ESPECTROMETRÍA DE MASAS

Definición de espectrómetro de masas.

Es un instrumento que permite analizar con gran precisión la composición de diferentes
elementos químicos e isótopos atómicos, separando los núcleos atómicos en función de
su relación masa-carga (m/z).

Ventajas de la MS
Los límites de detección que son, para muchos elementos, tres órdenes de magnitud
más sensibles frente a los métodos ópticos.
Espectros notablemente más sencillos, generalmente únicos y con frecuencia
fácilmente interpretables.
Capacidad para medir relaciones isotópicas atómicas.

Desventajas
El costo del instrumento es de dos a tres veces el de los instrumentos ópticos
atómicos.
Contiene unas determinadas interferencias.

Proporciona información acerca de:

La composición elemental de las muestras.

La composición de las moléculas inorgánicas, orgánicas y biológicas.
La composición cualitativa y cuantitativa de mezclas complejas.
La estructura y composición de superficies sólidas.
Las relaciones isotópicas de átomos en las muestras.

ESPECTRO DE MASAS: Es una gráfica de intensidad relativa del ion como función de la
relación masa/carga (m/z). El espectro de masas es frecuentemente representado
como un histograma simple.

Relación masa/carga:
Abreviada m/z, es la relación del número de masa (m) de una partícula dada entre el
número (z) de unidades cargadas electrostáticamente que posee la partícula.
Así, m/z es una relación adimensional que es el parámetro medido por el analizador de
masas.

Definición de ion molecular o progenitor y de pico base.

El ion molecular resulta de la ionización de la molécula a analizar. Este ion representa
la molécula intacta y es el último precursor de todos los iones fragmentados que
componen el espectro de masas. El pico del ion molecular aparece a un
valor m/z numéricamente igual al peso molecular del compuesto.

El pico base es el pico más intenso en el espectro de masas. Es usado como base para
normalizar las intensidades de los otros picos. Al pico base se le asigna una intensidad
relativa de 100%
Da los componentes de un instrumento de MS y explica el sistema de entrada.
MUESTRA
Sistemas de entrada de la muestra: Su finalidad es permitir la entrada de una muestra
representativa en la fuente de iones. Los espectrómetros de masas más modernos
están equipados con tres tipos de entradas capaces de acomodar diversos tipos de
muestras que incluyen sistemas discretos de entradas, entradas directa y entradas
cromatográficas.

FUENTE DE IONES
Las moléculas de la muestra son ionizadas por un haz de electrones (70eV)
Los iones son expulsados de la cámara y dirigidos al analizador

ANALIZADOR DE MASAS
Su objetivo es separar y enfocar los iones hacia el detector de acuerdo con el valor de
la razón masa/carga de cada uno.

Características principales de un analizador:

Límite de masas superior o alcance de masas: el valor más alto de la razón m/z que
puede ser medido y se expresa en unidades atómicas.
Transmisión: es la razón entre el número de iones que llega al detector y el número de
iones producido en la fuente.
Resolución: es la capacidad del espectrómetro para detectar señales diferentes
correspondientes a iones con una diferencia de masas pequeña.
Más comunes: de sector magnético, cuadrupular, de trampa de iones, de tiempo de
vuelo.

DETECTORES
La detección dependerá de cómo se efectuó la separación de los iones, es decir del
tipo de analizador utilizado; pueden utilizar detectores puntuales, compuestos o
ambos.

Más utilizado: Multiplicador de electrones

Es muy parecido al detector fotomultiplicador utilizado para la radiación UV-Visible.
En general, son robustos y seguros y son capaces de suministrar ganancias de
corriente elevadas y tiempos de respuesta en nanosegundos. Pueden utilizarse como
analizadores de masas que utilizan haces de electrones de baja energía cinética
(cuadrúpolos)

Explica las fuentes utilizadas en MS

Aspectos a considerar en relación a las fuentes de ionización: Energía que se transfiere
durante el proceso de ionización y propiedades químico-físicas de la especie a ionizar.

Técnicas duras de ionización: Producen iones con gran exceso de energía, dan lugar a
una fragmentación extensiva de la muestra.
Técnicas blandas de ionización: Sólo producen esencialmente el ión molecular.

¿Cómo se da el sistema de aceleración en la cámara de ionización (después de ella)?

Un potencial positivo de 2000 V se aplica a una serie de placas frente a la cámara de
ionización con el fin de acelerar los iones positivos a través del tubo hacia un campo
magnético. Los iones se desvían por efecto del campo magnético dependiendo de su
relación masa/carga; es decir el ión C5Hn+ se desvía en menor grado que el ión C3H7+,
debido a que tiene mayor masa y mayor momento. Así el haz de iones inicial se divide
en haces de iones cada uno con una relación de masa/carga diferente. Cada haz de
iones se hace pasar a través de una rendija en la zona del colector, e incide sobre la
placa del colector. Cada ión adquiere un electrón de la placa con el cual se neutraliza la
carga positiva y produce una corriente en el circuito del colector, la cual se amplifica y
se registra en función de la relación masa/carga. El tamaño de cada pico corresponde a
la medida del número relativo de iones en cada haz. Con el fin de dejar pasar solo un
haz determinado hacia el colector, se varía el campo eléctrico aplicado para acelerar
los iones, de esta manera se altera el momento de los iones y se restringe la entrada
de partículas con un momento inadecuado.

¿Cómo se hace el sistema de vacío en un equipo de MS?

El sistema de vacío se da para que los iones de la muestra no reaccionen con el aire y
dependiendo del analizador es el grado de vacío utilizado. Para analizadores, tiempo de
vuelo, cuadrupulares, y trampas iónicas se utilizan un vacío entre 10-4 y 10-6 tor y para
sector magnético y FTMS se utiliza vacío entre 10 -7 y 10 -9. Para que el proceso descrito
pueda realizarse con éxito, debe hacerse en un ambiente de alto vacío, donde el
recorrido libre medio de las moléculas y de los iones formados sea consistente con la
longitud de la trayectoria que deben recorrer en su camino hasta el detector. En otras
palabras, si un ión formado en la fuente de ionización debe recorrer una trayectoria de
un metro para alcanzar el detector, el interior del espectrómetro por donde debe volar
el ión debe estar evacuado a un vacío suficiente para asegurar la ausencia de
colisiones en su camino. Los principales tipos de bombas que se utilizan para conseguir
el alto son las difusoras y las turbomoleculares sin olvidar las mecánicas o rotatorias.

¿Cómo se determina el PM y la formula molecular con un MS?

Dando el ion molecular o un ion molecular protonado, el espectrómetro de masas es
una herramienta insuperable para la determinación del peso molecular. Esta
determinación, naturalmente, requiere la identificación del pico del ion molecular, o en
algunos casos, del pico (M + 1)+ o (M - 1)+. La localización del pico en la abscisa da
entonces el peso molecular con una precisión que no puede alcanzarse por ningún otro
método. Una determinación del peso molecular por espectrometría de masas requiere
conocer con seguridad la identidad del pico del ion molecular. Por esta razón es
siempre aconsejable ser precavido, en particular con fuentes de impacto de electrones,
donde el pico del ion molecular puede estar ausente o ser pequeño en relación con los
picos.
Las fórmulas moleculares se pueden determinar a partir del espectro de masas de un
compuesto, siempre que el pico del ion molecular pueda ser identificado y su masa
exacta determinada.

Fórmulas a partir de instrumentos de alta resolución. A menudo puede asignarse una

única fórmula para un compuesto a partir de la masa exacta del pico del ion molecular.
Esta aplicación, sin embargo, requiere instrumentos de alta resolución capaces de
detectar diferencias de masas de unas pocas milésimas de unidad de masa.
Fórmulas a partir de relaciones isotópicas. Los datos de un instrumento de baja
resolución que puede sólo discriminar entre iones que difieren en masa por un número
entero de masa pueden dar información útil sobre la fórmula de un compuesto, con tal
que sólo el pico del ion molecular sea suficientemente intenso para que su altura y las
alturas de los picos de los isótopos (M + 1)+ y (M + 2)+ puedan determinarse con
precisión.
Información estructural a partir de modelos de fragmentación. Los estudios
sistemáticos de modelos de fragmentación para sustancias puras han desembocado en
el establecimiento de ciertas guías que permiten predecir los mecanismos de
fragmentación y una serie de reglas generales que son una ayuda en la interpretación
de espectros.
Identificación de compuestos por comparación de espectros. Generalmente, después
de la determinación del peso molecular del analito y del estudio de su distribución
isotópica y de la aplicación de los modelos de fragmentación, a un espectroscopista de
masas experimentado le es posible reducir las posibles estructuras a unas pocas.
Cuando son asequibles compuestos de referencia, la identificación final se basa
entonces en una comparación de los espectros de masas del analito con los espectros
de muestras patrón de los compuestos esperados.

¿Cómo es la localización de pico-ion molecular (en la gráfica)?

Cuando una molécula se somete a ionización por impacto electrónico en un
espectrómetro de masas el proceso primario consiste en la abstracción de un electrón
para dar un catión-radical. Este catión-radical se trata del ión molecular y tendrá mayor
o menor tendencia a fragmentar en función de su estabilidad. Los iones moleculares
muy estables tendrán poca tendencia a fragmentar y serán muy abundantes. El ion
molecular resulta de la ionización de la molécula a analizar. Este ion representa la
molécula intacta y es el último precursor de todos los iones fragmentados que
componen el espectro de masas. El pico del ion molecular aparece a un
valor m/z numéricamente igual al peso molecular del compuesto.

Explica cómo es el origen de M+1 y M+2

Define la regla del Nitrógeno.

La regla del Nitrógeno establece que las moléculas que contienen C, H, O, Halógenos,
S, Si, P, y un número par de átomos de Nitrógeno (o cero) tienen una masa par. Se
requiere que la masa molecular sea siempre par en ausencia de átomos de Nitrógeno,
o esté presente un número par de ellos en la especie analizada. Los compuestos que
contienen un número non de átomos de nitrógeno en su molécula, tendrán un peso
molecular non. Este compuesto se fragmentará para generar iones de masa par, a
menos que se pierda un número non de átomos de nitrógeno. Un número par de
átomos de nitrógeno producirá un ión de masa nominal par.

Absorción Atómica.

1.- Definición de AA.

Método instrumental que se basa en la absorción, emisión y fluorescencia de radiación
electromagnética por partículas atómicas, es una técnica capaz de detectar y
determinar cuantitativamente la mayoría de los elementos químicos.
2.- Principios de la AA.
3.-Partes fundamentales de un equipo AA.
Fuente de radiación: deben originar una banda estrecha de una intensidad adecuada y
la estabilidad suficiente durante periodos de tiempos prolongados. Los más comunes
son las lámparas de cátodo.
Quemador Nebulizador: LA disolución de la muestra es inicialmente aspirada y dirigida
como una fina niebla hacia la llama (atomizador) lugar donde forman los átomos en
estado fundamental para eso se necesita por ejemplo acetileno y un oxidante como el
aire.
Monocromador (prisma, redes de difracción): dispone de una rendija o ranura de
entrada que limita la relación lumínica producida por una fuente y la confina a un área
determinada. Dispersa las distintas longitudes de onda de la radiación por la fuente
seleccionando la línea particular que se desea medir.
Detector: aquí se recibe la energía lumínica proveniente de la muestra que la convierte
en una señal eléctrica proporcional a la energía recibida. La señal eléctrica procesada y
amplificada para que pueda interpretarse a través del sistema de lectura que una vez
procesada es presentada al analista por ejemplo en unidades de ABS.
4.- Explica cómo se utiliza el mechero pre mezcla en AA.
En el se aspura la disolución de la muestra a través de un nebulizador que genera un
aerosol fino dentro de una cámara de muestra se mezcla con los gases combustibles y
oxidantes y después es llevado a la llama donde ocurre la combustión y la atomización
de la muestra.

5.- Cuales son las partes de la flama en AA.

Zona de combustión primaria: cuando a mezcla nebulizada se lleva al interior de la
flama, en disolventes se evapora.
Región Interzonal: En donde son llevadas las partículas solidas finalmente divididas,
aquí se forman los átomos gaseosos y los iones elementales, también se lleva a cabo la
excitación del espectro.
Zona de combustión secundaria: borde exterior donde la combustión se puede
presentar antes de que los productos de la atomización se dispersen en la atmosfera.

6.-Da las partes de un quemador de flujo laminar en AA.

Capilar de la muestra, nebulizador, ajuste del nebulizador, Tornillo de ajuste del
deflector, deflector de reflujo, válvulas para disminuir la presión, anillo que bloquea la
cabeza del quemador, cabeza del quemador.

7.- De los 3 combustibles que se utilizan en AA que temperatura alcanza cada uno:
Gas LP alcanza de 1700 a 1900, hidrogeno de 2000 a 2100 y acetileno 2100 a 2400
todos utizan como oxidante el aire.

8.- que efectos causa la temp. de la llama:

Con las elevadas temperaturas aumentan la población de datos y con esto la
sensibilidad, con ciertos elementos el aumento es mayor que la disminución debida a
la pérdida de átomos como resultado de ionización, determina el número de átomos
excitados y no excitados en la flama, el control de la temp. es muy importante en los
métodos de emisión de la flama.

9.-Lampara de Cátodo hueco:

Constituido por un cátodo metálico capaz de emitir radiaciones de las mismas
longitudes de onda capaces de absorber los átomos del elemento a analizar. SE
compone por: tubo cerrado, gas inerte a baja presión, cátodo cilíndrico del elemento a
analizar, ventana de cuarzo o de vidrio de transmisión UV.

10.-Como se lleva a cabo la modulación de la fuente de AA.

Monocromador entre la llama y el detector, disco circular que fluctúa a una frecuencia
constante, la espectrometría de AA también puede ser llevada a cabo mediante un
laser en la cual la técnica se denomina espectrometría de AA por laser de diodo.

11.- Como se evitan las interferencias químicas en AA.

Con el método de generación de hidruros y con el de adición estándar.

12.- Explica cómo se da la preparación de la muestra en AA.

La muestra en AA por lo general debe de estar diluida en agua y algunas muestras no
son solubles en agua por lo que se les debe dar un tratamiento previo, algunos
procedimientos son: tratamiento con ácidos minerales en caliente, oxidación con
reactivos líquidos como el H2SO4 o nítrico o perclorato, la mineralización a altas
temperaturas y la combustión en una bomba de oxigeno u otro tipo de contenedor
cerrado.

13.- como se preparan los patrones de calibración en AA y como se utilizan.

Los patrones de AA no solo deben de contener el analito a una concentración
exactamente conocida sino que también deberán parecerse lo más posible a la
muestra respecto al elemento de la matriz.

RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR

Da la definición de RMN
Es una técnica empleada principalmente en la elucidación de estructuras moleculares,
aunque también se puede emplear con fines cuantitativos. Algunos núcleos atómicos
sometidos a un campo magnético externo absorben radiación electromagnética en la
región de las frecuencias de radio o radiofrecuencias. Como la frecuencia exacta de
esta absorción depende del entorno de estos núcleos, se puede emplear para
determinar la estructura de la molécula en donde se encuentran éstos. Para que se
pueda emplear la técnica los núcleos deben tener un momento magnético distinto de
cero. Se prefieren los núcleos de número cuántico de espín nuclear igual a 1/2, ya que
carecen de un momento cuadrupolar eléctrico que produce un ensanchamiento de las
señales de RMN.

¿Cuáles son los fundamentos de RMN?

Las bases teóricas de RMN se establecieron en 1942 por W. Pualli que estableció que
en ciertos núcleos atómicos tenían espín y momentos magnéticos, como consecuencia
al aplicarles un campo magnético producirían desdoblamientos de sus niveles de
energía, pero en 1946 Bloch y Purcell establecieron que los núcleos de los átomos
tienen resonancia en los campos magnéticos.

Qué tipos de espectrómetros de RMN hay y defínelos

Los espectrómetros de resonancia magnética pueden ser de dos tipos: de líneas
anchas y de alta resolución.
Los de líneas anchas.
Tienen imanes con fuerzas de unas pocas décimas de teslas
Son simples y más baratos que los instrumentos de alta resolución.
Son útiles para el análisis cuantitativo.
Los de alta resolución.
El campo magnético que requieren para su funcionamiento, lo proporciona unos
solenoides superconductores.
Emplean imanes con fuerzas que oscilan entre 1.4 y 14 teslas
¿Cuál es la teoría del RMN?
¿Porqué ciertos núcleos giran, qué propiedad tienen y porqué algunos son nulos?
Los núcleos giran sobre un eje, al tener espín tienen un momento angular p. El cuál
está cuantizado y debe ser múltiplo de: h/2π
Éste depende de su número cuántico de espín I.
I, I-1, I-2,…, -I
Como el núcleo posee carga su espín origina un campo magnético análogo al campo
que se produce cuando una corriente eléctrica fluye. El momento magnético resultante
µ se orienta a lo largo del eje del espín y es proporcional al momento angular p.
¿Qué tipos de espectros obtenemos de RMN y en función de qué están?
Los efectos de la heterogeneidad del campo se pueden también contrarrestar por la
rotación de la muestra en torno a su eje longitudinal. La rotación se consigue mediante
una pequeña turbina de plástico que se ajusta sobre el tubo de la muestra. Una
corriente de aire mueve la turbina a una velocidad de 20 a 50 reps. Si estas
frecuencias son mucho mayores que la variación de frecuencia causada por las
heterogeneidades magnéticas, los núcleos experimentan una variación del entorno que
hace que las dispersiones de frecuencia aparentes tiendan a cero.

¿Qué es lo que afecta a los espectros de RMN?

Para que se pueda emplear la técnica los núcleos deben tener un momento magnético
distinto de cero. Esta condición no la cumplen los núcleos con número másico y
número atómico par (como el 12C, 16O, 32S). Los núcleos más importantes son: 1H, 13C,
31
P, 19F y 15N. Otros núcleos importantes: 7Li, 11B, 27Al, 29Si, 77Se, 117Sn, 195Pt, 199Hg, 203Tl,
205
Tl, 207Pb. También es mejor que el isótopo sea abundante en la naturaleza, ya que la
intensidad de la señal dependerá de la concentración de esos núcleos activos. Por eso,
uno de los más útiles en la elucidación de estructuras es el 1H, dando lugar a la
espectroscopia de resonancia magnética nuclear de protón.

¿Qué es desplazamiento químico y cuáles son sus unidades?

El desplazamiento químico se debe a los campos magnéticos secundarios producidos
por la circulación de electrones en la molécula. Estas corrientes se inducen por el
campo magnético fijo, y originan unos campos secundarios que pueden reducir o forzar
el campo que actúa sobre el protón dado.
El desplazamiento químico se emplea para identificación de grupos funcionales y como
auxiliar en la determinación de disposiciones estructurales de grupos. Estas
aplicaciones se basan en correlaciones empíricas entre estructura y desplazamiento.
Es conveniente utilizar unidades escalares de miligauss o Hertz.

¿Qué es acoplamiento de señales?

La realidad es que en muchos casos los picos aparecen como grupos de picos debido al
acoplamiento que sufren los espines con núcleos vecinos. El acoplamiento espín-espín
informa de cómo están conectados los protones

Explica qué es la constante de acoplamiento J2 Y J3

Acoplamiento geminal

Protones en disposición geminal, a una distancia de dos enlaces (acoplamiento J2). Los
protones de un grupo metileno que sean diastereotópicos y que resuenan a diferente d
se acoplan entre sí. El acoplamiento da lugar a la aparición de multiplicidad en las
señales de ambos. Los protones heterotópicos que resuenan a diferente d y que se
encuentran a un máximo de cuatro enlaces, se acoplan entre sí. El acoplamiento da
lugar a la aparición de multiplicidad en las señales de ambos.
Acoplamiento vecinal

Protones en disposición vecinal, a una distancia de tres enlaces (acoplamiento J3). El

protón que observamos sufre dos campos magnéticos diferentes:

En uno el campo externo B0 se refuerza por el 50% de los núcleos alineados con él.
En el otro, el campo B0 sufre una pequeña merma por el 50% de los núcleos que están
en su contra

¿Qué es al acoplamiento spin – spin?

Es el que ocurre entre los momentos angulares de espín, intrínsecos a diferentes
partículas. Entre espines nucleares, es de gran importancia en resonancia magnética
nuclear, ya que aporta información sobre la estructura de las moléculas en estudio.
Entre espines nucleares y electrónicos, define la estructura hiperfina, por ejemplo en
espectroscopia atómica o en espectroscopia de resonancia de espín electrónico. Entre
espines electrónicos, el canje magnético es la base de la magnetoquímica, dando lugar
por ejemplo a acoplamientos ferromagnéticos o antiferromagnéticos.

Las señales en RMN presentan en general una determinada estructura fina, en forma
de multipletes. Esta multiplicidad se debe a interacciones o acoplamientos entre
núcleos magnéticos vecinos, que pueden ser: -directos, a través del espacio, de
carácter dipolar. -indirectos, trasmitidos por polarización de los electrones a través de
los enlaces químicos, de carácter escalar. Los acoplamientos dipolares directos entre
núcleos vecinos pueden ser muy fuertes y producir desdoblamientos del orden de los
kHz. Los campos magnéticos locales que producen el acoplamiento dipolar fluctúan en
el tiempo debido a los cambios en las posiciones relativas y las distancias entre los
núcleos por la movilidad del retículo. Si la movilidad es muy alta, el entorno se hace
efectivamente isótropo y los campos magnéticos locales, producto de la interacción
dipolar, se promedian a cero; afectando sólo a los parámetros de relajación. La
multiplicidad de las señales en medios isótropos (fase líquida) se debe al acoplamiento
escalar indirecto entre los espines nucleares transmitido por los electrones de valencia,
mucho mas débil que el dipolar, con desdoblamientos del orden de 100 Hz.

Equipos Nuevos.

1.-Tipos de equipos modernos expuestos:

Espectrometría de masas: ESQUIRE 3000 PLUS (trampa de iones BRUKER), Resonancia
magnética nuclear: espectrómetro de avance DRX- BRUKER 300 MHz y UNIV Varian
300 MHz, Absorción atómica: espectrofotómetro de AA 210 VGP

2.- De los equipos mencionados en RMN ventajas y desventajas:

Ventajas: (DRX- BRUKER 300 MHz) accesorios para temperatura variable, cambiador
automático para 60 muestras (UNIV Varian 300 MHz) accesorios para temperatura
variable sondas para líquidos y gases. Desventajas: (DRX- BRUKER 300 MHz) solo se
usa en líquidos, (ambos) equipos muy costosos.

3.- Aplicación en RMN:

Identificación y estudio estructural de compuestos tanto orgánicos como inorgánicos,
estudios en biomacromoleculas, determinación de velocidades y mecanismos de
reacción, análisis de drogas y fármacos, control de calidad de productos químicos, en
medicina permite obtener imágenes del organismo de forma incruenta no invasiva sin
emitir radiación ionizante en cualquier plano del espacio