Tesis Final
Tesis Final
Tesis Final
TEMA:
AUTORAS:
NELLY ELIZABETH YAZUMA FOGACHO
CRISTINA ELIZABETH PILCO CARRERA
GUARANDA – ECUADOR
NOVIEMBRE - 2018
TEMA:
……………………………………………………………………..
PhD. JUAN ALBERTO GAIBOR CHÁVEZ
DIRECTOR
…………………………………………………………………….
DRA. MARÍA BERNARDA RUILOVA CUEVA
BIOMETRISTA
……………………………………………………………………..
ING. JOSE LUIS ALTUNA MSc
REDACCIÓN TÉCNICA
II
CERTIFICACIÓN DE AUTORÍA
Nosotros, Nelly Elizabeth Yazuma Fogacho con Cl: 0202485207 & Cristina
Elizabeth Pilco Carrera con Cl: 2100976576, declaramos que el trabajo y los
resultados presentados en este informe, no ha sido previamente presentado para
ningún grado o calificación profesional; y, que las referencias bibliográficas que se
incluyen han sido consultadas y citadas con su respectivo autor (es).
Estudiante Estudiante
Nelly Elizabeth Yazuma Fogacho Cristina Elizabeth Pilco Carrera
Cl: 1802538056
III
DEDICATORIA
A mis padres María y Carlos, por brindarme ese apoyo incondicional por la lucha, el
amor, sabiduría y sobre todo por guiarme cada día con sus consejos para ser cada
mejor persona.
A mis hermanas, Jenny, Elsa, Nathy, Adriana, y a mi nena Rosita, quienes con su
amor y cariño me demostraron que con trabajo, constancia y esfuerzo todo se puede.
A mis hermanos, Jinson, Kevin, Carlos y Sebastián, por sus enseñanzas por las
lecciones de vida que he aprendido con ellos ya que son un pilar fundamental en mi
vida.
Nelly
IV
AGRADECIMIENTO
Agradezco al tribunal de tesis, PhD. Juan Gaibor, PhD. María Bernarda Ruilova, Msc.
José Luis Altuna por sus enseñanzas, ayuda y tiempo brindado en el transcurso de la
realización del trabajo de investigación para mi formación profesional.
Nelly
V
DEDICATORIA
A mi hijo Maurito
Cristina
VI
AGRADECIMIENTO
A las personas que con su amplio conocimiento han sabido guiarme de la mejor manera
para la culminación de trabajo investigativo PhD. Juan Gaibor Chávez director del
proyecto de investigación, PhD. Bernarda Ruilova y MSc. José Luis Altuna
Y finalmente a mis amigos por los momentos inolvidables que hemos vivido a lo
largo de estos cinco años.
Cristina
VII
ÍNDICE DE CONTENIDOS
CONTENIDO Pág.
TEMA:..........................................................................................................................II
CERTIFICACIÓN DE AUTORÍA............................................................................. III
DEDICATORIA..........................................................................................................IV
AGRADECIMIENTO...............................................................................................VII
ÍNDICE DE CONTENIDOS....................................................................................VIII
ÍNDICE DE CUADROS............................................................................................XII
ÍNDICE DE GRÁFICOS...........................................................................................XV
ÍNDICE DE ANEXOS.............................................................................................XVI
RESUMEN.............................................................................................................XVII
SUNMARY...........................................................................................................XVIII
CAPÍTULO I.................................................................................................................1
I. Introducción.....................................................................................................1
CAPÍTULO II................................................................................................................3
II. Problema..........................................................................................................3
CAPITULO III.............................................................................................................. 6
III. Marco teórico...................................................................................................6
3.1. Papá (Solanun Tuberosum)..............................................................................6
3.1.1. Composición nutricional de la papa................................................................ 6
3.1.2. Polifenoles en papa..........................................................................................7
3.1.3. Variedades de papa en el Ecuador...................................................................7
3.1.3.1. Variedad papa-chola........................................................................................7
3.1.4. Cultivo de la Papa............................................................................................8
3.1.4.1. Cultivo nacional...............................................................................................8
3.1.4.2. Cultivo local.................................................................................................... 8
3.1.5. La industria de procesamiento.........................................................................8
3.2. Jícama.............................................................................................................. 9
3.2.1. Composición química de la jícama..................................................................9
3.2.2. Polifenoles en jícama.......................................................................................9
3.2.3. Variedades en Ecuador.................................................................................. 10
VIII
3.2.4. Cultivo de la jícama.......................................................................................10
3.2.4.1. Cultivo nacional.............................................................................................10
3.2.4.2. Cultivo en la Provincia Bolívar.....................................................................10
3.3. Yuca...............................................................................................................10
3.3.1. Composición química de la raíz de yuca.......................................................11
3.3.2. Polifenoles presentes en la yuca....................................................................11
3.3.3. Variedades existentes en el Ecuador............................................................. 11
3.3.3.1. Cultivo de yuca en Ecuador...........................................................................12
3.4. Papa china......................................................................................................12
3.4.1. Composición nutricional................................................................................13
3.4.2. Variedades en el Ecuador..............................................................................13
3.4.3.1. Comercialización de papa china en Ecuador.................................................14
3.5. Remolacha.....................................................................................................14
3.5.1. Composición Química................................................................................... 15
3.5.2. Polifenoles presentes en Remolacha..............................................................15
3.5.3. Variedades de Remolacha existentes en el Ecuador......................................16
3.5.4. Cultivo de Remolacha en Ecuador................................................................ 16
3.6. Fitoquímicos..................................................................................................17
3.6.1. Compuestos bioactivos de origen vegetal..................................................... 17
3.6.2. Polifenoles..................................................................................................... 17
3.6.3. Clasificación de los compuestos fenólicos....................................................19
3.6.4. Fuentes de polifenoles...................................................................................20
3.7. Antioxidantes.................................................................................................21
3.7.1. Antioxidante en alimentos.............................................................................21
3.7.2. Clasificación.................................................................................................. 22
3.8. Radicales libres, producción y acción........................................................... 23
3.9. Métodos de determinación de la actividad antioxidante............................... 24
3.9.1. FRAP (Poder reductor férrico/antioxidante)................................................. 24
3.9.2. ORAC (Capacidad de absorbancia del radical oxigeno)...............................24
3.9.3. ABTS (ácido 2,2 '-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfónico)).....................25
3.9.4. DPPH ( 2,2-difenil-1-picrilhidracil).............................................................. 25
IX
3.10. Folin- Ciocalteu............................................................................................. 26
3.12. Espectrofotometría Uv-Vis............................................................................27
3.13. Niveles de procesamiento de tubérculos....................................................... 27
3.13.1. Cocción..........................................................................................................27
3.13.2. Horneado....................................................................................................... 27
3.13.3. Fritura............................................................................................................ 28
CAPÍTULO IV............................................................................................................ 29
IV. Marco metodológico......................................................................................29
4.1. Localización de la investigación....................................................................29
4.1.2. Zona de vida.................................................................................................. 30
4.2. Materiales...................................................................................................... 30
4.2.1. Material experimental....................................................................................30
4.2.2. Materiales de campo......................................................................................30
4.2.3. Materiales del Laboratorio.............................................................................31
4.2.4. Equipos..........................................................................................................31
4.2.5. Reactivos....................................................................................................... 32
4.3. Métodos......................................................................................................... 32
4.3.1. Factores en estudio........................................................................................ 32
4.4. Tipo de análisis..............................................................................................35
4.4.1. Análisis elemental..........................................................................................35
4.4.2. Humedad........................................................................................................36
4.4.3. Cenizas...........................................................................................................36
4.4.4. Compuestos volátil........................................................................................ 36
4.4.5. Carbono Fijo..................................................................................................36
4.5. Manejo del Experimento............................................................................... 37
4.6. Mediciones experimentales en el producto final...........................................38
4.6.1. Determinación del contenido total de polifenoles con el método de Folin-
Ciocalteu en cinco variedades de tubérculos (papa, jícama, yuca, papa china y
remolacha) usando Ácido Gálico como estándar........................................................ 38
X
4.6.1.2. Acondicionamiento de las muestras crudas, cocidas, fritas y horneadas de cada
tubérculo en estudio.....................................................................................................39
CAPÍTULO V..............................................................................................................41
V. Resultados y discusiones...............................................................................41
5.1. Análisis de la materia prima.......................................................................... 41
5.1.1. Análisis proximal, determinación de humedad, ceniza, compuestos volátiles y
carbono fijo..................................................................................................................41
XI
ÍNDICE DE CUADROS
CUADRO Pág.
Nº
Cuadro 14. Valores promedios del análisis elemental en muestras crudas de los
tubérculos en estudio...................................................................................................43
XII
Cuadro 15. Valores promedios de la concentración de polifenoles totales (PPT) de la
papa “Chola” en estado crudo y a los diferentes niveles de procesamiento (hervido,
frito y horneado).......................................................................................................... 44
Cuadro 22. Prueba de Tukey al 95% para los tratamientos del contenido de polifenoles
en los cinco tubérculos en estudio............................................................................... 51
Cuadro 23. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor A (Tipo de
Tubérculo)................................................................................................................... 52
XIII
Cuadro 24. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor B (Tipo de
Tubérculo)................................................................................................................... 54
Cuadro 27. Prueba de Tukey al 95% para los tratamientos de capacidad antioxidante
en los cinco tubérculos en estudio............................................................................... 63
Cuadro 28. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor A (Tipo de
Tubérculo)................................................................................................................... 64
Cuadro 29. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor B (Nivel de
Procesamiento)............................................................................................................ 65
Cuadro 30. Comparación de los valores de “F” calculando con el de “F” de tablas,
para el contenido de polifenoles..................................................................................68
Cuadro 31. Comparación de los valores de “F” calculando con el valor de “F” de
tablas, para la capacidad antioxidante......................................................................... 69
XIV
ÍNDICE DE GRÁFICOS
GRAFICO Pág.
Nº
XV
ÍNDICE DE ANEXOS
ANEXO Pág.
Nº
Anexo 1. Mapa de ubicación de la investigación
XVI
RESUMEN
Se evaluó los efectos causados por diferentes procesos de cocción antes y después de
cada proceso. Mediante el método del Folin Ciocalteu se determinó que el contenido
de polifenoles más alto fue en estado fresco que corresponde a la remolacha y papa de
556,85 y 255, 46 (mg de ácido gálico/100 gramos de muestra) respectivamente,
seguido de la jícama 195,53, yuca 142, 75 y la papa china con 91, 96 (mg de ácido
gálico/100 gramos de muestra) y una vez procesadas la papa fue la que disminuyó
drásticamente a 27, 68 (mg de ácido gálico /100 g de muestra) en el proceso de
cocción por fritura, al igual que la yuca a 11,60 (mg de ácido gálico /100 g de
muestra) en hervido. Mediante el ensayo de evaluación de la inhibición de
peroxidación lipídica (TBARS) donde se encontró un mayor porcentaje de inhibición
a la peroxidasa en la papa y la jícama con un 91, 37 y 91, 18 % respectivamente,
seguido de la remolacha con un 90, 59 %, cada tubérculo en estado fresco. La
capacidad antioxidante más alta se presentó en el proceso de cocción por hervido de
86.67% hasta 95,10%, lo cual determina que este proceso de cocción tiene menor
efecto de degradación sobre los compuestos antioxidantes en cada tubérculo.
XVII
SUNMARY
The present study is focused on the determination of polyphenolic compounds and the
antioxidant activity of five tubers belonging to the Bolivar Province with three levels
of processing (boiled, fried, baked): potato, jicama, yucca, chinese potato, beet. The
biological activity of polyphenols is related to the antioxidant character and is
relevant for the identification of new bioactive compounds.
The effects caused by different cooking processes before and after each process were
evaluated. Using the Folin Ciocalteu method, it was determined that the highest
polyphenol content was in the fresh state corresponding to beet and potato of 556.85
and 255.46 (mg of gallic acid / 100 grams of sample) respectively, followed by the
jícama 195.53, yuca 142, 75 and the Chinese potato with 91, 96 (mg of gallic acid /
100 grams of sample) and once processed the potato was the one that decreased
drastically to 27, 68 (mg of gallic acid / 100 g of sample) in the cooking process by
frying, as well as cassava at 11.60 (mg of gallic acid / 100 g of sample) in boiling.
Using the lipid peroxidation inhibition assay (TBARS), where a higher percentage of
peroxidase inhibition was found in potato and jicama with 91, 37 and 91, 18%
respectively, followed by beet with 90, 59%, each tuber in its fresh state. The highest
antioxidant capacity was present in the boiling process from 86.67% up to 95.10%,
which determines that this cooking process has less degradation effect on the
antioxidant compounds in each tuber.
XVIII
CAPÍTULO I
I. Introducción
1
flavonoides, antocianinas, metabolitos secundarios con actividad antioxidante así
como micronutrientes minerales (Silvia et al. 2014).
2
CAPÍTULO II
II. Problema
3
Planteando la siguiente interrogante investigativa:
4
contienen metabolitos secundarios que al ser consumidos de forma natural ayuda a
que contribuyan a propiedades captadoras de radicales libres, lo que les confiere
actividad antioxidante, que podría estar relacionada con la prevención de
enfermedades cardiovasculares y de algunos tipos de cáncer, pues es importante
mencionar que estas enfermedades son el principal causante de muerte en el mundo
Así se obtendrá un impacto directo e indirecto en el ámbito económico ya que son
imprescindible en la alimentación diaria. Con lo mencionado anteriormente se logrará
la contribución al conocimiento para futuras investigación ya sean en frutas,
tubérculos, vegetales, hortalizas de nuestra provincia.
5
CAPITULO III
III. Marco teórico
Según el INIAP (2004) en el Ecuador el cultivo de papa es uno de los más principales
con más de 82000 agricultores involucrados. La producción está dirigida
principalmente para consumo interno, aproximadamente el 81% se comercializa para
consumo en fresco y las industrias utilizan el resto para procesamiento. La siembra y
cosecha de papa se la realiza todo el año
6
3.1.2. Polifenoles en papa
Estudios actuales realizados Muñoz (2014) revelan que las papas son consideradas la
tercera fuente de fenoles después de manzanas y naranjas. Estos compuestos se
encuentran presentes tanto en la piel como en la pulpa de las papas. Hoy en día existe
un creciente interés por consumir papas nativas, ricas en antioxidantes (polifenoles,
vitamina C, carotenoides y tocoferoles)
Hasta entrada la segunda mitad del siglo XX una de las papas más populares era la
Chola, hoy llamada Chola Antigua: una papa con distintos grosores, media, fuerte, de
un sabor espectacular, endémico del Ecuador. En los años setentas el Ministerio de
Agricultura realizó intensos trabajos de selección para conseguir un híbrido de mayor
tamaño y productividad, creando la papa que desde entonces se conoce como Súper
Chola. Ésta es ahora la papa más sembrada y consumida en el país, la papa básica en
la dieta ecuatoriana (Ministerio de Cultura y Patrimonio, 2016).
7
3.1.4. Cultivo de la Papa
Mastrocola et al. (2016) menciona que en el Ecuador la papa se cultiva en las tierras
altas, en alturas comprendidas entre los 2,700 a 3,400 metros sobre el nivel del mar;
se producen en las diez provincias de la Sierra, las más representativas son en la zona
Norte: Carchi y Pichincha; en la zona Centro: Cotopaxi, Tungurahua, Bolívar y
Chimborazo y en la zona al Sur: Cañar y Azuay (Mastrocola et al. 2016).
8
3.2. Jícama
Fibra 1,55 %
Sólidos solubles 9.0 – 12.6 Grados Brix
Grasa 0,10 %
Fuente: Yépez, 2016
9
3.2.3. Variedades en Ecuador
Según el INIAP se han identificado tres morfotipos de jícama en Ecuador, en los cuales el
color de los tallos y de las hojas, son los caracteres relevantes para la separación de los
distintos grupos, así, se tienen; morfotipo morado, verde oscuro y verde claro.
3.3. Yuca
La yuca es una raíz rica en hidratos de carbono complejos, ideal dentro de una dieta
equilibrada, además es un alimento saludable en cuanto a su alto contenido en
vitaminas C Y B6 y minerales como el potasio y magnesio (INIAP, 2014)
10
3.3.1. Composición química de la raíz de yuca
La Yuca es un alimento muy rico en hidratos de carbono (85 %). Pobre en grasas y
proteínas. Es un alimento muy digestivo, ya que aporta, de forma moderada,
vitaminas del grupo B (B2, B6), vitamina C, magnesio, potasio, calcio y hierro, como
se detalla a continuación (Elizalde & Pazmiño, 2015).
11
- Negras (las mejoradas INIAP Portoviejo 650 e INIAP Portoviejo 651, los
locales Tres meses o prieta, Escancela, Morada, Mulata, Quevedeña, etc.)
- Blancas (Taureña, Espada, Blanca, etc.)
- Amarillas (Yema de Huevo, Crema, Amarilla, etc.).
12
3.4.1. Composición nutricional
13
3.4.3. Cultivo de papa china en Ecuador
3.5. Remolacha
La remolacha se cultiva principalmente por sus raíces, las cuales presentan un alto
valor nutricional y contribuye con enormes beneficios a la salud. Además, presentan
un alto porcentaje de exhibición de capacidad antioxidante, que se asocia con el
pigmento betalaina (Mikołajczyk et al. 2015).
14
3.5.1. Composición Química
Trabajos anteriormente realizados como las de Orrala (2015), detalla que la remolacha es
un alimento de bajo contenido calórico, siendo los hidratos de carbono el componente
más abundante en la fruta, la misma que contiene buena fuente de fibra.
15
su ingestión regular dentro de una alimentación equilibrada ayuda a prevenir la
aparición de cáncer (Usca, 2014)
Bonfigli et al. (2013) detalla que as betalaínas y otros compuestos fenólicos presentes
en las remolachas disminuyen el daño oxidativo de lípidos y mejoran el estado
antioxidante en los humanos. Se encuentra posicionada dentro de los diez vegetales
más poderosos con respecto a su capacidad antioxidante. La actividad antioxidante de
las remolachas está vinculada a la participación de los compuestos fenólicos en el
efecto capturador de radicales libres y consecuentemente en la prevención de
enfermedades cancerígenas y cardiovasculares (Bonfigli et al. 2013).
El Ecuador por su ventajosa ubicación geográfica goza de una gama climática que
permite producir productos agropecuarios que aseguren la alimentación de la población
16
y de los animales creando fuentes de trabajo, mitigando problemas de mala
alimentación (Terranova, 2014)
3.6. Fitoquímicos
Los Fitoquímicos y los componentes bioactivos son sustancias de especial interés por
sus efectos benéficos en la salud, evidenciado por estudios que involucran efectos,
acciones y prevención de riesgo en ciertas enfermedades (Urango et al., 2015).
3.6.2. Polifenoles
17
Correa y Pinzón (2016), define a los polifenoles como un conjunto heterogéneo de
moléculas que comparten la característica de poseer en su estructura varios grupos
bencénicos sustituidos por funciones hidroxílicas; se encuentran en muchas plantas
que los sintetizan en gran cantidad, como producto de su metabolismo secundario.
Algunos son indispensables para las funciones fisiológicas vegetales, otros participan
en funciones de defensa ante situaciones de estrés y estímulos diversos.
Grafica1. Fenol
Grafica 2. Polifenol
18
3.6.3. Clasificación de los compuestos fenólicos
Ruiz et al. (2008) en su estudio reporta que existe más de 8000 estructuras fenólicas
diferentes según.
19
(dihidroflavonas), isoflavonas, antocianidinas y flavanole (Quiñones et al.
2012).
20
participación en la fisiología y el metabolismo celular como morfología, crecimiento,
reproducción, defensa contra plagas y depredadores, y procesos germinativos, entre
otros. Estos compuestos se encuentran en la mayoría de productos naturales
consumidos por el hombre y recientemente se ha descubierto significativa actividad
antioxidante, que demuestra su potencial benéfico sobre la salud humana (Jurado et
al. 2016).
21
produce un estrés oxidativo el cual está implicado en muchos procesos
fisiopatológicos. A medida que el individuo envejece dicho balance está a favor de
los oxidantes, por tanto, el consumo de alimentos que contengan antioxidantes
naturales son de vital importancia ya que de esta manera se pueda conservar el
equilibrio entre oxidantes/antioxidantes o incluso esté a favor de los antioxidantes
Se menciona que las células humanas producen por día 10.000 situaciones probables
para generar radicales libres, dando lugar a que produzcan sus acciones nocivas sobre
ciertas moléculas o procesos biológicos formando diversas patologías. Los efectos
biológicos de los radicales libres son controlados en los seres vivos por una gama de
mecanismos fisiológicos de defensa antioxidante, todos encaminados a evitar el
exceso de oxidación a nivel celular, que es el causante de los trastornos de salud
(Hartwig, 2015).
3.7.2. Clasificación
22
- Enzimáticos: actúan catalizando la reducción de algunas especies como el
peróxido de hidrógeno o bien capturando metales de transición.
- No enzimáticos: actúan como barreras fisiológicas que enfrenta el oxígeno a
su paso desde el aire hasta las células o bien como transportadores de metales.
Para que un compuesto fenólico sea clasificado como antioxidante debe cumplir dos
condiciones básicas.
Un radical libre es aquella figura química que tiene en su estructura uno o más electrones
no apareados. Es altamente reactiva y clave para formar otros radicales libres
23
en cadena, además por la vida media que es de microsegundos, produce una rápida
propagación con moléculas aledañas y mayor daño potencial
24
3.9.3. ABTS (ácido 2,2 '-azino-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfónico))
Según Fonseca (2017) este método se basa en la oxidación de ABTS con persulfato
de potasio para convertirse en el radical libre ABTS+, el cual, da una coloración azul
a la solución. Los fenoles, tioles o vitamina C presentes en la muestra eliminan el
radical libre ABTS+ y lo convierten en su forma neutra incolora que se mide
espectrofotométricamente. El ABTS absorbe una longitud de onda de 734 nm. Lo
resultados se expresan como equivalentes de Trolox o TEAC (por sus siglas en inglés,
Trolox Equivalent Antioxidant Capacity). Además, ABTS+ es soluble en solventes
acuosos como orgánicos, por lo que se puede medir su capacidad antioxidante tanto
en extractos hidrofílicos como en lipofílicos.
25
puede ser medido espectrofotométricamente a 532–535nm. Como producto final de la
peroxidación lipídica predomina el malondialdehído (MDA), principal sustrato de
esta reacción (Rojano et al. 2008).
Según Cofré (2015) define al Ácido Gálico como un ácido fenólico natural soluble en
agua, se utiliza como estándar para curvas de calibración para cuantificar polifenoles
totales, es decir, es un equivalente. Su lectura es generalmente en mg de ácido/100 gr o
mL de muestra. Este ácido está presente en plantas frutas y verduras y se le atribuyen
varios efectos biológicos como actividad antiinflamatoria, antioxidante y antibiótica.
26
3.12. Espectrofotometría Uv-Vis
3.13.1. Cocción
3.13.2. Horneado
27
Los alimentos horneados tienen buen sabor y desarrollan durante el proceso una
corteza dorada y crocante por la deshidratación superficial, característica similar a la
fritura con la ventaja adicional de no incorporar grasa al alimento, haciéndolo más
saludable (Ramos, 2017)
3.13.3. Fritura
28
CAPÍTULO IV
IV. Marco metodológico
Provincia: Bolívar
Cantón: Guaranda
Sector: Laguacoto II
investigación
Parámetros Valor
Altitud 2800 msnm
Latitud 01°34'15" sur
Longitud 79°0'02" oeste
Temperatura mínima 8 °C
Temperatura media anual 13 °C
Temperatura máxima 26,44 ºC
Humedad 30 %
Fuente: Estación Meteorológica, Universidad Estatal de Bolívar. Laguacoto II, 2017
29
4.1.2. Zona de vida
4.2. Materiales
• Cámara fotográfica
• Libreta de apuntes
• Esferográfico
• Regla
• Silla
• Escritorio
• Carpetas
• Impresora
• Hojas de papel boom
• Calculadora
• Computadora
• Flash Memory
30
4.2.3. Materiales del Laboratorio
• Vaso de precipitación
• Varilla de agitación
• Balones de aforo
• Tubos Eppendorf
• Puntas de pipetas automáticas
• Balanza analítica
• Micro pipetas automáticas
• Bandejas de plástico
• Espátula
• Pinza
• Desecador
• Crisoles
• Capsulas
• Gradillas
• Centrifuga
• Probeta
4.2.4. Equipos
31
4.2.5. Reactivos
• Folin Ciocalteu 1 N
• Ácido Gálico (99,90%)
• Metanol (99,99%)
• Carbonato de Sodio marca Fisher (Grado analítico)
• TBA
• Ácido Acético
• BHT
4.3. Métodos
b3 = Frito
b4 = Horneado
32
4.3.2. Tratamientos
33
4.3.3. Características del estudio
Se aplicará un diseño A*B con arreglo factorial 5 x 4 con 3 repeticiones el mismo que
responde al siguiente modelo matemático:
Dónde:
μ= Media General
34
4.3.5. Procedimiento
Fuente de variación Grados de libertad
Total (A.B.r-1) 59
Repetición (r-1) 2
Factor A (5-1) 4
Factor B (4-1) 3
Factor AxBñ (A-1)(B-1) 12
Error (A.B-1) (r-1) 18
35
• Se movió el carrusel a posición cero (0), presionando SYSTEM>CARRUSEL
POSITION>POSICION 1>OK.
• Se insertó las muestras en el carrusel, ingresando los pesos en la tabla de la
pantalla junto al nombre de cada muestra de acuerdo a los códigos de los
estándares utilizados.
• Se empezó a correr el análisis (SYSTEM AUTO RUN).
• Finalmente se obtuvo los resultados visualizados en la pantalla.
4.4.2. Humedad
4.4.3. Cenizas
Se determinó el contenido de cenizas según el Método AOAC 920. 181. Ed 19. 2012
Datos:
36
4.5. Manejo del Experimento
- Lavado: Los tubérculos se lavaron con agua clorada para sustraer todo tipo de
impureza y suciedad existente
- Enfriado: Una vez que los tubérculos han cumplido con los diferentes niveles de
procesamiento; se proceden al enfriamiento.
37
4.6. Mediciones experimentales en el producto final
38
4.6.1.2. Acondicionamiento de las muestras crudas, cocidas, fritas y horneadas
de cada tubérculo en estudio
39
substances) establecido en el protocolo de (Guzmán-Chozas et al. 1997) con
modificaciones.
Procedimiento
Formula: −
% ℎ ó ó = 100
Donde:
At = Absorbancia de la muestra
Ac = Absorbancia control
40
CAPÍTULO V
V. Resultados y discusiones
Los análisis proximales efectuados en la papa “Chola”; jícama “Tipo II”; yuca “Blanca”,
papa china “Blanca” y remolacha “Azucarera” procedente del Cantón Guaranda y
Caluma de la Provincia Bolívar y analizados en el laboratorio de Investigación de la
Universidad Estatal de Bolívar, arrojaron los siguientes resultados:
41
Los análisis de humedad ceniza, compuestos volátiles y carbono fijo, se realizó para
conocer su composición.
Muestras Crudas
Tubérculos Papa Jícama Yuca Papa China Remolacha
42
porcentaje de ceniza de 1,42% el mismo que está dentro de referencia bibliográfica
detallados en el cuadro 12. Finalmente, los valores de humedad y ceniza es 84, 91% y
1,27% de la remolacha respectivamente se encuentran dentro de los rangos reportados
por el autor Cuenca (2014). De esta manera se demuestra que los resultados obtenidos
en la determinación de estas características se encuentran dentro de los rangos
reportados en bibliografía.
Cuadro 14. Valores promedios del análisis elemental en muestras crudas de los
tubérculos en estudio
43
5.2. Análisis a los productos procesados
Los resultados obtenidos del análisis de polifenoles totales (PFT) están expresadas en
miligramos de equivalentes de ácido gálico por cada 100 g de muestra y se reportan
en los siguientes cuadros
En el cuadro 14, se muestra los efectos principales del nivel de procesamiento para el
contenido de polifenoles en la papa. Como se puede observar el contenido de polifenoles
de la papa chola en estado crudo es de 255,46 la cual es alto en comparación con los
resultados obtenidos a los diferentes niveles de procesamiento: hervido, frito y horneado
que es 69,74, 27,68 y 153,67 (mg de GAE/100g) respectivamente.
44
A nivel de procesamiento se presentó una menor afectación en el contenido de
polifenoles en la cocción por horneado. Resultados reportados por Navarre et al. (2010)
determinan que el contenido de polifenoles totales en papa cocinadas a microondas,
vapor, y al horno no disminuye de manera altamente significativa los fenoles totales.
45
Cuadro 17. Valores promedios de la concentración de polifenoles totales (PPT) en la
yuca “Blanca” en estado crudo y a los diferentes niveles de procesamiento (hervido,
frito y horneado).
Silva et al., (2017) con el tema “Procesamiento de tres diferentes métodos de cocción
de la yuca: Efectos in vitro bioaccesibilidad de compuestos fenólicos” demostró que
la cocción al vapor fue el método que retuvo más compuestos fenólicos; seguido por
el microondas y por ultima la ebullición. Al comparar con nuestros niveles en estudio
(hervido, frito, horneado) se determinó de igual manera, que el contenido de
polifenoles más bajo de la yuca fue en la cocción por hervido con un valor de 11, 80
(mg de GAE/100g de muestra.)
46
Cuadro 18. Valores de la concentración de polifenoles totales (PPT) la papa china
“Blanca” en estado fresco y a los diferentes niveles de procesamiento (hervido, frito y
horneado).
47
de 257,2 (mg de GAE/100 g de muestras), mientras que Raupp et al. (2011)reporta un
valor de 628.36 ± 76.06 (mg GAE/100 g) en remolacha cruda. Al comparar este valor
con el obtenido en nuestro experimento, se confirma que la cantidad de polifenoles se
encuentra entre los reportados por bibliografía (dependerá también de la metodología)
Por otra parte, el contenido de polifenoles en el proceso de cocción por hervido fue el que
más afecto en el contenido de polifenoles, con un valor de 80,06 (mg de GAE/100 g de
muestras), debido que al contacto con el agua durante la ebullición la muestra pierde
color siendo un factor importante en el contenido de polifenoles de las verduras. Además,
el contenido de polifenoles fueron analizados en la cocción por horneada y frito que fue
de 116,96 y 374,10 85 (mg de GAE/100 g de muestra) respectivamente.
Nivel de procesamiento
Tubérculo Crudo Hervido Frita Horneada
(mg de GAE/100 g de muestra)
Papa 255,46 69,74 27,68 153,67
Jícama 195,53 92,36 128,08 174,11
Yuca 142,75 11,8 18,95 32,84
Papa China 91,96 27,28 14,88 12,8
Remolacha 556,85 80,06 374,1 116,96
Fuente: Trabajo experimental 2018
48
Concentración de Polifenoles
600
(mg de
GAE/100 g de 500
muestra)
400
300
200
100
0
T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12 T13 T14
T15 T16 T17 T18 T19 T20
Tratamientos
49
Por otra parte Navarre et al. (2010), Indica que; “La cocción puede conducir
fácilmente a pérdidas significativas de fitonutrientes, aunque también es evidente que
cocinar no necesariamente disminuye ciertos fitonutrientes, e incluso puede conducir
a mayor biodisponibilidad de ciertos fitonutrientes extraíbles”, por lo que podemos
decir que la cocción por horneado ayuda a la disponibilidad de algunos de estos
metabolitos que no se digieren fácilmente en su estado natural. Esto se puede
evidenciar claramente en nuestro estudio ya que en la cocción por horneado no hubo
mayor afectación de este metabolito.
Efectos principales
A: Factor A 458767 4 114692 13495,85 0,000***
(Tipo de Tubérculo)
50
Fuente Suma de Gl Cuadrado Razón-F Valor-P
Cuadrados Medio
AB 303619 12 25301,6
Residuos 301164 39 5905,18
Total (corregido) 1,07189E6 59
Fuente: Trabajo experimental 2018
Cuadro 22. Prueba de Tukey al 95% para los tratamientos del contenido de
polifenoles en los cinco tubérculos en estudio.
51
Tratamiento Descripción Media Grupo Homogenio
T18 A5B2 80,06 K
T20 A1B2 69,74 L
T12 A3B4 32,84 M
T3 A1B3 27,68 MN
T14 A4B2 27,28 MN
T11 A3B3 18,95 NO
T15 A4B3 14,88 O
T16 A4B4 12,8 O
T10 A3B2 11,8 O
Fuente: Trabajo experimental 2018
Para determinar el nivel de incidencia de cada uno de los tratamientos y sus niveles,
se procedió a realizar la prueba de Tukey al 95% de confianza para el factor A y B
como se detalla a continuación:
Cuadro 23. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor A (Tipo de
Tubérculo)
52
El cuadro 22 se detalla la aplicación de comparación múltiple en el factor A para
determinar cuáles medias son significativas, en la misma se identificó cinco grupos
diferentes, lo que demuestra que entre estos 5 niveles existen diferencias estadísticas
con un nivel del 95,0% de confianza. Además, se puede apreciar que el valor medio
para la concentración de polifenoles más alto, reporto en el tubérculo A5 (281, 99 mg.
ácido gálico/100 g muestra). Por el contrario, en el nivel A3 y A4 se observa la
concentración de polifenoles media más baja. Se presenta de manera gráfica a
continuación:
250
POLIFENOLES
200
150
100
50
1 2 3 4 5
FACTOR A (TUBERCULO)
En la gráfica 6 se puede observar que cada uno de los niveles del factor A es
diferentes, por lo tanto, se determinó que estos factores en este estudio tienen un
efecto estadísticamente significativo sobre la concentración de polifenoles con un
nivel de confianza del 95,0%.
53
600 FACTOR B (NIVEL PROCESAMIENTO)
1
500 2
3
4
POLIFENOLES
400
300
200
100
1 2 3 4 5
FACTOR A (TUBERCULO)
Fuente: Trabajo experimental 2018
Cuadro 24. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor B (Tipo de
Tubérculo).
El cuadro 23 se puede apreciar que todos los grupos son diferentes, el valor medio
más alto fue el factor B1 (estado crudo), es decir en estado crudo el tubérculo
presenta un valor medio más alto en la concentración de polifenoles.
54
Medias y 95,0% de Tukey HSD
250
POLIFENOLES 200
150
100
50
1 2 3 4
FACTOR B (NIVEL PROCESAMIENTO)
En la gráfica 8 se puede observar que cada uno de los niveles del factor B es
diferentes, por lo tanto, se determinó que estos factores en este estudio tienen un
efecto estadísticamente significativo sobre la concentración de polifenoles con un
nivel de confianza del 95,0%.
200
100
0
1
2 3 4
FACTOR B (NIVEL PROCESAMIENTO)
55
5.2.2. Análisis de la actividad antioxidante
100,00
93,14 90,00
86,67
Porcentaje de 90,00
Inhibición a la 80,00 75,29
Peroxidasa
70,00
60,00
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
Fresca Hervida Frita Horneada
Nivel de Procesamiento
56
92,00
91,18
Porcentaje de 91,00 90,78
Inhibición a la 90,00
Peroxidasa 90,00
89,00
88,00
87,06
87,00
86,00
85,00
Fresca Hervida Frita Horneada
Nivel de Procesamiento
57
96,00
94,31
Porcentaje de 94,00
Inhibición a la
Peroxidasa 92,00
86,00
84,00
82,00
Fresca Hervida Frita Horneada
Nivel de Procesamiento
58
96,00
95,10
Inhibición a la
Peroxidasa 95,00
94,00
93,00
91,96
92,00
91,00
Porcentaje de 90,59 90,59
90,00
89,00
88,00
Fresca Hervida Frita Horneada
Nivel de Procesamiento
59
94,00
93,53
Porcentaje de 93,00
Inhibición a la 92,00 91,57
Peroxidasa
90,98
91,00
90,00 89,61
89,00
88,00
87,00
Nivel de Procesamiento
60
Cuadro 25. Valores de actividad antioxidante a nivel de tratamientos
Nivel de Procesamiento
61
Cuadro 26. Análisis de varianza (ADEVA) para la respuesta experimental de
capacidad antioxidante de los cinco tubérculos en estudio (papa “Chola”, jícama
“Tipo II”, yuca “Blanca”, papa china “Blanca” y remolacha “Cruenta”) a los
diferentes niveles de procesamiento (cruda, hervido, frito y horneado
Efectos principales
A: Factor A 238,382 4 59,5955 89,41 0,0000
(Tipo de Tubérculo)
Interacciones
AB 538,38 12 44,865 67,31 0,0000
Residuos 25,9962 39 0,66657
Total (corregido) 993,431 59
Fuente: Trabajo experimental 2018
62
Cuadro 27. Prueba de Tukey al 95% para los tratamientos de capacidad antioxidante
en los cinco tubérculos en estudio.
63
reporta en el T1 (Papa + cruda) de 75,30%, esto debido a que a que el tipo de cocción a la
que se le somete a los tubérculos influyen directamente en la actividad antioxidante.
Cuadro 28. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor A (Tipo de
Tubérculo)
91
89
Porcentaje
87
85
1 2 3 4 5
Factor A (Tipo de Tuberculo)
64
Grafica 15. Relación del factor A con relación a la capacidad antioxidante
En la gráfica 15 se puede observar 3 niveles de factor A son diferentes que cada uno,
por lo tanto, se determinó que estos factores en este estudio tienen un efecto
estadísticamente significativo en la actividad antioxidante con un nivel de confianza
del 95,0%.
86
82
78
74
1 2 3 4 5
Factor A (Tipo de Tuberculo)
Cuadro 29. Prueba de Tukey al 95% para los promedios del factor B (Nivel de
Procesamiento)
2 92,16 A
3 90,55 B
4 89,57 C
1 87,26 D
Fuente: Trabajo experimental 2018
65
El cuadro 28 se detalla la comparación múltiple en el factor B significativa, en la
misma se identificó que todos los grupos son diferentes, lo que demuestra que entre
estos cuatro niveles existen diferencias estadísticas con un nivel del 95,0% de
confianza. Además, se puede apreciar que el valor medio más alto en la actividad
antioxidante, reporto el nivel B2 de 92,16%.
94
Porcentaje de
92
Inhibición
90
88
86
1 2 3 4
Factor B (Nivel de Procesamient)
66
Interacciones y 95,0% de Tukey HSD
94 1
2
3
90
4
5
Porcentaje
86
82
78
74
1 2 3 4
Factor B (Nivel de Procesamient)
67
CAPITULO VI
VI. Comprobación de la hipótesis
4. Hipótesis a Verificar
T1 ≠ T2 ≠ T3……….T20
Cuadro 30. Comparación de los valores de “F” calculando con el de “F” de tablas,
para el contenido de polifenoles
68
Según los valores reportados en el cuadro 29, los valores de Fisher calculado tanto
para el factor A y factor B son mayor que Fisher tabulado, por ende, se rechaza la
hipótesis nula (H0) y se acepta la hipótesis alternativa (Hi).
Cuadro 31. Comparación de los valores de “F” calculando con el valor de “F” de
tablas, para la capacidad antioxidante
Según los valores reportados en el cuadro 30, los valores de Fisher calculado tanto
para el factor A y factor B son mayor que Fisher tabulado, por ende, se rechaza la
hipótesis nula (H0) y se acepta la hipótesis alternativa (Ha).
69
CAPITULO VII
VII. Conclusiones y Recomendaciones
7.1. Conclusiones
70
- Se evaluó la actividad antioxidante utilizando el método TBARS, donde los
tubérculos en estudio presentaron fuentes importantes de actividad
antioxidante, siendo la remolacha y la jícama que presenta mayor actividad
antioxidante en estado fresco de 90,59 y 91, 18% respectivamente
71
7.2. Recomendaciones
- Utilizar otro método como DPPH. ABTS, FRAP, para contrarrestar con los
resultados de nuestra investigación.
72
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Humana 11(1):124-4108.
81
ANEXOS
Laboratorio de
Investigación de la
Universidad Estatal de
Bolívar
Anexo 2. Fotografías de la Investigación
Remolacha
2
Fotografía 11. Pesado de las muestras
Fotografía 10. Preparación de reactivos
para determinación de
Capacidad Antioxidante
3
Anexo 3. Datos obtenidos en la determinación de la concentración de polifenoles en
los tubérculos en estudio.
Curva de Calibración
0,8
nm)
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 50 100 150 200 250 300
Conc. Acido Gálico (ppm)
Absorbancias
Muestras (mg de ácido gálico/100 g)
Papa Fresca Cocida Frita Horneada
R1 0,72 0,21 0,08 0,45
R2 0,74 0,21 0,10 0,44
R3 0,72 0,20 0,09 0,44
Jícama
R1 0,55 0,27 0,36 0,49
R2 0,58 0,28 0,37 0,51
R3 0,55 0,27 0,38 0,50
Yuca
R1 0,42 0,05 0,07 0,09
R2 0,41 0,04 0,07 0,12
R3 0,41 0,05 0,06 0,10
Papa China
R1 0,26 0,09 0,05 0,04
R2 0,28 0,09 0,06 0,05
R3 0,27 0,09 0,05 0,05
Remolacha
R1 1,58 0,23 1,06 0,34
R2 1,56 0,24 1,06 0,34
R3 1,57 0,24 1,06 0,34
Absorbancias
Muestras 200 ug/ml
Papa Fresca Cocida Frita Horneada
R1 0,16 0.21 0,13 0,18
R2 0,16 0,23 0,11 0,14
R3 0,16 0,24 0,11 0,19
Jícama
R1 0,15 0,16 0,15 0,22
R2 0,15 0,15 0,15 0,22
R3 0,16 0,14 0,17 0,22
Yuca
R1 0,39 0,11 0,17 0,15
R2 0,44 0,1 0,18 0,13
R3 0,43 0,12 0,17 0.15
Papa China
R1 0,2 0,11 0,19 0,21
R2 0,15 0,1 0,19 0,23
R3 0,19 0,12 0,18 0,21
Remolacha
R1 0,16 0,08 0,15 0,14
R2 0,16 0,09 0,17 0,13
R3 0,19 0,09 0,16 0,13
Fuente: Trabajo experimental 2018
Abs c (Absorbancia control (aceite oxidado) = 1,70
−
% Inhibición= ∗ 100