Reseña Bibliográfica Biotecnología Vegetal Vol. 9, No.

1: 3 - 18, enero - marzo, 2009

ISSN 1609-1841 (Versión impresa)
ISSN 2074-8647 (Versión electrónica)

Floración in vitro – revisión de literatura

Wayner Montero-Carmona1 y Víctor M. Jiménez2*. *Autor para correspondencia.
1
Centro de Investigación y Desarrollo Agrícola Sostenible para el Trópico Húmedo, Escuela de Agronomía, Instituto
Tecnológico de Costa Rica, Sede Regional San Carlos, Costa Rica.

2
Centro para Investigaciones en Granos y Semillas (CIGRAS), Universidad de Costa Rica, 2060 San Pedro, Costa
Rica. e-mail: victor.jimenez@ucr.ac.cr

RESUMEN
La floración in vitro puede ser inducida en diferentes estadios durante el desarrollo de las plantas in vitro mediante
variaciones en los factores físicos y químicos relacionados con el cultivo de tejidos. Dentro de los factores físicos,
el fotoperíodo y la temperatura son los que se han estudiado con más detalle. Su efecto inductivo puede variar en
diferentes especies. Algunos factores físicos también pueden ser sustituidos por estímulos químicos. Los factores
químicos que han sido descritos con más frecuencia en la literatura son algunos reguladores de crecimiento y la
relación sacarosa/nitrógeno. Las citoquininas pueden inducir el desarrollo floral a partir de varios órganos; no
obstante, altas concentraciones pueden inhibir la floración y ocasionar brotación de yemas vegetativas. Las
giberelinas y las poliaminas (principalmente espermidina) presentan un efecto positivo en la inducción floral. De
forma contrastante, el etileno y las auxinas han mostrado ser poderosos inhibidores de la floración in vitro. Sin
embargo, las auxinas parecen ser necesarias durante los primeros estadios del desarrollo floral. Un aumento en
la concentración de sacarosa en el medio de cultivo puede favorecer el desarrollo de flores in vitro; mientras que
concentraciones altas de nitrógeno pueden estimular el desarrollo vegetativo de los explantes. No obstante, si las
concentraciones de nitrógeno son muy bajas, el explante no se desarrolla bien. La presente revisión de literatura
tiene como fin discutir los factores más comunes que participan en la inducción de la floración in vitro, así como
presentar la literatura científica más relevante en el tema a partir de 1980.

Palabras clave: cultivo de tejidos, inducción floral, inductores, reguladores de crecimiento

ABSTRACT
In vitro flowering can be induced at different stages during development of in vitro plants by changes in
chemical and physical factors related to the tissue culture process. Among the physical factors, photoperiod
and temperature have been studied more detailed. Their inductive effect may vary in different species. Some
physical factors can also be replaced by chemical stimuli. The chemical factors more frequently described in
the literature are some growth regulators and the sucrose/nitrogen ratio. Cytokinins may induce flower
development from various organs, but high concentrations can inhibit flowering and cause sprouting of
vegetative buds. Gibberellins and polyamines (mostly spermidine) have a positive effect on flower induction.
While, ethylene and auxin seem to be powerful inhibitors of in vitro flowering. However, auxins seem to be
necessary during the early stages of floral development. An increase in the concentration of sucrose in the
culture medium favor development of flowers in vitro, whereas a high concentration of nitrogen can stimulate
vegetative growth of explants. Nevertheless, if the nitrogen concentration is too low, explants do not develop
well. The aim of this literature review is to discuss most common factors related to in vitro flowering and to list
the most relevant scientific literature about the subject from 1980 on.

Key words: flower induction, growth regulators, inducers, tissue culture

Abreviaturas: 2,4-D Ácido 2,4-diclorofenoxiacético, 2iP 2–isopentiladenina, ABA Ácido abscísico, AC Agua de coco,
AG3 Ácido giberélico, AIA Ácido indol acético, AIB Ácido indol butírico, ANA Ácido naftalen acético, BAP Benciladenina,
CAct Carbón activado, CasHid Caseína hidrolizada, DSDPs Plantas de día corto desplazado, GAx Giberelina x,
LDPs Plantas de día largo, MES Ácido 2 (N-morfolino) etanosulfónico, MS Murashige y Skoog (1962), MT Murashige
y Tucker (1969), PSF Plantas sensibles al fotoperíodo, Put Putrescina, PVP Polivinilpirrolindona, SAM S-adenosil-
L-metionina, SAMDC S-adenosil-L-metionina descarboxilasa, SDPs Plantas de día corto, Spd Espermidina, Spm
Espermina, TDZ Tidiazuron

Contenido
INTRODUCCIÓN
FACTORES QUE AFECTAN LA FLORACIÓN IN
VITRO
Fotoperíodo
Reguladores de crecimiento
4 Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

Nitrógeno al., 2000; Hayama y Coupland, 2003). Durante los

Concentración de sacarosa períodos inductivos, la floración es promovida por
Temperatura genes como PHYA, FHA, CO, GI, LHY o FT.
Aireación y gelificación Mientras que en períodos no inductivos, la floración
EFECTO DEL GENOTIPO EN LA INDUCCIÓN puede inducirse por tocoferoles (Molina-Torres et
FLORAL IN VITRO al., 1989) o mediante regulación hormonal (Roldán
Conclusiones et al., 1999).

INTRODUCCIÓN Los primeros trabajos publicados sobre floración

in vitro datan de 1933, cuando White logró, a partir
El éxito reproductivo de una planta depende de del estímulo de meristemos preformados, la
que complete su ciclo hasta floración. Durante el inducción floral en Stellaria media (Scorza,
proceso de inducción floral, a nivel de meristemo, 1982). Posteriores eventos de floración in vitro
ocurren una serie de eventos que afectarán el han sido referidos a partir de la reorganización
hábito de crecimiento vegetativo, incluyendo de estructuras preformadas (meristemos
pérdida de la dominancia apical, alargamiento del apicales, yemas y embriones somáticos), así
tallo, cambios en la filotaxia y la forma de la hoja como a partir de brotes adventicios obtenidos
(Galoch et al., 2002). El inicio de la floración está de callo proveniente de diversos tejidos
fuertemente regulado por cambios ambientales (segmentos de tallo, raíces, hojas, cotiledones,
relacionados con factores estacionales tales como p é t a l o s , c a p a s d e células epidermales,
el fotoperíodo y la temperatura, y por el estado de protoplastos), entre otros (Scorza, 1982; Bernier
desarrollo de la planta (Bernier et al., 1993; Laurie, et al., 1993; Laurie, 2004).
2004).
En este trabajo se pretende hacer una
La inducción floral involucra una serie de cambios recopilación, lo más exhaustiva posible, de los
profundos, pasando de estadios vegetativos informes científicos relacionados con floración in
(producción de tallos y hojas) a estadios vitro que se han publicados a partir de 1980. Las
reproductivos (producción de flores y semillas). La referencias anteriores a dicha fecha ya habían sido
floración requiere de un alto grado de reservas por compiladas por Scorza (1982). Recientemente se
parte de la planta; por lo que se han generado publicó una revisión en el tema, pero limitada a
mecanismos para asegurar que los procesos de plantas neófitas, que son aquellas plantas
inducción floral ocurran durante los periodos herbáceas que tienen órganos de almacenamiento
favorables para la floración. La forma en que las bajo tierra, tales como bulbos, cormos, rizomas o
plantas regulan los procesos de inducción floral tubérculos (Ziv y Naor, 2006).
varía entre especies. Sin embargo, este proceso
comúnmente involucra el uso de señales internas FACTORES QUE AFECTAN LA FLORACIÓN IN
relacionadas con el fotoperíodo o cambios en VITRO
temperatura (vernalización). La disponibilidad de
agua, nutrientes o reguladores de crecimiento son La floración in vitro puede ser inducida en
otros de los factores de importancia para la diferentes estadios de desarrollo de las plantas in
inducción floral (Laurie, 2004). vitro mediante variaciones en factores químicos
y físicos relacionados con el cultivo de tejidos.
Una sustancia debe cumplir con los siguientes Las familias de plantas que presentan mayor
requisitos para que se pueda confirmar su número de referencias sobre floración in vitro
participación en la inducción floral: estímulos que son: Poaceae, Rutaceae, Orchidaceae,
conducen a la floración deben aumentar sus niveles Brassicaceae y Cucurbitaceae (Tabla 1). Sin
endógenos en los meristemos, inhibidores de su embargo, la gran variedad de familias en las que
biosíntesis deben bloquear la inducción floral y se ha informado dicho fenómeno parece indicar
deben encontrase pruebas que relacionen que no existe una relación directa entre el grupo
molecular o bioquímicamente a dicha sustancia taxonómico y la inducción de este proceso. La
con la inducción floral (King et al., 2001). única relación que parece mantenerse es que
fotoperiodos de 16 horas luz o mayores inducen
Se ha relacionado a un grupo importante de genes la floración in vitro en plantas de día largo (long
con los procesos de inducción y regulación de la day plants, LDPs) en presencia de citoquininas
floración. Entre ellos se han propuesto varios en el medio de cultivo (Hillson y LaMotte, 1977;
relacionados con el control negativo (LHY/CCA1, Scorza y Janick, 1980; Rajasekaran et al., 1983;
TOC1) o positivo (CO, PHYB) de los ritmos McDaniel et al., 1991; Kachonpadungkitti et al.,
circadianos que conllevan a la floración (Barak et 1992; Zhang y Leung, 2000; King et al., 2001).
Tabla 1. Lista de especies y condiciones inductoras para la floración in vitro, a partir de 1980.

Espec ie (Familia) Medio de Cultiv o Condic iones de Cultiv o Ref erenc ia

-1 -1 -2
Amaranthus c audat us Murashige y Sk oog ( 1962) (MS) + 30 g.l sacaros a + 0. 1 mg.l Fotoperiodo 16 horas (2.2 W m ); Tis serat y Gallett a (1988)
-1
(Amarant haceae) áci do naftalen ac ét ic o (ANA) + 8 g.l agar ; pH 5.7 t emperatura 26±1°C

Arabidops is s p. MS + 10 g l-1 s ac aros a o gluc osa + 0.5 g.l- 1 ác ido 2 (N-morfolino) Os c uridad (5 s emanas) – Fot operiodo 12 Rol dán et al. (1999)
-1 - 2 -1
(Bras sic aceae) etanos ulf ónic o (MES) + 8 g.l agar; pH 5.7 horas (50 μE m s ); temperatura 24±2°C

Arachis hypogaea MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 1.13 mg.l -1 benci ladenina (BAP) + Fotoperí odo 18 horas (3 000 lux ); Kac honpadungkitti et al.
-1
(Fabaceae) 6 g.l agar; pH 5.7 temperatura 27±1°C (1992)
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

-1 -1 -2 -1
Arachis hypogaea ½ MS + v itaminas Gamborg + 100 mg. l inos it ol + 0. 5 mg. l BAP Fotoperiodo 16 horas (60 μmol m s ); Tiwari y Tuli (2008)
-1
(Fabaceae) + 30 g. l s ac aros a; pH 5.6 (medio de c ultiv o lí quido) t emperatura 25±2°C

Bambus a arundinac ea MS + 20 g. l-1 s ac aros a + 5% agua de c oco (AC) + 2.22 μM BAP Fotoperiodo 24 horas (10 μmol m-2 s- 1); J os hi y Nadgauda
(Poac eae) + 4 g.l- 1 agar; pH 5.8 t emperatura 28±2°C (1997); Nadgauda et al.
(1997)

Bambus a edulis MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 0.11 mg.l -1 tidiazuron (TDZ), 5 mg. l-1 Fotoperiodo 16 horas (54 μmol m-2 s- 1); Lin et al. (2003)
(Poac eae) k inet ina o 3.65 mg. l-1 BAP + 2. 2 g. l-1 de Gelrite; pH 5.7 t emperatura 26±1°C
-1 -1 -1 -2 -1
Boronia megas tigma MS + 30 g. l s ac aros a + 8 mg. l BAP + 11 g.l agar ; pH 5. 8 Fotoperí odo 10 horas (16.5 μmol m s ); Roberts et al. (1993)
(Rutaceae) t emperatura 15±1°C

Bougainv illea s p. cv. `San MS + 30 g. l-1 fructos a + 0.01 mg.l-1 áci do giberélico (AG 3) + Fotoperí odo 16 horas (20 μE m-2 s-1 ); Steff en et al. (1988)
-1
Diego Red´ 6 g.l agar; pH 5.7 t emperatura 25±2°C
(Ny ct aginac eae)

Brass ic a ol erac ea MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 3 mg. l-1 ácido indol acétic o (AIA) + 5 Fotoperiodo 16 horas (3 000 lux ); Kumar et al. (1995)
(Bras sic aceae) mg.l-1 k inet ina + 3 g. l-1 de Phyt agar; pH 5.7 t emperatura 26±2°C
-1 -2 -1
Capsicum f rutesc ens MS + 30 g. l s ac aros a + 40 μM nit rato de plat a (ó 30 μM c loruro Fotoperiodo 16 horas (4.41 J m s ) Sharma et al. (2008)
(Solanaceae) de cobalt o) + 8 g.l- 1 agar; pH 5.8 t emperatura 25±2°C

Ceropegia bulbos a Gamborg et al. (1968) + 30 g.l- 1 sacaros a + 0.5 mg.l -1 BAP + 1 Fotoperiodo 16 horas (3 000 lux ); Brit to et al. (2003)
-1 -1
(As clepiadac eae) mg.l AG 3 + 8 g. l agar; pH 5. 7 t emperatura 25±2°C
-1 -2 -1
Ceropegia s pp. MS + 60 g. l s ac aros a + 26. 6 μM BAP Fotoperiodo 16 horas (40 μmol m s ) Nai r et al. (2007)
-1
(As clepiadac eae) 8 g.l agar; pH 5.8 t emperatura 25±2°C
5
 6

Tabla 1. (Continuación)

Espec ie ( Familia) Medio de Cultiv o Condic iones de Cultiv o Ref erenc ia

-1 -1 -1 -2 -1
Cichorium int ybus MS + 30 g. l s ac aros a + 8.5 mg. l AgNO 3 + 2 mg. l 2– Fotoperiodo 16 horas (50 μE m s ); Bais et al. (2001)
-1 -1
(As teraceae) is opent iladenina (2-iP) + 0. 5 mg. l AG 3 + 8 g.l putres cina ( Put) t emperatura 25±2°C
-1
+ 8 g.l agar; pH 5.8

Citr us limon ( Rutac eae) MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 0.1 mg l-1 ANA + 8 g. l-1 agar; pH 5. 7 Fotoperí odo 16 horas (2.2 W m-2); Tis serat et al. (1990)
t emperatura 20±1°C

Citr us nobilis x C. delic ios a MS + 40 g. l-1 s ac aros a + 2 mg. l-1 k inet ina o BAP + 8 g.l-1 agar; Fotoperí odo 12 horas (40 μmol m-2 s- 1); Singh et al. (2006)
(Rutaceae) pH 5. 6 t emperatura 25±2°C
-1 -1 -1 -2 -1
Citr us unshiu MS + 30 g. l s ac aros a + 1 mg. l BAP + 12 g.l agar; pH 5.6 Fotoperiodo 16 horas (30 μmol m s ); Garc ía-Lui s et al . (1992)
(Rutaceae) t emperatura 15±2°C ( 15 días), luego
22±2ºC

Cuc umis sativ us MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 0.11 mg.l -1 BAP + 0.33 mg.l-1 ácido Fotoperí odo 24 horas (25 W m-2 ); Rajas ekaran et al. (1983)
-1
(Cucurbit ac eae) 2,4-Dic lorofenox iac étic o (2,4-D) + 0. 1 g.l cas eí na hidroliz ada t emperatura 27±2°C
-1
(CasHid) + 8 g.l agar; pH 5. 7
-1 -1 -1 -2 -1
Cymbidium ens ifolium 50% MS + 20 g.l sacaros a + 0. 5 mg.l niac ina + 1 g. l peptona Fotoperiodo 16 horas (10 μmol m s ); Chang y Chang ( 2003)
-1 -1 -1
(Orc hidac eae) + 0.05 mg. l ANA + 2 mg.l 2iP o TDZ + 2.2 g.l Gelr ite; pH 5.2 t emperatura 25±2°C
-1 -1 -2 -1
Cymbidium MS + 40 g. l s ac aros a + 10 mg. l BAP + 1/20 de la Fotoperí odo 16 horas (50 μmol m s ); Kos tenyuk et al. (1999)
niveo-marginatum c onc entr ac ión de N + 5 v ec es la concent rac ión de P + poda de t emperatura 25-26ºC
-1
(Orc hidac eae) raíc es + 2. 5 g.l gelrite
-1 -2 -1
Dedrobium Chao Pr aya Knudson C + 20 g. l s ac aros a + 15% AC + 11.1 μM BAP Fotoperí odo 16 horas (40 μmol m s ); Hee et al. (2007)
-1
Smile (Or chidac eae) 3 g.l gelrit e; pH 5. 3 t emperatura 25±2ºC
-1 -2 -1
Dendrobium Mada me Knudson C + 20 g. l s ac aros a + 4.4 μM BAP + 15% AC Fotoperí odo 16 horas (35 μmol m s ); Sim et al. ( 2007, 2008)
-1
Thong-I n (Orc hidac eae) + 3 g.l gelrit e; pH 5.3 t emperatura 26±2°C

Dendrobium Second Lov e Macronut rientes modif icados de Vac in y Went (1949) + Fotoperí odo 16 horas (35-45 μmol m- 2 s -1 ); Ferreira et al. (2006)
(Orc hidac eae) mic ronutrient es MS + 20 g.l-1 s ac arosa + 1.8 μM TDZ t emperatura 26±1ºC
-1
+ 2 g.l Phyt agel; pH 5.85
-2 -1
Dendrobium Sonia 17 ½ MS + v it aminas de Gamborg + 20 µM BAP (no s e indica Fotoperí odo 16 horas (25 μmol m s ); Tee et al. ( 2008)
(Orc hidac eae) c onc entr ac ión ni tipo de az úc ar ni de gel ificant e) t emperaura 25±2° C
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009
Tabla 1. (Continuación)

Espec ie (Familia) Medio de Cultiv o Condic iones de Cul tiv o Ref erenc ia
-1 -1 -1
Dendr oc alamus giganteus MS + 20 g. l s ac ar os a + 80 ml.l AC + 6 mg.l BAP + 0.1 Fotoperíodo y temperat ura no indic adas Ramanay ake et al.
-1 -1
(Poac eae) mg.l k inet ina + 2. 2 g. l Gelr ite; pH 5.6 (2001)
-1 -1 -2 -1
Dendr oc alamus hami ltonii MS + 30 g. l s ac ar os a + 5 mg. l BAP (s ol o las primer as 4 Fotoperiodo 16 horas (140 μmol m s ); Chamber s et al.
-1
(Poac eae) s emanas ) + 7 g.l agar; pH 5.7 temperatura 28± 2°C (1991)
-1 -2 -1
Dendr oc alamus latiflorus MS + 1 mg.l TDZ + sac aros a (no indi can cantidad) Fotoperiodo 16 horas (54 μmol m s ); Lin et al. (2007)
-1
(Poac eae) + 2.2 g.l gelrit e; pH 5. 7 temperatura 26° C
-1 -1 -1 -2 -1
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

Dianthus cary ophyllus c v. MS + 100 mg.l inos itol + 100 mg. l arginina + 100 mg. l Fotoperiodo 16 horas (40-50 μmol m s ); Sank hl a et al. (1994)
-1
Ger man Red alanina + 100 mg.l ác ido as córbic o + 8. 9 uM BAP + 2.7 uM temperatura 25± 1°C
-1
(Cary ophyll ac eae ) ANA + 7. 5 g. l agar (no indic an cant idad de sac aros a ni v alor
del pH)

Fagopy rum esc ul entum ½ MS c on nit rato como únic a fuent e de N + 50 g. l-1 s ac arosa + Fotoperiodo 8 hor as (12 s emanas ) – 16 Kac honpadungki tti et
-1 -1 -2 - 1
(Polygonac eae) 0.02 mg. l kinetina + 10 g. l agar; pH 5. 7 horas (35 μmol m s ); temperatura 27±2°C al. (2001)
-1 -1 -1 -2 -1
Fort unella hinds ii ½ MS + 50 g. l s ac ar os a + 0. 01 mg.l BAP + 3 g.l Gelr ite; pH Fotoperiodo 16 horas (35.3 μmol m s ); J umin y Nito (1996)
(Rutaceae) 5.7 temperatura 25± 1°C
-2 -1
Gentiana tr iflora WPM (Lloy d y McCown 1980) con vitaminas B 5 (G amborg et Fotoperiodo 16 horas (60 μmol m s ); Zhang y Leung
-1 -1 -1
(Gent ianac eae) al., 1968) + 30 g. l s ac aros a + 0.45 mg.l kinetina + 7.5 g.l temperatura 22± 2°C (2000)
agar; pH 5.8
-1 -1 -2 -1
Gly cine max 1/5 MS (s in NH 4NO 3) + 30 g. l s ac ar os a + 8 g.l agar; pH 5. 8 Fotoperiodo 8 hor as (110 μE m s ); Dic kens y v an St aden
(Fabaceae) temperatura 23± 2°C (1985)

Kalanchoe bl ossf eldi ana MS + 30 g. l-1 s ac ar os a + 9 g. l-1 agar; pH 5.8 Fotoperiodo 8 hor as (110 μE m -2 s -1 ); Dic kens y v an St aden
(Cras sulaceae) temperatura 25± 2°C (1988)
-1 -1 -1 -2 -1
Kniphof ia leucocephala MS + 30 g. l s ac ar os a + 4.5 mg. l B AP + 2 g. l Gel rit e; pH 5. 8 Fotoperíodo 16 hor as (12.6 μmol m s ); Tay lor et al. (2005)
(As phodelaceae) temperatura 25± 2°C
-1 -1 -1 -2 -1
Kniphof ia leucocephala MS + 60 g. l s ac ar os a + 2.0 mg. l B AP + 2 g.l Gelrite; pH Fotoperíodo 16 hor as (12.6 μmol m s ); Tay lor et al. (2007)
(As phodelaceae) 5.8 temperatura 25± 2°C
-1
Lemna sp. Pirs on y Seidel ( 1950) con 7.3 mg. l Fe-EDTA en reemplazo Fotoperiodo 8 – 12 horas (4 500 lux ); Mader (2004)
-1 -1
(Lemnaceae) de FeSO 4 + 20 g.l s ac arosa + 1 mg.l k inetina + 0. 22 μM/l – temperatura 24± 2°C
-1
Put , es permidina (Spd) o espermina (Spm) + 2.5 g.l agar; pH
5.5
7
 8

Tabla 1. (Continuación)

Espec ie ( Familia) Medio de Cultiv o Condic iones de Cultiv o Ref erenc ia

Leptinella nana MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 8 g. l-1 agar; pH 5.7 Fotoperiodo 24 horas (70 μmol m-2 s- 1); Carson y Leung (1994)
(Compositae) t emperatura 22±1°C
-1 -1 -1
Loli um t emulentum MS + 50 g. l s ac aros a + 0.35 mg.l AG 3 + 0.1 mg.l k inet ina + 7 Fotoperiodo 24 horas (3 días) – 8 hor as Mc Daniel et al. (1991)
-1 -2 -1
(Poac eae) g.l agar ; pH 5.6 (55 μmol m s ); temperatura 25±2°C
-1 -1 -1 -2 -1
Ly c opers icon esc ul entum MS + 30 g. l s ac aros a + 2 mg. l BAP + 8 g. l agar; pH 5. 8 Fotoperiodo 16 horas (39.3 μmol m s ); Sheeja y Mandal (2003)
(Solanaceae) t emperatura 25±2°C

Manihot es culent a Medio propio + 0.5 uM AIA + 5 uM BAP + 0. 5 uM AG 3 Fotoperiodo 16 horas (4000 lux ); Tang et al. (1983)
(Euphorbiac eae) t emperatura 27-30° C

Momordic a charant ia MS + 0.003 mg.l -1 Fe 2+ + 30 g. l-1 s ac aros a + 0. 45 mg.l -1 kinetina Fotoperiodo 12 horas (50 μmol m-2 s- 1); Wang et al. (2001)
-1
(Cucurbit ac eae) o BAP + 8 g. l agar; pH 6 t emperatura 25±2°C

Mur raya pani culata Murashige y Tucker (1969) + 50 g. l-1 s ac aros a + 0.01 mg.l -1 BAP Fotoperiodo 16 horas (52.9 μmol m- 2 s-1 ); J umin y Ahmad ( 1999)
(Rutaceae) + 3 g.l- 1 Gelrite; pH 5.7 t emperatura 25±1°C
-1
Nicotiana tabac um cv . MS + 125 mM sacaros a + 1 uM AI A + 1 uM BAP + 10 g. l agar No s e indica Peeters et al. (1991)
Sams un ( Solanac eae) (no s e indic a el pH del medio)

Olea europaea ½ MS + v itaminas OM (Rugini 1984) + 30 g.l -1 s acaros a + 10 Fotoperí odo 16 horas (3 000 lux ); Chaari- Rk his et al. (2006)
(Oleaceae) mg.l-1 AG 3 + 8 g. l-1 agar; pH 5. 7 t emperatura 24±2°C

Onc idium v ar ic os um Medio Knuds on (1946) c on 27. 8 mg. l-1 Fe-EDTA + 10 g. l-1 Fotoperí odo 16 horas (500 lux ); Kerbauy (1984)
(Orc hidac eae) s ac arosa + 0.5 mg.l- 1 ANA + 60 g.l -1 pulpa de banano + 1 g. l-1 t emperatura 25±1°C
-1
c arbón act ivado (CAct ) + 8 g.l agar; pH 5.7

Ory chophragmus ½ MS + 30 g. l-1 s ac aros a + 2. 5 mg. l-1 z eatina + 2 mg.l- 1 AG 3 + Fotoperí odo 16 horas (17.47 μmol m- 2 s -1 ); Luo et al. ( 2000)
-1
viol ac eus (Br assicaceae) 7 g.l agar; pH 5.7 t emperatura 7±2° C (14 dí as ), luego
20±2° C
-1 -1
Panax gins eng Gamborg et al. (1968) + 20 g.l sacaros a + 1 mg.l BAP + 1 Fotoperí odo 16 horas (1 500 lux ); Chang y Hsing (1980)
(Araliac eae) mg.l-1 AG 3 + 7 g. l-1 agar; pH 5. 7 t emperatura 26±1°C
-1 -1 -1
Pas siflora s uberosa MS + 30 g. l s ac aros a + 0.1 mg. l BAP + 10 g.l bact o-agar; Fotoperiodo 16 horas (2 000 lux ); Scorz a y J anick (1980)
(Pass iflor ac eae) pH 5. 7 t emperatura 26±1°C
-1 -1
Pentanema indicum MS + 30 g. l s ac aros a + 2 mg. l ácido indol butí ric o (AIB) + Fotoperí odo 16 horas (3 000 lux ); Siv anesan y Jeong
-1
(As teraceae) 8 g.l agar; pH 5.7 t emperatura 25±2°C (2007)
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009
Tabla 1. (Continuación)

Espec ie ( Familia) Medio de Cultiv o Condic iones de Cultiv o Ref erenc ia

Per illa c ri spa White c on 80 mg.l- 1 KNO 3 como fuente de N + 20 g. l-1 Fotoperiodo 24 horas (2 000 lux ); Wada y Tots uk a (1982)
-1
(Lamiac eae) s ac arosa + 7 g.l agar; pH 5.8 t emperatura 25±1°C
-1 -1 -1 -2 -1
Phalaenops is s p. 3.5 g.l Hy ponex + 2 g.l peptona + 25 g.l sacaros a + Fotoperí odo 12 horas (28.5 μmol m s ); Duan y Yazawa (1995)
-1 -1
(Orc hidac eae) 5 mg.l BAP + 10 g. l agar; pH 5.6 t emperatura 25±2°C
-1 -1 -1 -2 -1
Pharbitis nil 4/5 MS + 30 g. l sac aros a + 0. 02 mg.l BAP + 0.03 mg. l Fotoperí odo 12 horas (18.3 μmol m s ); Galoc h et al. (2002)
-1
(Conv ulvac eae) AG 3 + 2.5 g. l Gelrit e; pH 5. 7 t emperatura 25±2°C
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

-1 -1 -1 -2 -1
Phy llanthus niruri MS + 30 g. l s ac aros a + 0.5 mg. l GA 3 + 7.5 g.l agar; Fotoperiodo 24 horas (44±9 μE m s ); Liang y Keng (2006)
(Euphorbiac eae) pH 5. 7 t emperatura 25± 2°C
-1 -2 -1
Pisum s ativ um MS (1/2x NH 4NO 3) + v itaminas B 5 + 30 g.l s acaros a + Fotoperí odo 16 horas (30 μmol m s ); Frank lin et al. (2000)
-1 -1 -1
(Fabaceae) 1 mg.l AG 3 + 0. 5 mg. l AI B + 7 g.l agar; pH 5. 8 t emperatura 25±2°C
-1 -1 -2
Psy gmorc his pus illa Vac in-Went c on 27.8 mg.l Fe-EDTA y 22.3 mg. l MnSO 4 4H2 O Fotoperí odo 12 – 16 horas (30 μmol m Vaz et al. ( 2004)
-1 -1 -1 -1
(Orc hidac eae) + 20 g. l s ac ar os a + 60 g.l pulpa de banano + 1 g. l carbón s ); temperatura 27±1°C
-1
act iv ado (CAct ) + 6 g.l agar; pH 5.8

Rauvolf ia tetr aphyll a MS + v itaminas B 5 + 30 g.l -1 sac ar os a 4. 44 μM BAP + 4. 3 μM Fotoperí odo 16 horas (1 500 lux ); Anitha y Kumari (2006)
-1
(Apoc ynaceae) AG 3 + 8 g. l agar; pH 5.7 t emperatura 25±2°C

Ros a sp. (Rosaceae) MS s in NH4NO 3 + 30 g.l- 1 s ac arosa + 400 mg. l-1 mio-inos it ol + Fotoperí odo 16 horas (26 μmol m-2 s- 1); Wang et al. (2002)
-1 -1 -1
0.1 mg.l ANA + 0. 5 mg. l z eatina o TDZ + 3 g.l Phytagel; t emperatura 25±2°C
pH 5. 8
-1 -1 -1 -2 -1
Ros a hy brida c v. ‘First MS + 30 g. l s ac aros a + 3 mg. l BAP + 0. 1 mg. l ANA (no s e Fotoperí odo 10 horas (45 μmol m s ); Vu et al. (2006)
Priz e’ (Ros ac eae) indicó t ipo ni concentrac ión de gel ific ante) t emperatura 25±2°C
-1 -1
Sac charum officinarum MS + 30 g. l s ac aros a + 100 mg.l poliv inilpirrolindona (PVP) + Os c uridad ( 15 días), luego f ot operíodo de Virupak s hi et al. (2002)
(Poac eae) 3 mg.l-1 2,4-D + 100 cc /l AC + 40 mg.l- 1 proli na + 1.6 g.l- 1 Gelrite; 6 horas (40 μE m- 2 s -1 ); temperatura
pH 5. 7 25±2° C
-1 -1 -2 -1
Salv ia afr ic ana-lutea MS + 100 mg.l inos itol + 2.5 µM AIB + 30 g.l s ac arosa + Fotoperí odo 24 horas (50 μmol m s ); Makunga y v an Staden
-1
(Lamiac eae) 10 g. l agar; pH 5. 8 t emperatura 22-24° C (2008)
-1 -2 -1
Sapos hni kov ia divaric ata MS + 30 g. l s ac aros a + 0.34 – 1.36 μM pac lobutr az ol ó 1 – 4 Fotoperí odo 14 horas (80 μmol m s ); Qiao et al. (2009)
-1
(Umbelliferae) μM etephon + 6 g.l agar; pH 5.8 t emperatura 25±2°C
9
Tabla 1. (Continuación)
10

Espec ie (Familia) Medio de Cultiv o Condic iones de Cultiv o Ref er enc ia

-1 -1 -2 -1
Solanum tuberos um MS c on v it aminas B5 + 30 g. l sac aros a + 0. 75 g.l MgCl2 + 0. 5 Fotoperí odo 16 horas (16 μmol m s ); Al-Wareh et al. (1989)
-1 -1 -1
(Solanaceae) mg.l k inet ina + 0. 1 mg.l 2, 4- D + 1. 6 g. l Gelrit e; pH 5. 7 t emperatura 27±2°C
-1 -1 -1 -2 -1
Spathiphy ll um c annif oli um MS + 60 g. l s ac ar os a+ 10 mg.l GA 3 + 2 g.l gelrit e; Fotoperí odo 16 horas (35 μmol m s ); Dewir et al. (2007, 2008)
cv . Sunny Sails pH 5. 7 (biorreact or ) t emperatura 25±2°C
(Arac eae)
-1 -1 -1
Spathoglott is plic at a MS + 30 g. l s ac ar os a + 2 mg. l k inet ina + 0.5 mg.l ANA Fotoperí odo 16 horas (2 000 lux ); Murthy et al. (2006)
(Orc hidac eae) + 100 mg.l -1 Cas Hi d + 10% AC + 7 g.l- 1 agar ; pH 5.7 t emperatura 25±2°C
-1 -1 -1
Spinacia ol erac ea MS + 30 g. l s ac ar os a + 2 mg. l k inet ina + 0.01 mg.l 2,4-D Fotoperí odo 14 horas (84 días ) – 10 horas Al-Khay ri et al. (1991)
(Chenopodi ac eae) + 1 mg.l-1 AG 3 + 8 g l-1 agar; pH 5. 8 (65 μmol m-2 s -1 ); temperatura 22±3°C
-1 -1 -1 -2 -1
Streptocarpus nobilis MS c on 40 mg.l 330-Fe + 30 g. l sac aros a + 3. 38 mg.l BAP Fotoperí odo 8 horas (35 μE m s ); Simmonds (1982)
(Gesneriac eae) + 6 g.l- 1 agar; pH 5.8 t emperatura 25±1°C

Streptocarpus nobilis Macr oelementos de Knop + micr oelement os y vitaminas de Fotoperí odo 8 horas (5 000 lux); Handro (1983)
-1 -1
(Gesneriac eae) Nits c h y Nits ch (1965) + 1. 5 g. l adenina + 20 g. l s ac aros a 0.1 t emperatura 22° C (os curi dad) – 28° C (l uz )
-1 -1 -1
mg.l AIA + 0.35 mg.l BAP + 8 g. l agar; pH 5. 5
-1 -1 -1
Torenia s p. MS c on 330 mg. l NH4 NO 3 + 60 g.l s ac arosa + 6 g.l agar; Fotoperí odo 8 horas (2 000 lux); Tanimoto y Harada
(Linderniac eae) pH 5. 7 t emperatura 25±2°C (1981)

Vernonia ci nerea MS + 2 g.l- 1 inositol + 30 g. l-1 s ac aros a + 8 g.l- 1 agar (s in Fotoperí odo 16 horas (25 μmol m-2 s- 1); Maheshwari y Kumar
(As teraceae) regul ador es de c reci miento); pH 5. 8 t emperatura 25±2°C (2006)
-1 -2 -1
Vigna aconitif olia MS + 30 g. l s ac ar os a + 1-3 μM ABA (o 600 μM prolina) Fotoperí odo 14 horas (68 μmol m s ); Sax ena et al. ( 2008)
-1
(Fabaceae) + 8 g.l agar; pH t emperatura 27±0.5°C

Withania somnifera MS + 30 g. l-1 s ac ar os a + 2 mg. l-1 k inet ina + 0.1 mg.l -1 AI A + Fotoperí do 20 horas (2 000 lux); Saritha y Naidu ( 2007)
-1
(Solanaceae) 8 g.l agar; pH 5.8 t emperatura 26±2°C; humedad relativ a
60-70%
-1 -1 -1 -2 -1
Zantedes chia s p. MS + 30 g. l s ac ar os a + 20 mg. l AG3 + 6.5 g.l agar; pH 5.7 Fotoperí odo 16 horas (75 μmol m s ); Naor et al. (2004)
(Arac eae) t emperatura 22±1°C
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009 11

Fotoperíodo Reguladores de crecimiento

La percepción del fotoperíodo requiere de la participación En forma general, los reguladores del crecimiento y
de fotorreceptores. Entre los más importantes se las poliaminas son considerados como las principales
encuentran los fitocromos, los cuales pueden distinguir señales de estímulo para la inducción floral. Su relación,
entre luz y oscuridad, así como la duración de estas tanto a nivel de la inducción como de la morfogénesis
fases (Reid et al., 2004). Períodos de oscuridad de la flor, indica que su acción es multifactorial (Bernier
continua estimulan un aumento en la biosíntesis de et al., 1993; Perilleux y Bernier, 1997). A nivel fisiológico,
diversas giberelinas y su sensibilidad por parte de las citoquininas, auxinas y giberelinas han mostrado tener
células (Reed et al., 1996). La percepción de longitudes un efecto importante en la inducción floral en varias
de onda correspondientes al espectro rojo e infrarrojo especies de plantas (Metzger, 1987). Durante la
por parte de las hojas inductoras (generalmente las inducción floral en Lolium, una LDP, los niveles de GA5
más cercanas a la yema) parecen activar una señal de aumentan inicialmente, seguido varios días después,
estímulo para la inducción floral. Esta señal es por un incremento en la concentración de GA1, AG3,
trasladada en un lapso de 16 a 24 horas posterior al GA4 y GA6 (King et al., 2001). Los cambios para que
inicio de la exposición al período de luz correcto, sin los meristemos vegetativos pasen a su estadío
verse afectada por la intensidad lumínica (Perilleux et reproductivo involucran la redistribución de fitohormonas
al., 1994). endógenas y la pérdida de la dominancia apical. El
efecto de las fitohormonas durante la inducción floral
La sensibilidad de las plantas in vitro hacia el fotoperíodo puede estar relacionado con cambios en el crecimiento
varía durante su desarrollo. En algunos casos las plantas y desarrollo de los meristemos en estado vegetativo,
presentan un aumento y en otros una disminución en que pasan a un estado reproductivo (Galoch et al.,
la sensibilidad conforme avanzan hacia la madurez. 2002).
Estos cambios en la capacidad de percepción de las
plantas hacia la luz ha sido relacionada, no con los In vitro, las citoquininas pueden inducir el desarrollo
cambios en la susceptibilidad de los meristemos al floral a partir de varios órganos (Tabla 3). Tidiazurón
estímulo de inducción floral, sino con los procesos (TDZ), 2–isopentiladenina (2iP) y benciladenina (BAP)
inductivos de dicho estímulo en las hojas (Simmonds, han mostrado tener un fuerte efecto inductor en
1982). Se han encontrando plantas de día corto (short Cymibidum ensifolium (Chang y Chang, 2003) y
day plants, SDPs), plantas de día corto desplazado Bambusa edulis (Lin et al., 2004). Sin embargo, no
(displaced short day plants, DSDPs) y LDPs que todas las citoquininas muestran un efecto positivo en
responden al mismo ritmo circadiano de la floración. Altas concentraciones de varias citoquininas
aproximadamente 24 horas in vitro. La inducción floral (zeatina, kinetina, BAP y 2iP) pueden inhibir la
en el cultivo de tejidos parece estar fuertemente inducción floral y ocasionar un efecto en la brotación
influenciada por este modelo en muchas plantas de yemas vegetativas, como se ha observado en
sensibles al fotoperíodo (PSF) (Kachonpadungkitti Torenia sp. (Tanimoto y Harada, 1981), Fagopyrum
et al., 2001). Se ha hecho referencia al papel del esculentum (Kachonpadungkitti et al., 2001),
fotoperíodo como un factor de gran importancia para Pharbitis nil (Galoch et al., 2002) y Kniphofia
la floración in vitro en diferentes especies (Tabla 2). leucocephala (Taylor et al., 2005).

Tabla 2. Referencias en las cuales se ha observado efecto del fotoperiodo en la inducción floral in vitro.

Espec ie Fotoperíodo Referencia

Arabidopsis sp. Osc uridad Roldán et al. (199 9)
Citrus nobilis x C. deliciosa SDP Singh et al. ( 2006)
Cucumis s ativus cv . ‘Marketmore-76’ Luz c onstante Tiss erat y Galletta (1993)
Gentiana triflor a LDP Zhan g y Leung (2002)
Lemna s p. DSDP Mader (2004)
Lept inella nana Luz c onstante Carson y Leung (1994)
Lolium temulentum Luz c onstante McDaniel et al. (1991)
Ly copersic on esc ulentum LDP Sheeja y Mandal (2003)
Nicotiana tabac um LDP Hills on y LaMot te (197 7)
Psy gmorchis pusilla LDP Vaz et al. (2004)
Solanum tuberos um LDP Al-Wareh et al. (1989)
Spinac ia oleracea LDP Al-Khay ri et al. (1991)
Streptocarpus nobilis SDP Simmonds (1982)
Streptocarpus nobilis SDP Handro (1983)
12 Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

Tabla 3. Trabajos en los cuales se relacionan las citoquininas con la inducción floral in vitro.

Especie Citoquinina(s) Explante inicial Referencia

Amaranthus caudatus BAP Semilla Tis serat y Galleta (1988)

Arachis hypogaea BAP Semillas Kachonpadungkitti et al. (1992)

Bambusa arundinacea BAP Nudos Nadgauda et al. (1990)

Bambusa edulis BAP, k inetina, TDZ Nudos Lin y Chang (1998); Lin et al.
(2003, 2004)

Begonia franconis BAP, kinetina Segmentos de tallo Berghoef y Bruinsma (1979)

Begonia teuscheri x B. BAP Hojas y pedúnculo floral Ringe y Nitsch (1968)

cocc inea

Boronia megas tigma BAP Segmentos de tallo Roberts et al. (1993)

Brassica olerac ea k inetina Yemas Kumar et al. (1995)

Citrus nobilis x C. deliciosa BAP, kinetina Óvulos fértiles Singh et al. (2006)

Cymbidium ensifolium BAP, 2iP, TDZ Segmentos de escapo Wang (1988)

floral

Dendrocalamus brandisii BAP Nudos Nadgauda et al. (1990)

Dendrocalamus giganteus BAP, TDZ Yemas laterales Ramanayake et al. (2001)

Dendrocalamus giganteus , BAP Nudos Rout y Das (1994)
Dendrocalamus stric tus,
Bambusa vulgaris

Dendrocalamus hamiltonii BAP Nudos Chambers et al. (1991)

Fagopyrum esculentum k inetina Semilla Kachonpadungkitti et al. (2001)

Fortunella hinds ii BAP, kinetina Entrenudos de tallo y Jumin y Nito (1996)

yemas

Gentiana triflora BAP, kinetina Yemas laterales Zhang y Leung (2000, 2002)

Kalanchoe blos sfeldiana BAP Nudos Dic kens y van Staden (1990)

Kniphofia leucocephala BAP, 2iP, z eatina Yemas laterales Taylor et al. (2005)

Lycopersicon esculentum BAP Callo de hoja y tallo Sheeja y Mandal (2003)

Momordic a charantia BAP, kinetina Ápices Wang et al. (2001)

Murraya paniculata BAP Yemas laterales Jumin y Ahmad (1999)

Nicotiana tabacum k inetina Segmentos de tallo Hillson y LaMot te (1977)

Orychophragmus violaceus z eatina Semilla Luo et al. (2000)

Pass iflora suberosa BAP Hojas, segmentos de tallo Sc orza y Janick (1980)
y z arcillos

Phalaenopsis s p. BAP Estructuras protocórmicas Duan y Yazawa (1995)

Rosa sp. BAP, TDZ, z eatina Ápices Wang et al. (2002)

Streptocar pus nobilis BAP Hojas Simmonds (1982)

Torenia sp. z eatina Segmentos de tallo Tanimoto y Harada (1981)

Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009 13

Hay indicios de que las citoquininas y giberelinas un efecto positivo en la inducción floral en C. intybus,
son exportadas desde las hojas hacia los meristemos aparentemente porque los iones Ag2+ reducen la
durante la inducción floral in vitro en Mormodica capacidad de los receptores de membrana para
charantia (Prakash, 1977), Panax ginseng (Chang y detectar el etileno, lo que inhibe su acción. Esto
Hsing, 1980), Passiflora suberosa (Scorza y Janick, resulta en una autoinhibición en el proceso de
1980), Arabidopsis sp. (Roldán et al., 1999) y biosíntesis del etileno, generando que la SAM quede
Orychophragmus violaceus (Luo et al., 2000). Tanto disponible para la síntesis de poliaminas (Bais et
citoquininas como giberelinas pueden tener un efecto al., 2001).
inductor en fotoperiodos de baja intensidad lumínica
(por debajo de los 34 mM m-2 s-1) en O. violaceus Se ha observado inhibición de la inducción floral in
(Luo et al., 2000) y P. nil (Galoch et al., 2002). Se ha vitro mediante la adición de auxinas en Plumbago
informado que altas concentraciones de citoquininas indica (Nitsch y Nitsch, 1965), Streptocarpus nobilis
o giberelinas (superiores a 5 mg l-1) promueven la (Simmonds, 1982), P. nil (Galoch et al., 2002) y B.
inducción floral pero, a la vez, han inhibido el edulis (Lin et al., 2003). Las auxinas han mostrado
desarrollo de estructuras florales en P. nil (Galoch et ser un poderoso inhibidor de la floración in vitro tanto
al., 2002). en SDPs como en LDPs. En LDPs se ha observado
que la inducción floral se da como resultado de la
Las giberelinas son fundamentales en el proceso de reducción de la concentración de auxinas en el
inducción floral in vitro en condiciones de meristemo. Esto ocasiona un cambio en la relación
fotoperiodicidad no inductiva tal como se ha observado auxina/citoquinina a favor de las citoquininas lo cual
en Bougainvillea sp. cv. ‘San Diego Red´ (Steffen et puede llevar al proceso de floración. Hay dos posibles
al., 1988), Kalanchoe blossfeldiana (Dickens y van explicaciones para este cambio: que algunas auxinas
Staden, 1990), Arabidopsis sp. (Roldán et al., 1999) actúen como inhibidores directos de la floración o
y Zantedeschia sp. (Naor et al., 2004). Además, el que las auxinas desvíen los nutrientes necesarios
efecto de las giberelinas aparenta ser sinérgico con para que ocurra la inducción floral (Dickens y van
el efecto inductor causado por el fotoperíodo en P. Staden, 1990). No obstante, la adición de auxinas
nil (Galoch et al., 2002) y en Olea europaea (Chaari- exógenas parece ser necesaria durante los primeros
Rkhis et al., 2006). estadios del desarrollo floral en Nicotiana tabacum
(Hillson y LaMotte, 1977), Begonia franconis
Las poliaminas putrescina (Put), espermidina (Spd) (Berghoef y Bruinsma, 1979), Torenia sp. (Tanimoto
y espermina (Spm) han sido relacionadas con y Harada, 1981), Solanum tuberosum (Al-Wareh et
diferentes procesos fisiológicos de importancia para al., 1989), Citrus limon (Tisserat et al., 1990),
el desarrollo de la planta, uno de ellos la inducción Brassica oleracea (Kumar et al., 1995), Rosa sp.
floral. Una relación Spd/Spm alta estimula la floración (Wang et al., 2002) y B. edulis (Lin et al., 2003).
in vitro en varias especies (Bais et al., 2001). Los
efectos de la Put suelen ser menores y más variables Aunque generalmente se ha relacionado al ácido
que los de Spd y Spm. Esto sugiere que Put no actúa abscísico (ABA) con inhibición de la inducción floral
per se, sino probablemente como precursor de la (Bernier y Périlleux 2005), en K. blossfeldiana la
Spd (Mader, 2004). presencia de concentraciones bajas de ABA es
indispensable para la floración in vitro. Esto debido
La relación poliaminas/etileno parece estar probablemente al efecto inhibitorio del ABA sobre el
involucrada en la inducción floral in vitro de forma desarrollo vegetativo (Dickens y van Staden, 1990).
contrastante en LDPs y SDPs. En LDPs las
concentraciones endógenas de etileno tienden a ser Nitrógeno
inferiores a las de poliaminas y el caso contrario se
da en las SDPs (Bais et al., 2001; Mader, 2004). La La relación carbono/nitrógeno juega un papel
Put puede inducir la conversión de S-adenosil-L- importante en la inducción floral in vitro.
metionina (SAM) en Spd en Cichorium intybus, lo Concentraciones altas de nitrógeno se han
cual reduce la síntesis de etileno (Bais et al., 2001). relacionado con el desarrollo vegetativo de explantes
En Lemna sp., la relación a favor del etileno permite de S. nobilis (Simmonds, 1982) y del cruce Doritis
que la enzima S-adenosil-L-metionina descarboxilasa pulcherrima x Kingiella philippiensis (Duan y Yazawa,
(SAMDC) catalice la síntesis de etileno a partir de 1994). De la misma forma, hay indicios de que entre
SAM (Mader, 2004). mayor sea la concentración de nitrógeno en el medio
de cultivo, menor es el porcentaje de explantes que
Reducciones en las emisiones de etileno pueden ser desarrollan flores en Torenia sp. (Tanimoto y Harada,
resultado directo de la aplicación exógena de 1981), S. nobilis (Simmonds, 1982), O. violaceus
poliaminas. Las poliaminas (Put, Spd y Spm) pueden (Luo et al., 2000) y F. esculentum (Kachonpadungkitti
actuar como inhibidores de SAMDC; mientras que et al., 2001). Una relación alta en sacarosa y baja
el etileno puede bloquear el metabolismo de las en nitrógeno estimuló el desarrollo reproductivo en
poliaminas en las plantas, reprimiento la inducción Torenia sp. (Tanimoto y Harada, 1981), Perilla crispa
floral (Bais et al., 2001). El AgNO3 ha mostrado tener (Wada y Totsuka, 1982), P. nil (Ishioka et al., 1991),
14 Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

D. pulcherrima x K. philippiensis (Duan y Yazawa, se ha observado en S. nobilis (Simmonds, 1982),

1994) y M. charantia (Wang et al., 2001). No Leptinella nana (Carson y Leung, 1994), Bambusa
obstante, si las concentraciones de nitrógeno son sp. (John y Nadgauda, 1999), F. esculentum
muy bajas, el explante (vegetativo o reproductivo) no (Kachonpadungkitti et al., 2001) y el cruce Citrus
se desarrolla eficientemente (Hillman y Posner, 1971; nobilis x C. deliciosa (Singh et al., 2006).
Simmonds, 1982; Dickens y van Staden, 1988; Luo
et al., 2000). Se sabe muy poco sobre la relación que tiene el
almidón con la inducción floral. Eimert et al. (1995)
Concentración de sacarosa sugirieron que la acumulación de almidón produce
cambios en el metabolismo del nitrógeno durante la
La participación de carbohidratos en el control de la inducción de este proceso. Además, postularon la
floración ha sido discutida por varias décadas. La existencia de vías metabólicas regulatorias comunes
inducción floral es resultado de un aumento en el entre el catabolismo del almidón y la inducción floral
transporte de asimilados, especialmente sacarosa, en Arabidopsis sp. in vitro. Por otra parte, el acúmulo
hacia los meristemos apicales. Se ha observado que de almidón normalmente está relacionado con
la concentración de sacarosa aumenta en los retrasos en la floración de Lollium temulentum in vivo
meristemos apicales durante la inducción floral en (Perilleux y Bernier, 1997).
varias especies, incluyendo LDPs, SDPs o plantas
que dependen de cambios en la temperatura para La relación sacarosa/giberelinas presenta una nueva
iniciar los procesos de floración. En PSF dicho ruta para la interpretación de la inducción floral. En
transporte se da en estadios iniciales de la Fuchsia hybrida se observó que conforme aumente
inducción floral, en los cuales no es posible que la concentración de sacarosa y el nivel de giberelinas
dicha movilización sea a causa de un aumento en en el meristemo, este inicia el desarrollo reproductivo.
las necesidades metabólicas del meristemo, tanto Si solo se aumenta el nivel de giberelinas en el
en condiciones in vivo (Bernier et al., 1993; meristemo, el resultado es la elongación del tallo y
Perilleux y Bernier, 1997) como in vitro (Roldán et la reducción de los niveles de sacarosa en el
al., 1999). meristemo (King y Ben-Tal, 2001).

El transporte de sacarosa de las hojas hacia los Temperatura

meristemos durante la inducción floral ha hecho
pensar que este compuesto podría ser la señal de Muchas plantas en fase de crecimiento vegetativo
estímulo para la floración. Aumentos en la no pueden iniciar la producción de estructuras
concentración de sacarosa en SDPs pueden inducir reproductivas in vitro sin un apropiado tratamiento
a la floración. En PSF in vitro, una simple exposición de vernalización (Luo et al., 2000). En varias especies
a fotoperíodos inductivos resultó en un rápido aumento frutales, períodos con bajas temperaturas son
en los niveles de sacarosa en los productos requeridos para estimular la inducción floral. Durante
transportados desde la hoja hacia los meristemos la floración in vitro en Citrus, tratamientos con bajas
(Scorza, 1982; Roldán et al., 1999). Sin embargo, temperaturas permitieron la transformación de los
en LDPs la floración se puede lograr mediante meristemos vegetativos en florales (Tisserat et al.,
fotoperíodos inductivos que estimulan la floración sin 1990; García-Luis et al., 1992).
necesidad de aumentar los niveles de sacarosa en
los meristemos. Lo mismo ocurre en DSDPs, en Algunos genes que actúan independientemente de
donde fotoperíodos prolongados de baja intensidad la regulación fotoperíodica (FCA, FPA, FVE, FY o
inducen el estímulo de floración sin aumentar las LD) se han considerado de gran importancia para
concentraciones de sacarosa en los meristemos la inducción floral durante fotoperíodos no
(Roldán et al., 1999). inductivos. En muchos casos, este efecto puede
ser sustituido por tratamientos de vernalización.
Las discrepancias entre los diferentes sistemas En plantas susceptibles a la vernalización, la
de PFS (SDPs, LDPs y DSDPs) en cuanto al represión de la floración es causada por genes
transporte de sacarosa desde las hojas hacia los tales como FRI, FLC y TFL, los cuales promovieron
meristemos y la posibilidad de inducción floral sin el crecimiento vegetativo y evitaron el desarrollo
necesidad de aumento en los niveles de sacarosa de estructuras reproductivas en Arabidopsis sp.
podría indicar que la presencia de sacarosa en el (Roldán et al., 1999).
meristemo no está relacionada directamente con
la inducción floral, sino más bien con el desarrollo En Phalaenopsis, tratamientos de vernalización (los
de las estructuras florales in vitro (Scorza, 1982) cuales normalmente pueden estimular la floración in
o in vivo (Bernier et al., 1993; Perilleux y Bernier, vivo) no promovieron la inducción floral in vitro (Duan
1997; King y Ben-Tal, 2001). Sin embargo, un y Yazawa, 1995), lo cual sugiere que las condiciones
aumento en la concentración de sacarosa en el para la inducción floral no siempre son similares en
medio de cultivo sí puede aumentar el porcentaje cultivo in vitro a las mostradas en crecimiento ex
de explantes que desarrollan flores in vitro. Esto vitro.
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009 15

Aireación y gelificación CONCLUSIONES

La influencia de una buena aireación en medios de Las ventajas que presenta el cultivo in vitro para el
cultivo líquidos para el desarrollo de la floración ha estudio de la inducción floral radican en la facilidad
sido estudiada, principalmente en relación con la para aplicar diversos estímulos que induzcan o
reducción del fenómeno de la hiperhidricidad. No se inhiban este fenómeno sin involucrar las variantes
ha informado la ocurrencia de floración in vitro en ambientales (de Fossard, 1974; Scorza, 1982). En
cultivos hiperhídricos, lo que podría sugerir que el los últimos años, los estudios realizados in vitro han
proceso de hiperhidricidad inhibe la inducción floral, buscado establecer un modelo eficiente, reproducible
así como inhibe otros procesos morfogenéticos in y simple para la inducción floral. Lo anterior con el
vitro (Scorza, 1982). Se ha indicado que un aumento fin de facilitar estudios a nivel molecular y bioquímico
en la concentración del agente gelificante en el medio de los procesos involucrados (inactivación, sobre-
de cultivo puede favorecer la producción de flores in expresión, interacción entre genes y factores de
vitro en Cucumis sativus cv. ‘Marketmore-76’ (Tisserat transcripción). A nivel de aplicación práctica, podría
y Galleta, 1993) y F. esculentum (Kachonpadungkitti retardarse la floración de cultivos que no requieran
et al., 2001). desarrollo reproductivo, inducir floración para acortar
procesos de fitomejoramiento y reproducción, prevenir
EFECTO DEL GENOTIPO EN LA INDUCCIÓN o reducir la producción de agentes alergénicos, así
FLORAL IN VITRO como controlar la producción y diseminación de polen
en plantas transgénicas; sin olvidar el potencial uso
Se ha observado un efecto variable del genotipo en comercial de las plantas ornamentales floreadas in
la inducción floral in vitro. Por un lado, diferentes vitro (Nadgauda et al., 1990; Roldán et al., 1999;
cultivares de Perilla crispa (Wada y Totsuka, 1982), Wang et al., 2002; Laurie, 2004).
Amaranthus sp. (Tisserat y Galleta, 1988), Solanum
tuberosum (papa) (Al-Wareh et al., 1989), Arachis REFERENCIAS
hypogaea (maní) (Kachonpadungkitti et al., 1992),
Arabidopsis (Roldán et al., 1999), Rosa sp. (rosa) Al-Khayri, JM, Huang FH, Morelock TE (1991) In vitro flowering
(Wang et al., 2002), Lycopersicon esculentum in regenerated shoots of spinach. HortScience 26: 1422
(tomate) (Sheeja y Mandal, 2003) y Zantedeschia Al-Wareh, H, Trolinder NR, Goodin JL (1989) In vitro flowering
spp. (cala) (Naor et al., 2004), utilizados en varios of potato. HortScience 24: 827-829
estudios de floración in vitro, no mostraron diferencias
Anitha, S, Kumari BDR (2006) In vitro flowering in Rauvolfia
estructurales en las flores producidas ni en los
tetraphylla L. Pakistan Journal of Biological Sciences 9: 422-
procesos de inducción floral evaluados. 424

Sin embargo, en el caso de las especies Begonia Bais, H, Sudha G, Ravishankar G (2001) Influence of
putrescine, silver nitrate and polyamine inhibitors on the
socotrana, B. sutherlandii, B. evansiana y B.
morphogenetic response in untransformed and transformed
multiflora, así como de las variedades Gloire de tissue of Cichorium intybus and their regenerants. Plant Cell
Lorraine, Regent, Carollina de Lucerna, Comte de Reports 20: 547-555
Miribel, de esta especie, solo B. socotrana y la
Barak, S, Tobin EM, Green RM, Andronis C, Sugano S (2000)
variedad Carollina de Lucerna produjeron flores en
All in good time: the Arabidopsis circadian clock. Trends in
respuesta a tratamientos evaluados in vitro (Ringe Plant Science 5: 517-522
y Nitsch, 1968). La presencia de ácido indol
acético (AIA) en el medio de cultivo pudo haber Bernier, G, Périlleux C (2005) A physiological overview of the
genetics of flowering time control. Plant Biotechnology Journal
inhibido la inducción floral en los meristemos de
3: 316
las otras especies y variedades. En estudios
realizados en F. esculentum, se identificaron Bernier, G, Havelange A, Houssa C, Petitjean A, Lejeune P
diferencias estructurales entre las flores obtenidas (1993) Physiological signals that induce flowering. The Plant
(flores normales y enanas) en las mismas Cell 5: 1147-1155
condiciones de cultivo entre diferentes genotipos Berghoef, J, Bruinsma J (1979) Flower development of Begonia
de esta especie (Kachonpadungkitti et al., 2001). franconis Liebm. IV. Adventitious flower bud formation on
Si bien las flores fueron morfológicamente excised inflorescence pedicels in vitro. Zeitschrift für
idénticas, la alta concentración de sacarosa pudo Pflanzenphysiologie 94: 407-416
actuar como un inhibidor del desarrollo de los Britto, SJ, Natarajan E, Arockiasamy DI (2003) In vitro flowering
meristemos florales. Por otra parte, de seis and shoot multiplication from nodal explants of Ceropegia
variedades de olivo (O. europaea) evaluadas por bulbosa Roxb. var. bulbosa. Taiwania 48: 106-111
Chaari-Rkhis et al. (2006), solo la variedad Chemlali
no presentó inducción floral in vitro. Esto Carson, AJ, Leung DWM (1994) In vitro flowering and
propagation of Leptinella nana L., an endangered plant. New
probablemente se debió a que el medio de cultivo Zealand Journal of Botany 32: 79-83
(bajo en nitrógeno) y las concentraciones evaluadas
de AG3 (1, 2 y 10 mg l-1) no indujeron el estímulo Chaari-Rkhis, A, Maalej M, Ouled-Messaoud SO, Drira N (2006)
deseado en este cultivar. In vitro vegetative growth and flowering of olive tree in
16 Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

response to GA 3 treatment. African Journal of Biotechnology García-Luis, A, Kanduser M, Santamarina P, Guardiola JL

5: 2097-2302 (1992) Low temperature influence on flowering in Citrus. The
separation of inductive and bud dormancy releasing effects.
Chambers, SM, Heuch JHR, Pirrle A (1991) Micropropagation Physiologia Plantarum 86: 648-652
and in vitro flowering of bamboo Dendrocalamus hamiltonii
Munro. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 27: 45-48 Handro, W (1983) Effects of some growth regulators on in vitro
flowering of Streptocarpus nobilis. Plant Cell Reports 2: 133-136
Chang, C, Chang WC (2003) Cytokinins promotion of
flowering in Cymbidium ensifolium var. misericors in vitro. Hayama, R, Coupland G (2003) Shedding light on the circadian
Plant Growth Regulation 39: 217-221 clock and the photoperiodic control of flowering. Current
Opinion in Plant Biology 6: 13-19
Chang, W, Hsing Y (1980) In vitro flowering of embryoids
derived from mature root callus of ginseng (Panax ginseng). Hee, KH, Loh CS, Yeoh HH (2007) Early in vitro flowering and
Nature 284: 341-342 seed production in culture in Dendrobium Chao Praya Smile
(Orchidaceae). Plant Cell Reports 26: 2055-2062
de Fossard, R (1974) Flower initiation in tissue and organ
culture. En: Street, H (Ed) Tissue culture and plant science, Hillman, WS, Posner HB (1971) Ammonium ion and the flowering
pp. 193-212. Academic Press. Londres of Lemna perpusilla. Plant Physiology 47: 586-587

Dewir, YH, Chakrabarty D, Ali MB, Singh N, Hahn EJ, Paek Hillson, TD, LaMotte CE (1977) In vitro formation and
KY (2007) Influence of AG 3, sucrose and solid medium/ development of flower buds on tobacco stem explants. Plant
bioreactor culture on in vitro flowering of Spathiphyllum Physiology 60: 881-884
and association of glutathione metabolism. Plant Cell, Tissue
and Organ Culture 90: 225-235 Ishioka, N, Tanimoto S, Harada H (1991) Roles of nitrogen and
carbohydrate in flower-bud formation in Pharbitis apex
Dewir, YH, Chakrabarty D, Hahn EJ, Datta SK, Paek KY cultures. Journal of Plant Physiology 138: 573-576
(2008) Kinetics of nutrient utilization and photosynthetic
enzyme activities during floral versus vegetative John, CK, Nadgauda RS (1999) In vitro-induced flowering in
differentiation of Spathiphyllum in air-lift bioreactor cultures. bamboos. In Vitro Cellular and Developmental Biology-Plant
Plant Growth Regulation 54: 157-164 35: 309-315

Dickens, CWS, van Staden J (1985) In vitro flowering and Joshi, M, Nadgauda RS (1997) Cytokinins and in vitro induction
fruiting of soybean explants. Journal of Plant Physiology of flowering in bamboo: Bambusa arundinacea (Retz.) Willd.
120: 83-86 Current Science 73: 523-526

Dickens, CWS, van Staden J (1988) The in vitro flowering Jumin, HB, Ahmad M (1999) High-frequency in vitro flowering of
of Kalanchoe blossfeldiana Poellniz I. Role of culture Murraya paniculata (L.) Jack. Plant Cell Reports 18: 764-768
conditions and nutrients. Journal of Experimental Botany
39: 461-471 Jumin, HB, Nito N (1996) In vitro flowering of Fortunella hindsii
(Champ.). Plant Cell Reports 15: 484-488
Dickens, CWS, van Staden J (1990) The in vitro flowering
of Kalanchoe blossfeldiana Poellniz II. The effect of growth Kachonpadungkitti, Y, Hisajima S, Arai Y (1992) Life cycle of
regulators and gallic acid. Plant and Cell Physiology 31: 757- peanut (Arachis hypogaea L.) plant in vitro. Bioscience,
762 Biotechnology and Biochemistry 56: 543-546

Duan, JX, Yazawa S (1994) Induction of floral development Kachonpadungkitti, Y, Romchatngoen S, Hasegaw K, Hisajima
in x Doriella tiny (Doritis pulcherrima x Kingiella S (2001) Efficient flower induction from cultured buckwheat
philippinensis) in vitro and in vivo. Scientia Horticulturae (Fagopyrum esculentum L.) node segments in vitro. Plant
59: 253-261 Growth Regulation 35: 37-45

Duan, JX, Yazawa S (1995) Floral induction and Kerbauy, GB (1984) In vitro flowering of Oncidium varicosum
development in Phalaenopsis in vitro. Plant Cell, Tissue and mericlones (Orchidaceae). Plant Science Letters 35: 73-75
Organ Culture 43: 71-74
King, RW, Ben-Tal Y (2001) A florigenic effect of sucrose in
Eimert, K, Wang SM, Lue WL, Chen J (1995) Monogenic Fuchsia hybrida is blocked by gibberellin-induced assimilate
recessive mutations causing both late floral initiation and competition. Plant Physiology 125: 488-496
excess starch accumulation in Arabidopsis. The Plant Cell
7: 1703-1712 King, RW, Moritz T, Evans LT, Junttila O, Herlt AJ (2001) Long-
day induction of flowering in Lolium temulentum involves
Ferreira, W de M, Kerbauy GB, Kraus JE, Pescador R, Suzuki sequential increases in specific gibberellins at the shoot apex.
RM (2006) Thidiazuron influences the endogenous levels of Plant Physiology 127: 624-632
cytokinins and IAA during the flowering of isolated shoots
of Dendrobium. Journal of Plant Physiology 163: 1126-1134 Knudson, L (1946) A new nutrient solution for orchid seed
germination. American Orchid Society Bulletin 15: 214-217
Franklin, G, Pius PK, Ignacimuthu S (2000) Factors affecting
in vitro flowering and fruiting of green pea (Pisum sativum Kostenyuk, I, Oh BJ, So IS (1999) Induction of early flowering
L.). Euphytica 115: 65-73 in Cymbidium niveo-marginatum Mak in vitro. Plant Cell Reports
19: 1-5
Galoch, E, Czaplewska J, Burkacka-Laukajtys E, Kopcewicz
J (2002) Induction and stimulation of in vitro flowering of Kumar, VA, Kumar A, Kumar J (1995) In vitro flowering and
Pharbitis nil by cytokinin and gibberellin. Plant Growth pod formation in cauliflower (Brassica oleracea var. botrytis).
Regulation 37: 199-205 Current Science 69: 543-545

Gamborg, OL, Miller LA, Ojima K (1968) Nutrient requirements Laurie, D (2004) Flowering time. En: Christou, P y Klee, H
of suspension cultures of soybean root cells. Experiment (Eds). Handbook of Plant Biotechnology (Vol 1), pp. 659-671.
of Cell Research 50: 151-158 Wiley, Chichester
Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009 17

Liang, OP, Keng CL (2006) In vitro plant regeneration, flowering Nadgauda, RS, John CK, Parasharami VA, Joshi MS,
and fruiting of Phyllanthus niruri L. (Euphorbiaceae). Mascarenhas AF (1997) A comparison of in vitro with in vivo
International Journal of Botany 2: 409-414 flowering in bamboo: Bambusa arundinacea. Plant Cell, Tissue
and Organ Culture 48: 181-188
Lin, CS, Chang WC (1998) Micropropagation of Bambusa
edulis through nodal explants of field-grown culms and Nair, AK, Dilip ND, Subhash PS (2007) High-frequency in vitro
flowering of regenerated plantlets. Plant Cell Reports 17: flowering in six species of Ceropegia. Journal of Plant Biology
617-620 50: 374-377

Lin, CS, Lin CC, Chang WC (2003) In vitro flowering of Bambusa Naor, V, Kigel J, Ziv M (2004) Hormonal control of inflorescence
edulis and subsequent plantlet survival. Plant Cell, Tissue and development in plantlets of calla lily (Zantedeschia spp.) grown
Organ Culture 72: 71-78 in vitro. Plant Growth Regulation 42: 7-14

Lin, CS, Lin CC, Chang WC (2004) Effect of thidiazuron on Nitsch, JP, Nitsch C (1965) Néoformation de fleurs in vitro
vegetative tissue-derived somatic embryogenesis and chez une espèce de jours courts: Plumbago indica L. Annales
flowering of bamboo Bambusa edulis. Plant Cell, Tissue and de Physiologie Vegetale 7: 251-256
Organ Culture 76: 75-82
Peeters, AJM, Gerards W, Barendse GWM, Wullems GJ (1991)
Lin, CS, Liang CJ, Hsaio HW, Lin MJ, Chang, WC (2007) In vitro In vitro flower bud formation in tobacco: interaction of
flowering of green and albino Dendrocalamus latiflorus. New hormones. Plant Physiology 97: 402-408
Forests 34: 177- 186
Perilleux, C, Bernier G (1997) Leaf carbohydrate status in
Lloyd, G, McCown B (1980) Commercially –feasible Lolium temulentum during the induction of flowering. New
micropropagation of montain laurel, Kalmia latifolia, by use of Phytologist 135: 59-66
shoot-tip culture. Combined Proceedings of the International
Plant Propagators Society 30: 421-442 Perilleux, C, Bernier G, Kinet JM (1994) Circadian rhythms and
the induction of flowering in the long-day grass Lolium
Luo, P, Ye Q, Lan Z (2000) A study on floral biology of seedlings temulentum L. Plant, Cell and Environment 17: 755-761
in vitro in Orychophragmus violaceus: Induction of flowers in
seedlings of O. violaceus cultured in vitro. Plant Cell, Tissue Pirson, A, Seidel F (1950) Zell- und stoffwechselphysiologische
and Organ Culture 63: 73-75 Untersuchungen an der Wurzel von Lemna minor L. unter
besonderer Berücksichtigung von Kalium- und Kalziummangel.
Mader, JC (2004) Differential in vitro development of Planta 38: 431-473
inflorescences in long and short day Lemna spp.: Involvement
of ethylene and polyamines. Journal of Plant Physiology 161: Prakash, G (1977) Plant growth regulators and sex expression
653-663 in flower buds of Momordica charantia in vitro. Current
Science 46: 328-330
Maheshwari, P, Kumar A (2006) Organogenesis, shoot
regeneration, and flowering response of Vernonia cinerea Qiao, Q, Xing F-W, Xiao Y-P, Chen H-F (2009) Somatic
to different auxin/cytokinin combinations. In vitro Cellular embryogenesis and in vitro flowering in Saposhnikovia
and Developmental Biology-Plant 42: 589-595 divaricata. Journal of Plant Growth Regulation 28: 81-86

Makunga, NP, van Staden J (2008) An efficient system for Rajasekaran, K, Mullins MG, Nair Y (1983) Flower formation in
the production of clonal plantlets of the medicinally important vitro by hypocotyl explants of cucumber (Cucumis sativus
aromatic plant: Salvia africana-lutea L. Plant Cell, Tissue L.). Annals of Botany 52: 417-420
and Organ Culture 92: 63-72
Ramanayake, SMSD, Wanniarachchi WAVR, Tennakoon TMA
McDaniel, CN King RW, Evans LT (1991) Floral determination (2001) Axillary shoot proliferation and in vitro flowering in an
and in vitro floral differentiation in isolated shoot apices of adult giant bamboo, Dendrocalamus giganteus Wall. Ex Munro.
Lolium temulentum. Planta 182: 9-16 In Vitro Cellular and Developmental Biology-Plant 37: 667–671

Metzger, JD (1987) Hormones and reproductive development. Reed, JW, Foster KR, Morgan PW, Chory J (1996) Phytochrome
En: Davies, PJ (Ed) Plant hormones and their role in plant B affects responsiveness to gibberellins in Arabidopsis. Plant
growth and development, pp. 431-462. Martinus Nijhoff, Physiology 112: 337-342
Dordrecht
Reid, R, Jones H, Smith H (2004) Phytochromes -
Molina-Torres, J, Laidman DL, Gaunt JK (1989) The influence Biotechnological prospects. En: Christou, P y Klee, H (Eds)
of photoperiod on incorporation of precursors into Handbook of Plant Biotechnology (Vol 1), pp. 725-737, Wiley,
tocopherols and plastoquinone in Xanthium strumarium L. Chichester.
New Phytologist 111: 397-401
Ringe, F, Nitsch JP (1968) Conditions leading to flower formation
Murashige, T, Skoog F (1962) A revised medium for rapid on excised Begonia fragments cultured in vitro. Plant and Cell
growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiology 9: 639-652
Physiologia Plantarum 15: 473-497
Roberts, NJ, Luckman GA, Menary RC (1993) In vitro flowering
Murashige, T, Tucker D (1969) Growth factor requirements of Boronia megastigma Nees. and the effect of 6-
of citrus culture. Proceedings of the 1 st International Citrus benzylaminopurine. Plant Growth Regulation 12: 117-122
Symposium 3: 1155-1161
Roldán, M, Gómez-Mena C, Ruiz-García L, Salinas J, Martínez-
Murthy, KSR, Ramulu DR, Rao JC, Emmanuel S, Pullaiah T Zapater JM (1999) Sucrose availability on aerial part of the
(2006) In vitro flowering of Spathoglottis plicata Bl. plant promotes morphogenesis and flowering of Arabidopsis
(Orchidaceae). Phytomorphology 56: 117-120 in the dark. The Plant Journal 20: 581-590

Nadgauda, RS, Parasharami, VA y Mascarenhas, AF (1990) Rout, GR, Das P (1994) Somatic embryogenesis and in vitro
Precocious flowering and seeding behavior in tissue cultured flowering of 3 species of bamboo. Plant Cell Reports 13: 683-
bamboos. Nature 344: 335-336 686
18 Biotecnología Vegetal Vol. 9, No. 1, 2009

Rugini, E (1984) In vitro propagation of some olive (Olea Taylor, NJ, Light ME, van Staden J (2005) In vitro flowering of
europaea Savatina L.) cultivars with different rootability, and Kniphofia leucocephala: influence of cytokinins. Plant Cell,
medium development using analytical data from developing Tissue and Organ Culture 83: 327-333
shoots and embryos. Scientia Horticulturae 24: 123-134
Taylor, NJ, Light ME, van Staden J (2007) Monosaccharides
Sankhla, D, Davis TD, Sankhla N, Upadhyaya A (1994) In vitro promote flowering in Kniphofia leucocephala in vitro. Plant
production of flowering shoots in ‘German Red’ carnation: effect Growth Regulation 52: 73-79
of uniconazole and gibberellic acid. Plant Cell Reports 13: 514-
518 Tee, CS, Maziah M, Tan CS (2008) Induction of in vitro flowering
in the orchid Dendrobium Sonia 17. Biologia Plantarum 52:
Saritha, KV, Naidu CV (2007) In vitro flowering of Withania 723-726
somnifera Dunal.-An important antitumor medicinal plant. Plant
Science 172: 847-851 Tisserat, B, Galletta PD (1988) In vitro flowering in Amaranthus.
HortScience 23: 210-212
Saxena, SN, Kaushik N, Sharma R (2008) Effect of abscisic
acid and proline on in vitro flowering in Vigna aconitifolia. Tisserat, B, Galletta PD (1993) Production of cucumber fruits
Biologia Plantarum 52: 181-183 from the culture of ´Marketmore-76´ plantlet. Plant Cell Reports
13: 37-40
Scorza, R (1982) In vitro flowering. Horticultural Reviews 4:
106-127 Tisserat, B, Galletta PD, Jones D (1990) In vitro flowering from
Citrus limon lateral buds. Journal of Plant Physiology 136: 56
Scorza, R, Janick J (1980) In vitro flowering of Passiflora –60
suberosa L. Journal of the American Society for Horticultural
Science 105: 892-897 Tiwari, S, Tuli R (2008) Factors promoting efficient in vitro
regeneration from de-embryonated cotyledon explants of
Sharma, A, Kumar V, Giridhar P, Ravishankar GA (2008) Arachis hypogaea L. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 92:
Induction of in vitro flowering in Capsicum frutescens under 15-24
the influence of silver nitrate and cobalt chloride and pollen
transformation. Electronic Journal of Biotechnology 11: 1-6 Vacin, E, Went F (1949) Some pH changes in nutrient solution.
Botanic Gardens Conservation News 110: 605-613
Sheeja, TE, Mandal AB (2003) In vitro flowering and fruiting in
tomato (Lycopersicon esculentum). Asia Pacific Journal of Vaz, APA, Figueiredo-Ribeiro RCL, Kerbauy GB (2004)
Molecular Biology and Biotechnology 11: 37-42 Photoperiod and temperature effects on in vitro growth and
flowering of P. pusilla, an epiphytic orchid. Plant Physiology
Sim, GE, Loh CS, Goh CJ (2007) High frequency early in vitro and Biochemistry 42: 411-415
flowering of Dendrobium Madame Thong-In (Orchidaceae).
Plant Cell Reports 26: 383-393 Virupakshi, S, Manjunatha BR, Naik GR (2002) In vitro flower
induction in callus from a juvenile explant of sugarcane,
Sim, GE, Loh JG, Loh CS (2008) Induction of in vitro flowering Saccharum officinarum L., Var. CoC 671. Current Science 83:
in Dendrobium Madame Thong-In (Orchidaceae) seedlings is 1195-1197
associated with increase in endogenous N6-(Ä2-isopentenyl)-
adenine (iP) and N6-(Ä2-isopentenyl)-adenosine (iPA) levels. Vu, NH, Anh PH, Nhut DT (2006) The role of sucrose and
Plant Cell Reports 27: 1281-1289 different cytokinins in the in vitro floral morphogenesis of rose
(hybrid tea) cv. «First Prize». Plant Cell, Tissue and Organ
Simmonds, J (1982) In vitro flowering on leaf explants of Culture 87: 315-320
Streptocarpus nobilis. The influence of culture medium
components on vegetative and reproductive development. Wada, K, Totsuka T (1982) Long-day flowering of Perilla plants
Canadian Journal of Botany 60: 1461-1468 cultured in nitrogen-poor media. Plant and Cell Physiology 23:
977-985
Singh, B, Sharma S, Rani G, Virk GS, Zaidi AA, Nagpal A (2006)
In vitro flowering in embryogenic cultures of Kinnow mandarin Wang, X (1988) Tissue culture of Cymbidium: Plant and flower
(Citrus nobilis Lour x C. Deliciosa Tenora). African Journal induction in vitro. Lindleyana 3: 184-189
of Biotechnology 5: 1470-1474
Wang, S, Tang L, Chen F (2001) In vitro flowering of bitter
Sivanesan, I, Jeong BR (2007) Micropropagation and in vitro melon. Plant Cell Reports 20: 393-397
flowering in Pentanema indicum Ling. Plant Biotechnology 24:
527-532 Wang, GY, Yuan, MF, Hong Y (2002) In vitro flower induction
in roses. In Vitro Cellular and Developmental Biology-Plant 38:
Steffen, JD, Sachs RM, Hackett WP (1988) Bougainvillea 513-518
inflorescence meristem development: comparative action of
GA3 in vivo and in vitro. American Journal of Botany 75: 403- Zhang, Z, Leung DWM (2000) A comparison of in vitro with in
408 vivo flowering in gentian. Plant Cell, Tissue and Organ Culture
63: 223-226
Tang, AF, Cappadocia M, Byrne D (1983) In vitro flowering in
cassava (Manihot esculenta Crantz). Plant Cell, Tissue and Zhang, Z, Leung DWM (2002) Factors influencing the growth
Organ Culture 2: 199-206 of micropropagated shoots and in vitro flowering in gentian.
Plant Growth Regulation 36: 245-252
Tanimoto, S, Harada H (1981) Effects of IAA, zeatin, ammonium
nitrate and sucrose on the initiation and development of flower Ziv, M, Naor V (2006) Flowering of geophytes in vitro.
buds in Torenia stem segments cultured in vitro. Plant and Cell Propagation of Ornamental Plants 6: 3-16
Physiology 22: 1553-1560