Artículo Científico Rev. Fitotec. Mex. Vol.

37 (4): 393 - 398, 2014

EFICACIA DE PERÓXIDOS EN LA DESINFECCIÓN DE SUELOS APTOS PARA

EL CULTIVO DE FRESA EN EL MEDITERRÁNEO

EFFECTIVENESS OF PEROXIDES IN SOIL DISINFECTION IN RELATION WITH

STRAWBERRY CULTIVATION IN THE MEDITERRANEAN

Yazmín Cuervo-Usán1*, Pablo Tornos-Mauri2, Juan C. Hernández-Domínguez2, Diego Orihuela-Calvo2,

Martha E. Domínguez-Hernández1 y Ernesto Moreno-Martínez1

1
Departamento de Ciencias Agrícolas, Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán, Universidad Nacional Autónoma de México. Km. 2.5 Car. Cuautitlán-Teolo-
yucan. 54714, Cuautitlán Izcalli, Edo. de México. Tel. 01-55-56-23-18-41. 2Escuela Politécnica Superior de La Rábida, Universidad de Huelva. Apdo. 21819. Palos
de La Frontera, Huelva, España.

*Autor para correspondencia (yazmincuervo@hotmail.com)

RESUMEN INTRODUCCIÓN

Ante la inminente necesidad de encontrar alternativas sustentables La agricultura es una de las actividades de mayor impacto
para la desinfección de los suelos cultivados con fresa (Fragaria vesca)
en el Mediterráneo, se probaron opciones amigables con el ambiente. ecológico, en lo que se refiere a la emisión de gases y a la
El objetivo fue evaluar la eficacia del peróxido de hidrógeno (OXI) y contaminación del suelo y del agua en particular (Lampkin,
del ácido peracético (APA) como desinfectantes del suelo, mediante 2001; Gómez, 2002). Una de las principales fuentes de con-
la determinación de su efecto biocida sobre la micoflora y sobre la taminación agrícola en suelos y agua son los plaguicidas.
frecuencia de los hongos. Los muestreos de suelo se llevaron a cabo En varias especies hortícolas, como la fresa (Fragaria vesca)
en la Finca Las Malvinas, Palos de la Frontera, Huelva, España. Se
compararon cinco dosis de cada uno de los dos productos (en mL kg-1): para obtener cultivos sanos, la desinfección del suelo es in-
OXI D0: 0; D1: 0.128; D2: 1.28; D3: 12.8; D4: 128; y APA D0: 0 ; D1: 0 dispensable, lo cual se ha hecho mediante aplicaciones de
.853; D2: 8.53; D3: 85.3; D4: 853. En cada tratamiento se determinó su productos de alta peligrosidad como el bromuro de metilo,
efecto sobre las unidades formadoras de colonias (UFC) presentes en el cual está en desuso debido a que afecta la capa de ozono
un kilogramo de suelo. Con las dosis OXI D4 y APA D4 se obtuvo un (Karavina y Mandumbu, 2012).
100 % de desinfección. Las dosis OXI D1, OXI D2, APA D1 y APA D2
no mostraron eficiencia como desinfectantes, pero lograron bajar a 0 %
la frecuencia de Phytophthora sp. y Botrytis sp., en relación a los demás Para sustituirlo, es necesario encontrar alternativas que
géneros de hongos identificados: Fusarium, Aspergillus, Pencillium, sean eficientes y amigables con el medio (Mehmet, 2003).
Trichoderma y Rhizopus. Esta búsqueda inició en 1992, cuando el bromuro de metilo
fue clasificado como Clase I de sustancias controladas con
Palabras clave: Peróxido de hidrógeno, ácido peracético, desinfección
de suelos, micoflora. un potencial de agotamiento del ozono en el Protocolo de
Montreal (Sande et al., 2011). Entre las alternativas están
SUMMARY algunas prácticas culturales como la solarización y la apli-
cación de productos como el Dazomet que, de acuerdo con
Environment friendly disinfection options were tested on soils used Mitideri et al. (2009), D’Emilio et al. (2012) y Benavides-
in strawberry (Fragaria vesca) cultivation in the Mediterranean, due Mendoza et al. (2004), produjo buenos resultados en la des-
to the imminent need of finding sustainable alternatives. The efficacy
of hydrogen peroxide (OXI) and peracetic acid (APA) as soil disinfec- infección de suelos freseros.
tants was assessed by determining their biocide effect on mycoflora and
fungi frequency. Soil sampling was carried out in Finca Las Malvinas, El uso de productos orgánicos como los peróxidos se vis-
Palos de la Frontera, Huelva, Spain. Five doses of each product were lumbra también como una posibilidad para minimizar el
compared (in mL kg-1): OXI D0: 0; D1: 0.128; D2: 1.28; D3: 12.8; D4: impacto ambiental. El peróxido de hidrógeno es un agente
128; y APA D0: 0; D1: 0 .853; D2: 8.53; D3: 85.3; D4: 853, for the de-
termination of their effect on colony forming units (CFU) in 1 kg of oxidante con alta reactividad que se utiliza ampliamente
soil. With the doses OXI D4 and APA D4 a 100 % of disinfection was como un desinfectante (Chapman, 1998). Se usa en la me-
obtained. The doses OXI D1, OXI D2, APA D1 and APA D2 did not dicina, en la industria y en la restauración, entre otras; sin
show efficacy as disinfectants. However, they were able to reduce the embargo, su aplicación en procesos agrícolas ha sido escasa
frequency of Phytophthora sp. and Botrytis sp. to 0 %, compared to oth- debido a la poca información al respecto.
er identified fungi genera: Fusarium, Aspergillus, Pencillium, Tricho-
derma and Rhizopus.
Las investigaciones sobre su uso datan de fines del siglo
Index words: Hydrogen peroxide, peracetic acid, soil, disinfection, XX. Baldry (1982) comparó las propiedades antimicrobia-
mycoflora. les de algunas soluciones de peróxido de hidrógeno y ácido
Recibido: 19 de Septiembre del 2013
Aceptado: 9 de Mayo del 2014
DESINFECCIÓN DE SUELOS CON PERÓXIDOS Rev. Fitotec. Mex. Vol. 37 (4) 2014

peracético, y encontró que son excelentes para eliminar es- a 1 x 10-3.

poras fúngicas, y también muy buenos bacteristáticos, espe-
cialmente en condiciones de acidez. Las poblaciones de hongos del suelo se cuantificaron an-
tes y después de los tratamientos. Los géneros se identifica-
Se ha comprobado que el peróxido de hidrógeno tiene ron mediante claves taxonómicas (Domsch et al., 1980). El
bajo impacto ecológico en sistemas hidropónicos (Vines et número total de colonias se contó en cada caja de Petri. La
al., 2003)., y que puede sustituir al cloro como alternativa frecuencia se calculó como porcentaje con la fórmula de
de desinfección, para mejorar la calidad microbiológica de De-Cal et al. (2005):
los arándanos (Vaccinium sp.) (Crowe et al., 2007).
Desinfección del suelo. El experimento se realizó como
El ácido peracético es un desinfectante efectivo con un un factorial 2 x 5 con arreglo completamente al azar con
amplio espectro de actividad antimicrobiana. Debido a su 10 tratamientos distribuidos en un diseño completamente
efectividad como bactericida, viricida, fungicida y esporo- al azar con arreglo factorial 2 x 5; en el que los tratamien-
cida en diversas industrias, recientemente se le ha dado más tos fueron: peróxido de hidrógeno (OXI) y ácido peracéti-
atención a su aplicación en afluentes de agua, especialmen- co (APA), ambos con cinco niveles (D0, D1, D2, D3 y D4)
te porque es de fácil aplicación y bajo costo, y actúa aún en (Cuadro 1); cada uno de los 10 tratamientos se repitió por
presencia de materia orgánica, residuos tóxicos o mutagé- triplicado. Se utilizaron macetas de polietileno (PE) negro
nicos; también tiene baja dependencia del pH, un breve pe- de 1 L de capacidad, las cuales se rellenaron con 1 kg de
riodo de aplicación y efectividad para afluentes primarios o suelo y a cada una se le agregó el tratamiento correspon-
secundarios (Kitis, 2004). diente, y luego se selló con “parafilm”. Las macetas tratadas
se colocaron en una estufa para el control de la temperatura
El objetivo de la presente investigación fue evaluar la (28 ºC) y la humedad durante una semana.
eficacia del peróxido de hidrógeno y del ácido peracético
como desinfectantes del suelo comparando distintas dosis, La variable de respuesta fue la unidad formadora de colo-
para evaluar su efecto biocida sobre la micoflora, así como nias (UFC). Los valores obtenidos se analizaron en Minitab
su efecto sobre la frecuencia de los hongos, en muestras de 16 ®, con análisis de varianza y la prueba de medias se rea-
suelos destinados al cultivo de la fresa, provenientes de Pa- lizaron con Tukey (α = 0.05).
los de la Frontera, Huelva, España.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
MATERIALES Y MÉTODOS
Las características más relevantes del suelo son: Arenas
El trabajo experimental se llevó a cabo en los laboratorios con un drenaje elevado, nula pedregosidad, cuyo material
de la Escuela Politécnica Superior de La Rábida, Departa- original es arenisca silicea (Pleistoceno) y su clasificación
mento de Ciencias Agroforestales, ubicada en Palos de la es Entic Xerumbrepts (De la Rosa, 1984). El análisis del sue-
Frontera, Huelva, España, durante el ciclo agrícola de oc- lo se muestra en el Cuadro 2.
tubre de 2011 a mayo de 2012. Las muestras de suelo pro-
cedían de la Finca Las Malvinas, de Palos de la Frontera, En lo que se refiere a la eficacia del peróxido de hidróge-
Huelva, destinada a la siembra de fresa. Se analizaron las no (OXI) y del ácido peracético (APA) como desinfectan-
características más relevantes del suelo. tes, el análisis de varianza muestra que existen diferencias
significativas entre las dosis (P = 0.000) y en la interacción
Aislamiento de microrganismos. Se hizo una evaluación producto x dosis (P = 0.021). Al realizar la prueba de me-
previa de las colonias de hongos presentes en el suelo, que dias para los tratamientos se determinó que los mejores
corresponde a la microflora original. El medio de cultivo resultados se obtuvieron con OXI D4 y APA D4, APA D3,
utilizado para la dilución fue Papa Dextrosa Agar (PDA). OXI D3 y APA D2, que superaron a los demás tratamientos
La técnica de aislamiento fue la dilución en serie de 1 x 10-1 en abatir las UFC, y sin diferencias entre ellos. Las dosis D0,

Cuadro 1. Productos y dosis empleados para la desinfección del suelo Entic Xerumbrepts de la finca de Las Malvinas, Palos
de la Frontera, Huelva, España.
Dosis (mL kg-1)
Producto
D0 D1 D2 D3 D4
Peróxido de hidrógeno (OXI) 0 0.128 1.28 12.8 128
Ácido peracético (APA) 0 0 .853 8.53 85.3 853

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CUERVO-USÁN et al. Rev. Fitotec. Mex. Vol. 37 (4) 2014

D1 y D2 de ambos productos muestran una media de UFC tratamientos, como Phytophthora y Botrytis. El incremen-
que varía entre 101.3 y 226.3. La dosis D3 de OXI no es tan to o permanencia de Penicillium y de Trichoderma pueden
efectiva ya que presenta una media de 56.7; sin embargo, deberse a su competitividad potencial de descomposición
comparada con las dosis D0, D1 y D2 hay una reducción de química y capacidad de invadir nuevos nichos (De-Cal y
aproximadamente 75 %, y con el APA en la dosis 3 las UFC Melgarejo, 1997; Trabue et al., 2007). Esto es de significan-
se reducen en 99 % (Cuadro 3). cia ecológica, ya que Trichoderma es un género con poten-
cialidad para utilizarse en programas de control integrado
Los géneros de hongos identificados fueron: Fusarium, como agente de biocontrol para hongos patógenos del suelo.
Aspergillus, Penicillium, Phytophthora, Trichoderma, Rhizo- Por su parte, la permanencia de Fusarium se puede deber
pus y Botrytis (Figura 1). Su frecuencia después de las apli- a que la efectividad de la desinfección depende del tipo de
caciones se muestra en la Figura 2, en donde se puede ver microorganismo, pues en algunas investigaciones se ha en-
que Phytophthora y Botrytis, géneros presentes en la proble- contrado que los conidios de Fusarium solani son más resis-
mática fitosanitaria de la región, desaparecen a partir de la tentes que Escherichia coli (García-Fernández et al., 2012).
dosis más baja (OXI D2 y APA D2).
La desinfección total lograda con la dosis más alta con-
A pesar de que no se logró una desinfección, es impor- cuerda con lo señalado por Sichel et al. (2009), pero el riesgo
tante resaltar que algunos hongos que causan pérdidas es que tal dosis puede ocasionar toxicidad, además del costo
en el cultivo de la fresa no se presentaron después de los elevado que representa. Los datos experimentales de algunas

Cuadro 2. Análisis del suelo Entic Xerumbrepts en extracto saturado.

Nitratos Fosfatos Calcio Magnesio Materia
Elemento pH CE Potasio (K+)
(NO3-) (PO4-2) (Ca2+) (Mg2+) orgánica (MO)
Valor y
8.3 119.7 µS/cm 200 mg/L 15 mg/L 125 mg/L 0 mg/L 25 mg/L 0.77 %
Unidades

Cuadro 3. Unidades formadoras de colonias (UFC) en un suelo tratado diferentes dosis de peróxido de hidrógeno (OXI) y
ácido peracético (APA).
Producto OXI APA
Dosis D0 D1 D2 D3 D4 D0 D1 D2 D3 D4
UFC 226.3 a 157 abc 187.7 ab 56.7 cd 0.0 d 218.3 a 226.0 a 101.3 bcd 2.7 d 0.0 d
Las medias que comparten la misma letra son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05).

Figura 1. Géneros de hongos identificados en un suelo tratado con los biocidas peróxido de hidrógeno (OXI) y ácido
peracético(APA). A) Aspergillus; B). Penicillium; C) Rhizopus; D) Fusarium; E) Botrytis; F) Phytophthora; G)Trichoderma.

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concentraciones de OXI y APA se ajustaron con una regre- cación de APA, que a dosis bajas es mejor el OXI. Con la
sión lineal para determinar dosis intermedias que puedan modificación del número de UFC derivada de la aplicación
ser utilizadas en experimentos posteriores. En el caso de de peróxidos se podría realizar un manejo de las poblacio-
APA se consideraron las concentraciones 8.53 y 85.3, pero nes de patógenos de modo eficaz, ya que se observa la per-
sería conveniente probar las dosis 66.1 y 75.7 con el fin de manencia de hongos del género Trichoderma que se utiliza
determinar la dosis mínima del producto (Figura 3). Dosis para control biológico.
superiores o inferiores no generarían resultados deseables,
ya sea por el costo que implican o por la poca efectividad AGRADECIMIENTOS
para la disminución del número de UFC. En lo que se refie-
re a OXI, las concentraciones consideradas son 1.28, 12.8 y A la Dirección General de Asuntos del Personal Académi-
128, y los resultados obtenidos indican que sería convenien- co (DGAPA) por la beca otorgada para la estancia sabática
te probar dosis superiores a 9.92 e inferiores a 70.4 (Figura en la Universidad de Huelva, España, a través del Programa
4). de Apoyos para la Superación del Personal Académico de la
UNAM (PASPA).
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA
La desinfección de suelos con productos como el peróxi-
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do de hidrógeno y el ácido peracético permitirían dismi- erties of hydrogen peroxide and peracetic acid. Journal of
nuir la contaminación ambiental de suelos. Además, estos Applied Bacteriology 54:417-423.
Benavides-Mendoza A., H. Ramírez, V. Robledo-Torres y J. Hernández-
productos representan una alternativa viable al uso de Dávila (2004) El efecto de tres fumigantes de suelo y dos cepas
fumigantes como el bromuro de metilo. La efectividad de de bacterias sobre la productividad de fresa (Fragaria x anan-
la aplicación del peróxido de hidrógeno sobre las UFC se nassa). International Journal of Experimental Botany Fyton
2004:91-102.
obtiene con dosis entre 1.28 y 12.8; sin embargo, las UFC Chapman J. S. (1998) Characterizing bacterial resistance to preservatives
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totalmente con la aplicación de la dosis de OXI D1, esto in- radation Journal 41:241–245.
Crowe K., A. A. Bushway, R. J. Bushway, K. Davis-Dentici and R. A. Ha-
dica que el producto es efectivo en la desinfección de suelos zen (2007) A comparison of single oxidants versus advanced
freseros. Estadísticamente no existe diferencia con la apli- oxidation processes as chlorine-alternatives for wild blueberry
processing (Vaccinium angustifolium). International Journal of

20

18
Aspergillus
16
Penicillium
14
Rhizoctonia
12 Fusarim
Frecuencia (%)

10 Botrutis

8 Phytophthora

Trichoderma
6

0
OXI D0 OXI D1 OXI D2 OXI D3 OXI D4 APA D0 APA D1 APA D2 APA D3 APA D4
Tratamiento
Figura 2. Frecuencia de los géneros de hongos encontrados en un suelo tratado con diferentes dosis de los biocidas peróxido
de hidrógeno (OXI) y ácido peracético (APA).

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120

y = -1.2852x + 112.3
100
R² = 0.988

UFC 80

60

40

20

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
Concentración (mL)
Figura 3. Ajuste lineal para UFC a partir de concentraciones experimentales de ácido peracético (APA).

80
70 y = -0.4919x + 62.963
R² = 0.86954
60
50
UFC

40

30
20
10

0
0 20 40 60 80 100 120 140
Concentración (mL)
Figura 4. Ajuste lineal para unidades formadoras de colonias (UFC) experimentales de peróxido de hidrógeno (OXI).

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