un grupo (llamado snoRNA de caja C/D)
determinan que nucleótidos en el pre-RNAr se metilan en sus residuos de ribosa y los
miembros del otro grupo (denominado snoRNA de caja H/ACA) establecen las uridinas
que se convierten en pseudouridinas.
4.2. CONTROL DEL ENVEJECIMIENTO CELULAR

El envejecimiento celular está controlado por el nucléolo. Las mutaciones en las proteínas de
localización nucleolar promueven el envejecimiento prematuro en levaduras y humanos.

4.3. ENSAMBLAJE PARCIAL DEL RPS

El nucléolo participa en la biogénesis de la partícula de reconocimiento del péptido señal (SRP). El

complejo RPS se une al receptor proteico específico situado en la membrana del RER, que está
asociado a un canal que lo atraviesa completamente, llamado translocón.
 4.4. PARTICIPACIÓN DEL NUCLÉOLO EN LA SÍNTESIS DEL ARNm

Harris menciona que el nucléolo podría estar implicado en el ARNm de exportación se basó en los
resultados de un experimento que realizó en los eritrocitos del pollo. A partir de esto, se elaboró y
promulgó durante años, la idea de que el ARN mensajero debe pasar obligatoriamente por el
nucléolo.

4.5. TRANSPORTE Y- O RECAMBIO DE CIERTOS ARNm

Varios ácidos nucleicos y antígenos virales interactúan con proteínas nucleolares. En células humanas
infectadas, el transporte de los ARNs virales lo realizan dos proteínas (REV y REX) que se localizan
principalmente en el nucléolo.

4.6. PARTICIPACIÓN DEL NUCLÉOLO EN LA REPLICACIÓN VIRAL

La participación del nucléolo en ciclos de infección de virus animales y humanos está bien
establecida, ya que un número creciente de proteínas clave de ambos virus del ARN y ADN han
demostrado que están localizadas en el nucléolo.

4.7. NUCLÉOLO Y CÁNCER

El tamaño del nucléolo se amplía generalmente en las células cancerosas, y esto se ha correlacionado
con la proliferación celular.

5. MODIFICACIONES DE NUCLÉOLO

La actinomicina D, el bromuro de etilo y otros fármacos que se intercalan en el DNA inhibiendo la

transcripción provocan una inhibición de la síntesis del RNA45 S y originan una separación neta y
masiva entre los componentes granulares y fibrilares (segregación nucleolar).

La 8-azaguanina y el antibiótico toyocamicina bloquean el paso del RNA 45 S a 32 S, por lo que se

produce una hipertrofia de la parte fibrilar y una disminución de la granular.

La tiocetamida bloquea el paso del RNA 32 S al RNA 28 S, y por ello el primero se acumula en el
núcleo, ocasionándose una hipertrofia de la parte granular.

Las temperaturas superiores a los 45 °C causan la pérdida de la parte granular.

6. POLARIDAD DEL NUCLÉOLO

Los nucléolos están fuertemente involucrados en polaridad, son tradicionalmente límites celulares.
En células eucariotas superiores se encuentran cerca de la envoltura nuclear. Esta posición parece
estar relacionada con la presencia de estructuras óseas específicas en el sitio de unión nucleolar a la
envoltura.

7. VARIACIONES MORFOLÓGICAS PATOLÓGICAS

INACTIVACIÓN NUCLEOLAR: Puede provocar aumento del número de nucléolos (células poliploides,
células neoplásicas), disminución de los nucléolos (hipotrofia nucleolar), expulsión nucleolar,
vacuolización nucleolar, fragmentación (en la fase de postsíntesis fase G2).

SEGREGACIÓN NUCLEOLAR: Separación de los constituyentes del nucléolo (elementos fibrilares,

granulares, matriz), por acción de agentes químicos o físicos que bloquean la formación del ARN 45s.

MACROSEGREGACIÓN: Afecta a nucléolos reticulados, se desarrolla en tres etapas: Primera etapa, en

el cuerpo nucleolar, aparecen cuatro zonas distintas (zona fibrilar, zona granular, pars amorpha y una
sustancia densa) por reagrupamiento de cada uno de los elementos. Segunda etapa, la pars amorpha
aumenta de volumen, la masa granular disminuye y la masa fibrilar persiste. Tercera etapa, el cuerpo
nucleolar encierra una voluminosa masa fibrilar.

MICROSEGREGACIÓN: Conduce a la formación de agregados nucleolares, constituidos por elementos

fibrilares rodeados de gránulos o por elementos granulares rodeados de fibrillas.

HIPERTROFIA NUCLEOLAR: Indica una estimulación de origen tóxico o patológico del nucléolo,
acompañada de la desaparición de elementos fibrilares, y de un aumento del aspecto compacto.
Agentes causales: fitohemaglutinina, pilocarpina, radiaciones, infecciones por adenovirus.

TRANSFORMACIÓN CELULAR Y NUCLÉOLOS: Alteraciones estructurales (volumen, forma, número)

del nucléolo permiten dar a una célula la etiqueta de cancerosa.

8. PATOLOGIAS

PARKINSON: Trastorno por un proceso neurodegenerativo multisistémico crónico, con síntomas

motores y no motores. El fallecimiento de nucléolos es un causante de la “parálisis de sacudida”. Los
nucléolos defectuosos causan la tensión oxidativa en células y la integridad nucleolar se interrumpe
en las neuronas dopaminérgicas.Los reguladores de la transcripción de ARNr estarían implicados
(reducción de la nucleolina, mutación de la alfa sinucleina, proteína mal plegada DJ-1).

ENFERMEDAD DE BORNA: Enfermedad esporádica, transmisible y neurológica progresiva. El causante

es el VEB,que posee un genoma de ARN monocatenario de sentido negativo. Dentro de células
infectadas, los ARN de sentido hebra se localizan en regiones nucleolares(replicación del BDV en el
nucléolo). El VEB,patógeno animal,que causa manifestaciones neurológicas leves hasta
meningoencefalitis o muerte.

ENFERMEDAD DE HUNTINGTON O COREA DE HUNTINGTON: Trastorno hereditario que ocasiona el

desgaste o degeneración progresiva de las neuronas del cerebro. Se asocia con una expansión en el
exón1 del gen de la huntingtina, que conduce a un tracto de poliglutamina aberrante en la proteína
huntingtina. La transcripción de los genes de ARNr esta alterada en la EH.

SÍNDROME DE ZINSSER-COLE-ENGMAN,DISQUERATOSIS CONGÉNITA O SÍNDROME DE COLE-

RAUSCHKOLB-TOOMEY: Enfermedad genética multisistemática ligada al cromosoma X ,producida por
la mutación de la disquerina. que interviene en la biosíntesis del ARNr, produce insuficiencia
regenerativa de piel, médula ósea y aumenta el riesgo de cáncer. Predominante en el sexo
masculino.

SÍNDROME DE WERNER: Desorden recesivo autosómico con características de envejecimiento

prematuro. Causado por mutación en el gen WRN (cromosoma 8p11-12.), que modifica para una de
las cinco RecQ helicasas de la proteína WRN, constituida por 1 432 aminoácidos, en el nucléolo.

SÍNDROME DE TREACHER COLLINS: Causado por mutaciones en el gen TCOF1 o treacle implicado en
la transcripción de genes de ADNr. Otras variantes,síndrome de Treacher Collins II en el
gen POLR1D, síndrome de Treacher Collins III en el gen POLR1C, que codifican para las subunidades I
y III de las ARN polimerasas. Causa deformidades craneofaciales, y transmisión autosómica
dominante.