LEUCONOSTOC MESENTEROIDES

La Leuconostoc mesenteroides  es una bacteria Gram positiva que se encuentra distribuida a todo lo
largo y ancho del planeta. Fue descrita por primera vez en el año de 1878 por Tsenkovskii. Es una
de las bacterias del género Leuconostoc más conocidas y estudiadas.[ CITATION pezBeatriz \l
3082 ]

Los microorganismos del género Leuconostoc son coco-bacilos gram-positivos, catalasa-negativos y

oxidasa-negativos, que se caracterizan por ser intrínsecamente resistentes a Vancomicina. Se han
descrito procesos infecciosos causados por estos microorganismos, pero no se han descrito casos
de bacteriemia confirmada por Leuconostoc spp. en pacientes sin alteraciones inmunológicas.
[ CITATION Cin06 \l 3082 ]

Taxonomía

La clasificación taxonómica de la Leuconostoc mesenteroides es:

Dominio: Bacteria
División: Firmicutes
Clase: Bacilli
Orden: Lactobacillales
Familia: Leuconostocaceae
Género: Leuconostoc
Especie: Leuconostoc mesenteroides

Dextrano.
Producto importante que aporta la Leuconostoc mesenteroides. el dextrano puede formar complejos
con el hierro y ser un tratamiento eficaz contra la anemia.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]
En personas ancianas, con VIH o con patologías que afectan al sistema inmunológico, la bacteria
puede pasar al torrente sanguíneo y a partir de allí comenzar a hacer estragos y causar daños en el
organismo.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Morfología
Las células de Leuconostoc mesenteroides son de forma redondeada, de un tamaño promedio
de entre 0,5 micras de ancho y 1 micra de largo. Presenta una pared celular que contiene una capa
gruesa de peptidoglicano.
No presentan cilios ni flagelos.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

El genoma de la bacteria está conformado por un cromosoma circular y contiene algunos plásmidos.
Así mismo, en el ADN están contenidos 2003 genes que codifican para la expresión y síntesis de
algunas proteínas.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Cuando se cultivan en medios artificiales, las colonias son pequeñas (menos de 1mm), de apariencia
viscosa, lisa y de una coloración opaca.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Características generales

Es Gram positiva

Esta bacteria adquiere un característico color morado cuando se somete a la técnica de tinción de
Gram.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]
Es anaerobio facultativo

A diferencia de otras bacterias, la leuconostoc mesenteroides no requiere del oxígeno para los
distintos procesos que lleva a cabo. Esta bacteria tiene un metabolismo basado en otros procesos.
[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

A pesar de esto en ciertas condiciones puede emplear el oxígeno. Si el oxígeno no está presente, la
bacteria puede optar por otros procesos como la fermentación. El oxígeno no resulta tóxico para
la leuconostoc mesenteroides.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Es Indol Negativa

La Leuconostoc mesenteroides no sintetiza el grupo de enzimas conocidas como

triptofanasas[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

es frecuente realizarla en los laboratorios cuando se desean identificar cepas bacterianas

desconocidas.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Hábitat

Esta es una bacteria que se encuentra esparcida en prácticamente todos los ambientes del planeta.
Son epífitas. Pueden encontrarse asociadas con otras especies del género Leuconostoc en diversas
plantas. Son particularmente abundantes en árboles frutales y en diversos vegetales.[ CITATION
pezBeatriz \l 3082 ]

Metabolismo

La Leuconostoc mesenteroides es una bacteria que tiene un metabolismo bastante complejo.

Cuando no utiliza al oxígeno para sus procesos, puede seguir la vía de la fermentación heteroláctica.
a partir  de la glucosa se obtienen productos como etanol y dióxido de carbono.

convierte el citrato en diacetilo y acetona. La sacarosa la convierte en dextrano.[ CITATION

pezBeatriz \l 3082 ]
el metabolismo de la Leuconostoc mesenteroides es un complejo de reacciones químicas en las que
los carbohidratos como la glucosa experimentan una serie de cambios hasta generar los productos
antes mencionados.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Condiciones de crecimiento

la Leuconostoc mesenteroides debe encontrarse en un medio que le proporcione todos los

nutrientes necesarios, tales como aminoácidos, vitaminas y minerales.[ CITATION pezBeatriz \l
3082 ]

Medios de cultivo

Medios de cultivo para bacterias

Medio Agar Nutritivo: Se agregaron 23 g de agar nutritivo comercial en un litro de agua destilada,
posteriormente se somete a calentamiento dejándolo hervir aproximadamente durante un minuto y
se procede a esterilizar por calor húmedo en un autoclave a 120°C durante 30 minutos a una
presión de 15 psi. Posteriormente, el agar nutritivo es servido en cajas de Petri y solidificado a
temperatura ambiente.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

MEDIO DE CULTIVO PARA L. MESENTEROIDES Y LAS PRUEBAS DE ANTAGONISMO

Medio Mayeux: 

Peptona 10 g, extracto de levadura 5 g, sacarosa 100g, citrato de sodio 1 g, glucosa 5 g, gelatina 2.5
g, agar 15 g en un litro de agua destilada. Posteriormente, se sometió a calentamiento hasta hervir
durante aproximadamente 2 minutos y se procedió a esterilizar por autoclave (Condiciones
mencionadas anteriormente). Posteriormente, se sirvió en cajas de Petri y se solidificó a temperatura
ambiente.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

AISLAMIENTO
En el jugo de caña no se encuentra solamente la bacteria láctica L mesenteroides, por lo tanto, se
hizo necesario realizar el aislamiento de esta cepa y posterior identificación. El aislamiento se realizó
utilizando el método de siembras en superficie por estrías a partir de un cultivo mixto obtenido del
jugo de la caña proveniente del molino Fulton del Ingenio del Cauca. [ CITATION Cue10 \l 3082 ]

El mantenimiento de la cepa pura aislada se realizó en glicerol a -20°C y se almacenó en los

congeladores del laboratorio de microbiología de la Universidad de San Buenaventura-sede Cali.
[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

IDENTIFICACIÓN DE LA CEPA BACTERIANA LEUCONOSTOC MESENTEROIDES

PRUEBAS DE ANTAGONISMO MICROBIOLÓGICO EN CAJAS DE PETRI

En las pruebas de antagonismo bacteriano se tomaron dos cajas con agar nutritivo y dos cajas de
medio Mayeux. En el caso de las levaduras y los hongos dos cajas de YPDA y dos de medio
Mayeux.
. Con el asa se tomaron las cepas microbianas y se procedió a realizar las siembras necesarias para
determinar el antagonismo existente

Fuente:[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

para las pruebas de antagonismo de las bacterias y las levaduras se sembraron por mitad de placas
y en líneas perpendiculares los antagonistas en sus respectivos medios; las bacterias se incubaron a
37°C, las levaduras y los hongos en temperatura ambiente durante 96 horas. [ CITATION Cue10 \l
3082 ]

Posteriormente, se procedió a determinar el diámetro de crecimiento de los antagonistas cada 24

horas, observando si hubo o no antagonismo. [ CITATION Cue10 \l 3082 ]
ENFERMEDADES POR LEUCONOSTOC MESENTEROIDES

La Leuconostoc mesenteroides no es una bacteria patógena para el hombre, excepto en aquellos

individuos con un sistema inmunológico comprometido. En estos casos, la bacteria ingresa al
organismo, se desplaza por el torrente sanguíneo (bacteriemia) y puede llegar a cualquier parte del
organismo y causar daños en diversos tejidos. [ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Sepsis

La sepsis es una patología en la que el cuerpo llega a tener una respuesta antiinflamatoria y grave
ante algún agente patógeno como bacterias, hongos y virus.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Síntomas

 Disminución de la presión arterial.

 Fiebre elevada
 Mareos
 Erupción cutánea
 Piel caliente
 Confusión

Endocarditis

La endocarditis no es más que la inflamación, leve o severa de las estructuras más internas del
corazón. La bacteria siente predilección por las válvulas aurículoventriculares (entre las aurículas y
los ventrículos). Aquí la leuconostoc mesenteroides puede proliferar y colonizar las estructuras,
dando paso a los síntomas y signos.[ CITATION pezBeatriz \l 3082 ]

Síntomas

 Fiebre elevada
 Escalofríos
  Sudoración excesiva
 Sangrado leve debajo de las uñas.
 Manchas rojas y pequeñas en la planta del pie y a mano
 Inflamación en manos, brazos y abdomen
 Inflamación de los pies, las piernas y el abdomen.

CASO CLÍNICO

Mujer de 28 años de edad consulta con cuadro de 1 mes de evolución de astenia, debilidad
generalizada, sensación febril intermitente y pérdida de peso de 5 kilogramos. No tenía
antecedentes patológicos de interés.[ CITATION Gim19 \l 3082 ]

Al examen físico del ingreso se constató en boca lesiones ampollosas y placas blanquecinas. El
laboratorio mostró leucocitosis de 27000 /mm 3 con 90% de blastos en el hemograma. Se realizó el
diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda CD 20 + mediante punción aspirativa de la médula ósea.
Se realizó quimioterapia con doxorrubucina, citarabina, metotrexate y prednisona. [ CITATION
Gim19 \l 3082 ]

. Se aisló en hisopado anal Enterococcus faecium resistente a vancomicna (EVR); la muestra fue

incubada en agar y bilis. Luego de identificadas las colonias de enterococo. [ CITATION Gim19 \l
3082 ]

La paciente ya estaba tratada con meropenen más tigeciclina. presentó abombamiento abdominal y
detención de heces y gases, alteración de la función hepática (bilirrlubina total >4,5 mg/mL). La
ecografía abdominal y tomografía abdominal con contraste no mostraron causa aparente del cuadro
abdominal. Se diagnosticó hígado de sepsis e íleo paralítico secundario a alteración electrolítica.
Debido a intolerancia oral y débito bilioso por sonda nasogástrica se inició nutrición parenteral
mediante catéter venoso central. Con el correr de los días presentó buena evolución clínica
completando antibióticos por 14 días y supera aplasia medular .Se realizó antibiograma y ante
retorno de cultivo se suspendió tigecilina y meropenen y se inició ciprofloxacina y gentamicina, que
completó 14 días y es externada en buenas condiciones generales[ CITATION Gim19 \l 3082 ]
Tabla de Concentración mínima inhibitoria de Leuconostoc mesenteroides 

Fuente:[ CITATION Gim19 \l 3082 ]

INHIBICIÓN DE LA BACTERIA LEUCONOSTOC MESENTEROIDES EN CAÑA DE AZUCAR

En este trabajo de investigación se determinó la inhibición de la bacteria ácido-láctica L

mesenteroides aislada en un ingenio azucarero mediante la utilización de microorganismos
antagonistas.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

Para esto, se realizaron aislamientos y cultivos de L. mesenteroides provenientes del jugo de la

caña
Se comprobó que las cepas de los hongos Metharhizium anisopliae y Trichoderma sp, fueron las
más eficientes en el control de crecimiento de L mesenteroides
inhibición[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

se identificó a los hongos Aspergillus sp, Botrytis sp y Streptomyces sp como antagonistas naturales
y habituales presentes en el jugo de caña de los Ingenios.
La pérdida de sacarosa y la formación de dextrana están asociadas con el deterioro de la caña de
azúcar. El azúcar producido con caña deteriorada contiene un alto contenido de dextrinas [ CITATION
Cue10 \l 3082 ]
Durante años este ha sido un problema que la industria azucarera ha enfrentado, convirtiéndose en
un reto para el mejoramiento de la calidad y producción del azúcar
Uno de estos microorganismos es Leuconostoc mesenteroides el cual degrada la sacarosa presente
en el jugo y forma de incorporar al mismo tiempo, metabolitos como el ácido láctico, acético, etanol,
manitol y polisacáridos como dextranas y lévanos. [ CITATION Cue10 \l 3082 ]

 Leuconostoc sp, es responsable de una disminución significativa en la producción de azúcar y

etanol debido a los procesos de fermentación de la sacarosa, presentándose pérdidas cercanas al
20% del total producido [ CITATION Cue10 \l 3082 ]

Durante la ejecución de este proyecto, se pretendió inhibir el crecimiento de  L. mesenteroides a

partir de métodos de antagonismo microbiológicos, lo cual permitirá aumentar el rendimiento en la
producción de azúcar y etanol.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

Ensayo experimental

Se agregó 100 ml de guarapo de caña previamente filtrado el cual contenía una concentración
indeterminada de L mesenteroides,  posteriormente, se inoculó con una solución que contenía 2,3 x
108 esporas/ml de los microorganismos antagonistas y todo fue agitado y tapado. Cada 24 horas se
sacaron muestras de los clasificadores y se sembraron en cajas de Petri con medio Mayeux y YPDA
para la determinación de la concentración de colonias de Leuconostoc sp  y de los microorganismos
antagonistas. Este procedimiento se hizo con 2 réplicas. [ CITATION Cue10 \l 3082 ]

RESULTADOS

AISLAMIENTO DE LEUCONOSTOC MESENTEROIDES

Se evaluaron y se caracterizaron dos aislados de la bacteria L mesenteroides, dependiendo de la

cantidad de goma producida en medio Mayeux; las cuales fueron denominadas MFM 1 y MFM 3
(Molino Fulton Masa 1 y 3, respectivamente).
La presencia de esta goma es característica del género Leuconostoc sp, cuando crece en un medio
selectivo como Mayeux, puesto que este género bacteriano toma la sacarosa presente en el medio
selectivo produciendo una dextrana, la cual forma una goma translúcida por medio de una enzima
dextransacarasa[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

En la figura 2 se pueden observar las dos cepas aisladas de L mesenteroides  y la goma formada por
ella.

Se puede notar que la cepa MFM 1 presenta una colonia mucosa con gran cantidad de dextrana en
su alrededor, mientras que la cepa MFM 3, si bien presenta producción de dextrana [ CITATION
Cue10 \l 3082 ]

PRUEBAS MACROSCÓPICAS Y MICROSCÓPICAS DE LAS CEPAS DE LEUCONOSTOC

MESENTEROIDES  AISLADAS.

Las bacterias aisladas del jugo de caña, presentaban colonias de forma circular, superficie lisa,
traslúcida, color crema, consistencia viscosa, de gran tamaño, elevación convexa, borde entero con
formación de dextrana, lo cual concuerda con las características macroscópicas reportadas por la
literatura para el género Leuconostoc sp.  Se pudo observar además que la bacteria es un cocobacilo
Gram (+), agrupadas en pares o cadenas cortas, con ausencia de esporas y con presencia de
cápsula.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]
PRUEBAS BIOQUÍMICAS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA

Las pruebas bioquímicas realizadas permitieron la identificación de las colonias aisladas MFM 1 y
MFM 3. Estas pruebas corroboraron que ambas cepas pertenecen a la especie Leuconostoc
mesenteroides.

PRUEBAS DE INHIBICIÓN DEL AISLADO DE LEUCONOSTOC MESENTEROIDES SPP

MESENTEROIDES  (MFM 1 Y MFM 2) POR LOS HONGOS

Se realizaron pruebas de antagonismo con los hongos filamentosos Metharrizium

anisopliae y Thichoderma sp, los cuales presentaron un rápido crecimiento fúngico en los medios
Mayeux y YPDA e inhibieron el crecimiento de Leuconostoc mesenteroides spp mesenteroides .
(Figura 3 y 4).[ CITATION Cue10 \l 3082 ]
ANÁLISIS DEL PORCENTAJE DE INHIBICIÓN DE LEUCONOSTOC MESENTEROIDES  POR LOS
HONGOS ANTAGONISTAS

A partir del porcentaje de inhibición, se puede observar que el crecimiento de Leuconostoc

mesenteroides  disminuye a medida que aumenta el crecimiento de los hongos Thichoderma
sp  y Metharhizium anisopliae, los cuales fueron los más efectivos al momento de inhibir el
crecimiento de la bacteria.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]

PRUEBAS EXPERIMENTALES DE CAMPO

Para esta prueba se tuvo en cuenta el mayor porcentaje de inhibición del crecimiento de  L
mesenteroides spp mesenteroides  en presencia de los microorganismos antagonistas obtenidos en
las pruebas de laboratorio. Se seleccionaron los hongos Trichoderma sp  y Metharrizium
anisopliae  su alto porcentaje de inhibición a las 96 horas el cual era de 94,89% y de 88,77%;
respectivamente. Estos hongos inhibieron la bacteria Leuconostoc mesenteroides spp
mesenteroides  en campo (ingenio azucarero) corroborando los datos experimentales obtenidos en el
laboratorio, sugiere utilizar en las pruebas de campo los microorganismos  Streptomyces
culture  y Botryodiplodia theobromae,  por el efecto que pueden tener sus metabolitos microbianos
sobre el crecimiento de la bacteria L mesenteroides.[ CITATION Cue10 \l 3082 ]
DISCUSIÓN

Leuconostoc mesenteroides es habitualmente no reconocido por los laboratorios de bioquímica, en

general no forman parte de la rutina de investigación de los mismos y su reconocimiento no es
sencillo. Son cocos Gram (+) hemolíticos o alfa-hemolíticos (-) que crecen sobre agar de sangre de
oveja y se confunden generalmente con Enterococcus o Estreptococos. En este caso en particular
se pensó en una nueva infección por EVR posterior al choque séptico .

Se distribuye ampliamente en la naturaleza. A nivel industrial se utiliza en la producción de vinos,

productos lácteos, azúcar y, en ocasiones, se aísla en muestras vaginales y de heces humanas.

Cada vez son más reconocidos como patógenos importantes en pacientes neutropénicos,
probablemente debido a la inmunosupresión. La infección con Leuconostoc puede causar fiebre,
sepsis relacionada con catéter intravenoso, bacteriemia, dolor abdominal, gastroenteritis y meningitis

Las guías sobre tratamiento son inexistentes y dependen del antibiograma. se muestra la terapia
antibiótica de casos adultos reportados de Leuconostoc mesenteroides en los últimos 10 años y
llama la atención la falta de una terapia unificada.

Tabla 2 Tratamiento de bacteriemia a Leuconostoc en adultos reportados en los últimos 10 años 

CONCLUSIONES

 Se recomienda el empleo del hongo Thichoderma viridae  para el control de crecimiento

de Leuconostoc mesenteroides spp mesenteroides , sin embargo, otro hongo filamentoso
eficiente en el control de esta bacteria fue Metharrizium anisopliae, siendo una alternativa
para el control biológico de esta bacteria.
 Los hongos con menor porcentaje de inhibición fueron Colletotrichum sp, Thichoderma
viridae  y Rhizoctonia sp.
 A partir de este trabajo de experimentación se puede determinar que los
hongos Metharrizium anisopliae  y Thichoderma sp  poseen metabolitos que inhiben el
crecimiento de la bacteria acido láctica Leuconostoc mesenteroides.
 En conclusión, se demostró la presencia Leuconostoc y como a pesar de no existir reportes
se puede asociar con choque séptico. La principal característica es su espectro de
sensibilidad ya que son intrínsecamente resistentes a los glucopéptidos. Además de su
 facilidad de confusión con otros gérmenes, se debe incluir este género en el diagnóstico
diferencial de procesos infecciosos en pacientes con factores y condiciones clínicas
predisponentes.

Bibliografía
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