2130 TURBIDEZ *

2130 B. Método nefelométrico

1. Discusión general

a. Principio: Este método se basa en una comparación de la intensidad de la luz dispersada por la
muestra en condiciones definidas con la intensidad de la luz dispersada por una suspensión
estándar de referencia en las mismas condiciones. Cuanto mayor sea la intensidad de la luz
dispersa, mayor será la turbidez. El polímero de formacina se utiliza como suspensión de
referencia estándar primaria. La turbidez de una concentración específica de suspensión de
formazina se define como 4000 NTU.

b. Interferencia: La turbidez se puede determinar para cualquier muestra de agua que esté libre de
escombros y sedimentos gruesos que se depositen rápidamente. La cristalería sucia y la presencia
de burbujas de aire dan resultados falsos. El "color verdadero" (es decir, el color del agua debido a
sustancias disueltas que absorben la luz) hace que la turbidez medida sea baja. Este efecto
generalmente no es significativo en agua tratada.

C. Control de calidad (CC): Las prácticas de CC consideradas como parte integral de cada método
se resumen en las Tablas 2020: I y II.

2. Aparato

a. Nefelómetro de laboratorio o de proceso que consiste en una fuente de luz para iluminar la
muestra y uno o más detectores fotoeléctricos con un dispositivo de lectura para indicar la
intensidad de la luz dispersa a 90 ° del camino de la luz incidente. Utilice un instrumento diseñado
para minimizar la luz parásita que llega al detector en ausencia de turbidez y para estar libre de
desviaciones significativas después de un breve período de calentamiento. La sensibilidad del
instrumento debería permitir detectar diferencias de turbidez de 0.02 NTU o menos en el rango
más bajo en aguas que tienen una turbidez de menos de 1 NTU. Pueden ser necesarios varios
rangos para obtener una cobertura adecuada y una sensibilidad suficiente para turbidez baja. Las
diferencias en el diseño del instrumento causarán diferencias en los valores medidos de turbidez
aunque se utilice la misma suspensión para la calibración. Para minimizar tales diferencias,
observe los siguientes criterios de diseño:

1) Fuente de luz: lámpara de filamento de tungsteno que funciona a una temperatura de color
entre 2200 y 3000K.

2) Distancia recorrida por la luz incidente y la luz dispersa dentro del tubo de muestra. El total no
debe exceder los 10 cm.

3) Ángulo de aceptación de la luz por el detector: centrado a 90 ° con respecto a la trayectoria de

la luz incidente y que no exceda los 30 ° desde 90 °. El sistema de filtro y detector, si se utiliza,
deberá tener una respuesta de pico espectral entre 400 y 600 nm.

b. Cubetas de muestra: Utilice cubetas de muestra o tubos de vidrio o plástico transparente e

incoloro. Mantenga las celdas escrupulosamente limpias, tanto por dentro como por fuera, y
deséchelas si están rayadas o grabadas. Nunca los manipule donde el haz de luz del instrumento
los alcance. Utilice tubos con suficiente longitud extra, o con una funda protectora, para que
puedan manipularse correctamente. Llene las celdas con muestras y estándares que se hayan
agitado completamente y deje suficiente tiempo para que escapen las burbujas. Limpie las celdas
de muestra mediante un lavado a fondo con jabón de laboratorio por dentro y por fuera, seguido
de múltiples enjuagues con agua destilada o desionizada; Deje que las células se sequen al aire.
Manipule las cubetas de muestra solo por la parte superior para evitar suciedad y huellas
dactilares en el paso de la luz.

Las celdas pueden recubrirse por fuera con una fina capa de aceite de silicona para enmascarar
pequeñas imperfecciones y rayones que pueden contribuir a la luz parásita. Utilice aceite de
silicona con el mismo índice de refracción que el vidrio. Evite el exceso de aceite porque puede
atraer suciedad y contaminar el compartimento de muestras del instrumento. Con un paño suave
que no suelte pelusa, esparza el aceite uniformemente y limpie el exceso. La celda debe parecer
casi seca con poco o ningún aceite visible. Debido a que las pequeñas diferencias entre las celdas
de muestra tienen un impacto significativo en la medición, utilice pares de celdas coincidentes o la
misma celda para la estandarización y la medición de muestras.

3. Reactivos

a. Agua de dilución: el agua de alta pureza provocará cierta dispersión de luz, que los nefelómetros
detectan como turbidez. Para obtener agua de baja turbidez para diluciones, valor nominal 0.02
NTU, pase agua de grado reactivo de laboratorio a través de un filtro con un tamaño de poro lo
suficientemente pequeño para eliminar esencialmente todas las partículas mayores de 0.1 m; * el
filtro de membrana habitual utilizado para los exámenes bacteriológicos no es satisfactorio.
Enjuague el matraz colector al menos dos veces con agua filtrada y deseche los siguientes 200 ml.
Algunas aguas comerciales desmineralizadas embotelladas tienen poca turbidez. Estos pueden
usarse cuando la filtración no es práctica o no se dispone de agua de buena calidad para filtrar en
el laboratorio. Compruebe la turbidez del agua embotellada para asegurarse de que sea inferior al
nivel que se puede alcanzar en el laboratorio.

segundo. Suspensión estándar primaria de formazina:

1) Solución I: disuelva 1.000 g de sulfato de hidracina, (NH2) 2H2SO4, en agua destilada y diluya a
100 ml en un matraz aforado. PRECAUCIÓN: El sulfato de hidracina es un carcinógeno; evite la
inhalación, la ingestión y el contacto con la piel. Las suspensiones de formacina pueden contener
sulfato de hidracina residual.

2) Solución II: disuelva 10,00 g de hexametilentetramina, (CH2) 6N4, en agua destilada y diluya a
100 ml en un matraz aforado.

3) En un matraz, mezcle 5.0 mL de Solución I y 5.0 mL de Solución II. Deje reposar 24 ha 25 3 ° C.

Esto da como resultado una suspensión de 4000 NTU. Transfiera la suspensión de stock a un vidrio
ámbar u otra botella que bloquee la luz ultravioleta para almacenarla. Haga diluciones de esta
suspensión madre. La suspensión de stock es estable hasta por 1 año cuando se almacena
correctamente.
C. Diluir suspensiones de turbidez: Diluir la suspensión estándar primaria de 4000 NTU con agua de
dilución de alta calidad. Preparar inmediatamente antes de usar y desechar después de usar.

d. Estándares secundarios: los estándares secundarios son estándares que el fabricante (o una
organización de pruebas independiente) ha certificado y darán resultados de calibración del
instrumento equivalentes (dentro de ciertos límites) a los resultados obtenidos cuando el
instrumento se calibra con el estándar primario (es decir, formazina preparada por el usuario). Se
encuentran disponibles varios estándares secundarios que incluyen: suspensiones de stock
comerciales de formazina de 4000 NTU, suspensiones comerciales de microesferas de copolímero
de estireno-divinilbenceno † y artículos suministrados por los fabricantes de instrumentos, como
cubetas de muestra selladas llenas de suspensión de látex o con partículas de óxido metálico en un
polímero gel. La Agencia de Protección Ambiental de EE. UU .1 designa la formacina preparada por
el usuario, las suspensiones de formazina de stock comercial y las suspensiones comerciales de
estireno-divinilbenceno como "patrones primarios" y reserva el término "patrón secundario" para
los patrones sellados mencionados anteriormente.

Los patrones secundarios elaborados con suspensiones de microesferas de copolímero de

estireno-divinilbenceno son típicamente tan estables como la formazina concentrada y mucho más
estables que la formazina diluida. Estas suspensiones pueden ser específicas del instrumento; por
lo tanto, use solo suspensiones formuladas para el tipo de nefelómetro que se esté usando. Los
estándares secundarios proporcionados por el fabricante del instrumento (a veces llamados
estándares “permanentes”) pueden ser necesarios para estandarizar algunos instrumentos antes
de cada lectura y en otros instrumentos solo como una verificación de calibración para determinar
cuándo es necesaria la calibración con el estándar primario.

Todos los estándares secundarios, incluso los llamados estándares "permanentes", cambian con el
tiempo. Reemplácelos cuando su edad exceda la vida útil. El deterioro se puede detectar midiendo
la turbidez del estándar después de calibrar el instrumento con una nueva suspensión de
formazina o microesferas. Si existe alguna duda sobre la integridad o el valor de turbidez de
cualquier estándar secundario, verifique la calibración del instrumento primero con otro estándar
secundario y luego, si es necesario, con formazina preparada por el usuario. La mayoría de los
patrones secundarios han sido preparados cuidadosamente por su fabricante y, si se utilizan
correctamente, deben coincidir con la formazina. Prepare el patrón primario de formazina solo
como último recurso. La aplicación adecuada de estándares secundarios es específica para cada
marca y modelo de nefelómetro. No es necesario descartar todos los patrones secundarios cuando
la comparación con un patrón primario muestra que su valor de turbidez ha cambiado. En algunos
casos, el patrón secundario simplemente se debe volver a etiquetar con el nuevo valor de
turbidez. Siga siempre las instrucciones del fabricante.

4. Procedimiento

a. Técnicas generales de medición: las técnicas de medición adecuadas son importantes para
minimizar los efectos de las variables del instrumento, así como la luz parásita y las burbujas de
aire. Independientemente del instrumento utilizado, la medición será más exacta, precisa y
repetible si se presta mucha atención a las técnicas de medición adecuadas. Mida la turbidez de
inmediato para evitar cambios de temperatura y que la floculación y sedimentación de partículas
cambien las características de la muestra. Si la floculación es evidente, rompa los agregados
mediante agitación. Evite la dilución siempre que sea posible. Las partículas suspendidas en la
muestra original pueden disolverse o cambiar sus características cuando cambia la temperatura o
cuando la muestra se diluye. Elimine el aire u otros gases atrapados en la muestra antes de la
medición. Preferiblemente desgasifica incluso si no se ven burbujas. Desgasifique aplicando un
vacío parcial, agregando un surfactante no espumoso, usando un baño ultrasónico o aplicando
calor. En algunos casos, se pueden combinar dos o más de estas técnicas para eliminar las
burbujas de forma más eficaz. Por ejemplo, puede ser necesario combinar la adición de un
tensioactivo con el uso de un baño ultrasónico para algunas condiciones severas. Cualquiera de
estas técnicas, si se aplica incorrectamente, puede alterar la turbidez de la muestra; Úselo con
cuidado. Si no se puede aplicar la desgasificación, la formación de burbujas se minimizará si las
muestras se mantienen a la temperatura y presión del agua antes del muestreo.

No elimine las burbujas de aire dejando que la muestra repose por un período de tiempo porque
durante el reposo, las partículas que causan turbidez pueden asentarse y la temperatura de la
muestra puede cambiar. Ambas condiciones alteran la turbidez de la muestra, lo que resulta en
una medición no representativa.

Puede producirse condensación en la superficie exterior de una celda de muestra cuando se mide
una muestra fría en un ambiente cálido y húmedo. Esto interfiere con la medición de la turbidez.
Elimine toda la humedad del exterior de la celda de muestra antes de colocar la celda en el
instrumento. Si se repite el empañamiento, deje que la muestra se caliente ligeramente dejándola
reposar a temperatura ambiente o sumergiéndola parcialmente en un baño de agua tibia durante
un período breve. Asegúrese de que las muestras vuelvan a estar bien mezcladas.

b. Calibración del nefelómetro: siga las instrucciones de funcionamiento del fabricante. Ejecute al
menos un estándar en cada rango de instrumentos que se utilizará. Asegúrese de que el
nefelómetro dé lecturas estables en todos los rangos de sensibilidad utilizados. Siga las técnicas
descritas en las Secciones 2130B.2by 4a para el cuidado y manejo de las celdas de muestra,
desgasificación y tratamiento de la condensación.

C. Medición de la turbidez: Agite suavemente la muestra. Espere hasta que desaparezcan las
burbujas de aire y vierta la muestra en la celda. Cuando sea posible, vierta la muestra bien
mezclada en la celda y sumérjala en un baño ultrasónico durante 1 a 2 so aplique desgasificación al
vacío, lo que provoca la liberación completa de las burbujas. Lea la turbidez directamente desde la
pantalla del instrumento.

d. Calibración de monitores de turbidez continuos: calibre los monitores de turbidez continuos

para turbideces bajas determinando la turbidez del agua que sale de ellos, utilizando un
nefelómetro modelo de laboratorio, o calibre los instrumentos de acuerdo con las instrucciones
del fabricante con estándar primario de formazina o estándar secundario apropiado.
5. Interpretación de los resultados

Informe las lecturas de turbidez de la siguiente manera:

Al comparar las eficiencias del tratamiento de agua, no estime la turbidez más de cerca de lo
especificado anteriormente. Las incertidumbres y discrepancias en las mediciones de turbidez
hacen que sea poco probable que los resultados puedan duplicarse con mayor precisión que la
especificada.