UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NÚCLEO DE MONAGAS
ESCUELA DE INGENIERÍA Y CIENCIAS APLICADAS
DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA DE PETRÓLEO
MATURÍN / MONAGAS / VENEZUELA

EVALUACIÓN DE TRATAMIENTO DE BIORREMEDIACIÓN CON

ASERRÍN EN SUELO CONTAMINADO CON PETRÓLEOS DE
DIFERENTES °API

REALIZADO POR:

LERIMAR MILAGROS MARCANO ESPINOZA

C.I: 24.037.321

LUIS ALBERTO MORA GONZALEZ

C.I: 23.556.546

Trabajo especial de grado presentado como requisito parcial para optar

al título de

INGENIERO DE PETRÓLEO

MATURÍN, JUNIO DE 2018

i
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………….25

ii
 INTRODUCCIÓN

Los derrames de hidrocarburos de petróleo son una de las principales

fuentes de contaminación de suelos y aguas, debido que ocasionan
perturbaciones en los ecosistemas al afectar su estructura y bioprocesos,
debido que el petróleo contiene compuestos químicos tóxicos que producen
daños a plantas, animales y humanos pero principalmente sobre las
poblaciones de microorganismos, los cuales representan parte importante del
ecosistema y son claves para los procesos biogeoquímicos (Vasudevan y
Rajaram, 2001).

Las investigaciones relacionadas con la biorremediación como

alternativa eficiente para la recuperación de estos cada vez son de mayor
importancia. La Biorremediación consiste en la adición de materiales a
sistemas o ecosistemas contaminados para acelerar los procesos de
biodegradación natural. Algunos de ellos son capaces de degradar estos
compuestos hasta dióxido de carbono, sales, agua y otros productos inocuos
al medio ambiente (Avanced Biotech, 2000, Núñez, 2003).

Para de reducir en todo lo posible la liberación de contaminantes, hoy

en día existe la necesidad de indagar en la búsqueda de procesos que
aceleren la degradación de los contaminantes presentes en el ambiente, así
se reducirían de forma progresiva los efectos perniciosos que producen
sobre los ecosistemas y salud humana.

El aserrín resulta de desechos de la industria de la elaboración

primaria de la madera. En el mundo se desarrollan cada día nuevas
tecnologías para dar un uso racional a estos residuos, como por ejemplo el
aprovechamiento que se le da en la industria petrolera, como agente
fertilizante en el tratamiento de biodegradación, actuando de manera
orgánica para disminuir la contaminación causada por el crudo. (Resh, 1988).

1
 CAPÍTULO I

EL PROBLEMA Y SUS GENERALIDADES

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La actividad industrial ha ocasionado uno de los problemas mas serios en

materia de contaminación de suelos, donde el derrame de hidrocarburos
derivados del petróleo ocupa uno de los primeros lugares a nivel mundial. En
los últimos años, este tipo de contaminación ha aumentado, originando
afectación de las propiedades física, química y biológica de los suelos que
alteran su condición natural y por ende el ecosistema. (SEMARNAT 2003,
Gurrola–Nevárez 2008, Osorio–Rodríguez 2010)

La contaminación de los suelos por efecto de los hidrocarburos en la

zona de producción petrolera en el país se ve incrementada por la presencia
de compuestos difícilmente biodegradables, los cuales por su compleja
estructura no se degradan fácilmente, haciendo que el suelo pierda su
capacidad de depuración e incluso pueda actuar como fuente de sustancias
peligrosas, para los organismos que viven en éste.

Son muchas las técnicas que se han aplicado como alternativas viables
para minimizar la acción degradante, pero también, muchos fueron los
fracasos y daños hechos en su intento, hasta llegar al uso de los procesos
naturales de degradación, generalmente conocido por biorremediación. La
biorremediación es una técnica que utiliza la capacidad de los
microorganismos para transformar compuestos químicos con la finalidad de
disminuir o eliminar su toxicidad, y se ha convertido en una alternativa
prometedora para la recuperación de suelos contaminados con crudos. (Atlas
1981, 1984; Bartha 1986, Ryan et al, 1991).

3
 La biorremediación representa una herramienta muy importante para
quienes se interesan en controlar los residuos industriales tóxicos y
recuperar zonas contaminadas. Por tal motivo, el propósito de esta
investigación consiste en evaluar el tratamiento de biorremediación utilizando
aserrín como fertilizante orgánico en suelo contaminado con petróleos de
diferentes °API, debido a que se espera que con la aplicación de este
método se reduzcan los gastos por equipos o químicos, sustituidos por
especies orgánicas sin impactos negativos al ambiente, considerando que el
aserrín es una materia orgánica de origen vegetal, derivados del aserrío de
especies maderables duras y suaves, como la bolaina, el pino, capirona y
otros. (Arbaiza et al 1999).

1.2 OBJETIVO DE LA INVESTIGACIÓN

1.2.1 Objetivo General

Evaluar el tratamiento de biorremediación utilizando aserrín como

fertilizante orgánico en suelo contaminado con petróleos de diferentes °API.

1.2.2 Objetivos específicos

 Caracterizar la muestra de suelo en estudio y los diferentes tipos de

petróleos a través de propiedades físico-químicas.
 Determinar el %AyG en tratamientos de biorremediación aplicando
aserrín como fertilizante orgánico
 Determinar la cantidad de CO2 liberado en el tratamiento a través del
método de respirometría.
 Comparar el tratamiento de biorremediación aplicado en un suelo
contaminado con crudos de diferentes °API.

4
1.3 JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

Debido al alto impacto de contaminación de suelo que genera la

actividad de explotación y producción de petróleo es necesario aplicar
técnicas de descontaminación. Una de las técnicas que se recomienda para
este tipo de contaminación es la biorremediación como alternativa para la
recuperación de ambientes contaminados, que constituye una estrategia que
llama la atención, debido a la capacidad que tienen algunos microorganismos
y especies vegetales para absorber, degradar y acumular contaminantes,
para desarrollar una tecnología limpia que sea técnicamente factible y
económicamente viable en la solución de problemas ambientales. (Arbaiza
et al 1999).

De tal manera que estas variables, perjudican el ambiente donde se

desarrollan dichos procesos y también a su entorno, tanto para los
organismos de flora y fauna como para los seres humanos. A esto se suma
el factor económico, por el uso de químicos que además de ser tóxicos,
generan importantes gastos, por otra parte, el uso de costosos equipos de
tecnología que también sirven como indicadores de contaminación, debido a
que no se tiene previsto en la evaluación económica de un proyecto de
explotación de hidrocarburos.

Con la finalidad de establecer las correcciones pertinentes a estos

problemas y a la importancia de la conservación ambiental, se realiza esta
investigación con el propósito fundamental de establecer un método de
biorremediación de suelo de alta efectividad a bajos costos y sin agentes
tóxicos, el cual serán favorables para la industria petrolera, el ambiente y los
seres vivos que interactúan en él.

5
 CAPITULO II

MARCO TEÓRICO

2.1 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN.

Andrade (2008) En Lima se desarrolló un estudio titulado:

“Biorremediación de suelos contaminados por hidrocarburos utilizando
compost de aserrín y estiércol”. Realizado a nivel de bioensayo, en el
Laboratorio de Fertilidad de suelos de la Universidad Nacional Agraria La
Molina, aplicándose el modelo estadístico de Diseño Experimental
Completamente al Azar (DCA), con tres repeticiones y doce tratamientos
sumando un total de 36 macetas experimentales, para lo cual se empleó
estiércol y aserrines como sustrato a la planta indicadora de “maíz”
sembrados y controlados por un periodo de tiempo Los resultados de la
dosificación del suelo contaminado por hidrocarburos, estiércol y aserrín en
promedio disminuyó 22.5% el contenido de hidrocarburos en el suelo y
usando solamente aserrines disminuyó 9.6%. Comparando los tratamientos
del experimento el que mejor ha remediado los suelos fue el tratamiento de
suelo contaminado más vacaza más aserrín de bolaina, puesto que la
concentración inicial de hidrocarburos totales de petróleo (TPH) fue de 21.81
gr de TPH/kg de suelo, ha disminuido en 16.28 gr de TPH/kg de suelo, que
representa una reducción del 25%. Siendo este tratamiento lo más
recomendable a usar.

Esta investigación tiene vinculación con nuestro trabajo de grado en la

manera de como el petróleo afecta el suelo y lo contamina debido a esto se

7
utilizan tratamientos de biorremediación que son elegidos al azar, sometidos
a estudio, con el único fin de eliminar la contaminación del suelo.

Brito, R. (2008). Realizó un trabajo titulado “Evaluación de un producto

biofertilizante- orgánico para tratar suelos contaminados con hidrocarburos
como proceso de biorremedación, empresa PPSINCA el Tejero estado
Monagas”, la autora obtuvo las siguientes conclusiones: los resultados
obtenidos en este trabajo indican que el medio en que interactúan los
microorganismos fue favorecido por el producto biofertilizante- orgánico. La
humedad y la aireación continua del suelo permitieron llevar a cabo el
proceso de biorremedación del mismo. En forma experimental se comprobó
que la aplicación del compuesto BROS PLUS catalizó el proceso de
biorremedación. Los resultados muestran que el producto empleado actuó
sobre los parámetros tóxicos, acortando el tiempo de degradación de los
hidrocarburos totales, aceites y grasas. El proceso de biorremedación se
realizó exitosamente a condiciones de campo en un tiempo promedio de 6
semanas empleando 20 y 25 %V/V de BROS PLUS.

2.2 BASES TEÓRICAS

2.2.1 Suelo contaminado

Un suelo contaminado es aquel cuyas características han sido

alteradas negativamente por la presencia de compuestos químicos de
carácter peligroso de origen antropogénico, en concentraciones que superan
los niveles genéricos de referencias y que conllevan a un riesgo inaceptable
para la salud humana y el medio ambiente.

8
 La penetración del petróleo en el subsuelo esta determinada por su
viscosidad y generalmente, es retenido en el horizonte superficial del suelo
en donde se separa en fases. (Infante, C. 2001).

2.2.2 Fuentes de contaminación por petróleos

La contaminación por hidrocarburos se produce de forma frecuente y

los principales orígenes de aparición de hidrocarburos en el suelo-subsuelo
son por orden de importancia (Web gencat):

1. Fuga de depósitos
2. Vertidos accidentales.
3. Enterramiento de residuos que contienen hidrocarburo.
4. Lavado de aglutinantes de caminos asfaltados.
5. Riesgo de camino de tierras residuales para evitar el polvo.

Las principales actividades consideradas como fuente de contaminación

de hidrocarburos son:

 Saneamiento in situ (nitratos, microorganismos fecales, trazas de

hidrocarburos sintéticos).
 Gasolineras y talleres automotrices (benceno, otros hidrocarburos
aromáticos, fenoles e hidrocarburos halogenados).
 Curtidurías (plomo, salinidad, hidrocarburos halogenados y fenoles).
 Terrestres: ruptura de oleoductos o gasoductos. Descontrol de plantas
industriales. Evacuación de residuos oleosos.
 Marinas: buque tanque (lavado y limpieza de tanque, carga y
descarga, colisiones); pozos mar adentro (ruptura de ductos,
descontrol de producción). (Infante, C. 2001).

9
2.2.3 Efectos ambientales sobre la contaminación por petróleo

Un derrame de petróleo lleva consigo una serie de cambios

progresivos de sus propiedades físico-químicas los cuales se atribuyen al
proceso de intemperización, el cual incluye: evaporación, disolución,
dispersión, oxidación, emulsificación, sedimentación y biodegradación.
(SEMARNAT, 2006).

La intemperización es la pérdida de ciertos componentes de petróleo a

través de una serie de procesos naturales que comienzan una vez que
ocurra el derrame y continúan indefinidamente. La tasa de intemperización
del petróleo varía en función de las características del producto derramado y
de las condiciones climáticas existentes en el lugar del derrame.

 Evaporación: afecta la composición del producto derramado, aumenta

su densidad, viscosidad y decrece su solubilidad en el agua,
reduciendo así el nivel de toxicidad del producto
 Disolución: también llamado solución. Las fracciones ligeras de los
hidrocarburos y compuestos polares se disuelven en el volumen de la
columna de agua y en los alrededores del derrame. El rate (tiempo) de
disolución depende de la composición, tasa de esparcimiento,
temperatura del agua, turbulencia y grado de dispersión. La disolución
tiene efectos mínimos, y se acelera utilizando catalizadores
(fertilizantes como nutrientes para las bacterias: nitratos y fosfatos).
 Oxidación: combinación química de hidrocarburos con el oxígeno
atmosférico que contribuye a la descomposición o degradación final
del petróleo. Cuanta más área expuesta exista, mayor será oxidación
y mayor la velocidad de degradación. Este proceso es lento puesto
que sólo una pequeña cantidad de oxígeno puede penetrar en una
mancha de petróleo.

10
  Emulsificación: proceso por el cual un líquido se dispersa en otro
líquido en forma de pequeñas gotitas, es decir como suspensión. En el
caso del petróleo existen 2 tipos: Petróleo en agua: Pueden ser
fácilmente dispersas por las corrientes y la agitación superficial. La
formación natural de estas emulsiones resulta muy positiva debido a
que acelera los procesos de disolución, foto-oxidación y
biodegradación. Precisamente esto es lo que se pretende al aplicar
dispersantes a un derrame. Agua en petróleo: se forma cuando se
mezcla agua con petróleo viscoso o asfaltico por acción de las olas.
Es muy estable y puede durar meses o años.
 Sedimentación: puede suceder por dos mecanismos: el primero se
define en la medida que el hidrocarburo se intemperiza resultando en
un incremento de su densidad respecto al agua circundante y por
consiguiente se hunde. El segundo ocurre por la adhesión de las
partículas suspendidas en la columna de agua al petróleo. El aumento
de la densidad del petróleo por evaporación es solo efectivo en mar
abierto, donde la densidad del crudo sea muy cercana al agua del
mar.
 Biodegradación: proceso por el cual la mancha desaparece del medio
ambiente. Ciertas especies de bacterias marinas, hongos y otros
organismos utilizan los hidrocarburos como fuente de alimento. Es un
proceso natural y muy lento debido al agotamiento continuo de
oxígeno, a la formación de emulsiones de agua en petróleo, entre
otros (Infante,C. 2001).

2.2.4 Biorremediación

La biorremediación permite hacer referencia a la utilización de

microorganismos para tratar una sustancia o para recuperar las condiciones
medioambientales.

11
 Las bacterias, hongos y hasta ciertas plantas pueden absorber y
degradar elementos contaminantes, limpiando así el suelo, el agua o el
entorno en general. La biorremediación ayuda a la naturaleza a superar un
desequilibrio y así recuperar un ecosistema que haya experimentado alguna
clase de daño por acción de la contaminación.

Esta técnica se puede hacer in situ, es decir, en el mismo lugar donde

se produce la contaminación, o ex situ, en un lugar distinto, lo que requiere el
transporte y la modificación de las condiciones naturales.

La biorremediación tiene como objetivo principal promover el

crecimiento de poblaciones microbianas idóneas que puedan degradar
contaminantes presentes en los suelos expuestos a daños en los
ecosistemas.

2.2.4.1 Factores que influyen en la realización de la biorremediación

De acuerdo con Ordoñez (1999), en la biorremediación intervienen

cinco (5) factores a saber: los microbiológicos, los relativos al desecho y los
técnicos ambientales.

 Factores Medioambientales
Los factores medioambientales son aquellos que afectan directamente el
crecimiento y actividad de los organismos que llevan a cabo la
biodegradación. Entre éstos, los que revisten mayor importancia en el
proceso de biodegradación son:

1. Temperatura
2. pH del suelo
3. Humedad del suelo
4. Disponibilidad de oxigeno
5. Disponibilidad de nutrientes.

12
Temperatura: la temperatura del suelo afecta considerablemente la actividad
microbiana y las tasas de biodegradación. La mayoría de las especies
bacterianas presentes en los suelos son clasificadas como mesófilas, las
cuales se desarrollan entre 15 ºC y 45 ºC, teniendo un intervalo de
crecimiento óptimo entre 25 ºC y 35 ºC

pH del suelo: la presencia de contaminantes extremadamente ácidos ó

alcalinos, pueden llevar el pH del suelo a valores inhibitorios para el
desarrollo microbiano.

Humedad del suelo: el agua presente y el Potencial de Matriz del suelo

revisten una gran importancia en el proceso de biorremediación, ya que
regulan la actividad microbiana.

Disponibilidad de Oxígeno: el oxígeno (O2) puede constituir uno de los

factores limitantes para el desarrollo del proceso de biodegradación en
suelos, sedimentos y acuíferos.

Disponibilidad de Nutrientes: el metabolismo microbiano está orientado

hacia la reproducción de los organismos. Ello requiere que los componentes
químicos de la célula se encuentren disponibles para la asimilación y síntesis
del nuevo material celular.

 Factores Fisicoquímicos

Los factores fisicoquímicos que determinan la biodegradabilidad del

contaminante y su biodisponibilidad pueden ser divididos en dos grandes
grupos:

 Factores relativos al sustrato: la composición y estructura

química del contaminante

13
Volatilidad: es el proceso en el cual un contaminante se difunde desde la
fase sólida ó liquida a la fase gaseosa

Densidad: la densidad de los hidrocarburos es expresada

convencionalmente en API

Viscosidad: este parámetro es una medida de la resistencia interna de una

sustancia a fluir.

 Factores relativos al suelo

Tamaño de partícula. Los suelos se clasifican en función de su tamaño de

partícula, siendo sus tres principales componentes las arcillas (< 0.002 mm),
los sedimentos (0.002 - 0.05

Densidad aparente. Es el peso del suelo por unidad de volumen, incluyendo

agua y espacios

Permeabilidad. Se refiere a la facilidad o dificultad con la que un líquido

puede fluir a través de un medio permeable. La permeabilidad de un suelo es
uno de los factores que controla la efectividad de tecnologías in situ mm) y
las arenas (0.05 - 2.0 mm).

 Factores Biológicos

Para que una técnica de biorremediación opere eficientemente, deben

cumplirse varias condiciones:

 El residuo debe ser susceptible de biodegradarse biológicamente, y

presentarse en una forma física que sea susceptible a los
microorganismos.
 Deben estar disponibles los microorganismos apropiados.
 Las condiciones ambientales (como el pH, la temperatura y el nivel de
oxígeno) deben ser las apropiadas.

14
 2.2.4.2 Ventajas y desventajas de la biorremediación

Ventajas

 Costo mas bajo que otros métodos.

 Se transfiere poca contaminación de un medio a otro.
 Tecnología poco invasiva.
 Suele tener aceptación por parte de la opinión pública.
 El ecosistema prácticamente no se altera; al contrario, se recupera.
 Son tecnologías más benéficas para el ambiente.
 Contaminantes generalmente son destruidos.

Desventajas

 Si no es completa puede generar productos contaminantes iguales o

superiores al producto inicial.
 Dificultad para determinar la duración exacta de esta metodología.
 Es necesario verificar la toxicidad de intermediación y/o productos.
 No pueden emplearse si el tipo de suelo no favorece el crecimiento
microbiano. (Valke,T y Velasco,J. 2002).

2.2.4.3 Técnicas asociadas con la biorremediación

Biodegradación

Es la facultad que poseen algunas sustancias en descomponerse en

otros componentes químicos reintegrando, parcial o totalmente, esos
componentes al medio ambiente (aire, tierra y agua). La biodegradabilidad de
los materiales depende de la estructura física y química de los mismos.

15
Bioestimulación

Modifica las condiciones para facilitar la proliferación y actividad de los

microrganismos nativos, por medio de la adición de nutrientes, aceptores de
electrones, surfactantes o bien oxígeno.

Se ha comprobado, por ejemplo, que la aplicación de fertilizantes

favorece la degradación de compuestos de petróleo en el suelo.

Bioaumentación

Se incorpora microrganismos en el medio para aumentar la

degradación de los contaminantes cuando los microrganismos presentes no
son suficientes en número o en su capacidad para degradar los compuestos
tóxicos.

Bioventeo o inyección de aire

Cosiste en la ventilación forzada del suelo mediante la inyección a

presión de oxigeno (aire).

Cuando se incrementa la oxigenación del suelo, se estimula la

actividad bacteriana

Biolabranza

Comprende el uso de arado en el sitio contaminado, complementada

con la adición de nutrientes y otros compuestos químicos que mejoren las
características. Este método es exitoso para el tratamiento de contaminación
con hidrocarburo y algunos plaguicidas.

Fitorremediación.

Consiste en el uso de plantas en procesos de biorremediación

16
2.2.5 El aserrín

El aserrín es una mezcla de astillas y polvo grueso que queda

después del corte de las maderas. El aserrín de madera es otra de las
materias orgánicas que generalmente se dispone o tiene fácil acceso para
conseguir a bajo costos, en pocas veces en forma gratuita. El aserrín de
madera se compone principalmente de fibras celulosas unidad con lignina.
Según su análisis, su composición media es de un 50% de carbono (C), un
42% de oxigeno (O), un 6% de hidrogeno (H) y un 2% de nitrógeno (N)
asociado a otros elementos. Aunque el grado de dependencia de estos
organismos varíen entre diferentes requerimientos, cada uno de estos deben
estar presente para que ocurra el proceso de degradación.

2.26 Respirometría

Es una técnica basada en la medición del consumo de oxígeno por

parte de microorganismos que trabajan sobre un sustrato orgánico, el cual es
degradado y oxidado a dióxido de carbono (CO 2). Esta técnica esta
encontrando crecientes aplicaciones en la determinación de la cinética de la
biodegradación.

2.3 BASES LEGALES

2.3.1 Decreto 1257 “Normas para la evaluación de actividades
susceptibles de degradar el ambiente”

Este decreto tiene como objetivo principal establecer los

procedimientos necesarios para la realización de una evaluación ambiental,
la cual se llevará a cabo en todos los proyectos presentados ante el

17
ministerio del ambiente que pueden involucrar actividades susceptibles de
degradar el ambiente.

2.3.2 Decreto 2635 (1998) “Normas para el control de la

Recuperación de Materiales Peligrosos y el Manejo de Desechos
peligrosos”

Este decreto tiene por objeto regular la recuperación de materiales y el

manejo de desechos, cuando los mismos presentan características,
composición o condiciones peligrosas representando una fuente de riesgo a
la salud y al ambiente. El decreto está modificado para dar orientación en
cómo se debe manejar la generación, el transporte y la disposición o
tratamiento de desechos peligrosos. Los artículos que se refieren a los
parámetros que se deben seguir para llevar a cabo las actividades de
disposición y/o recuperación de los materiales generados durante la
exploración y producción de petróleo. Dicho artículo se cita a continuación:

Artículo 53: La práctica de biotratamiento se llevará a cabo

cumpliendo las siguientes condiciones:

 Contenido de hidrocarburos biodegradables en el desecho

entre 1% y 10%
 El desecho no exceda las concentraciones máximas
permisibles en lixiviados establecidas en la tabla 2.1
 El desecho tenga un pH entre 6-8
 Para la aplicación de la técnica de biotratamiento sobre el suelo
arable:
 El área del terreno debe estar conformada por suelos de textura
franca, o franco arenosa o franco limosa o franco arcillosa, o
acondicionado artificialmente.
 La profundidad del nivel freático debe ser mayor de 4 metros.

18
 El área del terreno no debe ser inundable.

19
 CAPÍTULO III

MARCO METODOLÓGICO

3.1 NIVEL DE LA INVESTIGACIÓN

Esta investigación que se llevará a cabo es de tipo explicativa, porque

consistirá en buscar el comportamiento del aserrín utilizado como fertilizante
orgánico en el tratamiento de biorremediación en suelo contaminado con
petróleos de diferentes °API, en tal sentido Arias (2006) señala que:

“La investigación explicativa se encarga de buscar el por qué de

los hechos mediante el establecimiento de relación causa-efecto. En
este sentido, los estudios explicativos pueden ocuparse tanto de la
determinación de las causas (investigación post facto) como de los
efectos (investigación experimental) mediante la prueba de hipótesis.
Sus resultados y conclusiones constituyen el nivel más profundo de
conocimientos.” (Pag. 3)

3.2 DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN

El estudio estuvo enmarcado dentro de un nivel de investigación de

carácter experimental, debido a que se manipularon y controlaron las
variables y condiciones que se ejercieron durante el experimento.

Según Arias, F. (2006), en su libro el proyecto de investigación define

un diseño experimental como un “Proceso que consiste en someter a un
objeto o grupo de individuos, a determinadas condiciones, estimulo o
tratamiento (variable independiente), para observar los efectos o reacciones
que se producen (variable dependiente).

19
3.3 POBLACION Y MUESTRA

Como la población “…es un conjunto finito o infinito de elementos con

características comunes para los cuales serán extensivas las conclusiones
de la investigación…” (Arias, 2006); en el presente trabajo de investigación
se le considerará como población la muestra de crudo mediano y liviano, el
suelo del norte de Monagas.

Para el desarrollo del presente proyecto se tendrá una muestra de

suelo del norte de Monagas a las cuales se le aplicarán 100 ml de crudo
respectivamente; conservando en cada bloque una muestra patrón o de
referencia que será utilizada para monitorear los efectos de este producto en
el tratamiento de biorremediación. Como lo refiere Arias, F. (2006) La
muestra no es más que “…un subconjunto representativo y finito que se
extrae de la población accesible…”

3.4 PROCEDIMIENTO METODOLÓGICO

El procedimiento metodológico se caracteriza por mantener una

secuencia y concordancia con los objetivos específicos de la investigación.
Se realizará mediante etapas que formarán la estructura metodológica de la
investigación.

3.4.1 Caracterización de la muestra de suelo en estudio y los diferentes

tipos de petróleos a través de propiedades físico-químicas.

3.4.1.1 Caracterización del suelo en estudio

Este objetivo se iniciará seleccionando la zona con un suelo fértil

favorable para nuestro estudio, definiéndose el lugar específico vía El Furrial
zona norte del estado Monagas, recogiéndose muestra de suelo de manera
aleatoria. Luego se llevará del laboratorio de suelos de la escuela de Ing.
agronómica, ubicado en la UDO Campus Los Guaritos para analizar su

20
densidad, ph conductividad eléctrica, carbono, fósforo, textura, equivalente
de humedad y nitrógeno con diferentes equipos localizados en dicho
laboratorio.

3.4.1.2 Caracterización de las muestras de crudos de diferentes

°API

Para el análisis del suministro de las muestras del crudo, mediano y

liviano, se contará con el apoyo de laboratorio de procesamiento de la UDO.

 Para determinar la densidad de los crudos se empleará el

método del picnómetro.
 Se determinará la gravedad API con el método del hidrómetro
según la norma ASTM D-258.
 Se determinará el % AyS según la normas ASTM D-96.

Todo esto con el fin de conocer algunas de las propiedades más

relevantes del crudo con que se contaminará la muestra de suelo y evaluar la
incidencia del tipo de crudo.

3.4.2 Determinación del %AyG en tratamientos de biorremediación

aplicando aserrín como fertilizante orgánico

Para la aplicación de tratamientos de biorremediación con fertilizantes

el suelo estará condicionado dentro del rango mayor o igual a uno por ciento
(1%) y menor o igual a diez por ciento (10%) de concentración de petróleo,
según el decreto 2.635 de las “Normas para el control de la recuperación de
materiales peligrosos y el manejo de los desechos peligrosos”.

Se realizará un ensayo constituido por diferentes niveles de

porcentajes dentro del rango establecido, el cual debe ser menor al 10% de
contaminación con crudos mediano y liviano. Esto con la finalidad de
establecer el porcentaje de aceite y grasa para el desarrollo de las pruebas

21
piloto para la aplicación de tratamientos de biorremediación con el uso de
aserrín como fertilizante orgánico.

Para el desarrollo de las pruebas piloto se montarán cinco (5)

tratamientos, los cuales serán: suelo contaminado con crudo liviano, suelo
contaminado con crudo mediano, suelo contaminado con crudo liviano mas
aserrín, suelo contaminado con crudo mediano más aserrín. Cada
tratamiento será repetido tres (3) veces y colocados en bloques al azar. Se
realizará mediciones a los 15 días, 45 días y 90 días.

3.4.3 Determinación de la cantidad de CO2 liberado en el tratamiento a

través del método de respirometría.

La producción de CO2 se realizará mediante la técnica de

respirometría donde se determinará la cantidad de CO 2 producido como
indicador indirecto de la actividad microbiana, expresado en miligramo de
CO2 producidos por 1Kg de suelo cada 15 días durante 90 días, esto con el
fin de medir el consumo que tiene los microorganismos autóctonos de
degradar el contaminante convirtiéndolo en CO 2.

3.4.4 Comparación del tratamiento de biorremediación aplicado en un

suelo contaminado con crudos de diferente °API.

Para biorremediar el suelo contaminado con crudos de diferente °API

específicamente con crudo liviano y crudo mediano, se comparará el
tratamiento aplicado con el agente fertilizante que es el aserrín a través de
análisis estadísticos, para así determinar si dicho tratamiento es el más
eficiente en la industria. Entre las herramientas estadísticas empleadas para
comparar, se tendrán un diseño de 5 bloques con repeticiones al azar y las
diferencias entre el tratamiento serán determinadas por la prueba de la
mínima diferencia significativa. El nivel de inferencia será del 5%. Se

22
desarrollarán análisis de correlación lineal simple entre pares de caracteres y
análisis de varianza

3.5 INSTRUMENTOS Y TÉCNICAS DE RECOLECCION DE DATOS

3.5.1 Instrumentos

Los instrumentos se manipularán para recaudar la información

necesaria al llevarse a cabo este proyecto, los equipos a usar como:
conductímetro, pH metro, balanza analítica, centrifugadora, retorta, estufa,
entre otros, los cuales están ubicados dentro de los laboratorios de
Procesamiento de Hidrocarburos, Suelo y Forraje de la Universidad de
Oriente, Núcleo Monagas.

3.5.2 Técnicas

La técnica manejada será adquirida a través del escrutinio de

documentos escritos y por medio de la observación. Las fuentes para la
recopilación de dicha información provendrán de documentos bibliográficos,
manuales y tesis de grados referentes al problema planteado.

23
 3.6 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ACTIVIDADES
JULIO AGOSTO SEPTIEMBRE OCTUBR NOVIEMBRE
E
Caracterización
de la muestra de
suelo en estudio y
los diferentes
tipos de petróleos
a través de
propiedades
físico-químicas
Determinación
del %AyG en
tratamientos de
biorremediación
aplicando aserrín
como fertilizante
orgánico
Determinación de
la cantidad de
CO2 liberado en
el tratamiento a
través del método
de respirometría
Comparación del
tratamiento de
biorremediación
aplicado en un
suelo
contaminado con
crudos de
diferente °API.

24
 3.7 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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