CARACTERIZACIÓN CUALITATIVA DE

CARBOHIDRATOS

RESUMEN:

En el desarrollo de esta práctica se realizara ensayos para identificar

carbohidratos, utilizando diferentes pruebas, que al reaccionar con estos se
puede identificar si son componentes reductores, cetosas, pentosas,
polisacáridos entre otros. Para esto se usa diferentes ensayos como reacción
de benedict, reacción de fehling, la reacción de seliwanof.

Con esta práctica se obtuvo la identificación de diferentes carbohidratos como

glucosa, fructosa, almidón, sacarosa, maltosa, xilosa, arabinosa y
adicionalmente utilizamos una muestra problema que en nuestro caso fue el
jugo de limón, que al ser sometidos a diferentes condiciones y reacciones se
logró identificarlos y clasificarlos.

Palabras claves: carbohidratos glucosa, fructosa, suero, sacarosa, hidrólisis,

reductores, cetosas, reacción.

INTRODUCCION de los monosacáridos que forman

parte de su molécula participan los
En el presente estudio se realizara carbonos anoméricos), por lo que la
ensayos para la clasificación e reacción con el reactivo de Fehling
identificación de glucosa, fructosa, es negativa. Sin embargo, en
almidón, sacarosa, maltosa, xilosa, presencia de HCl y NaOH en
caliente, la sacarosa se hidroliza y
arabinosa y jugo de limón utilizando
se descompone en los
diferentes pruebas, que al monosacáridos que la forman,
reaccionar con estos se puede glucosa y fructosa, que sí son
identificar si son componentes reductores. La prueba de que se ha
reductores, cetosas, polisacáridos verificado la hidrólisis se realiza con
entre otros. Para esto se usa el reactivo de Fehling y, si el
diferentes ensayos como la reacción resultado es positivo, aparecerá un
precipitado rojo1. Otra prueba fue la
de benedict, reacción de fehling, la
reacción de seliwanof en la cual las
reacción de seliwanof cetosas se diferencian de las
aldosas a través de la reacción de
Un ensayo fue la de hidrólisis de la Seliwanoff, puesto que las cetosas
sacarosa y comprobación de sus dan positiva esta reacción, a
diferencia de las aldosas2. La prueba
de Benedict se basa precisamente
en la reacción o no de un azúcar
Componentes en el cual la sacarosa con el ion Cu2+. El reactivo de
es un disacárido que carece de Benedict contiene soluciones de
poder reductor (porque en el enlace carbonato de sodio, sulfato de
cobre, y citrato de sodio. El Na2CO3 N con la ayuda de un pHmetro
confiere a la solución un pH alcalino “hach modelo sension Tm +PH1”,
necesario para que la reacción después se lo ajito durante 2
pueda llevarse a cabo. El citrato de
minutos y se deja en reposo la
sodio mantiene al ion Cu2+ en
solución ya que tiene la propiedad solución durante 10 minutos, se
de formar complejos coloreados pasó a filtrar con cuidado a través
poco ionizados con algunos de los de un papel filtro y se lavó varias
metales pesados. Con el cobre veces la cuajada con agua
produce un complejo de color azul. destilada, con lo que se va a
Si se le agrega al reactivo una trabajar es con el suero obtenido.
solución de azúcar reductor y se
calienta hasta llevar la mezcla a 2. Obtención de los azucares
ebullición, el azúcar en solución del suero
alcalina a elevadas temperaturas se
convertirá en D-gluconato y su ene- Adicionamos el suero obtenido
diol, rompiéndose luego en dos agitándolo suavemente hasta
fragmentos altamente reductores,
obtener un pH de 6.18 Ca(OH)2, al
los cuales con sus electrones
expuestos, reaccionarán con el Cu+ 5%. Calentándolo
+. Se obtiene entonces un azúcar subsecuentemente hasta la
oxidado y dos iones Cu+. ebullición, con una suave y continua
Posteriormente el Cu+ producido agitación, se decantó y se filtró en
reacciona con los iones OH- un papel filtro. Con el suero
presentes en la solución para formar obtenido se realiza las siguiente
el hidróxido de cobre3.
pruebas del numeral 3.
En el presente estudio se realizó los 3. Pruebas coloreadas
anteriores ensayos con el propósito
de identificar y clasificar los
diferentes carbohidratos como la  Benedict
glucosa, fructosa, sacarosa y la
presencia de carbohidratos en el En un tubo de ensayo se colocó 2
suero de la leche. ml del suero más 3 ml de Reactivo
de Benedict, se agitaron las 2
mezclas se pasó a calentar durante
5 minutos hasta observar la
PROCEDIMIENTO aparición de un precipitado rojizo,
amarillo rojizo o coloración verde.
Experimento 1: extracción de
azucares de la leche  Fehling

1. Obtención del suero En otro tubo de ensayo se añadió 1

ml de la solución de Fehling A, y
Se tomaron 200ml de la leche de 1ml de solución Fehling B, más 5 ml
cantina sin hervir, luego se pasó a de Agua destilada, y 5 ml de Suero,
calentar 30°C donde se mantuvo se puso el tubo en una solución de
constante, se ajustó el pH a 4.75 agua hirviendo por 5 minutos. Se
agregándole despacio el HCl, de 0.5 repitió el procedimiento, usando una
solución de glucosa y sacarosa. Se
observa si hubo formación de un
G raf
precipitado rojo indicativo de los ica 1:
azucares reductores.

 Seliwanoff

En un nuevo tubo de ensayo se

puso 5 ml de suero más 5 ml del
Reactivo de Seliwanoff se calentó a
baño Maria por el cual se repite el
procedimiento donde se remplazó
en el suero por 5 ml de fructosa al 5
%. Se observara si hay formación reacción de benedict con suero

de un rojo intenso indicativo de Tabla 1: resultados de la reacción de benedict

cetosas como fructosa. con suero.

RESULTADOS Y ANALISIS DE En la anterior tabla se muestra el color

REULTADOS del suero, en la reacción de benedict.
La prueba de Benedict se la usa para la
Obtención del suero identificación de azúcares
reductores (aquellos que tienen su OH
En la extracción de los azucares se libre del C anomérico), como la lactosa,
procedió a calentar y a ajustar el la glucosa, la maltosa, y celobiosa.4 En
pH, previamente se lo midió con el soluciones alcalinas, pueden reducir el
Phmetro hach modelo sesion tm Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que
+Ph. También se utilizó 17 ml de precipita de la solución alcalina
HCL 0.5M para ajustar el pH como Cu2O de color rojo-naranja; La
aparición de un precipitado amarillo,
obteniendo como resultado:
anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la
Ph =4.75 ph con acido presencia de un azúcar reductor. 5

Luego de agitar por 2 minutos y Esta prueba fue positiva para el

dejar la solución quieta por 10 suero dando una coloración rojo
minutos se filtró cuidadosamente ladrillo, es decir que el suero posee
obteniendo el material filtrado para presencia de azucares reductores.
Obtención de los azucares del El reactivo de Benedict consta de:
suero Sulfato cúprico; Citrato de sodio;
Carbonato Anhidro de Sodio.
Se adiciono el suero obtenido
Además se emplea NaOH para
suavemente hasta que se obtuvo un
alcalinizar el medio.
ph de:
El fundamento de esta reacción
Ph=6.18 ph con hidróxido de
radica en que en un medio alcalino,
calcio Ca(OH)2 5%
el ion cúprico (otorgado por el
1) Prueba de Benedict sulfato cúprico) es capaz de
reducirse por efecto del
grupo Aldehído del azúcar (CHO) a
su forma de Cu+. Este nuevo ion se
observa como un precipitado rojo
ladrillo correspondiente al óxido
cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilita que el
azúcar esté de forma lineal, puesto
que el azúcar en solución forma un
anillo de piranósico o furanósico.
Una vez que el azúcar está lineal,
Tabla 2: resultados de la reacción de fehling con
su grupo aldehído puede reaccionar
suero, glucosa y sacarosa
con el ion cúprico en solución. 5
La reacción es la siguiente: En la anterior tabla se muestra el
color de las sustancias, con el
reactivo de Fehling. El reactivo de
Fehling, también conocido como
Licor de Fehling, es una disolución
descubierta por el químico alemán
Hermann von Fehling y que se
utiliza como reactivo para la
determinación de azúcares

2) PRUEBA DE FEHLING: reductores. Sirve para demostrar la

Grafica 2: prueba de fheling con suero

Grafica 3: prueba de fheling con glucosa

Grafica 4: Reacción de fehling con sacarosa

presencia de glucosa, La sacarosa en nuestro caso el NaOH el ión
es un disacárido que no tiene poder Cu2+ formaría Cu (OH)2 insoluble por
eso añadimos tartrato sódico
reductor sobre el reactivo de
potásico que actúa como
Fehling6. estabilizador al formar un complejo
con el Cu2+2
La reacción será positiva si la
2) PRUEBA DE SELIWANOF:
muestra se vuelve de color rojo-
ladrillo; como en el caso del suero y
la glucosa, así se determinó que
hay presencia de azúcares
reductores, en estas dos sustancias.
La reacción será negativa si la
muestra queda azul, o cambia a un
tono azul-verdoso, como en el caso
de la sacarosa, de este modo
comprobamos que en esta
sustancia no hay presencia de
azúcares reductores. Grafica 5: Prueba de seliwanoff con suero
La reacción de fehling, es una
prueba utilizada para el
reconocimiento de azúcares
reductores. El poder reductor que
pueden presentar los azúcares
proviene de su grupo carbonilo, que
puede ser oxidado a grupo carboxilo
con agentes oxidantes suaves. Si el
grupo carbonilo se encuentra
combinado no puede presentar este
poder reductor.
Los azúcares reductores, en medio
Grafica 6: prueba de seliwanoff con fructosa.
alcalino, son capaces de reducir el
ión Cu2+ de color azul a Cu+ de color
rojo. Para ello el grupo carbonilo del
azúcar se oxida a grupo carboxilo.
En medio fuertemente básico como
 La prueba es negativa para el
suero, no hay visibilidad de color
permanece transparente, es decir
que no hay presencia de cetosas.
Tabla 3: resultados de la reacción de seliwanof
con suero y fructosa La prueba de Seliwanoff es una
prueba química que se usa para
En la anterior tabla se muestra la
distinguir entre aldosas y cetosas.
coloración que presentaron las
Los azúcares son distinguidos a
diferentes sustancias en la reacción
través de su función
de Seliwanof; La prueba de
como cetona o aldehído. Si el
Seliwanof es una reacción para
azúcar contiene un grupo cetona, es
diferenciar cetosas de aldosas;
una cetosa, y si contienen un grupo
aunque ambas dan la reacción, las
aldehído, es una aldosa. Esta
cetosas la dan rápidamente y las
prueba está basada en el hecho de
aldosas lentamente. Está basada en
que, al calentarlas, las cetosas son
la formación de durfural o en un
deshidratadas más rápido que las
derivado de éste y su posterior
aldosas.
condensación con el resorcinol
dando un color rojo intenso para El reactivo consiste

cetosas y rosa para aldosas6. en resorcinol y ácido

clorhídrico concentrado:
La prueba es positiva para la
fructuosa, esto se comprueba por la  La hidrólisis ácida de
formación de una coloración roja polisacáridos y oligosacáridos
da azúcares simples

 Entoneces la cetosa
deshidratada reacciona con el
resorcinol para producir un color
rojo. Es posible que las aldosas
reaccionen produciendo un leve
color rosa.7.
intensa, es decir que hay presencia
de cetosas.
CONCLUSIONES
  Los carbohidratos tienen 2)http://www.biopsicologia.net/Nivel-
estructuras definidas que 3-participacion-plastica-
pueden ser monosacáridos, yfuncional/6.Glucidos.html
disacáridos, polisacáridos y
3)http://www.medvet.una.ac.cr/carre
se los puede identificar
mediante diferentes pruebas ra/mva505_Practica2.pdf
en donde dependiendo de su
estructura indican q tipo de 4) Thomas, M. D. (2004).
carbohidrato es Bioquímica: Libro de Texto con
 Por medio de la extracción de Aplicaciones Clínicas (4° ed).
suero de la leche y las
diferentes pruebas que se Barcelona: Reverté
hicieron se pudo observar
5)http://almez.pntic.mec.es/~mbam0
que tipos de carbohidratos
tiene la leche como son con 000/paginas/LABORATORIOs/azuc
la reacción de benedict y la ares.htm
de fhling la cual nos indica la
presencia de azucares 6) Muñoz E (2006): Propiedades
reductoras. químicas de los azúcares. En
 Y gracias a la prueba de Lozano JA, Tudela J (eds):
seliwanoff se pudo observar Prácticas de bioquímica.
que el suero no tiene cetosas Experimentación y Simulación, 1ª
ni aldosas ya que su color fue Ed. Editorial Síntesis (Madrid,
transparente España).
7)https://docs.google.com/document
BIBLIOGRAFÍA
/d/1GahnYvZEDJYo_e4ObJu_aHilz
1)https://docs.google.com/document d42l22vYeh_rqFL6Y/edit?pli=1
/d/1GahnYvZEDJYo_e4ObJu_aHilz
d42l22vYeh_rqFL6Y/edit?pli=1