Práctica 9

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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas


Laboratorio de Ecología Microbiana

Práctica No.9

Evaluación de algunos procesos


microbianos del ciclo del carbono
Grupo 4QM3 Sección II
Equipo 1:
Cañas Barreiro Ronaldo Mauricio
Godinez Villeda Gary Alejandro

Profesores:
Santiago Cruz José Ángel
Mejía Coahuila Trinidad
Enríquez Nieto Cinthia Teresa
Gonzales Moreno Irma
Irma Martínez

Fecha de entrega: 12 Mayo 2021


Objetivos.
• Determinar la productividad primaria del fitoplancton en una muestra de
agua.
• Aislar y cuantificar las poblaciones de microorganismos celulíticos y
amilolíticos en muestras de suelo.
Resultados.
Tabla 1. Actividad fotosintética y productividad primaria calculadas para las diferentes
muestras procedentes de cuatro distintas fuentes.
Procedencia Tiempo Volumen de Gasto Gasto Oxígeno en P
la muestra tiosulfato tiosulfato fotosistema (mg/L/h) Pr
para titular (mL) Fi (mL) Fo (mg/L) (mg
(mL) Fi Fo C/L/h)
Bosque de Aragón 6 100 32.4 11 64.8 22 7.13 2.67
Parque Tezozómoc 5.5 200 28.9 20.4 28.9 20.4 1.54 0.57
Lago de Xochimilco 4 50 22 2.2 88 8.8 19.8 7.425
Alameda oriente 6 200 5.2 4.8 5.2 4.8 0.06 0.0225

25

20

15

10

0
Bosque de Aragón Parque Tezozómoc Lago de Xochimilco Alameda oriente

Figura 1. Actividad fotosintética calculada para las diferentes muestras procedentes de


cuatro distintas fuentes.
Tabla 2. Cuantificación de la población de microorganismos amilolíticos expresada en
UFC/g en base húmeda y base seca de las muestras obtenidas en cada una de las
estaciones de las cascadas de Atlihuetzía.
Eq. %H Dilución UFC/placa UFC/g Log UFC/g
Placa 1 Placa 2 Promedio B.H B.S (B.S.)
1 10 1X10-6 27 31 29 2.9X108 3.2X108 8.50
2 5 1X10-5 234 245 239.5 2.39X108 2.5X108 8.39
3 15 1X10-5 199 212 205.5 2.05X10 8 2.4X108 8.38
4 7 1X10-4 56 58 57 5.7X106 6.1X106 6.78
5 9 1X10-6 132 145 138.5 1.38X109 1.5X109 9.17
6 3 1X10-3 67 72 69.5 6.9X10 5 7.1X105 5.85
7 21 1X10-4 111 93 204 1.02X107 1.2X107 7.07
8 8 1X10-5 37 41 39 3.9X107 4.2X107 7.62

10

0
Eq.1 Eq.2 EQ.3 Eq.4 Eq.5 Eq.6 Eq.7 Eq.8

Figura 2. Log de las UFC/gB.S de los microorganismos amilolíticos cuantificados en las


muestras de suelo tomadas de las cascadas de Atlihuetzia.
Tabla 3. Cuantificación de la población de microorganismos celulíticos expresada UFC/g
en base húmeda y base seca de las muestras obtenidas en cada una de las estaciones
de las cascadas de Atlihuetzía.
Eq. %H Dilución UFC/placa UFC/g Log UFC/g
Placa 1 Placa 2 Promedio B.H B.S (B.S.)
1 10 1X10-5 63 58 60.5 6X108 6.6X108 8.81
2 5 1X10-5 274 281 277.5 2.77X108 2.9X108 8.46
3 15 1X10-5 251 263 257 2.57X108 3.0X108 8.47
4 7 1X10-4 34 39 36.5 3.6X106 3.8X106 6.57
5 9 1X10-6 94 89 91.5 9.1X108 1X108 8
6 3 1X10-3 249 247 248 2.48X106 2.5X106 6.29
7 21 1X10-4 87 81 84 8.4X106 1X106 6
8 8 1X10-5 52 61 56.5 5.6X107 6X107 7.77
10

0
Eq.1 Eq.2 Eq.3 Eq.4 Eq.5 Eq.6 Eq.7 Eq.8

Figura 3. Log de las UFC/gB.S de los microorganismos amilolíticos cuantificados en las


muestras de suelo tomadas de las cascadas de Atlihuetzia.

Discusión.
De las ocho estaciones, destaca en un mayor número de UFC las estaciones 2, 3 y
5 en el caso de los microorganismos amilolíticos.
Para los microorganismos celulolíticos, hubo una mayor cantidad de UFC en las
estaciones 2, 3 y 6.

Los resultados obtenidos de las muestras de suelo sembradas en gelosa almidón


evidenciaron la presencia de microorganismos amilolíticos, los cuales utilizan
enzimas reductoras para producir azúcares simples, fueron apreciados al agregar
Lugol, el cual al entrar en contacto con el almidón del medio forma un compuesto
denominado complejo Lugol-almidón de color azul obscuro, observando de esta
forma a los microorganismos amilolíticos como colonias rodeadas por un halo
incoloro en el fondo azul obscuro formado por el complejo, que indica la presencia
de enzimas degradadoras de almidón como la amilasa que, después de haber sido
producida por las colonias bacterianas y a su vez haber degradado el almidón
alrededor de la misma, habría dejado sin teñir las zonas circundantes y
percibiéndolas como dichos halos.

La presencia de organismos celulíticos, los cuales son comunes en los suelos de


cultivo, en abono y tejidos vegetales en descomposición, en las placas preparadas
con agar rojo Congo se comprobó mediante la observación de colonias que
presentaron un halo color amarillo, el cual indica que dichas colonias cuentan con
enzimas degradadoras de celulosa (principal componente de las plantas) como las
celulasas. El colorante del medio forma un complejo con la celulosa presente en el
mismo, sin embargo, al degradarse esta, provoca la ruptura del complejo debido a
la incapacidad del colorante para interactuar con las moléculas de celulosa
degradadas y, por consiguiente, generando los halos antes mencionados.
La determinación de productividad fotosintética por la técnica de Winkler determinó
que los niveles de oxígeno disuelto fueron mayores en las muestras expuestas a la
luz. El proceso fotosintético depende de este último factor para la conversión de la
energía lumínica en la energía química requerida para llevar a cabo la hidrólisis que,
en última instancia consiste en la ruptura de la molécula de agua donde el hidrógeno
será aprovechado en las consiguientes etapas del metabolismo vegetal del alga,
mientras que, el oxígeno será liberado al ambiente, siendo esta la razón primordial
del porqué de los niveles de oxígeno disuelto.

Con los resultados presentados en las gráficas y tablas, observamos que hay mayor
número de microorganismos celulolíticos, por lo que podemos decir que la mayoría
de las estaciones presentan gran cantidad de celulosa y los azúcares presentes
están de una manera más abundante en la vegetación, y eso es claro, pues en las
muestras de suelo había presencia de hierba y pasto, al igual que árboles. Por lo
tanto, en las estaciones donde no hay una gran variedad de estos dos tipos de
microorganismos se puede deber a la ausencia de vegetación presente en el suelo.

En la productividad primaria se utilizan los cambios de oxígenos disueltos para la


estimación de metabolismos de los microorganismos presentes. Se debe tomar en
cuenta los cambios de concentración del oxígeno, pues el tiempo de incubación
puede mostrar cambios en la fotosíntesis.

Conclusiones.

• La cantidad de microorganismos depende de la vegetación del suelo


• La productividad primaria siempre será diferente de los ecosistemas de
donde se recolecta la muestra
• La cantidad de oxígeno disuelto depende directamente de la exposición a la
luz solar y del ciclo de la fotosíntesis.
• Los diferentes microorganismos en el suelo producen enzimas para el
aprovechamiento de las cadenas poliméricas a partir de su descomposición
en monosacáridos
• La falta de luz propicia en los organismos fotosintéticos la transformación
de oxígeno orgánico a inorgánico y por consiguiente, la mineralización del
medio.
Cuestionario:
• Explique por qué es importante la determinación de la productividad
primaria relativa.
Porque a través de esta podemos saber la tasa a la cual la energía lumínica
es almacenada por la actividad fotosintética en forma de materia orgánica y
que puede ser utilizada en forma de alimento.
También porque pueden ser utilizados como indicadores del estatus
nutricional de cuerpos de agua naturales.
• ¿Qué aplicación podemos darles a los microorganismos celulolíticos?
A la transformación de residuos sólidos orgánicos en compost.
Utilización de residuos vegetales generados en el sector floricultor nacional
en la elaboración de papel manual.
Obtención de etanol como biocombustible.
• ¿Cuál es la razón de multiplicar por 0.375 la actividad fotosintética, para
obtener la productividad primaria?
0.375 es el factor para convertir mg de oxígeno a mg de carbono. El factor
12/32=(0.375) es utilizado para convertir el oxígeno liberado a carbono fijado,
dado que 1 mol de O (32g) es liberado por cada mol de carbono (12g) fijado.
2

• Explique la reacción que ocurre en la degradación de almidón y de la


celulosa.
Hidrólisis enzimática del almidón: En este proceso requiere dos etapas,
La primera etapa.- Se denomina licuefacción, que consiste en una hidrólisis
de las largas cadenas de almidón para obtener maltodextrina (cadenas más
cortas de almidón), está llevada a cabo por la enzima a-amilasa que corta los
enlaces glicosídicos a-1,4 intentos en forma aleatoria del almidón.
Segunda etapa,- Sacarificación, Es el momento donde se hidrolizan los
enlaces a-1,4 y/o a-1,6 del terminal no reductor de la cadena de dextrina, por
la enzima amiloglucosidasa, liberando glucosa.
La celulosa. Es producida principalmente por hongos aeróbicos tales como
Trichoderma reesei, Trichoderma viride, etc y bacterias mesofílicas como
Cellulomonas sp. Clostridium thermocellus, etc. Su acción implica una
operación secuencial y sinergista de un grupo de enzimas

Bibliografía:
1. Martínez Romero,Leyva Galán (2014)La biomasa de los cultivos en el ecosistema.
Sus beneficios agroecológicosRecuperado
de:http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext& pid= S0258-
59362014000100002
2. Ronald M. Atlas, Richard Bartha. (2001). Ecología microbiana y microbiología
ambiental. España: Pearson.
3. Murray W. Nabors. (2006). Introducción a la botánica. Madrid: Pearson educación,
S.A.

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