Quimica Farmaceutica B

Introducción a la
Química
Farmacéutica
C. AVENDANO
Gravy
McGraw hue • inter americana
INTRODUCCIÓN
A LA
QUÍMICA
FARMACÉUTICA
Coordinación:
CARMEN AVENDAÑO LÓPEZ
2.a edición
a® MADRID • BUENOS AIRES • CARACAS • GUATEMALA • LISBOA • MÉXICO

NUEVA YORK • PANAMÁ • SAN JUAN • SANTAFÉ DE BOGOTÁ • SANTIAGO • SAO PAULO
AUCKLAND • HAMBURGO • LONDRES • MILÁN • MONTREAL • NUEVA DELHI • PARÍS
SAN FRANCISCO • SIDNEY • SINGAPUR • ST. LOUIS • TOKIO • TORONTO
INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
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ninguna forma o por cualquier medio, ya sea electrónico, mecánico, por fotocopia, por registro u otros métodos, sin
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DERECHOS RESERVADOS © 2001, respecto a la segunda edición en español, por

CARMEN AVENDAÑO y cois.
McGRAW-HILL/INTERAMERICANA DE ESPAÑA, S. A. U.
Edificio Valrealty, 1 *. planta
Basauri, 17
28023 Aravaca (Madrid)
Primera edición: 1993
ISBN: 84-486-0361-3
Depósito legal: M. 38.963-2001
Preimpresión: FER Fotocomposición. S.A. Bocángcl, 45. 28028 Madrid

Impreso en EDIGRAFOS, S. A. Volta, 2. Pol. Industrial San Marcos.
28906 Getafe (Madrid)
IMPRESO EN ESPAÑA - PRINTED IN SPAIN

Colaboradores
Carmen Avendaño López. Catedrática de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y

Farmacéutica. Facultad de Farmacia. Universidad Complutense de Madrid.
Rosa Claramunt Vallespí. Catedrática de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y Biología.
Facultad de Ciencias. UNED. Madrid.
Modesta Espada López. Profesora Titular de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y
Antonio Espinosa Úbeda. Catedrático de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica. Facultad de
Farmacia. Universidad de Granada.
Miguel Ángel Gallo Mezo. Catedrático de Química Farmacéutica. Departamento de Química Orgánica.
Facultad de Farmacia. Universidad de Granada.
Emilio Llama Hurtado. Profesor Titular de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y
José Carlos Menéndez Ramos. Profesor Titular de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y
Antonio Monge Vega. Profesor Ordinario de Química Orgánica y Farmacéutica. Departamento de Química
Orgánica y Farmacéutica. Facultad de Farmacia. Universidad de Navarra.
Carmen Pedregal Freire. Profesora Titular de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y
Farmacéutica. Universidad Complutense de Madrid.
Enrique Raviña Rubira. Catedrático de Química Farmacéutica. Departamento de Química Orgánica. Facultad
de Farmacia. Universidad de Santiago de Compostela.
Ferran Sanz Carreras. Catedrático de Bioestadística e Informática Biomédica. Coordinador del Grupo de
Investigación en Informática Biomédica. Instituí Municipal d'Investigació Médica. Universitat Pompeu
Fabra. Barcelona.
Mónica SOllhuber Kretzer. Profesora Titular de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y
PROLOGO a la primera edición
Los textos de química farmacéutica tradicionales se concibieron como un conglomerado de datos de las farmaco
peas acerca de las propiedades fisicoquímicas y actividades de los fármacos, entre ellas sus síntesis y métodos de
análisis. Al contemplarse este estudio sobre bases farmacológicas, se reunían compuestos sin relación estructural,
en una sistemática alejada de la metodología y racionalización características de la química orgánica. En esta úl
tima, la estructura de un compuesto o de un intermedio de reacción justifica sus propiedades y su reactividad, así
como la elección o diseño de métodos de trabajo para su análisis y su síntesis.
Este sistema, agravado por la enorme información sobre los fármacos acumulada a lo largo del tiempo,
era frecuentemente rechazado por profesores, que se veían obligados a presentarla en un breve espacio de tiem
po. y por alumnos, que encontraban textos con un material cada vez más difícil de comprender, en los que se da
ban por supuestos muchos conocimientos básicos imprescindibles.
Han transcurrido alrededor de 20 años desde que comenzó a impartirse la química farmacéutica como
asignatura en las universidades españolas como consecuencia de su inclusión en los planes de estudios de la li
cenciatura de farmacia de 1973. La experiencia alcanzada en este tiempo ha demostrado la necesidad de dispo
ner de un texto básico que introduzca los contenidos de esta disciplina, los cuales han sido definidos por las di
rectrices de la Comunidad Europea que se siguen en el actual proceso de reforma de las titulaciones
universitarias españolas, como «diseño, síntesis y análisis de fármacos». Este texto, que es un primer paso, es el
resultado de un trabajo en equipo en el que se ha contado con la participación entusiasta de diversos profesores,
y se ha planteado para ser utilizado por estudiantes o profesionales que deseen acercarse a la materia a un nivel
elemental pero actualizado.
El diseño de nuevos y mejores fármacos se basa en la correlación entre la estructura de los ya conocidos y
su efectos farmacodinámicos experimentados. Ahora bien, los efectos farmacodinámicos son el resultado, en la
inmensa mayoría de los casos, de interacciones específicas entre el fármaco y macromoléculas biológicas, parti
cularmente enzimas y receptores, por lo que la sistematización de conocimientos debe hacerse, más que desde
un punto de vista farmacológico, desde el de su mecanismo de acción a nivel molecular, cada vez más conocido.
Sólo de este modo puede hablarse propiamente de la relación estructura química-actividad biológica.
Aunque los fenómenos biológicos son complejos y no pueden explicarse como una simple suma de pro
cesos aislados, la comprensión de éstos sobre bases moleculares es imprescindible para encontrar sus conexio
nes y diseñar fármacos específicos. Esta tarea es el resultado de un trabajo en equipo, cuyos componentes han
de ser capaces de comprender el lenguaje y los métodos utilizados por los distintos especialistas. Este nuevo en
PRÓLOGO A LA PRIMERA EDICIÓN
foque obliga definilivamente a asumir la interdisciplinariedad de la química farmacéutica, fundamentalmente en

lo que representa en el diseño de fármacos, que tal como se practica en la realidad requiere el intercambio con
tinuo de conocimientos desde muy diversos campos.
Si bien corresponde a la farmacología, y en un sentido más amplio a la biología, el desarrollo de modelos
para el estudio de las respuestas biológicas que originan sustancias naturales o de síntesis, así como el estableci
miento de los mecanismos moleculares que son responsables de dichas respuestas, es labor de la química far
macéutica justificar dichos mecanismos en función de la estructura de aquellas sustancias, y proponer las modi
ficaciones estructurales más idóneas para manipular dicha respuesta y encontrar fármacos mejores. Al igual que
el conocimiento de los mecanismos por los que se producen las transformaciones químicas permite disponer de
modelos para manipular la reactividad química de las moléculas, el conocimiento de los mecanismos biológicos
por los que se produce un determinado efecto permite disponer de modelos para predecir la actividad de estruc
turas nuevas, a través de correlaciones y métodos estadísticos. Dichos modelos están basados en propiedades fí
sicas (como el pKa o el coeficiente de partición), en la mecánica cuántica (para definir conformaciones y distri
bución de carga fundamentalmente), en la modelización molecular y, de un modo cualitativo pero muy eficaz,
en consideraciones de estructura y reactividad.
Dado que las dimensiones y objetivos de este texto no permiten un estudio sistemático de los fármacos, se
dedica una primera parte (capítulos 1 a 6) a considerar los diversos criterios y métodos de trabajo que se utilizan
en la búsqueda de estructuras modelos y en su manipulación, dirigida a conseguir la máxima actividad y selecti
vidad. En los capítulos 7 y 8 se contempla un importante aspecto del diseño y desarrollo de los fármacos: la mo
dificación de una estructura a fin de controlar su absorción, distribución y metabolismo. En los capítulos 9 a 18
se han seleccionado ejemplos representativos del modo de actuación de los fármacos y de las bases de diseño,
desde los inhibidores enzimáticos a los que interaccionan con receptores específicos, pasando por los que inter
fieren los diversos procesos biológicos de transporte.
La segunda parte del texto está dedicada a la síntesis de fármacos (capítulos 19 a 26). La metodología em
pleada en la síntesis de fármacos es idéntica a la de la de cualquier otra molécula, activa o no, y es tal su grado
de desarrollo que es imposible considerarla en toda su extensión. Por ello, resulta más conveniente comentar las
estrategias utilizadas en la preparación de varios fármacos, intentando hacer más énfasis en la síntesis de las es
tructuras más abundantes en el arsenal terapéutico, como son los heterociclos, y de las «específicamente acti
vas». como antibióticos, péptidos y esteroides, aunque por razones de limitación de objetivos se han sacrificado
muchas otras. Los ejemplos seleccionados son sólo ilustrativos de ciertos principios generales que hemos trata
do de racionalizar, con la esperanza de que estimulen a profundizar en una de las actividades más brillantes y
estimulantes de la química. Se ha considerado imprescindible el estudio de la problemática relacionada con la
síntesis de compuestos enantioméricamente puros que, salvo excepciones, serán obligados en un futuro para su
aplicación como medicamentos.
La tercera parte, dedicada al análisis de fármacos, se ha restringido al máximo, puesto que existen obliga
toriamente en la licenciatura de farmacia disciplinas dedicadas específicamente al análisis químico e instrumen
tal. En los capítulos correspondientes (capítulos 27 a 30) se ha pretendido poner de relieve que el conocimiento
de la estructura y propiedades de los fármacos también permite establecer y comprender los criterios analíticos
para su determinación.
Esperamos que los comentarios y criticas que suscite esta «Introducción a la Química Farmacéutica» per
mitan mejorarla en un futuro.
Madrid, diciembre de 1992
Carmen Avendaño López

PROLOGO a la segunda edición
El papel del farmacéutico en la sociedad moderna está cambiando y. en consecuencia, las Facultades de Farma
cia europeas están intentando adaptar sus planes de estudios a estos cambios. Lo que se ha hecho incuestionable
es que la Química Farmacéutica ha de completar el conocimiento de los fármacos en lo que respecta a su dise
ño. síntesis y análisis. Los estudiantes pueden completar este texto utilizando, como material de trabajo, el
manual Ejercicios de Química Farmacéutica, preparado por parte de los autores de este texto y editado por
McGraw-Hill/Interamericana en 1997.
Al preparar esta segunda edición, hemos mantenido la filosofía de la primera (1993). estableciendo en la
medida de lo posible las relaciones estructura química-actividad biológica. Esta información se introduce con
sentido retrospectivo, a través del mejor conocimiento de los fármacos ya establecidos, y también se analiza
cómo van surgiendo nuevos compuestos que tienen interés como posibles fármacos. Poniendo énfasis en las ba
ses químicas de los mecanismos de acción a nivel molecular, hemos intentado incorporar la información más re
levante que se ha producido en los últimos años. Aunque al diseño asistido por ordenador se le ha dado una ex
tensión semejante a la de la primera edición, se han ido incluyendo sus aportaciones a la racionalización de los
resultados de actividad biológica.
Para mayor simplicidad, se ha mantenido la denominación de figuras para lo que en muchas ocasiones
son esquemas y. por razones de extensión y alcance, así como por la escasa repercusión real que han tenido has
ta el momento en el hallazgo de prototipos, no se ha hecho hincapié en el conocimiento de nuevas metodologías
de síntesis y análisis que, como la síntesis combinatoria o los métodos de cribado al azar de alto rendimiento
(high throughput screening methods), acelerarán el proceso de descubrimiento de fármacos.
Sigue sin existir un método infalible para descubrir una familia de fármacos derivada de un prototipo ori
ginal. y puede constatarse que los factores económicos siguen forzando, incluso a compañías potentes, a com
petir desarrollando fármacos similares a los registrados por otras cuando es posible lograr alguna mejoría tera
péutica en estos análogos, denominados productos me too. La falta de originalidad de esta metodología se ve
compensada, en ocasiones, por descubrimientos notables.
Los productos naturales siguen siendo prototipos importantes en el descubrimiento de fármacos. Uno de
los grupos más desarrollados en los últimos años ha sido el de los péptidos. cuya optimización está dando lugar
a la introducción en la terapéutica de fármacos con estructura de peptidomiméticos.
La creatividad está en manos de los grupos más capaces por la claridad de sus propuestas, que son cada
vez más racionales. Estas surgen con frecuencia de la asociación de grandes empresas con otras pequeñas, pero
X ii PRÓLOGO A LA SEGUNDA EDICIÓN
muy especializadas, siendo fundamental poseer una gran agilidad en la planificación de los trabajos y en la ges
tión de los resultados.
Surgen cada día nuevas dianas terapéuticas para las que se buscan posibles ligandos y, en consecuencia,
posibles fármacos. Estos descubrimientos alcanzarán cada vez más importancia según se vaya conociendo el in
terés de las proteínas que codifican los diversos genes.
Conociendo, directa o indirectamente, estas dianas, puede establecerse racionalmente la mejor comple-
mentariedad geométrica y electrónica receptor-ligando. Pero, aun así, no puede determinarse de forma inequí
voca el comportamiento del fármaco in vivo, especialmente en lo que respecta a la absorción, distribución y me
tabolismo, cuya predicción sigue siendo una cuestión de experiencia. Hasta ahora, las enzimas han sido más
fáciles de aislar y de estudiar, lo que justifica el gran número de inhibidores enzimáticos que se han ido desarro
llando. siendo más difícil el descubrimiento de agonistas y antagonistas de receptores. Este panorama tiene que
cambiar con la genómica y. fundamentalmente, con la proteómica.
En este sentido, aunque según algunos nos esperan fármacos diferentes e incluso «personalizados», pare
ce prudente esperar a conocer la repercusión que tendrán en la farmacoterapia los nuevos conocimientos bioló
gicos y la mayor aplicación de la biotecnología, mientras que la terapia génica tendrá que encontrar los vectores
que permitan que los genes alcancen su destino específico en el organismo.
Quiero expresar mi agradecimiento a todos los coautores y a la Dra. M. T. Ramos, que ha sido una ayuda
inestimable en la corrección de pruebas. Nos gustaría conseguir que esta segunda edición fuese útil, no sólo a
los estudiantes de la Licenciatura de Farmacia, sino también a todos los que están interesados en el conocimien
to del complejo mundo de los fármacos, al que nosotros nos asomamos desde nuestra perspectiva de químicos
orgánicos.
Madrid, junio de 2001
Carmen Avendaño López

Contenido
Colaboradores.................................................................................................................................................... vii
Prólogo a la primera edición............................................................................................................................. ix
Prólogo a la segunda edición ........................................................................................................................... xi
1. Conceptos básicos en química farmacéutica. Nomenclatura de los fármacos. J. C. Menéndez
y C. Avendaño .................................................................................................................................. I
1. Conceptos básicos en química farmacéutica ................................................................................ 1
2. Nomenclatura de los fármacos .......................................... 4
2. Evolución de los métodos de búsqueda y descubrimiento de fármacos. .4. Monge .................. 25
1. Panorama histórico ......................................................................................................................... 25
2. Búsqueda de nuevos fármacos ........................................................................................................ 27
3. Etapas del desarrollo de un fármaco .............................................................................................. 39
4. El coste de la innovación ................................................................................................................ 39
3. Dianas biológicas: receptores. M. A. Gallo y A. Espinosa .............................................................. 41
1. Introducción: dianas biológicas y sus ligandos ............................................................................. 41
2. Experimentación farmacológica: curvas dosis-respuesta ............................................................ 42
3. Enfoque bioquímico mediante unión (Binding) a radioligandos ................................................ 48
4. Tipos de receptores y mecanismos para su activación ................................................................ 51
5. Aspectos estereoquímicos relacionados con la interacción fármaco-receptor ........................... 59
4. Optimización de un prototipo. Correlaciones cualitativas estructura química-actividad bioló
gica. J. C. Menéndez y C. Avendaño ............................................................................................. 63
I. Introducción .................................................................................................................................... 63
2. Modalidades del procedimiento de modificación molecular ..................................................... 65
3. Criterios clásicos para la modificación sistemática de unidades estructurales .......................... 67
4. Un ejemplo de aplicación: modificaciones del enlace peptídico ............................................... 77
5. Validez de las conclusiones alcanzadas a través de correlaciones cualitativas estructura-activi
dad ............................................................................................................................................. 82
Xiv CONTENIDO
5. Optimización de un prototipo. Correlaciones estructura química-actividad biológica cuanti

tativas. R. Claramunt y C. Avendaño ............................................................................................. 85
I. Introducción ...................................................................................................................................... 85
2. Parámetros o descriptores de las propiedades fisicoquímicas delos compuestos orgánicos ... 86
3. Ejemplo de aplicación del análisis QSAR al diseño deun fármaco .............................................. 106
4. Bioisosterismo y QSAR .................................................................................................................... 108
5. QSAR 3D .......................................................................................................................................... 109
6. Diseño de series por métodos semicuantitativos ............................................................................ 109
6. Modelos moleculares tridimensionales y su uso en el estudio de las relaciones estructura-acti
vidad. F. Sanz ................................................................................................................................... US
1. Introducción .................................................................................................................................... US
2. Representación gráfica de una molécula....................................................................................... 115
3. Coordenadas moleculares ............................................................................................................. 118
4. Obtención de la estructura tridimensional de un compuesto .................................................... 119
5. Optimización geométrica ............................................................................................................. 122
6. Análisis conformacional ............................................................................................................... 123
7. Dinámica molecular........................................................................................................................ 125
8. Mecánica molecular........................................................................................................................ 125
9. Función de onda molecular ........................................................................................................... 127
10. Propiedades derivadas de la función de onda molecular ........................................................... 129
11. Potenciales de interacción molecular ........................................................................................... 134
12. Estudios de la relación entre la estructura molecular de ligandos y su actividad biológica (mé
todos indirectos)..................................................................................................................... 134
13. Estudios cuantitativos de las relaciones entre propiedades moleculares 3D de ligandos y la ac
tividad biológica (3D-QSAR) .............................................................................................. 135
14. Otras aplicaciones de la semejanza molecular ........................................................................... 136
15. Predicción de la estructura tridimensional delas proteínas ........................................................ 137
16. Simulación del entorno de las biomoléculas.Solvatación .......................................................... 139
17. Relación entre las estructuras moleculares y la actividad biológica considerando la estructura
del receptor (métodos directos). Simulación de la interacción ligando-receptor ............ 139
7. Metabolismo de fármacos. E. Llama y C. Avendaño ........................................................................ 143
I. Principios de farmacocinética ....................................................................................................... 143
2. Transporte a través de las membranas biológicas ........................................................................ 144
3. Absorción ........................................................................................................................................ 146
4. Distribución ..................................................................................................................................... 147
5. Excreción ......................................................................................................................................... 147
6. Metabolismo de los fármacos ....................................................................................................... 148
8. Profármacos y sus aplicaciones. La manipulación de las propiedades fisicoquímicas y farma-
cocinéticas como objetivo del diseño de fármacos. J. C. Meriénde: y C. Avendaño .............. 175
1. Introducción ................................................................................................................................... 175
2. Concepto de profármaco .............................................................................................................. 176
3. Procedimientos para la construcción de profármacos sobre distintos grupos funcionales .... 177
4. Manipulación estructural orientada a resolver problemas de formulación farmacéutica y admi
nistración ................................................................................................................................ 183
5. Regulación del paso a través de membranas biológicas ............................................................ 188
6. Distribución selectiva .............................. ».................................................................................. 193
7. Modulación del metabolismo de fármacos .................................................................................. 201
9. La inhibición enzimática como objetivo en el diseño de fármacos (I). Agentes quimioterápicos.
C. Avendaño ..................................................................................................................................... 209
1. Introducción .................................................................................................................................... 209
2. Enzimas y coenzimas ...................................................................................................................... 211
CONTENIDO XV
3. Principios fundamentales de la catálisis enzimática ................................................................... 215

4. Inhibición enzimática. Tipos de inhibidores ................................................................................ 218
5. Quimioteripicos que actúan como inhibidores enzimáticos ....................................................... 224
10. Inhibidores enzimáticos que interfieren la biosintesis de las paredes celulares. C. Pedregal
y C. Avendaño.................................................................................................................................. 251
1. Introducción................................................. 251
2. Estructura del peptidoglicano ........................................................................................................ 251
3. Inhibidores de la biosintesis de UDP-N-acetilmuramoil pentapéptido ...................................... 253
4. Inhibidores de la segunda y tercera etapas de la biosintesis del peptidoglicano ........................ 255
5. Inhibidores de la cuarta etapa de la biosintesis del peptidoglicano antibióticos p-lactámicos . 257
6. Agentes que interfieren la biosintesis de otros componentes de la pared de las bacterias gram-
negativas ................................................................................................................................. 271
7. Inhibidores de la biosintesis de la pared celular de los hongos ................................................. 273
11. Inhibidores enzimáticos farmacodinámicos. M. Espada y C. Avendaño .................... 275

1. Introducción .................................................................................................................................... 275
2. Inhibidores de hidrolasas ................................................................................................................ 275
3. Inhibidores de enzimas que tienen al fosfato de piridoxal como cofactor ................................ 294
4. Inhibidores del citocromo P-450 ................................................................................................... 300
5. Inhibidores de la anhidrasa carbónica ........................................................................................... 306
6. Inhibidores de las monoaminooxidasas ......................................................................................... 308
7. Inhibidores de la COMT ................................................................................................................ 312
8. Inhibidores de la fosfolipasa A; y del metabolismo del ácido araquidónico.............................. 313
12. Diseño de fármacos que alteran el transporte a través de las membranas celulares. C. Pedre
gal y C. Avendaño ......................................................................................................................... 321
1. Introducción .................................................................................................................................... 321
2. Canales iónicos, estructura y función .......................................................................................... 321
3. Los canales iónicos como receptores de fármacos ...................................................................... 326
4. Fármacos que afectan a otros procesos de transporte activo de iones ...................................... 349
5. Fármacos que afectan a procesos de transporte activo de neurotransmisores y hormonas ... 354
6. Quimiosensibilizadores de fármacos antitumorales que actúan inhibiendo el transporte media
do por la glicoproteína P (inhibidores MDR) ...................................................................... 359
7. Fármacos ionóforos ....................................................................................................................... 360
8. Fármacos que actúan en la membrana citoplásmica como sistemas transportadores de molécu
las pequeñas ......................... 364
9. Agentes que rompen la membrana citoplásmica ......................................................................... 365
13. Fármacos que actúan sobre receptores de membrana (I). Fármacos que actúan sobre recepto
res adrenérgicos, dopaminérgicos y serotoninérgicos. £. Raviña ........................................ 367
1. Introducción .................................................................................................................................... 367
2. Fármacos adrenérgicos (simpaticomiméticos) ............................................................................... 369
3. Dopamina y receptores dopaminétgicos ....................................................................................... 383
4. Serotonina y receptores serotoninérgicos....................................................................................... 393
5. Ligandos del receptor de melatonina y sus posibles aplicaciones terapéuticas ......................... 400
6. Fármacos antiobesidad relacionados con los receptores adrenétgicos y serotoninérgicos ......... 401
14. Diseño de fármacos que actúan sobre receptores de acetilcolina. E. Raviña ............................ 405
I. Introducción. Acetilcolina y receptores colinérgicos ................................................................ 405
2. Interacciones entre la acetilcolina y sus receptores ................................................................... 409
3. Agonistas muscarínicos ................................................................................................................ 411
4. Agonistas nicotínicos .................................................................................................................... 413
xvi CONTENIDO
5. Antagonistas muscarínicos ......................................................................................................... 414

6. Antagonistas de los receptores nicotínicos ...................................... 418
15. Diseño de fármacos que actúan sobre receptores de membrana (III). Receptores de aminoáci
dos y péptidos. M. Sóllhuber y C. Avendaño .............................................................................. 421
1. Introducción ................................................................................................................................... 421
2. Receptores de GAB A.................................................................................................................... 421
3. Receptores de glicina .................................................................................................................... 434
4. Aminoácidos excitadores .............................................................................................................. 435
5. Receptores de péptidos ................................................................................................................ 439
16. Diseño de fármacos que actúan sobre receptores de histamina y adenosina. Profármacos de
óxido nítrico. M. Sóllhuber y C. Avendaño .............................................................................. 463
1. Introducción .................................................................................................................................. 463
2. Fármacos que actúan sobre receptores de histamina ................................................................ 464
3. Receptores de la adenosina y sus derivados fosforilados .......................................................... 484
4. Profármacos de óxido nítrico ....................................................................................................... 491
17. Diseño de fármacos que interactúan con receptores intracelulares (I). Receptores de hormo
nas esteroideas, tiroideas y otros. C. Pedregal y C. Avendaño ............................................. 497
1. Introducción .................................................................................................................................. 497
2. Agonistas y antagonistas de los receptores de hormonas esteroideas .................................. 499
3. Fármacos inmunosupresores ................................................... 515
4. la, 25-Dihidroxivitamina D> ...................................................................................................... 518
5. Hormonas tiroideas ..................................................................................................................... 524
6. Ligandos de receptores retinoides. Vitaminas A...................................................................... 527
7. Agonistas de receptores PPAR ............................... 529
18. Fármacos que interactúan con los ácidos nucleicos. M. Espada y C. Avendaño ....................... 531
1. Introducción ................................................................................................................................... 531
2. Consideraciones sobre la estructura, la función y las formas de interacción del ADN .......... 532
3. Fármacos que se unen de forma covalente al ADN .................................................................. 535
4. Fármacos intercalantes de ADN .................................................................................................. 563
5. Fármacos que se unen de forma no covalente al ADN sin intercalarse ................................... 565
6. Inhibidores de la mitosis que actúan en los microtúbulos.......................................................... 567
7. Antibacterianos que interactúan con ARN. Inhibidores de la biosíntesis de proteínas .......... 568
8. Nuevos avances en el tratamiento oncológico ........................................................................... 572
19. Diseño de fármacos basado en la química de radicales libres. J. C. Menéndez.......................... 575

1. Introducción ................................................................................................................................... 575
2. Tratamiento antioxidante .............................................................................................................. 582
3. Fármacos que actúan a través de la formación de especies radicalarias ................................... 597
20. Síntesis de fármacos. Derivados aromáticos. C. Pedregal y C. Avendaño .................................. 611

1. Introducción ................................................................................................................................... 611
2. Fármacos con estructura aromática ............................................................................................. 616
3. Compuestos aromáticos policíclicos condensados .................................................................... 640
21. Síntesis de fármacos con estructura heterocíclica no condensada. A. Espinosa y M. A. Gallo .. 645
1. Introducción ............................................................... 645
2. Fármacos derivados de furano y tetrahidrofurano....................................................................... 647
3. Fármacos derivados de pirrol, tiofeno y heterociclos relacionados ......................................... 648
4. Fármacos derivados de piridina y heterociclos relacionados .................................................... 650
5. Fármacos que contienen oxazol, tiazol y heterociclos relacionados ......................................... 655
6. Fármacos con estructura de pirazol, imidazol y heterociclos relacionados ............................. 657
CONTENIDO xvii
7. Fármacos que contienen otros heterociclos pentagonales con varios heteroátomos .............. 661
8. Fármacos que contienen heterociclos hexagonales con varios heteroátomos.......................... 662
22. Síntesis de sistemas heterocíclicos condensados con benceno. A. Monge ................................... 669
1. Anillos de cinco eslabones condensados con benceno ............................................................... 669
2. Anillos de cinco eslabones con dos heteroátomos condensados con benceno .......................... 674
3. Anillos de seis eslabones con un heteroátomo condensados con benceno ................................ 679
4. Anillos de seis eslabones con dos heteroátomos condensados con benceno ............................ 682
5. Anillos de siete eslabones con dos heteroátomos condensados con benceno............................ 689
23. Síntesis de péptidos. E. F. Llama ....................................................................................................... 695
1. Introducción ................................................................................................................................... 695
2. Problemática de la síntesis de péptidos ....................................................................................... 700
3. Síntesis química de péptidos ........................................................................................................ 701
4. Síntesis de péptidos por métodos biológicos............................................................................... 714
5. Estrategias utilizables en el diseño de una síntesis de péptidos. Ejemplos .............................. 718
24. Uso de productos naturales. Obtención de fármacos por semisíntesis (I). Síntesis de antibióti
cos P-lactámicos y otros. M. Sdllhuher....................................................................................... 723
I. Introducción .................................................................................................................................... 723
2. Síntesis de antibióticos p-lactámicos............................................................................................. 723
3. Síntesis de tetraciclinas ................................................................................................................. 737
4. Antibióticos aminoglucósidos ....................................................................................................... 740
5. Ansamicinas ..................................................................................................................................... 741
6. Síntesis de paclitaxel y análogos ................................................................................................... 742
25. Obtención de fármacos por semisíntesis (II). Síntesis de esteroides. E. Raviña .......................... 745
1. Introducción .................................................................................................................................... 745
2. Estrategias para la preparación comercial de estrógenos, andrógenos y progestinas (progestá-
genos) ....................................................................................................................................... 746
3. Síntesis de esteriodes con el anillo A aromático ........................................................................ 749
4. Semisíntesis de 19-noresteroides ................................................................................................. 749
5. Síntesis total de 19-noresteroides ................................................................................................. 751
6. Síntesis de andrógenos .................................................................................................................. 753
7. Síntesis de esteroides relacionados con la progesterona ........................................................... 757
8. Síntesis de corticosteroides ........................................................................................................... 759
9. Síntesis de mineralocorticoides..................................................................................................... 765
10. Síntesis de Vitamina Dj y la,25(OH)2D) .................................................................................... 767
26. Síntesis de fármacos quirales. J. C. Menéndez ................................................................................. 771
I. Conceptos fundamentales y términos estereoquímicos............................................................... 771
2. Estrategias generales para la obtención de compuestos enantioméricamente puros ................ 777
3. Reacciones estereoselectivas .......................................................................................................... 779
4. Utilización de sustratos quirales ................................................................................................... 796
27. Introducción al análisis farmacéutico. C. Avendaño ...................................................................... 801
1. Análisis, desarrollo y comercialización de fármacos ................................................................. 801
2. Elección de métodos de análisis y preparación de muestras ....................................................... 803
3. Técnicas de separación ................................................................................................................. 804
4. Técnicas cromatográfrcas ............................................................................................................. 805
5. Otras técnicas analíticas no espectroscópicas .............................................................................. 809
6. Enzimas en el análisis farmacéutico ............................................................................................. 811
7. Utilización de isótopos .................................................................................................................. 811
28. Análisis de fármacos basado en la reactividad de grupos funcionales. M. Espaday J. C Me
néndez ............................................................................................................................................. 815
xviii PRÓLOGO A LA SEGUNDA EDICIÓN
1. Introducción ...................... 815

2. Reacciones del grupo amino ......................................................................................................... 819
3. Reacciones del grupo hidroxilo ..................................................................................................... 829
4. Reacciones del grupo mercapto ..................................................................................................... 833
5. Reacciones del grupo carbonilo de aldehidosy cetonas .............................................................. 835
6. Reacciones del grupo carboxilo..................................................................................................... 838
7. Reacciones de derivados de ácido ................................................................................................. 841
8. Derivados del ácido carbónico ..................................................................................................... 845
9. Reacciones de sistemas policarbocíclicos .................................................................................... 850
10. Reacciones de sistemas heterocíclicos ........................................................................................ 851
29. Los métodos espectroscópicos en el análisis de fármacos. C. Pedregal y C. Avendaño ............. 863
1. Introducción ................................................................................................................................... 863
2. Espectroscopia UV-VIS ................................................................................................................. 865
3. Espectrometría de emisión y absorción atómica ......................................................................... 873
4. Espectrofluorimetría y espectrofosforimetría .............................................................................. 873
5. Espectrofotometría infrarroja ....................................................................................................... 875
6. Espectroscopia Raman........................................................ 876
7. Espectroscopias de resonancia magnética nuclear y de resonancia de espín electrónico......... 877
8. Espectrometría de masas ............................................................................................................... 881
9. Ejemplos de utilización de métodos espectroscópicos en el análisis de fármacos .................... 883
30. Métodos de separación y de análisis cuantitativo de enantiómeros. Determinación de la con
figuración absoluta. R Claramunt y C. Avendaño ................................................................. 897
1. Introducción .................................................................................................................................. 897
2. Propiedades de las moléculas quirales ..................................................................................... 898
3. Resolución (separación) de enantiómeros ................................................................................. 903
4. Métodos analíticos cualitativos y cuantitativos para determinar la pureza enantiomérica ... 908
5. Determinación deconfiguraciones absolutas .............................................................................. 916
índice analítico .............................................................................................................................................. 921
-------------------------------------------------------- 1-------------------------------------------------------------------------------------------
Conceptos básicos
en química farmacéutica.
Nomenclatura de los fármacos
Msc. María Eugenia Macas

BIOQUIMICA FARMACÉUTICA J. Q MENÉNDEZ y C. AVENDAÑO
1. CONCEPTOS BÁSICOS EN QUÍMICA FARMACÉUTICA
La química farmacéutica tiene como objetivos el estudio de los fármacos desde el punto de vista químico, así
como de los principios básicos utilizados en su diseño. Su rasgo diferencial respecto a otras áreas científicas es
su metodología, que se basa en el establecimiento de la relación entre la estructura química de un fármaco y su
actividad biológica.
Un fármaco, o principio activo, se define como una sustancia pura, químicamente definida, extraída de
fuentes naturales o sintetizada en el laboratorio, dotada de una acción biológica, que puede o no ser aprovecha
da por sus efectos terapéuticos. La lengua castellana, a diferencia de otras, distingue entre fármaco y droga,
que, estrictamente, significa una materia prima, de origen vegetal o animal, que contiene uno o varios principios
activos y que no ha sufrido manipulación, salvo la necesaria para su conservación.
Cuando un fármaco tiene una actividad biológica útil desde el punto de vista terapéutico, se hace necesa
rio su desarrollo hasta dar lugar a un medicamento, lo que supone las siguientes características:
— Se presenta como una «forma farmacéutica» (inyectables, comprimidos, etc.), constituida por uno o
varios principios activos y, generalmente, por uno o varios excipientes.
— Ha sido aprobado oficialmente para su comercialización tras superar una serie de controles analíticos
(composición química, pureza, etc.) y fannacológico-toxicológicos (actividad, efectos laterales y se
cundarios, ausencia de actividad carcinógena y teratógena. etc.).
La síntesis y el análisis de los fármacos son aplicaciones directas de la síntesis orgánica y de la química
analítica, respectivamente. Por tanto, su estudio debe realizarse desde una perspectiva estructural. En cambio,
para el estudio sistemático de los fármacos se prefiere una clasificación de tipo farmacológico o. más moderna
mente, según su mecanismo de acción a nivel molecular.
Tradicionalmente, se ha mantenido un concepto que todavía conserva cierta vigencia: la clasificación de
los fármacos en estructuralmente inespecíficos y estructuralmente específicos. El primer grupo, que es muy
minoritario, incluye aquellos fármacos cuya acción no está directamente relacionada con su estructura, o esta
relación no se conoce. La acción se explica, en este caso, por su capacidad para modificar las propiedades fisi
coquímicas de un medio biológico, con frecuencia una membrana. Por tanto, compuestos de estructuras muy di
versas pueden ejercer la misma acción. Entre ellos se encuentran hoy día ciertos anestésicos generales y algunos
anlibacterianos (Fig. 1.1).
2 INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
Ejemplos de anestésicos generales:

CjH,—O—CjH, CHCI,
Dietiléter Cloroformo
FjC-CHBrCI N2O
I. I. I -Trifluoro-2-bromo- Óxido nitroso
2-cloroetano (haloCano)
Ejemplos de antibacterianos «estructuralmente inespecíficos»:
ItjC—(CH;) u-ÑtCHdjCr
Cloruro de cetiltrimetilamonio
Figura 1.1. Algunos ejemplos de fármacos «estructuralmente inespecíficos».
En el segundo grupo, mínimos cambios estructurales pueden dar lugar a un compuesto inactivo o con una
actividad biológica diferente, a veces inesperada. Así, por ejemplo, dentro del grupo de las sulfonamidas encon
tramos. entre otras acciones, compuestos antibacterianos por inhibición de la biosíntesis de ácidos folímeos y
diuréticos por inhibición de la enzima anhidrasa carbónica (Fig. 1.2).
Sulfatiazol
(antibacteriano)
Acetazolamida
(diurético)
Figura 1.2. Ejemplos de sulfonamidas con actividad antibacteriana y diurética.

Se enmarca la porción estructural mínima considerada imprescindible para su actividad.
La clasificación tradicional de tipo farmacológico, empleada en los textos de farmacología y de química

farmacéutica, se organiza de acuerdo con la acción terapéutica de los fármacos sobre órganos (sistema nervioso
central, glándula tiroidea, etc.), síndromes patológicos (anticonvulsivos, antilipidémicos. etc.) o efectos idénti
cos (anestésicos locales, antihipertensores, etc.). Esta clasificación se estructura, a su vez, sobre subdivisiones
basadas en la similitud estructural de sus componentes. Por ejemplo, dentro del grupo de los antibióticos, se han
establecido subgrupos estructuralmente relacionados, como los p-lactámicos, las tetraciclinas, etc. (Fig. 1.3).
Finalmente, se distingue entre agentes quimioterápicos y farmacodinámicos. La primera denominación
corresponde a los que se utilizan en la defensa frente a microorganismos y parásitos (antimicrobianos, antivira
les. etc.) alterando su ciclo vital por interacción con sus procesos bioquímicos, aprovechando las diferencias en
tre éstos y los de los organismos superiores. La segunda corresponde a los que modulan las funciones fisiológi
cas. En los organismos superiores, dichas funciones se regulan a través de diversas biomoléculas. tales como
enzimas, hormonas, neurotransmisores. etc., cuya alteración puede corregirse mediante el empleo de sustancias
externas al organismo (xenobióticos), que imiten o antagonicen la acción de dichas biomoléculas, o que modu
len su biosíntesis, liberación, almacenamiento o metabolismo. Ambas modalidades de acción se engloban den
tro de los agentes farmacodinámicos.
CONCEPTOS BÁSICOS EN QUÍMICA FARMACÉUTICA. NOMENCLATURA DE LOS FÁRMACOS 3
COjH
Penicilinas Cefalosporinas
Antibióticos P-lactámicos
Tetraciciinas
Figura 1.3. Algunos subgrupos de antibióticos según una clasificación estructural.
Se define como receptor la fracción estructural de un biopolímero (enzima, ácido nucleico, canal iónico,
etcétera) cuya interacción con una molécula endógena o exógena se traduce en una respuesta biológica, general
mente consecuencia de una sucesión de fenómenos bioquímicos. La mayor parte de los receptores se localizan
en las membranas celulares, aunque otros son intracelulares o nucleares. En muchos casos, las enzimas son re
ceptores de fármacos (Fig. 1.4).
Figura 1.4. Tipos de receptores.

2. NOMENCLATURA DE LOS FÁRMACOS
Toda ciencia tiene un lenguaje propio, utilizado por los que la practican para intercambiar informaciones y opi
niones. El dominio de la nomenclatura de los fármacos es indispensable en la búsqueda de información biblio
gráfica sobre fármacos y medicamentos, y es el vocabulario sobre el que se construye el lenguaje, no sólo de la
química farmacéutica, sino también de la farmacología y, en general, de las ciencias farmacéuticas.
Debido a que la investigación y el desarrollo de nuevos fármacos lo realizan fundamentalmente las em
presas farmacéuticas y está, por tanto, sujeto a patentes, es preciso distinguir entre los nombres que podríamos
denominar «con propietario» (registrados) y los nombres «sin propietario». Existen al menos cuatro tipos de de
nominaciones:
— Nombres «con propietario»:
• Códigos de fabricante.
• Nombres comerciales.
— Nombres «sin propietario»;
• Denominaciones comunes (nombres farmacológicos).
• Nombres químicos sistemáticos.
De todos ellos, los nombres químicos sistemáticos, construidos sobre la base de las reglas aprobadas por
la IUPAC (International Union of Pure and Applied Chemistry), son los únicos que permiten identificar inequí
vocamente una sustancia, y su uso es imprescindible para la consulta de la literatura primaria y de fuentes como
el Chemical Abstracts. Sin embargo, la complejidad de los nombres químicos hace necesarios los nombres far
macológicos, generalmente representados por la llamada «denominación común internacional» (DCI). Estos
dos tipos de nombres suelen englobarse bajo el término «nombres sin propietario», ya que su uso no está res
tringido, a diferencia de los nombres comerciales y los códigos de fabricante, que son propiedad de la empresa
que produce el fármaco o medicamento, y posee derechos legales sobre estas denominaciones.
2.1. Códigos de fabricante
Son combinaciones de letras y números que utilizan provisionalmente las compañías farmacéuticas durante las
etapas de investigación de una sustancia nueva. Por ejemplo, el antagonista adrenérgico a. cuya denominación
común internacional es idazoxano se nombró, durante su etapa de investigación, como RX 781094. El conoci
miento de esta denominación es necesario si se pretcnte acceder a la información publicada cuando este com
puesto aún no había recibido una DCI.
Idazoxano
RX 781094
2.2. Nombres comerciales
Proceden del laboratorio que fabrica la especialidad farmacéutica y son de su propiedad; de ahí la denominación
«nombre registrado». A la hora de establecer equivalencias con otros tipos de nomenclatura, es preciso tener en
cuenta que, si bien un fármaco, tal y como es designado por un nombre farmacológico o químico, es una sustan
cia definida, los nombres comerciales corresponden a medicamentos que contienen normalmente excipientes y,
con frecuencia, mezclas de principios activos. Por ello, muchos medicamentos que poseen el mismo principio
activo (fármaco) pueden estar comercializados (registrados) bajo nombres diferentes.
Las fuentes más adecuadas para consultar la composición correspondiente a un determinado nombre co
mercial son las publicaciones oficiales de cada país (por ejemplo, en España el «Catálogo de Especialidades
Farmacéuticas», que edita el Consejo de Colegios Oficiales de Farmacéuticos).
2.3. Denominaciones comunes
Se utilizan exclusivamente para designar principios activos aislados. El tipo más importante es la llamada deno
minación común internacional (DCI). con frecuencia designada también por las siglas INN («International Non-
proprietary Name»). Son propuestas por la Organización Mundial de la Salud con objeto de disponer de un
nombre único y no ambiguo para cada fármaco, más sencillo que el químico e independiente de su fabricante.
Aunque estos nombres se conocen también como «nombres genéricos», esta expresión puede inducir a error, ya
que también es aplicable a ciertas clases de compuestos estructural men te relacionados que poseen una acción
terapéutica semejante, como por ejemplo las penicilinas.
Además de las denominaciones comunes internacionales, algunos países disponen de comités nacionales
de nomenclatura de fármacos, encargados de la selección de las «denominaciones comunes nacionales»; las
principales se recogen en la Tabla 1.1.
Tabla 1.1. Denominaciones comunes de algunos países
País Denominación
Significado de las siglas
común nacional
España DOE Denominación Oficial Española

Gran Bretaña BAN British Approved Name
Francia DCF Denomination Comunc Franâise
Italia DCIT Denominazionc Comune Italiana
Japón JAN Japanese Accepted Name
Países nórdicos NFN Nordiska Farmakopcnamneden
Estados Unidos USAN United States Adopted Name
Las DCI deben indicar el parentesco entre sustancias que pertenezcan al mismo grupo farmacológico. Pa
ra ello, la OMS ha aprobado partículas (con frecuencia sufijos) que son específicas de cada grupo de sustancias
con acción farmacológica semejante. Por ejemplo, un nombre terminado en -ciclina corresponde a un agente del
grupo de antibióticos conocidos como tetraciclinas, los anestésicos locales se distinguen por el sufijo -caína,
etcétera (véase Tabla 1.2).
Minoric/ñw Procaína
(antibiótico del grupo (anestésico local)
de las tetraciclinas)
Se tienden a abandonar las DCI que proporcionan información sobre la estructura química de los fárma
cos, costumbre que ha dado lugar en el pasado a nombres como «cloranfenicol» u «oxifenbutazona» (obsérvese
el uso, relativamente frecuente en DCI antiguas, del prefijo «oxi» para indicar un grupo hidroxilo).
CH2OH
CLCH-CO-NH-------- H
H-------- OH
Tabla 1.2. Partículas utilizadas en la construcción de denominaciones comunes

internacionales (selección). La posición de los guiones indica si se trata
de prefijos (ejemplo: cef-), sufijos (ejemplo: -acó) o partículas que pueden
colocarse en cualquier lugar del nombre (ejemplo: barb)
Partícula Grupo de fármacos
■acó Aniiinflamatorios del grupo del ¡bufenaco (derivados del ácido fe-
ni lacé tico)
andr Esferoides andrógenos
-aniel Antihelmínticos que no sean miembros de un grupo definido
-azam y -azolam Ansiolíticos cuya estructura no corresponde exactamente con la
de una benzodiazepina
-azepam Sustancias del grupo de diazepam (benzodiazepinas)
-azocina Antagonistas/agonistas narcóticos del grupo de los benzomorfanos
-bamato Ansiolíticos derivados del propanodiol y pentanodiol
barb Derivados del ácido barbitúrico. con actividad hipnótica
-bendazol Antihelmínticos del grupo del mebendazol
-bulazona Analgésicos aniiinflamatorios del grupo de la fcnilbutazona
-caína Anestésicos locales
cef- Antibióticos derivados del ácido cefalosporánico
-ciclina Antibióticos del grupo de la tetraciclina
-cid i na Antibióticos naturales no pertenecientes a una clase determinada
-cilina Antibióticos derivados del ácido 6-aminopenicilánico
-crina Derivados de acridina
-dapsona Derivados de dapsona
dipino Antagonistas de calcio del grupo del nifedipino
-drina Simpaticomiméticos (adrcnérgicos)
-eridina Analgésicos del grupo de la meperidina
estr Estrógcnos
fcnamato Antiinflamatorios derivados del ácido antranílico
gest Estcroides progestágenos
-metacina Aniiinflamatorios del grupo de la indometacina
mito- Aniineoplásicos nucleotóxicos
-micina Antibióticos producidos por Streptomyces
nal- Agonistas (antagonistas) narcóticos relacionados con la normorfina
-nidazol Antiprotozoarios del grupo del metronidazol
nifur- Derivados de 5-nitrofurano
-olol Agentes bloqueantes ^-adrenérgicos del grupo del propranolol
-ónido Esteroides de uso tópico que contienen un grupo acetal
-orex Anoréxicos derivados de la fenetilamina
orfan Agonistas/antagonistas narcóticos del grupo del morfinano
-oxacino Antibacierianos del grupo del ácido nalidíxico
-perona (-peridol) Ncurolépticos del grupo de las butirofenonas
-prcnalina Broncoditaladores derivados de la fenetilamina
-presina Vasoconstrictores
-prida Derivados de sulpirida
-pril. prilat Antihipertensores del grupo del captopril (inhibidores de la enzima
convcrsora de angiotcnsina)
-profeno Antiinflamatorios del grupo del ibuprofcno (ácidos arilpropiónicos)
prost Prostaglandinás
(Continúa}
Tabla 1.2. (continuación)
Partícula Grupo defármacos
-quina Derivados de la quinolina

sal Derivados del ácico salicílico
stat Inhibidores cnzimáticos
sulfa- Sulfonamidas quimioterápicas
-terol Broncodilatadorcs derivados de la fenetilamina
-tidina Antihistamínicos H; del grupo de la cimctidina
vir Sustancias antivirales
Muchos fármacos se administran en forma de sales, por lo que se acepta una serie de nombres abreviados,
no sistemáticos, para los aniones de uso más frecuente, que se recogen en la Tabla 1.3.
Tabla 1.3. Formas abreviadas para la designación de aniones en la construcción

de denominaciones comunes internacionales
Contracción Nombre químico sistemático
Accturato N-Acetilglicinato
Amsonato 4.4’-Diaminoestilbcno-2.2‘-disulfonato
Berilato Bencenosulfonato
Bunapsiiato 3,7-Di-ren-butil-1,5-naftalcnodisulfonato
Cams tlaio Canfosulfonato
Caproato Hexanoato
Carbesilato p-Carbox ibenccnosu I fonato
Closilato p-Clorobencenosulfonato
Cromesilato 6,7-Dihidroxicumarina-4-metanosulfonato
Cromocato ((6-Hidroxi-4-metil-2-oxo-2/7-1 -benzopiran-7-il)oxi)acctato
Cíelo talo 4-Metilbiciclo [2.2.2)-2-octeno-1 -carboxiiato
Cipionaio Ciclopentanopropionato
Dibudinato 2,6-Di-ferc'butil-1,5-naftalcnodisulfonato
Dobesilato 2.5-Dihidroxibencenosulfonato
Edctato Et i lend iam i note traacetato
Edisilato 1.2-Etanodisulfonato
Embónalo Véase pamoaio (véase también meiembonato)
Enantato Heptanoato
Esteaglato Octadecanoi (acetato
Esilato Etanosulfonato
Fendizoato o-[(2'-hidroxi-4-bifenilil)carbonil|benzoaio
Gluceptato Glucoheptanoato
Hibenzato o-(4-Hidrobcnzoil (benzoato
Isctionato 2-Hidroxietanosulfonato
Lauri Isul falo Dodccilsulfato
Megalato 3,4,5-Trimetox ¡benzoato
Mesilato Metanosulfonato
Meiembonato 4.4,-Metilenobis(3-metox¡-2-naftoato)
Napadisilato Naftaleno-1,5-disulfonato
Napsilato N aftalcno-2-sul fonato
Oxoglurato 2-Oxoglutarato
Pamoaio 4.4'-Metilcnobis(3-hidroxi-2-naftoato)
Fenpropionato 3-Fenilpropionato
Pivalato Trimetilacctato
Tebutato Tercbut i (acetato
Tcnoato 2-Tiofenocarbox i lato
Teoclato 8-Cloroteofiiinato (teofilina = 1,3-dimetilpurina-2.6-diona)
Teprosilato 1,2,3.6-Tetrahidro-1,3-dimetil-2,6-d¡oxopurina-7-propanosulfonato
Tofesilato 1,2,3.6-Telrahidro-1,3-dimetil-2.6-dioxopurina-7-etanosulfonato
Tosilalo p-Toluenosulfonato
Triclofenato 2,4,5-Triclorofenolato
En un intento de desarrollar un método universal para la designación de los fármacos, se ha propuesto un

sistema de nomenclatura conocido como «anatómico-terapéutico-químico» (ATC).
La clasificación ATC proporciona a cada fármaco un código, que se construye de la siguiente manera: en
primer lugar, una letra mayúscula designa el lugar de acción principal del fármaco (véase Tabla 1.4); una segun
da letra y un número indican la acción farmacológica principal, que a su vez se subdivide en subgrupos terapéu
ticos (véase Tabla 1.5); finalmente, un código alfa-numérico (que por su extensión no se incluye) designa el gru
po químico al que pertenece el fármaco y la sustancia concreta de que se trata. Puede encontrarse la
clasificación ATC completa en el «Catálogo de Especialidades Farmacéuticas» del Consejo General de Colegios
Oficiales de Farmacéuticos.
Tabla 1.4. Sistema ATC de nomenclatura de los fármacos.

Grupos anatómicos*
Grupo Descripción
A Tracto digestivo y metabolismo

B Sangre y órganos encargados de su formación
C Sistema cardiovascular
D Agentes dermatológicos
G Sistema genitourinario y hormonas sexuales
H Hormonas distintas a las sexuales
J Agentes antiinfecciosos sistémicos
L Antineoplásicos y agentes inmunosupresores
M Sistema muscular y esqueleto
N Sistema nervioso central
P Agentes antiparasitarios
R Aparato respiratorio
S órganos sensoriales
Varios
• Puede encontrarse una descripción más completa del sistema ATC en M. G. J. lx Roux. I. Ru-
sell. International Pharmacy Journal, 4, 150, 1990.
Tabla 1.5. Sistema ATC de nomenclatura de fármacos. Grupos terapéuticos

correspondientes al grupo anatómico «sistema nervioso central»
Grupo Descripción Subgrupo Descripción
NOI Anestésicos A Anestésicos generales

B Anestésicos locales
N02 Analgésicos A Analgésicos narcóticos

B Analgésicos no narcóticos
C Agentes antimigraña
N03 Antiepilépticos A Antiepilépticos
N04 Antiparkinsonianos A Antiparkinsonianos
N05 Psicolépticos A Antipsicóticos

B Ansiolíticos e hipnóticos
N06 Psicoanalépticos A Antidepresivos

B Psicoestimulantes
C Combinaciones psicolépticas y psicoanalépticas
D Agentes contra la demencia senil
E Tónicos del sistema nervioso central
N07 Otros agentes acti- A Otros agentes activos sobre el sistema nervioso
vos sobre el SNC central
Como ejemplo, veamos a continuación cómo se origina el código del diazepam (N05B A01):
N Sistema nervioso central (grupo anatómico)

N05 Agentes psicolépticos (grupo terapéutico)
N05B Ansiolíticos e hipnóticos (subgrupo terapéutico)
N05B A Derivados de benzodiazepina (grupo químico)
N05B AOI Diazepam (sustancia individual)
Como es lógico, a una sustancia pueden corresponderle varios códigos ATC, si presenta varias acciones.
Por ejemplo, el diazepam puede incluirse en el grupo N05, si se emplea como tranquilizante, o en el N03, si se
utiliza como anticonvulsivo. Esta situación también se da cuando la acción principal varía con la dosis emplea
da. Por ejemplo, la clonidina puede clasificarse como C02 (antihepertensor) o como N02C (antimigraña), según
la dosis utilizada.
2.4. Nombres químicos sistemáticos
No se pretende proporcionar aquí una recopilación exhaustiva de la nomenclatura química, sino comentar una
serie de ejemplos representativos, suponiendo un conocimiento básico de sus reglas. Un aspecto importante de
la nomenclatura sistemática de fármacos es la indicación de su estereoquímica. El lector interesado puede pro
fundizar en el tema recurriendo a alguna de las obras dedicadas específicamente a nomenclatura química que se
citan en la bibliografía de este capítulo.
2.4.1. Compuestos aciclicos polifuncionales
En general, una vez identificada la función principal, el siguiente paso es la elección de un fragmento estructu
ral (ciclo o cadena) que se considerará principal, para lo cual se aplican las normas oficiales de la IUPAC. Así,
por ejemplo, el hipnoanalgésico metadona contiene dos funciones (cetona y amina), de las cuales la cetona es
prioritaria y, por tanto, se denomina como sufijo. Esto supone empezar a numerar por el extremo más próximo a
la función principal y escoger como cadena principal la señalada con línea de trazos, que es la más larga que
contiene la función principal. El nombre que resulta es:
Función principal
H,C
Cadena principal
H,C
C,.H5 O
Metadona (hipnoanalgésico)
6-Dimetilamino-4,4-difenil-3-heptanona
El antineoplásico y antimicrobiano primocarcina contiene una función cetona (prefijo) y dos funciones
carboxamida (prioritaria). En las funciones éster y amida, la cadena a considerar es la que contiene el grupo car
bonita; como no es posible encontrar una cadena que contenga las dos funciones amida, la que incluye una ca
dena de seis carbonos y un doble enlace es la principal.
Funciones secundarias
CH,—CC\ • Función principal

NH
; H,'’c=c—C-CH,—¿H,-¿ONH,
. S-"t ■ ■ ■ Cadena principal
Primocarcina (antineoplásico y antimicrobiano)

5-Acetamido-4-oxo-5-hexenamida
En el hipnótico clorhexadol, encontramos una situación semejante, ya que no existe una cadena carbona
da que contenga las dos funciones alcohol, que tiene prioridad sobre la otra función existente (éter) (a efectos de
nomenclatura, el halógeno no se considera grupo funcional). Por tanto, se selecciona como cadena principal la
que contiene cinco carbonos, y la numeración es la que se indica, ya que da el número más bajo a la función
principal.
Cadena principal
CH
: CH-CH,
OH O-CH-CCI
Función principal
Funciones
secundarias
Clorhexadol (hipnótico)
4-( 1 -Hidroxi-2,2,2-tricloroetoxi)-2-metil-2-pentanol
2.4.2. Compuestos monocíclicos
En la elección de la cadena (o ciclo) principal se utilizan los mismos criterios ya mencionados. Por ejemplo, el
anestésico local procaína se nombra como un derivado del ácido benzoico, ya que el grupo carbonilo de la fun
ción éter está unido directamente al núcleo bencénico.
Procaína (anestésico local)

p-Aminobenzoato de 2-(dietilamino) etilo
En cambio, en la adrenalina, que contiene grupos hidroxilo, la cadena principal es la que contiene el hi-
droxilo alcohólico (preferente sobre los hidroxilos fenólicos). Recordemos que una nomenclatura correcta debe
incluir la configuración de los centros estereogénicos cuando está indicada en la estructura.
Adrenalina (neurotrasmisor)
(!/?)-!-(3.4-dihidroxifenil)-2-nielilaininoetanol
Para la nomenclatura de los agentes antibacterianos conocidos como «sulfamidas», es práctica habitual
tomar como base el nombre común «sulfanilamida» (procedente del «ácido sulfanílico») para la unidad de
4-aminobencenosulfonamida, utilizando los prefijos N1 y N4 como localizadores de sus dos nitrógenos:
CONCEPTOS BÁSICOS EN QUÍMICA FARMACÉUTICA. NOMENCLATURA DE LOS FÁRMACOS
Sulfacitina (antibacteriano)
N’-( I-Etil-1,2-dihidro-2-oxo-4-pirimidinil)
sulfanilamida
Otro ejemplo ilustrativo es el antimicrobiano cloranfenicol, para el que se dan dos nombres sistemáticos
(A y B). Si se elige como cadena principal la que contiene el grupo carbonilo correspondiente a la función prin
cipal (carboxamida), resulta un nombre sistemático complejo (A). Para el tipo de amidas RCONHR', en las que
R' es mucho más complejo que R, las reglas de la IUPAC admiten la alternativa B. en la que R' se considera ca
dena principal. Esta posibilidad se utiliza especialmente para amidas heterocfclicas, como se verá más adelante.
La disposición relativa de los centros estereogénicos corresponde al prefijo treo- (en contraposición a entro-).
De los dos enantiómeros treo. el representado es la forma más activa.
B. (IÑ.2/?)*2-(Dicloroacetamido>-1 -(4-nitrofenil)-1,3-propanodiol
El antibiótico amidinomicina pertenece al grupo de los sistemas cíclicos alifáticos. De nuevo la función
carboxamida es la principal.
Amidinomicina (antibiótico)
Af-(2-Amidinoetil)-3-aminociclopentanocarboxamida
Los nombres sistemáticos del vasoconstrictor nafazolina, del sedante y anticonvulsivo fenobarbital y del
antagonista de dopamina cleboprida sirven para ilustrar los principios en los que se basa la elección entre hete
rociclos o carbociclos como ciclos principales. En el primer caso, en el que no hay grupos funcionales, se pre
fiere el heterociclo. En el segundo, que contiene las funciones sobre el heterociclo, éste es igualmente el princi
pal, mientras que en el tercero, el carbociclo es una amida RCONHR', donde R' no es más compleja que R, el
ciclo principal.
Para el fenobarbital (DCI), se utiliza habitualmente el nombre semisistemático «ácido 5-etil-5-fenilbarbi-
túrico», derivado del ácido barbitúrico (2,4,6-l//,3H,5//-pirimidinatriona).
Nafazolina (vasoconstrictor)
2-( I -Naftilmctil)-2-imidazolina
Fenobarbital (sedante y anticonvulsivo)

5-Etil-5-fenil-2,4.6-( I //.3//,5/f)piriinidinatriona
Ácido 5-etil-5-fenilbarbitúrico
Cleboprida (antagonista de dopamina)

4-Amino-5-cloro-2-mctoxi-/V-( I -bcncil-4-piperidil )bencenocarboxamida
La construcción del nombre sistemático del antihelmíntico tiabendazol exigue conocer los criterios de
prioridad entre heterociclos. En este caso concreto, bencimidazol tiene prioridad sobre tiazol, ya que ambos son
sistemas nitrogenados y el bencimidazol contiene mayor número de anillos.
Tiabendazol (antihelmíntico)
2-(4-Tiazolil)bcncimidazol
En el caso de la fenciclidina, el ciclo principal es la piperidina, ya que contiene el único heteroátomo del
sistema. El sustituyeme unido a su posición 1 es un grupo ciclohexilo que, a su vez, está sustituido con un fenilo.
Fenciclidina (anestésico, alucinógcno)

!-(l-Fcnilciclohcxil)pipcridina
En los siguientes ejemplos, la elección del ciclo principal está condicionada por la presencia de grupos
funcionales. Por ejemplo, en el caso del antihelmíntico niridazol, la presencia del grupo carbonilo determina
que el ciclo principal sea el anillo de imidazolina.
Niridazol (antihelmíntico)
l-(5-Nitro-2-tiazolil)imidazolidin-2-ona
Análogamente, al construir el nombre de antiinflamatorio indometacina, se considera la unidad de ácido

acético como cadena principal.
2.4.3. Compuestos espírameos
La nomenclatura de sistemas espírameos sigue reglas especiales en lo que se refiere a numeración. Los dos
ejemplos que siguen ilustran la regla de nomenclatura que obliga a empezar a numerar por una de las posiciones
vecinas al centro espiránico del ciclo más pequeño. Cuando se aplica a heterociclos, se utiliza la nomenclatura
de reemplazamiento (o nomenclatura en «a»), en la que se indican los eslabones carbonados que han sido susti
tuidos por heteroátomos, como en el caso del espirileno. Con ello se pueden originar secuencias numéricas altas
para los heteroátomos (por ejemplo, en el espirotiobarbital).
Espirilcno (neuroléptico)
I-Fcnil-8-(4-(4-fluorofenin-3-pcntenill-1.3,8-triaz4»espiro(4,51decan-4ona
Espiroúobarbital (inductor de anestesia)

I-Etil-2,4-dimcti!-8-tioxo-7,9-<iiazaespiroí4,5)decano-6.10-diona
Otra forma sistemática de nombrar compuestos espiránicos, recomendada únicamente cuando el crite
rio anterior sea de difícil aplicación, consiste en intercalar la palabra «espiro» entre los nombres de los dos
componentes enlazados. Cada ciclo se numera como si estuviera aislado, pero se da el localizador más bajo
posible al átomo espiránico.
En el ejemplo, se ha elegido como componente fundamental el ciclo nitrogenado, de acuerdo con las
reglas habituales para atribución de prioridad entre heterociclos.
Sorbinilo (inhibidor de aldosa reduct asa)

(4S)-6'-Fluoroimidazolidina-4-espiro-4'-cromano-2.5-diona
2.4.4. Sistemas con puente
El sistema de reemplazamiento es también aplicable a la nomenclatura de heterociclos con puente.

En el caso del alcaloide atropina, la numeración del sistema bicíclico, de acuerdo con las normas sistemá
ticas, se inicia en uno de los carbonos cabeza de puente y se avanza hacia el otro por la cadena más larga posible
que los una, repitiéndose este proceso hasta que estén numerados todos los átomos.
Obsérvese que el nombre sistemático propuesto para la atropina no indica la disposición axial de la ca
dena en la posición 3 del biciclo. Este problema se resuelve utilizando los prefijos a y 0 (a, en el ejemplo)
para indicar, respectivamente, la disposición del grupo en la cara inferior («endo») o superior («exo») del bi
ciclo.
Atropina (anticolinérgico)
2-Fenil-3-hidroxipropanoato de 8-mctil-8-azabiciclo(3.2.1]-3a-octilo
2.4.5. Sistemas condensados
Existe infinidad de fármacos con estructuras de este tipo. La aplicación de las normas para su nomenclatura sis
temática suele ser más compleja que en los casos anteriores, y nos limitaremos a continuación a comentar algu
nos ejemplos sencillos.
En el antigotoso alopurinol, la aplicación de las normas es sencilla. De los dos heterociclos condensados
(pirazol y pirimidina), se elige este último como fundamental, por tener el anillo mayor, siendo ambos nitroge
nados. La cara de fusión se indica entre corchetes, utilizando letras para el componente principal (d) y números
para el secundario (3,4).
La numeración del conjunto es necesaria para situar la función hidroxilo (4) y la posición del «hidrógeno
indicado» (I). En sistemas lineales como el que se estudia, la primera posición de dicha numeración global pue
de elegirse entre cuatro, correspondientes a los átomos vecinos a la cara (o caras) de condensación de los ciclos
de los extremos del sistema. La elección se hace procurando que el conjunto de heteroátomos reciba la secuen
cia numérica más baja (1, 2,5 y 7. en nuestro ejemplo), teniendo en cuenta que la numeración se hace alejándo
se de la condensación.
OH OH
/Mopurinol (antigotoso)
lf/-Pirazolo|3.4-JJpirimidin-4-ol
En el nombre del antihelmíntico tetramisol se observan algunas particularidades interesantes. El nitróge

no situado en la condensación se considera perteneciente a ambos heterociclos y la lectura de los números co
rrespondientes a la cara de fusión en el imidazol se realiza en el sentido que marca la numeración individual del
ciclo principal tiazol (2,1-6 en lugar de 1,2-6, en este caso).
Tetramisol (antihelmíntico)
6-Fcnil-2.3.5,6-tetrahidroimidazol|2.l-/»)tiazol
En los sistemas condensados de dos anillos en los que uno es bencénico. es posible simplificar la nomen
clatura omitiendo la cara de condensación, e indicando la posición de los heteroátomos por sus localizadores en
la numeración global del sistema. El nombre se construye indicando estos números delante de la palabra «ben-
zo», a la que sigue el nombre del componente heterocíclico, como se aprecia en la clorotiazida y el diazepam.
Clorotiazida (diurético)
I. I -Dióxido de 6-cloro-2//-1,2,4-bcnzotiadiazina-7-sulfonamida
Diazepam (ansiolítico y anticonvulsivo)

7-Cloro-5-fcnil-1 -metil-1,3-dihidro-
1,4-bcnzodiazepin-2-ona
2.4.6. Productos naturales y sus análogos
La complejidad estructural y esteroquímica de la mayor parte de los productos naturales hace que se hayan
adoptado métodos de nomenclatura semisistemática, fundamentados en el uso de nombres aceptados para una
serie de estructuras base. Éstos incluyen una numeración aceptada que, generalmente, no coincide con la que se
aplicaría sistemáticamente.
A) Esteroides
Dentro de los esteroides, el anti inflamatorio triamcinolona, cuya estructura base de 21 átomos de carbono se de
nomina pregnano, se nombra como se indica a continuación. Obsérvese que la disposición espacial de los susti-
tuyentes se indica con los prefijos a y p. La estereoquímica de los carbonos 8, 10, 13, 14 y 17 va implícita en el
nombre «pregnano» (véanse Capítulos 17 y 25).
Triamcinolona (antiinflamaiorio)
9a-Fluoro-11P, 16a, 17a,21-tclrahidroxi-
1.4-prcgnadicn-3,20-diona
La utilización de los esteroides con nombre aceptado como base para la nomenclatura de fármacos re
quiere con frecuencia el uso de prefijos modificadores, los más importantes de los cuales son:
a) Ñor-: indica la supresión de un átomo en uno de los anillos o en una cadena lateral.
t>) Ciclo-; va precedido de los localizadores de dos posiciones e indica la existencia de un enlace adicio
nal entre ellas, lo que supone la aparición de un nuevo anillo.
Figura 1.5. Nombres aceptados para la nomenclatura de esteroides

c) Seco-: indica la ruptura de un enlace por comparación con la estructura base.

d) Homo-: significa que uno de los anillos está expandido, conteniendo un átomo más.
Se proporciona a continuación la nomenclatura del colecalciferol, como ejemplo que ilustra el uso de es
tos prefijos:
Colecalciferol (vitamina D,)

9. IO-Seco-5,7, IO( l9¡-colestatrieh-3p-ol
B) Prostaglandinas
Las prostaglandinas. en general, pueden nombrarse de forma abreviada utilizando conjuntos de letras y núme
ros. Las letras indican el tipo de sustitución del anillo de ciclopentano; los números, el número de dobles enla
ces en las cadenas laterales. Finalmente, la inclusión de letras griegas (a y (3) permite indicar la estereoquímica
del carbono 9.
Otra nomenclatura se hace derivando del ácido prostanoico. Cuando se usa, se deben incluir todas aque
llas características estereoquímicas presentes, salvo la configuración de los carbonos 8 y 12. Se proponen como
ejemplos la prostaglandina F,o y la prostaciclina PGL.
Ácido prostanoico
Prostaglandins F?a (PG F->a) (oxitócico) Prostaciclina (PG 12) (inhibidor de la agregación plaquetaria)
Ácido (5Z.I3E.ISS.9O.I Ia)-9.II.I3- Ácido (5Z.9a. 11 a. 13£. I5S)-6.9-cpoxi-11.15-
Irih idrox i-5.13-prostadienoico dihidroxi-5.13-prostadienoico
C) Antibióticos
En los antibióticos p-lactámicos inás conocidos (penicilinas y cefalosporinas). aunque puede utilizarse la no
menclatura de sistemas heterocíclicos con puente, están aceptadas las nomenclaturas semisistemáticas basadas
en el uso de los nombres «penamo» y «cefamo» para la estructura de la [5-1 aclama fusionada. El uso de estos
nombres se ilustra a continuación, utilizando como ejemplo la amoxicilina y la cefuroxima, en las cuales se ha
omitido la configuración de los centros estereogénicos.
Penamo Cefamo
Amoxicilina (antibiótico)
Nombre sistemático:
>\cido 3.3-dimetil-6-(2-amino-2-(4-hidroxifenil)]acctamido-7-oxo-4-
tia-1-azabiciclo(3.2.0)heptano-2-carboxílico
Nombre semisistemático:
Ácido6-|2-amino-2-(4-hidroxifcnil))acctamido-2.2-dimctil-
penamo-3-carbox íl ico
20 INTRODUCCIÓN A LA QUIMICA FARMACÉUTICA
Cefuroxima (antibiótico)
Nombre sistemático
3-Carbamoiloximctil-7-[2-(2-furill-2-mctoxinHno)acetamido-8-oxo-5-
tia-1 -azabiciclo|4.2.0J-2-octcno-2-carboxilato de 1 -acetoxietilo
3-Carbamoiloximetil-7-(2-(2-furil)-2-mctoximino]a€etamido-3-
cefemo-4-carboxilato de I -acetoxietilo
Los nombres de los antibióticos del grupo de las tetraciclinas se pueden derivar de una estructura base que
recibe el nombre de «tetraciclina». Entre otros, se utilizan los prefijos «des», para indicar la ausencia de un de
terminado grupo (como excepción, se admite «desoxi» en lugar de «deshidroxi»), y «anhidro», para indicar la
pérdida de agua entre dos posiciones. La estereoquímica se indica únicamente si hay diferencias con la estructu
ra base.
Tetraciclina
Minociclina (antibiótico)
Nombre sistemático:
(4S,4aS.5a/?, 12a$)-4,7-Bis(dimetilamino>-1,4.4a,5,5a,6,11,12a-
octahidro-3.10,12.12a-tetrahidroxi-1.11 -dioxonaftaccno-2-carboxamida
7-Dimetilamino-6-desmetil-6desoxitctraciclina
D) Análogos de morfina
Otro ejemplo de nomenclatura basada en el uso de nombres aceptados es el de los analgésicos referibles a mor
fina. Aunque se podría proponer una nomenclatura sistemática derivada del fenantreno, resulta mucho más sen
cillo el uso de la denominación «morfinano» para la estructura fundamental, cuya numeración respeta en parte
la del fenantreno:
Morfinano Morfina (hipnoanalgésico)

4,5-Epoxi-17-nietil-7-!norfineno-3,6-diol
Otro tipo de hipnoanalgésicos referibles a morfina son los derivados de benzomorfano. La nomenclatura
semisistemática de estos compuestos hace uso del nombre aceptado 6,7-benzomorfano (morfano = 2-azabici-
clo[3.3.1 ]nonano):
Morfano 6,7-Bcnzomorfano Pcntazocina (hipnoanalgésico)

(l/?,5/?.9/0-2-(3'-Metil-2'-butcnil)-5.9-dimetil-6.7-benzoniorfan-2'-ol
La nomenclatura sistemática es la correspondiente a un sistema condensado, pero puede simplificarse te

niendo en cuenta la posibilidad de indicar puentes carbonados mediante los prefijos «metano» (puente de un
carbono), «etano» (puente de dos carbonos), etc.:
1,2,3.4,5.6-Hexahidro-6.11 -dimctil-3*(3'-metil-2'-butenil)-2,6-
mctano-3-benzazocin-8-ol
E) Nucleósidos y nucleótidos
Por su gran interés en química farmacéutica y bioquímica, la nomenclatura de los heteronucleósidos y nucleóti
dos requiere una mención especial. Siempre que sea posible, se deben utilizar nombres aceptados para los tres
tipos más frecuentes de estructura hetcrocíclica: bases púricas (adenina o guanina) o pirimidínicas (tintina, cito-
sina, uracilo).
NH; O
Adenina H Guanina H
H H
U rae ilo Timina Citosina
Los nucleósidos proceden de la unión de una molécula de ribosa o 2-desoxirribosa a las bases púricas y
pirimidínicas anteriores y pueden nombrarse de dos maneras. En primer lugar, pueden utilizarse los nombres
que se resumen en la Tabla 1.6, en los que, en general, se asume que la base nitrogenada está unida a una molé
cula de ribosa (por ejemplo, adenosina = 9-PD-ribofuranosil-adenina), y el prefijo «desoxi» se utiliza para indi
car la falta de un hidroxilo en la posición 2' de la ribosa (por ejemplo, desoxiadenosina). La timina constituye
una excepción, ya que los nombres «timidina» y «ácido timidílico» implican la ausencia del hidroxilo en 2*.
En el caso de los nucleótidos. además del nombre aceptado, pueden emplearse denominaciones del tipo
«nucleósido + localizador + monofosfato», entendiéndose que, si no hay localizador, la posición en la que está
el grupo fosfato es la 5'.
Adenosina
9-PD-Ribofuranosiladcnma
NH, NH,
HO OH
I
OH
Ácido adcnílico Ácido 2'-adenílico
9-PD-Ribofuranosiladenina-5'-monofosfato 9-pD-Ribofuranosiladenina-2'-monofosfalo
Tabla 1.6. Nombres de los principales nucleósidos y nucleóúdos
Ribonucleósido Desoxirribonucleósido
Base
(ribonucleótidoi (desoxirribonucleótido)
Adenina Adenosina (ácido adenílico) Desoxiadenosina (ácido dcsoxiadcnílico)

Guanina Guanosina (ácido guanílico) Desoxiguanosina (ácido desoxiguanflico)
Citosina Citidina (ácido cilidílico) Desoxicitidina (ácido desoxicifidílico)
Uracilo Uridina (ácido uridílico) Desoxiuridina (ácido dcsoxiuridílico)
Timina Ribósido de timina Timidina (ácido timidílico)
Un ejemplo de un fármaco que se nombra de acuerdo con estos principios es el antiviral azidotimidina:
Si el componente heterocíclico no coincide con ninguna de las bases con nombre aceptado, se debe recu
rrir a la nomenclatura sistemática habitual, como se ha hecho para nombrar los antivirales ribavirina y aciclovir.
En este último, que no es propiamente un nucleósido ya que la cadena de azúcar se ha sustituido por un análogo
abierto, obsérvese la numeración aceptada para el núcleo de la purina.
Ribavirina (antiviral)
I -(JJD-Ribofuranosil)-1H-1.2.4-triazol-3-carboxamida
CH2
OH
Aciclovir (antiviral)
9-(2-Hidroxieto.xim<'(il (guanina
BIBLIOGRAFÍA DEL CAPÍTULO 1
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BIBLIOGRAFÍA SOBRE QUÍMICA FARMACÉUTICA
Indicamos a continuación algunas obras seleccionadas de carácter general que podrán servir para complementar lo expues
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Textos
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Evolución de los métodos
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de búsqueda y descubrimiento
de fármacos
A. Monge
1. PANORAMA HISTÓRICO
Los fármacos pueden ser considerados como el descubrimiento más importante del siglo xx, ya que la vida del
hombre se encuentra, en mayor o menor medida, relacionada con estos productos desde su nacimiento hasta su
muerte. El arsenal terapéutico del que actualmente dispone la humanidad se ha desarrollado a partir de un pe
queño número de prototipos, que en química farmacéutica se denominan «cabezas de serie». En la búsqueda o
diseño de estos prototipos, así como en sus modificaciones, que permiten llegar a compuestos más eficaces y
con menos efectos secundarios, se encuentra el objetivo de la química farmacéutica.
Aunque la utilización de plantas y minerales para restablecer la salud perdida, modificar la conducta, etc.,
se conoce desde la antigüedad, los medicamentos con el sentido y forma en que los conocemos actualmente son
relativamente recientes, y, más concretamente, de los últimos 50 años.
La historia del descubrimiento de los fármacos se encuentra íntimamente relacionada con el desarrollo de
las ciencias experimentales, en general, y de la química orgánica, en particular, al menos hasta los últimos 20
años, en que se produce la explosión de los métodos biológicos. Con el desarrollo de métodos de síntesis, la
aparición de técnicas instrumentales que han originado métodos de análisis poderosos, la aplicación de la infor
mática, así como el desarrollo de la biología molecular, se ha podido conocer la estructura de los receptores o se
tiene una idea aproximada de los mismos y. en muchos casos, se ha establecido la relación entre la estructura
química de un fármaco y su acción biológica.
Diferentes drogas de origen vegetal como el «ma huang», que contienen compuestos activos como la efe
drina, fueron utilizados en China hace más de cinco mil años. Plantas que contienen ascaridol. con propiedades
antihelmínticas, fueron utilizadas con diferentes nombres por distintas civilizaciones. Entre ellas se encuentran
el té mejicano y el Chenopodium anthelminticum de los romanos.
Las civilizaciones indoamericanas utilizaron también las hojas de coca como estimulantes, y los aztecas los
hongos sagrados. De la «corteza peruana», Pelletier y Caventou fueron capaces de extraer la quinina en 1823.
En la civilización occidental, la influencia ejercida por Hipócrates, en la utilización de compuestos metá
licos. y por Galeno (131-200 d.C.), al considerar los productos de origen vegetal como elementos esenciales en
la recuperación de la salud, fue muy grande. Desde un principio, estuvo presente el concepto de «pureza» de las
drogas que se utilizaban, lo que se manifiesta tanto en la preparación de sales metálicas como en la precisión
con la que se realiza la clasificación de las plantas.
El aspecto farmacéutico de la alquimia, que perseguía fundamentalmente la obtención de oro. surgió en

China en tiempos anteriores a J. C. Posteriormente, se desarrolló en la India, y fundamentalmente en la civili
zación árabe, cuyos médicos utilizaron medicamentos minerales en un amplio campo de la terapéutica. Con Pa-
racelso (1493-1541) comienza propiamente la química farmacéutica y la utilización en terapéutica de sales me
tálicas frente a la utilización de plantas.
El siglo xvii, sin embargo, estuvo marcado por el uso en medicina de drogas de origen vegetal. Se había
producido el descubrimiento de América por los españoles y se habían estudiado las drogas y las innovaciones
facilitadas por los exploradores. La droga más representativa de esta nueva era fue la corteza del árbol de la qui
na. Se organizaron las primeras expediciones científicas y se relacionaron los efectos biológicos de las plantas
con su clasificación botánica (Linnaeus. 1707-1778). Los intentos para relacionar la acción de las drogas con
los diferentes órganos (Cullen, 1712-1790) dominaron el pensamiento del siglo xvni. En este siglo, el descubri
miento más representativo fue la digital (Withering, 1741-1799), aplicada en el tratamiento de la hidropesía.
Aún se utiliza en la insuficiencia cardíaca congestiva.
El siglo xix puede entenderse como el comienzo de la era de los fármacos. Los primeros hallazgos estu
vieron relacionados con la anestesia, como el descubrimiento de esta acción en el óxido nitroso (Davy. 1778-
1829), el éter etílico (Long, 1815-1875) y el cloroformo (Simpson. 1811-1870). y supusieron una movilización
de esfuerzos para la resolución de un problema terapéutico como es el dolor. También en este siglo comenzó la
utilización de otros productos orgánicos de síntesis, siendo representativos la antipirina (Knorr. 1883), el hipnó
tico hedonal (carbamato de isopentilo; Dreser, 1889) y el primer barbitúrico. el veronal (E. Fischer y von Me
ring. 1903).
Se purificaron los extractos vegetales y se realizaron las primeras aproximaciones a la determinación de la
estructura. Y es que. como se indicó anteriormente, la introducción de nuevos compuestos en terapéutica iba a ir
pareja al desarrollo de la química orgánica. El aislamiento de la morfina (Sertümer, 1806). de la atropina (Mein,
1831) y de la quinina (Pelletier y Dumas. 1823) son ejemplos del inicio de un nuevo planteamiento en la inves
tigación de drogas de origen vegetal.
A finales del siglo xtx, apareció la obra de una de las grandes figuras de la química farmacéutica. Paul
Ehrlich (1854-1915), que puede considerarse como el fundador de la quimioterapia. Su legado intelectual, que
tan enorme beneficio ha supuesto para el estudio de los medicamentos, se asienta en el ambiente investigador
de la gran química centroeuropea. Sus planteamientos son válidos en la actualidad, con las modificaciones
propias del progreso científico. Al reconocer que las reacciones químicas que van a tener lugar en las células
son decisivas para determinar las relaciones entre la estructura química y la actividad biológica de los fárma
cos, planteó el concepto de receptor, que es una de las piedras angulares del pensamiento científico para el de
sarrollo de fármacos.
El siglo xx se inició con la utilización de la aspirina (Hoffman, 1898) y la síntesis de la adrenalina
(Stolz y Dakin, 1904). Empezó a usarse el salvarsán en el tratamiento de la sífilis (Ehrlich, 1910), se realiza
ron las primeras síntesis de sulfanilamidas (Gelmo, 1908): se introdujo el fenobarbital en el tratamiento de la
epilepsia (Fischer y von Mering. 1912); se consideró la heparina como anticoagulante natural (McLean. 1916
y Howell, 1922); se determinó la función de la acetilcolina como mediador en la transmisión nerviosa (Loewi,
1921); se aisló la insulina para el tratamiento de la diabetes (Banting y Best. 1921), así como algunas vitami
nas y otros productos del metabolismo secundario con actividad biológica, como la vitamina C (Zilva y
Szent-Gyórgyi, 1918-1928), las hormonas esteroideas (Butenandt. 1934) y la vitamina D, (Windaus, Heilbron
y Spring. 1936), que fueron sintetizados en los años siguientes. Aparecieron los antihistamínicos (Bovet y
Staub, 1937), se descubrieron los primeros péptidos con actividad antibiótica (Waksman y Dubos, 1939) y se
demostró la actividad bacteriostática de la penicilina y su manufactura (Florey y Chain, 1940), que abrió la
era de los antibióticos. Estos son sólo algunos ejemplos del desarrollo de la química farmacéutica en la prime
ra mitad del siglo xx.
La edad de oro en la introducción de nuevos fármacos corresponde al período comprendido entre 1940-
1960. La tragedia de la talidomida supuso una llamada de atención a las autoridades sanitarias de todo el mun
do, que reforzaron los requisitos necesarios para la introducción en el mercado de nuevos medicamentos, lo que
encareció lógicamente este proceso. La utilización de bases de datos en el diseño de fármacos, el establecimien
to de relaciones cuantitativas entre la estructura química y la actividad biológica de los fármacos, el aislamiento
y la caracterización de receptores, así como la obtención de fármacos mediante biotecnología han sido áreas de
gran desarrollo en los años siguientes.
EVOLUCIÓN DE LOS MÉTODOS DE BÚSQUEDA Y DESCUBRIMIENTO DE FÁRMACOS 27
2. BÚSQUEDA DE NUEVOS FÁRMACOS
La introducción en el mercado de un nuevo fármaco y su conversión en una forma farmacéutica o medicamento

precisa cubrir una serie de etapas que, de forma esquemática, podrían resumirse en:
a) Búsqueda de modelo.
b) Manipulación del modelo.
c) Determinación de formas farmacéuticas y dosificación.
La búsqueda de modelo o «cabeza de serie» supone encontrar una actividad biológica nueva en un com
puesto químico. Se trata, en consecuencia, de encontrar nuevas estructuras que puedan servir como punto de
partida para su modificación estructural, ante el hecho de que el nuevo compuesto no tiene por qué ser el mejor
de los posibles que se puedan preparar (manipulación del modelo).
2.1. Descubrimiento tradicional de un nuevo prototipo o «cabeza de serie»
El descubrimiento de un nuevo «cabeza de serie» puede realizarse de distintas formas. Históricamente, los mo
delos más interesantes se han encontrado como consecuencia del estudio de la actividad biológica de productos
del metabolismo secundario en organismos vivos, del descubrimiento accidental de una actividad en compues
tos de síntesis, del descubrimiento de efectos inesperados en la aplicación terapéutica de fármacos conocidos y
de estrategias basadas en planteamientos bioquímicos. Comentaremos algunos ejemplos.
2.1.1. Descubrimiento de prototipos a partir de metabolites secundarios de plantas
Muchos alcaloides de plantas poseen interesantes propiedades biológicas y. tras su aislamiento y purifica
ción, han dado lugar a análogos estructurales o se han incorporado al arsenal terapéutico. De los alcaloides
del opio. Sertüncr aisló la morfina en forma pura en 1806. En 1832. Robiquet aisló la codeína. cuya estructu
ra correcta la determinaron Gulland y Robinson en 1923. La papaverina se aisló en 1848 (Merck), a partir de
las aguas madres de la extracción de la morfina del opio. Fueron necesarios 69 años (1848-1918) para descu
brir sus propiedades espasmolíticas en el músculo liso. A partir de la síntesis de la papaverina, por Mannich
en 1927, se preparó un gran número de derivados. El verapamilo, un anlianginoso, es uno de los compuestos
que resultaron de aquella investigación, y puede considerarse un análogo de cadena abierta de la papaverina.
CN
I
X= —CH?-CH:-C —
CH(CH,)2
R = H. Morfina
R = CH3. Codeína Papaverina Verapamilo
Pelletier y Magendie aislaron la emetina de las raíces de la ipecacuana (Cephaelis ipecacuanha),

en 1817: la estricnina fue aislada de Strychnos nux vomica por Pelletier y Caventou; la cafeína de las semillas de
café por Runge en 1819, y la quinina de la corteza de la quina.
Emelina Estricnina
Quinina
Especialmente importantes fueron los esfuerzos desarrollados en la síntesis de análogos de quinina que man
tuvieran la actividad antipalúdica, lo que permitió la introducción de nuevos fármacos como la cloroquina o prima-
quina. Pensando que la estructura base era un sistema de tetrahidroquinolina. Koening y Fischer prepararon la kai-
rolina A, que se introdujo como antipirético. Su toxicidad llevó a Knorr, en 1884, a preparar compuestos con
estructura muy diferente, el primero de los cuales, la fenazona, condujo a la aminofenazona, tres veces más activa,
que fue utilizada como antipirético, analgésico y antirreumático, pero fue retirada del mercado en 1930 por inducir
agranulocitosis. La investigación de nuevos derivados llevaría a la fenilbutazona, que se introdujo en 1952.
CHj-CHj
Kairolina-A R = H. Fenazona Fenilbutazona

R = N(CH.j)2, Aminofenazona
Entre los alcaloides de las solanáceas, la atropina, aislada de Atropa belladona, llevó a Ladenburg a la
preparación de análogos como la homatropina, sintetizada en 1880, que apareció como alternativa en oftalmolo
gía debido a su duración de acción más corta.
CH,
Homatropina
Con el mismo planteamiento, a partir de la cocaína, aislada de Erythroxylon coca y ensayada como anal
gésico local por Niemann en 1860, se preparó la eucaína (menos irritante). El estudio de la actividad de frag-
mentos (véase el Capítulo 4) condujo a la preparación de ásteres aromáticos que llevaron al descubrimiento de
la procaína.
CO,CH,CH,N<CH,CH,),
Cocaína Eucaína-A Procaína
Del cornezuelo de centeno (Claviceps purpurea) Barger y Carr aislaron la ergotoxina (una mezcla de er-
gocomina, ergocristina y ergocriptina). En 1905 y, más adelante, se prepararon derivados como la ergometrini-
na y el producto de síntesis LSD (dietilamida del ácido lisérgico). que fue reconocido como un potente alucinó-
geno por Hoffman en 1943. Su actividad psicotrópica estimuló la preparación de un gran número de análogos
de esta molécula.
r = nh-ch-ch2oh
CH,
Ergometnnma
R= -N(CH2CH3)2,LSD
De los alcaloides del curare, la tubocurarina, obtenida por King en 1935, llevó, por un lado, a estudiar los
éteres fenólicos, como la galantina de Bovet, en 1945, y por otro, condujo al descubrimiento del decainetonio,
un potente bloqueante neuromuscular.
(H,C),N(CH,),„N(CH,),
Dccametonio
Tubocurarina
La efedrina, con actividad simpaticomimética, fue aislada por Nagai de la Ephedra vulgaris en 1897. Su
difícil extracción llevó al estudio de la anfetamina, un compuesto originalmente sintetizado en 1887. Sus análo
gos han demostrado una gran eficacia como potentes estimulantes centrales y supresores del apetito.
CHOH-CH-NHCH,
CH?
Efedrina Anfetamina
Los extractos de Rauwolfia serpentina demostraron poseer propiedades antihipertensoras y sedantes, que
llevaron, más adelante, al aislamiento de su alcaloide, la reserpina, que fue modelo para la preparación de un
gran número de análogos antihipertensores.
Reserpina
Aunque los glicósidos no han sido modelos frecuentes en la búsqueda de cabezas de serie, han estimulado
los estudios de biosintesis y metabolismo, transporte y solubilidad. La digoxina. de Digitalis lanata, es un gli-
cósido cardíaco de amplio uso, desplazado hoy por otros cardiotónicos más modernos. Otro de los ejemplos
más representativos, que ha supuesto la síntesis de centenares de derivados, es la salicina. Aislada de la corteza
de sauce (Spirea ulmaria), fue utilizada en 1874 por MacLagan en el tratamiento de la fiebre reumática. Des
pués se observó que un metabolito suyo, el ácido salicílico, tenía una enorme eficacia en este tratamiento, a la
vez que se reconocían sus propiedades antipiréticas. De sus análogos, el más importante fue su acetil derivado,
la aspirina, introducida por Hoffman en 1898.
Ácido acetilsalicílico
2.1.2. Descubrimiento de prototipos a partir de metabolitos secundarios de mamíferos
Las hormonas de mamíferos son prototipos muy importantes. La principal dificultad para su aislamiento reside
en que se encuentran en pequeñas cantidades en los organismos. Los primeros experimentos se realizaron con
extractos de glándulas tiroides, médula, pituitaria y ovarios. Kendall logró aislar, en 1914, unos cristales de la
hormona del tiroides que luego se identificó como tiroxina. La adrenalina fue aislada por Takamine en 1901.
Inicialmente, se utilizó como hemostático y como vasoconstrictor capaz de prolongar la acción de la procaína.
Su descubrimiento llevó a la preparación de la isoprenalina, que abrió las posibilidades de investigación de aná
logos con actividad por vía oral y resistentes a la inactivación metabólica.
Tiroxina Adrenalina
El estudio de los extractos pancreáticos se inició en 1889, con el descubrimiento, por Minkowski y von
Mering, de que la escisión del páncreas produce la muerte de los perros por diabetes. La purificación de la insu
lina en 1922, por Banting y Best, y su posterior cristalización por Aben en 1926, pueden considerarse pasos de
cisivos para el estudio de péptidos activos.
La investigación de las hormonas sexuales femeninas y masculinas, las de la corteza suprarrenal, las neu-
rohormonas y otras se inició, en los años veinte, con los trabajos de Butenandt. Marrian y Doisy, fundamen
talmente.
En 1934, von Euler descubrió las prostaglandinas. La posibilidad de que reduzcan la presión sanguínea y
estimulen el músculo liso impulsó el estudio de su estructura, que realizó Bergstrom en 1958. La síntesis de
análogos estructurales, inhibidores de su formación y otros compuestos relacionados, sigue siendo en la actuali
dad una línea de investigación cuyo alcance es difícil concretar.
2.1.3. Vitaminas
El trabajo sobre las vitaminas se inició con la vitamina A, cuya estructura determinó Karrer en 1933. Más ade
lante. se descubrieron la riboflavina, la nicotinamida, la piridoxina y la biotina. En 1948, la vitamina B,2 fue
identificada por Smith, Todd y Hodgkin. La estructura del ácido ascórbico, aislado por King en 1932. la deter
minó Hirst en 1933. Las vitaminas D, con sus propiedades antirraquíticas, tienen su origen en los trabajos ini
ciados por McCollum, en 1921, con el aceite de hígado de bacalao. La vitamina E fue aislada por Evans en
1936. La vitamina K, fundamental para la coagulación de la sangre, se detectó en la alfalfa y se aisló pura en
1939. De todas ellas, se ha preparado un elevado número de análogos.
2.1.4. Antibióticos
Pocas variedades de Penicillium son capaces de producir penicilina. Por esta razón, solamente puede atribuirse a
la fortuna la circunstancia de que los trabajos de Fleming con estafilococos se realizasen con Penicillium nota-
turn, que posee tal propiedad. En 1940, Chain y Florey, en Oxford, prepararon la que se identificó como penici
lina F en 1943, a la vez que en Estados Unidos se preparaba la penicilina G, que difería del producto preparado
en Oxford, y se abrían las posibilidades de farmacomodulación molecular en esta serie con las penicilinas semi-
sintéticas. Estas fueron consecuencia de los trabajos de Batchelor, a partir de los cuales el ácido 6-aminopenici-
lánico pudo obtenerse por fermentación. Los trabajos de Brotzu en Cephalosporiuni acremonium condujeron a
la identificación de la cefalosporina C, con un espectro de acción superior al de las penicilinas. Los trabajos de
Morin y la producción industrial del ácido 7-aminocefalosporánico, a partir de la cefalosporina C, abrieron el
camino a las cefalosporinas semisintéticas.
HO,C-CH-(CH2)jCONH
NH j
R= -CH=CH-CH2-CH„ Penicilina F
O x CHo-O-COCH;
R = C6H5. Penicilina G CO2H
Cefalosporina C
De gran importancia fueron los trabajos de Dubos hacia 1934, basados en la observación de que los orga
nismos patógenos depositados en el suelo pueden ser destruidos por otros organismos presentes en el mismo
suelo. Así aparecieron muchos antibióticos procedentes de actinomicetos. Uno de los más interesantes es la es-
treptotricina, aislada de Actinomyces lavadulae, que a pesar de su toxicidad renal, activó la investigación de fár
macos antituberculosos, llevando al aislamiento de la estreptomicina de Streptomyces griseus en 1944. Otro
ejemplo importante es el cloranfenicol, aislado en 1947 a partir de Streptomyces venezuelae.
2.1.5. Descubrimiento accidental de una acción biológica en productos de síntesis
Los ejemplos de utilización en terapéutica de fármacos descubiertos de este modo son numerosos, y algunos
muy antiguos. El óxido nitroso, o «gas de la risa», fue descubierto como euforizante por Davy en 1799.
En 1844. Wells lo evaluó como anestésico local después de observar que los voluntarios no respondían al daño
que se les infligía cuando se les golpeaba en las demostraciones públicas del uso del gas.
La observación, realizada por Balard, de que el nitrito de pentilo causaba grandes dolores de cabeza
llevó a estudiar la acción fisiológica de este compuesto, observándose que era consecuencia de una caída en
la presión arterial por dilatación de los capilares. Entre los años 1874 y 1875, se introdujeron los nitritos
como vasodilatadores. Este ejemplo puede considerarse como la primera modificación estructural en química
farmacéutica.
Erdtman encontró, en 1935, en sus investigaciones sobre la síntesis de la isogramina, que se le producía
un entumecimiento en la lengua cuando manipulaba el compuesto. La síntesis de sus análogos y derivados con
dujo al compuesto de cadena abierta lignocaína (lidocaína y xilocaína), que resultó ser un excelente anestésico
local.
Isogramina Lidocaína
Con el desarrollo de la síntesis orgánica, muchas de las estructuras químicas nuevas se consideraron como
candidatos para el estudio de sus propiedades biológicas. Un ejemplo de esta metodología son los trabajos reali
zados por la compañía BASF en piridazonas, que fueron consecuencia de un estudio acerca de las posibilidades
de la química de acetilenos (Esquema 1). Las piridazonas fueron un modelo de enorme valor en el diseño de fár
macos antihipertensores.
Esquema 1
El ejemplo más interesante sobre la actividad biológica de nuevas estructuras son los trabajos de Stem-
bach, que llevaron al descubrimiento de las benzodiazepinas (Esquema 2). Originalmente, se pretendía la sínte
sis de un sistema de 3,1,4-benzoxadiazepina para su estudio en animales. Dicho sistema se había descrito como
producto de la deshidratación de oximas de 2-acilaminobenzofenonas; sin embargo, cuando se repitió la síntesis
y se analizaron cuidadosamente las estructuras, se modificó la asignación inicial, ya que se trataba de derivados
de quinazolina-3-óxido. La siguiente sorpresa se produjo al tratar estos compuestos con aminas, en un intento
de preparar una serie de derivados. En lugar del metilaminometilén derivado esperado, se encontró una nueva
estructura de benzodiazepina que, al modificarse, dio lugar al primer fármaco desarrollado de esta serie, el clor-
diazepóxido, mejor conocido por su nombre comercial de Librium. Este fármaco abrió el camino para el poste
rior desarrollo de los ansiolíticos y relajantes musculares en la serie de las benzodiazepinas.
R
NH—COR
XX
R' C =N-OH
Ar
* XI
R"^ X/ J=N
Ar
'
CH2-NHCHa
R./ X/ Xjf- 0
Ar
R,/ XZ
Y n*
XQ-
R
CHyNHj y
'x
\
i yX Producto esperado
XiONH-CH,
Ar
R./x/\_./+
N o (Productoencontrado)
R=CH,CI
Ar
R' = Cl, Librium
Esquema 2
2.1.6. Descubrimiento de efectos inesperados en la aplicación terapéutica de fármacos conocidos
La observación de que el ácido salicílico, introducido en 1879 como antiséptico para uso externo, disminuía la
fiebre de los enfermos permitió a Stricker ensayarlo para controlar la temperatura de las fiebres reumáticas. Sor
prendentemente, el producto resultó ser además un agente antirreumático específico.
La acción diurética del merbafeno, un agente antisifilítico, fue reconocida por Vogel en 1919 y supuso la
introducción de organomercuriales en terapéutica. Investigaciones posteriores demostraron el gran valor que te
nían estos compuestos en pacientes con insuficiencia cardíaca congestiva. Posteriormente, este fármaco sería
sustituido por el mersalilo y. más adelante, por el ácido ctacrínico. carente de mercurio.
NaO,C-CH,O
CONHCH,CH(OCHjCH,HgOH
Mersalilo
Merbafeno H V
^co-c=ch2
|T CHj-CH,
HO2C-CH2OXyzK'Cl
Cl
Acido ctacrínico
Cuando se introdujeron las sulfamidas como quimioterápicos, en 1930, se observó que los pacientes tra
tados producían grandes cantidades de orina ligeramente alcalina. Se sugirió que este hecho se debía al au
mento de excreción de bicarbonato sódico producido por inhibición de la anhidrasa carbónica. Esta observa
ción constituyó la base para la utilización, en 1949, de grandes dosis de sulfanilamida como diurético en
pacientes con insuficiencia cardíaca congestiva. La toxicidad de esta amida fomentó el estudio de una larga se
rie de sulfonamidas, realizado por Roblin y Clapp. De esta forma, apareció la acetazolamida. que se introdujo
como diurético en 1952.
H,C—CO—HN SO2NH2
Acetazolamida
Por una evolución estructural razonable de las sulfonamidas. se llegó igualmente a las tiadiazinas,
en 1957, de las que son ejemplos la clorotiazida y la hidroclorotiazida.
Clorotiazida
Hidroclorotiazida
En los años cincuenta, se utilizaba la iproniazida como agente tuberculostático. La observación de que los
enfermos tratados con este compuesto presentaban una euforia no esperada llevó a determinar su acción como
inhibidor de la enzima monoaminooxidasa (IMAQ). abriéndose un nuevo frente al tratamiento antidepresivo.
2.1.7. El descubrimiento basado en estrategias bioquímicas
El éxito derivado de la utilización de sulfamidas como quimioterápicas condujo al estudio de su mecanismo de

acción. Woods determinó que su acción tenía lugar como consecuencia de la competencia, por analogía estruc
tural. entre los derivados de p-aminosulfanilamida y el ácido p-aminobenzoico (PABA) en la biosíntesis del áci
do dihidrofólico en organismos inferiores. Este trabajo establecía un nuevo enfoque de la búsqueda de «cabezas
de serie»: la interferencia cnzimática y la selectividad de acción. De esta fonna. se han diseñado muchos fárma
cos, entre los que puede citarse, como análogo de aminoácidos, el a-metilDOPA. que por su similitud estructu
ral con la 3.4-dihidroxifenilalanina. inhibe la DOPA-descarboxilasa.
DORA Dopamina
a-MetilDOPA
Un segundo ejemplo interesante es el 5-fluorouracilo, antimetabolito pirimidínico que ha demostrado ser

un importante fármaco antitumoral. Su acción biológica se debe a su relación estructural con el uracilo, con el
que compite por el centro activo de la enzima timidilato sintetasa.
Uracilo 5-Fluorou racilo
El estudio de inhibidores enzimáticos ha permitido, no solamente la aparición de nuevos fármacos, sino

también un mejor conocimiento de los sistemas enzimáticos. Los ejemplos actuales son innumerables.
2.2. El descubrimiento de un «cabeza de serie» en la actualidad
Los enfoques históricos, descritos anteriormente, para el descubrimiento de prototipos o «cabezas de serie»
continúan siendo válidos en la actualidad. No obstante, deben tenerse en cuenta las nuevas tecnologías y enfo
ques que están abriendo interesantes posibilidades en el descubrimiento de fármacos más seguros y eficaces.
Hasta I960, la actividad biológica de un compuesto se determinaba en el animal entero, siendo una ex
cepción las determinaciones en sistemas celulares. Posteriormente, como consecuencia del desarrollo de las
ciencias bioquímicas que permiten la purificación de sistemas enzimáticos. se plantearon las interrelaciones en
tre los sustratos y los fármacos inhibidores.
En estos años también empiezan a plantearse los estudios de relación estructura química-actividad bioló
gica. conocidos por sus iniciales inglesas QSARs (Quantitative Structure Activity Relationships). La responsa
bilidad de estos primeros trabajos, se debe fundamentalmente al Prof. C. Hansch, en EE.UU. Se trata, en esen
cia, de relacionar la acción biológica con parámetros fisicoquímicos. De esta forma, una vez establecidas las
ecuaciones para los productos conocidos, se pueden determinar las estructuras que se ajusten mejor a una activi
dad biológica deseada. En el laboratorio, solamente se preparan productos dirigidos, y por lo tanto el trabajo es
más eficaz. Un fármaco encontrado mediante la aplicación de estas técnicas es el norfloxacino.
Norfloxacino
Estos enfoques son las primeras iniciativas que consideran parámetros fisicoquímicos y utilizan cálculos
estadísticos en el diseño de fármacos. Con ellas se pretende optimizar la actividad biológica, en lugar de encon
trar un nuevo líder. La profusión de estos estudios aumentó considerablemente con la aparición de métodos rá
pidos de cálculo y programas de ordenador.
En los años setenta, el desarrollo de las técnicas de RM y rayos X proporcionó otro instrumento de gran
importancia para el descubrimiento de fármacos, al tener la posibilidad de conocer las disposiciones espaciales
de macromoléculas.
La dorzolamida, un inhibidor de la anhidrasa carbónica para el tratamiento del glaucoma, es un fármaco
diseñado utilizando la estructura tridimensional de dicha proteína.
C,HS -NH
Dorzolamida
El desarrollo de las técnicas computacionales, las espectroscopias, los cálculos fisicoquímicos y los pro
gramas de estadística hizo, inevitablemente, que se planteara la interrelación fármaco-receptor como algo men
surable, optimizable y visualizable, así como a la sensación de que, por fin, se había resuelto el problema de
descubrir un líder de forma racional; es lo que se ha denominado diseño racional de fármacos, terminología in
justa con los profesionales de la química farmacéutica que no utilizan estas técnicas, ya que podría parecer que
trabajan de forma irracional.
En este sentido, conviene considerar que puede haber moléculas que se acoplan con una diana farmacoló
gica pero no reúnen necesariamente las condiciones precisas de solubilidad, biodisponibilidad, toxicidad o me
tabolismo para ser buenos candidatos a fármaco.
A partir de 1995, aparecen técnicas de ensayos biológicos «robotizado» que permiten realizar un gran nú
mero de éstos a gran velocidad. Son los denominados HTS (High Throughput Screening). El número de ensayos
que se puede realizar por semana es de varias decenas de miles, por lo que surge la necesidad de disponer de un
gran número de compuestos a ensayar, algo que no puede proporcionar la síntesis tradicional.
No es de extrañar que surgieran, a la vez, las denominadas técnicas de la química combinatoria, que per
miten preparar un gran número de productos. También las acciones que llevan a disponer de las llamadas biblio
tecas de productos, preparados históricamente en los laboratorios o adquiridos, como un reservorio a utilizar en
cualquier nuevo ensayo. En ese estudio, el líder se abtendrá como consecuencia del ensayo biológico en un ele
vado número de productos.
En sólo cinco años se ha producido claramente un fenómeno pendular, que ha ido desde la posibilidad de
encontrar una molécula líder, preparando pocos productos seleccionados por técnicas de modclización molecular
en función de parámetros fisicoquímicos responsables de la interacción fármaco-receptor, a la situación actual, en
que se busca la molécula líder preparando muchos productos que se ensayan mediante métodos «robotizados».
Aunque es muy difícil adivinar el futuro, es previsible la conveniencia de plantear un trabajo integrador de los
métodos tradicionales, los métodos «computacionales», los ensayos «robotizados» y de los que aparezcan en un
futuro, utilizando en cada momento aquello que más interese en el problema concreto que se esté planteando.
La química combinatoria describe un grupo de técnicas que tienen como objetivo la producción de series
con un importante número de términos, de los que se van a estudiar luego sus propiedades biológicas. Los prime
ros esfuerzos se realizaron en los años ochenta y se dirigieron a la síntesis de péptidos y oligonucleótidos. Consi
dérese, por ejemplo, que para un hexapéptido, combinando 20 aminoácidos naturales, se puede originar un total de
64 millones de moléculas diferentes. Este número es especialmente revelador, si se considera que el número total
de compuestos descritos en Chemical Abstract es de una quinta parte. Es evidente la imposibilidad de preparar to
dos los compuestos por métodos convencionales, uno tras otro. Estas metodologías se han extendido a moléculas
pequeñas y se realizan frecuentemente en fase sólida (véase, p. ej., la síntesis de una biblioteca de benzodiazepina).
Síntesis combinatoria de 192 1,4-benzodiazcpin-2-onas

Se trata de unir los reactivos a un soporte sólido y. a continuación, se pueden utilizar diversas metodologías
para preparar la biblioteca de compuestos para su valoración biológica.
Con la puesta a punto de los métodos de ensayo biológico de alto rendimiento, que fundamentalmente
consideran la identificación de actividad en mezclas de compuestos, el estudio de los compuestos naturales ha
sufrido un importante impulso. Puede considerarse ahora que un extracto tiene las mismas características que
una mezcla de productos obtenidos por técnicas combinatorias. Las posibilidades de éxito en la búsqueda de ac
tividad biológica en plantas tratadas de esta forma aumenta considerablemente.
Un ejemplo de combinación de técnicas es el descubrimiento del Losartán a partir del S 8308 (un «ca
beza de serie» descubierto mediante técnicas de ensayo aleatorio), que en un refinamiento estructural llevó al
ZD7I55.
Por otra parte, la observación clínica continúa siendo fundamental en la búsqueda de nuevos fármacos. La
utilización de minoxidilo en el tratamiento de la alopecia es consecuencia de la observación de que crecía el pe
lo en enfermos tratados con este antihipertensor.
El desarrollo de la biología molecular, que está siendo espectacular en estos últimos años, permite cono
cer y descubrir nuevas dianas farmacológicas. Las estructuras tridimensionales de varios miles de proteínas,
muchas de ellas con un papel fisiológico, están depositadas, a disposición de los investigadores, en bibliotecas
de datos, como Brookhaven Protein Data Bank. Existe pues la posibilidad de diseñar moléculas que puedan
interactuar con ellas.
Además de las correlaciones que se encuentren entre las propiedades fisicoquímicas de los fármacos y
su actividad, en los últimos años se han desarrollado diversas metodologías del modelado molecular capaces
de representar las moléculas en tres dimensiones, superponerlas, y formar mapas que indiquen las diferentes
regiones del espacio, con sus características favorables y desfavorables desde el punto de vísta estético y de
carga, fundamentalmente.
También la genética ha permitido aislar e identificar secuencias de genes con los que construir vectores
que, transferidos a células del enfermo, permiten ejercer una actividad determinada o corregir un defecto gené
tico. La introducción de este material genético puede realizarse ex vivo, como en el caso del tratamiento de lin-
focitos medulares, pero también puede hacerse in vivo, en donde la información genética se transfiere por plás-
midos de ADN, por secuencias de ADN o por conjugados moleculares. Fundamentalmente, se utilizan
adenovirus, capaces de transferir su información a las células sin necesidad de la división celular. Hay un ele
vado número de ensayos clínicos actualmente en curso, y sus posibilidades de aplicación son muy importantes
en un gran número de tratamientos que sin duda tendrán gran relevancia tras el conocimiento del genoma hu
mano.
3. ETAPAS DEL DESARROLLO DE UN FÁRMACO
Una vez que se ha descubierto un nuevo fármaco, porque se ha demostrado una actividad útil en un com
puesto y se ha optimizado este prototipo o «cabeza de serie», comienza su desarrollo y finaliza la investigación
básica. Este desarrollo tiene una etapa preclínica, en la que se estudia su producción a mayor escala, su formu
lación farmacéutica, su farmacología y su toxicología, y otra etapa clínica, en la que se distinguen las fases I-IV
(Fig. 2.1).
En el descubrimiento de nuevos fármacos todos los enfoques son válidos si cumplen el fin propuesto de
encontrar el producto que la sociedad precisa. No obstante, todo tiene un precio y, si bien el valor de los medi
camentos sólo se puede apreciar cuando se necesitan, está claro que los costes de la 1+D no pueden crecer de
forma ilimitada.
Identificación de un prototipo —> manipulación molecular para

Investigación básica su optimización
J.
¿Mecanismo de acción? <— ensayos in vitro e in vivo
Producción (análisis de impurezas, control microbiológico. estudios de estabilidad y estu

dios galénicos)
Desarrollo prcclinico Perfil farmacológico
Perfil lexicológico (incluyendo mutagcnicidad)
Perfil ADME (absorción, distribución, metabolismo, excreción)
Fase 1 (administración a seres humanos sin abandonar los estudios preclínicos.

Estudios de tolerancia y seguridad en voluntarios sanos)
Fase II (muestras de pacientes cada vez más amplias, concreción de dosis y paulas de trata
Desarrollo clínico miento. indicación principal)
Fase III (perfil de eficacia y seguridad en comparación con otros fármacos disponibles en un
número importante de pacientes)
Fase IV (estudios postcomercialización)
Figura 2.1. Etapas del desarrollo de un fármaco
4. EL COSTE DE LA INNOVACIÓN
El descubrimiento de nuevos fármacos supone un elevado coste, que ha motivado el replanteamiento, no sólo de
los enfoques en la investigación, sino también de las estrategias empresariales. La cantidad de dinero gastado en
investigación y desarrollo (I+D) en lodo el mundo ha pasado de 4.109 millones de $ en 1984 a 20.109 en 1997.
Se ha multiplicado, por tanto, por cinco la cantidad gastada en tal fin. Sin embargo, el número de compues
tos nuevos introducidos en el mercado se ha mantenido constante en alrededor de 40 por año, con la excepción
de 1987, año en que fueron 65.
La sociedad espera tener compuestos cada vez más seguros y eficaces, lo que está haciendo que el tiempo
necesario para encontrar estos nuevos compuestos vaya aumentando igualmente, calculándose en 15 años el
tiempo necesario para que un compuesto pase del laboratorio de síntesis al mercado farmacéutico. Si en este
punto se considera que el tiempo de vigencia de una patente es de 25 años y que ésta generalmente se hace en
los tres primeros años, una vez identificada la actividad biológica en la nueva estructura, se comprende que el
tiempo disponible para recuperar las inversiones es realmente corto.
Los costes más importantes en el desarrollo de un fármaco son los de los estudios clínicos de las nuevas
estructuras. Ya se ha dicho que la sociedad exige cada vez compuestos más seguros, pero la investigación preclí
nica tiene sus limitaciones en lo que se refiere a la información que puede obtenerse de ella. Si en los años
ochenta la investigación clínica de un nuevo compuesto consideraba el estudio controlado en 3.000 personas,
como un término medio, en la actualidad este número supera con frecuencia los 10.000.
Otro fenómeno importante observado en estos últimos años es que. a consecuencia de los elevados costes
de la investigación, solamente los primeros fármacos que se seleccionan para su desarrollo, llegan al mercado.
A diferencia de lo que sucedía en otros tiempos, los compuestos similares sólo alcanzan el interés económico si
los primeros presentan problemas en su utilización clínica. Dado el carácter social de los medicamentos, otro
aspecto que puede llegar a tener interés es el precio, de forma que un compuesto de características similares a
otro podría desplazarlo del mercado por esta circunstancia.
BIBLIOGRAFÍA
Boyd. D.: Modern Drug Discovery, 41-47 (1998).

Buguer, A.: Guide to the Chemical Basis of Drug Design. John Wiley & Sons (eds.), Nueva York, 1983.
Connolly, Y.; Kutter, E, y Austel., V.: Modern Drug Research. Marcel Dekker. Inc. Nueva York. 1989.
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Reuben, B. G.. y Wittcoff. H. A.: Pharmaceutical Chemicals in Perspective. John Wiley & Sons (eds.), Nueva York, 1989.
3
Dianas biológicas: receptores
M. A. Gallo y A. Espinosa
1. INTRODUCCIÓN: DIANAS BIOLÓGICAS Y SUS LIGANDOS
Con la excepción de los anestésicos volátiles, los fármacos presentan especificidad estructural (véase Capítu
lo 1). que puede interpretarse aceptando que ejercen su efecto cuando interactúan con alguna macromolécula
biológica y admitiendo que la unión de ambas especies químicas inicia una serie de procesos que conducen a la
respuesta farmacológica. En un sentido muy amplio, se denomina receptor a la especie química biológica que
interactúa selectivamente con el fármaco. Por lo tanto, todos los fármacos, con las excepciones mencionadas,
encuentran una «diana» en el organismo vivo.
El término receptor aparece citado por primera vez en una publicación de Ehrlich
* y Morgenroth (1900),
en la que argumentan: «Por razones de brevedad, el grupo combinante de la molécula protoplasmática será lla
mado receptor».
Paralelamente. Langley consiguió pruebas experimentales de la existencia de sustancias en las termina
ciones nerviosas que son capaces de crear o transmitir estímulos, siendo posible bloquear o mimetizar su acción
mediante el uso de determinados «venenos»
**
.
Aunque el concepto de receptor ha tenido diversas interpretaciones a lo largo de sus más de cien años de
existencia, actualmente se define, de forma más general, como «una macromolécula o complejo macromolecu
lar a la que se unen, de forma muy selectiva, diversos ligandos que provocan un efecto biológico específico».
Tal definición supone, al menos, admitir que: a) cualquier compuesto (ligando) que estimule selectivamente el
receptor se denominará agonista; b) la selectividad del estímulo lleva implícita la consideración de que, entre
todas las moléculas que pueden interactuar con el receptor, sólo los agonistas son reconocidos por aquél y de
sencadenan los acontecimientos biológicos consecuentes, y c) la existencia de agonistas lleva implícita la posi
bilidad de que existan otras formas de interacción entre el ligando y el receptor, por ejemplo, la de antagonistas
* Ehrlich había observado que determinados compuestos, como algunos colorantes para tinción de tejidos, experimentan una dis
tribución biológica selectiva dependiente de su estructura.
*• Sobre esta hipótesis, logró explicar la contracción de los músculos esqueléticos de la rana, y en el primer volumen del Journal
of Physiology puede leerse un fragmento de uno de sus trabajos, relativo al antagonismo entre la atropina (antagonista) y la pilot arpiña
(agonista), sobre las glándulas salivales: «Se puede asumir que en las terminaciones de los nervios y en las células de las glándulas de
secrección existen una o varias sustancias que son capaces de formar compuestos con la pilocarpina. La formación de tales compuestos
está regulada por la ley de acción de masas y la afinidad química, entre otros factores».
que son ligandos que se unen al receptor sin desencadenar los acontecimientos biológicos involucrados en su
estímulo.
Por otro lado, la idea de receptor y, por tanto, la de los efectos biológicos asociados a su estímulo no con
lleva expresamente la consecuencia de su uso con finalidad terapéutica. Así, los receptores asociados a los sen
tidos del gusto y tacto no han encontrado hasta ahora una aplicación terapéutica. En consecuencia, el concepto
de receptor debe asociarse a un proceso biológico más amplio que incluya el funcionamiento normal del orga
nismo vivo, que lleva implícita la consideración de que muchos ligandos tienen un origen interno.
En la actualidad, se sabe que compuestos tales como fármacos, neurotransmisores. hormonas y toxinas,
así como el sistema inmunitario. la luz, etc., tienen la capacidad de actuar como activadores o bloqueantes de
los efectos asociados a los receptores. Por lo tanto, la idea de receptor va íntimamente ligada a la de su(s) ago
nista!s) y antagonista^) selectivos, de tal forma que este criterio ha sido mayoritariamente aceptado para esta
blecer una clasificación racional de los mismos. Así. por ejemplo, en el sistema adrenérgico (la respuesta ner
viosa adrenérgica está mediada por el neurotransmisor noradrenalina) se han descrito cinco respuestas
biológicas diferentes, asociadas a cinco receptores distintos, denominados a,. CQ. P,. p, y P<. cuyos agonistas
selectivos son, respectivamente, metoxamina. clonidina, xamoterol, procaterol y el compuesto BRL 37344: al
mismo tiempo, sus antagonistas específicos se han caracterizado como prazosina, idazoxán. atenolol, e
ICI 118.551. no habiéndose caracterizado hasta este momento el antagonista selectivo del receptor pA. En la
Tabla 3.1, se muestran algunos tipos de receptores, así como sus agonistas y antagonistas selectivos.
Tabla 3.1. Algunos ejemplos de la clasificación funcional de receptores
Receptor Agonista selectivo Antagonista selectivo
Histamina H, 2-Metilhi.stamina Mepiramina

Histamina H_- Dimapril Ranilidina
P, (adrenérgico) Xamoterol Atenolol
GABAa Muscimol Bicucuiina
Opiáceo p Morfina Naloxona
Nicotina (colinérgico) Nicotina Hexametonio
5-HTj a-Metil-5-hidroxitriptamina Ritanscrina
Muscarina M| (colinérgico) Bctanccol Pirenzepina
Para obtener información sobre el proceso de acomplamiento entre el fármaco y su receptor, se pueden
emplear dos métodos diferentes:
I) Métodos basados en técnicas farmacológicas, que emplean animales completos o parte de ellos, como,
por ejemplo, órganos aislados, para obtener correlaciones entre dosis usadas de agonista y respuesta
biológica o farmacológica obtenida.
2) Tecnología bioquímica en la que se emplean ligandos marcados (binding con radioligandos).
Históricamente, el enfoque farmacológico se desarrolló primero y condujo, no sólo a la obtención de las

curvas dosis-respuesta, sino también a la formulación de las primeras teorías sobre el receptor y el mecanismo
de acción de los fármacos (teorías clásicas).
2. EXPERIMENTACIÓN FARMACOLÓGICA: CURVAS DOSIS-RESPUESTA
Se basa en el análisis de los resultados experimentales obtenidos al medir el efecto final del fármaco sobre un
organismo completo o una parte del mismo (órgano aislado, tejido, etc.), en función de la dosis de fármaco em
pleada. Si se representa el efecto obtenido con un agonista (expresado normalmente como % del efecto máximo
observable), en función de la concentración del fármaco empleado (dosis empleada: normalmente se emplea
cualquier unidad de concentración, aunque se utiliza mucho la molaridad en experiencias llevadas a cabo sobre
órganos o tejidos aislados, y mg/kg de peso cuando se emplean animales enteros), se obtiene la curva (a) de
DIANAS BIOLÓGICAS: RECEPTORES 43
la Figura 3.1, que es completamente comparable con la isoterma de Langmuir, que correlaciona la adsorción de
gases en sólidos en función de la presión parcial del gas adsorbido.
Figura 3.1. Curvas que representan las respuestas obtenidas (% de la respuesta máxima) en función de la dosis:
a) escala decimal; b) escala semilogarítmica; c) índice terapéutico. En todos los casos se representan
los valores de las DE».
Estos resultados experimentales son compatibles con, al menos, los siguientes postulados:
I. Se puede aceptar que el efecto de cada receptor es independiente del obtenido con los demás recep
tores.
2. El número de receptores por unidad de volumen de un tejido debe ser limitado. Esto explicaría la satu
ración de la respuesta (relación hiperbólica), es decir, que se obtenga una respuesta máxima observa
ble para cada tejido.
3. La respuesta biológica podría ser interpretada como una función del número de receptores ocupados
por el fármaco (como propuso Clark, 1929, en su teoría de la ocupación).
Si se usa una escala semilogarítmica, es decir, si se representa el efecto obtenido (como porcentaje de la
respuesta máxima) en función del logaritmo de la dosis empleada del agonista (M), se obtiene la curba (b) de la
Figura 3.1. En cualquiera de las representaciones, lineal o semilogarítmica, la dosis de agonista que se precisa
para obtener un efecto 50 % del máximo observable se representa como DE» (dosis eficaz 50 %), aunque pue
de emplearse también el valor PD:.
PDj = -10g DEW
Cualquiera de los valores, PD2 o DE», representa con bastante fiabilidad la potencia del agonista sobre el
receptor, y los valores para diferentes agonistas son comparables si la determinación se ha realizado sobre el
mismo receptor empleando el mismo método experimental.
El efecto tóxico del agonista (curva c. Figura 3.1) guarda también una análoga relación dosis-efecto letal.
Así, puede definirse el parámetro DLs<¡ (dosis letal 50%) como la concentración a la que se produce la muerte
del 50% de los animales tratados. A este respecto, conviene destacar las dos cuestiones siguientes:
a) El parámetro DE» puede determinarse experimentalmente, tanto en órganos aislados como en anima
les completos, incluyendo los seres humanos, a través de las curvas dosis-efecto. Sin embargo, el pará
metro DL50, obviamente, no puede determinarse en seres humanos, pero sí se puede obtener en otros
animales, aunque los valores no pueden ser extrapolados a los primeros.
b) La relación DLy/DEwl define el concepto de índice terapéutico, que expresa el riesgo que implica el
uso del fármaco. El índice terapéutico debe ser grande, aunque el empleo del fármaco va a depender
también del beneficio obtenido (por ejemplo, en fármacos antitumorales, el índice terapéutico es muy
pequeño pero el beneficio obtenido es muy grande).
Figura 3.2. Curvas dosis-respuesta de antagonistas: a) antagonistas competitivos (obsérvese que siempre se puede
alcanzar el efecto máximo empleando concentraciones de agonista mayores); b) antagonistas no competitivos
(véase que el agonista no puede alcanzar el efecto máximo en presencia del antagonista no competitivo);
c) agonista parcial de eficacia 70 %.
Además de la interacción entre el receptor y el agonista, el estudio experimental de las relaciones dosis-efecto
demuestra la existencia de otras formas de interacción entre un ligando y su diana biológica. Así, existen compues
tos que no provocan efecto alguno, pero bloquean la respuesta de los agonistas sobre el tejido, órgano o animal com
pleto. En las curvas a) y b) de la Figura 3.2 se muestran los dos diferentes bloqueos del receptor observados experi
mentalmente. Los compuestos que interactúan de tal forma con el receptor se denominan antagonistas. En la curva
a), se muestra el comportamiento de un antagonista competitivo A (no se observa una disminución del efecto máxi
mo), para el que el bloqueo de la respuesta es proporcional a las concentraciones de agonistas y antagonista simultá
neamente. mientras que b) expresa el comportamiento de un antagonista no competitivo B (se observa una disminu
ción del efecto máximo que es proporcional a la concentración de antagonista) que bloquea el efecto del agonista
independientemente de la concentración de éste, pero dependiendo de su propia concentración.
Existen también compuestos que, siendo agonistas sobre un receptor, producen efectos inferiores al efec
to máximo observable con otros agonistas (Figura 3.2c). Este tipo de interacción es característica de los agonis
tas parciales que mostrando la misma afinidad química por el receptor, activan con menor eficacia los aconteci
mientos biológicos que caracterizan al agonismo.
Por último, en la Figura 3.3, se representa gráficamente cómo los antagonistas competitivos se unen al
mismo receptor que los agonistas, mientras que los no competitivos utilizan un «sitio de fijación» diferente.
Sitio receptor
Antagonista
No efecto.
El sitio receptor
está bloqueado
Sitio receptor
más área accesoria
Figura 33. Representación esquemática de los acoplamientos fármaco-receptor en: a) agonistas y antagonistas
competitivos (ocupan el sitio de reconocimiento bloqueando la acción del agonista),
b) agonistas no competitivos (bloquean la interacción con un área accesoria).
Diferentes investigadores han tratado de formular teorías sobre la interacción ligando-receptor que permitan
interpretar los resultados experimentales descritos. Entre los modelos que más información han aportado se pue
den citar los siguientes: a) teoría de la ocupación de Clark; b) teoría ocupacional modificada de Ariens; c) teoría
ocupacional modificada de Sthephenson y Furchgott; d) teoría de Paton; e) teoría de la perturbación molecular; f)
teoría de los dos estados del receptor; g) modelo operacional de Black y Leíf, y h) teoría del receptor móvil.
En la teoría ocupacional clásica de Clark, se considera que la formación del complejo entre agonista (fár
maco) y su receptor responde a un modelo de ecuación reversible bimolecular de segundo orden, definido por la
ecuación [1],
F+R^FR [1]
Si se supone, por un lado, que la respuesta biológica o farmacológica es proporcional al número de recep
tores ocupados (definido por FR) y que el número de receptores total por unidad de volumen de un tejido (Rt) es
limitado, se cumple al mismo tiempo la ecuación [2], en la que R es el número de receptores libres no unidos al
ligando.
RT = R + FR [2]
Por otro lado, si se acepta la proporcionalidad entre la respuesta y el número de receptores ocupados, la
relación entre el efecto observado cuando se emplea la dosis x (Ex) y el efecto máximo (E,„„) observable en un
tejido determinado vendrá definida por la ecuación [3], en la que Rx representa el número de receptores ocupa
dos para la dosis x del fármaco.
Ej/Emi. = [R.]/[RtJ (31
Si. además, se tiene en cuenta la constante de disociación del complejo (KD), se llega a establecer la ecua
ción [4], que correlaciona la dosis empleada y el efecto observado y muestra la misma relación hiperbólica que
la encontrada experimentalmente (Fig. 3.1. curva a).
ETEnu, = IF]KD+IF] [4]
Finalmente, la ecuación (4] deviene en la [5], en el caso particular de que la dosis usada provoque el efec
to mitad del máximo.
DE» = Kd [5]
La teoría clásica de la ocupación puede explicar satisfactoriamente las curvas dosis-respuesta para los
agonistas (Fig. 3.1, curva a) y también la existencia de antagonismo no competitivo (Fig. 3.2. curva b). pero no
puede dar una explicación lógica a la existencia de antagonistas competitivos (Fig. 3.2, curva a) y, sobre todo, a
la de agonistas parciales (Fig. 3.2, curva c). ¿Cómo justificar que un agonista que se usa en dosis en la que todos
los receptores están ocupados no origina la respuesta máxima observable?
Ariens modificó la teoría ocupacional suponiendo que la respuesta biológica o farmacológica es un proce
so en dos etapas (ecuación [6]):
Afinidad
1
F + R «v FR —> Respuesta biológica [6]
T
Actividad
intrínseca
siendo la afinidad, o afinidad química, el factor que controla la formación del complejo fármaco-receptor. Una
vez establecido este complejo, la facilidad de inducir una respuesta viene controlada por la actividad intrínse-
ca a, que mide la tendencia del complejo a originar una respuesta biológica. Así, la ecuación [4] se transforma
en la ecuación [7]
EJEmJ, = a[F]/KD+[F] (7]
De esta forma, los fármacos se denominan agonistas cuando muestran un valor de a = 1 (se alcanza el
efecto máximo observable); antagonistas cuando a = 0 (efecto nulo) y agonistas parciales cuando 0 < a < I (no
se alcanza el efecto máximo observable).
La primera ruptura con la teoría ocupacional surgió de Stephenson y Furchgott. Para estos investigadores,
el antagonismo debe transcurrir siempre con una reducción del efecto máximo, porque en presencia del antago
nista disminuye el número de receptores capaces de asociarse al agonista; es decir, el antagonismo debería ser
siempre no competitivo (Fig. 3.2, curva b), pero ¿cómo explicar el antagonismo competitivo en el que la res
puesta máxima se logra en presencia de cantidades importantes de antagonista? (Fig. 3.2, curva a).
Dicho en otros términos, los resultados de la Figura 3.2. a parecen indicar que no se necesita que el ago
nista ocupe todos los receptores para obtener la respuesta máxima y, en consecuencia, la respuesta biológica o
farmacológica no es directamente proporcional a! número de receptores ocupados.
Para explicar el efecto del antagonismo competitivo, Stephenson y Furchgott admitieron que los tejidos
biológicos tienen más receptores que los que se necesitan para obtener la respuesta máxima; es decir, los tejidos
contienen receptores de reserva y, por lo tanto, la ecuación (5] deja de ser válida, porque KD » DE» al necesi
tarse la estimulación de menos receptores para obtener la respuesta 50 %. La ecuación [4] debe tener en cuenta
este hecho.
Los autores propusieron el concepto de eficacia a través de la ecuación [8]
e = e R, [8]
en la que e representa la eficacia, e la eficacia intrínseca y RT el número total de receptores. Si la ecuación [4] se
corrige con este concepto, se obtiene la ecuación [9]
EI/EmiI = E[RT][F]/KD + [Fj [9]
Por otro lado, en 1983. Black y Leff formularon la ecuación [10] para la relación dosis-respuesta
= p[F]/KR + (I + p)[F[ 1101
En ella p es el coeficiente de transducción y representa el número de receptores que deben ocuparse para ob
tener el efecto mitad sobre el tejido considerado, y KF (ecuación [11]) el valor de |FR[ que determina tal
efecto mitad.
Así pues, el coeficiente de transducción, o eficacia, se define como la relación expresada por la ecua
ción [11]
P = [Rr]/Kfc di]
que puede determinarse experimentalmente si se tiene en cuenta que se cumple la ecuación [ 12]
DE.» — Kq/1 + p (12J

Figura 3.4. Curva dosis-respuesta (escala lineal) obtenida mediante la ecuación de Black y Leff.
La Figura 3.4 muestra la relación dosis-respuesta obtenida con la ecuación [10], en la que el valor asintó-
tico (denominado a) toma el valor dado por la ecuación [13]
a = pEM1/l+p [13]
siendo a igual a p E,ni> sólo en el caso particular para el que p tome un valor muy grande, denominándose a ta
les compuestos agonistas puros.
El modelo operacional de Black y Leff resulta muy útil, sobre todo para interpretar el acoplamiento entre
diferentes sistemas bioquímicos. Así, y como se verá posteriormente, algunos receptores actúan acoplándose a
proteínas G. En este caso, el modelo operacional puede ser representado por la ecuación [ 14]
Kd
F+R FR <= FRG Efecto [14]
siendo KD y Kfr las constantes de disociación de los complejos binario y temario, respectivamente, y G la pro
teína G asociada al receptor.
3. ENFOQUE BIOQUÍMICO MEDIANTE UNIÓN (BINDING) A RADIOLIGANDOS
3.1. Aislamiento y purificación de receptores
La concentración molar de un receptor en los tejidos u órganos, salvo excepciones como ocurre en los órganos
eléctricos de ciertos peces muy ricos en receptor nicotínico (véase Capítulo 14), es extremadamente pequeña
(en el sistema nervioso central es de rango pico-molar), y los valores de las constantes de disociación de los
complejos fármaco-receptor se encuentran próximos a IO93 M. *****
A pesar de las dificultades que supone trabajar con concentraciones tan bajas, en los últimos años la me
todología bioquímica ha permitido el desarrollo de técnicas de aislamiento, purificación y caracterización de re
ceptores, así como el estudio directo de sus interacciones con los fármacos o ligandos en general.
Dada su naturaleza lipoproteica. es bastante probable que los receptores no puedan resistir el rigor de la
metodología aplicada en su aislamiento, que puede alterar su conformación y, en consecuencia, sus propiedades
de reconocimiento. Por ello, se intentan aislar complejos irreversibles receptor-ligando.
Se emplean varias técnicas para solubilizar receptores unidos a las membranas celulares (detergentes sua
ves aniónicos como el dodecilsulfonato o el desoxicolato sódicos, o no iónicos), así como varios métodos cro-
matográficos para su separación y purificación. El método cromatográfico más empleado es la cromatografía de
afinidad, en la que el receptor, previamente solubilizado y prepurificado, se fija de forma selectiva y específica a
una molécula pequeña o «cebo», que se encuentra unida a un soporte poroso (amida poliacrílica, vidrio poroso,
etcétera). Una vez establecida la unión selectiva de la proteína receptora al cebo, las demás proteínas contami
nantes se eliminan por elución, y la retenida en el cebo se libera empleando sustancias de mayor afinidad por
aquél, eluyéndose posteriormente al estado puro.
3.2. Binding con radioligandos
La localización e identificación de receptores ha sido (o está siendo) posible gracias al empleo de fármacos mar
cados isotópicamente o radiofármacos. En los estudios de «binding» con radioligandos puede medirse la ra
diactividad del complejo F * = radioligando) y, por tanto, la concentración de fármaco unido al receptor.
*-R (F
Los primeros resultados no se obtuvieron hasta 1973. cuando: a) se pudo disponer de fármacos marcados que
presentaban la misma actividad y especificidad que los no marcados: b) se logró diferenciar la radiactividad de
bida al complejo F-R de la radiactividad inespecífica, debida a la fijación del fármaco marcado en numerosos
*
lugares de fijación no específica, y c) se pudo disponer de radioisótopos con suficiente radiactividad («ligandos
calientes», con un rango de 20-100 Ci). preparados con ’H y l25I, fundamentalmente.
F ■ concentración de radioíArmaco libre
Figura 3.5, B,^,, = "binding" máximo, a) Representación lineal del «binding» específico, inespecífico
y curvas de saturación, b) Representación lineal de Scatchard
En esencia, después de incubar un tejido rico en el receptor que se estudia con el radiofármaco. se deter
mina la radiactividad especifica (debida al complejo F -R) y no específica (asociada al almacenamiento del fár
*
maco en depósitos inertes, como proteínas no específicas, membranas, etc.). Para ello, es preciso eliminar pre
viamente el radiofármaco no unido mediante diversas técnicas de lavado. El valor de la radiactividad unida es la
medida de la cantidad de fármaco retenido en el tejido. El binding no específico puede determinarse ahora mi
diendo la radiactividad unida en presencia de un fármaco agonista no marcado (ligando frío), para el que se su
pone una gran afinidad por el receptor, que se incuba en exceso con el ligando caliente. Los valores obtenidos en
ausencia o presencia del agonista selectivo no marcado representan, respectivamente, la radiactividad total y la
inespecífica.
En la representación de Scatchard de las curvas de saturación con radioligandos, la concentración de ra
dioligando unido específicamente al receptor alcanza un valor máximo (B,,,^, Fig. 3.6), que representa el núme
ro total de receptores existentes en el tejido, El valor KD del complejo (concentración a la que se encuentran
ocupados la mitad de los receptores), puede determinarse experimentalmente de acuerdo con la ecuación [15],
o directamente, dado que la intersección de la recta con el eje de abcisas corresponde al valor B„u,, mientras que
la intersección con el eje de ordenadas representa el valor
B/F — l/Ko B + Boux/Kq
Figura 3.6. Representación no lineal de Scatchard. Resolución en dos componentes
En algunos casos, la representación de Scatchard no es lineal sino curva, indicando la existencia de coo-
peratividades positivas o negativas, de receptores multicéntricos (de baja o alta afinidad), de que el fármaco
marcado y no marcado tengan distinta afinidad, o de errores experimentales.
3.3. Autorradiografía
Los radiofármacos permiten también localizar anatómicamente o histológicamente los receptores mediante la
autorradiografía. Una vez alcanzado el equilibrio de distribución y fijación de un radiofármaco a un tejido, por
ejemplo, se realizan varios cortes en éste y se recubren con emulsiones fotográficas, manteniendo el conjunto
durante un tiempo prolongado que puede llegar a ser de varias semanas. En los receptores, en los que se alcanza
una gran concentración de radiofármaco, se depositan selectivamente granos de plata.
3.4. Otras técnicas
En la caracterización de los receptores también se utilizan sondas de fluorescencia, que utilizan marcadores de
fluorescencia capaces de indicar su interacción con macromoléculas a través de los cambios que pueden obser
varse por diversas técnicas de esta propiedad
*
. Muchas biomoléculas activas y muchos fármacos son fluores
centes, o si no lo son. pueden prepararse análogos que lo sean.
* La fluorescencia es el fenómeno por el que una energía radiante absorbida, que aumenta la energía de un electrón a un estado
excitado de singlete o triplete. se pierde como radiación a mayor longitud de onda, frente a la que se transmite a otra molécula o a parle
de la misma. Como la fluorescencia de una molécula suele depender del medio en que se encuentre, de cambios de configuración o de in
teracciones moleculares, los marcadores de fluorescencia se utilizan ampliamente para estudiar el enlace (binding) de los fármacos con
sus receptores y para la localización o cartografía de éstos.
La resonancia magnética nuclear también se utiliza para el estudio de las interacciones fármaco-receptor,
a través de las pequeñas diferencias que pueden observarse siempre que no se superpongan las señales del fár
maco con las de la macromolécula, entre los desplazamientos químicos de ciertos átomos del fármaco, protones
por ejemplo, después de incubarlo con las macromoléculas adecuadas. Es frecuente también que varíen la an
chura o resolución de determinadas señales por las variaciones de los tiempos de relajación (T¡)
** que produce
una determinada interacción intermolecular.
La resonancia paramagnética electrónica (RPE) o resonancia de espín electrónico (REE). que detecta
electrones no apareados (radicales), es semejante a la resonancia magnética nuclear, pero es más sensible (pue
de detectar concentraciones de 10” porque el momento magnético del electrón es mucho mayor que el del pro
tón), resultando de gran utilidad en el estudio de las interacciones fármaco-receptor (la inmovilización se obser
va por un ensanchamiento de la línea espectral). Para ello, se utilizan como sondas marcadores de espín que son
radicales libres estables.
4. TIPOS DE RECEPTORES Y MECANISMOS PARA SU ACTIVACIÓN
En el proceso de generación de la denominada respuesta biológica deben resolverse antes, al menos, tres cues
tiones:
I) ¿Dónde se encuentran localizadas las dianas biológicas?

2) ¿Qué acontecimientos se producen al activarse el complejo fármaco-diana?
3) ¿Como se lleva a cabo el reconocimiento molecular entre las dos especies químicas y qué fuerzas in
tervienen en el mismo?
4.1. Localización de las dianas biológicas y acontecimientos que tienen

lugar al activarse el complejo ligando-diana
Los receptores no son tan sólo la «diana» de muchos fármacos sino que. fundamentalmente los que se encuen
tran en las membranas celulares, están recibiendo continuamente estímulos eléctricos y químicos a fin de con
trolar el transporte de moléculas al interior de las células y transformar reguladamente unas en otras. La interac
ción entre sustancias activas de origen interno (neurotransmisores, hormonas, factores del crecimiento, etc.) y
externo (fármacos) y sus receptores de membrana, por ejemplo, puede activar una cascada de acontecimientos
que se traduce finalmente en una respuesta biológica.
Las macromoléculas o complejos macromoleculares biológicos cuya activación selectiva provoca res
puestas específicas se encuentran ampliamente distribuidos en el organismo vivo. Así, algunos fármacos tienen
como diana biológica el ADN o ARN; otros actúan sobre determinadas enzimas citosólicas, como por ejemplo,
la timidilato sintetasa. que cataliza la biotransformación de uracilo en tintina, base pirimidínica necesaria para la
síntesis de ADN, o sobre la enzima tirosina p-hidroxilasa, que interviene en la biosíntesis de la noradrenalina.
Finalmente, otros fármacos ejercen su efecto al actuar sobre macromoléculas que forman parte de las membra
nas citosólicas o nucleares. Dentro de este tercer grupo de dianas biológicas se pueden diferenciar varias zonas
de reconocimiento molecular o receptores: proteínas intrínsecas de membrana que forman parte de canales ióni
cos, proteínas intrínsecas de membrana asociadas a proteínas G, doble capa lipídica, etc. En la Figura 3.7, se
muestra un esquema de la localización de las principales dianas biológicas.
♦* Cuando núcleos, como tos protones, se irradian con una determinada radiofrecuencia, su población, que antes de la irradia
ción se distribuía ligeramente a favor de tos que poseen menor energía ten función de su número cuántico de espín -112 o + 1121. se
iguala {algunos absorben energía y se promocionan al nivel superior!, lo que se pone de manifiesto en el espectro de absorción frente
a la frecuencia radiante. Cuando se elimina ésta después de la saturación, la población de los núcleos vuelve a hacerse desigual a ira -
vés de la relajación, por transferencia de la energía absorbida al solvente {relajación espín-red. o T,). o a otro espín en la molécula
{relajación espín-espin o T¡). El tiempo necesario para que se produsca dicha relajación es diferente en el fármaco libre y en el aso-
Receptor con actividad

enzimática intrínseca
Figura 3.7. Representación esquemática de la localización de las principales dianas biológicas: receptores
de membrana, enzimas citosólicas, receptores nucleares y ADN.
De acuerdo con la Figura 3.7, existen tres tipos principales de receptores localiz.ados sobre la membrana
celular: canales iónicos, receptores con actividad tirosina cinasa y receptores acoplados a proteínas G. Desde un
punto de vista estructural, las principales características de cada uno de ellos son las siguientes:
a) Canales iónicos
Uno de los más conocidos es el receptor nicotínico: algunos receptores de aminoácidos, como los de GABA * y
de glicina, pertenecen también a esta categoría. Normalmente, están constituidos por proteínas asociadas en cin
co subunidades (Fig. 3.8«, receptor nicotínico). Cada subunidad está formada por una proteína homooligoméri-
ca o heterooligomérica, que contiene unos cuatro dominios de transmembrana (Fig. 6.8b) en la que los loops o
bucles extramembrana tienen aproximadamente la misma dimensión, y los dominios con los grupos amino y
ácido terminales se encuentran localizados extracelularmente. En estado de reposo, el canal o poro se encuentra
normalmente cerrado, pero se abre mediante su activación, que se produce cuando ligandos específicos se unen
a zonas específicas denominadas de reconocimiento molecular.
Una vez abierto el canal, el paso de iones tales como K*, Na*. Ca2* o CF, entre otros, puede producirse a
favor del gradiente de forma pasiva, o en contra del gradiente mediante el transporte activo que utiliza proteínas
de transporte adecuadas. En la práctica, existen dos tipos de canales iónicos: los dependientes del voltaje cuya
apertura está relacionada con procesos de despolarización, y los dependientes del receptor (receptores ionotró-
picos), que están controlados por las interacciones entre ciertos fármacos y sus receptores, o entre ciertos fárma
cos y los propios canales iónicos, directamente o alostéricamente (véase Capítulo 12).
El receptor nicotínico de acetilcolina. por ejemplo, está formado por una proteína con cinco subunidades
agrupadas en tomo a un canal o poro. Regula el paso a su través de cationes monovalentes (véase Capítulo 14).
La acetilcolina estimula su apertura al unirse a la subunidad a en un lugar que está próximo al aminoácido cis
terna (C192) y al sitio W-glicosilado N141 (Fig. 3.8.c). Los bloqueantes del receptor nicotínico. como ciertos
venenos de serpientes, inactivan este canal mediante la formación de enlaces disulfuro entre el resto de cisterna
C192 y otro situado en las unidades C128, C142 o C193.
Figura 3.8. a). Representación esquemática de un corte transversal de las cinco subunidades proteicas, b) Esquematiza-
ción de las regiones de transmembrana de una de las subunidades, c) Subunidad a del receptor nicotínico. con cinco domi
nios de transmembrana, en la que se muestran los restos que son importantes para la unión de agonistas y antagonistas.
b) Receptores con actividad tirosina cinasa
Los factores de crecimiento, por ejemplo, se unen (Fig. 3.9) a receptores con actividad tirosina cinasa, cuya ac
tivación permite la fosforilación de un resto tirosínico en el interior celular. Esos receptores están constituidos
por una cadena proteínica, que contiene un solo dominio transmembrana y cuya región -COOH terminal se en
cuentra en el interior de la célula, estando el dominio -NH: terminal situado en el exterior de la célula. Una vez
fosforilado el resto tirosínico. el sistema queda activado para la fosforilación de alguna(s) proteína(s) citosóli-
ca(s) con actividad enzimática. De esta forma, cambia la química celular y. por tanto, aparece una respuesta bio
lógica o farmacológica.
La interacción de los agonistas con este tipo de receptores, denominados también receptores con activi
dad enzimática intrínseca, provoca la formación de dímeros de receptores, provistos de la capacidad de autofos-
forilación del residuo tirosínico y, por tanto, de la de proteínas citosólicas enzimáticas específicas que tengan
gran afinidad por el sitio tirosínico.
Insulina
Figura 3.9 a). Estructura simplificada de receptores con actividad tirosina cinasa. b) Representación esquemática
de los acontecimientos que tienen lugar en el receptor de insulina.
c) Receptores asociados a proteínas G (receptores metabotrópicos)
En general, los receptores de membrana que no pertenecen a los tipos antes mencionados se engloban dentro de
un grupo complejo, que se caracteriza porque la protema receptora está asociada a una proteína G que se en
cuentra, al mismo tiempo, ligada a otra proteína con actividad catalítica o que forma parte de algún canal iónico.
Las proteínas receptoras (Fig. 3.10a) están constituidas por glicoproteínas monómeras que forman siete domi
nios transmembrana, con los dominios amino y ácido, respectivamente, situados en el exterior e interior celular,
completándose la estructura del receptor con tres bucles exteriores y otros tres internos, destacando la mayor
longitud del tercer bucle citosólico.
La interacción de un agonista con el receptor representa el primero de los acontecimientos que tienen lu
gar y que conducen a la formación citosólica de segundos mensajeros, cuya naturaleza es muy variada. Así, se
pueden citar como segundos mensajeros moléculas tales como iones, algunos productos de la hidrólisis de los
fosfolípidos constituyentes de las membranas celulares, monofosfato de adenosina cíclico (un nucleótido cícli
co), etc. Finalmente, el segundo mensajero desencadena una serie de acontecimientos que determinan la res
puesta biológica o farmacológica.
A continuación, se describen algunos de estos segundos mensajeros. Entre los mejor conocidos se pueden
destacar el AMPc (monofosfato de adenosina cíclico), el GMPc (monofosfato de guanosina cíclico), el ion Ca?*
y varios fosfoinositoles. En la Figura 3.10a se representa el proceso por el que la incubación de membranas con
glucagón y ATP es capaz de transformar el glucógeno en glucosa-1 -fosfato, algo que no tiene lugar en ausencia
de restos de membrana celular.
«) Fosforilasa (inactiva)
Activación de
} una proteina cinasa^

* fosfatasa
Fo$forilasa-P (activa)
Figura 3.10. a) Activación de la ruptura de glucógeno en el hígado por el glucagón. b) Activación de adenilato
ciclasa y de proteína cinasa. c) Estructura simplificada de las siete regiones de transmembrana.
El proceso ha sido interpretado en los siguientes términos: en la cara extema de la membrana (Fig. 3.106),
se encuentra la proteína de reconocimiento o receptor, y en el interior la proteína N (enlazante de nucleótido),
que es activada por GTP. El complejo activa, a su vez. la adenilatociclasa. que transforma ATP en AMPc que es
el segundo mensajero y cuya capacidad fosforilante permite la activación de otras proteínas. (Obsérvese que son
necesarios tres procesos de cooperación: la activación del receptor, la activación de la proteína enlazante de nu
cleótido y la activación de la ciclasa).
Krebs demostró que el AMPc así formado actúa sobre una proteína cinasa, la cinasa A. una enzima com
puesta por cuatro subunidades, de las que dos son receptoras y otras dos catalíticas, que puede fosforilar diver
sos sustratos proteínicos, originando cambios en la actividad celular y, en consecuencia, una respuesta biológi
ca. Entre las proteínas así fosforiladas se encuentran algunas enzimas metabólicas, como la fosforilasa-P de la
Figura 3.10. y otras relacionadas con la biosíntesis de neurotransmisores, así como algunas que son, a su vez,
receptores de neurotransmisores o forman parte de canales iónicos. Así, el aumento de AMPc produce respues
tas fisiológicas diversas, en función del tejido y de la naturaleza del agente estimulante: en el hígado, origina la
activación de una fosforilasa, mientras que en el tejido cardíaco produce una acción inotrópica (mayor trabajo
cardíaco) y en el páncreas induce la liberación de insulina.
Una segunda señal de transducción bien establecida está relacionada con la hidrólisis de fosfolípidos (Figu
ra 3.11). En la superficie celular, existen ciertos receptores que, a través de un estímulo, activan una fosfolipasa de
pendiente de Ca'+ que hidroliza el fosfatidilinositol, liberando dos segundos mensajeros: el trifosfato de inositol (IP¡)
y el diacilglicerol (DAG). El primero parece ser responsable, a su vez, de la movilización del Ca2* almacenado en el
interior de la célula, mientras que el DAG puede ser reciclado para formar nuevamente fosfolípidos de membrana,
puede ser utilizado en la síntesis de eicosanoides a través del ácido araquidónico. o puede activar la fosfocinasa C.
Interacción Activación
con receptores de fosfolipasa
de membrana dependiente de Ca2
Fosfolípidos
de membrana
In--/!;; Iii.u: ' <:ii ■ .¡.ti, >

(R. R’ = «tos de ácidos grasos)
COR COR'
¿ ¿ OH ■»
i i i
CH:—CH—CH2
Trifosfato de inositol
(IP})
Movilización del
Ca‘* almacenado
intracelulannente
Respuesta biológica
Figura 3.11. Sistema formado por fosfolípidos de inositol.

Este mecanismo de transducción se utiliza ampliamente en el organismo; la liberación de catecolaminas

en la médula suprarrenal, por ejemplo, tiene este origen. De forma análoga, se propaga la activación de los re
ceptores muscarínicos por la acetilcolina. de los receptores vasculares por la angiotensina II, y de la noradrena-
lina sobre los receptores a,.
4.2. Aspectos dinámicos de los receptores
Como cualquier otro componente celular, los receptores se encuentran sometidos a los procesos homeostáticos
regeneradores propios del organismo. En situaciones de normalidad fisiológica o farmacológica, se metabolizan
y regeneran en períodos de tiempo que oscilan entre varias horas y varios días. Sin embargo, en situaciones de
anormalidad fisiológica (habitualmente asociados a estados patológicos) o farmacológica (generalmente rela
cionadas con largos períodos de exposición a fármacos agonistas o antagonistas), las células pueden ver dismi
nuida {desensibilización) o aumentada (hipersensibilización) su respuesta a la acción de determinados fárma
cos, a través de procesos que regulan, tanto la actividad de los receptores, como la concentración de los mismos.
Las técnicas de enlace (binding) con fármacos marcados con isótopos radiactivos (radiofármacos) han
permitido comprobar que. ante un exceso prolongado de un fármaco agonista (o un agonista endógeno), la célu
la responde disminuyendo el número de receptores o su actividad (receptor down regulation). Por el contrario,
se produce un aumento del número de receptores o de su actividad (receptor up regulation) cuando un tejido o
un animal completo se trata, durante un tiempo prolongado, con un antagonista o cuando un agonista endógeno
disminuye su concentración. Estas alteraciones de la dinámica del receptor se han podido demostrar también en
estudios postmortem en seres humanos. Así, se ha confirmado que enfermedades como el Alzheimer, el Parkin
son, la esquizofrenia, la depresión, etc., se encuentran asociadas a alteraciones de la actividad y el número de
ciertos receptores en el sistema nervioso central.
4.3. Analogías y diferencias entre la interacción F-R y la interacción sustrato-enzima
Las ecuaciones [ 16] y (17] muestran, de forma esquemática, las analogías y diferencias que existen entre la in
teracción fármaco-receptor y la interacción sustrato-enzima.
F + R —> [FR] —» F + R + respuesta biológica [ 16]

S + E —♦ [SE] —> E + producto(s) de reacción [17]
Tanto la acción catalítica de una enzima, como el efecto de un fármaco a través de receptores, tienen su
origen en interacciones análogas que se llevan a cabo entre macromoléculas biológicas (enzima o receptor) y
moléculas pequeñas (sustratos o fármacos). Los complejos intermoleculares enzima-sustrato o receptor-fárma
co evolucionan de forma diferente. El segundo revierte el fármaco inalterado, pero la proteína receptora sufre un
cambio de configuración termodinámicamente controlado, que es responsable del inicio de la señal de transduc
ción. mientras que el complejo enzima-sustrato evoluciona liberando la proteína enzimática inalterada,
aunque el sustrato es transformado químicamente en otro(s) producto(s) de reacción, gracias a la intervención
de coenzimas apropiadas.
Las fuerzas que mantienen unidos a ambos tipos de complejos son los enlaces químicos (covalente, de
transferencia de carga, de hidrógeno, etc.) u otras interacciones atractivas (atracciones ion-ion. dipolo-dipolo.
etcétera), que producen el máximo acoplamiento estereoelectrónico.
4.4. Aspectos físicos y químicos relacionados con la interacción fármaco-receptor.

Fuerzas intermoleculares que operan en las interacciones fármaco-receptor
La unión del fármaco al receptor, o del inhibidor a la enzima, puede realizarse de forma reversible o irreversible.
En el segundo caso, el enlace involucrado suele ser el covalente, con energía de asociación de 40-140 kcal/mol,
por lo que el desdoblamiento del complejo F-R (o 1-E) es lento (irreversible). Así actúan, por ejemplo, los éste-
res fosfóricos, que inhiben de forma irreversible la acetilcolinesterasa (véase Capítulo 11), y los inhibidores sui
cidas como la aspirina, que acetila de forma covalcnte la serina 530 de la enzima ciclooxigenasa. y los antibióti
cos p-lactámicos, que inhiben la enzima D-alaniltranspeptidasa, necesaria para el desarrollo de la pared bacte
riana. Sin embargo, el mecanismo de unión reversible es el más usual, y en él participan interacciones más
débiles (Tabla 3.2)
Tabla 3.2. Fuerzas intermoleculares que operan

en las interacciones fármaco-receptor
1) Electrostáticas
Ion-ion
Ion-dipolo
Dipolo-dipolo (incluye el enlace de hidrógeno)
Polarización
Transferencia de carga
2) Fuerzas no polares
Dispersión (van der Waals)
3) Fuerzas basadas en la entropía
Perdida de entropía de rotación o de traslación

Interacciones hidrófobas
Dado que el cambio de configuración que sufre la proteína receptora es un proceso termodinámicamente
controlado, el parámetro que regula el proceso es el cambio de energía libre (G) entre los reactivos (fármaco y
receptor) y el complejo F-R. En condiciones fisiológicas, las interacciones ion-ion son las más importantes entre
las fuerzas de tipo electrostático (NH/.... OCX:, por ejemplo), ya que se encuentran ionizados numerosos gru
pos funcionales, como los restos de aminoácidos básicos (lisina. arginina) o ácidos (glutámico y aspártico), los
restos fosfato de los nucleótidos. etc. La energía asociada a este enlace es de 4-8 kcal/mol.
Muy frecuentes, debido a que actúan sobre cualquier molécula que presente enlaces polarizados, son las
atracciones ion-dipolo (NH/ ... O = C. por ejemplo) y dipolo-dipolo O = C ... O = C, por ejemplo, así como las
interacciones en las que un átomo de hidrógeno se une a dos átomos electronegativos (enlace de hidrógeno). En
disolución acuosa, la energía del enlace de hidrógeno (N-l 1... O = C, por ejemplo) es del orden de 1 -3 kcal/mol,
aumentando su valor en medios no polares. El enlace de hidrógeno es más fuerte cuanto mayor es la densidad de
carga de las especies que lo forman. Así, por ejemplo, los iones carboxilato, como aceptores de hidrógeno, for
man enlaces más fuertes que cualquiera de los derivados de los ácidos carboxílicos, y los iones amonio, como
donadores de hidrógeno, son mejores que las aminas no protonadas.
Entre las moléculas no polares, pueden también existir interacciones atractivas fuertes. Las fuerzas de dis
persión de London y las hidrófobas son decisivas para la formación del complejo fármaco-receptor, ya que las
electrostáticas están muy amortiguadas por la solvatación de los iones o los dipolos.
Frente a las fuerzas de dispersión, que son atracciones no polares, el enlace hidrófobo se basa en los cam
bios entrópicos que se producen cuando una región hidrófoba del fármaco se une a otra hidrófoba del receptor;
es del orden de 0.7 kcal/mol por grupo -CH?- y 2,0 kcal/mol por anillo bencénico
*
.
Puede resumirse que la variación de energía libre que se produce durante la interacción fármaco-receptor
tiene una componente entálpica. en la que se incluyen entre otras las fuerzas electrostáticas y de van der Waals,
* El principal efecto que se produce tí que ambas subeslrucluras lipófilas se agrupan, liberando las moléculas de agua que las ro
deaban con la consiguiente disminución del orden, lo que equivale a una ganancia de entropía del sistema. Las moléculas de agua están
normalmente ordenadas, siendo cada una capa: de formar cuatro enlaces de hidrógeno. Cuando un soluto se disuelve en agua, la orde
nación es aun mayor, pero se compenso con la energía de los enlaces ion-dipolo (si et soluto es iónico! o dipolo-dipolo (si es potar).
y una componente entrópica, posiblemente de mayor importancia, en la que se incluyen las atracciones hidrófo
bas y las debidas a cambios de los grados de libertad molecular.
5. ASPECTOS ESTEREOQUÍMICOS RELACIONADOS CON LA INTERACCIÓN

FÁRMACO-RECEPTOR
La quiralidad de los constituyentes proteicos de los receptores es responsable de que éstos tengan capacidad para
discernir entre ligandos estereoisómeros (enantiómeros. diastereoisómeros. estereoisómeros £-Z). Así. las tres
catecolaminas noradrenalina. adrenalina e isoprenalina pueden desdoblarse en enantiómeros cuya configuración
absoluta ha podido establecerse al relacionar la de los tres enantiómeros levógiros con el ácido D-ntandélico (véa
se Capítulo 30). La actividad broncodilatadora relativa es significativamente mayor en los enantiómeros o(-), al
canzándose una relación máxima D(-)/L(+) de X18 en el caso de la isoprenalina (Tabla 3.3). Este comportamiento
es bastante general, pudiendo interpretarse la diferencia de actividad entre enantiómeros de forma muy diversa
*.
Por ejemplo, ambos pueden presentar características muy diferentes en sus aspectos farmacocinéticos (metabolis
mo, distribución, paso a través de membranas, etc.), ya que bastantes procesos de distribución y metabolismo son
estercoselectivos o estereoespecíficos (véase Fig. 3.12 y Capítulo 7). aunque también puede existir una interpre
tación razonable en las diferencias estereoquímicas existentes entre los enantiómeros cuando se acoplan al recep
tor. Tal interpretación exige que ambos enantiómeros alcancen distribuciones análogas en el organismo.
Tabla 3.3. Actividad broncodilatadora relativa de enantiómeros
de catecolaminas
Compuesto Actividad broncodilatadora relativa
D(-)adrcnalina 5800
L(+)adrenalina 130 D(-)/L(+) = 45
D(-)noradrenalina 100
L(+)noradrcnalina 1.4 tX-)A-(+) = 71
Dí-Jisoprcnalina 2700
L(+)isoprenalina 33 d(-)/L(+) = 818
Figura 3.12. Procesos estercoselectivos o estereoespecíficos que acontecen antes de producirse

la interacción fármaco-receptor.
• El enantióinero más activo se denomina eutómero. el menos activo distómero. y la relación de actividades eutómcro/díMómero,
índice eudísmico.
En ocasiones, dos enantiómeros tienen actividades cualitativamente diferentes. Así. en las calecolaminas
antes mencionadas, el isómero R(-)isoprenalina (Fig. 3.13) es un potente agonista p y un débil antagonista a.
mientras que su enantiómero S(+)-isoprenalina es un débil agonista p y antagonista a. El (+)-propoxifeno es un
potente analgésico, mientras que su enantiómero levógiro es un potente antitusígeno, etc.
CH,
NH-CH
"CH,
/?(-)-isoprcnalina S(+)-isoprcnalina
(potente agonista p. (débil agonista p
débil antagonista a) y antagonista a)
O
H,C Ô-C—CH,—CH,
'n-CH,—C— C'
*'■ -?CH,C6H,
ch2c6h, H’C H CH, c6h,
(-)-Propoxifeno (+)-Propoxifcno
(antitusivo) (analgésico)
Figura 3.13. Ejemplos de enantiómeros con actividad cualitativamente distinta.
En los casos en los que exista una diferencia cuantitativa o cualitativa de actividad entre enantiómeros, el
menos potente puede contribuir a los efectos tóxicos y, por ello, el uso de mezclas racémicas, más económicas
que los fármacos ópticamente puros está siendo desechado (véase Capítulos 26 y 30). Sin embargo, se conocen
algunos casos en los que las diferencias cualitativas de actividad farmacológica entre enantiómeros encuentra
una utilidad terapéutica, ya que, más que representar un inconveniente, representa una ventaja. Por ejemplo, la
acción hiperuricémica (retención de ácido úrico) que provocan muchos diuréticos no se presenta en el ácido in-
dacrínico racémico y sí en el enantiómero dexlrógiro (muy potente como diurético), debido a la fuerte actividad
uricosúrica del enantiómero levógiro.
Dado que los diastereoisómeros poseen propiedades físicas y químicas diferentes, no debe sorprender que
un cambio de configuración en ellos provoque importantes cambios cualitativos y cuantitativos en la actividad bio
lógica. que no siempre se asocian exclusivamente a diferencias de acoplamiento con el receptor, ya que sus dife
rentes propiedades fisicoquímicas afectan, sobre todo, a la distribución. Un ejemplo clásico es el dietilestilbestrol,
cuyo isómero trans activo mimetiza mejor la estructura de la hormona estradiol. No obstante, estas hipótesis deben
contemplarse con prudencia, ya que. en este caso concreto, el producto de reducción mesohexestrol. que posee una
estructura más flexible, es tan activo como el traw.s-dietilestilbcstrol (véase Capítulo 17). En el campo de los inhi
bidores enzimáticos, se han descrito varios ejemplos acerca de la distinta capacidad de los estrereoisómeros cis- y
trans- para acoplarse a una enzima, como ocurre en el 2-dimetilaminociclohexanol (Fig. 3.14).
Figura 3.14. Ejemplos de diastereoisómeros

Finalmente, y dado que se requiere la complementariedad eslereoelectrónica entre un receptor y un fár

maco, la topografía del receptor sólo permite unirse a una de las posibles conformaciones del fármaco para dar
la respuesta deseada. Esta conformación se denomina conformación farmacófora o conformación activa, y no
siempre coincide con la más estable. Su conocimiento es de gran interés, ya que a partir de ella puede sugerirse
la topología del receptor y diseñar mejores fármacos. Para su estudio se emplean diversas técnicas que se co
mentarán brevemente en el Capítulo 6.
Un ejemplo muy utilizado en este sentido es el de la dualidad de acción del neurotransmisor acetilcolina, ca
paz de fijarse a dos tipos de receptores diferentes, el nicotínico y el muscarínico (véase Capítulo 14). Mientras que
la respuesta nicotínica es mimetizada por el alcaloide nicotina, la respuesta muscarínica es mimetizada por otro al
caloide. la muscarina. ¿Cómo una molécula tan sencilla puede tener este comportamiento dual? La respuesta más
evidente es que el acoplamiento a cada receptor se produce a través de diferentes conformaciones de acetilcolina.
Si se introducen elementos de rigidez en su estructura, por ejemplo, introduciendo un grupo metilo en las posicio
nes a ó P, o anillos que hagan posible la existencia de isómeros cis-, trans- (véase «Análogos agidos». Capítulo 4),
se puede poner de manifiesto la existencia de una esteroscleciividad en el acoplamiento con cada tipo de receptor.
Smissman preparó en 1966 los derivados agidos de acetilcolina cis- y rrazM-decalínicos (Fig. 3.15), y
Chiou. en 1969, los derivados ciclopropánicos. El isómero rrans-ciclopropánico muestra una respuesta muscarí
nica. mientras que el isómero cis- posee una gran respuesta nicotínica. Este hecho parece sugerir que la acetil
colina se fija al receptor muscaa'nico en la conformación «aati» y al receptor nicotínico en la conformación ses
gada o «gauche».
OAc
Conformación «gauche»
o sesgada de acetilcolina
Análogos rígidas (trans)
Grupos que interactúan

con el receptor
(+)-Muscarina
Figura 3.15. Análogos rígidos de acetilcolina.

La muscarina es un oxolano con tres centros estereogénicos y, por tanto, con ocho estereoisómeros posi
bles. que también representa un análogo rígido de acetilcolina. Mediante síntesis estereoselectiva acoplada a
técnicas de separación quiral (véanse Capítulos 26 y 30), se ha podido estudiar la actividad colinérgica de los
ocho estereoisómeros de la muscarina, observándose que sólo uno de ellos, el natural, de configuración 2S. 3R,
55, es activo. (Sin embargo, los cuatro estereoisómeros de la muscarona, producto de la oxidación en C-3 de la
muscarina. tienen actividades colinérgicas análogas).
De todo lo expuesto y del estudio de la actividad biológica de otros análogos, como un derivado de oxola
no representado en la Figura 3.15, puede deducirse que la acetilcolina se une al receptor muscarínico en una
conformación intermedia entre la «anti» y la «gauche», con tres anclajes importantes constituidos por el grupo
trimetilamonio y los enlaces polares de los dos átomos de oxígeno.
BIBLIOGRAFÍA
Melchiore, C.: / recettori del neurotrasttiotori, Ed. Clueb, Bologna. 1996.

Alberti, C. G.. y Villa, L.: Chimica Farmacéutica, Organizzazione Editoriale Medico Farmacéutica, Milano, 1984.
Kan. J. P: «Measurement and expression of drug effects», en The Practice of Medicinal Chemistry, editado por C. G. Wer
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Silverman. R. B.: The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action. Academic Press. San Diego, 1992.
Patrick. G. L.: An Introduction to Medicinal Chemistry. Oxford University Press, Oxford, 1995.
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Optimización de un prototipo.
Correlaciones cualitativas estructura
química-actividad biológica
J. C. Menéndez y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
Desde que se sospechó, en la segunda mitad del siglo xtx, que la actividad bloqueante neuromuscular del cu
rare podía deberse a su carácter de derivado del amonio cuaternario y que la actividad hipnótica de los alco
holes alifáticos estaba relacionada con su peso molecular, se hizo evidente que el efecto fisiológico de una
molécula está en función de su estructura. Esta relación se denomina SAR (Structure-Activity Relationship),
si es cualitativa, y QSAR (Quantitative Structure-Activity Relationship), si es cuantitativa. Generalmente, la
actividad es consecuencia de una interacción específica entre el fármaco y una macrotnolécula biológica (su
diana farmacológica, o receptor), pudiendo comportarse el fármaco como agonista o antagonista de dicho
receptor (Capítulo 3). Sólo en casos especiales la actividad se debe a otro tipo de fenómenos, hablándose en
tonces de fármacos estructuralmente inespecífícos. Como ejemplo citaremos a los anestésicos generales y
a las sales de amonio cuaternarias con actividad antiséptica, que alteran la estructura de determinadas mem
branas biológicas.
En el capítulo 2, se han considerado diferentes estrategias para buscar un fármaco prototipo, modelo o
«cabeza de serie», tanto si éste es de origen natural, como si es de síntesis. Antes de ver cómo se establecen co
rrelaciones cuantitativas estructura química-actividad biológica (Capítulo 5). cómo se realizan predicciones
cuantitativas de ciertas propiedades moleculares (Capítulos 5 y 6) y cómo pueden modelarse las estructuras de
las moléculas mediante cálculos teóricos (Capítulo 6), analizaremos aquí cómo se llega a establecer una rela
ción cualitativa estructura-actividad, así como los criterios que se utilizan para modificar la estructura de un fár
maco prototipo.
La modificación estructural de un prototipo tiene por objeto optimizar su actividad farmacológica princi
pal. a fin de disponer de fármacos más selectivos y menos tóxicos, con mejor farmacocinética o sin problemas
de formulación farmacéutica debidos a una solubilidad o estabilidad inadecuadas. Este proceso es prácticamen
te indispensable en el desarrollo de cualquier fármaco.
Puesto que existe una gran probabilidad de que una molécula obtenida por modificación de un prototipo
activo presente propiedades útiles, este proceso de búsqueda de fármacos suele ser más productivo que ensayar
sin una base suficientemente sólida nuevos compuestos aislados de la naturaleza o sintetizados en el laboratorio.
Además, ofrece ventajas económicas, ya que tanto los métodos de síntesis como los ensayos farmacológicos de
los análogos serán semejantes a los utilizados para el compuesto de referencia.
Incluso si no llegan a conseguirse análogos de gran actividad, las correlaciones cualitativas y cuantitativas
que pueden establecerse entre las modificaciones estructurales realizadas y los datos de la actividad biológica
son de gran utilidad para avanzaren el conocimiento del grupo farmacóforo. Éste se define como la porción de
la estructura de un fármaco que interactúa con su diana farmacológica y, por tanto, explica la acción biológica a
nivel molecular. Las interacciones de los fármacos con sus receptores son muy específicas, por lo que es fre
cuente que sólo una pequeña parte de la estructura del fármaco esté implicada en la interacción. La definición de
los distintos grupos farmacóforos es esencial para el diseño de fármacos, y constituye uno de los principales ob
jetivos de la Química Farmacéutica. En la Figura 4.1, se representan grupos farmacóforos de algunas familias de
fármacos.
Z = COO, CONH. NHCO, CO Y = Ar, ArCH2

z = o, nh,ch2
Hipnoanalgésicos Anestésicos locales Antihistamínicos H ।
SO;- NH—R
Sulfamidas antibacterianas
z = o.s
Z=N. CH Barbitúricos
Antidepresivos trieíclíeos (hipnótico-sedantes,
anticonvulsivos)
O O
II II
Ar-S-NH — C-NH-R
II
O
Sulfonilureas Mostazas nitrogenadas
(hipogluccmóanlcs orales) (antitumoralcs)
Figura 4.1. Grupos farmacóforos de algunas familias de fármacos.
En ciertos casos, es posible definir el grupo farmacóforo por la existencia de unas determinadas caracte
rísticas geométricas, y esto puede estimular la preparación de nuevos compuestos que las satisfagan. Por ejem
plo, el examen de algunos compuestos antitumorales, como la camptotecina y la estreptonigrina (Fig. 4.2), llevó
a la conclusión de que todos ellos presentaban un triángulo con dimensiones semejantes, en cuyos vértices se si-
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO. CORRELACIONES CUALITATIVAS 65
luaban dos átomos de oxígeno y uno de nitrógeno. Esta hipótesis impulsó la síntesis de compuestos como la mi-
toxantrona, los cuales resultaron también activos como antitumorales.
3Á,-O,--.&A
Mitoxantrona Farmacóforo propuesto
Figura 4.2. Farmacóforo expresado en términos de distancias interatómicas.
2. MODALIDADES DEL PROCEDIMIENTO DE MODIFICACIÓN MOLECULAR
2.1. Simplicación del prototipo
Es un método, conocido tradícionalmcnte como «variación estructural disyuntiva», que se aplica fundamen
talmente a productos naturales de estructura compleja. Aunque en algunos casos la simplificación de la estruc
tura supone la pérdida de la actividad biológica, es frecuente que una porción estructural del prototipo posea su
misma actividad. Como ejemplo, se representan, en la Figura 4.3. cuatro familias de hipnoanalgésicos (analgé
sicos narcóticos) que pueden considerarse análogos simplificados de la morfina, un alcaloide obtenido de diver
sas especies del género Papaver que puede considerarse el prototipo de este grupo de fármacos. De la compara
ción de las estructuras de estos compuestos puede deducirse que la actividad analgésica de la morfina está
asociada a la presencia de un anillo bencénico unido a un carbono cuaternario y éste a una amina terciaria a tra
vés de una cadena de dos carbonos: este fragmento es el farmacóforo del grupo de los hipnoanalgésicos.
En casos esporádicos, el proceso es el inverso y la estructura del prototipo, en vez de simplificarse, se ha
ce más compleja. Esto ocurre, por ejemplo, con la etorfina, otro hipnoanalgésico análogo a la morfina que posee
un ciclo adicional. Estos análogos se obtienen partiendo de tebaína a través de reacciones de Diels-Alder (Fi
gura 4.4 y Capítulo 15).
Supresión Morfina
Supresión
de B+C + D + E
Meperidina
Representante de las
fenilpiperidinas
Mctadona
Representante de las difenilpmpilaminas
Figura 4.3. Algunas familias de hipnoanalgésicos referibles a la simplificación de la morfina.
Adición de un ciclo
aC
H,C-C-C,H7
Morfina Óh
Etorfina
Representante tic las
oripavinas
Figura 4.4. Hipnoanalgésico análogo a la morfina con estructura más compleja.

OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO CORRELACIONES CUALITATIVAS 67
2.2. Asociación de dos moléculas
A veces, se asocian dos o más fármacos, a través de enlaces covalentes. para formar una nueva estructura que po
tencie la acción de ambos (fármacos gemelos, o híbridos). Por ejemplo, el analgésico benorilato procede de la
unión covalente de la aspirina y el paracetamol (Fig. 4.5a). En ocasiones, se busca reunir en una misma estructura
dos fragmentos cuyas acciones sean complementarias, como sucede con el compuesto representado en la Fig. 4.5b.
Benorilato
Acción antihipertensora por

antagonismo p-adrenérgico
Figura 4.5. Fármacos diseñados por conjunción de compuestos activos.
2.3. Replicación moduladora
Consiste en la modificación sistemática de determinados grupos o porciones estructurales de la estructura mo

delo. Normalmente, la actividad farmacológica del prototipo se mantiene, pero en algunos casos se descubre en
un análogo un nuevo perfil farmacológico. Como esta metodología es la que se utiliza con mayor frecuencia pa
ra la optimización de un prototipo, se comentará más ampliamente en los siguientes apartados.
3. CRITERIOS CLÁSICOS PARA LA MODIFICACIÓN SISTEMÁTICA

DE UNIDADES ESTRUCTURALES
3.1. Homología y ramificaciones de cadena
Un homólogo de un determinado compuesto es el análogo a éste que resulta de la adición (o sustracción) de un

carbono a una cadena o anillo. Un cambio de este tipo suele ir acompañado de un aumento (o disminución) de
lipofilia.
Aunque no siempre es posible detectar regularidades en la actividad biológica de compuestos de una serie
homologa, algunos de los comportamientos más comunes son los siguientes:
a) Cuando se homologa una cadena o un anillo en un prototipo, puede suceder que la actividad farmaco
lógica crezca, al aumentar el número de carbonos, hasta alcanzar un máximo a partir del cual vuelve a dismi
nuir. Esto suele ocurrir cuando la actividad está ligada a la lipofilia, como en el caso de ciertos fármacos estruc
turalmente inespecíficos. Un ejemplo lo tenemos en la relación entre la actividad bactericida de los alcoholes
saturados y el número de átomos de carbono (Fig. 4.6). En estos compuestos, la actividad crece gradualmente
hasta alcanzar un máximo en un punto que depende del microorganismo estudiado, pero que en general suele
corresponder al octanol, y luego desciende bruscamente. En el Capítulo 5, explicaremos las razones de este
comportamiento en términos del grado óptimo de lipofilia de la molécula.
Actividad
bactericida
Figura 4.6. Actividad bactericida de alcoholes primarios saturados en función de su longitud de cadena.
/>) En el caso de los fármacos que se unen a una diana específica, la homologación tiene éxito únicamen
te si el cambio de dimensiones de la molécula no afecta a la distancia entre dos grupos esenciales para la unión
al receptor. Por ejemplo, tanto la meperidina como su homólogo, la etoheptazina, son analgésicos.
H,C\CO.C.H,
CH,
O CH,
Meperidina Etoheptazina
(hipnoanalgésico) (hipnoanalgésico)
Figura 4.7. Ejemplo de diseño de análogos por homología.
Por el contrario, la actividad se pierde en caso de verse afectada una distancia crítica (Fig. 4.8).
Distancia óptima
Figura 4.8. Determinación de la distancia óptima entre dos sustituyentes por homologación.
A veces, se observa un comportamiento intermedio, en el que la actividad aumenta hasta llegar a una me
seta, manteniéndose más o menos constante para varios términos de la serie y descendiendo después. Esto ocu
rre, por ejemplo, en los bloqueantes ganglionares con estructura de bis-amonio cuaternario, antiguamente utili
zados como antihipertensores (Fig. 4.9). Su actividad es máxima cuando los nitrógenos catiónicos están
separados por 4,5 ó 6 carbonos, distancia que permite el acoplamiento óptimo con el receptor nicotínico de ace
tilcolina, que es la diana en la que actúan (véase Capítulo 14). Este comportamiento se puede atribuir a la nece
sidad de que se formen dos enlaces entre el fármaco y su receptor, con participación de los dos grupos amonio.
Si n es pequeña (caso a) o demasiado grande (caso d). sólo puede interactuar uno de los grupos amonio, y el fár
maco tiene una actividad débil. En los casos en que n está comprendido entre 4 y 6, la distancia entre los grupos
amonio es la óptima para la doble interacción (caso b) o, al menos, la flexibilidad de la cadena intermedia per
mite una interacción adecuada (caso c).
Figura 4.9. Bloqueantes ganglionares con estructura de bis-amonio cuaternario.
c) A veces, sucede que se encuentra una nueva actividad si la homologación permite por casualidad la in
teracción con otro tipo de diana farmacológica. Así. cuando se homologó la cadena de dos carbonos que separa
el nitrógeno heterocíclico y la amina terciaría en los antihistamínicos H, derivados de fenotiazina, se encontra
ron compuestos, como la clorpromazina, que son fundamentalmente antagonistas de los receptores dopaminér-
gicos y se emplean como neurolépticos (Fig. 4.10).
Díctazina
(antihislamínko H|)
Figura 4.10. Ejemplo de cambio de actividad por homologación.
Las ramificaciones de cadena disminuyen la liposolubilidad del fármaco prototipo. También pueden ser
de gran trascendencia en la interacción con la diana farmacológica, ya que la introducción de un grupo metilo
restringe la libre rotación de un enlace sencillo próximo a él. Además, un grupo metilo puede interactuar con un
«bolsillo lipófilo» de la diana farmacológica. Esto ocurrió en el diseño de captopril, un inhibidor de la enzima
conversora de angiotensina (ECA), a partir de una serie de mercaptoalcanoilprolinas (Fig. 4.11 y Capítulo 11).
El captopril es diez veces más activo que su análogo desmetilado.
Ramificación
Captopnl
Figura 4.11. Ramificación de cadena.
3.2. Introducción de grupos aromáticos en la búsqueda de antagonistas
Se ha comprobado, en muchas ocasiones, que la introducción de un sistema aromático extenso en una estructu
ra capaz de provocar una respuesta por unión a un determinado receptor puede conducir a un antagonista de di
cho receptor. Este fenómeno puede atribuirse a que este tipo de sustituyentes proporcionan un aumento en las
interacciones hidrófobas con los receptores, resultando complejos fármaco-receptor más estables que los forma
dos con agonistas que sólo interactúan con el centro activo. Esto es lo que ocurre, por ejemplo, cuando el grupo
acetilo de la acetilcolina (agonista colinérgico) se modifica introduciendo un sistema de dibenzopirano para dar
la propantelina (Fig. 4.12).
Acetilcolina
Figura 4.12. Diseño de antagonistas por introducción de grupos aromáticos.
3.3. Apertura o cierre de anillos. Restricción de la libertad de conformación
Como ya hemos comentado, la apertura de un anillo es una modificación habitual en la simplificación de un

prototipo. Por ejemplo, la pentazocina puede considerarse un análogo de los benzomorfanos en el que se ha
abierto el anillo C (Fig. 4.3). También es habitual la modificación contraria, es decir, el cierre de una cadena pa
ra formar un anillo. Por ejemplo, en la Figura 4.13 se observa la relación de este tipo entre dos fenotiazinas, la
trimeprazina y la metdilazina.
Figura 4.13. Un ejemplo de diseño de fármacos por cierre de un anillo.
Esla estrategia se ha utilizado con frecuencia para diseñar análogos más rígidos, a fin de proponer cuál es
la conformación bioactiva del prototipo, es decir, la que interactúa con su diana farmacológica.
Por ejemplo, sabiendo que los derivados de 2-aminotetralina son agonistas dopaminérgicos, puede supo
nerse que la dopamina interactúa con sus receptores en la conformación totalmente alternada o antiperiplanar
(Fig. 4.14).
5.6-Dihidnjxi-2-aminotctralina
Análogo rígido de la conformación
antiperiplanar de la dopamina
Dopamina. en su conformación antiperiplanar
Figura 4.14. Búsqueda de la conformación bioactiva utilizando análogos rígidos.
Por otra pane, cuando se restringe la libertad de conformación de un prototipo que es capaz de interactuar
con varios receptores, se consiguen con frecuencia fármacos que muestran afinidad muy superior frente a uno
de dichos receptores, es decir, más selectivos y con menos efectos secundarios.
La mianserina (Fig. 4.15) es un fármaco que posee una estructura con dos anillos aromáticos y un centro
básico, que presenta afinidad por varios receptores que actúan a través de la proteína G (es antagonista de los re
ceptores serotoninérgico 5-HT:. adrenérgico a, y de histamina H,). Cuando se restringió su libertad de confor
mación a través de la formación de un quinto anillo, se originó el compuesto BRL 34849, que mantiene la afini
dad por los dos primeros receptores, pero no por el de histamina.
'ch3
Mianserina (±) BRL 34849
Figura 4.15. Búsqueda de selectividad por restricción de conformación.

3.4. Introducción de enlaces múltiples. Vinilogía
La sustitución de un enlace sencillo, en la molécula de un fármaco, por uno doble o triple conduce a una altera
ción de la geometría molecular y, generalmente, a un aumento de la rigidez.
La presencia de dobles enlaces determina la existencia de isómeros geométricos, que con frecuencia pre
sentan diferencias en sus interacciones con los receptores. Por ejemplo, el rrazis-dietilestilbestrol es muy seme
jante al estradiol en cuanto a forma y dimensiones moleculares, lo que explica que ambos sean agonistas del re
ceptor de estrógenos. un tipo de hormonas sexuales femeninas. En cambio, el cis-dietilestilbestrol no satisface
los requerimientos del receptor y es inactivo (Fig. 4.16).
Estradiol
(esirógeno natural)
rá-Dietilestilbcstrol
(inactivo)
/raru-Dictilestilbestrol
(cstrógcno sintético)
Figura 4.16. Analogía entre el rro/is-dietilcstilbestrol y el estradiol.
Un criterio muy utilizado en el diseño de análogos se basa en el llamado principio de vinilogía. según el
cual dos sustituyentes. X e Y, unidos por una cadena vinilénica o polivinilénica se comportan como si estuvieran
unidos directamente. En términos de la teoría electrónica, los efectos de grupos atrayentes o donadores de elec
trones se transmiten en virtud de la superposición de orbitales n. que es la causa de los efectos mesómeros o de
resonancia, por lo que los grupos X e Y son equivalentes desde el punto de vista de la distribución de cargas.
Como ejemplo, se representa la cesión de carga hacia el carbonilo de una función éster y de dos grupos vinílo-
gos (Fig. 4.17).
X-HC=CH-Y X-(HC=CH^Y
Figura 4.17. Principio de vinilogía.
Si la densidad electrónica de una determinada zona de una molécula es importante para su fijación al re
ceptor. la actividad biológica puede mantenerse en los vinílogos del compuesto de referencia. Por ejemplo, va
rios análogos de procaína, diseñados por intercalación de un anillo bencénico o un grupo vinileno entre su ani-
lio bencénico y el grupo áster, mantienen la actividad anestésica local, mientras que si se intercala una cadena
polimctilénica, que rompe la conjugación entre el grupo amino en para y el grupo carbonilo del éster. se origina
un compuesto inactivo (Fig. 4.18).
O-CH,-CH,-NEt2
Procaína (anestésico local)
H,N
Homólogo inactivo de la procaína
Vinílogos activos de la procaína
Figura 4.18. Vinílogos activos de la procaína.
La aplicación del principio de vinilogía fracasa si la alteración de las distancias entre determinados gru
pos o los cambios en la geometría molecular que se producen al introducir los grupos fcnileno o vinileno afec
tan a la interacción con la diana farmacológica. Por ejemplo, cuando se sintetizó el vinílogo de la isoniazida. un
agente antituberculoso, resultó inactivo (Fig. 4.19).
NH—NFL
Isoniazida Vinílogo de la isoniazida

(antituberculoso) (inactivo)
Figura 4.19. Vinílogo inactivo de la isoniazida.
3.5. Bioisosterismo
3.5.1. Isosterismo basado en criterios electrónicos («clásico»)
El isosterismo fue inicialmente un concepto puramente químico, en un intento de aplicar a las moléculas el he
cho de que, en el caso de los átomos, una distribución electrónica similar conduce a propiedades similares.
Así, Langmuir observó la semejanza de propiedades fisicoquímicas (densidad, constante dialéctrica, solubili
dad. etc.) que presentan ciertas moléculas, como el nitrógeno y el monóxido de carbono. Atribuyó dicha seme
janza a que estos compuestos poseen el mismo número de átomos y de electrones de valencia y los definió
como isósteros.
La llamada «ley de desplazamiento de hidniro» de Grimm extendió el concepto a especies que, teniendo
diferente número de átomos, poseen el mismo número de electrones de valencia. Por ejemplo, si se parte del ion
O2 y se añade un protón a su núcleo, resulta el anión P; por otra otra parte, si se une un protón a la capa de elec
trones de valencia, resulta el anión OH’. Ambas especies son isoelectrónicas, y muestran una considerable se
mejanza en sus propiedades químicas, por lo que pueden considerarse isósteras. La comparación de los aniones
F’ y OH’ sugiere que un átomo es isóstero de la especie que resulta al añadir un protón y dos electrones («hi-
Figura 4.20. Ejemplos de especies isósteras según la ley de desplazamiento de «hidruro» de Grimm.
Erlenmeyer propuso varias ampliaciones posteriores del concepto de isosterismo. En la primera de ellas,
introdujo la idea de «isoelectronicidad periférica», según la cual deben considerarse isósteros aquellos átomos o
iones que son idénticos en su capa electrónica externa (N, P y As; N+ y P‘; O. S y Se. etc.). También propuso ex
tender el concepto de isosterismo para incluir ciertos grupos que son aparentemente muy diferentes, pero que en
la práctica poseen propiedades semejantes; es el caso, por ejemplo, de los «pseudohalógenos» (Cl. CN. SCN).
La similitud de propiedades físicas entre el benceno y el tiofeno llevó también a proponer la existencia de un
isosterismo entre los grupos vinileno (-CH=CH-) y sulfuro (-S-).
Los criterios anteriores conducen a una serie de «equivalencias de anillo», muy utilizadas como criterio
de diseño de análogos (Fig. 4.21).
Isosterismo CH-N Isosterismo O-S Isosterismo O-NH Isosterismo S-vinileno
Figura 4.21. Equivalencias isostéricas entre algunos anillos aromáticos.
3.5.2. Otros criterios de isosterismo
Todos los criterios basados en la disiribución electrónica, mencionados anteriormente, se suelen agrupar bajo el
término «isosterismo clásico». Cuando, además de ellos, se introducen otros, como la geometría (hibridación,
ángulos de enlace, tamaño molecular), la solubilidad, la acidez, la capacidad para formar enlaces de hidrógeno u
otros, se habla de «isosterismo no clásico». Mencionaremos a continuación algunos ejemplos.
El isosterismo H-F, muy utilizado en el diseño de fármacos, se basa en que ambos átomos tienen un tama
ño parecido. Por la misma razón, son isósteros CH, y CF3. Por otra parte, también se consideran isósteros los
grupos -CF2- y -O-, debido a que son muy similares en cuanto a características electrónicas.
La polaridad del grupo carbonilo se mantiene en las cetonas, los ásteres, los tioésteres y las amidas, así
como en agolpamientos de tipo sulfóxido, sulfona, sulfonamida y carbonitrilo. Estos grupos pueden también
considerarse isósteros (Fig. 4.22). De igual forma puede entenderse el isosterismo entre los agolpamientos de
tiourea. /V-eianoguanidina y aminal de nitrocetena, que se ha demostrado en los fármacos antagonistas del re
ceptor de histamina H2 (véase el Capítulo 16).
Cí?
—S-NHR
O
Figura 4.22. Isosterismo basado en criterios de polaridad.
El criterio de acidez puede aplicarse a grupos como el ácido carboxflico (CO^H). el ácido sulfónico
(SOiH). la sulfonamida (SO?NHR), el ácido hidroxámico (CONHOH), el 1,2.4-triazol. el tetrazol, el 3-hidroxii-
soxazol o el 3-hidroxi-4-oxo-2-piranilo. La acidez de todos estos grupos se puede racionalizar debido a la posi
bilidad de escribir varias estructuras resonantes que demuestran la deslocalización del anión correspondiente
(Fig. 4.23).
— CO2H — SO.H — SO,NHR —CONHOH
HN"^
1 N
Ejemplos:
Fig. 4.23. Isosterismo basado en criterios de acidez.
La capacidad para formar enlaces de hidrógeno justifica el isosterismo de agolpamientos semejantes a ca-
lecol, como los que se muestran en la Figura 4.24.
X = O, NR
Isóstcros del catecol
Figura 4.24. Lsósteros basados en la capacidad para formar enlaces de hidrógeno.

En la Tabla 4.1 se recogen, como resumen de lo que se ha comentado, algunos átomos y grupos isósteros.
Tabla 4.1. Algunos átomos y grupos isósteros
1. Monovalentes:
H.F
F. Cl. Br. I. OH. SH. NH;. PH:. CH,. CF,
2. Divalentes:
-Sc-. -S-. -CH=CH-, -O-, -NH-, -CHr. -CFr
3. Trivalentes:
-CH=. -N=, -P=. -As»
4. Tetravalentes:
3.5.3. Bioisosterismo: concepto y ejemplos
Pensando en la utilización del isosterismo como criterio de preparación de análogos en el diseño de fármacos,
Friedman propuso llamar bioisósteros a aquellos compuestos que «cumplan alguna de las definiciones de isos
terismo y posean el mismo tipo de actividad biológica». Además, Friedman consideró que también podrían en
cajar en el concepto de bioisósteros los compuestos que presenten propiedades antagónicas, ya que con frecuen
cia interactúan con la misma diana. De forma algo más concreta, Thomber propuso definir los bioisósteros
como «grupos o moléculas que tienen propiedades físicas y químicas semejantes, y que producen efectos fisio
lógicos aproximadamente similares». Son cientos los fármacos diseñados por la aplicación de uno u otro tipo de
isosterismo. En las Figuras 4.25 y 4.26 se han recogido algunos ejemplos.
QH,
Aminopirina (aminofenazona) Propifenazona

(analgésico y antipirético) (analgésico y antipirético)
h) Isosterismo HN -» O
Z = O Procaína 1 anestésicos 5=2uI anticonvulsivos

Z = NH Procainamida | locales Z = NH Hidantoínas
c) Isosterismo —OH —> —SH
Z = OH Hipoxantina
Z = SH 6-Mercaptopurina (antitumor al por antagonismo hacia
hipoxantina)
Figura 4.25. Ejemplos de fármacos diseñados por la aplicación de criterios clásicos de isosterismo.
a) Isosterismo —H -> —F
Z = H Uracilo
Z = F 5-Fluorouracilo (antitumoral por antagonismo hacia uracilo)
b) Isosterismo entre cetonas, sulfonas y esteres
Meperidina (hipnoanalgésico) Hipnoanalgésicos referibles a meperidina
c) Isosterismo entre grupos ácidos
O
II
X = - C - OH Indomctacina
O
II
X = - C - NHOH Oxametacina
Antiinflamatorios isósteros de la indomctacina
Figura 4.26. Ejemplos de fármacos diseñados por la aplicación de criterios no clásicos de isosterismo.
4. UN EJEMPLO DE APLICACIÓN: MODIFICACIONES DEL ENLACE PEPTÍDICO
Se conoce un gran número de péptidos endógenos con interesantes actividades biológicas, que podrían servir de
cabezas de serie en el diseño de fármacos. Sin embargo, los péptidos se absorben mal a través de las membranas
biológicas y se metabolizan muy rápidamente, por lo que es necesario preparar análogos que no presenten estos
problemas. Por lo tanto, como ejemplo de aplicación de lo que se ha comentado hasta el momento, vamos a es
tudiar en este apartado el diseño de análogos de péptidos.
4.1. Concepto de peptidomimético
Los peptidomiinéticos pueden definirse como estructuras capaces de reemplazar a los péptidos en sus interac
ciones con receptores y enzimas. El peptidomimético más conocido es la morfina, que debe su acción analgési
ca a que es capaz de unirse a los receptores de unos péptidos llamados encefalinas (Capítulo 15).
La mayor parle de los peptidomiméticos que se conocen se han descubierto por azar o por cribado gene
ralizado. Por ejemplo, la colecistocinina (CCK) es un péptido formado por 33 aminoácidos que estimula la con
tracción de la vesícula biliar, la secreción de las enzimas pancréaticas, y que también parece estar implicada en
los trastornos de la analgesia y la ansiedad. Por lo tanto, sus antagonistas tienen interés como fármacos poten
ciales en el tratamiento de la pancreatitis, la vesícula irritable, el dolor y la ansiedad. Utilizando cribados gene
ralizados de compuestos aislados de fuentes naturales, se observó que la asperlicina, un peptidomimético aisla
do de Aspergillus alliaceus. es un antagonista no muy potente de los receptores CCK-A. La asperlicina no es
activa por vía oral, por lo que, para aumentar la actividad y desarrollar análogos activos por vía oral, se prepara
ron muchos derivados. Se planteó la preparación de análogos simplificados que combinaran una unidad de D-
triptófano con un sistema de benzodiazepina, muy conocido antes de este estudio por encontrarse en fármacos
ansiolíticos como el diazepam. Ligeras modificaciones de esta idea inicial condujeron a la devazepida. actual
mente en ensayos clínicos (Fig. 4.27).
Devazepida
Diazepam
Figura 4.27. Diseño de la devazepida. un peptidomimético antagonista de CCK-A.
4.2. Diseño de peptidomiméticos por modificaciones isostéricas

en la estructura primaria de los péptidos
El enlace peptídico se sustituye con frecuencia por otros agolpamientos que. por su geometría, sus propiedades
electrónicas o su capacidad de enlace por puente de hidrógeno, resultan bioisósteros. Las modificaciones más
utilizadas (Fig. 4.28) son:
1. Introducción de restos de /V-alquilaminoácidos, resultando estructuras más lipófilas que los péptidos,
sin capacidad para establecer enlaces de hidrógeno en el aminoácido afectado y más difícilmente de-
gradables.
2. Introducción de D-aminoácidos en el péptido.
3. «Inversión» de enlaces amida (retroamidas).
4. Modificaciones isostéricas en el enlace amida. Por ejemplo, sustitución del grupo CH; en a por un
grupo NH (a-azapéptidos), del grupo amida por un grupo éster (dcpsipéptidos), del NH de la amida
por CH2 o del grupo carbonilo por tiocarbonilo (tioamidas).
5. Modificaciones en la cadena lateral de un aminoácido: uso de aminoácidos a. ot-disustituidos (por
ejemplo, los derivados del ácido «aminoisobutírico»), o bien de deshidroaminoácidos o sus derivados
de ciclopropanación.
6. Otras modificaciones del grupo de carboxamida: reducción parcial o total del grupo carbonilo.
7. Un enlace peptídico podrá sustituirse por un grupo vinileno, aunque esta sustitución anula la posibili
dad de participación en enlaces de hidrógeno.
figura 4.28. Algunas modificaciones isostéricas del enlace peptídico.
Algunos de estos agolpamientos, en lugar de ser análogos del enlace peptídico, mimetizan al intermedio
tetraédrico que se produce en la hidrólisis de los péptidos catalizada por peptidasas o proteasas. y son muy utili
zados en el diseño de inhibidores de este tipo de enzimas (Fig. 4.29 y Capítulos 9 y 11).
Tipo estalina Tipo hidroxietilamina
Figura 4.29. Algunos agolpamientos que inimetizan el intermedio de la hidrólisis de péptidos.
Estas modificaciones de un prototipo con estructura peptídica se reflejan en la nomenclatura intercalando

entre los dos aminoácidos del péptido cuyo enlace amídico se ha modificado el signo y y, a continuación, entre
paréntesis, el tipo de modificación. Pueden verse algunos ejemplos en la Figura 4.30.
se llama -Gly-Gly-
-Gly y (NHCOKJIy-
I.-Phc y ICHOHCH,] L-PheNH, i.-Val y [CH2NH] l-LcuNH2
Figura 4.30. Nomenclatura de pcplidomiméticos.
4.3. Restricciones de conformación
En disolución, los péptidos lineales pequeños se encuentran en forma de una mezcla de varios confórmeros en
equilibrio. La conformación bioactiva puede ser diferente a la conformación de mínima energía que predomina
en solución, en cuyo caso la interacción con sus receptores requiere un ajuste de conformación del péptido. De
bido a esto, las hormonas y los neurotransmisores que poseen estructura peptídica pueden adaptarse a topogra
fías diferentes y, por tanto, es frecuente que carezcan de selectividad frente a los distintos tipos y subtipos de re
ceptores. En consecuencia, es importante la incorporación de restricciones de conformación en estas estructu
ras. no sólo para encontrar las conformaciones bioactivas. sino también para buscar fármacos más selectivos.
Ésta es una de las principales justificaciones de la preparación de pcptidomiméticos.
Por todo lo que se ha expuesto, es importante el diseño de análogos peptídicos cíclicos en los que la con
formación está «congelada», mediante la introducción de puentes disulfuro o cadenas polimetilénicas entre dos
puntos del péptido. Son también frecuentes las 2,5-piperazinadionas. que son peptidomiméticos muy rígidos,
así como las hidantoínas, que mimetizan un agolpamiento de urea (Fig. 4.31). Algunas de las sustituciones isos-
téricas comentadas en el apartado anterior, como la W-alquilación o la introducción de deshidroaminoácidos,
también incrementan la rigidez de conformación de los péptidos.
SH HS
I PÉPTIDO | | PÉPTIDO |
2.5-Piperazinadionas
Figura 4.31. Restricción de conformación en los péptidos: peptidomiméticos rígidos.
4.4. Diseño de peptidomiméticos por modificaciones en la estructura secundaria
Los péptidos contienen tres clases de elementos relacionados con su estructura secundaria: las hélices a, las
láminas p y unas estructuras conocidas como «lazos», siendo los principales el lazo P y el lazo y. El lazo P es
tá formado por cuatro aminoácidos, y está estabilizado por un enlace de hidrógeno entre el primero y el cuarto;
el lazo y es similar, con participación de sólo tres aminoácidos. Se han descrito recientemente los lazos í}. que
son curvas grandes en las que participan entre 6 y 16 aminoácidos, y que parecen desempeñar un papel impor-
tante en fenómenos de reconocimiento. Hay ciertos sustiluyentes («miniéticos de lazo») cuya incorporación
fuerza al péptido a adoptar una conformación determinada, similar a la debida a la presencia de un determina
do lazo (Fig. 4.32).
Algunas eslrocluras que mimctizan el lazo [i
Lazo y Algunas estructuras que minletizun el lazo y
Figura 4.32. Estructuras de los lazos f y y. así como de algunos grupos que los mimetizan.
5. VALIDEZ DE LAS CONCLUSIONES ALCANZADAS A TRAVÉS DE CORRELACIONES

CUALITATIVAS ESTRUCTURA-ACTIVIDAD
Las relaciones estructura-actividad que se encuentran en la bibliografía, aunque proporcionan una orientación
muy útil en el diseño de nuevos análogos, deben examinarse con precaución, ya que es frecuente que la apari
ción de datos sobre nuevos compuestos dentro de un grupo terapéutico haga cambiar las conclusiones previa
mente alcanzadas.
También debe tenerse presente que las relaciones estructura-actividad obtenidas a partir de ensayos in vi-
tro no son aplicables directamente in vivo, ya que pueden darse problemas de falta de acceso al lugar de acción.
Un problema que se encuentra con frecuencia es la falta de relación estructural entre compuestos con la
misma acción farmacológica.
Las causas de esta aparente paradoja pueden ser de dos tipos:
1. Los agentes considerados, a pesar de tener la misma acción farmacológica «macroscópica», actúan so
bre diferentes receptores. Por ejemplo, en la Figura 4.33, se han representado algunos antihipertensores que ca
recen de semejanz.a estructural porque actúan en dianas farmacológicas diferentes.
2. La falta de relación estructural es sólo aparente, y las moléculas consideradas tienen suficiente seme
janza para interactuar con el mismo receptor, pero dicha semejanza queda oculta a primera vista a causa de la
Minoxidil Nifedipino
(Canales de potasio) (Canales de calcio)
Figura 4.33. Algunos agentes antihipertensores sin relación estructural.
complejidad de las moléculas, o bien porque es necesario considerar su estructura tridimensional o alguna pro
piedad química para apreciarla. Por ejemplo, tanto la acetilcolina como la nicotina son agonistas del llamado
«receptor nicotínico», lo que se explica teniendo en cuenta que el nitrógeno pirrolidínico de la nicotina se en
cuentra protonado a pH fisiológico y puede mimetizar el grupo amonio cuaternario del neuroiransmisor, mien
tras que el nitrógeno piridínico de la nicotina tiene una densidad de carga negativa que mimetiza la del oxígeno
carbonílico de la acetilcolina.
Figura 4.34. Semejanza estructural entre la conformación gauche de la acetilcolina y la nicotina.

K4 introducción a la química farmacéutica
La relación estructural entre los fármacos antagonistas de un receptores con frecuencia más difícil de es
tablecer. ya que suelen poseer grupos que se fijan a zonas distintas al «centro activo». Esta situación puede com
plicarse en los casos en los que la relación entre el fármaco y la molécula que mimetiza no es evidente, como su
cede con los neurolépticos antagonistas de dopamina (Fig. 4.35).
Dopamina
Figura 4.35. Estructuras de algunos neurolépticos antagonistas de dopamina.
A pesar de la aparente ausencia de rasgos estructurales comunes entre estos compuestos, se ha podido de
mostrar la superponibilidad de algunos fragmentos estructurales de todos ellos con la estructura de la dopamina.
como se muestra en la Figura 4.36 para el caso de las fenotiazinas.
Figura 4.36. Superposición de la dopamina y una fenotiazina.
BIBLIOGRAFÍA
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Thornber, C. W.: “Isosterism and Molecular Modification in Drug Design." Chern. Soc. Rev. 1979, 8, 563.
Wermuth, C. G. (ed.): The Practice of Medicinal Chemistry, capítulos 12 a 16. Academic Press. 1996.
------------------------------------------ 5------------------------------------------------------------
Optimización de un prototipo:
Correlaciones estructura química-
actividad biológica cuantitativas
R. Claramunt y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
En el capítulo anterior, se han considerado diferentes enfoques y criterios para optimizar la acción de un fár
maco prototipo y establecer relaciones cualitativas entre la estructura y la actividad biológica de sus análo
gos. El químico que pretende diseñar un fármaco tiene que tener en cuenta un enorme número de variables.
En este capítulo, veremos cómo puede definirse la estructura utilizando algunos parámetros que son cuantifi-
cables y, en consecuencia, es posible correlacionar cuantitativamente la estructura química con la actividad
biológica. Estos métodos de análisis se desarrollaron inicialmente por Hansch-Fujita en 1963 y se denomi
nan QSAR (Quantitative Structure-Activity Relationships'). Con ellos puede establecerse una ecuación ([I ]),
que relaciona la respuesta biológica (RB) con parámetros descriptores de la estructura de una serie de análo
gos en función de ciertos factores fisicoquímicos. f. definidos como parámetros de solubilidad, electrónicos
y estéricos.
log RB = f (fisicoquímicos) HI
Aunque la metodología QSAR no podrá nunca sustituir a la creatividad y la intuición de los químicos y
biólogos, es útil para lograr uno o varios de los siguientes objetivos:
I) Predecir la actividad de compuestos estructuralmente afines todavía no sintetizados.

2) Diseñar fármacos con actividad óptima.
3) Estudiar mecanismos de acción, estableciendo qué propiedades físicas comunes a compuestos estruc
turalmente diferentes son responsables de un efecto biológico idéntico a través de un mecanismo co
mún o diferente.
Un análisis QSAR consta de varias etapas:
— Planteamiento de los objetivos.

— Determinación de la actividad biológica de los compuestos a estudiar.
— Descripción de sus parámetros fisicoquímicos.

— Análisis estadístico de los datos y establecimiento de una relación matemática.
— Interpretación de la relación establecida.
Cuantificar la respuesta biológica es sencillo. Este valor se expresa, generalmente, como el logaritmo
de la inversa de la concentración de fármaco que produce el 50 % de la respuesta máxima (log 1/C) en los en
sayos in vivo. Para las medidas in vitro, suelen utilizarse parámetros como K¡ o KD> que son (o se aproximan
a) los valores de las constantes de disociación de los complejos que forma el fármaco con su diana farmaco
lógica (enzima o receptor, respectivamente).
Sin embargo, la descripción de estructuras con parámetros cuantitativos hidrófobos, electrónicos y es-
téricos es más compleja, y requiere conocer previamente su significado.
2. PARÁMETROS O DESCRIPTORES DE LAS PROPIEDADES

FISICOQUÍMICAS DE LOS COMPUESTOS ORGÁNICOS
2.1. Descriptores de los efectos hidrófobos
La lipofilia de las moléculas es un descriptor fisicoquímico de gran importancia, ya que es una medida de la
tendencia relativa que tiene un soluto para preferir un entorno no acuoso frente a uno acuoso.
La lipofilia de un fármaco es decisiva en su absorción, distribución y eliminación, pero también lo es
para la unión con su diana farmacológica, ya que los enlaces hidrófobos que se producen tras la desolvata-
ción de ambas entidades constituyen la primera interacción fármaco-receptor antes de establecerse otras inte
racciones polares (véase el Capítulo 3). Hoy día. modelar y predecir los procesos de solvatación de los fár
macos tiene una gran importancia.
En el análisis QSAR, es muy frecuente observar que la actividad biológica es proporcional al coeficiente
de reparto (P), que se define como la razón de concentraciones (Cj/C,) de una especie única entre dos fases en
equilibrio, donde, por convención, la fase l es el agua y la fase 2 suele ser el n-octanol. Este sistema resulta, en
general, satisfactorio como modelo de las interacciones de los fármacos con las proteínas y las regiones hidrófo
bas de las membranas celulares, aunque para otros tipos de membranas, como la barrera hematoencefálica, se
ha propuesto que son más adecuados otros sistemas en los que la fase 2 es un hidrocarburo alifático.
El octanol es capaz de actuar como donador y como aceptor de hidrógeno, propiedades características de
muchas membranas biológicas. Por otra parte, su polaridad parcial permite la inclusión de agua, que es también
característica de muchas membranas.
Hansch y Fujita descubrieron que la contribución de un determinado sustituyeme al logaritmo del cocien
te de reparto aceite/agua es un valor constante. Esta constante, para un sustituyeme X en una estructura R-X, se
denomina n y se define como se indica en la ecuación [2], siendo P 8X y P rh los coeficientes de reparto n-octa-
nol-agua de la forma neutra de la molécula sustituida y sin sustituir, respectivamente.
7t, = log P RX - log P RH [2)
Cuanto más positivo es el valor de 7t, más lipófilo será el sustituyeme y a la inversa (véanse los valores n
de algunos sustituyentes en compuestos aromáticos y alifáticos en la Tabla 5.1).
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA-ACTIVIDAD.. ■ 87
Tabla 5.1 . Descriptores electrónicos, estéticos e hidrófobos''
Sustituyeme re arom. a. <T, rm“ E, 8 re alif. L B, B: B., b4
H 0,00 0.00 0.00 1.03 0.00 0.00 0.00 0,00 2.06 1,00 1,00 1,00 1,00
B(OHh -0,55 -0.01 0,12 11.04 -0,08 -0.07 0,18
Br 0.86 0.39 0.23 8.88 - 1.16 0,44 0,44 -0,17 0.60 3.83 1,95 1,95 1,95 1,95
C! 0.71 0.37 0,23 6,03 -0.97 0,47 0.41 -0.15 0,39 3.52 1,80 1,80 1.80 1,80
F 0.14 0,34 0.06 0,92 -0,46 0,52 0.43 -0,34 -0.17 2.65 1,35 1,35 1,35 1,35
I 1.12 0.35 0,18 13.94 - 1.40 0.39 0.40 0,19 1,00 4,23 2.15 2,15 2.15 2,15
10. -3.46 0,68 0,78 63,51 0.68 0.63 0,20
NO -0.12 0.62 0,12 5.20 0,34 0,50 0,45 3.44 1.70 2,44 1,70 1,70
NO> - 0.28 0.71 0,78 7,36 -2,52 0.76 0.67 0.16 - 0,85 3.44 1.70 1,70 2,44 2.44
NNN 0.46 0,27 0.15 10,20 0,42 0,30 -0,13 4.62 1.50 4,18 2,34 2,57
NHCN 0.21 0.06 10,14 0,37 0.26 -0.18
NHCHO - 0.98 0,19 0.00 10,31 0,26 0,25 - 0,23 4.22 1.50 1,50 1,94 3,61
NHCH, -0,47 - 0.30 - 0.84 10,33 0,18 -0.11 -0,74 -0,67 3,53 1.50 3,08 1.90 1.90
N(CH,), 0.18 -0.15 -0,83 15,55 0,06 0,10 -0.92 -0,30 3,53 1.50 2,56 2.80 2,80
NHSOzCH, - 1.18 0.20 0.03 18.17 0.42 0,25 -0,20 4,06 1.50 1.90 3,59 3,88
NHC=O(CH) -0.97 0.21 0,00 14.93 0,28 0.28 -0.26 5,15 1,50 3,61 1.90 1.94
N=NC6H, 1.69 0.32 0.39 31,31 0.25 0,28 0,13 8.43 1.70 1.70 1.92 4.31
+N(CH,), -5.96 0.88 0,82 -2,84 0.93 0.89 0.00 - 5,26
NH: - 1.23 -0.16 -0.66 5.42 -0,61 0,21 0,02 - 0,68 - 1.19
+NHi 0.86 0,60 0.61 0.94 - 0.27 -4,19
NHNHj -0.88 - 0.02 -0,55 8.44 0,14 0,17 -0,71 3,40 1.50 2.82 1.84 1.84
NHOH - 1.34 -0.04 -0.34 7.22 0.06 -0,40
OCF, 1.04 0.38 0.35 7.86 0,39 0.38 0.00 4.57 1.35 3.33 2.44 2.44
O - 3.87 - 0.47 -0,81 -0.16 - 0,35 -0,49
OH -0.67 0.12 - 0.37 2.85 -0,55 0.29 0,29 -0.64 - 1,12 2.74 1,35 1,93 1.35 1,35
OCH, -0,02 0,12 - 0,27 7.87 - 0.55 0.27 0,26 -0,51 3,98 1,35 2.87 1.90 1,90
OC=O(CH0 -0.64 0.39 0.31 12.47 0.33 0.41 -0.07 -0.27 4,87 1,35 3,68 1.90 1.90
OCH(CH,h 0.85 0.10 - 0.45 17.06 0.26 0,30 -0,72 4.59 1,35 3.61 1.90 3.16
OBu 0,10 -0.32 21,66 0.27 0.25 - 0,55
OCJh 2,08 0,25 - 0.03 27.68 0.39 0,34 -0,35 4.51 1,35 5.89 3,11 3,11
OCH-CH. 0.38 0,10 -0.24 12,47 0,27 0.22 -0.44 0.03 4.92 1,35 3.36 1.35 1,90
O(CH:):CH< 1.05 0,10 -0,25 17.06 0,27 0,22 - 0.45 6.5 1,35 4.30 1,90 1,90
CN -0,57 0,56 0,66 6.33 -0.51 0,53 0.51 0.19 - 0,84 4.23 1.60 1.60 1.60 1.60
CO; -4.36 -0.10 0.00 6.05 -0,17 -0,15 0.13 -4.67
CHCh 1.10 0,19 15.30 -2.78 0.27
CHO 0.65 0.35 0.42 6.88 0,25 0.31 0,13 3.53 1,60 1,60 2.00 2,36
CO2H -0,32 0,37 0,45 6,93 0.39 0.33 0,15 3.91 1.60 1,60 2,36 2.66
CH.Br 0.79 0,12 0.14 13,39 - 1,51 0,12 0.10 0.05 4.09 1,52 3,75 1,95 1,95
CBr. 0,28 0,29 28.81 - 3,67 0.26 0,27 0,04 1,51
CCh 0,32 0,33 20,12 - 3,30 0,31 0.31 0,05 1,31
CF, 0.88 0.43 0.54 5,02 - 2,40 0.42 0,38 0,19 3,30 1.98 2.61 2,44 2,44
CHjCI 0.17 0.11 0.12 10,49 - 1,48 0.15 0,10 0.03 3.89 1.52 3,46 1.90 1.90
CH2I 0.10 0,11 18,60 - 1.61 0,16 0,09 0,03 1,50
C=O(NHj - 1.49 0.28 0,36 9,81 0.27 0.24 0,14 - 1.71
CH=NOH - 0,38 0,22 0.10 10.28 0,27 0,25 -0,13 -1,22
CHi 0.56 - 0.07 -0.17 5,65 - 1,24 - 0,04 -0.04 -0.13 0,50 3,00 1,52 2.04 1,90 1.90
CHOH - 1.03 0.00 0.00 7.19 - 1.21 0,05 0,00 0.00 3,97 1,52 2,70 1,90 1.90
CH»NH. - 1.04 9,09 0.00
CH:ÑHx -4.09 - 3,54 0,36
C-CH 0.40 0.21 0,23 9,55 0.35 0.19 0,05 0.48 4,66 1.60 1.60 1,60 1.60
ch2cn - 0.57 0.16 0.01 10.11 - 2,38 0.18 0.21 -0,18 3,99 1,52 4.12 1.90 1.90
CH=CH? 0,82 0.05 - 0.02 10.99 0.09 0.07 - 0.08 4,29 1.60 1.60 2.00 3,09
C=O(CH.) -0.55 0,38 0.50 11.18 0,29 0,32 0.20 4,06 1.90 1.90 2.36 2,93
C=O(C?H<) 0.06 0.48 15.83 0,29 -0.21
C=O(OCH,) -0.01 0.37 0.45 12.87 0.34 0.33 0,15 4.85 1,90 1.90 2.36 3,36
CH2CO2H -0.72 - 0.07 11.88 0.40
CH2CHjBr 0.96 18.04 -2,24 - 0,80
CH.CH:CI 0.82 15.15 -2.14 -0,02
CH CH< 1.02 - 0.07 -0.15 10,30 - 1,31 - 0.05 -0.05 -0.10 4,11 1.52 2.97 1.90 1,90
CH.OCH. - 0.78 0.03 12.06 -1,43 0,07 4.91 1,52 2,88 1.90 1.90
CH2CH2OH -0.77 11,84 0.00
(Comínúa)
XX INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
Tabla 5.1. Descriptores electrónicos, estéticos e hidrófobos (Continuación)"
Sustituyente n arom. On Oh R.M

* E, <7/ .9/ n alif. L fí, B¡ B, th
CHCH=CIC 1.10 14.49 0,00

C=Ó(OEt) 0.51 0.37 0.45 0,21 0.33 0.15 5.96 1.90 1.90 2.36 4.29
(CH ) CO>H - 0.29 - 0.03 - 0,07 16.52 -2.21 0.06 -0.02 -0.05
CHICHO.- 1.53 - 0.07 -0.15 14.96 - 1.71 - 0.03 -0.05 -0.10 4.11 2.04 2.76 3.16 3.16
CH?CHCH. 1,55 - 0.07 -0,13 14,98 - 1.60 - 0.03 - 0.06 - 0.08 5.05 1.52 3.49 1.90 1.90
C(CH,), 1.98 -0,10 - 0.20 19.62 -2.78 - 0.07 -0,07 -0.13 4.11 2,59 2.97 2.86 2.86
(CHOtCH. 2.13 - 0,08 - 0.16 19.59 - 1,63 - 0.04 - 0,06 -0.11 6.17 1.52 4.42 1.90 1.90
CJh 1.96 0.06 -0,01 25.36 - 3.79 0.10 0.08 -0.08 2.15 6.28 1.70 1.70 3.11 3.11
PlCH.h 0.44 0,03 0.31 21.19 0,08 -0.08 0.39 3.88 2.00 2.97 2.84 3,29
SO.(F) 0.05 0.80 0.91 8.65 0.75 0.75 0.22
SF, 1.23 0.61 0.68 9,89 -2.91 0,57 0.57 0.15
SH 0.39 0.25 0.15 9,22 - 1,07 0,26 0.28 -0.11 0.28
SOjíNHJ - 1.82 0.46 0.57 12,28 - 1.07 0.46 0.41 0.19
SOrfCFi) 0,55 0.79 0.93 12.86 0.78 0,73 0,26
SCF, 1.44 0,40 0.50 13.81 0.42 0.35 0,18
SCN 0.41 0.41 0.52 13.40 0.55 0.36 0,19 0.03
S=O(CH0 - 1.58 0.52 0.49 13,70 0.49 0.52 0,01 - 1.85 4.03 1,60 2.93 2.49 3.36
SOCH-. - 1.63 0.60 0.72 13.49 0.59 0.54 0.22 4,37 2.11 3.15 2.67 2.67
SCHt 0.61 0.15 0,00 13.82 - 1.07 0.23 0.20 -0.18 4.30 1,70 3.26 1.90 1.90
SC=O(CH.) 0.10 0,39 0.44 18.42 0.21 0.36 0.11 5.19 1.70 4.01 1.90 1.90
SEl 1.07 0.18 0,03 18,42 0.25 0.23 -0.18 5.24 1.70 3.97 1,90 1.90
Si(CHt). 2.59 -0.04 - 0,07 24.96 - 3.36 -0.13 - 0,04 - 0.04
S=O<C.,H,i - 0.07 0.47 33.41 0.52
SOaCJIa 0.27 0.61 0,70 33.20 0.57 0.56 0.18 5,82 2.11 6.01 2.67 2.67
SC.H. 2,32 0.18 34,29 0.30
Adamant i lo 3.30 -0.12 -0.13 40.6 -0.12 -0.02
Ferrocenilo 2.46 -0.15 -0.18 48.24 -0.22 -0.15 -0.04
Valores obtenidos de Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistry and Biology, por C. Hansell y A. l-eo, Wiley. Nueva York. 1979 y
de «Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery». Ed. M. E. Wolff, vol. I. John Wiley & Sons, New York. 1995.
11 El valor RM suele usarse multiplicado por 0.1.
Dado que los iones son mucho más polares que los compuestos neutros, la ionización complica la medida
e interpretación del valor log P de varios modos. En la Figura 5.1 se representan los equilibrios de reparto de un
ácido (HA).
n-oclanol
Figura 5.1. Equilibrios de reparto de un ácido.
IA 1
Cuantitativamente, se puede calcular la relación —------por medio de la ecuación de Henderson-Hassel-
balch. [HA]
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA ACTIVIDAD 89
Para ácidos:
HA - A + H'
K„ = ^lHa:logKa = logIH‘l + log-^L;

(HA] 6 6 (HA)
pKa = pH - log = pH + log lü^L;

|HA| F [A ]
ÍHA1 _ IQPtopH
|A |
Para una base, puede demostrarse igualmente:
[HB ] __ i0pK4.pl!
IB]
El coeficiente de reparto aparente a un pH en el que la forma ionizada |A ] o [ HB+] es la predominante

subestimará el valor de P de la especie neutra (HA) o (B ], de tal forma que habrá que corregirlo teniendo en
cuenta el pKa y el pH.
El coeficiente de reparto aparente se denomina coeficiente de distribución (£>). Las ecuaciones [3] y (4)
describen su relación con los valores de pH. pKa. coeficientes de reparto de la forma neutra no ionizada (P„) y
*,). para ácidos y bases, respectivamente.
de la forma ionizada (/
log D = log (P, • 10’*1 + P, • 10pH) - log (Itf

* ’ + 10”") [3]
log D = log (P„ ■ 10pH + P, ■ 10pKa) - log (10l’K" + IO””) (4)
La concentración de las especies iónicas [A ] o |HB’| en octanol puede despreciarse en los compuestos
poco lipófilos, ya queP, escon frecuencia 30 a 50 veces menor que P„, por lo que lasecuaciones (3)y (4) pue
den simplificarse parala mayor parte de los ácidos [5] y bases )6J a valores depH no muy alejados de los valo
res de pKa.
log D = log P„ - log (1 + 10pH pK") (5)
log D = log P„ - log (1 + IOpK" "") 16]
Cuando se registra la variación de los valores log D con los cambios de pH de la mayor parte de los ácidos
y bases, se obtienen curvas sigmoideas como la representada en la Figura 5.2. Para un ácido, log l) es constante
a bajos valores de pH. ya que log D = log P„. pero cuando el pH aumenta, log D disminuye hasta que la forma
iónica es la única que existe y se reparte entre ambas fases. Entonces, log D = log P,. Cuando el pH = pKa. el va
lor de O es menor que P.
Los aminoácidos y otros compuestos que poseen más de un grupo ionizable tienen un comportamiento
más complejo cuando varía el pH. En ellos, la especie más Iipóf ila es el ion dipolar (Figura 5.3).
Figura 5.3. Dependencia de los valores D de fenilalanina con el pH.
Por otra parte, ciertas especies iónicas, generalmente los pares iónicos |BH
* X j, se extraen en la fase or
gánica. En estas circunstancias, el coeficiente de reparto depende también de la naturaleza del contraión X~.
Aunque la solubilidad aumenta mucho con la temperatura, este efecto no debería prácticamente manifes
tarse en el log P, al ser una relación de concentraciones. Sin embargo, dado que el octanol y otros disolventes
orgánicos menos polares se vuelven más miscibles con el agua al aumentar la temperatura, los coeficientes de
reparto también varían con ésta, y deben determinarse a una temperatura constante.
Los valores P se determinan experimentalmente mediante el método shake-flask, que consiste en agitar
enérgicamente, durante un período de tiempo que puede variar entre veinticuatro horas y una semana, dos fases
no miscibles presaturadas previamente entre sí (la fase acuosa con «-octanol y la de «-octanol con agua). De
otro modo, el reparto del soluto en ambos disolventes se complicaría con el reparto de los disolventes entre sí.
El análisis de cada capa, una vez alcanzado el equilibrio, permite determinar la concentración de compuesto en
cada una de ellas y. de ahí. su log P. Por otro lado, para la determinación de la lipofilia de una molécula, se utili
zan métodos cromatográficos que, al estar gobernados por procesos de adsorción y de reparto, requieren limitar
la influencia de la adsorción. También se utilizan otras técnicas que están fuera del objetivo de este libro.
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA-ACTIVIDAD... 91
Los métodos cromatográficos más comunes para cuantificar la lipofilia son la cromatografía en capa fina
y fase reversa (RP-TLC, Reversed-Phase Thin-Layer Chromatography) y la cromatografía líquida de alta reso
lución en fase reversa (RP-HPLC. Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatography). En las croma
tografías en fase reversa, la fase estacionaria hidrófita se reemplaza por una hidrófoba (no polar). En el método
RP-TLC. la lipofilia se mide por el valor /?«, que es el logaritmo del cociente que se indica en la ecuación [7] en
la que Ze-Zx es la distancia entre el frente del disolvente y la mancha del soluto (una medida de la interacción
del soluto con la fase lipófila), y Zx-Zn es la distancia entre el comienzo y la mancha del soluto (y mide la mi
gración del soluto con la fase móvil hidrófita). Cuanto menos polar sea el soluto X, mayor será su interacción
con la fase estacionaria, disminuirá Zx y aumentará el valor Rw. El log P es función de una constante (C en la
ecuación [8]) que depende del sistema de disolventes y que se calcula aplicando el procedimiento matemático
de análisis de regresión con los datos que suministra la utilización de diferentes patrones en el calibrado del mé
todo cromatográfico.
*
= >°g (4 " 1) = log ( T7----- 1V Ru ~ log 7 z*
\ Kf / ¿x~¿o ¿x ~ ¿o
\zf-zo I
log P = log C +
En HPLC. el índice de lipofilia se deriva del factor de capacidad k'. según la expresión [91. en la que t, y t„
son los tiempos de retención del soluto y de un patrón no retenido en la columna, respectivamente. El valor log
P [ 10], como en el método anterior, es también función de C.
log P = log C + log k‘ [10]
Como la composición de la fase móvil puede variar, para una buena correlación entre los valores cromato-
gráficos y el coeficiente de reparto, los valores /?,„ y k' deben extrapolarse para una fase que fuera 100 % de agua
(/?<,.. y r»). También hay que tener en cuenta cuál es la fase estacionaria ideal (generalmente, octadecilsilil-síli-
ca gel = ODS), el pH y la fuerza iónica del disolvente, así como la presencia de ciertos amortiguadores que for
man pares iónicos con el soluto.
La determinación experimental de logP presenta con frecuencia dificultades, especialmente en los com
puestos con baja solubilidad o baja absorbancia en el espectro ultravioleta. Sin embargo, el valor logP de un
compuesto YRX puede calcularse (véase Ecuación [ 11 ]) si se conoce el log P del compuesto HRH del que deri
va. mediante la adición de los valores rr de los sustituyentes (itv y rtx).
log /’(VRXl = log P(HRH) + rty + Jtx [11]
Por ejemplo, en la ecuación [12] se ha calculado este valor para el clorobenceno. sabiendo que el log P
del benceno es 2,13 y que el valor rtci = 0,71 (véase Tabla 5.1).
log Pcutci = log Pen. + ita = 2,13 + 0,71 = 2,84 112]
Hay que resaltar que el valor log P no utiliza la suma de valores rt, sino la suma de las constantes hidrófo
bas it al log de P de un compuesto de referencia. Para ello, es conveniente fragmentar las moléculas complejas
de varias formas distintas, y realizar el cálculo partiendo de los valores de log P de distintos compuestos patrón,
para ver si los resultados son coincidentes.
Como ejemplo, vamos a calcular el log P de la difenhidramina (Fig. 5.4).
HA, ZCH,
CH-O-CH,-CH,-N
HSC/ 'CH,
log P„r = 3,27
log P = log Pmtm + 27t,cmk, + Ttoca, + «CH, + «NICHO.. = 1,09 + 2 x 1,89 - 0,98 + 0,5 - 0,95 = 3,44
log P - log Pen,. o - ch. - ch,+ Zafadlo + 7tN(cH0. = 0,33 + 2 x 1.89 - 0,95 = 3,16
log P - log P'qhjchj + Afrailo + .toen, + ^cn,+ l^NccHjj»= 2.69 + 1.89 — 0.98 + 0,50 - 0,95 = 3.15
log P = log /,c1H,NHCH, + itocH, + UcH. + 21tfa»to = 0,15- 0,98 + 0,50 + 2 x 1.89 = 3.45
Figura 5.4. Diferentes modos de fragmentación de la difenhidramina para el cálculo de log P usando valores n.
En una primera fragmentación, hemos derivado la estructura de la difenhidramina del metano; en una se
gunda. del éter metiletílico; en la tercera, del tolueno, y en la cuarta de la etilmetilamina. La diferencia entre los
cuatro valores calculados es aceptable y, si hallamos la media, observaremos que se encuentra próxima al valor
de log P medido experimentalmente, que es de 3,27.
Aunque los valores de rt se utilizan de forma aditiva, a veces pueden variar de forma sustancial en función
de la estructura. Esto sucede, fundamentalmente, cuando se trata de anillos aromáticos con un segundo sustitu
yeme en la posición para, cuyo carácter electrónico puede afectar a la polaridad de la molécula. En la Tabla 5.2
puede observarse que los valores 7tx de algunos sustituyentes varían según el sustituyeme en para.
'labia 5.2. Valores de ttx en bencenos sustituidos.

X CJ-LX X<4|-C6H4OCH?COJH X14l-C6H4-NO. Xt.rCJb-OH
H 0.00 0.00 0.00 0.00

CH, 0.56 0.52 0.52 0.49
Cl 0.71 0,78 0,54 0.93
OH - 0.67 -0.61 0.11 -0,87
NO. -0.28 0.24 -0.39 0.50
Así pues, las interacciones electrónicas entre los sustituyentes hacen «fracasar» la aditividad de los valo
res n. La lipofilia depende también de la geometría molecular. Si se calcula el log P del o-xileno (1,2-dimctil-
benceno), mesitileno (1,3,5-trimetilbenceno) y hexametilbenceno, sumando al valor de log/Vjt,, el valor rt<H,
multiplicado por 2. 3 y 6, respectivamente (Tabla 5.3), se obtiene un valor muy semejante al experimental en el
primer caso, pero no en los demás:
labia 53. Variaciones de P con la geometría molecular

Compuesto *
logP. log P,.,.
fí-Xilcno 3.25 3,20

Mesitileno 3,81 3.42
Hexametilbenceno 5,49 4.31
La razón es que la solubilidad de un compuesto no es independiente de su geometría, ya que ésta deter

mina el tipo de cavidad. Los derivados aromáticos sustituidos en orto suelen ser menos lipófilos que los corres-
pendientes análogos sustituidos en meta o para. Sin embargo, cuando en ellos existe un enlace de hidrógeno in
tramolecular. aumenta la lipofilia. Así. el ácido salicílico (o-hidroxibenzoico) es más lipófilo que el benzoico,
aunque se ha introducido un nuevo grupo polar.
En las primeras aplicaciones del valor de re al cálculo de log P en los hidrocarburos alifáticos. se encon
traron valores erróneos, que enseguida se atribuyeron a que la hidrofobicidad del hidrógeno, que según la defi
nición de los valores n de Hansch es 0. tiene sin embargo un valor positivo. Por ello, Nys y Rekker desarro
llaron, desde principios de los años setenta hasta la actualidad, un conjunto de valores fragmento (fx) que se
usan de forma aditiva (véase Ecuación [13)).
logPm=A+/r+/z ; log P = 57= í a.f + lk,-CM [13J
En esta ecuación, f es la constante hidrófoba de un fragmento, a indica el número de estos fragmentos

presentes en la molécula, CMes un factor de corrección y k, su frecuencia.
La diferencia entre la utilización de los valores n de Hansch ([14]) y el uso de los valores f de Rekker
([ 15]), se puede ver calculando el log P del etano.
log Ponen, = log Pck. + JtcH, = 1,09 + 0,64 = 1,73 [14)
log Pch.ch, — Vest — । <78 [15]
El valor fen, es la suma del valor Rch, y el valor del fragmento y, en general, fx = nx + J« (véanse
Ecuaciones [16] y [17]). Por lo tanto, los valores fx pueden determinarse experimentalmente (véase Ecuación
[18]) o calcularse a partir de los valores n o log P (véanse las Ecuaciones (19] y [20], respectivamente).
fx = nx+fH [16]
log P,,.H =O23 [|7]
J 2 2
/ch, = l0g = 0.90 |I8]
/ch. = Rch,+/„ = 0,64 + 0,23 = 0,87 [19]
/en, = log Pen. -ft = 1,09 - 0,23 = 0,86 [20]
A partir del valor fcn, = 0,89. que utilizaremos como valor promedio, podemos calcular la aportación hi
drófoba de los fragmentos CH2, CH y C (véanse las Ecuaciones (21 ]-[23]).
Íchí=/ch.-/h = 0,89 - 0,23 = 0,66 [21]
/ch = Ích¡-/h = 0,66-0,23 =0,43 [22]
/c=/ch-/h = 0,43 - 0,23 = 0,20 [23]
Las discrepancias observadas entre la medida de log P y los valores calculados por el método de los frag
mentos de Rekker se deben, al igual que vimos con el parámetro tt, a que en la solvatación influyen factores
electrónicos, estéricos y de conformación. Por ello, el método de los fragmentos de Rekker requiere la introduc
ción de factores de corrección, que se han ido incorporando con la experiencia, es decir, con la comparación
rutinaria de los valores calculados con los datos experimentales de log P.
Estos factores de corrección en el método de fragmentos de Rekker son: el efecto de proximidad, que des
cribe la presencia de centros electronegativos separados por uno o dos carbonos: X-(CH,)-X; el tipo de soporte
hidrocarbonado (alifático saturado acíclico, cíclico, insaturado, conjugado, aromático, aromático condensado o
conjugado): la presencia de átomos de hidrógeno unidos a grupos electronegativos; la presencia de un grupo
94 INTRODUCCIÓN A1-A QUÍMICA FARMACÉUTICA
electronegativo junto a un grupo alquilo voluminoso (p. ej„ el grupo OH unido a un carbono terciario en el al
cohol isopropílico o a uno cuaternario en el terbutílico); la presencia de un átomo de oxígeno unido a un anillo
aromático por un átomo de carbono: la existencia de enlaces de hidrógeno intramoleculares; los aspectos de
conformación; la presencia, en compuestos aromáticos, de grupos neutros situados en orto respecto a un sustitu
yeme capaz de interactuar por resonancia, o la combinación de dos grupos capaces de interactuar entre sí por re
sonancia.
Curiosamente, la experiencia ha demostrado que estos factores de corrección son múltiplos de un valor
constante, conocido como «constante mágica» (C«), cuyo valor es de 0,219, de forma que el cálculo de log P re
quiere la suma o resta de un número determinado de valores C.M a la suma de los valores f de los distintos frag
mentos. siguiendo las indicaciones del método, en función de las distintas circunstancias estructurales.
En esencia, para calcular la lipofilia de una molécula por el método de los fragmentos de Rekker
(Fig. 5.5), debe representarse su estructura y anotar los grupos funcionales que contiene como los fragmentos
fgi, fg>,... fg, junto con sus valores f. Restando esta suma de la fórmula molecular se obtiene la subestructura
del soporte hidrocarbonado (C.H,). cuya lipofilia se representa como x/(C) + y/(H) (obsérvese que los valores
fu y fe difieren ligeramente de los calculados en las ecuaciones 117] y [23]). A continuación, se valoran los fac
tores de corrección en función de la estructura (n ■ C«) y se completa el cálculo. Se representa el método aplica
do a la quinidina.
Algunos valores fragmento yóctanol/agua
H 0.2045
C 0,1102
N (alifálico) - 2,074
OH (alifálico) - 1.448
O (aromático) -0.450
Quinolinilo 1.821
Nomenclatura
Grupos funcionales
(fragmento /,... fragmento n) =s Datos
Estructura
Residuo C,H, =3 Individuales
Factores de corrección C.w =$
Quinidina CjoN^NjOj
I quinolinil (-IH) 1.617a

IO(ar.) -0,450
I OH (al.) -1,448
IN (al.) -2,074
Suma anterior - 2,355

CnH.x +4.893”
Suma total 2,538

f +0,438 (2 G,)
Correcciones J - 0,438 (2 Cw)
l +0,219(1 C„)
log P obs = 2.88; 1/ = 2.757
Figura 5.5. Cálculo de la lipofilia de la quinidina por el método de los fragmentos de Rekker
(CM = O,2I9).
*1.6I7= 1.821 (quinolinil)-0,204.3 (lH).b4,893 = 11(0.1102) + 18(0,2045).
En el cálculo anterior, el valor de las correcciones se ha deducido basándose en las siguientes circunstan
cias estructurales: existen dos grupos electronegativos (OH y N) separados por dos átomos de carbono (este
efecto de proximidad se corrige según este método sumando 2CW). Además, como existe un oxígeno alcohólico
unido a un reslo aromático por un átomo de carbono, se le suma otra CM. Finalmente, como este hidroxilo está
junto a un alquilo terciario, hay que restar 2CW. de donde se obtiene la correción final de 1C«.
Hansch y Leo también propusieron, en 1975, un sistema de fragmentos ligeramente diferente al de Rek-
ker, pero que requiere también el uso de factores de corrección y está incorporado en la determinación de log P
por el programa CLOGP (véase más adelante). En la expresión [24], f es la constante de fragmento, a es la inci
dencia de los fragmentos, F es el factor de corrección y b es la frecuencia de los factores de corrección.
log P = CLOGP = Z a. /„ + Z bm • Fm [24]
Naturalmente, hay que seguir las instrucciones del método para fragmentar la estructura y considerar la
suma de todos los posibles factores de corrección (ZA,, •/•'„,). El log P de la quinidina se ha calculado según se in
dica en la Figura 5.6.
/ 1 éter -0.610
I nitrógeno aromático - 1.120
I hidroxilo - 1,340
1 amina terciaria -2.180
11 carbonos alifáticos aislados + 2.145
9 carbonos aromáticos aislados + 1,170
I carbono aromático extendido ¡so + 0.100
I carbono heteroaromático extendido iso + 0.310
3 ramificaciones -0.390
1 ramificación de grupo polar que no es halógeno -0.220
23 hidrógenos sobre carbonos aislados + 5,221
13 enlaces (4 de cadena + 9 al ¡cíclicos) - 1,290
I doble enlace -0,090
I efecto de proximidad (X-C-C-X) + 0,810
2 interacciones potenciales + 0.228
CLOGP =2,743
Figura 5.6. Cálculo de la lipofilia de la quinidina por el método de fragmentos de Hansch y Leo.
Podemos observar que tanto los modos de fragmentación como los factores de corrección son, salvo ex
cepciones. diferentes en ambos métodos.
También se han desarrollado procedimientos basados en la disección de una molécula en átomos en vez
de en fragmentos. Entre ellos, el método de cálculo de log P desarrollado por Ghose/Crippen. que se define
por la expresión [25], en la que n, es el número de átomos de tipo i. siendo a, la contribución a la lipofilia del
átomo de tipo z. Por lo tanto, los grupos funcionales se diseccionan en sus diferentes átomos (p. ej., un grupo
CO2H se separa en C, =0, O y H), lo que complica bastante el procedimiento.
log P<:< = [25]
Otro método que utiliza la contribución a la lipofilia de grupos sin términos de corrección es el de Suzu
ki y Kudo, que en 1990 publicaron su propia variante para calcular el log P según la expresión [26]. En ella, N
es el número total de grupos, n, es el número de veces que está representado el grupo i en la molécula, y G, es la
contribución del grupo i al log P. Este método tiene una clasificación de grupos muy refinada, de forma que un
grupo CH; puede ser clasificado de 51 formas diferentes.
log PSK = £n, G, [26]
Estos métodos para calcular cl log P se complementan con otros análogos que están computarizados.
Basados en métodos de fragmentación, podemos citar los programas CLOGP de Hansch-Leo (anteriormente
mencionado). Z/-SYBYL de Rekker. MOLCAD de Ghose/Crippen y CHEMICAL-2 de Suzuki/Kudo. Otros se
basan en propiedades moleculares, como el Potencial de Lipofilia Molecular (PLM). que identifica aquellas
partes de la moléeula que pueden estar implicadas en interacciones hidrófobas con el receptor y permite calcu
lar la probabilidad de que exista una molécula de agua en un determinado lugar del espacio que la rodea.
¿Cómo se utilizan los descriptores hidrófobos en los métodos QSAR? Como se indica en la Figura 5.7,
que representa la actividad bactericida de una serie de sales de benzalconio. es frecuente encontrar una relación
parabólica entre la actividad biológica in vivo (c.m.i., concentración mínima inhibitoria) y la hidrofobia. Se pue
de así determinar cuál es el log P óptimo para dicha actividad. Esta curva es semejante a la que se ha visto en el
Capítulo 4. cuando comparábamos la actividad antiséptica de los alcoholes con el número de grupos metiléni-
cos, lo cual es lógico si recordamos que cada grupo metilénico aumenta la lipofilia.
Figura 5.7. Relación entre la actividad bactericida in vivo y la lipofilia en sales de benzalconio.
Por debajo del coeficiente de reparto óptimo, el fármaco será tan hidrosoluble que no podrá atravesar la
bicapa lipídica de las membranas por difusión pasiva, mientras que por encima de dicho valor, quedará retenido
en la primera fase Iipófila que encuentre y no será capaz de cruzar a la fase acuosa (líquido extracelular o cito
plasma).
Si se establece la ecuación de esta parábola, se encontrará la expresión [27] y se podrá definir cuál es el
coeficiente de reparto óptimo o la longitud idónea de una cadena polimetilénica. Los términos (-/), (£') y (k") en
dicha ecuación son coeficientes de regresión derivados del tratamiento estadístico de la curva. Recuérdese que
el método de regresión lineal múltiple permite determinar los mejores coeficientes por el método matemático de
mínimos cuadrados, que correlacionan la variable dependiente (actividad biológica) con una combinación li
neal de variables independientes, en este caso el descriptor molecular P.
log 1/C = -k (log P)2 + kJ (log P) + k" (27)
En lugar de los valores log P como descriptores de la hidrofobia, suelen emplearse los valores ít, que des
criben el aumento o disminución que produce la sustitución de un hidrógeno por un grupo determinado. En la
ecuación [28], se representa una relación de este tipo. Con ella podemos determinar (derivando e igualando a 0)
cuál es el valor óptimo de n de un sustituyente y buscar el idóneo (Ecuación [29]). En este caso, deberíamos in
troducir en el prototipo un sustituyente o varios que lo hicieran casi 1000 veces más lipófilo. ya que n,)p. = 2.8.
log 1/C = -0,18 tt2+ 1,01 tr-2,21 [28]
[d(Iog l/C)/dn] = -2(0,18)rt+ 1,01 =0; n,v = 1,01/0,36 = 2.8 [29|

Sin embargo, puede suceder que no se encuentre una correlación cuantitativa entre la actividad biológica
y los parámetros de hidrofobia, lo que puede significar que ésta no influye en la actividad o que existen otros
descriptores moleculares que hay que tener en cuenta.
2.2. Descriptores electrónicos
La reactividad de una molécula se basa fundamentalmente en sus propiedades electrónicas. Análogamente, la inte
racción fármaco-receptor no se realiza solamente por enlaces hidrófobos, sino también por uniones polares que re
quieren una determinada densidad electrónica en ciertos átomos. Los parámetros electrónicos surgieron, alrededor
de 1940. para predecir y cuantificar la influencia de los sustituyentes en las diferentes reacciones y hacer la Quími
ca Orgánica más cuantitativa. En su famoso postulado. Hammett propuso que los efectos electrónicos (inductivo y
de resonancia) de un conjunto de sustituyentes en diferentes reacciones orgánicas deberían ser similares.
En la Figura 5.8, se observa una correlación lineal entre los valores log K (en el eje de ordenadas) con los de
log K' (en el eje de abeisas). siendo K y K' las constantes de disociación del ácido fenilacético y del ácido benzoi
co, respectivamente, sustituidos en las posiciones meta y para por sustituyentes idénticos, l.os puntos se sitúan en
una recta que puede representarse por la ecuación [30], en la que A es la pendiente y C la ordenada en el origen.
log K = A log K' + C [30]

Del mismo modo, pueden relacionarse los valores log K' con los valores log k. siendo k la velocidad de hi
drólisis alcalina de benzoatos de etilo sustituidos de igual forma que los derivados de ácido benzoico cuya cons
tante de ionización se está comparando.
A la pendiente A se le denominó p. Su valor puede ser mayor o menor, según que la reacción que se estu
die (ionización de los ácidos fenilacéticos, en el primer ejemplo, o velocidad de hidrólisis alcalina de los dife
rentes benzoatos de etilo, en el segundo) sea más o menos sensible a los efectos electrónicos de los sustituyen-
tes en unas condiciones de reacción determinadas. Si el valor de p es grande, significa que la reacción es muy
sensible (la recta tendrá una pendiente pronunciada).
Figura 5.8. Correlación entre los valores log K y log K' de ácido fenilacético y benzoico sustituidos análogamente.
Hammel escogió como reacción estándar con un valor p = 1 la disociación de ácidos benzoicos en agua a
25 °C, y denominó 0X al valor log (K'X/K'H). Un sustituyeme tendrá un valor 0X positivo si X es atractor de elec
trones y negativo si es donador (véanse los signos de este parámetro en los ejemplos recogidos en la Tabla 5.1).
Si atrae carga, aumentará la acidez del grupo CO,H (argumento del estado fundamental) y estabilizará la carga
negativa incipiente del anión carboxilato en el estado de transición (argumento del estado de transición), por lo
que K'x será mayor que K'n y el parámetro a será positivo. Si se escribe la ecuación [32] para los compuestos
prototipo (no sustituidos), la [31] para los sustituidos y se restan ambas, se llega a la ecuación [33].
log Kx = p log K'x + C [31]
log K» = p log K'h + C [32]
log — =plog“ = pa [33]

AH
Haciendo uso de la ecucación [33], puede predecirse la acidez de un ácido benzoico sustituido por un de
terminado sustituyeme en la posición meta o para, si se conoce el valor o,„ o o,, de dicho sustituyeme en la serie
aromática. Del mismo modo, puede establecerse una correlación entre las velocidades de hidrólisis de benzoa
tos de etilo sustituidos y sin sustituir (A'), así como las constantes de ionización de los ácidos benzoicos idénti
camente sustituidos (X") [34]. El valor p puede ser negativo si la reacción está favorecida por una gran densidad
electrónica en el estado de transición, y positivo si ocurre al contrario.
log = P log = per [34]
Los valores de las constantes ox en series aromáticas dependen de que el sustituyeme se encuentre en una
posición meta o para. Esto es debido a que este parámetro es una combinación de la electronegatividad (efecto
de campo o inductivo) y la resonancia, y ambos efectos electrónicos dependen de la posición (véase la Ta
bla 5.1). Los parámetros 0,„,„ no se aplican ya que, debido a la proximidad del sustituyeme y el centro de reac
ción, se producen otras interacciones entre ambos que interfieren con los efectos electrónicos, como son los
efectos estéticos, posibles enlaces de hidrógeno intramoleculares, etc.
Otros parámetros electrónicos que describen el efecto electrónico de los sustituyentes son los denomina
dos ,9Í y )y (escala de Swain y Lupton), que corresponden a la separación cuantitativa del efecto de resonancia
(Di) y del inductivo (¿y, de field, campo), según la ecuación [35]. El parámetro se ha determinado midiendo la
ionización de ácidos derivados del biciclo] 2.2.2]octano-1 -carboxílico sustituidos en la posición 4. ya que este
sustituyeme influye en la ionización a través del espacio interviniendo enlaces O.
X o = r9l +/,T [35|
Así, si comparamos en la Tabla 5.1 los grupos cloro y nitro, observamos que es positivo para ambos,
como corresponde a un efecto inductivo (I de Ingold) atrayente de electrones, mientras que .9? es positivo para
NO2 y negativo para Cl, demostrando el diferente efecto de resonancia (M de Ingold) que poseen dichos susti
tuyentes.
Taft separó las contribuciones debidas al efecto inductivo (0,) y al de resonancia (ox) de las constantes 0P
de Hammett, según se indica en la ecuación [36], Como el efecto de resonancia opera mucho menos en la posi
ción meta (aproximadamente, 1/3 de dicho efecto en para), pueden establecerse ambas contribuciones para un
sustituyeme en meta, según se indica en la ecuación [37].
0p — 0/ + Ctfí [36]
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA-ACTIVIDAD . 99
c,„ = a, + aaK = <j, + 0.33 c» 137]
Una de las causas más importantes de las desviaciones que se encuentran cuando se aplican los paráme
tros a de Hammett es la interacción por resonancia entre el sustituyeme X y el centro de reacción que se consi
dera (F). Así, cuando se intentan correlacionar los valores de pKa de los iones anilinio con los valores <yx en
para, determinados como ya se ha indicado a partir de las constantes de ionización de los ácidos benzoicos, se
observa que los tres sustituyentes atrayentes de electrones indicados (NO,, SO2Me y CO2Et) se encuentran ale
jados de la recta de regresión (Fig. 5.9).
Figura 5.9. Correlación de los valores pKa de iones anilinio y los valores o del correspondiente sustituyeme.
En los tres casos, los iones anilinio son mucho más ácidos de lo previsto, ya que las formas no ionizadas se
encuentran estabilizadas por resonancia, tal como se indica en la Figura 5.10 para una de ellas: lap-nitroanilina.
Figura 5.10. Estabilización por resonancia de la forma neutra de lap-nitroanilina.
Para estos casos, se han definido los parámetros <5 p y c*

p, cuyos valores absolutos son siempre mayores
que los valores op. Así. los valores a p del grupo NO, y los valores a‘p del grupo NH2 son de 1.27 (en lugar de
0,78) y de -1,30 (en vez de -0,66), respectivamente. El valor o p se utiliza cuando un sustituyeme atrayente
de electrones por resonancia interactúa con un centro de reacción rico en electrones (caso de la protonación de la
p-nitroanilina), mientras que el valor ct'p se emplea cuando un grupo dador por resonancia lo hace con un cen
tro de reacción deficiente en electrones. La reacción utilizada para determinar estas nuevas constantes es la sol-
vólisis en acetona acuosa al 90 %, y a 25 °C, de cloruros de l-metil-l-feniletano (cloruro de t-cumilo) sustitui
do en para (véase la Ecuación [38] y la Fig. 5.11). La naturaleza de estos haluros de alquilo (terciarios y
bencílicos al mismo tiempo) hace que estas reacciones transcurran por mecanismos SN1 (un centro de reacción
pobre en electrones). El valor de p se determina sobre los compuestos sustituidos en meta.
log = P O'P [38]

Ah
Figura 5.11. Hidrólisis de cloruros de z-cumilo.
El descriptor electrónico más común en las series alifáticas es el parámetro o , que fue definido por Taft
*
midiendo el efecto inductivo de los sustituycntes X en las velocidades a las que se producen la hidrólisis básica
y ácida de los esteres del ácido acético sustituido en la posición a (k%) y sin sustituir (ÁH). En la Figura 5.12 se
representa la reacción y los correspondientes estados de transición.
xch2co2r + h2o « XCH2CO2H + ROH
o rH
xch2-c-or XCH,-C-OR
zÓy
ÓH
H H
Estado de transición Estado de transición

en la hidrólisis en la hidrólisis
catalizada por bases catalizada por ácidos
Figura 5.12. Hidrólisis de acetatos de alquilo sustituidos en la posición a.

Estados de transición de la hidrólisis básica (B) y ácida (A).
En ambos procesos, los efectos de los sustituyentes pueden tratarse como la suma de efectos electrónicos
inductivos (pa
)
* y de resonancia (/?). junto con los efectos estéticos (S) debido a la proximidad entre el sustitu
yeme y el centro de reacción. Puede establecerse la ecuación [41 ] restando las ecuaciones [39] y [40], que re
presentan la hidrólisis en medio básico y ácido, respectivamente, considerando que los efectos estéricos y de re
sonancia son iguales (lo que, obviamente, es una simplificación de la realidad).
| k 1
log J J = PsGx
* + + Su 139]
l°g | -p | = + Ra + Sa
[40]
logli;l/log[rlA = (p8“p4)Ov (41]
Se puede suponer que (p«-p.) es un valor constante, para el que Taft escogió el valor de 2.48. Así, pueden
calcularse los valores ax* a partir de la ecuación ]42J. El valor 2,48 indica que la reacción de hidrólisis básica es
más sensible que la ácida a los efectos electrónicos del sustituyeme X. Viendo los estados de transición indica
dos anteriormente, podemos observar que en la primera, el hidroxilión atacará más eficazmente al grupo carbo-
nilo del éster cuanto mayor sea su deficiencia electrónica, mientras que en la hidrólisis ácida, los efectos elec
trónicos de X son mucho menores, ya que ahora es el agua la que ataca a un grupo carbonilo previamente
protonado en su oxígeno.
log 1^1 -logí-^-l =2,48 a,• (42)
L L «o JA
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA-ACTIVIDAD.. 101
Estos valores son también positivos, cuando se trata de sustituyentes atrayentes de electrones, y negativos
cuando se trata de donadores. Por definición, los valores ov. se refieren a metilo, ya que se compara la velocidad
de hidrólisis de acetatos de alquilo y no de formiatos de alquilo (un grupo XCH: con un grupo CH,). mientras
que los valores a aromáticos se refieren a H. También pueden referirse a H multiplicándolos por 2,8.
Los descriptores electrónicos intervienen en muchas correlaciones QSAR. generalmente en conjunción
con los parámetros tt. Por ejemplo, en el análisis de Hansch aplicado a la actividad bloqueante (antagonista) de
receptores adrenérgicos de las P-bromo-P-ariletilaminas, se dedujo la correlación expresada en la ecuación [43],
log 1/C = 1,15 (It) - 1.47 (a'p) + 7.82 [43]
Esta ecuación indica que la actividad aumenta si se introducen sustituyentes lipófiios en el anillo aromáti
co y si el sustituyeme en para respecto al centro de reacción es donador de electrones (ya que debe ser negativo
para que. multiplicado por el coeficiente negativo, resulte un valor positivo que aumente la suma). También so
porta el mecanismo molecular que se propone para este tipo de fármacos y que se indica en la Figura 5.13.
Nu - Receptor
Figura 5.13. Mecanismo propuesto para la unión envalente entre fármacos con estructura de P-bromo
P-ariletilaminas y sus receptores.
La P-halo-etilaminas son estructuras alquilantes de grupos nucleófilos, a través de mecanismos de sustitu

ción nucleófila intramolecular (Ssi) (Capítulo 18). Se produce así el bloqueo irreversible (al establecerse un en
lace covalente muy estable) de las dianas farmacológicas con las que interactúan. La presencia de un sustitu
yeme donador de electrones en la posición para interacluará por resonancia con el carbono bencílico deficitario
de carga que se va formando en el estado de transición de esta reacción, que va a ser atacado por los grupos nu
cleófilos del receptor adrenérgico en nuestro ejemplo. Por ello, en la correlación observamos el parámetro elec
trónico corregido G’p con un coeficiente grande y negativo.
En las ecuaciones QSAR también se utilizan parámetros electrónicos macroscópicos que pueden medirse
experimentalmentc. pero que dependen de los efectos electrónicos de los sustituyentes. Entre ellos podemos
encontrar valores de pXa. desplazamientos químicos de diferentes átomos en resonancia magnética nuclear
('H, i3C, etc.), frecuencias de absorción en el infrarrojo, potenciales de óxido-reducción, momentos dipolares,
etcétera. Por ejemplo, la actividad antibacteriana in vitro de las sulfamidas se correlaciona con el pKa de las
mismas y el parámetro Ox. según las ecuaciones (44) y (45). Ambas indican que debemos introducir en el nitró
geno del agolpamiento sulfonamida sustituyentes X atrayentes de electrones, para hacerlo más ácido al estabili
zar la carga negativa que se va formando en el estado de transición.
log A = 6,405 - 0,693 pKa
logA = 0,398+ 1,128o
Esta ecuación apoya igualmente el mecanismo de acción propuesto para las sulfamidas como inhibidores
reversibles de la enzima dihidropteroato sintetasa. Estas estructuras compiten con el ácido p-aminobenzoi-
co (PABA). que es el sustrato de dicha enzima, por su centro activo (Fig. 5.14). Debido a que este sustrato inte
ractúa en su forma iónica, es natural que la interacción de las sulfamidas con la misma enzima se realice con su
forma iónica, por lo que será más eficaz cuanto menor sea su p/Ca (véase el Capítulo 9).
H2N
Forma iónica (activa)
H2N
PABA: Sustrato de la enzima SULFAMIDAS: inhibidores

dihidropteroato sintetasa competitivos de la enzima
dihidropteroato sintetasa
Figura 5.14. Mecanismo de acción propuesto para las sulfamidas antibacterianas. Influencia del pKa.
Los parámetros electrónicos de resonancia también se ven influidos por efectos estéricos. Así, en el p-di-
metilaminobenzoato de etilo (Fig. 5.15). el grupo N(CTL); posee una constante op = -0,83, mientras que cuan
do se introducen dos grupos metilo en orto, el valor op = -0,11. Esta disminución se debe a la «inhibición esfé
rica de la resonancia» que producen los grupos metilo. Su interacción estérica con el grupo dimetilamino obliga
a éste a disponerse lo más alejado posible de ambos, por giro alrededor del enlace sigma que lo une al benceno,
de forma que su par de electrones no compartido no puede superponerse eficazmente con los orbitales p de éste,
disminuyendo así el efecto de resonancia.
H,C
H,C \ —/ OEt
H,C
opNsk2=-0.83 opNMr.=-0.ll
Figura 5.15. Inhibición estérica de la resonancia. Influencia en el valor opsM.
Por último, se pueden encontrar correlaciones QSAR utilizando parámetros electrónicos derivados de la
mecánica cuántica, como las cargas eficaces sobre determinados átomos o el potencial electrostático molecu
lar (PEM). Este último identifica las partes de la molécula que son los lugares preferentes para un ataque clcc-
trófilo (véase el Capítulo 6). También se utiliza como descriptor electrónico la energía de los orbitales HOMO
(orbital molecular ocupado de mayor energía) y LllMO (orbital molecular vacante de menor energía), de la que
puede deducirse el potencial de ionización y la afinidad electrónica, respectivamente. Existen programas que es
tán muy generalizados y, como veremos en el Capítulo 6. permiten calcular con distintos niveles de aproxima
ción dichos parámetros a partir de la geometría molecular.
2.3. Descriptores del tamaño de los sustituyentes
El tamaño de los sustituyentes es también muy importante en las interacciones fármaco-receptor. Por ello, es
frecuente observar que la afinidad por un tipo o subtipo de receptores depende del volumen de un determinado
sustituyeme. ¿Cómo se puede cuantificar el tamaño de un sustituyeme? Uno de los parámetros más utilizados es
el parámetro Es (véase la Tabla 5.1). que fue definido por Taft utilizando como reacción de referencia la hidró
lisis ácida de acetatos de alquilo sustituidos en a por un sustituyeme X.
Ya se ha comentado que en la hidrólisis ácida los efectos electrónicos son menores que en la hidrólisis bá
sica. Por ello, si en la ecuación [40] hacemos p = 0. lo que supone asumir que la hidrólisis ácida de estos ésteres
es insensible a los efectos polares de los sustituyentes X. y definimos la suma de los efectos de resonancia R,
(efectos hiperconjugativos) y estéricos (S4) como Es. obtendremos la ecuación (46] y, generalizando, la expre
sión [47], donde Es es fundamentalmente un descriptor del efecto estérico o interacción entre el volumen del
grupo X y la función estudiada, mientras que 8 describe la sensibilidad de la reacción a este efecto. El valor 8 =
I corresponde, por definición, a la hidrólisis ácida de los esteres al itálicos y. también por definición, el valor Es«
= 0, cuando la función éster está unida a un metilo.
[46]
* „
log — = 8E5 (47J
*<>
La sustitución de un hidrógeno en a del acetato de alquilo supondrá siempre un aumento de volumen

respecto al éster sin sustituir y, por tanto, una velocidad de hidrólisis menor. Es decir, puesto que kx < k<¡. los
valores Es son negativos (véase la Tabla 5.1) y, cuanto mayor sea su valor absoluto, mayor será el volumen
del sustituyeme. También puede determinarse el efecto estérico de un sustituyeme referido al hidrógeno si es
tá unido directamente a la función éster, es decir, comparando las velocidades de hidrólisis de formiatos de
alquilo en los que el hidrógeno del formiato se ha sustituido por X. Es evidente que estos efectos serán ma
yores, y pueden calcularse de forma aproximada multiplicando Es por 1.24 (Es referido al hidrógeno =
£$x 1,24).
También se han calculado los efectos estéricos de los sustituyentes en compuestos aromáticos en la posi
ción orto.
Una descripción más sofisticada de los sustituyentes se refleja en los parámetros geométricos STER1-
MOL de Verloop y Tipker que, tras fijar una conformación «razonable», proporcionan una idea de la forma y
las dimensiones de un sustituyeme no esférico en un número restringido de direcciones en el espacio
(Fig. 5.16). Estos parámetros definen valores para la longitud (¿). que es la distancia en que sobresale el grupo
respecto a la molécula global, y la anchura en cuatro o cinco direcciones (B) perpendiculares al eje L (véase la
Tabla 5.1). De los valores que se seleccionan, al más pequeño se le denomina Bh
Molécula
Figura 5.16. Parámetros STERIMOL

En los análisis QSAR, se utilizan además otros parámetros descriptores del tamaño de los sustiluyentes,
como los radios y el volumen (Vl() de van der Waals, el volumen efectivo de Charton (Vr/). el peso molecular, el
paracoro (Pr) y. sobre todo, la refractividad molar (RM). Este último [48] se correlaciona con los parámetros
estéricos Es y STERIMOL. ya que representa un volumen (Mid, en donde M es el peso molecular y d la densi
dad a 20 °C), pero también refleja la polarizabilidad del grupo, responsable de las interacciones de London, al
incluir el índice de refracción n. Al ser el valor [(n2 - I )/(n2 + 2)J pequeño, el parámetro RM indica principal
mente el volumen, y suele emplearse multiplicado por 0.1 (véase la Tabla 5.1).
RM = M/d • (n2 - I )/(n2 + 2) |48 ]
Entre los muchos parámetros topológicos que se han propuesto, uno de los primeros sigue utilizándose
bastante. Nos referimos al indice de conectividad de Kier %, que se define como una suma de las contribucio
nes de fragmentos (S). Éstos, a su vez. se definen por los valores de conectividad (8) de los átomos que los cons
tituyen, siendo 8 el número de enlaces o que cada átomo de la molécula que no sea hidrógeno forma con otros
átomos también diferentes al hidrógeno [49] y [50] (a = n." total de enlaces sigma; h = n.° de enlaces con áto
mos de hidrógeno).
Z = SS [49]
S = 1/1/8¡ x 8j x..... x 8„; 8= G -h
Los índices de conectividad de Kier se calculan a partir de la fórmula molecular de una única manera, por
lo que definen con gran precisión algunas propiedades fisicoquímicas de isómeros ramificados y no ramifica
dos. La molécula se disecciona en subestructuras de uno (para un índice de conectividad de primer orden: '%),
dos (de segundo orden: ‘X) o más (de orden n:"x) enlaces contiguos.
Así, el índice de conectividad de Kier de primer orden ('x) para el fenol (Fig. 5.17) se calcula según la
ecuación [52].
[521
4 fragmentos aa 2 fragmentos ah I fragmento be
Figura 5.17. Cálculo de 'x para el fenol.
Los parámetros '%. 2x y ’x para el alcohol isobutílico (Fig. 5.18) se calculan según las ecuaciones
[53J-[55J.
Figura 5.18. Disección del alcohol isobutílico para el cálculo de los índices de conectividad.
'x = 2(l • 3)'lc + (2 • 3)’l/2 + (2 • l)"w = 2,27
Dos fragmentos ah (conectividades I y 3); un fragmento he (2 y 3): un fragmento cd (2 y I)
2x = (l -3- irl/2 + 3(l •3-2)’l/3= 1,802 (54]
Un fragmento aba (conectividades I, 3, I); tres fragmentos con conectividades 1.3 y 2.
’x = 2(1-3-2-l)‘w = 0,816 (55]
Dos fragmentos ahed con conectividades 1, 3, 2. I.
Como ejemplo de análisis QSAR en el que intervienen parámetros estéticos, la ecuación [56] relaciona
cuantitativamente la actividad de una enzima extraída de riñón de cordero con actividad de aminoácido oxidasa
(MAO), frente a fenilglicinas diversamente sustituidas en meta y para (Fig. 5.19).
log (\/Km) = (0,3 ± 0.2) n + (0,6 ± 0,3) o + (0,21 ± 0,18) Es + (2,3 ± 0,2) (56]
n= 15, r = 0,860
Figura 5.19. Afinidad de fenilglicinas sustituidas en meta y para frente a una MAO.
Como puede observarse, la afinidad de la enzima por el sustrato depende de los parámetros n. o y £s.
pero el parámetro electrónico o es el que más influye, aunque no demasiado. Su coeficiente positivo indica
que los sustituyentes atrayentes de electrones deben facilitar esta reacción metabólica. La influencia de los
parámetros de lipofilia y estéricos (rt y Es) es pequeña, ya que el margen de error es aproximadamente de la
misma magnitud que el coeficiente que multiplica a ambos. Obsérvese que el análisis QSAR de Hansch-Fu-
jita requiere que la correlación que se establezca se valore estadísticamente en función del número de com
puestos estudiados (n = 15. en este caso), el cual debe superar un mínimo para que la ecuación sea signi
ficativa.
La ecuación de segundo grado (57] refleja la relación entre la actividad frente a Staphilococcus aureus de
ciertas sales de amonio cuaternario con el índice de Kier de orden 1.
log A = 0.20 'x2 + 4.85 'x + 22,24 [57]

Aunque para los análisis QSAR de Hansch-Fujita se encuentran muchos valores de las constantes de sus
tituyeme. no existen datos para muchos grupos funcionales importantes. Por otra parte, los que existen para gru
pos no muy comunes no suelen ser muy fiables. En la actualidad, la computarización hace que sea posible cal
cular, en pocos segundos, los parámetros electrónicos, hidrófobos y estéticos, utilizando distintos programas.
Éstos también identifican automáticamente cuáles son las combinaciones de parámetros que explican mejor las
variaciones de la actividad biológica, determinan sus coeficientes y son capaces de encontrar ecuaciones con
buena capacidad de predicción.
Existen otros métodos estadísticos para los análisis QSAR, como el método de Free Wilson, el análisis de
componentes principales, el análisis discriminante o el de conglomerados (cluster analysis'), etc., que van más
allá del objetivo que pretende este texto.
3. EJEMPLO DE APLICACIÓN DEL ANÁLISIS QSAR AL DISEÑO DE UN FÁRMACO
Los ácidos nalidíxico. oxolínico y pipemídico son representantes de una familia de fármacos antibacteria
nos que tienen en común un sistema de ácido l,4-dihidro-4-oxopiridina-3-carboxílico fusionado con un anillo
de benceno (quinolonas) o de azina (Fig. 5.20 y Capítulo 9). Hace varios años, un grupo de trabajo decidió rea
lizar las variaciones estructurales por modificación de los sustituyentes en las posiciones indicadas en la estruc
tura 1. a fin de encontrar compuestos con más actividad, un espectro de acción más amplio, una menor toxicidad
y una mayor estabilidad metabólica que los hasta entonces conocidos.
Figura 5.20. Antibacterianos análogos del ácido nalidíxico.
Posteriormente determinaron la concentración mínima inhibitoria (c.m.i. en M) de cada compuesto frente a

Escherichia cali NIHJ JC-2 (porque se parecía a la que mostraban frente a bacterias gram-negativas, entre ellas
Pseudomonas), y realizaron el análisis estadístico de tres series correlacionando la actividad con los parámetros n,
<s„, ff, Di. Es. RM y STER1MOL, anteriormente comentados. Se utilizaron los valores n para las series de ben
cenos monosustituidos. En la primera serie, se fijó R1 = Et. R7 = R
* = H, y se varió el sustituyeme R6 (H, F. Cl. NO2,
Br. Me, OMe y I). Se encontraron valores de actividad en los que log (1/c.m.i.) variaba de 3,5 a 4.2, deduciéndose
la ecuación [58], en la que n es el número de compuestos utilizados en el análisis de regresión, s es la desviación es
tándar. r el coeficiente de correlación, y los números entre paréntesis son los intervalos de una confianza del 95 %.
log (1/c.m.i.) = - 3,318[£s(6)]2 - 4,371 [ES(6)J + 3,924 [58]
(0,59) (0,85)
n=8 s = 0,108 r = 0,989
Esta ecuación muestra que el efecto del sustituyeme R6 en la actividad es principalmente estérico. El valor
Es óptimo se puede establecer derivando e igualando a 0 [59]; se encuentra así el valor Es = - 0,66, que es inter
medio entre el de F y el de Cl (Tabla 5.1).
[d(log l/c.m.i.j/dEJ =-2(3.3I8)E,-4.371 = 0; E^, = -4.371/6.636 = -0,66 [59]
A continuación, se estudió la serie obtenida por sustitución de R8 (H, F, Cl. Me. OMe, Et y OEt), siendo
R1 = Et y R" = R = H. Se obtuvieron actividades entre 2,5 y 5.0. de las que se dedujo la Ecuación [60], en la que
se demuestra que el efecto de este sustituyeme es también de tipo estérico. siendo el parámetro STERIMOL B4
el que mejor representa dicho efecto en esa posición. El valor óptimo de este parámetro, deducido como en el
caso anterior igualando la derivada a 0, es de 1.83, valor muy próximo al del Cl.
log (l/c.m.i.) = -l,016(B4(8)]2-3,726 [B4(8)] + 1,301 [60]

(0,46) (2,04)
n=7 s = 0,221 r = 0,978
La introducción de sustituyentes R7 (R1 = Et, R7 = H, NO¡, Ac, Cl, Me, OMe, NMe2 y piperazinilo) au
mentó la actividad 10-30 veces (de 5 a 5,5). Al no resultar clara la influencia de los factores fisicoquímicos res
ponsables de tal efecto, se desarrolló la Ecuación [61], representando el efecto de la sustitución en 7 con un in
dicador variable 1(7), que puede tomar valores 1 ó 0, indicando la presencia o ausencia de un sustituyente en
dicha posición. Este es un ejemplo de un análisis de Hansch que incluye variables estructurales de tipo Free
Wilson. En ella, también se combinaron los resultados obtenidos en las otras dos series de derivados «mono»
sustituidos. Esta ecuación predice que la combinación óptima de parámetros de sustituyentes (que producirán
mayor actividad) es: [£s<6) =-0,65,1(7) = 1 y B4(8) = 1,84],
log (1/c.m.i.) = -3,236[£,(6)]2-4,210[£,(6)] + 1,358 1(7)- 1,024 [B4(8)]2 +3,770 [B4(8)] + 1,251 [61]
(0,89) (1,26) (0,40) (0,32) (1,43)
n = 21 s =0,205 r = 0,978
Para corroborarla y elaborarla, se sintetizó una nueva serie de compuestos en los que se mantuvo R1 = Et
y R6 = F; siendo R* = H. se introdujeron como R2: Cl, Me. NMe;, pirrolidinilo, piperazinilo y varios piperazini-
los sustituidos en N‘. Se dedujo así la Ecuación [62], que indica que el sustituyente en 7 no debe tener ninguna
función carbonilo (7N-CO) y debe tener una lipofilia óptima, que se le calcula un valor n = - 1,38 (el valor ir del
grupo piperazinilo = - 1,74 y el del /V'-metilpiperazinilo es - 1.24).
log (1/c.m.i.) = - 0,244[n(7)]2 - 0,67511(7) - 0,705 l(7N-CO) + 5,987 [62]

(0,05) (0,15) (0,27)
n = 22 s = 0,242 r = 0,943
En los anteriores análisis, R1 era siempre Et. por loque se preparó otra nueva serie siendo R6 = Fy R = pi
perazinilo. pero variando R1 = CH = CIL. OMe. CH,CH2F y CH:CHF;. Estos sustituyentes son semejantes a Et.
desde el punto de vista estérico. y suelen ser beneficiosos para la actividad biológica. Con esta serie se desarro
lló la Ecuación [63]. en la que L es el parámetro de longitud en el procedimiento STERIMOL. La longitud ópti
ma de 4.2 coincide con la del Et (L = 4.11).
log (1/c.m.i.) = -0,492[£(l)]2 + 4,IO2[L( I)] - 1.999 [63]

(0,18) (1,59)
n=8 s = 0,126 r = 0.955
De los análisis anteriores, se podría deducir que los mejores sustituyentes para las cuatro posiciones son:
R1 = Et. R6 = F o Cl, R7 = piperazinilo o A/'-metilpiperazinilo y Rs = Cl o Me. Considerando los efectos sobre
distintas bacterias, así como la toxicidad y el coste de los procesos sintéticos, se seleccionó cl I-etil-6-fluoro-7-
piperazinil-derivado (norfloxacino, Fig. 5.21), que se comercializó. Posee un valor Iog( 1/c.m.i.)=6,6, siendo 16-
500 veces más activo que el ácido nalidíxico en distintas especies bacterianas. El efecto más importante es su
gran actividad frente a Pseudomonas.
R1 = Et: Norfloxacino
Figura 5.21. Estructura seleccionada para su desarrollo.

4. BIOISOSTERISMO Y QSAR
En el Capítulo 3, se han definido los grupos bioisósteros como aquéllos que al intercambiarse en una estructura
no alteran apenas la actividad biológica. Si se tienen en cuenta los parámetros fisicoquímicos. el bioisosterismo
puede ser isométrico (si dichos parámetros son semejantes), o no isométrico. El benceno, el tiofeno y la piridi-
na se consideran con frecuencia bioisósteros. pero mientras que los dos primeros son semejantes en sus valores
log P. RM. <3x (el efecto inductivo del CH en el benceno se supone = 0) y punto de ebullición (Tabla 5.4), la pi-
ridina es mucho más hidrófita y contiene, además, una porción más electrófila que se corresponde con el efecto
atrayente de electrones del nitrógeno (<JX = 0.70). Así pues, estos tres anillos sólo se parecen en el tamaño y no
son bioisósteros isométricos.
Tabla 5.4. Propiedades de tres anillos bioisósteros
Parámetros Benceno Tiofeno Piridina
LogP 2.13 1.81 0.65

0.1 RM 2.70 2.50 2.48
Ox 0.00 0.12 0.70
PE fC) 80 84 115
El bioisosterismo no isométrico requiere un análisis crítico. Un ejemplo paradigmático lo encontramos en

los resultados de un análisis QSAR, realizado con ocho anestésicos locales, que se indica en la Figura 5.22 y la
Ecuación [64], Dos de estos derivados (X = Cl y X = NH2) mostraron una actividad análoga, por lo que dichos
sustituyentes podrían haber sido considerados bioisósteros. Sin embargo, el único parámetro fisicoquímico se
mejante en ambos es RM. Se da aquí la circunstancia de que unos efectos compensan a otros. Así, mientras que,
según la ecuación, el grupo NH, sería malo por su baja hidrofobia (n negativo), este efecto se compensa por su
constante a favorable (negativa). Para el Cl, que posee una hidrofobia favorable, existe un valor o menos favo
rable. Por supuesto, los sustituyentes que posean un valor grande y positivo de ir y negativo de o serán los más
potentes.
COO-CH2-CH2- N(CH2CH3)2
[64]
log l/C = 0.58lt - 1,26a + 0,96
n = 8: r2 = 0,870; s = 0.255
Sustituyeme it a 0.1 RM Actividad (log l/C)
NH, - 1,52 - 0.66 0.54 1,13

Cl 0,80 0,23 0,60 1.05
Figura 5.22. Actividad anestésica local en análogos de novocaína.
Cuando se analizan los parámetros fisicoquímicos de dos grupos bioisósteros. pueden comprenderse me
jor algunos resultados biológicos. Por ejemplo, el grupo CO2H y el 5-tetrazolilo se consideran bioisósteros. En
consecuencia, el heterociclo sustituye con frecuencia al ácido carboxílico en el diseño de fármacos (véase el Ca
pítulo 3). En su forma no ionizada (Tabla 5.5), ambos tienen una hidrofobia y un carácter electrónico semejan
tes, aunque el segundo tiene mayor tamaño. Sin embargo, a pH fisiológico, la forma ionizada del segundo
es = 10 veces menos hidrófila que la del primero. Quizás por eso la sustitución de CO2H por tetrazol dé tan bue
nos resultados biológicos.
'labia 5.5. Parámetros fisicoquímicos de dos grupos bioisósteros
Sustituyeme O. Jt 0.1 RM
—CO,H 0,45 -0.32 0.69
N
“tí7
0,56 -0.48 1.56
N-N
H
—co® 0.00 - 4.36 0.60
N
—tí
- 3,55 1.46
N-N®
5. QSAR 3D
Son los programas que tienen en cuenta la estructura tridimensional de las moléculas y el modo en que
ésta afecta a sus propiedades lipófilas, electrónicas o estéricas, para interpretar los enlaces con sus receptores.
La Ecuación [65] es un ejemplo de cómo pueden tenerse en cuenta estas circunstancias estructurales. La afini
dad por los canales de Ca2* de una serie de lactonas eslructuralmente relacionadas con nifedipino (véanse la
Fig. 5.23 y el Capítulo 12) varía en función del ángulo de torsión a entre el anillo de benceno y el de 1.4-dihi-
dropiridina. Este ángulo es de 90” en la conformación más activa.
log A = 0,067 (± 0,017) Aa + 0.19 (± 0.34)

n = 7,r = 0.88
A = Actividad medida por el desplazamiento de 'H-tiimodipino
Aa = desviación del ángulo respecto a 90°
Figura 5.23. Afinidad por los canales de Ca2* en función del ángulo de torsión a.
Algunos programas QSAR 3D, como el programa GRID, calculan las energías de interacción de diferen
tes átomos en la superficie de una proteína cuya estructura tridimensional se conoce. El programa LUDI identi
fica los grupos lipófilos, donadores o aceptores de hidrógeno, etc., de una proteína, buscando en una base de da
tos los posibles ligandos y estudiando, posteriormente, otras posibles interacciones. El análisis CoMFA
(Comparative Molecular Field Analysis) y otros, se comentarán brevemente en el Capítulo 6.
6. DISEÑO DE SERIES POR MÉTODOS SEMICUANTITATIVOS
Cuando se posee un «cabeza de serie» de actividad conocida y se quiere mejorar dicha actividad, es necesario
analizar un conjunto de derivados (véase el Capítulo 4). La elección de los análogos no debe realizarse al azar,
sino que existen diferentes estrategias para obtener la máxima información con un número mínimo de compues
tos. lo que supone un menor esfuerzo sintético y menor número de ensayos biológicos.
Una de las primeras, desarrollada por Craig (Fig. 5.24), consistió en representar en un espacio de dos di
mensiones las variables utilizadas, por ejemplo, n frente a a,„ para sustituyentes en el anillo aromático, con el
fin de escoger aquéllos para los que las variables no fueran colineares. Es decir, si se quiere estudiar cuatro nue
vos análogos, se debería elegir un sustituyeme de cada cuadrante.
Topliss desarrolló otra técnica, no matemática, que permite considerar a la vez varios parámetros físico-
químicos. Para derivados aromáticos, por ejemplo (Fig. 5.25), el punto de partida es el derivado aromático no
u menos activo; +, más activo; =. equiactivo.

b Los valores entre corchetes indican alternativas.
Figura 5.25. Árbol de decisión de Topliss para el diseño de derivados de sustitución en el anillo bencénico1’7'.
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA-ACT1VIDAD... II I
sustituido, para el que se determina la actividad biológica. A continuación, y en forma de árbol de decisión, el
procedimiento continúa ensayando el efecto de un sustituyente hidrófobo (4-cloro) en el sistema, y clasifica su
potencia como mayor, igual o menor que la del predecesor. El resultado de esta comparación inicial determina
cómo seguir, basándose en las propiedades electrónicas, esféricas e hidrófobas que determinan la bioactividad. y
el proceso se repite hasta alcanzar el punto final en una rama del árbol, es decir, el compuesto de mayor activi
dad. Es posible superar el valor óptimo de una variable fisicoquímica (ir, a o Es), obteniéndose un compuesto
menos activo que el anterior.
Topliss ha propuesto también un esquema de sustitución en compuestos alifáticos (véase la Fig. 5.26), en
la que el fármaco patrón o estándar es el que lleva un sustituyente CHt. y en lugar de examinar los efectos de un
grupo cloro, el primer derivado que se estudia es el que lleva un grupo isopropilo. Este método es útil siempre
que el ensayo biológico sea rápido comparativamente con el tiempo de síntesis.
CH,
ÉCjH, Í¿,H,
1 I ,___________ I
H; CHjOCH,; CH.SOJCH, -| -| »| -| .| +|
C2Hj CjHj C2H} ciclo-C5H9 cido-C}HQ ciclo-C5H9
ciclo-C6Hj
CHCI2; CF3; CH2CF3; CH2SCH3 ctcIo-C4H7[CH2-cícIo-C3H3]
CH2C6H.
1 II'
1 1
C.H,; CHjC.H, í-C.H, (CH^C.H,
a menos activo; +. más activo; =. cquiactivo.

b Los valores entre corchetes indican alternativas.
Figura 5.26. Árbol de decisión para el diseño de análogos en series alifáticas^.
Entre otras técnicas utilizadas para descubrir la actividad óptima en una serie utilizando el mínimo núme
ro de compuestos destaca el método de Fibonacci, basado en la serie de números 1, 2, 3, 5, 8, 13, 21......en la
que. a partir del tercero, cada uno de ellos es la suma de los dos anteriores. Esta técnica se ha utilizado para de
terminar la longitud óptima de una cadena lateral alifática. Para aplicarla hay que decidir cuál es la propiedad
que define la actividad biológica (p. ej.. log P) y en qué rango se encuentra el valor óptimo de dicha variable.
Los dos primeros análogos a sintetizar son los que corresponden a los dos números de Fibonacci por debajo del
límite superior.
En la Figura 5.27. se representa un ejemplo de aplicación del método para la elección del número de
grupos metileno que resulta óptimo para una determinada actividad biológica. Supongamos que la actividad
Número 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 II 12 13
Comparación 1
Potencia
Número 1 2 3 4 5 6 7 8
Comparación 2
Potencia
Número 4 5 6 7 8
Comparación 3 * •
Potencia
Número 6 7 8
Comparación 4 • •
Potencia
Figura 5.27. Aplicación del método de Fibonacci para la elección de análogos en el diseño de series.
1 12 INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
puede variar de acuerdo con la longitud de una cadena hidrocarbonada que posea de I a 13 átomos de carbo
no. Según el método Fibonacci, debemos empezar a sintetizar los compuestos que tengan 8 y 5 átomos de
carbono, que corresponden a los dos números de Fibonacci por debajo del límite superior (13). Supongamos
que, comparando la actividad de estos dos compuestos, resulta más activo el que posee 5 átomos de carbono
en la cadena. A continuación, deberíamos sintetizar el análogo con 3 átomos de carbono, ya que se corres
ponde con el número de Fibonacci inmediatamente inferior a 5. En nuestro ejemplo, este último compuesto
es menos activo, por lo que no sintetizaríamos ningún análogo con menor número de carbonos. A continua
ción, deberíamos sintetizar compuestos situados entre los números de Fibonacci 5 y 8. Así, en la compara
ción tercera se preparó el de 6 carbonos y, como era más activo que el de 5, se siguió con el compuesto de 7
carbonos, esta vez menos activo, de donde se deduce que la cadena de 6 átomos es la que conduce a una ma
yor actividad.
El método «simplex» es una figura geométrica definida por un número de puntos igual al número de va
riables independientes más uno (n + I). En un diseño con dos variables independientes, el «simplex» es un
triángulo; con tres, un tetraedro, etc. Si suponemos que la actividad biológica puede describirse en función de tt
you otra combinación de dos parámetros, cada derivado de una serie, o el sustituyente que lo caracteriza, pue
de representarse como un punto en un sistema de coordenadas bidimensional. El «simplex» que se forma en es
te caso será un triángulo cuyos vértices representarían tres compuestos análogos.
En el trío formado por los compuestos 1. 2 y 3, el análogo de menor actividad biológica, por ejemplo 1 en
la Figura 5.28, es reemplazado por el punto 4, que corresponde a su imagen respecto al segmento que une 2 con
3. El nuevo «simplex» contiene los dos compuestos más potentes del triángulo original y un tercero obtenido
por reflexión. El análogo 4 puede ser más, igual o menos activo que los compuestos 2 y 3. En el ejemplo, 2 es el
menos activo de este segundo triángulo, lo que nos lleva a 5. y el proceso se continúa hasta obtener el derivado
de bioactividad óptima. En la Figura 5.28, el orden de actividad biológica es el numérico: 1<2<3<4<5< 6.
El proceso se detiene cuando el último punto coincide con uno ya existente, o cuando no es posible sinte
tizar más derivados. Si fuera necesario trabajar con más de dos variables independientes, existen versiones ade
cuadas para ordenador.
Figura 5.28. Método «simplex» con dos variables independientes (o y a).
Existen otros métodos semicuantitativos cuya descripción queda más allá del objeto de este texto.
OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOTIPO: CORRELACIONES ESTRUCTURA QUÍMICA-ACTIVIDAD... I 13
BIBLIOGRAFÍA
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TOPLISS. J. G. (ed.): Quantitative Structure-Activity Relationships of Drugs, Academic Press. New York. 1983.
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Modelos moleculares tridimensionales

y su uso en el estudio de las relaciones
estructura-actividad
Ferran Sanz
1. INTRODUCCIÓN
En capítulos anteriores, se ha comentado la necesidad de considerar las relaciones existentes entre la estructura
química de los compuestos y su actividad biológica para llevar a cabo un diseño racional de nuevos fármacos, y se
ha presentado un conjunto de técnicas que permiten estudiar dichas relaciones, incluso desde un punto de vista
cuantitativo. La mayor parte de aquellos métodos tienen en común el hecho de poderse llevar a cabo sin necesidad
de conocer la estructura tridimensional de los compuestos. En los últimos años, y gracias sobre todo al gran auge
de la Informática, se han desarrollado nuevos y potentes métodos que estudian las relaciones estructura-actividad
mediante descripciones moleculares que tienen en cuenta las posiciones relativas en el espacio de los átomos que
forman las moléculas. Dichas descripciones moleculares incluyen a menudo cálculos energéticos o de propiedades
moleculares. La complejidad de los cálculos matemáticos necesarios y de las representaciones gráficas de los mo
delos hace que los ordenadores sean un instrumento imprescindible para el desarrollo y la aplicación de estos nue
vos métodos. Para referirse a ellos, se acostumbra a usar términos como modelización molecular y diseño de fár
macos asistido por ordenador (molecular modelling y computer-assisted drug design).
2. REPRESENTACIÓN GRÁFICA DE UNA MOLÉCULA
Existen distintas formas de representar la estructura tridimensional de las moléculas, la mayor parte de las
cuales fueron ideadas hace bastantes años y construidas entonces con materiales sólidos, como madera, metal
o plástico. Entre dichos procedimientos de representación, los más corrientes son el CPK, desarrollado por
Corey, Pauling y Koltun (véase la Fig. 6.1), y el Dreiding (véase la Fig. 6.2). En el caso de los modelos CPK,
los átomos se representan mediante esferas que siguen un código de color para indicar el elemento de que se
trata. Dichas esferas tienen un radio proporcional al de van der Waals y son secantes entre ellas para que las
distancias entre los centros de las esferas sean proporcionales a las distancias de enlace. Con este sistema de
representación, se consigue una buena imagen del volumen molecular. Los modelos Dreiding consisten en
segmentos que representan los distintos enlaces de la molécula. En los sistemas sólidos clásicos, los modelos
Dreiding se construyen con varillas que se unen con unas piezas que, por su forma, proporcionan los ángulos
adecuados entre los distintos enlaces. Existen también sistemas mixtos de construcción de modelos molecu-
Figura 6.1. Modelo CPK de la cafeína.
lares, basados en bolas y varillas. Todos estos modelos pueden ser simulados mediante el ordenador. En tal
caso, hay que tener en cuenta que no se obtienen modelos tridimensionales reales, sino proyecciones de éstos
en el plano de la pantalla del ordenador. La sensación de relieve se consigue con distintos procedimientos, el
más sencillo de los cuales consiste en que los objetos «más cercanos» al observador oculten a los que quedan
por detrás. Otros sistemas consisten en simular una iluminación lateral de dichas esferas, con lo que se pro
vocan reflejos, sombras y distintas intensidades de color. Otro procedimiento consiste en dotar de mayor lu
minosidad a los objetos que están «más cerca» del observador. Finalmente, existe la posibilidad de crear mo
delos tridimensionales virtuales, proyectando alternativamente en la pantalla imágenes estereoscópicas y
ayudándose con unas gafas especiales.
Los modelos moleculares obtenidos con el ordenador presentan muchas ventajas como, por ejemplo. la
posibilidad de cambiar instantáneamente de un sistema de representación a otro, modificar las distancias y án
gulos de enlace a nuestro libre albedrío, o superponer varias moléculas para demostrar sus semejanzas o dife
rencias estructurales, tal como se muestra en la Figura 6.3, así como la posibilidad de visualizar también propie-
Figura 6.2. Modelo Dreiding de la cafeína.

MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN EL ESTUDIO DE LAS RELACIONES... 1 17
dades de los compuestos (véanse las representaciones gráficas del potencial electrostático molecular que se
muestran más adelante).
Figura 6.3. Superposición de la estructura tridimensional de la serotonina (trazo grueso) con la de la 8-OH DPAT (trazo
fino), un agonista selectivo del receptor 5-HT|A. apreciándose la coincidencia en el espacio de los anillos aromáticos y de
los grupos amina e hidroxilo. Realizado con el programa BIOS1M.
En el caso particular de las proteínas, para evitar que la complejidad de su estructura produzca una repre
sentación gráfica excesivamente enmarañada, se tiende a simplificarla, presentando únicamente una línea, cinta o
tubo que sustituye la secuencia de enlaces peptídicos, o reemplazando las hélices a por cilindros y las láminas 0
por flechas (véase la Fig. 6.4).
Figura 6.4. Modelo 3D del citocromo P450 1A2, obtenido por homología a partir del citocromo P450 BM3 (J. J. Lozano,
E. López de Briñas, N. B. Centeno, R. Guigó y F. Sanz. J. Comput.-Aided Mol. Des. 11. 395-408. 1997).
3. COORDENADAS MOLECULARES
Las moléculas y los sistemas moleculares quedan unívocamente definidos por la naturaleza de los átomos que
los componen, la posición relativa de los núcleos de dichos átomos y su carga neta (diferencia entre el número
de protones y de electrones del sistema). Existen distintos procedimientos para especificar las posiciones de los
núcleos, siendo los más habituales las coordenadas cartesianas y las coordenadas internas.
Las coordenadas cartesianas consisten en describir cada núcleo mediante sus correspondientes proyeccio
nes sobre tres ejes perpendiculares arbitrarios, a los que nos referimos mediante las letras ry z. Las coordenadas
cartesianas presentan el inconveniente de que los valores de las proyecciones dependen de los ejes elegidos, pu-
diendo describirse una misma estructura molecular con coordenadas absolutamente distintas.
En cuanto a las coordenadas internas, consisten en definir la posición de cada núcleo en relación con
otros. Se toma como origen de este sistema de descripción un núcleo cualquiera. El siguiente núcleo que se
pretende especificar queda perfectamente definido mediante la distancia que lo separa del primero. El tercer
núcleo requiere ser descrito mediante una distancia respecto a otro anterior y mediante el ángulo que forman
los tres núcleos. A partir de ahí, cualquier núcleo se define mediante una distancia respecto a otro, mediante
un ángulo plano respecto a otros dos y mediante un ángulo diedro respecto a otros tres núcleos (véase, la Fi
gura 6.5). Los valores de los ángulos diedros resultan imprescindibles para definir las distintas geometrías
(«confórmeros») que se pueden obtener al girar una parte de una molécula respecto a otra con la que está uni
da mediante un enlace simple. Así, en el caso del 1,2-dicloroetano, el valor 0" del ángulo diedro Cl-C-C-Cl in
dicará el confórmero cisoide de los átomos de cloro, mientras que cl valor 180“ de dicho ángulo indicará el
confórmero transoide (véase la Fig. 6.6). En la Figura 6.6 se muestra el sistema de proyección de Newman,
que sirve para representar los confórmeros que se obtienen al ejecutar rotaciones alrededor de un enlace sim
ple. En dicho sistema, el enlace sencillo se representa por un cilindro que, observado perpendicularmente a
una de sus bases, se ve como un círculo; los sustituyentes del átomo más próximo al observador se superpo
nen a dicho círculo, mientras que por detrás del círculo asoman los sustituyentes del átomo más alejado. Los
ángulos diedros también sirven para especificar isómeros geométricos cis-trans o isómeros ópticos. Así. el va
lor 0” del ángulo diedro CI-C-C-CI define el cis-1,2-dicloroetileno. mientras que el valor 180“ indica el trans-
1.2-dicloroetileno. Véase la sección de este mismo capítulo titulada análisis conformacional para profundizar
más sobre este tema.
Figura 6.5. Esquema de la estructura molecular del formaldehído sobre el que se muestran las relaciones geométricas en
tre sus núcleos (coordenadas internas).
Para que un sistema molecular quede definido de una forma absolutamente unívoca, las coordenadas de
sus núcleos se acompañan de sus correspondientes números atómicos y de la carga neta, salvo que, por defecto,
se suponga que es nula (véase la Fig. 6.7).
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN EL ESTUDIO DE LAS RELACIONES... 119
Figura 6.6. Conformaciones cisoide y transoide del 1.2-dicloroetano. En la parte inferior, se muestran las correspondien
tes proyecciones de Newman.
Figura 6.7. Coordenadas internas y cartesianas del formaldchído en el formato del programa MOPAC.
4. OBTENCIÓN DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE UN COMPUESTO
Los espectros de difracción de rayos X constituyen el método más habitual para determinar experimen
talmente la estructura tridimensional de las moléculas. Dichos espectros se realizan mediante cristales de la mo
lécula de interés, puesto que un cristal es una repetición ordenada de unidades de la estructura molecular, lo que
hace que las desviaciones que sufren los rayos X al atravesar un cristal reflejen dicha estructura. Los rayos X es
tán especialmente indicados por su corta longitud de onda, que es aproximadamente la mitad de la distancia de
enlace carbono-carbono. A veces, los espectros de difracción se hacen, en lugar de con rayos X. bombardeando
las moléculas con partículas subatómicas como electrones o neutrones. En el caso de las proteínas, las estructu
ras obtenidas son menos precisas que en las moléculas más pequeñas. Ello se debe a la relativa flexibilidad que
poseen algunas partes de las proteínas, la cual les permite ocupar diferentes posiciones, incluso en un cristal.
Las geometrías moleculares obtenidas mediante espectros de difracción de estructuras cristalinas, aunque
resultan muy útiles, no proporcionan toda la información estructural necesaria en las moléculas biológicas, pues
la geometría de éstas que nos interesa no es aquélla que adoptan cuando a su alrededor tienen una estructura or
denada de moléculas iguales (tal como ocurre en un cristal), sino la geometría de las biomoléculas cuando se
encuentran en disolución o interacluando con otras biomoléculas distintas, tal como ocurre cuando un ligando
interactúa con su receptor biológico. A este respecto, estudios de espectroscopia de resonancia magnética nu-
clear (RMN) permiten la comparación de estructuras en disolución con las cristalinas. Esta técnica permite estu
diar. entre otros aspectos, los efectos del solvente, la rotación de anillos aromáticos, la variación de las estructu
ras con el pH. así como las interacciones intra e intermoleculares (por ensanchamiento de determinadas señales,
en este último caso). Por otra parte, resultan especialmente atractivos los datos de difracción de rayos X que en
los últimos años se están obteniendo a partir de cristales constituidos por complejos fármaco-receptor1, como
por ejemplo el formado por el metotrexato y la dihidrofolato reductasa (véase la Fig. 6.8).
Figura 6.8. Representación gráfica de la estructura tridimensional del complejo del metotrexato con la dihidrofolato re
ductasa de E. cali.
Las dos bases de datos (archivos informáticos) más importantes que contienen geometrías moleculares
experimentales son la Cambridge Structural Database (CSD) y la Brookhaven Protein Data Bank (PDB). La
CSD contiene más de 2(X).(XX) geometrías de compuestos orgánicos y organometálicos. Por su parte, la base de
datos PDB contiene estructuras cristalográficas de biopolímeros. como proteínas y ácidos nucleicos, así como
geometrías de complejos ligando-receptor. Actualmente la PDB contiene más de 12.000 entradas, aunque a ve
ces varias entradas se refieren a la misma proteína. Ese número es importante, aunque todavía resulta muy mo
desto en comparación con el número de biopolímeros que existen e incluso respecto a aquéllos de los que se co
noce su secuencia. Este hecho es el que ha llevado al desarrollo de los métodos teóricos de predicción de la
estructura terciaria de las proteínas, que se describen en otro apartado de este capítulo.
Si no se dispone de los datos experimentales de una molécula, se puede empezar a construir un modelo de
su estructura tridimensional asignando a sus coordenadas internas valores estándar, como los que se proporcio
I Lehn ha acuñado el término «química supramolceular» para referirse al estudio de la estructura y las funciones de los sistemas
moleculares que resultan del enlace no envalente entre un fármaco o ligando y su receptor biológico. La nomenclatura ligando-receptor se
aplica también, en sentido amplio, a las interacciones entre enzimas y sus sustratos o inhibidores.
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN EL ESTUDIO DE LAS RELACIONES- 121
nan en la Tabla 6.1, que se obtuvieron promediando los valores experimentales que dichas coordenadas intemas
adoptan en series de compuestos previamente estudiados.
Tabla 6.1. Datos geométricos estándar1
Enlace' Longitud (A) Enlace2 Longitud (A)
Enlaces simples Enlaces dobles
C4-H 1.09 C3-C3 1.34

C3-H 1.08 C3-C2 1.31
C2-H 1.06 C3-N2 1.32
N3-H 1.01 C3-OI 1.22
N2-H 0.99 C2-C2 1.28
O2-H 0.98 C2-N2 1.32
C4-C4 1.54 C2-O1 1.16
C4-C3 152 N3-O1 *
1.24
C4-C2 1.46 N2-N2 1.25
C4-N3 1.47 N2-O1 1.22
C4-N2 1.47
C4-O2 1.43
C4-F 1.37 Enlaces triples
C4-CI 1.77
C4-Br 1.94 C2-C2 1.20
1.46 C2-NI 1.16
C3-C3
C3-C2 1.45 Nl-Nl LIO
C3-N3 1.40’
C3-N2 1.40
C3-O2 1.36 Enlaces aromáticos
C3-F 1.33
C3-CI 1.71 C3-C3 1.40
C3-Br 1.87 C3-N2 1,34
C2-C2 1.38 N2-N2 1.35
C2-N3 1.33
1 33
C2-O2 L36
C2-F 1.30 Angulos
C2-CI 1.64
C2-Br 1.79 Trigonal 120°
N3-N3 1.45 Tciraédrico 109.47”
N3-N2 1.45 C-O-H 108"
N3-O2 1.36
X2-N2 1.45
N2-O2 1.41
' Se trata de una selección para moléculas de interés biológico

■’ El número que aparece tras el símbolo del elemento indica el número de enlaces que parten de el hacia átomos distintos.
1.32 Á en el grupo N-C=O.
' Enlaces dobles parciales correspondientes al grupo NOj.
Para simplificar la construcción de estructuras moleculares a partir de distancias y ángulos estándar, la

mayoría de los programas de modelización molecular que existen en el mercado incorporan un módulo que per
mite realizar dicha construcción en forma gráfica e interactiva, a partir de átomos o fragmentos moleculares pre
definidos. Así, por ejemplo, construir la estructura del fenol es algo tan sencillo como señalar gráficamente la
estructura predefinida del benceno, señalar luego uno de los hidrógenos del benceno y sustituirlo por un hidro-
xilo, cuyo hidrógeno se coloca automáticamente formando un ángulo de aproximadamente 108" con el carbono.
Los mejores programas de construcción interactiva de modelos moleculares incorporan reglas que, por ejemplo,
hacen que el hidrógeno del hidroxilo aparezca coplanar con el anillo aromático o que. en otro caso, se generen
automáticamente los confórmen» transoides y no los cisoides. Las coordenadas de un sistema molecular así ob
tenidas, aunque sean aproximadas, son imprescindibles para iniciar cálculos teóricos sobre su energía, su fun
ción de onda u otras propiedades a las que nos referiremos a continuación.
5. OPTIMIZACIÓN GEOMÉTRICA
A partir de una geometría molecular inicial obtenida mediante uno de los métodos explicados anteriormente,
conviene hallar aquélla que reduce al mínimo la energía de la molécula, es decir, aquélla que la hace más estable
desde el punto de vista energético. Dicha energía puede obtenerse a través de cálculos de mecánica molecular o
de la función de onda, técnicas que se explicarán someramente en secciones posteriores.
La energía de un sistema molecular, sea cual sea la estrategia usada para el cálculo de dicha energía, es
una función de su geometría. Así, llevar a cabo una «optimización geométrica» querrá decir proceder a buscar el
mínimo absoluto de dicha función. Esta búsqueda no se realiza por métodos analíticos, sino que se hace por mé
todos numéricos, entre los cuales el más usual es el llamado «método del gradiente». En este método, cada uno
de los parámetros geométricos independientes que definen un compuesto, es decir, cada una de sus coordenadas
internas, recibe el nombre de «grado de libertad». Así, por ejemplo, en la molécula de agua existen tres grados
de libertad, que pueden ser las distancias entre los tres núcleos, o bien dos distancias y un ángulo, por ejemplo,
las distancias de los dos átomos de hidrógeno al del oxígeno y el ángulo H-O-H. Dada una molécula, podremos
elegir distintos parámetros geométricos como grados de libertad, pero su número será constante. La energía mo
lecular es una función de dichos grados de libertad.
El método del gradiente procede a localizar el mínimo energético introduciendo pequeños cambios en los
valores de los grados de libertad y analizando las variaciones que ocasionan en la energía. Si ésta disminuye,
significa que estamos modificando los grados de libertad en la dirección correcta e introduciremos nuevos cam
bios en el mismo sentido. En el caso contrario, los cambios se harán en el sentido opuesto. A medida que nos
acercamos al mínimo, lo que se detecta por una disminución de la pendiente, es decir, del cociente entre el cam
bio en la energía y el cambio en los grados de libertad, haremos movimientos menores hasta alcanzar el mínimo
con la precisión deseada (véase la Fig. 6.9).
Figu ra 6.9. Búsqueda del mínimo de la energía por el método del gradiente. Esquema con un solo grado de libertad. La
figura ilustra cómo, si en lugar de elegir el valor 1 como valor inicial del grado de libertad elegimos el valor 1', el resulta
do final será un mínimo local.
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN El. ESTUDIO DE LAS RELACIONES.. 123
Cualquier método de optimización basado en el gradiente, es decir, en la pendiente hacia el mínimo,

presenta el grave inconveniente de que puede conducimos a «mínimos locales», tal como se muestra en la Figu
ra 6.9. La forma de disminuir la probabilidad de caer en ellos es partir de una geometría inicial no demasiado
alejada de la óptima. Otra forma consiste en probar distintas geometrías iniciales.
6. ANÁLISIS CONFORMACIONAL
Recibe el nombre de confórmero cada una de las estructuras de un mismo compuesto que se obtienen al girar,
alrededor de sus enlaces simples, la parte de la molécula que queda a un lado del enlace respecto a la situada al
otro lado. Las moléculas que pueden presentar distintos confórmeros diremos que poseen flexibilidad confor-
macional.
Un análisis conformacional es una exploración de los confórmeros que se obtienen al realizar torsiones
alrededor de enlaces sencillos (grados de libertad conformacionales), observando los cambios en la energía mo
lecular que dichas torsiones conllevan. Los análisis conformacionales pueden ser sistemáticos. En tal caso, se
sigue el siguiente procedimiento:
— Se establece un incremento fijo para el valor de cada ángulo diedro o rotor considerado (por ejem
plo. 30°).
— Basándose en dicho incremento, se establecen los valores de los diedros que se consideran (por ejem
plo, 0°, 30", 60", 90", 120", 150", 180", 210", 240", 270". 300" y 330").
— Las estructuras a estudiar son todas las combinaciones posibles de los valores de un rotor con los de
cualquier otro considerado. Si. por ejemplo, se están considerando dos rotores y en cada uno de ellos
se consideran 12 valores como los enumerados en el punto anterior, el número de estructuras a estu
diar serán 12 x 12 = 144. Hay que tener en cuenta que, a medida que el número de rotores aumenta, el
número de estructuras a estudiar crece de forma combinatoria y, con ellas, el tiempo de cálculo.
— Cada una de las estructuras resultantes se optimiza geométricamente manteniendo fijos los ángulos
diedros considerados.
— Los resultados se visualizan mediante curvas, que muestran la variación de la energía al variar un gra
do de libertad conformacional (véase la Fig. 6.10), o mediante mapas, que presentan líneas isoenergé-
ticas en el plano definido por dos grados de libertad conformacionales (véase la Fig. 6.11).
Figura 6.10. Análisis conformacional del taulómero N’-H de la histamina. correspondiente a la rotación del enlace de la
cadena lateral contiguo al anillo de imidazol. La estructura que se muestra corresponde al valor 0 de dicho ángulo (la cade
na etilamina y el anillo son coplanarcs). La función de la izquierda presenta la variación de la energía al variar el ángulo de
torsión. La de la derecha presenta la variación de la distancia señalada en el esquema de la molécula. Realizado con el pro
grama BIOS1M.
=Ci-C2-N,-C1
02 = c:-n.1-c4-c5
♦i
Figura 6.11. Análisis conformacional del fentanilo al variar los ángulos de torsión 0i y ife. Las curvas de nivel correspon
den a líneas isoenergéticas. A y B indican dos de los cuatro confórmeros más estables. C indica la barrera energética que
hay que superar para pasar de una conformación a otra. Realizado con el programa B1OSIM.
— Naturalmente, para cada molécula existe un determinado confórmero que presenta la energía mínima
(a veces son varios, pero simétricos). Dicho confórmero debería coincidir con la geometría que se ob
tiene al hacer una optimización geométrica global, salvo que dicha optimización haya conducido a un
mínimo local.
Existen otras estrategias para realizar análisis conformacionales que, en casi todos los casos, no pretenden
describir la variación de la energía molecular al introducir cambios conformacionales. sino localizar conforma
ciones de energía mínima (mínimos locales).
A menudo, los análisis conformacionales se usan para estudiar hasta qué punto un ligando puede adaptar
su estructura tridimensional con el fin de introducirse y establecer las interacciones adecuadas en el sitio activo
de su receptor biológico. La estructura adecuadamente adaptada a un receptor biológico recibe el nombre de
«confórmero activo». El análisis conformacional pretende, entre otras cosas, evaluar la diferencia de energía
que existe entre el confórmero activo y el de energía mínima. Hay que tener en cuenta que los ligandos no tienen
por qué adoptar la conformación de energía mínima cuando interactúan con su receptor biológico. A cualquier
temperatura superior a 0 K. y en concreto a la temperatura fisiológica del cuerpo humano (310 K aproximada
mente). los átomos de cualquier molécula reciben una energía que hace que permanentemente estén ejecutando
una serie de movimientos, entre ellos torsiones que permiten pasar de un confórmero a otro, y uno de ellos pue
de ser el confórmero activo. La ecuación de Boltzmann permite calcular la fracción de moléculas que. a una
temperatura determinada, se hallan en conformaciones que, a lo sumo, tienen una determinada diferencia de
energía respecto a la mínima.
Una forma de determinar confórmeros activos mediante análisis conformacional consiste en la compara
ción de series de mapas como los de la Figura 6.11, correspondientes a los análisis conformacionales de series
de compuestos estructuralmente relacionados, pero que en algunos casos presentan actividad biológica y en
otros no. En dichos mapas, sólo se muestra la línea que limita los confórmeros en los que. a temperatura fisioló
gica. se encontrará un porcentaje elevado de las moléculas de acuerdo con la ecuación de Boltzmann (p. ej„ el
99 %). Dichos confórmeros se consideran energéticamente accesibles. Comparando las regiones de confórme-
ros accesibles de los mapas de las distintas moléculas, en la forma que se muestra en la Figura 6.12. en algunos
casos se pueden deducir los valores de los ángulos diedros que son esenciales para la actividad biológica, que
serían aquellos a los que pueden acceder todos los compuestos activos pero no los inactivos. Observemos que
tan importante es la información aportada por los compuestos activos como por los inactivos.
Figura 6.12. Diagramas de Venn que representan los conjuntos de conformaciones de baja energía de dos moléculas,
mostrando las conformaciones necesarias para la actividad (superficies sombreadas), a) Las dos moléculas son activas.
b) La molécula A es activa pero B no lo es. y T, son valores de dos ángulos diedros de interés.
Otra utilidad del análisis confonnacional es la monitorización de una determinada distancia interatómica
de un compuesto para ver si puede adoptar el valor requerido por un determinado farmacóforo (una cierta dis
posición espacial de características moleculares que hace que un compuesto presente una cierta actividad bioló
gica). En la Figura 6.10, se muestra un ejemplo de dicha monitorización.
7. DINÁMICA MOLECULAR
Los ordenadores no sólo permiten simular la estructura y las propiedades estáticas de las moléculas o sistemas
moleculares, sino que también permiten simular los movimientos relativos de los átomos en un contexto de ex
citación térmica (la que se produce a la temperatura T). En general, dichas simulaciones se llevan a cabo me
diante la aplicación de las leyes de Newton que rigen para el movimiento clásico de los cuerpos (átomos, en
este caso). La trayectoria de cada partícula j de masa m, se obtiene resolviendo las ecuaciones diferenciales que
describen su movimiento a lo largo de cada coordenada .v, bajo la acción de la fuerza F,¿
<fx, _ F,
di2 m,
Estas ecuaciones se relacionan con la segunda ley de Newton (F = mal. Las fuerzas F,, sobre los átomos
se deducen de los campos de energía potencial a los que están sometidos (p. ej.. los campos de fuerzas de mecá
nica molecular que se explican en la próxima sección).
Desde el punto de vista práctico, las simulaciones de dinámica molecular se usan para superar el proble
ma de los mínimos locales en las optimizaciones geométricas, para llevar a cabo análisis conformacionales en
sistemas con muchos grados de libertad (proteínas, p. ej.) o para explorar la estabilidad de sistemas moleculares
(complejos ligando-receptor, p. ej.) a determinadas temperaturas.
8. MECÁNICA MOLECULAR
Existen diversos procedimientos para hallar un valor más o menos exacto para la energía molecular. Los valores
de energía obtenidos difícilmente tienen significado en su valor absoluto, sino que casi siempre se usan para ha
llar diferencias de energía entre dos geometrías distintas de la misma molécula o conjunto de ellas, diferencias
que naturalmente se han de calcular entre energías obtenidas con el mismo método.
Una forma relativamente sencilla de obtener una energía relativa de una determinada geometría molecular
consiste en usar el formalismo de la «mecánica molecular». Dicho formalismo consiste en calcular la energía
potencial de la molécula (V) mediante una visión pragmática, que supone que los núcleos están sometidos a un
campo de fuerza (force field), que se compone de la suma de una serie de términos que modelizan las tensiones
de los enlaces, de sus ángulos, sus torsiones, las interacciones de van der Waals, las electrostáticas y las de los
puentes de hidrógeno:
V = V enlace» + V angula» + V diedro» "F E >v/H! "F V elrrir *F f' H
Esos términos corresponden a distintos aspectos que influyen en la energía molecular en función de su
geometría. Así. el primer término intenta modelizar la variación de la energía potencial al alterar la longitud de
cualquier enlace en la molécula, mediante una expresión del tipo:
V' enlac e¡
vabrtl= ZKid-lo)1
en la cual / es la distancia que. en la geometría molecular que se está considerando, existe entre dos átomos uni
dos por un enlace. I„ es la longitud óptima para dicho tipo de enlace, y K¡ es una constante apropiada. De acuerdo
con esta fórmula, la energía irá aumentando a medida que la distancia de enlace se aleja del valor óptimo.
El segundo término modeliza de forma análoga el coste energético de las deformaciones de los ángulos de
enlace:
Vdegidio
V angula» = £ Krí (B - Bu)~
siendo Sel valor que toma cada ángulo en la geometría considerada. S„ el valor óptimo correspondiente y K„ la
constante oportuna.
El tercer término es análogo a los anteriores, y calcula las contribuciones energéticas debidas a la defor
mación de todos los ángulos diedros definidos por cada cuatro átomos enlazados consecutivamente. El cuarto
término modeliza las interacciones de van der Waals entre átomos que no pertenecen a la misma molécula o
que. perteneciendo a la misma molécula, se hallan en posiciones relativas 1,4 o más alejadas todavía. Estas inte
racciones se suelen representar con un potencial de Lennard-Jones:
= ' 1>
A--A
r'i r<i
en el que r,, es la distancia entre el par de átomos i y j considerados, y A,y y B,, son unas constantes que no varían
siempre que los dos átomos son del mismo tipo (p. ej., un carbono en hibridación sp2 y el oxígeno de un carbo-
nilo).
Otro término es aquel que modeliza las interacciones electrostáticas entre átomos que no pertenecen a la
misma molécula o que se hallan en posiciones relativas 1,4 o más alejadas todavía. Este término consiste en una
expresión de energía potencial de Coulomb:
en la que q, y q, son las cargas netas de los átomos i yj.ye es la constante dieléctrica del medio.
Cabría introducir otros términos en la expresión de la energía V para modelizar otros aspectos como, por
ejemplo, los puentes de hidrógeno.
La perfección del formalismo de mecánica molecular es limitada, y los resultados obtenidos de su aplica
ción deben ser usados con prudencia, especialmente cuando la estructura molecular presenta sistemas conjuga
dos de electrones tt. Aparte de su limitada exactitud, los métodos de mecánica molecular presentan el inconve
niente del elevadísimo número de constantes o parámetros que se deben conocer para proceder al cálculo de la
energía de una molécula. Así, por ejemplo, deberemos conocer tantas constantes /C8 para términos angulares co
mo secuencias distintas de tres tipos de átomos se presenten en el compuesto considerado. El problema de la pa-
ramctrización es el caballo de batalla de estos métodos.
Un algoritmo o programa de mecánica molecular se diferencia de otro en el número de términos que
el campo de fuerzas incluye, las fórmulas para cada uno de dichos términos y los valores de los correspondien
tes parámetros. Dos algoritmos de mecánica molecular muy utilizados son el MM2/MM3, que se usa especial
mente para moléculas pequeñas, y el AMBER, que está especialmente paramelrizado para proteínas y ácidos
nucleicos.
En contraposición, la principal ventaja que ofrecen los métodos de mecánica moleculares la rapidez de
su cálculo con los ordenadores actuales. Por esta razón, estos métodos permiten la modelización de macro-
moléculas, como proteínas o ácidos nucleicos, o de sistemas constituidos por un conjunto de moléculas que
interactúan entre sí. Así. por ejemplo, con ellos se pueden calcular energías de interacción de fármacos con su
receptor.
Muchos de los programas de modelización molecular que están disponibles en el mercado incorporan es
te método para el cálculo de energías moleculares, que se utilizan para llevar a cabo optimizaciones geométricas
y análisis conformacionales. Hay que tener cuidado con las estructuras «energéticamente optimizadas» que di
chos programas suministran. El entrecomillado anterior pretende llamar la atención sobre la posible inexactitud
de dichas estructuras por culpa de las imperfecciones de los métodos de mecánica molecular y por la posibilidad
de obtener mínimos locales.
9. FUNCIÓN DE ONDA MOLECULAR
Una forma mucho más compleja, pero también mucho más exacta, para encontrar la energía asociada a una de
terminada geometría de una molécula se obtiene a partir de la resolución de la ecuación de Schrodinger, es de
cir, mediante los postulados de la Química Cuántica. Mediante dicha resolución se obtiene no sólo la energía del
sistema, sino también una descripción de su estructura electrónica, pues la función de onda molecular nos per
mite obtener una descripción de la densidad electrónica en cada uno de los puntos del entorno molecular.
Como ya se ha comentado, la resolución de la ecuación de Schrodinger tiene una gran complejidad y, de
hecho, dicha ecuación sólo se ha podido resolver exactamente para el átomo de hidrógeno, es decir, para un sis
tema compuesto por un protón y un electrón. En el resto de los sistemas moleculares se debe introducir un con
junto de aproximaciones que condicionan la calidad de los resultados obtenidos. En el caso de las moléculas de
interés biológico, algunas de las aproximaciones que se acostumbran a introducir son las siguientes:
— La aproximación de Bom-Oppenheimer, según la cual los núcleos no se mueven.
— La aproximación de orbitales atómicos y moleculares, según la cual la función de onda de cualquier

sistema polielectrónico se aproxima mediante un producto de funciones de onda monoelectrónicas.
Así, por ejemplo, los orbitales atómicos pueden ser los conocidos I s, 2s, 2p. etc., habiendo pares de
cada uno de ellos, que son iguales desde un punto de vista espacial, pero se diferencian en el número
cuántico de espín. En este caso, la función de onda del átomo de carbono, por ejemplo, se expresaría
mediante el producto:
l.¿ • 2? • 2p2
en el que los exponentes indican el número de electrones con espín opuesto que se describen con el ci
tado tipo de orbital atómico. En general, la función de onda de un atómo se expresa como un produc
to de funciones monoelectrónicas de la siguiente manera:
<> = Xi Xi Xr-........X»
La parte espacial de cada orbital atómico se representa mediante una función matemática de Slater
(Slater Type Orbitals. STO). que a su vez se aproxima mediante una combinación lineal de funciones
de Gauss (Gaussian Type Orbitals. GTO).
En cuanto a los orbitales moleculares, tienen una expresión análoga del tipo:
y = <p, • <p: • q>3 •........ <p„
— Otra aproximación que se acostumbra a introducir es la LCAO (Linear Combination of Atomic Orbi
tals}. según la cual los orbitales moleculares monoelectrónicos <p, se obtienen mediante una combina
ción lineal de los orbitales atómicos de los átomos que componen la molécula:
vos
<P, = Sc«-Xi
t
La calidad de la función de onda molecular resultante dependerá, entre otros factores, de la calidad y can
tidad del conjunto de orbitales atómicos, que recibe el nombre de base. Bajo estas aproximaciones, «calcular»
una función de onda consiste en determinar el conjunto de coeficientes c„ que hace mínima la energía de la mo
lécula. Dado que cada electrón se halla bajo el campo eléctrico del resto, cada orbital molecular monoelectróni-
c«> <p, dependerá de los demás, y la búsqueda del mejor conjunto de coeficientes deberá ser iterativa. Dicha apro
ximación recibe el nombre de campo autocoherentc (Self-Consistent Field, SCF).
Si las aproximaciones anteriores son las únicas que se introducen, diremos que nos hallamos ante un
cálculo ab initio HF-SCF (HF. Hartree-Fock). cuya calidad dependerá básicamente de la dimensión de la base
utilizada para representar cada uno de los átomos de la molécula. La base mínima que se utiliza es la STO-3G,
una base en la que cada átomo se representa con sus orbitales atómicos ocupados totalmente o parcialmente
(l.v, 2s, 2/>,. 2py y 2p-_, en el caso del carbono), y a su vez cada uno de estos orbitales se representa mediante
tres funciones de Gauss o gausianas. Otras bases atómicas utilizadas en moléculas de interés biológico, es de
cir. de un cierto tamaño, son la 3-21G o la 6-31G. Hay que tener en cuenta que el tiempo de cálculo con orde
nador de una función de onda depende aproximadamente de la cuarta potencia del número total de funciones
de base: es decir, que el tiempo de cálculo se disparará al aumentar el número de átomos de una molécula o al
incrementar el número de funciones de base que utilizamos para describir cada uno de ellos. Los resultados
HF-SCF se pueden mejorar con los métodos llamados de interacción de configuraciones (Configuration Inte
raction, Cl). aunque su utilización en el abordaje de problemas biológicos es escasa, debido a su elevado coste
computacional.
Unos métodos alternativos a los HF-SCF, que están adquiriendo mucho auge en la determinación de la
energía y estructura electrónica de las moléculas, son los llamados métodos de la teoría del funcional de la den
sidad (Density Functional Theory. DFT). Estos métodos se basan en el teorema de Hohenberg-Kohn. que per
mite expresar la energía electrónica total de una molécula basándose en su función de densidad electrónica p.
Dado que cualquier función de densidad electrónica incorrecta producirá valores de la energía superiores a los
verdaderos, la minimización de E = f(p) nos permitirá encontrar los valores correctos de E y p. Con dichos re
sultados. podremos describir todas las propiedades del estado fundamental de la molécula.
Frente a los métodos ab initio, existen otros que incorporan más aproximaciones. Así. los llamados méto
dos semiempíricos consideran únicamente los electrones de la capa de valencia (2s2 ■ 2p"’. en el caso del carbo
no). omiten determinados términos en el cálculo de las interacciones interelectrónicas y. para compensar dichas
simplificaciones, modifican empíricamente los parámetros de las fórmulas para que ciertos resultados de los
cálculos coincidan al máximo con los correspondientes resultados experimentales. En dichos métodos se habla
de cores para referirse a los núcleos más los electrones de las capas internas de cada átomo. Los métodos sc-
miempíricos más utilizados en la actualidad son los llamados MNDO y AM I, especialmente este último. Exis
ten otros métodos con aproximaciones más drásticas todavía que las de los semiempíricos, como aquéllos que
prescinden totalmente de los términos bielectrónicos, considerando que cada función de onda monoelectrónica
es independiente de las demás y haciendo, por tanto, innecesario el proceso iterativo de cálculo. Entre estos úl
timos se halla el método de Hückel extendido (Extended lliickel Theory. EHT).
Por último, conviene señalar la existencia de los llamados métodos mixtos QM/MM (Quantum Mecha-
nics/Molecular Mechanics) que, como su nombre indica, usan formalismos quimicocuánticos para modclizar
un subconjunto critico de los átomos del sistema (p. ej„ aquellos directamente implicados en la interacción en
MODULOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN EL ESTUDIO DE LAS RELACIONES... 129
iré un fármaco y su receptor), mientras que el resto de los átomos se modelizan usando métodos de mecánica
molecular que. como se ha comentado anteriormente, son mucho menos costosos, desde un punto de vista com-
putacional.
Si se exceptúa el método de Hückel, que ha caído prácticamente en desuso, cualquier método químico-
cuántico o mixto requiere un considerable tiempo de cálculo para la modelización de moléculas de interés bio
lógico. Este hecho, unido a la complejidad de los algoritmos que subyacen, crean una cierta prevención frente al
uso de estos métodos. Frente a ello, hay que argumentar que los ordenadores potentes cada vez. son más asequi
bles y que existen programas que pueden utilizarse como «cajas negras», es decir, prescindiendo de la comple
jidad matemática de los métodos subyacentes. Entre dichos programas. GAUSSIAN es uno de los que se usan
para cálculos ah initio, mienlras que AMPAC o MOPAC lo son para cálculos semiempíricos. Dichos programas
necesitan como datos de partida poca cosa más que la geometría molecular, y generan como resultados las ener
gías moleculares y orbitales, los coeficientes c,y o vectores propios, así como propiedades moleculares que deri
van de ellos y que se comentan a continuación.
10. PROPIEDADES DERIVADAS DE LA FUNCIÓN DE ONDA MOLECULAR
La función de onda molecular contiene toda la información relativa a la distribución electrónica del compuesto
en cuestión. Dado que las distintas propiedades químicas y, por tanto, las biológicas, dependen de dicha distri
bución electrónica, a partir de los resultados del cálculo de la función de onda se pueden deducir parámetros con
gran significación química que. a su vez, se pueden relacionar con actividades biológicas.
Así. uno de los resultados suministrados por los cálculos quimicocuánticos son las energías asociadas a
cada uno de los orbitales moleculares. Estas energías reciben también el nombre de valores propios (eigenva
lues) y. en las moléculas neutras, son negativas en el caso de los orbitales ocupados, y positivas en el caso de los
orbitales no ocupados o virtuales. En la Figura 6.13 se muestra un esquema con los seis orbitales moleculares
resultantes de un cálculo semiempírico AM1 sobre la molécula de agua. Como se trata de un método que consi
dera únicamente electrones de valencia, serán ocho los que se deberán considerar, seis electrones correspon
dientes al oxígeno y uno a cada hidrógeno. Estos ochos electrones se distribuirán en los cuatro orbitales de ener
gía menor, que es negativa en todos los casos.
Según el teorema de Koopman, el potencial de ionización de un compuesto, o energía necesaria para
arrancarle un electrón y formar el correspondiente catión, es aproximadamente igual a la del último orbital mo
lecular ocupado (Highest Occupied Molecular Orbital. HOMO). En cuanto a la afinidad electrónica, o energía
necesaria para incorporar un electrón a la molécula y formar un anión, se puede aproximar mediante la energía
del primer orbital no ocupado (Lowest Unoccupied Molecular Orbital. LUMO). aunque esta última aproxima
ción es especialmente inexacta. Se puede intentar correlacionar estos parámetros con propiedades biológicas en
las que existe algún indicio de que las formas iónicas desempeñan algún papel.
Una información más útil que la anterior para el estudio de las relaciones estructura-actividad es la re
lativa a las propiedades electrostáticas de la molécula. A partir de la función de onda, y mediante distintos
procedimientos que dan resultados apreciablemente diferentes, se puede asignar una fracción de la densidad
electrónica a cada uno de los átomos de la molécula. Así, mediante un cálculo AM I de la molécula de agua y
el llamado análisis de población de Mulliken, podemos obtener una densidad electrónica atribuible al oxíge
no igual a 6,3828 electrones de valencia, mientras que la atribuible a cada uno de los átomos de hidrógeno es
de 0,8086 electrones. Expresándolo de otra forma, y dado que un átomo aislado de oxígeno tiene seis electro
nes de valencia y uno de hidrógeno tiene uno. se puede decir que en la molécula de agua existe una carga ne
ta sobre el átomo de oxígeno igual a -0,3828 (el 8 que aparece en algunos esquemas moleculares), y unas
cargas netas sobre cada átomo de hidrógeno igual a 1-0,8086 = +0,1914 (el 8'). Estas cargas netas 8, sobre
los núcleos guardan una cierta relación con la reactividad de cada centro de la molécula, y por ello constitu
yen un parámetro que se ha usado con éxito para correlacionarlo con actividades biológicas. Si, por ejemplo,
existe un heteroátomo que se repite en una serie de compuestos con distinta actividad, y se sospecha que pue
de estar involucrado en el mecanismo de acción biológica, se puede estudiar si existe una correlación signifi
cativa entre la carga neta sobre dicho átomo y la actividad. Los programas de cálculo de funciones de onda
proporcionan otras propiedades de naturaleza electrostática que pueden ser útiles para el estudio de biomolé
culas, como es el caso del momento dipolar.
Figura 6.13. Energías asociadas a los orbitales moleculares del agua, obtenidas mediante un cálculo semiempírico AM 1.
Sin embargo, la propiedad electrostática molecular que goza de más popularidad y que ha demostrado ser
más útil en el estudio de las relaciones estructura-actividad es el «potencial electrostático molecular» (PEM). La
definición de esta propiedad es la habitual en la física clásica: el PEM en un punto situado en el entorno de una
molécula es igual a la energía necesaria para trasladar una unidad de carga positiva desde el infinito al punto en
cuestión, bajo el campo eléctrico generado por la distribución de cargas de la molécula. La Figura 6.14 ilustra
esta definición.
Figura 6.14. Esquema de la definición del potencial electrostático molecular (PEM) en un punto cuyas coordenadas son
R. IRJ representan las coordenadas de los núcleos de los átomos de la molécula considerada, {ZJ representan las cargas
netas de dichos átomos y p(r) la función de densidad electrónica de la molécula.
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN EL ESTUDIO DE LAS RELACIONES. 131
En cuanto al algoritmo para el cálculo del PEM, caben dos planteamientos de muy distinta complejidad.
El método más sencillo, llamado aproximación de cargas puntuales, supone que el campo eléctrico generado
por la molécula lo es por un conjunto de cargas netas 8.. situadas en la posición de cada uno de los núcleos, y la
fórmula resultante es la siguiente:
X
núcietu
V<R) = z —-—
I l/?-/?J
donde V(R) es el valor del PEM en el punto R del espacio y R, son las coordenadas de los distintos núcleos.
Las cargas netas 8, se pueden obtener mediante cálculos quimicocuánticos, tal como se ha explicado anterior
mente.
El segundo algoritmo, que resulta mucho más correcto aunque también mucho más costoso en cuanto a
tiempo de cálculo, tiene en cuenta que el campo eléctrico molecular es generado por un conjunto (Z, | de cargas
nucleares, o de cargas efectivas de los cores en el caso de los métodos semiempíricos, y por la distribución de
densidad electrónica de la molécula p(r). Con estos supuestos, la fórmula del PEM adopta la siguiente expre
sión:
V(R) = ------ í-^>-dr

/ I R-R,\ J IR-rl
en la que el término generado por la distribución de densidad electrónica se integra sobre todos los puntos del
espacio, simbolizados mediante la variable r. La distribución de densidad electrónica de la molécula. p(r). se
debe obtener mediante el cálculo de su función de onda.
El PEM, que va tomando valores distintos en cada punto del espacio, se presta a ser representado gráfica
mente. La forma más sencilla de hacerlo consiste en elegir un plano y dibujar sobre él curvas isopotenciales que
unen puntos con el mismo valor de PEM, tal como se muestra en la Figura 6.15. Otro procedimiento consiste en
representar superficies isopotenciales sobre una representación tridimensional de la molécula, según se presenta
en la Figura 6.16. Por último, existe otra forma de representar el PEM. que consiste en colorear una superficie
que envuelve la molécula según el valor que el PEM adopta en los puntos de dicha superficie. Los colores usa
dos corresponden a diversos intervalos de valores de PEM.
Figura 6.15. Mapa potencial electrostático molecular (PEM) correspondiente al plano molecular de la cafeína. Se mues
tran las líneas isopotenciales correspondientes a +100.0 y -20 kcal/mol. Las zonas de PEM mínimo corresponden a los
pares libres de dos oxígenos carbonílicos y de un nitrógeno heterocíclico.
Figura 6.16. Representación gráfica tridimensional del potencial electrostático molecular (PEM) de la 2-amino-3.4-dime-
tilimidazo(4,5-/]-quinolina. Se muestra la superficie isopotcncial correspondiente a -30 kcal/mol. También se muestran las
distancias entre valores mínimos de PEM usadas para la construcción del farmacóforo mostrado en la Figura 6.17.
Unos puntos que presentan especial interés en las distribuciones del PEM son aquéllos en los que dicha
distribución presenta un valor mínimo respecto a su entorno. Estos mínimos, que indican direcciones de ata
que para reactivos electrófilos. pueden servir para definir farmacóforos para un determinado tipo de actividad
biológica, e incluso el valor del PEM de dichos mínimos puede utilizarse como parámetro en estudios cuanti
tativos de relaciones estructura-actividad (QSAR). Un ejemplo de farmacóforo basado en la posición relativa
de los mínimos del PEM es el propuesto para los sustratos del citocromo P450 IA2. que se muestra en la Figu
ra 6.17. Otro ejemplo lo constituye el paralelismo que se ha descrito entre la actividad frente al receptor H? de
la histamina de un conjunto de agonistas y el valor del mínimo del PEM que se presenta cerca de uno de los
nitrógenos del anillo de imidazol. En la Tabla 6.2. se muestran las actividades de estos compuestos y los valo
res del mínimo del PEM generado por el par libre del átomo de nitrógeno del imidazol. que se señala en la fór
mula de la histamina con un asterisco. Los valores del PEM tabulados corresponden a la especie neutra y al
catión que se obtiene al protonar el grupo amina de la cadena alquílica. Se puede ver cómo las tres moléculas
más activas presentan mínimos más profundos, tanto en su forma neutra como en la catiónica. Esta relación es
coherente con el «relé» protónico que se ha postulado para esta actividad biológica (véase el Capítulo 16).
pues el mecanismo de tal «relé» empezaría con un ataque clectrófilo. por pane de un protón al nitrógeno en
cuestión, y este ataque estará más favorecido cuanto más negativo sea el correspondiente mínimo del PEM.
Conviene resaltar que esta relación PEM/actividad no explica toda la gradación de actividad de los compues
tos de la serie, sino que se limita a discriminar entre los tres compuestos más activos y el resto, que son poco
activos. Debemos retener la idea de que cualquier método de estudio de las relaciones estructura-actividad es
imperfecto, pues los modelos moleculares siempre contienen aproximaciones y. por otra parte, existe un gran
número de factores que condicionan la actividad biológica y resulta prácticamente imposible tomarlos todos
en consideración con un rigor absoluto.
Figura 6.17. Farmacóforo para la afinidad por el citocromo P450 1A2 construido según las distribuciones de potencial
electrostático molecular de una serie de sustratos (E. López de Bridas, J. J. Lozano. N. B. Centeno, J. Segura, M. Gonzá
lez. R. de la Torre y F. Sanz. En: K. Gundelofte K. y F. S. Jorgensen. Eds., Molecular Modelling and Prediction of Bioacti-
vity. New York: Kluwer. 2000. pp. 141-146).
Tabla 6.2. Relación entre las actividades de algunos agonistas del receptor Hj de la histamina
y sus potenciales electrostáticos moleculares
Mínimo de PPM en la posición*
Compuesto Actividad agonista Molécula neutra Catión'

H; relativa (%)
Histamina 100 - 101.37 - 22,04

A'-metil-histamina 74 -101.71 - 23.82
4-metil-histamina 43 -103.01 - 24,38
4-cloro-hisiamina II -91,60 - 12.84

1,2,4-lriazol-3-il-etilamina 6.8 -92,84 -13.14
2-iiazolil-etilamina - 89.68 -3,90
4-nitro-histamina 0.6 - 86.36 -7,55
' Catión resultante al protonar el grupo amina de la cadena al ¡fótica.

Fukstf: F. J. Luque. F. Sanz. F. Illas. R. Pouplana y Y. G. Smcyers, Eur J. Med. Chem.. 23. 7-10. 1988.
11. POTENCIALES DE INTERACCIÓN MOLECULAR
Unas propiedades relacionadas con el potencial electrostático molecular (PEM) y que, en cierta manera, se pue
den considerar su generalización, son los llamados potenciales de interacción molecular (PIM). La diferencia
entre ellos es que. mientras que en el caso del PEM se calculan energías de interacción entre la molécula estu
diada y un protón, en el caso de los potenciales de interacción molecular se calculan energías de interacción en
tre la molécula y unas sondas moleculares que representan posibles grupos funcionales que la molécula estudia
da podría encontrar en su interacción con un receptor biológico. Algunas de las sondas utilizadas son el grupo
amina, el oxígeno carbonílico, el oxígeno carboxílico, el grupo hidroxilo, el grupo metilo, la molécula de agua,
etcétera. Los cálculos realizados con cada sonda molecular dan pie a distintas distribuciones de PIM. Sus repre
sentaciones gráficas son análogas a las de los PEM mostradas en las Figuras 6.15 y 6.16. Las zonas con poten
ciales negativos frente a una determinada sonda indican posibles interacciones favorables con grupos funciona
les similares del entorno biológico. Así. por ejemplo, las zonas negativas en una distribución de PIM obtenida
con la sonda metilo indican posiciones favorables para las interacciones hidrófobas. Uno de los programas más
utilizados para los cálculos de PIM es el programa GRID, desarrollado por el Prof. P. Goodford.
12. ESTUDIOS DE LA RELACIÓN ENTRE LA ESTRUCTURA MOLECULAR

DE LIGANDOS Y SU ACTIVIDAD BIOLÓGICA (MÉTODOS INDIRECTOS)
Existen diferentes estrategias para abordar los problemas de relaciones estructura-actividad usando los concep
tos y herramientas que se han descrito en este capítulo. Un primer grupo de métodos lo constituyen aquéllos que
prescinden de la estructura del receptor y fijan su atención en conjuntos de compuestos que, siendo semejantes
desde un punto de vista estructural, presentan distintos grados de actividad frente a un mismo receptor biológi
co. o conjuntos de moléculas que. poseyendo estructuras químicas diferentes, presentan actividades biológicas
semejantes. Todas estas estrategias tratan de encontrar relaciones entre las semejanzas o diferencias entre las es
tructuras y propiedades de series de moléculas y el hecho de que dichos compuestos sean o no activos, y reciben
el nombre de métodos indirectos por no considerar la estructura del receptor.
En los métodos indirectos, se plantean distintos problemas metodológicos relativos a la forma de evaluar
la semejanza molecular. Se trata de decidir qué aspectos de las moléculas se considerarán en la comparación, si
ésta se hará de una forma cuantitativa o únicamente desde una perspectiva cualitativa y, por último, en qué posi
ción relativa y conformaciones se compararán los compuestos.
Dado que disponemos de instrumentos informáticos que permiten construir con facilidad modelos mole
culares tridimensionales y superponerlos unos con otros (véase la Fig. 6.3). éste es el procedimiento más senci
llo para comparar compuestos entre sí, observando visualmente y, por tanto cualitativamente, sus semejanzas o
diferencias. Es evidente que la forma de proceder comporta un elevado grado de subjetividad en la valoración de
dichas semejanzas o diferencias, así como en la elección de la posición relativa de las dos moléculas y los con-
fórmeros de cada una de ellas con los que se realiza la comparación. Para obviar en parte los problemas de sub
jetividad en la comparación, se definen coeficientes que intentan medir la semejanza o diferencia entre los com
puestos. En el caso de la mera comparación estructural, se puede medir la diferencia entre dos moléculas
mediante la suma de las distancias entre las posiciones de determinados núcleos que se seleccionan con la con
dición de que existan en todas las moléculas a comparar. Dicha suma de distancias presenta el problema de que
depende del número de núcleos considerados (n). Para solucionar este problema, se usa el coeficiente RMS o
RMSD (Root-Mean-Squared-Distance) que se define como:
En cuanto a la elección de la posición relativa de comparación, se tiende a buscar aquella de máxima se
mejanza. o de mínima diferencia o distancia, mediante un proceso de optimización del coeficiente de medida,
de una forma análoga a la que proponíamos para la optimización geométrica. Hay que tener en cuenta que, en
este caso, los grados de libertad que intervienen en el proceso de optimización son aquellos que definen la posi
ción relativa en el espacio de un compuesto respecto a otro. Dichos grados de libertad son siempre seis: las tras
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN EL ESTUDIO DE LAS RELACIONES.. 135
laciones sobre tres ejes perpendiculares y las correspondientes rotaciones sobre dichos ejes. También conviene
no olvidar el problema de los «óptimos locales».
La mera comparación de estructuras moleculares sin tener en cuenta sus propiedades resulta muy imper
fecta. pues deja al margen aspectos tan importantes como el que un grupo amina y un grupo metilo son comple-
lamente distintos, aunque sus estructuras moleculares sean muy parecidas. Por ello, al comparar compuestos se
suelen tener en cuenta otros aspectos complementarios a la descripción estructural, y, con este fin, a menudo se
ha recurrido a la comparación de distribuciones de PEM o P1M. pues como se ha visto con anterioridad, dichas
distribuciones aportan información sobre ciertos aspectos de la reactividad química de los átomos y grupos fun
cionales que componen las moléculas. El enfoque cualitativo de dicha comparación consiste en cotejar visual
mente las representaciones gráficas de dichas distribuciones mostradas anteriormente (Figs. 6.15 y 6.16). Me
diante dichas comparaciones, y basándose en las posiciones de ciertas características de las distribuciones,
como por ejemplo las posiciones de sus mínimos, se pueden definir farmacóforos. Dichos farmacóforos pueden
mostrar semejanzas moleculares que resultan difíciles de observar por otros medios. Un ejemplo de este tipo de
análisis es el farmacóforo descrito para los sustratos del citrocromo P450 1A2 que se muestra en la Figura 6.17.
La comparación cuantitativa de propiedades moleculares que adoptan valores distintos en los puntos alre
dedor de las moléculas a comparar, como es el caso de la densidad electrónica p(r), el PEM o los PIM, se puede
realizar mediante dos estrategias distintas. La primera consiste en la comparación analítica de las funciones que
definen dichas distribuciones, obteniendo coeficientes de similitud molecular entre pares de compuestos. La se
gunda estrategia, que en la práctica es la más usual, parte del cálculo de los valores de la propiedad en una red
de puntos definidos alrededor de las moléculas consideradas (véase la Fig. 6.18). A partir de dichos valores, se
pueden calcular coeficientes de similitud molecular o realizar análisis 3D-QSAR (Three-Dimensional Quanti
tative Structure-Activity Relationships).
Figura 6.18. Esquema de una red de puntos alrededor de una molécula, que podrían ser aquéllos en los que se calculan
los potenciales electrostáticos o de interacción molecular.
13. ESTUDIOS CUANTITATIVOS DE LAS RELACIONES ENTRE PROPIEDADES

MOLECULARES 3D DE LIGANDOS Y LA ACTIVIDAD BIOLÓGICA (3D-QSAR)
Las propiedades o descriptores moleculares que se pueden obtener a partir de las estructuras moleculares de se
ries de ligandos permiten un gran número de estudios de relaciones estructura-actividad. A nivel cuantitativo, se
puede analizar si existe paralelismo entre una clasificación generada a partir de coeficientes de similitud o disimi
litud molecular y otra clasificación generada mediante los perfiles biológicos o farmacológicos de los compues
tos. Por otra parte, un grupo de técnicas actualmente muy utilizadas lo constituyen las llamadas CoMFA (Compa
rative Molecular Field Analysis) o GRID/GOLPE. Estas técnicas parten de una matriz de datos (Fig. 6.19) en la
que. por una parte, se incluyen las medidas de actividad biológica que pretendemos predecir basándose en pro-
Actividad PIM calculado con la PIM calculado PIM calculado con la

biológica sonda X en m puntos con la sonda... sonda Z en los m puntos
y x’ X2... X1". ............ ............. z1 z2 z"‘
Compuesto l y< x'i X2|... x-> ............ ............. z’l Z2I Z"|
Compuesto 2 yj
Compuesto 3 yj
Compuesto n y. x’. X2. ... XMn ............ ............. z'. z2.... z".
Figura 6.19. Matriz de datos sobre los análisis CoMFA o GR1D/GOLPE.
piedades moleculares. Por otra parte, en dicha matriz se incluyen valores de P1M obtenidos con distintas sondas
moleculares y calculados en los puntos de una red tridimensional definida alrededor de todos los compuestos
considerados (véase la Fig. 6.18). Sobre la matriz resultante se lleva a cabo un análisis estadístico multivariante
I lamado PLS (Partial Least Squares), que consiste en ajustar los coeficientes de las ecuaciones:
y = btrt + b2t2 + b,t, + ... + 6mr„

donde:
Z| = C1|X| + CijXj + ... + c}pxp

h = C2|X| + C22X2 + ... + C'lpXp
•m “ "r Cm2^2 "•

...+
* CmpXp
de forma que un pequeño número m de variable latentes ortogonales 11, | definidas mediante combinación lineal
de las variables originales |xj explique el máximo posible de la variabilidad de la actividad biológica y. Los re
sultados se suelen visualizar mediante zonas alrededor de los compuestos en las que determinadas interacciones
con cada una de las sondas consideradas resultan favorables o desfavorables para la actividad biológica.
En todas estas técnicas, dos aspectos cruciales para obtener buenos resultados son: el disponer de un con
junto de compuestos adecuado y que éstos estén adecuadamente alineados, es decir, adecuadamente superpues
tos en el seno de la red de puntos en los que se calcularán los potenciales de interacción.
14. OTRAS APLICACIONES DE LA SEMEJANZA MOLECULAR
Aparte de los estudios de relaciones estructura-actividad, el concepto de semejanza molecular se aplica fre
cuentemente y de forma muy útil, en otras operaciones relacionadas con el descubrimiento de nuevos fármacos.
En primer lugar, y una vez que se conoce el farmacóforo requerido para cierta actividad biológica, existen
instrumentos informáticos que permiten explorar grandes bases de datos de estructuras químicas tridimensiona
les buscando compuestos que presenten dicho farmacóforo. Esas bases de datos pueden obtenerse en el merca
do o ser el resultado del archivo de los compuestos sintetizados por una compañía farmacéutica a lo largo de los
años. Algunos de los compuestos localizados mediante dichos procedimientos resultaron ser cabezas de serie
interesantes para el desarrollo de nuevos fármacos, que difícilmente hubieran sido descubiertos mediante otros
procedimientos. Dado que la presencia o no de un cierto farmacóforo en una molécula de la base de datos pue
de depender del confónnero considerado, los algoritmos de búsqueda más sofisticados tienen en cuenta la flexi
bilidad conformational de las moléculas analizadas.
Otra aplicación del concepto de semejanza molecular se produce en el marco de los llamados estudios de di
versidad molecular. Cuando, por ejemplo, se está planificando la síntesis de una serie de derivados a partir de un
determinado compuesto, puede resultar interesante que los sustituyentes introducidos cubran la máxima variabili
dad de propiedades moleculares y repitan el mínimo de información. Este objetivo se puede conseguir eligiendo
un conjunto de sustituyentes que presenten la máxima diversidad molecular. Para ello, se describen todos los susti
tuyentes posibles, mediante descriptores moleculares, y se lleva a cabo un análisis matemático con el fin de elegir
un subconjunto de n sustituyentes que presenten la máxima diversidad y representatividad sobre el espacio de des
criptores. Este tipo de estudios es frecuente en el marco de la planificación de procesos de química combinatoria.
15. PREDICCIÓN DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE LAS PROTEÍNAS
Hasta el momento, nos hemos centrado en enfoques que no requieren el conocimiento de la estructura tridimen
sional de proteínas o de otras macromoléculas biológicas, como el ADN. Sin embargo, cada vez son más fre
cuentes los estudios en los que se considera la estructura tridimensional de los biopolímeros implicados en el
proceso biológico objeto de estudio («diana farmacológica»). La estructura tridimensional de la inmensa mayo
ría de los biopolímeros. y entre ellas la de casi todas las proteínas, es todavía desconocida. Como se ha comen
tado al inicio de este capítulo, las relativamente escasas estructuras de macromoléculas que han sido determina
das y publicadas se encuentran disponibles en la base de datos PDB. Sin embargo, se conocen las secuencias de
aminoácidos de un gran número de proteínas. Ante esta situación, uno de los retos actuales de las técnicas de
modelización molecular es la predicción de la estructura terciaria (tridimensional) de proteínas a partir de su es
tructura primaria (secuencia). Ante este problema, existen dos enfoques, los llamados métodos ab initio, que
pretenden proponer un cierto plegamiento para la proteína problema basándose en la aplicación de reglas empí
ricas o mediante cálculos energéticos. Entre los métodos basados en reglas, existen aquellos que permiten pre
decir elementos de estructura secundaria (como hélices a o hojas p) de las proteínas. Los métodos ab initio, si
bien se están perfeccionando mucho y cada vez van proporcionando mejores resultados, aún están lejos de ge
nerar estructuras con un grado de fiabilidad y precisión que permita un análisis adecuado de las interacciones
entre un ligando y una proteína.
Por otra parte, existen los llamados métodos de modelización de proteínas por homología, que proponen
una estructura terciaria para la proteína problema a partir de su secuencia y de otra proteína cuya secuencia es
parecida y de la cual se conoce la estructura terciaria. Así pues, en una modelización por homología, el primer
paso consiste en localizar, entre las proteínas incluidas en la PDB. una proteína cuya secuencia sea parecida a la
de la proteína problema. Para evaluar la similitud entre secuencias, se busca el mejor alineamiento entre las dos
secuencias comparadas (véase la Fig. 6.20). Se trata de desplazar una secuencia frente a otra, buscando el máxi
mo número de aminoácidos idénticos o de similares características (por ejemplo, ambos apolares o catiónicos,
etc.). Una operación adicional para mejorar un alineamiento consiste en introducir gaps, es decir, fragmentos de
una de las proteínas que se suponen más largos que en la otra. Para decidir cuál es el mejor alineamiento, se usa
una puntuación que «premia» las identidades, «premia» en mejor grado los aminoácidos de similares caracterís
ticas y «castiga» la introducción de gaps en forma proporcional a su longitud. Se han propuesto distintas pun
tuaciones para evaluar alineamientos, y los resultados que generan pueden ser significativamente distintos. La
obtención de un alineamiento adecuado es un paso esencial para tener éxito en un proceso de modelización de
una proteína por homología. La comparación de una predicción de la estructura secundaria de la proteína pro-
Figura 6.20. Alineamiento de las secuencias de los citocromos P450 BM3 (patrón) y IA2 (problema). Los residuos idén
ticos se muestran en fondo negro, los similares en sombreado y los «gaps» en fondo blanco. SRS son zonas de reconoci
miento de sustratos. Se muestran también elementos de la estructura secundaria (hélices) (J. J. Lozano. E. López de Bri
das, N. B. Centeno, R. Guigó y F. Sanz. J. Comput.-.Aided Mol. Des. 11, 395-408, 1997).
blema y de la estructura secundaria experimental de la proteína patrón puede ayudar en el proceso de alinea
miento, tal como se muestra en la Figura 6.20.
Una vez que se dispone de un buen alineamiento, la construcción de un modelo tridimensional para la
proteína problema empieza por la sustitución, en la estructura 3D de la proteína patrón de aquellos aminoáci
dos que no coinciden con los de la proteína problema. Otra operación consiste en la resolución de los gaps.
que suele consistir en el alargamiento o acortamiento del correspondiente elemento de estructura secundaria
de la proteína patrón. Obviamente, la sustitución de unos aminoácidos por otros y la resolución de los gaps
genera una estructura para la proteína problema que presenta una gran tensión desde un punto de vista ener
gético. Dicha estructura se debe refinar mediante reglas empíricas, así como con cálculos de mecánica y di
námica molecular. Existen muchos programas informáticos que ayudan en los distintos pasos de la modeliza-
ción de una proteína por homología: desde la obtención de buenos alineamientos, pasando por la
construcción del modelo 3D, incluyendo la resolución de los gaps, hasta el refinado y evaluación de la cali
dad del modelo resultante. Una forma habitual de evaluar la calidad del modelo de una proteína consiste en
comprobar si las combinaciones de valores de los ángulos 0 y xy de la cadena de enlaces peptídicos de la pro
teína (véase la Fig. 6.21) coinciden mayoritariamente con aquellas combinaciones que. mediante cálculos
energéticos y observación de las proteínas conocidas experimentalmente, se han descrito como valores favo
rables. Dicha comprobación se acostumbra realizar con la ayuda del gráfico de Ramachandran (véase la Fi
gura 6.22). Como ejemplo de modelización de proteínas por homología, en la Figura 6.4 se muestra el mode
lo del citocromo P450 IA2. obtenido a partir de la estructura experimental del citocromo P450 BM3 y el ali
neamiento de secuencias mostrado en la Figura 6.20.
Figura 6.21. Elementos geométricos de una cadena de enlaces peptídicos. La rotación alrededor del enlace N-C“ se des
cribe con el ángulo de torsión ó; la rotación alrededor del enlace C°-C' corresponde al ángulo y la del enlace C'-N co
rresponde al ángulo <0. mientras que % es el ángulo que describe la rotación de la cadena lateral.
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN El. ESTUDIO DE LAS RELACIONES... 139
<t>, (grados)
Figura 6.22. Gráfico de Ramachandran para el análisis de calidad de la estructura terciaria de una proteína. Cada punto
representa un residuo de la proteína analizada. Cuanto más oscura es una zona, más favorable es que un residuo adopte
aquella conformación. Este criterio no es aplicable en el caso de las glicinas y las prolinas.
16. SIMULACIÓN DEL ENTORNO DE LAS BIOMOLÉCULAS. SOLVATACIÓN
Las moléculas biológicas no se encuentran aisladas en el vacío, sino rodeadas de otras moléculas como agua u
otras moléculas biológicas distintas a la estudiada. Esto hace que las estructuras moleculares determinadas ex
perimentalmente mediante espectroscopia de rayos X a partir de cristales (conjunto ordenado de moléculas
iguales), o los modelos obtenidos mediante cálculos sobre una molécula aislada, puedan no ser adecuadas para
modelizar un fenómeno biológico.
Dado que el agua es el medio más frecuente con el que se enfrentan las moléculas biológicas, la simula
ción de su influencia sobre la estructura y las propiedades de las biomoléculas es un aspecto de máximo interés
en los estudios de modelización molecular. Existen distintos grados de aproximación en la consideración del
solvente. La más rudimentaria consiste en modificar la constante dieléctrica 6 del término electrostático del
campo de fuerzas en los cálculos de mecánica molecular de la molécula estudiada, adecuándola a la influencia
del entorno enormemente polar provocado por el agua. Otro método consiste en representar el disolvente como
un continuo que envuelve la molécula estudiada y que tiene ciertas propiedades dieléctricas. La forma más so
fisticada de considerar el solvente consiste en realizar los cálculos de la molécula de interés en el seno de un sis
tema molecular constituido por ésta y un gran número de moléculas de agua.
17. RELACIÓN ENTRE LAS ESTRUCTURAS MOLECULARES Y LA ACTIVIDAD BIOLÓGICA

CONSIDERANDO LA ESTRUCTURA DEL RECEPTOR (MÉTODOS DIRECTOS).
SIMULACIÓN DE LA INTERACCIÓN LIGANDO-RECEPTOR
Los métodos directos para estudiar las relaciones estructura-actividad consisten en la aplicación del concepto de
llave-cerradura, utilizando las potentes herramientas experimentales, teóricas e informáticas de las que actual
mente disponemos. Así, como se comentó en otro momento, la estructura tridimensional de algunos complejos
ligando-receptor se ha podido determinar experimcntalmente mediante espectroscopia de rayos X. Un ejemplo
lo constituye el complejo entre la dihidrofolato reductasa y el metotrexato. que se mostró en la Figura 6.8. Di
chos complejos resultan útiles para identificar el sitio de unión, así como las interacciones que se producen en
tre el ligando y la proteína. A partir de la estructura de dichos complejos, se pueden diseñar nuevos ligandos con
igual o mayor afinidad. Para ello, es necesario modelizar el acoplamiento al receptor de las nuevas estructuras
que se postulan. Así. se sustituye en el sitio de unión de la proteína, el ligando estudiado experimentalmente por
el que se está diseñando, y se analiza la «bondad» del nuevo complejo mediante cálculos de mecánica y dinámi
ca molecular. Existen incluso programas informáticos que proponen, de forma automática, estructuras que po
drían interactuar adecuadamente en un cierto sitio de unión previamente identificado.
Cuando, tal como sucede normalmente, no se dispone de la estructura experimental de la proteína que
constituye la diana farmacológica y, obviamente, se dispone incluso menos de la estructura experimental de
complejos ligando-receptor, los estudios se complican y se vuelven menos fiables. En tal caso, se debe conside
rar en primer lugar si es posible llegar a disponer de un modelo fiable de la proteína en cuestión mediante la
aplicación de las técnicas de modelización por homología explicadas en la sección anterior. Además, se necesi
tará una cierta información sobre la zona de la proteína donde se produce la unión de los ligandos. Esa informa
ción suele obtenerse mediante experimentos de biología molecular. Una vez que se disponga del modelo de la
proteína, se puede llevar a cabo una simulación del acoplamiento de los ligandos. La colocación de los ligandos
en el sitio activo se puede realizar manualmente, a partir de la información disponible sobre los residuos impli
cados en la unión y el farmacóforo requerido para dicha unión, o automáticamente, mediante programas que ex
ploran exhaustivamente las posibles posiciones de unión de los ligandos.
En las simulaciones de unión de ligandos con proteínas, es conveniente tener en cuenta que ambas molé
culas suelen poseer flexibilidad conformacional. y que confórmeros existentes antes de la unión no tienen por
qué coincidir con los existentes en el complejo ligando-receptor. Por otra parte, hay que tener en cuenta que el
sitio de unión no tiene por qué ser el mismo para todos los ligandos de un mismo receptor. Así. es bastante fre
cuente que los agonistas y los antagonistas se unan de distinta forma al mismo receptor.
En las simulaciones del acoplamiento ligando-receptor, a menudo nos conformamos con obtener informa
ción de tipo cualitativo (residuos que están implicados en la unión, información sobre cómo mejorar la estructu
ra del ligando, etc.). Sin embargo, es mejor desarrollar modelos cuantitativos que relacionen los parámetros de
dicha unión con la actividad biológica. La situación más ambiciosa es aquélla en la que se pretende estimar la
constante de acoplamiento K, de cada ligando mediante la modelización teórica de la correspondiente AG. K y
AG se relacionan mediante la expresión:
AG = - RT In K
Las estimaciones de la AG se realizan mediante el ciclo termodinámico que se esquematiza en la Figu

ra 6.23. Los cálculos necesarios para completar dicho ciclo termodinámico siguen siendo difíciles de realizar,
y proporcionan estimaciones de baja fiabilidad (especialmente, cuando se trabaja con un modelo de la pro
teína y no con su estructura experimental).
AGE„(L + R->LR)
L(g) + R(g) LR(g)
AGW|(L) AGjoi (R) AGM11(LR)
AG’aeopi
L (sol) + R (sol) LR (sol)
AGKOpi = AGb„ (L + R —> LR) + AGM|(LR) - AG„i(L) -AG^ÍR)
Figura 6.23. Ciclo termodinámico para el cálculo de la energía de acoplamiento de un ligando L a un receptor R. teniendo
en cuenta los fenómenos de solvatación.
MODELOS MOLECULARES TRIDIMENSIONALES Y SU USO EN El. ESTUDIO DE LAS RELACIONES... 141
En este capítulo, hemos hecho un recorrido introductorio para algunas de las herramientas y enfoques
computacionales más utilizados en el descubrimiento de nuevos fármacos. Naturalmente, para ser rigurosos en
la descripción de cualquiera de las técnicas esbozadas, se requeriría una presentación mucho más detallada y
matizada. Con tal fin. se recomienda la lectura de los textos citados en la sección de Bibliografía.
BIBLIOGRAFÍA
Libros
Cohen, N. C. (ed.): Guidebook on Molecular Modeling in Drug Design. Academic Press Inc., San Diego, 1996.
Dean, P. M„ y Lewis, R. A. (ed.): Molecular Diversity in Drug Design. Kluwer Academic Publishers. Dordrecht (The Net
herlands). 1999.
Hóltje. H.-D.. y Folkers, G.: Molecular Modelling. Basic principles and Applications. VCH. Weinheim, 1996.
Krogsgaard-Larsen, P.; Liuefors, T. y Madsen, U. (ed.): A Texbook of Drug Design and Development. Harwood acade
mic publishers, 2." edición. 1996.
Kubinyi, H. (ed.): 3D QSAR in Drug Design. Ed. ESCOM, Leiden. 1993.
Leach. A. R.: Molecular Modelling. Principles and Applications. Longman. Harlow (UK), 1996.
Mosqueira Toribio, A. (ed.): Diseño de Medicamentos. Monografías de la Real Academia de Farmacia. Farmaindustria,
Madrid. 1994.
Revistas
Journal of Computer-Aided Molecular Design. ESCOM.

Quantitative Structure-Activity Relationships. VCH (Es especialmente interesante la sección de abstracts de esta revista).
Journal of Molecular Graphics and Modelling. Wiley.
Además de estas revistas monográficas, frecuentemente aparecen trabajos sobre modelización molecular en muchas otras
revistas como: Bioinformatics. Journal of Computational Chemistry. Journal of Medicinal Chemistry. Protein Enginee
ring. PROTEINS: Structure. Function and Genetics, etc.
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Metabolismo de fármacos
E. Llama y C. Avendaño
1. PRINCIPIOS DE FARMACOCINÉTICA
La acción de los fármacos no depende únicamente de su capacidad para desarrollar una respuesta farmacológi
ca. Es también de importancia crítica que posean propiedades farmacocinéticas que les permitan alcanzar el lu
gar requerido para su acción y que su toxicidad sea mínima. Dado el elevado grado de variabilidad estructural
de los fármacos y la diversidad de reacciones metabólicas conocidas, es necesario el establecimiento de relacio
nes precisas entre las características estructurales de aquéllos y sus características farmacocinéticas.
Las principales rutas de absorción, distribución y excreción de los fármacos se resumen en la Figura 7.1.
Figura 7.1. Vías principales de administración, absorción, distribución y excreción de fánnacos.

2. TRANSPORTE A TRAVÉS DE LAS MEMBRANAS BIOLÓGICAS
Las membranas biológicas son las barreras que debe atravesar un fármaco para llegar a su lugar de acción. Son
sistemas dinámicos en los que una doble capa de fosfolípidos engloba un líquido viscoso, en el que están inmer
sas proteínas globulares que pueden flotar más o menos libremente. Un tercer componente de la estructura de la
membrana son las proteínas reticulares, que estabilizan su organización y prestan soporte mecánico.
El transporte a través de la membrana puede producirse por filtración, pinocitosis, difusión pasiva, difu
sión facilitada o transporte activo.
La filtración, proceso que describe el paso de pequeñas moléculas tales como agua, iones y moléculas hi-
drosolubles de pequeño volumen, viene determinada por el tamaño del poro de la membrana. La pinocitosis es
un proceso semejante a la fagocitosis por el que la membrana celular es capaz de engullir gotas de líquidos ex
tracelulares y materia coloidal mediante invaginaciones de sí misma.
Los ácidos grasos formados en la hidrólisis de los lípidos de la dieta se absorben así en el intestino delga
do, en un proceso en el que resultan esenciales las sales biliares que. por su acción tensoactiva. reducen el tama
ño de las gotas de grasa. Sin embargo, la importancia de la pinocitosis en la absorción de fármacos no está aún
establecida.
La difusión pasiva es la utilizada por la mayor parte de los fármacos. Es un proceso de difusión simple,
desde una zona de alta concentración a otra de baja concentración, que concluye cuando se iguala la concentra
ción a ambos lados de la membrana. Este equilibrio está regulado por la ley de Fick (Ecuación [ 11):
•- • A(C, - C2)
Grado de difusión =------------------- [1]
d
A= área de la superficie de difusión.

d= espesor de la membrana de difusión.
C| = concentración del fármaco fuera de la membrana.
C2 = concentración del fármaco dentro de la membrana.
K= constante de difusión.
La constante de difusión (A") depende, a su vez, de otros factores, como las características de la membra
na. el peso molecular del fármaco, su geometría esférica, su solubilidad en lípidos (liposolubilidad) y su cons
tante de disociación, si es ionizable.
Para un fármaco y una membrana determinados, el grado de difusión depende únicamente del gradiente
de concentración, que varía exponencialmente con el tiempo, de acuerdo con una ecuación de primer orden
(Ecuación [2]):
In Co- In (Co-X) = Kt
Co = concentración inicial
(Co - X) = concentración residual (sin difundir) después del tiempo (r)
La solubilidad en agua (hidrosolubilidad) es el primer requisito para que un fármaco sea transportado a la
superficie de la membrana, pero la difusión a través de la misma, con un interior lipídico, depende de la liposo
lubilidad de aquél. Por tanto, el grado de difusión de una molécula neutra dependerá, no sólo del gradiente de
concentración a cada lado de la membrana, sino también del coeficiente de reparto lípido/agua del fármaco. En
general, coeficientes de reparto elevados determinan una mayor afinidad por la membrana lipídica y una mayor
difusión al interior de la misma.
En la Tabla 7.1 se han seleccionado algunos alcoholes para los que se indica su actividad anestésica y su
coeficiente de reparto. Se observa que la concentración necesaria para inducir anestesia es tanto mayor cuanto
menor es el coeficiente de reparto.
METABOLISMO DE FÁRMACOS 145
Tabla 7.1. Actividad anestésica y coeficiente de reparto
Concentración Coeficiente de reparto

Alcohol
anestésica molar aceitelagua
Metanol 0.57 0.00966

Etanol 0,29 0,0357
Propanol 0.11 0,156
2-Melilpropanol 0.045 0,588
El transporte activo, o especializado, de nutrientes y de fármacos se produce cuando éstos son conducidos
a través de las membranas biológicas en contra de un gradiente de concentración o, en el caso de fragmentos
cargados (iones), contra un gradiente de potencial. Es, por tanto, un proceso que requiere energía e implica la
participación de transportadores (carriers'), que se combinan con el sustrato para conducirlo a través de la mem
brana y después liberarlo. También la difusión facilitada utiliza un transportador, pero las sustancias se mueven
a favor de un gradiente de concentración (Fig. 7.2).
Figura 7.2. Modelos de transporte a través de membranas (donde F representa la molécula

de fármaco y Ti. T¡ representan moléculas transportadoras o carriers).
Los fármacos que se asemejan a metabolitos naturales utilizan, en general, el mismo mecanismo de trans
porte que ellos. Así, el agente antineoplásico melfalán (4-bis(2-cloroetil)amino-L-fenilalanina, Fig. 7.3), se
transporta al interior de las células tumorales por el mismo mecanismo de transporte que la L-fenilalanina,
mientras que su D-isómero no se transporta y es menos activo. Este transporte puede inhibirse. Así. el paso de la
levo-DOPA a través de la barrera hematoencefálica se inhibe de forma competitiva por L-fenilalanina y L-tirosi-
na. y la excreción renal de bencilpenicilina se inhibe por probenecid.
i.-Mdfalán
t.-Tirosma
Levo-DOPA
Probenecid
“ El mclfalán utiliza, para penetrar al interior de la célula, cl mismo sistema de transporte que el aminoácido natural L-fenilalanina.
° La levo-DOPA compite con los aminoácidos naturales L-fenilalanina y t.-tirosina por el sistema de transporte que les permite su paso a través de la
barrera hematoencefálica.
El probenecid inhibe cl transporte de fármacos como la bencilpenicilina a los túbulos renales. La falta de semejanza estructural entre ambos fárma
cos indica que este sistema es poco selectivo.
Figura 7.3. Fármacos y melabolitos naturales que comparten o compiten por el mismo mecanismo de transporte.
3. ABSORCIÓN
Los fármacos, excepto los que se administran por vía intravenosa, deben absorberse para poder actuar en la vía
sistémica o general. Un paso crucial lo constituye la penetración de la capa epitelial en el tracto grastrointesti-
nal. el pulmón o la piel.
En el tracto grastrointestinal varían los valores de pH desde 1-3, en el estómago, debido a la secreción
clorhídrica, hasta un valor de 8, en el intestino delgado (íleon) y en el colon ascendente. Por ello, la absorción de
un fármaco no es igualmente eficaz en las diferentes partes del tracto gastrointestinal y, en casos extremos, se
produce en una pequeña parte, denominada «ventana de absorción».
La difusión pasiva es particularmente eficaz en el intestino delgado, debido al largo tiempo de tránsito y al
gran área de contacto. Para muchos fármacos, sólo la concentración de fármaco no ionizado, que es la forma
más liposoluble, es capaz de difundir pasivamente. Los compuestos neutros liposolubles tienen asegurada su ac
ción sistémica cuando se administran por vía oral, mientras que la absorción de ácidos y bases depende de su
constante de disociación (pK„) y del pH del medio, los cuales están relacionados según las ecuaciones de Hen-
derson-Hasselbalch (Ecuaciones (3] y [4]), en las que B es la base y Hfí' es su ácido conjugado.
Para ácidos
pH = pK„ + log -^-L

13]
Para bases:
pH = pK., + log -i-i- [4]

[HB \
Un ácido débil, como el ácido acetilsalicílico (aspirina), con un pK„ = 3,6, está casi completamente en
forma no ionizada en las condiciones ácidas del éstomago y, por esta razón, se absorbe rápidamente. Una
vez en el plasma (pH = 7.4), se ioniza casi completamente y no tiende a difundir de nuevo hacia el estóma
go (Fig. 7.4).
En muchos fármacos ácidos o básicos existe un compromiso entre la forma que interactúa con su re
ceptor y la que es capaz de difundir por difusión pasiva. Un ejemplo son las sulfamidas, que interactúan con
su receptor (la enzima dihidropteroato sintetasa) en forma iónica y difunden en su forma no ionizada (más
lipófila).
Ácido acetilsalicílico
(aspirina)
SOt-NH-R
Forma en la que Forma en la que

se produce su interactúa con
difusión pasiva su receptor
Sulfamida
Figura 7.4. Ejemplos de fármacos ionizables.
4. DISTRIBUCIÓN
La distribución de un fármaco en los diferentes líquidos del organismo está influenciada por la naturaleza de las
barreras de su entorno y por la presencia de macromoléculas que puedan modificar la concentración de fármaco
libre. La potencia como anestésicos generales del éter etílico, ciclopropano, óxido nitroso, alcoholes primarios,
sulfuro de carbono y cloroformo, es paralela a sus coeficientes de reparto porque sus niveles cerebrales depen
den de éstos y la barrera hematoencefálica (sangre-cerebro) es una barrera fisiológica especializada, particular
mente difícil para sustancias con insuficiente lipofilia, porque su endotelio está densamente rodeado por células
de glía que no dejan huecos intersticiales (poros). Como la penetración de los fármacos a través de esta barrera
es directamente proporcional a su hidrofobia, en muchos de ellos se observan efectos centrales indeseables que
pueden eliminarse disminuyendo su coeficiente de reparto.
La unión reversible a macromoléculas endógenas (como la albúmina y la glicoproteína ácida a) que se
produce en muchos fármacos, determina su concentración efectiva, ya que sólo el fármaco libre puede difundir
a través de las membranas. La albúmina sérica constituye cerca del 60 por 100 del total de las proteínas plasmá
ticas. Además de mantener la presión osmótica de la sangre se unen a ella de forma no específica muchos fár
macos que son posteriormente transportados. La glicoproteína ácida a>, cuyo papel fisiológico no se conoce,
presenta un alto grado de afinidad para fármacos básicos.
5. EXCRECIÓN
Un fármaco, o sus metabolitos, puede excretarse simultáneamente por varias vías: orina, bilis, saliva, respira
ción, etc. En la mayor parte de los casos, sólo la excreción renal y la biliar tienen importancia cuantitativa.
En cuanto a la eliminación, una vez en los túbulos renales, un fármaco o sus metabolitos pueden causar
problemas. Así, las primeras sulfamidas que se emplearon en quimioterapia presentaron como efecto secundario
adverso una cristaluria renal por su falta de hidrosolubilidad, debido a que su pK. (alrededor de 10,4) determi
naba que al pH de la orina (alrededor de 6 o inferior en las infecciones bacterianas), se encontraran en gran por
centaje en forma no ionizada que, al ser insoluble en agua, precipitaba. Para evitar este problema, puede aumen
tarse el flujo de orina incrementando la ingestión de agua, puede elevarse el pH de aquélla para aproximarlo a
10,4 o, lo que es mucho mejor, puede disminuirse el pK„ de las sulfamidas introduciendo sustituyentes aceptores
de electrones en el nitrógeno del grupo sulfonamida. Entre éstos, los derivados heterocíclicos resultaron los me
nos tóxicos (véase Tabla 7.2).
Tabla 7.2. Características fisicoquímicas y farmacocinélicas de algunas sulfamidas
H.N SO2NH-R
%. Unión a Sol. en
Denominación Semivida
R pK. proteínas, agua a 25 "C
común en horas
pmol/ml mg/100 mi
H,C CH,
Sulfisoxazol 5.0 76,5 350 6
Sulfadiazina 6,52 37,8 8 17
Sulfamcrazina 7 il 6.98 56.8 16 24

-X^Nxx:H,
CH,
Sulfametazina 7.4 66 150 7
'^N'^'CH,
Finalmente, la circulación enterohepática es un fenómeno por el que los compuestos de peso molecu
lar superior a 300 o unidos a proteínas plasmáticas se secretan con la bilis y después se reabsorben en la luz
intestinal, regresan al hígado por el sistema porta y se metabolizan o vuelven a excretarse por vía biliar, lo
que puede determinar un aumento en la semivida de compuestos muy resistentes al metabolismo y muy li-
pófilos.
6. METABOLISMO DE LOS FÁRMACOS
El proceso conjunto de metabolismo y excreción finaliza la acción de los fármacos. El metabolismo es esencial
mente un mecanismo de destoxiftcación, aunque en ciertos casos, la toxicidad de un fármaco se debe a la for
mación de determinados metabolitos. Aunque algunos fármacos no experimentan ninguna transformación meta-
bólica (Fig. 7.5), la mayoría sí lo hacen.
1. El fármaco se excreta directamente como consecuencia de su alta hidrosolubilidad.

2. El fármaco es metabólicamente estable y. por su carácter lipófilo. queda acumulado en tejidos adiposos.
3. El fármaco es suficientemente polar y experimenta una conjugación, de forma que el conjugado se excreta.
4. El fármaco experimenta una transformación mctabólica (reacción de fase I). El metabolito formado se conjuga (reacción de fase II) y, finalmente,
el conjugado se excreta. Es interesante destacar que en las reacciones de conjugación se producen normalmente inactivaciones, mientras que las
reacciones de fase I pueden conducir a la formación de un metabolito inactivo o transformar el compuesto inicialmente activo (o inactivo) en otro
inactivo (o activo).
5. El fármaco experimenta una transformación mctabólica y el metabolito se excreta sin conjugar.
6. El fármaco, un metabolito o un conjugado suyo entra en la circulación enterohepática. sufriendo posteriores reacciones metabólicas. excreción o
ambas cosas.
7. Un metabolito del fármaco entra en el esquema general del metabolismo intermediario de nutrientes, con la posibilidad de su incorporación a los tejidos.
Figura 7.5. Distribución y metabolismo de fármacos.
Las biotransformaciones de los fármacos van dirigidas a la formación de metabolites más hidrosolubles,
por desenmascaramiento o introducción de grupos polares, tales como COOH, OH y NH2, en reacciones deno
minadas de fase I. Estos procesos se pueden completar con la formación de conjugados con ácido sulfúrico, glu-
curónico o aminoácidos, en reacciones denominadas de fase II (Tabla 7.3).
Tabla 7.3. Reacciones metabólicas de fase I y fase II
Fase I Reacciones de reducción
Reacciones de oxidación Reducción de aldehidos y cetonas

Reducción de nitro y azocompuestos
Oxidación de restos aromáticos Otros procesos de reducción
Oxidación de definas
Oxidación de átomos de carbono bencílicos, afilíeos, y átomos Reacciones de hidrólisis
de carbono en alfa a carbon i los c iminas
Hidrólisis de nitritos, esteres, amidas
Oxidación de átomos de carbono alifáticos y alicíclicos Hidratación de epóxidos y óxidos de areno
Oxidación que implica sistemas carbono-heteroátomo:
Sistemas C-N: Ñ-dcsalquilación. desanimación oxidativa. Fase II
N-hidroxilación. formación de N-óxidos
Reacciones de conjugación
Sistemas C-O: O-dcsalquilación
Sistemas C-S: S-desalquilación, S-oxidación. desulfuración Conjugación con ácido glucurónico
Oxidación de alcoholes y aldehidos Conjugación con sulfato
Otros procesos oxidativos Conjugación con aminoácidos
Conjugación con glutatión
Acetilación
Mediación
Muchos compuestos denominados profármacos, se activan a fármacos mediante procesos metabólicos.

Además, el mecanismo de acción de ciertos fármacos consiste en activar o inhibir una reacción metabólica. Por
todo ello, el conocimiento y la predicción del metabolismo son esenciales en el diseño de fármacos.
La mayor parte de los sistemas enzimáticos esenciales para catalizar las reacciones metabólicas se en
cuentran en el hígado.
6.1. Reacciones de fase I
6.1.1. Oxidación
Los principales catalizadores de las reacciones de oxidación son los citocromos P-450, unas hemoproteínas que
toman su nombre del cambio espectral que se produce en su forma reducida después de la adición de monóxido
de carbono.
El proceso de oxidación de un fármaco (RH) se puede esquematizar:
P-450
* ----- > ROH + H,O + NADP
RH + O2 + NADPH + H *
(cofactor reducido) (cofactor oxidado)
La nicotinamida adenosina dinucleótido en su forma reducida (NADPH) proporciona al sistema un pro

tón y dos electrones, transformándose en el derivado de piridinio NADP
* (Fig. 7.6).
Figura 7.6. Transformación acoplada del cofactor NADPH en las reacciones de oxidación
catalizadas por el citrocromo P-450.
Estas enzimas tienen como cofactor al grupo hemo, una porfirina que contiene Fe’* el cual, en su forma
reactiva de Fe5* o Fe4* (especies II y III de la Fig. 7.7), efectúa reacciones de hidroxilación y epoxidación fun
damentalmente. El hidroperóxido de Fe5* es la especie I. en la que las letras N representan los cuatro nitrógenos
de pirrol, y el quinto ligando es un resto de cisterna de la enzima. Dicha especie se convierte, por protonación y
deshidratación, a la especie de Fe5' (II), que está en resonancia con el radical Fe4' (III). Esta especie activa rom
pe homolíticamente un enlace C-H para dar un radical alquilo y la especie IV, los cuales, por acoplamiento ra-
dicálico, originan alcoholes y regeneran el hemo. Por otro lado, los alquenos y árenos sufren la adición del radi
cal III y, posteriormente, se convierten en epóxidos u óxidos de areno.
Figura 7.7. Mecanismos de oxidaciones de alcanos, alquenos y árenos catalizados

por citrocromos P-450.
La oxidación de las cadenas hidrocarbonadas saturadas se produce principalmente en las posiciones <o u
co - 1. La oxidación de carbonos activados, alílicos o bencílicos se produce rápidamente (véase la tolbutamida,
en la Fig. 7.8). Los cicloalcanos también se oxidan; por ejemplo, la bromhexina se hidroxila en el anillo ciclo-
hexánico a la vez que se /V-desalquila para dar el ambroxol (expectorante).
X ,CA
HN ^V-CH-CHj-CHj-CH, P-450
A CH,
H
Pentobarbital
Figura 7.8. Ejemplos de reacciones de oxidación metabólica catalizadas

por citocromos P-450.
Los mamíferos son capaces de oxidar árenos a óxidos de areno. Estos productos intermedios pueden ori
ginar fenoles, hidratarse a //wis-dihidrodioles, conjugarse con glutatión para, finalmente, eliminarse como áci
dos mercaptúricos (véase más adelante), o formar aducios con una gran variedad de funciones nucleófilas pre
sentes en las macromoléculas orgánicas. Esta última posibilidad determina su potencial lexicológico (Fig. 7.9).
Los r/w?5-dihidrodioles pueden oxidarse posteriormente a benceno-1,2-dio)es.
Ácido prcmer- Aducto

Fenol Traas-dihidro-
caplúrico macromolecular
diol
M = ARN, ADN.
macromoléculas
S-CH2-CH -COOH
Ácido mercaptúrico
Figura 7.9. Principales rutas metabólicas de los compuestos aromáticos,

a través de óxidos de areno.
METABOLISMO OE FÁRMACOS 153
El mecanismo propuesto para estas reacciones, basado en el estudio de sustratos marcados (deuterados en
la Fig. 7.10). implica la introducción de un átomo de oxígeno para formar el óxido de areno ®, su apertura a es
pecies iónicas ® y finalmente la pérdida de protón (o deuterio). bien directamente ®, bien a través de una ciclo-
hexadienona ® y ®. para originar el fenol. La emigración intramolecular que se observa en los pasos ® —» ®,
que puede ser también concertada, se conoce como desplazamiento N1H, debido a que se descubrió en 1966 en
el Instituto Nacional de la Salud de Estados Unidos (National Institute of Health).
Figura 7.10. Mecanismos de oxidación de cadenas hidrocarbonadas aromáticas.
El desplazamiento NIH no se limita al hidrógeno y a sus isótopos, sino que también se ha observado con
otros sustituyentes, como los átomos de cloro y bromo, o el grupo metilo. Sólo así puede explicarse la forma
ción de ciertos metabolitos (Fig. 7.11).
CH.-CH-CO.H
Fcnilalanina
(hidroxilasa ,
Figura 7.11. Metabolitos originados en la oxidación de 4-clorofenilalanina.

La facilidad y orientación de la hidroxilación aromática en el metabolismo de fármacos viene influencia

da por el tipo de sustituyeme que soporta el anillo. Mientras que los donantes de electrones la favorecen, los
atrayentes de electrones la reducen o impiden. Así, un anillo activado, como el de la anilina, se hidroxila rápida
mente in vivo a orto- y para-aminofenol. Por el contrario, los grupos desactivantes (atrayentes de electrones)
presentes en el uricosúrico probenecid (Fig. 7.12) explican que no se hayan detectado metabolites de su oxida
ción aromática. Por último, la aparente resistencia al metabolismo de la toxina TCDD (tetraclorodibenzodioxa-
no) puede atribuirse, en parte, a la presencia de los cuatro átomos de cloro atractores de electrones.
Sustituyentes desactivantes
■ ó:
. n: CH,-CH2-CH,
H04C4 n'
CH2-CH2-CHj
Probenecid
TCDD
Figura 7.12. Ejemplos de sustratos aromáticos resistentes a la oxidación metabólica.
Los citocromos P-450 también catalizan reacciones de O, N y S-desalquilación (Fig. 7.13).
Reacción general:
| R-CH;-X-R' [
(X = O. S, NH)
Codeína
Figura 7.13. Ejemplos de reacciones metabólicas de O-, 5- y /V-desalquilación.

+ | HCHO |
+ | 2HCHO |
Figura 7.13. Continuación.
La O-desalquilación de éteres se inicia por una reacción de oxidación del átomo de carbono unido al oxí
geno. El hemiacetal así formado se descompone a alcohol o fenol y aldehido. La biotransformación de fenaceti-
na a paracetamol y la O-desmetilación de codeína a morfina son dos ejemplos. Una reacción similar es la 5-de-
salquilación, como la de la 6-metiltiopurina a 6-mercaptopurina.
La W-desalquilación origina las correspondientes aminas y compuestos carbonílicos. Así. la aminopirina
se biotransforma en 4-aminoantipirina y formaldehído en dos desmetilaciones sucesivas.
El grado de desmetilación de diferentes aminas se ha relacionado con su coeficiente de reparto y su pK„.
Hansch y colaboradores establecieron la Ecuación [5]:
log del grado de desmetilación = 0,470 log P - 0.268 (pK„ - 9,5) - 1,305
(r = 0,890) P - coeficiente de reparto [5]
El coeficiente negativo que multiplica al pK„ indica que una baja densidad electrónica en el nitrógeno fa
vorece la desmetilación.
La W-desalquilación también está afectada por la estereoquímica. Por ejemplo, las iV-alquilanfetaminas
dextrógiras muestran un mayor grado de /V-desalquilación a medida que se incrementa el tamaño del grupo al
quilo, no mostrando los isómeros levógiros tal efecto. Esto indica que el enlace C - H en alfa se ve implicado en
la unión a la enzima.
Las aminas terciarias pueden ser biodegradadas por desalquilación o por /V-oxidación. Esta última tam
bién tiene lugar en el metabolismo de aminas primarias y secundarias, dando lugar a hidroxilaminas y a nitroso-
compuestos que pueden ser metabolitos carcinógenos (Fig. 7.14).
N-óxido de
imipramina
Figura 7.14. Ejemplos del metabolismo oxidativo de aminas terciarias.

] 56 INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
Muchas reacciones de oxidación-reducción (redox) y de monooxigenación se producen con la catálisis de

otras enzimas que requieren mononucleótido o dinucleótido de flavina (FAD) como cofactor (Fig. 7.15).
Figura 7.15. Sistemas redox flavina reducida-oxidada.

El sistema heterocíclico de flavina (Flox) puede aceptar dos electrones y un protón originando primero
FT’ y después FIH . La forma reducida así producida, requiere ser oxidada de nuevo. En el caso de las deshidro-
genasas, dicha oxidación se produce por la captación sucesiva de un electrón por parte de un aceptor, mientras
que en las oxidasas se produce por la captación de dos electrones por parte del oxígeno a través de un 4a-hidro-
peróxido. Así, el catabolismo de los ácidos grasos al estado de acil-coenzima A comienza con la deshidrogena-
ción en los carbonos a y p en reacciones catalizadas por deshidrogenasas de flavina (Fig. 7.16).
Figura 7.16. Deshidrogenación de ácidos grasos catalizada por deshidrogenasas de flavina.
R-CHO + NH,
Figura 7.17. Mecanismo de catálisis de las monoaminooxidasas (MAO).

Un ejemplo de monooxigenasas son las monoaminooxidasas (MAO), que son responsables del catabolis
mo de algunos neurotransmisores. como la noradrenalina y la dopamina. Estas reacciones transforman aminas
primarias en amoníaco y aldehidos, y transcurren a través de intermedios radicálicos (Fig. 7.17).
Las monooxigenasas de flavina también oxidan xenobióticos (sustancias extrañas al organismo), incorpo
rando a un sustrato un átomo de oxígeno procedente del O? molecular (Fig. 7.18). El cofactor actúa en este caso
como 4a-hidroperóxido (véase la Fig. 7.15).
Figura 7.18. Oxidación de xenobióticos catalizada por monooxigenasas de flavina.
La interacción de una flavoproteína W-oxidasa con una amina aromática, como la anilina, puede dar lu
gar a W-hidroxianilina y nitrosobenceno y ciertas A-alquilanilinas. como la /V-metilanilina indicada en la Figu
ra 7.19. pueden también W-oxidarse. La A'-metil-A'-hidroxianilina así formada, por posterior oxidación, puede
originar el ALmetilén-IV-óxido y éste, por hidrólisis, W-hidroxianilina más formaldehído (Fig. 7.19).
flavina monooxigenosa
A'-mctillransfcrasa flavina o]¡

ArNH, ------------------------------- ArNHCH, -------------------------- ► i
monooxigenasa ArNCH,
ArNHOH + CH2O
t flavina [
ArN=CH2
monooxigenasa
Figura 7.19. Formación de /V-hidroxianilinas y nitroso derivados aromáticos.
La ALhidroxianilina. formada por reacciones de oxidación de anilina catalizadas por citocromo P-450 o
por monooxigenasas de flavina, se concentra en los glóbulos rojos y es responsable de la producción de metahe-
moglobinemia tras la administración de anilina a animales de experimentación. Ésta puede producirse por la
oxidación subsiguiente a nitrosobenceno, el cual puede volverse a reducir a N-hidroxianilina bajando los niveles
de glutatión reducido que protegen a la hemoglobina frente a la oxidación.
Por otra parte, muchos productos /V-hidroxilados pueden ser químicamente inestables y deshidratarse,
produciendo especies electrófilas de tipo imina o iminoquinona. que pueden ser muy tóxicas. En la Figura
7.20a, se representa la transformación del fármaco paracetamol en una iminoquinona. a través de una reacción
previa de /V-oxidación. La iminoquinona también puede producirse a través de intermedios de tipo epóxido
(Fig. 7.20Z»), En esta figura, XH representa al glutatión o a un nucleófilo presente en macromoléculas endóge
nas. Esta última reacción produce una disminución de los niveles de glutatión en los eritrocitos de la sangre, lo
que supone eliminar la protección de la hemoglobina a la oxidación.
Figura 7.20. Formación de iminoquinonas (posibles citotóxicos) en el metabolismo oxidative del paracetamol.
Grandes dosis de paracetamol causan lesiones hepáticas y renales en el ser humano. La actividad del cito-
cromo P-450 en los riñones es baja y, por consiguiente, estas enzimas no parecen ser responsables fundamenta
les de la toxicidad a este nivel. En este caso, es la prostaglandina H sintetasa, conocida también como ciclooxi-
genasa. la que puede promover la toxicidad del paracetamol en el riñón en procesos que transcurren a través de
radicales (Fig. 7.21). En dosis terapéuticas, el paracetamol es poco tóxico, pero en dosis elevadas, produce ne
crosis hepática y lesiones renales asociadas a descensos de las reservas de glutatión.
Figura 7.21. Oxidación del paracetamol a través de procesos radical icos.
Una reacción de oxidación metabólica de interés es la del aminoácido i.-arginina. En ella, se produce el
óxido nítrico ( N = O), que produce una acción vasodilatadora al activar la enzima guanilato ciclasa. En las cé
lulas de los mamíferos, el óxido nítrico se oxida posteriormente a N>O, y N.O4, Ambos son agentes nitrosantes
de aminas (Ecuaciones [6] - [9]).
. . . oxidación O2 ,
Argtntna-------------- > NO------ -—>2 NO2 [6]
óxido nítrico
NO + 2NO2 « 2 N,O, [7]
2NO2 - N2O4 [8]
N2O, ó N2O4
R;NH ->R;N - NO
/V-nitrosaminas
La diazotación de aminas primarias produce su desaminación por hidrólisis de los cationes diazonio así
producidos. Si este tipo de reacciones ocurre en grupos amino de bases de ADN. dichas bases se modifican ori
ginando aberraciones genéticas (Ecuación (10]).
—H O ® H O
•NO + H2N-R-------- > ----- ♦ N2-R——> HO-R (10]
T ¿
Grupos amino de bases de ADN Aberraciones genéticas
A su vez, los nitrosoderivados de aminas secundarias pueden ser cancerígenos, ya que son precursores de
especies electróftlas que pueden alquilar nucleófilos de macromoléculas como ADN. Ciertas aminas terciarias
pueden también nitrosarse y originar este tipo de especies. En la Figura 7.22, se representa el proceso para la ni
cotina.
Nicotina
ZO
N''
r-n'
'CH,
Nitrosamina
secundaria
Figura 7.22. Nitrosoderi vados de aminas secundarias como precursores de especies cancerígenas.
Los tioéteres también pueden oxidarse en el azufre a sulfóxidos y sulfonas. Así. la clorpromazina
(Fig. 7.23) se metaboliza a su correspondiente sulfóxido. Este proceso, a diferencia de la oxidación subsiguien
te a sulfonas, es reversible. Así, la sulfinpirazona se reduce a sulfuro y viceversa. Otra reacción de oxidación,
menos frecuente, que se produce en ciertos derivados de azufre es la desulfuración (véase, por ejemplo, la bio-
transfonnación de tiopental).
S-oxidación
Figura 7.23. Ejemplos de reacciones de S-oxidación y desulfuración.

La oxidación de alcoholes y aldehidos se cataliza por alcohol y aldehído-deshidrogenasas. que son enzi
mas no específicas. Los alcoholes secundarios se oxidan más lentamente que los primarios, debido a su menor
acidez y mayor impedimento estérico para la formación del complejo sustrato-enzima. En la Figura 7.24, se re
presenta el mecanismo de oxidación de I-deuterioetanol por la alcohol-deshidrogenasa hepática (LAD. liver al
cohol dehydrogenase).
Figura 7.24. Mecanismo de oxidación del deuterioetanol por LAD.
La oxidación de aldehidos a ácidos carboxílicos está catalizada por aldehído-deshidrogenasas hepáticas

*
dependientes igualmente de NADP y además, requiere, como en el caso de la oxidación de alcoholes, la trans
ferencia de hidruro al NADP' y la participación de agua o hidroxiliones como nucleófilos. De acuerdo con este
mecanismo, la actividad enzimática se incrementa a medida que aumenta el pH del medio (Fig. 7.25).
NADP* NADH
Figura 7.25. Oxidación rnetabólica de aldehidos a ácidos.
Otras enzimas oxidativas como la aromatasa, que transforma andrógenos en estrógenos, se verán en el
Capítulo 11.
6.1.2. Reducción
Aunque menos importantes que los procesos oxidativos, las reacciones de reducción también desempeñan un
importante papel. La Tabla 7.4 muestra los grupos químicos más comunes en los que se produce la reducción
rnetabólica. Todos los procesos de reducción son dependientes de NADPH-citocromo C-reductasa y muchos es
tán mediados por flavoproteínas, como FADH.
Tabla 7.4. Vías metabólicas de reducción.
Grupos funcionales Ejemplos
Aldehidos R-CHO --------- ► R-CH2OH
Cotonas R-CO-Rj --------- ► R-CHOH—R]
H H
Alquenos R-C=C-R --------- ► R-C-C-R
ii ii
R R R R
Sulfóxidos R,-S—R2 --------- ► R,—S—R¡

0
♦Nitroderivados R-NO, --------- ► R-NO --------- ► R-NHOH --------- ► R-NH,
Azoderivados R-N=N-R, --------- ► R-NH2 + NH2—R,
* Los metabolites producidos en la reducción de nitroderivados están implicados en problemas de toxicidad.
a) Azo-reducción. Los compuestos azoicos sufren una ruptura reductora, para originar aminas aromáticas
primarias, por la acción de azorreductasas. Uno de los ejemplos más representativos es el descubrimiento de la
azorreducción de prontosil rubrum, que dio lugar al desarrollo de las sulfamidas antibacterianas (Fig. 7.26a).
Determinados compuestos azoicos usados en la industria farmacéutica, como la tartrazina, se reducen por azo
rreductasas de la flora intestinal, por lo que, cuando se administran por vía parenteral, se eliminan, sin metabo-
lizar, por la orina. Por eso, la introducción de grupos sulfónicos es una estrategia ampliamente utilizada para au
mentar la hidrofilia y, por tanto, impedir la absorción oral y la posible toxicidad de algunos colorantes de uso
alimentario.
Sulfanilamida
DDT
reducción
(R) Warfarina (R,S) Warfarinol
7-Hidroxi-(S) Warfarina
(S) Warfarina
Figura 7.26. Ejemplos de reducciones melabólicas.
b) Reducción de nitroderívados. La reducción de nitroderivados aromáticos supone un riesgo toxicológi-

co, ya que algunos metabolites así producidos son mulágenos (Fig. 7.27 y Capítulos 18 y 19). La reducción de ni
troderivados aromáticos está catalizada por el citocromo P-450, siendo necesaria la presencia del NADPH. Es un
proceso de varios pasos en el que la reducción de grupo nitro a nitroso es el determinante de la reacción. Inicial
mente se forma un anión radical nitro, pero una reoxidación de este radical por el oxígeno da el compuesto nitro
original y un anión radical superóxido, lo que puede explicar la inhibición que la presencia de oxígeno determina
sobre el proceso. En la transformación de la especie RNÓ2H a R-NO, puede producirse la lesión de ADN.
ADN
Figura 7.27. Reducción de niiroderivados y formación de especies mutágenas.
c) Deshalogenaeión reductora. El enlace C—F es metabólicamente estable, pero un gran número de

compuestos polihalogenados, como el anestésico general halotano y el insecticida DDT, se metabolizan por es
ta vía (Fig. 7.26b).
d) Reducción de cetonas. Los grupos cetónicos pueden encontrarse en los fármacos o formarse como
productos intermedios en la desaminación oxidativa de otros. La LAD cataliza su reducción a alcoholes, así co
mo el proceso inverso. El anticoagulante oral warfarina es un ejemplo interesante de la estereoselectividad de
estas reacciones. En el ser humano, el enantiómero /?(+), menos activo (Fig. 7.26c), sufre la reducción del grupo
cetónico de su cadena lateral, dando preferentemente el alcohol R.S. Por el contrario, el isómero S(-) sufre una
mínima reducción y, fundamentalmente, se hidroxi la en posición 7.
e) Reducción de dobles enlaces. Las reducciones de compuestos etilénicos a alcanos las realizan reducta-
sas dependientes de NADH. Así, la del doble enlace C-24=C-25 del desmosterol, paso fundamental en la bio-
síntesis del colesterol, la realizan reductasas hepáticas.
6.1.3. Hidrólisis
Las enzimas hidrolíticas participan en muchas biotransformaciones de fase I. Entre ellas, las esterasas y amida-
sas, con escasa especificidad de sustrato, se encuentran en el intestino y la sangre, así como en el citoplasma de
las células de muchos tejidos y órganos. Las epóxido hidrolasas, que hidrolizan epóxidos a dioles, se encuentran
siempre asociadas al citocromo P-450.
a) Hidrólisis de esteres. Citaremos, como ejemplo, la enzima acetilcolinesterasa, que se localiza espe
cialmente en las terminaciones nerviosas y en las sinapsis, donde se produce la liberación del neurotransmisor
acetilcolina, catalizando su hidrólisis (Fig. 7.28). La pseudocolinesterasa presenta un espectro de acción más
amplio y es capaz de hidrolizar ásteres del ácido acético y de ácidos aromáticos como el anestésico local pro-
caína. Los efectos electrónicos y estéricos de los sustituyentes sobre un sustrato afectan al grado de hidrólisis
catalizada por esterasas, en forma análoga a como lo harían en su hidrólisis básica. Los sustituyentes abactores
de electrones incrementan la hidrólisis y los donantes de electrones la inhiben.
CH3 h,o r....... < -CH’

ch3: co-o-j-cH -ch2-ñ-ch, ------- ■------- ► CH, CO2H : + ; HO-CH-CH —N-CH,
SCH, "CH,
Acetilcolina
zc2h<
4-co2h : + • ho¿-ch2-ch2-n
'c2h5
Procaína
Figura 7.28. Ejemplos de reacciones de hidrólisis catalizadas por esterasas.

b) Metabolismo de nitrilos. Los nitrilos de ácidos aromáticos se metabolizan normalmente por hidroxila-
ción del anillo. Los alifáticos, sin embargo, se metabolizan con liberación de cianuro, al parecer, previa oxida
ción en el carbono alfa (Fig. 7.29). El ion cianuro, muy tóxico, se transforma rápidamente en anión tiocianato.
por reacción con tiosulfato catalizada por la enzima rodanasa (tiosulfato-sulfo-transferasa).
Figura 7.29. Rutas metabólicas de oxidación y destoxificación de nitrilos.
c) Hidrólisis de amidas. Las amidas suelen ser menos susceptibles a la hidrólisis que los ésteres. Esta hi
drólisis es una vía de ruptura de compuestos heterocíclicos nitrogenados, como las hidantoínas y las benzodia-
zepinas (Fig. 7.30).
Ácido (/?>-2-fcnilhidantoico
Clordiazcpóxido
Figura 7.30. Hidrólisis de fármacos con estructura de amida.

6.2. Reacciones de fase II
Las biotransformaciones oxidantes, reductores e hidrolíticas que sufren los fármacos en procesos de fase I no
necesariamente producen metabolites hidrófilos. En muchos casos, un grupo de enzimas complementarias de ti
po transferasas completan este trabajo posteriormente y catalizan las llamadas reacciones de fase II, en las que
se unen pequeñas moléculas polares endógenas, como ácido glucurónico. sulfato, glicina, etc., a los metabolites
producidos en la fase I, para formar productos más hidrosolubles, que se excretan. Algunas de estas reacciones,
sin embargo, como la acetilación y la metilación. no conducen a un aumento de la hidrosolubilidad. pero sirven
para suprimir o atenuar una determinada acción biológica.
6.2.1. Conjugación con ácido glucurónico
La glucuronoconjugación es la ruta de eliminación más importante de la mayor parte de los fármacos y produc
tos endógenos. La glucosa-1 -fosfato (Fig. 7.31). que se origina en el metabolismo de los hidratos de carbono, se
activa a uridinadifosfato-a-o-glucosa (UDPG). y posteriormente se oxida por deshidrogenasas para dar el ácido
uridina-difosfato-a-D-glucurónico (UDPGA), o ácido glucurónico «activo». Las transferasas catalizan su reac
ción con una gran variedad de grupos funcionales nucleófilos. La formación de glucurónidos implica la inver
sión del centro anomérico a del ácido glucurónico a la configuración p. En la Tabla 7.5 se señalan algunos gru
pos funcionales que experimentan estas reacciones.
1) OH O
Jí
OH
+utp —* 1 HN"?1
x JJ
HO'y^----- \ HO^
V—oh O^N + PP,
HO'ttcTl ?H HO-J'íio H OH OH
O-P-OH O-P-O-P-O—|
II 11 11 o
0 o r N
a-D-glucosa-1 -fosfato
UDPG 1 1
(Uridina difosfato a-D-glucosa) HO OH
2) CO,H
UDPG 0
UDPG + 2NAD
* + H.O ——----------- • HO \ + 2NADH + 2H
*
deshidrogenaba
O-UDP
UDPGA
(ácido uridina difosfato
a-D-glucurónico ■ ácido
glucurónico «activo»)
R-XH
3) co2h ___ j hn-^> COOH
J HO-^\ XR
OH OH O^N' ’ HO-^T^
ll() HO H 1 1
'♦O-P-O-P-O—.
a ü
X = 0, N, C, f}-D-glucurónido
HO OH 0
X = — C - O. éster de P-D-glucurónico
RXH = Metabolito o fármaco en el que X = O. S, N, C
Figura 7.31. Ácido glucurónico «activo» y reacciones de conjugación.

NH
Anilina
(aminas)
Fenilbutazona
(enlaces C—H activados)
6.2.2. Conjugación con sulfato
Aunque es una reacción menos frecuente que la anterior, por las escasas reservas de sulfato, la conjugación de
fenoles, alcoholes y aminas aromáticas es un proceso importante que compite con el anterior. En un primer pa
so. el ion sulfato se convierte en «sulfato activo» o 3'-fosfoadenosina-5'-fosfosulfato (PAPS), y es entonces
transferido al sustrato por una sulfocinasa (Fig. 7.32).
ATP + SO.'
sulfurilasa
Figura 7.32. Sulfato «activo» y reacciones de conjugación.

APS-cinasa
O
R-X—S-OH + PAP
Sulfotransferasa ii
(Sulfocinasa) O
Figura 7.32. Continuación.
Al ser el sulfato un buen grupo saliente, estos metabolites, especialmente los sulfatos derivados de hidro-
xilaminas aromáticas, pueden estar implicados en reacciones lexicológicas.
Sorprende la escasez de conjugados con fosfato de fármacos y xenobióticos que se han identificado, si se
considera la importancia del fosfato activo (ATP) en el organismo.
6.2.3. Acetilación
Una consecuencia de los procesos metabólicos es la abundancia de ácido acético activado en forma de acetil-co-
enzirna A. Por ello, la acetilación es la principal ruta de conjugación para fármacos y xenobióticos que conten
gan grupos NH>. La acetilación de la isoniazida (Fig. 7.33) muestra el mecanismo denominado de «ping-pong»
de este tipo de reacciones, en las que el intermedio es la enzima acilada.
Isoniazida
Figura 7.33. Acetilación de isoniazida catalizada por/V-acetil-transferasa.

6.2.4. Metilación
La .S'-adenosilmetionina (Fig. 7.34) es el agente metilante implicado en este proceso catalizado por (V-metil-
transferasas (los ácidos folínicos también pueden actuar como donadores de grupo metilo). Una de estas enzi
mas. la catecol-O-metil-transferasa (COMT), cataliza la metilación de hidroxilos catecólicos en posición meta
respecto al sustituyeme alquílico, uno de los procesos implicados en la inactivación Fisiológica de neurotransmi-
sores adrenérgicos.
COjH
Noradrcnahna
OH OH S-5'-Adcnosilmetionina
CO:H
CHNH,
I
ch2
OH OH
S-5'-Adenosilhomocisteína
Figura 7.34. S-Adenosilmetionina como agente metilante. Reacción catalizada por COMT.
6.2.5. Conjugación con glutatión
El tripéptido y-glutamil-cisteinil-glicina (GSH. Fig. 7.35) es importante en el metabolismo de fármacos y xeno-

bióticos, debido a la reactividad del grupo tiol y su elevada concentración intracelular. La nucleofilia de dicho
grupo le permite reaccionar enzimáticamcnte por la catálisis de glutatión-transferasas del citoplasma, y no enzi-
máticamente. con numerosos elcctrófilos tales como epóxidos. dobles enlaces activados, haluros activados y
quinonas. Los aductos se eliminan exclusivamente por vía biliar, pero en general se degradan posteriormente
hasta ácidos mercaptúricos. que se excretan por la orina mediante la separación de los restos de glutámico y gli
cina seguida de acetilación.
Glicina
«Cistcinil-glicinasa»
Derivado de
cisteína-S-sustituido
CoA-SH
E : electro filo (cpóxidos; >C = C - Z; R - X; quinonas; etc.)
Figura 735. Conjugación con glutatión (GSH) de metabolitos o xenobióticos electrófilos y su conversión
a ácidos mercapttiricos.
6.2.6. Conjugación con aminoácidos
Es una ruta de especial interés para la eliminación de ácidos carboxílicos aromáticos y ácidos arilacéticos, pre
via activación de éstos a la acilcoenzima correspondiente (Fig. 7.36).
Acilcoenzima A
«ácido activado» R = H; -CH2-CH2-CONH2
Figura 736. Conjugación del ácido fenilacético «activado» con glicina o L-glutamina.
6.3. Factores que influyen en el metabolismo de los fármacos
Las diferentes especies animales responden de una forma muy variada a la administración de los fármacos. Por
ejemplo, el 2-acetilaminofluoreno es carcinógeno en la rata, el conejo, el perro y el ser humano, y no lo es en el
cobayo. La toxicidad depende del mayor grado de JV-hidroxilación que se produce en aquellas especies frente a
otras vías de desintoxicación, preferentemente la hidroxilación aromática.
Se han observado en ratas diferencias según el sexo, pero son menos frecuentes en otras especies animales.
El polimorfismo genético en el ser humano justifica las diferencias encontradas en la capacidad para me-
tabolizar los fármacos. Por ejemplo, el 95-100 % de los esquimales son acetiladores rápidos de isoniazida,
mientras que sólo lo son el 18 % de los egipcios, ya que la mayoría son deficientes en /V-acetiltransferasa hepá
tica. Si la dosis de fármaco no se ajusta a estas diferencias metabólicas, pueden presentarse serios efectos tóxi
cos en los acetiladores lentos. Los acetiladores rápidos, por el contrario, pueden sufrir hepatitis asociada a la
mayor producción de acetilhidrazina. producto de la hidrólisis de la acetilisoniazida. que resulta hepatotóxica.
6.4. Inductores e inhibidores del metabolismo
En el año 1954, Richardson y cois, trataban de incrementar la incidencia de cáncer en ratas administrándoles, si
multáneamente, dos agentes carcinógenos: 4-dimetilaminoazobenceno y 3-metilcolantreno. Sorprendentemen
te. observaron que la hepatocarcinogénesis del azobenceno se suprimía. Este resultado se explicó cuando se de
terminó que el 3-metilcolantreno induce la síntesis de enzimas microsómicas que metabolizan los colorantes
azoicos por /V-desmetilación y azorreducción, originando productos no cancerígenos.
Estudios posteriores revelaron que otros hidrocarburos aromáticos condensados. como el benzo[a]pireno,
el dibenzo[ajj|antraceno y el enseno, aumentan en gran medida la actividad de las oxigenasas de los microsomas
hepáticos. Ciertos fármacos, pesticidas, herbicidas, e incluso el humo del tabaco, son inductores o inhibidores de
ciertos procesos metabólicos. Así. el ketoconazol es un antifúngico sistémico porque inhibe el citocromo P-450
responsable de la síntesis de esteróles en el hongo. Al carecer de especificidad, también inhibe al citocromo P-
450 de los mamíferos, por lo que produce hepatotoxicidad. Cienos fármacos con estructura imidazólica, como la
cimetidina y el metronidazol. pueden producir interacciones con otros fármacos por inhibir el citocromo P-450.
La dieta también puede afectar al metabolismo de los fármacos. Por ejemplo, la administración de vitami
na C previene la hepatotoxicidad resultante de la administración de aminas secundarias y nitratos, al bloquear la
formación de las nitrosaminas (potentes cancerígenos), ya que aumentan los niveles de citocromo P-450 y de
NADPH-citocromo-C-reductasa.
6.5. Selectividad en el metabolismo de fármacos
Fármacos con estructuras estrechamente relacionadas, pueden mostrar diferentes rutas metabólicas. Además,
un fármaco puede originar un mismo metabolito por rutas metabólicas diferentes. Las reacciones catalizadas
por enzimas se caracterizan por su selectividad, ya que deben reconocer el sustrato, para la formación del
complejo enzima-sustrato (selectividad de unión), y el estado de transición (selectividad cinética). Dada la
enorme importancia que tiene el metabolismo en la mayor o menor semivida y en la mayor o menor toxicidad
de los fármacos, el estudio profundo de esta selectividad está proporcionando datos importantes para el dise
ño de fármacos.
Las aminas terciarias se han dividido, después del estudio de su metabolismo, en tres grupos. En el primero,
se incluyen las que tienen un pK„ = 8-11 y son oxidadas por monooxigenasas que tienen flavinas como cofactores.
En el segundo, las que son bases débiles, con un pKd = 1-7, que pueden oxidarse como aquéllas o por citocromo
P-450. El tercero incluye las que no son básicas y se oxidan por sistemas dependientes del citocromo P-450.
El metabolismo puede ser igualmente estereoselectivo. El etomidato (Fig. 7.37), hipnótico cuya actividad
reside en el enantiómero /?(+), se metaboliza por dos rutas competitivas: la ruta A, que se inicia por la hidrólisis
del éster, y la ruta B. que comienza con una /V-desalquilación (o desaminación) como resultado de una hidroxi
lación en el carbono bencílico. El análisis de sus metabolitos urinarios muestra que el enantiómero /?(+) es me
jor sustrato para la hidrólisis que el enantiómero S(-).
• Preferente en el enantiómero R(+)
Figura 7.37. Vías de metabolismo de etomidato.
En muchos casos, uno de los enantiómeros es más estable al metabolismo que el otro, lo que puede supo
ner el enriquecimiento de aquél. Así, el antiinflamatorio ibuprofeno. después de su administración en forma ra-
cémica, origina los metabolitos indicados en la Figura 7.38.
Ibuprofeno racómico
(Relación S/R = 50/50)
Metabolitos Relación S/R del centro estereogénico en 2

en orina
Ibuprofeno 71/29 (enriquecimiento en el enantiómero S)

B 71/29 (metabolito hidroxilado con cl mismo exceso
cnantiomérico que el fármaco excretado)
Relación S/R de los centros estereogénicos en 2 y 2'
A (2S:2'Sr 43%
(2R-.2/RY 13% , 100%
(2 S: 2'/?) + (2/?; 2'S)* 44%,
Se separaron por GLC.

* Mezcla que no pudo separarse.
Figura 7.38. Estereoquímica del ibuprofeno y sus metabolitos en la orina humana después de su administración
en forma racémica.
6.6. Aspectos evolutivos del metabolismo de los fármacos
Muchas de las enzimas que metabolizan fármacos han evolucionado para permitir a los animales superiores eli
minar sustancias liposolubles. El feto carece casi por completo de enzimas oxidantes y presenta déficit de otras
hasta algunas semanas o incluso meses después del nacimiento. Los ancianos también presentan déficit de enzi
mas metabólicas.
6.7. Problemas toxicológicos derivados del metabolismo de los fármacos
Todos los intermedios reactivos tienen capacidad potencial para modificar moléculas endógenas, interferir fun
ciones fisiológicas o inhibir el sistema de defensa del organismo. Se deben considerar intermedios reactivos los
electrófilos fuertes que se encuentran en el fármaco original o que se han formado en el metabolismo. Por ello,
los árenos, que pueden originar epóxidos. y ciertos grupos funcionales como el NO:. que origina a través de ni
troso- e hidroxilaminas derivados mutágenos. contienen, entre otros, un elevado potencial toxicológico. Para
evitar los problemas derivados de la toxicidad producida en la bioactivación metabólica, han surgido los fárma
cos blandos (véase el Capítulo 8).
6.8. Métodos de estudio del metabolismo
La identificación y la cuantificación de los metabolitos constituye un estudio imprescindible en el desarrollo de

un fármaco. Se emplean la extracción con disolventes y las diversas cromatografías: papel, capa fina, de gases y
HPLC. Para la detección, identificación y estimación cuantitativa se utilizan la espectroscopia ultravioleta, el in
frarrojo, la resonancia magnética nuclear, la fluorimetría. la espectrometría de masas y los radioisótopos.
BIBLIOGRAFÍA
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Ariens, E. J.: Molecular Pharmacology, vol. 1. Academic Press, Nueva York, 1964.
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Stenlake. J. B.: Foundations of Molecular Pharmacology, vol. 1. The Athlone Press, Londres. 1979.
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Profármacos y sus aplicaciones.

La manipulación de las propiedades
fisicoquímicas y farmacocinéticas
como objetivo del diseño de fármacos
J. C. Menéndez y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
El objetivo fundamental del diseño de fármacos no es únicamente la búsqueda de moléculas de actividad bioló
gica máxima. Es importante tener en cuenta que, dentro de una serie de compuestos, el óptimo no es necesaria
mente el de mayor actividad, sino el que presenta un mayor índice terapéutico. Este parámetro es una medida
cuantitativa de la relación actividad/toxicidad; por ejemplo, si la actividad se cuantifica por medio de la dosis
eficaz 50 (DE») y la toxicidad como la dosis letal 50 (DLW). dado que los valores de DE» y DL» están en rela
ción inversa con la actividad y la toxicidad, respectivamente, el índice terapéutico se expresa:
Actividad _ DL«>
Toxicidad DEW
La optimización de una estructura cabeza de serie supone tratar de conseguir el IT máximo, lo que se pue
de lograr disminuyendo el denominador de la fracción DLmNDEso. mediante un aumento de la actividad, o bien
aumentando el numerador, por disminución de la toxicidad.
La toxicidad está íntimamente relacionada con la capacidad del fármaco para alcanzar selectivamente su
lugar de acción, ya que. si se logra dicha selectividad, es posible la máxima eficacia terapéutica con la adminis
tración de dosis inferiores. También guarda una relación muy estrecha con el metabolismo del fármaco, como se
ha comentado en el capítulo anterior. Existen, además, otros muchos problemas de índole galénica, farmacoci-
nética y lexicológica que pueden impedir, en la práctica, el empleo de un compuesto con buena actividad:
— Problemas relacionados con la formulación farmacéutica y la administración:
• Escasa hidrosolubilidad.
• Escasa estabilidad in vitro.
• Problemas en la administración: inyección dolorosa, olor o sabor desagradables, etc.
— Problemas relacionados con la etapa farmacocinética:
Problemas en el paso a través de membranas biológicas: absorción y distribución.

Inespecificidad en la distribución.
• Inactivación metabólica antes de alcanzar el sitio de acción.

• Acción demasiado breve.
• Toxicidad derivada del metabolismo.
En resumen, el diseño de fármacos no debe plantear como único objetivo el logro de una buena actividad
biológica, sino también la superación de una serie de problemas adicionales que podrían obstaculizar la utilidad
práctica de una molécula. Aunque, a veces, pueden superarse estos problemas mediante métodos físicos y bioló
gicos. abordaremos en este capítulo los métodos basados en transformaciones químicas. Entre ellos, uno de los
principales ha sido el empleo de profármacos.
2. CONCEPTO DE PROFÁRMACO
Para superar uno o varios de los problemas mencionados en el apartado anterior, podría plantearse la sustitu
ción del fármaco original por otro compuesto que posea propiedades mejoradas (por ejemplo, que sea hidroso-
luble. que se absorba bien, etc.). Este nuevo compuesto puede ser. simplemente, un análogo de la estructura
inicial, en cuyo caso su actividad biológica sería diferente de la del fármaco original. Otra posibilidad consiste
en diseñar el nuevo compuesto de manera que se transforme, en el organismo, en el fármaco original, en cuyo
caso se dice que el nuevo derivado es un profármaco. Por lo tanto, se puede definir un profármaco como un
compuesto que requiere ser transformado dentro del organismo, por un proceso químico o enzimático, para
que manifieste su efecto. Los profármacos se denominan, a veces, «fármacos latentes» o «derivados biorrever-
sibles».
Los profármacos suelen clasificarse en dos grupos (Fig. 8.1):
a) Profármacos con un grupo transportador. La estructura del fármaco original (F) se modifica por la
incorporación de un grupo G, sintetizando una nueva estructura F-G. que carece de la actividad de
F y se transforma en el organismo originando de nuevo F, generalmente a través de una reacción de
hidrólisis. Puede considerarse que el grupo G realiza el mismo papel que los grupos protectores
que se utilizan en síntesis orgánica para enmascarar temporalmente la reactividad de determinadas
funciones.
b) Bioprecursores. Estos compuestos presentan una estructura diferente a la activa, transformándose en
ésta a través de un proceso generalmente no hidrolítico y, a veces, complejo.
Profármaco con
grupo transportador
Bioprecursor
Figura 8.1. Profármacos con grupo transportador y bioprecursores: definición.
Como ejemplo de profármaco con un grupo transportador, puede mencionarse la dipivaloiladrenalina (di-
pivefrina). un derivado lipófilo de la adrenalina que se transforma in vivo en la especie activa por hidrólisis. Un
PROFÁRMACOS Y SUS APLICACIONES. LA MANIPULACIÓN DE LAS PROPIEDADES... 177
bioprecursor representativo es el antipalúdico cloroguanida. cuya especie activa es el cicloguanilo. La forma

ción del cicloguanilo tiene lugar a través de la hidroxilación del carbono vecino al nitrógeno, seguida de ci-
clación con pérdida de una molécula de agua (Fig. 8.2).
OH
....... -I
transportadores _____________ IJ \ NH-CH

........| (CH,)1C-CO-|O'"'^^^ 3
Dipivaloiladrenaiina (dipivefrina) Adrenalina

(profármaco con grupos transportadores) (especie activa)
Cicloguanilo (especie activa)
Cloroguanida
(bioprecursor)
Figura 8.2. Profármacos con grupo transportador y bioprecursores: ejemplos.
Un profármaco ideal debe presentar las siguientes características:
1. La unión del fármaco con el grupo modulador debe ser covalente.

2. Su bioactivación debe ser más rápida que otras posibles reacciones metabólicas y que su eliminación.
3. Ni el profármaco ni el grupo modulador, una vez liberados, deben ser tóxicos ni dar lugar a metaboli
tes tóxicos. Puesto que la mayor parte de los efectos tóxicos derivados del metabolismo se deben a las
reacciones oxidativas, es preferible que la bioactivación de los profármacos sea hidrolítica.
3. PROCEDIMIENTOS PARA LA CONSTRUCCIÓN DE PROFÁRMACOS

SOBRE DISTINTOS GRUPOS FUNCIONALES
3.1. Profármacos de ácidos carboxílicos
La amplia distribución de las esterasas en el organismo hace que los esteres sean los profármacos más co
munes para los fármacos con estructura de ácido carboxílico.
La principal limitación de este método se debe a la excesiva estabilidad in vivo de algunos ésteres,
cuyo grupo carbonilo es inaccesible al centro activo de la esterasa por motivos de impedimento estérico.
Este problema se ha resuelto a través de la preparación de aciloximetil ésteres. en los que el grupo ás
ter externo es más fácilmente accesible al centro activo de la esterasa. La hidrólisis de estos aciloximetil és
teres conduce a hidroximetil ésteres. químicamente inestables, que pierden formaldehído para regenerar el
fármaco.
En la Figura 8.3. se ilustra esta estrategia, utilizando como ejemplo la ampicilina, un antibiótico (J-
lactámico (véase también la Fig. 8.28). Es interesante destacar que la capacidad de las esterasas para hidro-
lizar ésteres impedidos depende de la especie; por ejemplo, los esteres simples de ampicilina son hidroliza-
dos sin problemas por las esterasas de ratón, pero no por las humanas.
Hidrólisis enzimática
lenta
Éster simple de la ampicilina
Aciloximetil ¿ster de la ampicilina
Figura 8.3. Profármacos de ampicilina con estructura de aciloximetil ésteres.
Otro tipo de profármacos de ácidos carboxílicos son los carbonatos cíclicos de tipo 2-oxo-1,3-dioxol-4-
ilo, que son capaces de regenerar el ácido según el mecanismo propuesto en la Figura 8.4.
Especie activa
Figura 8.4. Carbonatos cíclicos como profármacos de ácidos carboxílicos.
3.2. Profármacos de alcoholes, fenoles, fióles y tiofenoles
De nuevo, son los ésteres los profármacos más comunes. Los éteres ordinarios no son profármacos adecuados
de los hidroxiderivados, porque su desalquilación no es lo bastante rápida. Por ello, se han utilizado aciloxime
til éteres o tioéteres. basándose en la inestabilidad química de los hidroximetilderivados que resultan del ata
que por esterasas. Debido a la buena estabilidad del oxígeno aromático de los fenoles como grupo saliente, en
este caso se puede utilizar también un tipo especial de ésteres de menor reactividad, los carbamatos. Entre
ellos, son interesantes los derivados de imidazol, que liberan el fármaco correspondiente en un proceso no enzi-
mático (Fig. 8.5).
Profármaco
de tipo éter
Esterasa
Especie activa:
alcoholes, fenoles
H-CHO Profármaco de tipo
Profármaco
de tipo éster aciloximetil éter
Hidrólisis
Esterasa no enzimática
Profármaco de tipo carbamato
F igura 8.5. Profármacos de alcoholes y fenoles.
Para los lióles, se emplean profármacos similares (tioésteres y aciloximetil tioéteres). Además, se han
desarrollado profármacos con estructura de disulfuro, teniendo en cuenta la facilidad con que éstos se reducen
en el organismo, con intervención del glutatión (G-SH, Fig. 8.6).
Profármaco de tipo
aciloximetil tioéter
| Esterasa
(f)- sh Reductasa
Especie activa:
tioles. tiofenoles
Profármaco de Profármaco de
tipo tiocster tipo disulfuro
G-S-S-G G-SH
Figura 8.6. Profármacos de tioles y tiofenoles.
3.3. Profármacos de amidas, imidas y otros compuestos con grupos NH ácidos
La química para el desarrollo de profármacos de este grupo, al que pertenecen las carboxamidas. las sulfonami-
das y numerosos tipos de heterociclos, está relativamente poco desarrollada. La manipulación estructural más
empleada es la preparación de aminometilderivados (bases de Mannich), a través de la reacción del mismo
nombre entre el fármaco, formaldehído y una amina, generalmente dimetilamina, en un medio ácido. El proce
so de bioactivación presenta el mecanismo inverso al de la formación de las bases de Mannich, y no requiere la
intervención de una enzima (Fig. 8.7). Por lo tanto, el principal defecto de estos profármacos es su inestabilidad
in vitro. La velocidad de degradación aumenta notablemente por el aumento de los efectos estéricos de los sus
tituyentes de la amina y por el aumento de la acidez del componente amídico. ya que supone la estabilización
del grupo saliente RCONH .
1X0 INTRODUCCIÓN A I.A QUÍMICA FARMACÉUTICA
Figura 8.7. Bases de Mannich como profármaeos de amidas.
En busca de profármacos que se bioactiven por vía enzimática. los fármacos con grupos NH ácidos se han
transformado en aciloximetil derivados. Esta técnica es especialmente útil en el caso de compuestos de tipo
imida, ya que la vecindad de dos grupos carbonilo contribuye a estabilizar la carga negativa del grupo saliente
de la reacción (Fig. 8.8).
. COH
No enzimática
Figura 8.8. Profármacos de bioactivación enzimática para compuestos nitrogenados de tipo imida.
Resulta de interés comentar en este punto algunas técnicas de construcción de profármacos de péptidos.
debido a la relevancia biológica de éstos. Ya se ha comentado (Capítulo 4) que la fácil degradación de los enla
ces peptídicos en el aparato digestivo hace imposible su uso por vía oral, lo que ha motivado, por una parte, el
desarrollo de los peptidomiméticos, y por otra, el diseño de profármacos resistentes a la hidrólisis. La introduc
ción de un grupo N-hidroxialquilmetilo protege de la hidrólisis al grupo afectado y al adyacente, en el segundo
caso por motivos estéricos. En el caso, relativamente frecuente, de péptidos cuyo aminoácido C-terminal esté en
forma de carboxamida, puede prepararse un derivado de 4-imidazolidinona por reacción con un compuesto car-
bonílico. Estos derivados se hidrolizan espontáneamente a pH fisiológico (Fig. 8.9).
Figura 8.9. Algunos profármacos de péptidos.

3.4. Profármacos de aminas
Muchas de las reacciones que se han comentado anteriormente pueden aplicarse a la preparación de profárma
cos de aminas. Las amidas no son, en general, buenos profármacos, debido a que se hidrolizan con demasiada
lentitud; sin embargo, si el componente carboxílico es un aminoácido, la hidrólisis se produce a una velocidad
adecuada, gracias a la gran abundancia de peptidasas en el organismo.
También se pueden emplear carbamatos de fenoles o aciloximetil carbamates, que se activan por el ata
que de una esterasa.
Entre los derivados de activación no enzimática, pueden mencionarse las bases de Mannich y las ¡minas,
de las cuales las más adecuadas son las derivadas de compuestos p-dicarbonílicos, porque su estabilización a
través de un enlace de hidrógeno intramolecular hace que se hidrolicen a una velocidad adecuada (Fig. 8.10).
Profármaco de tipo imina (enamina) de un compuesto P-dicarbonílico
Figura 8.10. Algunos profármacos de aminas.
Un enfoque alternativo del diseño de profármacos de aminas consiste en la aplicación del método co
nocido como hidrólisis distal. Por ejemplo: las amidas derivadas de ácidos 2-aciloximetilbenzoicos I se
comportan como profármacos de aminas a través del mecanismo indicado en la Figura 8.11.
Del mismo modo, los derivados fenólicos 2 se hidrolizan para dar los compuestos 3. En ellos, la pre
sencia de tres grupos metilo próximos fuerza a la molécula a estar en una conformación adecuada para una
ciclación, que libera la amina activa de forma casi instantánea.
El intermedio 3 puede generarse también por acción de una reductasa sobre las quinonas 4.
Los derivados de tipo 2 ó 4 han resultado también adecuados como profármacos de polipéptidos.
Figura 8.11. Diseño de profármaeos de aminas a través del método de hidrólisis distal y métodos relacionados.
3.5. Profármaeos de aldehidos y cetonas
En aquellos fármacos que contengan un grupo carbonilo enolizable, es posible atrapar ia forma enólica por
alquilación o acilación. Los enol esteres así obtenidos pueden ser útiles como profármaeos, debido a su fácil
hidrólisis (Fig. 8.12).
Figura 8.12. Profármaeos de aldehidos y cetonas.

I’KOFÁRM ACOS Y SUS APLICACIONES. LA MANIPULACIÓN DE LAS PROPIEDADES... 183
También se emplean como profármacos algunos derivados del grupo carbonilo con estructura de oxa-
zolidina (Z = O) y tiazolidina (Z = S). Otros derivados, como los acétales cfclicos. presentan una hidrólisis
más lenta, aunque se utilizan en ocasiones (véase, por ejemplo, la Fig. 8.21 de este capítulo). Las oximas son,
en general, poco adecuadas, porque su hidrólisis es demasiado lenta. Sin embargo, las O-carboximetiloximas
se hidrolizan con mayor facilidad, debido a una asistencia intramolecular por parte del grupo carboxílico.
4. MANIPULACIÓN ESTRUCTURAL ORIENTADA A RESOLVER PROBLEMAS

DE FORMULACIÓN FARMACÉUTICA Y ADMINISTRACIÓN
4.1. Incremento de la hidrosolubilldad
Una hidrosolubilidad deficiente puede tener serias consecuencias negativas en la utilidad de un fármaco. Por
una parte, dificulta o imposibilita la preparación de formas farmacéuticas en disolución (inyectables, colirios,
etc.). Por otra, puede hacer que la absorción por vía oral sea deficiente, incluso si se emplean formas farmacéu
ticas sólidas, como los comprimidos, porque hace difícil la liberación de la molécula activa desde la forma far
macéutica hasta el medio intestinal, que es acuoso.
Para aumentar la hidrosolubilidad. pueden utilizarse dos técnicas: introducción de grupos hidrófilos en la
molécula o introducción de sustituyentes que hagan disminuir la estabilidad de su red cristalina.
a) Introducción de grupos hidrófilos
Lo más usual es la introducción de sustituyentes ionizables, es decir, grupos ácidos o básicos. Los grupos ácidos
más utilizados para incrementar la hidrosolubilidad son los hemisuccinatos y los fosfatos, de los que se presen
tan algunos ejemplos en la Figura 8.13. Estos sustituyentes se suelen introducir en fármacos con grupos hidroxi-
lo. En algunos casos concretos, puede emplearse directamente un grupo carboxílico como solubilizante. Por
ejemplo, el clorazepato, una benzodiazepina hidrosoluble, se descarboxila en el organismo debido a su estructu
ra de [J-oxoácido.
H,C„
Clorazepato
Profármacos hidrosolubles de la prednisolona

R = CO-CLb-CHi-CC^Na Hemisuccinato (sal sódica)
R = PO3Na2 Fosfato (sal disódica)
Hemisuccinato del oxazepam
Figura 8.13. Algunos grupos solubilizantes aniónicos.
Los fosfatos se suelen hidrolizar in vivo a una velocidad adecuada, gracias a la relativa abundancia de fos-
fatasas en el organismo, y además son estables in vitro. Los hemisuccinatos. en cambio, se activan por vía no
enzimática. en una reacción catalizada por el grupo carboxílico libre del grupo solubilizante. Esto hace que sean
poco estables in vitro, debido a lo cual es frecuente formularlos en forma de liofilizados, a partir de los cuales se
preparan las disoluciones poco antes de utilizarlas. Un segundo factor que puede afectar a la estabilidad de los
hemisuccinatos es la presencia de grupos hidroxilo en 8 respecto al carbonilo del grupo de hemisuccinato. ya
que se originan hemiortoésteres cíclicos; esto es lo que sucede, por ejemplo, en el derivado del cloranfenicol
(Fig. 8.14).
Prolámiaco de tipo
hemisuccinato
HO (CH,),-CO,H
Hemisuccinato del cloranfenicol Hemiotloéster
Figura 8.14. Algunos aspectos de la química de los hemisuccinatos.
En cuanto a la solubilización por introducción de grupos básicos, el procedimiento más habitual para los
derivados hidroxílicos consiste en la formación de ásteres que contengan en su cadena un grupo amino, que se
aprovecha para la preparación de sales. Aunque es frecuente el empleo de estructuras de tipo a-aminoácido (n =
1. Fig. 8.15), en este caso los profármacos son inestables in vitro, porque el efecto inductivo del grupo amino fa
vorece la hidrólisis del grupo éster. Por este motivo, son preferibles profármacos con mayor separación entre
ambos grupos, como los representados en la Figura 8.15. También pueden utilizarse como grupos solubilizantes
heterociclos básicos, como la piridina.
Figura 8.15. Grupos solubilizantes catiónicos para alcoholes y ácidos carboxílicos.
La solubilización de derivados carboxílicos se resuelve también mediante la preparación de ésteres, simi

lares a los ya comentados. Por ejemplo, en la Figura 8.16, se indica la estructura de un profármaco hidrosoluble
del ácido difenilhidantoico. que a su vez es un profármaco del agente anticonvulsivo y antiarrítmico fenitoína.
PROFÁRMACOS Y SUS APLICACIONES LA MANIPULACIÓN DE LAS PROPIEDADES 185
Esterasa
Ácido difenilhidantoico 55-Difenilhidantoínu

Profármaco hidrosoluble (fenitoína)
de la fenitoína Especie activa
Figura 8.16. Profármaco hidrosoluble de la fenitoína.
En el caso de fármacos con grupos amino, lo más adecuado es formar amidas con aminoácidos, ya que es
tos derivados son estables in vitro, suelen presentar una buena hidrosolubilidad y se bioaclivan rápidamente gra
cias a la abundancia de peptidasas en el plasma. En la Figura 8.17. se representa un profármaco del anestésico
local benzocaína diseñado según esta estrategia, así como un ejemplo de un profármaco hidrosoluble del diaze
pam. una benzodiazepina hipnótico-sedante. La hidrólisis del enlace de amida libera un derivado abierto que ci
cla espontáneamente a la benzodiazepina.
Peplidasa
Figura 8.17. Grupos solubilizantes canónicos para aminas y sus derivados.
Mencionaremos también que las bases de Mannich, cuya utilidad como profármacos de amidas se explicó
en el Apartado 3.3, contienen un grupo amino terciario, lo que permite la preparación de sales hidrosolubles.
Finalmente, la manera de incrementar la hidrosolubilidad de fármacos de tipo aldehido o cetona es la pre
paración de sales de O-carboximetil oximas. Como ejemplo, se representa la estructura de un profármaco hidro
soluble del anticoagulante menadiona (Fig. 8.18).
Figura 8.18. Profármaco hidrosoluble de la menadiona.

b) Disminución de la estabilidad de la red cristalina del fármaco
Algunos fármacos, especialmente heterociclos portadores de funciones amida o imida, forman redes cristalinas
muy estables, ya que las moléculas están fuertemente asociadas por enlaces de hidrógeno. Esta estabilidad limi
ta su solubilidad en cualquier tipo de medio (acuoso o lipófilo) y se refleja también en un elevado punto de fu
sión. Obviamente, una forma de disminuir la estabilidad de la red cristalina consiste en reemplazar los hidróge
nos ácidos de los grupos NH por otros sustituyenles; como ejemplo, en la Figura 8.19 se indica la variación del
punto de fusión e hidrosolubilidad del uracilo al metilar uno o los dos agrupamientos NH.
Compuesto Punto de fusión f'C) Sol. H:O (mg • mL"')
Uracilo 340 3
l-Mctiluracilo 232 20
3-Metiluracilo 180 200
1,3-Dimetiluracilo 123 500
Figura 8.19. Relación entre solubilidad y estabilidad de la red cristalina.
Un ejemplo de un fármaco con una elevada tendencia a la asociación por puentes de hidrógeno es el anti
gotoso alopurinol. Según lo ya expuesto, se razonó que la sustitución del hidrógeno por grupos aciloximetilo
debería conducir a derivados más hidrosolubles, que revertirían a la estructura original por hidrólisis seguida de
pérdida de una molécula de formaldehído. En la Figura 8.20. se presentan los datos de hidrosolubilidad y coefi
ciente de reparto octanol/agua de uno de estos derivados, que demuestran que la sustitución del hidrógeno ácido
por un sustituyeme incrementa tanto la hidrosolubilidad como la solubilidad en octanol, lo cual ha de deberse a
una disminución en la estabilidad de la red cristalina. Este compuesto concreto lleva, además, un grupo básico,
para poder formar sales adecuadas para su administración por vía rectal. Esta vía de administración requiere una
considerable hidrosolubilidad. debido a que el recto contiene un volumen de líquido pequeño, por lo que la libe
ración correcta del fármaco desde la forma farmacéutica requiere que se originen disoluciones relativamente
concentradas.
Alopurinol
Sol. H2O => 0.45 mg ■ niL’1
>og ânoi-.gu# = -0-55 Sol. HvO = 4.5 mg ■ mL 1
log P = + 0.20
Aciloximctil derivadas del alopurinol
Figura 8.20. Profármacos del alopurinol con solubilidad incrementada.

4.2. Incremento de la estabilidad in vitro
La inestabilidad in vitro es otro de los problemas que dificultan la utilización de determinados fármacos. Puede
encontrarse un ejemplo muy claro en la dinoprostona (prostaglandina E>), que tiene utilidad como oxitócico. La
dinoprostona es sumamente inestable, ya que. a causa de su estructura de compuesto fi-hidroxicarbonílico. ex
perimenta con facilidad una reacción de eliminación que origina el correspondiente sistema conjugado con un
doble enlace entre las posiciones 10 y 11. En la Figura 8.21. se presentan dos profármacos de la dinoprostona
que resultan estables durante su almacenamiento. En el primero de ellos, se enmascara el carbonilo C-9 por ob
tención de un acetal cíclico, lo que disminuye la tendencia a la eliminación, porque evita la formación de un sis
tema conjugado; se trata de un profármaco destinado a la administración por vía oral, ya que el acetal se hidro-
liza en las condiciones ácidas del estómago. En el segundo profármaco, se ha esterificado el grupo carboxílico
en C-1, lo que también aumenta la estabilidad in vitro de la dinoprostona. ya que evita la catálisis ácida del pro
ceso de eliminación por dicho grupo carboxílico.
Dinoprostona (PG E,)

Especie activa
Figura 8.21. Profármacos estables de la dinoprostona (PG Ej).
4.3. Resolución de problemas de administración
Muchos fármacos tienen sabores desagradables, lo que dificulta su aceptación por los pacientes, sobre todo, en el
caso de los niños. La detección del sabor requiere que el fármaco se disuelva en la saliva e interactúe con una serie
de receptores específicos. Por lo tanto, la preparación de profármacos poco hidrosolubles. por inclusión de cadenas
hidrocarbonadas largas, conduce a menudo a compuestos insípidos. Dos ejemplos característicos son los palmita-
tos del cloranfenicol y de la clindamicina. que enmascaran el sabor amaigo de estos dos antibióticos (Fig. 8.22).
H,C
Palmitato del cloranfenicol Palmitato de la clindamicina O
Figura 8.22. Profármacos para eliminar el mal sabor.

5. REGULACIÓN DEL PASO A TRAVÉS DE MEMBRANAS BIOLÓGICAS
5.1. Introducción
La Figura 8.23 resume los principales factores que regulan el paso de sustancias a través de las membranas ce
lulares. Éste puede utilizar proteínas específicas de membrana, o bien transcurrir a través de otros mecanismos.
El transporte mediado por proteínas de membrana es necesario para que la célula capte nutrientes hidrófilos
(azúcares, aminoácidos, nucleótidos) e iones, y puede ir a favor de un gradiente de concentración (transporte fa
cilitado) o en contra (transporte activo); en este último caso, debe existir un aporte energético, que procede de
la hidrólisis de moléculas de ATP (véase el Capítulo 7).
Un segundo mecanismo que permite el paso de sustancias al interior de las células es la endocitosis,
que es el proceso por el cual una pequeña porción de la membrana citoplásmica se invagina hasta formar una
vesícula, que posteriormente migra hacia el interior de la célula y se fusiona con un lisosoma, entrando en
contacto las enzimas hidrolíticas contenidas en éste con las sustancias transportadas en la vesícula. Se suele
distinguir entre pinocitosis. que es un proceso inespecífico en el que las vesículas endocíticas capturan pe
queñas gotas del líquido extracelular junto con las sustancias disueltas en él, y endocitosis mediada por re
ceptores. en la que es necesario que un receptor específico situado en la membrana reconozca una macromo-
lécula extracelular para que se inicie el proceso. El paso a través de poros es otro mecanismo posible,
utilizado generalmente por moléculas hidrófitas pequeñas, como el agua y la urea; tienen especial interés los
poros presentes en las membranas externas de las bacterias Gram negativas, formados por unas proteínas lla
madas porinas. Finalmente, una sustancia que no pueda aprovechar ninguno de los mecanismos anteriores
podrá penetrar en la célula únicamente por difusión pasiva a través de la bicapa de fosfolípidos, siempre a fa
vor de un gradiente de concentración.
FORMA FARMACÉUTICA
Disolución * MEDIADO POR TRANSPORTADORES ESPECÍFICOS

• TRANSPORTE FACILITADO
• TRANSPORTE ACTIVO
FÁRMACO EN EL _ PASO A TRAVÉS DE

MEDIO BIOLÓGICO BIOMEMBRANAS
NO MEDIADO POR TRANSPORTADORES ESPECÍFICOS

• ENDOCITOSIS
• PASO A TRAVÉS DE POROS
• DIFUSIÓN PASIVA
Figura 8.23. Principales factores que regulan el paso de fármacos a través de membranas celulares.
Con frecuencia, hay que considerar el paso de los fármacos a través de barreras formadas por un gran
número de células (por ejemplo, la pared intestinal, la córnea, etc.).
Estas barreras tienen comportamientos muy variables, dependiendo de que existan o no entre las célu
las espacios que puedan permitir el paso de sustancias a través de ellos.
Dos casos extremos los constituyen el de la pared de los capilares sanguíneos, que permite el paso li
bre de cualquier sustancia de masa molecular inferior a alrededor de 30.000. y el de la barrera hematoence-
fálica. que protege al sistema nervioso central y está formada por una capa doble de células sin espacios en
tre ellas, de manera que las sustancias disueltas en la sangre tienen que atravesar las células.
PROFÁRMACOS Y SUS APLICACIONES. LA MANIPULACIÓN DE LAS PROPIEDADES.. 189
5.2. Diseño de fármacos para el aprovechamiento de mecanismos

fisiológicos de transporte a través de membranas
El mecanismo de transporte mediado por transportadores de membrana específicos exige el reconocimiento y la

fijación de la sustancia que se va a transportar a la proteína transportadora.
Si un fármaco presenta analogía estructural con una sustancia endógena transportada por una proteína,
puede aprovechar el mismo mecanismo. Por ejemplo, la dopamina actúa como neurotransmisor en ciertas zonas
del cerebro que controlan los movimientos voluntarios, y su carencia origina los síntomas de la enfermedad de
Parkinson.
Por tanto, el tratamiento más sencillo para esta enfermedad consistiría en la administración de dopamina.
Sin embargo, la dopamina es muy hidrófita, por lo que no se absorbe bien por vía oral ni atraviesa la barrera he-
matoencefálica.
En cambio, el aminoácido L-dopa se absorbe correctamente gracias a mecanismos de transporte activo y,
una vez en el cerebro, se descarboxila y origina dopamina, comportándose, por tanto, como profármaco de ésta
(Fig. 8.24).
En la práctica, es necesario asociar la L-dopa con inhibidores de la dopa-descarboxilasa periférica, para
evitar efectos secundarios, como se comentará más ampliamente en el Capítulo 11.
Dopamina
Figura 8.24. La L-dopa como profánnaco de la dopamina.
Si el fármaco no es análogo a ninguno de ios sustratos de transporte activo, puede enlazarse a biomolé-
culas que sí lo sean, como aminoácidos, pequeños péptidos. azúcares o bases pirimidínicas, originando un
nuevo compuesto que utiliza el mecanismo de transporte activo propio del grupo modulador.
Los microorganismos, por ejemplo, tienen sistemas de transporte para la captación de péptidos forma
dos por t.-aminoácidos (permeasas), que pueden aprovecharse para el transporte de sustancias. Así, el ácido
sulfanílico es un análogo de las sulfamidas antibacterianas y, de hecho, es más activo que ellas como inhibi
dor in vitro de la enzima dihidropteroato sintasa, que es la diana sobre la que actúan. Sin embargo es inactivo
in vivo, lo que puede atribuirse a que su polaridad le impide penetrar en las bacterias.
El profármaco peptídico representado en la Figura 8.25 resulta ser un potente antibacteriano in vivo,
debido a que su estructura le permite atravesar las paredes y las membranas bacterianas. Una vez en el inte
rior de las células, las peptidasas liberan un precursor del ácido sulfanílico.
Membrana
bacteriana
SO,H
Ácido sulfanílico
Figura 8.25. Profármaco pcptídico del ácido sulfanílico.
Esta metodología permite también lograr el transporte de ciertos péptidos a sitios normalmente inaccesi
bles para ellos, como por ejemplo el sistema nervioso central. Por ejemplo, si un péptido carece de mecanismos
de transporte a través de la barrera hematoencefálica (compuesto A), es posible unirlo covalentemente a través
de un puente disulfuro a otro péptido (compuesto B) que sí posea estos mecanismos. El conjunto A-S-S-B, que
se denomina péptido quimérico, es capaz de atravesar la barrera hematoencefálica y regenerar los componentes
A y B por reducción del grupo disulfuro (Fig. 8.26).
BHE
Péptido
transportable
Figura 8.26. Transporte de péptidos al sistema nervioso central mediante el empleo de péptidos quiméricos.
5.3. Manipulación del proceso de difusión pasiva
El factor que más frecuentemente limita la absorción a través de membranas es una lipofilia insuficiente. Para
aumentarla, pueden introducirse grupos lipófdos o enmascararse grupos hidrófilos. Por ejemplo, la elevada hi-
drofilia de la adrenalina dificulta su absorción a través de la córnea. Por ello, su administración local en el ojo a
fin de disminuir la presión intraocular en pacientes de glaucoma requiere dosis muy elevadas. Una parte de esta
dosis llega a la sangre tras ser recogida en el conducto lagrimal, con los consiguientes efectos secundarios, que
afectan especialmente al corazón. El profármaco dipivefrina, ya mencionado, es menos hidrófilo debido al blo
queo de los hidroxilos fenólicos y la introducción de las cadenas terbuiílicas lipófilas. por lo que puede absor
berse a través de la córnea y liberar adrenalina en el interior del ojo por la acción de esterasas. Su actividad an-
tiglaucoma es unas 20 veces superior a la de la adrenalina, y los efectos secundarios de tipo cardíaco son mucho
menores. Un refinamiento de esta estrategia consiste en la utilización de dipivaloiladrenolona como profármaco.
aprovechando la existencia en el cuerpo ciliar del iris de una cetona reductasa específica. Este compuesto tiene
la ventaja de que su hidrólisis en sangre no produce adrenalina (Fig. 8.27).
Lágrima Córnea Humor acuoso
(T) Cetona reductasa (específica del cuerpo ciliar del iris)
Figura 8.27. Profármacos de adrenalina para su liberación intraocular.
Un problema que se observa en numerosos fármacos es una mala absorción por vía oral, debida a una li
pofilia insuficiente para que se produzca la difusión pasiva a través de las membranas de las células de la pared
intestinal. Con mucha frecuencia, basta con enmascarar algún grupo hidrófilo para mejorar la absorción. Por
ejemplo, la ampicilina tiene una absorción oral máxima de alrededor del 40 %, que puede atribuirse a que este
antibiótico tiene un grupo ácido y otro básico, por lo que un elevado porcentaje de las moléculas están en forma
de ion dipolar (zwitterion), poco lipófilo. La esterificación del grupo carboxílico. empleando derivados de tipo
aciloximetil áster como se comentó en el Apartado 2, introduce un grupo lipófilo y además evita la posibilidad
de existencia de estructuras de ion dipolar. Por tanto, estos ásteres de la ampicilina (Fig. 8.28) presentan una ex
celente absorción oral.
Pivampicilina:
R = O-CHj—O-CO—C(CH,),
Bacampicilina:
R = O-CH—O-CO-O—CH,—CH
CH,
Ftalampicilina:
Estructura de ion dipolar de la ampicilina
Figura 8.28. Esteres de la ampicilina.
En otras ocasiones, es necesario acudir a bioprecursores más complejos para lograr una buena lipofilia.
Por ejemplo, la estructura de la tiamina (vitamina B,) contiene un nitrógeno catiónico. por lo que su absorción
en el intestino y su paso a través de la barrera hematocncefálica son deficientes. El disulfuro 1 es un compuesto
lipófilo, que se absorbe bien y reacciona con el glutatión para dar el intermedio 2, cuya ciclación seguida de pér
dida de una molécula de agua conduce a la tiamina (Fig. 8.29).
Tiamina (vitamina B()
Figura 8.29. Profármaco lipófilo de la tiamina.
Otra situación en la que se persigue una elevada lipofilia es el diseño de fármacos que presentan acción
sostenida por actuar como formas de depósito, algo interesante en tratamientos prolongados para evitar faltas de
cumplimiento del paciente. La forma tradicional de lograr este objetivo consiste en limitar la etapa de disolu
ción del fármaco desde su lugar de administración, mediante la formación de sales con contraiones muy Iipófi-
los. Dichas sales precipitan en el lugar de la inyección, que es un medio acuoso, y forman un depósito a partir
del cual se va liberando lentamente el fármaco. Por ejemplo, la bencilpenicilina se administra salificada con di
versos compuestos (benzatina. entre otros), para su uso en el tratamiento de fiebres reumáticas. En otra estrate
gia, las «sales lipóftlas» se administran por vía oral y, tras absorberse, tienden a acumularse en tejidos Iipídicos,
desde donde se liberan lentamente. Un ejemplo de este tipo de compuestos es el pamoato de cicloguanilo. utili
zado en la profilaxis del paludismo.
También es posible emplear profármaeos lipófilos para los mismos fines. Estos compuestos se disuelven en
un vehículo oleoso (por ejemplo, aceite de sésamo) y se administran por inyección intramuscular, formándose así
un depósito de liberación lenta. Este método se usa con frecuencia en tratamientos prolongados con hormonas es-
teroídicas (anticonceptivos, estrógenos, etc.) o agentes neurolépticos, como por ejemplo la flufenazina (Fig. 8.30).
Flufenazina y sus profármacos
R Duración de la acción
H 6-8 h
CO-C.H,, 1 -2 semanas
CO-GH.9 3-4 semanas
Pamoato de cicloguanilo
Figura 8.30. Sales y profármacos lipóf ilos utilizados como formas de depósito.
En muchas ocasiones, se busca un objetivo contrario al perseguido en los ejemplos anteriores, es decir, se
busca la restricción del paso de un fármaco a través de ciertas membranas, lo que se consigue por aumento de su
hidrofilia. Por ejemplo, si se utilizan agentes antibacterianos para combatir infecciones del tracto gastrointesti
nal. es importante que no se absorban tras su administración oral. Es el caso de los profármacos hidrófilos del
sulfatiazol (succiniísulfatiazol, ftalilsulfatiazol) que se representan en la Figura 8.31. Otra situación relativa
mente frecuente es aquella en la que algunos efectos secundarios de los fármacos se deben a una acción no de
seada sobre el sistema nervioso central. Así, los antihislamínicos H, clásicos, utilizados como antialérgicos, tie
nen también acción sedante y, por tanto, producen somnolencia. El derivado de amonio cuaternario resultante
de la metilación de la prometazina (tiazinamio) no puede atravesar la barrera hematoencefálica a causa de su ca
rácter iónico y por tanto no es sedante.
Figura 831. Algunos compuestos diseñados para disminuir la absorción intestinal de sulfamidas
antibacterianas y para limitar la absorción de antihistamínicos H> al SNC.
6. DISTRIBUCIÓN SELECTIVA
6.1. Introducción
Si la distribución de un fármaco fuera selectiva, podrían administrarse dosis inferiores y lograrse un mayor índi
ce terapéutico. Este objetivo es especialmente importante cuando se trata de fármacos muy tóxicos, como los
antitumorales. o de fármacos que alcanzan con dificultad su lugar de acción. Lo ideal es que se transporten co
mo profármacos inactivos, que la bioactivación se produzca selectivamente en el lugar de acción, y que la forma
activa así originada quede retenida en dicho lugar. Es importante tener en cuenta que la distribución selectiva de
tipo sistémico es un objetivo sumamente difícil, que sólo se ha logrado en algunos ejemplos concretos.
Además de los métodos basados en el empleo de profármacos que vamos a comentar aquí, existen otros,
como son los implantes de depósitos de fármaco unido a un polímero en la zona en que se desee la acción (im
plantes intrauterinos de progeslerona como anticonceptivos, implantes intraoculares de pilocarpina como an-
ticolinérgico en el tratamiento del glaucoma, etc.), o bien el empleo de liposomas o incluso células enteras como
transportadores.
6.2. Transporte selectivo
a) Nutrientes celulares como grupos transportadores
Existen algunos antitumorales (por ejemplo, el melfalán o la uracilmostaza) en los que se ha fijado la estructura
activa de las mostazas nitrogenadas a aminoácidos o bases puncas o pirimidínicas. La idea detrás del diseño de
estos compuestos era la búsqueda de una cierta selectividad en el transporte hacia los tumores de crecimiento
rápido, ya que éstos sintetizan ADN y proteínas a una velocidad superior a la de los tejidos sanos, por lo que su
demanda de aminoácidos y bases es mayor. Del mismo modo, el profármaco estramustina. donde se ha unido el
fragmento activo de las mostazas nitrogenadas al estradiol, persigue una distribución selectiva hacia tumores de
mama dependientes de estrógenos (Fig. 8.32).
Estramustina
Figura 8.32. Aminoácidos, bases pirimidínicas y hormonas esteroídicas como grupos

transportadores de mostazas nitrogenadas.
b) Fármacos unidos a macromoléculas
La fijación covalente de un fármaco a una macromolécula puede permitir un alto nivel de control sobre su
distribución, ya que es fácil regular las propiedades fisicoquímicas del soporte polimérico en función de su
estructura.
Las principales limitaciones de este método radican en la mala absorción por vía oral que suelen presentar
los polímeros, lo que puede obligar a emplear otras vías de administración, y la posibilidad de que produzcan
problemas inmunológicos.
Estos polímeros pueden acceder al interior de las células a través del mecanismo de pinocitosis menciona
do anteriormente, por lo que su principal campo de aplicación está en los fármacos que actúan en el núcleo ce
lular. principalmente hormonas esteroideas y agentes antitumorales.
Los elementos estructurales que suelen formar parte de un profármaco de este tipo son:
1. Un polímero que sirve de soporte a la estructura. Puesto que los polímeros sintéticos no suelen ser bio-
degradables, lo normal es utilizar una cadena de poli(L-ot-aminoácido). que será degradada por las hi-
drolasas contenidas en los lisosomas una vez que el compuesto haya sido captado al interior de la célu
la por pinocitosis.
2. Una serie de «grupos solubilizantes». que proporcionen al conjunto la hidrofilia (o lipofilia) deseada.
3. Una «cadena espadadora» que separe al fármaco del polímero, para evitar que éste cause problemas
estéticos en la hidrólisis del fragmento activo.
4. El fármaco en sí.
5. Si es posible, un fragmento que asegure una distribución selectiva hacia el tejido deseado.
Por ejemplo, en la Figura 8.33 se representa un antitumoral diseñado sobre las bases anteriores. Está cons
truido sobre una cadena de ácido poli(L-glutámico), cuyos grupos carboxilato libres actúan como solubilizantes.
El fármaco empleado pertenece al grupo de las mostazas nitrogenadas, y está unido a una de las cadenas
laterales de glutámico. que actúa como espaciador. Finalmente, se incorporó a la estructura un anticuerpo espe
cífico contra antígenos presentes en la superficie de células de linfoma. para lograr una fijación selectiva a las
células tumorales. Este compuesto presentó un índice terapéutico unas 40 veces mayor que la mostaza nitroge
nada como tal.
Figura 8.33. Profármaco polimérico de una mostaza nitrogenada.
A veces, se pueden emplear proteínas como transportadores. Por ejemplo, la avidina. una proteína aisla
da del huevo, tiene buenas propiedades para ser utilizada como transportador de sustancias hacia el sistema ner
vioso central, porque atraviesa la barrera hematoencefálica mediante un proceso de endocitosis.
La avidina muestra una elevada afinidad hacia la biotina, por lo que las sustancias que se desean trans
portar (por ejemplo, péptidos, oligonucleótidos, etc.) se unen covalentemente a la biotina a través de una cade
na espaciadora. lo que asegura que sean captadas por la avidina. Finalmente, se incorpora también un anticuer
po capaz de reconocer proteínas de la superficie de la barrera hematoencefálica. lo que facilita la captación del
conjunto por endocitosis (Fig. 8.34).
Grupo transportador
Grupo para fijación a la

superficie de la BHE
Figura 8.34. Uso del complejo avidina-biotina para el transporte de péptidos al sistema nervioso central.
6.3. Bioactivación selectiva
En algunas ocasiones, es posible aprovechar diferencias químicas o bioquímicas entre diferentes órganos o teji
dos para lograr la bioactivación selectiva de un profármaco en su lugar de acción.
Por ejemplo, la flora anaerobia del colon produce azorreductasas, lo que permite utilizar azocompuestos
como profármacos de bioactivación selectiva; estos profármacos deben ser hidrófilos, para evitar su absorción en
zonas anteriores del intestino.
Dos de estos profármacos son la sulfasalazina. diseñada inicialmente como un antibacteriano de acción in
testinal porque libera la sulfamida correspondiente, y la olsalazina. Ambos liberan ácido 5-aminosalicílico y se
emplean para el tratamiento de alteraciones inflamatorias del colon, como la colitis ulcerosa. Se han diseñado
también profármacos soportados sobre polímeros, que garantizan mejor la ausencia de absorción intestinal (Fi
gura 8.35).
HO,C
Olsalazina
Figura 8.35. Profármacos para la liberación de ácido 5-aminosalicílico en el colon.
Los profármacos cuya activación requiere condiciones rcductoras son también apropiados para buscar
bioactivación selectiva, ya que el poder reductor varía considerablemente de unos tejidos a otros. Por ejem
plo. las regiones intemas de los tumores sólidos están con frecuencia poco vascularizadas y son hipóxicas.
Estas zonas son más reductoras que otros tejidos, debido a que el oxígeno hace revertir muchas reacciones de
reducción.
Estas consideraciones llevaron al diseño de bioprecursores con estructuras de p-nitrofenil y p-arilazofenil
mostazas nitrogenadas. Los grupos nitro y arilazo, al ser atrayentes de electrones, disminuyen la nucleofilia del
nitrógeno amínico c impiden la activación de la mostaza a un derivado del catión aziridinio. que es la especie
que reacciona con el ADN y es responsable de la actividad antitumoral (la reacción directa del ADN con un de
rivado clorado a la temperatura fisiológica es demasiado lenta).
Una vez en el interior de un tumor sólido, el ambiente reductor favorece la transformación de los grupos
citados en un grupo amino, que es donador electrónico y favorece la producción del derivado de aziridinio (Fi
gura 8.36).
PROFÁRMACOS Y SUS APLICACIONES. LA MANIPULACIÓN DE LAS PROPIEDADES. 197
Figura 8-36. Bioactivación de mostazas nitrogenadas por reducción selectiva en tejidos hipóxicos.
Una segunda estrategia de bioaclivación selectiva de agentes antitumorales que aprovecha el elevado poder
reductor de los tumores sólidos se conoce como alquilación biorreductora. Consiste en la incorporación de un
grupo -CH.-X, donde X es un buen saliente, a la posición vecina a un carbonilo de quinona. El sustituyeme X se
escoge de manera que la posición a la que está unido no reaccione directamente con el ADN en condiciones fi
siológicas. Tras la reducción del sistema de quinona a hidroquinona, ésta genera una especie altamente electrófi-
la por eliminación de una molécula HX (Fig. 8.37). Muchas quinonas naturales antitumorales actúan por el me
canismo de alquilación reductora, pudiendo citarse como ejemplo la mitomicina (véase el Capítulo 18).
Nu—| ADN |
Figura 8.37. El proceso de alquilación biorreductora.
También puede lograrse bioactivación selectiva en caso de que en el órgano donde se desea actuar exista
una enzima en concentraciones superiores a otros órganos. Por ejemplo, las células renales contienen elevadas
concentraciones de L-y-glutamiltranspeptidasa. que cataliza la transferencia de residuos de glutámico desde el
extremo A-terminal de un péptido al de otro. Por lo tanto, un profármaco construido por incorporación de una
unidad L-y-glutámico al grupo amino de un fármaco tiene muchas posibilidades de ser bioactivado selectiva
mente en el riñón. Es posible, incluso, incrementar la lipofilia del profármaco por acetilación del grupo amino
libre, ya que las células renales contienen también altas concentraciones de /V-acilaminoácido desacilasa. En la
Figura 8.38 se representa el proceso de bioactivación de un profármaco de activación selectiva en el riñón de la
sulfamida antibacteriana sulfametoxazol. diseñado según estos principios.
N-acilaminoácido L-y-glutamil-
desacilasa tr-anspeptidasa
Sulfameioxazol
Figura 8.38. Un antibacteriano de bioactivación selectiva en el riñón.
6.4. Retención de la especie activa en el sitio de acción
Puede lograrse este objetivo empleando profármacos cuya activación transcurra a través de especies intermedias
capaces de formar enlaces covalentes con biomoléculas presentes en el lugar de acción. Un ejemplo de esta es
trategia se refleja en la Figura 8.39. Cuando el antiinflamatorio cortisona se administra por vía tópica, difunde
rápidamente a través de la piel. Por ello, si se quiere que sea eficaz, se necesitan administraciones frecuentes
que pueden originar concentraciones elevadas del fármaco en sangre y. por tanto, la aparición de los efectos tó
xicos propios de los corticosteroides. La administración de un profármaco derivado de espirotiazolidina resuel
ve este problema gracias a que origina un intermedio de naturaleza tiólica capaz de unirse mediante puentes di
sulfuro a restos de cisterna de las proteínas de la piel. Este depósito libera lentamente, por hidrólisis, la especie
activa, evitándose así altas concentraciones en sangre y consiguiéndose un índice terapéutico ocho veces mayor
que en la administración directa de hidrocortisona.
Figura 8.39. Retención de un profármaco de cortisona por formación de enlaces covalentes

con proteínas del lugar de acción.
PROFÁRMACOS Y SUS APLICACIONES. LA MANIPULACIÓN DE LAS PROPIEDADES.- 199
Una segunda estrategia para la retención de profármacos en el sitio de acción se basa en que tenga lugar
una reacción que invierta su polaridad, impidiendo su salida. El sistema más estudiado es el basado en la facili
dad con que se transforman las dihidropiridinas en sales de piridinio, con intervención de oxidorreductasas de
pendientes de NADP' (Fig. 8.40). Se ha utilizado para concentrar fármacos, de forma selectiva, en el sistema
nervioso central.
Figura 8.40. Oxidación a piridinio de dihidropiridinas I -sustituidas.
Consideremos, por ejemplo, el problema, ya mencionado, de hacer pasar dopamina a través de la barrera
hematoencefálica para su empleo en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. De forma análoga a lo expli
cado para el caso de la absorción de la adrenalina a través de la córnea, podría plantearse la utilización de la di-
pivaloildopamina como profármaco. Este compuesto sería lo bastante lipófilo para atravesar la barrera hemato
encefálica, pero, al no ser retenido en el cerebro, su acción sería breve. Además, para que exista difusión pasiva,
la concentración en sangre tendría que ser superior a la concentración en el cerebro, y la hidrólisis del profár
maco por esterasas plasmáticas produciría niveles periféricos de dopamina elevados, con la correspondiente to
xicidad (Fig. 8.41).
Figura 8.41. Limitaciones de la dipivaloildopamina como profármaco de dopamina.
Un profármaco más elaborado, en el que el grupo de amina primaria está también bloqueado como amida
del ácido l-metil-l,4-dihidropiridina-3-carboxílico, presenta una estructura también lipófila que requiere dos
reacciones hidrolíticas para su bioactivación a dopamina. El fragmento de 1,4-dihidropiridina se transforma, por
oxidación enzimática, en una sal de I -metilpiridinio en un proceso ya comentado. Si esta oxidación se produce
extracerebralmente. tanto el compuesto así originado como el derivado de su hidrólisis por las esterasas resultan
tan hidrófilos que se eliminan por orina rápidamente. Por el contrario, la fracción que se oxida en el cerebro se
retiene en éste al no poder difundir al plasma a través de la barrera hematoencefálica. Como la hidrólisis de las
amidas es más lenta que la de los ásteres, la degradación de este profármaco sigue la secuencia indicada en la
Figura 8.42. El otro producto de degradación del doble profármaco en el sistema nervioso central, la trigonelina.
no es tóxico. La situación final es una elevada concentración en el cerebro (lugar de acción) y una concentración
baja o nula en el plasma.
Figura 8.42. Utilización del fragmento de I -metil-1.4-dihidropiridina en un doble profármaco de dopamina.
El uso del sistema de 1 -metil-1,4-dihidropiridina se ha extendido a fármacos anticonvulsivos como la d¡-

fenilhidantoína. antitumorales como las nitrosoureas, antibióticos como las penicilinas, antivirales como la azi-
dotimidina (AZT) utilizada en el SIDA, etc. (Fig. 8.43).
Profármaco de loinustina (antirumoral)
Figura 8.43. Algunos ejemplos de profármacos diseñados para almacenamiento selectivo en el SNC
por transformación en productos con polaridad invertida.
Más recientemente, el sistema de l-metil-l,4-dihidropiridina se ha aplicado también al difícil problema, ya

mencionado anteriormente, del transporte de péptidos al sistema nervioso central. En la Figura 8.44. se indica la
técnica empleada, utilizando como ejemplo un análogo de la Leu-encefalina conocido con las siglas «DADLE».
Las transformaciones realizadas son: a) esterificación del extremo C-terminal con una molécula voluminosa y de
alta lipofilia, como por ejemplo el colesterol. para mejorar el paso del profármaco a través de la barrera hematoen
cefálica y para dificultar su hidrólisis por esterasas del plasma antes de llegar al sitio de acción; b) unión del extre
mo A-tcrminal a un aminoácido «espaciador» y de éste al sistema de dihidropiridina a través de un enlace amida
(estructura 1). Si dicho grupo transportador estuviera unido directamente al extremo A-tetminal del péptido que se
quiere transportar, la liberación de éste sería lenta, a causa del bajo nivel de amidasas en el cerebro. Sin embargo, la
incorporación del aminoácido extra (prolina, en el ejemplo) hace que la liberación de la especie activa pueda pro
ducirse por acción de una dipeptidasa. que es un tipo de enzimas que separan los dos últimos aminoácidos de un
péptido; el cerebro contiene aminodipeptidil peptidasas. que reconocen el extremo A-terminal del péptido que van
a escindir. La especie 2 que resulta de la oxidación de I tiene un grupo canónico aproximadamente en el mismo lu
gar que el grupo amino protonado del aminoácido A-terminal. por lo que 2 puede ser sustrato de aminodipeptidil
peptidasas cerebrales, lo que conduce a la ruptura del enlace amídico deseado:
aminodipeptidil peptidasas
Figura 8.44. Transporte de péptidos al SNC.
7. MODULACIÓN DEL METABOLISMO DE FÁRMACOS
7.1. Manipulación estructural orientada a dificultar el metabolismo
Existen algunas situaciones en las que es conveniente retrasar la degradación metabólica de un fármaco, que corres
ponden a compuestos de acción demasiado breve, o bien a fármacos que experimentan el llamado «efecto de primer
paso», es decir, que se degradan en la pared intestinal o en el hígado antes de alcanzar la circulación general.
Una forma de dificultar el metabolismo consiste en obtener análogos en los que el grupo vulnerable esté
protegido a través de efectos estéricos o electrónicos. En la Figura 8.45 se resumen algunas de estas transforma
ciones. Por ejemplo, la hidroxilación del carbono unido directamente al nitrógeno (primera etapa de la A-desal-
quilación de aminas) puede bloquearse por la presencia de un grupo voluminoso en el nitrógeno, que impida el
acceso de la enzima. La hidroxilación aromática puede bloquearse también por impedimento estético o median
te la introducción de grupos aceptores de electrones en el anillo aromático. La función éster puede reemplazarse
por otra más resistente a la hidrólisis, como la función amida, o su hidrólisis puede bloquearse creando un im
pedimento estérico en la proximidad a una función éster.
Modificación estructural
Reacción metabólica Explicación
que la dificulta
1. JV-Desalquilación
CHj CH2OH H CH, Impedimento estérico en
R-n' —► R-n' —* R-N
* R-N la etapa de hidroxilación
'C(CH3)j
CHj CH, CH,
Desactivación del anillo

aromático a causa del
efecto aceptor de X
Efecto accptor de los

cloros más impedimento
estérico
3. Hidrólisis de ésteres
O O
Mayor estabilidad de las
R-CH2—----- ► R-CH2—+ R'-OH amidas
OR' OH
Impedimento estérico
F igura 8.45. Algunas manipulaciones estructurales que dificultan procesos metabólicos de fármacos.
Un ejemplo clásico lo constituyen los análogos de la acctilcolina representados en la Figura 8.46. diseña
dos porque dicho neurotransmisor presenta una semivida demasiado corta, ya que es hidrolizada muy rápida
mente por esterasas del plasma.
R R' Velocidad de hidrólisis

Acctilcolina
H H 500
CHj H 15
CH, CH, 0
Carbacol
Figura 8.46. Modificaciones de la estructura de acetilcolina para incrementar la duración de su acción.
La preparación de análogos tiene el inconveniente de que la introducción de nuevos sustituyentes puede

conducir a la pérdida de la actividad, por lo que es interesante considerar también el empleo de profármacos.
Los péptidos constituyen uno de los grupos de compuestos en los que es más necesario realizar modificaciones
orientadas a aumentar su estabilidad metabólica. Por ejemplo, las encefalinas poseen una potente actividad
analgésica (véase el Capítulo 15), y sería interesante poder administrarlas por vía oral con este fin. Sin embar-
go, son sensibles a varias proteasas digestivas, como la quimotripsina y la pepsina, que reconocen enlaces pep-
tídicos cuyo grupo carbonilo proceda de la fenilalanina. Por el contrario, el derivado de 4-imidaz.olidinona re
presentado en la Figura 8.47 es resistente al tránsito digestivo, y puede emplearse por vía oral.
Leu-encefalina
Figura 8.47. Profármaco de la Leu-encefalina para su administración oral.
El empleo de profármacos ha sido también muy eficaz para prevenir el efecto del primer paso. Un grupo de
fármacos en los que dicho fenómeno es especialmente perjudicial son los derivados ténólicos, que se inactivan rápi
damente en las células de la pared intestinal o en el hígado a través de reacciones de conjugación con ácido glucuró-
nico o sulfato. La simple esterificación del hidroxilo fenólicono suele bastar para resolver el problema; por ejemplo,
los ásteres benzoicos de los fenoles tienen una biodisponibilidad oral igual, o incluso inferior, a la de los propios fe
noles. Esto se atribuye a que el incremento de lipofilia favorece el paso de la sustancia a los microsomas hepáticos,
donde posteriormente se hidroliza y conjuga. En cambio, si la esterificación se realiza con derivados «-sustituidos
del ácido benzoico, como el ácido salicílico (o-OH) o el ácido antranílico (o-NFL), la hidrólisis se dificulta, lo que
permite que una parte considerable de la dosis supere el hígado sin metabolizar. Como ejemplo, se indican en la Fi
gura 8.48 los datos de biodisponibilidad oral del analgésico opiáceo naltrexona y de algunos de sus ásteres.
R = H naltrexona < I %)
R=-CO-C„H5 (-1%)
X = OH (31%)
X = NH,(49%)
Figura 8.48. Biodisponibilidad oral de varios profármacos de naltrexona.
7.2. Disminución de la toxicidad debida al metabolismo
En el Capítulo 7 se comentó que los procesos metabólicos causantes de toxicidad están relacionados, en su ma
yor parte, con el metabolismo oxidativo, sobre todo hepático, que genera intermedios de alta reactividad, como
epóxidos o radicales libres, que interactúan fácilmente con biomoléculas, conduciendo a su inactivación e inclu
so a mutagénesis. En principio, pueden plantearse dos tipos de estrategias para evitar este problema. La primera
consistiría en suprimir completamente los procesos metabólicos, administrando fármacos resistentes al metabo
lismo (fármacos duros). Este objetivo no sólo es atractivo para disminuir la toxicidad, sino también porque per
mitiría una considerable simplificación de la farmacocinética y, por tanto, de la posología. Desgraciadamente, el
diseño de fármacos duros a través de las técnicas comentadas en el apartado anterior no ha tenido éxito porque
el «metabolismo cero» es imposible en la práctica.
El segundo método para reducir la toxicidad asociada con el metabolismo se basa en desviar éste hacia
reacciones no oxidativas. Los fármacos diseñados para que se metabolicen a través de una ruta sencilla y no
oxidativa se conocen como fármacos blandos. El concepto de fármaco blando es opuesto al de profármaco; un
fármaco blando es un agente activo diseñado para que se inactive de forma controlada y predecible, mientras que
un profármaco es un compuesto inactivo para el que puede preverse una ruta de activación sencilla y controlada.
Muchos neurotransmisores tienen un comportamiento análogo al que se pretende en los fármacos blandos. Su
actividad es potente y muy corta a causa de su extrema labilidad, y son inactivados tras su liberación.
La técnica más sencilla para obtener fármacos blandos consiste en incorporar grupos vulnerables a la hi
drólisis o a otras reacciones no oxidativas en la estructura cuyo metabolismo se desea facilitar. Para exponer al
gunas de las técnicas de diseño empleadas, utilizaremos como ejemplo las sales de amonio cuaternario. Así, a
partir del relajante muscular decametonio, se diseñó el suxctonio (succinilcolina) por sustitución de dos grupos
dimetilcno por dos funciones éster, consiguiéndose un metabolismo hidrolítico a la vez que se respeta la distan
cia entre los nitrógenos cuaternarios (Fig. 8.49). Esta modificación evita los problemas de toxicidad por acumu
lación que presenta el decametonio.
Dccamclonio
Figura 8.49. La succinilcolina como análogo blando del decametonio.
Dentro del mismo grupo terapéutico, se ha diseñado el atracurio como un relajante muscular «blando» en
el que se han introducido dos grupos éster en las dos posiciones |3 respecto a los nitrógenos cuaternarios en la
cadena que une a éstos. Su presencia hace posible que tenga lugar una reacción de eliminación espontánea a
temperatura y pH fisiológicos, ayudada por la acidez de los protones vecinos al carbonilo (Fig. 8.50).
Figura 8.50. El atracurio como relajante muscular «blando»

Una de las aplicaciones de los fármacos «blandos» es la de eviiar efectos sistémicos en los compuestos de
acción tópica, haciendo que el fármaco se inactive al pasar a la sangre.
Por ejemplo, el anticolinérgico representado en la Figura 8.51 es un eficaz antitranspirante. Su estructura
de derivado de aciloximetilamonio, con un átomo de carbono muy electrófilo debido a la vecindad de dos áto
mos fuertemente aceptores. hace que se degrade espontáneamente al alcanzar la sangre, evitándose la aparición
de efectos secundarios.
Figura 8.51. Ejemplo de un fármaco blando de acción tópica.
Una segunda técnica de diseño de fármacos blandos se basa en el estudio de rutas metabólicas de otros
fármacos.
Si uno de los metabolitos de un fármaco resulta activo, su administración como sustituto del compuesto
original suprime una parte del proceso metabólico. por lo que puede considerarse su análogo blando. Por ejem
plo. la oxifenbutazona es un analgésico y antiinflamatorio diseñado a través del estudio del metabolismo de la
fenilbutazona (Fig. 8.52).
Metabolismo
oxidativo
Fenilbutazona Oxifenbutazona
(amiinflamatorio) Activo como amiinflamatorio
Análogo «blando» del fármaco original
Figura 8.52. Diseño de fármacos blandos basados en el metabolismo de fármacos conocidos.
Una vez que se identifica un metabolito de eliminación rápida, sus derivados pueden comportarse como
análogos blandos del fármaco original, si es que presentan la actividad deseada.
Así. el antiinflamatorio fluocortolona se metaboliza a través de una ruta oxidativa para dar la fluocortina,
un compuesto de eliminación más rápida. Los ésteres de este ácido pueden considerarse análogos blandos de la
fluocortolona. ya que se metabolizan por hidrólisis.
Debido a que los ésteres tenbutflicos se hidrolizan con gran facilidad a causa de la estabilidad del catión
rerbutilo, el éster rercbutílico de la fluocortina es un antiinflamatorio de uso tópico con pocos efectos secunda
rios de tipo sistémico (Fig. 8.53).
Figura 8.53. Diseño de fármacos blandos basado en el metabolismo de fármacos conocidos.
El concepto de fármaco blando ha encontrado aplicaciones en campos distintos a la prevención de la toxi

cidad asociada al metabolismo. Por ejemplo, la mayor parte de los antibióticos no son metabolizados por los se
res humanos ni por los animales, por lo que se excretan en forma activa. La utilización masiva de antibióticos
como fármacos y como aditivos en la alimentación de animales hace que se acumulen grandes cantidades de es
tos compuestos en el medio ambiente, contribuyendo a la selección de bacterias resistentes. Por lo tanto, podría
ser interesante disponer de antibióticos con un cieno grado de inestabilidad, que se degradasen espontáneamen
te transcurrido cierto tiempo. El compuesto 1 que se representa en la Figura 8.54 se degrada por exposición a la
luz solar y se origina 2. Esta reacción libera un grupo de hidrazina muy nucleófilo. que ataca al sistema de p-
lactama, inactivando el antibiótico.
Figura 8.54. Diseño de una cefalosporina «blanda» que no se acumula en el medio ambiente.
Mencionaremos, finalmente, que puede haber casos en los que no sea viable la desviación del metabolis
mo hacia rutas no oxidativas. En cualquier caso, es conveniente tratar de evitar las reacciones de oxidación que
generan intermedios más dañinos, como las de epoxidación. Si en una estructura aromática se introducen cade
nas alifáticas, se ofrece a las enzimas oxidativas un punto de ataque más sencillo que el anillo bencénico, por lo
que disminuye la reacción de hidroxilación aromática, que transcurre a través de epóxidos como intermedios, y
se logra una menor toxicidad (Fig. 8.55),
28 % de excreción
como fenol
Oíros metabolitos
Figura 8.55. Desviación del metabolismo hacia rutas oxidativas que no tengan epóxidos como intermedios.
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9
La inhibición enzimática como objetivo
en el diseño de fármacos (I).
Agentes quimioterápicos
Msc. María Enfrenta Macas

BIOQUIMICA FARMACEUTICA .
C. Avendano
1. INTRODUCCIÓN
Una gran variedad de moléculas, de origen natural o de síntesis, poseen la capacidad de inhibir específicamente
algunas enzimas. El estudio de las bases moleculares de este fenómeno es muy importante porque permite el di
seño de fármacos con la máxima especificidad in vivo. Aunque muchos fármacos que interfieren la actividad de
las enzimas fueron introducidos en terapéutica antes de que se demostrara su mecanismo de acción a nivel mo
lecular, una vez conocido éste se han podido diseñar nuevos y mejores compuestos. En general, las enzimas son
dianas farmacológicas más sencillas para ser estudiadas que los receptores o los sistemas de transporte, ya que
son más fáciles de purificar y tanto su centro activo, como su mecanismo de catálisis, son relativamente accesi
bles. Los nuevos enfoques del diseño de fármacos se basan, en gran parte, en la avalancha de nueva informa
ción, derivada de la Biología Molecular, acerca del aislamiento y la secuenciación de genes que codifican pro
teínas de interés farmacológico. No hace mucho tiempo, averiguar la estructura primaria de una enzima costaba
años, mientras que ahora se resuelve en unas semanas. Además, cuando se identifica una enzima como diana
farmacológica, se sabe cómo expresarla en una gran variedad de células, si no es posible aislarla de fuentes na
turales pura y a gran escala, y cómo modelizar el sitio activo.
Cuando se trata de utilizar una enzima como objetivo para la acción de fármacos, es útil distinguir entre
dos situaciones posibles. En primer lugar, puede tratarse de inhibidores enzimáticos farmacodinámicos. que ac
túan cuando las causas o síntomas de la enfermedad se deben a una alteración de una reacción enzimática que se
produce habitualmente en el organismo sano. En segundo lugar, se encuentran los inhibidores enzimáticos qui
mioterápicos, que actúan cuando la enfermedad está causada por agentes externos (bacterias, virus, hongos o
parásitos en general). Estos fármacos pueden inhibir una enzima importante para su supervivencia que no se en
cuentra en el hospedador o que, si está presente, es posible encontrar compuestos que inhiban aquélla de forma
selectiva. Se denominan también quimioterápicos los antitumorales que actúan inhibiendo enzimas para las que
no existen más que diferencias cuantitativas entre las células normales y las tumorales, con lo que la inhibición
selectiva es prácticamente imposible, al menos in vitro.
En la Figura 9.1. se representa lo que se pretende cuando se administran fármacos antiinflamatorios que.
como el ácido acetilsalicílico (aspirina), actúan inhibiendo la enzima prostaglandina sintetasa, o cuando se ad
ministra el fármaco antigotoso alopurinol, que actúa inhibiendo la enzima xantina oxidasa. Estos son ejemplos
representativos de los muchos farmacodinámicos clínicamente útiles que actúan por inhibición de una enzima
habitual en un organismo sano. En ambos casos, se intenta que no se produzca un metabolito que posee un de
terminado efecto fisiológico: la prostaglandina (un mediador inflamatorio) o el ácido úrico. Cuando se adminis
tra como fármaco anticonvulsivo un inhibidor de la enzima GABA transaminasa. se intenta que un sustrato que
se encuentra en defecto, el neurotransmisor inhibitorio GABA, no se degrade a semialdehído succínico.
Antiinflamatorios inhibidores
de la prostaglandina sintetasa
Prostaglandina
Evitar un metabolito
que no debe producirse
Alopurinol. f ármaco antigotoso
inhibidor de la xantina oxidasa
Ácido úrico
Posibles objetivos de los
inhibidores enzimáticos
farmacodinámicos
Evitar que un sustrato
necesario se metabolice h2n CO,H
GABA
one co2h
Semialdehído
succínico
Figura 9.1. Posibles objetivos de los farmacodinámicos que actúan por inhibición enzimática.
El mecanismo molecular del alopurinol se indica en la Figura 9.2. En la gota, la inflamación y el dolor se de
ben fundamentalmente al depósito en el líquido sinovial y las articulaciones de ácido úrico, que procede del meta
bolismo de las purinas en los mamíferos superiores, y que se origina principalmente a partir de la hipoxantina en
una reacción de oxidación catalizada por la enzima xantina oxidasa. Cuando se administra alopurinol. un isóstero
de hipoxantina en el que el anillo imidazólico se ha reemplazado por uno pirazólico. éste actúa como inhibidor
competitivo de la citada enzima, por lo que disminuye la producción de ácido úrico. Al ser la xantina y la hipoxan
tina más hidrosolubles. se excretan más rápidamente y se mejoran las manifestaciones clínicas de la enfermedad.
O
Xantina
3; oxidasa*
Ácido úrico
Alopurinol Aloxantinu
Figura 9.2. Interferencia del alopurinol en el metabolismo de las purinas.

LA INHIBICIÓN ENZ1MÁTICA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I>. AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 21 I
El ejemplo de los inhibidores de GAB A transaminasa (Fig. 9.1) refleja que la inhibición de enzimas que
degradan moléculas que tienen una acción biológica puede ser beneficioso, ya que de esta forma dicha acción se
prolonga más tiempo. Estos inhibidores se comportan como agonistas indirectos si el metabolito cuya vida se
alarga es un neurotransmisor o una hormona. Lo mismo ocurre si se trata de un segundo mensajero. El sildena-
filo, comercializado con el nombre de Viagra, es el ejemplo más popular de este tipo de inhibidores, que actúa,
como veremos en el Capítulo II. inhibiendo una fosfodiesterasa que degrada al segundo mensajero guanosil-
monofosfato cíclico (GMP).
Es frecuente también asociar un fármaco con un compuesto que inhibe una enzima que participa en su de
gradación. Con esta estrategia, se consigue que la dosis eficaz de aquél pueda ser menor. Son ejemplos la aso
ciación de penicilinas con inhibidores de p-laetamasas, de DOPA con inhibidores de DOPA descarboxilasa. de
ara-C con tetrahidrouridina o la de 6-mercaptopurina con alopurinol.
Algunas enzimas, como la superóxido dismutasa en enfermedades inflamatorias, se utilizan como fárma
cos, pero no se comentarán aquí. Tampoco podremos estudiar todos los quimioterápicos y farmacodinámicos
que actúan como inhibidores enzimáticos. sino que seleccionaremos ejemplos representativos de ambos en este
capítulo y en los dos siguientes.
2. ENZIMAS Y COENZIMAS
Las enzimas son proteínas, es decir, polímeros de (S)-aminoácidos unidos por enlaces peptídicos entre el grupo car-
boxilo en a de un residuo y el amino en a del siguiente. Este enlace es plano, y adopta básicamente la configuración
anti por la resonancia del agolpamiento amida, que restringe la libre rotación del enlace C-N. Por esta razón, el gru
po NH es un buen donador y el oxígeno carbonílico un buen aceptor de protones, lo que es muy importante para la
formación de puentes de hidrógeno intramoleculares que mantienen la estructura plegada, o para establecer interac
ciones entre la enzima y sus sustratos. La secuencia de aminoácidos característica de una proteína se denomina es
tructura primaria, mientras que la estructura determinada por interacciones entre aminoácidos no contiguos (gene
ralmente de enlace de hidrógeno) se denomina secundaria (por ejemplo una hélice a o una lámina p; Fig. 9.3).
Figura 9.3. Estructura primaria y secundaria de las proteínas.

Los plegainientos adicionales, que se producen debido a las fuerzas de atracción o repulsión entre los re
siduos de los aminoácidos y el entorno acuoso, determinan la estructura terciaria (Fig. 9.4). Finalmente, pueden
asociarse varias unidades para dar una estructura cuaternaria (dímera, trímera, etc.; Fig. 9.5).
Estructura
terciaria
Figura 9.4. Estructura terciaria de las proteínas.
Estructura
cuaternaria
Figura 9.5. Estructura cuaternaria de las proteínas.
La determinación de la estructura primaria puede hacerse por métodos químicos (véase el método de San
ger. en el Capítulo 28). mientras que la tridimensional puede realizarse por difracción de rayos X o por resonan
cia magnética nuclear. La mayor parte de las enzimas tiene estructuras muy similares, con pesos moleculares
entre 30 kDa y 60 kDa. Aunque algunas son estables durante muchos años, en general se hidrolizan constante
mente a sus aminoácidos, y tienden a presentar una semivida muy corta. La estructura plegada de las enzimas es
más estable en condiciones fisiológicas, situándose los sitios activos de muchas de ellas en las regiones más fle
xibles. Por ello, son muy sensibles a los agentes desnaturalizantes.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I >- AGENTES QUIM1OTERÁPICOS 213
Pueden clasificarse en seis clases principales, en función de los tipos de reacción que catalizan. Una Co
misión de Enzimas internacional da a cada una un número (número CE), un nombre sistemático, basado en la
reacción que cataliza y, en muchos casos, un nombre común. Por ejemplo, la enzima denominada comúnmente
fosfolipasa C, que cataliza la hidrólisis de fosfatidilcolina a 1,2-diacilglicerol y fosfato de colina, es la L-3-gli-
cerofosfocolina glicerofosfohidrolasa y posee el número CE 3.1.4.3.
Clase Tipo de reacción
1. Oxidorrcductasas Oxidorreducción
2. Transferasas Transferencia de grupos
3. Hidrolasas Hidrólisis
4. Liasas Eliminación con formación de dobles enlaces
Adición a dobles enlaces
5. Isomerasas Isomerización
6. Sinteiasas Formación de enlaces entre dos moléculas
o Ligasas (su energía se suministra por la transformación simultánea
de trifosfatos de nucleósidos en monofosfatos de nucleósidos)
Se denominan isoenzimas aquellas enzimas que tienen una estructura y una función muy semejantes, pe
ro que muestran parámetros cinéticos diferentes, pueden separarse por electroforesis, tienen diferente estabili
dad a la temperatura y se inhiben de forma diferente. Es frecuente que los distintos tejidos tengan una propor
ción diferente de estas isoenzimas. Cuando ejercen funciones similares, pero no están relacionadas genética o
estructuralmente, las enzimas se llaman isofuncionales. La comparación de éstas en diferentes especies es muy
importante en el diseño de fármacos inhibidores, porque lo ideal en el campo de los quimioterápicos es encon
trar fármacos que ataquen al parásito y no al hospedador.
Muchas enzimas (aôenzimas) requieren para su actividad cofactores, que son iones metálicos como
Zn2*, Mg2’. Mn2*, Fe2*, Fe3*, Cu2*, o moléculas orgánicas denominadas coenzimas (en general, vitaminas esen
ciales o sus metabolitos). Las vitaminas se clasifican en hidrosolubles, que no pueden almacenarse en el orga
nismo y deben ingerirse regularmente, y liposolubles. Su ausencia en la dieta produce enfermedades carencia
les. por lo que su administración tiene gran interés en terapéutica.
La vitamina B_>. o riboflavina, es un derivado de benzopteridina con una cadena de ribosa reducida en la
posición 10. Como componente del dinucleótido de flavina y adenina (FAD, del inglés flavin-adenine-dinucleo-
tide), es un transportador de electrones y protones debido a la estabilidad del anión-radical que se produce cuan
do adiciona un electrón (Fig. 9.6). Está implicada en el metabolismo de azúcares y ácidos grasos. También las
monoaminooxidasas (MAO), que hemos revisado en el Capítulo 7, son flavoenzimas. La nicotinamida (deriva
da del ácido piridina-3-carboxílico), en su forma de nuclcótido fosforilado de nicotinamida y adenina (NADP
*)
es el transportador de electrones más importante en las reacciones metabólicas, a través de la adición de un
anión hidruro. Su carencia se denomina pelagra.
OH OH OH
CH2-CH-CH-CH-CH2OH
Riboflavina (vitamina B2) O
Ribosa-Fosfato-Ribosa-Adenina Ri bosa- Fosfato-Ri bosa-Aden i na

NADP® NADPH
Figura 9.6. Coenzimas transportadoras de electrones.

La vitamina B6, en su forma activa de fosfato de piridoxal, es coenzima de varias enzimas implicadas
en el metabolismo de aminoácidos. Algunos de sus inhibidores, cuya importancia terapéutica se comentará
en el Capítulo 11, son reactivos del grupo carbonilo aldehídico.
El ácido pantoténico es una hidroxiamida que forma parte del coenzima-A, que interviene como cofac
tor de la proteína transportadora de acilos en el complejo enzimático de las sintetasas de ácidos grasos.
La vitamina B12, o cianocobalamina. es una molécula compleja semejante a hemoproteínas, como la
hemoglobina, o a las oxidasas de función mixta encuadradas en la familia P-450 (véase el capítulo 7). Su áto
mo de cobalto central está coordinado con cuatro anillos de pirrol y un grupo ciano. siendo un resto de benci-
midazol el sexto ligando. Interviene en la catálisis de varias reacciones y su carencia conduce a la anemia
perniciosa.
La vitamina C. o ácido ascórbico. es una laclona derivada de un azúcar que se utiliza en la hidroxila-
ción de esteroidcs y de prolina, entre otras importantes funciones (Fig. 9.7).
Pirofosfato de (¡amina (vitamina B() Fosfato de piridoxal

(vitamina B¿)
CH,OH
HOCH-C—C-CONH-CH2-CH2-CO2H
ch3 h
Ácido pantoténico
Ácido ascórbico
CH H O (vitamina C)
t i ii
— C— C-C-NH
CHjOH (CH;)2CONH-(CH,),SH
Figura 9.7. Estructura de algunas vitaminas hidrosolubles.
Entre las vitaminas liposolubles, se encuentra la vitamina A o retinol (Fig. 9.8), un terpenoide insaturado
que desempeña un papel biológico muy importante.
La vitamina D, o calciferol, además de encontrarse en ciertos alimentos, se produce en la piel a partir de
una previtamina de estructura esteroídica, por la acción de la luz. Las formas activas de la vitamina D. como la
1,25-dihidroxivitamina D, (1,25 (OH)2D3), se consideran hormonas. Se forman por hidroxilación enzimática en
los microsomas hepáticos y en el riñón, se transportan a los huesos y otros órganos, y movilizan el calcio y el
fosfato, favoreciendo su absorción en el intestino (véase el Capítulo 17).
La vitamina E, o tocoferol, posee una estructura de cromano con propiedades antioxidantes. Probable
mente, estabiliza a la vitamina A y a los ácidos grasos insaturados, evitando reacciones a través de radicales
libres.
La vitamina K es una naftoquinona sustituida por una cadena terpénica. Participa en el proceso de la coa
gulación, concretamente en la carboxilación de los residuos de glutamato de las proteínas que. como la pro-
trombina, están implicadas en la formación de complejos de fosfolípidos e iones calcio.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 215
Retinol
Vitamina K ।
(Vitamina A)
Figura 9.8. Estructura de algunas vitaminas liposolubles.
Los anticoagulantes orales, como el dicumarol, la warfarina y la fenindiona, inhiben este proceso
(Fig. 9.9).
O
OH CHt-C-CH,
Dicumarol Warfarina
Fenindiona
Figura 9.9. Estructura de algunos anticoagulantes orales.
3. PRINCIPIOS FUNDAMENTALES DE LA CATÁLISIS ENZIMÁTICA
Los mecanismos de las reacciones catalizadas por enzimas pueden racionalizarse teniendo en cuenta que éstas
actúan como catalizadores.
Para que los sustratos reactivos se conviertan en productos, deben adquirir la energía suficiente para al
canzar el «estado de transición» o «estado activado» de la reacción. Las enzimas, como lodos los catalizadores,
reducen dicha energía (Fig. 9.10).
Curso de la reacción------------- ►
Figura 9.10. Diagrama energético de una reacción catalizada y no catalizada.
La unión de un sustrato a una enzima origina cambios electrónicos y geométricos en ésta. Dicha unión se
produce, en general, en los lugares catalíticos o «sitios activos» de las enzimas, pero también puede producirse
en otros «sitios de reconocimiento».
Entre las diversas teorías que existen para explicar el aumento de la velocidad en las reacciones cataliza
das por enzimas y la discriminación que éstas muestran ante diferentes sustratos, una de ellas supone que un
sustrato específico, al unirse al centro activo de la enzima, induce un cambio desde una conformación catalítica
mente inactiva de ésta a otra catalíticamente activa. La energía del enlace entre la enzima y su sustrato se utiliza
fundamentalmente para compensar la entropía desfavorable que supone la formación del complejo enzima-sus
trato (ES) y para compensar la conversión de la enzima a una conformación energéticamente más desfavorable,
pero activa.
En general, las enzimas tienen especificidad de reacción. Por ejemplo, dentro de las hidrolasas, algunas
pueden catalizar hidrólisis de esteres, y por ello se denominan esterasas. o de péptidos, denominándose peptida-
sas. Esto se debe a que en sus centros activos intervienen grupos funcionales de distintos aminoácidos y, como
ya se ha comentado, a la cooperación de distintas coenzimas o iones metálicos. Poseen también, en general, es
pecificidad de sustrato, hasta tal punto que una enzima puede enlazarse mejor con un enantiómero que con otro
si el sustrato es quiral. Las enzimas son estructuras quirales, dado que están fomadas por i.-aminoácidos (salvo
la glicina) y, por tanto, la energía requerida para formar el complejo ES(/?), que es diastereoisómero del com
plejo ES(S), debe ser diferente. Puede suceder que, aunque una enzima pueda enlazarse a ambos enantiómeros,
sólo en uno de los complejos la interacción sea productiva (ese enantiómero se transforme). En el Capítulo 26,
se comentará su aplicación en la síntesis de compuestos enantioméricamente puros.
ES(/() Complejos diastereoisómeros ES(S)
i *
■■■ f
EP EP
Las enzimas disminuyen la energía de los estados de transición de la reacción que catalizan, de tal forma
que son capaces de transformar I0J moléculas de sustrato/minuto o más. Esta catálisis tan eficaz es consecuen
cia, fundamentalmente, de la aproximación entre los grupos que deben interactuar. La enzima sirve de molde a
los sustratos y a los grupos catalíticos, lo que equivale a realizar la reacción a una concentración mucho mayor,
y a que las reacciones sean casi de primer orden o intramoleculares y, en consecuencia, se produzcan con un
cambio no desfavorable de la entropía.
Los mecanismos de catálisis pueden ser varios. En la catálisis covalente, o nucleófila, las enzimas utilizan
cadenas nucleófilas de aminoácidos para formar enlaces covalentes con el sustrato. Un segundo sustrato puede
LA INHIBICIÓN ENZIMÁT1CA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 217
reaccionar con este complejo covalente enzima-sustrato, para generar un producto. Es el caso de las proteasas
de serina o de cisterna, que forman primero una acilenzima, que sufre posteriormente la hidrólisis, regenerando
la enzima (Fig. 9.11. X = O. X = S).
En estas reacciones, la enzima interviene además como un catalizador ácido, colaborando en la ruptura del
enlace y en la formación de H.N-R2, y básico, aumentando la nucleofilia del agua en la hidrólisis de la acilenzima
para liberar R'-COjH.
OH
Figura 9.11. Catálisis covalente o nucleófila y catálisis ácido-base.
La catálisis puede efectuarse también por interacciones electrostáticas o por desolvatación. Por ejemplo,
en la hidrólisis de un enlace peptídico por una proteasa de serina (Fig. 9.12), el intermedio tetraédrico que se
forma, de tipo aniónico, puede estabilizarse por una interacción electrostática con un catión del centro activo.
En el medio hidrófobo de los centros activos, las interacciones electrostáticas son mucho más fuertes.
Figura 9.12. Catálisis electrostática.
La velocidad a la que se produce una reacción catalizada por una enzima viene determinada por el pH. la
temperatura y. muy especialmente, por la concentración de sustrato. Las ideas fundamentales acerca de la catá
lisis cnzimática derivan de los clásicos estudios de Michaelis y Mentcn. Si la velocidad de una reacción (V) se
representa en función de la concentración de sustrato (S), resulta una hipérbola como la representada en la Figu
ra 9.13. definiéndose la constante de Michaelis-Mcnten (X,,,) como la concentración de sustrato a la que se al
canza la mitad de la velocidad máxima (Vmto). Si se representa 1/[S| frente a l/V, resulta una línea recta más sen
cilla de interpretar.
Figura 9.13. Velocidad de una reacción en función de la concentración de sustrato.
4. INHIBICIÓN ENZIMÁTICA. TIPOS DE INHIBIDORES
Los inhibidores enzimáticos pueden clasificarse en reversibles e irreversibles. La inhibición enzimática irrever
sible se denomina, más adecuadamente, inactivación enzimática, ya que requiere que la proteína implicada se
sintetice de novo. Los inhibidores reversibles pueden ser, a su vez, competitivos, que disminuyen la afinidad del
sustrato aumentando K„. y no competitivos, que disminuyen el valor V^¡Algunos inhibidores reversibles deno
minados mixtos alteran ambos valores. En presencia de un inhibidor competitivo (I), que se enlaza al sitio acti
vo de forma reversible, se pueden formar dos complejos: E-S * y E-I. La velocidad máxima no cambia, porque
sólo depende de la concentración de enzima que no está inhibida, pero se alcanza a mayores concentraciones de
sustrato, por lo que varia el valor aparente de K,„. La constante del inhibidor K se aproxima a la constante de di
sociación del complejo El y, cuanto menor sea su valor, el inhibidor se une más eficazmente a la enzima.
Aplicando la representación de Lineweaver-Burk ([S]'1 frente a V1) a diferentes concentraciones de un in
hibidor, se puede reconocer su carácter competitivo cuando aumenta la pendiente de la recta si se aumenta la con
centración del inhibidor. La intersección con el eje V1 permanece constante y con el eje [S] 1 aumenta (Fig. 9.14).
Muchos de los inhibidores enzimáticos son «inhibidores competitivos análogos del sustrato», también denomina
dos antimetabolitos. Su diseño se ha basado en la similitud estructural, lo cual es comprensible dado que el sustra
to y el inhibidor interactúan con el mismo centro activo de una enzima determinada. La calificación «reversible» o
«irreversible» depende de la fortaleza de los enlaces implicados en la interacción (véase el Capítulo 3).
Figura 9.14. Efecto de un inhibidor competitivo (línea de puntos) en una representación Lineweaver-Burk.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES Ql'IMIOTERÁPICOS 219
Por el contrario, con un «inhibidor no competitivo», la pendiente aumenta, porque V^, disminuye, la in
tersección con el eje [S] 1 (-/C,,1) permanece constante, mientras que con el eje V aumenta (Fig. 9.15). Esta
inhibición no revierte aumentando la concentración de sustrato, ya que el inhibidor no compite por el centro ac
tivo de la enzima, sino que interactúa con otros residuos de aminoácidos de un lugar alostérico. Como resultado
de dicha interacción, el centro activo de la enzima puede quedar inaccesible al sustrato, o la enzima puede variar
su conformación de tal forma que resulta no funcional. Es obvio que la estructura de este tipo de inhibidores no
tiene ninguna relación con la del sustrato y. por tanto, no pueden diseñarse por analogía estructural.
v-'
|S|-'
Figura 9.15. Efecto de un inhibidor no competitivo (linea de puntos) en una representación de Lineweaver-Burk.
Los «inhibidores irreversibles dirigidos al centro activo» son portadores de una subunidad que les permite su
enlace reversible con un «sitio de reconocimiento» de la enzima, pero el complejo inicial así formado deja situados
convenientemente un grupo reactivo del inhibidor y un grupo nucleófilo del «sitio activo» de la enzima, que for
man fácilmente un enlace covalente. Como ejemplos, citaremos algunas cetonas a-halogenadas. que se construyen
sobre un sustrato específico de las proteasas de cisterna, y son inhibidores de quimotripsina y tripsina (Fig. 9.16).
i enzima.
Figura 9.16. Inhibidores irreversibles de quimotripsina y tripsina dirigidos al centro activo.
El primer ejemplo es capaz de alquilar el resto histidina-57 de la a-quimotripsina, y su resto aromático de

fcnilalanina se enlaza a la cavidad hidrófoba de la enzima, con la colaboración adicional de varios enlaces de
hidrógeno. Se bloquea así el acceso de las moléculas del sustrato al «sitio activo» y se elimina sü acción catalítica.
Debido a que las a-halometilcetonas son demasiado reactivas para ser inhibidores enzimáticos selectivos, se
prefieren análogos menos reactivos, como las a-diazometilcetonas u otros grupos reactivos eleclrófilos.
Dado que la teoría más aceptada acerca de la catálisis enzimática supone que, cuando se realiza la interac
ción entre la enzima y su sustrato, aquélla sufre un cambio de conformación que desestabiliza el estado inicial y
estabiliza el estado de transición de la reacción que cataliza, el diseño de compuestos cuya estructura sea similar
al estado de transición correspondiente origina inhibidores reversibles muy específicos, que se denominan «in
hibidores análogos del estado de transición». El diseño de inhibidores análogos del estado de transición exige,
como condición previa, el conocimiento detallado del mecanismo de la reacción que se va a inhibir y de la ac
tuación de la enzima en dicha reacción. Entre sus principales inconvenientes, se encuentra el hecho de que las
reacciones que cataliza una determinada enzima pueden transcurrir a través de estados de transición diferentes,
y de que un análogo del estado de transición puede estar más solvatado que un análogo del estado inicial del
sustrato y, por tanto, puede resultar un mal inhibidor.
Como representantes de este grupo, se encuentran los inhibidores de proteasa VIH-1. que se estudiarán
más adelante, y la coformicina, un inhibidor de la enzima adenosina desaminasa, que cataliza la desaminación
hidrolítica de nucleósidos de adenina. De igual modo funciona la citidina desaminasa con los nucleósidos de ci-
tosina. El estado de transición de estas reacciones, en las que el agua ataca nucleofílicamente al átomo de carbo
no correspondiente, posee una estructura de carbono tetraédrico.
Pencoslatina Ribósidode 1,6- Coformicina

R = 2*-Desoxirribofuranosilo dihidro-6-hidroxi- R = Ribofuranosilo
metilpurina
R = Ribofuranosilo
Figura 9.17. Inhibidores de adenosina desaminasa análogos del estado de transición.
En la Figura 9.17, se representan las estructuras de coformicina y su 2’-desoxirribósido pentostatina, dos

antibióticos aislados de Streptomyces. junto al ribósido de 1.6-dihidro-6-hidroximetilpurina. que es sintético.
Los tres compuestos son inhibidores de adenosina desaminasa análogos del estado de transición, ya que poseen
un carbono tetraédrico que soporta un grupo hidroxilo. Por ello, su afinidad por la enzima es mucho mayor que
la del sustrato. El valor K„ del sustrato de la reacción (2'-desoxiadenosina) es 10"’ M, mientras que el valor Ki
de la pentostatina es de 2.5 X 10‘12 M. Se asocian con ara-A (véase más adelante) para prolongar su acción. La
pentostatina resultó ser además antitumoral. posiblemente porque al acumularse la 2'-desoxiadenosina se inhi
ben enzimas, como la nucleótido reductasa, que transforma ribósidos en desoxirribósidos que son fundamenta
les en el crecimiento celular. Sin embargo, no se utiliza por ser muy tóxica a las concentraciones activas.
Del mismo modo, la citidina desaminasa se inhibe por la tetrahidrouridina, otro análogo del estado de
transición que ha demostrado utilidad, asociado al fármaco antitumoral arabinofuranosilcitosina (ara-C), para
modular su farmacocinética. ya que al inhibir la desaminación de éste, que lleva consigo la pérdida de actividad,
se prolonga su semivida (Fig. 9.18).
LA INHIBICIÓN ENZ1MÁT1CACOMO OBJETIVO EN El- DISEÑO DE FÁRMACOS (1). AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 221
Estado de transición Uric! i na

hipotético
Ciudina desaminasa
Tetrahidrouridina
(análogo del estado de transición que se asocia
con Ara-C en la quimioterapia antitumoral)
Figura 9.18. Inhibición de citidina desaminasa por un análogo del estado de transición.
Las enzimas que catalizan reacciones entre dos sustratos forman un complejo temario con éstos y pueden in
hibirse por compuestos que contengan en su estructura porciones que representen a ambos sustratos enlazados cova-
lentcmenle. Estos compuestos se denominan «inhibidores multisustrato». Su eficacia se basa en que el cambio de
entropía asociada a la unión de una enzima con una molécula es menos desfavorable que la asociada a la unión de
una enzima con dos moléculas. Desde el punto de vista conceptual, son muy semejantes a los inhibidores análogos
del estado de transición. Como ejemplo, mencionamos el i.-aspartato de N-fosfonoacetilo. denominado PALA (del
inglés, Phosphono-Acetyl- i.-Aspartate). que combina en su estructura a los dos sustratos de la aspartato transcarba-
moilasa, el L-aspartato y el fosfato de carbamoílo, pero que, al carecer del grupo fosfato saliente, como consecuencia
de la sustitución isoslérica -O- por -CH?-, no se transforma tras la interacción con la enzima. La aspartato transcar-
bamoilasa cataliza el primer paso de la biosíntesis del ácido uridílico (Fig. 9.19).
o
O
co2h CO,H
O-P=O
°-P=O co2H
I CH, CH,
o + + P, —► Ácido dihidroorótico
h2nch O=C-N-CH
o=c h2n cq, h
co2h > H I
NH2 nh2 co2h
Fosfato de
carbamoílo i. -aspártico
Aspartato transcarbamoilasa
Sustitución isostérica
-O-------- ► -CHÍ
PALA
(/V-Fosfonoacctil L-aspártico)
Figura 9.19, Inhibidores multisustrato de aspartato transcarbamoilasa.

En la Figura 9.20 se incluyen otros pasos posteriores a la formación de ácido dihidroorótico en los que es
tán implicadas otras enzimas que. a su vez, pueden ser bloqueadas por inhibidores reversibles análogos del sus
trato.
Figura 9.20. Biosíntesis del ácido uridílico. Inhibidores reversibles.
Los inhibidores irreversibles establecen interacciones tan fuertes con la enzima, con frecuencia covalen-
tes. que el complejo El no revierte por diálisis. Filtración o dilución, y deben denominarse, más adecuadamente,
inactivadores enzimáticos. Éstos son. generalmente, compuestos alquilantes o acilantes que reaccionan con nu-
cleófilos, por lo que pueden ser muy tóxicos y no son tan útiles como otros inhibidores. Para evitar la toxicidad,
deben tener una enorme afinidad, con valores de K, muy pequeños. De esta forma, no interactúan con otros nu-
cleófilos de forma indiscriminada. Son ejemplos las penicilinas, las cefalosporinas y las cefamicinas, inhibido
res de la transpeptidasa de péptidoglicano que veremos con más extensión en el Capítulo 10.
Desde el punto de vista del diseño de fármacos, resultan particularmente atractivos los denominados «in
hibidores irreversibles basados en el mecanismo», también llamados «inhibidores latentes» o «fármacos que
producen inhibición suicida». Éstos pueden considerarse como profármacos en los que la bioactivación, que
suele poner de manifiesto un grupo electrófilo anteriormente latente, está catalizada por la misma enzima que se
va a inhibir posteriormente. Inicialmente, forman un complejo con la enzima y se transforman en el inhibidor
propiamente dicho (!' en la ecuación [ 1 ]). cuyo grupo electrófilo va a unirse de nuevo a un resto nuclcófilo (X)
de la enzima, formando un complejo muy estable (El"). Si el complejo El' formado inicialmente no es covalen
te, la inhibición resulta menos efectiva en presencia del sustrato, ya que I' compile con S para transformarse en
producto (P).
[11
Se han diseñado muchos grupos funcionales «latentes» para inhibir de este modo enzimas de significa
ción terapéutica: penicilinasas y alanina-racemasas en el diseño de antibacterianos, GABA-transaminasas en el
de antiepilépticos, omitina-descarboxilasa en el de antitumorales y antiparasitarios, la A'- lipooxigenasa y la ci-
clooxigenasa para el bloqueo de la síntesis de prostaglandinas y leucolrienos, la aromatasa para controlar la in-
terconversión de hormonas androgénicas en estrogénicas, etc. Algunos se verán con más detalle en los capítulos
siguientes.
En la Figura 9.21 se resumen algunos procesos de bioactivación en los que un resto (R) está unido a agru-
pamientos que. a través de reacciones catalizadas por diversas enzimas, se transforman en agrupamientos elec-
trófilos capaces de interactuar de forma covalente con ellas, y no con otras que no lo reconocen y. por tanto, no
lo bioctivan.
Grupo latente Grupo bioactivo Unión covalente

del inhibidor del inhibidor a la enzima
Oxidación Enzima-Nu
enzimática
NR2
HC=C—/ Oxidación
enzimática
Oxidación
enzimática
Eliminación
enzimática
Oxidación
enzimática
y deshidro-
halogenación
Figura 9.21. Procesos que ilustran el mecanismo de inhibición suicida (activación por la enzima
a inhibir y unión covalente del inhibidor activado).
La bioactivación del fármaco antiviral trifluridina se representa, como ejemplo, en la Figura 9.22. La en
zima timidilato sinlasa (TS), cuya catálisis se analiza más adelante, transforma el grupo trifluorometilo a través
de varios pasos, en un derivado (El') que acila a la enzima para dar la estructura El".
Figura 9.22. Mecanismo propuesto para la inhibición de TS por la trifluridina.
5. QUIMIOTERÁPICOS QUE ACTÚAN COMO INHIBIDORES ENZIMÁTICOS
5.1. Inhibidores de dihidropteroato sintasa, dihidrofolato reductasa y timidilato sintasa

Las diferencias cualitativas en el equipo enzimático de agentes microbianos o parásitos y el de las células del
hospedador, pueden explotarse en el diseño de inhibidores enzimáticos como quimioterápicos. Cuando se inhi
be una enzima que es imprescindible para la vida de una bacteria y no existe en el hospedador, se tiene en teoría
un fármaco antibacteriano carente de toxicidad. Esto sucede con las sulfamidas que, por su semejanza con el
ácido p-aminobenzoico (PABA), actúan como antimetabolitos de éste. Las sulfamidas antibacterianas son inhi
bidores competitivos de la enzima dihidropteroato sintasa que fueron desarrolladas a partir de que, en 1935, se
descubriera que la actividad antibacteriana del colorante azoico prontosil se debía a uno de sus metabolitos con
estructura de sulfanilamida (Fig. 9.23).
NH,
Bioactivación
Prontosil nibnim Metabolito activo Sulfamidas antibacterianas
Figura 9.23. Origen de las sulfamidas antibacterianas.

LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN El. DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 225
Se ha demostrado, utilizando sulfamidas marcadas como [”S] sulfametoxazol, que se forma un enlace en
tre el grupo amino de este inhibidor y el metileno activado como áster de ácido pirofosfórico del sustrato deri
vado del hcterociclo pteridina que se indica en la Figura 9.24. Esta reacción compite con la incorporación del
ácido />-aminobenzoico (PABA) en la formación del enlace -CH;-N(10)-en la biosintesis del ácido fólico.
El ser humano, que absorbe el ácido dihidropteroico de la dieta, no posee dicha enzima, mientras que las
bacterias en general son incapaces de utilizar ácido fólico exógeno por problemas de absorción.
Las sulfamidas constituyen uno de los primeros ejemplos de fármacos a los que pudo asignarse un meca
nismo de acción a nivel molecular. Poseen un amplio espectro de actividad antimicrobiana y supusieron una re
volución en el tratamiento de enfermedades infecciosas. Sin embargo, su uso indiscriminado ha conducido al
desarrollo de resistencias mediante la superproducción de ácido p-aminobenzoico o la biosintesis de una enzima
con menor afinidad para las sulfamidas.
En los Capítulos 5 y 7, se ha explicado la influencia del pKa de las sulfamidas sobre su actividad antibac
teriana in vitro. Cuanto menor sea aquél, mayor será la concentración de sus formas iónicas capaces de interac
tuar con la enzima, de forma semejante al sustrato. Por otra parte, las formas no ionizadas serán transportadas a
través de las membranas más fácilmente, de forma que el pKa puede regularse introduciendo un sustituyente
adecuado en el nitrógeno del grupo sulfonamida. algo que es decisivo para una actividad idónea in vivo. La io
nización aumenta con un sustituyente atrayente de electrones.
Tras su administración por vía oral, la absorción intestinal se produce en las sulfamidas que no poseen
otros grupos ionizables adicionales. Estas últimas no se absorben, permanecen en el intestino y pueden utilizar
se en infecciones gastrointestinales (véase el Capítulo 8). La absorción se produce a través de las formas no io
nizadas, que se distribuyen por el organismo. Las formas ionizadas, más hidrosolubles. tienden a excretarse rá
pidamente y son útiles en infecciones urinarias. Las más lipófilas, con semivida mayor, se utilizan en
infecciones sistémicas (generalizadas).
Uno de los problemas que presentan ciertas sulfamidas es su tendencia a cristalizar a valores de pH infe
riores a los del plasma, produciendo cristaluria. En este caso, se han de preparar derivados más hidrosolubles y
más activos, que permitan menores concentraciones en el hospedador.
En la Tabla 9.1 se indican ejemplos representativos de sulfamidas antibacterianas y algunas de sus carac
terísticas.
Tabla 9.1. Sulfamidas clásicas H2N —\_/~ SOaNHR
DCI R pKa Farmacocinétiea y uso
NH
. Se absorbe mal. se utiliza en infecciones gas-

Sulfaguanidina NH, BásKO troiniestinales
N—\
Sulfa tiazol ./ 7.25 Se absorbe bien y se excreta rápidamente
Se absorbe bien y se excreta moderada

Sulfamcioxazol
mente
Sulfadiazina Se absorbe bien y se excreta moderadamente
La semejanza estructural entre las sulfamidas y las sulfonas hizo que estas últimas se ensayasen como an
tibacterianos. Debido a su toxicidad, no se utilizan para este propósito, pero sí para el tratamiento de la lepra
(producida por Mycobacterium leprae). La más importante es la dapsona, que también se ha utilizado como
profiláctico del paludismo. La presencia de grupos donantes de electrones facilita la unión a la enzima
(Fig. 9.25).
O®
HtN—c —s={
\_/ II \__ /
\—/ 0 \/
Dapsona
Figura 9.25. Eormas resonantes de dapsona.
A veces, la célula del organismo invasor y la del hospedador presentan diferencias más sutiles, que tam
bién pueden explotarse. Las enzimas que catalizan la misma reacción, pero son diferentes en su estructura y. por
tanto, no tienen la misma afinidad para un inhibidor, se denominan enzimas isofuncionales. Por ejemplo, la tri-
inetoprima (Fig. 9.26) es un fármaco que se asocia con frecuencia a las sulfamidas en la quimioterapia, ya que
es un inhibidor potente de la dihidrofolato reductasa bacteriana, mientras que se enlaza más débilmente a la
dihidrofolato reductasa de los mamíferos, ya que ésta posee una estructura ligeramente diferente, debido a que
las enzimas pueden haber evolucionado a lo largo de los siglos de distinta manera en unos organismos y en
otros. Resulta así una toxicidad selectiva para los microorganismos. El valor Cijo de la trimetoprima en las bac
terias es de 5 nM. mientras que en los mamíferos es de 2,6 x 105 nM. Las sulfamidas y la trimetoprima son fár
macos sinérgicos. ya que interfieren la acción de dos enzimas en un mismo proceso. De forma análoga, la piri-
metamina (véase a continuación) se asocia a las sulfamidas y a las sulfonas en la quimioterapia del paludismo y
la toxoplasmosis.
La dihidrofolato reductasa (DHFR) cataliza la reducción de ácido dihidrofólico a tetrahidrofólico. Es
una de las enzimas más estudiadas, y se conocen las estructuras de DHFR de distinta procedencia (E. coli, L.
casei c hígado de pollo) por difracción de rayos X de sus formas cristalinas (véase el Capítulo 6). Utilizando
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS <I>. AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 227
diversas técnicas, como marcadores de afinidad o sondas, modelización molecular, rayos X y resonancia
magnética nuclear protónica de alta resolución, se ha podido determinar que las secuencias de aminoácidos y
la estructura de DHFR de células sanas y enfermas en ciertas leucemias, así como de bacterias y otros mi
croorganismos. aunque parecidas, son diferentes. La homología de secuencia de DHFR de diferentes verte
brados es del 75-90 %, mientras que, si se compara con las de enzimas bacterianas, es del 20-30 %. También
se han estudiado algunos complejos binarios, enzima-inhibidor, y temarios. enzima-inhibidor-NADPH (este
último es el cofactor). La estructura cristalina del complejo enzima-metotrexato (MTX)-NADPH se conoce
desde 1982.
Figura 9.26. Biosíntesis del ácido folínico. Inhibidores de DHFR.
La aminopterina y el metotrexato (Fig. 9.27) son. como la trimetoprima. inhibidores competitivos que se
enlazan al «sitio-activo» de la DHFR unas 3.000 a 100.000 veces más intensamente que el sustrato natural, por
la formación de enlaces de hidrógeno entre la porción de 2.4-diaminopteridina. protonada a pH fisiológico, y
los grupos aniónicos del centro activo de la enzima. La basicidad del anillo pteridínico es mucho mayor (tres
unidades de pK,) que la de dicho anillo en el sustrato natural. El átomo de nitrógeno N1 protonado interactúa
intensamente con el grupo carboxilato del resto aspartalo-27 de la enzima. Además, al menos otros quince
aminoácidos contactan con el metotrexato en el sitio de enlace con la enzima, que es una cavidad hidrófoba
formada por las cadenas laterales de la hélice, de 15 Á de profundidad, en la que se «entierra» el anillo de piri-
midina.
O CO;H
C-NH-CH-íCHjíz-COjH
R1 = OH. R2 • H: Ácido fólico

R1 = NHj, R2 = H: Aminopterina
* = NHj, R2 = Me: Metotrexato (antincoplásico)
R
Figura 9.27. Inhibidores de DHFR. Aminopterina y metotrexato.
Cuando se comenzó un programa de investigación sobre la posible utilidad de los inhibidores de DHFR como
antipalúdicos, se observó que ni la aminopterina ni el metotrexato eran tóxicos para los protozoos, ya que. al igual
que ocurre con el ácido fólico. no son absorbidos por los microorganismos. Por ello, se diseñaron estructuras de dia-
minopteridina con sustituyentes lipófilos alquilo o fenilo, y surgieron los inhibidores de DHF no clásicos. Entre
ellos, la 2,4-diamino-6.7-difenilpteridina. mostró una actividad antipalúdica semejante a la de la quinina. Nuevas
modificaciones del núcleo de pteridina. en las que se omitió el nitrógeno de la posición 5 y se retuvieron los sustitu
yentes alquil icos lipófilos. condujeron a análogos más activos, como la pirimetamina (Fig. 9.28), en la que la lipofi
lia de los grupos clorofenilo y etilo, facilita la penetración a través de la membrana de los hematíes infestados con
las formas eritrocíticas del parásito. Este fármaco muestra selectividad por la DHFR del plasmodio. con un peso mo
lecular diez veces mayor que la del hospedador, y por tanto tiene un buen índice terapéutico. Se administra, general
mente. combinada con una sulfamida o sulfona. en la profilaxis y tratamiento del paludismo y la toxoplasmosis.
En otro programa de investigación, dirigido a la preparación de 2,4-diaminopirimidinas antibacterianas, se
sintetizaron 5-bencil derivados, en los que. cuando se redujo la lipofilia ligeramente por introducción de grupos
metoxilo en el anillo aromático, se alcanzó la actividad óptima. Así surgió el antibacteriano trimetoprima, descrito
en 1962 como un «sencillo y lejano análogo del ácido fólico». Unos diez años después, se observó que. adminis
trado junto con una sulfamida como el sulfametoxazol resultaba una actividad antibacteriana exaltada, debido al
efecto sinérgico basado en la inhibición secuencial de dos enzimas implicadas en la biosíntesis del ácido fólico. la
dihidropteroato sintasa y la DHFR. Entre sus aplicaciones se encuentran el tratamiento de infecciones de las vías
urinarias, las otitis, las enteritis y ciertas neumonías. El mismo sinetgismo se ha empleado en el tratamiento del pa
ludismo y la toxoplasmosis, por asociación de la pirimetamina con sulfamidas o sulfonas. La estructura del com
plejo que forma la trimetoprima con la DHFR se ha utilizado como modelo para diseñar análogos más afines. Así
se observó que un análogo con uno de los grupos metoxilo en meta sustituido por una cadena -O-(CH2)5CO;H. in
teractuaba muy bien con el resto Arg-57 de la enzima, pero sus propiedades farmacocinéticas no fueron adecuadas.
El cicloguanilo es otro fármaco antipalúdico análogo a la pirimetamina que posee una estructura de dihi-
drotriazina.
Más recientemente, otros inhibidores de la DHFR, como el trimetrexato, derivado de 2,4-diaminoquina-
zolina y el piritrexeno. han demostrado poseer una interesante actividad antiprotozoaria y antineoplásica. La
combinación de trimetrexato con otros antineoplásicos. como la adriamicina o la ciclofosfamida, ha demostrado
un importante sinergismo.
Figura 9.28. Estructura y aplicación terapéutica de algunos inhibidores de DHFR.

LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN El. DISEÑO DE FÁRMACOS (1). AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 229
El ácido tetrahidrofólico es el precursor de los ácidos folínicos (Fig. 9.26), que se requieren como cofac-
tores en la síntesis de novo de las bases púricas y pirimidínicas, por lo que resultan esenciales en la biosíntesis
de ácidos nucleicos. Como ejemplo, en la Figura 9.29, se resume la transformación del ácido desoxiuridílico en
ácido desoxitimidílico. catalizada por la enzima timidilato sintasa. Obsérvese que la enzima se enlaza a la posi
ción C-6 del sustrato (que está conjugada con el carbonilo C(4)=O) a través de un resto de cisteína como nu-
cleófilo. El anión enolato así originado actúa ahora como nucleófilo sobre el grupo metileno de la porción
N(5)=CH3 del cofactor. La posterior eliminación de un protón en la posición C(5) del uracilo origina el 5-me-
tiliden derivado y ácido tetrahidrofólico (ATHF). Un proceso redox posterior, en el que el ATHF se oxida a áci
do dihidrofólico (ADHF) y el metiliden derivado anterior se reduce a timina. completan el proceso. Por ello, es
necesario que el ADHF sea, de nuevo, reducido por la dihidrofolato reductasa a ATHF.
Figura 9.29. Conversión del ácido 2'-desoxiuridílico en ácido timidílico catalizada

por la enzima timidilato sintasa (HS-TS).
Entre los inhibidores de la timidilato sintasa, tenemos el 5-fluorouracilo (5-FU), un profármaco que,
tras su bioactivación al correspondiente desoxinucleótido, forma un complejo irreversibe con ella y el cofactor
(Fig. 9.30). Como en este caso el enlace C-F no puede evolucionar, por pérdida de una hipotética especie F*. la
enzima queda inhibida irreversiblemente.
Figura 9.30. Inactivación de la enzima limidilato sintasa (HS-TS) producida

por el desoxinucleótido de 5-fluorouracilo (FdUMP).
Este mecanismo se ha confirmado determinando las estructuras de TS de varias fuentes, con o sin inhibi
dor y/o cofactor, por rayos X.
En la enzima nativa, es el residuo Cys-198, activado como nucleófilo por un enlace de hidrógeno con el
residuo Arg-218. el que reacciona con la posición C-6 del FdUMP. Debido a la electronegatividad del flúor y a
que la unión covalente del grupo -SH de la enzima al sustrato es un ataque nucleófilo al sistema O=C4-C5=C<’
del anillo de pirimidina, el 5-FdUMP presenta una afinidad por la enzima varios miles de veces mayor que el
sustrato normal, el ácido 2'-desoxiuridílico.
El resultado de esta inhibición es la denominada «muerte atimínica». Las células no pueden sintetizar ti-
mina, que es una de las cuatro bases que constituyen el ADN, por lo que pueden ser útiles como antitumorales.
Además, el 5-FdUMP se incorpora a los ácidos nucleicos como falso nucleótido, lo que afecta al proceso de
apareamiento de las bases. La alteración del ARN así originado, sobre todo del mensajero, inhibe la síntesis pro
teica.
El 5-FU se combina frecuentemente con otros fármacos antitumorales, como la ciclofosfamida y la 4'-epi-
rrubicina. que se verán en el Capítulo 18. También se administra conjuntamente leucovorina (5-formil-THF),
que rápidamente se convierte in vivo en 5,10-metilen-THF. El exceso de cofactor así producido favorece la for
mación del complejo temario con 5-FdUMP y aumenta su efecto citotóxico.
5.2. Inhibidores de la biosíntesis de pirimidinas y purinas
En los mamíferos, los ácidos nucleicos se forman a partir de nucleótidos que proceden de una base púrica o
pirimidínica, un azúcar (ribosa en el ARN y 2-desoxirribosa en el ADN) y un grupo fosfato unido a la posi
ción 5' del azúcar.
En la Figura 9.31, se representa un diagrama esquemático de las transformaciones de los nucleótidos en
sus trifosfatos y posteriormente en ARN o ADN.
Los monofosfatos de los ribonucleósidos principales deben transformarse en nucleósido difosfatos pa
ra que, por la catálisis de la ribonucleótido reductasa, se reduzcan a los 2'-desoxiderivados. Ambos tipos de
nucleósido trifosfatos se condensan para formar ácidos nucleicos.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁT1CA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QU1MIOTERÁPICOS 231
Ribonucleótido
Muchos inhibidores
Figura 9.31. Transformaciones de los nucleótidos. Biosíntesis de ARN y ADN.
A su vez. los nucleótidos pueden biosintetizarse de novo, a partir de fragmentos estructuralmente peque
ños, o pueden obtenerse por interconversión de unas bases heterocíclicas en otras, tal como hemos visto ante
riormente para el ácido timidílico. En la Figura 9.20, se ha representado la biosíntesis del ácido uridílico a partir
del ácido dihidroorótico, con indicación de los lugares en los que producen inhibición algunos quimioterápicos
antitumorales. El ácido dcsoxiuridílico es precursor del ácido timidílico (véase Fig. 9.29). Por otra parte, previa
transformación de la uridina-5'-monofosfato en uridina-5'-trifosfato. por acción de la glutamina en los mamífe
ros y el catión NH/ en microorganismos, el ácido uridílico origina el trifosfato de citidina (Fig. 9.32).
Trifosfato de uridina Trifosfato de citidina
Figura 9.32. Biosíntesis del trifosfato de citidina.
En lo que respecta a las purinas, su biosíntesis de novo puede representarse en dos fases. En la pri
mera, que se indica en la Figura 9.33, se construye el ribonucleótido de 5-aminoimidazol. La ribosa-5-fosfa-
to se transforma en 5-fosforribosil-l-pirofosfato (PRPP), por la acción de la ribosafosfato pirofosfocinasa (o
5-fosforribosil-l-pirofosfatosintetasa). El paso 1, en el que se origina la 5-fosforribosilamina a partir de
PRPP y glutamina por la acción de la fosforribosilamina sintetasa, es el más comprometido, y se inhibe por
la 6-mercaptopurina y la 6-tioguanina, que pueden usarse como fármacos antineoplásicos. En el paso 2. se
une la glicina para formar el ribonucleótido de glicinamida. En el paso 3, se produce la formilación cataliza
da por una transformilasa que tiene como cofactor al ácido W5. N'" -metilentetrahidrofólico y, por tanto, pue
de inhibirse por un antifolato como el metotrexato. El grupo amida del ribonucleótido de a-W-formilglicina-
mida así formado se transforma en amidina en el paso 4, con el concurso de la glutamina y la catálisis de la
fosforribosilformilglicinamida sintetasa. La deshidratación posterior (paso 5). origina el ribonucleótido de
5-aminoimidazol.
OH O
Fosforribosilpirofosfato
amino sintetasa
PRPP
(fosforribosilpirofosfato)
0
Transformilasa
Tetrahidrofólico N5, /V,0-Mctilen-

tetrahidrofólico
Ribonucleótido de a-N-Formilglicmamida Ribonucleótido de
g lie inamida
Ribonucleótido de a-/V-Formilglicinamidina Ribonucleótido de 5-aminoimidazol
Figura 9.33. Biosíntesis de novo del ribonucleótido de 5-aminoimidazol.
La formación del ciclo de pirimidina (Fig. 9.34) se realiza a través de una reacción de carboxilación (6).
seguida de la adición de aspartato (7), la separación de fumarato (8) y la formilación por la acción de una trans
formilasa, que tiene como cofactor el ácido /V'°-formiltetrahidrofólico (9) (inhibida por tanto por metotrexato) y,
finalmente, la deshidratación (10). Este complejo proceso conduce al ácido inosínico, que es precursor de los
ácidos adenílico y guanílico.
Ribonucleótido de 5-aminoimidazol
OH OH
Ácido inosínico
Figura 9.34. Biosíntesis del ácido inosínico a partir del ribonucleótido de 5-aminoimidazol.
De todo lo expuesto anteriormente, puede deducirse que muchos análogos de pirimidinas y purinas pue
den ser agentes que interfieran enzimas relacionadas con la biosíntesis de éstas, y, por tanto, de los ácidos nu
cleicos, resultando de interés en el diseño de quimioterápicos.
La búsqueda de análogos de pirimidina como antineoplásicos surgió a partir de que en 1954 se observa
ra una mayor incorporación de uracilo a las células anormales de hepatoma de rata. De los varios isósteros de
uracilo estudiados a partir de 1957. el 5-fluorouracilo (5-FU) y su 2'-desoxirribonucleósido (5-FUdR o fioxu-
ridina) resultaron ser muy selectivos en el tratamiento del cáncer de piel, y paliativos en el de varios tumores
sólidos. El primero, debe activarse in vivo a 5-fluorouridina monofosfato (5-FUMP), después a difosfato (5-
FUDP); a continuación, la reducción de éste a 5-FdUDP y la hidrólisis a 5-FdUMP (ácido 5-fluorodesoxiuridí-
lico). El segundo, también ha de transformarse en 5-FdUMP. En la Figura 9.30 se ha reflejado el mecanismo
por el que el 5-FdUMP inhibe la enzima timidilato sintasa. Otros análogos de 5-FU, como la trifluridina, dise
ñados como inhibidores de dicha enzima, se muestran en la Figura 9.35 (la mayor parte en forma de desoxirri-
bonucleótidos).
dRP
5-Ftuoro-lW-
Trifluridina
4-pírimidinona
monofosfato
Florafur
Figura 9.35. Anútumorales inhibidores de la timidilato sintasa análogos al ácido 5-fluoro-2'-desoxiuridílico.
Los fármacos anteriormente citados son, en su mayor parte, inhibidores «suicidas» o basados en el meca
nismo, ya que la enzima los bioactiva previamente para formar un complejo El', que finalmente se transforma
en un derivado irreversible El" (véase el Apartado 4). La trifluridina (Fig. 9.22), en forma de 5'-monofosfato,
posee un alto índice terapéutico en algunas neoplasias. El 5-fiuoro-l-(2-tetrahidrofuril)uracilo (ftorafur o tega-
fur) es uno de los muchos profármacos de 5-FU. Otro de ellos es la 5-fluoro-l W-4-pirimidinona. que debe bio-
activarse comenzando por una oxidación en C-2.
5.3. Antitumorales, antivirales y antibacterianos inhibidores de polimerasas de ADN

y de otras enzimas que afectan al funcionamiento de los ácidos nucleicos
Las polimerasas de ADN y ARN catalizan la unión de subunidades monómeras a una nueva secuencia de ácido
nucleico complementaria del patrón de ADN que actúa como molde. Las topoisomerasas de ADN alteran la to
pología de estos ácidos, facilitando el desenrollamiento de la hélice. Las helicasas de ADN desenrollan la doble
hélice y preparan al molde para su copia. Las metil transferasas de ADN modifican las bases de los nucleótidos.
Las enzimas de reparación de ADN eliminan los nucleótidos dañados por mutágenos y carcinógenos, y restau
ran la secuencia natural. Otros tipos de enzimas son las recombinasas de ADN, las endonucleasas y exonuclea-
sas, las enzimas de restricción, ele. Todas ellas ejercen funciones fundamentales en el mantenimiento y la pro
pagación de las diferentes formas de vida, por lo que su inhibición es un objetivo terapéutico. Si los inhibidores
no son selectivos, producirán toxicidad en el hospedador. Un ejemplo de gran éxito y actualidad lo constituyen
las quinolonas antibacterianas, que inhiben intensamente la topoisomerasa II bacteriana (girasa de ADN), sien
do inhibidores muy débiles de la humana (véase más adelante). Mucho más difícil es encontrar esta selectividad
en agentes antitumorales: cuando ésta se observa, se debe probablemente a que la mayor proliferación de las cé
lulas tumorales requiere una gran actividad enzimática.
Muchos quimioterápicos que se utilizan como antitumorales o antivirales son derivados de estructuras
análogas a las bases pirimidínicas o púricas presentes en los ácidos nucleicos que inhiben polimerasas de
ADN u otras enzimas que afectan al normal funcionamiento de éstos. Las polimerasas son enzimas que cata
lizan el ataque nucleófilo de un grupo 3'-OH de un resto de desoxirribosa del polímero en crecimiento al
grupo trifosfato en la posición 5'-0 de un desoxinucleótido, el cual se incorpora de acuerdo con el aparea
miento que señala el molde de ADN. con salida de anión pirofosfato. Con frecuencia, sus inhibidores, como
es el caso del 5-FU. se incorporan a estructuras poliméricas de ácidos nucleicos fraudulentos, ya que poseen
una o varias unidades diferenciadas de las bases normales. También pueden actuar como terminadores de ca
dena.
Entre los análogos de las purinas. se han introducido en quimioterapia la 6-mercaptopurina. la 6-tio-
guanina y la azatioprina (Fig. 9.36). Los dos primeros fármacos se han utilizado como antineoplásicos y el
tercero como inmunosupresor (véase el Capítulo 17). La 6-mercaptopurina se transforma in vivo en su ribo-
nucleótido. el ácido tioinosínico. que inhibe varias secuencias enzimáticas relacionadas con la biosintesis de
nucleótidos de purina. El ácido tioinosínico se degrada, por desfosforilación seguida de pérdida de azúcar,
para regenerar 6-mercaptopurina, que se oxida a ácido 6-tioúrico. Para evitar esta degradación metabólica,
se asocia con frecuencia al alopurinol. La 8-azaguanina fue el primer representante de las azapurinas anti-
neoplásicas, y se conoce desde 1949. Se activa in vivo a 8-azaguanosina-5'-monofosfato y luego a di- y tri
fosfato. Su principal efecto es la incorporación a ARN como ácido 8-azaguanílico, inhibiendo la síntesis
proteica.
S S
6-Metvaptopurinu 6-Tioguanina
Figura 9.36. Antitumorales análogos de las purinas.
Además de los análogos de bases púricas y pirimidínicas anteriormente citados, se han desarrollado fár
macos utilizados específicamente como antivirales. Entre ellos, se encuentran los 2'-desoxinucleósidos de piri-
midinas, como la idoxuridina (5-iodo-2'-desoxiuridina, Fig. 9.37), que. al transformarse en mono-, di-, y final
mente trifosfato, compite con la timidina y sus fosfatos por las enzimas fosforilantes timidina y timidilato
cinasas (pasos 1-3), impidiendo así la utilización de timidina. Sin embargo, su acción antiviral se debe funda
mentalmente a su incorporación al ADN viral, en lugar de la timidina. El radio de van der Waals del iodo es al
go mayor que el del grupo metilo de la tintina y, debido al efecto inductivo de aquél, el pKa del 5-iodouracilo es
1,5 veces menor que el de la tintina. Se utiliza en infecciones víricas oculares, como la queratitis herpética. y en
el tratamiento del herpes zóster, por aplicación a las lesiones de una disolución en dimctilsulfóxido. Su toxici
dad impide su uso a nivel general.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICACOMO OBJETIVO EN El. DISEÑO DE l-ARMACOS (II AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 235
La semejanza entre la timina y el 5-iodouracilo se refleja también en la transformación de la idoxuridi-

na en 5-iodouracilo, por la acción de la enzima timidina fosforilasa (4), y en la desiodación del ácido 5'-iodo-
2'-desoxiuridílico catalizada por la timidilato sintasa. En esta última transformación, se elimina anión iodu-
ro.
Figura 9.37. Transformaciones metabólicas de la idoxuridina.
La 5-iodo-5'-amino-2',5'-didesoxiuridina actúa de forma semejante a la idoxuridina y es menos tóxica

(Fig. 9.38).
Cuando el iodo se sustituye por otros grupos X atrayentes de electrones que forman enlaces C(5)-X esta
bles. se inhibe la timidilato sintasa sin que puedan actuar como sustratos. Este es el caso de los fármacos ya
mencionados (Fig. 9.35) 5-fluoro-2'-desoxiuridina, 5-nitro-2'-desoxiuridina y 5-trifluorometil-2'-desoxiuridina
(F,dThd. TFT, trifluridina). La fosforilación de esta última a mono-, di- y trifosfato es más eficaz en las células
infectadas por el virus. Por ello, el 5-FU sólo se utiliza en la quimioterapia antitumoral y la trifluridina en el tra
tamiento tópico de la queratitis herpética; la 5-nitro-2'-desoxiuridina no se usa.
Desde que se descubrió la idoxuridina. el desarrollo de la quimioterapia antiviral ha sido lento, debido a la
localización intracelular de los virus, a que poseen menos enzimas específicas que las bacterias, a la íntima aso
ciación entre el ciclo de replicación del virus y el metabolismo de la célula, y al desarrollo en ciertos casos de
vacunas eficaces. La aparición del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) supuso un enorme impulso
para la quimioterapia antiviral.
En la mayor parte de los antivirales que poseen una estructura de nucleósido, se ha modificado la base o
cl azúcar. Rara vez ha dado buenos resultados la conjunción de ambas modificaciones. La l-(2'-desoxi-2'-fluo-
ro-P-D-arabinofuranosil)-5-iodocitosina FIAC (Fig. 9.38) es una excepción, ya que es activa frente a varios ti
pos de virus, al igual que los 2'-desoxi-2'-fiuoro-P-D-arabinofuranosil derivados de uracilo. timina y 5-etiluraci-
lo. Su mecanismo de acción es similar al de la BVdU, inhibiendo la polimerasa de ADN. Se sabe que se meta-
boliza por desiodación y desaminación.
Las muertes producidas en algunos pacientes afectados de hepatitis B tratados con FIAC ha situado con
flictivamente a estos nucleósidos.
También presenta una gran semejanza con la timidina la 3'-azido-3'-azidotimidina (AZT o zidovudina) un
inhibidor de la enzima transcriptasa inversa (TI) que significó el primer paso en la quimioterapia frente al retro-
virus del SIDA VIH-1 (véase el apartado siguiente); es unas 100-300 veces menos activo como inhibidor de po
limerasa de ADN de mamíferos. Aquí, el hidroxilo de la posición 3' se ha sustituido por un grupo azido, y su
bioactivación requiere la transformación a trifosfato.
OH OH N, OH
FIAC BVDU AZT 5-Iodo-5'.amino-
<|3-D-2'-desoxi-2'-fluoro- (£-5-(2-bromovmi!)- (zidovudina. retrovir) 2'.5'-didesoxiuridina
arabinofuranosil-S-iodociloMnii) |3-D-2'-dcsoxirribofuranosil- 3'-Azido-3’-desoxi-
2-amino-4-oxo. 1.4-dihidropirimidina| limidina
Figura 9.38. Estructura de algunos nucleósidos de pirimidina usados como antivirales.
La enzima timidina cinasa es crucial en el anabolismo de los 2'-desoxinucleósidos de pirimidina, ya que

cataliza su conversión a 5'-monofosfatos. Algunos virus herpes (VHS-1 y VHS-2) y varicela-herpes zóster
(VZV) codifican sus propias timidina cinasas, habiéndose observado que la introducción de un sustituyeme en
C-5 produce mayor selectividad por ellas y la posibilidad de obtener fármacos antivirales menos tóxicos.
Son ejemplos la 5-etil-2'-desoxiuridina (EtdUrd) y, sobre todo, la 5-(E)-bromovinil-2'-desoxiuridina (BV-
dllrd). que es superior a otros agentes en el tratamiento tópico de infecciones oculares por VHS-I y más activo
que el aciclovir en la varicela. Sólo en las células infectadas por virus se produce la bioactivación de estos pro
fármacos y su incorporación al ADN.
Entre los análogos de bases púricas inhibidores de polimerasas de ADN que han encontrado utilidad
como antivirales, citaremos el aciclovir, cuya actividad se descubrió por accidente, buscando inhibidores de
adenosina desaminasa (Fig. 9.39).
En esta estructura, el azúcar se ha sustituido por una cadena acíclica. Como ocurre en todo el grupo, es un
profármaco que requiere ser previamente bioactivado por cinasas al estado de trifosfato. La fosforilación del
grupo alcohol está catalizada, en este caso, de forma selectiva por una timidina/desoxicitidina cinasa viral, que
lo reconoce como un análogo de desoxicitidina (esta enzima, aunque tiene como sustratos nucleósidos de piri
midina, acepta también nucleósidos de purinas). Esto quiere decir que la bioactivación se produce selectivamen
te en el virus, por lo que su toxicidad para el hospedador es baja.
Las infecciones causadas por virus que codifican esta enzima pueden ser tratadas con este fármaco, pero
no otras causadas por citomegalovirus que no la codifican. Se utiliza, por vía oral o intravenosa y tópicamente
en la queratitis herpética y en el herpes labial.
El aciclovir ha dado lugar a numerosos análogos como el ganciclovir (9-[2-hidroxi-l-(hidroximetil) eto-
ximetil] guanina] cuyo uso está restringido a las infecciones causadas por citomegalovirus en pacientes inmuno-
deprimidos. y el penciclovir [9-(4-hidroxi-3-hidroximetilbutil)guanina]. que posee un espectro de acción seme
jante al aciclovir.
Otros análogos en los que la posición N-9 de la purina se une a la cadena acíclica a través de un átomo de
oxígeno, en vez de carbono, son todavía más activos.
HO
Ganciclovir Penciclovir
Aciclovir
tzuvirax)
Figura 939. Aciclovir y análogos.
El cidofovir [(S)-l-(3-hidroxi-2-fosfonilmetoxipropil)citosina, (HPMPC), Fig. 9.40] y cl PMEA [9-(2-

fosfonilmetoxietil)adenina| son derivados de citosina y adenina en los que se ha introducido un grupo fosfónico
en la cadena hidroxialquílica. Han demostrado ser potentes inhibidores de los virus VHS-1 y VIH.
Figura 9.40. Cidofovir y PMEA.
Entre otros nucleósidos en los que se ha modificado el azúcar, se encuentra la vidarabina [ara-A, 9-(P-d-
arabinofuranosil)adenina. Fig. 9.41], un antiviral que posee un mecanismo de acción múltiple. Se fosforita pri
mero a monofosfato y después a di- y trifosfato, el cual inhibe polimerasas de ADN. lo que explica su acción
frente a virus ADN. También puede incorporarse al ADN de la célula hospedadora y al del virus. Se ha utilizado
en el tratamiento de la encefalitis producida por VHS-I y en el herpes zóster de pacientes inmunodeprimidos.
pero se ha sustituido por el aciclovir. Su principal inconveniente radica en su inactivación por desaminación, pa
ra dar 9-(p-D-arabinofuranosil)hipoxantina. mucho menos activa. Para evitarla, puede administrarse con inhibi
dores de adenosinadesaminasa, como la pentostatina, un inhibidor análogo del estado de transición que se co
mentó anteriormente.
R = OH. Ara-C o citaravina 2.2'-Anhidro-1-D-

(vidarabina) R = N , | Análogos resistentes arabinofuranosilcito-
R = NH2( a citidina desaminasa sina
Figura 9.41. Ara-A. Ara-C y análogos.

La l-P-D-arabinofuranosilcitosina, denominada citarabina o ara-C, se utiliza en leucemias agudas o como

antiviral. Es el epímero en C-2' de citosina (posee un resto de o-arabinosa en vez de t>-ribosa), e interfiere la sín
tesis de ADN previa transformación a monofosfato y después a trifosfato (ara-CTP), el cual, por analogía con la
desoxicitidinatrifosfato. inhibe competitivamente las polimerasas de ADN, incorporándose a las cadenas de
ADN y ARN e interrumpiendo su elongación. Su mayor inconveniente es su fácil desaminación a 1-p-D-arabi-
nofuranosiluracilo (ara-U), que es inactivo. Para evitarla, se administra con inhibidores de citidina desaminasa.
como la tetrahidrouridina. un inhibidor análogo del estado de transición que ya se ha mencionado (véase la
Fig. 9.18). También se han estudiado análogos y profármacos resistentes a la desaminasa, como sucede con la
2,2'-anhidro-l-p-D-arabinofuranosilcitosina que, dada su estructura de iminoéter, se hidroliza lentamente libe
rando ara-C.
Existen también productos naturales o de síntesis con estructura de N- o C-nucleósidos de azoles, en los
que la purina se ha simplificado a un anillo de pirazol o de triazol, que mantienen la semejanza estructural con
las bases púricas. Es el caso de la ribavirina o virazol (l-p-t>-ribofuranosil-l,2,4-triazol-3-carboxamida,
Fig. 9.42), que posee un amplio espectro de actividad frente a virus ARN y ADN. Es muy potente frente a virus
de la hepatitis A, de la gripe, del sarampión y de algunos herpes cutáneos. También se utiliza, junto con interfe-
rón, en la hepatitis C. Dada su semejanza estructural con los nucleósidos de las bases púricas se fosforila por ci-
nasas hasta el trifosfato, el cual inhibe la polimerasa ARN (por ejemplo, en el virus de la gripe), así como la for
mación de varios metabolites importantes. Otro ejemplo es la pirazofurina. que es muy potente in vitro como
inhibidor de varios tipos de virus.
Figura 9.42. N y C-Nucleósidos de azoles antivirales.
En contraposición a los nucleósidos, los análogos carbocíclicos en los que el oxígeno furánico del azúcar se
ha sustituido por un grupo metileno, no se desactivan por nucleósido fosforilasas (véase la Fig. 9.37). Entre ellos,
se encuentran la carbodina (el análogo carbocíclico de la citidina, Fig. 9.43) y la ciclaradina (el análogo carbocí-
clico de ara-A). El derivado 5-metoxiacetilado de ciclaradina es más eficaz que el aciclovir en el tratamiento de in
fecciones genitales causadas por VHS-2. La neplanocina A. un carbonuclcósido natural, y su 3-desaza análogo sin
tético, son antivirales que actúan inhibiendo la enzima S-adenosilhomocisteína hidrolasa (SAH). Esta enzima es
clave en las reacciones de transmetilación que utilizan la 5-adenosilmetionina como donador de grupos metilo
(véase el Capítulo 7). Por ello, no necesitan ser fosforilados para ejercer su actividad antiviral.
Figura 9.43. Nucleósidos carbocíclicos antivirales.

LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICACOMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QUIMIOTERÁP1COS 239
También se han estudiado nucleósidos cuyo fragmento azucarado posee la configuración L (no natural), y
que pueden considerarse, por tanto, enantiómeros de los nucleósidos naturales. Aunque se creía que estas es
tructuras no serían reconocidas por las correspondientes enzimas, esto no parece ser cierto. Así, el L-isómero de
la 2'.3'-didesoxicitidina (Fig. 9.44), aunque es menos activo que el isómero D frente al virus VIH, es menos tó
xico. Lo mismo ocurre con la L-3'-tia-2',3'-didesoxicitidina (3TC. lamivudina) y con sus 5-fluoroderivados. Se
cree que la menor toxicidad de estos análogos se debe al hecho de que no son transportados a las mitocondrias
y. por tanto, no inhiben la síntesis del ADN mitocondrial.
X = H, L-2'..V-dide.soxicitidina X = H, i.-3'-tia-2',3'-didesoxicitidina
X = F. análogo fluorado X = F, análogo fluorado
Figura 9.44. Nucleósidos con la configuración no natural L que presentan acción antiviral.
En la Figura 9.45, se esquematiza el proceso por el que se han realizado las modificaciones estructurales
que afectan a la base, al azúcar, o a ambos, y que han sido útiles en el diseño de fármacos antivirales que actúan
por procesos de inhibición enzimática.
1) Introducción o modificación
de sustituyentes (5-FU, ¡doxuridina.
Reemplazamicnto trifluridina. BVDU. etc.)
de O por C 2) Reemplazamiento de la base púrica
o pirimidínica por otro ciclo (ribavirina.
pirazofurina. etc.)
Modificaciones
de la cadena Nucleósidos de la serie L (no natural)
__ í I) Sustitución (FIAC)
J 2) Epimerización (Ara-A. Ara C)
Sustitución (AZT)
Apertura del anillo
(aciclovir, ganciclovir)
Figura 9.45. Diseño de antivirales por modificación de la estructura de nucleósidos.
Además de las polimerasas de ADN implicadas en su biosíntesis, la expresión de la información del ADN
por transcripción a ácidos ribonucleicos mensajeros y por replicación, requiere otras enzimas y, en algunos casos,
ATP como cofactor. Entre ellas, las topoisomerasas alteran su topología facilitando el desenrollamiento de la héli
ce. Su inhibición es muy importante en la quimioterapia antitumoral, como ocurre con el grupo de las antraciclinas
adriamicina y doxorrubicina. m-AMSA, epipodofilotoxinas. elipticina, actinomicina. etc. En la mayor parte de los
casos, estos inhibidores se intercalan previamente entre los pares de bases de ADN, por lo que se estudiarán poste
riormente en el Capítulo 18, que está dedicado a los fármacos cuya diana farmacológica es el ADN.
Las denominadas quinolonas antibacterianas inhiben selectivamente la topoisomcrasa II bacteriana (de
nominada también girasa de ADN). Por ello, se han introducido con éxito en el tratamiento de neumonías e in-
fecciones del aparato urinario (debido a su farmacocinética) causadas por microorganismos Gram-negativos. La
aparición de resistencias ha estimulado una intensa modificación estructural. La estructura común a este grupo
consiste en un ácido 1-alquil-l-oxo-l,4-dihidropiridina-3-carboxílico, condensado con un anillo aromático, que
suele poseer sustituyentes flúor o piperazinilo. En la Figura 9.46. se indican algunos representantes. Su activi
dad antibacteriana rivaliza con la de antibióticos importantes, y su uso se extiende al tratamiento de infecciones
causadas por enterobacterias y estafilococos resistentes.
Norfloxacino
o o
S(-)-Levofloxacino CH3 Lometloxacino
Figura 9.46. Quinolonas antibacterianas inhibidoras de topoisomeras II (girasa de ADN).
5.4. Inhibidores de la ribonucleótido reductasa
La enzima ribonucleótido reductasa (RNR, véase la Fig. 9.31) es una enzima formada por dos proteínas (R1 y
R2) que resulta esencial, ya que cataliza la conversión de los cuatro ribonucleótidos naturales en los correspon
dientes desoxirribonucleótidos. y éste es el paso limitante en la síntesis del ADN. El único inhibidor que se uti
liza hasta el momento en el tratamiento antineoplásico es la hidroxiurea (Fig. 9.42), que actúa destruyendo el ra
dical de tirosina de la proteína R2 que interactúa con el hierro. Además de la hidroxiurea, hay otros muchos
inhibidores en estudio, diseñados para actuar por este mecanismo. Algunos virus codifican su propia enzima,
por lo que las diferencias pueden usarse en el diseño de inhibidores como fármacos antivirales. Se conocen es
tructuras de tipo peptidomimético que interfieren la interfase entre las subunidades Rl y R2 de estas enzimas vi
rales.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁT1CACOMO OBJETIVO EN El- DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QUIM1OTERÁPICOS 241
O
JJ
H2N NHOH
Figura 9.47. Hidroxiurea, antitumoral inhibidor de la enzima nucleótido reductasa.
5.5. Inhibidores enzimáticos utilizados en el tratamiento contra el SIDA
Desde que, en los primeros años ochenta, se identificara el virus responsable de esta pandemia, se han produci
do progresos notables en su tratamiento. Las dianas de estos fármacos son las enzimas del virus que son impres
cindibles en su ciclo vital. El virus VIH es un retrovirus y, por tanto, cuando la célula se infecta, su ARN se
transcribe al ADN proviral por una enzima específica del virus: la transcriptasa inversa (TI). Esta enzima es una
polimerasa de ADN dependiente de ARN, que utiliza ARN en lugar de ADN como molde para codificar la in
corporación de desoxinucleótidos a la cadena de ADN en crecimiento del virus. Desgraciadamente, el VIH no
codifica una cinasa específica que pueda activar selectivamente a los análogos de nucleósidos en las células in
fectadas.
Se han desarrollado dos clases de inhibidores de dicha enzima. Los más conocidos son los 2',3'-didesoxi-
nucleósidos, que requieren ser bioactivados a sus correspondientes 5'-trifosfatos y actúan como inhibidores
competitivos de los sustratos naturales o como terminadores de cadenas de ADN, ya que carecen del grupo 3'-
hidroxi necesario para el enlace de otro nucleótido a través de un grupo 3',5'-fosfato. Entre ellos se encuentran
la AZT (3'-azidotimidina o zidovudina), ya mencionada, la DDC (2',3'-didesoxicitidina o zalcitabina), la DD1
(2',3'-didesoxiinosina o didanosina), la D4T (2',3'-dideshidro-2',3'-didesoxitimidina o estavudina), la 3TC (3-
tia-didesoxicitidina o lamivudina) y el abacavir (ABC). Todos ellos (Fig. 9.48) están aprobados para el trata
miento de la enfermedad.
Figura 9.48. 2',3'-Didesoxinucleósidos inhibidores de TI utilizados como agentes contra el SIDA.
El otro tipo de inhibidores se denominan no-nucleósidos y algunos, como la nevirapina, la delavirdina y

el efavirenz (Fig. 9.49), se utilizan en tratamientos de combinación junto con los nucleósidos anteriormente ci
tados y los inhibidores de proteasa VIH. La estructura de los inhibidores de transcriptasa inversa no nucleósidos
es diversa, pero todos se unen a una región hidrófoba de la enzima distinta de su lugar catalítico.
Ncvirapina
Figura 9.49. Inhibidores no competitivos de transcriptasa inversa.
Este virus requiere, además, la ruptura proteolítica de unas proteínas precursoras (Pr55 y PrlóO) para
dar proteínas virales fundamentales. Esta hidrólisis está catalizada por la enzima viral denominada proteasa
VIH-1.
En el tratamiento contra el SIDA, se han incorporado en los últimos años inhibidores de esta enzima,
una proteinasa de aspártico cuya estructura de rayos X se conoce, que produce unas roturas específicas en
ciertas proteínas virales para originar partículas virales con capacidad infecciosa.
La proteasa V1H-I es una proteasa de aspártico dímera que actúa activando una molécula de agua des
de los dos residuos de ácido aspártico al lugar de ruptura del sustrato, creando inicialmente un intermedio te-
traédrico (Fig. 9.50).
Inhibidor que mimetiza

el estado de transición
y no puede romperse
Figura 9.50. Mecanismo propuesto para la ruptura de enlaces peptídicos por proteasas de aspártico.
Muchos inhibidores de proteasas se han desarrollado incorporando una subestructura que mimetiza la
porción Pi-Pi’, que corresponde al enlace peptídico del sustrato que experimenta la hidrólisis, frecuentemente
un enlace Tyr(Phe)-Pro, pero que no sea hidrolizable (véase el Capítulo 3). Algunas estructuras que mimetizan
el estado de transición citado se representan en la Figura 9.51.
LA INHIBICIÓN ENZ1MÁT1CA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I). AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 243
Intermedio tetraédrico
p, p;
Tipo estatina Hidroxicti lamina Hidroxietileno
Dihidroxictilcno Fosfinato Amida reducida
Figura 9.51. Ejemplos de mimélicos del estado de transición.
En la Figura 9.52 puede observarse cómo estos inhibidores (tipo hidroxietileno en el ejemplo) interactúan
con la enzima a través de la formación de enlaces de hidrógeno.
Figura 9.52. Interacción de un inhibidor de tipo hidroxietileno con una proteasa de aspártico.
Un fármaco contra el SIDA inhibidor de la proteasa Hl V-1 no debe inhibir apreciablemente otras aspartil-
proteasas humanas importantes, como la renina, ya que aparecerán importantes efectos secundarios (en el Capí
tulo 11, se expondrá la utilidad terapéutica de los inhibidores de la renina).
Existen varios inhibidores aprobados por la FDA en EEUU, y también en Europa, que son peptidomimé-
ticos o pseudopéptidos análogos del estado de transición de tipo hidroxietilamina e hidroxietileno (Fig. 9.53): el
mesilato de saquinavir, el ritonavir, el sulfato de indinavir y el mesilato de nelfinavir, estando otros en la etapa
de desarrollo clínico.
Nclfinavir
Figura 9.53. Inhibidores de la proteasa VIH-1 utilizados en el tratamiento contra el SIDA.
5.6. Inhibidores de neuraminidasa
Los virus de la gripe son porciones de ARN recubiertas de una cubierta lipídica que contiene dos proteínas, las
cuales, además de proteger el material genético, colaboran en su reproducción dentro del organismo. La neura
minidasa (acilneuraminil hidrolasa), una de las dos proteínas, se ancla a la membrana viral por su región amino
terminal hidrófoba. La segunda es una glicoproteína denominada hemaglutinina. Ambas están implicadas en la
infección de las células del hospedador. La reciente aparición en el mercado de los primeros antigripales efica
ces: el zanamivir (comercializado por Glaxo-Wellcome) y el fosfato de oseltamivir (comercializado por Gilead-
Roche), cuyo mecanismo se debe a la inhibición de la neuraminidasa, es consecuencia de una combinación de
suerte y de lógica (Fig. 9.54).
Figura 9.54. Estructura esquemática del virus de la gripe y lugar de acción de los inhibidores de neuraminidasa.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN EL DISEÑO DE FÁRMACOS (I), AGENTES QUIMIOTERÁPICOS 245
Otros antigripales, como la amantadina y la rimantadina (Fig. 9.55), cuyo mecanismo no está dilucidado
por completo (posiblemente, bloquean la descapsidación del virus tras su entrada en la célula), son mucho me
nos eficaces y causan importantes efectos secundarios neurológicos. ya que producen la liberación de dopamina
(véase el Capítulo 12).
Figura 9.55. Estructuras de amantadina y rimantadina.
Los virus de la gripe poseen una afinidad específica por las células epiteliales de las vías respiratorias,
siendo los dos tipos más importantes el tipo A, que afecta a algunos animales y a los seres humanos, y el tipo B,
que sólo infecta a los seres humanos. Ambos se diferencian en la estructura primaria de dichas proteínas. Hasta
la fecha, se han descubierto en el tipo A quince subtipos de hemaglutinina (H) y nueve de neuraminidasa (N),
por lo que estas variantes se denominan H1N1, H1N2, H2N2, etc. A su vez, aunque el tipo B es más uniforme,
la secuencia aminoacídica de ambas proteínas puede también variar ligeramente. Cuando alguien tiene gripe o
se vacuna, el sistema inmunitario produce anticuerpos que reconocen segmentos específicos de dichas proteínas
(antígenos). de forma que si la persona vuelve a exponerse al mismo subtipo, los anticuerpos se enlazan al virus
y se impide la infección. Desgraciadamente, al contrario de lo que ocurre con otros virus, como los del saram
pión o la parotiditis, los virus de la gripe cambian continuamente a través de pequeñas mutaciones genéticas que
producen cambios en ciertos aminoácidos de los antígenos. En consecuencia, éstos no son reconocidos por los
anticuerpos. Cuando se acumulan varias alteraciones genéticas, la hemaglutinina y la neuraminidasa pueden ser
irreconocibles para una población muy amplia y se inicia una epidemia. Los cambios más drásticos se producen
por la mezcla de dos subtipos dentro de una misma célula o por mutaciones que permiten la transmisión a los
seres humanos de subtipos que sólo infectaban a los animales.
El ciclo vital de todos los subtipos es muy semejante. Para que un virus entre en una célula humana, un
resto de azúcar de la hemaglutinina debe enlazarse al ácido siálico, una molécula del mismo tipo que se encuen
tra en la superficie celular. Esta unión induce la entrada del virus en una especie de burbuja y. una vez dentro, se
libera el ARN viral, que se dirige al núcleo. Allí se replica y se construyen los ARN mensajeros, que se traducen
a proteínas virales aprovechando la maquinaria celular. De nuevo, ARN y proteínas se unen, pero las partículas
virales así formadas están también recubiertas con ácido siálico, la misma sustancia que enlaza los virus a las
células que pretende invadir. Por ello, si no se elimina el ácido siálico, el resto de azúcar de la hemaglutinina se
enlaza a él a través de su hidroxilo en C-2 y dichas partículas quedan atrapadas dentro de la célula. Aquí es don
de desempeña su papel la enzima neuraminidasa (Fig. 9.56), de forma que. al catalizar la hidrólisis de este enla
ce permite la salida del virus y su transmisión.
+ Hemaglutinina-azúcar-OH
Neuraminidasa
NH-CO-CH,
Ácido siálico Hemaglutinina-azúcar
NH-CO-CHi
Figura 9.56. Mecanismo de acción de la neuraminidasa.

Cuando se comparaba la secuencia aminoacídica de dos neuraminidasas procedentes de virus que habían
producido dos importantes pandemias (la asiática de 1957 y la de Hong Kong de 1968), se produjo casualmente
la cristalización de esta enzima, lo que permitió el estudio de su estructura tridimensional. Este estudio reveló
que se trataba de una proteína tetrámera que emerge del virus sobre un eje embebido en su membrana. Cada uno
de los cuatro monómeros posee una profunda hendidura, cuya secuencia aminoacídica se encuentra muy con
servada en los distintos subtipos, indicando que éste debería ser el centro activo que acopla al ácido siálico. En
esta hendidura, se identificaron tres aminoácidos cargados positivamente, que podían estar implicados en la
unión del grupo carboxilato del ácido siálico (Fig. 9.57b). En el fondo de aquélla, se encontraban, además, dos
restos de glutamato cargados negativamente, que no contactaban con el grupo hidroxilo en C-4 del ácido siálico.
Estos hechos sugirieron que la sustitución de este grupo por otro mayor, cargado positivamente, podría originar
un inhibidor con mayor afinidad que el sustrato. Así surgió, después de muchos estudios, el zanamivir (Fi
gura 9.57a), que posee un grupo guanidina en dicha posición. Desgraciadamente, este grupo se protona e impi
de la absorción intestinal, por lo que este fármaco se administra en forma de inhalaciones bucales.
La búsqueda de un inhibidor que pudiera ser administrado por vía oral condujo al fármaco GS 4071. tan
potente como el zanamivir. Éste posee el mismo grupo carboxilato para enlazarse con los tres aminoácidos del
centro activo cargados positivamente, y su cadena hidrocarbonada se enlaza a un bolsillo hidrófobo que se ori
gina a través de un cambio conformacional como consecuencia de la interacción El. Los estudios in vivo de
mostraron que el grupo carboxilato cargado impedía la absorción intestinal, por lo que se desarrolló como pro-
fármaco el fosfato de su éster etílico (denominado GS4104 y, posteriormente, oseltamivir), que se bioactiva, por
la acción de esterasas hepáticas, a oseltamivir carboxilato.
LA INHIBICIÓN ENZIMÁTICA COMO OBJETIVO EN El- DISEÑO DE FÁRMACOS (II. AGENTES Ql'IMIOTERÁPICOS 247
5.7. Inhibidores de enzimas de transcripción
En la transcripción, secuencias especificas de ADN se transcriben selectivamente por la acción de polimera-

sas de ARN dependientes de ADN, para producir ARN mensajeros, ribosómicos o de transferencia. Las poli-
merasas de ARN insertan el nucleótido correcto en el grupo 3'-OH del nucleótido terminal de la cadena de
ácido ribonucleico en crecimiento. Su inhibición supone un primer paso en el bloqueo de la biosíntesis de las
proteínas.
De los muchos compuestos que se han descrito como inhibidores, la mayor parte se enlazan al ADN,
por lo que no tienen especificidad de acción, debido a que la estructura del ADN es similar en todos los orga
nismos vivos. Por ello, no se usan como antiinfecciosos, sino como antitumorales, y se estudiarán en el Capí
tulo 18. Si interactúan con las enzimas, son selectivos, debido a las grandes diferencias que existen en su
composición.
Algunos antibacterianos actúan por este mecanismo. Al inhibirse la ARN polimerasa, y por tanto la sínte
sis de ARN bacteriano, la síntesis de proteínas se ralentiza hasta que se anula, cuando se han degradado los
ARNm existentes. Entre ellos, las rifamicinas. que son metabolitos secundarios de Nocardia mediterránea y pe-
tenecen al grupo de las ansamicinas (estructuras formadas por un sistema aromático al que se une un «asa» for
mada por una cadena alifática), tienen un interés considerable (en la Fig. 9.58, se ha enmarcado el anillo aromá
tico que se ha modificado por semisíntesis). A partir de la rifamicina B, se han obtenido cientos de derivados,
algunos de los cuales, como la rifampicina o la rifamicina SV, se utilizan en el tratamiento de bacterias Gram-
positivas y micobacterias. como las de la tuberculosis o la lepra.
Rifamicina B
(se ha recuadrado el anillo
bcncénico que se manipula
generalmente en las rifamicinas
semisintéticas)
Figura 9.58. Inhibidores de la ARN polimerasa bacteriana. Rifamicinas.
El anillo plano de naftaleno y varios grupos hidroxilo son esenciales. Aunque las células de mamífero
contienen ARN polimerasa, estos antibióticos son selectivos de la enzima bacteriana, que contiene una cadena
peptídica de la que carece la enzima de los mamíferos. Como se verá en el Capítulo 19, la subestructura de 1.4-
bencenodiol presente en la rifamicina SV o en la rifampicina es capaz de generar radicales hidroxilo. lo que
puede contribuir a su efecto biológico.
El enlace de la rifampicina a la subunidad p de la ARN polimerasa de E. cali se ha estudiado en pro
fundidad, y la evaluación de la actividad antibacteriana de un elevado número de análogos ha hecho posible
disponer de una información muy precisa acerca de los requisitos estructurales para que se produzca la inhi
bición.
5.8. Inhibidores de citocromos P-450 útiles como antifúngicos
Las membranas celulares están compuestas, en su mayor parte, por proteínas, fosfblípidos y esteróles. Los fos-
folípidos y los esteróles desempeñan un papel fundamental en su estructura y permeabilidad. Dentro de los este
róles. el colesterol es fundamental en las membranas celulares de los mamíferos, y el ergosterol en las de hon
gos y levaduras.
Los hongos que nos rodean pueden proliferar en la piel, en las mucosas, e incluso producir infecciones
sistémicas muy peligrosas que son cada vez más frecuentes en pacientes inmunodeprimidos. Estos procesos se
denominan micosis.
Debido a la semejanza entre las células de hongos y las humanas (ambos son seres eucarióticos y poseen
procesos metabólicos muy evolucionados), cl desarrollo de fármacos antifúngicos selectivos no es fácil.
Entre los antifúngicos sistémicos activos, se encuentran la griseofulvina, que se estudiará en el Capítu
lo 10, y la anfotericina B. que se estudiará en cl Capítulo 12.
Los antifúngicos que aquí se comentan son los inhibidores de una enzima del grupo de los citocromos
P-450 que cataliza uno de los primeros pasos en la biosíntesis de esteróles en células de hongos y de los mamí
feros, produciendo la desmetilación en C-14 del lanosterol (de ahí su denominación de 14a-desmetilasa; Fi
gura 9.59).
Figura 9.59. Reacción catalizada por la 14a-desmetilasa.
Si estos inhibidores son selectivos de la enzima fúngica, como el itraconazol, podrán utilizarse por vía ge
neral. y si no lo son. por vía tópica. Su origen se debe a la observación fortuita de esta actividad en ciertos deri
vados de imidazol, los cuales se modificaron para encontrar estructuras con mejor actividad o farmacocinética.
Entre ellos están el miconazol, econazol c isoconazol. imazalilo, ketoconazol. el itraconazol y el lluconazol
(Fig. 9.60).
Figura 9.60. Azoles antifúngicos inhibidores de I4a-desmetilasa.
Desde un principio, se observó que los imidazoles tipo miconazol eran demasiado lipófilos y se enlazaban
en gran medida a las proteínas plasmáticas. Esta circunstancia, junto con su rápido metabolismo, determinaba
niveles en sangre muy bajos. Por lo tanto, la manipulación molecular se dirigió hacia la búsqueda de compuestos
menos lipófilos y más estables desde el punto de vista metabólico. El ketoconazol demostró ser mejor en ambos
aspectos, por lo que se elaboraron múltiples análogos en los que el anillo de dioxolano. que forma parte de su es
tructura, se modificó sistemáticamente. Finalmente, se relacionó la inestabilidad metabólica, con la presencia del
anillo de imidazol. La búsqueda de isósteros de éste condujo a los derivados de triazol, como el fluconazol.
Al inhibir el citrocromo P-450 en los hongos, estos azoles evitan la conversión de lanosterol en ergosterol,
y la acumulación de varios 14 a-metilesteroles produce alteraciones en la permeabilidad de la membrana celu
lar y en la actividad de las enzimas enlazadas a dicha membrana, lo que conduce a la inhibición del crecimiento
y a la muerte celular.
Otra enzima que participa en la biosíntesis del ergosterol es la escualeno epoxidasa (Fig. 9.59). Algunos
de sus inhibidores, como la naftifina y la terbinafma (Fig. 9.61) se utilizan como antifúngicos tópicos.
Naftifina Terbinafma
Figura 9.61. Antifúngicos tópicos, inhibidores de la escualeno epoxidasa.

BIBLIOGRAFÍA
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* edición. Harwood Academic
Smith. 11. J.: Smith and Williams’ Introduction to the Principles ofDrug Design and Action. 3.
Publishers, 1998. capítulo 8.
------------ 10--------------
Inhibidores enzimáticos que interfieren
la biosíntesis de las paredes
celulares
C. Pedregal y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
A lo largo de todo el texto, y más concretamente en el capítulo anterior, hemos hecho hincapié en el hecho de
que la utilidad de un fármaco depende primordialmente de su selectividad frente a un organismo invasor, o fren
te a un receptor o enzima cuya disfunción provoca una enfermedad. Las bacterias y los hongos poseen paredes
celulares rígidas para mantener su integridad en condiciones de pH, temperatura y osmolaridad variables, mien
tras que las células de los mamíferos carecen de estas estructuras. Cuando crecen aquellos organismos, la pared
celular tiene también que hacerlo a través de la síntesis de sus componentes. Si un fármaco inhibe esta biosínte
sis, la pared estará incompleta y la presión osmótica reventará la célula. Puesto que las células de los mamíferos
no poseen esta maquinaria biosintética, se alcanzará una gran selectividad. En este capítulo, se estudiarán agen
tes, como las penicilinas y las cefalosporinas, que se han comentado en el Capítulo 9, que actúan inhibiendo en
zimas que intervienen en este proceso.
Conviene recordar que las bacterias se subdividen, según su capacidad para retener o no el colorante cris
tal violeta después de un lavado con alcohol (ensayo de Gram), en Gram-positivas y Gram-negativas, respecti
vamente. Esta diferencia se debe a que la pared de las últimas es mucho más compleja, ya que posee capas de li-
poproteínas y lipopolisacáridos superpuestas a la pared rígida de peptidoglicano presente en ambas.
2. ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO
El peptidoglicano. mucopéptido o mureína. posee un esqueleto de polisacárido en el que se alternan la ÍV-ace-

tilglucosamina y el ácido ÍV-acctilmurámico. a través de un enlace p-1 —>4 (Fig. 10.1). El grupo ácido se une,
a través de un enlace amídico, con un tetrapéptido que contiene L- y o-aminoácidos. Los dos primeros son
L-Ala y d-GIu (unido a través del grupo carboxilo en y), el cuarto es t>-Ala, y el tercero, puede ser L-homose-
rina. L-2.4-diaminobutírico, L-omitina, L-lisina. o ácido meso- o L,L-2.6-diaminopimélico. Este tetrapéptido
se entrecruza, a través de enlaces peptídicos, para crear una mayor rigidez. En las bacterias Gram- negativas
ese enlace cruzado se realiza ente el grupo carboxilo del residuo o-Ala de una cadena y el grupo amino situa
do sobre el átomo de carbono de configuración l< (D) de un residuo de ácido meso-diaminopimélico de otra
cadena o entre dos residuos de ácido diaminopimélico. como se verá más adelante. En las bacterias Gram-po-
sitivas, suele producirse englobando varias unidades repetidas de un mismo aminoácido [por ejemplo
(Gly)5), que se ha enlazado al diaminoácido (t-Lys en la Fig. 10.1) de otra cadena. Si en ésta no hay ningún
diaminoácido, la unión se produce entre el residuo D-Ala. un aminoácido básico que hace de puente, y el gru
po carboxilo en a del ácido d-GIu de otra cadena.
Figura 10.1. a) Polímero de peptidoglicano sin formar cl puente cruzado, b) Representación esquemática de la estructura
del peptidoglicano de la pared bacteriana.
La biosíntesis del peptidoglicano es un proceso complejo en el que participan numerosas enzimas. Para
crecer y dividirse, las bacterias deben modificar continuamente su pared celular, por lo que son vulnerables a los
antibióticos P-lactámicos (inhibidores de la transpeptidasa de peptidoglicano) y a otros fármacos que inhiben
otras enzimas implicadas.
A pesar de las diferencias químicas y morfológicas de las paredes bacterianas, la biosíntesis del pepti
doglicano es muy semejante en todas las bacterias. En una primera etapa, se sintetizan los precursores enla
INHIBIDORES ENZIMÁTICOS QUE INTERFIEREN LA BIOSÍNTESIS DE LAS PAREDES CELULARES 253
zados a nucleótidos: UDP-Á'-acctilglucosamina (UDP-/V-Ac-glc) y LDP-iV-acetilmuramoil-L-Ala-o-Glu-R'-

D-Ala-D-Ala (UDP-/V-acetilmuramoilpentapéptido, en el que R1 es un aminoácido que puede variar), con la
participación de enzimas citoplásmicas solubles. La UDP-/V-acetilglucosamina se forma a partir de UTP y N-
acetilglucosamina-l-'bsfato. Puesto que la A-acetilglucosamina forma parte de la estructura de otros políme
ros y de los grupos glicosilo de glicoproleínas de mamíferos, esta reacción no es específica del peptidoglica-
no. Sin embargo, la formación del ácido UDP-A-acetilmurámico (UDP-/V-Ac-Mur). por transferencia de
cnolpiruvato a la UDP-ÍV-acetilglucosamina y posterior reducción, es el primer paso específico de la síntesis
del peptidoglicano (Fig. 10.2).
LIDP-.V-acetilglucosamina
(fosfoenolpiruvato)
NADP
*
NADPH
L
OH OH
UDP-/V-acetilglucosamina-
enolpiruvato
UDP-/V-acetil
murámico
Figura 10.2. Biosíntesis de UDP-/V-acetilmurámico (P representa grupos fosfato).
3. INHIBIDORES DE LA BIOSÍNTESIS DE UDP-N-ACETILMURAMOIL PENTAPÉPT1DO
Entre estos agentes, se encuentra el antibiótico fosofonomicina, un antibacteriano más o menos eficaz según
pueda o no ser transportado al interior celular. Por ser análogo al fosfoenolpiruvato, actúa como inhibidor com
petitivo irreversible de la enzima UDP-Al-acetilglucosamina-3-O-enolpiruvil transferasa (Fig. 10.3).
Figura 10.3. Interacciones de fosfoenolpiruvato y fosfonomicina en el sitio activo de la UDP-/V-acetilglucosamina-3-O-

enolpiniviltransferasa.
La adición de un grupo SH de un resto de cisteína de la enzima al enlace C(2)-O del anillo oxiránico de la
fosfonomicina es análoga a la adición de dicho grupo al doble enlace del fosfoenolpiruvato, pero en este com
plejo hay un grupo fosfonato y no un grupo fosfato. Por esta razón, no hay grupo saliente para que pueda enla
zarse el grupo C(3)-OH de la UDP-/V-acetilglucosamina al átomo de carbono y formar el agolpamiento enoléter
que, por posterior reducción, origina el ácido UDP-N-acetilmurámico. Otras enzimas que utilizan este último
compuesto como sustrato no se inhiben de forma eficaz por la fosfonomicina porque catalizan otras reacciones.
La conversión del ácido UDP-/V-acctilmurámico en UDPW-acetilmuramoilpentapéptido (Fig. 10.4) se
produce a través de la adición secuencial de tres aminoácidos y. finalmente, del dipéptido D-Ala-D-Ala.
U DP-jV-acel i Imurámico
L-Ala
UDP-Af-aceiilmuramoilL-Ala
d-GIu O-Ala
Piruvato
LIDP-.V-acetilinuramoil-L-Ala-o-Glu Cetoglutaraio
Ácido meso-diaminopimélico
UDP-N-acetilmuramoil-L-Ala
*D-Glu-mr¿o-diaminopimélico
ADP + Pi
D-Ala-0-Ala 2oAla 2t-Ala
U DP-A'-acct i I m u ramoi 1 pen tapépt ido
Figura 10.4. Conversión del ácido UDP-/V-acetilmurámico en UDP-iV-acetilmuramoilpenlapéptido.

Cada adición de un aminoácido está catalizada por la correspondiente ligasa. La formación del ácido
Glu, por transaminación de o-Ala y a-cetoglutarato, se inhibe por derivados p-halogenados de D-alanina. por
cicloserina (un tuberculostático) y por otros aminoácidos (Fig. 10,5).
La conversión de L-Ala en o-Ala es una reacción catalizada por la alanina racemasa, una enzima dependien
te de fosfato de piridoxal, que se inhibe por la D-cicloserina, las p-haloalaninas, la O-carbamoil-D-serina y el ácido
S-l-aminoetilfosfónico. Este aminoácido se ha incorporado dentro del péptido alafosfina (L-alanil-S-l-aminoetil-
fosfónico) para facilitar su transporte a través de la membrana bacteriana y. posteriormente, sufrir la hidrólisis in-
tracelular para generar el agente antibacteriano. La alafosfina posee un amplio espectro y es eficaz frente a bacte
rias Gram-negativas de las vías urinarias. La D-alanil-D-alanina sintetasa también es inhibida por la D-cicloserina.
D-Alanina D-Cicloserina (J-Halo-L>Alanina Acido S-1 -aminoctil-

(sustrato) fosfónico
O H CH3
H3C J-L Aminopcptidasas
H,N H H
Ácido-S-1 -aminoetilforfónico (Ala-P)
Alafosfina
Figura 10.5. Analogía entre l>-Ala y algunos inhibidores de enzimas que catalizan reacciones en que
se encuentra implicada.
4. INHIBIDORES DE LA SEGUNDA Y TERCERA ETAPAS DE LA BIOSÍNTESIS

DEL PEPTIDOGLICANO
La segunda etapa de la biosíntesis del peptidoglicano supone la transferencia de la A-acetilglucosamina y del N-

acetilmuramoilpentapéptido desde el interior de la célula al exterior de la membrana, para incorporarse, a través
de reacciones catalizadas por enzimas que se encuentran enlazadas a aquélla, al peptidoglicano en crecimiento.
En esta etapa (Fig. 10.6), es crucial la actuación del fosfato de undecaprenilo como transportador lipófilo (el pi-
rofosfato de undecaprenilo contiene 55 átomos de carbono y está formado por once unidades de isopreno). En
primer lugar, se transfiere desde el nucleótido al fosfato de undecaprenilo el fosfo-A-acetilmuramoilpcntapépti-
do. en una reacción que supone la ruptura y la síntesis de dos enlaces pirofosfato y está catalizada por una trans-
locasa. A continuación, se une la /V-acetilglucosamina, en una reacción de transglicosilación. para formar unde-
caprenilpirofosforil-ÍV-acetilmuramoilpentapéptido-/V-acetilglucosamina.
UDP-iV-acetilmuramoilpcntapéptido
Fosfato (P-C55)
de undecaprenilo
IJndecaprenil-pirofosforil-.'V-acctilniuramoilpcntapéptido
UDP-jV-acetilglucosamina
Undecaprcnil-pirofosforil-N-acctilmuramoilpentapéptido-iV-acctilglucosaniina
Figura 10.6. Segunda etapa de la biosíntesis del peptidoglicano.

Se conocen algunos antibióticos que inhiben ambos procesos. La bacitracina A (Fig. 10.7), que es el com
ponente principal de una mezcla de antibióticos con estructura de péptidos cíclicos aislada de B. licheniformis,
inhibe la defosforilación del pirofosfato de undecaprenilo. mediante la formación de un complejo con éste y un
catión divalente. Contiene un anillo de tiazolina. formado entre dos residuos de L-Cys y L-Ile, y un enlace amida
entre el grupo e-amino de un residuo de lisina y un carboxilo en p de aspártico. El grupo amino libre de la L-Ile,
adyacente al anillo de tiazolina. es esencial para la actividad biológica. Al parecer, el pirofosfato de undecapre
nilo encaja en un bolsillo que forma la bacitracina. y el ion metálico forma un puente entre el nitrógeno N-l del
residuo de l-Hís del antibiótico y el grupo ionizado del pirofosfato. La bacitracina también inhibe otras reaccio
nes enzimáticas en las que está implicado un pirofosfato Iipídico. por ejemplo, el paso en el que interviene el pi
rofosfato de famesilo en la biosíntesis del cscualeno.
L-lle (grupo amino

libre esencial para
la actividad)
Bacitracina A
Figura 10.7. Estructura de la bacitracina A.
En la tercera etapa, que también está catalizada por enzimas unidas a la membrana, la porción de N-acetil-
muramoilo terminal del peptidoglicano se transfiere al residuo de /V-acetilglucosamina de la subunidad disaca-
ridopéptido recientemente sintetizada (que permanece unida a la membrana a través del pirofosfato de undeca
prenilo). De esta forma, la cadena crece en una unidad de disacárido y se separa aquél. Tras la desfosforilación a
monofosfato de undecaprenilo (inhibida por bacitracina). vuelve a iniciarse el ciclo (Fig. 10.8).
transglicosilasa
C$5—P—P-jV—Ac-Mur— N — Ac— gle
Peptidoglicano
N—Ac -Mur-N— Ac — gle — peptidoglicano
Figura 10.8. Tercera etapa de la biosíntesis del peptidoglicano.
Algunos agentes actúan en esta etapa, bien por inhibición de esta transglicosilasa (peptidoglicano polime-
rasa), bien por otros mecanismos. El antibiótico con estructura de glicopéptido vancomicina lo hace a través de
la formación de un complejo con el residuo acil-D-Ala-D-Ala del peptidoglicano naciente. Su estructura es com
pleja y contiene un aminoazúcar enlazado a tres anillos aromáticos y varios residuos de aminoácidos (Fig. 10.9).
Puede actuar también por otros mecanismos, alterando la permeabilidad e interfiriendo la síntesis de ácido ribo
nucleico. Es extraordinariamente activo frente a bacterias Gram-positivas y se usa en el tratamiento por vía oral
de las colitis causadas por Clostridium.
Vancomicina
Figura 10.9. Estructura de la vancomicina.
5. INHIBIDORES DE LA CUARTA ETAPA DE LA BIOSÍNTESIS DEL PEPTIDOGLICANO.

ANTIBIÓTICOS P-LACTÁMICOS
Mientras las cadenas de peptidoglicano polímeras no se unen a través de enlaces peptídicos cruzados, estas es
tructuras permanecen disueltas en agua. Sólo cuando se entrecruzan, a través de la reacción catalizada por la
transpeptidasa de peptidoglicano. se produce la matriz insoluble capaz de mantener la integridad de la célula.
En este proceso, se forma un enlace peptídico entre el grupo carboxilo del residuo R4 de una cadena y el grupo
amino del residuo R4 de otra (o ligado a R ) (Fig. 10.10).
transpeptidasa
t>-Ala
D-Ala
I
D-Ala
Figura 10.10. Cuarta etapa de la biosintesis del peptidoglicano.

Esta enzima es una transpeptidasa de serina que inicialmente cataliza la hidrólisis del enlace o-Ala-D-
AJa, dipéptido C-terminal de la cadena de peptidoglicano bacteriana. Según se esquematiza en la Figura
10.11. la enzima queda en principio acilada. separándose el último residuo de n-alanina. para catalizar poste
riormente la reacción de transamidación entre la acilenzima y un residuo de glicina (Gly) u otro aminoácido
de otra cadena de peptidoglicano. De esta forma, se establecen enlaces cruzados que proporcionan estabili
dad a la pared bacteriana.
Primero se rompe el enlace o-Ala-o-Ala y se forma una acil-D-alanil-enzima, liberándose D-Ala y, poste
riormente. o bien se forma el enlace cruzado (transpeptidación), o bien el agua libera la acil-D-alanina de la
carboxipeptidasa. Ambos procesos son inhibidos por los antibióticos p-lactámicos. El mecanismo propuesto
en 1965 para las penicilinas se conoce como hipótesis de Tipper-Strominger, según la cual el antibiótico actúa
como un falso sustrato para la transpeptidasa.
Figura 10.11. Mecanismo propuesto para la reacción catalizada por transpeptidasas de peptidoglicano.
5.1. Penicilinas
Las penicilinas mimetizan al dipéptido terminal o-Ala-o-Ala. En consecuencia, son análogos del sustrato e inte
ractúan con la enzima. A través de un mecanismo de catálisis semejante al anterior, representado en la Figura
10.12. el anillo [J-lactámico de las penicilinas se rompe y queda la enzima acilada. Este enlace puede ser duradero,
y de ahí que estos antibióticos se clasifiquen como inhibidores irreversibles. Si el enlace peniciloil-enzima se hi-
droliza rápidamente, el resultado es que la penicilina se ha hidrolizado para dar un metabolito inactivo. Las isoen-
zimas que producen este fenómeno se denominan P-lactamasas. y suelen sobreexpresarse como consecuencia de
tratamientos prolongados, en un típico fenómeno de resistencia a los fármacos. Otras formas de resistencia se aso
cian a la presencia de isoenz.imas menos susceptibles de ser aciladas por estos antibióticos, o a cambios de per
meabilidad en la membrana celular.
Hay dos tipos de P-lactamasas: el grupo A, que actúa preferentemente sobre penicilinas (penicilinasas), y
el C, más selectivo frente a cefalosporinas (cefalosporinasas). Existe un grupo B formado por enzimas que con
tienen Zn2+.
La hidrólisis del complejo acil-enzima, formado por un hidroxilo de serina y la P-lactama, es fácil en las
P-lactamasas y difícil en las PBPs (Penicillin Binding Proteins). Este diferente comportamiento se debe a una
pequeña diferencia estructural: las p-lactamasas contienen un resto de ácido glutámico, próximo al centro acti
vo, capaz de actuar como una base y activar moléculas de agua en forma de OH“, para producir la hidrólisis.
Las PBPs, por el contrario, tienen un resto de fenilalanina en dicho lugar.
Figura 10.12. a) Semejanza entre las penicilinas y los residuos O-Ala-O-Ala del peptidoglicano.
b) Mecanismo propuesto para la inhibición de peptidasas de peptidoglicano por las penicilinas.
El anillo de p-lactama es poco reactivo como agente acilante, por lo que no produce acilaciones de nu-
cleófilos inespecíficos. Obsérvese que si las penicilinas poseyeran un grupo metilo en C-6. se asemejarían más al
dipéptido de alanina y deberían ser más activas. En general no ocurre esto: sin embargo, sí son activos los me-
toxiderivados en C-7a de las cefalosporinas. que se denominan cefamicinas, y algunas C-6a metoxipenicilinas.
como la temocilina.
Las P-lactamasas son inhibidas por ciertos inhibidores suicidas, entre los que se encuentran el ácido cla-
vulánico, la sulbactama y la tazobactama (Fig. 10.13). Estos inhibidores se asocian a ciertos antibióticos P-lac-
támicos para revertir las resistencias bacterianas. Es importante resaltar que estos compuestos no inhiben de for
ma eficaz las transpeptidasas de peptidoglicano como otras estructuras P-lactámicas. por lo que no son útiles
per se como antibacterianos.
Ácido clavulánico Sillona del ácido pcnicilánico Tazobactama

(sulbactama)
Figura 10.13. Algunos inhibidores de p-lactamasas.

El ácido clavulánico, aislado en 1976 de Streptomyces clavuligerus, y la sulbactama. un compuesto desa

rrollado por Pfizer, producen en primer lugar la acilación de la enzima (Fig. 10.14), pero, a diferencia de las pe
nicilinas. la apertura del anillo lactámico es simultánea, como consecuencia de la estabilidad de los productos
así formados: una cetona, en el caso del ácido clavulánico, y un anión sulfinato, en el caso de la sulbactama. Es
tos productos intermedios (E-F) poseen un centro electrófilo de tipo iminio, al que se adiciona un resto de lisina
de la enzima a través de un nuevo enlace covalente y se libera un fragmento del inhibidor primitivo.
E.I E.I"
Figura 10.14. Mecanismo propuesto para la inhibición de [1-lactamasas por ácido clavulámico y sulbactama.
La observación realizada por A. Fleming en 1929, que condujo a la identificación en el cultivo de Penici-
llium notation de la penicilina G (bencilpenicilina), el primer antibiótico P-lactámico conocido, fue especial
mente afortunada, ya que supuso el hallazgo de una sustancia activa con efecto tóxico selectivo sobre las bacte
rias. Desde su introducción en la quimioterapia antibacteriana, se ha preparado un número enorme de
penicilinas semisintéticas, mediante la variación del sustituyeme en el grupo amino del ácido 6-aminopenici-
lánico, precursor común de todas ellas, el cual se obtiene a partir de bencilpenicilina (penicilina G) o fenoxime-
tilpenicilina (penicilina V), mediante la ruptura enzimática del enlace amida de la cadena lateral (Fig. 10.15). La
enzima que cataliza esta ruptura es la penicilamidasa. Al contrario de lo que ocurre con las P-lactamasas. la pc-
nicilatnidasa no es utilizada por los microorganismos para su protección frente al fármaco, pero se emplea in
dustrialmente para preparar por fermentación el ácido 6-aminopenicilánico (6-APA, del inglés 6-Amino Penici-
llanic Acid). A partir de éste, y siguiendo procesos muy semejantes a los utilizados en la síntesis de péptidos tal
y como se estudiará con más detalle en el Capítulo 24, se obtienen las penicilinas semisintéticas.
Penicilamidasa
Ácido 6-aminopcnicilánico Penicilinas

(6-APA) semisintéticas
Figura 10.15. Penicilinas naturales y semisintéticas.

INHtBIIXJRES ENZIMÁTICOS QUE INTERFIEREN LA BIOSÍNTES1S DE LAS PAREDES CELULARES 261
Todas las bacterias contienen múltiples proteínas que se unen a penicilinas (PBP). y que se denominan
con números en orden decreciente respecto a su peso molecular. Según se inhiban unas u otras, se pueden pro
ducir efectos diferentes en las bacterias. Un organismo puede tener de cuatro a ocho PBPs diferentes, por lo que
su afinidad para el antibiótico es también diferente. Esto puede relacionarse con la resistencia bacteriana en el
caso de que las PBPs que resulten esenciales muestren poca afinidad. En E. coli, sólo son esenciales las PBP I,
2 y 3. Los antibióticos [i-lactamicos que se enlazan a la PBPI producen la lisis de la célula; los que se enlazan a
la PBP2 producen células gigantes esféricas y los que se enlazan a PBP3 producen la filamentación (Fig. 10.16).
Agente P-lactámico Efecto producido en la célula bacteriana
Lisis de la célula
(enlace a PBPI)
Forma esférica
(enlace a PBP2)
Fi lamentación
(enlace a PBP3)
Figura 10.16. Efectos producidos por la unión de agentes p-lactámicos a diversas PBP de E. coli.
La gran facilidad con que se produce la unión covalente cnzima-P-lactama se debe a la reactividad de este
anillo. En el caso de las penicilinas, la distorsión de ángulos de enlace que imponen el ciclo de cuatro eslabones y
la fusión con el anillo de tiazolidina, explican que el par de electrones no compartidos del nitrógeno que se en
cuentra fijo no pueda superponerse con los electrones del enlace ir del grupo carbonilo, por lo que no está permi
tida la resonancia característica del enlace amida y el grupo carbonilo es muy clectrófilo (Fig. 10.17). Lo mismo
ocurre en las cefalosporinas. Para que una P-lactama monocíclica, como el aztreonam, presente una actividad an-
tibiótica es preciso que el nitrógeno esté sustituido por un grupo atrayente de electrones (SO,H, en este caso)
Resonancia en amidas acíclicas

— C-N
P-lactamas monocíclicas
(R = SOjH: Aztreonam)
Figura 10.17. Inhibición de la resonancia en el anillo P-lactámico de las penicilinas.

Esta reactividad del anillo fj-lactámico como electrófilo, que es responsable de su actividad biológica, ex
plica las dificultades que se encontraron en un primer momento para la síntesis total de estos compuestos, así
como su inestabilidad en medios básicos y ácidos. La primera síntesis total de las penicilinas fue realizada, en
1953. por Sheehan y colaboradores, y requirió el desarrollo de algunos reactivos, como las carbodiimidas, que
siguen siendo de gran interés en la síntesis de péptidos.
Una apertura análoga a la que producen las [5-lactamasas se produce por hidrólisis alcalina o por el ataque
de otros nuclófilos. como las aminas (Fig. 10.18). La alergia a las penicilinas que muestran ciertos individuos se
puede explicar por una reacción de este tipo con los grupos amino de las proteínas.
R —CO—NH—CH —CHO
Ácido penilico
Figura 10.18. Algunas transformaciones químicas de las penicilinas.
En medio ácido y temperatura ambiente, estos antibióticos sufren una reordenación que se inicia por la
protonación del nitrógeno lactámico, seguida del ataque nucleófilo del resto carbonilo de la cadena lateral. El
anillo de oxazolina intermedio así formado se transpone de nuevo a uno de imidazol, originándose el ácido pe
nilico. Este proceso tiene interés porque puede tener lugar en el estómago, por lo que se requiere modificar la
estructura para hacerlas resistentes al medio ácido y poder ser administradas por vía oral.
Finalmente, el tratamiento con ácido a temperatura alta o con cloruro mercúrico, rompe además el anillo
de tiazolidina para originar, entre otros productos, la penicilamina, que por ser un agente quelante de metales
pesados, se utiliza en el tratamiento de intoxicaciones y en la artritis reumatoide.
Ciertos cationes metálicos se coordinan con el nitrógeno del anillo (3-lactámico facilitando su ruptura.
La solubilidad, así como otras propiedades fisicoquímicas de las penicilinas que afectan a su penetración
en los distintos tipos de bacterias (espectro de acción) y a su farmacocinética. varían con la naturaleza del grupo
R del acilo de la cadena lateral. Lo mismo ocurre con los cationes utilizados para la formación de sales del gru
po carboxilo de la posición 3 (los ácidos libres no suelen ser adecuados para la administración por vía oral o pa
renteral).
INHIBIDORES ENZIMATICOS QUE INTERFIEREN LA B1OSÍNTESIS DE LAS PAREDES CELULARES 263
La degradación catalizada por ácido en el estómago, que es la principal responsable de la baja absorción
por vía oral de las primeras penicilinas naturales, puede reducirse al mínimo introduciendo, en la posición ben
cílica de la bencilpenicilina o penicilina G, sustituyentes atrayentes de electrones. De esta forma, aunque se pro
tone el nitrógeno lactámico (Fig. 10.19), no se produce el ataque nucleófilo del grupo carbonita de la cadena la
teral, ya que se han introducido en a agolpamientos atrayentes de electrones. Por eso, la fenoximctilpenicilina,
o penicilina V. y la a-aminobencilpenicilina, o ampicilina. son más estables que la penicilina G (bencilpenicili
na) al medio ácido.
Sustituyeme atrayente
de electrones
Ácido pcnílico
Figura 10.19. Penicilinas acidorresistentes.
Algunas bacterias, sobre todo la mayor parte de las Gram-negativas, no son sensibles a las penicilinas y
otras son capaces de desarrollar resistencias, alterando la permeabilidad de sus membranas o la estructura de las
transpeptidasas. o bien produciendo la inactivación del antibiótico mediante la sobreexpresión de P-lactamasas.
La introducción de diferentes restos acilo en el 6-APA se dirigió fundamentalmente a la obtención de análogos
resistentes a esta inactivación. En general, el impedimento estérico en la posición a del acilo, como sucede en el
grupo 2.6-dimetoxifenilo de la meticilina (Fig. 10.20), confiere resistencia a las P-lactamasas. pero hay que te
ner en cuenta que, como es lógico, estos derivados presentan, al mismo tiempo, menor afinidad por las trans
peptidasas y. por tanto, son menos activos que la penicilina G (bencilpenicilina) o la penicilina V (fenoximetil-
penicilina) frente a bacterias normalmente sensibles a las penicilinas.
Si los sustituyentes en dicha posición son. además de voluminosos, atrayentes de electrones (como ocurre
con el isoxazol y con los átomos cloro y flúor de la cloxacilina y la flucoxacilina. Fig. 10.20), los derivados se
rán, además de estables frente a P-lactamasas. resistentes a la hidrólisis ácida. Por el contrario, si son donantes
de electrones, como ocurre con tas grupos metoxilo de la meticilina. tas derivados serán más estables frente a P-
lactamasas, pero incluso más sensibles a la hidrólisis ácida.
Los átomos de halógeno influyen, además, en otras propiedades farmacocinéticas. Así, la cloxacilina se
absorbe mejor que la oxacilina, y la flucloxacilina se une en menor grado a las proteínas plasmáticas, por lo que
existen mayores niveles de fármaco libre en sangre.
Se dificulta la
interacción con las
P-lactamasas
Nombre
Mcticilina (resistente a ^-lactamasas)
Flucloxacilina (ídem)
Oxacilina
Figura 10.20. Penicilinas resistentes a las P-lactamasas.
La introducción de un grupo ionizado o polar en la posición bencílica de la bencilpenicilina, como ocurre

en la ampicilina (Fig. 10.21) cuyo grupo amino, tanto en medio ácido como en medio neutro (en este caso,
como ion híbrido), está protonado, confiere actividad frente a bacterias Gram-negativas, porque permite su
penetración al interior celular a través de canales acuosos llamados canales de porina. La amoxicilina también
posee un grupo amino, y es activa frente a bacterias Gram-negativas, pero se absorbe por vía oral mejor que la
ampicilina, quizás por la alteración de las formas cargadas que produce el hidroxilo fenólico adicional. Otro
grupo polar que aumenta la eficacia frente a las bacterias Gram-negativas es el carboxilo. Este grupo se encuentra
en la carbenicilina o a-carboxibencilpenicilina, aunque en este caso es menos eficaz frente a bacterias Gram-
positivas, quizás porque una estructura tan polar penetra peor en este tipo de microorganismos.
R Nombre
Ph—CH —
Ampicilina
®NHj (ionizado)
Amoxicilina
Carbenicilina
CO2 (ionizado)
Figura 10.21. Ejemplos de penicilinas semisintéticas activas frente a bacterias Gram-negativas.

La carbenicilina es también resistente a algunas [J-lactamasas, pero al ser un ácido p-oxocarboxílico, se

descarboxila en medio ácido a bencilpenicilina (Fig. 10.22), por lo que no es activa por vía oral sino por vía pa
renteral.
Penicilina G
(bencilpenicilina
Figura 10.22. Descarboxilación de la carbenicilina.
*) son muy hidrosolubles, a diferencia de las sales con ciertas bases orgánicas,
Las sales alcalinas (Na4, K
que se utilizan para prolongar la duración del efecto. Entre estas formas de depósito, se encuentran la bencilpe-
nicilina-procaína o la bencilpenicilina-benzatina (Fig. 10.23).
Anión Catión (nombre)
EhNH- CH2-CH2-O-CO NH,
(bcncilpenicilina-procaína)
PhCH2—NH:—CHj—CHj—NH2—CH;Ph
(bencilpenicilina-benzatina)
(Clcmizol o alcrcurpenicilina)
Figura 10.23. Sales de bencilpenicilina diseñadas como formas de depósito.
A este respecto, recordaremos aquí que se han diseñado también profármacos, por esterificación del gru
po carboxilo en la posición 3, los cuales, tras su absorción por la mucosa grastrointestinal, se hidrolizan enzimá-
ticamente para originar los antibióticos activos (véase el Capítulo 8). Otros ésteres, como la carfencilina y la ca-
rindacilina, se han diseñado como profármacos de carbenicilina para que ésta pueda administrarse por vía oral.
También se han diseñado ureas derivadas del grupo amino de la ampicilina, como la piperacilina. que combinan
el espectro de acción de la ampicilina y la carbenicilina (Fig. 10.24).
R (nombre)
Me —CH,-O-CO-Bu
CA-CH-CO-NH
Me (pivampicilina)
NHr n
CO,R
Aciloximetil derivados de ampicilina en cl carboxilo en C-3 del anillo de penamo
—CH-O-COjEt
CH,
(bacampicilina)
Me
C6HS-CH —CO-NH
¿O2R Me
CO:H —Ph (carfencilina)
Ésteres de carbenicilina en cl
carboxilo de la cadena lateral
piperacilina
Figura 10.24. Ésteres y amidas derivados de penicilinas.
Además, se han estudiado otros profármacos de ampicilina con estructura de aminal. como la metacilina
(Fig. 10.25), que se ha preparado por reacción de aquélla con acetona.
Metacilina
Figura 10.2?. Profármaco de ampicilina de tipo aminal.

5.2. Cefalosporinas
En 1945, se aisló del Cephalosporium acraemonium la cefalosporina C, que fue la primera de un grupo de
compuestos relacionados eslructuralmente con las penicilinas. Aunque, en general, resultaron ser menos acti
vas que las penicilinas, el hecho de que fueran estables frente a las penicilinasas (véase más adelante) impulsó
su desarrollo.
Hasta la fecha se ha preparado un gran número de cefalosporinas semisintéticas a partir del ácido 7-ami-
no-cefalosporánico (7-ACA. del inglés 7-Amino Cephalosporanic Acid).
La cefalosporina C tiene una cadena lateral de 5-aminoadipoilo. que presenta una considerable resisten
cia a la hidrólisis enzimática, por lo que no se ha encontrado ningún proceso biotecnológico que permita obte
ner 7-ACA y éste debe prepararse por procedimientos químicos para la obtención de cefalosporinas semisinté
ticas.
Estos procedimientos requieren una hidrólisis ácida cuidadosa, que deje intacto el anillo de lactama. El
más usual consiste en el tratamiento con pentacloruro de fósforo de un derivado convenientemente protegido
para dar un iminocloruro. y posteriormente con un alcohol, para dar un iminoéter cuya hidrólisis y desprotec
ción origina 7-ACA (Fig. 10.26 y Capítulo 24).
Cefalosporina C 7-ACA
Figura 10.26. Obtención de cefalosporinas semisintéticas.
La acilación del 7-ACA, utilizando un método análogo al empleado en las penicilinas semisintéticas, ori
ginó derivados como la cefalotina. que fue la primera cefalosporina semisintética que se comercializó
(Fig. 10.27). Este compuesto posee un amplio espectro de acción, pero se desacetila por esterasas del suero, de
forma que el alcohol así formado puede formar una lactona con el grupo carboxilo, que es inactiva.
Ccfaloiina Laciona inactiva
Figura 10.27. Inactivación de las cefalosporinas que poseen la cadena acetoximetílica.
Por esta razón, en muchas cefalosporinas semisintéticas se ha modificado la cadena acetoximetílica, me
diante el tratamiento con nucleófilos de nitrógeno o de azufre, como los que se indican en la Figura 10.28.
Si en lugar de un sustituyeme acetoximetilo en la posición 3 hay uno de tipo carbamoiloximetilo (R =
CH;O-CO-NH2), se producen compuestos más estables a la hidrólisis.
Figura 10.28. Variaciones del sustituyeme en C-3.
Los 3-metil-3-desacetoximetil derivados, como la cefalexina, se prepararon en un principio por acilación

del correspondiente derivado de 7-ACA, el cual se había obtenido por hidrogenación catalítica a alta presión
de la cefalosporina C. Pero este método es muy poco satisfactorio y no resulta adecuado para la preparación
industrial.
Afortunadamente, se descubrió que es posible obtener estos derivados a partir de penicilinas que se trans
forman en sulfóxidos por tratamiento con perácidos y posteriormente sufren una reordenación del anillo a través
de ácidos sulfénicos o sus derivados (véase el Capítulo 24 y la Fig. 10.29).
Esta reordenación se denomina, en general, reordenación de Morin y se utilizó por primera vez para la
transformación de penicilinas en cefalosporinas en los laboratorios Eli Lilly.
INHIBIDORES F.NZIMÁT1COS QUE INTERFIEREN LA BIOSÍNTESIS DE LAS PAREDES CELULARES 269
Ácido sulfénico
Figura 10.29. Preparación de 3-metil-3-desacetoximetilcefalosporinas.
En las cefalosporinas, la p-lactama es de tipo enamida. El par de electrones no compartidos del nitrógeno
lactámico resuena con el doble enlace C=C, haciendo que el carbonilo de la lactama sea muy reactivo como
electrófilo y, por tanto, que estos compuestos sean activos biológicamente. Si en la cadena en la posición 3 se
introducen grupos atrayentes de electrones que faciliten la resonancia con el enlace C=C, los compuestos serán
todavía más activos. Si son buenos salientes, el ataque por nucleófilos puede producir su eliminación simultánea
con la apertura del anillo (Fig. 10.30).
Carbonilo muy
si X es buen saliente electrófilo
Figura 10.30. Reactividad del anillo p-lactámico de las cefalosporinas.
La esterifícación del grupo carboxilo de las cefalosporinas origina, como en las penicilinas, profármacos
con mejores propiedades por su solubilidad. Sin embargo, debido a la conjugación del grupo carboxilato con el
doble enlace, estos ésteres experimentan con facilidad la isomerización de éste a la posición C-2. Los isómeros
así formados, después de hidrolizado el éster por esterasas hepáticas, resultan mucho menos activos, ya que el
anillo de 6 eslabones posee una mayor libertad conformacional, que permite al par de electrones no compartido
del nitrógeno adoptar una disposición en la que se conjuga con el grupo carbonilo 0-lactámico, perdiendo su ac
tividad biológica (Fig. 10.31).
Mayor libertad
Mejor solapamiento de orbitales

(menor reactividad como electrólito —►menor actividad biológica)
Figura 10.31. Esterificación del grupo carbox i lo y sus consecuencias.
Las primeras cefalosporinas eran estables frente a las [l-lactamasas de los estafilococos, aunque enseguida
se observaron resistencias. Salvo excepciones, también eran inestables frente a las P-lactamasas producidas por
bacterias Gram-ncgativas. Además de la administración conjunta con inhibidores de P-lactamasas. igual que se
hace con las penicilinas, el diseño de análogos estables a estas enzimas se ha basado fundamentalmente en la in
troducción de un metoxilo en C-7, por el impedimento estérico que produce. La cefamicina C. producida por
Streptomyces clavuligerus, es un compuesto natural de este tipo que posee la misma cadena de y-aminoadipoilo
que la cefalosporina C. pero la cadena en C-3 es de tipo carbamoiloximetilo (Fig. 10.32). Aquel sustituyeme
impide la hidrólisis quimioselectiva del grupo amida para obtener el análogo correspondiente al 7-ACA. Cuan
do se intentó esta hidrólisis en la 7a-metoxicefalosporina C, se produjo una considerable epimerización en C-7.
Por otra parte, la presencia del grupo metoxilo hace al grupo C(7)-NH, menos nucleófilo y más impedido esté
ticamente, lo que dificulta su reacilación. Una solución a este problema, desarrollada en los laboratorios Merck,
se verá en el Capítulo 24. en la semisíntesis de cefoxitina a partir cefamicina C (Fig. 10.32). También allí se ve
rá cómo puede introducirse el metoxilo en C-7. utilizando 7-iminocefalosporinas u otros 7-iminoprecursores.
Cefoxitina (scmisintética)
Figura 10.32. Estabilidad frente a P-lactamasas. Cefamicinas naturales y semisintéticas.
También se han introducido sustituyentes en la cadena acilo para impedir estéticamente el ataque enzimá-
tico. En la mayor parte de los casos, se pierde la actividad antibacteriana, como era de prever, ya que se impide
igualmente el acceso a las CBPs, pero se han encontrado algunos alcoximino derivados que son estables a p-
lactamasas y activos, como la cefotaxima y la cefuroxima (Fig. 10.33).
La optimización de las cefalosporinas ha seguido desarrollándose pero, dada su extensión, el lector debe
remitirse a textos especializados.
INHIBIDORES F.NZ.1MÁT1COS QUE INTERFIEREN LA B1OSÍNTES1S DE LAS PAREDES CELULARES 271
Figura 1033. Cefalosporinas estables frente a P-lactamasas.
5.3. Otros agentes p-lactámicos
Existen, además, otras muchas estructuras p-lactárnicas con actividad antibiótica (Fig. 10.34). Así. los ácidos 6-
amidinopenicilánicos, como el mecilinam o la fenoxiacetamidina, pertenecen a la primera clase de agentes que
mostraron actividad antibiótica en ausencia de la cadena lateral de W-acilo. Las monobactamas, cuyo principal re
presentante es el aztreonam, obtenido por síntesis total. Los carbapenemos, obtenidos por sustitución isostérica del
átomo de azufre por un grupo metileno e introducción de un doble enlace, pueden tener actividad antibacteriana,
como la tienamicina. o ser inhibidores de p-lactamasas, como el ácido olivánico. En la tienamicina, la estereoquí
mica de la cadena en C-6 es opuesta. Ya hemos visto que otros compuestos, como el ácido clavulánico (un oxape-
namo) o la sulbactama (la sulfona del ácido penicilánico) son igualmente inhibidores de P-lactamasas.
Mecilinam Fenoxiacetamidina
Figura 10.34. Otras P-lactamas con actividad antibiótica.
Otras p-lactamas inhiben otras enzimas, como ocurre con la nocardicina A.
6. AGENTES QUE INTERFIEREN LA BIOSÍNTESIS DE OTROS COMPONENTES

DE LA PARED DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS
La membrana externa de las bacterias Gram-negativas está formada por lipopolisacáridos. lipoproteínas y fosfo-
lípidos. distribuidos de forma asimétrica. Las lipoproteínas se sintetizan en el citoplasma, desde donde son
transportadas hasta la pared externa y permiten la unión de ésta al peptidoglicano, a través de un enlace peptídi-
co entre un grupo e-amino de lisina de la lipoproteína y el grupo a-carboxilo del centro L de un residuo de ácido
meso-diaminopimélico. Recordemos que el ácido nteso-diaminopimélico es el tercer residuo enlazado al ácido
/V-acetilmurámico en estas bacterias. Algunos de los enlaces cruzados del peptidoglicano los forman los grupos
carboxilo y amino del centro d de este residuo pertenecientes a dos cadenas diferentes, constituyendo un anillo
de piperazina-2,5-diona (Fig. 10.35). La lipoproteína sólo se une a las subunidades que contienen este enlace
cruzado, produciéndose posteriormente la hidrólisis de la piperazinadiona y liberándose subunidades de disacá-
rido tripéptido que contienen la lipoproteína. La biciclomicina es un antibiótico aislado de varias especies de
Slreptomyces que posee una estructura de piperazina-2,5-diona y, dada su semejanza con la estructura de este
enlace cruzado, inhibe su hidrólisis. Por ello, las bacterias Gram-negativas tratadas con este antibiótico experi
mentan cambios morfológicos en sus paredes.
Figura 10.35. Estructura de algunos enlaces cruzados en bacterias gramnegativas. Biciclomicina.
La globomicina es otro de los varios agentes activos frente a bacterias Gram-negativas. Es un antibiótico
que posee una estructura de pentapéptido. Éste se cicla, a través de un enlace éster y otro amida, con el ácido 3-
hidroxi-2-metil-heptanoico. Por su semejanza estructual con los precursores de la biosíntesis de la lipoproteína.
se inhiben enzimas implicadas en su formación (Fig. 10.36).
Figura 20.36. Estructura de la globomicina.

INHIBIDORES ENZIMÁTICOS QUE INTERFIEREN I A BIOSÍNTESIS DE LAS PAREDES CELULARES 273
7. INHIBIDORES DE LA BIOSÍNTESIS DE LA PARED CELULAR DE LOS HONGOS
En el mundo de las plantas, los hongos y sus equivalentes unicelulares, las levaduras, poseen paredes celula
res algo más sencillas que las bacterias que son exclusivas y, por tanto, proporcionan lugares de acción para
el ataque selectivo de agentes quimioterápicos. En los hongos, estas paredes están constituidas, fundamen
talmente. por un mosaico de varios hidratos de carbono, de los que los más abundantes son el 0-glucano y la
quitina. Ésta es un polímero de [$-( 1—>4)-/V-acetilglucosamina. La griseofulvina (Fig. 10.37) es un fungicida
sistémico que actúa (al menos en parte) inhibiendo la producción de quitina, con lo que la presión osmótica
interna provoca la ruptura de la célula. Los nucleósidos peptídicos denominados polioxinas y nikkomicinas
son inhibidores competitivos de la quitina sintetasa. Ambas tienen que atravesar la membrana citoplasmática
utilizando algún sistema de transporte específico de di- y tripéptidos, y ser resistentes a la desactivación por
peptidasas.
R R~
Polioxina D CO2 H H
Nikkomicina Z H H
Figura 10.37. Estructura de antifúngicos que interfieren la biosíntesis de la pared celular.
BIBLIOGRAFÍA
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Inhibidores enzimáticos
farmacodinámicos
M. Espada y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
Muchos agentes farmacodinámicos clínicamente útiles actúan por inhibición de enzimas del propio organismo
implicadas en la biosintesis o degradación metabólica de sustancias endógenas que realizan funciones impor
tantes. Aunque es imposible contemplarlos todos, comentaremos en este lugar algunos ejemplos de fármacos
útiles (o potencialmente útiles) en terapéutica. Como hemos visto en los dos capítulos anteriores, la compren
sión de los mecanismos de catálisis enzimática. así como de la unión de sustratos e inhibidores a las enzimas en
cuestión, es la base de su diseño.
2. INHIBIDORES DE HIDROLASAS
Las hidrolasas son enzimas que catalizan la ruptura de enlaces entre un carbono y otro átomo con la adición de
agua. Este grupo incluye, entre otras, a las esterasas (como la acetilcolinesterasa y las fosfodiesterasas), a las
peptidasas, a las lipasas y fosfolipasas, y a las glicosidasas.
2.1. Inhibidores de la acetilcolinesterasa
La acetilcolina (AcCh) es un importante transmisor químico que se libera tras un impulso en las terminaciones
del sistema nervioso parasimpático y motor (véase el Capítulo 14). Su acción se tennina, principalmente, al
ser hidrolizada en una reacción que cataliza la acetilcolinesterasa (ACE). Por ello, los inhibidores de la ACE
prolongan su vida, incrementan su concentración en los receptores correspondientes, y producen efectos far
macológicos similares a los observados cuando se administra acetilcolina o sus agonistas. Son, por tanto, ago
nistas colinérgicos indirectos y se utilizan en el tratamiento de la miastenia grave, la atonía del tracto gastroin
testinal, el glaucoma y la enfermedad de Alzheimer. La toxicidad de algunos de ellos ha desviado su
utilización del campo de la clínica a su uso en agricultura como insecticidas, pesticidas y. en algunos casos,
como gases de guerra.
La acetilcolinesterasa tiene una estructura de árbol situado en las proximidades de los receptores de ace-
tilcolina, cuyo tronco es una molécula de colágeno anclada en la membrana celular. De él salen tres ramas que
sitúan a la enzima propiamente dicha, una proteína tetrámera formada por cuatro subunidades, cada una de las
cuales tiene un sitio activo, por encima de la superficie celular. El sitio activo de la acetilcolinesterasa posee dos
áreas de interacción: un lugar de enlace éster y un lugar de enlace aniónico. La acetilcolina se une al lugar anió
nico por un enlace iónico con el grupo carboxilato de un residuo Glu o Asp (de forma parecida a como interac
túa con el receptor colinérgico), y por un enlace de hidrógeno a un residuo Tyr (Fig. 11.1).
Lugar aniónico
Lugar de enlace
del éster
Figura 11.1. Interacción de la acetilcolina con el centro activo de ACE.
En la hidrólisis intervienen, además, residuos de serina y de histidina. El paso inicial de la hidrólisis de

acetilcolina. tras la formación de un complejo reversible enzima-sustrato (E. A-X, Ec. (1 ]). es la transesterifica-
ción de la enzima.
E-A E + HOA III

(complejo) (acilenzima)
HX H2O
E = ECA; Hr C -CO -O -CH, -CH2 -N (CH 3)3
Un grupo hidroxilo del residuo de serina del centro activo, que incrementa su nucleofilia por eliminación
de un protón mediante un anillo imidazólico de histidina que actúa como una base, se acetila con liberación de
colina (Fig. 11.2). En la eliminación participa el ácido conjugado de la histidina. transfiriendo un protón al ion
alcóxido saliente. Éste es el paso limitante de la velocidad del proceso. A continuación, la enzima acetilada se
hidroliza. De nuevo, un residuo de histidina actúa como catalizador básico, activando como nucléofilo una mo
lécula de agua y protonando el residuo de serina para regenerar la enzima con liberación de ácido acético. Así
pues, la histidina actúa como catalizador ácido/base y la serina como nucleóftlo.
INHIBIDORES ENZIMÁTICOS FARMACODINÁMICOS 277
Acetii-enzima
H,C-CO,H
Enzima libre
Figura 11.2. Mecanismo de hidrólisis de la acetilcolina catalizada por ACE.
Los fármacos que se asocian, de forma reversible o irreversible, al centro activo de la ACE impiden el acceso
al mismo de la acetilcolina y son inhibidores competitivos reversibles o irreversibles de aquélla. La mayoría posee
un átomo de nitrógeno cargado positivamente y un agolpamiento éster cuyo resto ácido acila al hidroxilo de serina
citado. Se comportan como falsos sustratos, pero poseen una constante de velocidad de hidrólisis k3 muy pequeña,
con lo que la enzima ve muy limitada su capacidad funcional. Hay dos grupos principales: los carbamatos. como la
fisostigmina y sus análogos, que son reversibles, y los compuestos organofosforados, que son irreversibles.
La fisostigmina es un producto natural muy tóxico, aislado del haba de calabar, que posee un grupo car-
bamato, esencial para la actividad, y un anillo dihidroindólico fusionado con uno de pirrolidina. El valor de pKa
del nitrógeno pirrolidínico es de 7,9. por lo que se encuentra protonado a pH fisiológico (Fig. 11.3). Este último
se enlaza con el lugar aniónico de la enzima y los primeros pasos transcurren de forma semejante a lo que ocu
rre con el sustrato. Así. el ataque nucleóftlo de la serina produce la expulsión de un anión fenóxido (mejor sa
liente que el alcóxido en AcCh). Sin embargo, el grupo carbonilo de un carbamato es menos electrófilo que el
de un éster. ya que el par de electrones no compartido del nitrógeno se conjuga con aquél, por lo que la hidróli
sis final es extremadamente lenta (kj es muy pequeña).
Figura 11.3. Mecanismo de la inhibición producida por la fisostigmina.

La fisostigmina se utiliza en urgencias como antídoto en intoxicaciones causadas por fármacos de acción
anticolinérgica (antidepresivos tricíclicos, neurolépticos, antihistamínicos o antiparkinsonianos) y en el trata
miento del glaucoma, ya que la estimulación del cuerpo ciliar que produce su acción colinérgica indirecta facili
ta el drenaje del ojo y disminuye la presión intraocular. Sin embargo, posee efectos secundarios importantes. La
neostigmina es un análogo diseñado para que no pueda pasar la barrera hematohencefálica. ya que al ser un
compuesto de amonio cuaternario está permanentemente cargado. Además, la hidrólisis del grupo carbamato
está todavía más dificultada, debido a la mayor tendencia del par de electrones no compartido del nitrógeno a
conjugarse, al haber introducido un segundo resto metilo sobre dicho átomo (Fig. 11.4).
Carbamato
Figura 11.4. Neostigmina.
Los inhibidores organofosforados. como el sarín o el diflós. se obtuvieron para ser utilizados como gases
de guerra (venenos nerviosos) en la Segunda Guerra Mundial, antes de que se conociera su mecanismo de ac
ción. Actualmente, se utilizan como insecticidas y pesticidas. Reaccionan rápidamente con la enzima para for
mar un derivado fosforilado de serina muy estable a la hidrólisis, quedando la enzima inhibida irreversiblemen
te. Por ello, la AcCh se acumula, el músculo esquelético está en contracción permanente y se produce la muerte.
El ecotiopato, un análogo diseñado para que encaje con el sitio activo de la enzima más eficazmente, se usa en
el tratamiento del glaucoma (Fig. 11.5). Son ésteres fosfínicos. fosfónicos o fosfóricos con un buen grupo sa
liente.
EtO. PríK /O
P^
Me F PrO F
Sarín Diflós
Yoduro de ecotiopato
Ester fosfórico
muy estable a
la hidrólisis
ACE
Figura 11.5. Inhibición de ACE producida por insecticidas organofosforados.
El paratión y el malatión son insecticidas no tóxicos, debido a que son profármacos con estructura de tío-
no o ditiofosfato que sólo se bioactivan en los insectos por desulfuración oxidativa para dar fosfatos o fosfona-
tos. que son los inhibidores activos. Las células de los mamíferos carecen de este sistema metabólico y los me-
tabolizan de forma diferente (Fig. 11.6).
INHIBHX>RES ENZIMÁTICOS FARMACODINÁMICOS 279
MeOxp<-s zCO2Et
MeO^ '"S-CHX
CH2- CO,Et
Malatión (profármaco) Paratión (profármaco)
Figura 11.6. Metabolismo del paratión en insectos y en mamíferos.
La pralidoxima es un antídoto contra el envenenamiento por insecticidas organofosforados cuyo diseño

fue espectacular. Estos agentes tienen que desplazar la serina del insecticida y, por tanto, deben ser nucleófilos
fuertes capaces de romper el enlace fosfato. Dado que se conocía que un grupo éster fosfato puede hidroliz.arse
con hidroxilamina. pero que este reactivo no puede aplicarse a los seres humanos por su toxicidad, se diseñó
una estructura capaz de enlazarse al lugar aniónico del sitio activo de la enzima: un anillo de (V-metilpiridinio. Este
lugar no está ocupado por los organofosforados. Una vez enlazado al sitio activo, el grupo hidroxilimino susti
tuido en la posición orto, que resultó la más adecuada según los cálculos, puede reaccionar con el éster fosfato y
liberar la enzima (Fig. 11.7).
Enzima libre
Enzima fosforilada
Figura 11.7. Mecanismo de acción de la pralidoxima.
Recientemente, algunos inhibidores reversibles no competitivos de la ACE (y por tanto no relacionados

estructuralmente con la AcCh), como la tacrina (un fármaco poco específico, con efectos secundarios indesea
bles) y el donepezilo (más específico, perteneciente al grupo de derivados de bencilpiperidinas), se han comer
cializado porque presentan cierta utilidad para frenar el deterioro intelectual de los enfermos de Alzheimer. Esta
enfermedad es una demencia caracterizada por determinados cambios microscópicos en el cerebro y por la re
ducción de la biosíntesis neuronal de ciertos neurotransmisores. muy especialmente de la AcCh (Fig. 11.8). Es
ta aplicación terapéutica de los inhibidores de la ACE requiere compuestos selectivos, con escasa actividad en el
sistema periférico. A pesar del carácter fuertemente básico de la tacrina (pKa = 10,0) y, por tanto, de su alto por
centaje de formas protonadas a pH fisiológico, sus anillos bencénico y de ciclohexeno le confieren la lipofilia
suficiente para penetrar a través de la barrera hematoencefálica. Sin embargo, como ya se ha comentado, la ta
crina no es específica porque al inhibir la ACE plasmática produce efectos periféricos.
Los carbamatos tipo fisostigmina tienen una farmacocinética poco adecuada, pero un análogo como la ri-
vastigmina está comercializado en algunos países. El metrifonato es un profármaco organofosforado que se
conviene en el metabolito activo diclorvós. Éste es un inhibidor irreversible de la ACE y, por tanto, es de acción
prolongada. Finalmente, algunos alcaloides naturales, como la huperzina A y la galantamina. así como sus aná
logos. están también en estudio como posibles fármacos frente a la enfermedad de Alzheimer.
NH.
O
Tacrina
(±)-Donepc7.ilo
NH, OH
(±) -Vclnacrina Metrifonato Diclorvós
Rivastigmina Huperzina A Galantamina
Figura 11.8. Inhibidores de la ACE útiles en la enfermedad de Alzheimer.
2.2. Inhibidores de las lipasas
Entre las muchas dianas farmacológicas implicadas en el control de la obesidad (véase el Capítulo 13), se en
cuentran las lipasas. Un fármaco que se ha comercializado con esta indicación terapéutica, aunque produce
efectos indeseables, es el orlistat (Fig. 11.9). Se trata de un producto natural extraído de Streptomyces toxytrici-
ne que inhibe la lipasa gástrica, la pancreática y otras. Estas enzimas son necesarias para que se produzca la hi
drólisis de las grasas de la dieta en el tracto gastrointestinal para dar ácidos grasos y monoacilglicerol. Se ha de
mostrado que la inhibición de la lipasa pancreática se produce al ser atacado el anillo de propiolactona del
fármaco por el resto Ser-152 de la enzima. La acilenzima así formada se hidroliza tan lentamente que la inhibi
ción se considera irreversible.
Acilenzima
que se hidroliza
lentamente
Ser-I52de la
lipasa pancreática
Figura 11.9. Inhibidores de lipasas. Orlistat.
2.3. Inhibidores de las fosfodiesterasas
El adenosilmonofosfato cíclico (AMPc) y el guanosilmonofosfato cíclico (GMPc) son «segundos mensajeros»

en la transmisión de la respuesta que producen los fármacos al actuar sobre sus receptores (véase el Capítulo 3).
En su formación y degradación participan enzimas como la adenilciclasa y la guanilciclasa (que los producen) y
las fosfodiesterasas (que catalizan la hidrólisis de la función diéster fosfato para dar 5'-AMP y 5'-GMP), respec
tivamente (Fig. 11.10).
Adenilciclasa
Figura 11.10. Estructura del AMP-c. su degradación y su biosintesis.

A medida que se van conociendo las dislintas familias de fosfodiesterasas (FDEs), se van descubriendo
inhibidores selectivos, lo que está permitiendo conocer el papel de estas enzimas en la regulación de la transmi
sión nerviosa postsináptica. la contracción del músculo cardíaco, la lipólisis. etc. El AMPc está implicado en
la respuesta inotrópica (contracción del músculo cardíaco) que producen los agonistas P-adrenérgicos
(Fig. 11.11). Por ello, algunos inhibidores de las FDEs actúan como agonistas adrenérgicos indirectos, utilizán
dose a nivel periférico como agentes antiasmáticos o inotrópicos, y a nivel central como antidepresivos.
Figura. 11.11. Papel del AMPc en la actuación de los agonistas P-adrenérgicos.
La familia de las FDE tiene varias formas, siendo sus inhibidores más conocidos las xantinas, como la
teofilina, que se utiliza como broncodilatador. y sus análogos (véase el Capítulo 16, apartado 3 y la Fig. 11.12).
Desgraciadamente, estos fármacos no son selectivos y tienen un índice terapéutico muy estrecho, habiendo
mostrado alteraciones sobre el corazón y el SNC. La papaverina, un alcaloide del opio que carece de acción
analgésica y se utiliza como relajante de la fibra muscular lisa y como vasodilatador, parece que actúa igual
mente elevando los niveles de AMPc por inhibición de las fosfodiesterasas.
Figura 11.12. Inhibidores de fosfodiesterasas no selectivos. Análogos de teofilina y papaverina.

En la búsqueda de inhibidores más selectivos, se han encontrado la amrinona y la milrinona (Fig. 11.13),
inhibidores de la FDE III que se utilizan en el tratamiento de la insuficiencia cardíaca congestiva; el rolipram,
un antidepresivo con efectos secundarios que se une a un lugar no catalítico de la PDE IV; y la nitracuazona. un
antiinflamatorio. Los efectos antidepresivos del rolipram se deben también a un aumento en los niveles de
AMPc presináptico y poslsináptico en las neuronas adrenérgicas. lo que se traduce en un aumento de la biosín
tesis y liberación de noradrenalina. La utilización de los inhibidores de las FDE en los procesos inflamatorios y
asmáticos deriva de la observación de una mayor actividad de las FDE en dichos procesos. Los fármacos men
cionados han dado lugar a infinidad de análogos.
Rolipram
R = CH,. X = CN; Milrinona
R - H. X = NH2; Amrinona
Figura 11.13. Estructura de otros inhibidores de fosfodiesterasas más selectivos.
En los últimos años, ha alcanzado gran popularidad un análogo de la xantina inhibidor de la FDE V, espe
cífica de los cuerpos cavémosos, el sildenafilo, comercializado por Pfizer con el nombre de Viagra (Fig. 11.14).
Esta isoenzima hidroliza selectivamente el GMPc. Su inhibición produce la liberación de óxido nítrico ( N=O),
que activa a su vez a la guanilciclasa. Ambos procesos elevan los niveles de GMPc. lo que produce la relajación
del músculo liso y el aumento del flujo sanguíneo del pene, restaurando la función eréctil.
Figura 11.14. Inhibidores de lósfodiesterasa V. Sildenafilo.
2.4. Inhibidores de las peptidasas (proteinasas o proteasas)
Las peptidasas o proteinasas son enzimas fundamentales. Unas liberan hormonas y neurotransmisores de natu
raleza peptídica. a partir de precursores inactivos, mientras que otras son responsables de poner fin a determina
das respuestas biológicas mediadas por aquéllos. Su acción está a su vez regulada por inhibidores endógenos se
lectivos. El uso de inhibidores de las peptidasas, de origen natural o sintéticos, para regular determinados
procesos patológicos está teniendo un avance espectacular en los últimos años, sobre todo desde el descubri
miento del captopril. El diseño de inhibidores de peptidasas de máxima actividad se basa actualmente en estra
tegias de síntesis, a veces muy sofisticadas, en los estudios de cinética enzimática y en la modelización molecu
lar. El principal escollo que encuentran para ser desarrollados y aplicarse en terapéutica es la incapacidad de las
estructuras peptídicas para su administración por vía oral, debido a su fácil hidrólisis a causa de la existencia en
el estómago de varias proteasas inespecíficas y a su mala penetración celular. Por ello, se desarrollan estructuras
peptidomiméticas (véase el Capítulo 8).
Las proteasas presentan, en general, especificidad de sustrato; es decir, hidrolizan un determinado enlace
peptídico según sea la estructura de una serie de aminoácidos y, muy especialmente, del residuo Pj. que es el
que va a ser liberado en la ruptura como extremo amino del aminoácido o péptido (FLNR?) (Fig. 11.15).
Extemo Enlace que se hidroliza Externo C-

amino-lemúnal 1 terminal
—Gly—Val—Gly—Leu—Phe—Pro—
P3 P2 P, *. P* 2 P-3
P
Figura 11.15. Denominación de los residuos de una secuencia en las inmediaciones del enlace peptídico que hidroliza una
proteasa.
2.4.1. Inhibidores de proteasas de serina. Elastasas y trombina
Las peptidasas poseen diferentes mecanismos de catálisis. Las llamadas proteinasas de serina actúan, en un
primer paso, de fonna muy semejante al mecanismo que ya se ha mencionado para la acetilcolinesterasa. uti
lizando un residuo de serina del sitio activo como nucleófilo (Fig. 11.16). Ese hidroxilo se activa por un resto
de imidazol de una histidina que se encuentra en sus proximidades, y ataca al grupo carbonilo de un enlace
amida del sustrato (R'CO-NHR2) para formar un producto intermedio tetraédrico. Un grupo carboxílico de
un resto de ácido aspártico parece imprescindible igualmente para colaborar con el imidazol en la transferen
cia del protón.
Figura 11.16. Representación esquemática del mecanismo de catálisis de proteinasas de serina.

INHIBIDORES ENZ1MÁTICOS FARMACODINÁM1COS 285
El oxígeno aniónico del intermedio tetraédrico así formado se estabiliza mediante un enlace de hidró
geno, uniéndose a dos protones amídicos convenientemente situados, para finalmente romperse y dar el
péptido con carboxilo terminal (H2NR2) y una acil-enzima que, a través de un segundo intermedio tetraédri
co, se hidroliza para dar el otro producto (R'CO2H). Esta secuencia es reversible y puede utilizarse con fines
sintéticos.
Las protcasas de serina se clasifican, en función de su especificidad de sustrato, en tres tipos: tipo tripsina,
que rompe sustratos que contienen aminoácidos en P’t cargados positivamente; tipo quimotripsina, que prefiere
en dicho lugar aminoácidos aromáticos o alifáticos de cadena larga; y tipo elastasa. que prefiere aminoácidos
alifáticos de cadena corta, como Ala o Val.
2.4.1.1. Inhibidores de las elastasas
Las elastasas de leucocitos y de neutrófilos humanos son miembros de una familia de proteasas que se liberan
en respuesta a varios estímulos inflamatorios y son capaces de degradar proteínas como el colágeno o la elasti-
na. En circunstancias normales, su actividad está controlada por inhibidores de proteinasas naturales, pero en
ciertos estados patológicos la regulación se rompe resultando una actividad elastolítica incontrolada, que se aso
cia a enfermedades como la artritis reumatoide o el enfisema.
Los inhibidores de las elastasas se proponen para cl tratamiento del enfisema pulmonar, ya que pueden ac
tuar como los factores de inhibición naturales que se han perdido.
En general, la inhibición irreversible de las proteasas de serina, como ocurre con la ACE, se produce
por organofosfatos y estructuras relacionadas, pero los más prometedores en el caso de las elastasas son los
inhibidores dirigidos al centro activo, cuyo carácter puede ser más o menos irreversible. Entre ellos, se en
cuentran péptidos con secuencias que se asemejan al sustrato que poseen un grupo aldehido situado cerca del
enlace a hidrolizar. Este grupo forma un aducto semiacetálico con el residuo de serina del sitio activo de la
proteasa, que puede estabilizarse además por enlaces de hidrógeno con grupos NH de la enzima (véase el
aducto que forma la proteasa A de Streptomyces griseus con la quimostatina, que es un inhibidor de este tipo,
en la Figura 11.17).
NH Grupos amida de la enzima
Análogo del estado

de transición tetraédrico
Quimostatina
(inhibidor) Complejo enzima-inhibidor
Figura 11.17. Unión de la quimostatina al sitio activo de una proteinasa de serina.
Las estructuras de estos aductos son semejantes a los intermedios tetraédricos que se forman en la hidróli
sis de un péptido catalizada por proteasas de serina. Sin embargo, estos compuestos no suelen ser suficiente
mente selectivos para ser utilizados como inhibidores de elastasa. y tienen una vida muy corta, debido a la fácil
oxidación del grupo aldehido. Por ello, se han desarrollado para este propósito trifluorometilcetonas basándose
en la deficiencia electrónica y. por tanto, la reactividad para enlazarse al grupo OH de la serina. de estos grupos
carbonita (Fig. 11.18).
Inhibidor de elastasa
Figura 11.18. Enlace de una trifluorometilcetona a una proteasa de serina. Estructura de un inhibidor de elastasa diseñado
sobre esta base.
Los ácidos borónicos y los boronatos adicionan fácilmente un ion hidróxido, para formar aducios que se
asemejan también al intermedio tetraédrico de la hidrólisis de un péptido catalizada por una proteasa de serina.
Por ello, también se han diseñado péptidos con residuos de ácido a-aminoalquilborónico como inhibidores de
elastasa (Fig. 11.19).
Figura 11.19. Adición de una proteasa de serina a boronatos. Estructura de un inhibidor de elastasa diseñado
sobre esta base.
También se conocen inhibidores de elastasa con estructura heterocíclica. algunos de los cuales actúan co
mo inhibidores suicidas.
En la Figura 11.20, se representa el mecanismo propuesto para un inhibidor de este tipo (1).
El ataque nucleófilo de la serina del sitio activo origina una O-acilenzima que, tras la eliminación de HCI
a través de una catálisis ácida, origina el intermedio I. que se une irreversiblemente a un resto de histidina de la
enzima para dar 2.
Dado que las PBPs y las |}-lactamasas (véase el Capítulo 10) son proteasas de serina. algunos de sus inhi
bidores, como el éster bencílico del ácido clavulánico, han resultado ser también inhibidores de elastasas. Tras
INHIBIDORES ENZIMÁTICOS IARMACODINÁMICOS 287
Enzima inaclivada
Figura 11.20. Inhibidor suicida de la elastasa con estructura helerocíclica.
una búsqueda extensa, se ha identificado una sulfona de cefalosporina que posee una potente actividad inhibi
dora de elastasas (Fig. 11.21). Es importante destacar la configuración C-7ct de este compuesto, ya que es la
configuración opuesta la que se requiere para que estos derivados se enlacen a las PBPs. Estudios de modelado
molecular han demostrado que el sustituyeme en C-4 se sitúa en los lugares St'-S/ de la elastasa (complementa
rios de Pi'-P/, véase la Fig. 11.27). Los datos cristalográficos, los estudios bioquímicos y la caracterización de
los complejos enzima-inhibidor indican un mecanismo de inhibición suicida, que comienza con el ataque nucleófi-
lo de la Ser-195, con apertura del anillo de P-lactama y la expulsión del grupo aciloxi en C-3 del cefemo. A con
tinuación, se produce el enlace con el residuo His-57.
O O
Figura 11.21. Inhibición de elastasas por P-lactamas.

2.4.1.2. Inhibidores de la trombina
La trombina es una proteasa de serina que pertenece a la familia de la tripsina y se caracteriza porque ataca a en
laces peptídicos contiguos a residuos de aminoácidos básicos, como la lisina o la arginina. Se forma en la san
gre. a partir de la protrombina, cuando se activa la cascada de la coagulación. Sus inhibidores, algunos de los
cuales, como el argatrobán o la argipidina. se utilizan ya en terapéutica como anticoagulantes y antitrombóticos
en vez de la heparina, poseen o imitan las cadenas laterales de Lys y Arg (Fig. 11.22). Se conocen otros muchos
inhibidores de trombina cuyo desarrollo depende no tanto de su actividad sino también de la mejora de sus pro
piedades farmacocinéticas. especialmente de una buena biodisponibilidad tras su administración por vía oral.
Residuo de Arginina
Argatrobán (argipidina)
Figura 11.22. Inhibidores de la trombina.
2.4.2. Inhibidores de las metaloproteasas
2.4.2.1. Inhibidores de la enzima conversora de la angiotensina (EGA)
El sistema renina-angiotensina. que transforma el angiotensinógeno en angiotensina I y II. está íntimamente re
lacionado con los valores de la tensión arterial y su control es de importancia capital (Fig. 11.23).
Hidrólisis
I
Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Pre-His-Leu-Val-Ile-His-Proteína
I 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Angiotensinógeno (Sustrato)
Renina
Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu
1 2 3 45678|9 10
(Sustrato) Angilcnsina I
cha Hidrólisis
Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe + H-His-Leu-OH
I 2 3 4 5 6 7 8
Angiotensina II
(Péptido activo)
Figura 11.23. Transformaciones del sistema renina-angiotensina.

La renina se libera a la sangre en el riñón en respuesta a una baja concentración de Na' o una baja presión
sanguínea, provocando la ruptura de una a-globulina que se sintetiza en el hígado y circula en la sangre, el an-
giotensinógeno. Se libera así el decapéptido angiotensina I (A I), que se hidroliza en el pulmón, los riñones y
otros tejidos, en una reacción catalizada por una carboxipeptidildipéptido hidrolasa habitualmente conocida
como enzima conversora de la angiotensina (ECA), para dar el octapéptido angiotensina II (A II). La angioten
sina II es uno de los agentes vasoconstrictores más potentes. Al actuar sobre sus receptores, contrae directamen
te las arteriolas y produce una inmediata elevación de la presión sanguínea. En una reacción metabólica catali
zada por una aminopeptidasa, la A II se transforma en angiotensina III (A III). Tanto la A II como la A III
estimulan la liberación de aldosterona, una hormona esteroidea que controla la homeostasis aumentando la re
absorción renal de sodio, lo que provoca un incremento gradual del líquido extracelular y un incremento soste
nido de la presión sanguínea (Fig. 11.24). La inhibición de las enzimas que intervienen en este proceso ha sido
objeto de múltiples investigaciones, especialmente en relación con la ECA.
Hígado Corazón, riñones, cerebro

vasos sanguíneos
-| ANGIOTENSINÓGENO |
Renina Inhibidores de la renina
Proteasas ANGIOTENSINA I |
Proteasas ECA IECA Respuestas celulares:

Vasoconstricción
ANGIOTENSINA II Liberación de hormonas
Reabsorción de sodio
Crecimiento celular
Antagonistas
del receptor A II
Figura 11.24. Mecanismos por los que la angiotensina II produce hipertensión y lugares de acción de fármacos
antihipertensores.
La enzima conversora de angiotensina pertenece al grupo de metaloproteasas que contienen Zn. que com
prende endoproteasas (como la termoiisina y la colagenasa) y exoproteasas (como las aminopeptidasas, las car-
box ipeptidasas y las dipcptidilcarboxipeptidasas). A este último subtipo pertenece la ECA. El ion Zn‘* activa el
grupo carbonita de la amida como un ácido de Lewis, mientras que el agua se activa como nuclcófilo por la ca
tálisis básica de un resto de glutamato (Fig. 11.25). Aunque la interacción con el metal es una entre las muchas
implicadas en el reconocimiento de la enzima por su sustrato (o sus inhibidores), dado que el Zn2* se coordina
con otros centros ricos en electrones, como fosforamidatos o fbsfonam ¡datos, mercaptidas, ácidos carboxílicos
y carboxilatos, estos agolpamientos suelen estar presentes en los inhibidores.
> 2
HO ]। NHR*
R’
Figura 11.25. a) Mecanismo de la catálisis de la ECA. b) Grupos que se coordinan bien con Zn'
.*
El desarrollo de los inhibidores de la ECA partió de los estudios realizados con péptidos aislados de vene
nos de serpiente. Éstos mostraron que el nonapéptido Glu-Trp-Pro-Arg-Pro-Glu-Ile-Pro-Pro era un potente an-
tihipertensor y. administrado por vía parenteral, resultó eficaz en el tratamiento de muchas formas de hiperten
sión. El residuo Pro terminal de este compuesto era muy importante para la inhibición. La búsqueda de
inhibidores específicos y potentes de ECA activos por vía oral tuvo en cuenta la estructura del sitio activo, de
terminada por rayos X. de otra metaloproteína de Zn2’. la carboxipeptidasa A, que cataliza la hidrólisis de un
sólo aminoácido del extremo C-terminal. En dicha enzima, el péptido sustrato de la reacción se mantiene unido
al centro activo por un enlace iónico entre el grupo carboxilato terminal y un residuo de arginina cargado positi
vamente de la enzima, así como por interacciones hidrófobas entre el aminoácido amino-terminal del péptido y
una región hidrófoba del centro activo. De esta forma, el grupo C=O del último enlace peptídico que debe hi-
drolizarse se sitúa adyacente al ion metálico.
Se pensó que el sustrato de la ECA se situaría de forma semejante. Dado que el último enlace peptídico
aquí no se hidroliza. estaría unido a la enzima a través de un enlace de hidrógeno, situando al penúltimo grupo
C=O próximo al Zn2*. Se llegó así a la succinilprolina. que era un débil inhibidor. A través de modificaciones
estructurales, de las que la más importante fue la sustitución del grupo C=O, que se enlaza al Zn2* por un grupo
SH y. en segundo lugar, la introducción de un metilo en el carbono contiguo al carbonilo amídico, se llegó al
captopril, activo por vía oral y con constante de inhibición de rango nanomolar (Fig. 11.26).
Grupos que se coordinan con Zn**
Succinil-L-prolina Captopril
R = H: Ácido enalaprílico
R = Ei; Enalapril (profármaco)
Lisinopril
Figura 11.26. Inhibidores de la ECA activos por vía oral.
En otros análogos, como el ácido enalaprílico, el grupo que se coordina con el ion es, de nuevo, el car-
boxilo. En éstos, para que su absorción en el tracto gastrointestinal sea adecuada, es frecuente su transfor
mación a profármacos de tipo éster (véase enalapril), que se bioactivan por esterasas sanguíneas. Se ha com
probado que el residuo P\ puede variar considerablemente. Un análogo del ácido enalaprílico activo por vía
oral sin necesidad de derivarlo a un profármaco es el lisinopril, que contiene un residuo de lisina en dicho
lugar. En la Figura 11.27, se representa esquemáticamente la interacción entre la enzima y algunos de sus
inhibidores.
Figura 11.27. Interacción del captopril y del ácido cnalaprílico con el sitio activo de la ECA.
El grupo metilo de la cadena del captopril estabiliza la conformación bioactiva de éste. Estudios con aná
logos rígidos, en los que dicho metilo forma parte de un segundo heterociclo, han demostrado que el tamaño óp
timo de este ciclo es de siete eslabones. Estos heterociclos fijan un ángulo de torsión óptimo (de 165-166°)
(Fig. 11.28).
n=3; T = 165-166°
Figura 11.28. Inhibidores de la ECA de conformación restringida.
2.4.2.2. Inhibidores de encefalinasa y colagenasa
Otra importante metaloproteasa dependiente de Zn2* es una endopeptidasa neutra enlazada a la membrana de
muchos tejidos, denominada encefalinasa. El nombre proviene de que entre sus sustratos se encuentran los pép
tidos opioides denominados encefalinas (Met-encefalina y Leu-encefalina. véase el Capítulo 15). que pueden
también hidrolizarse por otras Zn2* metaloproteasas que se indican en la Figura 11.29.
_ í Tyr-Gly-GIv-Phe-Mct
Encefalinas I
[ Tyr-Gly-Gly-Phe-Lcu
1,2.3 4 5
H2 N — Tyr -|- Gly 4- Gly — Phe -|- Leu — OH (o Mct-OH)
Aminopcptidasa Dipeptidil Encefalinasa
aminopeptidasa
Figura 11.29. Encefalinas. Enzimas implicadas en su hidrólisis.
Los inhibidores de la encefalinasa son agonistas indirectos de los receptores opiodes y. por tanto, analgé
sicos potenciales. Su diseño se ha basado en la analogía con el lugar activo de la ECA, pero han de ser selectivos
para no tener efectos hipotensores. En la Figura 11.30, se indican algunas estructuras en las que se observa a la
fenilalanina como residuo P't. que es importante para la selectividad. Puede también observarse que. además de
los grupos SU (liorfano) y CO2H. ya mencionados en los inhibidores de la ECA como ligandos de Zn2*, se han
utilizado los grupos fosfónico c hidroxámico (ketalorfano).
fosfónico
Figura 11.30. Ejemplos de inhibidores de la encefalinasa.
La colagenasa es otra Zn2’ metaloprotcasa que hidroliza el colágeno. Sus inhibidores pueden ser útiles en
procesos, como la artritis reumatoide. caracterizados por una excesiva proteólisis de colágeno. Una vez que se
conoció la especificidad del residuo P\ y el hecho de que el residuo P*> debe ser hidrófobo, puede entenderse el
diseño de alguno de los compuestos activos encontrados hasta el momento (Fig. 11.31).
Hidrólisis
P3 Pj P| | P. P'z Pj
- Gly - Pro - No Pro - Gly - Leu - No Pro - Gly -
(hidrófobo)
Figura 11.31. Secuencia de aminoácidos preferida por la colagenasa. Ejemplo de inhibidor.
2.4.3. Inhibidores de proteasas de aspártico. Inhibidores de la renina
Uno de los pocos inconvenientes de los inhibidodres de la ECA como antihipertensores. que parece estar
asociado con la inhibición de la degradación de bradicinina (un péptido con efectos opuestos a la angioten-
sina II, ya que es vasodilatador y diurético), podría superarse utilizando inhibidores de la renina, una pro-
teasa de aspártico. Las peptidasas de aspártico (entre las que se encuentra la proteasa VIH-1), catalizan la
adición directa de agua al enlace amídico. Utilizando dos grupos carboxilo de dos restos de aspártico del si
tio activo, la renina transfiere un protón al oxígeno del grupo carbonilo amídico (catálisis ácida), a la vez
que el otro anión carboxilato colabora en el ataque nucleófilo del agua por un clásico mecanismo de catáli
sis básica (Fig. 11.32). Muchos inhibidores de proteasas de aspártico se han diseñado tomando como mode
lo la pepstatina, un péptidomimético natural que inhibe eficazmente a muchas proteasas de aspártico, pero
no a la renina.
a)
Figura 11.32. a) Mecanismo de catálisis propuesto por las proleinasas de aspártico. b) Pepstatina.
La pepstatina contiene un aminoácido no convencional que se llama estatina [ácido (3S.4S) 3-hidroxi-4-
amino-6-metilheptanoico]. Diversos estudios han demostrado que la estatina es un análogo del intermedio tetraé-
drico implicado en la hidólisis del penúltimo enlace peptídico del extremo C-tenminal y, por tanto, un análogo
del estado de transición. Si se compara su estructura con la de otros isósteros del enlace peptídico análogos al
estado de transición tetraédrico de tipo hidroxietileno (Fig. 11.33), puede observarse que la estatina carece del
residuo P',. Muchos péptidos que contienen estatina (SCRIP, statine-containing renin inhibitor peptides) o aná
logos más lipófilos, como cl ácido (3S,4S)-3-hidroxi-4-amino-5-cicIohexiIpentanoico, son inhibidores potentes
de renina. Otros poseen un residuo de estatina oxidado a cetona (estatona), cuya electrofilia se ha aumentado
por la introducción de flúor en el carbono en a a fin de favorecer la hidratación a gem-diol para originar estruc
turas análogas del estado de transición tetraédrico.
OH O
«Dipcptido» análogo al estado
de transición tetraédrico de Análogo de estatina
tipo hidroxictilcno más lipófilo
OH OH
Figura 11.33. Estructura de algunos inhibidores de la renina.
3. INHIBIDORES DE ENZIMAS QUE TIENEN AL FOSFATO DE PIRIDOXAL

COMO COFACTOR
El fosfato de piridoxal (PLP. pyridoxal 5‘-phosphate o vitamina Bf.) es cofactor de ¡numerables reacciones cata
lizadas por enzimas que están implicadas en el metabolismo de los aminoácidos.
Como muchos aminoácidos son neurotransmisores y otros son precursores de aquéllos, la inhibición de
sus biotransformaciones tiene un gran interés, aunque hasta ahora sólo algunos de estos inhibidores han encon
trado aplicación terapéutica, fundamentalmente en el tratamiento del Parkinson.
Todas las transformaciones en las que está implicado el fosfato de piridoxal se inician con la formación de
una aldimina, por reacción de un residuo de lisina de la enzima y el grupo formilo en la posición 4 del cofactor.
Este derivado servirá como reactivo en reacciones metabólicas de transaminación. descarboxilación y racemiza-
ción, entre otras, en las que intervienen como sustratos los aminoácidos.
La condensación de un aminoácido con la aldimina anteriormente citada da lugar a una nueva aldimina, o
base de Schiff, que se transforma por ruptura de los enlaces del carbono en a.
En la Figura 11.34. se representa la reacción de transaminación catalizada por glutamato transaminasa
que produce ácido a-oxoglutárico.
INHIBIDORES ENZIMÁT1COS FARMACODINÁM1COS 295
Piridoxamina
Figura 11.34. Reacción de transaminación catalizada por glutamato transaminasa y fosfato de piridoxal como cofactor.
Para que se produzcan las transformaciones, el complejo enzima-sustrato-cofactor debe tener libre rota
ción alrededor del enlace N-Ca. En este caso, el enlace Co-H se dispone ortogonalmente respecto al plano del
anillo de piridinio, fijando la enzima dicha conformación. En esta conformación, tiene lugar el máximo solapa-
miento entre la carga negativa que se está desarrollando por abstracción del protón en dicha posición y el siste
ma conjugado deficiente de electrones (Fig. 11.35). La posterior protonación origina, en vez de una aldimina
(Fig. 11.34), una cetimina, que por hidrólisis conduce al a-cetoácido.
Figura 11.35. Geometría requerida para que se produzca la desprotonación.

En general, las enzimas dependientes de fosfato de piridoxal se inhiben por compuestos con grupos fun
cionales capaces de atacar al grupo formilo de la posición 4 del cofactor (hidroxilaminas o hidrazinas, por ejem
plo), semejantes a sus sustratos naturales. Muchas de las investigaciones se him dirigido al diseño de inhibidores
suicidas. Comentaremos algunos de ellos y su importancia terapéutica.
3.1. Inhibidores de la y-aminobutirato aminotransferasa (GABA-T)
La epilepsia es una enfermedad del SNC caracterizada por la aparición de fenómenos convulsivos recurrentes.
Se desconocen los mecanismos por los que se producen las descargas eléctricas, pero las convulsiones son el re
sultado de un balance inadecuado de dos de los principales neurolransmisores cerebrales: el ácido i.-glutámico
(un ncurotransmisor excitador) y el GABA (un neurotransmisor inhibidor). Los niveles bajos de GABA se rela
cionan con la aparición de convulsiones. Una disfunción del GABA también está asociada a otras enfermeda
des, como el Parkinson (véase el Capítulo 15).
La inhibición de la y-aminobutirato aminotransferasa (GABA-T), una de las enzimas que controlan el me
tabolismo del GABA (Fig. 11.36), requiere un alto grado de especificidad, ya que la enzima que controla su bio-
síntesis, la glutamato descarboxilasa (GAD), también depende del fosfato de piridoxal. Si la inhibición de la
primera no es selectiva, podría inhibirse también la segunda, lo que originaría una disminución de GABA en el
cerebro y la inducción de convulsiones.
Figura 11.36. Biosíntesis y metabolismo del GABA.
El GABA es un anticonvulsivo excelente, pero no atraviesa la barrera hematoencefálica. Una sustancia

capaz de atravesarla y de inhibir selectivamente la GABA-T tendría el mismo efecto. Otra forma de aumentar
los niveles de GABA, que se utiliza en el tratamiento del Parkinson, consiste en administrar un inhibidor rever
sible de la semialdehído succínicio deshidrogenasa, el valproato sódico (2-propil-pentanoato sódico). Al acu
mularse el semialdehído succínico disminuye la actividad de la GABA-T (Fig. 11.36), incrementándose la con
centración del neurotransmisor.
Entre los múltiples inhibidores de GABA-T, la vigabatrina [(Sj-y-vinil-GABA] y el y-fluorometil-GABA
son inhibidores suicidas, cuyo mecanismo de acción se esquematiza en las Figuras 11.37 y 11.38. Los inhibido
res que presentan insaturaciones se activan a iminas a,p-insaturadas, que posteriormente se enlazan de forma
covalcnte a la enzima a través de una adición nucleófila conjugada.
Figura 11.37. Mecanismo de inhibición de la GABA-T por análogos de GABA insaturados. Vigabatrina.
En el caso del y-fluorometilderivado. la reacción se inicia igualmente con la formación de la aldimina, se
guido de la eliminación de anión fluoruro. Tras una reacción de transaminación con la enzima, se forma una
nueva imina y se libera una enamina. Finalmente, ésta se adiciona covalentemcnte como C-nucleóftlo a la imina
(Fig. 11.38).
Figura 1138. Mecanismo de inhibición de la GABA-T por y-fluorometil-GABA.

La gabaculina (Fig. 11.39) es una neurotoxina aislada de Streplomyces toxacaenis que, aunque no se utili
za en terapéutica, inhibe la GABA-T actuando como sustrato. Al convertirse en una aldimina, se aromatiza con
la ayuda de un grupo básico de la enzima, con lo que ésta queda inactivada al formarse un enlace estable con la
piridoxamina (véase la Fig. 11.34).
Figura 1139. Inactivación de la GABA-T por gabaculina.
3.2. Inhibidores de otras transaminasas de aminoácidos. Aspartato aminotransferasa (AAT)
La aspartato aminotransferasa (AAT) es una de las enzimas dependientes de fosfato de piridoxal mejor estudiadas.
Se ha investigado su inactivación por diferentes tipos de inhibidores, aunque no ha sido posible la inhibición especí
fica de las enzimas bacterianas, que podría haber dado lugar a interesantes quimioterápicos. La AAT se inhibe por el
ácido D- y L-hidrazinosuccínico. el ácido 2-metilaspártico y el ácido maleico. así como por un gran número de inhi
bidores suicidas que incluyen la L-serina-O-sulfato. el ácido metilaspártico y el ácido (27?,3S)-3-cloroaspártico (Fi
gura 11.40). El mecanismo de esta inhibición para la L-serina-O-sulfato es análogo al indicado para la inhibición de
la GABA-T por el fluorometil-GABA, sólo que en este caso es el anión bisulfato, y no el fluoruro, el grupo saliente.
HO,C-CH —CH2CO2H CH, Hx zH

Ñh-nh2 HOjC - C -CH 2 -CO2H ,C=C
Inhibidores ho2c co2h
competitivos nh2
Ácido hidrazinosuccínico Ácido inalcico
Ácido 2-metilaspártico
NH.
CO,H
Inhibidores Cl — Grupo saliente

suicidas Grupo saliente
L-serina-O-sull'ato
Ácido (2R. 3S)-3-cloroaspártico
Figura 11.40. Inhibidores de la aspartato aminotransferasa.
3.3. Inhibidores de descarboxilasas de aminoácidos aromáticos (AADC)
Aunque algunos inhibidores de descarboxilasas de omitina tienen interés en la quimioterapia antitumoral y anti-
protozoaria, se comentarán aquí ciertos inhibidores de AADC (aromatic amino acid decarboxylases), que se
utilizan como coadyuvantes en el tratamiento del Parkinson y como antihipertensores. La noradrenalina se bio-
sintetiza en las terminaciones nerviosas de las fibras postganglionares a través de una serie de reacciones a par
tir de la tirosina (Fig. 11.41, véase el Capítulo 13).
Tirosina
hídroxilasa
Dopamina
p-oxídasa
Dopamina
Figura 11.41. Biosíntesis de la dopamina y la noradrenalina.
Los inhibidores de las descarboxilasas de aminoácidos aromáticos, unas de las enzimas implicadas en esta
secuencia, se han diseñado como fármacos antihipertensores potenciales basándose en el hecho de que una dis
minución en la biosíntesis de noradrenalina (NA) puede vaciar las vesículas donde se almacena en las termi
naciones nerviosas y producir un descenso de la presión sanguínea. Aunque se conocen muchos inhibidores in
vitro de estas enzimas, solamente algunos son activos como antihipertensores in vivo, probablemente porque el
paso limitante de la velocidad en la biosíntesis de NA está gobernado por la enzima tirosina hidroxilasa. Sin em
bargo, inhibidores de AADC, como la serazida y la carbidopa (Fig. 11.42), son útiles en el tratamiento de la en
fermedad de Parkinson, administrándose junto con la t-DOPA para evitar su descarboxilación periférica antes
de que ésta atraviese la barrera hemaloencefálica y penetre en los ganglios básales del cerebro para descarboxi-
larse allí y liberar dopamina. Ambas estructuras, junto con la a-metil-DOPA, son inhibidores competitivos que
deben enlazarse al grupo aldehido del fosfato de piridoxal por sus grupos NH>. Otros inhibidores «suicidas» son
la a-fluorometil-DOPA y la a.a-difluorometil-DOPA. cuyo mecanismo de inactivación enzimática es semejan
te en sus últimas etapas al del a-fluorometil-GABA, comentado en la Figura 11.38.
y fosfato de piridoxal
Figura 11.42. Inhibidores de la DOPA-descarboxilasa.

4. INHIBIDORES DEL CITOCROMO P-450
Dada la gran variedad de estructuras que son capaces de oxidarse por estas enzimas (véase el Capítulo 7), es
comprensible que se conozcan muchos análogos de aquéllas capaces de producir su inhibición reversible o irre
versible. Muchos de estos inhibidores son ligandos de hierro que. al mismo tiempo que se enlazan a éste, se
unen al mismo lugar de la enzima que cl sustrato. En general, se descubren como consecuencia de la interacción
inesperada e indeseable de ciertos fármacos que inhiben el metabolismo de otros. Los más selectivos han en
contrado utilidad terapéutica, como veremos en los ejemplos seleccionados a continuación.
4.1. Inhibidores de la biosíntesis de hormonas esteroideas
En la biosíntesis de hormonas esteroideas a partir de colesterol están implicadas varias enzimas del citocromo
P-450. El paso determinante de la velocidad en estos procesos es la conversión del colesterol a pregnenolona,
por la enzima que rompe la cadena lateral del colesterol (CSCC, cholesterol side chain cleavage enzyme.
Fig. 11.43). La pregnenolona se oxida e isomeriza después a progesterona. y ésta a androstendiona a través de
una I7a-hidroxi-17.20-liasa. La posterior reducción de la androstendiona origina testosterona.
3|}-Dcshidrogenasa
y A-'-A^ isomcrasa
I7a-Hidroxi-
17.20-liasa
Androstendiona
Figura 11.43. Biosíntesis de hormonas esteroideas a partir de colesterol.

El glucocorticoide cortisol (hidrocortisona) y el mineralocorticoide aldosterona se sintetizan, a partir de la

pregnenolona, por la catálisis de hidroxilasas que producen hidroxilaciones consecutivas en las posiciones 17a
y 11P o 21. Upy 18, respectivamente, mientras que la androstendiona y la testosterona, a través de dos hidroxi
laciones en C-19 para dar un aldehido que posteriormente se oxida, y una última oxidación seguida de aromati
zación con pérdida de anión formiato. se transforman en estrona y estradiol, respectivamente (Fig. 11.44). La
aromatasa. que es la enzima que cataliza estas reacciones, se localiza en el ovario de las mujeres, pero tras la
menopausia, lo hace preferentemente en los tejidos grasos.
Paso I Paso 2
H2O.O2, NADPH H2O. O2. NADPH
Androstendiona
Paso 3
Ojê-
T
rn®
Estrona
Figura 11.44. Mecanismo de acción de la aromatasa.
4.1.1. Inhibidores de la aromatasa
La producción de estrógenos está asociada a ginecomastia. endometriosis, y cáncer de endometrio y mama. Los
tumores de mama dependientes de la concentración de estrógenos pueden tratarse, tras la cirugía, con antago
nistas del receptor estrogénico, como el tamoxifeno (véase el Capítulo 17), o con inhibidores de la aromatasa. a
fin de inhibir la biosíntesis de estrógenos. Entre estos últimos, se encuentra la aminoglutetimida (Fig. 11.45), un
fármaco introducido en terapéutica como antiepiléptico (de ahí sus efectos secundarios), cuyo efecto antiestro-
génico fue detectado en la clínica. La aminoglutetimida es un inhibidor reversible de la aromatasa, existiendo
una interacción entre el nitrógeno amínico y el átomo de hierro de porftrina del citocromo P-450, aunque es pro
bable que el anillo de piperidindiona sea el responsable de la interacción con el sitio activo de la enzima. Tam
bién se observó que algunos antifúngicos inhibidores de otra enzima P-450 de los hongos (la 14a-desmetilasa,
véase el Capítulo 9) como el ketoconazol o el econazol, inhibían otras enzimas P-450. entre las que se encontra
ba la aromatasa. En ellos, es un nitrógeno del azol (imidazol o triazol, generalmente) el que se coordina con el
Fe. Por eso, se prepararon análogos que fuesen más selectivos hacia la aromatasa, encontrándose fármacos anti-
neoplásicos, como el fradozol, el vorozol, cl letrozol, el arimidex y el anastrozol. mucho más activos y seguros
que la aminoglutetimida.
Aminoglutctimida Vorozol
Letrozol
Arimidex Anastrozol
Figura 11.45. Algunos inhibidores de la aromatasa diseñados a partir de la observación de efectos secundarios en otras
aplicaciones terapéuticas.
Algunos antineoplásicos inhibidores de la aromatasa basados en el mecanismo (inhibidores «suicidas»)

son derivados de la androstendiona (un sustrato de la reacción) funcionalizados adecuadamente en C-4 o en
C-19. Entre ios primeros están los análogos de 4-hidroxiandrostendiona, para los que puede proponerse el me
canismo indicado en la Figura 11.46. Entre los funcionalizados en C-19 se encuentra el plomestano.
Figura 11.46. Mecanismo propuesto para los inhibidores «suicidas» de aromatasa análogos de 4-hidroxiandrostendiona.
Inhibidores funcionalizados en C-19.
Actualmente, se utilizan en el tratamiento del cáncer de mama dependiente de estrógenos varios inhibido
res de la aromatasa muy potentes, bien tolerados y muy selectivos (como el anastrozol, Fig. 11.45). Sin embar
go, la respuesta a estos fármacos es menor de la esperada. Esta relativa falta de eficacia se debe, al parecer, a
que la formación de estrógenos en dichos tumores proviene fundamentalmente de la vía de la estrona sulfatasa
(E,-STS). que hidroliza el sulfato de estrona (E,S) a estrona (Fig. 11.47 y Capítulo 17), en lugar de la vía de la
aromatasa (Fig. 11.44). Por otra parte, los efectos estrogénicos pueden producirse, además de por la estrona y el
estradiol, por el 5-androsten-3|3,17|}-diol (adiol), que proviene de la hidrólisis, catalizada por la DHEA-sulfata-
sa, del sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEAS). Por ello, actualmente se estudian inhibidores de sulfatasas
para su utilización en solitario o en combinación con inhibidores de la aromatasa.
DHEA-STS
Efectos
androgénicos
Inhibición
Inhibición
F igura 11.47. Biosíntesis de andrógenos y estrógenos catalizada por sulfatasas de esteroides. Acción de los inhibidores de
estas enzimas en tumores de mama dependientes de estrógenos. RA = receptor de andrógenos. RE = receptor de estrógenos.
4.1.2. Inhibidores de hidroximetilglutaril-coenzima A reductasa (HMGCoA reductasa).

Biosíntesis del colesterol
El depósito de placas grasas en las paredes internas de las arterias Se denomina aterosclerosis. Este proceso
causa enfermedades coronarias y es responsable de un alto índice de mortalidad en el mundo occidental. Uno
de los principales factores que favorecen su desarrollo es el exceso de una lipoproteína de baja densidad
(LDL = «low density lipoprotein»), que contiene fundamentalmente colcsterol.
En los humanos, más de la mitad del colesterol total deriva de su biosíntesis en el hígado, un proceso
que requiere más de 20 enzimas a partir de acetil-CoA, y cuyo paso limitante de la velocidad es el que catali -
za la enzima hidroximetilglutaril-coenzima A reductasa (HMGCoA reductasa), que transforma el sustrato
HMG-CoA en ácido mevalónico (Fig. 11.48).
Figura 11.48. Reacción catalizada por la enzima HMGCoA reductasa.
En la búsqueda de inhibidores de la HMGCoA reductasa, útiles como antihiperlipémicos. se estudiaron

muchísimos metabolites de microorganismos, encontrándose finalmente la compactina o mevastatina en varias
especies del género Penicillium.
A partir del hongo Monascus ruber y de Aspergillus terreus, se aisló otro compuesto más activo, la mevi-
nolina, que es el derivado mediado en la posición 6 al que posteriormente se denominó lovastatina. La simvas-
tadna es un análogo sintédco de lovastatina.
Son lactonas cíclicas cuya forma activa es la de hidroxiácido, en la que puede apreciarse su carácter de in
hibidores análogos del estado de transición. Según los modelos, la porción estructural de hidroxiácido ocuparía
el sitio activo de la enzima (a la que se acopla la unidad de cinco carbonos del sustrato), mientras que el resto
ocuparía una región hidrófoba adyacente.
Como resultado de estas interacciones, la disociación del complejo E.I es muy lenta.
Tras varias modificaciones estructurales de los compuestos prototipos, se encontró la necesidad de un
grupo carboxilato y de los grupos hidroxilo dispuestos en una configuración entro. Otros inhibidores muy po
tentes de la hidroximetilglutaril-coenzima A reductasa. como la atorvastatina. la fluvastatina y la cerivastina, se
indican en la Figura 11.49.
Fluvastatina
Cerivastatina
Figura 11.49. Inhibidores de la enzima HMGCoA reductasa.
4.1.3. Inhibidores de la 5a-reductasa. Biosintesis de andrógenos
La testoslcrona es la hormona andrógena que estimula el desarrollo muscular, la espermatogénesis y otras fun
ciones en muchos tejidos. Sin embargo, en ciertos lugares como la próstata, es una prohormona ya que la verda
dera hormona es su metabolito reducido, la 4,5a-dihidrotestosterona. que se produce por la catálisis de la enzi
ma 5ct-reductasa (Fig. 11.50). Dada la implicación de esta hormona en ciertos procesos, como la hiperplasia de
la próstata, se han buscado inhibidores. Uno de elfos, la finasterida (un 4-aza-esteroide que mimetiza al enolato
intermedio de esta reacción), se utiliza en el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata y en el de la alo
pecia masculina (por sus efectos secundarios).
Figura 11.50. Mecanismo de acción de la 5<x-reductasa. Finasterida.
5. INHIBIDORES DE LA ANHIDRASA CARBÓNICA
La hidratación del dióxido de carbono para dar ácido carbónico y la reacción inversa, son procesos bastante rá
pidos. Sin embargo, la naturaleza ha preparado una enzima que los hace 107 veces más rápidos: la anhidrasa car
bónica. Sus distintas isoformas se encuentran presentes en ciertos órganos, como el riñón. En condiciones fisio
lógicas, el ácido carbónico formado se ioniza a anión bicarbonato [2].
CO2 + HjO Anhidrasa carbónica. H,CO, * + HCO,-

> H
Cuando el ion bicarbonato se libera en el glomérulo renal y pasa al lóbulo proximal, se combina con el ion
Na’ para dar bicarbonato sódico. Entonces, el catión sodio se reabsorbe a la sangre en un proceso de transporte
activo, que lleva aparejada la correspondiente reabsorción de agua a fin de mantener la presión osmótica, y el
protón que se ha intercambiado con él, reacciona con el anión bicarbonato para dar más ácido carbónico que.
por la catálisis de la anhidrasa carbónica situada en la membrana del túbulo. se convierte en dióxido de carbono,
que difunde pasivamente y se hidrata de nuevo en la membrana para iniciar el proceso. El resultado es la reab
sorción de bicarbonato sódico y del agua desde el túbulo proximal. La inhibición de esta enzima supone la re
tención en el túbulo renal del bicarbonato, con el subsiguiente aumento de pH. y la menor reabsorción de iones
sodio y del agua asociada a ellos, lo que produce una mayor diuresis. Este efecto puede, sin embargo, compen
sarse cuando el filtrado renal pasa del túbulo proximal al asa de Henle (Fig. 11.51). ya que en este trayecto exis
ten procesos muy eficaces de reabsorción de iones sodio (y también de cloruro) que no dependen del anión bi
carbonato (véase el Capítulo 12).
I. Lugar de acción de fármacos bloqueantes de canales de Na*

2. Lugar de acción de fármacos bloqueantes de canales de CE
3. Lugar de acción de los inhibidores de la enzima anhidrasa carbónica que. como las sulfamidas
diuréticas, retienen iones bicarbonato en el lóbulo, incrementando el pH y disminuyendo la
reabsorción de Na* y HjO.
Figura 11.51. Representación esquemática de una nefrona.
Tras la utilización clínica de las primeras sulfamidas antibacterianas, se observaron en algunas de ellas
efectos diuréticos.
Más adelante, se descubrió que dichos efectos se debían a la inhibición de la anhidrasa carbónica. Esta es
una Zn— enzima en la que el catión Zn2* actúa sobre el agua como ácido de Lewis, liberando un protón que se
adiciona al CO2.
Las sulfamidas activas, que tienen que tener el nitrógeno amídico sin sustituir, llegan al sitio activo de la
enzima, quelan el cinc y desplazan el agua como ligando.
Las que se utilizan como diuréticos, como la hidroclorotiazida. acetazolamida y metazolamida (Fi
gura 11.52), suelen acompañarse por las razones citadas, con fármacos inhibidores de canales de sodio o
cloruro.
El sultiamo se utiliza como anticonvulsivo por un proceso no muy bien conocido, mientras que la me
tazolamida se ha utilizado también desde hace años por vía sistémica para aliviar los síntomas del glau
coma.
La enzima anhidrasa carbónica se encuentra en la membrana de las células que separan el humor acuoso
del ojo de la sangre, y allí el bicarbonato se vierte al humor con el subsiguiente paso de agua, lo que aumenta la
presión sobre el iris y el nervio óptico.
Estudios para potenciar la lipofilia y de modelado molecular, han permitido la comercialización en
los últimos años del primer inhibidor de anhidrasa carbónica útil en el glaucoma de uso tópico, la dorzola-
mida.
Hidroclorotiazida
(diurético)
Acelazolamida Mctazolamida
(diurético) (diurético y antiglaucoma)
Dorzolamida
(antiglaucoma de uso tópico)
Figura 11.52. Sulfonamidas inhibidoras de la anhidrasa carbónica.
Las interacciones entre la dorzolamida. que procede de la manipulación molecular de metazolamida, con
el centro activo de la enzima anhidrasa carbónica reflejan, además de otras interacciones hidrófobas, la unión
al metal y los enlaces de hidrógeno con los aminoácidos indicados (Fig. 11.53).
Figura 11.53. Interacciones entre la dorzolamida y la anhidrasa carbónica.
6. INHIBIDORES DE LAS MONOAMINOOXIDASAS
Las monoaminooxidasas (MAO) son flavoproteínas que catalizan la oxidación a aldehidos de aminas endógenas
que actúan como neurotransmisores (noradrenalina. dopamina y serotonina) o son sus precursores o metabolites
(tiramina y triptamina). y de aminas exógenas tales como la bencilamina y la fenetilamina. El cofactor flavina-
adenina-dinucleótido (FAD, Fl„, vitamina B2) actúa como aceptor de un electrón para dar un intermedio anión-
radical (FT’, Fig. 11.54 y Capítulo 7), que adiciona un protón para dar el radical F1H'. La adición posterior de
otro electrón origina el anión F1H", y la adición final de otro protón conduce a la forma reducida FIH2 (FADH2).
Este proceso está acoplado a la oxidación del sustrato, que implica la abstracción de un electrón para dar un ca
tión-radical. la pérdida posterior de un protón para dar un radical, y la pérdida de otro electrón para dar un
catión iminio, que se hidroliza espontáneamente para dar amoníaco y el correspondiente aldehido. La reoxida
ción del cofactor por el oxígeno molecular completa el ciclo catalítico.
Figura 11.54, Mecanismo redox de las monoaminooxidasas.
Se distinguen dos isoformas: MAO A y B. La MAO A es responsable de la oxidación de serotonina y

noradrenalina. mientras que la dopamina se metaboliza en el cerebro principalmente por la isoenzima MAO B.
Por ello, los inhibidores (1MA0) que no inhiben la enzima a nivel periférico y son selectivos de la MAO A son
útiles como fármacos antidepresivos, mientras los IMAO B pueden usarse como fármacos antiparkinsonianos
(véase el Capítulo 13). Son en su mayoría hidrazinas. propargilaminas o ciclopropilaminas. que actúan como in
hibidores irreversibles basados en el mecanismo o suicidas. Como ejemplos, la MAO A se inhibe por la clorgil i -
na y la MAO B por el deprenilo, siendo inhibidores de ambas la iproniazida y la tranilcipromina. Se ha sugerido
que la reacción de inactivación de las MAO por este último compuesto, representada en la Figura 11.55, supone
una apertura homolítica del anillo de ciclopropano y la unión del radical bencílico indicado con un radical de
cisteína situado en el centro activo de la enzima.
Figura 11.55. a) IMAO. b) Inactivación de MAO (A y B) por tranilcipromina.
En cuanto al mecanismo de inactivación que produce el antiparkinsoniano deprendo (selegilina), parece im
plicar un enlace covalente bastante estable entre el nitrógeno 5 del cofactor y el carbono activado por oxidación de
la cadena de propargilamina (Fig. 11.56). El enantiómero del deprendo es un inhibidor de la MAO-B débil. Ade
más, al metabolizarse a /V-metilanfetamina y posteriormente a anfetamina. tiene efectos estimulantes indeseables.
La utilización como fármacos antidepresivos de los inhibidores de la MAO se vio desacreditada en un

principio por efectos adversos (hepatotoxicidad e inducción de crisis de hipertensión), sobre todo cuando no se
eliminaban de la alimentación alimentos ricos en tiramina. que al no ser metabolizada estimula la liberación de
NA. La hipertensión provocada por ésta, que podía ser mortal, se denominó «efecto queso». Para que un inhibi
dor de la MAO A pueda usarse como antidepresivo sin una restricción muy determinada de la alimentación, es
necesario que inactive la MAO A central y no la periférica. También puede conseguirse esta selectividad de ac
ción utilizando profármacos. Así, la (E)-p-fluorometilén-m-tirosina, que no es acliva como IMAO y se transpor
ta activamente al sistema nervioso central, donde se concentra, es un buen sustrato de la descarboxilasa de
INHIBIDORES ENZ1MÁTICOS FARMACODINÁMICOS 31 I
i .-aminoácidos aromáticos (AADC, vése el Apartado 3.3). Al transformarse en la amina, ésta inhibe la MAO A
en el mismo lugar (Fig. 11.57).
Figura 11.57. Inhibición selectiva de la MAO A central utilizando un profármaco bioactivado por AADC.
La moclobemida (Fig. 11.58) es el primer representante de una nueva generación de fármacos antidepre
sivos que son inhibidores reversibles y selectivos de la MAO A. El estudio de su metabolismo ha permitido en
contrar nuevos compuestos inhibidores de la MAO B, entre los que destaca lap-cloro-A-P-aminoetilbenzamida.
Variaciones sistemáticas de este compuesto han revelado que la longitud y la estructura de la cadena lateral no
pueden ser alteradas sin pérdida de actividad inhibidora de la MAO B. pero pueden realizarse cambios en el ani
llo aromático. Su sustitución por heterociclos ha conducido a una serie de nuevos inhibidores de la MAO B. en
tre los que destaca el fármaco antiparkinsoniano derivado del ácido picolínico S-cloro-ZV-P-aminoetilpiperidina-
2-carboxamida.
Moclobemida
lantidepresivo)
Figura 11.58. Fármacos IMAO reversibles y selectivos.
Una «heroína sintética» derivada del analgésido meperidina por inversión del grupo éster, debido a la fácil eli
minación del grupo propionato cuando se calienta en presencia de ácidos, puede estar contaminada con la tetrahi-
dropiridina correspondiente, que es capaz de atravesar la barrera hematoencefálica (Fig. 11.59). Resulta de interés el
hecho de que la MAO B sea capaz de oxidar este sustrato hasta una estructura de piridinio que. por su polaridad, no
puede difundir al exterior del cerebro y actúa como una toxina, provocando los mismos efectos que la enfermedad
de Parkinson. Esta circunstancia ha permitido suponer que esta enfermedad puede estar producida por neurotoxinas.
Figura 11.59. Origen de una neurotoxina que provoca los mismos efectos que la enfermedad de Parkinson.
7. INHIBIDORES DE LA COMT
La enzima catecol-O-metiltransferasa (COMT) cataliza la metilación de un hidroxilo fenólico en estructuras de

tipo catecol (1.2-bencenodiol). Además de su función para desintoxicar el organismo de estos xenobióticos. su
actividad regula las cantidades de dopamina y noradrenalina en varias partes del cerebro, por lo que puede estar
asociada a procesos en los que están implicados estos neurotransmisores. Dentro de su actividad periférica, tiene
particular relevancia terapéutica la O-melilación de la l-DOPA en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
La enzima se une al cofactor (S-adenosilmetionina) y, a continuación, se enlaza el sustrato al sitio activo.
El Mg'" se necesita para facilitar la ionización de los hidroxilos fenólicos. Un residuo de lisina de la enzima
acepta un protón, actuando como catalizador básico en la transferencia del grupo metilo (Fig. 11.60).
COMT (enzima)
Figura 11.60. O-Metilación de la L-DOPA catalizada por la COMT.
Recientemente, se han introducido en terapéutica algunos inhibidores de la COMT con estructura de ni-
trocatecol, como la tolcapona y la entacapona (Fig. 11.61). El primero de ellos se ha retirado por sus efectos in
deseables, mientras que el segundo carece de dichos efectos.
INHIBIDORES ENZIMÁTICOS FARMACODÍNÁM1COS 313
OH
Tolcapona (retirado) Entacapona
Figura 11.61. Inhibidores de la COMT utilizados en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson asociados con l-DOPA.
8. INHIBIDORES DE LA FOSFOLIPASA A2 Y DEL METABOLISMO DEL ÁCIDO ARAQUIDÓNICO
La enzima fosfolipasa A2 (PLA:) cataliza la hidrólisis de fosfolípidos para originar ácido araquidónico (un áci
do graso poliinsaturado de 20 átomos de carbono) y liso-PAF [ 1 -O-estearil- ó l-O-palmitil-gIicero-3-fosfocoli-
na (Fig. 11.62)].
Figura 11.62. Formación de ácido araquidónico y de PAE

Ambos compuestos son precursores bioquímicos de una serie de mediadores inflamatorios. El segundo se
acetila por la catálisis de una acetiltransferasa, para originar PAF (platelet-activating factor), el cual también
puede sintetizarse por una ruta de novo. El PAF actúa a través de receptores selectivos acoplados a proteínas G,
que activan la fosfolipasa C, produciendo IP, y DAG. El ácido araquidónico se oxida por ciertas lipooxigenasas
a diversos eicosanoides, también mediadores inflamatorios. Las más importantes son la ciclooxigenasa (COX)
y la 5-lipooxigcnasa.
Los inhibidores de la PLA2, análogos de glucocorticoides como la hidrocortisona, son por tanto antiinfla
matorios (se estudiarán en el Capítulo 17). La inflamación, que es una reacción natural en respuesta a una infec
ción o un traumatismo, se convierte a veces en un proceso crónico, que es característico de muchas enfermeda
des. como la artritis reumatoide, la psoriasis o el asma bronquial, entre otras.
8.1. Inhibidores de la ciclooxigenasa (COX, prostaglandina H sintetasa)
Las prostaglandinas son derivados del ácido prostanoico, un ácido graso de 20 átomos de carbono que contiene
un anillo de ciclopentano. y se forman a partir de ácido araquidónico por la enzima denominada ciclooxigenasa
de ácido graso (COX) o prostaglandina H sintetasa. Las prostaglandinas están implicadas en muchos procesos
fisiológicos. Así, la PGE2 es un potente broncodilatador, mientras que la PGD2, la PGF2a y el TXA2 son bron-
coconstrictores. El tromboxano A2 (TXA2) se forma en las plaquetas y parece que participa en la agregación
plaquetaria. mientras que la prostaciclina, que se produce en las paredes de las arterias, inhibe la agregación pla-
quetaria. Las prostaglandinas también están implicadas en la función renal y en la reproducción, pero su papel
más importante radica en la inflamación, la producción de dolor y la fiebre.
En 1971, se conoció que un grupo de fármacos semejantes a la aspirina, conocido como fármacos an
tiinflamatorios no esteroides (AINEs o NSAIDs, de nonsteroidal antiinflammatory drugs), eran en su mayor
parte, inhibidores muy potentes de la COX. Esta enzima posee dos centros activos adyacentes: el de ciclooxi
genasa y el de peroxidasa, este último asociado a un grupo prostético hemo. El grupo hemo se activa por un
peróxido, que inicia el ciclo catalítico (después será la prostaglandina G la que lo propague), oxidándose a la
especie oxorradicalaria de Fe,v (véase el Capítulo 7). Esta especie abstrae un átomo de hidrógeno (XH) de la
enzima, al parecer del residuo Tyr-385 (Fig. 11.63). El radical así formado abstrae entonces el átomo de hi
drógeno C-13 pro-S del ácido araquidónico (o de su 5,6-dihidroderivado), originando un radical muy estabi
lizado por resonancia (véase el Capítulo 19). La adición de oxígeno triplete seguida de ciclación y adición de
otra molécula de oxígeno, origina la prostaglandina G (PGG2 o PGGt. según posea o no el citado doble enla
ce). A continuación, mostrando su actividad de peroxidasa. la prostaglandina G se transforma en prostaglan
dina H(H,oH2).
Figura 11.63. Mecanismo de la catálisis de la prostaglandina H sintetasa.

Otras prostaglandina sintetasas catalizan la conversación de PGH, a PGD,. PGE2. PGF2o y PGI2 (prostaci-
clina) y. del mismo modo, las correspondientes series con un doble enlace a partir de PGH,. Por otra parte, la
tromboxano sintetasa convierte PGH: en tromboxano (Fig. 11.64).
Figura 11.64. Interconversiones de prostaglandinas.
Al menos existen dos formas de la enzima prostaglandina II sintetasa. también denominada ciclooxigena-
sa: COX-1 y COX-2 (ciclooxigenasa-1 y 2). La primera es responsable de la producción de prostaglandinas que
participan en el mantenimiento de los tejidos que revisten al estómago, mientras que la segunda se induce por ci-
tocinas y es responsable de la elevada producción de prostaglandinas en los procesos inflamatorios asociados con
dolor y fiebre. Muchos antiinflamatorios no esteroideos. como la aspirina, inhiben ambas formas y. por ello, pro
ducen irritación e incluso úlceras de estómago. Se conocen las estructuras cristalinas de ambas por rayos X, y se
sabe que los sitios activos de ciclooxigenasa se diferencian en uno de los aminoácidos: Ile-523 en COX-1 y Val-
523 en COX-2. Dado que la valina es más pequeña que la isoleucina. se han podido diseñar inhibidores COX-2
carentes de complicaciones estomacales, introduciendo un sustituyeme voluminoso que pueda acoplarse selecti
vamente a su centro activo y no al de COX-1. Los sitios activos de ambas ciclooxigcnasas constituyen un canal
largo y estrecho constituido casi totalmente por aminoácidos hidrófobos que pueden enlazar al sustrato (el ácido
araquidónico). siendo el resto Arg-120 el que fija al grupo carboxilato. También en este centro activo se encuen
tra el residuo Ser-530, al que se une la aspirina, un analgésico, antiinflamatorio, antipirético y antitrombótico
muy utilizado, produciendo su inactivación por formación de un enlace covalente (Fig. 11.65). El ácido salicílico
es incapaz de efectuar esta acetilación. Tanto la aspirina como el ácido salicílico inhiben muchas otras enzimas,
pero a concentraciones mucho mayores, es decir, a través de interacciones relativamente no específicas.
Ser-530 de COX
O
Acciilenzima
Aspirina
F igura 11.65. Inhibición de las ciclooxigenasas por la aspirina.

Los antiinflamatorios no esferoides son inhibidores de la ciclooxigenasa que. en general, poseen una fun
ción ácida que les confiere un pKa de 3-6. Son inhibidores competitivos que actúan por mecanismos diversos, im
pidiendo la sustración del hidrógeno H-13 del ácido araquidónico (Fig. 11.63). Pertenecen a este grupo los ácidos
arilacéticos y arilpropiónicos. como el ibuprofeno, el flurbiprofeno, el naproxeno, el etodolaco, la indometacina,
el sulindaco; derivados de ácido salicílico, como el diflunisal; ácidos ÍV-arilantranílicos, como el ácido mefenámi-
co (fenamatos); enoles, como el piroxicam; y pirazolonas, como la fenilbutazona o el metamizol (Fig. 11.66).
En general, son poco hidrosolubles, se absorben bien y se unen con proteínas del suero, fundamentalmen
te con los residuos e-amino de Usinas de la albúmina. Muchos de ellos y sus acilglucurónidos se secretan por los
conductos biliares al intestino delgado, donde liberan el ácido libre, que posteriormente se reabsorbe en una clá
sica circulación enterohepática. En los ácidos arilpropiónicos que poseen un centro estereogénico, su actividad
biológica se asocia con el isómero S-(+), habiéndose refinado un modelo de «sitio activo» de la ciclooxigenasa
que acomoda al sustrato (ácido araquidónico) y a estos agentes. La indometacina se ha usado como patrón de
este tipo de fármacos desde 1964, pero es muy tóxica. El sulindaco es un análogos algo menos tóxico que fun
ciona como profármaco, ya que ha de reducirse biológicamente a su forma activa de sulfuro.
Metamizol
Piroxicam R = H, Fenilbutazona (dipirona)
R = OH. Oxifenbutazona
Figura 11.66. Antitnflantatorios no esteroideos. Inhibidores de ciclooxigenasas.
El piroxicam es un representante del grupo denominado «oxicamos», que son formas enólicas de com
puestos p-dicarbonílicos (ácidos) en los que un carbonilo es cetónico y está incorporado al heterociclo y el otro
forma pane de un grupo carboxamida. Entre las pirazolonas, debe destacarse el metamizol o dipirona. que al pa
recer actúa como profármaco. Se utiliza como analgésico y antitérmico. Por su ligera acción relajante de la mus
culatura lisa, es útil en dolores de tipo cólico, solo o asociado a espasmolíticos o anticolinérgicos.
Los AINEs son también capaces de inhibir la propagación de radicales libres, lo que puede contribuir a su ac
ción antiinflamatoria (el mecanismo se verá con detalle en el Capítulo 19). El ácido 5-aminosalicílico, que se admi
nistra en forma de profármacos (véase la sulfasalazina y la olsalazina en el Capítulo 8) y se utiliza como antiinfla
matorio en la colitis ulcerosa, es también un potente antioxidante. Otros fármacos antiinflamatorios, analgésicos y
antipiréticos, como el paracetamol, que a veces se encuadran como inhibidores de ciclooxigenasas. deben actuar de
forma indirecta; en el caso del paracetamol, atrapando los radicales de tipo peróxido que propagan el ciclo catalítico.
El tromboxano A; (TXA2) es un potente estimulante de la agregación plaquetaria, por lo que, teóricamen
te. un inhibidor selectivo de la enzima tromboxano sintetasa debería ser un buen agente antitrombótico que per
mitiría la formación continuada de prostaciclina a partir de endoperóxidos. Los principales inhibidores de la
tromboxano sintetasa que se han desarrollado son análogos estructurales de los endoperóxidos PGG; o PGHj y
del TXA:, aunque también se conocen derivados de imidazol y piridina.
8.2. Inhibidores de las lipooxigenasas y análogos de prostaglandinas, prostaciclinas

y leucotrienos
Otra ruta metabólica del ácido araquidónico es la catalizada por 5-lipooxigenasas (Fig. 11.67), en la que un hi
drógeno se abstrae formando hidroperóxidos de ácidos eicosatetraenoicos (HPTE). que son precursores de leu
cotrienos. Algunos leucotrienos son mediadores inflamatorios, en particular el leucotrieno B4 (LTB4), que es un
activador de las funciones de los leucocitos polimorfonucleados. un potente quimiotáctico, y puede estar impli
cado en la inmunorregulación. En contraste con las ciclooxigenasas, que pueden obtenerse fácilmente, se nece
sita utilizar células enteras para estudiar la inhibición de la enzima 5-lipooxigenasa. A pesar de esta dificultad,
se conocen ya algunos inhibidores.
Figura 11.67. Metabolismo del ácido araquidónico. Ruta de las 5-lipooxigenasas.

Los antagonistas de receptores PAF podrían ser fármacos antiasmáticos mejores que los que se utilizan en
la actualidad. La prostaglandina PGEi sintética, el alprostadilo (Fig. 11.68), se utiliza para favorecer la circu
lación sanguínea, y ciertos derivados, como cl misoprostol y el gemeprost, se usan en la perforación gástrica y
en la dilatación del cuello uterino. La PGE? sintética (dinoprostona) se usa para inducir el parto, y el derivado
sulprostona, como abortivo. La PGF2„ sintética (dinoprost) también se utiliza en obstetricia (después del parto),
y el derivado latanoprost en el tratamiento del glaucoma (por un mecanismo no muy claro). Entre los análogos
de las prostaciclinas, el iloprost es un inhibidor de la agregación leucocitaria.
Figura 11.68. Eicosanoides y derivados.
Señalemos también que un fármaco antiasmático, el montelukast, es un antagonista selectivo de los recep
tores LTD4. En la Figura 11.69, puede verse su semejanza con la cadena de cisteinilglicina de este leucotrieno.
H,C OH
Montelukast
Figura 11.69. Montelukast (antagonista de receptores LTD4).

BIBLIOGRAFÍA
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Diseño de fármacos que alteran

el transporte a través de las membranas
celulares
1. INTRODUCCIÓN
Los fármacos que actúan directamente sobre la membrana celular de mamíferos, hongos o bacterias pueden mo
dificar el transporte de iones o moléculas a través de las mismas.
La bicapa lipídica es impermeable a los iones y moléculas polares (véase el Capítulo 7). por lo que algu
nas proteínas que están integradas en las membranas celulares forman canales que se abren y se cierran a través
de cambios conformacionales en dichas proteínas, exponiendo sus aminoácidos polares hacia el interior, y per
mitiendo así la entrada y salida de iones y moléculas polares.
El transporte de iones puede ser pasivo, a favor de un gradiente de potencial y de concentración, a través
de los denominados canales iónicos.
Los sistemas de transporte activo, que se realizan en contra de un gradiente de potencial y de concentra
ción, consumen una gran cantidad de energía y se denominan bombas iónicas o ATPasas.
2. CANALES IÓNICOS, ESTRUCTURA Y FUNCIÓN
De forma simplificada, un canal iónico tiene una estructura proteica, más o menos organizada, que dispone de
sensores integrales o remotos para responder a estímulos físicos o químicos, y puertas en el interior del poro que
se abren o cierran en respuesta a dichos estímulos (Fig. 12.1).
Los cambios de voltaje, diferentes mensajeros y proteínas G. así como diversos fármacos o ligandos en
dógenos, pueden regularlos.
La extremada eficacia de muchos de estos sistemas, capaces de transportar más de 107 iones por segundo,
hace suponer que estos canales disponen de múltiples lugares de unión para enlazar muchos iones simultánea
mente, y que la repulsión mutua entre éstos facilita también su tránsito.
La aplicación de las técnicas de biología molecular ha permitido clasificar los diferentes tipos y subtipos
de canales iónicos de acuerdo con su estructura primaria. Se ha puesto así de manifesto que forman un número
de familias homólogas limitado y que, a pesar de tener aparentemente características diferentes, son muy seme
jantes, quedando pendiente la cuestión de relacionar su estructura con su función.
Figura 12.1. Esquema de la estructura de un canal tónico.
Las células excitables, como las nerviosas o las musculares, son capaces de autogcnerar impulsos electro
químicos en sus membranas, para transmitir señales. Estas células responden a señales físicas, como el calor, la
luz y la presión, y químicas, como las que producen los neurotransmisores y las hormonas. La respuesta a estas
señales se traduce en procesos como la activación de ciertas enzimas, la incorporación de ciertas moléculas, y la
apertura o cierre de canales iónicos. Todas las células contienen iones Na'. K'. Ca2* y Cl que se distribuyen asi
métricamente a través de sus membranas. La concentración intracelular de los iones Na *, Ca2* y CL es menor
que la extracelular, sucediendo lo contrario con los iones K'. Esta asimetría se debe a que las membranas po
seen canales y bombas de iones para mantener los gradientes iónicos.
Los procesos de regulación de los canales iónicos son críticos, ya que los movimientos incontrolados de
iones son letales para las células. La selectividad de los canales se debe a la naturaleza de las cargas eléctricas
de los aminoácidos polares que se distribuyen a lo largo de su superficie interior y a su diámetro. Por ello, exis
ten canales selectivos de cationes o aniones, y dentro de ellos, de iones con diferente carga y tamaño del radio
iónico. El catión sodio, por ser más pequeño que el catión potasio, debería poder utilizar los mismos canales que
éste. Sin embargo, el ion Na' retiene más moléculas de agua de solvatación y más eficazmente. Los canales es
pecíficos de Na' son capaces de eliminar esa cubierta acuosa y dejarlo pasar con la colaboración de sus cargas
negativas. Por el contrario, el ion K" solvatado es más pequeño y se filtra a través de canales específicos sin des-
hidratación previa (Fig. 12.2).
Exterior
Exterior
Interior
Figura 12.2. Esquema de transporte a través de canales iónicos de *Na y de K’.
En la Figura 12.3, se indican los valores aproximados de los gradientes de concentración (XJ y los poten
ciales de equilibrio de los diferentes iones, deducidos por aplicación de la ecuación de Nemst en células excita
bles. Como consecuencia de que la permeabilidad de la membrana al potasio es casi 100 veces mayor que la del
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ALTERAN EL TRANSPORTE A TRAVÉS DE LAS MEMBRANAS CELULARES 323
sodio, el resultado neto es un potencial de reposo de alrededor de -70 m V. A este valor contribuyen también sis
temas de transporte activo de iones, como la ATPasa *Na /K /K
y los sistemas de cotransporte *.Na que se co
mentarán más adelante. Dado que el potencial de equilibrio del K * es aproximadamente -90 mV. este ion podría
salir al exterior en estado de reposo a través de sus canales, si se produjera la salida simultánea de un contraión
cargado negativamente o la entrada de Na *. Sin embargo, los contraiones, que serían proteínas, fosfatos, sulfa
tes, etc., no pueden pasar a través de la membrana celular, y los canales de sodio están cerrados en su mayor
parte cuando las células están en reposo. A través de la apertura de algunos canales de K‘, salen al exterior muy
pocos iones que no afectan a su concentración, y se establece un potencial eléctrico de reposo a lo largo de la
membrana, aproximadamente -70 mV. que hace que el interior sea más negativo que el exterior. Si se abren más
canales de potasio o se activan los canales de cloruro, la célula se hiperpolariza, mientras que si se activan los de
sodio o los de calcio, se despolariza.
ixh. Potencial de equilibrio

Ion niM mM mV (aprox.)
*
Na 145 12 + 70
K' 4 155 -90
Ca” 1.5 <IO‘‘ >+120
Cl 123 4 -90
M'duiT—ZJ0:OIZZ Z3;l- ;I:EDZ ZZM- .□□■EZ
K* K* K* Na* K* Ch
Hiperpolarización Despolarización Hiperpoiarización
Figura 12.3. Concentraciones y potenciales de equilibrio iónico. Despolarización e hiperpoiarización.
* y Ca2* disipa el potencial de reposo de la membrana, lo que se

En general, la apertura de canales de Na
traduce en excitación, mientras que la apertura de canales de K* y Cl" mantiene o eleva el potencial de membra
na, y se traduce en inhibición. Los fármacos que activen o bloqueen los canales tendrán efectos excitadores (+)
o inhibidores (-), según el tipo de canales sobre los que actúen (Fig. 12.4).
En la transmisión de un potencial de acción (impulso nervioso) a lo largo del axón, intervienen canales de
sodio y potasio dependientes de voltaje. Los canales de sodio localizados en la unión del axón nervioso con la
célula son los primeros que señalan si dicha célula está despolarizada o hiperpolarizada. Si está despolarizada
Figura 12.4. Efectos de los fármacos que activan o bloquean los canales iónicos.
por encima de un umbral determinado, se genera una señal a lo largo del nervio, mientras que si la despolari
zación es menor, se abren muy pocos canales de sodio, que vuelven a cerrarse y no se transmite señal alguna
(Fig. 12.5). Cuando se supera dicho umbral con una mayor despolarización, se abren más canales de sodio, has
ta que el número de iones Na’ que entran es mayor que el de iones K * que salen, con lo que se produce una des
polarización todavía mayor que abre todavía más canales de sodio. De esta forma, el potencial es ahora positivo
en el interior y negativo en el exterior. En este momento (ha transcurrido menos de un milisegundo), se vuelven
a cerrar los canales de sodio, y se abren por un tiempo más canales de potasio para volver al estado inicial. Se ha
generado un potencial de acción como consecuencia de la inversión de la polaridad de la membrana en el cuello
del axón, y esto tiene un efecto en las áreas vecinas, que se despolarizan por encima del umbral anteriormente
citado, continuando el proceso a lo largo del axón sin que se afecten las concentraciones iónicas.
Apertura de canales de
Na* en el cuello del axón
Estado de reposo
(canales de K* abiertos
y canales de Na* cerrados)
Los canales de Na
*
en el cuello del axón
Apertura de se cierran, aumenta
más canales el flujo de K
* en
de Na* el cuello. Se vuelve
en esa zona al estado
Dcspolarización por de reposo. Apertura
encima del umbral de los canales de Na
* en
la región contigua.
El área de despolari
zación se mueve a lo
largo del axón. Trans
misión del «mensaje»
Figura 12.5. Generación de un potencial de acción en el axón.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ALTERAN El. TRANSPORTE A TRAVÉS DE LAS MEMBRANAS CELULARES 325
Otras membranas excitables son las de las células musculares (músculo liso, esquelético y cardíaco). En
la Figura 12.6, se representa la generación del potencial de acción en una célula de las fibras de Purkinje, que
controlan el pulso cardíaco. En equilibrio, el ion potasio está concentrado intracelularmente, mientras que los
iones sodio, calcio y cloruro predominan en el líquido extracelular. Cuando la corriente excitadora activa los ca
nales de sodio, se produce en ellos un cambio conformacional. y este ion penetra a su través en gran cantidad,
causando la despolarización. El potencial de membrana pasa de -70 mV a, aproximadamente. + 25 mV (fase 0.
o de despolarización). Se genera así un potencial de acción que transmite a las regiones adyacentes la onda des
polarizante. Los canales de sodio se desactivan y no pueden abrise hasta que la membrana sea de nuevo repola
rizada. En la fase I. el potencial se reduce a + 20 mV, debido probablemente a la entrada de ion cloruro. En la
fase 2, se produce una entrada de ion calcio a través de los canales lentos de calcio. Finalmente, los canales de
cloruro y de calcio se cierran, y la membrana se repolariza principalmente por la salida al exterior de una gran
cantidad de iones potasio en la fase 3. Los canales de potasio se inactivan cuando se ha alcanzado un potencial
de - 80 a - 90 mV. aunque continúa operando otro canal por el que entra potasio durante un corto tiempo hasta
que se alcanza un potencial de membrana de - 70 mV en la fase 4 o diastólica. El proceso se repite si el canal de
sodio se activa nuevamente.
Figura 12.6. Fases del potencial de acción del miocardio.
Según todo lo expuesto, los niveles de K * del líquido intracelular serían menores y mayores, res
* y Na
pectivamente, que los del líquido extracelular, por lo que la situación inversa se alcanza fundamentalmente a
través de la ATPasa Na’/K *. Los canales de sodio son esenciales en las células del miocardio para la genera
ción y propagación de las señales eléctricas, pero su tiempo de apertura es de unos pocos milisegundos, por lo
que se denominan «canales rápidos de sodio». La transmisión del potencial de acción tiene como consecuen
cia final la salida de Ca;* del retículo sarcoplásinico. que difunde a las miofibrillas y promueve el desliza
miento de actina y miosina, que genera la contracción muscular. La arritmia, o pulso cardíaco anormal, puede
originarse por un fallo en los mecanismos de iniciación del impulso eléctrico o por una mala conducción del
mismo.
Además de ios canales iónicos dependientes de voltaje, como los que se han comentado anteriormente,
existen otros muchos canales que se regulan por ligandos. Estos últimos, a su vez, pueden diferenciarse en aqué
llos en los que el receptor del ligando forma parte de la estructura del canal propiamente dicha o en los que el re
ceptor se encuentra acoplado al canal a través de proteínas G o segundos mensajeros (Fig. 12.1). Como ejemplo
de los primeros, citaremos el neurotransmisor acetilcolina. que controla canales de sodio al actuar sobre el re
ceptor nicotínico, así como al GABA y las benzodiazepinas, que controlan canales de cloruro al interactuar
con los receptores GABA-A (véanse los Capítulos 14 y 15). Entre los que se activan a través de proteínas G, se
encuentran los canales de K * activados por agonistas muscarínicos M;.
Con frecuencia, los canales actúan de forma cooperativa. Por ejemplo, las células fí del páncreas que se
cretan insulina, poseen canales de K* dependientes de ATP ®, canales de Ca" dependientes del voltaje (2) y
canales de K’ activados por Ca2*. Cuando se elevan los niveles intracelulares de ATP por una elevada concentra
ción de glucosa o aminoácidos, se cierran los canales de K* (no sale K *). La despolarización que esto produce
activa los canales de Ca2*, y la entrada de este ion promueve la liberación de insulina. Finalmente, la elevación
de la concentración de Ca2* activa los canales de K * dependientes de Ca2* (J), para restaurar el potencial de
membrana. Los antidiabéticos orales, como las sulfonilureas (Apartado 3.4.1), actúan bloqueando los canales
de K
* dependientes de ATP (Fig. 12.7).
Figura 12.7. Acción cooperativa de los canales iónicos. Anúdiabéticos orales del grupo de las sulfonilureas.
3. LOS CANALES IÓNICOS COMO RECEPTORES DE FÁRMACOS
La especificidad que muestran los canales hacia diversas estructuras químicas permite deducir que son verda
deros receptores, es decir, que poseen lugares de enlace específicos dispuestos en una determinada estereo
química para reconocer determinados ligandos. Éstos pueden actuar como agonistas (activadores) o antago
nistas (bloqueantes). Sin embargo, estas interacciones tienen peculiaridades específicas. Así, en los canales
dependientes de voltaje, la interacción depende del estado (y por tanto de la conformación) en que se encuen
tre el canal iónico en el momento de enlazarse el fármaco: estacionario, abierto o cerrado. Un fármaco puede
tener una gran afinidad por un canal en su estado inactivado y podrá utilizarse como bloqueante, mientras que
otro que estabilice un canal en su forma abierta funcionará como un activador (agonista). Así, el anestésico
* dependientes de voltaje que se utiliza en el tratamiento de
local lidocaína, un bloqueante de canales de Na
arritmias ventriculares, se enlaza preferentemente al estado abierto del canal, que lo hace accesible a especies
hidrófilas, mientras que el bloqueante de canal L de Ca2* nifedipino, que se utiliza como antihipertensivo,
presenta selectividad para el canal inactivado. Los compuestos de amonio cuaternario que bloquean canales
de K*, cuando se aplican intracelularmente, bloquean el canal sólo cuando éste está abierto, porque es cuando
pueden penetrar por el mismo (Fig. 12.8).
Figura 12.8. Esquema de un ion de amonio cuaternario atrapado en un canal cerrado de K

.*
En cuanto a los fármacos que interactúan con canales regulados por ligandos endógenos, puede suceder
que dicha interacción se produzca en el lugar de unión de estos ligandos o en un lugar alostérico. Así, el anes
tésico local QX 222 (Fig. 12.9), que deriva de la lidocaína por sustitución del grupo dietilamino protonado a
pH fisiológico por un grupo trimetilamonio, es un antagonista no competitivo que se une a un lugar alostéri
co del receptor nicotínico de acetilcolina. el cual es un canal de Na
* (véase el Capítulo 14). Por ello, los efec
tos de este fármaco y de la lidocaína son idénticos, aunque sus receptores sean canales de sodio diferentes. La
fenciclidina y la dizocilpina (MK-801), son otros ejemplos de bloqueantes no competitivos de canales ióni
cos, en este caso regulados por aminoácidos excitadores de tipo Á'-metil-D-aspártico (NMDA. véase el Capí
tulo 15). El primero se utiliza como anestésico por vía intravenosa y el segundo para estudios bioquímicos
del receptor NMDA y como antiepiléptico.
(MK-801)
QX222 Dizocilpina
(anestésico local) Fenciclidina
(«polvo de ángel»)
Figura 12.9. Fármacos que interactúan preferentemente con los estados abiertos de canales iónicos.
3.1. Fármacos que actúan en los canales de Na

*
3.1.1. Anestésicos locales
Los canales de Na' dependientes de potencial se bloquean por algunos fármacos utilizados como antiarrítmicos,
como anestésicos locales o como anticonvulsivos. Estos canales son, además, el lugar de acción de toxinas que
poseen un catión guanidinio, como la tetrodotoxina, de otras toxinas de tipo alcaloide o peptídico, como las de
anémona de mar o de escorpión, y de muchos insecticidas, como las piretrinas y el DDT. Los anestésicos loca
les se unen a los canales de sodio en la membrana de las células nerviosas, bloqueando la iniciación y la trans
misión de los impulsos. Al bloquear el canal de Na", se impide la despolarización, se interfiere la conducción
neuronal y la consiguiente liberación de neurotransmisores en la sinapsis. Por lo tanto, estos fármacos son anta
gonistas indirectos de los receptores sobre los que actúan los neurotransmisores.
Desde el descubrimiento de las propiedades como anestésico local de la cocaína, se han sintetizado mu
chos análogos con propiedades más favorables (Fig. 12.10). Algunos, como la benzocaína. se utilizan sólo tópi
camente por su escasa hidrosolubilidad. Otros, como la procaína o la novocaína, se utilizan como inyectables en
la anestesia local, así como en la epidural o espinal. Muchos de los análogos de procaína. como la tetracaína.
son más activos que aquélla por su mayor liposolubilidad, lo que puede interpretarse como consecuencia de la
necesidad que lienen de atravesar las membranas para poder ejercer su acción desde el interior de la célula. No
obstante, el bloqueo del canal de sodio desde el citoplasma debe requerir la presencia de las formas catiónicas
en estos fármacos.
Amina
Amina
Nombre Ri R’
Benzocaína H GH,
Cocaína Procaína (novocaína) H CH2CH2-N(C,H,)2
Tetracaína /i-C4H9 CH2CH,-N(CHj)2
Amida (análogo «duro» de procaína)
Procainamida
Lidocaína
Figura 12.10. Anestésicos locales que actúan por bloqueo de los canales de Na+.
Estos requisitos pueden explicar por qué la mayor parte de los anestésicos locales utilizados posee un gru
po amino terciario o secundario, con valores de pKa de 8 a 9, que a un pH de 7.4, se encuentran en forma ioni
zada en una proporción alrededor del 5-20 %. De esta forma, existe un alto porcentaje de forma no ionizada que
puede atravesar la membrana y una cantidad suficiente de forma ionizada activa (Fig. 12.11). Se especula que
las estructuras que no pueden ionizarse pueden interactuar con el canal por enlaces hidrófobos que. tal vez, sean
más eficaces que los iónicos.
Figura 12.11. Bloqueo del canal de Na’ desde el citoplasma por anestésicos locales.
La cocaína es, además, un inhibidor central de la recaplación de neurotransmisores excitadores y, por

tanto, un fármaco psicomimético narcótico que no debe usarse como anestésico local. Sus análogos se han di
señado como ésteres básicos de ácidos carboxílicos aromáticos, pero tienen una acción corta por su fácil hi
drólisis. Por ello, la lidocaína y sus análogos (Fig. 12.12), que poseen una función amida en lugar de la fun
ción éster y dos grupos metilo en orto, es más estable. Se han desarrollado estructuras más activas pero, en
general, un aumento de la actividad anestésica lleva consigo un aumento en la toxicidad. De todos modos, es
difícil determinar las circunstancias estructurales que están asociadas a una acción anestésica local, ya que en
muchos compuestos dicha acción es secundaria de otra actividad biológica y sólo se pone de manifiesto a al
tas concentraciones.
Figura 12.12. Anestésicos locales análogos de lidocaína.
3.1.2. Antiarrítmicos
En principio, si un anestésico local tiene una semivida suficiente, como es el caso de la procainamida y de la li
docaína, puede utilizarse como antiarrítmico, aunque la acción sobre el ritmo cardíaco de los anestésicos locales
debe considerarse como un efecto secundario a evitar. Los fármacos antiarrítmicos corrigen alteraciones en la
generación y conducción del impulso eléctrico en el miocardio. En su mayor parte, sus propiedades antiarrítmi
cas se descubrieron dentro de los efectos secundarios observados en su aplicación primitiva como antipalúdicos,
anticonvulsivos o anestésicos locales (fig. 12.13).
Propafenona (I)
Figura 12.13. Algunos fármacos antiarrítmicos que actúan sobre los canales de Na'. K' o Ca2*, o son antagonistas
P-adrenérgicos.
Casi todos los fármacos antiarrítmicos tienen un nitrógeno básico, por lo que pueden formar sales, o dicho
nitrógeno está cuatemizado. Unos (clase 1) actúan por bloqueo de los canales de Na *. Entre ellos están la quini-
dina, la disopiramida (Fig. 12.13), la procainamida y la lidocaína (Fig. 12.10). Otros (clase II), actúan por blo
queo de los receptores p-adrenérgicos y antagonizan los efectos de las catecolaminas en el tejido cardíaco. En
tre ellos se encuentra el propranolol. Los antiarrítmicos que pertenecen a la clase III actúan por bloqueo de la
salida de K*. prolongando la duración del potencial de acción de la membrana. Entre ellos se encuentran el tosi-
lato de bretilio, la amiodarona y la sematilida. El grupo IV está formado por los bloqueantes de los canales de
*
,
Ca' siendo el verapamilo y el diltiazem (Fig. 12.23) los más conocidos. Algunos fármacos antiarrítmicos ac
túan por mecanismos múltiples. Así, la amiodarona bloquea la salida de K *. tiene afinidad por el estado inacti
vado del canal de Na*, bloquea el canal de Ca2* y, en dosis altas, es antagonista no competitivo de los receptores
a- y P-adrenérgicos. La mayoría reduce la pendiente de la fase 3 del potencial de acción, o fase de repolariza
ción del miocardio, y algunos también la de la fase 0 (Fig. 12.7).
Para que un antiarrítmico actúe por bloqueo de canales iónicos de Na *, parece esencial un grupo o grupos
aromáticos en su estructura, capaces de intercalarse con fosfolípidos, una cadena alquílica de conexión en la que
existan grupos funcionales capaces de asociarse por enlaces de hidrógeno, y un grupo amino ionizable a pH fi
siológico. El aumento de actividad de muchos antiarrftmicos bloqueantes de canales de Na * se correlaciona con

el mayor coeficiente de reparto.
A pesar del gran número de fármacos antiarrítmicos que se conocen, actualmente no existe un tratamiento
satisfactorio, y es necesario el desarrollo de agentes de larga duración que sean activos por vía oral y que po
sean menores efectos secundarios. Muchos de los nuevos compuestos que se están estudiando en la actualidad
poseen diversos agrupamicntos capaces de interactuar simultáneamente con uno u otro canal iónico, o actuar
como p-bloqueantes adrenérgicos. Así, el compuesto 1 (Fig. 12.13) presenta en su estructura una combinación
de porciones que se encuentran en el propranolol (clase II) y la sematiiida (clase III).
3.1.3. Anticonvulsivos
Con respecto a los fármacos anticonvulsivos que actúan como inhibidores de canales de Na * dependientes de
potencial, tenemos la carbamazepina y la oxcarbazepina. cuyas estructuras están estrechamente relacionadas
con las de los antidepresivos tricíclicos que se comentarán más adelante (Fig. 12.14). Ambos fármacos se utili
zan como antiepilépticos, y el primero como analgésico en la neuralgia de trigémino. Interactúan con la forma
inactivada del canal de Na'. lo que explica su acción selectiva sobre las neuronas que sufren descargas epilépti
cas (en las que se incrementa el número de estos canales inactivados). La toxicidad de la carbamazepina se debe
a su metabolismo oxidativo, que transcurre a través del correspondiente epóxido (que también es activo biológi
camente), para finalmente originar los rrans-dioles inactivos. Por eso, la oxcarbazepina es menos tóxica. Se tra
ta de un profármaco que se metaboliza rápidamente, por reducción al correspondiente 10-hidroxiderivado activo
que, finalmente, se eliminan como glucurónidos o se oxidan a rrans-dioles inactivos.
Citocromo P-450
epoxidasa mesoepóxido
bidrolasa
Carbamazepina
Melabolilo activo, pero tóxico
Oxidación
Cetorreductasa
Figura 12.14. Estructura y metabolismo de los anticonvulsivos carbamazepina y oxcarbazepina.
La fenitoína es el antiepiléptico más conocido de una serie de estructuras anticonvulsivas derivadas de

imidazolidina-2,4-dionas (hidantoínas). de oxazolidina-2,4-dionas. o de succinimidas (Fig. 12.15). Todas ellas
se desarrollaron por manipulación del anillo de los ácidos barbitúricos a partir del conocimiento de la
acción anticonvulsiva del fenobarbital. un activador del canal de CT regulado por el GABA como ligando en
dógeno (véase el Capítulo 15). Aunque en algunos casos no se conoce exactamente la proteína con la que inter
actúan, en su gran mayoría bloquean canales de Na' dependientes de voltaje. Mientras que la trimetadiona (tri-
diona) no se une a canales de Na' a concentraciones de hasta ImM, los análogos 2, en los que los sustituyentes
en las posiciones N(3) y C(5) se han sustituido por un puente polimetilénico, son anticonvulsivos con una gran
afinidad por dichos canales.
5-Etil-5-fcniihidamoína
Oxazolidinadionas (X = O)
Trimctadiona
Succinimidas (X = CH2)
Elosuximida Mcsuximida
Figura 12.15. Fármacos anticonvulsivos derivados de la estructura de fenobarbital.
En relación con la difenilhidantoína y sus 5-alquil-5-fenil análogos (Fig. 12.16). a pesar de los muchos es
tudios realizados, no se han determinado todavía los requerimientos estructurales para producir la máxima in
teracción con los canales de Na' dependientes de voltaje, ni el lugar en el que se produce aquélla. Sin embargo,
mediante técnicas QSAR tridimensionales, se ha descrito cuáles son las orientaciones más favorables para los
sustituyentes en el carbono 5, y se ha demostrado que el anillo de hidantoína no es imprescindible, de forma que
las a-hidroxi-a-fenilamidas representan a una nueva clase de ligandos de este canal, en los que el hidroxilo se
superpone con el agrupamiento N(l)-H de las hidantoínas y la función carboxamida con el agolpamiento
C(4)=O-N(3 )-H.
Figura 12.16. Algunos análogos de fenitoína bloqueantes de canales de Na' dependientes de voltaje.
Cerca del 95 % de los fármacos que actualmente se prescriben en todo el mundo como antiepiléticos se
desarrollaron antes de 1975. En los últimos años, se han comercializado o están en sus últimas fases de desarro-
lio, varios compuestos que actúan a través de diversos mecanismos. Entre ios «nuevos» anticonvulsivos blo
queantes de canales de Na' dependientes de potencial se encuentran el felbamato, el topiramato, la lamotrigina,
la zonisamida y la rufinamida. En la Figura 12.17, se indican los agolpamientos similares que, a pesar de su di
ferente estructura, se encuentran en estos fármacos: una subunidad hidrófoba (R), un grupo electrón-donante
(D) y otro aceptor o donador de enlaces de hidrógeno (ADH).
Felbamato
Lamotrigina
Figura 12.17. Otros fármacos anticonvulsivos que bloquean el canal de *Na dependiente de voltaje. Relación estructura-
actividad.
La ameltolida, un anticonvulsivo comercializado por el laboratorio Lilly, y sus análogos en desarrollo

derivados de la ftalimida (Fig. 12.18), poseen una estructura que está estrechamente relacionada con la de lido-
caína.
Figura 12.18. Estructura de la ameltolida y sus análogos.
3.1.4. Agentes neuroprotectores
Uno de los efectos que demostró la tetrodotoxina (Fig. 12.19). una toxina natural que bloquea los canales de
* dependientes de potencial, fue actuar como neuroprotector en un modelo de isquemia cerebral. De dicha
Na
* dependientes de
observación ha surgido una nueva aplicación terapéulica para los bloqueantes de canales de Na
voltaje: su utilización como agentes neuroprotectores en el traumatismo craneal y en dolores neuropáticos, tales
como la neuralgia del trigémino, en la isquemia aguda y en condiciones neurodegenerativas. Estos fármacos son
complementarios de los antagonistas de receptores de ácido glutámico, que actúan exclusivamente en la sustan
cia gris. En la búsqueda de bloqueantes selectivos que atraviesan la barrera hematoencefálica, se encontraron
derivados de guanidina y de sus isósteros. como los compuestos 3. 4. lubeluzol y riluzol. los cuales actúan tam
bién como bloqueantes de los canales de Ca2*.
Lubeluzol
Figura 12.19. Agentes neuroproteclores bloqueantes de canales de Na* y Ca2*.
Su acción dual se racionalizó teniendo en cuenta su libertad conformacional, que les permite interactuar
electrostáticamente en su forma protonada catiónica con un grupo carboxilato de un aminoácido de diversos ti
pos y subtipos de canales iónicos. Los cationes de estructura TVJV'-diarilguanidinio pueden adoptar tres confor
maciones límite: anti-anti, anti-sin y sin-sin (Fig. 12.20). El paso de una a otra se realiza variando los ángulos de
torsión Z, y Zj, por giro a través de los enlaces C=NH (parcialmente dobles). Los ángulos tg, y qri reflejan el
giro de los sustituyentes arilo respecto al plano del catión guanidinio.
Hx®,h
anti-anti
sin-sin
Figura 12.20. Conformaciones límite del catión NJV'-diarilguanidinio.
En la Figura 12.20, se representan algunas estructuras diseñadas como análogos rígidos de los confórme-
ros anteriormente mencionados y de los arilbencil análogos. De su estudio se dedujo que la conformación sin-
sin es la de mayor potencia.
Figura 12.21. Estructuras de conformación restringida derivadas de diaril y aril-bencil guanidinio.

3.2. Fármacos reguladores de los canales de Ca2*
Los iones Ca2" son mensajeros ubicuos de numerosas funciones celulares: mecánicas, como la contracción mus
cular; enzimáticas, como la división celular, secretoras, como la liberación de neurotransmisores y hormonas,
etc. En algunos tejidos ejercen su función al ser liberados de las reservas intracelulares como las mitocondrias
(Fig. 12.22,5), vesículas de almacenamiento de hormonas o neurotransmisores. retículo sarcoplásmico (6) o en-
doplásmico, y de proteínas fijadoras como la calmodulina o la troponina C (7). En otros, se requiere su entrada
desde el espacio extracelular a través de canales iónicos accionados por potencial o por receptores (1 y 2). y en
algunas células se dan ambos mecanismos. La alteración de los niveles de Ca2* intracelulares una de las claves
para controlar los procesos biológicos. Su acción parece estar relacionada con su capacidad para formar puentes
entre dos grupos aniónicos, de la que se deriva la de «formar estructuras» y producir cambios conformacionales
y asociaciones entre macromoléculas. Una vez terminada su acción, el Ca" * debe ser retirado desde el interior al
medio extracelular por dos mecanismos importantes: las bombas de calcio (3), que utilizan la energía de la hi
drólisis del ATP, y el intercambio Na
*/Ca 2* (4), por el que el calcio es bombeado al exterior de la célula, mien
tras que el sodio entra. Cualquier modificación de uno de estos mecanismos causará una profunda alteración
(Fig. 12.22).
Figura 12.22. Representación esquemática de los procesos que controlan los niveles de Ca2* en el interior de las células
excitables.
Los canales de calcio son proteínas localizadas en la membrana de multitud de células excitables, que su
fren cambios continuos entre estados conformacionales de apertura (activación) y cierre (inactivación). Se han
identificado varios tipos y se conocen reguladores de canales L (de large) como el nifedipino, de canales T (de
transient) como la amilorida, además de los tipos N, P, Q, R y sus distintos subtipos. Estos reguladores, activa
dores y bloqueantes, forman un grupo heterogéneo. La introducción en la terapéutica cardiovascular de los blo
queantes de canales de Ca2* ha supuesto el mayor avance desde la aparición de los bloqueantes p-adrenérgicos
(véase el Capítulo 13). Al inhibir o incrementar el flujo de Ca2* al interior de la célula, modifican los procesos
regulados por la concentración de dicho ion. Los términos alternativos de «antagonistas de calcio» para los blo
queantes y «agonistas de calcio» para los activadores, que acuñó su descubridor A. Fleckenstein en 1969, es im
preciso y equívoco.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ALTERAN EL TRANSPORTE ATRAVÉS DE LAS MEMBRANAS CELULARES 337
3.2.1. Bloqueantes de canales de Ca2' dependientes de voltaje
Los fármacos bloqueantes de canales de calcio forman un grupo diverso, desde el punto de vista químico y far
macológico. Se clasifican en fcnilalquilaminas, como cl vcrapamilo (clase I. Fig. 12.23). L4-dihidropiridinas,
como el nifedipino (clase II). benzotiazcpinas como el diltiazem. benzotiazinas. como el semotiadil, y benzotia-
zolilbencilfosfonatos, como fostedil (clase III), pipcrazinas como la flunaricina y la cinarizina (clase IV), otras
aminas como la prenilamina (clase V) y el resto de estructuras que han mostrado esta actividad y constituyen la
clase VI, como la perhexilina. Los compuestos de las clases I-III son los más interesantes. El vcrapamilo, el ni
fedipino y sus análogos, y el diltiazem se utilizan con gran éxito en trastornos cardiovasculares como la angina,
la hipertensión, la arritmia, etc., además de otros usos muy variados.
Figura 12.23. Ejemplos representativos de fármacos bloqueantes de los canales de Ca**.
Se acepta que tan diversas estructuras tienen lugares de unión diferentes a la glicoproteína del canal. Las
dihidropiridinas no están cargadas a pH fisilógico y se enlazan al canal desde el exterior de la membrana, inde
pendientemente del estado en que se encuentre éste, aunque son más afines para el estado inactivo. El verapami-
lo y el diltiazem se enlazan desde el citoplasma a dos lugares diferentes, después de atravesar la membrana por
difusión pasiva en sus formas no ionizadas, las formas cargadas son las que se unen al estado inactivo del canal.
En la Figura 12.24, se representan esquemáticamente las interacciones alostéricas entre los tres lugares de unión
citados.
Figura 12.24. Lugares de unión de los fármacos que interactúan con el canal L de Ca2* dependientes de voltaje.
Interacciones alostéricas entre ellos (+, estimulación; bloqueo).
Las dihidropiridinas (DHPs) interactúan con dominios helicoidales del canal de Ca2+ que contienen deter
minados residuos de aminoácidos polares y no polares. Como interacciones más importantes se ha propuesto
que existe una interacción polar entre el hidroxilo de un residuo de treonina como donador de hidrógeno y un
grupo carbonita de un grupo éster y el grupo NH de la dihidropiridina se enlaza al grupo carbonita de un resto
de glutamina, mientras que las interacciones con residuos no polares de metionina y fenilalanina se producen
con el agolpamiento arilo. Las interacciones que se establecen cuando existe un grupo nitro en la posición orlo
del fenilo en C-4 (nifedipino y nisoldipino. Fig. 12.25) son muy diferentes a las que se establecen cuando dicho
agolpamiento está en meta (nitrendipino. nimodipino y nicardipino).
Nisoldipino
Figura 12.25. Algunos análogos de nifedipino.

Los requerimientos estructurales que conducen a una actividad óptima en las DHPs se han estudiado con
detalle. El anillo de 1,4-dihidropiridina es esencial, así como el protón sobre el nitrógeno, mientras que los agol
pamientos éster pueden ser reemplazados por otros sustituyentes aceptores de electrones. Los sustituyentes en
C(2) y C(6) suelen ser grupos alquilo pequeños, generalmente metilo (Fig. 12.26).
alquilumino
Figura 12.26. Requerimientos estructurales para la actividad de las 1.4-dihidropiridinas.
Las DHPs son moléculas flexibles en las que los sustituyentes arilo en C(4) y éster en C(3) y C(5) pue
den rotar (Fig. 12.27). El anillo de dihidropiridina existe en una conformación de bote aplanado, con el susti
tuyeme arilo en posición pseudoaxial y casi ortogonal a éste. En las DHPs sustituidas en orto o meta del arilo
en C(4) por un grupo X # H, existen dos conformaciones límite: una que sitúa dicho grupo en una conforma
ción sinperiplanar al hidrógeno en C(4) y distal al NH, y otra que lo sitúa antiperiplanar a aquel hidrógeno y
Figura 12.27. Rotámeros de 1,4-dihidropiridinas.

proximal al NH. Aunque las barreras energéticas que separan a ambas conformaciones son pequeñas, para los
derivados sustituidos en orto el rotámero sinpcriplanar es el más estable, y ésta es la conformación que, al pa
recer, se une al canal.
Las interacciones entre las DHPs y el canal de Ca2* son estereoselectivas. Cuando los grupos éster en
C(3) y C(5) son diferentes, ambos enantiómeros son bloqueantes, pero poseen distinta actividad.
En las DHPs que contienen un grupo éster y un grupo nitro como sustituyentes en C-3 y C-5, los enan
tiómeros R son bloqueantes, mientras que los S son activantes (Fig. 12.28).
En ambos enantiómeros, el arito está en una disposición pseudoaxial, pero mientras que en el enantió-
mero S está orientado hacia arriba, en el R está hacia abajo. Sin embargo, la actividad activante o boqueante
no depende solamente de la estereoquímica, sino también del estado del canal en función del potencial de la
membrana. Así, el (S)-Bay K 8644 actúa como activante a potenciales de membrana en la que ésta está pola
rizada, mientras que actúa como bloqueante a potenciales en la que está despolarizada.
En las DHPs 5-nitro-3-carboxilato que poseen en C(4) un sustituyeme piridilo, isóstero de nitrofenilo,
el enantiómero dextrógiro del 2-piridiI derivado es activante de canales de Ca2* en el músculo cardíaco y liso,
mientras que el levógiro es activante en los del tejido cardíaco y bloqueante en los del músculo liso.
Esta acción doble es muy interesante desde el punto de vista terapéutico, ya que permite disponer de
fármacos, con efecto inotrópico positivo (activante de canales de Ca2* cardíacos), útiles en la insuficiencia
cardíaca congestiva, sin que posean efectos vasoconstrictores (bloqueante de canales de Ca‘* en el músculo
liso).
Figura 12.28. Estructuras de DHPquirales.
Entre los bloqueantes de canales de calcio de estructura de benzotiazepina, el diltiazem (que es el enan
tiómero cír-dextrorrotatorio), se utiliza como vasodilatador.
Con la excepción de los inhibidores de la enzima conversora de angiotensina (véase el Capítulo 9). el
resto de los vasodilatadores retiene sodio, cualidad que tiende a contrarrestar su acción antihipertensiva.
Es probable que la eficacia como antihipertensivos de los bloqueantes de los canales de Ca2* se deba
también a su capacidad natriurética (eliminación de Na*).
Estudios teóricos han propuesto las interacciones con los canales de Ca2* que se representan en la Figu
ra 12.29 de análogos del diltiazem con estructura de benzotiazina. en los que la función lactama se ha susti
tuido por un anillo de pirrol (bioisóstero).
Figura 12.29. Modelo de interacción de los canales de Ca2* y análogos del diltiazem.
Se ha demostrado que el dantroleno (Fig. 12.30), un fármaco con estructura de hidantoína que se utiliza en
la hipertermia maligna y es beneficioso en el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central que manifies
tan algún grado de espasmo involuntario del músculo esquelético (como la esclerosis múltiple), actúa molecular
mente bloqueando los canales de Ca2* del retículo sarcoplásmico, denominados receptores de rianodina por la
afinidad que posee hacia ellos este alcaloide vegetal (las xantinas. como la cafeína, activan estos canales). La hi
pertermia maligna se manifiesta tras la administración de anestésicos generales, como el halotano. y relajantes
musculares despolarizantes, como la succinilcolina (véase el Capítulo 14) en pacientes que tienen alterado el gen
que codifica dicho canal de Ca2*, y es consecuencia de una liberación masiva de Ca2* al interior de la célula.
Dantroleno X = CH. R = NCh

Azidodantrolenno X = CH, R = N3
Aminodantroleno X = CH. R = NH2
Azumoleno X = N. R = Br
Figura 12.30. Bloqueantes del receptor de rianodina (canales de Ca2* del retículo sarcoplásmico).
3.2.2. Activadores de los canales de Ca2’
Los canales de Ca2* dependientes de voltaje del corazón se activan indirectamente por agonistas p-adrenérgicos
como el isoproterenol (véase el Capítulo 13), ya que, al producir un aumento de AMPc, se fosforita el canal y se
abre, con la consiguiente entrada de Ca2* y contracción muscular. Ya se ha comentado que la interacción directa
de algunas dihidropiridinas con los canales de calcio promueve su activación y, en consecuencia, la entrada de
calcio a la célula, por lo que podrían utilizarse como agentes inotrópicos positivos para el tratamiento de la in
suficiencia cardíaca. Son tan potentes como la adrenalina, y más potentes que los digitálicos y las xantinas inhi
bidoras de las fosfodiesterasas. Su problema reside en separar los efectos cardíacos de los que producen sobre
los vasos periféricos y el sistema nervioso central (una vez más, la selectividad tisular surge como limitación al
uso terapéutico de los fármacos). En la Figura 12.31, se representa el activante (-) (S)-Bay K 8644 y su análogo
(+) (S)-202-79L ambos activadores de canales de Ca2*.
H
l-XSFBay K SM4
(+XS)-2O2-79I
Figura 12.31. Otros compuestos activadores de los canales de Ca .
3.3. Antialérgicos basados en la estabilización de las membranas por bloqueo

de canales de Ca2*
Aunque el mecanismo de los procesos secretores no está claro todavía, se conoce la participación del Ca2* ex
tracelular o intracelular en la liberación de los mediadores inflamatorios. El cromoglicato (cromolino) y el ne-
docromilo (Fig. 12.32), son fármacos antialérgicos, útiles en la profilaxis del asma broquial y los catarros alér
gicos que. al parecer, actúan como agentes bloqueantes de los canales de Ca2*. estabilizando la membrana de los
mastocitos (células en las que se almacena la histamina) e inhibiendo su liberación. Se trata de estructuras deri
vadas de cromona. con uno o dos grupos carboxílicos que, a pH neutro, se encuentran en forma ionizada. Por
ello, se administran por inhalación, ya que no son capaces de atravesar las membranas biológicas en ausencia de
un transporte activo, por lo que deben actuar extracelularmente.
Cromoglicato disódico
Figura 12.32. Fármacos antialérgicos que impiden la liberación de mediadores inflamatorios por bloqueo de canales de
*Ca + en los mastocitos.
3.4. Agentes que actúan sobre los canales de K

*
Los fármacos que activan los canales de K* en las membranas excitables producen una hiperpolarización celular
que origina el cierre de los canales de Ca2+ dependientes de voltaje, mientras que los bloqueantes mantienen la
despolarización y, al aumentar los niveles de Ca2* intracelular, se produce una respuesta excitadora.
Los canales de K’ son muy diversos y se agrupan, desde el punto de vista de la Biología Molecular, en
tres grupos o familias: la superfamiiia S4. que comprende a los dependientes de voltaje, los canales minK y los
canales dependientes de ATP. Entre los canales regulados por receptores de neurotransmisores, se encuentra el
canal «M». que se abre de forma indirecta por la interacción de la acetilcolina con los receptores muscarínicos
M2 (véase el capítulo 14) al producirse una disminución del segundo mensajero. AMPc.
Los regulados por ATP u otros nucleótidos de adenina se bloquean al aumentar la relación ATP/ADP
como consecuencia del metabolismo de la glucosa, lo que lleva consigo la apertura de canales de Ca2*. Estos ca
DISEÑO DE F/XRMACOS QUE ALTERAN EL TRANSPORTE A TRAVÉS DE LAS MEMBRANAS CELULARES 343
nales, detectados por primera vez en el músculo cardíaco, son dímeros formados por una subunidad a y otra p.
denominada SUR (Sulfonyl urea receptor) debido a que es la región a la que se enlazan las sulfonilureas.
3.4.1. Bloqueantes de los canales de *K regulados por el ATP. Antidiabéticos orales
La insulina es una hormona que controla muchas de las transformaciones de la gluconeogénesis y su déficit es
la causa de la diabetes, caracterizada por altos niveles de glucosa en sangre. Aunque el tratamiento de reempla
zamiento, mediante la administración de insulina, es lo habitual, muchos pacientes que son capaces de producir
la son tratados por vía oral con sulfonilureas hipoglucemiantes, como la tolbutamida. la clorpropamida. la glipi-
zida y la glibenclamida o gliburida (Fig. 12.33), que surgieron históricamente de la observación de efectos
hipoglucémicos en pacientes con fiebres tifoideas tratados con sulfamidas.
Nombre
Tolbutamida
Glicazida
Clorpropamida
/Xcctohexamida
Glibenclamida
(gliburida) Ciclohexilo
Glipizida Ciclohexilo
Figura 12.33. Sulfonilureas antidiabéticas.
Estos fármacos, tras interactuar con su receptor, que es un componente o está asociado a los canales de K *
dependientes de ATP, producen su bloqueo (Fig. 12.7). Al producirse una retención intracelular de K *, se produ
ce la despolarización. Este cambio de potencial de membrana activa los canales de Ca2* dependientes de volta
je. y el aumento de Ca2* intracelular estimula la liberación de insulina en las células P del páncreas. En consecuen
cia. se bloquean dichos canales y se produce el mismo efecto que cuando aumenta el ATP intracelular en estas
células.
Recientemente, se ha descubierto otro lugar en estos canales de K’ al que se fijan estructuras de imida-
zolina y que son diferentes a los receptores I( e L que se comentarán en el Capítulo 13. Las estructuras indi
cadas en la Figura 12.34. bloquean el canal de K‘ y son agentes antidiabéticos con posible aplicación tera
péutica.
Midaglizol
Figura 12.34. Otros bloqueantes de canales de K' dependientes de ATP.
3.4.2. Activantes de canales de *K regulados por ATP
Los activantes de estos canales, cuya interacción parece que se produce en la subunidad (3. al incrementar el
eflujo de potasio, hipcrpolarizan la membrana y disminuyen su excitabilidad. Son relajantes del músculo liso,
siendo interesantes como fármacos cardioprotectores, antihipertensores y broncodilatadores, así como en el tra
tamiento de la incontinencia urinaria. Se conocen varios tipos de compuestos que poseen esta acción, siendo los
más importantes los que tienen estructura de benzopirano, cianoguanidina o nitratos orgánicos. Los más estu
diados son los benzopiranos, en los que, para optimizar sus interacciones con el receptor, el sustituyeme de la
posición C(6) ha de ser pequeño y atrayente de electrones (Fig. 12.35).
Cromokalim
Nicorandil
Biinakalim
Diazóxido
Figura 12.35. Algunos activadores del canal de K’ con actividad vasodilatadora.

Cromokalim surgió a partir de los estudios relacionados con la actividad antihipertensiva de los (J-blo-
queantes adrenérgicos. Estos fármacos poseen la estructura general 3. con una cadena de «propanolamina» con
gran libertad confonnacional. siendo el propranolol el más representativo (Fig. 12.36). Ante la duda de que su
efecto antihipertensivo no derivara de un bloqueo de los receptores p-adrenérgicos (véase el Capítulo 13). se
pensó en restringir la conformación de la cadena y preparar análogos cíclicos, incapaces de fijarse al receptor p-
adrenérgico pero que pudieran retener la actividad anlihipertensora. Su síntesis se planificó, tal como se indica
en la figura, por ciclación del éter l.l-dimetil-2-propinil-p-nitrofenílico, subsiguiente formación de la bromhi-
drina. transformación de ésta a epóxido y apertura de éste por aminas. Se llegó así a un prototipo antihipertensi
vo que no bloqueaba al receptor P-adrenérgico. Su manipulación puso de manifiesto la necesidad de los dos
grupos metilo en la posición 2 y de un grupo atrayente de electrones (el mejor fue el grupo ciano) en la posi
ción 6. La mejor amina no fue la isopropilamina, sino la pirrolidina, pero puesto que este derivado no era activo
in vitro, se supuso que se trataba de un profármaco. Dado que la oxidación en a a grupos amino es una reacción
metabólica muy común (véase el Capítulo 7). se sintetizó el análogo derivado de la pirrolidona. que resultó ser
cromokalim. El estudio de su mecanismo de acción demostró que se trataba de un activador de canales de K *;
de hecho, su actividad vasodilatadora se inhibe con la glibenclamida.
Ar-O-CHj-CHOH-CHj-NH-C^CHjJj
Prototipo
(inactivo in vitro)
Figura 12.36. Diseño de cromokalim.
El nicorandil y el pinacidil se utilizan como fármacos antianginosos y antihipertensivos. El minoxidil se

utiliza, por su acción vasodilatodora. contra la alopecia. Finalmente, el diazóxido, desarrollado como derivado
* dependientes de ATP; induce una gran vaso-
del diurético clorotiazida. resultó ser un activador de canales de K
dilatación y se utiliza en las urgencias debidas a hipertensión, siendo además, por su acción hiperglucemiante
(opuesta a la de los bloqueantes de canal del grupo de las sulfonilureas). útil en el tratamiento sintomático de hi-
perinsulinomas no resecables.
La investigación se dirige a la búsqueda de agentes cardioprotectores que activen selectivamente los cana
les de las células del miocardio y tengan una mínima acción vasodilatadora. También se han diseñado compues
tos que combinan la actividad bloqueante de canales de Ca!" (antianginosa) con la agonista de canales de K’
(antiisquémica o cardioprotectora) (véase el derivado de 1.4-dihidropiridina de la Fig. 12.35).
3.4.3. Fármacos que actúan sobre canales de K' dependientes de voltaje
Los bloqueantes de canales de K * dependientes de voltaje se investigan principalmente como fármacos útiles en
cl tratamiento de la esclerosis múltiple, debido a que es uno de los procesos que producen desmielinización del
axón neuronal y, en consecuencia, la apertura de canales de K’ dependientes de voltaje (que normalmente están
estacionarios), produciendo corrientes anormales y fallos en la conducción nerviosa. Entre estos compuestos, se
encuentran la 4-aminopiridina y el cloruro de tetraetilamonio.
3.5. Avermectinas
Las avermectinas son lactonas de dieciséis miembros (Fig. 12.37), que incorporan una porción de espirocetal
(dioxaespiroundeceno). una de hexahidrobenzofurano funcionalizada y un grupo hidroxilo en C-13, que está
glicosidificado. Debido a su hidrofdia. no atraviesan la barrera hematoencefálica de los mamíferos. Se aislaron,
en 1976, a partir de cultivos de Streptomyces avermitilis. La ivermectina (comercializada como antihelmíntico
en veterinaria) es una mezcla de avermectinas y B,b. Su uso en seres humanos se restringe a casos de filaria-
sis. como la oncocercosis ocular y dérmica. Estos fármacos provocan un incremento de iones cargados negati
vamente (fundamentalmente de iones Cl ) lo que provoca parálisis muscular (en los helmintos). Estos canales
de cloruro son independientes del receptor de GABA
*
. en contra de lo que se pensaba hace unos años.
Figura 12.37. Estructura de las avermectinas.
3.6. Diuréticos
La diuresis depende del transporte de agua a través del riñón, el cual viene determinado por cl balance de iones
Cl y Na’, fundamentalmente. Los canales de las células del tejido epitelial del riñón tienen la función de reab
sorber los iones citados que han sido previamente Filtrados junto con otros solutos de la sangre en el glomérulo
(Fig. 12.38).
Figura 1238. Transportes iónicos en el riñón.
Entre los diuréticos que se muestran en la Figura 12.39. la furosemida y sus análogos, a pesar de su es
tructura de sulfonatnida característica de los inhibidores de anhidrasa carbónica (véase el Capítulo 11). no ac
túan como tales, sino que se unen a la proteína contransportadora Na'-K'-2CI . bloqueando la reabsorción de
estos iones en el asa de Henle.
Las benzotiadiazinas inhiben el contrasportador Na'-CF de la membrana del tübulo distal. Como poseen
cierta actividad inhibidora de anhidrasa carbónica, es posible que actúen además por este mecanismo.
Otros fármacos diuréticos con estructura de diaminopirimidina y diaminopirazina que se encuentran par
cialmente ionizados, como la amilorida y cl triamtereno. bloquean el canal de Na', inhibiendo la reabsorción de
este ión en el túbulo distal.
Al inhibir la reabsorción de sodio, se reduce su intercambio con el K’, disminuyendo la eliminación de és
te. Por eso. se denominan diuréticos ahorradores de potasio. Su acción diurética también se debe a la inhibición
del sistema de intercambio Na'/H'. que introduce Na' en el interior de la célula y expulsa H>O‘ al exterior.
Ácidos
ariloxiacéticos
Ácidos
sulfamoilbenzoicos
Benzoliadiazinas
Diaminopirimidinas
y diaminopirazinas
Amilorida Triannereno
Figura 12.39. Diuréticos que actúan bloqueando sistemas de transporte e intercambio iónico en el riñón.
Como consecuencia de la inhibición del sistema de intercambio Na7H‘, la amilorida y sus análogos con
estructura de sulfonilbenzoilguanida (Fig. 12.40) pueden utilizarse para revertir los efectos cardiotóxicos de
los venenos polipeptídicos y de los digitálicos (véase más adelante), y para limitar el influjo de Ca2* (véase
Fig. 12.22) en pacientes cardíacos con alto riesgo de infarto de miocardio (ya que el intercambio *Na
/H repre
senta un 50 % de la entrada de Na
* en la célula cardíaca).
Cariporida
Figura 12.40. Amilorida y análogos.
Muchos aspectos del mecanismo de acción, a nivel molecular, de los fármacos diuréticos, entre los que se
encuentra también el ácido etacrínico, todavía no se han aclarado. Ciertos fármacos inhiben el transporte de
otros y su eliminación renal. Entre ellos, destaca el probenecid (véase el Capítulo 7), que en cambio inhibe la re
absorción de ácido úrico y. por ello, es uricosúrico.
3.7. Los anestésicos generales y los canales iónicos
Los anestésicos generales comprenden un grupo muy heterogéneo de compuestos que, en general, actúan de
modo inespecífico a alta concentración. Los fosfolípidos de las membranas se sugirieron en principio como el
lugar de acción de estos fármacos, ya que la depresión de la excitabilidad celular se relacionaba con su capaci
dad para disolverse en aquéllos y alterar la estructura de la membrana. La anestesia puede inducirse por alcoho
les, alcanos. cetonas, éteres e incluso algunos gases inertes, pero esta aparente falta de especificidad no explica
por qué la actividad anestésica de moléculas relativamente simples, como el isoflurano o el pentobarbital, es es-
tereoselectiva, siendo uno de los enantiómeros más potente que el otro (Fig. 12.41). Actualmente se conocen
muchos datos que sugieren una acción directa de los anestésicos generales en lugares proteicos, como los cana
les iónicos regulados por receptores que se verán en capítulos sucesivos: canal de CT ligado al receptor GABAa
(barbitúricos, como pentobarbital y tiopental, anéstesicos esteroideos, como la alfaxalona y el acetato de alfado-
lona, anestésicos inhalatorios, como el halotano, y fenoles como el propofol): canal de Ca2' ligado al receptor de
glutámico NMDA (ketamina); canal de Na’ ligado al receptor nicotínico de acetilcolina (como los éteres fluora-
dos isoflurano y enflurano) y otros.
Figura 12.41. Estructuras de algunos anestésicos generales.
4. FÁRMACOS QUE AFECTAN A OTROS PROCESOS DE TRANSPORTE ACTIVO DE IONES
Las ATPasas de membrana son enzimas que utilizan la energía de la hidrólisis del ATP para dos transportes aso
ciados. La inhibición de las ATPasas *H
/K *
y Na7K representa una opción para el tratamiento de la úlcera pép
tica y la insuficiencia cardíaca, respectivamente. Otras ATPasas importantes como dianas farmacológicas son
las de Ca27Mg2*. que participan en las células musculares en el transporte de Ca2* al exterior celular o al interior
del retículo sarcoplásmico. En la actualidad, se están proponiendo otras ATPasas como dianas farmacológicas
para diversos procesos patológicos. Entre ellas, resulta especialmente interesante la posible inhibición de la AT-
Pasa de H' de los osteoclaslos, que participa en los procesos de resorción del hueso que se producen en la os
teoporosis.
En general, las ATPasas actúan por un mecanismo de catálisis similar, en el que un resto de ácido aspárti-
co del centro activo de la enzima <E1) se fosforila con ATP. formando un intermedio de aspartilfosfato. liberando
ADP y cambiando su confonnación (E:). En presencia de un ion intracelular, como por ejemplo Na’ en el caso
de una ATP-asa Na'/K', el complejo E,(Na’) se transforma en E;-P(Na’), transportando este ion al exterior de la
membrana y liberándolo. Allí, interactúa con los iones K * extracelulares, se desfosforila, cambiando de nuevo
desde una conformación E>-P(K‘) a una conformación Ei(K’), y en este proceso se transporta el ion potasio al
interior celular para iniciar el ciclo catalítico.
No todos los sistemas de bombeo de cationes son eléctricamente neutros. Por ejemplo, la ATPasa ante
riormente mencionada intercambia tres iones sodio por dos de potasio por cada molécula de ATP que interviene.
4.1. Inhibidores de la ATPasa Na’*/K

. Glicósidos cardíacos de acción inotrópica
Los glicósidos cardíacos que mejor se conocen derivan de la digital, y se utilizan en el tratamiento de la insu
ficiencia cardíaca desde 1785. Su efecto inotrópico positivo se debe a que la inhibición de la ATPasa Na'/K‘ tie
ne como consecuencia una mayor concentración intracelular de Na', lo que produce la activación de una proteí
na de membrana intercambiadora de iones Na'/Ca2' (véase Fig. 12.22). Aumenta así el Ca2' intracelular que. a
su vez. estimula la contracción muscular. Estos inhibidores están formados por la unión de uno o más restos de
azúcar a un hidroxilo en C-3 de agliconas o geninas de estructura esteroidea, con un anillo de lactona insaturada
en C-17 (cardenólido). Las geninas son las activas, pero los azúcares son importantes en la regulación de la far-
macocinética de aquéllas, que es inadecuada. Su principal componente es la digoxina. La ouabaína. por ser más
polar, se absorbe tan mal por vía oral que se administra por vía intravenosa (Fig. 12.42). Estos fármacos, aunque
poseen un índice terapéutico bajo, se utilizan como cardiotónicos.
Figura 12.42. Estructuras y configuración de algunos glicósidos cardíacos inhibidores de ATPasa Na'/K'
Para disminuir su toxicidad y descubrir posibles efectos fisiológicos que puedan conducir a otras aplica
ciones terapéuticas, ya que la ATPasa Na'/K
* es universal en todos los tejidos, se han diseñado análogos de sín
tesis o semisíntesis como posibles fármacos. El problema de identificare! grupo farmacóforo de los «compues
tos digilálicos» sigue sin aclararse completamente, ya que agliconas con estereoquímica A/B trans o C/D trans
(opuestas a la esleroquímica cis de los compuestos naturales representados en la Figura 12.42), pueden también
inhibir la ATPasa, aunque a mayores concentraciones. El condicionante más importante es una interacción hi
drófoba del esqueleto esteroideo. La estereoquímica 17fJ. que en un principio se consideró imprescindible, tam
bién puede alterarse, como ocurre en el compuesto 4 (Fig. 12.43). en el que, además, el anillo de lactona en C-
17 se ha reemplazado por una cadena abierta -CH=CH-Z. en la que Z es un grupo atrayente de electrones que se
requiere para un enlace de hidrógeno con el receptor. El grupo Z puede ser: CO.R. CN, HC=O. Algunos de es
tos compuestos no tienen estructura esteroidea, como los derivados de 14.l5-seco-5p-androstano, análogos del
alcaloide cassaína 5 (tipo 6-8). Estudios de modelado molecular, por superposición de la cassaína con la digito-
xigenina, sugieren que el grupo 7-oxo de aquélla es un receptor de hidrógeno análogo al grupo 14-OH de los
cardenólidos naturales. El grupo etilo de los compuestos 6-8 aumenta la interacción hidrófoba en la cara a y la
Figura 12.43. Otros inhibidores de ATPasa Na". K‘.
4.2. Inhibidores de ATPasa H7K’. Fármacos anti úlcera
Esta enzima, que cataliza el intercambio de un protón por un ion K*. está localizada en las membranas de las cé
lulas parietales de la mucosa gástrica especializadas en la secreción de ácido clorhídrico, produciendo un gra
diente de protones de 106. Es el paso final de un proceso inducido por varios secretagogos endógenos, en el que
participan dos tipos de células fundamentalmente: los mastocitos. que liberan histamina. y las células parietales,
que son responsables de la secreción ácida.
Por la influencia de varios estímulos, se libera la hormona polipeptídica gastrina (véase el Capítulo 15).
que estimula la liberación de histamina. y ésta, al ocupar los receptores de histamina IL (véase el Capítulo 16),
estimula la secreción ácida en la célula parietal. El mismo estímulo se produce tras la activación de los recep
tores muscarínicos de la acctilcolina (véase el Capítulo 14). Todos estos sucesos conectados activan la enzima
ATPasa H'/K' (Fig. 12.44).
Es posible, por lo tanto, inhibir la secreción de ácido bloqueando los receptores muscarínicos, los de his
tamina H2 o los de gastrina con antagonistas selectivos, pero también se puede bloquear el último proceso en la
secreción ácida que es la bomba de protones (ATPasa H7K *).
Hasta ahora, se han desarrollado inhibidores competitivos reversibles con estructura de imidazof l,2-¿/]pi-
ridina que, al parecer, actúan en su forma protonada en el dominio extracelular de la enzima, compitiendo ciné
ticamente con el ion K *. El prototipo (compuesto Sch 28080) y las relaciones estructura-actividad encontradas
se reflejan en la Figura 12.45.
Alquilo pequeño (-CH3)

Alquilo pequeño conteniendo heteroátomo (-CH->OH. -CHo CN)
NH2
Alquilo pequeño (CH3)
Análogo del prototipo en el que

Rs tiene la conformación restringida
Figura 12.45. /K
Inhibidores competitivos reversibles de la enzima ATPasa *H +.
El omeprazol es el prototipo de los inhibidores no competitivos e irreversibles de la enzima, con estructu

ra de 2-(2-piridilmetilsulfinil)-bencimidazol. Es un profármaco que, por su carácter básico (su pKa se aproxima
a 4), se protona en el espacio ácido adyacente a los canalículos secretores de la célula parietal, donde se acumu
la. La protonación del nitrógeno del anillo de bencimidazol va acompañada de la adición del nitrógeno del ani
llo de piridina para dar un intermedio espiránico, el cual, a través de una transposición de Smiles, transforma el
grupo sulfóxido en ácido sulfénico. Tanto éste como la sulfenamida derivada por deshidratación, son especies
activas tióftlas que forman enlaces covalentes de tipo disulfuro con residuos de cisterna de la ATPasa H7K *
(Fig. 12.46).
« Mercaptano» «Disulfuro inactivo» «Sulfenamida»
Figura 12.46. Mecanismo de inhibición de la ATPasa *H7K propuesto para el omeprazol y ciclo metabólico.
La especificidad de acción del omeprazol y de otros análogos, como el lansoprazol y el pantoprazol

(Fig. 12.47), se debe a su bioactivación en el lugar de acción producida por cl pH ácido. Por tanto, los anillos
de piridina y bencimidazol, así como la cadena -CHj-SO-, son esenciales para la actividad en estos com
puestos, siendo los sustituyentes en ambos anillos sólo importantes en la medida en que determinan la velo
cidad de conversión del profármaco ai inhibidor activo. La inhibición es irreversible en condiciones fisioló
gicas, ya que la enzima permanece inhibida durante un largo tiempo. Finalmente (Fig. 12.46), el puente
disulfuro puede reconvertirse a tiol por reacción con el glutatión, y este intermedio, a través de una segunda
transposición de Smiles catalizada por bases, origina el correspondiente sulfuro, que finalmente se oxida en
el hígado al sulfóxido original. Cabría pensar que el omeprazol actúa como un catalizador que se regenera en
el hígado; sin embargo, sólo una fracción de la dosis completa el ciclo, ya que el resto se oxida hasta sulfona
y se elimina.
H 1
Omcprazol: X = 5-OCHj
Y = 3-CH,. 4-OCH3. 5-CH3
Lansoprazol: X = H
Y = 3-CH3,4-OCH2CF3
Pantoprazol: X = 5-OCHF-»
Y = 3-OCH3.4-OCH3
Figura 12.47. Inhibidores irreversibles no competitivos de la ATPasa H7K

.*
En la búsqueda de otras estructuras que. al igual de los 2-(2-pirid¡lmetilsulfinil)-bencimidazoles, se bioac-

tiven a especies tiófilas a pH ácido, se han encontrado derivados de 2-bencilsuirmilnicotinamida (Fig. 12.48).
Éstos se transforman en isotiazolopiridinas, a través de intermedios de sulfonio, por eliminación del catión ben
cílico, estabilizado por resonancia con los dos grupos metoxilo. Las isotiazolopiridinas así formadas son espe
cies tiófilas que inactivan la ATPasa H7K
*.
«Sulfonio»
Isotiazolopiridina
(Fármaco activo)
R= CH,-CH(CH,>,
Figura 12.48. Otros inhibidores irreversibles de la ATPasa H7K'.
5. FÁRMACOS QUE AFECTAN A PROCESOS DE TRANSPORTE ACTIVO

DE NEUROTRANSMISORES Y HORMONAS
Muchos fármacos actúan de forma indirecta (sin interactuar con los receptores) al interferir los procesos de
transporte, almacenamiento y liberación de neurotransmisores. Comenzaremos comentando los que están rela
cionados con la noradrenalina, la dopamina y la serotonina. Como se verá en el Capítulo 13, estos neurotrans
misores se almacenan en vesículas. El transporte al interior de las mismas, en la neurona presináptica corres
pondiente, se realiza mediante una proteína de doce segmentos transmembrana hidrófilos, que acopla la entrada
de los neurotransmisores con la salida de protones.
Ciertos fármacos, como la reserpina (Fig. 12.49). se unen a dicha proteína, inhibiendo el almacena
miento de los neurotransmisores. El resultado es que no hay neurotransmisor disponible cuando llega un im
pulso nervioso, lo que produce hipotensión y sedación. Un segundo grupo de fármacos impide la liberación
de los neurotransmisores desde sus vesículas de almacenamiento. Son los llamados bloqueantes adrenérgicos
neuronales, entre los que se encuentran derivados de guanidina como la guanetidina. la betanidina, la debri-
soquina y el guanadrel. A diferencia de la reserpina, no atraviesan la barrera hematoencefálica, por lo que no
poseen efectos sedantes centrales, y se utilizan como fármacos antihipertensores. Otro fármaco que actúa de
forma similar es el tosilato de bretilio. pero dada su baja absorción oral y la tolerancia que produce, se usa só
lo como antiarrítmico (véase el Apartado 3.1.2). ya que incrementa el período refractario de las fibras del
miocardio.
NH-CH,
Betanidina
Tosilato de bretilio
Figura 12.49. Fármacos que interfieren el almacenamiento y la liberación de las vesículas de noradrenalina.
dopamina y serotonina.
Además de su rápido metabolismo, los neurotransmisores adrenérgicos, dopaminérgicos y serotoninér-

gicos. dejan de actuar sobre sus receptores presinápticos y postsinápticos porque son recaptados desde la si-
napsis a la presinapsis (véase el Capítulo 13). Este proceso se realiza a través de una «bomba de amina», que
es un sistema de transporte activo que forma parte de una familia de transportadores dependientes de Na* y
C1 . Los fármacos que interfieren este proceso se pueden clasificar en dos categorías: los verdaderos inhibi
dores de recaptación que bloquean la «bomba de amina», y otro grupo de compuestos que se verán en el
Capítulo 13, como la tiramina, la octopamina, las efedrinas, las anfetaminas (entre ellas, la fenfluramina)
(Fig. 12.50), que son captados por esta bomba de amina y, a continuación, por otro mecanismo de recapta
ción vesicular más específico que la bomba presináptica, penetran en las vesículas de almacenamiento y des
plazan a los neurotransmisores que, al liberarse, producen efectos postsinápticos. Algunos de ellos compiten,
además, con las catecolaminas por las MAO y. en consecuencia, protegen a los neurotransmisores de su des
trucción y elevan su concentración libre. La fenfluramina es una anfetamina que vacía las vesículas de sero
tonina y se usa en el control del apetito. Actualmente, se estudian diversos compuestos que interfieren el al
macenamiento o la liberación de la acctilcolina de sus vesículas como posibles fármacos útiles en el
tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.
CH,
CH.-CH-NH-QH,
Tiramina Octopamina
/----- \ °1’
v 7—CH-CH-NH-R'
\ —/ 1
R Fcnfluramina
Efedrinas Anieiaminas
Figura 12.50. Fármacos que compilen con la adrenalina, la dopamina y la serotonina en la «bomba de amina»
y en el almacenamiento en vesículas.
Al otro grupo, constituido por los verdaderos inhibidores de la recaptación de los neurotransmisores cita
dos por bloqueo de la «bomba de amina», pertenecen los fármacos antidepresivos de estructura tricíclica.
Éstos elevan el tono del paciente con depresión endógena al inhibir la recaptación de noradrenalina y se
rotonina.
Entre ellos, las aminas secundarias, como la desipramina y la nortriptilina (Fig. 12.51). son potentes inhi
bidores de la recaptación de noradrenalina. mientras que las aminas terciarias, como la imipramina. la amitripti-
lina y la doxepina, son más selectivos como inhibidores de la recaptación de serotonina.
Doxepina
Nombre Nombre R
Imiparmina CH, H Amitriptilina CH,

Clorimipramina CH, Cl Nortriptilina II
Desipramina H II
Cianopramina CH, ( \
Figura 12.51. Antidepresivos que actúan por bloqueo de la recaptación de neurotransmisores.
Otros antidepresivos son inhibidores selectivos de la rccaplación de un determinado neuretransmisor. Así,

la reboxetina (Fig. 12.52) inhibe selectivamente la recaptación de noradrenalina. la nomifensina inhibe la recap
tación de dopamina. mientras que ciertos derivados tricíclicos con grupos atrayentes de electrones, como la cia
nopramina (Fig. 12.50), la fluoxetina (Prozac” de Lilly), la fluvoxamina, la paroxetina y la sertralina. son inhi
bidores selectivos de la recaptación de serotonina.
En los últimos años, está siendo muy activa la investigación sobre la inhibición de la recaptación de dopa
mina. ya que al parecer es uno de los procesos que colabora en los efectos centrales de la cocaína.
(±)-Fluoxciina
Figura 12.52. Antidepresivos que actúan por bloqueo de la recaptación selectiva de un neurotransmisor.
Otro neurotransmisor cuyo principal mecanismo de desactivación no es su metabolismo, sino su recap

tación, es el GABA (véase el Capítulo 15). que es reabsorbido por la neurona presináptica o es transportado
a las células gliales donde finalmente se degrada.
Se conocen inhibidores de ambos tipos de transporte activo que tienen interés como antiepilépticos po
tenciales o como neuroprotectores, ya que, al inhibir la recaptación de GABA, aumentan los efectos de éste.
Pequeños aminoácidos, como el ácido nipecótico, la guvacina, THPO y THAO (Fig. 12.53). son po
tentes inhibidores de dicha recaptación. Como son demasiado polares para atravesar la barrera hematoence
fálica. se han preparado análogos más lipófilos. Entre ellos, se encuentran el (V-4,4-difenil-3-butenil deriva
do (SKF 89976-A) y sus análogos, tiagabina. Cl-966, diariloximas y diarilviniléteres.
Un compuesto que aumenta la liberación de GABA y se usa como relajante muscular es el baclofeno.
h2n OH OH
GABA
Ácido nipccótico
THPO THAO
«Diariloxima»
(RFBaclofeno
Figura 12.53. Fármacos que inhiben el transporte de GABA o aumentan su liberación.
Algunos vasodilatadores coronarios, como el dipiridamol, la papaverina y el dilazep (Fig. 12.54). deben
su actividad al bloqueo de la recaptación de adenosina extracelular.
Al inhibirse este proceso, se potencia la acción de esta purina, que se libera en el tejido cardíaco isquémi
co para producir vasodilatación coronaria.
Dilazep
Figura 12.54. Vasodilatadores coronarios que actúan por bloqueo de la recaptación de adenosina.
Finalmente, algunos fármacos utilizados en el tratamiento del hipertiroidismo, como el tiamazol o el me-
tiamazol, el carbimazol (un profármaco del tiamazol) y el 6-propiltiouracilo (Fig. 12.55), actúan inhibiendo la
liberación de la triyodotironina (Tj. véase el Capítulo 17). aunque muestran muchos efectos secundarios.
II CO,Et
CH, CH,
Tiamazol Carbimazol 6-Propiltiouracilo
(metiamazol)
Figura 12.55. Inhibidores de la liberación de triodotironina.
6. QUIMIOSENSIBILIZADORES DE FÁRMACOS ANTITUMORALES QUE ACTÚAN INHIBIENDO

EL TRANSPORTE MEDIADO POR LA GLICOPROTEÍNA P (INHIBIDORES MDR)
La glicoproteína P funciona como una bomba de eflujo de compuestos dependiente de ATP, que está implicada
en la resistencia que muestran muchos tumores al tratamiento con ciertos antitumorales lipófdos, denominada
MDR (multi drug resistance). Estos antitumorales no están relacionados estructuralmente, y entre ellos se en
cuentran la doxorrubicina, el etopósido o el taxol. Cuando se sobreexpresa esta proteína transmembrana, estos
fármacos se transportan al exterior celular y dejan de ser eficaces, ya que su concentración intracelular descien
de por debajo de sus dosis activas. Muchos compuestos, antre los que se encuentran bloqueantes de los canales
de Ca2’. como el verapamilo y las dihidropiridinas. antiarrítmicos, como la quinidina, inmunosupresores, como
la ciclosporina A. etc., inhiben esta proteína. Se denominan quimiosensibilizadores porque, cuando se adminis
tran en combinación con los antitumorales en tumores que se han hecho resistentes a la quimioterapia, revierten
los efectos de dicha proleína. restaurándose las concentraciones intracelulares de aquéllos. Ninguno de ellos se
utiliza todavía en terapéutica.
7. FÁRMACOS IONÓFOROS
7.1. Fármacos que forman complejos metálicos
A diferencia de los iones de metales alcalinos y alcalinotérreos, los metales de transición rara vez se encuentran
libres, y en su mayor parte forman complejos con proteínas de bajo peso molecular que atraviesan la membrana
por difusión pasiva. La interferencia con estos procesos puede tener un gran interés terapéutico.
Además de los elementos esenciales para la vida que se encuentran en el organismo humano en cantida
des importantes, como son el carbono, el oxígeno, cl hidrógeno, el nitrógeno, el calcio, el magnesio, el fósforo,
el azufre, el potasio, el sodio y el cloro, hay muchos otros elementos que también son esenciales, pero que se en
cuentran en muy pequeña concentración. Son los elementos traza u oligoelementos. Los esenciales son: Li (gru
po IA). Mo (VB), Mn (VIB), Fe y Co (VIII), Cu (IB) y Zn (IIB); otros, como el boro (IIIA), el vanadio (VB), el
selenio (VIA) y el níquel (VIII), entre otros, son beneficiosos aunque no esenciales. Las carencias de los meta
les de transición (que en su conjunto pesan menos de 10 g) son particularmente importantes, ya que muchos de
ellos forman parte de las más de 1.000 metaloenzimas conocidas. De ellas, casi la mitad contienen Zn, mientras
que otras requieren Mn, Mo, Cu, Ni o Se. El Co desempeña un papel importante en la vitamina B,, y en algunos
procesos radicalarios; las oxidasas de Cu, entre otras importantes misiones, son captadoras de radicales libres; y
ciertos metales actúan en procesos redox facilitando el flujo de electrones.
El proceso por el que un metal se absorbe de la dieta, atraviesa las membranas celulares, se incorpora a
una metaloenzima o a otro centro activo en el estado de oxidación correcto, y es posteriormente excretado es
muy complejo.
Muchos fármacos son ligandos de iones metálicos, es decir, son compuestos capaces de donar un par de
electrones a un orbital vacante del ión. Los grupos donadores más frecuentes son: RS . -NH,, -COO", -O . PO?"
y -NO, . Los metales tienen dos tipos de valencia: una valencia primaria, responsable de su ionización (que se
complementa con iones negativos como Cl", NO3‘, etc.) y otra secundaria no ionizable (covalente), que se deno
mina número de coordinación. Estas valencias secundarias presentan una determinada dirección desde el ion a
los extremos de un tetraedro o de un octaedro, si el número de coordinación es 4 ó 6, respectivamente (los nú
meros de coordinación pueden ser mayores). Así, el Fe2*, que tiene un número de coordinación 6, forma el com
plejo ferrocianuro potásico [K4Fe(CN)6], muy poco tóxico, cuando se combinan dos soluciones (muy tóxicas)
de cianuro potásico y de cianuro ferroso (Fig. 12.56). En esta estructura, la porción [Fe(CN)J
*
" se ioniza como
una sola entidad, sin que se produzcan iones CN" tóxicos.
Figura 12.56. Estructura del complejo [K4Fe(CN)6¡.
Los ligandos grandes y polidentados (con dos o más puntos de unión) pueden unirse al ion metálico a tra
vés de dos o más enlaces, formando quelatos muy estables. Por ejemplo, la porfirina es un ligando polidentado
para el Fe
*" en la hemoglobina y para el Co2* en la vitamina B,2. Como ocurre en el [K4Fe(CN)6], la coordina
ción con metales enmascara las propiedades del ligando, pero también permite la existencia de iones metálicos
en un estado de valencia desfavorable, que puede ser necesario para realizar sus funciones bioquímicas, así
como el paso de los iones a través de las membranas celulares.
Algunos fármacos actúan formando complejos metálicos. Por ejemplo, el crecimiento de muchos micro
organismos es tan dependiente de ciertos metales que muchos fármacos antimicrobianos actúan secuestrándo
los. Uno de los agentes quclantes de Fe’* más antiguos es la 8-hidroxiquinolina (oxina), que se administra como
antiséptico, antifúngico o antihelmíntico, en forma de sulfato o aluminio sulfato. Los 5,7-diiodo- y 5-cloro-7-
iodo-derivados de la oxina son útiles en las disenterías bacterianas (Fig. 12.57). Los complejos de Fe3' que ori
ginan estos fármacos catalizan la oxidación de ciertos grupos SH esenciales para la actividad bioquímica de los
parásitos.
Tctraciclina
Figura 12.57. Fármacos antimicrobianos que forman complejos con metales.
La actividad antituberculosa de la isoniazida, la tiacetazona y el etambutol depende de su capacidad para

formar quelatos de Cu(ll), que interactúan con los ácidos nucleicos, al igual que el antiviral metisazona. Las te-
traciclinas poseen grupos hidroxilo y dimetilamina en posiciones adecuadas para formar complejos con Ca2* y
Mg2*. Al parecer, su actividad antibacteriana se debe a la formación de un complejo con Mg2* lipófilo en la
membrana de la célula bacteriana. El aumento de lipofilia le facilita la permeabilidad al interior, donde actúa in
hibiendo la biosíntesis de proteínas, interfiriendo el enlace del aminoacil-ARN-t a sus receptores en el riboso-
ma. La actividad de varios antitumorales que interactúan con el ADN depende también de la formación de com
plejos con metales, como es el caso de las bleomicinas o las antraciclinas daunomicina y adriamicina (véase el
Capítulo 18).
Ciertas enfermedades son consecuencia de la acumulación de un metal que no se utiliza adecuadamente.
Así, en la enfermedad de Wilson, el cobre de la dieta no se utiliza para sintetizar la ceruloplasmina (una metalo-
enzima), por lo que se deposita en ciertos órganos y puede producir la muerte. El progreso de la enfermedad
puede retrasarse en gran medida utilizando n-penicilamina (Fig. 12.59) o trietilenotetramina (TREN) como
agentes quelantes (Fig. 12.58).
Los compuestos quelantes de Fe se llaman sideróforos, y muchos de ellos son de origen bacteriano. La
desferroxiamina B (cuyo metanosulfonato se denomina desferal) es un quelante de Fe(III) que se utiliza en el
tratamiento de la enfermedad genética talasemia (anemia falciforme), ya que en ésta se producen sobredosis de
hierro como consecuencia de las transfusiones sanguíneas repetidas que hay que administrar a los enfermos (la
función de ácido hidroxámico presente en su estructura posee buenas propiedades quelantes). La deferiprona es
otro fármaco capaz de movilizar el hierro de ciertas proteínas de depósito, como la ferritina, posiblemente por
que por su pequeño tamaño puede penetraren ellas hasta llegar al hierro depositado (debido a su nefrotoxicidad,
se estudian actualmente análogos menos tóxicos). La desferritiocina es otro agente quelante tridentado. cuyo
grupo farmacóforo está formado por el nitrógeno de tiazolina, el grupo carboxilo y el hidroxilo aromático. Es
activa por vía oral, pero sufre la desactivación metabólica ya que su grupo hidroxilo. necesario para su efecto
quelante, forma fácilmente O-glucurónidos.
Complejo de Felllll y desferroxiamina B
Figura 12.58. Otros fármacos quelantes de Cu y Fe.
Entre los agentes quelantes que se utilizan en terapéutica para movilizar el exceso de otros iones metáli
cos que producen intoxicaciones, podemos citar al 2,3-dimercaptopropanol (dimercaprol. BAL = British Anti-
Lewisite, dicaptol, sulfactin) (Fig. 12.59). que ha de inyectarse en forma de una suspensión oleosa. El dimerca
prol posee dos grupos SH donadores y se utiliza como antídoto en intoxicaciones por As, Au(I) y Hg(l.II), con
los que forma complejos hidrosolubles. El derivado sulfonado dimeval, hidrosoluble, se utiliza como alternativa
en las intoxicaciones por mercurio y arsénico. El EDTA4 (ácido etilenodiaminaWJVJV'JV'-tetraacético) contie
ne 4 átomos de oxígeno y 2 de nitrógeno donadores, y suele administrarse en forma de sal disódica (la sal letra-
sódica es demasiado alcalina), para movilizar Pb(Il), en las intoxicaciones, o Ca(II). en la hipercalcemia. En la
primera aplicación, dado que la especie cargada es incapaz de atravesar las membranas celulares, se administra
previamente otro agente quelante como la D-penicilamina. Ésta procede de la degradación de la penicilina (véa
se el Capítulo 10), y es eléctricamente neutra, conteniendo un átomo de azufre, otro de nitrógeno y otro de oxí
geno donadores. Moviliza el plomo intracelular, lo transporta a la sangre y, tras la administración de EDTA, es
te agente forma un complejo de Pb hidrosoluble que se elimina por la orina. El (V-acetilderivado de la
D-penicilamina se utiliza también en intoxicaciones por mercurio. En algunas intoxicaciones producidas por
H
H-------- SH SH
H-------- SH SH
H-------- OH
H
Dimercaproi Dimeval
(BAL)
NH-CO-CH,
D-Pcnicilamina /V-acetil-D-pcnicilamina
Figura 12.59. Fármacos útiles en el tratamiento de intoxicaciones por metales.
contaminaciones de plutonio y americio, procedentes de la industria nuclear, se emplea el ácido dietilenotriami-

napentaacético (DTPA).
7.2. lonóforos formadores de canales
Los péptidos valinomicina (Fig. 12.60) y gramicidins A (Fig. 12.61) son antibióticos ionóforos que actúan
como transportadores catiónicos artificiales en las membranas celulares y, al modificar los gradientes de con
centración iónica y de potencial, la célula muere. Desgraciadamente, estos agentes no muestran toxicidad selec
tiva para las células bacterianas y las de los mamíferos, por lo que no pueden usarse en terapéutica. Sin embar
go. su mecanismo de acción es muy interesante. La valinomicina posee una estructura cíclica formada por tres
Figura 12.60. Estructura del antibiótico ionóforo valinomicina.

moléculas de L-valina, tres de o-valina. tres de ácido L-láclico y tres de ácido t>-2-hidroxiisovalérico (d-Hív),
unidos de tal forma que se alternan los enlaces éster con los enlaces amida. Es liposoluble, ya que posee un ex
terior hidrófobo, mientras que en el interior, los grupos carbonilo polares de las funciones éster y amida son hi
drófilos. dejando un hueco capaz de acomodar el catión K’ desnudo y transportarlo, en un proceso de difusión
facilitada, fuera de la célula. Esta interferencia con los sistemas de transporte iónico, resulta letal.
La gramidicina A es un péptido que contiene 15 aminoácidos. Debe disponerse como una hélice con un
exterior hidrófobo, que interactúa con los lípidos de la membrana, y un interior en el que se sitúan grupos hidró
filos que permiten el paso de iones.
Se ha propuesto que dos moléculas de gramicidina A (una es demasiado corta) forman un poro a través
del cual pasan los iones (Fig. 12.61).
H-C-Val-Gly-Ala-o-Lcu-Ala-D-Val-Val-D-Val-Trp-o-Leu-Trp-is-Leu-Trp-o-Leu-TrpNH-CHj-CHjOH
O Gramicidina A
Flujo de iones
Figura 12.61. Estructura y mecanismo de acción de la gramicidina A.
8. FÁRMACOS QUE ACTÚAN EN LA MEMBRANA CITOPLÁSMICA COMO SISTEMAS

TRANSPORTADORES DE MOLÉCULAS PEQUEÑAS
El agente antifúngico anfotericina B (Fig. 12.62), aislado de Streptomyces nodosus, es una molécula formada
por una región hidrófoba poliénica y otra hidrófita, que contiene varios grupos hidroxilo, un carboxilo y un res
to de azúcar.
Varias moléculas pueden agruparse formando un túnel o canal que permite escapar del interior celular al
exterior compuestos polares, mientras que la región hidrófoba interactúa con las estructuras lipídicas de la
membrana.
La polimixina B es otro antibiótico que también actúa dentro de la membrana celular formando complejos
y es capaz de transportar al exterior celular moléculas pequeñas, como los nucleósidos.
Su toxicidad selectiva permite su utilización en terapéutica contra cepas de Pseudomonas resistentes a
otros antibióticos. Se administra por vía intramuscular.
L-Leu — l-DAB
l.-DAB
l-DAB
L-Thr
I
l-DAB
C=O
I
(CH2)4
CH -CH,
CH2CH'
Polimixina B
(DAB = ácido L-a.y-
diaminobutírico)
Figura 12.62. Anfotericina B (mecanismo de acción) y polimixina B.
9. AGENTES QUE ROMPEN LA MEMBRANA CITOPLÁSMICA
Algunas de las estructuras anteriormente citadas, y otras muchas, afectan a la integridad de la membrana cito-
plásmica, produciendo incluso su ruptura. Así funcionan muchos agentes antimicrobianos no específicos, como
los disolventes orgánicos, fenoles y detergentes catiónicos. Muchos antipalúdicos, como la cloroquina, la amo-
diaquina y sus análogos, y los derivados de artemisina (Fig. 12.63), interfieren el mecanismo de la hemoglobina
en los parásitos interactuando con la ferriprotoporfirina IX, o hemina. que es uno de los pigmentos de la degra
dación oxidativa de la hemoglobina. La hemina es tóxica porque lesiona las membranas del parásito, al promo
ver la peroxidación de los fosfolípidos de la membrana (véase el Capítulo 19). por lo que se transforma, por
unión a una proteína, en un pigmento inerte, no tóxico, que se denomina hemozoína. Cuando los antipalúdicos
citados se unen a la hemina, forman un complejo soluble que impide la destoxificación de la hemina a través de
su transformación en hemozoína, produciéndose como resultado la muerte del plasmodio por la lesión de la
membrana citoplásmica anteriormente comentada.
Cloroquina
R' = R2 = Et
Amodiaquina
Desetilcloroquina R' = R- = Et
R1 = Et. R2 = H Desctilamodiaquina
*
R1 =Et.R =H
Figura 12.63. Antipalúdicos que actúan rompiendo la membrana citoplásmica tras su interacción con la hemina.
BIBLIOGRAFÍA
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Smith, H. J. (ed.): Smith and Williams' Introduction to the Principles of Drug design and Drug Action, 3.a edición, Har
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Fármacos que actúan sobre receptores
de membrana (I). Fármacos que actúan
sobre receptores adrenérgicos,
dopaminérgicos y serotoninérgicos
E. Raviña
1. INTRODUCCIÓN
Los receptores que aquí nos ocupan reciben el calificativo de adrenérgicos, dopaminérgicos y serotoninérgicos, se
gún que el neurotransmisor que interactúa con ellos sea la noradenalina (NA) o la adrenalina, la dopamina (DA) o
la serotonina (5-hidroxitriptamina, 5-HT). Los receptores adrenérgicos a,, a2, P, y p2, los dopaminérgicos D, y D_>.
y varios serotoninérgicos (5-HT,A, 5-HT,c y 5-HTj) pertenecen, al igual que los receptores muscarínicos de acetil-
colina y muchos receptores de péptidos, a una superfamilia de receptores acoplados a proteínas G. Éstos activan o
inhiben proteínas que enlazan GTP (proteínas G). las cuales, a su vez, activan o inhiben enzimas que forman se
gundos mensajeros, como AMPc o GMPc (adenil o guaní Iciclasas), inositol-1,4,5-trifosfato y diacilglicerol (hidro-
lasas de fosfatidildifosfato), que a su vez afectan a la fosforilación intracelular (activación de cinasas), a la movili
zación de Ca2*. etc. Otros receptores activan canales iónicos o son canales (Fig. 13.1 y Capítulo 3).
Señales extracelulares
Figura 13.1. Receptores acoplados a proteínas G. Esquema simplificado de algunas señales de transmisión.
Todos los receptores de esta familia presentan siete dominios transmembrana que contienen aminoácidos
hidrófobos, por lo que se llaman receptores 7-TM. Existe gran homología entre ellos, lo que explica la dificul
tad para encontrar ligandos específicos. A través de experimentos de mutagenesis con los receptores [J-adrenér-
gicos y dopaminérgicos Di, se ha determinado la existencia de tres aminoácidos responsables del enlace a sus li
gandos: un residuo de ácido aspártico en el dominio TM3, que forma un par iónico con la función amina
protonada de las catecolaminas neurotransmisoras, y dos residuos de serina en el dominio TM5, responsables
del enlace de hidrógeno con los hidroxilos fenólicos. En el caso de los P-adrenérgicos, se sabe que el Asp-98 es
esencial para el efecto agonista, mientras que el Asp-133 determina fundamentalmente el enlace con los antago
nistas. Las interacciones con TM5 parecen cruciales para que se produzca el cambio de conformación de estos
receptores y, en consecuencia, la interacción con la subunidad a de la proteína G (Fig. 13.2).
Figura 13.2. Representación esquemática de un receptor p-adrenérgico.
La familia de los receptores adrenérgicos interviene en las acciones de los neurotransmisores con estruc
tura de catecolamina adrenalina y noradrenalina. A la clasificación inicial de éstos en tipos a y p, siguió la sub
división de los receptores adrenérgicos P en los subtipos P,, p2 y, más recientemente, p3. Sin embargo, la sub
clasificación de los receptores adrenérgicos a ha sido menos clara. En 1973, se propusieron los subtipos a, y a2
como receptores postsinápticos y presinápticos, respectivamente. Sin embargo, pronto se vio que, aunque la
mayor parte de los receptores a2 son presinápticos, también pueden ser postsinápticos, e incluso estar localiza
dos fuera de las sinapsis, por ejemplo en las plaquetas. Se ha sugerido que la clasificación de los receptores
adrenérgicos en los tipos ab a2 y p es preferible a la división en a y p.
Cada uno de estos tres tipos de receptores se acopla a una familia de proteínas G distinta y, mientras que
los tipos a, y P tienen un tercer lazo intracelular corto y una porción CO2H terminal larga, el receptor a2 tiene
este lazo grande y el extremo CO2H corto. Los receptores a2 se han clasificado, a su vez, en varios subtipos:
a2A, «¡b. «te. y «io. cuyas funciones específicas todavía no se conocen completamente.
El sistema nervioso de los vertebrados se divide en sistema nervioso central (SNC), que comprende el en
céfalo y la médula espinal, y el sistema nervioso periférico (SNP). que inerva al resto del cuerpo. Las órdenes
del SNC a todos los órganos del cuerpo y a la periferia son transmitidas por el sistema nervioso autónomo,
mientras que las órdenes a los músculos esqueléticos lo son por el sistema motor-esquelético. Se entiende por
conducción nerviosa el paso de un impulso a lo largo de una neurona, y por transmisión el paso de un impulso a
través de una sinapsis. Como las células nerviosas son excitables, un potencial de acción o impulso nervioso in
vierte el potencial de reposo desde -50 ó -80 mV hasta un valor positivo de 30-40 mV (Capítulo 12). Esta des-
FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (I) 369
polarización se propaga a lo largo del axón hasta su terminación, y allí se inicia una serie de fenómenos que per
miten la transmisión del impulso a través de la sinapsis o de la unión neuroefectora, por mediadores químicos
llamados neurotransmisores. Éstos se biosintetizan en las terminaciones axónicas y se almacenan dentro de las
vesículas sinápticas en forma iónica, como la acetilcolina. o como complejos con ATPy proteínas, como la nor-
adrenalina. En estado de reposo, existe una liberación lenta y continua de cantidades mínimas de neurotransmi-
sor, insuficientes para iniciar el impulso. Sin embargo, la llegada de un potencial de acción hace que las vesícu
las liberen el neurotransmisor. en un proceso de transporte dependiente de la concentración de iones calcio. El
neurotransmisor liberado cruza la hendidura sináptica e interactúa con receptores en la membrana de la célula
efectora o postsináptica, creando un potencial de acción que se propaga por dicha célula. Por otro lado, el re
ceptor puede interactuar con receptores presinápticos (autorreceptores) o ser recaptado por la célula presinápti-
ca(Fig. 13.3).
Terminal nerviosa noradrcnérgica
Adrenérgicos Agentes de bloqueo

indirectos adrenérgico
Tirosma reserpina
efedrina
guanetidina
anfetamina
Directos a-bloqueantes
a-agonistas
DOPAMINA (DA)
a/a,
noradrenalina
adrenalina
prazosina
fenilefrina
O^-clonidina ft-bloqueantes
0|/02
propranolol
[^-agonistas timolol
oxprenolol
adrenalina P|-cardioselectivo
Meta
isoprenalina atenolol
bolites
02 acebutolol
salbutamol
terbutalina
\o
0. í ()X!I
noradrenalina Receptores fí
AdeniJcidasa
AMPcf IP, +DAG
| Efectos simpáticos |
Figura 13.3. Modelo esquemático de una sinapsis adrenérgica. Fármacos que actúan en el sistema nervioso
simpático.
2. FÁRMACOS ADRENÉRGICOS (SIMPATICOMIMÉTICOS)
Los simpaticomiméticos son fármacos que imitan, total o parcialmente, las acciones de la adrenalina o de la
noradrenalina. Pueden actuar directamente sobre los receptores adrenérgicos a. sobre los p o sobre ambos, o
bien, indirectamente, en las terminaciones presinápticas.
2.1. Fármacos adrenérgicos presinápticos
La parte del sistema nervioso autónomo o vegetativo (SNA) cuyo neurotransmisor desde la terminación post-
ganglionar al órgano elector es la noradrenalina (NA) y, en menor extensión, la adrenalina (también denomina
da simpatina. epinefrina) se conoce como sistema nervioso simpático o adrenérgico. Ejerce un papel importante
en la regulación de muchas funciones fisiológicas, como la presión sanguínea, el ritmo y la fuerza de contrac
ción cardíacas, la motilidad intestinal, el tono de la musculatura lisa bronquial, etc.
La biosíntesis de la noradrenalina tiene lugar en las dendritas sinópticas, a partir del aminoácido tirosina.
por la acción de la tirosina hidroxilasa, que la transforma en dihidroxifenilalanina (DOPA). Una descarboxilasa
transforma la DOPA en dopamina (DA), que es también un neurotransmisor (véase el Capítulo 11 y la Figura
13.5), y ésta se convierte en noradrenalina (NA) por la acción de la dopamina p-hidroxilasa. La/V-metilación de
la noradrenalina a adrenalina es catalizada por la feniletanolamina W-meliltransferasa.
Tirosina
hidroxilasa Descarboxilasa
de aminoácidos
aromáticos
Dopamina Feniletanolamina
3-hidroxilasa N-metil transferasa
(cofactor: 5-metil
metionina)
Dopamina
Adrenalina
Figura 13.5. Biosíntesis de catecolaminas.
La enzima limitante de este proceso biosintético es la tirosina hidroxilasa y, por tanto, el punto lógico de
ataque en el diseño de fármacos que. como la a-metiltirosina. inhiben la biosíntesis de catecolaminas. La nor-
adrenalina. la adrenalina y la dopamina se conocen genéricamente como catecolaminas. por ser derivados de la
p-fenilctilamina con estructura o-difenólica (el tf-difenol, u o-dihidroxibenceno, se denomina comúnmente ca-
tecol o pirocatecol).
Una vez sintetizada, la noradrenalina se almacena en las vesículas sinápticas formando un complejo con
ATP y cromogranina. una proteína acida que la protege de su destrucción por la monoaminooxidasa (MAO).
Una vez liberada en la hendidura sináptica, como consecuencia de la llegada de un potencial de acción o por
otros mecanismos, puede:
I. Ser recaptada a la neurona presináplica y almacenada en las vesículas por procesos de transporte acti
vo, siendo ésta su principal vía de finalización de sus efectos.
2. Ser inactivada enzimáticamente por la acción combinada de MAO y de calecol-O-metil transferasa
(COMT). enzima que metila el hidroxilo fenólico en meta.
FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRAN A(l) 371
3. Actuar sobre los receptores presinápticos (autorreceptores), cuya estimulación regula la biosíntesis y
liberación del neurotransmisor.
4. Actuar sobre los receptores situados en la membrana postsináptica (Fig. 13.3).
En el Capítulo 12, se han comentado algunos fármacos que actúan en el transporte y almacenamiento. Así
la guanetidina y el bretilio impiden el transporte activo a las vesículas de almacenamiento, y la reserpina actúa
vaciando las vesículas. En ambos casos, se produce como efecto una menor cantidad de noradrenalina para ac
tuar en sus receptores sinápticos, lo que justifica sus aplicaciones terapéuticas como antihipertensores. A causa
de sus efectos secundarios, su uso es limitado. El proceso de recaptación de la noradrenalina desde la hendidura
sináptica al interior de la presinapsis. que se denomina bomba de amina, se ve interferida por algunos antidepre
sivos. De ello se deriva una mayor disponibilidad de neurotransmisor para interactuar con receptores postsináp-
ticos y, por consiguiente, una potenciación de la transmisión adrenérgica.
Por otra parte, se ha comentado en el Capítulo 11 que los inhibidores selectivos de MAO-A, como la clor-
gilina. prolongan la vida de la noradrenalina y pueden utilizarse como antidepresivos.
2.2. Agonistas adrenérgicos indirectos
Los agonistas adrenérgicos indirectos como las efedrinas, las anfetaminas y otros compuestos relacionados
(Fig. 13.6). son derivados de la feniletilamina carentes de hidroxilos fenólicos, por lo que no interactúan con los
receptores adrenérgicos. No obstante, al provocar un incremento de la concentración del neurotransmisor en los
receptores, se conocen como agonistas adrenérgicos indirectos. Este efecto se produce por un mecanismo múlti
ple. ya que inhiben la recaptación del neurotransmisor (del mismo modo que los antidepresivos tricíclicos) e in
crementan su liberación. Algunos son inhibidores de la MAO. Muchos son también estimulantes del SNC y han
encontrado aplicación como anoréxicos o depresores del apetito (véase el Apartado 5).
R = OH
R’ = H. CH,. heterociclo
HC-R
a¿ HC-NH-R'
N CH,
Z \
Figura 13.6. Estructura general de los fármacos adrenérgicos indirectos.
Al carecer de grupos OH fenólicos, son estables y activos por vía oral. Los que carecen del grupo hidroxi
lo bencílico, como las anfetaminas, son todavía menos polares, atraviesan con mayor facilidad la barrera hema
toencefálica y, en consecuencia, producen un mayor estímulo del SNC.
Las efedrinas y las anfetaminas son derivados de la p-fenilisopropilamina. Su mayor actividad por vía
oral se debe, probablemente, a que el grupo metilo de la posición a al grupo amino inhibe la interacción con las
MAO. Generalmente, el grupo amino es secundario y puede formar parte de un heterociclo.
La efedrina, un alcaloide aislado de varias especies de Ephedra, fue el primer adrenérgico de uso clínico.
Contiene dos átomos de carbono estereogénicos. por lo que presenta cuatro configuraciones quirales (dos eritro
y dos treo). siendo el más activo el estereoisómero (-)-erírro (1/L2S) (Fig. 13.7). En estado de base o como sal
(clorhidrato), se emplea como broncodilatador y descongestionante nasal en estados alérgicos, resfriados, rini
tis, etc. La efetonina es la efedrina racémica.
HO-C-H
H-C-NH-CH,
¿H,
1S.25 IR.2R
Efedrinas Pseudoefedrinas
Figura 13.7. Efedrinas y pseudoefedrinas.
La anfetamina es la [J-fenilisopropilamina (1 -fenil-2-aminopropano) racémica. Su isómero dextrógiro, la dex-

troanfetamina o dexedrina. es dos o cuatro veces más activa que aquélla. En estado de sulfato, se emplean en el tra
tamiento de la narcolcpsia (ataques súbitos e incontrolados de sueño) y en el síndrome hipercinético infantil. La an
fetamina no se emplea como anoréxico por su acción estimulante central y su elevado riesgo de adicción (Fig. 13.8).
CH_,
R-C-CH, ■CH-CHj
NH. NH-CH.-CH,
(±) Fentluramina
R = H; Anfetamina (+) Dcxfennuramina
R = CHv Fentcrmina
Figura 13.8. Anfetaminas.
Se han realizado numerosas variaciones estructurales con el fin de conservar la acción anoréxica (anore
xígena) de la anfetamina y evitar, al mismo tiempo, la acción estimulante central y, con ello, el riesgo de adic
ción. Así se han utilizado en terapéutica la fentermina y la fenmetrazina en estado de hidrocloruros en el trata
miento coadyuvante de la obesidad.
Actúan, como la anfetamina. liberando la noradrenalina de las vesículas donde se almacena. Una excep
ción la constituye la fenfluramina (y su isómero dextrógiro. la dexfenfluramina) que actúan por un mecanismo
diferente, vaciando las vesículas donde se almacena la serotonina. por lo que no son estimulantes y su uso cau
sa somnolencia. La anfetamina y su IV-metil derivado, y la metanfetamina. incrementan el rendimiento físico,
especialmente en pruebas deportivas que requieren gran esfuerzo. Por esta razón, se emplean en el dopaje de de
portistas. pero se detectan fácilmente en orina. La facilidad de su preparación es la causa del rápido desarrollo
de las llamadas drogas de diseño, muchas de ellas de síntesis clandestina. Son derivados de la anfetamina diver
samente sustituidos en el anillo aromático. La 3.4-metilendioxianfetamina (MDA. «droga del amor») y la 3,4-
metilendioxi-Al-metilanfetamina (MDMA o «éxtasis») aparecieron en el mercado americano en los años setenta
(Fig. 13.9). Poseen propiedades estimulantes del SNC (psicoestimulantes) y alucinógenas (psicodélicas). estas
Últimas debidas a sus efectos serotoninérgicos.
MDA MDMA
«Droga del amor» «Extasis»
Figura 13.9. Anfetaminas de «diseño».
2.3. Agonistas y antagonistas adrenérgicos
En los últimos años, se ha realizado un esfuerzo considerable en el desarrollo de agonistas y antagonistas adre
nérgicos selectivos. Además de las dos grandes clases de receptores adrenérgicos designados como a y P (los
cuales se subdividen en a,. a:, Pi. p; y pj). hay diversos subtipos de receptores a, (ai *
, predominante en la
próstata humana; <Z|8 en el bazo de rata; a)L en la aorta de rata; a,c. clonado, de cerebro de buey que se corres
ponde con el a, a, etc.) y a> (tres subtipos), en muchos de los cuales su función concreta no se conoce por el mo
mento. Los receptores a, postsinápticos producen respuestas excitadoras: constricción de vasos y de la muscu
latura intestinal y uterina. La actividad de los diversos agonistas sobre tales receptores decrece en el orden:
noradrenalina > adrenalina > isoprenalina. Los receptores P y p; producen respuestas inhibidoras en la muscu
latura lisa, pero estimulan la fuerza y contractilidad cardíacas, decreciendo la actividad de distintos agonistas en
el orden: isoprenalina > adrenalina > noradrenalina (Tablas 13.1-13.2).
Tabla 13.1. Diferenciación de receptores adrenérgicos en función de sus respuestas fisiológicas
Respuesta
Órgano (o tejido) efector --------------------------------------------------------------------------------
a, P. ft ft
Sistema vascular Constricción — Dilatación
Útero Constricción Relajación Relajación
Intestino Descenso de Descenso de Descenso de
la motilidad la motilidad la motilidad
Músculo bronquial Constricción — Relajación
Frecuencia y tuerza
de contracción cardíaca —— Aumento —
Tejido adiposo — — — Lipólisis
Hígado — — Glucogenólisis
Tabla 13.2. Afinidad de algunas catccolaminas por distintos receptores

adrenérgicos
Catecolamina Receptores a. Receptores p. Receptoes

Noradrenalina 100 25 1-2
Adrenalina 50 50 50
Isoprenalina 5 100 l(X)
El aumento de tamaño y la ramificación del sustituyeme sobre el átomo de nitrógeno implica una menor
actividad a-adrenérgica y una mayor actividad P-adrenérgica (Fig. 13.10), aceptándose que en ambos recep
tores se produce una interacción iónica con el grupo amino protonado. pero que el receptor p posee, además, un
lugar de enlace no polar responsable de la transición progresiva de la actividad a a la p. Actualmente, se cono
cen bastante bien los requerimientos estructurales que deben reunir las moléculas con actividad agonista adre-
nérgica postsináptica.
Uterorrclajación
Esencial
Radicales pequeños
actividad a
Radicales voluminosos
actividad [J
R = H, Noradrenalina
R = CH,. Adrenalina
Necesarios CH,
para establecer R = —CH . Isoprenalina (isoproterenol)
enlaces de H CH,
o formar quelatos
con metales
Figura 13.10. Principales efectos fisiológicos de las catecolaminas y significación de los sustituyentes.
Los receptores a y 0 son estereoespecíftcos. uniéndose preferentemente a los enantiómeros R (levógiros)

de sus sustratos (Fig. 13.11). Son varias la interacciones agonista-receptor a través de los lugares de unión de és
tos: un lugar aniónico, que permite un enlace iónico con la amina protonada; un grupo X de un aminoácido, que
permite la formación de un enlace de hidrógeno con el alcohol secundario en la disposición R; y un área plana,
que puede ser el fenilo de un residuo de fenilalanina. que interactúa por fuerzas de van der Waals con el anillo
aromático. Por último, un sitio para que los hidroxilos fenólicos se enlacen por puentes de hidrógeno o forman
do quelatos con un ion metálico.
Figura 13.11. Interacciones de los enantiómeros R y S de la noradrenalina.

La adrenalina, como todas las catecolaminas, es muy sensible a la luz y al oxígeno del aire, que la trans
forma en productos quinónicos (adrenocromo y productos de polimerización). Las soluciones inyectables se es
tabilizan con un reductor (bisulfito sódico). La adrenalina (disuelta al estado de clorhidrato para su administra
ción intravenosa) se emplea en situaciones de emergencia (shock anafiláctico, colapso circulatorio, resucitación
cardiopulmonar). Bajo la forma de colirio, disuelta al estado de bitartrato, encuentra aplicación en el tratamien
to del glaucoma. La isoprenalina (isoproterenol, aleudrina) tiene utilización limitada como broncodilatador y
cardiotónico.
2.3.1. Agonistas ai
Los agonistas a, casi puros, como la fenilefrina. el etiladrianol (Efortil®). o el metaraminol, caracen de OH en
para, y se emplean como descongestionantes nasales (en particular, la fenilefrina en estado de hidrocloruro) y
midriáticos (Fig. 13.12).
R = H; R' = CHj (-) Fenilefrina

R = H: R’ = CH2-CH3 (±) Etiladrianol
R = CHjt R' = H Metaraminol
Figura 13.12. Agonistas a>.
2.3.2. Agonistas a2
El prototipo de agonista a> es la clonidina. Descubierta accidentalmente en 1962. es el primer antihipertensor

representante de la serie de las 2-amino imidazolinas. De potencia moderada, en su estructura puede apreciarse
un fragmento guanidina (Fig. 13.13). La clonidina ha sido formulada bajo la forma de parche transdérmico,
como forma de acción retardada, para el tratamiento de la hipertensión.
Figura 13.13. Clonidina.
Las imidazolinas sustituidas en 2 con grupos arilmetilo voluminosos, responden a la estructura general de
P-feniletilamina. y son agonistas parciales de ambos receptores a, y a¡. Imidazolinas como la nafazolina, la xi-
lometazolina o la oximetazolina son eficaces vasoconstrictores de mucosas y se emplean como descongestivos
nasales y oculares disueltos al estado de clorhidratos. Tienen acceso limitado al SNC. ya que a causa del carác
ter fuertemente básico de la imidazolina, se encuentran ionizadas al pH fisiológico (Fig. 13.14).
Nafazolina
Xilomctazolma
Oximctazolina
HO CH,
Brimonidina
Figura 13.14. Imidazolinas vasoconstrictoras.
La brimonidina es otro agonista a¡ antiglaucoma, debido a su efecto vasoconstrictor a nivel local.

Varios fármacos que interactúan con el receptor ctj, como la clonidina y el idazoxano, se enlazan también a
otras proteínas en lugares que tienen muy baja afinidad por la adrenalina y la noradrenalina. Algunos de es
tos receptores, denominados receptores de imidazolina (I). receptores de idazoxano o lugares de enlace de
idazoxano no adrenérgicos. tienen importantes efectos fisiológicos, conociéndose hasta el momento los
subtipos I, e I,. Aunque todavía no se ha encontrado su agonista endógeno, se ha propuesto que podría ser
la agmatina, una arginina descarboxilada que presenta escasa afinidad por los cuatro subtipos de receptores
a2 (Fig. 13.15).
Agmatina
Clonidina Moxonidina
Idazoxano
Figura 13.15. Fármacos que interactúan con receptores de imidazolina.
Algunos fármacos utilizados como antihipertensores, son agonistas de receptores de imidazolina I,,
siendo difícil diferenciar si este efecto está mediado también por los receptores a:. Los receptores I, se acti
van por varios compuestos con estructura de imidazolina. como la clonidina y la moxonidina, lodos ellos
agonistas a2.
Los receptores I, están acoplados a proteínas G. y parecen regular la presión arterial inhibiendo la activi
dad adrenérgica en el tronco encefálico. Los I2 se localizan en las mitocondrias y se relacionan con la MAO.
Pueden estar implicados en diversos procesos patológicos, como ciertas enfermedades neurodegenerativas, la
tolerancia y dependencia de los opioides. el envejecimiento, la enfermedad de Alzheimer, la tendencia al suici
FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES ÜE MEMBRANA (I) 377
dio y otros. Por otra parte, es posible que algunas imidazolinas que evitan la muerte neuronal inducida por el
glutamato (véase el Capítulo 15) actúen bloqueando el receptor NMDA.
2.3.3. Antagonistas ai (a-bloqueantes)
Los antagonistas adrenérgicos a, (a-bloqueantes) pueden usarse, por su efecto vasodilatador periférico, para
tratar la hipertensión.
Cuando el receptor a postsináptico está bloqueado, la noradrenalina sólo actúa en los receptores p. produ
ciendo vasodilatación periférica e hipotensión. Sin embargo, sólo los antagonistas a! puros son buenos antihi-
pertensores, ya que el bloqueo simultáneo de los receptores a? presinápticos impide la regulación de la libera
ción de noradrenalina. la cual, al actuar sobre los receptores 0,. puede conducir al fallo cardíaco. Algunos como
la fenoxibenzamina (Fig. 13.16) también tienen efectos colinérgicos, es decir, no discriminan el receptor adre-
nérgico.
No llama la atención el hecho de que los antagonistas a-adrenérgicos no tengan semejanza estructural con
los agonistas, puesto que utilizan lugares de unión accesorios del receptor para su unión con éste.
Pmsimpal Pipcroxano
Fenlolamina Fenoxibenzamina
Figura 13.16. Antagonistas ai.
Los primeros antagonistas (a-simpaticolíticos) fueron los benzodioxanos prosimpal y piperoxano. prepa
rados en 1934 por Foumeau en el Instituto Pasteur. Le siguieron las imidazolinas. como la fentolamina (un vie
jo fármaco, actualmente en fase clínica para el tratamiento de la disfunción eréctil) y las 0-halogenoetilaminas,
como la fenoxibenzamina. que actúan alquilando grupos OH y NH, del receptor a,, produciendo un bloqueo
irreversible.
La prazosina. un antagonista a¡ puro, es el prototipo de los antihipertensores derivados de 2,4-diamino-
quinazolina (Fig. 13.17). Éstos bloquean selectivamente, y de forma reversible, los receptores a, postsinápticos.
originando vasodilatación arteriolar y venosa sin aumentar la frecuencia cardíaca.
El grupo amino en 2 se encuentra incorporado en una piperazina. y los diferentes derivados se diferencian
por la naturaleza del sustituyente acilo en la posición 4 de ésta: furoil para la prazosina. tetrahidrofuroil para la
terazosina. 1.4-benzodioxanilcarbonil para la doxazosina. En la alfuzosina. la amina es de tipo propilendiamina.
con un resto tetrahidrofuroil en el N terminal.
Alfuzosina
Figura 13.17. ai-Antagonistas derivados de la 2.4-diaminoquinazolina.
Por su acción a, bloqueante, disminuyen el tono muscular del conducto urinario (vejiga urinaria, próstata,
esfínteres), facilitando la micción. Por ello, tienen aplicación terapéutica en el tratamiento de la hiperplasia be
nigna de próstata. La acción antihipertensora concomitante puede ser beneficiosa para los hipertensos. En per
sonas normotensas, apenas desciende la presión sanguínea.
Alcaloides del cornezuelo del centeno y derivados
Los alcaloides del cornezuelo del centeno (Claviceps purpurea) fueron, históricamente, los primeros antago
nistas a-adre nérgicos identificados como tales. Sin embargo, poseen un amplio espectro de actividades. Deri
van de una estructura tetracíclica quinolino-indólica. conocida como ergolina, que contiene las subunidades de
feniletilamina y de 3-indolilelilamina características de la dopamina. la adrenalina y la serotonina. lo que expli
ca su interacción con receptores dopaminérgicos. adrenérgicos y serotoninérgicos. de lo que. a su vez, se deriva
que ejerzan un amplio espectro de efectos en procesos fisiológicos mediados por estos receptores. Durante la
primera mitad del siglo pasado, se aislaron los alcaloides y se realizaron los estudios de determinación de sus
estructuras. Woodward obtuvo el ácido lisérgico por síntesis total en 1956.
Todos los alcaloides son amidas y originan por hidrólisis ácido lisérgico o su epímero (ácido isolisérgico)
y un componente básico (P-aminopropanol o una fracción polipeptídica) común a cada par de diastereómeros
(Fig. 13.18).
Ergolina
Ácido lisérgico R = OH Acido isoliscrgico R = OH
Figura 13.18. Ácidos lisérgico e isolisérgico.

FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (1) 379
El alcaloide minoritario (0.006 %), y también el más sencillo, es la ergometrina (ergobasina, ergonovina),
amida del ácido lisérgico con el (+)-2-antinopropanol. Es un poderoso ocitócico y, junto con su homólogo med
iado. la metilergometrina (metilergometrina maléalo, Metergín) se emplea en obstetricia en el tratamiento de las
hemorragias postparto y postaborto (Fig. 13.19).
R = H. R' = CHy, Ergometrina

R = H. R' = CsHs; Metilergometrina (Metergín*')
R = CH3. R' =’C2H5; Metiscrgida
Figura 1.3.19. Alcaloides del cornezuelo del centeno y derivados.
La ergotamina y los alcaloides del grupo de la ergotoxina (ergocristina. crgocriptina y ergocomina) son
amidas del ácido lisérgico con tripéptidos cíclicos, diferenciándose entre sí en la naturaleza de los aminoácidos
que forman el citado tripéptido. Por ejemplo: prolina (a), fcnilalanina (b) e hidroxialanina (c) para la ergotami
na. La prolina es común a todos. En otros, se encuentra leucina, isoleucina. valina. etc. (Fig. 13.20).
Ergotamina
Ergocornina
Ergocriplina
Ergocristina
Figura. 13.20. Alcaloides del cornezuelo del centeno y derivados.
La ergotamina se encuentra en el cornezuelo en proporciones que oscilan entre el 0,02 y el 0,2 %. Es va
soconstrictora y la principal causante de la falta de riego periférico en los intoxicados por cornezuelo, lo que
producía la gangrena de las extremidades en las personas que se alimentaban con pan de centeno contaminado
por el hongo. (La intoxicación por cornezuelo, conocida por ergotismo o/irego de San Antonio, produjo verda
deras epidemias en las Edades Media y Moderna). El tartrato de ergotamina asociado con cafeína (Cafergot
)
* se
utiliza en el tratamiento de la jaqueca (migraña) y, en general, de las cefaleas vasomotoras; la cafeína facilita la
absorción de la ergotamina. La dihidroergotamina. 9.10-dihidrodcrivado de la ergotamina. es también vaso
constrictora. En estado de mesilato (Dihydergot®) se emplea en la profilaxis de la jaqueca. Es menos potente
que la ergotamina y no es ocitócica.
La ergocristina, la ergocriptina y la ergocomina son ocitócicos. Si se hidrogena el doble enlace 9,10 desa
parece la acción ocitócica y se mantiene la acción a-antagonista. La Hidergina
* es una mezcla de estos tres
dihidroderivados que, en estado de mesilatos, se utiliza como vasodilatador cerebral y periférico. La nicergolina
*
)
(Sermión es una ergolina sintética que se emplea como sucedáneo de la Hidergina. La dietilamida del ácido li-
sérgico (LSD, del alemán Lisergin Sáure Diethylamide) es un compuesto, sintetizado por Hoffmann en los co
mienzos de los años cuarenta, de gran poder alucinógeno.
2.3.4. Agonistas /3-adrenérgicos
La isoprenalina (isoproterenol) es un agonista 0 que no selecciona entre los receptores p, y 0;, por lo que no
puede usarse como broncodilatador y antiasmático (que es la principal aplicación terapéutica de los agonistas
p), por tener efectos cardíacos indesables. La relación agonista P2/P1 aumenta drásticamente cuando el OH fe-
nólico en meta se sustituye por metilsulfonamido (soterenol). por hidroximetilo, como en el salbutamol (Vento
*)
lín y en el salmeterol (Serevent
*
), por formilamino, como en el formeterol, etc. El salmeterol es portador de
una larga cadena carbonada que le confiere carácter lipófilo y acción prolongada, incluso cuando se administra
en forma de aerosol. Esta cadena larga también le confiere gran selectividad para los receptores p; de los
músculos lisos bronquiales. Algo parecido ocurre con el formeterol. Ambos tienen escasa o nula afinidad para
los receptores a y p, (Fig. 13.21).
Otros derivados con los hidroxilos fenólicos en las posiciones 3,5 (por lo tanto, no derivados de la isoprena
lina, que es or/^-difenólica) son la orciprenalina (Alupent®), la terbutalina y el fenoterol. Este último tiene dos cen
tros estereogénicos, siendo el isómero R, R el más activo. Sin embargo, todos se emplean como racematos.
«Ortofcnoles». De acción breve
R
"oh Isoprenalina P2/P1 = 1
NHSO2CHj Soterenol P2/Pi = 6
CH2OH Salbutamol P2/P1 = 59
De acción prolongada
Salmeterol
«Metafenolcs». De acción breve Formeterol
CH(CHj)2 Orciprenalina
C(CH3)j Terbutalina
Fenoterol
Figura 13.21. Agonistas P-adrenérgicos. Antiasmáticos.

FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA <l) 381
2.3.4. Fármacos antagonistas /3-adrenérgicos. (J3-Bloqueantes)
Los antagonistas p-adrenérgicos. o ^-bloqueantes, constituyen un grupo importante de fármacos adrenérgicos

ampliamente utilizados en el tratamiento de la hipertensión, las arritmias, algunas formas de angina y ciertos ti
pos de ansiedad. Son fármacos de elección en el tratamiento del glaucoma, aunque es difícil explicar la razón
del uso de un P-bloqueante en el glaucoma, cuando la adrenalina es otro de los fármacos utilizados para el mis
mo propósito. También resulta paradójico el hecho de que de un bloqueo de receptores [3 resulte un descenso de
la presión sanguínea, ya que podría esperarse que se tradujera en un efecto hipertensor. como consecuencia de
un bloqueo de los receptores p que producen vasodilatación.
Se admite que el descenso de presión sanguínea se produce a través de la inhibición del gasto cardíaco y
de la inhibición de renina (véase el Capítulo 11). Los P-bloqueantes cardioselectivos evitarían los problemas
que resultan de la aplicación de los P-bloqueantes en pacientes asmáticos.
El primer compuesto conocido con actividad antagonista p fue la dicloroisoprenalina o dicloroisoprote-
renol (DC1), obtenido ya en 1948 por simple sustitución de los hidroxilos fenólicos de la isoprenalina por
átomos de cloro. Dejó de utilizarse por su acción P-agonista parcial. Le siguió el pronetalol, en el que los hi
droxilos citados fueron reemplazados por un anillo bencénico. El pronetalol dejó de emplearse porque produ
cía tumores linfoides en el ratón.
Posteriormente, se observó que las a-naftiloxipropanolaminas. como el propranolol, poseen entre diez
y veinte veces mayor actividad que el pronetalol, probablemente a consecuencia de que la conformación más
estable en estos compuestos, estabilizada por enlaces de hidrógeno, mantiene las mismas relaciones espacia
les entre los grupos que las que existen en las feniletanolaminas (Fig. 13.22).
Históricamente, el prosimpal. un viejo simpaticomimético. podría ser considerado como precursor de
las ariloxipropanolaminas.
Dicloroisoprenalina Isoproterenol Pronetalol
Prosimpal
Figura 13.22. Relación entre feniletanolaminas y y-ariloxipropanolaminas.
Se han preparado docenas de ariloxipropanolaminas. en las que el resto arilo se encuentra representado
por una gran variedad de anillos homocíclicos y heterocíclicos: desde un simple anillo bencénico, como en el
atenolol, a un éter, como en el oxprenolol, un indol, como en cl pindolol, un tiadiazol. como en el timolol, etc.
El sustituyeme en el grupo amino es voluminoso para asegurar la afinidad por los receptores |3. siendo el iso-
propilo el sustituyeme más pequeño (Fig. 13.23).
y-Ariloxipropanoiaminas
Ar-O-CH2-‘CHOH-CH2-NH-R
DCI
Figura 13.23. Estructura de los principales p-bloqucántes.

FARMACOS QUE ACTÚAS SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA ll> 383
3. DOPAMINA Y RECEPTORES DOPAMINÉRGICOS

La dopamina (3,4-dihidroxifenil-p-etilamina. DA) es una catecolamina intermedia en la biosíntesis de la nora
drenalina. y goza, por derecho propio, de la categoría de neurotransmisor.
Es reconocida por receptores específicos centrales y periféricos, que están localizados en ganglios y ter
minaciones nerviosas simpáticas, lecho vascular mesentérico, renal y túbulos renales, y está implicada en diver
sas funciones fisiológicas y patológicas. Muchos fármacos antiparkinsonianos antipsicóticos, antieméticos y an-
tihipertensores, entre otros, actúan sobre el sistema dopaminérgico.
Las características de la neurotransmisión dopaminérgica son las generales de la transmisión neuroquímica.
I ti dopamina se almacena en vesículas sinápticas. de las que. una vez liberada en la hendidura sináptica, puede:
I. Ser recaptada por la neurona presináptica.
2. Ser degradada por la acción combinada de COMT y MAO.
3. Actuar sobre los receptores dopaminérgicos prcsinápticos (autorreceptores).
4. Actuar sobre los receptores dopaminérgicos postsinápticos.
Los principales metabolitos resultantes de la acción combinada de las dos enzimas citadas son el ácido
3,4-dihidroxifenilacético (DOPAC) y el homovanílico (HVA, ácido (4-hidroxi-3-metoxi)fenil-2-hidroxiacéti-
co). Los niveles cerebrales de ambos metabolitos se elevan después de la administración de un antagonista do
paminérgico. por lo que su determinación es uno de los principales procedimientos para evaluar su actividad.
Mediante técnicas farmacológicas y de clonación se han identificado cinco subtipos de receptores dopa
minérgicos, que pueden ser agrupados en dos clases, los Di (que comprenden los subtipos D, y Ds) y los D2 (que
incluyen los subtipos D2. Dj. Dj. Sólo los receptores D, y D2 se encuentran expresados en todas las áreas dopa-
minérgicas del cerebro. Los restantes subtipos, como el D>. se expresan en áreas cerebrales restringidas, como
son las áreas límbicas. Los receptores de la dopamina pertenecen al grupo de los acoplados a proteínas G. Los
receptores D, son postsinápticos y activan el sistema de la adenilciclasa (Fig. 13.24). Muchas de las funciones
conocidas de la dopamina parecen implicar a los receptores D>.
La estimulación de los receptores D2 que se encuentran en las terminaciones nerviosas presinápticas pro
duce la inhibición de la enzima tirosina hidroxilasa (que cataliza la formación de DOPA a partir de tirosina). Di
cha estimulación también disminuye la liberación de DA. Por el contrario, el bloqueo de los receptores D2 pre-
sinápticos equivale a la estimulación de los receptores D; postsinápticos, y un antagonista postsináptico puede
sustituirse por un agonista presináptico.
Figura 13.24. Modelo esquemático de una sinapsis dopaminérgica y lugar de acción de los fármacos dopaminérgicos.
La acción antipsicótica de los neurolépticos se debe al antagonismo de los receptores D? y D4, pero los efec
tos secundarios motores y endocrinos derivan del bloqueo de los receptores D- del neoestriado y la hipófisis.
Como existe una alta densidad de receptores D; en las áreas del núcleo caudado que reciben fibras del
tracto nigroestriado, los neurolépticos producen alteraciones del movimiento que recuerdan a la enfermedad de
Parkinson (efectos extrapiramidales).
3.1. Agonistas dopaminérgicos. Fármacos antiparkinsonianos

La DA se oxida fácilmente, no atraviesa la barrera hematoencefálica de forma eficaz, es degradada por la MAO
B y otras enzimas, y no es selectiva para un determinado subtipo de receptores DA.
La apomorfina es un agonista dopaminérgico D, y D; (por tanto, no selectivo), que se prepara calentando
el clorhidrato de morfina bajo presión en un medio muy ácido (HCI 35 %); en estas condiciones, pierde una mo
lécula de agua, produciendo apomorfina (Fig. 13.25). Es uno de los fármacos más eficaces, seguros y rápidos
(10-15 min) de que se dispone actualmente para provocar el vómito. Se administra por vía subcutánea disuel
ta al estado de clorhidrato. Por vía oral es inactiva.
El fcnoldopam es un agonista D, selectivo que se utiliza en el tratamiento hospitalario de la hipertensión grave.
HÓ OH
Apomorfina
Figura 13.25. Estructura de algunos agonistas dopaminérgicos.
Sin embargo, el concepto de agonista dopaminérgico está tradicionalmente relacionado con la enferme
dad de Parkinson. Se desconoce la etiología de esta enfermedad, pero la degeneración del núcleo estriado puede
suplirse restaurando los niveles de dopamina suministrando precursores (ya que no atraviesa la barrera hemato
encefálica), bloqueando su degradación con inhibidores enzimáticos o suministrando agonistas.
La administración de levodopa con un inhibidor de la descarboxilasa periférica, como carbidopa o bense-
razida (véase el Capítulo 11), es el mejor tratamiento de la enfermedad de Parkinson. La levodopa. antes de
atravesar la barrera hematoencefálica, sufre un proceso de descarboxilación notable en el aparato digestivo y, en
general, a nivel periférico. La administración con un inhibidor de descarboxilasas permite que haya más levo
dopa disponible para atravesar la barrera. La dosis de levodopa que se deberá administrar será menor (un 75 %
menos) y, por consiguiente, la incidencia de efectos secundarios también menor (Fig. 13.26).
DOPA
Figura 13.26. Inhibidores de DOPA-descarboxilasa periférica.

El bloqueo de la degradación metabólica de la dopamina se realiza con inhibidores de la MAO B, como la

selegilina (deprendo), o con inhibidores selectivos de COMT, como la entacapona y la tolcapona (Fig. 13.27 y
Capítulo 11).
Estos inhibidores enzimáticos reducen el metabolismo de la dopamina en el cerebro y potencian la acción
de la levodopa, cuya dosis puede reducirse hasta un tercio. La entacapona ha sido retirada recientemente de al
gunos países, ya que se han detectado casos aislados de lesión hepática fulminante.
Figura 13.27. Inhibidores de MAO B y COMT.
Entre los agonistas dopaminérgicos útiles en la enfermedad de Parkinson, se encuentra la bromocriplina

(Fig. 13.28). un derivado bromado del alcaloide del cornezuelo ergocriptina. Es un agonista selectivo de los re
ceptores D: y se administra en las fases finales de la enfermedad de Parkinson, en un intento de reducir los efec
tos adversos de la levodopa. La bromocriplina inhibe la liberación de prolactina (hormona producida en la hipó
fisis que regula la lactancia) por lo que se usa también en el tratamiento de la hiperprolactinemia.
Otros agonistas D2t con mayores efectos secundarios de naturaleza psíquica, son las ergolinas lisurida y
pergolida. Recientemente, se ha introducido cl ropinirol, un agonista no ergolínico derivado del indol (obsérvese
que en la estructura de las ergolinas hay una porción de indol y otra de quinolina).
Figura 13.28. Agonistas dopaminérgicos útiles como fármacos antiparkinsonianos.
3.2. Antagonistas dopaminérgicos. Neurolépticos (antipsicóticos)

Los fármacos neurolépticos o antipsicóticos son antagonistas dopaminérgicos que controlan muchos de los sín
tomas de la esquizofrenia y de las psicosis agudas. La esquizofrenia es un síndrome caracterizado por aluci
naciones, paranoias y comportamiento desorganizado (síntomas positivos), así como apatía, falta de motivación
e incapacidad para expresar emociones (síntomas negativos). El hecho de que todos los neurolépticos sean anta
gonistas de los receptores dopaminérgicos D; sugiere que la esquizofrenia está asociada a un aumento de la ac
tividad en el sistema dopaminérgico mesolímbico o mesocortical. Lamentablemente, los neurolépticos también
bloquean los receptores D; en el núcleo estriado, de lo que se derivan, entre otros efectos secundarios, alteracio
nes del sistema extrapiramidal con distorsiones del movimiento que recuerdan la enfermedad de Parkinson.
Desde el punto de vista químico, los neurolépticos se agrupan en varias clases: los derivados tricíclicos con ani
llo central de seis miembros (como las fenotiazinas y los tioxantenos), los derivados tricíclicos con anillo cen
tral de siete miembros, las bulirofenonas y las ortopramidas.
3.2.1. Neurolépticos triciclicos con anillo central de seis miembros

El prototipo de la serie de las fenotiazinas es la clorpromazina (Largactil
),
* un antagonista D2 que posee, ade
más, acciones anticolinérgicas y antihistamínicas, cuyo descubrimiento dio origen al grupo de los neurolépticos.
fármacos hasta entonces desconocidos (Fig. 13.29).
Fenotiazinas
Nombre
Clorpromazina Cl (CH,),N(CHj>2
CFj (CH2)3N(CH,)2
Triflupromazina
Proclorperazina Cl (CH2),-N n-ch.
Flufenazina CF, (CHj),-N N-CH,
Tioridazina SCH,
Tielilperazina S—CH2—CH, (CH2),-N N-CH,
Tiaxantenos
Figura 13.29. Algunos ejemplos de neurolépticos derivados de la fenotiazina y del tiaxanteno.
La cadena lateral de las fenotiazinas ha de ser trimetilénica. ya que si es dimetilénica. resultan compues
tos antihistamínicos con intensa acción sedante (véase el Capítulo 16). De hecho, el descubrimiento de la acción
de la clorpromazina (Rhóne-Poulenc, 1953) se inició con H. Laborit, un cirujano que había observado cómo la
administración de fenotiazinas antihistamínicas (como la prometazina) producía una relajación y sedación, muy
beneficiosas, previas a la anestesia.
Es favorable la sustitución, en la posición 2, del sistema tricíclico por grupos atrayentes de electrones como
Cl, CFj, SR. SO>, NR2, etc. La cadena lateral puede estar integrada en un heterociclo como la piperidina (es cl caso
de la tioridazina) o la piperazina (flufenazina y tielilperazina). En los tiaxantenos, que son isósteros de las fenotiazi
nas en los que el grupo N-CH2 se ha sustituido por C=CH, son representativos el clorprotixeno y el flupentixol.
Los límites de la utilización de los neurolépticos triciclicos típicos, además de sus efectos discinésicos, radican
en sus efectos secundarios, que son consecuencia del bloqueo simultáneo de los receptores muscarínicos. adrenérgi-
FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRAN A (I) 387
cos a, e histamínicos Ht. Los efectos del bloqueo de los receptores muscarínicos (efectos atropínicos) se traducen en
sequedad de boca, visión borrosa, disminución del peristaltismo (estreñimiento) y retención urinaria (que puede ser
útil en el tratamiento de la enuresis). Los efectos del bloqueo a, son la hipotensión postural y la hipotermia, y los
efectos sobre los receptores H, se traducen en sedación, somnolencia y potenciación de los depresores del SNC.
3.2.2. Neurolépticos tricíclicos con anillo central de siete miembros
La sustitución bioisostéra en la fenotiazina del átomo de S por CH=CH conduce a la dibenzo[/>/|azepina (iminoes-
lilbeno), y su saturación, a la 10,1 l-dihidrodibenzo[b,/]azepina (iminodibencilo). Ambas estructuras tricíclicas.
con anillo central de siete miembros, constituyen el soporte de numerosos fármacos con multiplicidad de activida
des farmacológicas (neuroléptica. antidepresora, sedante, antihistamínica H¡. antiserotoninérgica, etc.).
De acuerdo con la naturaleza de las cadenas laterales, la presencia y el tipo de heteroátomos en el anillo
heplacíclico, la existencia o no de insaturaciones en Cl()-Cn, se tienen compuestos de difícil clasificación farma
cológica. En la Figura 13.30, se indican los principales sistemas tricíclicos de los que derivan fármacos con ac
ción predominante neuroléptica. antidepresiva (timoléptica) o doble. Estos últimos están particularmente indi
cados en síndromes psicóticos con componente depresivo-ansioso.
Figura 13.30. Influencia del anillo central sobre la actividad farmacológica de los psicotropos tricíclicos. Con el aumento
de la deformación y complicación del sistema cíclico, disminuye la actividad neuroléptica y aumenta la antidepresiva.
Entre los derivados de la dibenzoxazepina se encuentra la loxapina (neuroléptico) y la amoxapina (antide

presivo). Sus diferencias estructurales son mínimas (Fig. 13.31).
En la serie de la dibenzotiazepina y dibenzodiazepina. la clotiapina y la clozapina son ejemplos represen
tativos. La clozapina es el prototipo de los neurolépticos o antipsicóticos atípicos, que son eficaces frente a los
síntomas positivos y negativos de la esquizofrenia y no producen efectos secundarios extrapiramidales. Actual
mente existen pruebas de que estas propiedades son consecuencia de su actividad antagonista de los receptores
de dopamina D2 y D4 y de serotonina 5-HT2A. La clozapina es eficaz frente a los síntomas positivos y negativos
de la esquizofrenia, incluso en enfermos refractarios a otros tratamientos, y no produce efectos secundarios ex-
trapiramidales; sin embargo, puede producir discrasias hemáticas (granulocitopenia), lo que obliga a monitori-
zar los tratamientos. Recientemente se han introducido otros compuestos, como la olanzapina (Ryprexa®), el
isóstero tiofénico de la clozapina o la quetiapina, que no causan alteraciones hemáticas y tienen menos efectos
secundarios.
1.4-Oxazepina Dibenzol I>,/1| 1.4)oxazcpina
Amoxapina
(antidepresivo)
1.4-Tiazepina Dibenzo|/>/][ 1,4|tiazepina
Clotiapina Quetiapina
1,4-Diazepina Dibcnzo|¿>/|[ 1,4|diazcpina
Clozapina
< 1963, Sandoz) Olanzapina
Figura 13.31. Neurolépticos tricíclicos con anillo central de siete miembros.
3.2.3. Butirofenonas
El prototipo del grupo de las butirofenonas es el haloperidol, descubierto por P. A. J. Janssen en la famiacomo-
dulación del analgésico petidina (véase el Capítulo 15). La estructura general del grupo corresponde a un frag-
memo de 4-fluorobutirofenona unido a un átomo de nitrógeno, el cual puede estar formando parte de una pipe-
ridina 4-sustituida por un resto imidazolona (espiroperidol o espiperona) o benzimidazolona (droperidol. benpe-
ridol). o de una piperazina también 4-sustituida como la fluanisona (Fig. 13.32). El grupo carbonilo puede susti
tuirse por un resto arilo, dando lugar a diarilbutilaminas como la pimozida.
Butirofcnonas
Fármaco NR'R-
Haloperidol
Espiroperidol’
(espiperona)
**
Droperidol
Fluanisona
También antagonistas 5-HT?

* El benperidol carece de doble enlace piperidínico
Diarilbutilaminas
Figura 13.32. Butirofenonas antipsicóticas y otros neurolépticos relacionados.

Si se restringe la libertad conformacional de la cadena de butirofenona presente en el haloperidol y el dro-

peridol mediante su sustitución por un resto de 4-benzoilpiperidina ó 4-bencisoxazolilpiperidina, y al mismo
tiempo se aumenta de tamaño el fragmento de bencimidazolona del droperidol a otro de quinazolindiona o de
piridopirimidona. se llega a la ketanserina y a la risperidona (Fig. 13.33).
Haloperidol
Droperidol
Risperidona
Ketanserina (Janssen. 1996)
Figura 13.33. Desde el haloperidol a la risperidona.
La ketanserina es un antagonista 5HT2A (véase el Apartado 4.2.3) que ha resultado útil como antihiperten-
sor. La risperidona es un potente antagonista de los receptores D2 y 5-HT2A, que se emplea en el tratamiento de
los síntomas positivos y negativos de la esquizofrenia (en dosis altas, produce síntomas extrapiramidales).
Los tratamientos de la esquizofrenia y la psicosis son crónicos. Debido a la dificultad de que los enfermos
tomen regularmente la medicación, se han desarrollado preparaciones inyectables de depósito que liberan lenta
mente el fármaco desde el punto de inyección intramuscular, consiguiendo un efecto sostenido durante 1-3 se
manas. Estas preparaciones, generalmente, son sales de ácidos de cadena larga: cúprico (decanoico) o palmítico,
con fenotiazinas o butirofenonas.
3.2.4. Ortopramidas
Las ortopramidas son benzamidas que poseen un grupo metoxilo con orto. Constituyen otro grupo de antipsicó-
ticos atípicos desarrollados basándose en el conocimiento de la actividad antiemética de la o-metoxiprocainami-
da. Con objeto de eliminar la actividad anestésica local colateral de esta última, se incorporaron grupos lipófilos
en la posición 5: cloro (metoclopramida). sulfonamido (sulpirida) y etilsulfonilo (sultoprida). En los últimos
fármacos, la cadena lateral se ha integrado en un anillo de pirrolidina. Se distribuyen por el SNC y se emplean
como antipsicóticos (Fig. 13.34).
La cadena lateral que separa al nitrógeno amídico del amínico puede estar integrada en otros heterociclos,
como la piperidina en el caso de la cleboprida. la cinitaprida y la cisaprida.
El grupo metoxilo en posición orto de las benzamidas antipsicóticas establece un enlace de hidrógeno
con el átomo de hidrógeno de la función amida, lo que restringe la conformación. El desafortunado acrónimo
de ortoparabenzamidas proviene de la presencia de este sustituyente en orto y del grupo amino en para. La
mayor parte de las ortopramidas bloquea los receptores dopaminérgicos D>. lo que explica su acción antiemé
tica.
HjC
Procainamida
o-Metoxiprocainamida
R = SOjNH, Sulpirida Zacoprida Metoclopramida

R = SOiCiHs Sultoprida (antagonista 5-HT4) (agonista 5-H1J)
Cleboprida
Rcmoxiprida Cinitaprida
Figura 13.34. Ortopramidas.
La acción procinética (que se traduce en un aumento de la motilidad gástrica y del intestino delgado y,
por consiguiente, del vaciado gástrico y de la velocidad del tránsito intestinal) se atribuye a la activación de los
receptores 5-HT4dc las neuronas colinérgicas entéricas, con la consiguiente liberación de acetilcolina, la cual
interactúa con los receptores muscarínicos del músculo liso gastrointestinal. En cualquier caso, las acciones
procinética y antagonista D? son independientes. La cisaprida no tiene acción antidopaminérgica, la cinitrapri-
da sólo en parte, y la metoclopramida es mixta procinética/antiemética. La cisaprida y, en dosis altas, la meto
clopramida y la cleboprida bloquean también el receptor 5-HTu lo que contribuye a su acción antiemética. La
principal aplicación de las ortopramidas radica en el tratamiento de los trastornos funcionales digestivos, co
mo dispepsias, reflujo gastroesofágico (esofagitis por reflujo) y en el control de los vómitos inducidos por ra
dioterapia o quimioterapia.
La rcmoxiprida, un bloqueante D2 selectivo, representa una etapa final en la investigación de benzamidas
antipsicóticas. Al parecer, es tan eficaz como el haloperidol, y con escasos efectos extrapiramidales.
La manipulación de la cadena básica de la metoclopramida ha dado lugar a antagonistas 5-HT.» muy po
tentes, como la zacoprida (Fig. 13.34), aunque otras muchas ortopramidas son agonistas de este receptor.
3.3. Antidepresivos tricíclicos con anillo central de siete miembros
Los antidepresivos son fármacos estimulantes del tono afectivo y emotivo, que modifican favorablemente los
estados de depresión. Por su origen y por su estrecha relación química con los neurolépticos tricíclicos, es opor
tuno estudiar aquí aquellos que poseen una estructura tricíclica con anillo central de siete miembros, los cuales
actúan inhibiendo la recaptación de noradrenalina, o serotonina, o ambas (véase el Capítulo 12). En este grupo,
se encuentran los derivados de 10,1 l-dihidrodibenzo|6/]azepina, de los que la imipramina (Tofranil") es el ca
beza de serie (Fig. 13.35). Sufre JV-desmetilación metabólica a desmetilimipramina (desipramina), por lo que
una parte de su actividad hay que atribuírsela a este metabolito. La presencia de un doble enlace origina com
puestos. como el opipramol. con actividad neuroléptica-antidepresiva.
R = CH,;R' = H Imipramina
R = CH,: R' = Cl Clorimipramina Opipramol Carbamazepina
R = CH,: R' = CN Cianopramina
R = R’= H Desipramina
Figura 13.35. Antidepresivos tricíclicos con estructura de dibenzo[/>./]az.cpina.
La carbamazepina (Tegretol®) es un antiepiléptico psicótropo en cuya estructura se aprecia una subunidad

de urea o carbamida, de ahí su denominación de carbamazepina. También se utiliza en la neuralgia del trigémino.
Entre los derivados de (5W)-dibenzo|o.</]ciclohepteno y (5W)-dibenzo[«. djcicloheptano, conocidos gené
ricamente como triptilinas, se encuentran los fármacos representados en la Figura 13.36. Son el resultado de la
sustitución bioisóstera del agolpamiento N-CH2 en las series anteriores por un grupo vinileno (CH=CH) o vini-
leno hidrogenado, etileno (CfL-CFL).
R = CH, Amitriptilina
R=H Nortripcilina
Pizotifeno
(antiserotonínico) Ketotifcno
(antiasmático)
Figura 13.36. Derivados referibles a la estructura dibcnzocicloheptano y dibenzociclohepteno.

La maprotilina y la mianserina son prototipos de antidepresivos tetracíclicos (Fig. 13.37). La primera es

un derivado 9( 10)-etanoantracénico que se obtiene aprovechando la reactividad del sistema diénico del antrace-
no en reacciones tipo Diels-Alder. La mianserina es un antidepresivo que presenta, además, una intensa activi
dad sedante, una ligera actividad antihistamínica Hi y una escasa actividad anticolinérgica.
Figura 13.37. Antidepresivos tetracíclicos.
4. SEROTONINA Y RECEPTORES SEROTONINÉRGICOS
Pocos campos de investigación en Química Farmacéutica han sido tan fructíferos en los últimos decenios como el
de la investigación y desarrollo de nuevos fármacos relacionados con el neurotransmisor serotonina. Desde 1965,
unos 20-25 fármacos que interactúan con sus numerosos receptores o bloquean su transporte, han pasado a engro
sar las listas del arsenal terapéutico. La serotonina (5-hidroxitripamina. 5-HT) es un neurotransmisor que se en
cuentra en células neuronales y no neuronales, y se biosintetiza a partir del triptófano. metabolizándose por la
MAO a 5-hidroxiindolacetaldehído que. finalmente, se oxida a ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA. Fig. 13.38).
Figura 13.38. Biosíntesis y metabolismo del 5-HT.
El 90 % de la serotonina que se encuentra en el organismo está localizado en el tracto gastrointestinal, es

pecialmente en las células enterocromafines. Hay también serotonina en las plaquetas, en la glándula pineal
(donde sirve como precursor en la biosíntesis de melatonina) y en las neuronas del SNC. Las características de
la neurotransmisión serotoninérgica son, básicamente, las mismas que las indicadas en la transmisión adrenérgi-
ca y dopaminérgica (Fig. 13.39). Así, se almacena en vesículas formando complejos con proteínas específicas.
La reserpina bloquea esta recaptación y es capaz de vaciar, además de las vesículas serotoninérgicas, las adre-
nérgicas (véase el Capítulo 12).
Figura 13.39. Modelo esquemático de una sinapsis serotoninérgica y lugar de acción de f ármacos serotoninérgicos.
4.1. Inhibidores de la recaptación de la serotonina
Muchos de los fármacos usados en el tratamiento de la depresión inhiben la recaptación de la noradrenalina o la

serotonina, o ambas. Los antidepresivos tricíclicos son fármacos de eficacia probada, pero son sedantes y tienen
efectos secundarios como ya hemos visto. Mucho más recientes son los inhibidores selectivos de la recaptación
de serotonina (ISRS). que tienen un amplio margen de seguridad y menos efectos secundarios (Fig. 13.40).
Aunque no es fácil establecer una relación entre ellos, tienen en común una estructura de fenilalquilamina
quiral, en la que el grupo amino puede estar formando parte de un heterociclo. Cabe destacar la fluoxetina (Pro
*
zac
), la paroxetina (Seroxat®), la viloxazina, la venlafaxina. la sertralina y el citalopram.
*
El Prozac es la fluoxetina racémica cuya patente expira pronto (año 2001). Ambos enantiómeros están
en fase clínica avanzada, la (S)-fluoxetina para la migraña y la (/?)-fluoxetina para la depresión. Asimismo, el
(S)-citalopram está en fase clínica avanzada como antidepresivo.
FÁRMACOS QUE ACI DAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA tt> 395
Figura 13.40. Antidepresivos inhibidores selectivos de la recaptación de 5-HT.
4.2. Receptores serotoninérgicos
Actualmente, se reconocen siete tipos distintos de receptores serotoninérgicos que, según sus características de
transducción (sistema efector al que están agrupados), se pueden clasificar en receptores acoplados a proteínas
G, donde se incluyen los receptores 5-HT, (cinco subtipos), 5-HT, (tres subtipos), 5-HT4, 5-HT, (dos subtipos).
5-HT, y 5-HT7. y en receptores asociados a un canal iónico, grupo en el que se incluye el receptor 5-HT,.
La activación de los subtipos 5-HT, está asociada a la inhibición de la adenilciclasa. con la consiguiente
reducción de la concentración intracelular de AMPc. La activación de los 5-HT, produce estimulación del ciclo
de los fosfoinositoles y un aumento del calcio intracelular. Los tipos 5-HT4, 5-HT, y 5-HT, están acoplados po
sitivamente a la adenilciclasa y, al ser activados, aumentan el AMPc intracelular. En la Tabla 13.3 se relacionan
los tipos de receptores 5-HT, así como los agonistas y antagonistas selectivos de cada receptor, con especial hin
capié en los que se utilizan en terapéutica.
Las hélices de transmembrana TM2 y TM3 del receptor 5-HT, contienen algunos aminoácidos muy pola
res que se han conservado, lo que sugiere su importancia funcional: Asp-98, en la segunda, y Asp-133, Ser-137
y Ser-140, en la tercera. Un análisis conformacional de varios agonistas 5-HT, derivados de serotonina. feniletil-
amina y arilpiperazina ha permitido proponer un modelo de interacción de sus grupos farmacóforos con dicho
receptor, según el cual, las dos regiones ricas en electrones de los agonistas se enlazan a Ser-137 y Ser-140 de la
hélice de transmembrana 3, mientras que el grupo amino se une al Asp-98 de la hélice 2. Por otra parte, los an
tagonistas como la ketanserina y compuestos análogos, como se verá más adelante, no reunen estos requisitos,
pero poseen un anillo heterocíclico y un nitrógeno protonable a una distancia adecuada. Se ha sugerido que es
tos antagonistas se unen mediante enlace de hidrógeno con Ser-137 y Ser-140, y el nitrógeno protonado interne-
lúa electrostáticamente con Asp-133. En su conformación extendida, energéticamente favorecida, puede produ
cirse una cuarta interacción entre el sistema aromático fluorado y el Trp-129 de la tercera hélice, que no existe
en los agonistas.
Tabla 13.3. Fármacos con utilidad terapéutica actual o propuesta en cuya acción
intervienen receptores de 5-HT.
Tipo de Utilidad terapéutica Fármacos de

Receptor introducción Fármacos
ligando actual o propuesta reciente históricos
Agonista Ansiedad/Dcprcsión/ Buspirona

Bulimia
Antagonista Ansiedad/ WAY 100635
Esquizofrenia
5-HTiivid Agonista Migraña/Ansiedad Sumalriptán Metisergida

Alcaloides del
cornezuelo
Antagonista Trastornos motores GR 127935
Enfermedad
vasoespástica
Antagonista Hipertensión Ketanserina

l’sicosis/Esquizofrenia Rispe ridona
5-HTJn Antagonista Migraña/Ansiedad Metisergida

Ciprohcptadina
Pizotifeno
5-HTjc Antagonista Ansiedad Desamciclona Metisergida

Epilepsia Ciproheptadina
Pizotifeno
Antagonista Quimioterapia Ondansctrón Metoclopramida

(Emesis inducida por Granisetrón
radiaciones}
5-HT4 Agonista Trastornos de la motilidad *Prucralopida Mctoclopramida

gastrointestinal Renzaprida
*
RS39604
Recaptación Inhibidor Depresión Fluoxctina Inhibidores de la

serotonina MAO
Anorexia Sertralina Amitriptilina
Temor, pánico Citalopram, etc.
* En fases clínicas avanzadas para cl tratamiento del síndrome denominado colon irritable.
Los receptores de serotonina están implicados en muchas funciones fisiológicas: broncoconstricción (5-
HTJ. agregación plaquetaria (5-HT2). vasoconstricción periférica (5-HT;). vasoconstricción craneal (5-
HTia b.d). hipotensión (5-HT,A), contracción de la musculatura gastrointestinal (5-HT;. 5-HT. e. indirectamente,
5-HT,), relajación de la musculatura gastrointestinal (5-HT.), despolarización neuronal (5-HT; y 5-HT}), hiper-
polarización neuronal (5-HT,A) e inhibición de la liberación de neurotransmisores (5-HTIA, 5-HT,D).
4.2.1. Agonistas 5-HT,a
Los receptores 5-HTiA son muy abundantes en ciertas áreas del cerebro, como el hipocampo, y parecen es
tar implicados en el origen y desarrollo de la ansiedad. Aunque las benzodiazepinas. agonistas de un sitio
alostérico del receptor GABA-A, se utilizan muy ampliamente como ansiolíticos, poseen una acción muy
corta, tienen efectos anticonvulsivos y. en su administración continuada, producen fenómenos de dependen
cia, sedación y tolerancia cruzada (véase el Capítulo 15). La 8-hidroxi-2-/V./V-dipropilaminotetralina (8-OH
DPAT) es un agonista 5-HT1A que ha llegado a ser una herramienta farmacológica de gran utilidad para ca
racterizar diversos subtipos de receptores de serotonina, ya que presenta baja afinidad frente a receptores 5-
HTib, 5-HTic y 5-HTj, pero muy alta (rango nanomolar) frente a los receptores 5-HTIA. Posee muy baja es-
tereoselectividad (el enantiómero R es sólo dos veces más afín que el S), lo que sugiere que el hidroxilo
fenólico no interviene en la interacción con el receptor, que sólo requiere un nitrógeno protonado y un ani
llo aromático. Los agonistas parciales del receptor 5-HTIA, como la buspirona y la ipsapirona, son derivados
de IV-arilpiperazina separados por un puente polimetilénico de una porción heterocíclica nitrogenada. En
general, sus acciones también son «sucias», ya que son igualmente agonistas de receptores a,. D: y 5-HT^
(Fig. 13.41).
S-OH DPAT
Ipsapirona
Figura 13.41. Agonistas 5-HT|A.
4.2.2. Agonista 5-HTm. Fármacos antimigraña
Los agonistas 5-HT|D se emplean en el tratamiento de la migraña. Conocida también comojaqueca o cefalea va
somotora. la migraña es fundamentalmente una inflamación de los vasos craneales consecuencia de alteraciones
neurovasculares. Se manifiesta con intensa cefalea, que se acompaña de náuseas, vómitos y fotofobia. Los ago
nistas 5-HT|D, genéricamente conocidos como triptanes son, como la serotonina, derivados del indol. y se des
cubrieron y desarrollaron en la década de los noventa (Fig. 13.42). Actúan estimulando el receptor 5-HT,D pre
sente en el músculo liso de los vasos, lo que produce vasoconstricción con la consiguiente reversión de la
vasodilatación que se manifiesta en la migraña. El sumatriptán. de la compañía farmacéutica Glaxo, fue el pri
mer agonista serotoninérgico introducido en el mercado farmacéutico en 1991. No sólo alivia la intensa cefalea
de las crisis de migraña, sino también los síntomas asociados, como vómitos, náuseas, fotofobia, etc. A partir de
1995, surgieron triptanes, como el zolmitriptán, que mejoran al sumatriptán en una mayor biodisponibilidad.
mayor penetración en el SNC, mayor semivida. etc. El almotriptán (Almogram
*
), de la compañía farmacéutica
española Almirall-Prodesfarma, tiene una biodisponibilidad oral absoluta del 70 %, la más alta de los triptanes
hasta ahora conocidos. Recientemente ha sido aprobado por la FDA para su comercialización en los Estados
Unidos.
Figura 13.42. Agonistas 5-HTi0. Triptanes.
El diseño del sumatriptan como fármaco antimigraña merece ser comentado, ya que es uno de los ejem
plos representativos de cómo se trabaja cuando no se conoce exactamente la diana farmacológica (en el Capí
tulo 16. se comentará también con detalle el diseño del antihistamínico H¡ cimetidina).
La migraña se trataba frecuentemente con fármacos derivados de la ergotamina como metisergida, un
potente vasoconstrictor no selectivo que interactúa con receptores de NA, DA y 5-HT (Fig. 13.20).
Por otra parte, se sabía que la 5-HT inyectada por vía intravenosa aborta los ataques de migraña, y que
la metisergida, un antagonista 5-HT (Fig. 13.19), era mucho más eficaz que otros antagonistas de este recep
tor. Por ello, se supuso que la metisergida podía actuar como agonista (o agonista parcial) de un nuevo subti
po de receptores 5-HT. que intervenían en la vasoconstricción selectiva responsable del efecto antimigraña.
A través de ensayos farmacológicos ingeniosos, se caracterizó dicho subtipo y se denominó receptor
«5-HTi-like», ya que era semejante (pero no idéntico) a otros lugares de enlace 5-HT, encontrados en otras
áreas del cerebro (hoy se conoce como receptor 5-HTm).
Tras este hallazgo, se comenzó la búsqueda de agonistas selectivos manipulando la estructura de la se-
rotonina. empezando por la modificación del grupo hidroxilo. ya que cuando se elimina éste, desaparece la
afinidad por el receptor 5-HT}. Estos trabajos permitieron conocer que las posiciones 1.2 y p de la serotoni-
na no deben sustituirse, ya que basta un metilo en alguna de ellas para que se pierda esa actividad.
Se llegó así a la 5-carboxamidotriptamina (5-CT, Fig. 13.43), pero desgraciadamente su acción no era se
lectiva. ya que producía hipotensión por interacción con otros receptores 5-HT. El cambio del grupo carbamoi-
lo en C-5 por M-metilcarbamoilmetilo originó un compuesto selectivo, pero inadecuado para su administración
por vía oral. Se ensayaron entonces los bioisósteros de tipo sulfamoilo. destacando la actividad del derivado con
un agolpamiento A'-metilsulfamoilmetilo. Finalmente, para evitar su rápida desaminación oxidativa. se sustitu
yó el grupo amino primario de la cadena lateral de serotonina por aminas secundarias y terciarias. De ellas, des
tacó el /V,/V-dimetilderivado que, tras el correspondiente desarrollo, se comercializó en 1991 con el nombre de
sumatriptán.
4.2.3. Antagonistas 5-HT2
Los antagonistas 5-HT2 constituyen un gmpo de compuestos muy numerosos y heterogéneos, muchos de los
cuales son también antagonistas dopaminérgicos. Entre las butirofenonas, la espiperona y el dropcridol (Fi
gura 13.32) son antagonistas D; y 5-HTi
*. La ketanserina (Fig. 13.33) es un prototipo de antagonista 5-HT2A
h3c-nh H,N-CO
5-CT (no selectivo)
Selectivo (no oral)
Bioisosterismo
HjC-HN-S
Sumatnptán
Selectivo, rápida desanimación
oxidativa
Figura 13.43. De la serotonina al sumatriptan.
que se ha comentado en el Apartado 3.2.3. Entre los antidepresivos triciclicos. algunos, como la ciproheptadina
y su isóstero tiofénico pizotifeno (Fig. 13.36), son antagonistas 5-HT2B que se utilizan como fármacos antimi
graña y estimulantes del apetito.
En el esqueleto de la ergolina (Fig. 13.18) se aprecian los elementos estructurales claves de dopamina
y serotonina. De acuerdo con esto, ya se ha comentado que la metisergida se utiliza en la migraña (véase la
Tabla 13.3).
4.2.4. Antagonistas 5-HT3
Se utilizan fundamentalmente como antieméticos, en el tratamiento de las náuseas y los vómitos inducidos
por los quimioterápicos. Algunas ortopramidas, como la metoclopamida (Fig. 13.34), son antieméticos, no
sólo por su actividad antagonista D>, sino también por bloqueo de los receptores 5-HT,. Este descubrimiento
motivó la búsqueda de antagonistas 5-HT3 puros. Desde 1970. se conocía la débil actividad antagonista 5-
HT> de la cocaína, éster benzoico de la eegonina (ácido 3-hidroxitropano-2-carboxílico)(Fig. 13.44), por lo
que se prepararon esteres y amidas derivados de ácidos que incluían la estructura de indol con alcoholes y
aminas derivados del tropano. Surgieron así los setrones, como el tropisetrón (el éster del ácido indol-3-car-
boxílico con la tropina) y el granisetrón (la amida del ácido /V-metilindaz.ol-3-carboxílico con la 3-amino-W-
metilgranatanina (un alcaloide homólogo del tropano). El ondansetrón es una estructura diferente, ya que es
la base de Mannich procedente de la /V-metil-1,2,3,4-tetrahidro-4-carbazolona con formaldehído y 2-metili-
midazol. Se utilizan disueltos al estado de clorhidratos para ser administrados por perfusión intravenosa pri
mero y, después de varios días, por vía oral.
Figura 13.44. Antagonistas 5-HTj. Setrones.
5. LIGANDOS DEL RECEPTOR DE MELATONINA Y SUS POSIBLES

APLICACIONES TERAPÉUTICAS
La melatonina (A/-acetil-5-metoxitriptamina) es un derivado de la 5-HT producido por/V-acetilación y posterior

O-metilación con un ritmo circadiano, de tal forma que los niveles más altos se encuentran durante los períodos
de oscuridad. Experiencias bioquímicas han demostrado la existencia de varios receptores (melt„ mellh y melk),
acoplados a proteínas G, que son diferentes a los receptores de serotonina. Sus agonistas parecen ser beneficio
sos en los trastornos del sueño y actúan inhibiendo la acumulación de AMPc, aunque existen lugares de interac
ción acoplados a la hidrólisis del fosfoinositol.
A pesar de que los estudios sobre estos receptores no son concluyentes, se sabe que con la mayor parte de
los subtipos se establecen enlaces de hidrógeno con el grupo metoxilo y el grupo de amido de la melatonina
(Fig. 13.45).
Enlaces de i Enlaces de hidrógeno

hidrógeno H
Figura 13.45. Interacciones de la melatonina y sus receptores.

El anillo de indol puede sustituirse en la posición 2 por halógeno, metilo o fenilo. La mayor afinidad de
estos derivados puede deberse a que dichos sustituyentes estabilicen una determinada conformación de la cade
na lateral, o a que establezcan una interacción complementaria con el receptor.
También puede sustituirse el anillo de indol por uno de naftaleno, benzofurano o benzotiofeno
(Fig. 13.46). El grupo farmacóforo mínimo parece encontrarse en m-metoxialquilamidas y, a su vez, éstas pue
den incorporarse en anillos de tetralina, cromano, indano, fluoreno. tetrahidrocarbazol o naftaleno, para restrin
gir la conformación. Algunos de estos compuestos se encuentran en fase de desarrollo muy avanzado.
Figura 13.46. Agonistas de receptores de melatonina.
6. FÁRMACOS ANTIOBESIDAD RELACIONADOS CON LOS RECEPTORES

ADRENÉRGICOS Y SEROTONINÉRGICOS
Para controlar la obesidad, se han estudiado compuestos supresores del apetito (anoréxicos) que actúan acti
vando los sistemas adrenérgico o serotoninérgico a nivel central. La anfctamina, que hoy se encuentra abso
lutamente desaconsejada por sus efectos estimulantes y su dependencia, es el más antiguo. En la Tabla 13.4,
se recogen ejemplos representativos. Además de los posibles efectos secundarios de estos fármacos, la pre
dicción de su aplicación contra la obesidad es difícil. Así por ejemplo, el antidrepesivo fluoxetina, un inhibi
dor de la recaptación de 5-HT que finalmente no fue aprobado para esta indicación terapéutica, posee este
efecto como consecuencia de un aumento en la sensación de saciedad mientras que antidrepesivos tricíclicos
producen un aumento de peso. La sibutramina. evaluada en principio como antidrepesivo pero registrada co
mo fármaco antiobesidad, inhibe la recaptación de NA y 5-HT. previa desmetilación a las aminas secundaria
y primaria correspondientes. La posible aplicación en este campo del agonista parcial 5-HT 1A buspirona, o de
los antagonistas 5-HTiB, 5HT2C y otros, está en estudio.
Tabla 13.4.. Fármacos antiobesidad
Sistema Fármaco Mecanismo
Adrenérgico Estimula la
liberación de NA
Agonista ai
Bloquea la recaptación
de NA
Serotoninérgico
Estimula la liberación
de 5-HT
Dcxfenfluramina
Inhibe la recaptación
de 5-HT
(no aprobado para la obesidad)
Inhibe la recaptación
de NA y 5-HT (funda
mentalmente sus metabolites)
Sibutramina
6.1. Agonistas del receptor p3
Este receptor, cuyo estímulo supone también la activación de la adenilciclasa, se encuentra fundamentalmente
en el tejido adiposo y está implicado en diversas funciones metabólicas. Sus agonistas aumentan la lipólisis y la
termogénesis en dicho tejido, a través de la activación de varias proteínas mediada por AMPc. De forma com
plementaria, los receptores p; y [i. centrales reducen la ingestión de alimento.
En la búsqueda de fármacos para controlar la obesidad, se han desarrollado agonistas p, selectivos, que
carecen de los efectos cardiovasculares u otros derivados de la estimulación de los receptores pi y p¡. Sus es
tructuras son básicamente de tipo ariletanolamina o ariloxipropanolamina.
El primer grupo ha surgido a partir del prototipo 1 (Fig. 13.47), en el que pronto se reconoció que la por
ción de ácido acético era la responsable de la selectividad hacia los receptores p3.
De este prototipo se han hecho múltiples variaciones, entre las que destacan la utilización de esteres como
profármacos (2), el reemplazamiento del grupo carboxilo por otros isósteros (3), la incorporación de la cadena
dimetilénica que enlaza el grupo NH con el benceno a un anillo (2) o los profármacos en los que el grupo «eta-
nolamina» se encuentra formando un anillo (4).
Entre las estructuras de tipo ariloxipropanolamina, puede observarse igualmente la evolución desde un
patrón 5 a derivados muy selectivos, como 6.
Figura 13.47. Agonistas pj de tipo ariletanolamina y ariloxipropanolamina.

BIBLIOGRAFÍA
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Diseño de fármacos que actúan
sobre receptores
de acetilcolina
E. Raviña
1. INTRODUCCIÓN. ACETILCOLINA Y RECEPTORES COLINÉRGICOS
La acetilcolina (AcCo, CHjCO-CHiCHiN'fCHOj) es un importante neurotransmisor en el sistema nervioso

central (SNC). que comprende el encéfalo y la médula espinal y en el sistema nervioso periférico (dentro de éste
se encuentran los nervios sensitivos, que transmiten mensajes desde el cuerpo al SNC, y los nervios motores,
que lo hacen desde el SNC al resto del cuerpo).
Los nervios motores son los que ahora nos conciernen y pueden inervar el músculo esquelético, formando
el sistema nervioso somático o motor esquelético, que no tiene sinapsis intermedias y en el que la acetilcolina es
el neurotransmisor al interactuar con los receptores nicotínicos NM. Una grave enfermedad, la miastenia grave.
se caracteriza por la pérdida de estos receptores debida a una reacción de autoinmunidad.
Los nervios motores también pueden inervar el músculo liso, el músculo cardíaco o la médula suprarre
nal. Este último sistema se denomina autónomo o vegetativo, y puede dividirse a su vez en dos subgrupos: los
nervios simpáticos y los parasimpáticos.
Casi inmediatamente después del SNC. los nervios simpáticos se juntan en una sinapsis con un segundo
nervio que va a la sinapsis final, en la que actúan como neurotransmisores la noradrenalina y la adrenalina; sin
embargo, la acetilcolina es el neurotransmisor de la primera sinapsis, al interactuar con los receptores nicotíni
cos Nn.
En los nervios parasimpáticos, que se juntan en una sinapsis a cierta distancia del SNC para finalmente in
teractuar con los músculos lisos en la última sinapsis parasimpática, la acetilcolina es el neurotransmisor de la
primera sinapsis (interactúa con los receptores nicotínicos Nn) y de la última (actuando sobre los muscarínicos
M. Fig. 14.1).
La única excepción en este panorama son los nervios simpáticos que van directamente a la médula supra
rrenal (Fig. 14.2), en los que la actuación de la acetilcolina sobre los receptores Nn estimula la liberación de
adrenalina desde la médula. Ésta circula en la sangre e interactúa con los receptores de noradrenalina de los ner
vios simpáticos y con otros receptores de adrenalina (véase el Capítulo 13).
Figura 14.1. Esquema de los sistemas nerviosos autónomos y motor esquelético, y lugares en los que interviene
la acetilcolina como neurotransmisor (receptores muscarínicos y nicotínicos NM y Nn).
Figura 14.2. Nervios motores del sistema nervioso periférico.
La acetilcolina se biosintetiza en el citoplasma de las terminaciones axónicas. por la acetilación de la co

lina, procedente de la hidrólisis de lecitina o fosfatidilcolina, con acetilcoenzima A. Esta reacción está cataliza
da por la enzima colina acetiltransferasa. Una vez sintetizada, se almacena en su mayor parte en vesículas, for
mando un depósito del que puede liberarse por estimulación neuronal. La liberación de AcCo de estas vesículas
puede inhibirse específicamente por la «toxina botulínica», una mezcla de toxinas producías por Clostridium
botulinum que producen una parálisis nerviosa llamada botulismo. Cuando produce su efecto después de libera
da, la AcCo se destruye rápidamente por la enzima acetilcolinesterasa, que cataliza su hidrólisis a colina y ácido
acético. Por ello, los fármacos inhibidores de la acetilcolinesterasa, son agonistas indirectos de la AcCo, ya que
permiten que ésta actúe durante más tiempo en sus receptores (véase el Capítulo 11).
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE ACETILCOLINA 407
Como ocurre en casi todos los sistemas neuronales, los receptores colinérgicos producen respuestas dis
tintas, distinguiéndose los receptores nicotínicos y los muscarínicos, cuyos nombres derivan de los diferentes
efectos fisiológicos que se observaron para el alcaloide del tabaco (Nicotiana tabacum) nicotina, y de la amani
ta (Amanita muscaria) muscarina (Fig. 14.3).
a) Biosíntesis
(CH,)3N-CH2-CH2OH + CH3-C0-S-C0A
Colina acctiltransferasaj
(CH3)3N-CH2-CH2-O-C-CH3 + HSCoA
O Nicotina
AcCo
b) Metabolismo
(CH3)jN-CH2-CH2-O-C -ch3
Acetilcolinesterasa
(CH,),N-CH2-CH2OH + HO2C-CH3 Muscarina
Figura 14.3. Estructuras de AcCo y de los agonistas muscarínicos y nicotínicos clásicos: muscarina y nicotina.
El receptor nicotínico de AcCo (NM) es el mejor estudiado de todos los receptores sobre los que actúan los
distintos neurotransmisores, y ha servido de modelo para el estudio de otros receptores de membrana, ya que
pudo aislarse y caracterizarse a partir de los órganos eléctricos de varias especies de peces que como la raya
eléctrica del Atlántico (Torpedo marmorata), son muy ricos en estos receptores. El receptor nicotínico NM es el
prototipo de canal iónico mediado por neurotransmisores (véase el Capítulo 12). Está formado por una glico-
proteína embebida en la membrana postsinática, compuesta por cuatro subunidades peptídicas diferentes, en
proporción 2a, p, yy 5. de peso molecular aproximado 250 kD (Fig. 14.4.).
Canal iónico
Figura 14.4. Receptor nicotínico NM.
De los estudios con los radioligandos, se sabe que los receptores nicotínicos tienen dos sitios de unión de
máxima afinidad por la AcCo en las subunidades a, y que los sitios aniónicos a los que se unen los agolpamien
tos de amonio cuaternario de los agonistas son restos aspartato y glutamato. La interacción de los ligandos acti
vantes produce un cambio de su conformación, que se traduce en un aumento de la permeabilidad no selectiva
para cationes monovalentes y divalentes de un diámetro inferior a 8Á (Na
*, * y, en menor grado. Ca2* y Mg2*),
K
que fluyen en el sentido obligado por su gradiente de concentración (el Na* hacia dentro y el K
* hacia fuera), de
lo que deriva la despolarización de la membrana. Se aceptan los subtipos NM (placa motriz) y Nn (SNC y gan
glios vegetativos). En estos últimos, las subunidades que los constituyen pueden ser menos variadas que en los
Nm, y estar formados por a2Ps. Ctjp2, etc.
Dado que la respuesta muscarínica es más lenta que la nicotínica y sus efectos más duraderos, se suponía
que los receptores muscarínicos no eran canales iónicos, sino que entre la actuación del neurotransmisor y la
respuesta celular final debían interponerse fenómenos bioquímicos. En realidad, son una familia de receptores
glicoproteicos asociados a proteínas G con 7 regiones de transmembrana. Los agonistas se fijan al parecer en la
tercera región de transmembrana, y el tercer bucle intracelular es el que se asocia con las proteínas G. Basándo
se en datos farmacológicos y bioquímicos, se han caracterizado los subtipos Mr.Mi. mientras que por estudios
de clonación se han identificado cinco (mi-m5). De éstos, los tres primeros se corresponden con los MrM» y se
encuentran ampliamente distribuidos, aunque de forma irregular, en el SNC (Fig. 14.5).
M2 M;
Receptor atrial glandular
ID| (también m4 y 1115)
Segundo mensajero IP3/DAG? AMPcf IPj/DAGT
Figura 14.5. Receptores muscarínicos. localización principal, antagonistas y segundos mensajeros.
Los receptores M, están localizados en las neuronas ganglionares del sistema vegetativo, incluidas las de
los plexos mesentéricos de la pared gástrica. En el SNC desempeñan un papel importante en los procesos del
aprendizaje y la memoria. La pirenzepina es un antagonista selectivo que se utiliza en el tratamiento de la úlce
ra gastroduodenal. Los receptores M2 se localizan en la aurícula y en el tejido conductor del corazón. Su estí
mulo produce la disminución de la frecuencia cardíaca y de la fuerza del corazón. Los receptores se encuen
tran en las glándulas exocrinas y en el músculo liso. Al estimularse, se contrae éste y se incrementan las
secreciones de las glándulas salivales, lagrimales, bronquiales, gástricas y pancreáticas como consecuencia de
la movilización de Ca‘* que produce su acoplamiento a proteínas G, ya que la interacción con agonistas activa la
fosfolipasa C (M, y Mj), liberando así diacilglicerol (DAG) y trifosfato de inositol (IP,). La activación de los re
ceptores M2 (y también m< y ms) inhibe la adenilciclasa con la consiguiente reducción de los niveles intracelula-
res de AMPc. Esta última situación produce la hiperpolarización de la membrana y la reducción de la contracti
lidad a través de distintos mecanismos.
2. INTERACCIONES ENTRE LA ACETILCOLINA Y SUS RECEPTORES
La AcCo es un agente terapéutico de muy escaso valor. Aunque se ha empleado como cloruro para administrar
lo por vía parenteral, su acción es muy fugaz. Se hidroliza rápidamente en el medio ácido del estómago, mien
tras que en la sangre puede hidrolizarse química y enzimáticamente por la catálisis de esterasas y, en particular,
de acetilcolinesterasa. Naturalmente, la hidrólisis a nivel gástrico la hace inactiva por vía oral. Además, su ac
ción no es selectiva, ya que puede interactuar con los diversos subtipos de receptores.
La AcCo es una molécula flexible cuya conformación más estable, según cálculos ab initio y otros estudios
teóricos (EHT o extended Hiickel theory. CNDO o complete neglect differential overlap, etc), que están de acuer
do con los estudios de difracción de rayos X de cristales de diversas sales de acetilcolina y con los estudios espec-
trocópicos de RMN de 'H, ”C y UN. de sus soluciones, es aquélla en que los átomos de oxígeno no carbonílico y
de nitrógeno presentan una conformación gauche, y los restantes una conformación antiplanar (trans) (Fig. 14.6).
(Mirando a lo largo
del enlace 5-4)
Figura 14.6. Conformación más estable de AcCo.
En cuanto a la distribución de cargas, puede decirse que la carga positiva del N * se distribuye en los tres
grupos metilo y el metileno adyacentes. La carga positiva es esencial, la distancia entre el nitrógeno y el éster es
importante, la cadena dimetilénica no puede extenderse, ni tampoco la del ácido, y debe haber al menos dos gru
pos metilo sobre el nitrógeno. De acuerdo con estos hechos, se ha sugerido que la interacción se produce a través
de un enlace de hidrógeno entre el grupo éster de la acetilcolina y un residuo de histidina de los receptores
(Fig. 14.7). mientras que deben existir regiones hidrófobas que acomoden al metilo de éster. pero no a grupos ma
yores (fundamentalmente, en los receptores muscarínicos). Por otra parte, debe existir una interacción iónica con
residuos de aspártico o glutámico. aunque un anillo aromático rico en electrones, como el de tirosina. también
puede establecer interacciones dipolares con la carga positiva difusa del grupo trimetilamonio de la acetilcolina.
También se proponen dos subsitios hidrófobos que acomodan a dos de los tres sustituyentes sobre el nitrógeno.
Subsiiio .
hidrófobo Subsitios hidrófobos
Glu o Asp
Figura 14.7. Principales interacciones entre la AcCo y sus receptores.

Tradicionalmente, se ha propuesto que el enlace de hidrógeno entre el éster y el grupo NH del imidazol de
la histidina se produce con el receptor nicotínico con el grupo carbonilo del «lado carbonílico», mientras que se
produce por el oxígeno del «lado metílico» con el receptor tnuscarínico (Fig. 14.8).
El cambio energético asociado a una u otra conformación es pequeño.
b) Receptor muscarínico
Figura 14.8. Propuestas acerca de la diferente interacción de la AcCo con los receptores nicotínicos (a) y
muscarínico (b).
Aunque estas consideraciones no dejan de ser una mera aproximación, lo cierto es que, mientras que la
actividad muscarínica es bastante específica (Fig. 14.9), los parámetros estéricos son bastante poco significati
vos para la acción de los agonistas del receptor nicotínico.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE ACETILCOL1NA 411
Carbacol
Arccolina (catión)
Muscarina
Pilocarpina (catión)
Figura 14.9. Distancia entre los átomos de nitrógeno y oxígeno en agonistas muscarínicos.
3. AGONISTAS MUSCARÍNICOS
En la Tabla 14.1 se resumen algunos efectos de los agonistas muscarínicos en distintos órganos.
Tabla 14.1. Respuestas producidas tras la estimulación de los receptores muscarínicos
Órgano efecior Respuesta

Corazón Disminución de la frecuencia cardíaca
Disminución de la contractilidad
Vasos Vasodilatación periférica y caída de tensión (mediada por la liberación
de óxido nítrico)
Músculo liso Contracción del esfínter del iris y músculo ciliar (ojo), broncoconstríc-
ción. aumento del tono y motilidad del tubo digestivo.
Glándulas Secreción (lagrimal, salival, bronquial, gastrointestinal, pancreática)
Los agonistas muscarínicos pueden ser útiles en el glaucoma, en la activación de los tractos gastrointesti
nal y urinario tras una intervención quirúrgica, y en el tratamiento de ciertos problemas cardíacos que requieren
disminuir la actividad muscular y la velocidad del corazón. Los que actúan a nivel central se han ensayado en
los intentos de combatir la enfermedad de Alzheimer, ya que en estos enfermos se produce una pérdida de neu
ronas colinérgicas y un notable descenso de actividad de la colina acetiltransferasa en varias regiones cerebrales.
Su posible uso está limitado por sus efectos parasimpáticos (náuseas, diarrea, broncoconstricción, bradicardia,
hipotensión, mayor secrección gástrica, sudor y saliva). Recuérdese que también se han ensayado para este pro
pósito los inhibidores de la acetilcolinesterasa que actúan a nivel central, como la tetrahidro-9-aminoacridina
(Capítulo 11).
La introducción de un grupo metilo en p de la acctilcolina, como en la metacolina, origina un análogo
más estable a la hidrólisis por impedimento estérico, que mantiene la actividad muscan'nica, pero no la nicotíni-
ca que, en cambio, se conserva en el ot-metildcrivado (Fig. 14.10). La actividad muscarínica reside en el enan-
tiómero S (análoga a la configuración del centro estereogénico C-5 en la muscarina), aunque se emplea como
racémico. En cuanto a las modificaciones del grupo éster, el carbamato de colina (carbacol) se emplea tópica
mente en el tratamiento del glaucoma, y el betanecol (carbamato de P-metilcolina) se emplea por vía oral en ca
sos de atonía postoperatoria gastrointestinal y urinaria. Ambos son más resistentes a la hidrólisis, debido a que
el par de electrones del nitrógeno del grupo carbamato hace menos electrófilo al carbonilo.
O
-N(CH,), N(CH,)
h2n ”
Carbacol Betanecol
HO.
CHjN(CH03
(25, 5/?)-2-Mctil-5( 1,3-dioxolanil)

(+) 2S. 3R. 5S-Muscarina
(I S.2S)(+)trans-Acelox ic ic lopropi I - metiltrimctilamonio
trimetilamonio
Pilocarpina
Arecolina
Figura 14.10. Algunos agonistas muscarínicos.
Entre los numerosos análogos cíclicos naturales y sintéticos de la AcCo que se conocen, el compuesto
(lS,2S)(+)rrazis-acetoxiciclopropiltrimetilamonio es tan potente como aquélla. Merece especial mención la
muscarina. un alcaloide muy tóxico que no se utiliza en terapéutica. Su acción agonista es muy estereoespecífi-
ca, ya que, de los 8 estereoisómeros posibles, sólo es activo el isómero natural (+) 2S, 4R, 5S. Diversos análogos
sintéticos, como (2S,5/?)-2-metil-5(l,3-dioxolanil)metiltrimetilamonio, tienen una actividad comparable. Ob
sérvese que una configuración análoga a la 2S de la muscarina es clave para que la actividad sea óptima.
La pilocarpina es un alcaloide del arbusto Pylocarpus jaborandi que produce hipersecrección salival y su
doral. Se emplea en farmacología, como herramienta de trabajo, y en oftalmología, como miótico en el trata
miento de la elevada presión intraocular asociada al glaucoma o para evitar la fotofobia tras la aplicación de fár
macos midriáticos. En este alcaloide, que no atraviesa fácilmente la barrera hematoencefálica, un resto de
imidazol (que se protona a pH fisiológico) se une a un fragmento de y-butirolactona a través de un puente meti-
lénico.
La arecolina (éster metílico del ácido A'-metiltetrahidronicotínico). que es el principal alcaloide de la nuez
de areca (Areca catechu), puede considerarse un análogo semirrígido de una AcCo «inversa» que poseyera la
estructura CH)O;CCH2CH;N (CH
* ,)>. Es un agonista parcial de los receptores Mi y M2 que ha demostrado su
utilidad en pacientes con demencia presenil y enfermedad de Alzheimer, facilitando el aprendizaje y la memoria
(por ser agonista M,). A pH 7,4. la arecolina está parcialmente protonada. Utilizando la ecuación [14.1] se de
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE ACEFILCOUNA 413
duce que la concentración de su forma ionizada, que se une a los receptores es del 71 %, mientras que su forma
no ionizada (29 %) es la que atraviesa la barrera hematoencefálica.
% Forma ionizada = 100/[l+antilog (pH-pKa)J (14.1]
Los efectos de la arecolina son cortos, debido a la fácil hidrólisis in vivo de su grupo éster y. además, po
see efectos secundarios derivados de la activación de los receptores M; centrales y periféricos. El reemplaza
miento del grupo éster por el bioisóstero derivado de 3-hidroxiisoxazol (resistente a la hidrólisis), originó 3-mc-
toxi-5-metil-4,5.6,7-tetrahidroisoxazolo|4.5-<|piridina (THPO) (Fig. 14.11). Este compuesto es más estable y
selectivo que la arecolina hacia los receptores M,. Su pKa es menor (6.6) y su log Pes mayor, por lo que atra
viesa fácilmente la barrera hematoencefálica. Otros bioisósteros con un agrupamiento de etiltctrazol o hexiloxi-
tiadiazol activan también de forma preferente los receptores M, y, por tanto, son potencialmente útiles en la en
fermedad de Alzheimer.
Bioisóteros
Figura 14.11. Arecolina, THPO y otros bioisósteros con actividad agonista Mi central.
4. AGONISTAS NICOTÍNICOS
Los agonistas nicotínicos pueden usarse en el tratamiento de la miastenia grave, una enfermedad autoinmunita-
ria en la que el organismo produce anticuerpos contra sus propios receptores de AcCo. En los ésteres de colina
con ácidos carboxílicos, se conserva la actividad para los ácidos de cadena mayor que el acético, que resultan
más activos en los ganglios que en la placa neuromotora. En los ésteres benzoicos, la potencia disminuye cuan
do aumenta la constante de Hammett del sustituyeme, quizás porque al retirar carga se hace menos negativo el
oxígeno carbonílico. Los esteres indicados en la Figura 14.12 son tan potentes o más que la AcCo. Las cetonas
son agonistas de los receptores neuromusculares, siendo el pentilderivado en las series de alquiltrimetilamonio
más potente que la AcCo en los ganglios.
N(CH,),
R = a. Pr". Bu".CH2 = CH
Acctiltiocolina Ésieres benzoicos
(X = donador electrónico)
ch,^^Ñ(CH5)1
Compuestos de amonio
cuaternario
HjCZ SCHj
Muscarona
Metilioduro
de arecolona Metilioduro
de isoarecolona
Figura 14.12. Agonistas de receptores nicotínicos.
Entre los agonistas cíclicos, el más estudiado ha sido la nicotina y sus análogos. En la primera, la conforma
ción más estable, según los cálculos de orbitales moleculares, es la que presenta el plano del anillo de piridina per
pendicular al anillo de pirrolidina. El nitrógeno pirrolidínico está protonado (pK, = 8.5) y el de piridina posee una
densidad de carga negativa. Ambos nitrógenos se asemejan a los centros positivos y negativos, respectivamente, de
AcCo. La muscarona es más potente que la AcCo, así como las sales cuaternarias de arecolona e isoarecolona (me-
tilioduros).
5. ANTAGONISTAS MUSCARÍNICOS
Son fármacos que bloquean la actividad resultante de la acción de la acetilcolina en las sinapsis colinérgicas o
parasimpáticas cuyos receptores son muscarínicos. No deben confundirse con los bloqueantes ganglionares o
gangliopléjicos, que inhiben los receptores nicotínicos Nn de AcCo en los ganglios, ni con los bloqueantes neu
romusculares, que bloquean los receptores nicotínicos NM de la placa neuromotora, que se verán más adelante.
Los antagonistas muscarínicos reducen las secreciones gástricas y salival, y relajan el músculo liso, por lo
que pueden ser útiles como broncodilatadores. para reducir la motilidad de los tractos gastrointestinal y uri
nario. y para dilatar la pupila. De hecho, se utilizan en las exploraciones oftalmológicas, como broncodilatado
res y antiasmáticos (a veces, en forma de aerosoles), y como antiespasmódicos en diarreas, disenterías suaves y
diverticulitis, cólicos biliares y renales (junto con analgésicos). Su acción central justifica su uso en el trata
miento de la enfermedad de Parkinson (véase el Capítulo 13).
Su utilización clásica en el control de la hiperacidez gástrica y la úlcera gastroduodenal quedó superada
como consecuencia de la introducción, en los años ochenta, de los antihistamínicos H2, como la ranitidina y la
famotidina (que se verán en el Capítulo 16), y en los noventa, de los inhibidores de la ATPasa H7K *. como el
omeprazol y sus análogos (que se han comentado en el Capítulo 12). Sin embargo, los antagonistas Mi selecti
vos. como la pirenzepina (véase la Fig. 14.5), se utilizan en el tratamiento de la gastritis y de la úlcera duodenal.
Los primeros compuestos que mostraron actividad antimuscarínica fueron la atropina y la escopolamina
(Fig. 14.13), alcaloides que, en grandes dosis, son alucinógenos. Se aislaron de Atropa belladona y de Datura Stra
monium (el nombre de la primera planta, «belladonna», proviene de su uso durante algún tiempo por las mujeres ita
lianas para embellecerse dilatando la pupila del ojo). El núcleo fundamental de estas estructuras es el tropano </V-me-
til-8-azabiciclo(3.2.1.]octano), un sistema formado por un anillo piperidínico metilado en el nitrógeno y otro
pinolidínico. El anillo de piperidina puede adoptar la conformación de silla o la de bote, y las dos configuraciones
posibles para su 3-hidroxiderivado se denominan tropina (con hidroxilo en a) y pseudotropina (con hidroxilo en fJ).
La atropina es el éster de la tropina con el ácido (±)-trópico, siendo la hiosciamina el éster de tropina con el enantió
mero S (-) del ácido trópico. Este centro estereogénico se racemiza muy fácilmente, ya que es contiguo a un grupo
carbonilo y, por tanto, el protón del enlace C-H es «ácido». La escopolamina o hioscina es el éster del ácido (±)-tró-
pico con la escopina, y se diferencia de la tropina en la función epóxido adicional. La homatropina es el éster del áci
do mandélico con la tropina. El bencilato de quinuclidina es un análogo sintético que se utiliza como radioli|ando
para estudiar la localización de los receptores muscannicos. El n-butilbromuro de la hioscina es la Buscapina®. que
se asocia a analgésicos tipo metamizol (Buscapina compositum®) en el tratamiento de dolores cólicos o postopera
torios.
Atropina Escopolamina Bencilato de

(configuración 3a) quinuclidina
R = OH; Homatropina
Butilbromuro de
escopolamina
(«Buscapina»)
Figura 14.13. Antagonistas muscannicos derivados del tropano.
Todos estos derivados son antagonistas mixtos de los receptores M(, M2 y M.», cuya actividad va aso-
ciada a la orientación axial del hidroxilo de la tropina y a la esterificación con hidroxiácidos aromáticos con
carbono estereogénico (trópico o mandélico) la mayor parte de las veces. El grupo hidroxilo de éstos ácidos
contribuye de forma importante a la unión al receptor a través de enlaces de hidrógeno. Si el ácido esterifi-
cante carece de este grupo, el compuesto suele poseer acción anestésica local. La actividad anestésica se fa
vorece si el alcohol esterificado es el epímero p (pseudotropina), como ocurre en la tropocaína (véase el
Capítulo 12).
La atropina y sus análogos se asemejan a la acetilcolina en que poseen un nitrógeno cargado (cuando se
protonan) y un grupo éster. Se unen a los mismos receptores, pero no los activan (Fig. 14.14).
Figura 14.14. Superposición de la acetilcolina con la atropina.
Muy pronto se observó que en estos alcaloides eran posibles amplias variaciones estructurales, que se re
sumen en la Figura 14.15. Los grupos alquilo sobre el nitrógeno pueden ser mayores que el metilo (en contraste
con los agonistas), el nitrógeno puede ser terciario o cuaternario, y suelen tener grupos acilo grandes en los que
R' = anillo aromático o heteroaromático.
Al menos un anillo aromático y uno alifático

cíclico o cadena hidrocarbonada con
interacción hidrófoba.
Amonio cuaternario
o amina terciaria
protonada
Puede incluir un éster (la mayoría),

un éter o un hidrocarburo R’ = anillo aromático o
heteroaromático
Grupos OH o CONH2 capaces

de formar enlaces de H
con el receptor
Figura 14.15. Estructuras que caracterizan a los antimuscarínicos de síntesis.
Entre los diversos ésteres de los ácidos difenilacético. difenilglicólico, bencílico, ciclohcxilfenilglicólico,
xanteno-carboxílico, etc., con aminoalcoholes diversos, citaremos a la adifenina, al bromuro de clidinio, al de
oxifenonio y a la propantelina (Fig. 14.16).
Entre los ésteres, la difenhidramina (Benadryl , también antihistamínico), usado en el tratamiento de la
enfermedad de Parkinson.
Entre los aminoalcoholes, citaremos la prociclidina (Altane®) y el pridinol, que se utilizan como coadyu
vantes antiparkinsonianos. La tolterodina se ha introducido recientemente en el tratamiento de la incontinencia
urinaria (vejiga inestable).
Los anticolinérgicos puros que actúan impidiendo la llegada de los impulsos emetógenos desde el aparta
do vestibular del oído interno hasta el centro del vómito son los más eficaces como antieméticos, pero sólo se
utilizan en pacientes refractarios a otros tratamientos por su toxicidad.
Los antieméticos más utilizados en el mareo cinético son los antihistamínicos (véase capítulo 16), pero su
acción terapéutica se debe, mayoritariamente, a su efecto anticolinérgico.
Bromuro de
Adifenina oxifenonio
Toltcrodina
Bromuro de Bromuro de
clidinio propantclina
Pridinol Prociclidina
Figura 14.16. Antimuscarínicos de síntesis.
De la importancia de los dos agrupamientos de arilo o heteroarilo se deduce que debe haber un lugar de
enlace próximo al lugar de los agonistas colinérgicos en estos receptores que permita la unión de estos anillos
impidiendo a la acetilcolina enlazarse a su lugar (véase la propantelina en la Fig. 14.17).
Figura 14.17. Lugares de unión de los antagonistas muscarínicos.

Las enfermedades respiratorias se trataban durante siglos administrando cigarrillos elaborados con estra
monio o belladona, y desde el siglo xvn se utilizaron sus extractos como antiasmáticos. Hoy sabemos que este
efecto se debe a su contenido en atropina que, como otros anticolinérgicos, es un potente broncodilatador. Sin
embargo, al atravesar la barrera hematoencefálica, se producen efectos indeseables, especialmente taquicardia y
visión borrosa, por lo que. desde que en los años sesenta se introdujeron los agonistas adrenérgicos P> (véase el
Capítulo 13) y los corticosteroides, la atropina dejó de usarse como fármaco antiasmático. No obstante, algunos
derivados con nitrógeno cuaternario pueden inhalarse, ya que se distribuyen mal al SNC y carecen de efectos
secundarios. Entre ellos, se encuentran el metil bromuro de A/-isopropilnortropina (bromuro de ipratropio) y el
bromuro de tiotropio (un isóstero bis-tiofénico del bencilato de escopina bromometilado), que se utilizan como
broncodilatadores (Fig. 14.18).
' Ácido trópico Bromuro de tiotropio
Figura 14.18. Análogos de atropina y escopolamina utilizados como broncodilatadores.
6. ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES NICOTÍNICOS
Debido fundamentalmente a su diferente biodistribución, existen antagonistas selectivos de los receptores nico-
tínicos de los ganglios (Nn) que carecen de interés terapéutico, ya que no distinguen entre los del sistema sim
pático y el parasimpático, y de la placa neuromotora (Nm). Estos últimos se conocen como bloqueantes neuro-
musculares.
Se conocen dos clases de bloqueantes neuromusculares: los competitivos o estabilizantes, como la (+)-tu-
bocurarina, el vecuronio y el pancuronio, y los despolarizantes, como el decametonio o la succinilcolina
(Fig. 14.19).
El curare, un veneno utilizado por los indios americanos que causa parálisis y parada cardíaca, es el ex
tracto seco de la planta Chondrodendron tomentosum. La principal aplicación de su componente activo, la tubo-
curarina, es la relajación de los músculos abdominales en la preparación previa a la cirugía, permitiendo así uti
lizar menores concentraciones de anestésicos generales. Esta molécula posee dos nitrógenos cargados
positivamente (uno cuaternario y otro terciario protonado a pH fisiológico). Al principio, se creyó que la distan
cia entre estos dos centros (1,4 nm) podía ser equivalente a la distancia entre dos receptores colinérgicos separa
dos, y que la molécula actuaría como un puente entre ambos lugares, bloqueando el acceso a la AcCo. Basándo
se en que la distancia curarizante es crucial, se prepararon moléculas como el vecuronio y el pancuronio. donde
el núcleo esteroideo actúa de espaciador de ambos átomos de nitrógeno, los cuales se encuentran a una distancia
semejante a la de la tubocurarina (1,1 nm). También se introdujeron dos restos acetilo para asemejarse más a la
AcCo. Aunque esta teoría era atractiva, se ha demostrado que la distancia entre los dos subsitios a de una de las
dos proteínas pentámeras que forman estos receptores es mayor de 1,4 nm, y dos subsitios a de dos proteínas se
encuentran más separados todavía (9-10 nm). Por ello, se ha propuesto que bloquean el canal iónico en su forma
de reposo cerrada de modo que uno de los nitrógenos cuaternizados se enlaza al lugar aniónico de una subuni
dad a y otro a un resto de cisteína situado a la distancia adecuada.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE ACET1LCOLIN A 419
a) Competitivos o estabilizantes
(CH,)3Ñ(CH,)i0Ñ(CH,)3
Decametonio
Figura 14.19. Bloqueantes neuromusculares.
La tubocurarina, el vecuronio y el pancuronio se denominan bloqueantes neuromusculares no despolari-

zantes. Ocupan el mismo lugar que la AcCo, pero no pueden penetrar su cabeza catiónica en el surco del recep
tor. Compitiendo con aquélla, reducen el potencial de despolarización por debajo del umbral necesario para que
se produzca la contracción, produciéndose así la parálisis muscular. Su acción revierte con los inhibidores de la
acetilcolinesterasa.
Los bloqueantes neuromusculares despolarizantes, como el decametonio, cuyos centros nitrogenados car
gados positivamente se encuentran a una distancia de 1,35 nm. muy semejante a la de la tubocurarina, actúan
como agonistas más que como antagonistas. Al principio, mimetizan la acción de la AcCo, ya que su cabeza ca
tiónica puede penetrar en el surco del receptor nicolt'nico produciendo en éste cambios conformacionales seme
jantes a los que produce aquélla, pero se mantienen unidos mucho tiempo, por lo que. al no repolarizarse la
membrana, no se mantiene la tensión muscular y se produce la relajación. Su acción no revierte con inhibidores
de la acetilcolinesterasa. La succinilcolina (o suxetonio) se diseñó como un análogo «blando» del decametonio.
ya que puede hidrolizarse enzimáticamente si la persona posee la esterasa adecuada, teniendo una duración de
acción de pocos minutos. La unión de dos fragmentos de colina a través de un áster succínico mantiene la dis
tancia de 1,35 nm entre los nitrógenos catiónicos. Sin embargo, el suxetonio tiene importantes efectos secunda
rios.
El atracurio (Fig. 14.20) se diseñó basándose en las estructuras de la tubocurarina y del suxetonio. A pH
sanguíneo (alrededor de 7,4) sufre la eliminación de Hofmann gracias a la presencia de dos grupos carbonilo
atrayentes de electrones en 0 respecto al nitrógeno cuaternario. Otras sales de amonio cuaternario requieren me
dios muy básicos para la abstracción del protón de esta posición que se requiere para dicha eliminación. Como
la eliminación de Hofmann no tiene lugar en medios ácidos, el fármaco es estable en solución como benceno-
sulfonato. En estado de bencenosulfonato o besilato es muy soluble y puede almacenarse. Debido a su inestabi
lidad en sangre, se administra a medida que se necesita y, terminada la intervención quirúrgica se interrumpe el
goteo, cesando casi instantáneamente el bloqueo colinérgico. Junto con el vecuronio, es uno de los bloqueantes
neuromusculares más utilizados.
OMc OMe
Eliminación
de Hofmann
Metabolitos
inactivos
Figura 14.20. Atracurio. Eliminación de Hofmann.
BIBLIOGRAFÍA
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Diseño de fármacos que actúan sobre
receptores de membrana (III). Receptores
de aminoácidos y péptidos
M. SÓLLHUBER y C. AVENDAÑO
1. INTRODUCCIÓN
Los aminoácidos son los componentes de las proteínas, pero algunos de ellos actúan en el SNC como neuro-
transmisores. Se diferencian de los neurotransmisores clásicos (catecolamina, serotonina y acetilcolina) en dos
aspectos principales. En primer lugar, su acción se limita al SNC, por lo que, al carecer de efectos periféricos,
puede esperarse que su toxicidad sea baja. Por otra parte, su concentración como neurotransmisores es bastante
más elevada. Existen neurotransmisores con estructura de aminoácidos neutros, entre los que se encuentran el
ácido y-aminobutírico (GABA), la glicina y la taurina, y con estructura de aminoácidos ácidos, como el ácido
glutámico. el ácido aspártico y otras sustancias relacionadas con ellos. El primer grupo tiene una acción inhibi
dora sobre el sistema nervioso central, como consecuencia de una hiperpolarización de la membrana neuronal
que hace a la neurona incapaz de excitarse. Los del segundo grupo, por el contrario, actúan de forma excitadora,
ejerciendo una acción despolarizante de la membrana postsináptica.
Muchos péptidos naturales son igualmente neurotransmisores y factores endógenos que. al actuar sobre
sus receptores, desempeñan importantes funciones fisiológicas. Entre ellos se encuentran los péptidos opioides,
la angiotensina II, la cndotelina o la gastrina.
Varios receptores de aminoácidos y péptidos. como el receptor de glicina, el de GABAA/benzodiazepina,
el de ácido glutámico denominado AMPA [ácido 2-amino-3-(3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolil)-propiónico], y al
gunos receptores de opioides, regulan canales iónicos y reciben el calificativo de receptores ionotrópicos. En su
mayor parte, estos receptores están formados por varias subunidades que pueden ser muy variables. Por ello, to
davía no se conocen en su totalidad, aunque por técnicas de clonación se puede disponer hoy de modelos farma
cológicos que se comportan de forma semejante a los receptores naturales.
2. RECEPTORES DE GABA
Ya se han comentado algunos fármacos que actúan regulando la biosíntesis y la degradación del GABA, así
como su transporte (véanse los Capítulos 11 y I2, respectivamente). Hablaremos aquí de los que actúan sobre
sus receptores, Existen al menos tres clases de receptores; GABAa, que están asociados directamente con un
canal de CI; GABAb, que suelen ser receptores presináplicos asociados a proteínas G que regulan la libera
ción de neurotransmisores a través de la regulación de los canales de Ca2* o K * por un segundo mensajero; y
receptores GABAC, que están también asociados a un canal de Cl * y se relacionan estructuralmente con los
GABAa.
El receptor GABAa postsináptico. que es el más estudiado, contiene además lugares de unión para una
gran variedad de ligandos, entre ellos barbitúricos, esteroides, benzodiazepinas y diversos agentes relacionados
con las convulsiones (Fig. 15.1). Este hecho permite establecer una relación estricta entre diferentes grupos te
rapéuticos, que inicialmente surgieron como grupos separados sin relación aparente. Es decir, podemos relacio
nar ansiolíticos, sedantes, relajantes musculares, anticonvulsivos, hipnóticos e inductores de anestesia, como
fármacos que tienen una finalidad común: la activación del receptor postsináptico GABAa. El receptor GABAa
postsináptico tiene una estructura pentámera, análoga al receptor nicotínico. que puede estar formada por algu
nas de las seis subunidades caracterizadas hasta el momento (a, p, y, 8, e y p), que a su vez son muy variables,
conociéndose al menos 18 tipos diferentes (oti<„ Pi.4, yM, eb 8h y pi,2). Aunque en teoría son posibles múltiples
combinaciones, hasta el momento se han caracterizado 15 subtipos de receptores que muestran diferentes perfi
les farmacológicos.
El GABA propiamente dicho se enlaza a una subunidad p, aunque su acción sólo se expresa en presencia
de subunidades a. Cuando se activan los receptores GABAa postsinápticos, se produce un influjo de iones Cl
y, en consecuencia, la hiperpolarización de la membrana celular, con la consiguiente inhibición de la sensibili
dad de la neurona a la excitación (véase el Capítulo 12).
Figura 15.1. Lugares de unión de distintos fármacos al receptor GABAa.
Los receptores GABAa se bloquean por el metilcloruro de bicuculina (BMC, bicuculline methochloride)
y por SR 95531. mientras que se activan por la isoguvacina, TH1P (tetrahidroisoxazolo-3-piridinol) o IAA (imi
dazole acetic acid). Los receptores GABAb se bloquean por /f-faclofeno, saclofeno, 2-OH-saclofeno y por los
ácidos fosfínicos CGP-35348 y CGP-55845, que son capaces de atravesar la barrera hematoencefálica. En prin
cipio. la administración de antagonistas GABAb debería estimular la liberación de NA, DA y 5-HT, y podría te
ner interés en ciertos procesos psiquiátricos. Los receptores GABAb se activan por el X-baclofeno y el R-3-OH-
GABA(Fig. 15.2).
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (Ill) 423
Receptor GABA-B
CGP-55845
Figura 15.2. Antagonistas y agonistas representativos de los receptores GABA

* y GABA8.
Es interesante observar que estos dos últimos compuestos, aunque poseen la configuración R, sitúan los
grupos hidroxilo y p-clorofenilo en lugares opuestos, por lo que deben interactuar con diferentes subestructuras
del receptor. Si se comparan las estructuras del agonista GABA
* S-dihidromuscimol (véase la Fig. 15.3) y el
agonista GABAa /?-3-OH-GABA, puede deducirse que ambos receptores presentan estereoselectividad opues
ta. También es interesante que la sustitución de un grupo carboxilo en el /?-baclofeno por un grupo fosfónico en
el /?-faclofeno signifique el cambio de una actividad agonista a una antagonista. El /?-baclofeno potencia, ade
más, la liberación de GABA (acción agonista indirecta), tiene un efecto analgésico no opiáceo y se emplea en
terapéutica como relajante muscular en ciertos tipos de espasticidad.
OH OH OH
Muscimol Tiomuscimol
DHM (S)-Dihidn>muscimol
GABAa Binding (nM) 30 6 20 5
Isoguvacina
THIP Análogo de THIP
GABAa Binding (nM) 30 130 42.000 >100.000
F igura 15.3. Afinidades in vitro de distintos agonistas del receptor GABAA(se indican con flechas
algunos grados de libertad).
2.1. Análogos del GABA
Muchos agonistas del receptor GABAa son anticonvulsivos, antidepresivos y analgésicos, ya que el GABA
parece estar implicado en el sueño, la secreción hormonal, las funciones cardiovasculares y la analgesia no
mediada por neuronas sensibles a los opiáceos. El muscimol, un alucinógeno aislado de Amanita muscaria, el
tiomuscimol y el dihidromuscimol (DHM, Fig. I5.3) son agonistas muy potentes de los receptores GABAa, lo
que demuestra que los 3-hidroxiderivados de los sistemas heterocíclicos de isoxazol, isoxazolina e isotiazol
son aquí bioisósteros del grupo carboxilo. ya que permiten la deslocalización de la carga negativa (véase el
Capítulo 4). Aunque interactúan con el receptor más eficazmente que el GABA, su actividad in vivo es menor,
debido a que su afinidad por la enzima GABA transaminasa (GABA-T, véase el Capítulo 11) también es ma
yor, como muestran los valores menores de Km. El anillo de 3-hidroxiisotiazol del agonista GABAa THIP
(Fig. 15.3), también puede considerarse bioisóstero del grupo carboxilo presente en la isoguvacina. Se meta-
boliza in vivo lentamente, y penetra eficazmente a través de la barrera hematoencefálica. Sin embargo, a pesar
de que tiene efectos anticonvulsivos en modelos animales, no muestra efectos antiepilépticos potentes, debido
quizás a que en el ser humano los receptores GABAa se desensibilizan a este fármaco. Es interesante como
analgésico dental.
Aunque los análogos del GABA que se están comentando se representan en forma no ionizada, lo cierto
es que la gran mayoría de sus moléculas existen en solución en forma ionizada (Fig. 15.4). La relación entre las
formas ionizadas/no ionizadas (I/NI) depende de la diferencia entre los dos valores de pK. que presentan el gru
po amino y el grupo carboxílico (u otros grupos ácidos). En el caso de la isoguvacina disuelta en agua, esta rela
ción es de. aproximadamente, 20.000. Sus valores de pK, (3.6 y 9.8) son comparables a los del GABA (4,0 y
10,7). Éste no penetra eficazmente en el SNC. ya que su porcentaje de forma no ionizada es muy pequeño. Por
ello, se han diseñado análogos del GABA con ambos valores de pK„ más próximos para su uso como anticon
vulsivos. El THIP, por ejemplo, tiene valores de pKa de 4,4 y 8.5. En consecuencia, su relación I/NI es menor,
lo que permite su paso a través de la barrera hematoencefálica.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA <HI> 425
Figura 15.4. Formas ionizadas y no ionizadas de GABA. isoguvacina y TH1P.
Ciertos compuestos, como el /f-baclofeno, atraviesan dicha barrera gracias a la lipofilia de determinados
agolpamientos, como el p-clorofenilo, más que a la relación entre formas ionizadas y no ionizadas. También se han
diseñado profármacos más lipófilos. como el pivaloiloximeliléster de la isoguvacina. indicado en la Figura 15.5.
Un agonista del GABA muy estudiado, que se ha introducido recientemente en terapéutica como anticonvulsivo,
es la progabida. Tiene una estructura de GABA-amida, en la que el grupo amino básico se encuentra como imina
de una benzofenona. Su lipofilia le proporciona una buena absorción intestinal y acceso al SNC. Tanto el metabo
lite de progabida con la función ácida libre como su metabolite final (GABA), activan al receptor GABA
*.
Ácido de progabida
(agonista GABAa)
Figura 15.5. Profánnacos de agonistas del receptor GABAa.

Dado que todos los antagonistas GABAa son agentes convulsivos, sus opciones terapéuticas podrían pa
recer improbables. Sin embargo, los agonistas GABAa agravan los síntomas de ciertas enfermedades neurológi-
cas, por lo que un antagonista podría ser beneficioso. En este sentido, parecen tener interés los agonistas GA-
BAa parciales, como cl 4-PIOL [5-(4-piperidil)-3-isoxazol], y los isósteros indicados en la Figura 15.6.
4-P1OL
Figura 15.6. Agonistas parciales del receptor GABAa.
2.2. Benzodlazepinas
Las benzodiazepinas (BZD) son fármacos ansiolíticos, hipnóticos y relajantes musculares, que se incluyen toda
vía entre los más utilizados en el mundo occidental. Para ilustrar de una forma real su evolución hacia sustancias
de acción más específica, seria conveniente seguir su trayectoria histórica a partir de los métodos clásicos de di
seño hasta el modelado molecular complementado con los estudios de distribución de caigas. El interés terapéu
tico del clordiazepóxido y su novedad estructural, permitieron su rápida introducción en terapéutica en I960, ba
jo el nombre comercial de Librium’" (véase el Capítulo 2). Sin embargo, este fármaco presenta una serie de
defectos, entre ellos un sabor amargo y una escasa estabilidad química debido a su fácil hidrólisis e higroscopici-
dad, lo que motivó la búsqueda de análogos. Pronto se observó que el producto de hidrólisis en el carbono 2 (re
acción que supone transformar una amidina en amida) tiene una actividad equivalente al clordiazepóxido, y que
el grupo /V-óxido no era imprescindible, surgiendo así la estructura fundamental de las 1,4-benzodiazepinas, que
suele incorporar un cloro en posición 7 y un fenilo en posición 5. De ella se han derivado más de 3.000 análogos.
Las relaciones estructura-actividad más importantes en este grupo de compuestos pueden resumirse:
1) Anillo bencénico fusionado

— Puede sustituirse por tiofeno, como en el clotiazepam (Fig. 15.7).
— Los sustituyentes en la posición 7 deben ser aceptores de electrones, aunque no son necesarios para la
unión a los receptores. Entre ellos, los sustituyentes nitro, como el nitrazepam y el clonazepam, puede
potenciar actividades hipnóticas y anticonvulsivas.
— Las sustituciones en otras posiciones del anillo bencénico dan resultados negativos.
2) Anillo de 1,4-diazepina
— Es importante la función lactámica, ya que el medazepam, por ejemplo, es un profármaco que necesi
ta activarse in vivo.
— La alquilación en I, como ocurre en el diazepam, o Valium®, y en el prazepam, aumenta la Iipofilia y
la actividad. Se han introducido sustituyentes dietilaminoetilo como en el flurazepam, y compuestos
de condensación por la cara a con un anillo de imidazol o triazol. Resultan así estructuras muy acti
vas, como el midazolam, el alprazolam y el triazolam.
— Las 3-hidroxibenzodiazepinas son metabolites activos, por lo que la hidroxilación en la posición 3 se
aplica al diseño de sustancias de rápida eliminación útiles como hipnóticos, como el oxazepam, el lo
razepam y el lormetazepam.
3) Anillo bencénico en la posición 5
— Puede sustituirse por l-ciclohexenilo, como en el tetrazepam, o 2-piridilo. como en el bromazepam.
— La halogenación en 2' favorece una conformación y lipofilia adecuadas para una mejor actividad bio
lógica, por lo que se encuentra en muchos de los fármacos citados.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (III) 427
Estructura fundamental
R=H Nitrazepam Diazepam

Medazepam R = CH
R = Cl Clonazepam
R=H Alprazolam
R = Cl Triazolam
Bromazepam
R1 = R3 = H, Oxazepam
R1 = H, R3 = Cl. lorazepam
Rl = CH3; R2 = Cl. Lormetazepam
Figura 15.7. Estructura de las benzodiazepinas y de análogos sencillos.

Los derivados de tipo hemiaminal que tienen un ciclo fusionado por la cara d del sistema, como el keta
zolam y el oxazolam (Fig. 15.8), son profármacos que se transforman metabólicamente en benzodiazepinas clá
sicas. Finalmente, la variación de las posiciones de los átomos de nitrógeno en 1,4 sólo ha conducido a deriva
dos activos en el caso de las 1,5-benzodiazepinas como el clobazam.
Ketazolam
Figura 15.8. Ketazolam, oxazolam y clobazam.
Distintos estudios del sistema de 1,4-benzodiazepina han demostrado que. de las dos posibles conforma
ciones (Fig. 15.9), sólo la conformación A es activa. Esto se ha demostrado utilizando 3-metil-derivados que po
seen un centro estereogénico. Ambos enantiómeros tienden a disponer el alquilo en C-3 en la posición ecuato
rial. El enantiómero S es un modelo de la conformación A y es activo, mientras que el enantiómero R, modelo
de la conformación B. no lo es.
R = H. CH,
Figura 15.9. Conformación del anillo heptagonal de 1,4-benzodiazcpinas.
Las primeras benzodiazepinas (BZD) desarrolladas en los años sesenta se utilizaron como fármacos de
acción tranquilizante y ansiolítica, relegando a los derivados del ácido barbitúrico. Actualmente, están comer
cializadas varias decenas para el tratamiento de la ansiedad generalizada, las crisis de pánico, la depresión, al
gunas formas de epilepsia, los trastornos del sueño, los espasmos musculares y como anestésicos. El flumazenil
(Fig. 15.10) es un antagonista que se comercializó en 1989 y que se emplea en las sobredosis de agonistas BZD.
En general, no están exentas de efectos secundarios, como la producción de fatiga, de interacciones adversas
con el etanol y, fundamentalmente, de dependencia física.
Figura 15.10. Antagonistas de las BZD. Flumazenil.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (ITI) 429
R = i-Pr Abccamilo
R = El ZK 93423
Imidazopiridinas
R = R । = CHj Zolpidem (hipnótico)

R = n-Pr; R| = Cl Alpidem
Triazolopiridazinas
(antiepiléptico)
Piridobenzimidazoles
X = 2F; R = CH3
X = 2F; R = CH2CN
X = 3F; R = 3-tieniletil
Figura 15.11. Estructuras no benzodiazepínicas que se enlazan al lugar BZD del receptor GABAa.
El receptor GABAa/BDZ regula numerosas funciones necrológicas: convulsiones, ansiedad, sueño, me
moria y procesos de aprendizaje. Estudios de mutagénesis han demostrado que, en general, las BZD se enlazan
a determinados aminoácidos de determinadas subunidades. Por ejemplo, en la subunidad ot|, estos aminoácidos
son: Hislnl, Thru,,. Glylw y Valjn. Probablemente, la activación de los receptores GABAa por las BZD es un
proceso de varios pasos en el que éstas se unen primero a su lugar de enlace, produciendo un cambio conforma-
cional que desenmascara lugares de unión del GABA y, al enlazarse éste, se induce el cambio conformacional
que activa al receptor. Es decir, la actividad ansiolítica de las BZD se debe a su capacidad para regular la activi
dad fisiológica del GABA en los receptores GABAa. Actualmente, se investiga cuál es el tipo o subtipo de re
ceptor que interviene en las acciones farmacológicas deseables, y cuáles son responsables de los efectos secun
darios. Así, por ejemplo, los subtipos (XiPj'Yj y ct-pff. están implicados en la ansiólisis, que es su principal
aplicación terapéutica (la ansiedad generalizada es un trastorno con múltiples manifestaciones que puede llegar
a incapacitar al individuo tanto físicamente como mentalmente).
Curiosamente, no se conocen ligandos endógenos para el lugar de unión de BZD. como demuestra el he
cho de que los antagonistas no producen aparentemente ningún efecto. Sin embargo, se conocen otros com
puestos capaces de enlazarse a este lugar. Su estructura suele ser plana y estar formada por dos o tres anillos
heterocíclicos. Entre ellos, hay que mencionar (véase la Fig. 15.11): imidazobenzodiazepinas (FG 8205 y bre-
tazenilo), p-carbolinas (abecamilo y ZK 93423), imidazopiridinas (alpidem y zolpidem), pirazoloquinolinas
(CGS 8216 y CGS 9896), imidazoquinoxalinas (panadiplona), triazolopirimidinas (CL 218872), pirrolopirazi-
nas (zopiclona), arenoquinolizinas (Ro 19-5663, Ro 19-5686 y Ro 41-3696), piridobencimidazoles y pirido-
diindoles, siendo cada día más abundantes los tipos de estructuras que se descubren con capacidad para enla
zarse al lugar BZD.
Agonista inverso parcial
Antagonistas
Figura 15.12. Ejemplos de agonistas inversos, antagonistas, agonistas parciales y agonistas inversos parciales
del lugar BZD.
Los compuestos que se enlazan al lugar BZD pueden ejercer dos efectos reguladores: reguladores positi
vos, o agonistas, que reducen la concentración de GABA que se requiere para activar a su receptor, y regula
dores negativos o agonistas inversos, que se caracterizan porque en su presencia es necesario un aumento en la
concentración de GABA para activar a su receptor. Por otra parte, los antagonistas, son ligandos que no afectan
a la actividad del GABA, y sólo evitan que los agonistas o agonistas inversos BZD modulen dicha actividad.
Las benzodiazepinas clásicas, como el diazepam y sus análogos, algunas p-carbolinas. como el abecamilo y
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (111) 431
otras estructuras, son agonistas. Compuestos como Ro 15-4513 o BCCE (Fig. 15.12) son agonistas inversos,
mientras que BCCT y flumazenil son antagonistas. Finalmente, se conocen compuestos con actividad agonista
parcial (como 6-PBC) y agonista inverso parcial (como 3-EBC). Los agonistas inversos podrían tener alguna
utilidad en la enfermedad de Alzheimer.
Se ha propuesto un modelo que permite explicar las interacciones de agonistas y agonistas
inversos/antagonistas con distintos subsitios del receptor, tanto para estructuras derivadas de las benzodia
zepinas como para otros compuestos.
Según éste, hay cuatro lugares fundamentales de fijación, Ht, IL, A? y L,. y tres regiones lipófilas adi
cionales. L2, L, y Lo, (sitio lipófilo insensible al diazepam) (Fig. 15.13). Los sitios H y A son donadores y
aceptores de hidrógeno, respectivamente; los L son lugares de interacción lipófila y los S son regiones de
repulsión estérica.
Las interacciones con los sitios H, y H; son necesarias para la unión de agonistas, mientras que la in
teracción con el subsitio A- es necesaria para la acción agonista inversa.
Figura 15.13. Interacciones del receptor de benzodiazepinas con agonistas y agonistas inversos/antagonistas. a) Ejemplo
de interacción de un agonista con estructura de benzodiazepina. b) Ejemplo de interacción con un agonista inverso (Ro-15-
4513, X = Nj) y con un antagonista (flumazenil. X = F).
2.3. Sitio de fijación de estructuras esteroideas al receptor GABAn
Se ha observado que muchos csteroides, como la progesterona y algunos glucocorlicoidcs. tienen acciones en el
SNC a través de su interacción con un lugar de enlace situado en el receptor GABA
*
. que no es el mismo que el
de los barbitúricos, pero que produce efectos muy similares (Fig. 15.1).
Al igual que ocurre con las BZD. la regulación del receptor GABAa por estos esferoides puede ser posi
tiva (agonistas totales o parciales), negativa (agonistas inversos) o antagonista.
Mediante la manipulación de la estructura de la progesterona. el esferoide natural que muestra esta capa
cidad, se han preparado fármacos potencialmente útiles como anticonvulsivos, ansiolíticos. sedantes e hipnóti
cos. Los compuestos activos poseen un grupo 3a-OH, que parece esencial para esta unión, y un grupo carboni
ta en posición 20.
Así, la alfaxalona y la minaxolona (véase el capítulo 12 y la Fig. 15.14), se emplean como anéstesicos ge
nerales por vía intravenosa. El epímero en la posición 3 de alfaxolona (betaxolona) es inactivo, y su 16,17-
dideshidroderivado es antagonista.
Figura 15.14. Estructuras esteroideas que se fijan al receptor del GABAa.
Algunos derivados que poseen, además, un sustituyeme en 30 con un grupo aceptor de hidrógeno separa
do a una determinada distancia del anillo A por un espaciador, parecen ser potentes anticonvulsivos y han per
mitido proponer un modelo de enlace de los esteroides al receptor GABAa como el que se representa en la Fi
gura 15.15.
Donador de puente
de hidrógeno
Tolerancia
de volumen
apolar
Accptor de puente
de hidrógeno
Figura 15.15. Modelo de enlace de los esferoides al receptor GABAa.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (lll> 433
2.4. Sitios de fijación de ácidos barbitúricos al receptor GABAa
Tras el descubrimiento de su actividad hipnótica en 1903, por Fischer y von Mehring, los ácidos barbitúricos
fueron objeto de los primeros estudios de relación estructura química-actividad biológica, y dieron origen a los
fármacos anticonvulsivos. Posteriormente, debido a su toxicidad y dependencia, fueron casi totalmente despla
zados por las benzodiazepinas. Sus descubridores partieron de la base de que la actividad hipnótica que los ca
racteriza estaba relacionada con la existencia de un átomo de carbono cuaternario, ya que esta circunstancia
estructural estaba presente en otros dos hipnóticos conocidos entonces: el sulfonal y el hidrato de amileno.
Apoyaba a esta teoría el hecho de que sólo los ácidos barbitúricos 5.5-disustituidos son activos, careciendo de
actividad los monosustituidos y los no sustituidos en dicha posición (Fig. 15.16). Sin embargo, la actividad no
depende de la presencia de un carbono cuaternario, sino de la influencia que tiene la sustitución en la posición
5 en el pKa de estas sustancias. Para que un ácido barbitúrico tenga buena actividad hipnótica, debe ser un áci
do débil, que a pH fisiológico posea un coeficiente de reparto que permita su paso a través de la membrana he-
matoencefálica. Los derivados 5-monosustituidos y no sustituidos, tienen una elevada acidez (pKa = 4,5), por
lo que están disociados totalmente a pH fisiológico. Por el contrario, los 5,5-disustituidos tienen valores de
pKa que oscilan entre 7.1 y 8,1 (al impedirse la tautomería entre las posiciones 4 y 5) y, por tanto, son más li
pófilos.
Figura 15.16. a) Equilibrios de tautomería y disociación de los ácidos barbitúricos. b) Variaciones estructurales
en el anillo heterocíclico que aumentan la lipofilia.
En la lipofilia influyen, además, la naturaleza de los sustituyentes en las posiciones 1 ó 5, así como la sus
titución de un grupo carbonilo por uno de tiocarbonilo. Los sustituyentes en la posición 5 influyen también en la
semivida de los barbitúricos, ya que la velocidad de metabolización varía con su estructura. Si los sustituyentes
son demasiado lipófilos. las moléculas se fijan rápidamente a los tejidos lipidíeos, con la consiguiente pérdida
de actividad. Los ácidos barbitúricos de semivida corta y ultracorta poseen sustituyentes insaturados o haloge-
nados. mientras que los sustituyentes alifáticos saturados y los aromáticos dan lugar a ácidos barbitúricos de se
mivida larga (Fig. 15.17).
Estructura
Nombre R1 R2 R3 X Acción
Barbilal Et Et H 0 Prolongada
Fenobarbital Et C<,H5 H 0 Prolongada
Ciclobarbital Et H o Intermedia
Amobarbital Et -(CH2)í-CH(CHj)j H 0 Intermedia
-CH2
Ciclopentobarbital H 0 Corta
CH
II
CH2
CH, CH, o Corta

Hexobarbital —
Tiopental Et —CH(CH2)2CH, H s Ultracorta

CH,
Tioamilal -ch2-ch=ch2 -CH(CH2)2CH» H s Ultracorta
CH,
Metohexital -ch2-ch=ch2 -CH-CsC-CHj-CH, CH, o Ultracorta

CH,
Figura 15.17. Ejemplos de ácidos barbitúricos.
El lugar de unión de los barbitúricos dentro del receptor GABAa parece estar localizado en el propio ca
nal de cloruro. La especificidad de unión con sus lugares de fijación se pone de manifiesto en el hecho de que
los dos enantiómeros de los ácidos barbitúricos quirales muestran distinta actividad biológica. Como ya se ha
comentado, estos fármacos han sido relegados totalmente como hipnóticos y sedantes, limitándose su uso al
Iratamiento antiepiléptico (fenobarbital y tiopental), la anestesia quirúrgica (tiopental) y con fines diagnósticos
(metohexital y amobarbital).
Con el descubrimiento de la acción anticonvulsiva del fenobarbital. en 1912, se inició el desarrollo de
los fármacos anticonvulsivos. Ya se ha comentado (véase el Capítulo 12) que los clásicos anticonvulsivos con
estructura de hidantoína. oxazolidinadiona y succinimida surgieron como análogos de los ácidos barbitúri
cos.
3. RECEPTORES DE GLICINA
Los receptores de glicina constituyen otro tipo de canales de Cf que están formados por cinco subunidades pro
teicas muy variables. Su estudio ha sido posible gracias a la existencia de un aniagonista. el alcaloide estricnina
(aislado de la semilla de Strychnos nux vomica'). La glicina actúa como aminoácido inhibidor, fundamentalmen-
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (HI) 435
te en la médula y el bulbo raquídeo. Un bloqueo de sus receptores o un déficit de glicina produce convulsiones
y, por tanto, sus agonistas son potencialmente útiles como anticonvulsivos. Entre ellos, se encuentran la p-alani-
na y el ácido 3-aminopirrolidina-3-carboxílico (Fig. 15.18).
H,N-CH,—CH,-COOH
P-alanina Ácido 3-aniinopirn>lidina-
3-carbox íl ico
Estricnina
Figura 15.18. Agonistas y antagonistas de los receptores de glicina.
4. AMINOÁCIDOS EXCITADORES
El ácido (S)-glutámico (Glu), además de ser el precursor del GABA, es un neurotransmisor excitador que está
implicado en la comunicación de la mayor parte de las sinapsis excitadoras del encéfalo. Una hiperactividad de
estos sistemas puede ser la causa de procesos neurodegenerativos complejos causantes de enfermedades tales
como la epilepsia, la enfermedad de Hungtinton y la de Alzheimer. Sus antagonistas son interesantes como anti
convulsivos, ansiolíticos, relajantes musculares y agentes neuroprotectores. y sus agonistas podrían ser útiles en
problemas de aprendizaje y memoria.
Figura 15.19. Receptores de aminoácidos excitadores.

4.1. Receptores de aminoácidos excitadores
Se conocen varios receptores de aminoácidos excitadores (todos ellos activados por Glu), formados por diferen
tes subunidades proteicas que se representan en la Figura 15.19 como un círculo. Se subdividen en cuatro cla
ses. Tres de ellas son receptores ionotrópicos (¡GluRS) y reciben su nombre en función de su agonista selec
tivo: NMDA (del ácido /V-metil-D-aspártico), AMPA [del ácido 2-amino-3(3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolil)-
propiónico] y Kain (del ácido kaínico).
Son. en realidad, un tipo de canales iónicos mediados por un ligando. La cuarta clase está formada por
un grupo muy heterogéneo de receptores acoplados a proteínas G. que se llaman receptores metabotrópicos
(mGluRS). A éstos se enlazan diversos aminoácidos, como ACPD o L-AP4.
Los receptores NMDA (Fig. 15.20) constituyen un canal por el que fluyen iones Na
*. K‘ y Ca2*.
La glicina es un coagonista del receptor NMDA, ya que en estos receptores tienen que estar ocupados, si
multáneamente, por un agonista los lugares de la glicina y NMDA para que se produzca la respuesta.
Lugar de unión
del Mg24
Lugar de unión del Zn2+—
Lugar de unión de la PCP-
Agonistas
NMDA Trans-ACBD
Antagonistas
competitivos
Antagonistas
no competitivos
PCP MK-801
Fenciclidina Dizocilpina Ketamina
Figura 15.20. Receptor NMDA y estructuras de algunos agonistas y antagonistas competitivos y no competitivos.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA till) 437
Los receptores NMDA actúan como un sistema de amplificación, y se ponen en funcionamiento sólo
cuando la actividad de las neuronas alcanza un cierto nivel. En un potencial de reposo, están bloqueados por
Mg!*. que probablemente se une en el propio canal.
Cuando la neurona se despolariza parcialmente por activación de otros receptores Glu ionotrópicos.
termina el bloqueo del Mg?' y se activa el receptor NMDA. para provocar una despolarización mayor. Los
ácidos /V-metil-D-aspártico. (/?.S)-2-amino-2-(3-hidroxi-5-metil-4-isoxazolil)-acético (abreviado, en inglés.
AMAA) y irons-1 -aminociclobutano-1,3-dicarboxílico (rran.v-ACBD). son agonistas muy potentes de este
receptor.
También se conocen antagonistas potentes, la mayor parte de los cuales son análogos del ácido (/?)-2-
amino-5-fosfonovalérico (n-AP5) o del ácido (R)-4-(3-fosfonopropil)-2-piperazinilcarboxílico (o-CPP).
Este último se estudió como anticonvulsivo, pero tuvo que retirarse debido a sus importantes efectos secun
darios.
Además de lugares de unión para el Zn2* y las poliaminas, también se ha descubierto en estos recep
tores un lugar de unión de los antagonistas no competitivos, que se denomina de fenciclidina (PCP),
La acción antagonista de la PCP, la dizocilpina (MK-801) y otros antagonistas no competitivos del re
ceptor NMDA requiere que el canal esté abierto (Fig. 15.24).
Estos fármacos pueden tener interés como neuroprotectores antiepilépticos por su capacidad para in
hibir la degeneración neuronal provocada por falta de riego o de oxígeno. Desgraciadamente, muchos han
mostrado efectos psicomiméticos que impiden su aplicación terapéutica.
Los receptores AMPA y Kain son difíciles de separar, desde el punto de vista farmacológico, por lo que a
veces se denominan conjuntamente receptores no-NMDA, en oposición a los NMDA.
Los receptores AMPA se denominaron primero receptores Quis (del ácido natural denominado quiscuáli-
co o Quis), pero después de descubrió que este ácido no era un agonista selectivo. El aniracetam es un agonista
alostérico del receptor AMPA que se comercializa como fármaco paliativo en procesos que afectan a la memo
ria, el aprendizaje y la sociabilidad.
El dietil éster del ácido glutámico (GDEE) es un antagonista de escasa potencia, mientras que la 6-ciano-7-
nitroquinoxalina-2.3-diona (CNQX) es más potente, pero también actúa sobre los receptores Kain. Los compues
tos (S)-AMOA y NBQX (un derivado de CNQX) son antagonistas más selectivos (Fig. 15.21). El compuesto
NBQX se ha estudiado como anticonvulsivo y neuroprotector, y el CNQX ha mostrado actividad antiinflamatoria
en ciertos procesos.
Agonistas
HOOC
)—\ 0H
HjN N-^
Ácido quiscuálico (no selectivo) Aniracetam

(agonista alostérico)
Antagonistas competitivos
Figura 15.21. Agonistas y antagonistas competitivos de los receptores Quis y (S)-AMPA.

438 INTRODUCCIÓN A I.A QUÍMICA FARMACÉUTICA
Agonistas
Trans-MCG
Antagonistas
NS-102
AMNH
Figura 15.22. Estructuras de algunos agonistas y antagonistas del receptor Kain.
La mayor parte de los compuestos mencionados poseen, como el ácido glutámico. un centro estereogéni-
co. En el caso de los agonistas AMPA, las formas S son las activas, mientras que en los agonistas NMDA. son
las formas /?. En ciertos casos, un enantiómero es agonista y el otro es antagonista.
La mayor parte de los agonistas del receptor Kain. denominados kainoides, son compuestos naturales co
mo el propio ácido kaínico. Entre ellos se encuentran los ácidos domoico y acromélico. y el análogo sintético
ciclopropánico rrans-MCG (Fig. 15.22). También se conocen algunos antagonistas de Kain. pero tienen poca
selectividad, como cl CNQX (equipolente con el receptor AMPA). Algunos, como el AMNH y el NS-102, son
más selectivos.
Los receptores metabotrópicos, como otros receptores acoplados a proteínas G, poseen siete dominios
transmembrana, manifiestan sus respuestas más lentamente que los receptores ionotrópicos, y pueden ser post-
sinápticos o presinápticos. En un principio, se subdividieron en diferentes clases, según fueran activados por
agonistas, como rrans-ACPD ((1S,3R)-ACPD. Fig. 12.23], Quis y ácido iboténico (Ibo). o por L-AP4. Actual
mente. se caracterizan en función de las diferentes proteínas G acopladas a ellos y de los sistemas de segundos
mensajeros que se producen en su activación. Algunos receptores metobotrópicos están acoplados al metabolis
mo del fosfoinositol y a la movilización del Ca" intracelular (mGluRI y mGluR5) (Fig. 15.24), mientras que
otros están acoplados negativamente a la formación de AMPc (mGluR2-4, mGIuRó y mGluR7). Los receptores
metabotrópicos pueden también afectar a canales iónicos. Son los receptores más interesantes desde el punto de
vista del posible desarrollo de fármacos, ya que están implicados en la epilepsia, la isquemia, el dolor crónico y
procesos degenerativos lentos (enfermedad de Parkinson, de Alzheimer, etc.)
El ácido iboténico es un análogo de Glu de conformación restringida en el que la porción de 3-hidroxiiso-
xazol es bioisóstera del grupo carboxílico. Se encuentra en Amanita muscaria y es también agonista de los re
ceptores NMDA. Se ha utilizado como prototipo para el diseño de análogos químicamente más estables y más
selectivos. Muchos grupos de trabajo están desarrollando ligandos selectivos de los receptores metabotrópicos.
que permitirán conocer sus funciones fisiológicas y encontrar nuevos agentes terapéuticos para el tratamiento
de enfermedades del SNC. Los ligandos de los receptores metabotrópicos mimetizan al trans-ACPD y al ácido
glutámico en una conformación extendida, mientras que los ligandos de los receptores ionotrópicos mimetizan
a confórmeros de Glu más plegados. Varios fosfonatos, como L-AP3 y L-AP4. se han identificado como antago
nistas. Las fenilglicinas y sus análogos de conformación restringida, suelen ser antagonistas ntGluR, pero algu
nos compuestos son agonistas.
Agonistas
HOOC
..•’COOH
(ISJR)-ACPD
Trans-ACPD
Ibo
(Ácido iboten ico)
Antagonistas
HOOC /—PO,H’
H,N
I.-AP3 I.-AP4
MCPG
Fenilglicina de conformación
restringida
Figura 15.23. Ejemplos de agonistas y antagonistas de receptores metabotrópicos.
5. RECEPTORES DE PÉPTIDOS
Se han descrito más de 100 péptidos, muchos de los cuales se encuentran en el SNC. que actúan como ncuro-
transmisores, neuromoduladores y hormonas de crecimiento. Entre ellos, se encuentran: angiotensinas. bombe-
sina. bradicinina. calcitonina. colecistocinina, P-endorfina, l.eu-encefalina. Met-encefalina. endotelina, gastri-
na, neurocininas. neuropéptido Y, oxitocina, somatostatina, sustancia P. hormona liberadora de tirotropina.
péptido intestinal vasoactivo, vasopresina y glucagón. Ya se ha comentado, en el caso de los inhibidores de en
zimas con actividad de peptidasa o proteasa (véanse los Capítulos 9 y II). que las estructuras peptídicas son po
co apropiadas como fármacos por su difícil distribución y su semivida corta. Por ello, se han diseñado análogos
que mantienen la capacidad para interactuar con los receptores de péptidos endógenos, pero que no son propia
mente péptidos. Estos compuestos se denominan peptoides, pscudopéptidos o peptidomiméticos (veánse los
Capítulos 4 y 8). Su éxito depende de su eficacia, que se basa en su biodisponibilidad cuando se administran por
vía oral, y de la viabilidad de su síntesis a escala industrial. Veremos sólo algunos ejemplos de lo que actual
mente es un campo de investigación en continua expansión.
5.1. Receptores opioides
Los péptidos neurotransmisores más conocidos son las encefalinas y las endorfmas. que actúan sobre recep
tores denominados opioides porque producen, al interactuar con ellos, los mismos efectos que los analgésicos
derivados del opio. El opio, que es el látex de la dormidera sin madurar, se ha utilizado desde la antigüedad pa
ra el tratamiento del dolor. Su alcaloide principal, la morfina, es el prototipo de analgésico de acción central
desde su aislamiento y determinación estructural, habiendo servido de modelo para el diseño de muchos aná
logos.
Figura 15.24. Algunos efectos de los ligandos de receptores de aminoácidos excitadores.
La acción específica de la morfina sobre el SNC indujo a la búsqueda de sus receptores y de sustancias
«opioides endógenas». Estos estudios demostraron la existencia de receptores opioides en 1973. En 1975. se
aislaron los pentapéptidos endógenos Leu-encefalina y Met-cnccfalina. que actúan en el SNC y el tracto gas
trointestinal del mismo modo que la morfina.
En 1976. se describieron tres receptores opioides, p, Ky o, cuyos nombres derivaban de los diferentes li
gandos que se unen a ellos: morfina, ketazocina y IV-alilnormetazocina. respectivamente. A éstos se añadió el
receptor 8. específico de las encefalinas. Actualmente, el receptor a ha dejado de ser considerado un opioide. ya
que no se antagoniza por la naloxona. Este receptor se relaciona actualmente con la acción de ciertos alucinóge-
nos como la fcnciclidina y la ketamina (véase la Fig. 15.20).
A su vez. los receptores p se han subdividido en p, (responsables de la analgesia central y raquídea) y p,
(responsable de los efectos secundarios adversos, como la depresión respiratoria), por lo que sería deseable en
contrar agonistas selectivos del primer subtipo. Los receptores k y 6 se han subdividido en tres y dos subtipos,
respectivamente.
Tyr-Gly-Gly-Phc-Lcu-Arg-Arg-¡lc-Arg-Pro-Lys-Leu-Lys-Trp-Asp-Asn-Gln
Dinortina
®
iyr-Gly-Gly-Phc-Lcu
Leu-encefalina
®
Tyr-Gly-Gly-Phe-Mct
Met-encefalina
® ® ®
Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-GIn-Lys-Scr-GIn-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-
@ @ @
A.sn-Ala-lle-lle-Lys-Asn-Ala-Tyr-Lys-Lys-Gly-Gly
Endorñnas Restos de aminoácidos
Figura 15.25. Estructura de péptidos opiodes endógenos.
Todos ellos son receptores transmembrana que se encuentran acoplados a distintas formas de proteínas G
(G„ que inhiben la adenilciclasa, y Go. que actúan directamente sobre canales iónicos). En el caso de los recep
tores p. la interacción con los agonistas se traduce en la apertura de los canales de K
*. mientras que los agonis
tas de los receptores K producen el cierre de los canales de Ca2*. En el primer caso, se produce la hiperpolariza-
ción directa de la membrana, mientras que en el segundo, la disminución de Ca2* intracelular tiene como
consecuencia la disminución de la liberación de neurotransmisores.
Finalmente, en la acción de los agonistas 5 no están implicados los canales iónicos. En este caso, la inhi
bición de la adenilciclasa y cl subsiguiente déficit de AMPc (segundo mensajero) corta la transmisión del men
saje del dolor.
La administración de opioides aumenta primero y disminuye después la liberación de encefalinas, lo que
probablemente evita la analgesia fisiológica completa, que sería fatal habida cuenta del importante papel de
alerta que tiene el dolor.
Los opioides tienen efectos secundarios adversos, como depresión respiratoria, efectos cardiovasculares,
adición y dependencia. Estos últimos pueden explicarse teniendo en cuenta que disminuyen los niveles de
AMPc. por lo que, en su presencia, las células producen mayor cantidad de este mensajero para compensar su
disminución. Si se interrumpe su administración, el organismo se encuentra con unos valores muy altos de
AMPc. a los que se atribuye el llamado «síndrome de abstinencia».
5.1.1. Péptidos opiodes endógenos
Se conocen varios péptidos opiodes endógenos, como la dinorfina o la endorfina (5 (endorfina significa morfina
endógena) y las encefalinas (Fig. I5.25). que poseen diferente especificidad para los distintos receptores.
Tienen una semivida muy corta, ya que son metabolizados por metaloproteasas. especialmente por ence-
falinasas. Los inhibidores de estas enzimas se han diseñado basándose en el conocimiento de otras metalopro-
teínas portadoras de Zn2* y son agonistas indirectos con posible aplicación como analgésicos. La mayor parte de
estos inhibidores, como el ketalorfano y el acetorfano (este último es un profármaco que se utiliza como anti-
diarreico), poseen grupos funcionales capaces de unirse al Zn2* (Fig. 15.26).
La síntesis de análogos peptídicos de encefalinas (peptidomiméticos), para disponer de agonistas de mayor
estabilidad, a ser posible activos por Vía oral, y que no presenten los efectos secundarios adversos de los opioides
análogos a morfina, ha sido y sigue siendo uno de los objetivos en el diseño de este tipo de analgésicos. Las va-
riaciones estructurales representadas en la Figura 15.27 corroboran la estructura del grupo farmacóforo previa
mente propuesto a partir de la morfina y sus análogos. También corroboran que la función amina de este grupo se
enlaza al receptor en su forma protonada, por lo que puede alquilarse o sustituirse por un grupo guanidinio. Por
otra parte, los tres enlaces peptídicos de la porción Tyr-Gly-Gly-Phe del péptido no intervienen en la unión al re
ceptor. ya que los dos primeros pueden sustituirse por otros agolpamientos bioisósteros y el último puede alqui
larse. Hay que recordar aquí que los ¡V-alquilderivados de péptidos. denominados peptoides, son más estables al
ataque por peptidasas. También se observa que el residuo de Met puede modificarse, y que si el grupo carboxilo
terminal se esterifica o se amidifica, se tienen derivados más estables metaból¡cántente porque no pueden actuar
las carboxipeptidasas. Si se alarga la cadena peptídica de las encefalinas, la semejanza con las endorfinas es ma
yor, lo que produce un cambio de selectividad de los receptores 8 o los p. Desgraciadamente, desde el punto de
vista práctico, todos los análogos de las encefalinas han producido efectos secundarios adversos, lo que permite
suponer que si las encefalinas no presentan estos efectos, es gracias a su rápido metabolismo.
Bcstatina
Kctalorfano
(A)
Acetorfano (R = CHjCO), R' = CH,C6H5

(C)
Figura 15.26. Metabolismo de la Leu-cneefalina. Algunos inhibidores de mctaloproteasas útiles como agonistas
opioides indirectos.
También se han encontrado y modificado estructuralmcntc otros péptidos de origen natural que se com
portan como buenos agonistas opioides con alta selectividad hacia los receptores p. como la morficeptina. un
tetrapéptido que es un fragmento de la P-caseína de la leche (Fig. 15.28). Obsérvese que en ellos aparece como
aminoácido N-terminal, al igual que en las encefalinas y las endorfinas. la tirosina. y que los residuos Gly-Gly
se corresponden en estos péptidos con un resto de prolina que impone una restricción a la libre rotación.
5.1.2. Opioides análogos de morfina
La unión de endorfinas y alcaloides opioides a los mismos receptores obliga a buscar analogías estructurales en
tre ambos tipos de compuestos. En la Figura 15.29, se representan la Lcu-encefalina y dos derivados de morfi
na. Uno posee en la posición 6 una cadena peptídica C-terminal análoga a la de Leu-encefalina y el otro los re
siduos 4-8 de la dinorfina A.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA lili) 443
Esencial para
la actividad
Figura 15.27. Variaciones estructuales en la Met-encefalina.
Puede observarse que el grupo farmacóforo es análogo en ambas estructuras, que los residuos Gly-Gly ac
túan en la Leu-encefalina como grupo espaciador entre el farmacóforo y el dipéptido terminal que selecciona el
receptor 8. y que la selección hacia receptores 8 o K en estos derivados de morfina se debe a la naturaleza del
péptido C-terminal. según que sea análogo de Leu-encefalina (Phe-Leu) o de dinorfina (Phe-Leu-Arg-Arg-Ile).
Morflccptina
(3-Casomorfina
Figura 15.28. Otros péptidos naturales agonistas opioides.
A partir de la morfina, se han desarrollado seis tipos de estructuras que han surgido de forma desordena
da. aunque hoy podemos establecer una clara relación entre ellas (Fig. 15.30). La secuencia morfina, morfinano.
benzomorfano, fenilpiperidina y fenilpropilamina corresponde a una variación estructural disyuntiva (véase el
Capítulo 4). pero no responde a su diseño y desarrollo desde el punto de vista histórico, como puede deducirse
de las fechas del descubrimiento de cada uno de los grupos mencionados.
El hallazgo de la actividad analgésica de la meperidina (petidina) permitió reconocer que el sistema de fe
nilpiperidina es el grupo farmacóforo de la morfina.
Las estructuras representadas en la Figura 15.30 tienen ciertas características comunes: un sistema aromá
tico plano unido a un átomo cuaternario (generalmente carbono), un nitrógeno básico y una cadena de dos car
bonos separando el centro cuaternario del nitrógeno básico.
La configuración absoluta del carbono cuaternario (C-13 en la morfina y morfinanos. C-5 en los benzo-
morfanos. C-4 en las ténilpiperidinas y C-3 en las fenilpropilaminas) debe ser equivalente a la configuración S
de dicho carbono en la morfina (los enantiómeros R son inactivos).
Encefalinas
Tyr-Gly-Gly-Phc-Met
Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu
Morfina
CH,
N
Mensaje Espaciador Selección Mensaje Espaciador Selección

(Farmacóforo)
R = Phe-Leu (Selectivo de receptor 8)

R = Phe-Lcu-Arg-Arg-lle-OMc (selectivo de receptor K)
Figura 15.29. Relación estructural entre la Leu-encefalina y los derivados peptidomiméticos de morfina.
En 1954, antes del conocimiento de la multiplicidad de los receptores opioides, se propuso un modelo
de receptor, que aún tiene validez y sigue siendo la base de nuevas propuestas acerca de su topología y de la
acción agonista o antagonista (Fig. 15.31).
Según este modelo, el anillo aromático interactúa por enlaces de van der Waals con el receptor, el hi-
droxilo fenólico lo hace a través de un enlace de hidrógeno, el nitrógeno protonado a pH fisiológico se une a
través de un enlace iónico a un centro aniónico, y el sustituyente sobre el nitrógeno interactúa con otro lugar
lipófilo del receptor.
Si este sustituyente se dispone axial mente respecto al anillo de piperidina, como ocurre en el caso del
metilo, dicha interacción produce una conformación activa en el receptor, y los compuestos son agonistas.
Por el contrario, si el sustituyente en el nitrógeno se dispone ecuatorialmente, caso del alilo o el ciclopropil-
metilo, la interacción con otro lugar complementario del receptor induce en éste una conformación inactiva,
y estos compuestos son antagonistas.
Los derivados que poseen un grupo N-fenetilo son agonistas particularmente activos como consecuen
cia de una interacción hidrófoba adicional en el «lugar agonista».
Los antagonistas de la morfina contrarrestan los efectos farmacológicos de ésta y tienen, en general, ma
yor afinidad por los receptores p, k y 5 que los agonistas. El primer antagonista introducido en terapéutica en
1969, como antídoto en casos de intoxicación con morfina, fue la nalorfina (N-alilnorcodeína). que actualmente
ya no se emplea en terapéutica. A este fármaco le siguieron la naloxona y la naltrexona, que son antagonistas
puros (Fig. 15.32). Las interacciones estéricas del hidroxilo en C-14 con el sustituyeme en el nitrógeno de nalo
xona y naltrexona fuerzan a éste para adoptar una conformación ecuatorial que hace a estos fármacos antago
nistas puros.
Los opioides tienen diversa afinidad por los receptores p, k y 5. Además, muchos de ellos se unen a los
receptores o no opioides, produciendo una acción alucinógena.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (111 I 445
5.9-Dialquilbenzomorfanos
Pentazocina
Murfinanos May y cois. (1969)
Morfina
Modificaciones Levoifano
Grcwc (1946)
Small y cois. (1929)
Fenilptpcridinas Fcmlpropilaminas
Meperidina (petidina) Mctadona
Eislcb y Schaumann (1939) Bix'kmühl y cois. (1949)
R1 JcH "¡? = H
Rl = C3H7. Etorfina
Bentley y Hardy (1972)
Figura 15.30. Estructuras de los seis tipos de analgésicos opioides derivados de la morfina como prototipo.
Sitio de unión
agonista
Figura 15.31. Modelo del receptor opioide.

Buprcnorfina
Nalorfina
Pcntazocina
Buiorfanol
Figura 15.33. Fármacos agonistas-antagonistas y agonistas parciales de receptores opioides específicos.
Los agonistas puros conocidos son preferentemente agonistas p. Se emplean, además, en terapéutica los
agonistas-antagonistas mixtos, como la pentazozina. el buiorfanol, la nalbuftna y la nalorfina (Fig. 15.33), que
tienen una gran actividad como agonistas en los receptores K y escasa actividad agonista, o incluso actividad
antagonista, en los receptores p.
Puesto que la depresión respiratoria y la hipertonía intestinal son efectos indeseables asociados con la ac
tivación de los receptores p. los agonistas que muestren afinidad por los receptores k tienen menos efectos se
cundarios, por lo que sería deseable disponer de agonistas k puros. Sin embargo, algunos agonistas K, como la
espiradolina que veremos más adelante, han dejado de desarrollarse debido a algunos efectos adversos relacio
nados con su afinidad parcial por los receptores G.
Se conocen, además, agonistas parciales de los receptores p, como es el caso de la buprenorfina.
La morfina se encuentra en el látex de Papaver somniferum, junto con otros alcaloides que pueden agru
parse principalmente en dos grupos: los derivados de l-bencilisoquinolina, cuyo principal representante es la
papaverina (Fig. 15.34), y los análogos de morfina. Entre estos últimos se encuentran la codeína. de acción anti
tusígena. la tebaína y la oripavina.
La molécula de la morfina posee cinco centros estereogénicos de configuración 5Z?, 6S, 9/?. I3S. 14/?. De
éstos, la configuración más trascendental para la actividad farmacológica es la configuración en C-13, que per
mite una disposición en forma de T, en la que los anillos A. B y E ocupan el plano vertical, y los anillos C y D.
con una disposición trans, el plano horizontal. El anillo C existe en una conformación de bote.
Las variaciones estructurales más clásicas de la morfina, dejando aparte el cambio de actividad que supo
ne la modificación del grupo metilo sobre el nitrógeno anteriormente mencionado, se representan en la Figu
ra 15.35. La codeína y la folcodina son éteres en el hidroxilo fenólico y poseen menor actividad analgésica, uti
lizándose fundamentalmente como antitusígenos. La eterificación o esterificación del hidroxilo en la posición 6
aumenta en cambio la actividad analgésica. Así. la heterocodeína es 60 veces más activa que la morfina. La fun
ción alcohólica en C-6 puede también oxidarse a cetona o reducirse. El 6-oxoderivado. llamado morfinona, es
4-5 veces más activo que la morfina. El diacetilderivado, denominado diamorfina (heroína), es un analgésico
muy potente al ser más lipófilo, pero debido a su acción altamente adjetiva no se utiliza en terapéutica. El doble
enlace no es esencial para la actividad, y su hidrogenación origina compuestos más activos, pero de semivida
más corla.
R = H, Oripavina
Papaverina R = CH3, Tebaína
Figura 15.34. Alcaloides de Papaver somniferuni más importantes.
El sistema de dobles enlaces de la tebaína permite reacciones de Diels-Alder con dienófilos como la me-
tilvinilcetona (Fig. 15.36). Por adición de organometálicos a las cetonas de seis ciclos así obtenidas, se preparan
las oripavinas. Su estructura permite la unión a lugares adicionales de los receptores, por lo que estos compues
tos tienen una actividad analgésica hasta 11.000 veces mayor que la morfina. La etorfina. que es 5.000 veces
más activa que la morfina, se emplea en veterinaria para inmovilizar grandes animales. Los compuestos más po
tentes de este grupo se originan al hidrogenar el doble enlace C( I7)=C( 18).
Figura 15.35. Variaciones estructurales clásicas de la morfina.

448 INTRODUCCIÓN A 1.A QUÍMICA FARMACÉUTICA
Diels-Alder
7. - grupo atrayente de electrones Organomctálicos|
Obsérvese que los C-7 > C-x de (chaina u oripavina Etorfmas
Figura 15.36. Semisíntesis de etorfmas.
5.1.3. Derivados de morfinano y benzomorfano
El morfinano es una estructura que carece del puente cpóxido de la morfina, pero mantiene la misma numeración
que aquélla. Aunque posee tres centros estereogénicos (C-9. C-13 y C-14), sólo puede dar lugar a cuatro estereoi-
sómeros, ya que el anillo de piperidina se une con una disposición diaxial (cü) a los carbonos C-9 y C-13. Su for
ma activa es aquella que se corresponde con la morfina, en este caso: 9/?. 13/?. 14/?. El 3-hidroxiderivado. deno
minado levorfano. es más activo que la morfina y posee mejor absorción por vía oral. Su enantiómero. el
dextrorfano. es inactivo como analgésico y su (9-metil derivado, el dextrometorfano. se emplea como antitusíge
no. La mezcla racémica de levorfano y dextrorfano se conoce como racemorfano. La acción agonista o antago
nista de los derivados activos se relaciona con la naturaleza del sustituyeme en el nitrógeno (Eig. 15.37).
Racemorfano
X _. _ h IR1 = H. Morfinano
Levorfano
I R1 = CHj,/V-.Meulmorlinano (agonías>
R2 = OH. X = H. R1 = alilo Levalorfano (antagonista)
R2 = OH. X = H. R'= — Levofcnacil-

morfano. agonista
Oxilorfano. pótenle antagonista,

con acción analgésica débil
Butorfanol
* - OH. X = OH.
R agonista/anlugonista
mixto
Figura 15.37. Derivados de morfinano.
Por apertura del anillo C de los inorfinanos. se obtienen los benzomorfanos. cuya numeración ya no sigue
la misma paula que la morfina.
Suelen poseer dos grupos metilo en C-5 y C-9, que pueden disponerse en cis o en trans. Ambas configu
raciones han originado compuestos activos, si bien los benzomorfanos que se han introducido en terapéutica
son derivados cis.
La estructura más sencilla es la metazocina. de la que deriva la fenazocina (un analgésico más potente que
la morfina) por sustitución del grupo A-metilo por A-fcnetilo.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA till! 449
Figura 15.38. Benzomorfanos.
La pentazocina es menos activa que la morfina, pero tiene menos efectos secundarios al ser preferente
mente agonista en los receptores K. A la vez, es antagonista de los receptores (l. La bremazocina es otro análogo
más moderno, más activo que la morfina y. al parecer, con menores efectos adversos (Fig. 15.38).
Muchos benzomorfanos con actividad analgésica interesante no han podido introducirse en terapéutica
por sus propiedades alucinógcnas y disfóricas.
Difenoxilato
R1 = CN. R~ = -COOEt, R' = H (antidiarreico, antiperistáltico)
Lopcramida
R1 = CON(CH3)3. R~ = OH.R1 = Cl (antidiarreico, analgésico de uso tópico)
Figura 15.39. Derivados de fenilpiperidina.

5.1.4. Derivados de fenilpiperidina y metadona
Desde el punto de vista histórico, los derivados de 4-fenilpiperidina son los análogos de la morfina más anti
guos, siendo la meperidina (o petidina) su prototipo (Fig. 15.39).
Para que se superponga su estructura con la de la morfina, se requiere que el anillo de piperidina adopte
una conformación de silla y que el anillo aromático se disponga axialmente. Dado que esta conformación es
energéticamente menos favorecida que la conformación con fenilo ecuatorial, es discutible si la petidina la
adopta para unirse al receptor o si. con el anillo aromático dispuesto ecuatorialmente, el grupo básico se enlaza
a un centro aniónico diferente de aquél.
Desde el punto de vista histórico, la manipulación estructural de la petidina condujo al descubrimiento de
los neurolépticos de tipo butirofenona, cuyo prototipo es el haloperidol (véase el Capítulo 13).
La petidina, que es algo menos activa que la morfina, sigue siendo uno de los opioides más empleados en
el tratamiento del dolor a pesar de producir adicción. Sus variaciones estructurales han producido otros análo
gos, como las bemidonas (4-hidroxifcnilderivados), las prodinas (portadoras de una función éster invertida) y
los derivados de tentando. Al igual que en la morfina y en los morfinanos, la introducción de sustituyente fene-
tilo sobre el nitrógeno conduce a compuestos más activos, y la sustitución del grupo /V-metilo por ÍV-alilo origi
na antagonistas. En las prodinas, la actividad aumenta por la introducción de un metilo en C-3. debido a que
esta sustitución hace que la estructura sea más rígida. En estos compuestos, son posibles dos diaslereoisómeros
(a y p) según la estereoquímica en C-3. El isómero a, a pesar de ser el menos activo, se utiliza en obstetricia
por su acción analgésica rápida y corta.
La loperamida y el difcnoxilalo son derivados de la petidina que no atraviesan la barrera hematoencefá
lica, por lo que se utilizan fundamentalmente como antidiarreicos. El meptazinol es otro analgésico narcótico
cuya estructura se corresponde con la de un homólogo de la petidina (derivado de perhidroazepina). que tiene
una ligera actividad como agonista p,.
Figura 15.40. Femando y análogos
El fentanilo (Fig. 15.40) es 50-100 veces más activo que la morfina, en parte gracias a su gran lipofilia.
que le permite atravesar rápidamente la barrera hematoencefálica. habiendo encontrado aplicación como anesté
sico. La introducción adicional en el fentanilo de una cadena de tipo éter o éster en C-4 origina estructuras muy
activas. Entre los éteres, el sufentanilo y el alfentanilo se diferencian en la cadena sobre el nitrógeno, siendo el
primero el más lipófilo del grupo. Entre los esteres, tenemos el carfentanilo y el remifentanilo, el segundo de los
cuales se hidroliza rápidamente por las esterasas plasmáticas y tisulares. por lo que posee una semivida muy
corta, administrándose por infusión en la anestesia y la analgesia postoperatoria.
Estudios de modelización molecular sobre el receptor p han demostrado que el radical IV-fenetilo del fen
tanilo puede superponerse con el de la IV-fenetil-normofina. al igual que pueden superponerse los anillos de pi
peridina. Sin embargo, el gntpo fenilo sobre el nitrógeno amídico ocupa la zona del anillo C de la morfina, en
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (lili 451
lugar de superponerse con el anillo fenólico de ésta. Estos estudios han determinado los aminoácidos de las re
giones transmembrana de dicho receptor con los que interactúan ambas estructuras (Fig. 15.41).
Figura 15.41. Superposición de femando (línea de pumos) y W-fenetilnormofina (línea continua): DTM = dominio trans
membrana.
Dcxtromorainida
Figura 15.42. Mctadona y análogos.

La mayor simplificación de la estructura de la morfina corresponde a la (-)-metadona (Fig. 15.42). que es

el prototipo de las 3,3-difenilpropilaminas. Posee una actividad análoga a la de la morfina, se absorbe muy bien
por vía oral (a diferencia de ésta) y, debido a su menor poder de adicción, se emplea en el mantenimiento y la re
habilitación social de morfinómanos y heroinómanos. El desplazamiento del metilo en C-6 a la posición C-5
origina la isomeladona, menos activa. El dextropropoxifeno [(IS,2/?)-propoxifeno] es un analgésico opioide
muy utilizado semejante a la isomeladona. pero con un sustituyeme bencílico. La eliminación del metilo dio lu
gar al antitusígeno normetadona, y la dextromoramida se origina por sustitución de la función carbonílica en la
isometadona por una función carboxamida, y la del grupo dimetilamina por morfolina.
La inclusión de la cadena polimetilénica de estos analgésicos dentro de un anillo origina compuestos con
libertad conformacional restringida, como el tramadol y la lilidina.
El primero es un analgésico, muy utilizado en la actualidad, que posee una afinidad moderada por los re
ceptores |1 y menor afinidad todavía por los receptores 6o K. Como sus efectos no se antagonizan completa
mente por la naloxona, se supone que en su acción analgésica intervienen también otros mecanismos.
La tilidina se suele comercializar junto con la naloxona; es un profármaco cuyo metabolito activo es el
norderivado. El enantiómero más activo de la tilidina es el IS,2R. Curiosamente, si se hidrogena su doble enla
ce, desaparece la acción analgésica.
Fcnampromida
Asimadolina
Espiradohna
Enadolina
Figura 15.43. Nuevos agonistas kderivados de la fenanipromida.
Actualmente, se estudian otras estructuras muy diversas intentando encontrar agonistas puros de los re
ceptores K sin efectos secundarios. En su mayor parte, han surgido por derivación de la fcnampromida y. funda
mentalmente. del prototipo U-50.488. cuya manipulación sentó las bases del grupo farmacóforo indicado en la
Figura 15.43. al que pertenecen la asimadolina. la enadolina, la espiradolina y DuP747.
Otros compuestos en estudio, con estructura diversa, son la apadolina (fenotiazina), el tifluadom (1,4-
benzodizepina) y la SB 205588 |4a-(3-hidroxifenil)-perhidroisoquinolina|. El tifluadom es, simultáneamente,
un antagonista CCK-A (véase más adelante». El último tipo de estructuras deriva de la disección de los anillos B
y E de la morfina, tal como se indica en la Figura 15.44.
Figura 15.44. Otros agonistas K.
5.2. Antagonistas del receptor de la angiotensina II
Aunque los inhibidores de la enzima conversora de angiotensina (ECA). como el captopril y sus análogos,
han tenido mucho éxito en el tratamiento antihipertensor. dicha enzima es una proteasa no específica que
también cataliza la hidrólisis de otros péptidos. como la sustancia P. las encefalinas y la bradicinina. por lo
que. a veces, estos fármacos producen efectos secundarios (con frecuencia, una tos nerviosa). Por otra parte,
ninguno de los inhibidores de la renina estudiados (véase el Capítulo 11) se ha comercializado todavía, debi
do a su mala farmacocinética y a su complejidad estructural. Una tercera aproximación para encontrar antihi-
pertcnsores dentro del sistema renina-angiotensina consiste en la búsqueda de antagonistas del receptor de
angiotensina II (Angll). el oclapéptido que se produce por la acción de la ECA (Asp-Arg-Val-Tyr-lle-His-
Pro-Phe).
Losartán
(DuP753)
Figura 15.45. Diserto del losartán y el eprosartán a partir de prototipos: ácidos 2( I -bencil-2-nbutil-5-imidazolil)-
acélicos.
Metabolismo
(mctabolito menos activo)
Candesartanciclohexilo
(profármaco) Condesan án
Figura 15.46. Antagonistas AT>. «Sartancs».

El receptor de la angiotensina II es una glicoproteína que se encuentra en distintos tejidos y presenta di
versos subtipos (AT, y AT2). Cuando los receptores AT,, que están acoplados a proteínas G. interactúan con
sus ligandos agonistas, se produce la inhibición de adenilciclasa (disminuyendo la concentración de AMPc) o
la estimulación de la fosfolipasa C (formándose IPj y liberándose Ca2* intracelular). La producción de una
descarga simpática y la liberación de aldosterona que tiene lugar como consecuencia de la acción de aquellos
mensajeros se traduce en vasoconstricción y aumento de la presión arterial. Por eso, muchos antagonistas AT,
con estructura no peptídica, que se denominan «sartanes», se utilizan como fármacos antihipertensores.
El losartán (DuP753) y el eprosartán (SK&FI08566) derivan de una serie de ácidos l-bencil-5-imidazolil-
acéticos que mostraron una actividad antagonista AT, débil (Fig. 15.45). En un primer momento, se modelizó la
angiotensina II, y su extremo C-terminal (que es crucial para el enlace de este péptido al receptor) se superpuso
con los compuestos prototipo derivados del ácido acético, de tal forma que el anillo de imidazol de éstos se su
perpuso con el de histidina de Angll y el grupo n-Bu (lipófilo) con la cadena lateral del residuo lie. De este mo
do, el resto bencilo del prototipo se extendía hacia el extremo (V-terminal del péptido. sugiriendo que, si se alar
gaba, podría aumentarse la interacción con el receptor. Así, se llegó al losartán, mientras que otras
correspondencias entre Angll y el prototipo llevaron al eprosartán.
Los «sartanes» son, pues, estructuras simples que mimetizan la porción Tyr-Ue-His-Pro-Phe de Angll. En
ellos, es muy importante el grupo carboxilo vecino al bencilo. Por ejemplo, el losartán es muy poco activo,
mientras que su metabolito (producido en la oxidación del alcohol primario) es mucho más activo (Fig. 15.46).
La única excepción es el irbesartán. cuyo grupo carbonilo debe enlazarse al receptor por un puente de hidróge
no, aunque no puede descartarse que se metabolice para dar un ácido carboxílico. También es muy importante la
cadena lipóftla. Así, el metabolito de valsartán producido por oxidación en la posición <0-1 de dicha cadena es
prácticamente inactivo. Es igualmente importante el grupo CO2H o su bioisóstero tetrazol, situados en el benci
lo o en la posición orto de un fenilo que. a su vez. se encuentra en la posición para del bencilo. El candesartán-
ciclohexetilo es un profármaco que origina candesartán como metabolito activo.
5.3. Antagonistas de la colecistocinina
La colecistocinina (CCK) es una hormona peptídica que se encuentra en varias formas activas, según el número
de aminoácidos que contiene: CCK-58, CCK-33, CCK-8 (Asp-TyríSOjHl-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phc-NH») y
CCK-4 (Trp-Met-Asp-Phe-NH;). En el SNC. se encuentra preferentemente como CCK-8( sulfatada). En la peri
feria, la CCK regula la función intestinal y la digestión, mientras que en el SNC es un neurotransmisor y un neu-
romodulador. CCK-8. provoca la contracción muscular en la vesícula biliar (de ahí su nombre), en el estómago
y en el intestino delgado (bien directamente, o bien como consecuencia de la estimulación del sistema colinér-
gico). El pentapéptido formado por los cinco aminoácidos de su extremo C-terminal es idéntico a la gastrina.
que es otro neurotransmisor que interviene en acciones periféricas y centrales.
Devazepida (CI50 = O.(MX)K pM>
Figura 15.47. Antagonistas no peptídicos del receptor CCK-A.

Se conocen hasta cl inomento dos formas del receptor CCK: CCK-A y CCK-B/gastrina. Los receptores
CCK-A del páncreas se bloquean por el antagonista devazepida, desarrollado por los laboratorios Merck me
diante manipulación del producto natural asperlicina (descubierto en un cribado al azar) (Fig. 15.47). Ambos
son ejemplos de ligandos de receptores de péptidos con estructura no peptídica. Obsérvese que en la estructura
de asperlicina están incorporados dos residuos de ácido í)/7o-aminobenzoico, uno de triptófano y uno de leuci-
na, mientras que la devazepida es un derivado de 1,4-benzodiazepina más simple y más activa (la afinidad de la
devazepida por el receptor CCK-A es prácticamente igual que la de CCK-8, que es 10 10 M; sin embargo, no
puede aplicarse en terapéutica).
Parece que los receptores de CCK en el intestino y el receptor CCK-B del SNC son idénticos, pero están
asociados a diferentes sistemas de transmisión. Ambos se activan por la gastrina y se bloquean por antagonistas
como el CI-988, un dipeptoide muy selectivo que muestra acciones ansiolíticas y antigastrina. Lo vamos a utili
zar como ejemplo de diseño de peptoides (Fig. 15.48).
Asp—Tyr(OSO ,H) — Met — Gly —Trp — Met — Asp—Phe — NFL Gly —Trp —Met — Asp—Phe —NFL
26 27 2» 29 30 31 32 33 29 30 3t 32 33
CCK-8
Boe NH - Trp - Phe - NFL ____ > ____ ►

30 33
I (Boc: terbutiloxicarbonil)
CI-988 (2-Adoc: 2-adamantiloxicarbonil)
Figura 15.48. Estructuras de CCK-8. gastrina y CI-988 (antagonista CCK-B/gastrina).
A partir de la CCK, se siguió la metodología clásica, que consiste en eliminar o sustituir (generalmente
por alanina) determinados aminoácidos para definir su importancia.
De estas primeras modificaciones, se concluyó que la fenilalanina terminal (Phe-33) es esencial para el
enlace al receptor, y que los péptidos requerían, para ser activos, el residuo de triptófano; es decir, debía tener
una estructura X-Trp-Y-Phe-NFL, presente en la porción CCK 30-33.
Interacción de la conformación
plegada del extremo CCK 30-33 con
el receptor CCK-B Interacción de 1 con el mismo receptor
CH K CH
HjC-S—(CH2)< SCONHX 'CHjCOjH
CCK 30-33
Figura 15.49. Esquema de la interacción del tetrapéptido CCK 30-33 y el compuesto 1 con el receptor CCK-B.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (111) 457
Como grupo X, se observó que eran adecuados dos grupos protectores utilizados en la síntesis de pépti
dos, como son Boc (terbutiloxicarbonil) o 2-Adoc (2-adamantiloxicarbonil) (véase el Capítulo 23). La porción
espaciadora Y no era imprescindible, lo que se interpretó suponiendo que las cadenas laterales hidrófobas de
Trp y Phe en el dipéptido 1 interactúan con el receptor del mismo modo que lo hacen en el tetrapéptido C-ter-
minal cuando se dispone en una estructura de a-hélice (Fig. 15.49).
Por sustitución del residuo natural t-Trp de 1 por a-metil-D-triptófano. se obtuvo un peptoide (2) todavía
más activo que 1.
Posteriores manipulaciones de 2 permitieron determinar que el grupo amida terminal no era necesario pa
ra el enlace al receptor, y que el agrupamiento fenilo puede sustituirse por otros heterociclos, como piridina.
Por otra parte, el grupo protector Boc puede sustituirse por el grupo TcBoc (CCbCMejOCO-), que es más
voluminoso, más lipófilo y más estable metabólicamente (véase el compuesto 3).
Para mimetizar al residuo Asp de CCK 30-33, se puede utilizar un residuo de monoamida del ácido maló-
nico sustituido en las posiciones a o p (véanse los compuestos 4 ó S = Cl-988).
Este último compuesto es un dipeptoide que mimetiza las subestructuras Trp-30 y Phe-33, así como la ca
dena lateral de Asp-32. Tiene un valor K, muy pequeño (1.7 nM) y una gran selectividad por el receptor B (con
centración antagonista CCK-A/CCKB = 2500:1), es activo por vía oral y un agente ansiolítico potencial (Figu
ra 15.50).
5 (CI-988)
Figura 15.50. Diseño del antagonista CCK-B/gastrina CI-988.

5.4. Antagonistas de los receptores de endotelinas
Estos compuestos son un ejemplo más de cómo, en los últimos años, pueden desarrollarse en un tiempo muy
corto compuestos muy selectivos, conociendo y aislando previamente el receptor de los mismos y utilizando
métodos de cribado de alto rendimiento (véase el Capítulo 2). Primero, suele descubrirse un receptor; des
pués se descubren los distintos subtipos y surge la pregunta de cuál de ellos debe bloquearse. Si se dispone de
animales transgénicos carentes de uno de estos subtipos (como son los ratones knock-out), es relativamente
fácil determinar su importancia y. si no, es cuestión de más trabajo. En cualquier caso, sólo los resultados ob
tenidos a partir de los ensayos en seres humanos determinará la relevancia terapéutica de los fármacos descu
biertos.
La endotelina (ET-I) es un péptido vasoconstrictor compuesto por 21 aminoácidos descubierto en
1988. Luego se comprobó la existencia en el organismo de otros péptidos análogos, y que unos venenos de
serpiente (las sarafotoxinas) actúan en los mismos receptores. En el organismo, la ET-1 se forma a partir de
una proteína de 203 aminoácidos que. por la acción de una endopeptidasa. da lugar a otra de 39 aminoácidos
(proendotelina o «big»-endotelina). Ésta, por la catálisis de una metaloproteasa denominada enzima conver-
sora de endotelina (ECE). origina finalmente endotelina. Se conocen dos receptores: ETA (presente en la
musculatura lisa de los vasos sanguíneos), cuya estimulación produce aumento de la presión sanguínea, y
ETb (muy distribuido en el organismo y también en los bronquios).
Con estos receptores aislados, varias industrias farmacéuticas pudieron ensayar muy rápidamente mu
chos compuestos utilizando dos estrategias: la modificación racional del péptido natural y el cribado al azar
de todas las estructuras que poseían en sus ficheros (denominados bibliotecas).
La sustitución de cada uno de los aminoácidos de ET por Ala permitió descubrir que la porción C-termi-
nal es la responsable de la unión al receptor. Por ejemplo, la eliminación del Trp en el hexapéptido C-terminal
(His-Leu-Asp-lle-Ile-Trp. con un valor de CI50 = 44 pM) da compuestos inactivos.
Por el contrario, la modificación del residuo His por su enantiómero d-Hís (Parke-Davis) y. finalmente,
por Ac-o-Dip (AI-acetildifenilalanina) aumentó 100 veces su actividad (CIS> = 35 nM). Todavía no se ha logrado
una molécula más pequeña ni con mayor acción.
Por otra parte. Bristol-Myers Squibb observó, en el cribado al azar de sus compuestos, que el sulfatiazol te
nía afinidad por los receptores ETA (Cl» = 69 pM), siendo el sulfixosazol todavía más activo (Cijo = 0,78 pM).
La manipulación de estos prototipos originó el compuesto BMS-182874, con una actividad CIM = 0,15
pM. Es activo por vía oral y tiene actividad antihipertensora (Fig. 15.51).
Sulfatiazol Sulñsoxazol BMS= 182874

Cl™ = 69 pM CIjosO, 78 pM Cl5o = O.I5pM
Figura 15.51. Antagonistas del receptor ETA derivados del sulfatiazol.
Siguiendo igualmente la estrategia de cribado al azar. Parke-Davies encontró el compuesto PD 012527

(Fig. 15.52).
De la optimización de esta estructura, siguiendo el esquema de Topliss (véase el Capítulo 5), se dedujo
la importancia de la introducción de grupos donadores de electrones en los anillos bencénicos, y así se llegó
al compuesto PD 156707.
Igualmente, la compañía BASF llegó a 6. que en un primer momento se había estudiado como herbici
da, de cuya variación estructural se obtuvo 7. SmithKIine-Beecham llegó simultáneamente a 8.
Surgió la hipótesis de que 7 y 8 actúan en el mismo lugar del receptor. Ambos tienen un grupo CO; ro
deado de grupos lipófilos. Dado que se sabía que el grupo metilenodioxi de 8 aumentaba mucho la afinidad
por el receptor, se introdujo en 7 un anillo fusionado de cinco eslabones, originándose 9. muy activo y selec
tivo.
También se conocen compuestos con afinidad selectiva para el receptor ETB. pero hay que esperar a los
ensayos clínicos para saber si son útiles.
9 K, = 0.4 nM (ETa)
56 nM (ETjj)
Figura 15.52. Otros antagonistas de receptores ET obtenidos por cribado al azar.
5.5. Antagonistas del receptor de fibrinógeno
El fibrinógeno es una proteína que se une a la glicoproteína Ilb/llla (receptor de fibrinógeno). Sus antagonistas
selectivos podrían ser excelentes antitrombóticos. En 1986. se descubrió que una secuencia tripeptídica del fi
brinógeno (Arg-Gly-Asp). denominada motivo RGD. inhibe la interacción mencionada. Dicha secuencia se in
trodujo en pentapéptidos cíclicos para estudiar, además, en qué conformación se enlaza el fibrinógeno con el re
ceptor. Surgió así el compuesto 10 (CIsu = 2 nM) que, de acuerdo con estudios de resonancia magnética, tiene
una estructura de lazo p. También se sintetizaron otros péptidos cíclicos a través de puentes disulfuro (11, CIs> =
2 nM). y se buscaron moléculas orgánicas pequeñas semejantes a 10 y 11. La compañía SKB se concentró en el
460 INTRODUCCIÓN A I A QUÍMICA FARMACÉUTICA
estudio de las benzodiazepinas como moldes rígidos, llegando al compuesto 12. que sitúa las cadenas de «Arg»
y Asp igual que II. mientras que Searle partió del péptido abierto 13. y lo modificó (compuestos 14-17). El
compuesto 17 es activo por vía oral (Fig. 15.53).
Figura 15.53. Antagonistas del receptor de fibrinógeno.
BIBLIOGRAFÍA
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Bóhm, H. J.; Klebe, G., y Kubinyi. H.: Wirkstoffdesign, Spektrum Akademischer Verlag. 1996.
DISEÑO DE FARMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE MEMBRANA (III) 461
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----------------------------------- 16----------------------------------------------------
Diseño de fármacos que actúan

sobre receptores de histamina
y adenosina. Profármacos
de óxido nítrico
M. SOllhuber y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
La histamina es la amina biógena más difundida en el organismo, donde se almacena en una forma inactiva y
se libera por diferentes estímulos y mecanismos. Fue sintetizada por Windaus y Vogt en I907. antes de que se
descubriera su papel como mensajero químico de acción fisiológica compleja. En I910, Dale y Lardlaw pos
tularon su importancia en las reacciones alérgicas, considerándola una hormona «local», aunque carece de
una glándula endocrina para su producción. En años más recientes, se ha reconocido su papel como neuro-
transmisor. Sus receptores se encuentran en las membranas celulares y actualmente se han descrito tres: H,.
H2yH3.
Al actuar sobre los receptores H,. que se sitúan principalmente en la piel y las membranas de los aparatos
respiratorios y digestivo, la histamina cumple el papel fisiológico de defender al organismo frente a agentes ex
traños, daños mecánicos, quemaduras, infecciones o algunos xenobióticos, ya que su liberación va acompañada
de la aparición de anticuerpos. La estimulación de los receptores H, produce la contracción de la musculatura
lisa del intestino, el útero y los bronquios (este efecto puede producir asma), la dilatación de la musculatura lisa
de los vasos sanguíneos (que da lugar a hipotensión) y el incremento de la permeabilidad de las paredes de los
capilares sanguíneos (que favorece la salida de plasma y la formación de edemas). En determinadas circunstan
cias, sus efectos pueden ser patológicos y, por lo tanto, los antagonistas de la histamina en los receptores H,
(antihistamínicos H,) se emplean como antialérgicos.
Los receptores H2, establecidos por Black y colaboradores en 1972, se sitúan en las paredes gástricas y
son responsables de la producción de ácido clorhídrico en las células parietales, probablemente como un meca
nismo para controlar la población bacteriana. Una situación patológica produce un exceso de secrección y la
formación de úlceras gástricas o duodenales. Por ello, el desarrollo de antagonistas H_> ha dado lugar a su apli
cación terapéutica como fármacos antiulcerosos.
El papel de la histamina como neurotransmisor central no se conoce totalmente. En 1987, se confirmó la
existencia de receptores FL presinápticos en el SNC capaces de regular la síntesis y la liberación de histamina.
Posteriormente, se han encontrado en muchas neuronas y en el sistema nervioso periférico, actuando como re
guladores de muchos procesos fisiológicos.
A partir del conocimiento de la actividad antagonista de cienos receptores de adenosina de las metil-xan-
tinas (especialmente, teofilina y cafeína), el estudio de los distintos tipos de receptores de adenosina y sus deri-
vados 5'-fosforilados, así como de las posibles aplicaciones de sus agonistas y antagonistas, ha sido y sigue
siendo un campo de investigación muy activo. Al igual que los receptores estudiados hasta el momento, éstos
son también receptores situados en las membranas celulares.
Por último, aunque las dianas del óxido nítrico (factor relajante derivado del endotelio) no son receptores
en el estricto sentido de la palabra (la más conocida es la enzima guanilciclasa soluble), comentaremos breve
mente algunos aspectos relacionados con sus profármacos.
2. FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMINA
2.1. Biosíntesis y metabolismo de la histamina
La histamina se forma por descarboxilación del aminoácido histidina. en una reacción que puede estar cata
lizada por aminoácido descarboxilasas no específicas o por i.-histidina descarboxilasa (específica). Cuando
se libera, tiene una semivida muy corta: en parte se reabsorbe, pero fundamentalmente se metaboliza por dos
rutas diferentes (Fig. 16.1). La principal ruta en el ser humano origina, en una reacción de metilación con
S-adenosilmetionina catalizada por histamina metiltransferasa. un metabolito activo, mientras que la desa
nimación oxidativa por la histaminasa (segunda ruta) conduce al ácido imidazolacético o (V-metilimidazo-
lacético.
L-Histidina
L-Histidina descarboxilasa
(o aminoácido descarboxilasa)
a-Fluoromctilhistidina
Figura 16.1. Biosíntesis y metabolismo de la histamina.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMINA Y ADENOSINA 465
Entre las sustancias que afectan a la biosíntesis y el metabolismo de la histamina, cabe destacar la a-fluo-
rometilhistidina, un inhibidor de la histidina descarboxilasa que se emplea en el tratamiento de las mastocitosis
y en el estudio experimental de los niveles de histamina cerebrales (véase el mecanismo de acción de compues
tos semejantes en el Capítulo 11, Apartado 3).
2.2. Equilibrios prototrópicos, tautomería y conformación de la histamina
La histamina tiene dos centros básicos, con pKa de 9,4 y 5,8 (que corresponden a la cadena lateral y al anillo
imidazólico, respectivamente). El nitrógeno 1 del anillo de imidazol (NH) tiene carácter ácido, con un pKa de
14. A pH fisiológico, se encuentra en un 96,6 % en forma de monocatión (Fig. 16.2), con el grupo de amina pri
maria casi totalmente ionizado, mientras que el nitrógeno básico del imidazol está protonado sólo en un 2,4 %
(forma de dicatión). En dicho monocatión. la cadena lateral ionizada ejerce un efecto inductor atrayente de elec
trones (-1) sobre el imidazol, lo que reduce la densidad electrónica del nitrógeno en la posición contigua y faci
lita la disociación de un protón de este átomo para formar el tautómero x (N'-H). Como se analizará más ade
lante, la presencia de un metilo en la posición 5(4) ejerce un efecto inductor positivo (+1), que estabiliza
también al isómero x. La forma tautómera que sitúa al hidrógeno sobre el nitrógeno próximo a la cadena se de
nomina tautómero N"-H.
Porcentaje molar de las especies

iónicas
pH = 7,4 pH = 5.4
2,4% ------------- 71,5%
96,6 % ------------- 28,5 %
I %------------- 3x 10-3 %
Anión
Figura 16.2. Equilibrios prototrópicos y tautomería de la histamina.
La histamina es una molécula flexible, con rotación libre a través del enlace C(a)-C(p) de la cadena.
Mientras que en estado cristalino sólo se observa la conformación trans, en solución acuosa es una mezcla equi-
molecular de los confórmeros trans y gauche. A través del giro del enlace C(p)-C4(5), el anillo imidazólico
puede pasar de ser coplanar a la cadena a ser hasta perpendicular a la misma (Fig. 16.3).
Figura 16.3. Equilibrios confomtacionales de la histamina.
2.3. Agonistas de los receptores de histamina Hi, H2 y H3
Aunque los agonistas histamínicos tienen escaso o nulo interés terapéutico, son herramientas farmacológicas
esenciales para el estudio de los tres receptores mencionados.
El receptor de histamina H|, al igual que el adrenérgico a,, el muscarínico, el 5-HT2 o el de angiotensina
II. entre otros, está unido a través de proteínas G a una fosfodiesterasa específica de fosfolípidos, llamada fosfo-
lipasa C (PLC), que cataliza la hidrólisis del fosfoinositol 4,5-difosfato para liberar dos segundos mensajeros:
diacilglicerol (DAG, que permanece asociado a la membrana celular por su lipofilia y activa, a su vez, a la pro
teína cinasa C o PKC) y el inositol-(1,4,5)-trifosfato (IP3). que es hidrosoluble y pasa al citoplasma uniéndose a
receptores del retículo endoplásmico y liberando Ca2* (véase la Fig. 13.1).
El receptor de histamina H? es también un receptor ligado a la proteína G, que interactúa con sus ligan-
dos de forma muy semejante a lo que se ha comentado para los receptores adrenérgicos, dopaminérgicos y se-
rotoninérgicos, sólo que los dos residuos de serina del dominio de transmembrana TM5 son ahora un residuo
de aspártico (Asp-185) y de treonina (Thr-189).
Su estimulación, como ocurre con los receptores p-adrenérgicos y dopaminérgicos D,, induce la activa
ción a través de proteínas G de adenilciclasa, aumentando la concentración intracelular del segundo mensajero
AMPc.
Los receptores H3 están menos estudiados, aunque se han desarrollado y se conocen con cierto detalle
los perfiles farmacológicos de algunos de sus agonistas y antagonistas.
Las variaciones en el heterociclo o la cadena de la histamina conducen, generalmente, a compuestos me
nos activos que el propio neurotransmisor.
La sustitución del imidazol por otros heterociclos ha dado lugar a estructuras interesantes sólo en los ca
sos del 2-tiazoliIo y 2-piridilo, cuyos análogos resultan agonistas bastante selectivos de los receptores H, (Ta
bla 16.1). Esto demuestra que en dicha actividad no influye la tautomería anteriormente comentada, pero sí
es conveniente la presencia, en el anillo aromático, de un nitrógeno básico en posición vecina a la cadena ali -
fótica. El 2-metilderivado es un agonista H, bastante selectivo, mientras que el 4(5)-metilderivado es un a-
gonista Hj.
Los N.a- y a,a-dimetilderivados son inactivos. Sin embargo, la introducción de grupos metilo en la cade
na lateral da lugar a compuestos de acción muy débil sobre los receptores H । y H2. pero en cambio origina ago
nistas selectivos de los receptores Hj, para los que se observa una dependencia estereoquímica muy acusada.
Sólo el enantiómero /?-(-) de la a-metilhistamina es activo.
Tabla 16.1. Potencia agonista de análogos de histamina en los distintos receptores

Como el imidazol es una amidina cíclica, otra variación ha sido la sustitución de este anillo por bioisóste-
ros con estructura de amidina y posibilidades de tautomería.
Destacaremos la (.S)-3-(iV,A'-dimetilaminopropil)-isotiourea (dimaprit), que es un agonista H: muy selecti
vo (Fig. 16.4).
H.N“A . /CH3
>—CH,—CH,—Ñ
N । 'ru,
H ’
Va. M^Dimetilhistaniina
HÑX . zCHr N-rt + zCH3

'c-S-CH,-CH,-CH,-Ñ' < CH,—CH,—Ñ
H2Ñ' h'CH, N I'CH,
i H
H
Figura 16.4. Bioisosterismo entre isotiourea e imidazol en el dimaprit (formas protonadas).
La impromidina (Fig. 16.5) es otro agonista muy selectivo de los receptores H2, que es también antago
nista de los receptores FL e inhibidor de la imidazol-N-metiltransferasa. En este fármaco, la cadena imidazolil-
propílica, en la que es posible la tautomería. parece ser la responsable de su eficacia, mientras que el otro anillo
imidazólico puede sustituirse por otros heterociclos y es responsable de su afinidad por el receptor. La sustitu
ción de la función guanidina por cianoguanidina, urea o tiourea da lugar a antagonistas, mientras que la isotiou
rea puede conducir a agonistas o antagonistas. Ambos anillos de imidazol pueden ser sustituidos por su grupo
bioisóstero isotiourea, dando lugar a agonistas. El enantiómero $-(+) del a-metiletil derivado es antagonista H2.
mientras que el enantiómero /?-(-), conocido como sopromidina. cuya estructura se corresponde a la de la D-his-
tidina, es un potente agonista H2. Todas estas observaciones demuestran que el receptor H2 de la histamina es
enantioseiectivo.
responsable de responsable de (KX-); Sopromidina (potente agonista H,)

la eficacia la afinidad (.S )(+) (antagonista H2)
Figura 16.5. Variaciones estructurales de la impromidina.

De todas las relaciones estructura-actividad deducidas en estudios con análogos de histamina, puede resu
mirse que, para una actividad agonista H>, se requiere una cadena lateral con un nitrógeno básico que pueda ro
tar (las estructuras rígidas son inactivas), y un sistema aromático con un nitrógeno básico en posición orto.
mientras que para una actividad agonista H>, además de la cadena lateral con el nitrógeno básico, se requiere un
sistema de tipo amidina que mimetice al tautómero de tipo N'-H y pueda enlazarse al receptor por enlaces de hi
drógeno que originen una transferencia de protones (Fig. 16.6).
Figura 16.6. a) Interacciones de la histamina con los receptores H, y H,. b) Posible transferencia de protones
en el receptor Hj.
2.4. Antagonistas H,
Las primeras estructuras con actividad antihistamínica H|, como F-929 y F-933 (Fig. 16.7), las descubrieron
Bovet y Foumou entre 1933 y 1937. pero resultaron ser demasiado tóxicas para su empleo en terapéutica.
En 1942, a partir de un estudio sistemático de derivados de etilenodiamina, surgió la primera empleada en
terapéutica, la fenbenzamina (Antergán®), que fue modelo de una amplia serie de análogos.
En la mepiramina y la tripelenamina. un fenilo se ha sustituido por el grupo 2-piridilo; en el metapirile-
no y el cloropirileno se ha sustituido, además, el otro fenilo por un resto de 2-tienilo; en la mebhidrolina, el
clemizol y la prometazina, un resto de anilina se ha incorporado a un sistema de indol. bencimidazol o fenotia-
zina; etc.
Un grupo aparte lo constituyen los derivados de piperazina, como la mecloz.ina y la oxatomida. que tienen
una intensa acción antiemética.
En 1946, surgió la difenhidramina, la primera estructura activa del grupo de los aminoetanoles. Para
paliar sus efectos sedantes, que producen somnolencia debido a su paso a través de la barrera hematoencefá-
lica. y a su acción anticolinérgica, se salificó con derivados de purina que son excitantes centrales (véase el
Capítulo 15) y surgió la dramamina (el 8-cloroteofilinato), que se utiliza contra los mareos provocados por el
movimiento.
Ya se ha comentado en el Apartado 5 del Capítulo 14. que la utilidad como antieméticos en el mareo ci
nético (por movimiento) de estos antihistamínicos se debe mayoritariamente a su acción como antagonistas
de receptores colinérgicos.
F-933
F-929 (Piperoxano)
Fenbenzamina R = OCH V Mcpiramina

(Antcqján)
Cl
Oxatomida
Drainainina
Figura 16.7. Antihistamínicos H, clásicos.

Se sintetizaron miles de estructuras de tipo (R'R2)-X-C-C- N(R’R4), en las que R1 y R; son anillos aromá
ticos y heteroaromáticos de los que uno puede estar separado de X por un grupo metilénico o pueden estar uni
dos formando un sistema tricíclico (Fig. 16.8). El grupo X puede ser N (etilenodiaminas), O (derivados de 2-
aminoetanol) o CH (3,3-diarilpropilaminas); C-C es una cadena de dos carbonos que puede ser saturada,
insaturada, ramificada o formar parte de un sistema cíclico (en cuyo caso, se puede ampliar a tres carbonos); y
R’ y R4 son restos alquílicos pequeños que pueden estar unidos formando un anillo de pirrolidina. Obsérvese
que la parte hidrófoba de estos antagonistas (R1 y R2), responsable de su fijación a lugares «alostéricos» y de su
gran afinidad, también está presente en muchos anticolinérgicos, antagonistas a-adrenérgicos, antidopaminérgi-
cos y antiserotoninérgicos. Esto explica los efectos secundarios sedantes, hipnóticos y antieméticos, fundamen
talmente, de los antagonistas H, «clásicos» (véanse los Capítulos 13 y 14).
Del grupo de las propilaminas, cuyo prototipo es la feniramina. han derivado la tripolidina (el isómero £
es el más activo) y los análogos tricíclicos ciproheptadina, azatadina, loratadina y ketotifeno que, aunque en
principio se desarrollaron como antidepresivos, presentan una gran afinidad por el receptor H,. Algunos se utili
zan como antiasmáticos, porque inhiben la broncoconstricción inducida por leucotrienos y PAF (fosfato de coli
na y 3-O-alquil-2(/?)-acetil-2,3-dihidroxipropilo, factor activador plaquetario).
R = H, Feniramina
Ketotifeno
R = C!. Clorfenamina Tripolidina
R = Br. Bromfemramina (isómero E)
Azdastina
Figura 16.8. Otros antagonistas H| clásicos.
La azatadina tiene acción periférica y central, mientras que la loratadina no tiene efectos centrales. Éste es
uno de los antialérgicos más prescritos, porque además presenta la ventaja de inhibir la liberación de mediado
res inflamatorios como la proslaglandina D;. los leucotrienos C4 y la bradicinina. ¿Es el diferente metabolismo
la razón de que de dos fármacos tan semejantes estructuralmente uno tenga efectos centrales y el otro no? Dado
que, por desmetilación oxidativa o por hidrólisis, la azatadina o la loratadina originan un metabolito análogo, se
pensó que la hidrólisis podría ser más rápida que la desmetilación, y de ahí la ausencia de efectos centrales. Sin
embargo, la razón es que la loratadina tiene menor afinidad que la azatadina por las isoformas de los receptores
H, centrales.
La azelastina es un derivado de perhidroazepina que no atraviesa la barrera hematocncefálica (BHE). Se
utiliza, en forma racémica, en las alergias primaverales.
Actualmente, la investigación de antagonistas H| va dirigida a la búsqueda de antialérgicos carentes de
efectos sedantes. La clave es que no atraviesen la barrera hematoencefálica y que tengan menor afinidad por los
receptores H, centrales que por los periféricos. El astemizol, la terfenadina y la mequitazina no atraviesan la ba
rrera hematoencefálica (Fig. 16.9). Si se comparan la mequitazina y la prometazina (Fig. 16.7). podría pensarse
que aquélla, al poseer mayor número de mctilcnos. fuese más lipófila y atravesar dicha barrera. Sin embargo, no
lo hace debido a que. por efectos estéticos, el nitrógeno de quinuclidina es más básico y la mayor parte de sus
moléculas se encuentran protonadas a pH fisiológico. En el astemizol. la porción de guanidina (2-aminobencimi-
dazol) le confiere también una gran basicidad. La terfenadina. al poseer tres grupos polares (dos hidroxilos y un
nitrógeno piperidínico protonado a pH fisiológico), no atraviesa la BHE. Algunos están surgiendo por derivación
de antihistamínicos ya conocidos, como la acrivastina. un derivado de la Iripolidina con una función carboxílica
que la convierte en un ion híbrido que no es capaz de atravesar dicha barrera, o la fexofenadina (un metabolite
activo de la terfenadina). La ebastina (comercializada por el laboratorio Almirall) también se metaboliza a care-
bastina. con estructura de ion híbrido, que no atraviesa la BHE. Otro ejemplo es la cetrizina. un derivado de la hi-
droxizina en el que la oxidación del alcohol a ácido carboxílico la convierte en un ion híbrido.
Figura 16.9. Antihistamínicos H¡ de segunda generación.

Posteriormente, han ido surgiendo otras estructuras, como la temelastina, cuya semejanza con la histami
na reside únicamente en la presencia de un sistema básico, protonado a pH fisiológico, unido a través de una ca
dena alifática a un grupo arito. La temelastina se desarrolló a partir del antagonista H, cimetidina. tal como se
indica en la Figura 16.10.
Temelastina (antagonista H()
Figura 16.10. Desarrollo de la temelastina a partir de la cimetidina.
2.5. Antagonistas H2
2.5.1. Investigación y desarrollo de la cimetidina como agente antiulceroso
La introducción de la cimetidina en terapéutica como agente antiulceroso es uno de los ejemplos representa
tivos de la metodología utilizada en cl diseño de fármacos por manipulación de un prototipo (véase el Capí
tulo 4). En el año 1964. cuando los laboratorios SmithKIine&French iniciaron el programa de investigación
que culminó con su descubrimiento, el tratamiento convencional de la úlcera consistía en tratar de neutralizar
cl ácido clohídrico gástrico administrando bases como cl bicarbonato sódico o el carbonato cálcico. Sin em
bargo. la necesidad de utilizar grandes dosis originaba efectos secundarios adversos, por lo que se pensó en
que deberían encontrarse fármacos que inhibieran la liberación del ácido. Por aquel entonces, sólo se conocía
la participación en este proceso de la acetilcolina y de la gastrina. La primera se libera por la vista, el olor o
incluso por pensamientos relacionados con los alimentos y, al actuar sobre los receptores muscarínicos, pro
voca la liberación de ácido. La gastrina es un péptido que se libera cuando el alimento llega al estómago, y
provoca el mismo efecto al actuar sobre sus receptores (véase Capítulo 12, Fig. 12.44). Sin embargo, los an
tagonistas muscarínicos bloquean también los receptores en otros lugares del organismo, con los consiguien
tes efectos secundarios.
En lugar de estudiar antagonistas del receptor de la gastrina. se intentó la búsqueda de antagonistas de la
histamina partiendo de unas bases muy poco claras, ya que. aunque se sabía que la histamina era capaz de esti
mular la liberación de ácido en el estómago, lo cierto es que ningún antihistamínico de los ensayados había
mostrado el efecto deseado. Una posible explicación era suponer que aquéllos eran antagonistas de un receptor
responsable de la inflamación (al que luego se denominó H,) diferente al responsable de la secreción ácida del
estómago (al que luego se denominó H2). pero mientras esta teoría no se demostrara con antagonistas específi
cos, la existencia de este segundo receptor era una pura especulación.
Los antagonistas H, surgieron a partir de la premisa de que uno de los mejores caminos para encontrar
antagonistas es la investigación de compuestos que contengan algunos elementos estructurales de los agonis
tas naturales.
Tras ensayar más de 200 análogos de la histamina. se encontró actividad H. en la 4(5)-metilhistamina y
en la guanilhistamina. En la primera, la selectividad se racionalizó teniendo en cuenta que el grupo metilo en
el anillo de imidazol desestabiliza unas conformaciones de la cadena lateral más que otras, mientras que la
guanilhistamina protonada posee un grupo polar que puede interactuar con el receptor de forma diferente al
ion amonio de la histamina. ya que la carga positiva está aquí extendida alrededor de tres nitrógenos coplana-
res y. por tanto, puede enlazarse a un lugar aniónico del receptor más alejado del anillo de imidazol (Fi
gura 16.11).
Interacción estérica
4(5)-MetiIhistamina
Conformación impedida Conformación favorecida
Guanilhistamina
(formas resonantes del catión!
Figura 16.11. Diferencias entre la histamina. la 4-metilhistamina y la guanilhistamina.
La guanilhistamina es en realidad un agonista parcial del receptor 1L con capacidad para activar al recep
tor H2, pero no en la misma medida que la histamina. por lo que disminuye la liberación de ácido. Ésta fue la
primera indicación de un antagonismo H2.
Se prepararon entonces varias guanidinas carentes de imidazol. para averiguar si la guanidina era el
grupo farmacóforo de los antagonistas H;, pero no fue así. La actuación de la guanilhistamina se racionalizó
basándose en un lugar aniónico en el receptor al que no llega la histamina y que sería el lugar de unión de los
antagonistas. Su capacidad para enlazarse también al lugar agonista explicaría su acción agonista parcial
(Fig. 16.12).
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMIN A ¥ ADENOSINA 475
La histamina sólo
puede enlazarse al
lugar de enlace de
los agonistas
Figura 16.12. Modelos de interacción de la histamina y de la guanilhistamina sobre el receptor Hj.
El isóstero de la guanilhistamina obtenido por sustitución del nitrógeno más próximo al imidazol por azu
fre dio un derivado de isotiourea en el que la carga positiva está restringida a la porción terminal y, por tanto, se
ría más selectivo si fuese verdad que el lugar aniónico de los antagonistas está más alejado. En realidad, aumen
tó la actividad antagonista, pero siguió siendo un agonista parcial, es decir, tenía capacidad para enlazarse al
lugar agonista. También se sustituyó uno de ios grupos amino de la guanidina por grupos metilo o metiltio. per
diéndose casi por completo la actividad antagonista, de donde se dedujo que ambos grupos amino eran necesa
rios para dicha actividad y se propuso que el grupo guanidina cargado interactúa con un grupo carboxilato del
receptor a través de dos enlaces de hidrógeno. Si sólo puede formarse uno, la interacción es más débil y también
lo es la actividad antagonista (Fig. 16.13).
Interacción fuerte
NH:
CH2—CH2-S—C. ♦ RECEPTOR
vnh2
X = NH, S
Derivado de isotiourea (catión)
Interacción débil
H /
n-h^ o *
CH2-CH2-NH-C '*C — RECEPTOR
\ óz X = Me. SMe
X = CHVS-CH,
Figura 16.13. Isósteros de guanilhistamina de tipo isotiourea y inetil o metiltioamidina.

Se alargó entonces la cadena lateral de dos a tres carbonos, para observar qué pasaba cuando el grupo
guanidina se aleja del heterociclo. Mientras que esta modificación era buena para la guanidina. era adversa para
la isotiourea. por lo que se propuso que en los compuestos dimetilénicos la interación se producía con dos gru
pos NH;. mientras que en los trimetilénicos se hacía con uno de ellos y el grupo NH (Fig. 16.14).
X = S, NH
Interacciones de los compuestos dimetilénicos
X = NH2.SMe. Me
Interacciones de los compuestos trimetilénicos
Figura 16.14. Modelo de interacción de los derivados dimetilénicos y trimetilénicos de la guanilhistamina y sus isósteros
con el receptor H2.
En apoyo de este modelo, los análogos trimetilénicos de tipo metil o metiltioamidina no perdían actividad
(Fig. 16.15).
Enlace como antagonista débil

(sólo una interacción)
Enlace como antagonistas fuertes (dos interacciones)
Figura 16.15. Interacciones de derivados trimetilénicos.

DISEÑO UE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMINA Y ADENOSINA 477
Para eliminar totalmente la actividad agonista, se propuso que la unión agonista era de tipo iónico, pero
que la antagonista podía ser de tipo quelato, con lo que el grupo en cuestión podía ser neutro, por lo que se bus
có un grupo semejante a la guanidina en cuanto a tamaño, forma e hidrofobia, llegándose entre los ensayados a
la tiourea SK&F91581. que, efectivamente, resultó ser un antagonista débil pero sin actividad agonista. La gua
nidina y la tiourea se diferencian en su basicidad. La tiourea no es básica porque el grupo C=S atrayente de elec
trones hace a los nitrógenos no básicos. Por lo demás, ambos grupos son planos, tienen un tamaño semejante y
poseen capacidad para formar enlaces de hidrógeno. Cuando se alargó la cadena con otro grupo metileno y se
sustituyó el grupo NIL por CH?NH. se obtuvo la burinamida, un potente antagonista H; cuya mayor actividad
puede atribuirse a una mejor aproximación del grupo tiourea al lugar de enlace antagonista y a una mayor lipo
filia (Fig. 16.16). La burinamida probó finalmente la existencia de receptores H:.
HN-'X '/ HN""X //

i CH;-CH;-CH;-NH-C l CH,-CH,—CH,-CH,-NH-Cx
^N 'NHj ^N 'NHMe
SK&F9I58I Burinamida
Antagonista débil Potente antagonista H;
No agonista
Figura 16.16. SK&F91581 y burinamida.
Sin embargo, la burinamida es muy poco activa por vía oral, por lo que se realizaron nuevas exploracio
nes fijándose ahora en el anillo de imidazol y la influencia de sus dos formas tautómeras. Ya se ha comentado
que el pK, del imidazol en la histamina es de 5.74 y que, por ser una base débil, se encuentra prácticamente en
su forma no ionizada y debe enlazarse al receptor por un enlace de hidrógeno. El pK. del propio imidazol es de
6.80 y el del anillo de imidazol en la burinamida es de 7,25. La influencia de la cadena lateral R en la basicidad
del imidazol no sustituido puede calcularse de acuerdo con la ecuación de Hammett [ 1 ].
— pK«m + póg [1 ]
En la burinamida, la cadena lateral es donante de electrones (el pK, del imidazol es mayor que el del imi
dazol no sustituido y tiene una mayor tendencia a protonarse). mientras que en la histamina es atrayente de elec
trones, debido a que el grupo amino primario está prácticamente protonado. A pH = 7,4, el 40 % de la porción
imidazólica de la burinamida está protonada, mientras que en la histamina este valor está próximo al 3 %. Si el ti
po de enlace entre el anillo de imidazol y el receptor H; es igual para agonistas y antagonistas, debería disminuir
se el pK, del imidazol de la burinamida para que sea similar al de la histamina. haciendo que la cadena sea atra
yente de electrones sin que se alteren las otras propiedades moleculares. En resumen, se requería un isóstero de
un grupo metileno con un efecto -I. El primero en estudiarse fue el azufre, que se colocó en posición 2 por razo
nes de accesibilidad sintética. Resultó así la tiaburinamida. con un pK, = 6.25 y una mayor actividad antagonista
H; (Fig. 16.17). Para favorecer el tautómero r del imidazol. se introdujo un metilo en la posición 5 como grupo
donador de electrones, obteniéndose la metiamida. en la que el pKa del imidazol pasa a 6,80, el mismo que el del
imidazol [los efectos donantes de electrones del metilo en 4(5) y atrayentes de electrones del alquiltiometilo en
5(4) se compensan y anulan]. La consecuencia de ambos efectos es el aumento y la disminución de la densidad
electrónica que se producen en los nitrógenos N-1 y N-3 de la metiamida, en comparación con la burinamida. lo
que facilita la disociación del protón N(3)-H en el catión y la presencia predominante en la forma neutra del tau
tómero N’-H. Sin embargo, añadir un metilo en la misma posición de la burinamida [5(4)-metilburinamida|, que
produce un aumento de pK, a 7.80 y un 72 % de forma ionizada, no conduce a un aumento de actividad. El meti
lo sobre el imidazol de la metiamida debe también favorecer una conformación de la cadena lateral propia de los
antagonistas. El isóstero oxigenado de la burinamida (oxahurinamida). con un poder atrayente de electrones se
mejante al del azufre, es menos activo, quizás porque no tiene la misma flexibilidad que la cadena con azufre (el
enlace C-S es más largo que los grupos -CH:- u -O-). Además, el oxígeno es más básico y más hidrófilo que el
azufre, y puede formar enlaces de hidrógeno con el receptor o con el grupo NH del imidazol.
Oxaburinamida
Figura 16.17. Burinamida. liaburinamida. metiamida y análogos.
Los efectos secundarios de la metiamida (lesión renal y granulocitopenias) impidieron su empleo en tera
péutica, por lo que se buscaron análogos carentes del agolpamiento de tiourea. al que se responsabilizó de di
chos efectos. Para ello, se utilizaron urea y guanidina, observándose en estos últimos una actividad antagonista
débil, pero no una actividad agonista parcial, como en el caso de los derivados trimctilénicos, lo que se relacio
nó con la mayor longitud de la cadena (Fig. 16.18).
Figura 16.18. Guanidinas con tres y cuatro eslabones en la cadena.

Dada su menor actividad antagonista, se planeó la manipulación de la porción de guanidina a un derivado

que no fuese básico, para que no se protonara a pH fisiológico. La nitroguanidina y la cianoguanidina poseen
valores de pK„ de 0,9 y 0,4, respectivamente, muy semejantes al de la tiourea (-1,2). Ambos se sintetizaron y
mostraron una actividad semejante a la metiamida. El cianoderivado fue el más activo y el que se desarrolló,
originando la cimetidina, que se comercializó en 1976. Fue el fármaco más recetado hasta que en 1981 fue des
plazado al segundo lugar por ranitidina (Fig. 16.25). Está claro que la cianoguanidina es un grupo bioisóstero de
la tiourea. De las tres formas tautómeras posibles (I-III, Fig. 16.19), la II es la más favorecida, ya que el grupo
ciano debe hacer menos básico, por efecto inductivo, al nitrógeno contiguo, que tenderá a estar menos protona-
do que los otros dos. Los grupos tiourea y cianoguanidina son muy semejantes: no están ionizados a pH 7,4, tie
nen un sistema plano de electrones n con distancias y ángulos análogos, un momento dipolar grande y un coefi
ciente de reparto pequeño.
Imino
Amino ZCN \ ZCN
N N
i
ZC4 zcs ZCX
RNZ NHMe RHN NHMc RHN sNMe
III
Conformación
favorecida
Figura 16.19. Formas tautómeras de la porción de cianoguanidina de la histamina.
Si, verdaderamente, la interacción de la porción de cianoguanidina de la cimetidina con el receptor es de

tipo de enlace de hidrógeno bidentado, la conformación que debería adoptar es la 4. Sin embargo, estudios de
rayos X y de resonancia magnética indican que las conformaciones favorecidas son la 1 y la 3, ya que en la 4
existe una interacción estérica desfavorable entre el grupo ciano y el N-metilo que en la 3 está próximo al susti
tuyeme R. Los enlaces C-N son parcialmente dobles por la conjugación (Fig. 16.20).
Desfavorecidas por interacciones esféricas
Figura 16.20. Conformaciones del grupo cianoguanidina en la cimetidina.
Si la conformación 4 no está presente y ios confórmeros 1 y 3 no pueden enlazarse a un único grupo car-
boxilato, es que quizás se enlacen a dos grupos aceptores de hidrógeno distintos (Fig. 16.21).
^///Recépíór/^/X
Figura 16.21. Unión del confórmen) 3 a un grupo cárboxilato o a dos aceptores de hidrógeno diferenlcs.
Si esto es así, sería mejor disponer de estructuras con esa conformación restringida, como es el caso de los
análogos rígidos derivados del nitropirrol o de la isocitosina (Fig. 16.22). La introducción de grupos hidrófobos
en ésta (véase la oxmetidina) aumenta la actividad antagonista H¡. lo que está de acuerdo con la ecuación [2],
Otros análogos cíclicos poseen una subestructura de imidazolinona.
log actividad = 2.0 log P + 7.4
Oxmetidina
Figura 16.22. Análogos con conformación rígida (cíclicos) de la porción cianoguanidina de la cimetidina.
También se estudiaron otros grupos bioisósteros de la cianoguanidina, entre los que destacan los aminales
de nilrocetenas. Los aminales de cetena (Fig. 16.23, X = H. R) no son bioisósteros, porque en ellos predomina
el tautómero de tipo amidina, pero la presencia de un grupo nitro muy atrayente de electrones favorece el tautó-
mcro bioisóstero de cianoguanidina.
H X H X CFLX CH,X
C C ' •
11 11 <
C „CX RN NHMe RNH " NMe
" RNH NHMe
O Amidina Amidina
Cetena Antinal de cetena (X = NO;)
(Bioisóstero de cianoguanidina)
Figura 16.23. Aminales de nitrocetena como grupos bioisósteros de cianoguanidina.

Al comparar la actividad antagonista H, de estos análogos de cimetidina, se comprobó que, más que el va
lor del momento dipolar (jl) de estos grupos bioisósteros, tenía importancia su orientación (véase el vector en la
Fig. 16.24). El valor óptimo del ángulo formado por el momento dipolar y el enlace N-R ($) se calculó en
unos 30", de acuerdo con la ecuación [3], siendo 0 la desviación del valor <¡) óptimo (30").
log A = 9,12 eos 0 + 0,6 log P - 2,71
Figura 16.24. Momentos dipolares y ángulos 0 de varios bioisósteros de la cianoguanidina.
Si 0 es 0", su coseno es 1 y su actividad antagonista será máxima. Cuanto más se desvíe 0 de 0°. su cose
no será menor, y también su actividad biológica.
2.5.2. Variaciones en el anillo de imidazol. Ranitidina, famotidina, nizatidina y otros
En 1981, la ranitidina, un derivado no imidazólico descubierto por los laboratorios Glaxo, desplazó a la cimeti
dina. especialmente después de la alarma surgida acerca de la posible formación, en tratamientos prolongados,
de A-nitrosoderivados de cimetidina con acción carcinógena. La ranitidina no posee un anillo imidazólico, sino
uno furánico con un sustituyeme dimetilamino en la posición 5. Las sustituciones en este anillo apoyan el hecho
de que los heterociclos imidazol de la cimetidina y furano de ranitidina interactúan con el receptor de diferente
manera. Por lo demás, la ranitidina posee la cadena de la cimetidina y un grupo aminal de nitrocetena como gru
po bioisóstero de la cianoguanidina. Entre 1985 y 1987, se comercializaron nuevos antagonistas H:. entre los
que se encuentran la famotidina, la nizatidina y la roxatidina, pero la ranitidina sigue siendo el más utilizado
(Fig. 16.25). La famotidina posee un grupo sulfamoilamidina en la cadena lateral, que puede reemplazarse por
otros grupos planos polares y capaces de enlazarse por enlaces de hidrógeno. La nizatidina, de los laboratorios
Lilly, posee de nuevo la subestructura de aminal de nitrocetena pero, al igual que la famotidina. tiene un anillo
de tiazol en vez del imidazol (cimetidina) o cl furano (ranitidina). En un intento de encontrar antihistamínicos
de mayor duración de acción, se diseñaron análogos de la ranitidina, como la roxatidina, en la que el oxígeno
del furano se ha desplazado fuera de un benceno (que sustituye al furano) y el grupo dimetilaminometilo se ha
sustituido por piperidinometilo. Una vez absorbida, se convierte, por la acción de esterasas. en su metabolito ac
tivo: desacetilroxatidina.
SO2NH2
N
II
ch,sch2ch,-c-nh.
Ranitidina
Famotidina
CHNO,
II
CH2SCH2CH2—NH—C -NHMe
S.,N
Nizatidina
CH2NMe2
Figura 16.25. Ranitidina y otros antagonistas H2.
Así pues, entre los antagonistas H2 se incluyen compuestos con una cadena puente flexible que une un
anillo aromático a un agolpamiento polar con capacidad para formar enlaces de hidrógeno. Se tienen así imida
zoles como la cimetidina, tiazoles como la nizatidina y la famotidina, dimetilaminofuranos como la ranitidina, y
piperidinometilfenoxi derivados. En ellos, los agolpamientos de tipo isocitosina polares originan antagonistas
H2 muy potentes, como la lupitidina y la donetidina (Fig. 16.26). Lo mismo sucede cuando esta subestructura se
sustituye por otra de 3,4-diamino-l,2.5-tiadiazol-I-óxido. El agolpamiento 3(piperidinometil)fenoxipropilo da
lugar a compuestos más activos que la ranitidina. como la roxatidina, la lamtidina y la zolantidina. Este último
puede atravesar la barrera hematoencefálica y permite el estudio de las funciones fisiológicas que tienen los re
ceptores H2 en el encéfalo.
Derivados de ranitidina con

un grupo 3.4-diamino-1,2,5-
-tiadiazol-1-óxido
Lamtidina
Zolanlidina
Derivados de ranitidina con
agolpamientos de isocitosina
Derivados de roxatidina con
otros grupos polares
Figura 16.26. Nuevos antagonistas H2 con anillos aromáticos y grupos polares separados por una cadena flexible.
Como vemos, los antagonistas 1L son muy diversos desde el punto de vista estructural, pero la mayor
parte tiene en común, al menos, un sistema aromático o heterocíclico y un sistema polar plano de electrones n
unidos por una cadena lipófila de cuatro átomos. Con respecto al heterociclo, pueden dividirse en cuatro gru
pos: imidazol (cimetidina), aminometilfurano (ranitidina), guanidinotiazol (famotidina) y piperidinometil-
fenoxi (roxatidina). Todos son capaces de situar el grupo polar plano terminal y la porción hidrófoba central en
la misma disposición, pero no es posible superponer los nitrógenos de los diferentes heterociclos. En todos los
antagonistas H2 que no poseen un sistema de guanidinotiazol como heterociclo. su nitrógeno protonable puede
superponerse con el de la cadena lateral de la histamina y debe interactuar con un lugar aniónico del receptor
por enlace iónico. De los dos átomos de nitrógeno imidazólicos de la histamina, los nitrógenos rt y x deben en
lazarse por enlaces de hidrógeno con un donador y un aceptor de hidrógeno, respectivamente. Si se superpo
nen la famotidina (con una porción de guanidinotiazol) y la cimetidina (con una porción de imidazol) con la
histamina, de forma que sus potenciales electrostáticos moleculares sean lo más semejantes posible, puede
observarse que, en la primera, dos nitrógenos de la guanidina se corresponden con los nitrógenos x y rt de la
histamina, mientras que la cimetidina no puede situar al mismo tiempo en las posiciones adecuadas su grupo
polar terminal y los lugares de enlace de H del imidazol anteriormente citados, lo que puede explicar su menor
actividad.
2.5.3. Comparación entre los antagonistas H, y H?
Los antagonistas Hi poseen un grupo amino básico protonado al final de una cadena flexible y dos anillos arilo
o heteroarilo en lugar del anillo de imidazol. Por ello, son hidrófobos y tienen coeficientes de reparto grandes
(Fig. 16.27). En contraposición, los antagonistas H2 son polares, con grandes momentos dipolares y coeficientes
de reparto bajos. Tienen, al final de la cadena, un grupo plano de electrones n que no está ionizado a pl I 7.4. El
anillo heterocíclico generalmente contiene un nitrógeno y. si no. posee un sustituyente nitrogenado en otra ca
dena lateral.
Ar’x ,
X-CH.-CH.-NHRR'
Ar ' R = H, CH.NR,
X = S, CH2
Antagonistas Hj Y = S, NCÑ,CHNO2
Z = CH, N. O. S
Antagonistas H2
Figura 16.27. Comparación entre antagonistas y H..
2.5.4. Agonistas y antagonistas de receptores H3
Los agonistas de estos receptores en el SNC podrían utilizarse como hipnóticos o antimigrañosos (por su acción
antiinflamatoria) y. a nivel periférico, como protectores de disfunciones cardíacas y arritmias producidas por is
quemia miocárdica o por hipertensión. Sus antagonistas (véase tioperamida. Fig. 16.28) podrían ser útiles en el
aprendizaje y la epilepsia.
Agonista H3
Figura 16.28. Agonistas y antagonistas Hj.
3. RECEPTORES DE LA ADENOSINA Y SUS DERIVADOS FOSFORILADOS
La adenosina es un neurotransmisor inhibidor que. una vez liberado por un sistema dependiente del Ca2*, se re
capta o se desamina por la catálisis de la enzima adenosina desaminasa para dar inosina inactiva (Fig. 16.29).
Sus receptores (antiguamente denominados receptores P,) son de varios subtipos: ArA>. Los receptores Ai es
tán acoplados a proteínas G y. al activarse, inhiben la adenilciclasa. activan los canales de K' e inactivan los ca
nales de Ca2' de tipo N. Como resultado, se reduce la liberación de neurotransmisores, sean activadores o inhi
bidores. En conjunto, la acción es sedante, analgésica y neuroprotectora. En el corazón, se inhibe la actividad
contráctil, en el tejido adiposo son antilipolíticos, y en el riñón (al reducir la liberación de renina) antidiuréticos.
La activación de los receptores A, estimula la adenilciclasa. Sus agonistas son vasodilatadores y broncodilata-
dores. aunque en los asmáticos son broncoconstrictores porque actúan en los mastocitos estimulando la libera
ción de mediadores inflamatorios.
El dipiridamol. un inhibidor de la recaptación de la adenosina (véase el Capítulo 12. Fig. 12.54) es un va
sodilatador por su acción agonista indirecta sobre estos receptores. La teofilina es un antagonista débil y, al
Figura 16.29. Farmacocinética de la adenosina.

OISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMINA Y ADENOSINA 485
igual que otros análogos, se utiliza en el asma bronquial por este motivo (además de por su débil acción inhibi
dora de fosfodiesterasas. véase el Capítulo II, apartado 2.3).
Al parecer, los receptores A, y A>., presentan alta afinidad por la adenosina, mientras que los de los subti
pos Ai,, y A, tienen escasa afinidad y sólo se activan en situaciones de estrés extremo, traumatismo o isquemia.
Los agonistas A;, inhiben la actividad de la dopamina, por lo que compuestos que tengan dicha actividad y atra
viesen la BHE podrían desarrollarse como antipsicóticos.
Los antagonistas Aj. que actúen en el núcleo estriado aumentan la actividad de dopamina y podrían, posi
blemente, ser fármacos antiparkinsonianos.
Entre los diversos compuestos que se encuentran en fases de desarrollo clínico, citaremos la acadesina
(estimulante cardiaco útil para reducir los problemas coronarios tras la cirugía vascular. Fig. 16.30), el CVT-
124 (un antagonista A, que se estudia como diurético), el KW-6002 (un antagonista A2„ como antiparkinsonia-
no). el RPR-100579 (un agonista A;, para prevenir la isquemia de miocardio) y el GR-7936 (un agonista A,
que se estudia en el tratamiento del dolor).
RPR-100579 GR - 7936
Figura 16.30. Agonistas y antagonistas de receptores A en desarrollo clínico.
La introducción de un sustituyeme alquilo en el amino en C-6 de la purina, particularmente si está ramifi

cado en a, origina agonistas selectivos A, con efectos vasculares mínimos (compuestos 5-7, Fig. 16.31).
Los primeros antagonistas A, fueron derivados de la xantina (8 y 9), y después se han desarrollado mu
chos heterociclos (10-12).
La modificación en C-3' del agonista 5 dio 13. que es el antagonista más potente de esta serie.
Agonistas A|
Antagonistas A|
Figura 16.31. Agonistas y antagonistas selectivos de los receptores A|.
Los agonistas A2a suelen estar sustituidos en C-2 (14-16. Fig. 16.32), aunque también se conocen deriva
dos en C-6 (17). Entre los antagonistas A^, se encuentran muchos análogos de la xantina (18) y otros compues
tos (19).
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMINA Y ADENOSINA 4X7
Figura 16.32. Agonistas y antagonistas selectivos de los receptores A,..
La sustitución del grupo CFLOH de la ribosa por W-metilcarbamoil origina compuestos con actividad
agonista A> (20 y 21. Fig. 16.33). La sustitución por H,C=CH (22) también da compuestos activos. Se conocen
igualmente varias series de antagonistas A , (23-25).
Agonistas A3
Antagonistas A3
Figura 16.33. Agonistas y antagonistas selectivos de los receptores A..
Los agonistas indirectos de la adenosina pueden actuar inhibiendo las enzimas adenosina cinasa o adeno
sina desaminasa, o bien inhibiendo su transporte (Fig. 16.29). Así. el análogo de la coformicina 26 (véase el Ca-
pílulo 9) y algunos C-5'-desoxiaminonucleósidos, como 27. son inhibidores de la adenosina desaminasa. El

compuesto 28 es un potente inhibidor de la recaptación de adenosina (Fig. 16.34).
Figura 16.34. Agonistas indirectos de la adenosina.
Variaciones sistemáticas a partir de la adenosina, para desarrollar agonistas A. han permitido averiguar que.
en general, la variación de los hidroxilos en 2' y 3' elimina la acción agonista, mientras que el OH en C-5' puede
sustituirse por grupos carboxamida. lo que conduce a agonistas A-,, A,, o ambos. La disustitución en el grupo ami
no en C-6 es inapropiada, pero la monosustitución es muy buena (véase la Fig. 16.31). Esto sugiere que el grupo
NH en C-6 está implicado en una unión al receptor por un puente de hidrógeno. La esteroselectividad es muy im
portante. Así. el (R)-PIA (Fig. 16.35) es 40 veces más activo que su diastereoisómero con la configuración S en la
cadena 6-alquilamino. Si se introduce un cloro en C-2, se tienen agonistas A, más selectivos, mientras que si en di
cha posición se introducen aritos o alquilos (más grandes que el cloro), la selectividad se dirige a los receptores Aj,.
Figura 16.35. Agonistas de la adenosina por modificación sistemática del prototipo. (Actividades en mmol/L. desplaza
miento de radioligandos.)
Al contrario de lo que ocurre con los agonistas, se conocen muchas estructuras con actividad antagonista
de adenosina: xantinas, imidazopurinonas, 9-desazaxantinas. adeninas, 7-desazaadeninas y pirazolopiridimidi-
nas (Fig. 16.36). Lo único en común es la presencia de un anillo aromático nitrogenado, generalmente un siste
ma de (6+5) eslabones, que se une por una cadena lateral a otro anillo.
K¡(A|) = 29 K¡(A2a) = 38500
Figura 16.36. Antagonistas de receptores de adenosina (actividades en mmol/L; desplazamiento de radioligandos).
La introducción de un arilo o cicloalquilo en la posición C-8 de una xantina produce compuestos con más
afinidad y mayor selectividad como antagonistas Ai (Fig. 16.37).
Me
8-Ciclopentilteofilina
K¡(A|)=10,9
K,(A2a)= 1440
Figura 16.37. Derivados por sustitución en C-8 de xantinas antagonistas de receptores de adenosina (actividades en
mmol/L. desplazamiento de radioligandos).
Los sustituyentes propilo en N-l son muy buenos. Los sustituyentes butilo y bencilo se toleran en A,, pe
ro no en A;„ lo que conduce a antagonistas A, selectivos (Fig. 16.38). La introducción de sustituyentes en N-3
también es buena a favor de los receptores A,, pero no es tan importante como la anterior. La sustitución en N-7
disminuye la afinidad, pero algunos N(7)-mctil derivados son antagonistas A;.. Por ello, los antagonistas selec
tivos A, no deben estar sustituidos en esta posición. La sustitución en N-9 conduce a la eliminación de la activi
dad antagonista. Finalmente, mientras que puede sustituirse el grupo C(2)=O por C=S, no puede hacerse esta
sustitución en el carbonilo C(6)=O.
No puede sustituirse por C=S
Propilo, butilo y fenilo La sustitución disminuye la afinidad

Los antagonistas A । no deben
estar sustituidos en N-7
Sustituyentes alquilo o arilo

Puede sustituirse por C=S
Alquilo u otros grupos
Figura 16.38. Relaciones estructura-actividad en derivados de la xantina.
Dada la escasa hidrosolubilidad de las xantinas, otras modificaciones estructurales se han dirigido a la in
troducción de grupos que aumenten la hidroftlia. Entre éstos, la midaxifilina mantiene la selectividad A,. pero
es 100 veces menos activa que el derivado no aminado (Fig. 16.39).
K,(A|) = 26
K,(A2A) = 54600
Figura 16.39. Derivados de la xantina para aumentar la hidrosolubilidad (actividad en mmol/L, desplazamiento de radioli
gandos).
Se ha propuesto un modelo para explicar las interacciones con el receptor de agonistas (CPA) y antago
nistas (DPCPX) de receptores de la adenosina (Fig. 16.40).
N6-/C(8)-Sustituyemes
Figura 16.40. Modelo para explicar las interacciones con el receptor de agonistas (CPA) y antagonistas (DPCPX) de re
ceptores de la adenosina.
Entre los receptores de adenosina fosforilada en la posición C-5', se encuentran dos fármacos reciente
mente comercializados como antitrombóticos: la ticlopidina y el clopidogrel (Fig. 16.41). Aunque todavía se
discute su mecanismo de acción, estos fármacos son antagonistas no competitivos del receptor ADP (adenosina-
difosfato). De este antagonismo resulta la inhibición selectiva, dependiente de ADP. del receptor de glicoproteí
na GP-I Ib/IIIa en la membrana de los trombocitos y, en consecuencia, la inhibición de la unión del fibrinógeno
a estas células, por lo que no se forman trombos.
Cl
Ticlopidina
Figura 16.41. Agentes antitrombóticos antagonistas no competitivos de receptores ADP.
Este mecanismo es alternativo a la acción antitrombótica de la aspirina (un agente acilante de ciclooxige-
nasa que inhibe la síntesis de tromboxano A2; véase el Capítulo 11) o del dipiridamol (un inhibidor de la recap
tación de adenosina y de fosfodiesterasa, con lo que colabora a la acción inhibidora de la prostaciclina que a su
vez depende del AMPc; véanse los Capítulos 11 y 12).
Finalmente, los receptores de ATP (adenosina-5'-trifosfato) se denominan receptores P!x (Pjxi-P’xr) y Pav
(PjYrPrvr). Los primeros son receptores ligados a canales iónicos (sus agonistas activan canales de Ca"), mien
tras que los segundos están ligados a proteínas G y pueden generar gran número de respuestas.
El ATP es un activador que se libera en las terminaciones nerviosas junto con la noradrenalina y se con
vierte fácilmente en adenosina. que es un inhibidor. Su acción modula distintas funciones en el SNC, el sistema
inmunitario y la apoptosis (muerte celular estimulada por ATP). Por ello, algunas potenciales aplicaciones de
sus agonistas se dirigen a su aplicación como inhibidores del crecimiento tumoral.
4. PROFÁRMACOS DE ÓXIDO NÍTRICO
Él óxido nítrico, también denominado factor de relajación derivado del endotelio (EDRF. de endothelium deri
ved relaxing factor), es un neurotransmisor con una semivida de 3-5 segundos, que se produce en el metabolis
mo oxidativo de la arginina (véase el Capítulo 7).
Es un radical nitrosilo que, al actuar sobre sus dianas, de las cuales la más conocida es la guanilcicla-
sa. estimula la producción de GMPc (guanosil monofosfato cíclico). Éste activa una cinasa que produce la
disminución de Ca" y, en consecuencia, la relajación de la musculatura lisa (véase el sildenafilo, en el Ca
pítulo II). Sus profármacos, nitritos y nitratos, molsidomina y nitroprusiato, se utilizan como agentes an
tianginosos.
Los nitritos de etilo e isoamilo son ásteres volátiles del ácido nitroso de acción rápida y semivida corta,
que se emplean rara vez. administrándose por inhalación. Por la acción de la nitrato reductasa dependiente del
glutatión. los nitratos originan el correspondiente alcohol y el anión nitrito que. en medio ácido, se reduce al
radical denominado óxido nítrico (Fig. 16.42).
Tanto éste como los nitrosotioles formados en su reacción con grupos mercapto de moléculas del orga
nismo, producen la activación de la guanilciclasa anteriormente mencionada.
Nitrato reductasa «
R-O—NO2 ------------------------------ ► NO? + ROM
*/e
|2H
®Ñ=Ó® ■* ----- ► ¡Ñ=Ó + H,0
Óxido nítrico
h<Jrsh
RS—NO ----- ► Guanilciclasa
l
Vasodilatation
Figura 16.42. Bioactivación de los nitratos para dar NO.
El trinitrato de glicerilo (nitroglicerina) es un líquido que se administra en forma de cápsulas sublinguales

en la angina de pecho, y que tiene una acción muy rápida. También se administra en forma de apósitos y poma
das, ya que se absorbe bien a través de la piel. Otros nitratos se utilizan como formas de depósito, ya que liberan
NO más lentamente. Entre ellos se encuentran el tetranitrato de pentaeritritilo, el dinitrato de isosorbitol (ISDN)
y el 5-mononitrato de isosorbol (ISMN) (Fig. 16.43). Su semivida depende, tanto de su bioactivación reductora.
como de su hidrólisis; esta última se produce escalonadamente en el hígado. En el caso del ISDN, debido a que
el grupo nitrato en C-2 se sitúa en una conformación exo. mientras que el de la posición C-5 es endo. el metabo
lismo actúa preferentemente sobre el primero, esféricamente menos impedido. Por ello, en la actualidad se pre
fiere utilizar el 5-mononitrato, cuya semivida es más larga y controlada.
Nitraio de glicerilo
Dinitrato de isosorbitol 5-Mononitrato de

(ISDN) isosorbitol (isosorbol)
(ISMN)
Figura 16.43. Nitratos profármacos de NO.
La molsidomina y el nitroprusiato sódico son otros profármacos de NO. La primera es una forma mesoió-
nica de un heterociclo muy poco corriente. Su bioactivación se produce comenzando por la hidrólisis del grupo
carbamato, para dar etanol, dióxido de carbono y sidnonimina. Esta, por apertura espontánea, forma un /V-nitro-
sohidrazinoacetonitrilo que. finalmente, libera NO (Fig. 16.44).
DISEÑO UE FÁRMACOS QUE ACTÚAN SOBRE RECEPTORES DE HISTAMINA Y ADENOSINA 493
Figura 16.44. a) Molsidomina y nitroprusiato sódico, b) Bioactivación de la molsidomina.
En los últimos años, ha surgido la creencia de que la liberación selectiva de NO en determinados órga
nos o tejidos podría utilizarse para el tratamiento de una sorprendente diversidad de trastornos clínicos. Por
ejemplo, la acción vasodilatadora anteriormente comentada podría utilizarse para revertir los vasoespasmos
cerebrales, si se pudiera liberar NO en el lugar correspondiente.
Por sus propiedades antiadhesivas, estos profármacos pueden ser útiles para evitar la agregación pla-
quetaria y la reestenosis (engrasamiento de las paredes vasculares que se produce con frecuencia tras una an-
gioplastia, una frecuente intervención en la que se ensancha un vaso para restaurar el flujo sanguíneo). Tam
bién interviene en los mecanismos de respuesta inmunitaria específica, al ser responsable de la toxicidad que
ejercen los macrófagos contra organismos invasores, como las filarias, generando radicales hidroxilo (véase
el Capítulo 19). Al estar implicado en la muerte celular programada, los profármacos de NO selectivos, al
menos en teoría, podrían utilizarse en la quimioterapia antitumoral.
Si se administra un profármaco que genera NO espontáneamente en todo el cuerpo, se producirán, jun
to con el efecto local deseado, una serie de efectos no deseados. En ocasiones, un profármaco de dichas ca
racterísticas podría administrarse localmente. Por ejemplo, en el tratamiento de la disfunción eréctil, podría
inyectarse directamente en el pene un profármaco que tuviera una bioactivación muy rápida. Lo idóneo, sin
embargo, sería disponer de profármacos de NO que lo liberen selectivamente en el lugar deseado (véase el
Capítulo 8).
Desde hace años, se sabe que el óxido nítrico forma aducios con aminas. Algunos de estos aducios, los
llamados diazeniodiolatos o «NONOatos», generan NO espontáneamente en el organismo a velocidad variable
(desde una semivida de 2 segundos hasta 20 horas) (Fig. 16.45).
Figura 16.45. Estructuras de algunos diazeniodiolatos iónicos (profármacos no selectivos de NO).
Estos compuestos iónicos se han derivado a análogos covalentes más estables que. según la estructura del
grupo protector introducido, podrían quizás bioactivarse selectivamente en función del pH y las actividades en-
zimáticas que existan en los lugares de acción. Entre ellos, se encuentran el O-vinil derivado de PYRRO/NO
(un diazeniodiolato que. al pH y temperatura del organismo, tiene una vida de 3 segundos). Este profármaco (V-
PYRRO/NO) se ha diseñado para su bioactivación selectiva en el hígado, teniendo en cuenta la abundancia en
dicho órgano de citocromos P450, que catalizan la epoxidación del éter vindico (Fig. 16.46).
O
HOCH.CH
PYRRO/NO
Figura 16.46. Mecanismo propuesto para la bioactivación selectiva de V-PYRRO/NO en el hígado.

Esterasas
BrCH,OCOR pH 7,4
Síntesis Bioactivación
del profármaco del profármaco
Disolvente
orgánico
Figura 16.47. Mecanismo propuesto para la bioactivación selectiva catalizada por esterasas en derivados de PYRRO/NO
(RCO-O-metil-PYRRO/NO).
Otros profármacos selectivos derivados del mismo diazeniodiolato podrían ser O-aciloximetilén deriva
dos que se hidrolizaran selectivamente por esterasas específicas (Fig. 16.47).
BIBLIOGRAFÍA
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Roth, H. J., y Fenner. H.: Arzneistoffe, Deutscher Aptheker Verlag (DAV). 3.“ ed.. Stuttgart. 2000.
— Diseño de fármacos que interactúan
17---
con receptores intracelulares (I).
Receptores de hormonas esteroideas,
tiroideas y otros
1. INTRODUCCIÓN
Los receptores esteroideos intracelulares pertenecen a una superfamilia de receptores formada por más
de I0 proteínas, que se encuentran silentes en las células hasta que se activan en presencia de sus ligandos
para actuar como factores de transcripción genética. Su descubrimiento ha contribuido al esclarecimiento de
los mecanismos de acción de las hormonas lipófilas (esteroides. vitamina Di, ácido retinoico y hormonas ti
roideas) en los animales y el ser humano. A nivel molecular, este proceso depende de la asociación de los
complejos ligando-receptor con secuencias específicas de ADN que se llaman elementos de respuesta hor
monal (ERH).
Los receptores de hormonas y fármacos con estructura esteroidea pueden localizarse en la membrana, en
el citoplasma y en el núcleo. Los primeros son responsables del transporte al interior de la célula de grandes
moléculas. Son ejemplos el receptor lipoproteico de baja densidad, responsable del transporte del colesterol, o
las ATPasas Na'/K’. que son el lugar de acción de los esteroides cardíacos (véase el Capítulo 12).
Sin embargo, los receptores de las hormonas esteroideas que regulan la expresión genética son intracelu
lares. En el caso de las hormonas mineralocorticoides y glucocorticoides, dichos receptores se encuentran en el
citoplasma, donde se forma un complejo activado que posteriormente atraviesa la membrana nuclear. Las hor
monas sexuales (estrógenos, andrógenos y progestágenos) atraviesan previamente esta membrana, para después
enlazarse a sus receptores, que se encuentran en el núcleo.
Los complejos ligando-receptor así formados se encargan de transmitir su mensaje al ADN interactuando
con los elementos de respuesta esteroidea del ADN y. a través de los factores de transcripción y de la ARN poli-
merasa, se inicia la biosíntesis de los ARN mensajeros que, a su vez, regulan la biosíntesis de las proteínas (Fi
gura 17.1).
Se ha debatido mucho acerca de la función de los receptores esteroideos. Al parecer, son capaces por sí
solos de reconocer las secuencias de ADN reguladoras, y el papel de las hormonas consiste en acelerar este pro
ceso. Determinadas experiencias parecen confirmar que las propias hormonas son capaces de interactuar direc
tamente con el ADN.
Figura 17.1. Regulación de la expresión genética mediada por la interacción de las hormonas glucocorticoides
en sus receptores.
En las proteínas receptoras de hormonas esteroideas se distinguen varias regiones. La región C-terminal
contiene, aproximadamente, unos 250 aminoácidos y se conoce como HBD (del inglés, hormone-binding do
main), porque en ella se fijan las hormonas. Esta región se une, a través de una zona hidrófila de unos 50 a 70
aminoácidos, a otra región central que contiene unos 65 aminoácidos y se denomina DBD (del inglés, DNA-bin-
ding domain), porque a ella se fija el ADN. Por último, está la región A-terminal o NTD (del inglés, N-terminal
domain), que es intensamente inmunógena. La principal fuerza de unión entre las hormonas esteroideas y sus
receptores es la hidrófoba, y su especificidad viene determinada por otras interacciones electrostáticas y de van
der Waals, así como por la formación de enlaces de hidrógeno concretos en los que intervienen las funciones
oxigenadas en C-3 y C-17 (además de en C-l 1 para los glucocorticoides y mineralocorticoides). La estructura
«casi planar» de los esteroides facilita su entrada al canal hidrófobo de sus receptores, y su movilidad de con
formación aumenta las posibilidades de interacción. Cambios de conformación muy pequeños pueden ser cru
ciales para originar una afinidad específica para un receptor esteroideo determinado. Al parecer, sólo algunos
aminoácidos de estos receptores (o solo uno) hacen posible la unión correcta del complejo ligando-receptor con
el ADN para inducir la transcripción genética.
HO,C---------------------------------- 1-------- y \J V|-----------------------------------1 nh,

12 3 4
1. Región C-terminal de fijación de la honnona esteroidea (HBD)

2. Región hidrófila de unión entre la I y la 3
3. Región central de fijación de ADN (DBD)
4. Región /V-terminal. inmunógena (NTD).
Figura 17.2. Regiones diferenciadas en la estructura de los receptores de hormonas esteroideas.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE 1NTERACTÚAN CON RECEPTORES INTRACELULARES (l> 499
Las hormonas esteroideas naturales tienen un uso limitado como fármacos, debido a que no suelen ser ac
tivas por vía oral. En muchos casos, presentan además efectos secundarios que hay que eliminar. Los estudios
sobre las interacciones de ligandos y receptores tratan de determinar los lugares de fijación a través del modela
do molecular por comparación de estructuras tridimensionales. Además, al comparar ligandos de potencia o es
pecificidad diferentes, pueden establecerse los mecanismos de acción de las hormonas esteroideas y diseñarse
ligandos, que pueden ser fármacos potenciales útiles para compensar un fallo hormonal (agonistas) u oponerse a
una sobreproducción (antagonistas).
2. AGONISTAS Y ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES DE HORMONAS ESTEROIDEAS
En la Figura 17.3, se representan algunos de los agonistas naturales que interactúan con estos receptores.
Aldostcrona
Figura 17.3. Fórmulas estructurales de algunas hormonas esteroideas.
2.1. Hormonas sexuales
Los estrógenos y la progesterona son las hormonas sexuales femeninas, siendo la testosterona y su dihidroderi-
vado (DHT) las hormonas sexuales masculinas. Todas ellas se biosintetizan, en ambos sexos, a partir del coles-
terol procedente de la dieta o biosintetizado a partir de acetilcoenzima A (véase la Fig. 17.21).
2.1.1. Diseño de fármacos agonistas y antagonistas de estrógenos
Los estrógenos naturales se producen en gran cantidad en los ovarios y la placenta, cuando los primeros son es
timulados por la hormona foliculoestimulante. También se producen en pequeña cantidad en las glándulas su
prarrenales. y a nivel de trazas en los testículos. Promueven y regulan el ciclo sexual, o estro, de forma que sus
niveles se elevan hasta la mitad del ciclo, cuando se produce la ovulación, y disminuyen posteriormente si no
tiene lugar la fecundación del óvulo. También intervienen en el desarrollo de los caracteres sexuales femeninos,
influyen en el metabolismo del Ca2', estimulan la síntesis de los h'pidos y su déficit puede producir trastornos
psíquicos. Por ello, sus agonistas pueden utilizarse como tratamiento de sustitución en la menopausia, en la pre
vención de la osteoporosis posmenopáusica y, combinados con progestinas, como anovulatorios orales. El in
cremento de la concentración de estrógenos y de progesterona conduce a la inhibición de la ovulación, por inhi
bición de la producción en el hipotálamo o en la hipófisis anterior de la hormona liberadora de gonadotropina,

de la hormona luteinizante (HL) y de la hormona foliculoestimulante (HFE) (Fig. 17.4).
Retroacción Retroacción
negativa negativa
GnRH: hormona liberadora de gonadotropina

HL: hormona luteinizante
HFE: hormona foliculoestimulante
Figura 17.4. Representación esquemática de los procesos que regulan la ovulación.
En el Capítulo 11. se ha comentado que los estrógenos se biosintetizan a partir de andrógenos por la catá
lisis de una enzima del grupo de los citocromos P-450. denominada aromatasa, por lo que sus inhibidores son
antagonistas indirectos. El estradiol es la hormona que se anlaza al receptor de estrógenos, siendo la estrena y el
estriol (Fig. 17.5) metabolitos urinarios que poseen menor actividad. Las tres estructuras, como en general ocu-
Figura 17.5. Agonistas de estrógenos derivados de hormonas naturales.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES INTRACELULARES (I) 501
rre con los esferoides oxigenados en C-17, son poco activas por vía oral, ya que son metabolizadas por la flora
intestinal a compuestos inactivos hidrosolubles. Si se incorporan uno o dos carbonos en C-17, se tienen alcoho
les terciarios que no sufren el ataque enzimático y son activos por vía oral. Uno de estos derivados, el 17-etinil-
estradiol. es tan potente como el estradiol por vía parenteral, pero es 10-20 veces más activo por vía oral. Tam
bién se utilizan por vía oral derivados de tipo éter en la posición 3. Algunos ásteres derivados del estradiol se
han diseñado como formas de depósito, que se hidrolizan lentamente liberando estradiol, y se administran por
vía intramuscular en vehículos oleosos. La estrena, el estriol y sus análogos se obtenían antiguamente de la ori
na de hembras embarazadas. En la actualidad, se obtienen por semisíntesis en procesos complicados, por la ne
cesidad de aromatizar el anillo A (véase el Capítulo 25).
Existen estrógenos de síntesis no esteroideos que son más fáciles de sintetizar. Entre ellos, destaca el
dietilestilbestrol (DEE) y sus análogos, cuya actividad estrogénica se descubrió en 1937. Se ha propuesto que la
distancia entre los grupos hidroxilos en C-3 y C-17 del estradiol en su forma hidratada es la misma que entre los
dos hidroxilos fenólicos del dietilestilbestrol (Fig. 17.6). Apoya esta teoría el hecho de que sólo el isómero en
tro (meso) del hexestrol. que se origina en la reducción del dietilestilbestrol, es el diastereoisómero activo,
mientras que el isómero treo no lo es, debido a que (como indican las proyecciones de Newman) la repulsión de
los dos restos etilo hace girar el enlace C-C, situando los hidroxilos fenólicos en una disposición que no es la
apropiada para el enlace al receptor estrogénico.
Proyecciones de Newman del hexestrol
(Treo)
Conformación menos estable
(biológicamente inactivo)
Figura 17.6. Analogía entre el estradiol, el dietilestilbestrol y el diastereoisómero entro del hexestrol.
El dietilestilbestrol es teratógeno, pero pronto se observó que en estos derivados de estilbeno uno de los
sustituyentes alquílicos puede reemplazarse por un anillo aromático y el otro por un halógeno con retención de
la actividad biológica. Un representante de este tipo de estrógenos, actualmente considerados también peligro
sos, es el clorolrianiseno. Por su gran liposolubilidad, se almacena en los tejidos grasos del cuerpo y se libera
lentamente, al parecer, como uno de sus metabolites (Fig. 17.7).
Los antagonistas del receptor estrogénico han sido objeto de un intenso estudio, dirigido particularmente al
tratamiento de carcinomas de mama dependientes de estrógenos. Además, se utilizan en el tratamiento de la este
rilidad. debido a que el bloqueo de la inhibición por retroacción de la ovulación que producen los estrógenos in
duce la ovulación. Es frecuente que. cuando se utilizan para este propósito en mujeres estériles por falta de ovu
lación. se produzcan embarazos múltiples. Los primeros antiestrógenos se encontraron en derivados del estradiol
sustituidos en C-7, pero su biodisponibilidad era escasa. Las estructuras de algunos antiestrógenos corresponden
a derivados de 1.1,2-trifenileteno por alquilación de un grupo fenólico con un sustituyeme dialquilaminoalquilo,
como es el caso del clomifeno. el tamoxifeno y el toremifeno.
OCH’ Clomifeno Tamoxifeno (R = H)

Torcmifeno (R = Cl)
Clorotrianiseno
Agonista Antagonistas
Figura 17.7. Agonistas y antagonistas estrogénicos derivados de 1,1,2-trifenileleno.
Recientemente, la investigación en el campo de los estrógenos se ha dirigido también hacia el tratamiento

paliativo de la osteoporosis, que se agudiza en las mujeres posmenopáusicas por la falta de estrógenos. Estos
tratamientos son alternativos al uso de la calcitonina y los bis-fosfonatos.
A este respecto hay que mencionar que existen varios tipos de receptores de estrógenos (RE). El tipo REa
se encuentra en la mama y el útero y, en menor número, en otras células, mientras que en las células óseas se en
cuentra el tipo REp. El tratamiento de sustitución con estrógenos reduce la pérdida de hueso y los problemas
coronarios, pero no hay que olvidar que los estrógenos pueden inducir tumores, fundamentalmente en el endo-
metrio y la mama. Por ello, se trata de buscar compuestos que sean selectivos: activos en tejidos no reproduc
tores, e inactivos o antagonistas en el endometrio y la mama. La tibolona, por ejemplo (Fig. 17.8), se ha utiliza
do por vía oral y en forma de parches transdérmicos con este fin, aunque a largo plazo puede producir
hipertrofia del endometrio. Es importante destacar que este esteroide no responde a la estructura clásica de los
estrógenos con anillo A aromático. Algunos compuestos sintéticos análogos del tamoxifeno, que están siendo
evaluados para la prevención o el tratamiento del cáncer de mama (como el draloxifeno, el idoxifeno y el
GW5638). protegen de la pérdida de hueso en modelos animales y parecen prometedores para el tratamiento de
los trastornos posmenopáusicos.
CO,H
Tibolona
Droloxifeno (R - Me; X = 3-OH) GW5638

Idoxifeno (R = (CH,)4; X = 4-1)
Figura. 17.8. Agentes reguladores de receptores estrogénicos de interés en la prevención de la osteoporosis.
Otras familias de compuestos sintéticos útiles en el tratamiento de la osteoporosis por tratamiento de

sustitución comprenden derivados de benzotiofeno, como el raloxifeno (comercializado por los laboratorios
Lilly con el nombre de Evista) y su análogo LY353381 (Fig. 17.9), de dihidronaftaleno (nafoxidina) y de
benzopirano (levormeloxifcno). Estos esqueletos son miméticos de trifenileteno, cuyos derivados se estudia
ron con anterioridad. El raloxifeno. que se estudió en un principio para el tratamiento del cáncer de mama, y
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES 1NTRACELULARES (1) 503
el LY353381 son antagonistas de los receptores de estrógenos en la mama y el útero, y agonistas en receptores
de otros tejidos.
Nafoxidina Levormcloxifeno
Figura 17.9. Reguladores de receptores estrogénicos derivados del benzotiofeno, dihidronaftaleno y dihidrobenzopirano.
La estrategia de la incorporación del resto de estilbeno de un trifenileteno en un sistema bicíclico de ben

zotiofeno, dihidronaftaleno o benzopirano. conduce a derivados más rígidos, en los que la cadena lateral básica
se dispone casi ortogonal a estos anillos, mientras que en el tamoxifeno dicha cadena es coplanar al estilbeno.
Esta diferencia espacial puede justificar la selectividad que se encuentra en los derivados cíclicos que estamos
considerando. Además, el metabolismo de estos compuestos es menos problemático que el de los derivados de
trifenileteno. El tamoxifeno produce cáncer de hígado en ratas tras largos períodos de administración, debido a
la formación de aductos con el ADN tras su activación rnetabólica por citocromos P-450. Se ha propuesto que la
oxidación se produce en la posición alílica, y este alcohol origina un intermedio catiónico que se une al ADN
(Fig. 17.10). En el caso del toremifeno. el átomo de cloro contiguo a la posición alílica (R = Cl) desestabiza el
catión en dicha posición, por lo que no se activa tan fácilmente y no es cancerígeno.
Ñu = ADN
Aducto
/XDN-tamoxifcno
Figura 17.10. Formación de aductos entre metabolites del tamoxifeno y ADN.

De forma semejante, cuando se estudió el derivado de dihidronaftaleno. nafoxidina, como candidato para
el tratamiento del cáncer de mama, se observó un efecto beneficioso en los niveles de colesterol y en la descal
cificación; su análogo trioxifeno (Fig. 17.11) es comparable. Sin embargo, ambos fármacos tienen actividad
agonista parcial en los receptores de estrógenos del útero. El derivado tetrahidrogenado CP336.I56 mantiene
los dos primeros efectos y carece de efectos en el útero, por lo que actualmente se encuentra en desarrollo clíni
co. Su mejor biodisponibilidad se debe a que. al ser menos coplanar, el hidroxilo fenólico forma glucurónidos
con más dificultad que en el caso de los dihidroderivados.
Trioxifeno
Figura 17.11. Otros reguladores de receptores de estrógenos derivados de dihidronaftaleno y tetralina.
Dentro de la serie de los benzopiranos. cl levormeloxifeno (isómero levógiro del ormeloxifeno) se en
cuentra en ensayos clínicos. Su análogo EM800 (Fig. 17.12) es, también, antagonista de receptores estrogénicos
en el útero y agonista en otros tejidos.
Figura 17.12. Otros reguladores de receptores estrogénicos derivados de benzopirano.
Los análogos de EM800 en los que se ha restringido todavía más la conformación, enlazando el anillo de
pirano con el fenilo en C-3 mediante un heteroátomo (O, S) o un grupo vinileno (Fig. 17.13). presentan un per
fil todavía más optimizado como reguladores de los receptores estrogénicos. Estos compuestos mantienen la
disposición ortogonal de la cadena lateral respecto al plano del «estilbeno» y son muy semejantes al estradiol.
X = 0. S,-CH=CH-
R' = R2 = OH
R1 = OH; R2 = H
R2=H;R' = OH
Figura 17.13. Reguladores de receptores estrogénicos derivados de benzopirano con conformación restringida.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES INTRACELULARES (l> 505
En ciertos países, se utiliza para el tratamiento de la osteoporosis un derivado de isoflavona denominado

iprillavona (Fig. 17.14). Basados en su estructura, se están estudiando derivados de 2-benzotiopirano y 3-ben-
zotiepina, cuyo mecanismo de acción de debe al aumento de actividad de la fosfatasa alcalina, y no a la regula
ción de receptores de estrógenos.
O
Ipriflavona n = 0; 2-Benzotiapiranos
n = I; 3-Benzotiepinas
Figura 17.14. Otros fármacos útiles en la osteoporosis.
2.1.2. Diseño de fármacos agonistas y antagonistas de receptores de progesterona.

Progestágenos o progestinas
Los progestágenos son compuestos con una actividad similar a la de la progesterona. que es una hormona esen
cial para el mantenimiento del embarazo. Se produce, en su mayor parte, en el cuerpo lúteo del ovario y. poste
riormente. en la placenta.
A través del mecanismo de inhibición por retroacción indicado en la Figura I7.4. inhibe la ovulación y
detiene el movimiento uterino cuando existe embarazo. Si no, los niveles de progesterona y estrógenos dismi
nuyen. y se produce la pérdida del endometrio con el óvulo no fecundado. Los bajos niveles de esteroides esti
mulan entonces la secreción endocrina hipotálamo hipofisaria, y comienza de nuevo el ciclo menstrual.
La progesterona y los fármacos denominados progestinas o progestágenos. al ser agonistas del receptor de
la progesterona. se utilizan en el tratamiento de los abortos espontáneos y de trastornos menstruales, pero su
principal interés radica en su efecto antifertilizante.
La progesterona no puede administrarse por vía oral a causa de la ruptura mctabólica de la cadena la
teral en C-I7, por lo que es necesario administrarla por vía parenteral en excipientes oleosos o en suspen
siones acuosas de microcristales que producen dolor.
Foresta razón, se han preparado muchos derivados semisintéticos con estructura de I7a-alquilderiva-
dos o de esteres de 17a-hidroxiprogesterona. que son activos por vía oral (demegestona. promegestona.
acetatos de clormadinona. medroxiprogesterona. ciproterona, megestrol y nomegestrol. Fig. 17.15).
Los análogos con sustituyentes hidrófilos, como ocurre con la I7a-hidroxiprogesterona. no presentan
actividad progestágena, lo que indica que el sustituyente en dicha posición debe acomodarse en una zona hi
drófoba del receptor.
La introducción de un doble enlace, un grupo metilo o un átomo de cloro en C-6 aumenta la actividad
por vía oral, aunque en algún caso se originan compuestos androgénicos.
Mientras que la subestruelura 4-en-3-ona del anillo A de la progesterona es esencial para su actividad, el
grupo carbonilo CM=O no lo es.
Incluso el cambio de la cadena en C-17 a la posición a no altera su actividad.
Por ello, se han desarrollado progestinas activas por vía oral y de semivida más larga, a partir de la testos-
terona y la 19-nortestosterona. por introducción de grupos alquilo (generalmente etinilo) en la posición 17-a
(Fig. 17.16). En ellas, la sustitución del metilo C-18 por etilo aumenta la actividad (norgestrel).
Los derivados de la 19-nortestosterona inhiben la ovulación sin que se produzca en paralelo una actividad
progestágena (la proliferación del endometrio), pero pueden tener efectos secundarios androgénicos y anaboli-
zantes (véase la metandroiona y la noretandrolona en el Apartado 2.1.3).
Coproato de
17a-hidrox i progesterona
Acetato de nomegestrol
Acetato de ciprotcrona
(androgénico)
R = CH?, demegestona
Acetato de
Acetato de clormadinona R = C2H?, promegestona
medroxiprogesterona
Figura 17.15. Progestinas análogas a la progesterona.
Es curioso que la introducción de un grupo etinilo en derivados de testosterona haya sido el punto de par
tida para el desarrollo de los agentes antifertilidad orales (la principal aplicación de las progestinas). Por el con
trario, los derivados de 17a-acetoxiprogestcrona se usan como ant¡andrógenos, lo que ilustra las sutiles diferen
cias entre el enlace al receptor de la progesterona y el de la testosterona. Se ha propuesto que los primeros
interactúan con el receptor de progesterona. además de por asociaciones hidrófobas, con la participación del
carbonilo en C-3 y el oxígeno en C-17.
El uso de las progestinas como anticonceptivos orales se justifica si se considera que, durante el embara
zo (en el que existen altos niveles de progesterona), no se ovula. por lo que es lógico pensar que los progestáge-
nos sean anovulatorios. Experimcntalmente, se comprobó que la combinación de un estrógeno y un progestáge-
no es más eficaz en este sentido y. debido a que mantener a una mujer sin un estado menstrual es
desaconsejable, la práctica casi universal consiste en administrar los anticonceptivos durante 20-21 días, produ
ciéndose a continuación la menstruación. Existen distintas pautas, como la combinatoria, que consiste en la ad
ministración de mestranol o etinilestradiol como estrógenos (en dosis muy pequeñas) y norctislerona o norges
trel como progestinas (en dosis mayores). La pauta secuencia! consiste en la administración de estrógenos solos
durante los primeros quince días, seguido de cinco dosis combinadas de estrógenos-progestinas. También pue
den administrarse exclusivamente progestinas como inyecciones de depósito, siendo levonorgestrel (forma le
vógira del norgestrel) el principio activo de la píldora poscoital, que se administra en dos dosis por vía oral.
Además de utilizarse como anticonceptivos orales, las progestinas tienen varias aplicaciones por su potencia an-
tiestrogénica, que se opone a los efectos de la continua impregnación de estrógenos en el endometrio (insu
ficiencia lútea y endometriosis).
Figura 17.16. Progestinas derivadas de la testosterona y la 19-nortestosterona.
Ya se ha comentado que las progestinas poseen cierta afinidad por el receptor androgénico y pueden pro
ducir efectos andrógenos. Los complejos formados por las progestinas derivadas del pregnano y el receptor an
drogénico se caracterizan por su escasa afinidad relativa (se disocian rápidamente), lo que se asocia con su acti
vidad antiandrógena y, a veces, se utilizan en el hirsutismo. el acné y el cáncer de próstata. Por el contrario, los
complejos que forman los derivados de testosterona, nocretisterona. norgestrienona. gestrinona. norgestrel y da-
nazol (un fármaco que. además de actuar como agonista del receptor de progesterona. es un inhibidor enzimáti-
co que interfiere la biosíntesis de estradiol, progesterona. testosterona y glucocorticoides) son mucho más esta
bles. lo que se asocia a su actividad androgénica. Algunas progestinas también pueden interactuar con el
receptor glucocorticoide. Las propiedades sedantes de la progesterona y los cambios de comportamiento asocia
dos a las progestinas se relacionan con su enlace a este último receptor.
Las antiprogestinas antagonizan los efectos de la progestcrona y pueden aplicarse para evitar cesáreas
(por la dilatación del cuello uterino que producen), así como en el tratamiento de tumores dependientes de la
progesterona. Varias antiprogestinas, como RU38486 (mifepristona) y onapristona (Fig. 17.17). son 19-noreste-
roides sustituidos en C-11 p. En su desarrollo, es importante disociar la actividad antagonista de progesterona de
la antagonista de cortisol, que a veces poseen (véase más adelante).
CH,
I
Figura 17.17. Antiprogestinas.
Debido a la capacidad que. como se ha ido viendo, poseen las progestinas para interactuar con diversos
receptores esteroideos y no esteroideos (como GABA y glicina), están en estudio otras estructuras no esteroides,
entre las que destacan ciertos derivados de 1,2-dihidroquinolina que son potentes agonistas (compuestos 1 y 2
de la Figura 17.18) o antagonistas (3) del receptor de progesterona.
Figura 17.18. Progcstágenos y antiprogestinas no esteroides.
2.1.3. Diseño de fármacos agonistas y antagonistas androgénicos
Los esteroides circulantes en Cl9 se secretan en los testículos, en el ovario y en las glándulas suprarrenales, y a
partir de ellos se originan los andrógenos. La testosterona (T, Fig. 17.19) se biosintetiza en los testículos y se
reduce a 4,5a-dihidrotestosterona (FIT), que es un metabolito con mayor afinidad para unirse a los receptores an
drogénicos (RA). Éstos son factores de transcripción que deben alterar su conformación tras la interacción
T-RA o HT-RA. como un primer paso para la regulación de la transcripción genética. De dicha interacción deri
van dos importantes efectos: el androgénico. que promueve las características físicas masculinas (producción de
esperma y crecimiento de los órganos sexuales, próstata y vesícula seminal), y cl anabólico, que produce la reten
ción de nitrógeno mediante la estimulación de la síntesis de proteínas durante el crecimiento. En el Capítulo 11,
se han comentado algunos fármacos que actúan como antagonistas androgénicos indirectos, ya que inhiben enzi
mas que intervienen en la biosíntesis de las hormonas naturales. Aquí se comentarán brevemente los que actúan
como ligandos RA. Para que tenga lugar un enlace eficaz con estos receptores, son importantes las funciones oxi
genadas en las posiciones 3 y 17. siendo óptima en los 17p-hidroxi-3-oxo-derivados. Otros análogos con estruc
tura de androstanodioles. androstenodioles. androstanodionas o 5a-androstan-3-onas. presentan menor afinidad.
Estos compuestos pueden enlazarse también a receptores de glucocorticoides actuando como antagonistas.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE 1NTERACTÚAN CON RECEPTORES 1NTRACELULARES (I) 509
H
R = H. Testosterona 17a-Metil-testostcrona
R = CO - (CH2)5- CH 3, Enantato de testosterona 4.5a-Dihidrotestostcrona
(andrógeno activo)
Tricnbolona R = CH i. Bolasterona
R = H, Nandrolona
R = CH,. Normctandrolona
R = C2 H5. Noretandrolona
Figura 17.19. Andrógenos y agentes anabolizantes.
Las hormonas naturales, testosterona y 4,5a-dihidrotestosterona. administradas por vía oral o parenteral,
se degradan con rapidez. La esterificación del hidroxilo en C-170. como en el enantato de testosterona, origina
compuestos solubles en lípidos que se administran por vía parenteral como formas de depósito. La semivida de
la T y la HT puede prolongarse por introducción de un grupo metilo o etilo en C-I7a. Así, la 17a-metiltestoste-
rona es activa por vía oral y su 9a-flúor-l 10-hidroxiderivado (fluoximesterona) es mucho más activo.
Por eliminación del metilo en C-19, se tienen compuestos como la nandrolona. Este fármaco y sus 17a-al-
quil derivados, normetandrolona y noretandrolona, tienen mayor actividad como anabolizantes que como com
puestos androgénicos. Dada su similitud estructural con los 19-noresteroides con actividad de progestinas (véase
noretinodrel y noretindrona), no es de extrañar que los 19-noresteroides utilizados como anabolizantes se enlacen,
además, al receptor de progesterona. Con la introducción de dobles enlaces conjugados (trienbolona), la mediación
en C-7 (7a-metil-19-nortestosterona) o la sustitución por oxígeno del C-2 (oxandrolona). se alcanza un aumento
de actividad anabólica, aunque la actividad androgénica que retienen sigue limitando su aplicación en las mujeres.
La mayor parte de los agonistas androgénicos se han desarrollado en tratamientos de sustitución en casos
de hipogonadismo en el varón. También se han utilizado en algunas formas de cáncer de mama, debido posible
mente a su efecto antiestrógeno. Los tratamientos con anabolizantes pueden tener interés en ciertos estados de
cáncer, inmovilización, etc., si bien se han utilizado también, a pesar de las prohibiciones, para el desarrollo
muscular de los deportistas. La testolactona, quizás por no ser un verdadero esteroide, no tiene actividad andro
génica, utilizándose como fármaco paliativo en el cáncer de mama. Son interesantes como anabolizantes la me-
tandrostenolona y el estanozolol. El danazol, sin actividad androgénica, se utiliza en ciertos cánceres de mama,
al igual que el propionato de 2p-metiltestosterona. Obsérvese que el estanozolol y el danazol poseen un anillo
de pirazol o isoxazol fusionado al anillo A.
Los antiandrógenos son antagonistas competitivos de los receptores androgénicos que se han desarrollado
mucho dada la incidencia de la hiperplasia benigna y del cáncer de próstata estimulado por andrógenos. También se
han investigado por su posible aplicación en la contraccpción masculina. Se ha puesto un gran énfasis en el diseño de
antagonistas no esteroideos, como la flutamida (eulexina), la bicalutamida y la nilutamida (anandrón) (Fig. 17.20).
Entre los que poseen estructura esteroidea. se encuentran el acetato de ciproterona (androcur) y la osaterona.
FjC Flutamida
Bicalutamida
Figura 17.20. Antagonistas del receptor androgénico.
2.2. Hormonas de la corteza suprarrenal
La glándula suprarrenal, situada sobre el riñón, tiene una parte interna, o médula, donde se biosintetizan las ca-
tecolaminas. y una externa, o corteza, donde se produce la biosíntesis de los esteroides regulada por los péptidos
hipotalámico-hipofisarios. El hipotálamo secreta el factor liberador de corticotropina (FLC) que. a través de la
regulación por retroacción de las hormonas esteroideas y el control del sistema nervioso central, regula la libe
ración de adrenocorticotropina (HACT). El compuesto de partida de dicha biosíntesis es el colesterol, proceden
te de la circulación o biosintetizado en la propia corteza por la vía del acetato. A partir del colesterol se origina
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES 1NTRACELUI.ARES (1) 511
Figura 17.21. Biosíntesis de hormonas esteroideas.
la pregnenolona, que, a través de una serie de hidroxilaciones sucesivas en los carbonos C-17, C-l I y C-21, se
transforma en hidrocortisona, corticosterona, aldosterona. testosterona y 17|3-estradiol (Fig. 17.21).
La hidrocortisona y la aldosterona son los principales glucocorticoides y mineralocorticoides en el ser hu
mano. La primera influye en el metabolismo de los hidratos de carbono, las grasas y las proteínas, además de po
seer propiedades antiinflamatorias. La segunda regula el balance electrolítico a través de la retención de Na *.
Cuando existen alteraciones enzimáticas en los procesos de su biosíntesis, pueden producirse diversos trastornos.
Si la actividad de la I7a-hidroxilasa es baja, disminuye la producción de testosterona, estrógenos e hidrocortiso
na. mientras que si es alta, habrá un incremento de la testosterona. Si la actividad de la enzima 11 p-hidroxilasa es
pequeña, se producen grandes cantidades de 11 -desoxicorticosterona, un potente mineralocorticoidc que produce
entre otros efectos, hipertensión. Finalmente, cuando la actividad de la 21-hidroxilasa es baja, disminuye la pro
ducción de hidrocortisona. compensándose con un incremento de HACT.
2.2.1. Diseño de fármacos agonistas y antagonistas de los glucocorticoides
Las hormonas glucocorticoides circulantes se enlazan a la transcortina, una proteína del suero, y pasan al inte
rior de sus células diana, activan sus receptores situados en el citoplasma, y el complejo esteroide-receptor así
formado pasa al núcleo, donde se une a la cromatina e induce la producción de ARNm. El hígado es, junto con
otros tejidos (como los músculos y el cerebro), muy rico en receptores de glucocorticoides. Los glucocorticoi
des actúan preferentemente sobre cl metabolismo de los hidratos de carbono (son hiperglucemiantes y diabetó-
genos). aumentando la concentración de piruvato carboxilasa y, por tanto, de oxalacetalo. Inhiben la transfor
mación de piruvato a acetilcoenzima A, y se fuerza su transformación por la ruta de la glucogeneogénesis (al
contrario que la insulina).
La estimulación de la gluconeogenesis desnivela negativamente el balance nitrogenado, aumentando la
producción de urea, reduciendo en gran medida la masa de algunos tejidos (en particular, del muscular, óseo,
cutáneo y linfático) e interfiriendo con la respuesta inmunitaria de modo inhibidor. También estimulan el meta
bolismo lipídico, por activación de la adenilciclasa e inhibición de la fosfodiesterasa, lo que incrementa el
AMPc. Reducen la absorción intestinal de Ca2’ y la formación ósea, y aumentan la excreción renal de dicho ion.
Muchos glucocorticoides poseen, además, actividad mineralocorticoidc y producen retención hídrica. un efecto
secundario adverso que se intenta eliminar o disminuir por manipulación molecular.
Los glucorticoides se han utilizado en los últimos decenios como fármacos antiinflamatorios (son los an-
liinflamatorios más eficaces), antialérgicos e imunodepresores. Son varios los mecanismos responsables de las
acciones antiinflamatorias e inmunodepresoras de los glucocorticoides. pero el más importante de ellos es la in
hibición del acceso de los leucocitos al foco inflamatorio, por bloqueo de la expresión de moléculas de adhesión
celular que permiten la fijación de los leucocitos al endotelio inflamado. Entre los genes que responden a los
glucocorticoides. se encuentran los responsables de la expresión de citocinas proinflamatorias (como las inter-
leucinas) o del interferón y. Aunque en un principio se pensó que los glucocorticoides inhibían la producción de
eicosanoides inflamatorios, por inhibición directa de la fosfolipasa A;, en realidad inhiben esta enzima de forma
indirecta, al aumentar la síntesis de determinadas proteínas como la lipocortina 1. De este modo, no se libera el
ácido araquidónico del que derivan los mediadores inflamatorios prostaglandinas y leucotrienos (véase el Capí
tulo 11 y la Figura 17.22).
Se han sucedido tres generaciones de corticoides. La primera está representada por la cortisona, el cortisol
y la corticosterona, que son cetonas en C-3 a,p-insaturadas, con un grupo cetónico o hidroxilo en C-l 1 y una ca
dena lateral de naturaleza de 17a,21-dihidroxi-20-ona. La actividad antiartrítica de la cortisona se descubrió en
1949. pero ningún análogo fue más potente que ella hasta que. en 1953, se ensayó el 9a-fluorocortisol. La corti
sona se transforma in vivo en cortisol (hidrocortisona), y es más estable que ésta, por lo que se utiliza por vía oral
mientras que el cortisol se utiliza por vía parenteral (Fig. 17.23). La segunda generación está representada por la
prednisona. una A'-l 1-cetona, y la prednisolona (su análogo 1 Ip-hidroxilado). En estos análogos, se ha aumenta
do la potencia sin aumentar los efectos mineralocorticoides, lo que se explica por el cambio de la geometría del
anillo A que supone la incorporación de dobles enlaces adicionales. Los cálculos teóricos para determinar la con
formación preferida de los esteroides y su estructura electrónica han permitido conocer, por ejemplo, que la intro
ducción de insaturaciones aumenta la flexibilidad molecular, y que los compuestos insaturados en C-l y C-4 pue
den existir como varios confórmeros con diferencias energéticas mínimas.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTION CON RECEPTORES INTRACELULARES (I) 513
Fosfol (pidos Ácido

de membrana araquidónico
FosoI ipasa A2
Mediadores
de la inflamación
(leucotrienos.
prostaglandinas,
tromboxanos)
Figura 17.22. Interferencia de los corlicostcroides con la formación de mediadores inflamatorios derivados del ácido
araquidónico.
R=CHV RU 28362
Figura 17.23. Agonistas del receptor glucocorticoide.

El primer análisis por regresión de la actividad antiinflamatoria de una serie de derivados de cortisol con
un sustituyente en C-9 (F, Cl, Br, I, OH, CH3, CH3O, OC;HS y SCN) demostró que la actividad antiinflamatoria
se correlaciona con su efecto inductor, su tamaño y el parámetro tt de solubilidad. La actividad aumenta cuando
el sustituyente en dicha posición retira carga (o positivo), cuando disminuye su tamaño y cuando aumenta su hi
drofobia. siendo el flúor el más activo de todos los derivados halogenados. Se ha sugerido que el principal efec
to de la retirada de carga eléctrica es el aumento de la acidez del grupo 11 0-hidroxi, lo que origina un enlace de
hidrógeno más fuerte entre este grupo y el receptor.
La fluoración en 9a (fludrocortisona) aumenta también la actividad mineralocorticoide, por lo que estos
compuestos se usan sólo tópicamente como antiinflamatorios. Por introducción simultánea de un doble enlace y
un metilo en C-6. surgió la 6a-metilprednisolona (Urbasón®). Si en los 9a-fluoroderivados se introduce un hi
droxilo en C-I6a. se llega a triamcinolona y a su acetónido, que se utiliza en el tratamiento de la psoriasis y
otros trastornos dermatológicos. Otros derivados, como la dexametasona o la betametasona, poseen un grupo
metilo en la posición C-16a o C-160. Un análogo de la dexametasona, el furoato de nometasona, es 100-200
veces más activo que aquélla.
La tercera generación de glucocorticoides está representada por el deflazacort, un análogo de la predniso-
lona con un anillo de oxazolina condensado en C-16 y C-17, que se comporta como profármaco, ya que se hi
droliza por las esterasas séricas al 21-hidroxiderivado, que es el metabolito activo con efectos casi exclusiva
mente antiinflamatorios, sin efectos mineralocorticoides y prácticamente anulados los efectos sobre el
metabolismo del calcio y el metabolismo glucídico, evitando así la osteoporosis y la diabetes producida por el
tratamiento continuado con glucocorticoides. También pertenecen a este grupo compuestos, como RU26988 y
RU28362, en los que la cadena de dihidroxiacetona en C-17 de los corticosteroides naturales se ha reemplazado
por un resto 17a-alquinil-l70-hidroxi. Si se introducen en estos compuestos sustituyentes en C-l 10, se tienen
derivados que se enlazan fuertemente al receptor de progesterona, como ya se ha visto en el caso de la mifepris-
tona.
Algunos agonistas del receptor glucocorticoide se utilizan en pacientes con leucemia aguda y linfosarco-
ma, así como en algunas enfermedades alérgicas (como el asma bronquial y diversas dermatitis). En este último
caso, pueden aplicarse por vía tópica, a fin de evitar sus muchos efectos generales. Con este propósito, se han
introducido grupos lipófilos (ásteres y cetales, fundamentalmente) para evitar que pasen de la epidermis a la
dermis. También se aplican estos derivados en suspensiones cristalinas por vía intraarticular, evitando en lo po
sible su paso al torrente circulatorio (véase el Capítulo 8).
Se han diseñado antagonistas del receptor glucocorticoide que pueden tener interés en distintas aplicacio
nes. como el síndrome de Cushing, un hiperadrenalismo caracterizado por un exceso en la producción de estas
hormonas.
2.2.2. Agonistas y antagonistas mineralocorticoides
La aldosterona es la hormona mineralocorticoide. Actúa preferentemente sobre el metabolismo inorgánico,

especialmente del sodio, y posee una estructura única, ya que un grupo hidroxilo en la posición 110 forma un
hemiacetal con un grupo formilo en la posición C-18, que puede también acetalizarse con el hidroxilo en
C-21 (Fig. 17.24). La aldosterona es parte activa en el ciclo que regula la presión sanguínea por el sistema re-
nina-angiotensina (véase el Capítulo 11). Cuando disminuye el volumen sanguíneo, se estimula la secreción
de la renina en el riñón, y ésta, al catalizar la conversión de angiotensinógeno en angiotensina, estimula en la
corteza suprarrenal la liberación de aldosterona. que a su vez produce la retención de sodio en el riñón y el
correspondiente aumento de volumen sanguíneo. Los agonistas mineralocorticoides sólo se utilizan en casos
de insuficiencia suprarrenal o cuando la corteza suprarrenal se ha destruido (enfermedad de Addison). La de-
soxicorticosterona puede utilizarse en forma de acetato para mantener la tensión arterial. Ya se ha comentado
que ciertos glucocorticoides, como la fludrocortisona, son también mineralocorticoides.
Se pensó, desde un principio, que un antagonista de la aldosterona podría actuar como diurético en esta
dos edematosos causados por una retención excesiva de Na *. Sin embargo, aunque la aldosterona se ha prepara
do por síntesis total y por semisíntesis, su estructura es demasiado compleja para preparar antagonistas basados
sólo en su estructura. Afortunadamente, se observó de forma fortuita, que la lactona de un hidroxiácido en C-17
antagonizaba a la aldosterona cuando se administraba a los animales. Para que este compuesto tuviera actividad
por vía oral, se incorporó el grupo 7ot-tioacetato, obteniéndose así la espironolactona, un antagonista de la al
dosterona activo por vía oral y con gran actividad diurética; también tiene actividad antiandrogénica, por lo que
se utiliza contra el acné.
Aldosterona
(forma hemiacelálica)
Nombre Ro Ri. Ri? R Espironolactona

(Antagonista)
Desoxiconicosterona H H H H
Acetato de desoxicorticostcrona H H H COCH,
Acetato de fludrocortisona F OH OH COCH,
Figura 17.24. Agonistas y antagonistas mineralocorticoides.
3. FÁRMACOS INMUNOSUPRESORES
Además de los glucocorticoides, son varios los fármacos que inducen la supresión de la respuesta inmunita-
ria. Han cobrado mucha importancia en los últimos años, debido a la necesidad de controlar el rechazo en los
trasplantes de órganos, pero poseen otras posibles aplicaciones terapéuticas, ya que varias enfermedades,
como la diabetes mellitus insulinodependiente, la psoriasis o la artritis reumatoide, tienen un componente in-
munitario.
Debido a su acción antiproliferativa. los imunosupresores poseen efectos tóxicos, ya que aumentan
el riesgo de infecciones, así como la aparición o crecimiento de tumores. En los trasplantes de óganos. sue
le utilizarse una combinación de corticosteroides, ciclosporina A (Fig. 17.25) y azatioprina (véase el Capí
tulo 9). Esta última puede sustituirse o acompañarse por clorambucilo. ciclofosfamida y metotrexato. que se
comentarán en el Capítulo 18, así como utilizarse en otros protocolos de combinación, como ciclosporina A
con tacrólimo (FK506), rapamicina y micofenolato de mofetilo (RS-61443) (Fig. 17.28).
La ciclosporina A es un undecapéptido cíclico, producido por Tolypocladium inflatum y otros hongos,
que puede interactuar con algunas proteínas y, específicamente, con una proteína intracelular que se denomi
na ciclofilina y que es una peptidilprolil cis-lrans isomerasa.
Mientras que los corticosteroides inhiben la proliferación de los leucocitos y la azatioprina suprime el sis
tema hematopoyético. produciendo leucocitopenia y anemia, el descubrimiento de compuestos que. como la ci
closporina A. el FK506 y la rapamicina, afectan específicamente a la capacidad de los linfocitos T para producir
los mediadores químicos llamados linfocinas o a su capacidad para responder a estos mediadores, fue un avan
ce importante en los fármacos imunosupresores.
El complejo ciclofilina-ciclosporina bloquea el proceso de transducción de señales que culmina con la

biosíntesis de la linfocina denominada interleucina-2 (IL-2), responsable de reclutar células T, transformarlas en
células T citocidas y activar otros factores de muerte celular como las NK (Natural Killers') y los LAK (Lymp-
hokine-Activated Killers).
Figura 17.25. Estructuras de ciclosporina A. rapamicina. ascomicina y FK506.
El fármaco FK506 es un antibiótico macrólido que posee un índice terapéutico muy pequeño y actúa de
forma semejante a la ciclosporina, enlazándose a otra peptidil-prolil-isomerasa del grupo denominado FKBP
(FK-binding proteins). Aislado de la bacteria Streptomyces tsukubaensis. posee una estructura de lactona de 23
miembros, con una función de a.p-dicetoamida derivada de ácido pipecólico (piperidina-2-carboxílico), cuyo
grupo cetónico en p está enmascarado en forma de hemiacetal. Su estructura es muy semejante a la de la rapami
cina. otro producto natural aislado de Streptomyces hygroscopicus. con estructura de macrólido y un anillo de 31
miembros. La rapamicina despertó en un principio interés como antitumoral. hasta que se puso de manifiesto su
actividad inmunosupresora. Al parecer, se une a las mismas proteínas citoplasmáticas que FK506. bloqueando la
respuesta de las células T a la IL-2, sin afectar a su producción. La ascomicina es otro análogo de la rapamicina.
Las peptidil-prolil-c¿s-zran.r-isomerasas (PPIasas), también denominadas inmunofilinas. se descubrieron
en 1984, y son enzimas que catalizan la interconversión de los rotámeros de los enlaces amídicos adyacentes a
un residuo de prolina, interviniendo en los plegamientos de las proteínas (Fig. 17.26). Los imunosupresores que
se han comentado, se enlazan al lugar de unión de la prolina de estas PPIasas e inhiben su actividad enzimática.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE 1NTERACTÚAN CON RECEPTORES INTRACELULARES (I) 517
por lo que podrían haberse contemplado en el Capítulo 11. Aunque esta inhibición parece tener un gran futuro,
la actividad inmunosupresora no está relacionada con la inhibición de la actividad PPIasa, sino con la interac
ción de los complejos fármaco-inmunofilina con otras proteínas con actividad de cinasas o fosfatasas (como
la calcineurina). Es decir, los fármacos inmunosupresores parecen actuar como un «pegamento» que permite la
formación de complejos trimoleculares en los que intervienen dos proteínas.
CO-Pj2
PPIasas °pNO
Pi CO -P2'
S-trans S-cis
Figura 17.26. Isomerización cis-trans catalizada por inmunofilinas (PPIasas) de enlaces de peptidilprolina.
En un intento de alterar su enlace con proteínas FKBP o calcineurina (unión que se relaciona con su gran
toxicidad), se han investigado algunos derivados semisintéticos. Por ejemplo, el grupo hidroxilo en C(32) de la
ascomicina se ha transformado por alquilación en O-carboximetil derivados, y el grupo carboxilo así introduci
do se ha transformado posteriormente en ésteres o en amidas (véase la Fig. 17.27).
R = OH OR1. NHR1
Figura 17.27. Derivados semisintéticos de la ascomicina.
Otro inmunosupresor es el micofenolato de mofetilo (RS-61443, Fig. 17.28). Aislado de Penicillium

brevicompactum y de otras especies semejantes, su porción de éster de morfolinoetilo se hidroliza rápida
mente en el hígado para dar el ácido activo. Dado que éste es demasiado hidrófilo, se han investigado otros
derivados como profármacos más estables al metabolismo.
El ácido micofenólico es un inhibidor reversible, potente y selectivo, de inosina monofosfato deshidro-
genasa y de guanosina monofosfato sintetasa. dos enzimas necesarias para la biosíntesis del monofosfato de
guanosina. lo que se traduce en bajos niveles de GTP y GDP, la inhibición de la síntesis de ADN y la paráli
sis del ciclo celular en la fase G1 a S, bloqueando la formación de anticuerpos.
La mizoribina es un nucleósido de imidazol aislado de Eupenicillium brefeldianum. Al igual que RS-
61443. vacía los nucleótidos de guanina intracelulares y paraliza la síntesis de ácidos nucleicos en los linfo-
citos.
El brequinar sódico es un derivado del ácido quinolina-4-carboxílico. inhibidor de la dihidroorotato-
deshidrogenasa y, en consecuencia, de la síntesis de pirimidinas; se desarrolló inicialmente como antineo-
plásico.
Figura 17.28. Otros fármacos imunosupresorcs.
La I5-desoxiespergualina es un análogo de síntesis del antitumoral espergualina, aislada originalmente de

Bacillus lacterosporus. Sus mecanismos de acción todavía no son muy claros.
4. 1a, 25-DIHIDROXIVITAMINA D3
El término vitamina D se aplicó, en un principio, a los productos de la fotólisis del ergosterol. En este proceso,
se forma taquisterol y un complejo molecular 1:1 de ergocalciferol (activo como antirraquítico) y lumisterol
(inactivo), que se llamó vitamina D, (Fig. 17.29). Después de su caracterización, el ergocalciferol pasó a ser la
vitamina D2.
Como puede verse en la Figura, la biosíntesis de la vitamina D2 comienza con la ruptura del anillo B del
ergosterol por las radiaciones luminosas (hv). La ruptura del enlace a entre los carbonos C(9)-C(I0) va acom
pañada de la formación de un nuevo doble enlace entre los carbonos C(6) y C(7) en disposición cis. En sistema
de tres dobles enlaces conjugados debe reordenarse a través de una transposición que se comentará más adelan
te. y, finalmente, isomerizarse a una geometría s-trans (el enlace sencillo C(6)-C(7) tiene cierto carácter de en
lace doble por estar conjugado y. por tanto, su libertad para rotar está restringida; de ahí el término s. de enlace
sencillo, trans).
Del mismo modo, el 7-deshidrocolesterol. producido en el metabolismo del colesterol en el ser humano,
se transforma por irradiación (por exposición de la piel al sol) en colecalciferol, que es la vitamina D,
(Fig. 17.30).
Las reacciones fotoquímicas que producen la apertura del anillo B en los sistemas 5,7-dideshidrogenados.
presentes en el 7-deshidrocolesterol y en el ergosterol , son ejemplos de reacciones electrocíclicas. Éstas forman,
junto con las reacciones de cicloadición y las transposiciones sigmatrópicas, un conjunto de reacciones, deno-
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE 1NTERACTÚAN CON RECEPTORES 1NTRACELULARES (I) 519
minadas pericíclicas, que tienen lugar a través de mecanismos concertados (todos los enlaces se rompen y for
man simultáneamente).
Figura 17.29. Transformaciones del ergosterol catalizadas por la luz ultravioleta.

Figura. 17.30. Transformaciones del 7-deshidrocolesterol catalizadas por la luz ultravioleta.
Ergosterol Lumisterol
o 7-deshidrocolcsterol (para cl ergosterol)
Orbital molecular n4*
(HOMO del estado excitado)
Figura 17.31. Reacciones electrocíclicas de 5,7-dideshidroesteroles.

DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES 1NTRACELU1.ARES (I) 521
Figura 17.32. Transposición sigmatrópica [ 1,7] (la numeración indicada no se corresponde con la del esleroide).
En las reacciones electrocíclicas de las Figuras 17.31 y 17.32, el anillo B de los esteroides (un ciclohexa-
dieno) se rompe y se convierte en un sistema triénico conjugado. La luz ultravioleta proporciona la energía para
la ruptura del enlace a C(9)-C( 10). y la rehibridación a orbitales p produce los derivados 9,IO-seco-5(IO),6,8-
triénicos.
La formación de las vitaminas D: (procedente del ergosterol) y D< (procedente del 7-deshidrocolesterol)
requiere una segunda reacción pericíclica: una transposición sigmatrópica 11,7] del compuesto A, en la que un
átomo de hidrógeno del metilo en C( 19) pasa a la posición C-9 del esleroide para dar B (Fig. 17.32).
La geometría s-cis del enlace C(6)-C(7) en el trieno B se corresponde con la configuración cis en el trieno
A formado en la reacción de electrociclación. El término s-cis indica una conformación sinperiplanar alrededor
del enlace sencillo, que posee un carácter de doble enlace por tratarse de un sistema conjugado. El cambio a la
conformación antiperipalanar (s-trans) conduce, finalmente, a las vitaminas D.
El giro del anillo A sitúa el hidroxilo 3(3 del estero! en la cara inferior de la molécula, pero, para mayor fa
cilidad. en los derivados de las vitaminas D, se mantiene la numeración y la estereoquímica que tenían
(o tendrían) en el primitivo esteroide.
La vitamina D, absorbida de la dieta, o biosintetizada en la piel a partir del 7-deshidrocolesterol, se bioac-
tiva transformándose en metabolitos más polares en el hígado y el riñón.
La hidroxilación del carbono 25 se produce en los microsomas de los hepatocitos, y la 25(OH)D< así ori
ginada es nuevamente hidroxilada en las mitocondrias renales a la,25-dihidroxicolecalciferol [la,25-dihidro-
xivitamina D,. la,25-(OH)5Dj, calcitriol], que se considera la hormona activa (obsérvese que se mantiene en el
secoesteroide la numeración y la disposición relativa a o (3 del sistema esleroideo precursor).
La acción de una nueva hidroxilasa renal estimulada por la hormona paratiroidea introduce un nuevo hi
droxilo en la posición 24 y causa la inactivación (Fig. 17.33).
Figura 17.33. Biosíntesis y metabolismo de vitaminas D.

1
X
2 pOH
X
3
pOH
X
5
|X)H
X
6
l'OH
X
7 P'OH
X
.
8 l'OH
X
9 ll pon
Y
Figura 17.34. Modificaciones de la cadena en C-17.
Se ha demostrado la existencia, en el núcleo celular, de receptores específicos para la la,25(OH)2D3. Esta

interacción estimula la producción de ciertas proteínas como la osteocalcina. Al contrario de lo que sucede con
las hormonas esteroideas que se han comentado anteriormente, no se conoce todavía exactamente cómo se unen
los receptores al esteroide y al ADN. ni tampoco los distintos tipos de proteínas que se originan en consecuen
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÜAN CON RECEPTORES INTRACELULARES <I> 523
cia. La la,25(OH);Dj no es necesaria para la síntesis de la matriz orgánica del hueso ni para los procesos de mi-
neralización. sino para regular la homeostasis del calcio y el metabolismo del fósforo. Otras hormonas regulan
también los niveles de Ca . Así, la tirocalcitonina (una hormona tiroidea) y la hormona paratitoidea disminuyen
y aumentan, respectivamente, el nivel de calcio en sangre. La la,25(OH)2D> tiene, además, otras acciones im
portantes, ya que afecta al sistema inmunológico. inhibe la proliferación y promueve la diferenciación celular.
En la unión a su receptor, los tres hidroxilos del calcitriol desempeñan un importante papel. Los grupos
la y 25 son críticos, ya que su eliminación disminuye la afinidad por el receptor unas 1.000 veces. Se han sin
tetizado muchísimos análogos activos, algunos de los cuales se utilizan para el tratamiento de enfermedades
metabólicas de los huesos y para trastornos cutáneos, como la psoriasis.
Casi todas las modificaciones que han originado compuestos con mayor actividad que el ligando natural
(1. Fig. 17.34) tienen modificada la cadena lateral en C-17. Esta cadena es muy flexible, de forma que el hidro
xilo en C-25, que parece tener una función muy importante en la interacción con cl receptor, puede situarse en
una región del espacio muy amplia.
El epímero en C-20 (2) es mucho más potente que la vitamina natural. Analizando la conformación de la
cadena lateral de ambos epímeros, se determinaron cuatro regiones diferentes que podría ocupar el grupo 25-
OH en las conformaciones con energía mínima. A continuación, se sintetizaron análogos más rígidos de estas
distintas conformaciones (compuestos 3-6). observándose que la afinidad por el receptor aumentaba en el orden
6<3<4<5, que se corresponde con una localización del hidroxilo C-25 de 1 en una de dichas cuatro regiones, di
ferente a la del epímero 2. El cálculo de las posibles conformaciones que adopta esta cadena lateral en com
puestos muy activos demostró que la potencia de estos análogos puede predecirse aplicando este método. En re
sumen. las modificaciones que aumentan la potencia son: epimerización en C-20, sustitución de metileno en
C-22 por oxígeno (compuesto 7). introducción de un doble o triple enlace en la cadena lateral (compuesto 8) o
en la posición C-16 (compuesto 9). eliminación del metilo en C-18 (compuesto 11). alargamiento de la cadena
(compuesto 12). metilación de los grupos metilo terminales C-26 y C-27 (compuesto 14), y metilación en C-20
(compuesto 17).
Como grandes dosis de la,25(OH)2Dt pueden causar hipercalcemia, es interesante preparar análogos
de calcitriol con actividad selectiva que retengan una actividad antiproliferativa y diferenciado™, y que no
produzcan hipercalcemia. La suma de varias de las modificaciones indicadas en la Figura 17.34 puede obser
varse en el compuesto 18. preparado por Hoffmann-La Roche. Este compuesto mostró una actividad fisioló
gica muy selectiva, por lo que se propuso como candidato para el tratamiento de enfermedades inmunológi-
cas y proliferativas.
Conformación preferente en el Conformación preferente para cl

19-nor-3ct-hidroximctilcalcitriol 10.19-diltidro-19-hidroxicalcitriol
(Actividad potente) (Menos potente)
Figura 17.35. Equilibrio conformacional en el anillo A de análogos de calcitriol.

Entre las manipulaciones que se han realizado en el anillo A. es interesante saber que la introducción de
un sustituyeme voluminoso (metilo e hidroximetilo) en C-2a de un 19-norcalcitriol (Fig. 17.35) hace que dicho
sustituyeme se disponga preferentemente, dada una conformación de silla en este anillo, en una conformación
ecuatorial: por lo tanto, el hidoxilo la se sitúa en una disposición axial. Estos análogos muestran una actividad
diferenciadora muy potente. Por el contrario, la hidrogcnación del doble enlace C( IO)-C( 19) y la oxidación en
C(19), para dar derivados la,19,25-trihidroxilados, hace que el sustituyeme hidroximetilo en C-10 adopte pre
ferentemente una disposición axial, por lo que el grupo la-hidroxi adopta una orientación ecuatorial que no es
adecuada para la interacción con el receptor.
Los derivados 19 y 20 (Fig. 17.36), que han demostrado buena actividad antiproliferativa, poseen un
agolpamiento l-hidroximetilo y algunas de las modificaciones en la cadena lateral que ya se han comentado.
19; R = CH ,
20:R = C2H,
Figura 17.36. Candidatos a fármacos diseñados por modificaciones en el anillo A y en la cadena lateral de caicitriol.
La acción de la 1 a.25(OH):D3 se bloquea por inhibidores de la transcripción y la traslación, como son los
antibióticos antineoplásicos actinomicina D y puromicina (véase el capítulo 18).
5. HORMONAS TIROIDEAS
En el siglo xix, se estableció la función endocrina del tiroides, un órgano situado a ambos lados de la tráquea, y
se inició el estudio de las hormonas implicadas en dicha función, la L-tiroxina o 3,5,3',5'-tetraiodo-L-tironina
(T4) y su análogo 3,5.3'-triiodo-L-tironina (Tj) (Fig. 17.37). Las hormonas tiroideas afectan al desarrollo y las
funciones de muchos órganos a través de interacciones con sus receptores, que están localizados en el genoma
del núcleo, o como consecuencia de la inducción a distancia de cambios en los niveles de otras hormonas. Las
hormonas Tj y T4 se aplican para el tratamiento del hipotiroidismo. pero pueden producir problemas cardíacos.
La iodación de la tiroglobulina. una proteína que se sintetiza en las células foliculares del tiroides, utili
zando el ioduro concentrado en dichos folículos mediante un sistema de transporte activo, está catalizada por la
peroxidasa tiroidea. La tiroglobulina iodada contiene en su secuencia los residuos T, y T4, aminoácidos que se
vierten a la sangre cuando se hidroliza en una reacción catalizada por la hormona estimulante del tiroides (TSH,
tirotropina). una glicoproteína hipofisaria con una subunidad a idéntica a la de la hormona luteinizante, otra 0
compuesta por 112 aminoácidos, y una cadena hidrocarbonada. La TSH, a su vez, se libera por la acción de la
hormona estimuladora de tirotropina (HET), secretada por el hipotálamo. La concentración de hormonas tiroi
deas en el plasma se regula por un control de retroacción negativa. La somatostatina (otra hormona hipotalámi-
ca de naturaleza de tetradecapéptido), la noradrenalina y la dopamina. entre otros agentes, regulan la liberación
de la hormona estimulante del tiroides. Cuando la TSH se enlaza a sus receptores en las células foliculares, pro
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES INTRACELULARES 11) 525
mueve un incremento de las concentraciones de AMPc y de Ca2*. Estos mensajeros favorecen la endocitosis de
la tiroglobulina. que. finalmente, origina por hidrólisis las hormonas tiroideas. Transportadas en la sangre en
forma libre o unidas a proteínas, las hormonas tiroideas entran en las células y. posteriormente, la T3 entra en el
núcleo por sistemas de transporte activo. El enlace con sus receptores modifica la transcripción, alterando los ti
pos de ARNm que se producen y que dirigen la síntesis de nuevas proteínas, causando los cambios característi
cos en la bioquímica y la fisiología de los órganos en los que se expresa la respuesta. Sus efectos son múltiples.
Incrementan la cantidad de energía gastada en el movimiento de cationes a través de las membranas celulares,
actúan sobre el sistema cardiovascular, sobre el metabolismo lipídico. en el encéfalo, etc.
3.5.3'-triiodo-L-tironina (T,) R = H
3,5,3', 5'-letraiodo-L-tironina (T4) R = I
efecto de retroacción positiva
Figura 17.37. Estructura de las hormonas tiroideas y regulación de su liberación.
La síntesis y el estudio de compuestos análogos a las hormonas tiroideas ha permitido conocer mejor su
mecanismo de actuación. Los fármacos tiromiméticos han contribuido al conocimiento de la interacción de las
hormonas naturales con sus receptores, pero no se utilizan en terapéutica. El desarrollo de antagonistas de los
receptores de las hormonas tiroideas cardioselectivos sería de gran interés en el tratamiento de las arritmias car
díacas o de la angina de pecho.
Para la manifestación de la actividad tiromimética, es necesaria la disposición ortogonal de los anillos
aromáticos que impone la disustitución por iodo en las posiciones 3 y 5 en la estructura de éter difenílico. Su
eliminación conduce a la pérdida de afinidad por el receptor, resultando compuestos inactivos, salvo en el caso
de los análogos dibromados, que son más activos in vivo por su mejor absorción por vía oral. La sustitución de
la función éter por metileno o azufre mantiene la actividad, ya que se retiene la conformación preferente, mien
tras que los derivados de bifenilo y los metilenoxiderivados no son activos (Fig. 17.38).
En la triiodotironina, el sustituyeme en 3' puede orientarse distal o proximal respecto al resto de tirosina.
y el grupo hidroxilo fenólico en 4' puede adoptar conformaciones cis o trans respecto al sustituyeme en 3'. A su
vez, la cadena de tirosina puede adoptar conformaciones cisoides o transoides.
Al parecer, el hidroxilo fenólico en 4' se une por puente de hidrógeno a un centro básico aceptor de proto
nes del receptor, por lo que resulta esencial, y sólo puede sustituirse por un grupo NH2, que se enlaza intramole
cularmente a través de uno de sus hidrógenos con el iodo en 3' y con el otro al receptor (Fig. 17.39).
Algunos análogos que carecen del grupo 4'-OH son activos porque se hidroxilan metabólicamente. Igual
mente, la actividad de los 4'-meliléteres se explica admitiendo que son profármacos que se bioactivan por des
metilación.
3'-lodo proximal al 3'-Iodo distal al

resto de tiros i na resto de tirosina
X = O; Tj (activa)
X = S. CH, —> Se mantiene la disposición ortogonal de los anillos aromáticos (activos
X = CHj-0-----> Se pierde dicha disposición (inactivos)
Figura 17.38. Conformaciones de la triiodotironina (T3).
El átomo de iodo en 3' puede sustituirse por muchos agolpamientos Iipófilos sin que disminuya la afini
dad por el receptor. Sin embargo, la introducción de otra sustitución en 5' inhibe esféricamente la formación del
enlace de hidrógeno entre el OH en 4' y el receptor, y conduce a la pérdida de la afinidad.
Finalmente, el grupo amino de tirosina no es esencial, pero los análogos en los que dicho grupo se ha eli
minado, a pesar de que poseen alta afinidad, son poco activos, debido a que tienen una semivida corta.
4'-OH cis respecto a R 4'-OH trans respecto a R
Forma cisoide Forma transoide

(cuando el grupo metino
es cis respecto al anillo fenol ico)
Enlace de II
del grupo 4'-OH
(o 4’-NH2) con
el receptor
Figura 17.39. Interacciones y agolpamientos importantes en las hormonas tiroideas y sus análogos.
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES INTRACELULARES <l> 527
El hipotiroidismo se trata con la administración regular de iodo, pero en los casos en que la glándula está
destruida, debe administrarse tiroxina. Las investigaciones se dirigen a conseguir tiromiméticos selectivos, co
mo el derivado de piridazinona (Fig. 17.40), que es igual de activo que la hormona Tj en su efecto hipocoleste-
rolémico en el hígado, pero tiene una actividad cardíaca mínima.
R, = L-Ala. o-Ala. OL-Ala. COOH. CH,COOH

R, = I. Br. H. Me. Pr
Rs = I. Br. Me. Pr
R'3 = H. C, Br. 1
R'„ = OH. H, OCH,. NH,
R's=I. 'Pr X = O. S. CHj
Figura 17.40. Análogos de la tiroxina.
El hipcrtiroidismo se trata mediante tiroidectomía. por radiación con radioisótopos o con la administra
ción de algunos inhibidores de enzimas que. como la peroxidasa tiroidea, son esenciales para la biosíntesis de
estas hormonas. El diseño de los antagonistas de receptores tiroideos que bloqueen específicamente los recep
tores del miocardio sería muy interesante, ya que dichos compuestos tienen una posible aplicación en el trata
miento de las arritmias cardíacas o la angina de pecho.
6. LIGANDOS DE RECEPTORES RETINOIDES. VITAMINAS A
Aunque históricamente los retinoides están relacionados con la nutrición y la visión, su interés se ha extendido
desde hace años debido, fundamentalmente, a su papel de mediadores en la diferenciación y proliferación celu
lares. Los retinoides son hormonas que regulan la transcripción genética tras su enlace a receptores nucleares y
la subsiguiente activación de éstos.
Hay dos familias de receptores de retinoides: los receptores de ácido retinoico (RAR) y los receptores X
de retinoides (RXR). Cada una de ellas tiene varios subtipos. El ácido rrans-retinoico (todo-E. vitamina A o tre-
tinoína. Fig. 17.41) es el ligando fisiológico de los receptores RAR. y realiza su función hormonal a través de
homodímeros o heterodímeros RXR/RAR. El ácido 9-Z-retinoico (vitamina A, o «vitamina del crecimiento»)
se une a los receptores RXR y realiza su función hormonal a través de homodímeros RXR/RXR. siendo tam
bién capaz de unirse y activar los receptores RAR. Los receptores RXR actúan regulando muchos mecanismos
hormonales, ya que forman heterodímeros con los receptores de vitamina D¡ (RXR/RVD), los del ácido retinoi
co (RXR/RAR). los de la hormona del tiroides (RXR/RT) y los de factores activadores de la proliferación de los
peroxisomas (RXR/FAPP). Estos últimos controlan la expresión de genes implicados en el metabolismo intra-
celular y extracelular de lípidos, fundamentalmente de los que intervienen en la ^-oxidación que tiene lugar en
los peroxisomas. y son actualmente objeto de estudio para el desarrollo de fármacos.Los retinoides (que son
sustancias obtenidas esencialmente a través de la dieta) son necesarios en los mamíferos para funciones tan
importantes como la reproducción, la embriogénesis normal, el crecimiento, el mantenimiento de la diferen
ciación celular normal y la integridad del sistema inmunitario. La capacidad de los ácidos todo-frans-, 9-
cis- y 13-cís-retinoicos y de otros retinoides de síntesis, para regular la diferenciación y proliferación de las
células, ha llevado al desarrollo de fármacos para el tratamiento de enfermedades dermatológicas y del cán
cer. Algunos retinoides de síntesis ligandos de los receptores RAR. como la acitretina. el etretinato o el ta-
zaroteno (Fig. 17.41). se utilizan en el tratamiento del acné y la psoriasis. Los dos últimos son profármacos
que se bioactivan en la piel, por hidrólisis, a los correspondientes ácidos: acitretina o ácido tazaroténico. El
etretinato es útil en el tratamiento de la leucemia. Ciertos agonistas RAR. como (todo-£)-UAB8 y (todo-E)-
UAB30, se han estudiado también para el tratamiento de varios tipos de tumores.
Figura 17.41. Estructuras de algunos retinoides.
Los enlaces sencillos de los retinoides naturales son siempre conjugados, por lo que pueden adoptar una
conformación s-trans (antiperiplanar) o s-cis (sinperiplanar). El retinoide 1 (Fig. 17.42), en el que un benceno
sustituye al sistema de dobles enlaces 1 IE. 13£, tiene una interesante actividad biológica, al igual que el com
puesto 2, un derivado del ácido estilbenocarboxflico diseñado por aromatización de C(8)-C(18) y de C( 12)-
C(14) del ácido retinoico. Por derivación de 2, sustituyendo el doble enlace por un agrupamiento amida o re-
troamida, se obtuvieron los fármacos 3 y 4, que son potentes diferenciadores de células de leucemia a
granulocitos. La A-metilación de estos compuestos conduce a la pérdida de la actividad debido al cambio con-
formacional de trans a cis, que se produce alrededor del enlace amida y que al parecer no reconoce el receptor
retinoico. Un análogo de 4, diseñado por sustitución de dos agrupamientos CH del anillo de tetrahidronaftale-
no por dos átomos de nitrógeno de un anillo de tetrahidroquinoxalina, con el propósito de aumentar la hidrofi-
lia y determinar si dichos átomos de nitrógeno pueden establecer interaciones adicionales de enlace de hidró
geno con el receptor, originó 5, alguno de cuyos derivados fue muy activo. Esta serie corroboró, igualmente, la
necesaria disposición s-trans del enlace amida. Varios estudios de conformación (utilizando técnicas de reso
nancia magnética y difracción de rayos X) demostraron que en estos compuestos se forma un enlace de hidró
geno intramolecular, entre el nitrógeno de la quinoxalina y el grupo NH de la amida, que estabiliza esta con
formación. La A-metilación de los derivados de P-ionona 6 también condujo a una notable disminución de la
Los agonistas RXR tienen interés porque pueden producir las actividades farmacológicas beneficiosas de
los retinoides sin originar efectos secundarios tóxicos, como la teratogenia. Algunos ligandos de los receptores
RXR llamados rexinoides. como las oximas 7 (Fig. 17.43), activan el heterodímero RXR/FAPPy y son eficaces
en el tratamiento de la diabetes mellitus no insulinodependiente (tipo II). Por otra parte, dado que el ácido 9-cis-
DISEÑO DE FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON RECEPTORES 1NTRACELULARES (I) 529
retinoico activa los receptores RAR y RXR. se han diseñado agonistas RXR como el derivado de tetrahidroqui-
nolina 8, que poseen un átomo de nitrógeno en la parte hidrófoba (lo que disminuye la afinidad por RAR) y un
átomo de flúor en el sistema triénico para estabilizar la conformación 9-cís.
4. R,=H. R, = H, X=NH
3. R, = H, R, = H. X = NH
X = N-CHj —> Inactivos (s-cis)
5. X = NH,R| = H
Figura 17.42. Retinoides con conformación restringida.
Figura 17.43. Agonistas de receptores RXR.
7. AGONISTAS DE RECEPTORES PPAR
Los receptores de la actividad proliferativa de peroxisomas (PPAR, de peroxisome proliferator activated recep
tors) pertenecen a la superfamilia de factores de transcripción activados por ligandos. en los que se incluyen los
que ya se han comentado en este capítulo. Los diversos subtipos de receptores PPAR regulan la expresión gené
tica al enlazarse a secuencias específicas de ADN. Aunque existe bastante polémica acerca de la aplicación tera
péutica de sus agonistas, algunos ya están comercializados.
Piogliiazona
NH NH,
• HCI
Metformina
Clofibraío, R = Et
Ácido clofíbrico, R = H Fenofibrato (R = Pr)
Ácido fenofíbrico, R1 = H Bezafibrato
(metabolito activo)
(metabolito activo)
Figura 17.44. Agonistas de receptores PPAR.
Así, algunos fármacos utilizados en la diabetes de tipo II. que poseen estructura de tiazolidinadiona
(TDZ) y se denominan glitizonas (Fig. 17.44). son agonistas del subtipo PPARy. fundamental en la diferen
ciación de adipocitos. La interacción de estos fármacos con dichos receptores aumenta la sensibilidad de los re
ceptores de insulina. La administración de TDZ es una alternativa al tratamiento de este tipo de diabetes con bi-
guanidas como la metformina (su mecanismo de acción no está totalmente establecido).
A pesar de su actualidad, las TZD se han desarrollado como compuestos racémicos, dado que el centro es-
tereogénico del anillo heterocíclico sufre racemización en condiciones fisiológicas.
Algunos agonistas PPARot. como el clorfibrato. el fenofibrato y el bezafibrato. también están comerciali
zados. utilizándose como antilipidémicos en la prevención de ateromas.
BIBLIOGRAFÍA
Delgado, J. N., y Remers. W. A. (eds.): Wilson and Gisvold's Textbook of Organic Medicinal Chemistry, J. B. Lippincott
Company, 1991.
Ellis, D.: Emmett. J. C.; Leeson, P. D.. y Underwood. A. H.: Handbook of Hormones, Vitamins and Radiopaques, Ed. M.
Verderame. CRC Press. 1986.
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MUTSCHLER. E.. y Winterfeldt. E. (eds.): Trends in Medicinal Chemistry, VCH. 1987.
Roberts, S. M.. y Price. B. J.: Medicinal Chemistry. The Role of Organic Chemistry in Drug Reserarch, Academic Press,
1985.
Sporn, M. B.; Roberts, A. B.; Goodman. D. S. (eds.): The Retinoids: Biology. Chemistry and Biology of Synthetic Reti
noids, Raven Press. 1994.
Van der Goot. H.; Domany. G.; Pallas. L„ y Timmerman, H.: Trends in Medicinal Chemistry, Elsevier. 1989.
Wolff. M. E. (ed.): Burgers Medicinal Chemistry. 4.a cd., John Wiley and Sons. 1981.
------- 18--------
Fármacos que interactúan
con los ácidos nucleicos
1. INTRODUCCIÓN
Los fármacos pueden interactuar con el ADN. un polinucleótido que codifica la información en las células.
Dada la importancia de este receptor y las escasas diferencias entre el ADN de células normales y alteradas,
estos fármacos suelen ser muy tóxicos, y su uso se limita al tratamiento del cáncer y de ciertas infecciones ví
ricas.
El cáncer es una enfermedad en la que se pierde cl control del crecimiento en una o más células, lo que
origina un gran número de ellas (neoplasia). Es muy común la formación de una masa sólida de células, deno
minada tumor primario, que puede obstruir vasos y órganos, aunque la muerte del paciente se produce funda
mentalmente como consecuencia de la extensión del tumor a otros lugares del organismo (metástasis), ya que
las células tumorales pueden atravesar las paredes de los vasos linfáticos y de los capilares sanguíneos, y di
fundirse de un órgano a otro a través de cavidades. Dado que el diagnóstico de esta enfermedad se produce con
frecuencia en estas circunstancias, el tratamiento quirúrgico o la radioterapia con rayos X o radioisótopos (que
actúan como fuente de rayos y) no son eficaces, por lo que se recurre al tratamiento quimioterápico. También
suelen administrarse quimioterápicos antes de la extirpación quirúrgica del tumor.
Los mecanismos por los que se produce esta afección se traducen, finalmente, en cambios en la informa
ción y expresión de determinados genes. Aquéllos pueden ser consecuencia de factores internos o externos y. en
algunos casos, hereditarios. Entre los factores internos, se encuentran las mutaciones puntuales que afectan sólo
a una base y, en consecuencia, el codon alterado produce la inserción de un aminoácido diferente en una deter
minada posición de la proteína que codifica. En otros casos, se produce una translocación, es decir, el movi
miento de una secuencia de ADN a otra parte del gen o del cromosoma, de forma que lo que era un protoonco-
gén que no causaba cáncer se transforma en un oncogén. También puede eliminarse o añadirse una base durante
los procesos de reparación del ADN, produciéndose, como en el caso de las mutaciones puntuales, una modifi
cación de la estructura de proteínas relevantes, como los factores de crecimiento y de control. Finalmente, pue
den producirse cambios en la expresión de un determinado gen.
Entre los factores externos, se encuentran los virus y las radiaciones (partículas a y p. rayos X), que rom
pen el ADN a través de la formación de radicales libres (véase el Capítulo 19). así como varios compuestos quí
micos (hidrocarburos aromáticos policíclicos. aflatoxinas, ciertas aminas, etc.) que, bien directamente, bien des
pués de su metabolismo, se unen covalentemcnte al ADN.
Pioglitazona
• HCI
Metformina
Clofibrato, R = Et
Acido cloffbrico, R = H
(metabolito activo)
(metabolito activo)
Figura 17.44. Agonistas de receptores PPAR.
Así. algunos fármacos utilizados en la diabetes de tipo II. que poseen estructura de tiazolidinadiona
(TDZ) y se denominan glitizonas (Fig. 17.44). son agonistas del subtipo PPARy, fundamental en la diferen
ciación de adipocitos. La interacción de estos fármacos con dichos receptores aumenta la sensibilidad de los re
ceptores de insulina. La administración de TDZ es una alternativa al tratamiento de este tipo de diabetes con bi-
guanidas como la metformina (su mecanismo de acción no está totalmente establecido).
A pesar de su actualidad, las TZD se han desarrollado como compuestos racémicos. dado que el centro es-
lereogénico del anillo heterocíclico sufre racemización en condiciones fisiológicas.
Algunos agonistas PPARa. como el clorfibrato. el fenofibrato y el bezafibrato. también están comerciali
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------- 18--------
Fármacos que interactúan
con los ácidos nucleicos
1. INTRODUCCIÓN
Los fármacos pueden interactuar con el ADN, un polinucleótido que codifica la información en las células.
Dada la importancia de este receptor y las escasas diferencias entre el ADN de células normales y alteradas,
estos fármacos suelen ser muy tóxicos, y su uso se limita al tratamiento del cáncer y de ciertas infecciones ví
ricas.
El cáncer es una enfermedad en la que se pierde el control del crecimiento en una o más células, lo que
origina un gran número de ellas (neoplasia). Es muy común la formación de una masa sólida de células, deno
minada tumor primario, que puede obstruir vasos y órganos, aunque la muerte del paciente se produce funda
mentalmente como consecuencia de la extensión del tumor a otros lugares del organismo (metástasis), ya que
las células tumorales pueden atravesar las paredes de los vasos linfáticos y de los capilares sanguíneos, y di
fundirse de un órgano a otro a través de cavidades. Dado que el diagnóstico de esta enfermedad se produce con
frecuencia en estas circunstancias, el tratamiento quirúrgico o la radioterapia con rayos X o radioisótopos (que
actúan como fuente de rayos y) no son eficaces, por lo que se recurre al tratamiento quimioterápico. También
suelen administrarse quimioterápicos antes de la extirpación quirúrgica del tumor.
Los mecanismos por los que se produce esta afección se traducen, finalmente, en cambios en la informa
ción y expresión de determinados genes. Aquéllos pueden ser consecuencia de factores internos o externos y. en
algunos casos, hereditarios. Entre los factores internos, se encuentran las mutaciones puntuales que afectan sólo
a una base y, en consecuencia, el codon alterado produce la inserción de un aminoácido diferente en una deter
minada posición de la proteína que codifica. En otros casos, se produce una translocación, es decir, cl movi
miento de una secuencia de ADN a otra parte del gen o del cromosoma, de forma que lo que era un protoonco-
gén que no causaba cáncer se transforma en un oncogén. También puede eliminarse o añadirse una base durante
los procesos de reparación del ADN, produciéndose, como en el caso de las mutaciones puntuales, una modifi
cación de la estructura de proteínas relevantes, como los factores de crecimiento y de control. Finalmente, pue
den producirse cambios en la expresión de un determinado gen.
Entre los factores externos, se encuentran los virus y las radiaciones (partículas a y p. rayos X), que rom
pen el ADN a través de la formación de radicales libres (véase el Capítulo I9). así como varios compuestos quí
micos (hidrocarburos aromáticos policíclicos, aflatoxinas, ciertas aminas, etc.) que. bien directamente, bien des
pués de su metabolismo, se unen covalentemente al ADN.
A pesar de las limitaciones que supone la dificultad de encontrar fármacos selectivos que no afecten a
las células sanas, la quimioterapia del cáncer ha progresado espectacularmente desde su introducción en los
años cuarenta, fundamentalmente en los tumores de origen hematopoyético (leucemias y linfomas). Esta si
tuación se debe, en cierta medida, a que durante años se utilizaron como modelos para el ensayo de la activi
dad citotóxica líneas celulares de leucemias linfocíticas (especialmente, P388 y L1210). En consecuencia, los
agentes que se mostraron activos en estos modelos lo fueron finalmente frente a neoplasias similares. Para la
evaluación de compuestos activos frente a carcinomas y otros tumores sólidos (más comunes), fue necesario
disponer de modelos adecuados. Una diferencia fundamental entre los tumores de origen hematopoyético y
los tumores sólidos es que. en los primeros, hay mucha mayor proporción de células que están dividiéndose
rápidamente, por lo que la toxicidad de los fármacos les afecta en mayor grado que a las células normales,
que disponen de suficiente tiempo para que se pongan en marcha los mecanismos de reparación. Sin embar
go, muchas células sanas (médula ósea, epitelio y mucosa bucal) se multiplican más rápidamente que muchos
tumores, por lo que es muy difícil evitar los efectos secundarios que limitan la práctica de la quimioterapia
antineoplásica. Afortunadamente, salvo excepciones (toxicidad cardíaca, pulmonar o renal, en algunos ca
sos), la mayor parte de estos efectos secundarios revierte en unos días, y las náuseas y los vómitos que suelen
producir se reducen con modernos alieméticos (como los antagonistas 5-HT3, que se han comentado en el
Capítulo 13).
Los primeros antitumorales que se utilizaron, las mostazas nitrogenadas, provenían del gas mostaza (un
gas utilizado en la Primera Guerra Mundial): otros, como el cisplatino (de gran utilidad en el tratamiento de car
cinomas de ovario y de testículos), se descubrieron casualmente. Los antitumorales más modernos, como la vin-
blastina o el paclitaxel, se han descubierto a partir de programas de cribado de sustancias de origen natural, y en
la actualidad, a medida que avanza el conocimiento sobre las diferencias bioquímicas que existen entre las célu
las normales y las tumorales, se abre paso el diseño racional.
La quimioterapia antineoplásica se enfrenta también con el problema de la quimiorresistencia adquirida,
que se origina en ciertos tumores, tras varios ciclos de tratamiento, por varios mecanismos, siendo el más fre
cuente la sobreexpresión de enzimas destoxificantes (como la glutatión-S-transferasa) o de ciertas proteínas
transportadoras asociadas a las membranas celulares, entre las cuales la glicoproteína P-170 es la más estudiada.
Su sobreexpresión conlleva una menor concentración intracelular de muchos antineoplásicos y representa un ti
po de resistencia denominada MDR (multidruf’ resistance, resistencia a múltiples fármacos). Estas resistencias
se superan, en parte, combinando varios tipos de agentes citotóxicos: actualmente, está en estudio la posible
asociación de compuestos antitumorales con fármacos que reviertan los mecanismos por los que se producen
estas resistencias.
En el Capítulo 9 se han comentado varios inhibidores enzimáticos (antimetabolitos). como los antifolatos
inhibidores de la dihidrofolato reductasa (metotrexato) y los antimetabolitos de purinas y pirimidinas (6-mer-
captopurina, 6-tioguanina, citarabina y 5-fluorouracilo), que se utilizan en la quimioterapia antineoplásica. Aun
que hoy existen numerosos enfoques sobre la quimioterapia del cáncer, y se estudian muchos compuestos cuyo
mecanismo de acción se desconoce, su comentario excedería los límites de este texto, por lo que nos limitare
mos aquí a conocer que la interacción directa con el ADN es la base del mecanismo de acción de muchos anti
tumorales. así como de ciertos antibacterianos, antivirales y antiprotozoarios. También se comentan brevemente
los que actúan en los microtúbulos y los inhibidores de la biosíntesis de las proteínas.
2. CONSIDERACIONES SOBRE LA ESTRUCTURA, LA FUNCIÓN Y LAS FORMAS

DE INTERACCIÓN DEL ADN
La estructura de doble hélice del ADN es la fuente de información más potente de los organismos vivos, ya que
codifica la síntesis de enzimas y otras proteínas, además de la síntesis de ARN. Los modos de interacción con
estos receptores son múltiples. Ciertos compuestos, como los agentes alquilantes del grupo de las mostazas ni
trogenadas. pueden formar enlaces cruzados con ambas hebras, mientras que otros, como el cisplatino, suelen
formar enlaces cruzados en una sola hebra. Otros pueden intercalarse por interacciones no covalentes entre los
pares de bases, distorsionando la doble hélice e interfiriendo la acción de enzimas, como las topoisomerasas de
ADN y las polimerasas de ARN. Además, muchos agentes se enlazan, de forma covalente o no covalente. a los
surcos mayor y menor del ADN, con los que normalmente interactúan muchas proteínas de control, especial
FÁRMACOS QUE INTERACTÚAN CON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS 533
mente con el surco mayor (algunas estructuras tipo hélice a y láminas p de las proteínas tienen dimensiones y
geometría que son complementarias a la hélice del ADN).
El ADN se encuentra en varias formas y tamaños. Algunas moléculas son lineales y otras circulares (su-
perenrolladas o no). Algunos de los cambios entre ellas están catalizados por enzimas, como las topoisomera-
sas, que son a su vez dianas de muchos fármacos (véase también el Capítulo 9). La topoisomerasa 1 produce la
ruptura de una hebra, con formación de un enlace éster entre el fosfato 3' y un hidroxilo de tirosina de la enzima,
mientras que la topoisomerasa II rompe ambas hebras, con formación de un enlace éster entre un hidroxilo de ti
rosina de la enzima y el grupo fosfato en 5' (Fig. 18.1).
Figura. 18.1. Estructura de una hebra de ADN y ruptura catalizada por topoisomerasas (A: adenina; T: tintina; C:
citosina; G: guanina; R: resto del polímero).
También existen varias conformaciones de ADN. La conformación A presenta 11 residuos de base por
vuelta completa de hélice, mientras que la B presenta 10, por lo que sus bases no son totalmente ortogonales al
eje de la hélice. El enlace glicosilo entre el nitrógeno de una base y el carbono anomérico del azúcar tiene una
orientación anti en la forma B, tal y como se representa en la Figura 18.1. aunque normalmente (por ahorro de
espacio) se representa en una orientación sin (hacia la base). La transición entre ambas conformaciones depen
de de la fuerza iónica del medio, siendo la conformación B la más probable en condiciones fisiológicas. En
ella, las dos cadenas (hebras) de polinucleótidos van en sentido antiparalelo y se enrollan, alrededor de un eje
común, con un giro hacia la derecha, situándose las bases en el interior y ocupando las cadenas de azúcar-fos
fato la periferia, a fin de reducir al mínimo las repulsiones electrostáticas entre ambas. En la conformación B,
una base se encuentra rotada 36" respecto a la base contigua de la misma hebra, situándose 10 pares de bases
en una vuelta de hélice, por lo que se encuentran muy apiladas (a una distancia de 2,4 nm). La formación de
enlaces de hidrógeno entre las bases (Fig. 18.2) es crucial para mantener la estructura secundaria por unión en
tre ambas hebras. El hecho de que la adenina y la guanina se enlacen siempre con timina y citosina, respecti
vamente, explica que una hebra funcione como un molde para la construcción de una doble hélice idéntica en
la replicación. Es importante recordar que la doble hélice (estructura secundaria) es capaz de enrollarse origi
nando estructuras terciarias.
Figura 18.2. Apareamiento de bases por puentes de hidrógeno según el modelo de Watson-Crick. Estructura de ADN
en su forma B.
La información que incorpora el ADN para la síntesis de las proteínas se basa en el hecho de que un ami
noácido está codificado por un trinucleótido; como hay 64 modos de organizar los cuatro nucleótidos naturales
para formar conjuntos de tres, puede producirse la selección de los aminoácidos que deben insertarse.
El ADN puede romperse tras su aiquilación en un proceso independiente del oxígeno molecular. También se
rompe por radiaciones ionizantes o a través de la formación de radicales libres de oxígeno (véase el Capítulo 19).
3. FÁRMACOS QUE SE UNEN DE FORMA COVALENTE AL ADN
Los fármacos que se unen de forma covalente al ADN son fundamentalmente compuestos electrófilos alquilan
tes que atacan preferentemente a un mismo tipo de base, generalmente una base púrica, formando una unión
irreversible. El grupo NH. y el N-7 de la guanina, o el N-3 de la adenina, son lugares comunes de dicho ataque.
Además de preferir una base determinada y una posición de ataque dentro de la misma, parece existir, en algu
nos casos, especificidad por una determinada secuencia de bases, que podría estar relacionada con la implica
ción de genes específicos en la eficacia de estos fármacos. La comprensión de estos procesos ha sido posible
tras el desarrollo de la síntesis en fase sólida de oligonucleótidos, ya que el estudio de las lesiones del ADN na
tural por digestión enzimática, aislamiento y caracterización de los complejos nucleótido-fármaco-nucleótido
ha sido difícil, debido a los bajos rendimientos y a la inestabilidad de dichos complejos.
Los antitumorales que actúan por este mecanismo pueden ser activos perse, o pueden ser activados por la
luz (fotoactivados), por oxidación o por reducción.
3.1. Fármacos activos per se
3.1.1. Mostazas nitrogenadas
Entre los primeros compuestos descritos en la literatura como agentes activos frente a tumores animales, se en
cuentran las mostazas de azufre (sulfures de p-haloalquilo), aunque su inespecificidad no les permitió su utili
zación terapéutica. Compuestos análogos, tales como las mostazas nitrogenadas (p-haloalquilaminas), mostra
ron una cierta toxicidad selectiva, especialmente en el tejido linfoide, y fueron el origen de este amplio grupo de
compuestos al que pertenecen los representados en la Figura 18.3. Entre ellos, la mecloretamina y el clorambu-
cilo, a pesar de ser muy antiguos, siguen utilizándose en la actualidad.
CH,
Mecloretamina
Clorambucilo
Melfalán
HO-P-N
Mostaza de
Mostaza de uracilo fosforamida
Figura 18.3. Mostazas nitrogenadas.
Estudiando el mecanismo de acción de la mecloretamina. se aisló el compuesto 1 (Fig. 18.4). en el que

los dos extremos electrófilos de aquélla están unidos a los átomos N(7) de dos residuos de guanina. Se supu
so que dicho compuesto se formaba por bisalquilación de dos hebras, formando un enlace cruzado con dos
desoxiguanosinas de tipo 5GNC’, donde N = dA. dG. dC o dT. El enlace tiene lugar comenzando por la for
mación de un catión aziridinio. seguido de alquilación y, presumiblemente, repetición del ciclo para originar
1. Por otro lado, el compuesto monoalquilado podría reaccionar con un catión aziridinio procedente de otra
molécula de mecloreiamina, originando finalmente compuestos de tipo 2. De esta forma, la doble hélice no
quedaría muy distorsionada. De ambas posibilidades, la primera es la que aparentemente se corresponde con
la realidad.
Figura 18.4. Mecanismo de acción de las mostazas nitrogenadas.
Aunque la bis-alquilación puede producirse dentro de una misma hebra, o incluso entre dos hélices
(Fig. 18.5), diversos métodos han demostrado que tiene lugar, fundamentalmente, entre dos hebras.
FÁRMACOS QUE 1NTERACTÚAN CON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS 537
Bases enlazadas por puentes de hidrógeno
Esqueleto de
azúcar-fosfato
Agente alquilante
bifuncional
Monoaducto Unión ADN- Enlace cruzado Enlace Enlace

hidrolizado proteína en una hebra cruzado cruzado
entre dos entre dos
hebras hélices
Figura 18.5. Posibles uniones entre los agentes bis-alquilantes y el ADN.
La guanina alquilada, con una carga positiva en el anillo imidazólico. es más ácida, y en ella se desplaza
el equilibrio tautómero oxo-enol de la forma oxo apareada con citosina (véase la Fig. 18.2) a la forma enólica,
que sólo puede aparearse con timina, distorsionando el apareamiento normal de las bases (Fig. 18.6).
Figura 18.6. Apareamiento de un residuo de guanina alquilado con otro de timina.
Por otra parte, dicha carga promueve la ruptura del enlace guanina-desoxirribosa. con la separación de
guanina /V-alquilada o despurinación (Fig. 18.7).
En este proceso, el agua puede inicialmente adicionarse al C-8 del catión iminio o al catión oxonio del
azúcar.
del azúcar
Figura 18.7. Despumación tras la alquilación de los restos de guanina de ADN.
Las mostazas nitrogenadas aril-sustiluidas surgieron con la necesidad de diseñar análogos de meclore-
tamina menos reactivos. La mecloretamina se comercializa en forma sólida como clorhidrato, y sus solucio
nes acuosas se preparan inmediatamente antes de ser inyectadas, reaccionando como electrófilo en el orga
nismo de forma indiscriminada. La sustitución del /V-metilo por un anillo aromático disminuye la nucleofilia
del átomo de nitrógeno y la reactividad de la mostaza como electrófilo (Fig. 18.4). La introducción de un gru
po CO.H en para originó un compuesto más hidrosoluble, pero demasiado poco reactivo, por la presencia de
un grupo carboxilato atrayente de electrones. Al separarlo por grupos metileno. el número óptimo de éstos
fue 3, y surgió cl clorambucilo (Fig. 18.3). Las mostazas de fenilalanina (mclfalán, si es L-. medfalán si es o-
y merfalán si es racémica) son aproximadamente igual de eficaces entre sí. Tanto el melfalán como la uracil
mostaza se diseñaron suponiendo un transporte activo favorecido en los tumores que requieren un mayor
aporte de L-Phe o de uracilo. El derivado de clorambucilo 3 (Fig. 18.8), que lleva incorporada la espennidina
FÁRMACOS QI IE INTERACTÚAN CON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS 539
como amida, se diseñó pensando que. a pH fisiológico. las cadenas de amina estarían protonadas y los catio
nes amonio podrían asociarse a los restos fosfato del ADN con mayor afinidad que el dorambucilo. Esta ma
yor afinidad se demostró in vitro; sin embargo, aunque muchas células cancerosas poseen sistemas de trans
porte de poliaminas, el derivado 3 no se transportó adecuadamente al interior celular y fue muy poco activo
in vivo.
Otra estrategia para aumentar la afinidad del dorambucilo (compuestos 4-6 de la Fig. 18.8) ha consisti
do en enlazarlo, a través de un puente polimetilénico, a un cromóforo intercalante, como la quinazolina o la
acridina (véase, más adelante, fármacos intercalantes de ADN).
La intercalación del cromóforo suele producir, en efecto, mayor afinidad, pero también, en algunos ca
sos, distorsiones en los pares de bases, permitiendo alquilaciones en el N-l de la adenina. que normalmente
está implicado en un puente de hidrógeno y, en consecuencia, no se alquila.
Figura 18.8. Algunas modificaciones del dorambucilo dirigidas a aumentar su afinidad por el ADN.
3.1.2. 2-Cloroetil-nitrosoureas (CENU)
Este grupo se ha desarrollado a partir de un prototipo que mostró una ligera actividad en modelos de tumores
animales: la (V-metil-Al-nitrosourea. Análogos que llevan agolpamientos de 2-cloroetilo (CENU = cloroetil-ni-
trosoureas), como la carmustina y la lomustina (Fig. 18.9), mostraron mucha más actividad y. al ser lipófilos,
atraviesan la barrera hematoencefálica. por lo que se utilizan en el tratamiento de tumores cerebrales (aunque
son más tóxicos que otros antitumorales).
Estos fármacos se descomponen, para originar 2-hidroxietil y 2-cloroctilderivados con el ADN.
Al parecer, la carbamoilación que pueden producir los isocianatos, otros clectrófilos que generan en su
descomposición, no es importante para la actividad anticancerosa.
Figura 18.9. 2-Cloroetil-nitrosoureas. Especies electrófilas que generan.
De todos los derivados de alquilaeión que son capaces de originar estos fármacos con el ADN. resulta cru
cial el enlace cruzado (entre dos hebras) que une el N-l de un resto de guanina con el N-3 de su base comple
mentaria. citosina.
Se ha propuesto que este enlace se origina como se indica en la Figura 18.10.
Figura 18.10. Enlace cruzado formado por las CENU.

3.1.3. 1,3-Dialquil-3-acil-triazenos
Estos compuestos se descomponen químicamente por desacilación o heterólisis (Fig. 18. II). La primera ruta,
que es minoritaria, va seguida de una tautomería y transferencia del grupo alquilo sobre N-3 (metilo, en el ejem
plo). La segunda genera un catión alcanodiazonio. Si el alcano es un resto de 2-cloroetilo. se producen reaccio
nes análogas a las comentadas en el apartado anterior.
Desacetilación »
HjC-CO2H
COCH,
HN
'CH,
Figura 18.11. Degradación de l,3-dialquil-3-aciltriazcnos y derivados de alquilación del ADN.
La mitozolamida es un profármaco del triazeno 7 cuyo mecanismo de bioactivación se refleja en la Fig. 18.12.
Figura 18.12. Descomposición de la mitozolamida.

3.1.4. Sulfonatos de alquilo bifuncionales
De entre los muchos compuestos estudiados, se ha demostrado que el metano suifonato de tetrametileno (busul
fano. Fig. 18.13) lesiona el ADN. para dar. tras su hidrólisis, l,4-bis(7-guanil)butano (8) y 7-(4-hidroxibutil)
guanina (9). Entre otros análogos, hay que destacar la clomesona, un agente cloroetilante que es más selectivo
que las CENU y los cloroetiltriazenos ya comentados.
O O
H3C—S—O—(CH2)<—O—S—CH5
O O
Busulfano
H.C-S'^'O-S-O'
O O
Clomesona
Figura 18.13. Busulfano y clomesona.
3.1.5. Epóxidos y etileniminas
Las etileniminas (aziridinas). al estar protonadas a pH fisiológico formando cationes aziridinio, son demasiado
reactivas y no pueden utilizarse como fármacos. Sólo cuando existan sustituyentes atrayentes de electrones, que
desciendan el pKa del nitrógeno hasta un punto en que no se protonen in vivo, son menos reactivas y podrían
utilizarse como antitumorales alquilantes. En general, se requieren dos grupos reactivos por molécula (véanse
algunos ejemplos en la Fig. 18.14).
Carbocuona Diazicuona
Trietilenomelamina
Figura 18.14. Ejemplos de etileniminas
En cl caso de las aziridinilbenzoquinonas, puede ser necesaria la bioactivación rcductora a las correspon
dientes hidroquinonas, en las que el nitrógeno no está conjugado con grupos carbonilo y es más reactivo.
Dada la reactividad de los epóxidos como clectrófilos. no es extraño que se conozcan varios compuestos
de este tipo capaces de alquilar el ADN. En muchos casos, los epóxidos se forman en el metabolismo oxidativo
de compuestos con dobles enlaces (árenos u olefmas, véase el Capítulo 7). Un caso muy conocido es el efecto
carcinógeno/mutágeno que produce en los mamíferos el (+)-anti-BDPE (7.8-dihidroxi-9.10-epoxi-7,8,9,10-te-
trahidrobenz.o(u]pireno. Fig. 18.15). que se forma en el metabolismo oxidativo del bcnzo(u|pireno. Este epóxi-
do se une. por la posición bencílica (C-10), al grupo amino de la guanina. Curiosamente, la alquilación de los
otros tres estereoisómeros tiene mucha menor importancia biológica.
Benzo |a| pircno
Figura 18.15. Lesión del ADN como consecuencia del metabolismo oxidativo de benzo[«lpireno.
544 INTRODUCCIÓN A1-A QUÍMICA FARMACÉUTICA
La toxicidad de la aflatoxina Bi (Fig. 18.16) se debe igualmente a la epoxidación de un doble enlace.
Aflatoxina B,
ADN
Figura 18.16. Biaclivación oxidativa de la aflatoxina B, y alquilación del ADN.
El diepoxibutano (DEB. Fig. 18.17) es el más sencillo de los epóxidos capaces de formar enlaces cru
zados con el ADN. reconociendo en este caso a diferentes secuencias de nucleótidos. de las cuales la más
reactiva es la ’GGCC3.
El aislamiento del diol 10 implica que el enlace cruzado se produce en el N-7 de dos residuos de guani
na. La distancia entre ambos nitrógenos en la forma B del ADN es de 6,7 A. Dado que la cadena tetrametilé-
nica entre ellos, en la estructura 10. es mucho más corta (la formada por las mostazas nitrogenadas con un ni
trógeno adicional es de 5,1 Á), hay que suponer que, para que se forme el enlace cruzado entre estos dos
nitrógenos con ambos tipos de agentes alquilantes, estas regiones del ADN tienen que sufrir una gran distor
sión.
Diepoxibutano
Figura 18.17. Diepoxibutano y alquilación del ADN.
Mucho más complejo, y todavía dudoso, es el mecanismo por el que se produce un enlace cruzado entre
el ADN y el antibiótico carzinofilina = azinomicina B (Fig. 18.18), muy potente como antitumoral. que posee
una subestructura de epóxido y otra de aziridina.
De diversas experiencias con nucléofilos sencillos, se ha propuesto que. en primer lugar, alquila el ADN
el anillo de aziridina (más reactivo como electrófilo que el epóxido. por estar conjugado con un grupo carbonilo
de amida), y posteriormente el epóxido.
Carzinofilina
(azinomicina B )
Figura 18.18. Mecanismo propuesto para la formación del enlace cruzado de ADN y carzinofilina (azinomicina B).
3.1.6. cis-Diaminodicloroplatino(ll) (cisplatino)
Aunque ciertos metales se han utilizado como fármacos desde hace miles de años, quizás el fármaco que ha ad
quirido mayor relevancia, por su gran actividad antitumoral. es el cisplatino. El descubrimiento del cí.r-dicloro-
diaminaplatino(II) (cisplatino. Fig. 18.19) fue accidental. Su actividad se observó por primera vez por los efec
tos que producía una corriente eléctrica en la velocidad de crecimiento de E. coli en presencia de NH,CI. como
consecuencia de la generación de cisplatino por la electrólisis de los electrodos de platino. Desgraciadamente, el
cisplatino es muy tóxico (especialmente para el riñón), por lo que se administra con una hidratación adecuada
del paciente. Además, es uno de los fármacos con mayor actividad emética, y debe administrarse por vía intra
venosa. Estos problemas, junto con la resistencia que empezaba a aparecer en muchos tumores, impulsó la bús
queda de otros complejos menos tóxicos, como el carboplatino [<M-(l.l-dicarboxi-ciclobutano)diaminaplati-
no(ll)]. que también se utiliza en terapéutica, o el compuesto activo por vía oral JM2I6 [bír-acetatoamina-
dicloro(ciclohexilamina)platino(IV)], un profármaco que se metaboliza in vivo para dar la especie activa [ami-
na(ciclohexilamina)dicloroplatino(ll)|, JM118.
El cisplatino es un complejo plano, eléctricamente neutro, que es capaz de atravesar las membranas celu
lares. Su toxicidad se debe a su capacidad para intercambiar los dos iones cloruro adyacentes por dos nitrógenos
de bases púricas o pirimidínicas, para formar un quelato que interfiere la replicación. Sin embargo, diversos es
tudios han demostrado que, cuando el cisplatino atraviesa la membrana celular y la concentración de CI des
ciende, es cuando se produce el desplazamiento sucesivo de los ligandos CI por el agua, convirtiéndose el cis-
DDP neutro en especies cargadas que son atraídas por el ADN negativamente cargado (Ecuaciones [1J y (2J).
para finalmente enlazarse.
ki
H,O + <ú-[Pt(NH,),CI,| »=«-crf-[Pt(NH,)2CI(H2O)]+ + CF [1)
k.t
k2
H2O + cis-(Pt(NH3)2CI(H2O)]
* *
< í.s-|Pt(NH
^=i 3),(H,O);|2* + CF [2]
Este tipo de enlace es esencialmente irreversible, como el de los agentes alquilantes. La mayor parte de
las lesiones del ADN se producen por enlaces dentro de una de sus hebras, en contraste con el que producen las
mostazas nitrogenadas, que enlazan dos hebras de la hélice.
Este distinto comportamiento podría explicarse teniendo en cuenta que la distancia entre los centros elec-
trófilos del cisplalino es todavía menor que la de las mostazas. Los complejos más abundantes se forman con el
N-7 de dos guaninas (11) o de guanina y adenina adyacentes (12), habiéndose encontrado también complejos
con el N-7 de dos guaninas que tienen otra base entre ellas (13).
Cl
CI-Pt-NHj
NH,
Cisplalino
Especie activa
JMI18
Figura 18.19. Complejos de Pl(II) y principales complejos con una hebra de ADN.
3.1.7. Dimeros que forman enlaces cruzados con el ADN
La formación de enlaces cruzados enlre el ADN y las moléculas pequeñas que hemos considerado hasta ahora
tiene inconvenientes: es poco selectiva, ya que los motivos de reconocimiento se limitan a 2 ó 3 bases de la se
cuencia de ADN; la afinidad es baja, debido a su pequeño tamaño, y la velocidad de la segunda alquilación es
mucho más lenta que la de la primera. Una estrategia que está siendo muy utilizada para superar estos inconve
nientes es la dimerización.
Algunos productos naturales, como la isocrisohermidina (Fig. 18.20), son dímeros que tienen gran afini
dad y especificidad. Dado que la actividad biológica de sus enantiómeros (+) y (-) y del racémico es aproxima
damente la misma a pH ácido o básico, y que su eficacia desciende a pH neutro, se ha sugerido que los agentes
electrófilos son las cetonas 14 y 15. generadas por la apertura del anillo, y no los cationes aciliminio (16) u oxo-
nio (17). generados por la salida de OH.
15
Figura 18.20. Mecanismo propuesto para la formación de enlaces cruzados entre el ADN, y la isocrisohermidina.
Los ciclopropilpirroloindoles (CPI), como la adozelesina (Fig. 18.21), son agentes que producen la alqui-
lación del N-3 de la adenina en el ADN, en un proceso que conduce a reacomodaciones del mismo y que termi
na con la rotura de la hebra. Se han preparado compuestos dímeros, como 18 y 19 y dentro de los compuestos
19. el denominado bizelesina ha llegado a la fase de ensayos clínicos.
Adozelesina
19 (X = CO : Bizelesina)
Figura 18.21. Algunos ciclopropilpirroloindoles alquilantes del ADN.

Igualmente, dado que ciertos antibióticos antitumorales con estructura de pirrolo[2,l-c][l,4|benzodiaze-

pina, como la antramicina, la tomaimicina y la siboricina (Fig. 18.22), son agentes que alquilan reversiblemente
el grupo NH, de la guanina en el surco menor del ADN tras la conversión de la carbinolamina (-N(IO)H-
C(ll)OH-) en una imina electrófila [-N( 10)=C(11 )-]> se han preparado derivados de pirrolobenzodiazepinas
bis-alquilantes, como 20, que se enlazan muy eficazmente al ADN.
Figura 18.22. Pirrolo(2,1-c][ 1.4]benzodiazepinas y derivados que producen enlaces cruzados con el ADN.
También se han preparado complejos que poseen dos centros de Pt(II) (como 21-23) con un solo cloro y,
por lo tanto, con una sola coordinación en cada uno (Fig. 18.23).
Figura 18.23. Análogos de cisplatino dinucleares.
3.2. Profármacos alquilantes
3.2.1. Compuestos que se activan por fotólisis: psoralenos
Los psoralenos son compuestos naturales, aislados de plantas y de microorganismos, que poseen un anillo de fu-
rano fusionado a otro de cumarina. Son capaces de originar enlaces cruzados con dos restos de tiniina entre dos
hebras de ADN, por fotólisis. En la Figura 18.24, se representan dos de los psoralenos más estudiados: el 8-meto-
xipsoraleno y el 4,5',8-trimetilpsoraleno. Inicialmente, la estructura tricíclica plana de estos agentes se intercala

en el dúplex entre dos bases que contengan 5'-TA o 5'-AT. Tras la absorción de la luz. el doble enlace 4',5' del fu-
rano reacciona con el doble enlace 5,6 de la tintina, en una cicloadición 12+2J, para formar 24. Del mismo modo,
el doble enlace 3,4 de pirona origina otra cicloadición [2+2] con el doble enlace 5,6 de otra limina (25). En el tri-
metilpsoraleno. aumenta la afinidad como agente intercalante y el rendimiento en la cicloadición. Se han diseña
do análogos sintéticos (como 26) para aumentar la hidrosolubilidad.
Figura 18.24. Psoralenos y mecanismo de acción.
Algunos psoralenos se utilizan por vía oral o tópica, seguida de exposición a la radiación ultravioleta, en
el tratamiento de la psoriasis, el linfoma cutáneo de células T y otros procesos asociados con trastornos autoin-
munitarios. Recuérdese que las cicloadiciones [2 + 2] son procesos fotoquímicos que requieren la activación
por radiaciones ultravioleta.
3.2.2. Profármacos alquilantes que se activan por el metabolismo oxidativo
Aunque existen varias enzimas capaces de catalizar reacciones de oxidación, los citocromos P-450 son los res
ponsables de la mayor parte de los procesos de bioactivación hepática que originan agentes alquilantes del
ADN. Comentaremos algunos que originan enlaces cruzados con el ADN.
3.2.2.1. Metilhidrazinas: procarbazina
Al estudiar una serie de dialquilhidrazinas. preparadas inicialmente como inhibidores de la monoamino-oxidasa

(IMAO), se descubrió que los derivados con grupo ÍV-metilo eran citotóxicos. El más importante de estos deri
vados es la procarbazina (PZC). que se utiliza para el untamiento del linfoma de Hodgkin. El grupo hidrazina se
bioactiva por oxidación, según se indica en la Figura 18.25, transformándose primero en un azoderivado, des
pués en los dos posibles azoxiderivados y. finalmente, en la especie metildiazonio, que es el agente alquilante.
El resto de la estructura se elimina como ácido. El mecanismo alternativo sugerido en principio, que responsa
bilizaba al radical metilo formado por tautomería del azoderivado, seguida de hidrólisis a metilhidrazina y oxi
dación, parece estar desechado.
Procarbazina
Figura 18.25. Mecanismo de bioactivación de la procarbazina.
3.2.2.2. Ciclofosfamida
Debido a que la concentración de fosforamidasas es mayor en las células neoplásicas, se estudiaron muchos
profármacos de mostazas nitrogenadas con estructura de fosforamida. Así surgió, en 1958, la ciclofosfamida.
que es el agente alquilante más utilizado como antitumoral (Fig. 18.26). La bioactivación comienza con la oxi
dación en C-4 (adyacente al NH). para dar el hidroxidcrivado 26. Este metabolito se abre espontáneamente para
dar 27. que ya es activo biológicamente, aunque las mostazas 28 y 29 deben ser los metabolites responsables de
la alquilación del ADN y la formación del derivado 30. Numerosos estudios han permitido conocer qué citocro-
mos P-450 son específicos en la bioactivación de la ciclofosfamida y sus análogos. La sobreexpresión selectiva
de los genes que los codifican en tumores, por técnicas de terapia génica. en combinación con el profármaco, es
una nueva estrategia que se apunta para aumentar su potencialidad.
FÁRMACOS QUE INTERACTUAN CON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS 551
La acroleína. que se origina a partir de 27, es un aceptor de Michael que parece ser responsable de ciertos
efectos secundarios (como la cistitis hcmorrágica) producidos por la ciclofosfamida. Por otra parte, la oxidación
catalizada por la aldehido deshidrogenasa de 26 y 27 a otros metabolitos inactivos con estructura de amida y
ácido carboxílico, respectivamente, supone una parcial destoxiftcación selectiva, ya que se produce preferente
mente en células sanas.
Metabolitos inactivos
Alcohol
deshidrogenasa
Figura 18.26. Bioactivación y destoxiftcación de la ciclofosfamida.
3.2.2.3. N.N,N',N',N",N"-Hexametilmelamina y compuestos relacionados
La hcxametilmelamina (HMM, Fig. 18.27) es un profármaco que se ha mostrado útil en el tratamiento de cier
tos tumores. Se bioactiva por hidroxilación catalizada con citocromos P-450. seguida de deshidratación, para
dar cationes iminio electrófilos que se unen al ADN. El trimelamol, un derivado que no requiere el primer paso
de oxidación, es más eficaz pero requiere sistemas adecuados de transporte. El aislamiento del aducto 31 se
debe, al parecer, a la actuación del formaldehído liberado en la descomposición del trimelamol con el grupo
amino de dos restos de adenina.
Trimelamol
Figura 18.27. Bioactivación de hexametilmelamina y aducios con ADN. Trimelamol.

3.2.2.4. Triazenoimidazoles (dacarbazina)
En el grupo de triazenoimidazoles, los A/-dialquilderivados inactivos sufren la desalquilación oxidativa. tal

como se indica en la Figura 18.28, para dar N-monoalquilderivados.
Éstos, en la forma tautómera indicada, sufren la ruptura del enlace N-N para dar 5-aminoimidazoles y ca
tiones de alquildiazonio. que son los electrófilos responsables de la alquilación del ADN.
Este mecanismo se ha propuesto basándose en los estudios realizados con dacarbazina.
N CONH2
<-y '
H N=Nx „CH,
P-450
N '
I
CH3
Dacarbazina
ADN
Figura 18.28. Mecanismo propuesto para la alquilación del ADN por dacarbazina.
3.2.2.5. Alcaloides de pirrolizidina
Muchos de estos alcaloides son biológicamente activos. Los diacilderivados del sistema 6-hidroxi-4-hidroxime-
til-l-azabiciclo(3.3.0]oct-3-eno, entre los que se encuentran los diésteres macrocíclicos senecifilina, senecioni-
na y monocrotalina (Fig. 18.29), se bioactivan por acción de citocromos P-450 a los 5-hidroxiderivados, que se
deshidratan para dar un anillo de pirrol.
Éste posee dos centros electrófilos activados por conjugación con el par de electrones no compartido del nitró
geno.
5-Hidroxi-
derivados
activados por conjugación
con el N pirrólico
Figura 18.29. Algunos alcaloides representativos de la pirrolizidina y mecanismos de bioactivación.
De esta forma, estudios con el compuesto sintético 32 con determinados oligonucleótidos permitieron ais
lar el aducto 33 (Fig. 18.30).
33
Figura 18.30. Aducto de pirrolizidinas con oligonucleótidos.
3.2.3. Profármacos alquilantes que se activan por metabolismo reductor
Las células hipóxicas (con falta de oxígeno) que existen en los tumores sólidos son resistentes a los efectos de
las radiaciones ionizantes, ya que éstos son consecuencia de la existencia de oxígeno. Éste se transforma en su-
peróxido, peróxido de hidrógeno y. finalmente, en radical hidroxilo. que produce la lesión celular (véase el Ca
pítulo 19). El desarrollo de un tumor sólido requiere la expresión y secreción de factores de la angiogénesis pa
ra que los vasos sanguíneos aporten oxígeno, por lo que existen células tumorales lejos de estos vasos, que son
hipóxicas. También, el crecimiento del lumor constriñe y cierra los vasos ya existentes. De ahí el potencial tera
péutico que poseen ciertos compuestos cuyo potencial redox les permite activarse in vivo por reducción enzima-
FÁRMACOS QUE INTERACTÜAN CON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS 555
tica, catalizada fundamentalmente por enzimas microsómicas y citocromo-P450 reductasas. Entre ellos se en
cuentran nitroderivados y azoderivados. quinonas y complejos de metales de transición.
3.2.3.1. Profármacos de mostazas nitrogenadas y compuestos relacionados
En el Capítulo 8, se comentó la utilización de derivados aromáticos con grupos nitro y azo como profármacos
activables por reducción. En las mostazas nitrogenadas derivadas de p-nitroanilina. la conjugación del par de
electrones del nitrógeno con el grupo NO, impide la formación del catión aziridinio que se requiere para un pro
ceso de alquilación eficaz (Fig. 18.31).
Figura 18.31. Bases del diseño de mostazas nitrogenadas derivadas de p-nitroanilina.
La reducción del grupo nitro (véase una posible transformación en la Ecuación [3]) genera hidroxilaminas
y, finalmente, aminas por adición de cuatro o seis electrones, respectivamente (en este proceso, se pueden libe
rar radicales hidroxilo. como se verá en el Capítulo 19). Las aminas pueden formar cationes aziridinio alquilan
tes.
le-
Ar-NO, ArNO2- Ar-N = O -^♦Ar-Ñ-OH -l£i
Ar-NHOH
*
Nitroderivado f Nitroso ff H Hidroxilamina
GSU ©oh derivado 2GSH-~J
Superóxido GS- H2O + 2GS- ^-4
Ar-NH,
Amina
Como ejemplo, en la Figura 18.32, se representa el mecanismo de bioactivación del profármaco 34.
En este caso, la reducción a amina aumenta enormemente la basicidad del nitrógeno de quinolina, facilitando
la ruptura del enlace C-O indicado, originando una mostaza de fosforamida que forma enlaces cruzados con
el ADN.
También por reducción, se bioactivan las mostazas nitrogenadas azoaromáticas. como 35. Últimamente,
se está estudiando la utilidad de los /V-óxidos. como 36 y 37. que son profármacos de la mecloretamina y el clo-
rambucilo. respectivamente, también bioactivables por reducción.
\----- NH,
N-P-OH +
Mostaza de
fosforamida
Figura 18.32. Ejemplos de mostazas nitrogenadas enmascaradas.
La transformación de un sustituyente nitro, que atrae fuertemente a los electrones, en un grupo hidroxi-
lamina o amina, débilmente donador si no está protonado, puede reactivar como electrófilo a otro centro de la
molécula.
Así. pueden generarse iminometilenquinonas como 38 (Figura 18.33).
También pueden activarse como electrófilos ciertos nitroimidazoles, como el misonidazol.
Este compuesto es capaz de alquilar el ADN a través de un producto intermedio de hidroxilamina. que
activa como electrófilo la cadena hidroxilada en una reordenación semejante a la reacción de Bamberger (que
transforma hidroxilaminas aromáticas en p-aminofenoles).
Del misino modo, el compuesto 39 es un agente que produce enlaces cruzados con el ADN, comenzando
el ataque de éste, en condiciones aeróbicas, por el anillo de aziridina (véase el Apartado 2.1.5) y. una vez an
clado en el receptor, la reducción del grupo nitro a hidroxilamina origina la segunda alquilación.
Misonidazol
Figura 18.33. Bioactivación reductora de otros nitroderivados aromáticos.
También se ha propuesto que el antiprotozoario ronidazol, tras su bioactivación por reducción del grupo
nitro a hidroxilamina. alquila grupos mercapto de proteínas del parásito, formando finalmente derivados tipo 40
(Fig. 18.34).
Figura 18.34. Mecanismo de acción propuesto para el ronidazol a través de un proceso de alquilación reductora.
3.2.3.2. Antraciclinas
Son muy importantes en el tratamiento antitumoral. Se han aislado muchos antibióticos naturales pertenecientes
a este grupo y se han preparado miles de análogos sintéticos. Poseen una estructura cromófora de cuatro ciclos,
con una función quinona, grupos fenólicos y una porción de hidrato de carbono. Los fármacos más representati-
vos son la daunorrubicina y la doxorrubicina (adriamicina) (Fig. 18.35). Aunque actúan a través de diversos me
canismos, principalmente la inhibición de la topoisomerasa II o la ruptura del ADN tras procesos reductores, to
das tienen en común su capacidad para intercalarse con el ADN. El cromóforo penetra en la doble hélice y se in
tercala entre residuos 5CpG' de ambas hebras, colocándose de forma ortogonal con respecto al eje de la hélice
(véase el Apartado 4). A continuación, se forma un complejo temario con la topisomerasa II, con la consiguien
te inhibición de la replicación y la transcripción. Desde un principio, se observó la importancia del hidroxilo en
C-9 (que debe participar en un enlace de hidrógeno con el receptor), ya que su ausencia significa la pérdida de
la actividad. El grupo amino protonado del resto de azúcar se sitúa en el centro de un surco menor y puede mo
dificarse ampliamente sin que se altere la actividad.
O OH O
Daunorrubicina Doxorrubicina
(Adriamicina)
Figura 18.35. Antraciclinas representativas.
El proceso de reducción de estos compuestos transcurre en condiciones aeróbicas, por captación de un

electrón para dar un radical semiquinona. que transfiere un electrón al oxígeno, regenerando la antraciclina y
produciendo superóxido (O3-•)- Posteriormente, éste forma peróxido de hidrógeno y, finalmente, radicales hi
droxilo, que rompen la hebra (véase el Capítulo 19). En ausencia de oxígeno (tumores sólidos), se ha propuesto
que el radical semiquinona puede eliminar el resto de azúcar, originar una metilenquinona electrófila (41). y al
quilar el ADN (Fig. 18.36).
Trabajos posteriores parecen demostrar que en el proceso de alquiiación del ADN no está implicado el in
termedio 41. sino que el peróxido de hidrógeno formado en la activación reductora aerobia produce formaldehí-
do a través de una reacción de Baeyer-Villiger. éste se condensa con el grupo amino en 3' del azúcar y, poste
riormente, se forma el aminal 42 con el grupo amino de un resto de guanina próximo (Fig. 18.37).
ADN
X = OH. doxorrubicina
X = H. daunomicina
Figura 18.37. Mecanismo alternativo propuesto para la alquilación de ADN por doxorrubicina.
3.2.3.3. Mitomicina C y estructuras relacionadas
La mitomicina C es el prototipo de los antibióticos antitumorales que actúan como agentes alquilantes del
ADN por bioactivación reductora. Posee un esqueleto de pirrólo) 1.2-a]indol, con una estructura de quinona y
un anillo de aziridina.
Diversos experimentos han demostrado que. en la reducción a hidroquinona (Fig. 18.38), el N-4 deja de
estar conjugado con un carbonilo (amida viníloga), pudiendo su par de electrones desplazar el grupo metoxilo y
originar un ion iminio. Éste, por pérdida de un protón da 43 y. posteriormente. 44. que actúa como electrófilo en
C-1 para dar 45. En éste, el par de electrones del nitrógeno indólico colabora en la salida de carbamato, formán
dose un segundo centro electrófilo en C-10 (46). Tras la oxidación a quinona se genera 47.
Figura 18.38. Mecanismo propuesto para la formación de un enlace cruzado entre el ADN y la mitomicina C tras
su bioactivación reductora.
Más recientemente, se han aislado otros antibióticos, como FR-900482 y FR-66979, más activos y menos
tóxicos que la mitomicina C. que también requieren una biactivación reductora (Fig. 18.39). Ésta transcurre al
parecer con reacomodación del heterociclo: apertura a 48 y ciclación al sistema pirroloindólico 49, que se com
porta análogamente a la mitomicina C para dar, finalmente, la estructura SO.
,, OCONH,
OH 'V' 2
FR-66979. R = CH.OH FR-900482
50
Figura 18.39. Mecanismo de bioactivación reductora propuesto para el antibiótico FR-900482.

3.2.3.4. Bioxalomicinas, ecteinascidina 743 y otros compuestos
Los antibióticos bioxalomicinas, naftiridomicina y cianociclina poseen una actividad antitumoral y una estruc
tura semejantes, habiéndose demostrado que la naftiridomicina se forma en el aislamiento de las bioxalomicinas
por hidrólisis en C-7 y apertura de uno de los anillos de oxazolidina (Fig. 18.40). La naftiridomicina y la cia-
nociclina inhiben la síntesis del ADN, actuando como agentes alquilantes del surco menor en regiones ricas en
las bases GC, produciendo además la oxidación del ADN a través de su reducción a semiquinona, generación de
superóxido y, finalmente, radical hidroxilo. La alquilación debe producirse en el producto intermedio de la bio
activación reductora 51. un catión iminio muy electrófilo.
Bioxalonúcina a(, R = H Bioxalonúcina 8,. R = H

Bioxalomicina a2. R = Me Bioxalomicina p2- R = Me
Figura 18.40. Bioxalomicinas y algunos compuestos relacionados. Mecanismo propuesto para la alquilación de ADN
que produce naftiridomicina.
Estos resultados permiten suponer que la bioxalomicina a¡ debe formar enlaces cruzados con el ADN. És
tos pueden originarse a través del ataque nucleófilo en C-3a y C-7 del producto intermedio con dos funciones
iminio (52). por ataque en C-9 y C-13b a estructuras de metilenquinona formadas por desprotonación de la for
ma hidroquinona (53), o por ataque a productos intermedios de estructura mixta (iminio y metilenquinona)
como 54 y 55 (Fig. 18.41).
Figura 18.41. Posibles procesos de dialquilación de ADN por bioxalomicina cq. G: Guanina de ADN.
Otros compuestos naturales con acción antitumoral que poseen cierta semejanza estructural son las safra-
micinas y las ecteinascidinas.
La saframicina A y la ecteinascidina 743 (que se encuentra en un avanzado estado de desarrollo clínico)
se representan en la Figura 18.42.
Ambas alquilan el surco menor del ADN, posiblemente por procesos de activación semejantes al de la
bioxalomicina oq.
Figura 18.42. Otros antitumorales alquilantes: saframicina A y ecteinascidina 743.
4. FÁRMACOS INTERCALANTES DE ADN
Son compuestos planos, aromáticos o heteroaromáticos, capaces de incorporarse entre las bases apareadas de
sorganizando la forma de la doble hélice, lo que impide la replicación y la transcripción. Esta interacción modi
fica las propiedades químicas y espectroscópicas del agente intercalante, fundamentalmente sus espectros de
absorción electrónica, y se traduce generalmente en cambios de conformación del ADN que interfieren la ac
ción de las enzimas que se unen al mismo, fundamentalmente topoisomerasas y polimerasas. La intercalación
suele ser el primer paso de una serie de acontecimientos que terminan dañando el ADN por diversos mecanis
mos, fundamentalmente alterando las interacciones de éste con las enzimas mencionadas.
Los agentes intercalantes pueden interactuar con el ADN, aproximándose por un surco mayor o menor, y
pueden ser más o menos selectivos. La formación de complejos por intercalación es reversible, siendo la fuerza
impulsora para su unión una combinación de interacciones electrostáticas, de van der Waals e hidrófobas, así
como enlaces de hidrógeno y factores entrópicos. Son cromóforos planos conjugados, deficientes en electrones
que suelen llevar cadenas flexibles con grupos polares.
Entre los antitumorales intercalantes, destacan por su número, potencia y actividad quimioterápica las an-
traciclinas, anteriormente estudiadas como alquilantes. En ellas, el sistema de antraquinona es un cromóforo
plano, particularmente bien adaptado para su intercalación entre los pares de bases del ADN. ya que su superfi
cie se acopla íntimamente a la de éstas. Los derivados de la antraquinona surgieron en la búsqueda de análogos
de antraciclinas que carecieran de la toxicidad cardíaca de éstas. Entre ellos, la mitoxantrona y la ametantrona
tienen interés terapéutico (Fig. 18.43). Los derivados del antraceno. como el bisanlreno, tienen un mecanismo
de acción análogo.
Los derivados de la acridina se introdujeron en terapéutica en el siglo xtx como antipalúdicos. Posterior
mente, empezaron a usarse la proflavina y la aminacrina como antibacterianos y más adelante algunos deriva
dos de la 9-aminoacridina. como la amsacrina. se utilizaron como antitumorales. Las anilinoacridinas se inter
calan con el ADN, situándose el anillo de anilina casi perpendicular al plano del cromóforo acridina. La
intercalación es necesaria, pero no suficiente, para la acción antitumoral, ya que ésta se produce por la posterior
interacción de este complejo con la enzima topoisomerasa II. que queda inhibida. En consecuencia, y al igual
que ocurre en el caso de las antraciclinas, se produce la ruptura de las hebras de ADN. Algunos derivados inte
resantes poseen un grupo carboxamida en la posición 4. La amsacrina es el más conocido de los cientos de 9-
anilinoacridinas que se han investigado como antitumorales, siendo un fármaco establecido en el tratamiento de
las leucemias agudas y los linfomas malignos.
La nitracrina es otro antitumoral intercalante derivado de la 9-aminoacridina. En ausencia de agentes re
ductores, se intercala de forma reversible con el ADN, pero el grupo nitro puede reducirse y actuar como otros
nitroderivados cuyo mecanismo ya se ha comentado. Esto explica que resulte selectivamente tóxica frente a cé
lulas de cultivos hipóxicos y justifica su eficacia en tumores sólidos poco oxigenados.
R O NH(CH,),NH(CH2),OH
R = OH Miloxantrona
R=H Ametantrona
Nitracrina
Figura 18.43. Agentes intercalantes. Antraquinonas, acridinas y compuestos relacionados.
La actinomicina D es un antibiótico que se utiliza en el tratamiento de ciertos tumores (Fig. 18.44).

Contiene dos lactonas cíclicas de pentapéptido unidas a un cromóforo de fenoxazinona. Utilizando la infor
mación obtenida del estudio de la estructura cristalina del complejo actinomicina-desoxiguanosina. se ha
propuesto un modelo molecular para su intercalación con el ADN. Según éste, los grupos amida de los resi
duos de treonina del péptido, dispuestos simétricamente en una molécula de actinomicina intercalada en el
surco menor de la secuencia G-C, interactúan por enlaces de hidrógeno, específicamente, con el átomo de N-
3 y el grupo amino en 2 de la guanina. Este complejo intercalante está muy estabilizado e inhibe la ARN-po-
limerasa (esta inhibición produce el bloqueo de la síntesis de ácidos ribonucleicos). También, igual que la
adriamicina, causa la rotura de hebras de ADN a través de la formación de radicales o por interacciones con
topoisomerasas.
Los alcaloides elipticina y camptotecina (CPT) son también agentes intercalantes de ADN que deben su
acción a la inhibición de las enzimas topoisomerasa II o I, respectivamente, que producen finalmente estos com
plejos. Se ha sugerido que la elipticina puede, además, actuar como agente alquilante, ya que las peroxidasas
oxidan la posición C-9 a un hidroxiderivado que. por posterior oxidación, origina una estructura de quinonimi-
na electrófila. De los derivados de la elipticina ha destacado la intolpicina, mientras que de los muchos análogos
de la compotecina que se han preparado (debido a su toxicidad y falta de solubilidad), algunos como el irinote-
cán (un profármaco que se bioactiva por hidrólisis de la cadena de tipo éster), se utilizan en terapéutica. Entre
otros agentes intercalantes de ADN e inhibidores de la topoisomerasa II que han sido muy estudiados citaremos
la mitonafida. un representante del grupo denominado naftalimidas (Fig. 18.44).
Figura 18.44. Otros compuestos intercalantes.
Ciertos agentes intercalantes son selectivamente tóxicos frente a organismos parásitos sencillos y multice
lulares. Esto ocurre con la cloroquina y la quinacrina. análogos de la quinina activos como antipalúdicos, y el
antihelmíntico lucantona (Fig. 18.45). El agente antitripanosómico etidio es un derivado de la fenantridina tam
bién intercalante.
5. FÁRMACOS QUE SE UNEN DE FORMA NO COVALENTE AL ADN SIN INTERCALARSE
Ciertos antitumorales se unen de forma no intercalante al ADN, estabilizando un complejo temario ADN-topoi-
somerasa Il-fármaco.
Entre ellos, se encuentran las epipodofilotoxinas tenipósido y etopósido, que son derivados semisintéticos
del alcaloide natural podofilotoxina (véase el Apartado 6), útiles en ciertos tipos de tumores (Fig. 18.46).
También se ha sugerido que estos compuestos podrían activarse in vivo por desmetilación a catecoles. los
cuales originarían radicales libres como productos intermedios en su oxidación a quinonas o semiquinonas, y
dichos radicales podrían unirse de forma covalente al ADN o a la topoisomerasa II.
Etidio
Figura 18.45. Agentes intercalantes antiparasitarios.
Podofiioloxina
Etopósido, R = CHt (acetal del ctanal)
Tenipósido. R = 2-tienilo (acetal del tiofeno-2-
-carbaldehído)
Figura 18.46. Epipodofilotoxinas representativas.
Otros fármacos antitumorales no intercalantes se unen al ADN a través del surco menor, seleccionando
secuencias de nucleótidos ricas en A-T.
Son moléculas relativamente largas y flexibles, con grupos cargados positivamente en sus extremos, ca
paces de interactuar con los grupos fosfato del ADN (como el agolpamiento guanidinio), y varios grupos do
nadores y aceptores de protones (como los grupos amida), que pueden formar enlaces de hidrógeno con el car
bonilo en 2 de la timina o el nitrógeno 3 de la adenina.
La netropsina y la distamicina A, así como sus análogos, poseen unidades repetidas de /V-metilpirrolcar-
boxamida (Fig. 18.47).
También se unen al surco menor la pentamidina o los bis-amidinobenzimidazoles.
/>ri-Amidinobencimidazoles
Figura 18.47. Otros fármacos que se unen al surco menor del ADN. Interacciones por enlace de hidrógeno propuestas
para la distamicina A en el surco menor con las secuencias A-T del ADN.
6. INHIBIDORES DE LA MITOSIS QUE ACTÚAN EN LOS MICROTÚBULOS
Los microtúbulos, formados principalmente por la proteína tubulina. son muy importantes en las células euca-
riotas como componentes del uso mitótico. responsable del movimiento de los cromosomas durante la división
celular. Los fármacos que alteran su función son selectivamente tóxicos, al inhibir la mitosis y, por tanto, son
posibles antitumorales. Entre ellos, los alcaloides naturales colchicina y podoftlotoxina se enlazan a la tubulina,
inhibiendo la asociación de microtúbulos (Fig. 18.48). Ambos comparten una estructura de trimetoxifenilo, que
debe ser importante para dicha unión. Aunque la podoftlotoxina no ha encontrado aplicación en terapéutica, ya
hemos dicho que algunos de sus derivados epimerizados en C-4 (epidofilotoxinas) son muy utilizados en el tra
tamiento del cáncer (véase el Apartado 5).
Los alcaloides de la Vinca, vincristina y vinblastina. también se unen a la tubulina. La primera se utiliza
en el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda y otras neoplasias, y la segunda en el tratamiento de la enfer
medad de Hodgkin. Se han encontrado otros muchos compuestos naturales que se enlazan a la tubulina en los
mismos lugares que los alcaloides de la Vinca o que la colchicina.
El paclitaxel (taxol), por el contrario, es un diterpenoide que. tras enlazarse a la tubulina. promueve la for
mación de haces de microtúbulos resistentes a la despolimerización con la consiguiente paralización de la mito-
sis. Desde que se resolvió el problema de disponer de cantidades suficientes por scmisíntesis (acilación del al
cohol tetracíclico que es más accesible), paclitaxel y otros análogos como docetaxel se introdujeron en la
terapéutica antitumoral.
Podofilotoxina
Figura 18.48. Antitumorales inhibidores de la mitosis por su interacción con los microtúbulos.
7. ANTIBACTERIANOS QUE INTERACTION CON ARN. INHIBIDORES

DE LA BIOSÍNTESIS DE PROTEÍNAS
El ribosoma es el lugar de la célula donde se produce la biosíntesis de las proteínas. En las células procariotas,
el ribosoma sedimenta a 70S. existiendo dos subunidades a 50S y 30S que están libres o combinadas. La sub
unidad 30S libre es la que inicia la síntesis de las proteínas tras la asociación con un factor de iniciación (1F-3),
con la participación del ARN mensajero (ARNm).
Entre los antibacterianos que inhiben la síntesis proteica, se encuentran la estreptomicina (que inhibe la
iniciación), las tetraciclinas (que inhiben la unión del aminoacil-tARN a la subunidad 30S), el cloranfenicol
(que inhibe la peptidiltransferasa), la eritromicina (que inhibe la traslocación) y la puromicina (que se une a la
peptidil transferasa de forma no selectiva).
La estreptomicina es un representante de los denominados antibióticos aminoglucósidos, ampliamente
utilizados en terapéutica (Fig. 18.49). Produce varios efectos en las bacterias relacionados con la descodiftea-
ción y la inhibición del paso de iniciación de la biosíntesis proteica. Estos microorganismos pueden hacerse re
sistentes por una mutación que afecta a una de sus proteínas ribosómicas. la SI2. Además, son capaces de indu
cir enzimas para acetilar, fosforilar o adenilar los grupos amino o hidroxilo del antibiótico, con la
correspondiente inactivación del mismo (aminoacetiltransferasas. que acctilan los grupos amino de las posicio-
ncs 2' y 6' del anillo I y el grupo amino de la posición 3 del anillo II. fosfotransferasas. que fosforilan el grupo
hidroxilo de la posición 3' del anillo I. y nucleotidiltransferasas. que adenilan los hidroxilos 2" y 4" del anillo III
y el 4' del anillo I).
La investigación en este grupo de antibióticos ha ido dirigida principalmente a la identificación de nuevos
compuestos o a la modificación de estructuras ya conocidas para crear nuevos modelos que carezcan de los gru
pos funcionales susceptibles al ataque enzimático o que estén impedidos estéticamente y sean resistentes. Así.
las gentamicinas y la tobramicina no tienen el grupo hidroxilo en la posición 3' y no se inactivan por las fosfo
transferasas.
Las gentamicinas son también resistentes a las nucleotidil transferasas, enzimas que son capaces de ade-
nilar los grupos hidroxilos secundarios en disposición ecuatorial.
La gentamicina C, es resistente, quizás por razones de impedimento estérico. a las acetiltransferasas. que
acetilan el grupo amino de la posición 6'.
N-metil-¿-glucosamina
Nombre R R, R2 R, R4 R, R„
Gentamicina C, H CH, CH, CHj OH CH, H
Gentamicina C2 H CH1 H CH, OH CH, H
Gentamicina C,, H H H CHj OH CH, H
Tobramicina OH H H H H OH CH2OH
Figura 18.49. Representantes de los antibióticos aminoglucósidos.
Las tetraciclinas constituyen una amplia familia de antibióticos de amplio espectro, que actualmente
han perdido gran parte de la importancia que tuvieron en el pasado (Fig. 18.50).
La inhibición de la biosíntesis proteica se produce a través de la unión de las tetraciclinas con la sub
unidad ribosómica 30S. impidiendo la unión del aminoacil-ARNt al ARNm. Al parecer, supone la formación
de un complejo con Mg , ya que ambas uniones requieren este catión.
Aunque son capaces de unirse a los ribosomas de las células de los mamíferos, lo hacen con menor afi
nidad, y aparentemente no alcanzan la suficiente concentración como para interferir con la biosíntesis protei
ca en estas últimas. De hecho, la toxicidad selectiva de las tetraciclinas depende de la concentración del fár
maco en el interior celular.
La formación de quelatos con Ca:+ interfiere con los procesos de mineralización ósea (fundamen
talmente. del crecimiento de los huesos largos en los niños prematuros), la hipoplasia de la corona dental y la
decoloración del esmalte. La unión con otros iones metálicos está claramente implicada, de forma negativa,
en su absorción gastrointestinal, y la formación de quelatos con el Fe(II) puede afectar a la síntesis del colá
geno a través de la inhibición de la enzima protocolágeno hidroxilasa.
Nombre «2 /?, /?4 «s

Tetraciclina H CH, OH H H
Clorotetraciclina Cl CH, OH H H
Oxitetraciclina H CH, OH OH H
Demeclociclina Cl H OH H H
Metaciclina H =ch2 OH H
Doxiciclina H H CH, OH H
Minociclina N(CH,), H H H H
Rolitetraciclina H CH, OH H ch3-n
Figura 18.50. Estructuras de algunas tetraciclinas naturales y semisintéticas.
Las tetraciclinas se obtienen en procesos de fermentación, a partir de especies de Streptomyces. o por se-
misíntesis, a través de transformaciones químicas de productos naturales.
Derivan de un octahidronaftaceno y poseen varios centros estereogénicos cuya estereoquímica resulta
fundamental para su actividad biológica.
Desde el punto de vista químico, se comportan como compuestos anfóteros, que existen en solución neu
tra, fundamentalmente, como iones híbridos, aunque poseen tres constantes de disociación relacionadas con los
grupos indicados en la Figura 18.51.
pK., PK„2
Tetraciclina 3.3 7.7 9.5

Clorotetraciclina 3.3 7,4 9.3
Demeclociclina 3.3 7.2 9,3
Oxitetraciclina 3,3 7.3 9,1
Doxiciclina 3.4 7.7 9,7
Minociclina 2.8 7,8 9,3
Figura 18.51. Constantes de disociación características de algunas tetraciclinas.
A valores de pH intermedios, se epimerizan en C-4 a epitetraciclinas. mucho menos activas, mientras

que en solución ácida o básica, las estructuras que poseen un hidroxilo en la posición 6 pierden la actividad
biológica. En el caso de los ácidos fuertes, se producen anhidrotetraciclinas por una reacción de deshidratación
entre dicho hidroxilo y el hidrógeno en 5a. generándose un doble enlace que induce la aromatización posterior
del anillo C a través de un proceso de tautomería.
Las bases producen la isotetraciclina (inactiva), por reacción del hidroxilo de la posición 6 y la cetona
en 11, en una reacción de tipo retro-Claisen. previa tautomería del enol en C-12 a un compuesto dicarbonílico.
Se rompe así el enlace Cl 1-C1 la y se forma el anillo de lactona (Fig. 18.52).
FÁRMACOS QUE INTERACTÜAN CON l-OS ÁCIDOS NUCLEICOS 571
Inactiva
Activa (Epitctraciclina)
Anhidrotetraciclina Isotetracidina
(inactiva) (inactiva)
Figura. 18.52. Epimerización de las tetraciclinas naturales en C-4. y transformaciones en ácidos y bases.
Estos procesos de desactivación química de las tetraciclinas estimularon el desarrollo de análogos más es
tables y de mayor semivida, tales como la metaciclina. la doxiciclina y la minocidina (Fig. 18.50). Las 6-deso-
xitetracidinas, además de ser más estables en medio ácido y alcalino, por carecer del hidroxilo que participa en
la inactivación, se absorben por vía oral de forma completa. Esta propiedad se debe a que. probablemente, for
man menos complejos con metales en el intestino que las estructuras 6-hidroxiladas.
El estudio de análogos estructurales ha permitido determinar qué fragmentos estructurales afectan, de una
forma más o menos llamativa, a la actividad. Así, el reemplazamiento de la función amida en C-2 por otras fun
ciones, tales como aldehido o nitrilo, la reduce o suprime; la monoalquilación del nitrógeno amídico produce
derivados más hidrosolubles, pero la actividad se reduce proporcionalmente al tamaño del grupo alquilo; parece
esencial que los anillos A y B estén fusionados en cis y exista un grupo hidroxi en C-12a; si se alquila la posi
ción C-l la, se obtienen compuestos inactivos (lo que demuestra la importancia del hidroxilo enólico en C-12);
los sustituyentes en 5,5a, 6, 7,8 y 9 pueden modificarse, con retención o incluso aumento de la actividad bioló
gica. siendo los más estudiados, quizás por su fácil acceso sintético, los sustituyentes en la posición 7. Reciente
mente, se han descubierto las glicilciclinas, con una cadena de NJV-dimetilglicilamino en C-9. Estos análogos
no son reconocidos por las proteínas de transporte que disminuyen el contenido intracelular de las tetraciclinas
clásicas, haciendo resistentes a las células. Finalmente, algunos derivados como la rolitetraciclina se han dise
ñado como profármacos.
El cloranfenicol (Fig. 18.53) actúa inhibiendo la enzima que cataliza la incorporación de un nuevo amino
ácido a la cadena peptídica en formación, la peptidiltransferasa. La forma activa es el isómero D-treo. Aunque
puede producir anemia aplásica por su posible interacción con el ADN y puede inactivarse por acetilación del
hidroxilo primario, sigue siendo importante en el tratamiento de ciertas infecciones, administrándose por vía
oral como palmitato para evitar su sabor. Este profártnaco se hidroliza en el tracto gastrointestinal. También
puede administrarse como inyectable en forma de succinato sódico.
572 INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA l-ARM ACÉl/TICA
Cloranfenicol, R = H
Palmitato de cloranfenicol, R = CH3 (CH,)HCO-
Hemisuccinato de cloranfenicol, R = Nd3 GO3 C-fCH2)-CO-
Figura 18.53. Cloranfenicol y profármacos.
La eritromicina A es el más importante de los antibióticos macrólidos, cuyo mecanismo ha sido objeto de
alguna controversia. Una hipótesis, generalmente aceptada, propone que su acción se debe a la inhibición de la
traslocación, proceso en el que el peptidil-tARN se transfiere del lugar «A» del ribosoma al lugar «P» del mis
mo, para posteriormente proseguir la formación de enlaces peptídicos. Otra de las hipótesis afirma que el fár
maco desestabiliza el ribosma 70S, y produce un cambio de conformación de la subunidad ribosómica 50S, ha
ciéndola inactiva. Los macrólidos contienen un gran anillo de lactona (de 12-16 átomos) al que se unen uno o
más azúcares. Los compuestos más interesantes son los semisintéticos, con diferentes sustituciones en el ciclo
de la lactona (Fig. 18.54).
Figura. 18.54. Anlibióticos macrólidos.
8. NUEVOS AVANCES EN EL TRATAMIENTO ONCOLÓGICO
Los agentes antisentido, que se prevén como futuros antivirales y antitumoralcs. tienen generalmente como
diana el ARNm. Son secuencias de nucleótidos. complementarias de mensajeros genéticos potencialmente pe
ligrosos, diseñadas para bloquearlos. También pueden unirse directamente al ADN, formando localmente una
triple hélice. Sus inconvenientes son la falta de penetración en las células, la degradación por nucleasas y la
ausencia de selectividad. Para intentar resolverlos, se ha modificado la estructura de diésteres de ácido fosfóri
co, se les han unido grupos capaces de intercalarse o alquilar la diana, y se ha sustituido el esqueleto de oligo
nucleotides por otros de tipo peptídico, más fáciles de preparar, más hidrosolubles y más estables en condicio
nes fisiológicas.
Las proteínas responsables de la iniciación y progresión del crecimiento tumoral son actualmente nuevas
dianas específicas para la investigación y desarrollo de fármacos citostáticos. Esta nueva quimioterapia se diri
ge a las vías de señalización de multiplicación celular y apoptosis, así como a los mecanismos de angiogénesis e
interacción celular. Actualmente, se encuentran comercializados algunos de estos fármacos, como el trastuzu
*
)
mab (Herceptin de Roche, un anticuerpo monoclonal (AcMo) dirigido contra HER2, una lirosina cinasa que,
cuando se activa, provoca una serie de respuestas bioquímicas y fisiológicas que conducen a la transducción de
señales de mitogénesis. Su inactivación con el anticuerpo específico limita la señal de este receptor de trans
membrana. Está recomendado, solo o asociado con paclitaxel, en los tumores de mama que sobreexpresan di
cho receptor.
La quimioterapia antitumoral del futuro será mucho más «personalizada», aunque se necesitará la combi
nación de varios agentes, porque es raro que sea una única diana la responsable del desarrollo y la progresión de
un tumor.
BIBLIOGRAFÍA
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Silverman, R. B.: The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action. Academic Press. 1992.
---------- ¡19----------
Diseño de fármacos basado
en la química de radicales libres
J. C. Menéndez
1. INTRODUCCIÓN
1.1. Radicales y su estabilidad
Un radical (radical libre) es una especie química con un electrón desapareado. Normalmente, los radicales son
muy reactivos y no pueden ser aislados, pero pueden estar presentes como intermedios en numerosas reacciones
de gran relevancia biológica, si existe algún factor estructural que incremente su estabilidad. Algunas situacio
nes en las que los radicales tienen suficiente estabilidad para cumplir este papel son:
a) Electrones desapareados sobre átomos de oxígeno. Son importantes los radicales derivados de fenoles,
que se encuentran estabilizados gracias a la deslocalización del electrón desapareado sobre la nube aromática,
especialmente si hay un segundo átomo de oxígeno en la posición />-;
Figura 19.1. Estabilidad de radicales de fenoles.

b) Electrones desapareados sobre átomos de carbono vecinos a un doble enlace o a un heteroátomo:
X = Hal. OR. NRj,...
Figura 19.2. Estabilidad de radicales sobre carbono.
c) Una situación especialmente favorable para la formación de radicales es la que corresponde a la llama
da estabilización captodativa, en la que el átomo en el que está el electrón desapareado está unido simultánea
mente a un grupo donador y a uno aceptor. Este tipo de estabilización explica la especial estabilidad de ciertas
especies radicalarias, como por ejemplo las que resultan de la adición de un electrón a las quinonas o a los siste
mas de flavina. Estos radicales tienen gran importancia biológica, ya que actúan como intermedios en los proce
sos del metabolismo oxidativo que tienen lugar en las mitocondrias y que proporcionan la energía necesaria pa
ra la biosíntesis del ATP a partir de la oxidación del NAD(P)H («cadenas respiratorias»).
1.2. Radicales derivados de la molécula de oxigeno y su toxicidad
El oxígeno molecular es el principal promotor de la formación de radicales libres en las células. Como se obser
va en la Figura 19.4, la configuración electrónica de la molécula de oxígeno en su estado fundamental (oxígeno
DISEÑO DE FÁRMACOS BASADO EN LA QUÍMICA DE RADICALES LIBRES 577
¡ripíete) contiene dos electrones desapareados. Por lo tanto, dicha molécula puede considerarse como un radical
doble, lo que debería hacerla extremadamente reactiva. Sin embargo, el hecho de que los dos electrones desapa
reados tengan el mismo espín hace que la molécula de oxígeno no pueda aceptar directamente dos electrones
(con espines antiparalelos) de un par no enlazante de otra molécula, ya que la combinación final de espines in
cumpliría el principio de exclusión de Pauli1.
Por tanto, la molécula de oxígeno tiende a aceptar electrones de uno en uno: la adición de un electrón con
duce al radical superóxido (Of). y la de un segundo electrón, al anión peróxido (Of).
En los organismos aerobios, el origen de los electrones necesarios para estos procesos está en las cadenas
respiratorias, ya que el oxígeno molecular actúa como aceptor último de los electrones liberados durante el me
tabolismo oxidativo. También se generan radicales durante la actuación de ciertas enzimas (xantina oxidasa, ci-
clooxigenasa, monoaminooxidasa).
* 2p
o □ □ □ □ □
* 2p
n □□ □ m m □□ m □□ ffi
k 2p □□ □□ □□ [E □□ QD □o m □□ ffi
o2p □□ □D m □□ QD
o2s m m m
o2s m m □□ m
* Is
o m □□ □□ □□ m
a Is m °2 °2 °2
□□o2-
QD
(estado fundamental) (singlete) (singlete) (superóxido) (peróxido)
Figura 19.4. Configuración electrónica de la molécula de oxígeno y de varias especies relacionadas.
Puesto que los electrones adicionales que recibe la molécula de oxígeno van a parar al orbital n antien
lazante, el enlace 0-0 se va debilitando. La adición de dos electrones más al anión peróxido eliminaría el en
lace por completo, ya que se ocuparían los orbitales a anticnlazantes, resultando dos iones O. Por tanto, en
los sistemas biológicos, la reducción del oxígeno por dos electrones conduce a peróxido de hidrógeno (forma
protonada de Of'). y la de cuatro electrones lleva a dos moléculas de agua (forma protonada de O2).
Una fuente adicional de peróxido de hidrógeno en los sistemas biológicos es la enzima superóxido dis-
mutasa (SOD), que cataliza la transferencia de un electrón de un superóxido a otro, resultando una molécula
de oxígeno y un anión peróxido. Puesto que, como se ha comentado, el enlace 0-0 del peróxido de hidróge
no es relativamente débil, en condiciones adecuadas (por ejemplo, radiación ultravioleta) puede producirse
su ruptura homolítica, resultando dos radicales hidroxilo. También se originan estos radicales por la adición
de un solo electrón al peróxido de hidrógeno, pudiendo ser el anión superóxido la fuente de dicho electrón
(Figura 19.5)
1. Esta restricción no existe en las especies conocidas como oxigeno tínglele. que por tanto son oxidantes mucho más fuertes que el oxí
geno en estado fundamental.
dismutación
energía
H,O, (HO-OH) -------- * 2 HO’
(peróxido) (peróxido de hidrógeno) (radical hidroxilo)
4H< °2‘
2O2" 2 H,O
(óxido) HO’ + HO
Figura 19.5. Radicales derivados de la molécula de oxígeno.
El radical hidroxilo es la especie más reactiva de todas las representadas en la Figura 19.5: de hecho, es una
de las especies químicas más reactivas que se conocen. Su generación, a partir del peróxido de hidrógeno, es muy
lenta, pero el proceso es catalizado por la presencia de varios cationes metálicos relativamente abundantes en el or
ganismo, como por ejemplo Fe2* o Cu *. En la Figura 6, se representa el mecanismo para el caso del Fe2*, que es ca
paz de descomponer el peróxido de hidrógeno en un radical hidroxilo y un anión hidróxido (reacción de Fenton).
Esta reacción se combina con la reducción del Fe3* por el radical superóxido, que regenera el Fe2* (Fig. 19.6).
Reacción global (reacción de Haber-Weiss): H2O2 + O, ’----- * O, + HO~ + HO’
Figura 19.6. Catálisis por Fe2* de la formación de radicales hidroxilo.
Una de las estructuras biológicas más sensibles al ataque por radicales libres es la membrana celular, a
causa de la presencia de ácidos grasos poliinsaturados en los fosfolípidos que la constituyen. Estos ácidos gra
sos tienen átomos de carbono doblemente alílicos, es decir, vecinos a dos dobles enlaces. Estas posiciones son
los sitios de ataque por especies radicalarias, ya que los radicales alquilo que se generan por abstracción de un
átomo de hidrógeno están doblemente estabilizados por resonancia (Fig. 19.7).
Figura 19.7. Un ejemplo de un fosfolípido de membrana.

La reacción de estos ácidos grasos con radicales libres origina el fenómeno conocido como peroxida-
ción de fosfolípidos, que conduce al deterioro de las membranas y al mal funcionamiento de un gran número
de procesos celulares. Se inicia mediante el ataque de un radical libre (por ejemplo, un radical hidroxilo) a
alguna de las posiciones doblemente alílicas existentes en las cadenas de los ácidos grasos poliinsaturados,
generándose un radical alquilo (R‘, estructura 1). que reacciona muy rápidamente con una molécula de oxí
geno. para originar un radical peroxilo (R-O-O', estructura 2). Éste puede abstraer un nuevo hidrógeno de la
posición bis-alílica de una cadena de ácido graso vecina, generándose un hidroperóxido (R-OOH, estructura
3) y un nuevo radical 1. lo que hace que el proceso se mantenga a sí mismo (fase de propagación), exten
diéndose a zonas cada vez mayores de la membrana. Además, en presencia de trazas de cationes, como Fe2*
y otros, algunas de las moléculas de hidroperóxidos 3 pueden generar nuevas especies radicalarias (RO\
HO ) a través de una reacción de tipo Fenton (Fig. 19.8). lo que contribuiría a iniciar nuevos procesos de pe-
roxidación.
Figura 19.8. La reacción de peroxidación de los lípidos de membrana.
Otra posibilidad es que un radical peroxilo 2 evolucione por el ataque a un doble enlace vecino, origi
nando endoperóxidos cíclicos, en un proceso similar al que tiene lugar en el centro activo de la ciclooxigena-
sa. Junto con otros productos, estos endoperóxidos originan aldehido malónico a través de una reacción de
tipo retro Diels-Alder. Este compuesto contribuye considerablemente a los efectos nocivos del proceso de
peroxidación, ya que altera las proteínas de membrana porque reacciona con grupos amino de éstas, origi
nando iminas (Fig. 19.9).
Malondialdchído
Ácido 12-hidroxieicosatrienoico
(MDA)
(12-HETE)
Figura 19.9. Formación de peróxidos cíclicos y malondialdehído a partir de ácidos grasos de membrana.
Además de lesionar las membranas, los radicales hidroxilo causan otros efectos perjudiciales que se co
mentarán más adelante, como por ejemplo la fragmentación de las cadenas del ADN.
1.3. Relevancia patológica de los radicales libres
El estrés oxidativo puede ser el causante de algunas enfermedades. En otros muchos casos, acompaña a las en
fermedades. pero no es su causa, sino una consecuencia más del proceso patológico. Incluso en estos casos, la
generación de especies oxidantes puede ser un importante mecanismo de lesión tisular. Algunos procesos pato
lógicos en los que tiene importancia la generación de radicales libres son:
Aterosclerosis
Las enfermedades cardiovasculares (infarto de miocardio, accidentes cerebrovasculares) son la principal causa
de mortalidad en los países occidentales. La mayor parte de estas enfermedades tiene su origen en la ateros
clerosis, es decir, el depósito de placas en la pared de las arterias que lleva a su obstrucción paulatina, directa o
mediada por un trombo. La aterosclerosis parece iniciarse con una lesión del endotelio vascular por causas me
cánicas o por intervención de ciertos virus o toxinas; esta lesión inicial puede agravarse por la intervención de
diversas células del sistema imunitario (monocitos, macrófagos), que excretan enzimas hidrolíticas y diversas
especies radicalarias, fundamentalmente O2 ' y posiblemente NO'. Parece tener especial importancia en la ge
neración de la aterosclerosis la oxidación de las proteínas plasmáticas conocidas como LDL (Low Density Li
proteins. proteínas de baja densidad), que participan en el transporte del colesterol.
Isquemia/reperfusión
Una consecuencia inmediata de la obstrucción total o parcial de uno de los vasos sanguíneos del corazón o cere
bro es la aparición de isquemia, o privación de oxígeno en el tejido afectado. Si la falta de oxígeno es prolonga
da, el tejido termina por morir. Paradójicamente, cuando se recupera el aporte de oxígeno (reoxigenación, tam
bién llamada reperfusión), el tejido experimenta una serie de lesiones adicionales a las sufridas durante el pcrí-
do de hipoxia. Estas lesiones se atribuyen a un incremento de la velocidad de degradación del ATP y, por tanto,
de los niveles de inosina, que las células procesan mediante un incremento de los niveles de xantina oxidasa. La
actuación de esta enzima va acompañada de la formación de O, ' y H2O>, responsables de las lesiones tisulares
observadas durante la reperfusión (Fig. 19.10). Estas lesiones pueden limitarse mediante la administración de
antioxidantes o de alopurinol. un inhibidor de la xantina oxidasa.
Isquemia
ATP -► ADP -► AMP
Xantina oxidasa
Adenosina
Hipoxantina
Figura 19.10.
Enfermedades inflamatorias crónicas y artritis reumatoide
La respuesta inflamatoria aguda forma parte de los mecanismos de defensa del organismo. Sin embargo, la in
flamación lesiona los tejidos a través de numerosos mecanismos, algunos de los cuales se deben a la presencia
de radicales libres. También parece estar demostrado el papel de especies radicalarias en la lesión tisular obser
vada en enfermedades inflamatorias intestinales, como la colitis ulcerosa y la enfermedad de Crohn.
La artritis reumatoide es una enfermedad caracterizada por una inflamación crónica de las articulaciones,
especialmente en las manos y rodillas. Parece deberse a un proceso de tipo autoinmunitario dirigido contra las
inmunoglobulinas G; es probable que éstas deban su carácter antigénico a una transformación estructural oca
sionada por su reacción con especies radicalarias generadas en el proceso de inflamación crónica. Además, las
modificaciones observadas en las propiedades del líquido sinovial de pacientes con artritis reumatoide pueden
explicarse como consecuencia de una reacción entre el ácido hialurónico (principal constituyente del líquido) y
radicales hidroxilo.
Diabetes
Algunas de las complicaciones asociadas a la diabetes parecen deberse a un aumento de la producción de espe
cies radicalarias, que participan como oxidantes en la formación irreversible de diversos productos de reacción
entre la glucosa y diversas proteínas, produciendo a largo plazo lesiones en diversos tejidos, especialmente en el
riñón, el ojo, los vasos sanguíneos y los nervios (Fig. 19.11). Se ha propuesto el uso de fármacos fuertemente
nucleófilos para atrapar los intermedios de tipo dicarbonílico que participan en estos procesos, retardando así
los efectos de la diabetes sobre dichos tejidos. El más interesante es la aminoguanidina. que se encuentra en fa
se de ensayo clínico.
Compuestos
dicarbonflicos
Aminoguanidina
Figura 19.11.
Cáncer
Puesto que el suceso inicial en el proceso de carcinogénesis es una lesión del ADN, parece lógico pensar que
cualquier agente capaz de modificar químicamente el ADN (incluyendo los radicales hidroxilo y sus precur
sores) puede ser cancerígeno. Está bien demostrado, por ejemplo, que la exposición repetida a la radiación ioni
zante (que genera radicales hidroxilo por fragmentación directa de las moléculas de agua) favorece la aparición
de cáncer.
Enfermedades degenerativas del sistema nervioso central
El sistema nervioso central es especialmente sensible a las lesiones causadas por radicales libres, quizá por ser
el órgano con mayor consumo de oxígeno (hasta un 20 % del consumo total del organismo). Algunas enferme
dades degenerativas del sistema nervioso central (enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer) van
acompañadas de un aumento de la formación de especies radicalarias, aunque no está claro si son la causa de la
enfermedad o un efecto.
2. TRATAMIENTO ANTIOXIDANTE
En la Figura 19.12, se resumen los principales procesos relacionados con la formación de radicales libres en el
organismo, y en qué puntos es posible la interferencia mediante el empleo de agentes antioxidantes.
Antioxidantes preventivos:
- Enzimas aniioxidantes y fármacos que las mimetizan
- Quelantes
- Agentes que absorben en el UV
Varios pasos
O2 ___ ► R-
Antioxidantes preventivos
METALES
Figura 19.12. Principales tipos de agentes antioxidantes.
2.1. Antioxidantes preventivos
2.1.1. Agentes quelantes como antioxidantes
Puesto que la descomposición del peróxido de hidrógeno a radicales hidroxilo está catalizada por determinados
cationes metálicos, una forma de evitar la formación de radicales consiste en retirar dichos cationes, pudiendo
utilizarse con este fin agentes quelantes tradicionales, como la penicilamina o el EDTA (véase el Capítulo 12).
Este último compuesto es demasiado hidrófilo para absorberse por vía oral; el profármaco dexrazoxano, sin em
bargo. presenta una aceptable absorción por vía oral, y se bioactiva por hidrólisis a una especie quelante análo
ga al EDTA (Fig. 19.13).
Lie
H2hT "CO2H
Penicilamina
Figura 19.13. Algunos agentes quelantes con propiedades antioxidantes.

2.1.2. Enzimas antioxidantes y fármacos que las mimetizan
Como ya se ha comentado, existe una enzima, llamada superóxido dismutasa (SOD). que degrada el radical su-
peróxido a oxígeno y anión peróxido, cuya protonación conduce a peróxido de hidrógeno. Puesto que la acumu
lación de este compuesto podría ser muy perjudicial, ya que es el precursor directo del radical hidroxilo. el or
ganismo dispone también de dos enzimas capaces de degradar el peróxido de hidrógeno: la glutatión peroxidasa
y la catalasa (Fig. 19.14). Los mecanismos de destrucción del peróxido de hidrógeno son muy eficaces, por lo
que puede considerarse que la superóxido dismutasa es la etapa limitante de estos procesos.
Catalasa Glutatión peroxidasa
HO
(superóxido) (peróxido) (peróxido de
hidrógeno) HO"
Superóxido dismutasa
Figura 19.14. Resumen de la actuación de las enzimas antioxidantes.
a) Superóxido dismutasa (SOD)
Existe un considerable interés en el uso directo de la superóxido dismutasa como agente antioxidante, lo que
obliga a superar los problemas habituales de los fármacos peptídicos: escasa estabilidad por vía oral y en el
plasma, a causa de su labilidad frente a la hidrólisis, y posibilidad de inducir problemas inmunológicos. Se han
propuesto varias soluciones de tipo galénico a estos problemas, como el empleo de liposomas. y también exis
ten derivados de la superóxido dismutasa formados por la unión covalente a diversos polímeros, que engloban
la enzima y la aíslan del exterior.
Se conocen varios tipos de superóxido dismutasa, que contienen diferentes cationes en su centro activo
(CuZn-SOD, Mn-SOD. Fe-SOD. FeZn-SOD, etc.). El metal es esencial para la actividad de la enzima y, de he
cho, algunos cationes metálicos tienen una actividad comparable a la de la propia enzima como catalizadores de
la dismutación del superóxido. Por ejemplo, el catión Cu’* tiene una actividad similar a CuZn-SOD. aunque no
sería posible utilizarlo in vivo a causa de su toxicidad y porque se uniría fuertemente a una serie de componen
tes celulares. El mecanismo más problable para la reacción de dismutación catalizada por una especie metálica
* del centro activo de la superóxido dismutasa se resume en la Figura 19.15.
M"
Mn* + Of -------► M’1”1* + O2

M(n-I,+ + Of ------ » (Mn+ Of)
(ITO?-) + 2H
* ------ - M"
* + H,Oj
Figura 19.15. Mecanismo de la dismutación del superóxido catalizada por metales.
Basándose en el mecanismo anterior, se ha descrito recientemente que ciertos complejos metálicos, como
los derivados de manganeso SC 55858 y M 40470 (Fig. 19.16), poseen propiedades antioxidantes similares a
las de la superóxido dismutasa.
SC 55858
M 40470
Figura 19.16. Algunos compuestos que mimetizan la acción de la superóxido dismutasa.
b) Glutatión peroxidasa
Esta enzima cataliza la reducción del peróxido de hidrógeno a agua, o bien la de los hidroperóxidos a alcoholes
y agua. Estas reacciones van acompañadas de la oxidación de una molécula de glutatión al correspondiente di-
sufuro(Fig. 19.17).
HO-OH 2 H,O RO-OH R-OH + H,O
2 G-SH G-S-S-G G-S-S-G
Figura 19.17. Degradación de hidroperóxidos por la glutatión peroxidasa.
Se cree que el mecanismo de actuación de la glutatión peroxidasa transcurre a través del ciclo catalítico
representado en la Figura 19.18, con el ácido selenénico 1 y el selenosulfuro 2 como productos intermedios.
También se han propuesto mecanismos alternativos en los que intervienen diselenuros.
Figura 19.18. Mecanismo de actuación de la glutatión peroxidasa.

Los intermedios 1 y 2 de la figura anterior han servido como referencia para el diseño de fármacos con ca
pacidad para imitar la acción de la glutatión peroxidasa.
El más importante es el ebselen, un profármaco que, por hidrólisis, origina el ácido selenénico 1. y éste el
selenosulfuro 2 por reacción con un tiol (Fig. 19.19a). También es interesante cl diselenuro 3, que es diez veces
más activo que el ebselen.
Este incremento de actividad no se observa en otros diselenuros, y se atribuye a que el nitrógeno básico
facilita la reacción con fióles a través del mecanismo indicado en la Figura 19.19b.
Figura 19.19. Algunos fármacos que mimetizan el centro activo de la glutatión peroxidasa.
2.2. Agentes antioxidantes que interrumpen la fase de propagación

de procesos radicalarlos
El primer grupo de antioxidantes actúa bloqueando la fase de propagación, por reacción con alguna de las espe
cies radicalarias que intervienen en ella, principalmente el radical peroxilo; se dice, por tanto, que son agentes
«captadores de radicales» (radical scavengers).
Es necesario que se cumplan dos condiciones:
I. La reacción entre el radical peroxilo y el antioxidante ha de ser más rápida que la reacción de propaga
ción entre el peroxilo y una molécula de ácido graso.
2. El radical procedente de la especie antioxidante debe ser incapaz de iniciar una nueva fase de propaga
ción, por lo que dicho radical debe ser poco reactivo (Fig. 19.20).
DISEÑO DE FÁRMACOS BASADO EN LA QUÍMICA DE RADICALES UBRES 587
Figura 19.20. Antioxidantcs que interrumpen la fase de propagación.
2.2.1. Fenoles antioxidantes
Debido a la relativa estabilidad de los radicales oxigenados derivados de los fenoles (Fig. 19.1), éstos constitu
yen el principal grupo de antioxidantes que actúan en la fase de propagación. La mayor parte de los fenoles an
tioxidantes reúnen dos características estructurales (Fig. 19.21):
a) Presencia de sustituyentes (voluminosos, generalmente) en las dos posiciones vecinas al hidroxilo. Se

persigue con esto disminuir la reactividad del radical a causa de un efecto estérico.
Figura 19.21. Fundamentos del diseño de fenoles antioxidantes.

b) Presencia, en la posición p-. de alguna estructura que contribuya a la deslocalización del electrón desapa
reado. Lo más habitual (Fig. 19.21a) es que esta deslocalización proceda de un heteroátomo, preferente
mente electronegativo (O. N). También existen compuestos en los que la estabilización del electrón desa
pareado se debe al efecto captodativo, como sucede, por ejemplo, en el compuesto 1 (Fig. 19.21b).
a) Tocoferoles
Los tocoferoles (vitaminas E) son los antioxidantes que utiliza el organismo para evitar el proceso de peroxidación
de los ácidos grasos poliinsaturados de las membranas. El más activo de los tocoferoles naturales es el a-tocoferol:
H.C
La molécula del tocoferol se dispone en la membrana con su cadena lipófila orientada en paralelo a las ca
denas de los fosfolípidos, y su zona más polar (el hidroxilo fenólico) entre los grupos polares («cabezas») de los
fosfolípidos. El grupo peroxilo que se incorpora a la cadena del ácido graso durante el proceso de peroxidación
es relativamente hidrófilo y tiende a ascender hacia la superficie de la membrana, donde se encuentra con el hi
droxilo fenólico del tocoferol y se produce la reacción entre ambos. En etapas posteriores, la fosfolipasa A2 eli
mina, por hidrólisis, el ácido graso peroxidado y tiene lugar una nueva esteriftcación, quedando reparado el fos-
foh'pido. Por su parte, el radical del tocoferol reacciona con una molécula de ácido ascórbico, como se
comentará más adelante, regenerándose el antioxidante (Fig. 19.22).
Figura 19.22. Reparación de membranas por la vitamina E.

DISEÑO DE FÁRMACOS BASADO EN LA QUÍMICA DE RADICALES LIBRES 5X9
Este último mecanismo regenera sólo una pane de los radicales tocoferilo. ya que también se producen
reacciones competitivas que dan lugar a productos de oxidación, como los indicados en la Figura 19.23.
H,C
Epoxitocoferol
Figura 19.23. Algunos productos de oxidación del radical tocoferilo.
Como se resume en la Figura 19.24. se han sintetizado numerosos análogos del tocoferol, buscando me
jorar su actividad antioxidante o modificar sus propiedades fisicoquímicas.
Un descubrimiento interesante que se ha realizado durante estos estudios es que la sustitución del anillo
de pirano del tocoferol por uno de furano conduce a una mejora de la actividad antioxidante (p. ej., 2 es más
activo que 1).
Esto se puede atribuir a que, por motivos geométricos, el par no enlazante del oxígeno es más paralelo a
los orbitales del sistema te del benceno en el compuesto pentagonal (<f> = 84 ") que en el hexagonal ($ = 73 °).
Muchas de las modificaciones estructurales realizadas se han orientado hacia la obtención de análogos
hidrófilos, con objeto de modificar la farmacocinética de los tocoferoles. Por ejemplo, los compuestos 3 y 4
(trolox) tienen una buena distribución cardíaca, y pueden utilizarse para prevenir el estrés oxidativo posterior
al infarto de miocardio, reduciendo el tamaño de la zona infartada.
También se han diseñado análogos del tocoferol con mayor lipofilia, para mejorar su penetración en las
membranas, por ejemplo, por sustitución del anillo de benceno por uno de naftaleno (compuesto 5).
b) Otros fenoles antioxidantes
Existen numerosos fenoles antioxidantes de síntesis que responden a la estructura general resumida en la Figu
ra 19.21.
Pueden mencionarse, por ejemplo, los compuestos conocidos como BHT (dirercbutilhidroxitolueno) y
BHA (ditercbutilhidroxianisol) (Fig. 19.25).
OCH,
BHT BHA
Figura 19.25. Algunos fenoles antioxidantes.
También tienen estructura fenólica muchos antioxidantes de origen natural dotados de diversas acciones
biológicas, como las familias de compuestos representadas en la Figura 19.26.
Alcaloides
Carazostatina Esculetina
Flavonoles Lignanos
Cinamofilina
R=H Quercctina
R = Rutinosa Rutina
Otros
Figura 19.26. Algunas familias de antioxidantes fenólicos de origen natural.
2.2.2. Ácido ascórbico y compuestos relacionados
El ácido ascórbico (vitamina C) es otro de los antioxidantes naturales que utilizan los organismos para proteger
se de los efectos de los radicales libres.
A causa de su elevada hidrofilia, es el complemento ideal de los tocoferoles, y actúa en ambientes acuo
sos (ya se ha comentado, por ejemplo, su papel en la regeneración del tocoferol a partir de su radical).
Su carácter antioxidante se puede atribuir a la estabilización captodativa del radical derivado de la abs
tracción de un hidrógeno (Fig. 19.27).
Figura. 19.27. Estabilidad del radical derivado del ácido ascórbico.
Al igual que en el caso de los tocoferoles. se han sintetizado numerosos análogos del ácido ascórbico, ge
neralmente con la finalidad de conseguir compuestos más lipófilos. Esto se ha logrado mediante la formación
de acetales (1). éteres (2) o ésteres (3) con cadenas lipóftlas. También se han preparado compuestos híbridos,
como 4. que combinan las estructuras del ácido ascórbico y el tocoferol (Fig. 19.28).
HO O—(CH,)„-CH,
2
Figura 19.28. Manipulación estructural en el ácido ascórbico.

DISEÑO DE FÁRMACOS BASADO EN LA QUÍMICA DE RADICALES UBRES 593
2.2.3. Tioles
Existen numerosos datos que indican que ciertos tioles, como el glutatión, la /V-acetilcisteína, la penicilamina o
el 2-mercaptoetanosulfonato de sodio (MESNA) (Fig. 19.29), tienen propiedades antioxidantes in vivo. Aunque
estas propiedades pueden deberse, en parte, a su carácter de agentes quelantes, como se comentará más adelan
te, también guardan relación con su capacidad de interrumpir la fase de propagación de procesos radicalarios.
Esta propiedad se debe a que los radicales de los tioles tienen una gran tendencia a dimerizarse, originando di-
sulfuros, por lo que no pueden propagar los procesos radicalarios.
X- H-SR HX > R-S' 2R-S‘ --------- ► R-S-S-R
CH,
N^CO.H hsxLch3 NaO,S.
SH
X SH H2N CO2H MESNA
N-Acelilcisteína Penicilamina
Figura 19.29. Tioles antioxidantes.
2.2.4. Folíenos
Las estructuras poliénicas permiten la formación de radicales estabilizados, por deslocalización del electrón de
sapareado sobre los dobles enlaces vecinos. Estas estructuras pueden reaccionar con un radical X' a través de
dos mecanismos: a) adición del radical a uno de los dobles enlaces, formándose un enlace covalente entre X y el
polieno; b) cesión de un electrón de uno de los dobles enlaces a la especie X'. quedando convertido el polieno
en un catión radical (Fig. 19.30).
Figura 19.30. Acción antioxidante de los polienos.
En la Figura 19.31 se representa la estructura de un caroteno, un ejemplo de antioxidante natural con es
tructura poliénica.
a-Caroteno
Figura 19.31. Ejemplo de un polieno antioxidante.

2.3. Agentes antioxidantes que actúan por estabilización de membranas
Existen antioxidantes que inhiben la peroxidación a través de la alteración de las propiedades fisicoquímicas de
las membranas celulares (incremento de la viscosidad superficial de la membrana, disminución de la fluidez de
la bicapa lipídica).
La acción de los tocoferoles se debe, en parte, a estos efectos, que aparecen como consecuencia de la in
tercalación de moléculas de tocoferol entre las cadenas de los fosfolípidos.
Los lazaroides son un grupo de esteroides con sustituyentes muy básicos en la posición 21. siendo el tiri-
lazad (U-74006F) su representante más conocido. También existen lazaroides no esleroídicos, como el com
puesto U-78517F, derivado del esqueleto de los tocoferoles (Fig. 19.32).
Figura 19.32. Estructuras de algunos lazaroides.
El modo de acción de los lazaroides es complejo y todavía no está aclarado por completo. Entre otras
hipótesis, se ha propuesto que estos compuestos quedan englobados en las membranas celulares, con la por
ción esteroídica situada entre las cadenas lipídicas de los ácidos grasos y la porción heterocíclica en la super
ficie de la membrana, donde problablemente se formarían enlaces iónicos o de hidrógeno entre grupos fosfa
to de los fosfolípidos y grupos amino protonados del lazaroide. El grupo heterocíclico puede rotar en tomo al
esteroide, empujando las cabezas polares de los fosfolípidos y tensando así la membrana (Fig. 19.33). Todos
estos efectos contribuyen a incrementar la viscosidad de ésta, dificultando que se extienda el proceso de pe
roxidación.
Figura 1933. Estabilización de membranas por los lazaroides.
2.4. Propiedades antioxidantes de fármacos pertenecientes a otros grupos terapéuticos
Sucede con cierta frecuencia que fármacos diseñados con otras finalidades tienen propiedades anlioxidantes, a
las que deben parte de sus efectos. Un caso muy claro es el de los antiinflamatorios no esteroideos (Fig. 19.34).
Figura 19.34. Estabilización de los radicales derivados de algunos antiinflamatorios no esteroideos.

Aunque estos compuestos ajercen su acción principalmente a través de la inhibición de la ciclooxigenasa,

también son capaces de inhibir la propagación de radicales libres, lo que puede contribuir a su acción antiinfla
matoria. Las propiedades antioxidantes de los antiinflamatorios no esteroideos se deben a la existencia en sus
moléculas, de posiciones en las que un radical libre está estabilizado.
Son ejemplos la posición bencílica de los ácidos arilacéticos o arilpropiónicos, como el naproxeno, la po
sición 3 de los derivados de oxicam, como el piroxicam, y la posición vecina al carbonilo de las pirazolidi-
nadionas, como la fenilbutazona.
Además de contribuir a la acción antiinflamatoria, la inhibición de especies radicalarias podría desem
peñar un papel en el propio proceso de inhibición de la ciclooxigenasa, que constituye el mecanismo de ac-
c ión primario de estos compuestos.
Esto se debe a que el mecanismo de actuación de la ciclooxigenasa transcurre con la participación de
especies radicalarias (véase el Capítulo 11), por lo que podría ser inhibido por captadores de radicales.
Estas consideraciones han conducido al ensayo de estructuras típicamente antioxidantes (p. ej„ 2,6-di-
tercbutilfenoles) como inhibidores de la ciclooxigenasa. con éxito en muchos casos.
Como ejemplo, representamos en la Figura 19.35 algunos fenoles que inhiben selectivamente la ciclo
oxigenasa 2 (COX-2).
'Bu
Figura 19.35. Algunos fenoles que inhiben selectivamente la COX-2.
Un caso en el que parece clara la relación entre la acción terapéutica y las propiedades antioxidantcs es el
del ácido 5-aminosalicílico.
Como se comentó en el Capítulo 8, este compuesto es la especie responsable de la actividad de varios
profármacos usados para el tratamiento de la colitis ulcerosa, como la sulfasalazina y la olsalazina.
El ácido 5-aminosalicílico es un potente antioxidante in vivo, lo que puede atribuirse a la elevada desloca
lización del electrón desapareado en el radical formado sobre su hidroxilo fenólico (Fig. 19.36).
HO O
■NHj *NH¡
Figura 19.36. Estabilización del radical del ácido 5-aminosalicílico.

Otro ejemplo de un fármaco que debe su actividad terapéutica a sus propiedades antioxidantes es el pro-
bucol, utilizado para disminuir los niveles de colesterol. Su acción se debe a que el probucol protege de la de
gradación oxidativa a las partículas de lipoproteínas de baja densidad (LDL) encargadas del transporte del co
lesterol.
Esta protección se debe a que el probucol se oxida con preferencia a la lipoproteína, a través del mecanis
mo representado en la Figura 19.37, que se inicia con la formación del radical 1. seguida de formación de un en
lace carbono-carbono a través de un proceso conocido como acoplamiento oxidativo de fenoles. Resulta así el
diespirano 2, que posteriormente evoluciona a 3.
Figura 19.37. El probucol como inhibidor de la modificación oxidativa de las LDL.
3. FÁRMACOS QUE ACTÚAN A TRAVÉS DE LA FORMACIÓN

DE ESPECIES RADICALARIAS
3.1. Agentes quimioterápicos que generan radicales hidroxilo
Los radicales hidroxilo causan daños en los fosfolípidos y las proteínas y, especialmente, en los ácidos nuclei
cos. Por una parte, los radicales hidroxilo pueden reaccionar con las bases púricas y pirimidínicas, provocando
su oxidación.
Como ejemplo de este proceso, se representan a continuación algunas de las reacciones que tienen lugar
entre la tintina y el radical hidroxilo (Fig. 19.38).
Por otra parte, los radicales hidroxilo pueden reaccionar con las unidades de desoxirribosa, lo que provo
ca la fragmentación de las hebras de ADN. Se representa, a continuación, uno de los numerosos mecanismos
descritos para dicha fragmentación, que se inicia con la abstracción del hidrógeno de la posición 5 de la desoxi
rribosa de un nucleótido. El radical resultante adiciona una molécula de oxígeno, resultando el radical peroxilo
1, que puede atacar a un nuevo nucleótido, transformándose en el hidroperóxido 2; se entra así en la fase de pro
pagación del proceso (Fig. 19.39).
Figura 19.38. Oxidación de la timina por el radical hidroxilo.
Figura 19.39. Generación de hidroperóxidos de moléculas de ADN.

El hidroperóxido 2 puede evolucionar al compuesto 3 (Fig. 19.40), a través de una transposición de Cri-
gee, que recuerda a una de las etapas del mecanismo de la ozonolisis de alquenos. El intermedio 3 es un hemia
cetal que existe en equilibrio con 4, el cual se fragmenta a 5 y 6, y éste a 7 y 8, gracias a la acidez del hidrógeno
vecino a carbonilo. Por otra parte, el hidroperóxido 2 puede reaccionar con un tiol y reducirse al alcohol 9. que
se transforma en 10 por pérdida de la base. El compuesto 10. debido a la acidez de los hidrógenos vecinos al
grupo aldehido, se fragmenta a S y 11 (Fig. 19.40).
Figura 19.40. Algunos mecanismos de fragmentación de moléculas de ADN por el radical hidroxilo.
A causa de los mecanismos anteriores, la generación controlada de radicales hidroxilo podría permitir la
destrucción de las células tumorales. De hecho, la radioterapia del cáncer se basa en el hecho de que la radiación
ionizante tiene suficiente energía para romper homolíticamente las moléculas de agua, generando directamente
radicales hidroxilo. También existen fármacos antitumorales que actúan promoviendo la formación de radicales
hidroxilo a través de mecanismos indirectos.
Mencionaremos también que el óxido nítrico, o factor relajante derivado del endotelio (EDRF), es un ra
dical relativamente estable que desempeña un papel fisiológico esencial en la regulación de fenómenos como el
control de la tensión arterial y la función plaquetaria. Está también relacionado con la respuesta inmunitaria
inespecífica, ya que es responsable de la citotoxicidad que ejercen los macrófagos contra microorganismos in
vasores. Esta citotoxidad se debe a la generación de radicales hidroxilo a través del mecanismo representado en
la Figura 19.41:
6 = n> + .p - ó: ------ ► ó = n-6-6: 11 -> 6 = n-o-o-h

Óxido nítrico Supcróxido Pcroxinitrito
Figura 19.41. Formación de radicales hidroxilo a partir del óxido nítrico.
3.1.1. Quinonas antitumorales: antraciclinas
Las antraciclinas constituyen una familia de compuestos antitumorales aislados de diversas especies de Slrep-
tomyces. representada principalmente por la doxorrubicina (adriamicina) y la daunorrubicina (daunomicina), así
como sus análogos sintéticos. Las antraciclinas, y muchos de sus análogos de síntesis, son agentes antitumora
les activos, principalmente en las leucemias (daunorrubicina, doxorrubicina) y los tumores sólidos (doxorrubi
cina). Estos compuestos son agentes intercalantes del ADN (véase el Capítulo 18). lo que explica en parte sus
propiedades antitumorales, y también actúan a través de la generación de radicales hidroxilo. Las antraciclinas
contienen un fragmento estructural de quinona, lo que hace que sean buenos aceptores electrónicos (Fig. 19.42).
Figura 19.42. Estructura de las antraciclinas y su radical de tipo semiquinona.
El radical derivado de una quinona puede actuar, a su vez. como donador de un electrón, por lo que las
quinonas pueden comportarse como productos intermedios entre el donador y el aceptor de electrones origina
les, facilitando el proceso si estos dos compuestos tenían potenciales rcdox demasiado alejados para interactuar
directamente. Uno de esos aceptores electrónicos puede ser la molécula de oxígeno, por lo que las antraciclinas
facilitan la generación del radical superóxido (Fig. 19.43).
Figura 19.43. Participación de las antraciclinas en la generación de radical superóxido.
La presencia de fragmentos estructurales de tipo P-hidroxicarbonilo hace que las antraciclinas tengan pro
piedades quelantes; por lo que forman un complejo con el catión Fe' *; este complejo se fija al ADN, donde el
Fe5* puede ser reducido a Fe2-, por captación de un electrón procedente de un radical superóxido. Puesto que el
catión Fe2* promueve la formación de radicales hidroxilo a partir del peróxido de hidrógeno por cesión de un
electrón, el resultado final del proceso es la generación de radicales hidroxilo en la proximidad de la molécula
de ADN (Fig. 19.44).
Figura 19.44. Acción quelante de las antraciclinas y su papel en la generación de radicales hidroxilo.
El principal inconveniente de las antraciclinas es que producen efectos secundarios de tipo cardíaco, a
causa de la toxicidad de los radicales hidroxilo. Para disminuirla, se pueden administrar asociadas a un antioxi
dante de tipo quelante. como por ejemplo el dexrazoxano, aunque dicha asociación probablemente disminuya
su actividad antitumoral. por disminuir la concentración de hierro.
Además de los mecanismos anteriores, las antraciclinas pueden dar lugar procesos de alquilación reducto-
ra. especialmente en condiciones anaerobias (ver el Capítulo 18).
602 INTRODUCCIÓN ALA QUÍMICA FARMACÉUTICA
3.1.2. Rifamicinas
Las rifamicinas son antibióticos que se utilizan con frecuencia en el tratamiento de la tuberculosis.
Además del mecanismo de acción ya comentado en el capítulo 9 basado en la inhibición de la ARN poli-
merasa, las rifamicinas tienen la capacidad de generar radicales superóxido (y, a partir de éstos, radicales hidro
xilo) a través del mecanismo resumido en la Figura 19.45.
Rifamicina S
Figura 19.45. Formación de radicales oxigenados por las rifamicinas
3.1.3. Bleomicina
Las bleomicinas son una familia de antibióticos glicopeptídicos con actividad contra varios cánceres hu
manos.
Su estructura es compleja, y contiene tres fragmentos estructurales de interés:
a) una unidad de bitiazol, que permite la fijación al ADN por intercalación;

b) una porción en la que existen cinco átomos de nitrógeno a la distancia adecuada para formar un
complejo estable con el hierro, dejando libre una sexta valencia de coordinación que permite a la
molécula captar una molécula de oxígeno;
c) un disacárido, que influye en las propiedades fisicoquímicas de la molécula (solubilidad, etc.) pero
no participa directamente en la unión con el ADN.
La especie antitumoral es un complejo temario formado por una molécula de bleomicina, un catión Fe2* y
una molécula de oxígeno.
Esta especie capta un electrón de una fuente externa [por ejemplo, una molécula de NAD(P)H] y la espe
cie resultante cede dicho electrón a una molécula de ADN, iniciándose la degradación de éste (Figura 19.46).
DISEÑO DE FÁRMACOS BASADO EN LA QUIMICA DE RADICALES UBRES 603
Bleomicina Bleomicina
«activada»
-------- ► Fragmentación
Figura 19.46. Mecanismo de acción de la bleomicina.
3.1.4. Enodiinos
Constituyen un grupo de antibióticos antitumorales relativamente reciente, con una característica estructural co
mún. que consiste en un sistema macrocíclico que contiene, al menos, un doble enlace y dos triples enlaces car
bono-carbono (Fig. 19.47).
CH,
OH R = O-azúcar: Espcramicinas
(Pol. = polisacárido)
Neocarcinostatina (zinostatina)
Figura 19.47. Estructuras de algunos antibióticos antitumorales del grupo de los enodiinos.
La estructura de enodiino genera un doble radical muy reactivo, a través de un proceso conocido como ci
clación de Bergmann (Fig. 19.48a).
En una variante de ésta, uno de los triples enlaces puede sustituirse por un sistema de aleño (Fig. 19.48b).
La razón por la que estos procesos no se producen espontáneamente en los productos naturales es que en
ellos el fragmento de enodiino se encuentra en una disposición espacial en la que los tres enlaces no ocupan el
mismo plano, lo que impide la ciclación.
Figura 19.48. La ciclación de Bergmann.
El mecanismo de la acción antitumoral de estos antibióticos consta de tres etapas.

En primer lugar, una parte de la molécula se fija al surco menor del ADN.
En segundo lugar, se produce una reacción (con un nuclcófilo, generalmente) que provoca una alteración
en la geometría del sistema de enodiino. lo que permite que se produzca la reacción de Bergmann.
En tercer lugar, el radical formado reacciona con restos de desoxirribosa de la molécula de ADN. provo
cando su fragmentación a través de un mecanismo similar al descrito para el radical hidroxilo.
En la Figura 19.49. se resumen los mecanismos de activación de los principales enodiinos.
En general, la reacción de activación requiere la actuación de un nuclcófilo externo, que suele ser un tiol
o un hidruro cedido por una molécula de NAD(P)H.
En todos los casos, el ataque del nucleófilo altera la geometría de la molécula y permite la ciclación de
Bergmann:
Figura 19.49. Activación de los enodiinos por un tiol.
En el caso de la dinomicina. su naturaleza de quinona permite un mecanismo alternativo de activación,

que se inicia mediante su reducción a hidroquinona (Fig. 19.50).
3.2. Nitroheterociclos como agentes antiparasitarios y radiosensibilizantes
Existen numerosos heterociclos nitrados (nitrofuranos, nitrotiazoles. nitroimidazoles) que se utilizan como agentes
antibacterianos, antiparasitarios o antitumorales (Fig. 19.51, véase también el Apartado 3.2.3.1 del Capítulo 18).
Figura 19.50. Activación de la dinomicina por vía reductora.
Nitrofu ranos
Misonidazol Benznidazol
5-Nitroimidazoles
Ronidazol
X = OH Metronidazol
X = SO2Et Tinidazol X = CH2CI Omidazol
X = NH-C(S)-OCH3 Camidazol X = CHj Secnidazol
Figura 19.51. Algunos nitroheterociclos quimioterápicos.
La acción quimioterápica de estos compuestos se debe a la facilidad con que el grupo nitro puede actuar
como aceptor de un solo electrón, ya que se origina la especie 1, en la que el electrón desapareado está desloca-
lizado sobre el nitrógeno y los dos oxígenos. En presencia de oxígeno, el intermedio 1 revierte al nitroderivado
de partida, originando un radical superóxido (Fig. 19.52):
:o:
Superóxido
Figura 1932. Generación de radicales superóxido a partir de nitroderivados, en presencia de oxígeno.
En medios anaerobios, el proceso anterior no tiene lugar y el producto intermedio 1 continúa reduciéndo
se (por ejemplo, por acción del glutatión), originando nitroso derivados 2 y, en un paso posterior, los radicales
nitróxido 3. Además, el intermedio 1 es básico y su protonación puede conducir a 4, que se fragmenta homolíti-
camente, originando un nitroso derivado y un radical hidroxilo. El compuesto 4 puede también fragmentarse a
un radical arilo y una molécula de ácido nitroso (Fig. 19.53). Las especies generadas en estas reacciones son
más tóxicas que el radical superóxido, lo cual explica por qué los nitroderivados son normalmente más efecti
vos en el caso de organismos anaerobios.
Nitroso derivado
Figura 19.53. Algunos mecanismos de generación de radicales libres a partir de nitroderivados.
Una segunda propiedad interesante de los nitroheterociclos mencionados en este apartado es la posibili
dad de utilizarlos como agentes radiosensibilizantes, es decir, como coadyuvantes de la radioterapia. Ya se ha
comentado que ésta se basa en la generación de radicales hidroxilo por fragmentación homolítica de las molé
culas de agua. Normalmente, los radicales hidroxilo reaccionan con las diversas biomoléculas (R-H), con for
mación del radical R*. Las células del tumor pueden defenderse de estos radicales a través de numerosos meca
nismos. entre ellos, mediante la captación de los radicales R * por el glutatión o por otros antioxidantes. La
presencia de oxígeno dificulta estas reacciones de reparación, ya que los radicales R* reaccionan más rápida
mente con el oxígeno que con los anlioxidantes. Por este motivo, la radioterapia es más eficaz en los tumores
bien irrigados. Sin embargo, los tumores sólidos contienen con frecuencia zonas hipóxicas, que no son elimina
das por la radioterapia y sirven de núcleos para que el tumor crezca de nuevo. Los nitroderivados pueden cum
plir un papel similar al del oxígeno en este tipo de tumores, ya que también reaccionan rápidamente con los ra
dicales R’. evitando su reparación y generando especies citotóxicas (Fig. 19.54).
Reacción entre el radical hidroxilo y biomoléculas:
R-H + .O-H -------- * R* + H,O
Reparación de los daños por el glutatión (también por el ácido ascórbico. etc.):
R’ + G-SH ------- » R-H + G-S’
Biomolécula
reparada
La presencia de oxígeno impide o dificulta la reparación, porque evita que el glutatión reaccione con R’:
R’ + O2 ------- ► R-O-O
*
R-O-O’ + G-SH --------- ► R-O-OH + GS
*
Biomolécula
oxidada
Los nitroderivados pueden suplir al oxígeno, en ambientes hipóxicos:
Radical
citotóxico
Figura 19.54. Algunos mecanismos de generación de radicales libres a partir de nitroderivados.
3.3. Endoperóxidos como antlpalúdicos
Aunque el paludismo es una de las enfermedades más extendidas en el mundo y una de las principales causas
de mortalidad, el número de agentes antipalúdicos disponibles es reducido. Los más importantes son los deri
vados de la quinolina. como la cloroquina. la amodiaquina. la mefloquina, etc. (véase el Capítulo 18). pero la
aparición de resistencias a la cloroquina y a otros fármacos en los parásitos productores del paludismo, espe
cialmente Plasmodium falciparum, hace temer que en un futuro próximo pierdan su utilidad. Por tanto, resul
tó de gran interés el aislamiento, en 1972, del principio activo de las hojas de Artemisia annua, una planta
utilizada en la medicina tradicional china como antipalúdico. Este principio activo recibió el nombre de qing-
haosu, o artemisina, y presenta una potente actividad antipalúdica, al igual que algunos derivados semisinté-
ticos, como el p-artemeter. La escasez de artemisina natural ha estimulado el desarrollo de análogos sintéti
cos, entre los cuales pueden mencionarse el compuesto conocido como BO7 (fenozan-50F) y el artefleno.
Una característica estructural común a todos estos compuestos es la presencia de un grupo peróxido (R-O-O-
R), sin el cual no existe actividad antipalúdica. Generalmente, este grupo es parte de un anillo de 1,2.4-trio-
xano(Fig. 19.55).
Figura 1935. Estructuras de la artemisina y algunos análogos.
El modo de actuación de la artemisina está ligado a su estructura de endoperóxido, y parece iniciarse me
diante la ruptura homolítica del enlace oxígeno-oxígeno de esta función, por adición de un electrón, procedente
del Fe2’ del grupo hemo de una molécula de hemoglobina. Esta fragmentación origina los radicales 1 o 2. que se
transforman posteriormente en los C-radicales fuertemente alquilantes 3 o 4 (Fig. 19.56).
X = H. HEMO-Fc"'
X = H. HEMO-Fe'"
| ALQUILAC1ÓN DEL HEMO O DE PROTEÍNAS |
Figura 19.56. Posibles mecanismos de acción alquilante de la artemisina y análogos.

BIBLIOGRAFÍA
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Silverman. R. B.: The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, capítulo 6, Academic Press, 1992.
------ 20------
Síntesis de fármacos.
Derivados aromáticos
1. INTRODUCCIÓN
La química se diferencia de otras ciencias en que crea los objetos de su propio estudio, así como en su lenguaje
a través de fórmulas estructurales. Si bien la estructura de muchos fármacos se «inspira» en modelos naturales,
prácticamente todos ellos se modifican a través de transformaciones químicas. En los comienzos del largo y
costoso proceso de investigación y desarrollo de nuevos fármacos, una vez que se ha seleccionado una estructu
ra o una serie de análogos, resulta imprescindible disponer de cantidades suficientes para su estudio y, si el de
sarrollo progresa, la síntesis vuelve a cobrar protagonismo, ya que se requieren métodos a gran escala que per
mitan precios razonables. El grado de madurez y sofisticación de métodos que ha alcanzado hoy la síntesis
orgánica es tal, que puede plantearse la preparación de prácticamente cualquier compuesto. Sin embargo, el mé
todo utilizado para la síntesis de un producto a gran escala (tal y como se realiza en la industria) difiere casi
siempre de aquel que permitió la preparación en el laboratorio de las pequeñas cantidades con las que se inició
su estudio.
Los fármacos necesarios para cubrir el mercado que requiere el cuidado de la salud son, en su mayor par
te, producidos por síntesis total (aproximadamente, el 75 %); otros son compuestos semisintéticos que proceden
de la modificación parcial de productos naturales; un tercer grupo se obtiene por fermentación o por métodos
biologicoquímicos (entre ellos los métodos biotecnológicos), y un cuarto grupo (generalmente utilizado como
materiales de partida o como intermedios) procede de plantas y órganos de animales.
Los procesos biologicoquímicos, en los que están implicados microorganismos y enzimas, tenían hace
años un uso limitado, pero hoy se han introducido en las síntesis a gran escala de diversos productos y. en espe
cial. de ciertos fármacos. La penicilina y otros antibióticos se obtienen por fermentación; proteínas como la in
sulina y el interferon se obtienen utilizando Escherichia cali modificado con la ayuda de la ingeniería genética;
muchos aminoácidos se preparan con enzimas inmovilizadas en fase sólida o atrapadas dentro de una membra
na; ciertos hidroxiesteroides se obtienen con la ayuda de oxigenasas, etc. Muchas reacciones biologicoquímicas
se utilizan también para obtener compuestos enantioméricamente puros.
En lo que respecta a los métodos químicos, se han introducido grandes cambios en la preparación a gran
escala de productos farmacéuticos, como el uso de presiones muy altas, de temperaturas muy bajas y de atmós
feras inertes, de reactivos soportados sobre diversos materiales, etc. Trataremos, a continuación, de los princi
pios generales en los que se basa la planificación de una síntesis a escala de laboratorio.
La síntesis de un compuesto determinado no es simplemente una cuestión de juntar de una manera arbi
traria los átomos de su esqueleto. Para su planificación hay que sopesar diversas estrategias, teniendo en cuenta
la posición de los grupos funcionales que posee y su estereoquímica. Para ello, es muy útil el método de las des
conexiones, que consiste en la fragmentación de la estructura deseada en porciones denominadas simones.
Como símbolo para representar este proceso, opuesto al progreso de una reacción representado por la flecha
normal, se utiliza una flecha doble. Por ejemplo, una unión C-C podría planificarse a través de una desconexión
radicálica o iónica (Fig. 20.1).
Enlace que se quiere formar . Retrosínlesis
I
dp —>
/ c- + o Desconexión radicálica
cSp ------ > *

/ c + c- Desconexión iónica
/1 1
Figura 20.1. Retrosíntesis. a través de desconexiones iónicas o radicálicas, de un enlace C-C. Simones.
El paso siguiente consiste en reconocer y seleccionar los reactivos equivalentes de los sintones R
*. R o
R'. Los compuestos organometálicos y los carbaniones estabilizados son los equivalentes sintéticos del sintón
R . mientras que los agentes alquilantes, los compuestos con grupo C=O, C=N o CsN, y los carbenos, son parte
de los equivalentes sintéticos del sintón R
*.
En principio, debe buscarse el menor número de pasos, ya que son pocas las reacciones orgánicas que den
rendimientos cuantitativos. Un rendimiento del 80 % en cada paso (que podemos considerar muy bueno) pro
porciona. en una estrategia de tres pasos, un rendimiento final del 51 %, y baja hasta el 33 % en otra de cinco
pasos. También es importante tener en cuenta que, a igualdad de pasos, el orden en que se realizan puede cam
biar mucho el proceso y que, además, es preferible una síntesis convergente (en la que se ensamblan en el paso
o pasos finales dos porciones previamente sintetizadas por separado) a un proceso en serie (Fig. 20.2).
O—O—O — O — O— o
Figura 20.2. Estrategias seriadas y convergentes.
La planificación de una estrategia de síntesis requiere conocer en profundidad la reactividad de los com
puestos orgánicos y, por tanto, partir de una buena base de Química Orgánica. Por esta razón, es inadecuado es-
SÍNTESIS DE FÁRMACOS. DERIVADOS AROMÁTICOS 613
tudiar aquí lo que en sí misma es un área de conocimiento. Sin embargo, a conlinuación se comentarán algunos
aspectos cuyo recuerdo puede ser útil para estos propósitos.
Las principales reacciones que conducen a la formación de enlaces son aquéllas en las que interactúan
dos grupos funcionales, o un grupo funcional y una posición adyacente a un segundo grupo. Por ello, los
grupos funcionales del producto se utilizan frecuentemente como clave para su desconexión, y se introducen
antes de la unión de los diferentes fragmentos (generalmente uno electrófilo con otro nucleófilo). En la Figu
ra 20.3, se representan algunas especies con carbono electrófilo. entre las que se encuentran los haluros. los
sulfonatos y los sulfates de alquilo que, por disponer de «buenos grupos salientes», dan reacciones de susti
tución nucleófila; los oxiranos (epóxidos), que al adicionar nucleófilos liberan su tensión angular; los alco
holes y éteres protonados, que pueden dar lugar a carbocationes. pero que son menos útiles debido a que su
existencia requiere condiciones acidas y éstas pueden ser incompatibles con los nucleófilos; las sales de dia-
zonio o las sales de trialquiloxonio (como el tetrafluoroborato de trietiloxonio 1. Z = O. X = F4B o de sulfo
nio 1. Z = S). Recordemos también que el efecto mesómero (-M) del oxígeno carbonílico está regulado por
la capacidad donante o atrayente de electrones de los sustituyentes unidos al carbono, lo que explica el orden
de reactividad de los agentes acilantes, que son equivalentes sintéticos del sintón ‘C=O. Entre los equivalen
tes sintéticos del sintón ‘C=N, se encuentran los nitritos, las iminas y las sales de iminio. También son de es
te tipo los iones metileniminio (que intervienen en las reacciones de Mannich) producidos in situ, a partir de
formaldehído y una amina secundaria, en medio ácido. Los imidatos o iminoéteres tienen especial relevancia
en la síntesis de heterociclos.
Ar-N=N X
Sales de diazonio
O O Epóxidos
♦ /R .
—O-S-OR', — O-S-Ar
R"—Z X
O O SR’
Haluros, sulfatos y sulfonatos 1. Sales de trialquiloxonio (Z = O)
O O
RXXR' U
r nr;
Aldehidos Cetonas ásteres, X = O Amidas
Haluros de ácido Tioéstcres, X = S
X = OCOR'
Anhídridos de ácido
c)
R + R" ,NR"
R-C=N Jc = N X’ R-C'
Nitritos R,Z R"
OR'
Iminas Sales de iminio Imidatos

R = R' = H. iones metileniminio (Iminoéteres)
Figura 20.3. Especies electrófilas equivalentes de los simones *R (a), 'C=O (b) y ‘ON (c).
Aunque tos alquenos y alquinos reaccionan habitualmente con electrófilos, con la participación de orbita
les rt. tos conjugados con grupos atrayentes de electrones (haluros de alito y compuestos carbonílicos a,|3-no sa
turados, por ejemplo) son electrófilos equivalentes de simones R‘ (Fig. 20.4). Ambos pueden reaccionar con nu-
cleófilos en dos centros carbonados: en el que posee el grupo saliente (haluros de afilo) o el efecto mesóme
ro -M (carbonilos a,P-insaturados), o en el carbono conjugado. Otras especies electrófilas importantes son tos
carbenos, que intervienen en reacciones con compuestos aromáticos ricos en electrones y dan reacciones de ci-
clopropanación con olefinas.
Nu
Figura 20.4. Reacciones de alquenos electrófilos (a). Reacciones de ciclopropanación (b).
Los reactivos organometálicos y los carbaniones estabilizados son especies con carbono nucleófilo equi
valentes de simones R o Ar . El primer grupo se ha desarrollado extraordinariamente, aunque los compuestos
de Grignard y los organolíticos siguen siendo los más utilizados, y en menor grado los organocíncicos y orga-
nocádmicos. Los dos primeros son muy reactivos, pero por su gran basicidad se descomponen con ácidos débi
les como agua, alcoholes o aminas; los dos últimos son menos reactivos y, por tanto, más selectivos. Los reacti
vos organocúpricos. todavía más selectivos, proceden de la reacción entre haluros de Cu(I) y compuestos
organolíticos. Dependiendo de la proporción de los reactivos que se utilice, pueden ser de tipo alquilcobre o
arilcobre (poco solubles en los disolventes orgánicos usuales, por lo que se usan en forma de complejos con di
ferentes ligandos como las trialquilfosfinas), o dialquilcobrelitio (solubles en éter y utilizables directamente)
(véase la Fig. 20.5). Aunque se consideran formalmente como nucleófilos, ya que son equivalentes del sintón
R , los mecanismos de las reacciones en que participan no están totalmente claros, pudiendo reaccionar a través
de la formación de complejos y procesos redox, con transferencia de un electrón.
R-MgX R-Li
Ar-MgX Ar-Li R2Cd R,Zn
Reactivos de Organolíticos Dialquilcadmio Dialquilcina

Grignard
2RLi + Cu,X2 __________ > 2RCu + 2LiX

Alquilcobre
4RLi + Cu2X2 2R2CuLi + 2LiX

Dialquilcuprato de litio
Figura 20.5. Ejemplos de reactivos organometálicos.
La desprotonación más o menos completa de un enlace C-H activado para obtener carbaniones estabiliza
dos requiere una base más fuerte que el carbanión que se forma, por lo que resulta fundamental conocer la aci
dez relativa de los denominados «compuestos con hidrógeno activo», así como otras reacciones alternativas que
pueden producirse con ciertas bases. Los carbaniones más frecuentes se estabilizan por conjugación con un gru
po atrayente de electrones con efecto mesómero -M (carbonilo, ciano. nitro o sulfonilo) o con efecto inductivo 1
(los más eficaces son ios grupos que poseen una carga positiva sobre un átomo de la segunda fila de la tabla pe
riódica, en particular P o S, que forman especies denominadas iluros) (Fig. 20.6).
R _ O R _
c—< c— C=N C—N
R,Z R" R'Z / \ _
R O
R._+ Rx- ♦
y-pR, ?—sr2
R R
Figura 20.6. Ejemplos de carbaniones estabilizados (a) e iluros (b).
Los alquinos terminales también originan aniones sobre el carbono, dado el mayor carácters de éste, y los
compuestos aromáticos activados (con grupos donadores de electrones) reaccionan con electrófilos a través de
carbaniones estabilizados. Igualmente ocurre con los alquenos que poseen grupos donadores de electrones (eno
les, enolatos y enaminas) (Fig. 20.7). Los enolatos y las enaminas son aniones bidentados, y el lugar de ataque
del electróftlo depende de muchos factores, por lo que no siempre puede predecirse el resultado.
Enol
Enamina
Figura 20.7. Otros reactivos equivalentes de simones R o Ar.
Además del conocimiento de la reactividad de los diferentes simones, al planear una estrategia sintética
ha de cuidarse especialmente la elección de reacciones que sean regio-, quimio- y estereoselectivas, para evitar
al máximo las mezclas de compuestos. Si no es posible en un caso concreto, se recurre a métodos indirectos,
utilizando grupos protectores o activantes.
En un proceso de síntesis, es prácticamente imprescindible la interconversión de grupos funcionales. Ci
taremos, como ejemplo, algunas transformaciones de los alcoholes. Éstos son. en general, los precursores de los
derivados halogenados. ésteres, éteres y alquenos (Fig. 20.8a). Los glicoles y tioglicoles también se utilizan pa
ra la protección de grupos carbonilo a través de la formación de acétales o cetales (tioacetales o tiocctales) esta
bles a los nucleóftlos (Fig. 20.8b).
X = O. S
Figura 20.8. Algunas transformaciones de alcoholes y lióles muy utilizadas en síntesis.
En éste y en posteriores capítulos, se comentarán algunas secuencias de síntesis de fármacos representati

vos. agrupados según su estructura.
La agrupación estructural que se ha seguido es, en muchos casos, arbitraria, ya que ciertos fármacos que
se han englobado dentro de un tipo determinado podrían haber sido considerados en otros.
Sin pretender ser exhaustivos, podremos constatar que la reactividad de los compuestos orgánicos marca
la pauta para su utilización como reactivos y para las desconexiones de una estructura objeto de síntesis.
Comenzaremos por la síntesis de compuestos monocíclicos y policíclicos con estructura aromática, ya
que los hidrocarburos alifáticos tienen una importancia mínima como agentes terapéuticos. En los compuestos
aromáticos monocíclicos, hemos diferenciado aquellos que poseen el grupo funcional (o los grupos funciona
les) en la cadena alifática de los que los soportan directamente sobre el anillo bencénico.
Por su especial problemática, la síntesis enantioselectiva de compuestos con actividad óptica se estudiará
en el Capítulo 26, y la resolución de racémicos en el Capítulo 30. Los centros estereogénicos se señalan en las
figuras con un asterisco.
2. FÁRMACOS CON ESTRUCTURA AROMÁTICA
2.1. Arilalquilaminas y compuestos relacionados
Muchos fármacos poseen una estructura de arilalquilamina, y su síntesis puede abordarse según la distancia en
tre el núcleo aromático y el grupo amino.
Así. muchos antihistamínicos (Fig. 20.9) se obtienen a partir de arilaminas y pueden englobarse arbitra
riamente como bencilaminas.
La estrategia general para su síntesis consiste en dos procesos sucesivos de alquilación de la amina aro
mática o. alternativamente, la arilbencilamina puede derivar de la reducción de una base de Schiff.
a) <CH2- Ar'
Ar-fy => Ar—NH—CH2Ar' + XCH2CH2-NRR'
XHj-CHj-NRR' . .. x.
Ar’CHjX + ArNH, v ArNH, + ArCHO
ArCHO + H2NCH2Ar'
b)
Ar AP R R' Antihistamínico
Ph Ph Me Me Fenbenzamina
Ph Ph —(CH2)j— Histapirrodina
Ph Me Me Tripelcnamina
'-=-N
Pirilamina
MeO — Me Me
(mepiramina)
z-NV
f
Me Me Tonzilamina
MeO —
\=J
MeO- Me Me Zolamina
N
Figura 20.9. a) Estrategias de síntesis de arilbencilaminas. b) Ejemplos de antihistamínicos a los que pueden aplicarse.
La síntesis de compuestos con estructura de fenetilamina puede también llevarse a cabo por diferentes
vías, en las que en general se parte de una adición nucleófila a aldehidos o cetonas aromáticas, seguido de mani
pulación e interconversión de grupos funcionales. Así, el grupo de «ariletanolaminas» (al que pertenecen muchos
fármacos adrenérgicos) y el de las fenilisopropilaminas (al que pertenecen las anfetaminas) pueden prepararse se
gún se indica en los ejemplos de las Figuras 20.10 y 20.11.
Ar-CH-SCH-R2 => ArCHO + Nu

R1 NHR'
R1 = OH. R2 = H, «Ariletanolaminas»
R1 = H, R2 = Me. «Anfetaminas»
Figura 20.10. a) Estrategias de síntesis de fenetilaminas partiendo de un aldehido aromático, b) Hidroxianfetamina.

Figura 20.11. Adrenalina.
Muy semejantes son las rutas que parten de cetonas aromáticas, las cuales suelen obtenerse a su vez por
acilación de Friedel-Crafts. En la Figura 20.12, se esquematizan dos rutas muy semejantes para obtener sinefri-
na, basadas en la reducción catalítica de una arilcetona.
ArH (Acilación de Friedel-Crafts)
b) Ruta I:
AIC1,
(transposición
de Fries)
4-Hidroxiacetofenona*
El isómero en 2 se separa por destilación
Sincfrina (racémica)
Figura 20. J 2. Ejemplos de fármacos con estructura de fcnetilamina. Síntesis que parten de cetonas aromáticas obtenidas
por acilaciones de Friedel-Crafts.
Una tercera estrategia muy utilizada para la obtención de «ariletanolaminas» se basa también en una des
conexión Ar-R, pero aquí se utilizan aldehidos o reactivos equivalentes para la hidroxialquilación de fenoles
(Fig. 20.13). Véase la síntesis de adrenalina racémica a partir de pirocatecol y el dietilacetal de 2’metilaminoa-
cetaldehído.
a)
Ar-S-CH- CH- R:
ArH + O=CH-R
R1 NHR1
(C,HsO),CHCH2NHCHs
HCI, H2O
H) ácido tartárico (1-Adrcnalina

(Resolución) Adrenalina (racémica)
Figura 20.13. Síntesis de fármacos con estructura de ariletanolamina por hidroxialquilación de fenoles.
También puede plantearse la desconexión ArCHR1 ^CHR-NHR'

* a través de una condensación reductora
para la obtención de «ariletanolaminas» (Fig. 20.14, síntesis del metaraminol).
a)
Ar— CH^-CH-R2
ArCHO
R1 NHR’
Desconexión
HO OCOCHj OCOCH3 /
(H,CCO);O , „ CH'CHO ( 4c-CH, 2>h"Uc
(protección) \J (condensación \_ / * 711 ’(condensación

reductora O y reducción con
catalizada por levadura) desprotección)
Metaraminol
(mezcla de los cuatro estereoisómeros)
Figura 20.14. Síntesis de fármacos con estructura de fenetilamina utilizando la condensación reductora.
En otra estrategia para la síntesis de fenetilaminas. basada en la desconexión indicada, se utiliza la cloro-
metilación de bencenos activados, seguida de una reacción de sustitución nucleófila del cloruro de bencilo así
originado y la posterior manipulación de grupos funcionales (Fig. 20.15, síntesis de dopamina).
a)
Ar-CH,-$-CH,-NHR' ArCHjCl + Nu
Desconexión
Dopamina
Figura 20.15. Síntesis de fármacos con estructura de fenetilamina utilizando la clorometilación de bencenos activados.
Para la síntesis de 3-arilpropilaminas pueden utilizarse igualmente diversas estrategias. Por ejemplo, la
síntesis del bloqueante |3-adrenérgico labetalol se realiza a partir de la salicilamida, según se indica en la Figu
ra 20.16b. La reacción fundamental en esta secuencia es la alquilación reductora de una amina primaria, previa
desprotección de su AíJV-dibencilderivado (Fig. 20.16a). Esto supone la formación de la base de Schiff y su re
ducción posterior (obsérvese que la 4-fenil-2-butanona se prepara en este caso por alquilación del enolato deri
vado del éster acetilacético).
a)
>\r — 3) i—C?H-S’NHR------ > ArCH.-^CH,-C-0 + H,NR‘ (Animación reductora)
ArCH2X + pCH.COR1)
Figura 20.16. Síntesis de fármacos con estructura de 3-arilpropilainina por reducción de bases de Schiff
(aminas secundarias).
Para la síntesis del vasodilatador prenilamina (Fig. 20.17) se parte de la fenilacetona, y la amina se obtie
ne por reducción del nitrilo correspondiente.
Desconexión
H2/C-Pd
PhCH?COCH, PhCH,CH -S- NHCH,CH2CHPh.
Ph2CHCH2CN Ph2CHCH2CH2NH2
H^C-Pd *i
CH,
Prenilamina (racémica)
Figura 20.17. Síntesis de fármacos con estructura de 3-arilpropilamina por reducción de nitritos (aminas primarias).
Los análogos de la metadona (Fig. 20.18b) son arilpropilaminas que se obtienen, en general, por reacción
de un carbanión bencílico estabilizado con una P-haloalquilamina (muy reactiva a través de su estructura de ca
tión aziridinio. como se ha visto para las mostazas nitrogenadas en el Capítulo 18) (Fig. 20.18).
a)
Ar—CH-$-(CH2)nNR'R2
Desconexión
b)
DEtMgBr
Ph2CHCN + CICH(CH5)CH2NMe2 NaNH,, 'BuOK 2) H,O
*
5 3
>r-CH(CH,)CH2NMe2 Ácido (+) -tartárico

Levometadona
(Resolución)
CT'CHjCH,
(Racémico)
Figura 20.18. a) Alquilación de carbaniones bencílicos estabilizados, b) Síntesis de fármacos con estructura
de 3-arilpropilamina.
La alquilación de aniones bencílicos estabilizados también puede utilizarse para obtener 4-fenilbutiIami-
nas. entre las que se encuentra el bloqueante de los canales de calcio verapamilo (Fig. 20.19).
Verapamilo
Figura 20.19. Síntesis de verapamilo.

Siguiendo una reacción de Mannich (Fig. 20.20), se obtiene el agente hipnoanalgésico propoxifeno a par
tir de propiofenona.
El radical bencilo se introduce por adición nucleófila diastereoselectiva al carbonilo cetónico utilizando
bromuro de bencilmagnesio y. finalmente, se esterifica el alcohol así formado.
ArCOCH
ArCOCH VCH2NR2 (Reacción de Mannich)
R'
R’
b) Desconexión
1) CH2O/Me2NH. HCI I) BrMgBn
2) Ácido (-)-dibenzoiltartárico» 2) H,O*
PhCOCH2CHj
(R. de Mannich y resolución) 3) (EtCO)2O
(+)-Propoxifeno
Figura 20.20. Síntesis de fármacos con estructura de 4-fenibutilamina a través de reacciones de Mannich.
Los psicofármacos derivados de la 4,4-difenilbutilamina pueden utilizarse también como ejemplo de es
tructuras que poseen un grupo amino separado de un anillo bencénico por cuatro eslabones carbonados.
La síntesis de haloperidol, indicada en la Figura 20.21, se basa en la alquilación de una piperidina disusti
tuida en la posición C-4, utilizando la y-clorobutirofenona correspondiente que, a su vez. se prepara por aci-
lación de Friedel-Crafts.
CIjAl
+ CICO-(CH,),CI C-(CH2)ACI
(acilación de
Friedel-Crafts) O
y-Cloro-p-fluorobutirofenona
Desconexión
(N-alquilación)
Haloperidol
Figura 20.21. Otras estrategias de síntesis de fármacos con estructura de 4-fcnilbutilamina. Haloperidol.
La alquilación de una piperidina 4,4-disustituida es también la reacción utilizada en la síntesis del neuro-
léptico fluspirileno (Fig. 20.22). La novedad estriba en que. con anterioridad a la formación del sistema espirá-
nico, hay que proteger al nitrógeno piperidínico como /V-bencilderivado y, antes de la alquilación. hay que eli
minar dicha desprotección por hidrogenolisis.
SÍNTESIS DE FÁRMACOS, DERIVADOS AROMÁTICOS 623
Desconexión
H;, Pd/C
(desprotección
y /V-alquilación)
Fluspirileno
Figura 20.22. Síntesis de fluspirileno.
En la preparación de arilalquilhidrazinas y arilalquilpropilaminas. grupo en el que se encuentran muchos

fármacos inhibidores de la monoamino oxidasa (IMAO), se utilizan diferentes estrategias sintéticas. La fenelzi-
na, por ejemplo, se obtiene por alquilación de la hidrazina con cloruro de fcnetilo (Fig. 20.23a). La fenilprazina
(Fig. 20.23b) se obtiene por reducción de la /V-acelilhidrazona correspondiente, y la tranilcipromina (Fig. 20.24)
Desconexión
N,, ElOH. 80 °C
+ NH,NH3 H,O NH -NH,
(/V-alquilación)
X = CI. Br Fenelzina
jV-acctilhidrazona
H,. Pt OH~
(reducción) (hidrólisis)
Fenilprazina
Figura 20.23. Síntesis de fenelzina y fenilprazina.

Desconexiones
<f^-CH=CH2+N2=CH-COOC2H5 COOC;H< (h.dró'lisis 1 COOH

'---- ' '---- ' y separación
(ciclopropanación (mezcla de de isómeros)
de olefinas) isómeros
cis y trans)
H3O*
(hidrólisis)
Isocianato Tranilcipromina
Figura 20.24. Síntesis de tranilcipromina.
a partir de estireno, en una reacción de ciclopropanación con diazoacetato de etilo, seguida de hidrólisis en me
dio alcalino. Una vez que el ácido trans así originado se separa por recristalización, se transforma en cloruro y
éste se hace reaccionar con azida sódica, para dar una acilazida que, en el seno de tolueno, experimenta al ca
lentarse una transposición de Curtius con pérdida de nitrógeno, para dar el correspondiente isocianato, que fi
nalmente se hidroliza para dar la amina primaria.
2.2. Ácidos arilalcanoicos y derivados
La mayor parte de los fármacos con estructura de ácidos arilalcanoicos son ácidos fenilacéticos con modifica
ciones en el anillo bencénico, en la función carboxílica o en el grupo metileno, y pertenecen al grupo de los an
iiinflamatorios no esteroideos utilizados en el tratamiento de la artritis reumatoide.
Para su preparación, pueden utilizarse distintos métodos.
La síntesis de ácidos arilacéticos a-sustituidos (con frecuencia, por un grupo metilo) se puede realizar por
alquilación de arilacetonitrilos o arilacetatos (en algún caso, activados) utilizando hidruro sódico o amiduro só
dico como bases para generar el carbanión.
Así se preparan ibuprofeno, flurbiprofeno y naproxeno (Fig. 20.25).
Los arilacetonitrilos se obtienen a su vez por reacción de sustitución nucleófila de un haluro de bencilo
con cianuro alcalino (el haluro de bencilo puede obtenerse por clorometilación de un benceno activado).
CFW, HCI, ZnCI;

(clorometilación)
NaOH, H,O
(hidrólisis)
Desconexiones Ibufenaco
Ibuprofeno
CO(OEt)2, EtONa,
ElONa CHJ
H2CO2Et
(activación) (alquilación
del carbanión)
I) NaOH. H2O
2) H3O*
(hidrólisis y
descarboxilación)
ch2-cooch.
I)NaH
2) CH,!
(alquilación
del carba
nión) (hidrólisis)
Naproxeno
Figura 20.25. Síntesis de ácidos arilacéticos a-sustituidos por alquilación de carbaniones estabilizados.
Si se parte de fenonas, a través de su reducción a alcoholes bencílicos y sustitución del hidroxilo por ha
lógeno, se obtienen 2-arilpropionitrilos. Véase como ejemplo la síntesis de fenoprofeno, en la Figura 20.26.
Fenoprofeno
Figura 20.26. Síntesis de ácidos arilacéticos a partir de fenonas. Fenoprofeno.

Se emplean planteamientos retrosintéticos análogos para derivados diaril y triarilmetánicos que tienen ac
tividades farmacológicas muy diversas. Así, en la síntesis del antitusivo pentoxiverina (Fig. 20.27), el esqueleto
fundamental se construye a través de una doble alquilación del anión derivado del fenilacetonitrilo con bromuro
de tetrametileno.
l)H,O-
+ Br—(CH2)4—Br NaNH- 2) SOCI;
HO(CH,);O(CH2);N(C;tl>),
C - COO - (CH 2)2- O - (CH 2)N(C ,Hj),
(esterificación)
Pentoxiverina
Figura 20.27. Síntesis de otros fármacos por alquilación de aniones derivados de arilacetonitrilos.
El ácido difenésico (Fig. 20.28), que tiene interés en el tratamiento de la hipercolesterolemia, se prepara
también por alquilación de arilacetonitrilos.
1) Br-CH,-CH=CH-CHl
*2)H¿>
Ácido difenésico
Figura 20.28. Síntesis de ácido difenésico.
En la síntesis del hipnoanalgésico dextromoramida (Fig. 20.29). puede observarse la alquilación de una
amida derivada de un ácido diarilacético.
NaNH,
(+)-Dextromoramida
Figura 20.29. Síntesis de (+)-dextromoramida.
Por otra parte, la gran reactividad de los diarilacetonitrilos (cuya obtención se comentará en el Aparta
do 2.3) se utiliza para preparar derivados por alquilación, como podemos ver en la síntesis de la disopiramida
(Fig. 20.30).
Figura 20.30. Síntesis de disopiramida.
Comentario aparte requieren las estrategias para la síntesis de derivados de ácidos arilacéticos que parten
de esteres malónicos mono o disustituidos (fácilmente accesibles), a través de su hidrólisis y descarboxilación,
como puede observarse en la preparación de a-fenilbutirato de etilo, estudiado como hipocolesterolémico
(Fig. 20.31).
I)H,O’
2) A
(-CO,)
a-Fenilbutirato de etilo
Figura 20.31. Síntesis de derivados de ácidos arilacéticos partiendo de esteres malónicos.
2.3. Compuestos diaril y triarilmetánicos
Muchos fármacos pueden agruparse dentro de la estructura difenilmetánica, como se ilustra con algunos selec
cionados que se comentan a continuación. La síntesis del laxante bisacodilo (Fig. 20.32) se basa en la alquila
ción de fenoles con compuestos carbonílicos (piridina-2-carbaldchído) en medio ácido.
H,SO4
(C-alquilación)
Figura 20.32. Síntesis de triarilmetanos por alquilación de fenoles.
Los derivados difenilmetánicos que tienen un átomo de oxígeno, azufre o nitrógeno unido al carbono me-
tánico pueden prepararse por sustitución nucleófila de un haluro de difenilmetilo. Así, en la Figura 20.33, que
esquematiza la síntesis de los antihistamínicos difenhidramina y difenilpiralina, el bromuro de difenilmetilo al
quila al correspondiente alcohol utilizando carbonato sódico como base para generar aniones alcóxido.
Figura 20.33. Síntesis de derivados diarilmetánicos por sustitución nucleófila con haluros de diarilmetilo.
En la Figura 20.34, se esquematiza la síntesis de benzhidrilaminas en las que el grupo amino forma parte
de un anillo de piperazina, como la ciclizina (un antihistamínico utilizado como antiemético en los vómitos por
movimiento) y la cinarizina (un bloqueante del canal de Ca2* utilizado como vasodilatador). Por otro lado, el al
cohol diarilmetílico puede ser el nucleóftlo, como ocurre en la síntesis de los antihistamínicos clorfenoxamina y
clemastina. Los alcoholes se obtienen a través de reacciones de Grignard.
Cinarizina
Figura 20.34. a) Síntesis de derivados diarilmetánicos con N. S u O unidos al carbono benzhidn'lico. b) Uso de alcoholes
benzhidrílicos como nucleófilos.
En el caso de fármacos con estructura de diarilmetanol, la estrategia más frecuente es la construcción de

la función alcohólica terciaria por reacción de Grignard entre la fenona o el éster correspondiente y un magne-
siano, tal como se recoge en la Figura 20.35 para la síntesis del antiemético difenidol, del relajante muscular y
antiparkinsoniano pirindol y del espasmolítico difepanol.
2) 11,0'
(sustitución
nuclcófila)
Figura 20.35. Síntesis de diarilmetanoles a través de reacciones de Grignard.
La transposición bencílica también se ha utilizado en ciertos casos, como ocurre en la Figura 20.36 para la
síntesis del anticolinérgico lachesina.
OH
OH~
(transposición
bencílica)
COOH
C1(CH2)2N(CH3)2
(esterificación)
Figura 20.36. Síntesis de diarilmetanoles por trasposición bencílica.

2.4. Compuestos diariletilénicos

Como ejemplo de este tipo de estructuras, se ha seleccionado la obtención de uno de los primeros estrógenos
sintéticos desprovistos del núcleo esteroideo: el dietilestilbestrol (Fig. 20.37). Comienza con la alquilación de
desoxianisoína con ioduro de etilo, en presencia de una base fuerte. La reacción del producto con bromuro de
etilmagnesio conduce a la olefina trans y una pequeña cantidad del isómero cis. La desprotección de los éteres
metílicos conduce al dietilestilbestrol, cuya hidrogcnación catalítica procede estereoespecíficamente para dar el
isómero (+)-treo del hexestrol. que es el diastereoisómero activo.
Dietilestilbestrol
Figura 20.37. Síntesis de compuestos diariletilénicos. Hexestrol.
De forma semejante se obtiene el antiestrógeno utilizado como antitumoral. tamoxifeno (Fig. 20.38).
O-CH2-CH,-N(CHa)2
Figura 20.38. Síntesis de tamoxifeno.

2.5. Éteres arilalquilicos
La estructura de éter arilalquílico se encuentra en numerosos fármacos. En su preparación se utiliza general

mente el correspondiente fenol como material de partida. Así. en las Figuras 20.39 y 20.40 se recogen los es
quemas de la síntesis de varios fármacos con estructura de ariloxialquilamina, ariloxialcanoles y ácidos arilo-
xialcanoicos, que se basan en la O-alquilación de fenoles como desconexión principal. Por ejemplo, los
bloqueantes de receptores P-adrenérgicos de estructura general 3-ariloxi-l-amino-2-propanol (como el practo-
lol) se obtienen por esta vía (Fig. 20.39).
OH________
CH.CONH
(sustitución nuclcófila
intramolecular)
Practolol
Figura 20.39. Síntesis de éteres arilalquilicos por O-alquilación de fenoles.
De forma semejante se preparan la fenoxibenzamina (Fig. 20.40). un fármaco que bloquea de forma irre
versible los receptores a-adrenérgicos por su naturaleza de p-haloalquilamina, el antihistamínico feniltoloxami-
na (Fig. 20.41) y el relajante muscular metocarbamol (Fig. 20.42).
OH Desconexión
C1CH,-CH-CH3
Base______
(O-alquilación) CI2SO
(intercambio de
grupo funcional)
H,N-CH2-CH;OH C1CHAH;
O-CH;-CH-CHj
(A'-alquilación) (/V-alquilación)
NHCHvCHjOH
Fenoxibenzamina
Figura 20.40. Síntesis de fenoxibenzamina.

CI(CH,)2N(CH,)„
EtONa
(O-alquilación)
Desconexión
Feniltoloxamina
Figura 20.41. Síntesis de feniltoloxamina.
CH<—CH —CH-.OH ó
v
OH
। Desconexión
OCH, C1CH2—CH—CH2OH OCH,
Base
•OH
(<?-alquilación) o-S-ch2-ch-ch,oh OCH,-CH -CHjOCOCI
OH COCI; OH
(cloroformilación)
OCH,
NH,
OCH 2 - CH - CH 2OCON H,
(amonolisis)
OH
Metocarbamol
Figura 20.42. Síntesis de metocarbamol.
Como ejemplos de ácidos ariloxiacéticos. comentaremos la obtención de ácido ctacrínico (diurético, Fi
gura 20.43). que tiene la estructura de ácido ariloxiacético. Para su síntesis, se utiliza también como estrategia
común la reacción de (?-alquilación de fenoles.
l)C!CH2CO2Et Desconexión
Base / CH,(CH.)2COCI
2) KOH. H2O ci/ai t
O-S-CH2COOH
(alquilación e (acilación de Friedel -
hidrólisis) Crafts)
Cl Cl Cl Cl
CH,O, NH(CH3)2
(reacción de Mannich)
-NH(CH,)2
(eliminación) Ácido etacrínico
Figura 20.43. Síntesis de ácidos ariloxiacéticos por O-alquilación de fenoles.
2.6. Ácidos arenocarboxílicos y sus derivados
La estructura del ácido benzoico y sus derivados se encuentra en muchos fármacos. Entre ellos, podemos citar a
los derivados del ácido salicílico (o-hidroxibenzoico), interesantes como anti inflamatorios y analgésicos, y a los
de los ácidos p- y e-aminobenzoico (ácido amranílico). El ácido salicílico se prepara por carboxilación del fe-
nóxido sódico. El ácido acetilsalicílico (aspirina) se obtiene a partir de dicho ácido por calentamiento con anhí
drido acético (también con cloruro de acetilo o cetena). mientras que su esterificación con metano! y posterior
reacción con amoníaco origina la salicilamida (Fig. 20.44).
Figura 20.44. Ácidos arenocarboxíücos y sus derivados.
Los derivados del ácido p-aminobenzoico, entre los que se encuentran muchos anestésicos locales y algu
nos antiarrítmicos, se preparan generalmente por esterificación del ácido p-nitrobenzoico o sus derivados acti
vados como cloruros de ácido, seguida de la reducción del grupo nitro. Esta estrategia se aplica, por ejemplo, en
la síntesis de procaína (a), benzocaína (b) y propoxicaína (c) (Fig. 20.45).
Propoxicaína
Figura 20.45. Ejemplos de anestésicos locales y antiarrítmicos derivados del ácido p-aminobenzoico.
El ácido p-nitrobenzoico deriva, a su vez, de la oxidación de 4-nitrotolueno, como puede verse en la sín
tesis de procaína. También puede verificarse la esterificación con la sal del ácido y el haluro correspondiente,
como se muestra en una síntesis alternativa de procaína (Fig. 20.46).
+ CI-CH,CH2-N(C,H5)2 ■ ■ ...—r— COOCH2CH2N(C2H5)2

22 ■ ’2 (esterificación)
Procaína
Figura 20.46. Otra síntesis de procaína.
Otros derivados del ácido p-aminobenzoico son las benzamidas con actividad neuroléptica sustituidas en
la posición orlo por un grupo metoxilo («ortopramidas»). Éstas se preparan por reacción del éster o cloruro del
ácido 4-aminobenzoico, convenientemente sustituido (protegido su grupo amino por acetilación), con la corres
pondiente amina. Así se obtienen la metoclopramida (Fig. 20.47), un antiemético que en dosis altas resulta
antipsicótico. y la bromoprida (Fig. 20.48). Obsérvese que la acetilación como método de protección del grupo
amino puede realizarse sin que su desprotección afecte a la función benzamida. gracias a la mayor reactividad
de la acetamida sustituida (hidrólisis quimioselectiva).
(CH5CO)2O SOCI2
(protección del (activación del
grupo amino) grupo carboxilo)
Desconexión
OCH,
H2N-CH2CH2N(C2Hs)2<
CO$NH(CH2)2N(C2H,)2
Aminolisis (desprotección)
Metoclopramida
Figura 20.47. Síntesis de 4-amino-2-metoxibenzamidas. Metoclopramida.
Desconexión
OCH, /
I l2N-CH2-CH2-N(C,H5)2
CH3CO-NH CO$NH(CH2)2N(C2H5);
(aminólisis)
Br2. CH5CO2H
(sustitución
aromática)
Figura 20.48. Síntesis de bromoprida.
Los derivados del ácido antranílico llamados ácidos fenámicos son fármacos antiinflamatorios. El grupo
arilamino en orto se introduce a partir de ácido o-halobenzoico y la anilina convenientemente sustituida, en una
reacción catalizada por cobre denominada reacción de Ullmann. Así se preparan, por ejemplo, los ácidos mefe-
námico. flufenámico y meclofenámico (Fig. 20.49).
Desconexión
Cu. K2CO,
(reacción de
Ullmann)
CO2H B C
A = B = H: C = CFf. ácido flufenámico

A = B = Cl: C = CH,: ácido meclofcnámico
Desconexión
(H3CCO2),Cu
(reacción de
Ullmann)
CO,H CHj CH,
Ácido mefcnámico
Figura 20.49. Derivados del ácido antranílico.
2.7. Anilinas, anilidas y compuestos relacionados
Las arilaminas se obtienen prácticamente siempre por reducción de nitroderivados. Aunque podríamos incluir
múltiples fármacos dentro de este grupo estructural, nos limitaremos a comentar la síntesis de la mostaza nitro
genada antineoplásica clorambucilo (Fig. 20.50). En ella, la anilina se prepara por nitración del ácido 4-fenilbu-
tírico. esterificación posterior y reducción catalítica. La A-alquilación con óxido de etilcno, el intercambio de
grupo funcional OH por Cl y la hidrólisis del éster, completan la secuencia.
HNOy H,SO4 Desconexión HCI.CH.OH

(CH2)3CO2CH,
(nitración (esterificación)
e hidrólisis)
O2N (CH2)3CO2H
IL, Pd (HO-CH2-CH2)2N PQCI,

(CH2)3CO2CH, JL (intercambio de
(reducción) (^-alquilación)
| |] grupo funcional)
(CH2),
CO2CHj
(CICH2CH2)2N (CH2)3CO2H
(hidrólisis)
Clorambucilo
Figura 20.50. Síntesis de clorambucilo.

A través de las sales de diazonio, las arilaminas dan reacciones de sustitución con pérdida de nitróge
no. Así se obtienen, por ejemplo, los derivados biguanídicos antipalúdicos. En la Figura 20.51a. se esquema
tiza la preparación de cloroguanida (paludrina), por reacción de la correspondiente sal de diazonio con cia-
noguanidina, seguida de la adición de isopropilamina al grupo nitrilo.
Por otro lado (Fig. 20.5 Ib), puede prepararse la 4-clorofenilguanidina a través de la 4-cloroanilina y S-
metilisotiourea, adicionando /V-cianoisopropilamina.
NH
NC-NH-C-NH2
NaNO.. IK Cianoguanidina
(diazotación) (sustitución)
Desconexión
H2NCH(CH1)2
(adición) NH-C—NH-C-NH—CH(CH0?
II ti
NH NH
Cloroguanida
-HSCH,
nhSc-nh,
(aminolisis) II
NH
4-Clorofenilguanidina
NC-NHCHCCHQs
(adición) NH-C-NH-C-NH-CH(CH,)2
NH NH
Cloroguanida
Figura 20.51. Derivados biguanídicos.
Entre las andidas (/V-acilanilinas). podemos citar los anestésicos locales lidocaína y bupivacaína, que se
obtienen siguiendo el método general de acilación de un grupo amino (Fig. 20.52).
Obsérvese que en la segunda, el agente acilante es un anhídrido mixto formado por reacción del cloro-
formiato de etilo y el ácido picolínico (piridina-2-carboxílico), y que el anillo de piperidina se construye por
reducción catalítica de una sal de piridinio.
Desconexión
CH, j CH,
NHVCOCH,CI NH-CO-CH.-NtC.H,),
\— / (/V-alqu ilación) \ _ /
CH, CH,
Lidocaína
n-C4H9I
(acilación) (^-alquilación)
H;, ñ
(reducción)
Bupivacaína
Figura 20.52. Síntesis de lidocaína y bupivacaína.
2.8. Sulfonamidas y sulfonilureas
Las sulfonamidas suelen prepararse por clorosulfonación de anillos bencénicos con ácido clorosulfónico. segui
da de amonolisís. Así. el diurético diclorfenamida se prepara a partir de o-clorofenol. Éste se somete a clorosul
fonación. halogenación y posterior amonolisís (Fig. 20.53).
Diclorfenamida
Figura 20.53. Síntesis de sulfonamidas diuréticas. Diclorfenamida.
La estrategia general para la preparación de sulfonamidas antibacterianas derivadas del ácido 4-amino-
bencenosulfónico es semejante (a partir del cloruro del ácido 4-acetamidobencenosulfónico, que se obtiene por
reacción del ácido clorosulfónico y acetanilida. Fig. 20.54).
CISO4H H2NR
CH,CONH SO2CI
(clorosulfonación) (aminolisis)
Acetanilida
Desconexión
NaOH
SO,NHR
(desprotección)
Sulfonamida
Figura 20.54. Sulfonamidas antibacterianas. Proceso general de síntesis.
Desde el punto de vista sintético, el problema suele residir en la preparación de la amina, generalmente
heterocíclica, que se utiliza en la aminolisis. Así, en la síntesis de sulfazamet (Fig. 20.55), la amina se obtiene
por reacción de fenilhidrazina y cianoacetona; en la de sulfatiazol (Fig. 20.56), por reacción de tiourea y cloroa-
cetaldehído; en la de sulfadiazina (Fig. 20.57), por reacción de guanidina y ácido 3-oxopropanoico o dietilacetal
de 3-metoxiacroleína; y en la de sulfametoxipiridazina (Fig. 20.58), por reacción de la hidrazina con el éster di
metílico del ácido maleteo.
Sulfatiazol
Figura 20.56. Síntesis de sulfatiazol.
Figura 20.57. Síntesis de sulfadiazina.

CH-CO2CH3
H2N-NH2
CH-CO2CHj
Sulfamctoxipiridazina
Figura 20.58. Síntesis de sulfametoxipiridazina.
Las sulfonilureas constituyen un importante grupo de fármacos antidiabéticos.

Para su síntesis, se emplean dos procedimientos generales, como puede verse en la tolbutamida (Figu
ra 20.59a), o se preparan los ésteres /V-arilsuIfonilcarbámicos (por reacción de la arilsulfonamida con clorofor-
miato de etilo) que reaccionan posteriormente con la correspondiente amina, o bien la arilsulfonamida reaccio
na con el correspondiente isocianato (Fig. 20.59b).
Na2CO,
CICOAH,
(acilación)
ester /V-arilsulfonilcarbámico
I HjNQÍL
(aminolisis)
Tolbutamida
+ o=c=n-c4h<,
Figura 20.59. Síntesis de sulfonilureas. Tolbutamida.
Las sulfonas, como la dapsona (Fig. 20.60), poseen una acción bacieriostática similar a las sulfamidas y
suelen prepararse por arenosulfonilación de anillos bencénicos.
C13A1
(acilación de
Friedel-Crafts)
NHU a presión
(N-arilación)
Dapsona
Figura 20.60. Síntesis de dapsona.
3. COMPUESTOS AROMÁTICOS POLICÍCLICOS CONDENSADOS
3.1. Derivados del benceno. Dibenzocicloheptenos
Los antidepresivos tricíclicos se obtienen a partir de la dibenzosuberona (lO.l l-dihidro-5//-dibenzo[íz,J] ciclo-

hepatatrien-5-ona), su derivado 10,11-deshidrogenado o el producto de reducción del carbonilo cetónico a gru
po metileno. La dibenzosuberona se obtiene por condensación del anhídrido itálico con ácido fenilacético. rup
tura reductora del éster de enol así originado a ácido 2-fenet i (benzoico y ciclación de éste con ácido
poli fosfórico (PPA. Fig. 20.61).
r'°
■^co
HI.P
(reducción)
PPA. I7O°C NBS

(ciclación) (bromación
-H,O bencílica)
Dibenzosuberona
Figura 20.61. Síntesis de dibenz.oheptalrienos. Antidepresivos tricíclicos.
En la síntesis de la amitriptilina y la ciproheptadina. puede observarse que las dos cetonas indicadas origi
nan, con los correspondientes reactivos de Grignard, alcoholes terciarios, cuya dcshidratación con ácidos fuer
tes conduce al compuesto deseado (Fig. 20.62).
SÍNTESIS DE FÁRMACOS DERIVADOS AROMÁTICOS 641
Ciproheptadina
Figura 20.62. Síntesis de amitriptilina y ciproheptadina.
En el caso de la nortriptilina (Fig. 20.63). dado que no puede obtenerse el reactivo de Grignard por poseer
la cadena alquílica un grupo NH libre, se recurre al uso de bromuro de ciclopropilmagnesio. El alcohol terciario
así originado da lugar, por deshidratación y reacomodación homoalílica en presencia de ácido bromhídrico, al
3-bromopropilidenderivado, que reacciona posteriormente con metilamina, para la obtención de nortriptilina, y
con dimetilamina. para la obtención de amitriptilina.
Nortriptilina
(CH3)jNH
Amitriptilina
Figura 20.63. Síntesis de amitriptilina y nortriptilina.
La noxiptilina (Fig. 20.64) se obtiene por O-alquilación de la oxima de la dibenzosuberona, y la protripti-

lina (Fig. 20.65) por alquilación. en medio básico, del dibenzo[a,í/]cicloheptalrieno. En este ejemplo, el agente
alquilante tiene el grupo NH protegido como formilderivado, y posteriormente se libera por hidrólisis alcalina.
l)NaOC2H5
2) CI(CH2)2N(CH J,
(O-alquilación)
NOH
Noxiptilina
Figura 20.64. Síntesis de noxiptilina.
DKNH2 CHO
2) CI(CH2)3N
___________ XCH,
(alquilación)
I! (CH2)3NHCH3
Protriptilina
Figura 20.65. Síntesis de protriptilina.
3.2. Derivados del naftaleno y el antraceno
Así como los derivados del naftaleno suelen obtenerse por funcionalización del mismo (véase la síntesis del
antimicótico naftifma y del vasodilatador naftidrofurilo en la Figura 20.66 a. b). algunos derivados de antraceno
se obtienen por ciclación de los correspondientes precursores, como puede observarse en la síntesis del antide
presivo y antipsicótico fluorotraceno (Fig. 20.67).
Naftidrofurilo
Figura 20.66. Ejemplos de síntesis de derivados de naftalemo. Naftifma y Naftidrofurilo.

Figura 20.67. Síntesis de fluorotraceno.
La reactividad del sistema diénico del antraceno frente a dienófilos en reacciones Diels-Alder se aprove
cha. por ejemplo, en la obtención del antidepresivo maprotilina (Fig. 20.68).
I)SOCL
2) H'CNH,
3) LiAIH4
“ DMF = dimctilformamida Maprotilina
Figura 20.68. Síntesis de maprotilina.
4. BIBLIOGRAFÍA
Borrell, J. I.; Teixidó, J., y Falcó. J. L.: Síntesis Orgánica. Síntesis. S. A.. 1999.
Mackie, R. K.; Smith, D. M.. y Aitken, R. A.: Guidebook to Organic Synthesis. 3.“ edición. Logman. 1999.
Roth, H. J., y Kleemann, A.: «Pharmaceutical Chemistry», vol. I. Drug Synthesis, Ellis Horwood. 1988.
Smith, M. B.: Organic Synthesis. McGraw-Hill. 1994.
Warren, S.: Organic Synthesis: The Disconnection Approach. John Wiley & Sons. 1982.
Willis, C., y Willis, M.: Organic Synthesis. Oxford University Press. 1995.
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Síntesis de fármacos con estructura

heterocíclica no condensada
A. Espinosa y M. A. Gallo
1. INTRODUCCIÓN
Un gran número de fármacos son derivados de heterociclos. por lo que el conocimiento de la estructura y las
propiedades de estos compuestos es esencial en la síntesis de fármacos. En este capítulo, sólo vamos a comentar
algunos ejemplos representativos en los que trataremos de recordar conocimientos previos.
Los heterociclos pueden considerarse formalmente como derivados de los compuestos carbocíclicos me
diante procesos de sustitución isostérica. Por ejemplo, si se sustituye un grupo -CH2- del ciclohexano por su
isóstero -NH-, se tiene el compuesto heterocíclico saturado piperidina; la sustitución del grupo -CH= por -N=
en el benceno conduce al heterociclo piridina. mientras que el pirrol deriva formalmente del benceno por susti
tución isostérica del grupo -CH=CH- por -NH-.
Recordemos que las propiedades de los heterociclos pueden predecirse por sus analogías y diferencias
respecto a compuestos análogos alifáticos o aromáticos. Así, la piperidina tiene las propiedades de una amina
secundaria, mientras que la piridina y el pirrol. aunque son compuestos aromáticos que contienen 6 electrones
deslocalizados en una estructura cíclica plana, muestran notables diferencias de comportamiento respecto al
benceno.
La piridina es un híbrido de resonancia entre las formas canónicas representadas en la Figura 21.1 a. El par
de electrones no compartido sobre el nitrógeno no participa en el sextete electrónico, sino que, situado en un or
2, puede protonarse. alquilarse, etc. La mayor elcctronegatividad del nitrógeno respecto al carbono es
bital sp1
responsable de que la densidad de carga esté polarizada hacia el heteroátomo, y puede observarse que las for
mas dipolares disminuyen la densidad electrónica de la porción carbocíclica.
Basándose en esto, Albert clasificó los heterociclos aromáticos en n-deficientes, que tienen estructuras
análogas a la piridina, y 7t-excedentes, que presentan estructuras electrónicas análogas al pirrol, en el que el par
de electrones no compartido sobre el nitrógeno participa en el sextete de electrones n (sus formas resonantes se
indican en la Figura 21.1b).
Otros heterociclos, como el pirazol y el imidazol, tienen naturaleza mixta, ya que contienen simultánea
mente átomos de nitrógeno piridínico (~N=) y pirrólico (-NH-). El oxazol, el isoxazol, el tiazol y el isotiazol
son también heterociclos que poseen, además de un nitrógeno piridínico (-N=), un heteroátomo cuyo par de
electrones no compartido participa en el sextete electrónico (O, S). Los heterociclos aromáticos con seis eslabo
nes y dos átomos de nitrógeno piridínico. muy frecuentes en los fármacos, se recogen también en la Figura 21.2.
Figura 21.1. Formas canónicas resonantes de piridina y pirrol.
Oxazol Isoxazol Tiazol Isotiazol
Pirazina
Figura 21.2. Principales heterociclos aromáticos con dos heteroátomos.
La reactividad de los heterociclos saturados o parcialmente saturados es la de los grupos funcionales que
contengan (amina, éter, amida, enamina, etc.), aunque en algunos casos pueden aparecer propiedades peculiares.
Los heterociclos aromáticos n-excedentes muestran una reactividad química análoga a la de los compuestos ben
cénicos activados, siendo muy buenos sustratos en reacciones de sustitución electrófila aromática. Por el contra
rio, los heterociclos rt-deficientes se asemejan en cuanto a su reactividad a los compuestos bencénicos desactiva
dos y, en consecuencia, los procesos más favorecidos son las reacciones de sustitución nucleófila aromática. La
reactividad de los heterociclos mixtos está controlada por los dos tipos de efectos, siendo en general menos reac
tivos frente a los electrófilos que los rt-excedentes. Resulta posible modular la reactividad mediante el uso de sus-
lituyentes auxiliares adecuados. Así, en el ÍV-óxido de piridina, la polarización de la carga negativa del oxígeno
hacia el anillo facilita las reacciones de sustitución electrófila aromática respecto a la piridina (Fig. 21.3).
Figura 21.3. Polaridad del A-óxido de piridina.
La complejidad de la química de los heterociclos se manifiesta por la existencia de equilibrios prototrópi-

cos de tipo oxo-enólico o imina-enamina (Fig. 21.4a). Así, mientras que los equilibrios de 2- y 4-hidroxipiridina
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCLICA NO CONDENSABA 647
están claramente desplazados hacia las correspondientes formas oxo (2- y 4-piridona), el 3-hidroxiderivado
muestra un claro predominio de la forma enólica (Fig. 21.4b). En consecuencia, las propiedades químicas de es
tos isómeros de posición son diferentes, y el equilibrio prototrópico puede influir notablemente en las propieda
des biológicas de algunas moléculas. Así, en el uracilo, la timina y la citosina predominan las formas carboní-
licas, que son las que se acoplan a las bases púricas complementarias mediante los enlaces de hidrógeno para
formar la doble hélice del ADN.
a)
I
H
Oxo
b)
Figura 21.4. Equilibrios prototrópicos en heterociclos.
Las diferencias estructurales entre los distintos tipos de heterociclos no dan lugar a diferencias notables
en los procesos sintéticos que conducen a ellos, y sus estrategias de síntesis resultan bastante análogas. Para ma
yor información, se recomienda la consulta de textos especializados.
2. FÁRMACOS DERIVADOS DE FURANO Y TETRAHIDROFURANO
Los anillos furánico y tetrahidrofuránico se encuentran formando parte de varios fármacos con actividad an
tibacteriana (como la nitrofurantoína). relajante muscular (dantroleno) o bloqueante de los receptores P-adre
nérgicos (terazosina). Entre los nitrofuranos que poseen acción bacteriostática, un derivado importante es la
nitrofurantoína. que se sintetiza condensando el diacetato de 5-nitrofurfurilo con l-aminoimidazolidin-2,4-
diona (1 -aminohidantoína), para formar una base de Schiff. El derivado furánico de partida se obtiene a partir
de furfural (una materia prima barata), protegiendo su grupo formilo como diacetato y nitrándolo. con ace
tato de nitronio, para evitar el empleo de otros agentes ácidos que producirían la polimerización (Fig. 21.5a).
El fragmento imidazolínico se obtiene siguiendo una estrategia de síntesis en la que se cicla un precursor que
contiene todos los átomos del anillo. Éste procede de la adición de una hidrazina convenientemente sustituida
a isocianato potásico.
El dantroleno es formalmente un vinflogo de la nitrofurantoína. ya que el grupo nitro se encuentra conju
gado a través de un anillo bencénico. A pesar de esta semejanza estructural, las actividades de ambos son muy
diferentes, ya que el dantroleno es un relajante muscular. Su síntesis se lleva a cabo de forma análoga a la furan-
loína. comenzando por la diazotación de p-nitroanilina y la copulación catalizada por sales de cobre de esta sal
de diazonio con furfural (Fig. 21.5b).
La terazosina, un bloqueante adrenérgico selectivo de los receptores a, que se usa como antihipertensivo,
contiene en su estructura anillos de tetrahidrofurano, piperazina y quinazolina. Para su síntesis, se parte de deri
vados de furano, más accesibles que los de tetrahidrofurano, que pueden reducirse en el momento oportuno con
Hj/Ni Raney. La última fase de esta estrategia utiliza una sustitución nucleófila sobre una quinazolina conve
nientemente funcionalizada con la correspondiente piperazina (Fig. 21.5c).
Figura 21.5. Ejemplo de síntesis de fármacos con estructura de furano o tetrahidrofurano.
3. FÁRMACOS DERIVADOS DE PIRROL, TIOFENO Y HETEROCICLOS RELACIONADOS
Entre los derivados arilacéticos con propiedades antiinflamatorias, se encuentra el clopirac, en el que el grupo
arilo es un pirrol. En su síntesis (Fig. 21.6), se pueden distinguir dos fases: la preparación de 1 (p-clorofenil)-
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCLICA NO CONDENSADA 649
2.5-dimetilpirrol, mediante una ciclación de Paal-Knorr entre 2,5-hexanodiona y p-cloroanilina, y la introduc

ción de la cadena lateral en C-3, a través de una reacción de Mannich con formaldehído y dimetilamina. para
dar una amina que se metila hasta sal de amonio cuaternario. El tratamiento de ésta con NaCN/Me2SO supone
una sustitución nucleóftla (el grupo Me,N es un buen saliente en reacciones de sustitución Sn2) que conduce al
nitrilo, y éste se hidroliza finalmente a ácido.
Figura 21.6. Síntesis de clopirac.
El antihipertensivo captopril tiene dos átomos de carbono estereogénicos y. por tanto, su síntesis debe te
ner en cuenta los aspectos estereoquímicos (véase el Capítulo 26). La estrategia seguida en la Figura 21.7 para
obtener puro el diastereoisómero activo (S.S) utiliza un aminoácido quiral, la L-prolina, y después de proceder a
la /V-acilación con el conveniente cloruro de ácido, separa la mezcla de diastereoisómeros (.S'ó', activo) y (SJ(.
inactivo) (las sales que originan con diciclohexilamina pueden separarse fácilmente por cristalización fraccio
nada en acetato de etilo). La desprotección del grupo SH con H,N/CH,OH origina el captopril. La síntesis del
cloruro de ácido anteriormente mencionado se lleva a cabo por adición de Michael del ácido tiolacético al ácido
metacrílico, seguida de reacción con cloruro de tionilo.
CO-iH * SOCh *
■ + CH,—c' ----------- ► CH,-C-S-$-CH2-CH-CO3H H,C -C -S-CH,-CH - C v
'CH, SSH o CH, O CH, Cl
(racémico)
L-prolina NHi
2) Separación de CH,01l
diastereoisómeros h3c h o
Captopril
Figura 21.7. Síntesis de captopril.

Las pirrolidina-2,5-dionas son útiles como anticonvulsivos. La etosuximida, por ejemplo, se sintetiza por
delación de un ácido succínico 2,2-disustituido en presencia de amoníaco (Fig. 21.8). Dicho ácido se prepara
por condensación de Knoevenagel entre 2-butanona y cianoacetato de etilo seguida de adición de HCN e hidró
lisis del éster dinitrilo así formado. La hidrólisis va acompañada de descarboxilación.
H,C CO2Et H,C CO2Et CH,

Piperidina HCN | 3
)=o + ch/ Xcn -------- * H5C2—C—CH—CO2Et
hsc2 cn h5c2 CN CN
CH, CH,
HjCj-C------- CH2 NH,
co2h co2h
H
Etosuximida
Figura 21.8. Síntesis de ctosuccinimida.
El ioduro de demonio es un analgésico que contiene un anillo de tiofeno. Se obtiene por metilación con
ioduro de metilo de un aminoalcohol terciario, obtenido, a su vez. a través de una reacción de Grignard con una
cetona (en general, los alcoholes terciarios suelen prepararse por este procedimiento). Dicha cetona se prepara a
través de una reacción de Mannich con formaldehído. morfolina y 2-acetiltiofeno. Obsérvese cómo la acetila*
ción del tiofeno. y en general la entrada de reactivos electrófilos. tiene lugar preferentemente en la posición 2
del heterociclo.
Figura 21.9. Síntesis de ioduro de tiemonio.
4. FÁRMACOS DERIVADOS DE PIRIDINA Y HETEROCICLOS RELACIONADOS
El anillo piridínico es, junto con el piperidínico, uno de los que más frecuentemente se encuentra en los fárma
cos sintéticos y en los productos naturales con actividad biológica. Un ejemplo puede estar representado por el
piridoxol. precursor del 5-fosfato de piridoxal o vitamina B6. una de cuyas rulas de síntesis se resume en la Fi
gura 21.10a. Se trata de la condensación de un compuesto [i-dicarbonílico, convenientemente sustituido, y la
cianoacetamida, que conduce en un solo paso al cierre del anillo piridínico. Los demás pasos representan proce
sos de interconversión de grupos funcionales para elaborar los sustituyentes propios del piridoxol. En la actuali
dad, se sintetiza por el procedimiento esquematizado cn la Figura 21.10b, a través de una cicloadición [4+2] en-
tre 2-isopropil-4.7-dihidro-l,3-dioxepina y 4-metil-5-etoxioxazol (que se prepara por deshidrataron con P2O5

de /V-formil-2-aminopropionato de etilo). El aducto formado evoluciona reacomodándose a un isobutirilacetal,
cuya hidrólisis libera piridoxol.
Figura 21.10. Síntesis de piridoxol.
El piridoxol puede utilizarse, a su vez, como materia prima para la síntesis del psicoestimulante piritinol.
Es destacable la sustitución nucleófila regioselectiva en el haluro de alquilo menos impedido estéricamente, que
conduce a un precursor de la función SH. Una vez liberado este grupo, se produce un acoplamiento oxidativo
con formación del enlace disulfuro (Fig. 21.11).
zS
KS-c'
PBr, XOEt
Piritinol
Figura 21.11. Síntesis dé piritinol.

Otra gran familia de fármacos que contienen un anillo de piridina es la formada por los derivados tuber-
culostáticos del ácido isonicotínico. entre los que se encuentra la etionamida. que inhibe la síntesis proteica de
Mycobacterium tuberculosis por bloqueo de la incorporación de aminoácidos con azufre. Uno de los métodos
para su síntesis es análogo al descrito para el piridoxol y se recoge en la Figura 21.12. En él. un compuesto [3-di-
carbonílico se condensa con cianoacetamida en piridina. para dar una 2-piridona, precursora de la etionamida, a
través de la elaboración de sustituyentes indicada.
Etionamida
Figura 21.12. Síntesis de etionamida.
En el campo de los antihistamínicos Hi también es frecuente encontrar fármacos con un anillo piridínico.
Tal es el caso de la clorfenamina, en la que se ha utilizado el bioisosterismo benceno-piridina. El esquema de
síntesis que se refleja en la Figura 21.13 indica la estrategia que debe seguirse cuando se pretende introducir un
grupo 2-piridilo en un compuesto. Aquí, el anión derivado del grupo metileno activo de 4-clorofenilacetonitrilo
es el nucleófilo que sustituye al cloro de 2-cloropiridina. El esquema termina con la alquilación de un carbanión
bencílico estabilizado.
Cl
Clorfenamina (clorfeniramina)
Figura 21.13. Síntesis de clorfenamina.
Los bloqueantes de los canales de calcio con estructura dihidropiridínica representan uno de los grupos de
fármacos que más se investigaron en su momento, por lo que es interesante describir la síntesis de algunos de
sus miembros más significativos, como el nifedipino y el nimodipino (Fig. 21.14a y b). Ambas moléculas difie
ren en la posición del grupo nitro y en que el nifedipino es un diéster metílico simétrico, mientras que el nimo
dipino es un diéster no simétrico. La primera de las diferencias se resuelve empleando orro-nitro o mera-nitro-
benzaldehído en la condensación con un p-cetoéster, pero la segunda afecta al método de síntesis, ya que la
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCLICA NO CONDENSABA 653
síntesis de Hantzsch de piridinas (en la que un aldehido se condensa con dos moléculas de P-cetoéster y una de
amoníaco, para dar un derivado dihidropiridínico simétrico que, por oxidación suave, conduce a piridinas) sólo
es operativa para derivados simétricos como el nifedipino. Por ello, el nimodipino se prepara a través de una
modificación de este proceso, en la que el último paso consiste en cerrar el anillo dihidropiridínico por reacción
entre una enamina y un compuesto carbonílico a,p-insaturado.
R = —CH2-CH2OCH3
Nimodipino cHj
R=-CH^
'ch3
Figura 21.14. a) Síntesis de nifedipino. b) Síntesis de nimodipino.
Como ejemplos de los muchos fármacos en los que se encuentra presente el anillo piperidínico, citaremos
el piperidolato, la tioridazina y el haloperidol. El piperidolato es un anticolinérgico de síntesis, que se sintetiza
por reacción del cloruro del ácido difenilacético con el aminoalcohol correspondiente (Fig. 21.15). El interés de
esta síntesis radica en la preparación de dicho aminoalcohol, que se realiza por transformación del furfural en 2-
(/V-etilaminometil)tetrahidrofurano, el cual sufre una reacomodación con expansión de anillo, en presencia de
HBr/AcOH.
Figura 21.15. Síntesis de fármacos con estructura piperidínica. Síntesis de piperidolato.

Dentro de los antipsicóticos de estructura fenotiazínica, se sabe que la cadena lateral propilamínica puede
formar parte de estructuras heterocíclicas, entre las que se encuentran la piperidina y la piperazina. En la síntesis de
la tioridazina. un ejemplo de la primera modificación citada, lo más destacable es la preparación de 2-(2-cloroetil)-
1-metilpiperidina, cuya condensación con el anillo fenotiazínico da lugar al fármaco deseado (Fig. 21.16). Puede
observarse la especial reactividad de la piridina, cuyo átomo de nitrógeno es responsable de la mayor acidez de los
hidrógenos en a en sustituyentes alquílicos situados en las posiciones 2, 4 y 6 del anillo. Aquí la 2-metilpiridina
(a-picolina) tiene activado el grupo metilo y, a través del derivado litiado, reacciona con formaldehído como elec-
trófilo para dar la 2-(2-hidroxietil)piridina. El resto de las reacciones son sobradamente conocidas.
Figura 21.16. Síntesis de tioridazina.
El haloperidol es una butirofenona con potente actividad neuroléptica cuya síntesis se lleva a cabo por al
quilación de 4-(p-clorofenil)-4-hidroxipiperidina con 4-fluorofenil-3-cloropropilcetona. Lo más destacable es la
forma en que se obtiene el anillo piperidínico. a través de la reacción entre 2-p-clorofenil-1 -propeno y un catión
iminio derivado de la reacción entre dos equivalentes de formaldehído y cloruro amónico. La tetrahidro-1,3-
oxazina intermedia sufre una reordenación catalizada por ácido (vía ¡minio) a una tetrahidropiridina, seguido de
la hidratación del doble enlace para dar un alcohol (Fig. 21.17).
2HCHO + NH,CI
[HOCHf-NH=CHJ
0
Tetrahidro-1,3-oxazina
Haloperidol
Figura 21.17. Síntesis de haloperidol.
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCL1CA NO CONDENSADA 655
Finalmente, la Figura 21.18 esquematiza la síntesis de cincpiritiona, un potente antifúngico y antisebo-

rreico. El paso clave es la transformación de 2-cloropiridina en su W-óxido. A éste le sigue la sustitución nucle-
ófila del cloro por el anión bisulfuro y la formación de la sal de cinc.
I
OH
Figura 21.18. Síntesis de cincpiritiona.
5. FÁRMACOS QUE CONTIENEN OXAZOL, TIAZOL Y HETEROCICLOS RELACIONADOS
Entre los fármacos que contienen un anillo de isoxazol, se encuentra la isocarboxazida, un antidepresivo que ac
túa inhibiendo la MAO cerebral. Su síntesis comienza con la preparación del ácido 5-metilisoxazol-3-carboxíli-
co (Fig. 21.19). Obsérvese que los cinco átomos de carbono de dicho ácido se encuentran en el producto de par
tida (la 2,5-hexanodiona), y su síntesis se realiza por nitrosación de dicha dicetona, la cual origina un producto
intermedio que se cicla, perdiendo una molécula de agua con degradación simultánea del grupo acetilo a carbo
xilo. Las siguientes transformaciones se realizan en cuatro etapas sucesivas: esterificación, reacción con hidra-
zina y condensación con benzaldehído seguida de hidrogenación catalítica de la función imina así formada.
HNO,
EtOH ,
h,so4 1 2) H2/Pd
CH.
Isocarboxazida
Figura 21.19. Síntesis de isocarboxazida.

Uno de los antibacterianos de estructura más sencilla es la cicloserina. un ejemplo entre los muchos fár
macos diseñados racionalmente, que actúa inhibiendo competitivamente la racemasa que transforma la L-alani-
na en D-alanina. Es un derivado isoxazólico de síntesis relativamente sencilla (Fig. 21.20). La quiralidad nece
saria se obtiene, en este caso, partiendo de la D-serina, siendo el paso clave la preparación del cloroaminoácido,
cuyo tratamiento con NH2OH/NaOH conduce, en lugar de al ácido hidroxámico correspondiente, a la cicloseri
na. Obsérvese la importancia del átomo de cloro previamente introducido, que actúa como buen gnipo saliente
durante la ciclación. Normalmente, la cicloserina. debido a que es inestable en medio ácido o alcalino, y a que
se polimeriza al almacenarla, se emplea como un profármaco, un derivado de enamina obtenido por condensa
ción con acetilacetona.
Cicloserina Profánnaco de cicloserina
Figura 21.20. Síntesis de cicloserina.
Como ejemplo de fármacos con estructura oxazólica, citaremos el quimioterápico sulfamoxol, que
pertenece al grupo de las sulfamidas de acción prolongada. Su síntesis no se lleva a cabo a través de la ruta
más sencilla, es decir, a través de la formación del enlace sulfonamídico a partir de la amina heterocíclica y
el cloruro de p-acetamidobencenosulfonilo, sino que se crea el derivado oxazólico sobre la sulfamida inter
media (Fig. 21.21). Esta estrategia se basa, fundamentalmente, en aspectos estrictamente económicos, ya
que todos los productos empleados (anilina, anhídrido acético, cianamida y aciloína) son económicamente
asequibles.
O
CHj-C-NH SO¡5-NH-C=N
Sulfamoxol
Figura 21.21. Síntesis de sulfamoxol.
La pemolina es un psicoestimulante que muestra un claro ejemplo de síntesis inmediata, ya que se obtie
ne, en un solo paso, por ciclación intermolecular entre el mandelato de etilo y la guanidina (Fig. 21.22).
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCL1CA NO CONDENSADA 657
NH
+ H,N-C-NH,
Penicilina
Figura 21.22. Síntesis de pemolina.
6. FÁRMACOS CON ESTRUCTURA DE PIRAZOL, IMIDAZOL Y HETEROCICLOS

RELACIONADOS
Dentro de los heterociclos de tipo pirazólico, los fármacos más importantes pertenecen a las familias de
las 5-pirazolonas y las 3,5-pirazolidinadionas. Suelen utilizarse como analgésicos, antipiréticos, y antiinflama
torios o antirrcumáticos. Aunque a partir de 1977 fueron prohibidos en EEUU, al comprobar efectos secunda
rios tales como agranulocitosis y anemia aplásica. entre otros, algunos siguen empleándose en Europa bajo es
tricto control médico.
En el grupo de las 3-pirazolin-5-onas, destaca el metamizol magnésico (Nolotil®), desarrollado por los la
boratorios Hoechst a partir de la antipirina (l-fenil-2,3-dimctil-3-pirazolin-5-ona). Las 3-pirazolin-5-onas se
forman en una reacción general entre |3-cetoésteres e hidrazinas, conocida como reacción de Knorr. La elabora
ción de la antipirina hasta metamizol (Fig. 21.23) se lleva a cabo a través de una serie de pasos consecutivos,
que permiten nitrosar la posición 4 del anillo heterocíclico y reducir a grupo amino. La monometilación de di
cho grupo amino se produce a través de la base de Schiff con benzaldehído y. finalmente, la reacción de la ami
na secundaria así formada con HCHO/NaHSOj permite introducir el grupo metanosulfonato sódico, con forma
ción del metamizol.
Metamizol Metamizol
sódico magnésico
Figura 21.23. Síntesis de metamizol.

Dentro del grupo de las pirazolidina-3,5-dionas, merece destacarse la sulfinpirazona (Anturane’j, un inte
resante compuesto cuyas propiedades uricosúricas se deben a la exaltada acidez del átomo de hidrógeno en C-4
del anillo (pK., = 2,8). Es un producto de farmacorregulación del antiinflamatorio fenilbutazona y, por lo tanto,
su síntesis sólo difiere en la parte concerniente a la preparación del éster malónico sustituido (Fig. 21.24). El
anillo heterocíclico, por condensación del éster malónico, es convenientemente sustituido con TV./V'-difenilhi-
drazina. El malonato correspondiente a la sulfinpirazona se obtiene a partir de bencenotiol y 1,2-dibromoetano,
seguido de alquilación del malonato de dietilo.
CO.Et
Zn CO,Et
H,SO4 NaOH EtONa
Ph-NH-NH-Ph
EtONa
Fenilbutazona
Figura 21.24. Síntesis de sulfinpirazona.
La cimetidina. un antihistamínico EL útil en el tratamiento de las úlceras pépticas, se sintetiza según se in
dica en la Figura 21.25. En su síntesis pueden distinguirse dos partes: la preparación del anillo imidazólico y su
posterior manipulación para introducir los sustituyentes característicos del fármaco. El anillo imidazólico se
prepara condensando 2-cloroacetoacetato de etilo con formamida. seguido de la reducción selectiva del grupo
éster a grupo hidroximetilo con Na/NH? líquido. La elaboración de la cadena se produce en tres etapas.
Cimetidina
Figura 21.25. Síntesis de cimetidina.

La clonidina es una 2-aminoimidazolina que posee una actividad agonista <x2 y que se emplea como hipo-
tensivo. En su síntesis, se utiliza un método de valor general para la preparación de 2-aminoimidazolinas, mu
chas de las cuales son agonistas oq. Como puede observarse en la Figura 21.26, el anillo imidazólico se prepara
a partir del sustituyente amino del derivado bencénico de partida. En primer lugar, se prepara la tioamidina, y
posteriormente se condensa con etilenodiamina.
1CH,
H,N-<CH,),-NH2
-HSCH,.-NH,
Clonidina
Figura 21.26. Síntesis de clonidina.
Las imidazolidina-2,4-dionas, conocidas como hidantoínas, tienen una fuerte actividad anticonvulsiva y
un efecto hipnótico menor que los barbitúricos. Para estos fármacos, se han desarrollado muchos métodos de
síntesis, algunos de los cuales se comentan a continuación. En la etotoína (Fig. 21.27), el anillo heterocíclico se
prepara por ciclación de a-aminofenilacetonitrilo con cianato potásico. El aminonitrilo se obtiene por un méto
do general, denominado síntesis de Strecker, que consiste en la condensación entre un aldehido o cetona y una
amina, seguida de la adición de HCN.
CN
NH. / KOCN
Ph-CHO Ph-CH
NaCN/H’
NH,
1) HCI
2) Etl *
(Base)
Etotoína
Figura 21.27. Síntesis de etotoína.
En la mefitoína (Fig. 21.28), se emplea la reacción de Bucherer, en la que un compuesto carbonílico se

trata con KCN y (NHJ2CO3 en etanol-agua (el proceso es bastante complejo).
Mefitoína
Figura 21.28. Síntesis de mefitoína.

Finalmente, en cl caso de la fenitoína, el anillo hidanloínico se prepara a partir del benzaldehído. que su
fre la condensación benzoínica, para dar una aciloína cuya oxidación, seguida de trasposición bencílica del pro
ducto resultante y posterior condensación con urea, origina el compuesto deseado (Fig. 21.39).
I) EtONa Ph
KCN HNOj 2) H,O
*
2PHCHO Ph—CH-S-C-Ph
------------ o KBrO-,' Ph-C-C-Ph Ph-C-OH
I II ii ii
OH O O O CO.H
Fenitoína
Figura 21.29. Síntesis de fenitoína.
Dentro de los compuestos que contienen tiazol, hemos seleccionado la vitamina Bi, una sal de liazolio
que contiene también un anillo pirimidínico. En la Figura 21.30, se muestran los aspectos más destacables de su
síntesis. El anillo tiazólico se prepara a partir de 2-metil-4-amino-5-aminometilpirimidina. que en un primer pa
so reacciona con sulfuro de carbono (con lo que se incorpora el átomo de carbono C-2 y el átomo de azufre del
heterociclo). El producto resultante se hace reaccionar con 5-acetoxi-3-cloropentan-2-ona (que contiene todos
los átomos necesarios para completar dicho heterociclo). El producto obtenido se cicla a tiazolina, con despro
tección del grupo alcohol, y después se oxida suavemente con HjOj/HCl. HNO3, Fe’* u otros agentes oxidantes
a la sal de tiazolio.
Vitamina B,
Figura 21.30. Síntesis de vitamina B|.
Para finalizar este apartado, se ha seleccionado también la etozolina. un eficaz diurético con estructura de
tiazolidinona. que se prepara empleando como reactivos equivalentes de los simones C-N y C-C-S. el cianoace-
tato de etilo y el tioglicolato de etilo (Fig. 21.31). La reacción entre ambos conduce a un intermedio, cuya N-
metilación y sustitución en C-5 conduce al compuesto deseado.
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCL1CA NO CONDENSABA 661
Etozolina
Figura 21.31. Síntesis de etozolina.
7. FÁRMACOS QUE CONTIENEN OTROS HETEROCICLOS PENTAGONALES

CON VARIOS HETEROÁTOMOS
Entre ellos, comentaremos en primer lugar la síntesis de un [i-bloqueante inespecífico, el timolol, del
que se emplea el enantiómero S(-). Se ha seleccionado, no tanto por el interés de la preparación del anillo he-
terocíclico, sino porque es un ejemplo de síntesis enantioespecífica a partir de D-gliceraldehído o su O.O-iso-
propiliden derivado, que se transforma primero a través de su reacción con t-butilamina. hidrogenación de la
imina así formada y posterior desprotección (Fig. 21.32). El compuesto final se obtiene, en una segunda fase,
por sustitución nucleófila del 3(4-morfolinil)-4-cloro-1,2,5-tiadiazol con el hidroxilo del alcohol primario,
menos impedido.
1) H,N-Bu HV>0H
HOH;C CHO 2) Hj/Pd-C HOH.C CH,-$-NH-Bu

3) H,O’
Timolol
Figura 21.32. Síntesis de timolol.
Del diurético inhibidor de la anhidrasa carbónica azetazolamida comentaremos una síntesis cuyo inter
medio clave es el 2-mercapto-5-amino-l,3,4-tiadiazol, que se prepara a partir de W,N'-ditiocarbamoilhidrazi-
na (que equivale al simón S-C-N-N-C). a través de una delación intramolecular (Fig. 21.33). Dicha ciclación
se lleva a cabo empleando un mol de fosgeno, que transforma uno de los grupos amino en un buen grupo sa
liente. Finalmente, el grupo amino del derivado heterocíclico se acetila. se oxida el grupo mercapto y se for
ma la sulfamida.
2H.NSCN + H2N-NH;
N-N 1) AC;O N-N

H;N— 2) Cl;. H;O HjC -CO -NH SO;C1
Acetazolamida
Figura 21.33. Síntesis de acetazolamida.
La oxolamina es un antitusígeno con estructura de 1,2.4-oxadiazol (Fig. 21.34). El heterociclo se prepara,

en un solo paso, haciendo reaccionar el cloruro del ácido 3-cloropropiónico con el hidroxilimino derivado de la
benzamida, en una síntesis que recuerda bastante la formación de 2-oxazolinas. La segunda reacción representa
un método general para obtener aminas terciarias: la reacción de un derivado halogenado con una amina secun
daria.
zN-OH °x ,N-0 Et.NH

Ph-c' ^C-CH.-CH.CI ------ ► Ph-c' CH.CH.CI
nh2 Cl NH.O
Oxolamina
Figura 21.34. Síntesis de oxolamina.
El analéptico cardiorrespiratorio pentatetrazol (cardiazol) se prepara por cl método más general que con
duce a tetrazoles: la reacción entre una amida y azida sódica. En este caso, la amida tiene una estructura lactá-
mica. y se obtiene mediante trasposición de Beckmann de la ciclohexanona oxima (Fig. 21.35).
NHjOH
Pentatetrazol
Figura 21.35. Síntesis de pentatetrazol.
8. FÁRMACOS QUE CONTIENEN HETEROCICLOS HEXAGONALES

CON VARIOS HETEROÁTOMOS
Dentro de este grupo, existen muchos e importantes fármacos. Entre ellos, el colerético azintamida, que
posee una estructura pirazínica 3,6-disustituida, es uno de los más sencillos. Normalmente, este tipo de hetero-
ciclos se obtiene condensando anhídrido maleico con hidrazina (Fig. 21.36). La introducción de sustituyentes se
consigue a partir del 3,6-dicloroderivado.
POCI,
Ci
Azintamida
Figura 21.36. Síntesis de azintamida.
El antipalúdico inhibidor de la dihidrofólico reductasa pirimetamina se prepara según se indica en la Fi

gura 21.37. Se emplea el propionato de etilo, como reactivo equivalente de un sintón C-C-C, y la guanidina. co
mo equivalente de un sintón N-C(N)-N. La reacción transcurre con mejor rendimiento si el compuesto carboní-
lico se transforma en el éter metílico de la forma enóiica, por tratamiento con ortoformiato de etilo.
CH3-CH2CO2Et
F.tONa
CN
Figura 21.37. Síntesis de pirimetamina.
Para disminuir en parte la hepatotoxicidad del antincoplásico inhibidor de la timidilato sintetasa 5-fluo-
rouracilo, se transformó en su profármaco ftorafur. De su síntesis puede destacarse la preparación de la pirimi-
dina fluorada. condensando fluoroacetato de etilo y formiato de etilo, seguido de condensación con S-metili-
sotiourea. La hidrólisis suave conduce al 5-fluorouracilo (Fig. 21.38). La activación de este intermedio como
O-trimetilsililderivado facilita la /V-alquilación. en el nitrógeno menos impedido, con 2-clorotetrahidrofurano.
Ftorafur
Figura 21.38. Síntesis de Ftorafur.

Otra gran familia de derivados pirimidínicos activos está formada por los ácidos barbitúricos, muy utili
zados hace años como hipnóticos-sedantes o anticonvulsivos. Su síntesis está representada en el proceso retro-
sintético de la Figura 21,39a.
Se obtienen condensando p-diésteres o productos relacionados (malonato de dietilo, malonodinitrilo, cia-
nacetato de etilo) con derivados del ácido carbónico (urea, tiourea, guanidina, /V-metilurea o cianoguanidina).
Los sustituyentes en C-5 se introducen normalmente sobre el malonato de dietilo mediante alquilaciones sucesi
vas (Fig. 21.39b).
A pesar de la sencillez del método, pueden presentarse complicaciones cuando el alquilo es secundario,
por la competencia entre las reacciones de sustitución nucleófila y de eliminación. En estos casos, la mejor so
lución es utilizar la síntesis de Knoevenagel, como se refleja en la Figura 21.39c. que esquematiza la prepara
ción de aprobarbital. La reacción de Knoevenagel entre malonato de dietilo y acetona, seguida de hidrogenación
catalítica, conduce al isopropilmalonato de dietilo. El sustituyeme alilo puede introducirse a continuación del
modo habitual.
H.N
H,<\
H,C"
CH CO,Et H,N
>=°
*
H2C=CH-CH/ CO.Et
Aprobarbital
Figura 21.39. Síntesis de barbitúricos. Aprobarbital.
La introducción de arilos también es un problema interesante, ya que no puede aplicarse ni la alquilación

directa ni la reacción de Knoevenagel.
Por ello, la estrategia consiste en partir de un éster malónico que contenga dicho sustituyeme, como
puede verse en la síntesis de fenobarbital (Fig. 21.40). El fenilmalonato de dielilo se prepara a partir del fcni-
lacetonitrilo. Su alquilación con bromuro de etilo y posterior condensación con urea conduce al compuesto
deseado.
I) EtONa ElOU
CHjCN
2) ElO2C-CO2El H*
H,N
BrEt
Ph CO,El
H,N
>=°
EíONa
Et COjEt
Fcnobarbital
Figura 21.40. Síntesis de fenobarbital.
También se utiliza un método indirecto para la introducción, en el éster malónico, de sustituyentes insatu
rados, como sucede en la preparación del hexobarbital (Fig. 21.41). en la que la condensación de Knoevenagel
de ciclohexanona y cianoacetato de etilo conduce a un derivado que contiene un doble enlace endocíclico. Es
interesante destacar que el empleo de cianoguanidina. en lugar de urea o guanidina, permite sintetizar el anillo
con uno de los átomos de nitrógeno bloqueado por el grupo ciano, lo que posibilita la mediación selectiva del
otro átomo de nitrógeno.
Me.SO.
CH.ÜNa
CH,
I '
11 Me.SO.
2) H,SO4
Hexobarbital
Figura 21.41. Síntesis de hexobarbital.
El minoxidilo es un andhipertensivo que, por su toxicidad, se derivó a una aplicación tópica en el trata
miento de la alopecia androgénica.
Su precursor es el ácido barbitúrico no sustituido, cuyo tratamiento con POCI, da lugar a la 2,4,6-tri-
cloropirimidina (Fig. 21.42).
El átomo de cloro en 2 es más reactivo que los situados en las posiciones 4 ó 6, y por ello es posible lle
var a cabo sustituciones nucleóftlas sucesivas de dichos átomos.
NH,
Cl
Minoxidilo
Figura 21.42. Síntesis de minoxidilo.
La hexetidina (Oraldine
*
) es un antiséptico bucal con estructura de perhidropirimidina cuya síntesis im
plica un proceso C-C-C+N+C+N (Fig. 21.43).
El fragmento de tres carbonos es un 1,3-diol. que se obtiene condensando nitroetano con dos moles de
formaldehído. La condensación de aquél con dos equivalentes de la amina primaria indicada y uno de formalde-
hído, integra el ciclo de seis miembros esperado.
F.l
Ch/"’ Ca<OHh H,C CH2OH ’Bu-CH-CH2-NH,
2HCHO +
OjNZ CH.OH HCHO
NO,
Hexetidina
Figura 21.43. Síntesis de hexetidina.
El tuberculostático pirazinamida es un isóstero pirazínico de la nicotinamida. Su formación se lleva a

cabo oxidando, de forma degradativa. la quinoxalina, que a su vez se prepara fácilmente condensando glioxal y
o-fenilenodiamina.
El producto de la oxidación permangánica es un diácido que se descarboxila térmicamente, dando ácido
pirazina-2-carboxílico que. finalmente, se transforma en amida (Fig. 21.44).
SÍNTESIS DE FÁRMACOS CON ESTRUCTURA HETEROCÍCLICA NO CONPENSADA 667
Figura 21.44. Síntesis de pirazinamida.
La buspirona es un ansiolítico que contiene tres subestructuras heterocíclicas: un sistema azaespiránico,

una piperazina y una pirimidina. En la Figura 21.45, se muestran tan sólo los procesos de acoplamiento entre
ellas.
CICH2(CH2)2CN 1L
K,CO, Ni Raney
Figura 21.45. Síntesis de buspirona.
Se ha seleccionado la fenmetrazina, un agonista adrenérgico de acción indirecta, como representante del

modo de construir el anillo de morfolina que se encuentra en numerosos fármacos. Se obtiene por deshidrata
*
ción intramolecular de un aminodiol, cuya síntesis se efectúa, a partir de la propiofenona, a través de varios pa
sos consecutivos convencionales (Fig. 21.46).
CH2—Ph
HN
Br2 CH2-CH2OH
CO-CH2-CH,
O CH2Ph
Ph-C-CH^-N
CHj 'CH2CH2OH
Fenmetrazina
Figura 21.46. Síntesis de fenmetrazina.

Almitrina
Figura 21.47. Síntesis de almitrina.
Finalmente, aunque los sistemas triazínicos no se encuentran muy extendidos en el campo de los fárma
cos. existe algún ejemplo que debe ser considerado, como el analéptico vasodilatador cerebral almitrina, cuya
síntesis se representa en la Figura 21.47. La estrategia es muy simple y no ofrece dificultades dignas de men
ción. Las diferentes uniones C-N se llevan a cabo, a través de precursores C-Cl, por sustitución nucleófila, lo
que constituye un modo operatorio muy generalizado.
BIBLIOGRAFÍA
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Síntesis de sistemas heterocíclicos

condensados con benceno
A. Monge
1. ANILLOS DE CINCO ESLABONES CONDENSADOS CON BENCENO
1.1. Indoles
La preparación de derivados de indol a partir de precursores no heterocíclicos puede lograrse por numerosas ru
tas. de las que se recogen las más importantes en la Figura 22.1. La que tiene una mayor aplicación es la síntesis
de Fischer, que transcurre por un mecanismo bastante complejo a través de la ruptura del enlace N-N en arilhi-
drazonas. Obsérvese que la elección del compuesto carbonílico que se condensa con la arilhidrazina determina
la naturaleza de los sustituyentes R, y R;.
a) Síntesis de Fischer: ciclación de fenilhidrazonas por calentamiento bajo catálisis acida
b) Síntesis de Madelung: ciclación de o-aeilaminotoluenos con bases fuertes
K'rBuO'
c) Síntesis de tíischler: calentamiento de a-halo o a-hidroxicetonas con arilaminas. bajo catálisis ácida
d) Síntesis de Reissert. condensación entre o-nitrotoluenos y oxalato de diclilo. seguida de ciclación reductora
(EtOCO);
K’'OEt 1
Figura 22.1. Principales métodos para la síntesis de derivados de indol a partir de precursores no heterocíclicos.
Como ejemplo de aplicación de este método, se resume, en la Figura 22.2, la síntesis descrita por la
compañía Merck para la indometacina, el primer compuesto introducido en terapéutica como antiinflamato
rio no esteroideo. Se prepara, por síntesis de Fischer, a partir del hidrocloruro de 4-metoxifenilhidrazina y el
éster metílico del ácido levulínico, para dar el éster metílico del ácido 2-metil-5-metoxi-3-indolilacético, que
posteriormente se saponifica, para después transformarlo en el (erc-butil éster en presencia de diciclohexil-
carbodiimida. El indol obtenido se acila con cloruro de p-clorobenzoilo, y posteriormente se desprotege el
éster terbutílico por pirólisis, para dar la indometacina. Otros posibles métodos de desprotección, tales como
la hidrólisis ácida o básica, son inviables en la práctica, porque conducen a la ruptura del sistema de l-aci-
lindol.
CH,-CH,-COOCH,
HCI
O CH,
Ácido levulínico
(éster metílico)
(CH,),COH/ZnCk
Figura 22.2. Síntesis de indoles de Fischer aplicada a la preparación del antiinflamatorio indometacina.
1.2. Carbazoles
Su síntesis está estrechamente relacionada con la de los índoles, y con frecuencia se recurre al método de Fis
cher para la formación del anillo heterocíclico, partiendo de un derivado de ciclohexanona como componente
cetónico. En la Figura 22.3, se representan, como ejemplos, la preparación del antidepresivo ciclindol, del
antipsicótico flucindol y del antialérgico oxarbazol.
SÍNTESIS DE SISTEMAS HETEROCÍCLICOS CONDENSADOS CON BENCENO 671
Figura 22.3. Síntesis de carbazoles.
1.3. Oxindoles
El sistema de oxindol (2-indolinona) se encuentra en algunos fármacos. Se obtiene por métodos reductores,
como la reducción de ¡satinas o de derivados de 2-nitrofenilacético, o por ciclación de derivados de 2-cloro-iV-
fenilacetamida (Fig. 22.4).
Figura 22.4. Algunos métodos de síntesis de derivados de oxindol.
Un ejemplo interesante es la amedalina. un antidepresivo que se prepara por reacción de difenilamina con
cloruro de 2-cloropropionilo (Fig. 22.5). La amida resultante se cicla al correspondiente oxindol, el cual, por
tratamiento con hidruro sódico, forma el correspondiente enolato, que se alquila con 2-cloroetildimetilamina en
la posición 3 del anillo.
Figura 22.5. Síntesis de amedalina.
La desmetilación parcial, para obtener el producto final (pasos 3 y 4 del esquema anterior), se realiza por
el método de von Braun, que consiste en el tratamiento con cloroformiato de etilo y posterior hidrólisis del co
rrespondiente carbamato, según se indica en la Figura 22.6. Este método tiene valor general para la degradación
de aminas terciarias a sus norderi vados.
.CH, CH,
H3O®
R—N ‘ + CICO-»Et ______ > R—
CH3 CO2Et CO,Et
CH,
R—N\ R—NHCH,
CO,H
Figura 22.6. Desmetilación de aminas terciarias por el método de von Braun.
1.4. Isoindoles
Tienen interés algunos derivados de isoindol-1-ona. que se preparan por reducción parcial de las correspondien
tes ftalimidas con metales (Zn o Sn) en medio ácido. Los derivados N-sustituidos de la ftalimida, a su vez. son
accesibles a través de dos rutas generales: la alquilación del sistema no sustituido o la reacción de derivados del
ácido itálico con aminas primarias (Fig. 22.7a). Por ejemplo, el antiinflamatorio indoprofeno es un derivado de
la isoindolona que se prepara, a partir de p-nitroetilbenceno, por carbonatación y posterior reducción con cloru
ro de estaño a ácido 2-(p-aminofcnil)propanoico. Su condensación con anhídrido ftálico a la correspondiente
ftalimida y reducción parcial con cinc conduce al compuesto deseado (Fig. 22.7b).
CO2H
CH-CHi
O
Indoprofeno
Figura 22.7. a) Métodos generales para la síntesis de isoindol-1-onas. b) Síntesis de indoprofeno.
1.5. Síntesis a partir del anillo heterocíclico preformado
Se trata de una estrategia frecuente. Por ejemplo, el pindolol (un agente bloqueante p-adrenérgico) es un com
puesto indólico que se prepara, a partir de 4-hidroxiindol. por reacción con epiclorhidrina (glicidol) y posterior
desplazamiento del átomo de cloro con isopropilamina (Fig. 22.8).
Pindolol
Figura 22.8. Síntesis de pindolol.
En los isoindoles. también es frecuente utilizar un precursor que. como la ftalimida. contenga el esqueleto
preformado.
Así. el diurético clorexolona se obtiene a partir de 5-cloroftalimida por reacción con cloruro de ciclohexi-
lo. reducción selectiva de un grupo carbonita con estaño en medio ácido, nitración y sustitución del grupo nitro
por clorosulfonilo mediante la reducción de aquél, diazotación de la amina así formada, y posterior reacción de
Sandmeyer con dióxido de azufre y cloruro de cobre en ácido acético.
El tratamiento final con amoníaco líquido lleva a la clorexolona (Fig. 22.9).
Clorexolona
Figura 22.9. Síntesis de clorexolona.
2. ANILLOS DE CINCO ESLABONES CON DOS HETEROÁTOMOS

CONDENSADOS CON BENCENO
2.1. Indazoles
En este grupo de compuestos, se encuentra un cierto número de agentes antiinflamatorios y anestésicos. Como
ejemplo representativo, puede considerarse el anestésico local benziamida (Fig. 22.10). Su síntesis supone la al-
quilación del grupo amino del antranilato de metilo con cloruro de bencilo y la /V-nitrosación por tratamiento
posterior con ácido nitroso. La W-niirosamina se reduce in situ a una hidrazina, que cicla espontáneamente al
sistema de 3-oxoindazol. De éste deriva el éter de su forma enólica (benziamida). por calefacción con cloruro de
3-dimetilaminopropilo.
O=N-OH/IT
Benziamida
Figura 22.10. Indazoles. Síntesis de benziamida.

SÍNTESIS DE SISTEMAS HETEROCÍCL1COS CONDENSADOS CON BENCENO 675
2.2. Bencimidazoles
La representación de estos sistemas entre los compuestos con aplicación terapéutica es numerosa y variada. Por
ejemplo, en el campo de los antihistamínicos. el clemizol se prepara por reacción de fenilenodiamina con ácido
cloroacético. Esta reacción es un ejemplo de una de las estrategias de síntesis de bencimidazoles más utilizadas,
la síntesis de Phillips, que consiste en condensar orro-fenilenodiaminas con ácidos carboxílicos o sus derivados
(Fig. 22.11).
HOOC-CH2CI
1) AgOH
Clemizol
Figura 22.11. Bencimidazoles. Síntesis de clemizol.
En la síntesis del antihelmíntico tiabendazol (Fig. 22.12), se plantean dos métodos: la síntesis de Phillips,
utilizando fenilenodiamina y ácido tiazol-4-carboxílico (Fig. 22.12a), y otro método alternativo a partir de anili
na, por reacción con 4-cianotiazol, W-cloración de la amidina así formada con hipoclorito sódico y posterior ci-
clación por una reacción de inserción de nitreno (Fig. 22.12b).
Figura 22.12. Síntesis de tiabendazol.

Otro antihelmíntico, el flubendazol, se obtiene también a partir de derivados de la fenilenodiamina

(Fig. 22.13).
a
H,N
^—nh2 i/2 so;'
CH,S
NH^COOCH,
CICOOCH,
Flubendazol
Figura 22.13. Síntesis de flubendazol.
El clonitazeno, un analgésico narcótico, se obtiene preparando la fenilenodiamina ^-sustituida adecuada,

que se cicla en una síntesis de Phillips utilizando un nitrilo como derivado de ácido.
La fenilenodiamina se obtiene, a su vez, a través de una sustitución nucleófila entre la 2-dielilaminoetila-
mina y el 2,4-dinitroclorobenceno, seguida de reducción selectiva del grupo nitro en orto con sulfuro amónico
(Fig. 22.14).
S(NH4)2
Et
NH2-(CH2)2-N
Et
Clonitazeno
Figura 22.14. Síntesis de clonitazeno.
El sulmazol es un cardiotónico que posee una estructura en la que se ha llevado a cabo una sustitución
isostérica del benceno del bencimidazol, por un anillo de piridina.
Por ello, cl punto de partida, cn lugar de ser una fenilenodiamina, es la 2,4-diaminopiridina. La síntesis
culmina con la oxidación de un sulfuro a sulfóxido (Fig. 22.15).
SÍNTESIS DE SIS TEMAS HETEROCÍCLICOS CONDENSADOS CON BENCENO 677
Sulmazol
Figura 22.15. Síntesis de sulmazol.
Finalmente, el pirobenzano es un cardiotónico que incluye en su molécula un resto de bencimidazol. En

este caso, hay que resaltar la inclusión de un anillo de piridazinona, de importancia fundamental para esta acti
vidad. Este anillo se ha construido a partir de un compuesto 1,4-dicarbonílico, que se condensa con hidrazina en
ácido acético (Fig. 22.16).
Figura 22.16. Síntesis de pirobenzano.
2.3. Benzoxazoles
En su preparación, suele utilizarse la condensación entre un derivado de ácido y una o-hidroxianilina (en lugar de
una o-fenilenodiamina, como hemos visto para los bencimidazoles). El benoxaprofeno utilizado como ejemplo en
la Figura 22.17 pertenece a los analgésicos con estructura de ácidos arilpropiónicos. Pueden verse, en este caso,
una serie de transformaciones sencillas, entre las que destaca la transformación de una anilina en o-aminofenol. a
través de la nitrosación e hidrólisis de la amina aromática, seguidas de posterior nitración y reducción.
Bcnoxaprofeno
Figura 22.17. Benzoxazoles. Síntesis de benoxaprofeno.
Figura 22.18. Quinolinas. a) Síntesis de Combes, b) Síntesis de Conrad-Limpach-Knorr.

3. ANILLOS DE SEIS ESLABONES CON UN HETEROÁTOMO CONDENSADOS

CON BENCENO
3.1. Quinolinas
Las quinolinas se han utilizado frecuentemente en terapéutica (fundamentalmente, en el campo de los antipalú
dicos), pero hay muchos otros fármacos que contienen dicho sistema. Este anillo se prepara habitualmente a
partir de anilinas con simones tricarbonados. Así, en la síntesis de Combes, las anilinas reaccionan con com
puestos l,3-dicarbonílicos, para dar intermedios que pueden ciclarse con ácidos (Fig. 22.18a). Si se trata de
p-oxoésteres, pueden originarse 2- <5 4- quinolonas (síntesis de Conrad-Limpach-Knorr. Fig. 22.1 Xb).
Una anilina puede reaccionar también con un compuesto carbonílico a.p-no saturado, y el producto de
adición 1,4 puede ciclarse en medio ácido y oxidarse para originar quinolinas. Cuando éstas no llevan susti
tuyentes en el anillo heterocíclico, se usa glicerol como precursor del compuesto carbonílico a,p-insaturado
(el glicerol produce in situ acroleína por deshidratación con ácido sulfúrico concentrado). Esta reacción se
denomina síntesis de Skraup. y en ella se utiliza nitrobenceno como oxidante para la aromatización final
(Fig. 22.19).
■H,0
Figura 22.19. Quinolinas. Síntesis de Skraup.
Por último, en la síntesis de Friedlander, que es también muy utilizada, una or/o-acilanilina se condensa
con una cetona o un aldehido que posee un metileno activo en la posición a. utilizando una catálisis ácida o bá
sica (Fig. 22.20).
C„H.
AcOH/H,SO4 cone.
Figura 22.20. Quinolinas. Síntesis de Friedlander.
Entre las quinolinas antipalúdicas que representan una simplificación del alcaloide quinina, algunas es
tructuras fundamentales son la cloroquina. la primaquina y la pamaquina. La primera se prepara a partir de la m-
cloroanilina y el oxalacetato de etilo (Fig. 22.21). El producto de condensación así formado se cicla a quinolina
en una reacción de Conrad-Limpach-Knorr. La saponificación del éster al ácido, seguida de la descarboxilación.
da la 4-hidroxi-7-cloro-quinolina. en la que el grupo hidroxilo se sustituye por un átomo de cloro y éste por la
correspondiente amina (los 2- y 4-halogenoderivados de quinolina son muy reactivos frente a nucleóftlos, ya
que son semejantes a los haluros de ácido).
Figura 22.21. Síntesis de cloroquina.
La primaquina y la pamaquina se obtienen aplicando la síntesis de Skraup, a partir de la 4-metoxi-2-nitroa-

nilina, por adición de Michael al propenal y condensación a la correspondiente 8-nitroquinolina. La reducción
posterior del grupo nitro y la alquilación de la amina resultante conducen al antipalúdico deseado. Mención espe
cial merece la alquilación de la 6-metoxi-8-amino-quinolina para la obtención de la primaquina, ya que. al tener
esta última un grupo amino libre en su molécula, ha de protegerse como derivado de la ftalimida (Fig. 22.22).
Figura 22.22. Síntesis de primaquina y pamaquina.
Hace años, apareció en terapéutica una serie de compuestos antibacterianos referibles a la 4-quinolona.
Un ejemplo interesante de estas estructuras es el norfloxacino, que se obtiene a partir de la 4-fluoro-3-cloroani-
lina por condensación con 2-ctoximetilenmalonato de dietilo, para posteriormente, por calefacción, originar la
correspondiente quinolona. El proceso transcurre a través de una adición 1.4 al diéster a,p-insaturado, con eli-
SINTESIS DE SISTEMAS HETEROCÍCLICOS CONDENSADOS CON BENCENO 681
minación de etanol. La delación se realiza en éter difenílico como disolvente por su alto punto de ebullición.
Posteriormente, se realiza la A'-alquilación y se sustituye el átomo de cloro sobre el anillo aromático para dar el
producto deseado (Fig. 22.23). Esta reacción es posible porque el átomo de cloro está en para respecto a un gru
po carbonilo atrayente de electrones.
Norfloxacino
Figura 22.23. Síntesis de norfloxacino.
Otro ejemplo del grupo de las quinolonas antibacterianas es el ácido nalidíxico, que se sintetiza por una
ruta similar a la descrita anteriormente para el norfloxacino. si bien en este caso se parte de la 2-amino-6-metil-
piridina (Fig. 22.24). En este compuesto, hay un anillo de piridina sustituyendo al anillo de benceno que encon
trábamos en el compuesto anterior.
Figura 22.24. Síntesis de ácido nalidíxico.
3.2. Isoquinolinas
El sistema de la isoquinolina se encuentra en muchos alcaloides (como, por ejemplo, la papaverina). La primera
síntesis descrita para esta estructura la realizó Picket, y supone la reacción de la veratrilamina con cloruro del
ácido 3,4-dimetoxifenilacético para dar la correspondiente amida, que se cicla con oxicloruro de fósforo a tra
vés de un iminocloruro. La aromatización se logra por deshidrogenación con paladio (Fig. 22.25).
Figura 22.25. Síntesis de papaverina.
4. ANILLOS DE SEIS ESLABONES CON DOS HETEROÁTOMOS

CONDENSADOS CON BENCENO
4.1. Benzodioxanos
Dentro de este grupo, existe una miscelánea de compuestos con actividad biológica. Se sintetizan a partir del
correspondiente pirocatecol y epiclorhidrina u otros reactivos 1,2-dielectrófilos. El piperoxano (útil en trata
mientos cardiovasculares) es un ejemplo de este tipo de compuestos. Las modificaciones en la cadena lateral
son decisivas para determinar la actividad final del producto (Fig. 22.26).
Figura 22.26. Síntesis de piperoxano.
El piroxano (un bloqueante p-adrenérgico) es otro ejemplo. En su síntesis se utiliza una reacción de Man
nich entre la 3-fenilpirrolidina, el formaldehído y la correspondiente metilcetona derivada del benzodioxano
(Fig. 22.27).
4.2. Benzopiridazinas
Los anillos de ftalazina han proporcionado una serie de compuestos con interesante actividad antihipertensiva,
que actúan fundamentalmente como vasodilatadores. La primera de estas estructuras fue la hidralazina. sinteti
zada a partir del semialdehído del ácido itálico que. por reacción con la hidrazina. origina la correspondiente pi-
ridazina (Fig. 22.28). Este producto, con oxicloruro de fósforo, da el compuesto clorado, que luego se desplaza
con hidrazina para dar hidralazina.
H,N-NH2
Figura 22.28. Síntesis de hidralazina.
El carbazerán es un cardiotónico que también tiene la estructura de la piridazina y que representa a los
agentes inotrópicos de síntesis. En la Figura 22.29, se parte ya del sistema de la correspondiente benzopirida-
zina.
OCONHC,H5
Figura 22.29. Síntesis de carbazerán.

684 INTRODUCCIÓN A l-A QUÍMICA FARMACÉUTICA
4.3. Benzopirimidinas y compuestos relacionados
Los compuestos que presentan en su estructura un anillo heterocíclico con dos átomos de nitrógeno separados
por un átomo de carbono, condensado con un benceno, están representados en un buen número de compuestos
de distinta actividad biológica. Entre ellos, la tioperidona es un tranquilizante depresor del sistema nervioso
central que se prepara a partir del anhídrido isatoico por condensación con la correspondiente amina (Figu
ra 22.30). La amida así obtenida se cicla con fosgeno a la benzopirimidina deseada (el sistema de benzol[</)piri-
midina se denomina quinazolina).
Figura 22.30. Síntesis de tioperidona.
La prazosina es un ejemplo de a-bloqueanle postsináptico cuya síntesis se realiza a partir del 3.4-dimeto-
xibenzaldehído (Fig. 22.31). La nitración de este compuesto, seguida de la oxidación del aldehido, da el corres-
Figura 22.31. Síntesis de prazosina.

SÍNTESIS DE SIS TEMAS HETEROCÍCUCOS CONDENSADOS CON BENCENO 685
pondientc ácido, que se transforma en su amida con amoníaco y. posteriormente, se reduce catalíticamente el
grupo nitro a amina. Ésta, con fosgeno o urea, da una benzopirimidinadiona (quinazolinadiona) que. por reac
ción con oxicloruro de fósforo, origina el correspondiente dicloroderivado. Los dos átomos de cloro tienen dife
rentes reactividades, y el de la posición 4 (más reactivo) se reemplaza por amoníaco en tetrahidrofurano. El se
gundo átomo de halógeno reacciona posteriormente con la piperazina. para dar el producto de sustitución. La
acilación de la amina secundaria con cloruro de furoílo da la prazosina.
La fenquinona es una quinazolina diurética (obsérvese la presencia de un grupo sulfamida asociado con
frecuencia a esta actividad (Fig. 22.32). En este caso, se prepara por condensación de una o-aminobenzamida
convenientemente sustituida con benzaldchído.
Cl./^^NH,
jT jf C„H,CHO
HjNOjS^^^CONHj
Fenquinona
Figura 22.32. Síntesis de fenquinona.
Otro tipo de compuestos, con dos átomos de nitrógeno separados por uno de carbono y un grupo sulfa
mida en su estructura, es el de las 1,2,4-benzotiadiazinas. La hidroclorotiazida (un diurético muy utilizado)
es el 3.4-dihidroderivado de la clorotiazida, y constituye un ejemplo de cómo pequeños cambios estructurales
pueden afectar de forma importante a la actividad biológica de un compuesto. Se tolera mejor y tiene menos
efectos secundarios que el compuesto no reducido, la clorotiazida, aunque los dos son buenos diuréticos. Se
prepara por doble clorosulfonación de la m-cloroanilina, seguido de reacción con amoníaco, para dar sulfona-
mida, posterior reacción con fonnamida y reducción con formaldehído en medio alcalino. Alternativamente,
puede utilizarse la condensación con formaldehído en medio ácido, para dar un catión de metileniminio que
se cicla (reacción de Mannich, Fig. 22.33).
C1SO,H NH,
(exceso)
HCONH, HCHO + HO°
Figura 22.33. Síntesis de hidroclorotiazida.
Otro diurético que presenta en su estructura el anillo de pirimidina, en este caso fusionado con otro de pi-
razina formando el sistema denominado de pteridina, es el triamtereno. Su síntesis se realiza por condensación
de guanidina y malonodinitrilo, que origina un anillo de pirimidina. Posteriormente, éste se nitrosa y se conden
sa con fenilacetonitrilo, para dar el derivado de pteridina (Fig. 22.34).
nc-ch2-cn
h2nx
CH?ONa NaNO,, H
*
C=NH • HNQ,
H2N
C6H,-CH2-CN
CHjOÑa
NH2
Triamlereno
Figura 22.34. Síntesis de triamtereno.
El dipiridamol es un importante fármaco, preparado originalmente como vasodilatador coronario. Es un

inhibidor de la enzima fosfodiesterasa y. por tanto, responsable de la elevación de los niveles de AMPc, que es
timula la formación de prostaciclina e inhibe la agregación plaquetaria. La síntesis que se refleja en la Figu
ra 22.35 se realiza a partir de una tetrahidroxipirimidopirimidina que, por tratamiento con oxicloruro y penta-
cloruro de fósforo, da un tetracloroderivado. La distinta reactividad de las posiciones halogenadas (mayor en
C-4 y C-8) permite una primera sustitución con piperidina y una segunda con dietanolamina.
Dipiridamol
Figura 22.35. Síntesis de dipiridamol.
Las xantinas, muchos de cuyos derivados han demostrado utilidad terapéutica, son derivados de la pu-
rina, un sistema en el que se condensa una pirimidina con un imidazol. La estrategia más utilizada para su
síntesis parte de las 4,5-diaminopirimidinas, que se condensan con ácido fórmico o sus derivados. Así, en la
teofilina (Fig. 22.36a), el carbamoilacetato de etilo y la AJV'-dimetilurea se condensan en medio básico a un
derivado de aminopirimidina que. por nitrosación y reducción posterior, da la diaminopirimidina correspon
diente. Ésta se condensa finalmente con ácido fórmico. Igualmente, a partir de la W-metilurea, se obtiene ca
feína (Fig. 22.36b).
Cafeína
Figura 22.36. a) Síntesis de teofilina. b) Síntesis de cafeína.
La veroftlina, un broncodilatador utilizado en terapéutica, se prepara por condensación del ácido ciano-
acético y la /V-metil-lV'-(2-metil)butilurea (preparada por adición de la correspondiente amina al isocianato de
metilo, Fig. 22.37). La delación posterior, nitrosación, reducción y condensación con anhídrido acético permite
obtener el producto deseado.
H,N-CH2-CH-CH2-CH, CH,NH
CH, ,C„„, NC-CHj-COOH
H,C-N=C=O ----------------------------------- ► O' । ----------------- =--------------
CH,-CH-CHj-CH,
CH,
I) HONO
2) SnCI2
3) (CH,CO);O
NH2
I
ch2-ch-ch,-ch,
CH,
Verofilina
Figura 22.37. Síntesis de verofilina.

4.4. Benzotiazinas y fenotiazinas
Un ejemplo de fármaco con estructura de benzotiazina es el piroxicam, un antiinflamatorio no esteroideo cuya

síntesis se realiza a partir de la sacarina (Fig. 22.38). por reacción de ésta con cloroacetato de metilo, expansión
del anillo de dihidroisotiazol a dihidro-1,2-tiazina con mctóxido sódico en dimetilsulfóxido, metilación con io-
duro de metilo y tratamiento con 2-aminopiridina.
N® Na® CI-CH2-COOCH,
0 H,CO® Na®
Sacarina
Piroxicam
Figura 22.38. Síntesis de piroxicam.
La clorpromazina pertenece al grupo de los neurolépticos derivados de la fenotiazina, que clásicamente

se sintetizan a partir de difenilaminas (3-clorodifenilamina. en este caso), por calefacción con azufre utilizan
do iodo como catalizador (reacción de Bernthsen) (Fig. 22.39). La alquilación posterior del grupo amina del
isómero mayoritario en presencia de amiduro sódico, conduce a la clorpromazina.
S^l,
NaNHj
CI(CH2),N(CH,)2
(CH2),N(CHj)j
Clorpromazina
Figura 22.39. Síntesis de clorpromazina.
Son muy numerosas las modificaciones que se han realizado de la cadena lateral, las cuales producen en
muchos casos cambios drásticos en la actividad biológica. Así, la etmozina es un antipalúdico que no tiene es
tructura de quinolina, sino de fenotiazina. Su síntesis, muy semejante a la que se ha comentado anteriormente,
se refleja en la Figura 22.40.
Figura 22.40. Síntesis de etmozina.
5. ANILLOS DE SIETE ESLABONES CON DOS HETEROÁTOMOS CONDENSADOS

CON BENCENO
5.1. Dibenzoazepinas, dibenzoxepinas y compuestos relacionados
Estos sistemas se encuentran en ciertos fármacos antidepresivos. Entre ellos, la imipramina se sintetiza a partir
de dos moles de cloruro de o-nitrobencilo, que se condensa en condiciones alcalinas para dar dinitroestilbeno
(Fig. 22.41). La reducción de los grupos nitro a amina, con hierro y ácido clorhídrico, y del doble enlace, con
sodio y alcohol amílico, seguida de la ciclación térmica y la alquilación, en presencia de amiduro sódico, con
ducen al compuesto deseado. Para comprender la reacción de ciclación, es necesario considerar la forma imina
tautómera cn una de las dos anilinas.
Fe, HCI
Imipramina
Figura 22.41. Síntesis de imipramina.

La doxepina es otro antidepresivo tricíclico. cuya síntesis se realiza a partir de ácido 2-benciloxibenzoico.
Éste se cicla con ácido polifosfórico (acilación de Friedel-Crafts) y el producto resultante se trata con el corres
pondiente derivado de Grignard, para dar el alcohol, que finalmente se deshidrata (Fig. 22.42).
Doxepina
Figura 22.42. Síntesis de doxepina.
La amitriptilina, otro antidepresivo tricíclico, se prepara a partir de anhídrido itálico y ácido fenilacético
por condensación con pérdida de agua y dióxido de carbono (Fig. 22.43). El tratamiento con ácido iodhídrico
produce (por reducción) la apertura del anillo de lactona, al mismo tiempo que el medio ácido cataliza la ci-
clación al sistema tricíclico (acilación Friedel-Crafts). La adición de bromuro de ciclopropilmagnesio a la ceto-
na da el correspondiente alcohol terciario que. por tratamiento con ácido bromhídrico, origina un haluro que al
quila. posteriormente la dimetilamina.
Amiiriptilina
Figura 22.43. Síntesis de amitriptilina.

5.2. Benzodiazepinas
Muchos de estos derivados se introdujeron en terapéutica como ansiolíticos. sedantes y anticonvulsivos. El dia
zepam, por ejemplo, se prepara a partir de la p-cloroanilina. Ésta se condensa con cloruro de benzoilo, para dar
(junto con el producto de N-benzoilación) un intermedio cíclico, que posteriormente se hidroliza para dar
o-benzoil-p-cloroanilina (este proceso es muy complejo en su mecanismo, pero es muy eficaz, Fig. 22.44). La
cetona se convierte en oxima, y el grupo amino se motila primero con sulfato de metilo y luego se acila con clo
ruro de cloroacetilo. La condensación con hidróxido sódico del producto así formado, seguida de la reducción
del /V-óxido, origina el diazepam.
Figura 22.44. Síntesis de diazepam.
Dos análogos, en los que el anillo de benceno se ha sustituido por pirazol, son la zometapina y el ripaze-
pam. La primera se prepara utilizando un anillo de pirazol convenientemente sustituido, como se indica en la Fi
gura 22.45, a través de una acilación Friedel-Crafts, seguida de tratamiento con etilenodiamina (lo que implica
una reacción de condensación a imina y una sustitución nucleófila).
CH,
H2N-(CH2)2NH2
CH,
Figura 22.45. Síntesis de zometapina.

El ripazepam se prepara por nitración del derivado de pirazol adecuado, derivación al cloruro de ácido
(que acila posteriormente al benceno), reducción del grupo nitro a amina y condensación con glicinato de etilo.
Este método es general para muchos derivados de este grupo cuya síntesis parte de una o-aminobenzofenona
convenientemente sustituida (Fig. 22.46).
5.3. Benzotiazepinas
El diltiazem es un bloqueante de los canales de calcio muy utilizado, que está relacionado estructuralmente con
las benzodiazepinas. Para su síntesis, se parte del epóxido de p-metoxicinamato de metilo y de 2-nitrotiofenol
(Fig. 22.47).
Diltiazem
Figura 22.47. Síntesis de diltiazem.

La apertura del epóxido da una mezcla de diastereoisómeros (R * Ji

* yR . S
* *
) que puede hacerse en con
diciones en las que el primero sea el mayoritario. Una vez separado el diastereoisómero R *
. R * (racémico). la
hidrólisis posterior del grupo éster da un ácido carboxílico. que puede resolverse a través de la formación de sa
les con bases enantioméricamente puras (por ejemplo, con cinconidina) (véase el Capítulo 30). La reducción
posterior del grupo nitro del enantiómero puro origina la correspondiente amina, que se cicla por el calor a
una lactama de siete términos con la estereoquímica correcta (2S.3S). Posteriormente, se alquila el nitrógeno
amídico, en presencia de una base, y se acila el grupo hidroxilo con anhídrido acético para dar diltiazem (véase
el Apartado 3.2.1 del Capítulo 26).
BIBLIOGRAFÍA
Lednicer. D., y Mitscher, L. A.: The Organic Chemistry of Drug Synthesis. John Wiley and Sons, 1977-1998 (vols. I-VI).
Reuben. B. G.. y Wittcoff. H. A.: Pharmaceutical Chemicals in Perspective. John Wiley and Sons, 1989.
Roth, H. J., y Kleemann, A.: «Pharmaceutical Chemistry», vol. I: Drug Synthesis. Ellis Horwood Limited, 1988.
Gilchrist, T. L.: Heterocyclic Chemistry (3.a ed.). Longman, 1997.
Joule, J. A., y Smith, G. F.: Heterocyclic Chemistry (3.a ed.). Chapman and Hall. 1995.
Síntesis de péptidos
E. E Llama
1. INTRODUCCIÓN
Los péptidos están formados por la unión de aminoácidos y constituyen una clase fundamental de productos na
turales, dada su participación en procesos vitales para los organismos vivos.
Cuando dos aminoácidos se unen por un enlace C-N de amida, por reacción del grupo amino de uno con
el carboxilo de otro, se origina un dipéptido. Si se une un tercero, un tripéptido, y así sucesivamente, denomi
nándose polipéplido a la unión de muchos aminoácidos. Cada péptido posee un aminoácido con su grupo carbo
xilo libre. A este aminoácido se le denomina carboxiterminal o C-terminal. En el otro extremo de la cadena,
existe el denominado aminoácido aminoterminal o/V-terminal, que posee el grupo amino libre. En la nomencla
tura de péptidos se emplea el aminoácido carboxi-terminal como nombre principal de la cadena peptídica, y el
nombre de los restos acilos unidos a él se añaden como prefijos. Así, en la glicil-alanina (Fig. 23.1), la alanina
es el aminoácido C-terminal cuyo grupo amino está acilado por un resto de glicina (glicilo), y en la prolil-glicil-
alanina, el grupo amino del aminoácido /V-terminal de la glicil-alanina está acilado por un resto de prolina (pro-
lilo). Por tanto, el grupo que aparece en primer lugar en el nombre de un péptido es siempre el grupo acilo del
aminoácido Ai-terminal. Las estructuras de los péptidos suelen representarse abreviando el nombre de sus ami-
O : CH,
II ।
H,N—CH,—C^-NH—CH—CO,H
Glicil-alanina Prolil-glici 1-alanina

(Gly-Ala) (Pro-Gly-Ala)
HCys-Tyr-Phc-GIn-Asn-Gys-Pro-Arg-Gly-NH-
Vasopresina Gramicidina-S
Figura 23.1. Nomenclatura de péptidos.

Tabla 23.1. Aminoácidos constituyentes de las proteínas
Estructura de L-aminoácidos según las proyecciones de Fischer
CO,H
h,n-c-.h
R
Nombre Cadena lateral R Abrev. Código *
/>/
Ácidos mono- Glicina H— Gly G 5,97
aininomonocar-
boxílicos
Alanina ch3— Ala A 6.00
Valina" (CH3)2CH— Val V 5.96
Leucina" (CH,)2CH-CH, — Leu L 5,98
Isoleucina" CH,CH?(CH()CH— lie I 6.02
*
Prolina Pro P 6.30
Aminodiácidos Ácido aspártico HO,C-CH,— Asp D 2,77

y sus amidas
AsparraginafoJ HjNCO-CH,— Asn N 5,41
Ácido glutámico HO,C-CH,—CH,— Glu E 3.22
Glutamina H.N-CO- CHj—CH2— Gln Q 5,65
Aminoácidos Lisina" H,N - CH,—CH,—CH2 — CH2 — Lys K 9,74

básicos
Arginina H,NC(NH)NH—CH,—CH,—CH,— Arg R 10,76
HN^N
Histidina" His II 7.59
CH,—
Hidroxiamino- Serina HO—CH, Ser S 5,68

ácidos
Treonina" CH3—CH(OH) Thr T 5,64
Aminoácidos
aromáticos —CH,—
Fenilalanina" Phe F 5.48
HO —CH, — Tyr Y 5,66

Tirosina
/CH“
r if
Triplófano"
Trp W 5,89
H
Aminoácidos Cisteína HS-CH2— Cys C 5,07
con azufre Metionina" HjC-S—CH2-CH,— Met M 5,74
• El punto isoeléctrico es cl valor de pH en el que la molécula es eléctricamente neutra.

a Aminoácidos cuya presencia en la dieta es esencial.
(ai Aminoácidos que pueden ser esenciales en ciertos individuos.
h Estructura completa del aminoácido.
noácidos con los símbolos de tres letras. Obsérvese la estructura de la vasopresina. representada en la Figu
ra 23.1, en la que el aminoácido C-terminal (Gly) se encuentra en forma de amida. Cuando los símbolos de los
aminoácidos van unidos con flechas, como se indica en el antibiótico de naturaleza de decapéptido cíclico gra-
micidina-S (Fig. 23.1), éstas representan enlaces amida desde un grupo carbonilo a un grupo amino.
SÍNTESIS DE PÉPTICOS 697
Los constituyentes esenciales de los péptidos naturales son los veinte aminoácidos representados en la Ta
bla 23.1 (véase su abreviatura y código). El organismo humano es capaz de sintetizar la mayoría en cantidad su
ficiente a partir de otras moléculas. Sin embargo, existen al menos ocho aminoácidos, denominados esenciales,
que han de obtenerse a partir de la dieta.
El átomo de carbono en alfa es un centro estereogénico en todos los aminoácidos naturales, a excepción de
la glicina, pudiendo existir como enantiómeros pertenecientes a una de las dos familias ópticas c o L. La serina es
el compuesto de referencia en este sentido, y su configuración se relaciona con la del gliceraldehído en la quími
ca de los hidratos de carbono. Todos los aminoácidos naturales ópticamente activos pertenecen a la familia L.
La estructura del enlace peptídico, de naturaleza de amida, es plana y estabilizada por resonancia (Fi
gura 23.2). Por ello, el enlace C-N posee un carácter parcial de doble enlace y. aunque la rotación a lo largo del
mismo es posible, las conformaciones son particularmente estables. La difracción de rayos X muestra que los
péptidos presentan sus enlaces de amida en un plano y con una disposición en la que el hidrógeno se sitúa en
trans respecto al oxígeno. En esta disposición, denominada s-trans. existe menor repulsión entre el sustituyeme
del nitrógeno y el situado en el carbono alfa al grupo acilo.
Los seis átomos señalados deben situarse en el mismo plano
Enlaces de hidrógeno de los agolpamientos de amida de los péptidos
Figura 23.2. Estructura de los péptidos.

No obstante, los péptidos son muy flexibles y con frecuencia adoptan un gran número de conformaciones
en solución. Esta flexibilidad viene determinada por la rotación alrededor de los enlaces sencillos establecidos
entre cada aminoácido. Las torsiones en su esqueleto son de particular interés.
En la Figura 23.3, se representan algunos ángulos de torsión de la Leu-encefalina. Como consecuencia de
interacciones estéticas desfavorables, muchas combinaciones de estos ángulos no están permitidas. Las relacio
nes entre los ángulos \|/ y <j> y la energía pueden representarse en los denominados mapas de Ramachandran, en
los que se pueden identificar las áreas de los ángulos permitidos (véase el Capítulo 6).
Leu-encefalina
Figura 23.3. a) Ángulos de torsión representativos de Leu-encefalina. b) Mapa de Ramachandran.
Los péptidos pequeños existen en multitud de conformaciones en solución, mientras que los más grandes
pueden adoptar estructuras secundarias estables del tipo a-hélice.
Los grupos amida pueden formar enlaces de hidrógeno fuertes intramoleculares o intermoleculares, debi
do a las cargas negativas parciales de los átomos de oxígeno y positivas de los de nitrógeno. Esta propiedad es
determinante para establecer la estructura espiral de a-hélice de los péptidos y de algunas proteínas (Fig. 23.4).
Figura 23.4. Estructura de a-hélice estabilizada por enlaces de hidrógeno.
Las alquilaciones y acilaciones son los procesos químicos más comunes de los aminoácidos y. por exten
sión. de los péptidos. La alquilación es frecuente en condiciones fisiológicas, siendo fundamental en la acción
de algunos fármacos, como ocurre en ciertos bloqueantes a-adrenérgicos (fenoxibenzamina, Fig. 23.5a) que
funcionan como agentes alquilantes de sus receptores. También el método analítico de Sanger, para la determi-
SÍNTESIS DE PÉPTIDOS 699
Fenoxibenzamina CH2 CbLCI

(ataque nucleófilo
al catión aziridinio)
péptido
Figura 23.5. a) Ejemplos de fármacos que actúan alquilando restos amínicos de péptidos o de proteínas, b) Arilación del
grupo amino terminal de una proteína en el método analítico de Sanger.
nación de la secuencia de aminoácidos de un péptido o proteína, se basa en la reacción de desplazamiento entre

la función amino terminal nucleófila de una proteína y el fluoruro de 2.4-dinitrofenilo.
La acilación del grupo amino libre de un aminoácido, cuyo grupo carboxílico está protegido, es la base de
la síntesis de los péptidos, como se verá más adelante.
Los isocianatos e isotiocianatos originan, con aminoácidos, hidantoínas y tiohidantoínas. respectivamente
(Fig. 23.6a). Esta reacción se utiliza en el método de Edman para determinar la secuencia de aminoácidos de un
péptido. Así. tras esta reacción en la glicilalanina (Fig. 23.6b), la glicina se separa de la alanina por ser el ami
noácido /V-tenninal en forma de liohidantoína.
R-CH-CO®
®NH.
Hidantoína 2-Tiohidantoína
CH.
H2N-CH:-CO-NH-CH-CO.H
CH,
CH-CO^NH -CH-CO,H
/ *
HN NH- Ph
C
S
Figura 23.6. Acilaciones de aminoácidos y péptidos. Método de degradación de péptidos de Edman.

Los péptidos son cada vez más importantes en el arsenal terapéutico. Su principal problema se deriva de
su rápido metabolismo y de la proteólisis que tiene lugar en el intestino, que no permite su administración por
vía oral. Sin embargo, estos problemas pueden resolverse por modificación estructural. Así, si se reemplaza en
un péptido natural un L-aminoácido situado en un lugar en el que se produce fácilmente la ruptura proteolítica,
por un D-aminoácido, se consigue que la velocidad de hidrólisis sea mucho más lenta.
2. PROBLEMÁTICA DE LA SÍNTESIS DE PÉPTIDOS
La mezcla de dos aminoácidos, uno con la función amina no protonada, esencialmente nucleófila, y otro con
una función carboxilo no ionizada (recordemos que un aminoácido en estado sólido y en soluciones próximas a
la neutralidad se encuentra como ion dipolar o zwitterion), a temperatura ambiente, sólo origina la correspon
diente sal (Fig. 23.7a). El enlace peptídico es un enlace fuerte que requiere energía para su formación, por lo
que la función carboxílica debe ser activada. Como la energía libre de hidrólisis del enlace amida es del orden
de - 3 kcal/mol y la de un cloruro de ácido es, aproximadamente, de - 7 kcal/mol, es posible convertir el grupo
carboxilo de un aminoácido, con su grupo amino protegido según se verá más adelante, en el correspondiente
cloruro de acilo para formar el enlace amídico con el grupo amino libre de otro aminoácido (Fig. 23.7b). Si no
se protege dicho grupo amino, tiene lugar la autocondensación (véase la formación de dicetopiperazina por
reacción del cloruro de ácido derivado de glicina, Fig. 23.7c). Considerando, por ejemplo, la síntesis de un di
péptido sencillo, la glicil-alanina (Gly-Ala), no es posible mezclar los dos aminoácidos y esperar que reaccio
nen en la secuencia deseada para dar un único producto. El número posible de dipéptidos será de cuatro (Gly-
Gly, Gly-Ala. Ala-Gly, Ala-Ala), siendo sólo uno el deseado. El problema se acentúa en la síntesis de péptidos
de cadena mayor. Si quisiéramos obtener de esta forma la gramicidina-S, un antibiótico de naturaleza de deca-
péptido con dos cadenas de pentapéptido complementarias (véase la Fig. 23. Ib), por mezcla en un reactor de los
cinco aminoácidos constituyentes del antibiótico, los polipéptidos posibles serían 3125 y sólo uno el deseado,
teniendo que separarlo del resto.
R—NH2 + HO,C—R-------► R—NH, CO2—R

R y R' = restos de aminoácidos o péptidos
O
PCI,
b) Y—NH—CH—CO2H -------------------- ► Y—NH—CH—C
I ‘ oSOCI2 | \
R R CI
Y—NH—CH—COCI + H2N—CH—COZ ----------------- ► Y—NH—CH—CO—NH—CH—COZ
Aminoácido /V-protcgido Aminoácido

C-activado C-prolegido
Desprotección
—2HCI
Dicetopiperazina
Figura 23.7. Formación del enlace peptídico.

SÍNTESIS ÜE PÉPTICOS 701
El éxito de una síntesis peptídica exige un orden secueneial de acoplamiento de aminoácidos, mediante el
empleo de grupos protectores que han de ser fácilmente eliminados una vez concluida la secuencia de síntesis.
Ha de realizarse además con pasos de elevado rendimiento, sobre todo si la secuencia es larga.
Otro punto muy importante a considerar es la conservación de la pureza enantiomérica de los aminoáci
dos, evitando, o cuando menos reduciendo al mínimo, su racemización.
3. SÍNTESIS QUÍMICA DE PÉPTIDOS
La necesaria activación del grupo carboxilo de un aminoácido, para convertirlo en un buen agente acilante, se
realiza reemplazando el grupo OH por un sustituyeme X atrayente de electrones, que aumenta la polarización
del grupo carbonilo y la electrofilia de su átomo de carbono, facilitando de esta forma el ataque nucleófilo del
grupo amino del aminoácido que debe ser acilado (Apartado 3.1). También es posible la formación del enlace
peptídico por reacción de dos aminoácidos, uno protegido en su grupo amino y otro en su grupo carboxílico, en
presencia de un reactivo de acoplamiento que activa la función carboxílica in situ (Apartado 3.2).
3.1. Síntesis con la activación previa del grupo carboxilo
Puede transformarse un aminoácido W-protegido con un grupo Y en el cloruro de ácido, por reacción con PCI5 o,
mejor, con SOCI,. En estas reacciones, sin embargo, es frecuente observar la formación de intermedios cíclicos de
naturaleza de dihidrooxazolonas (azalactonas), cuando el grupo Y es acilo. Además, si la formación del enlace pep
tídico se cataliza por bases, la naturaleza de éstas repercute en la mayor o menor racemización (Fig. 23.8).
R' = resto del acilo protector
Azalactona
Q racémica
------------- ► R — C-NH-CH-C-NH-R"
I
R
Dipéptído con aminoácido terminal racémico (W-protegido) y C-terminal protegido
Figura 23.8. Reacciones secundarias que se producen en la activación del grupo carboxilo de aminoácidos /V-protegidos
a cloruros de ácido.
Las azalactonas son buenos agentes achantes, pero es muy probable su racemización al ser el protón lábil.
Su pérdida origina un carbanión estabilizado, al que vuelve a adicionarse el protón por ambos lados del plano
del anillo, lo que determina su racemización. Si esto ocurre, cuando la azalactona participa posteriormente en la
formación de un enlace peptídico, se introduce el aminoácido racémico en el péptido. La naturaleza de la cade
na lateral de los aminoácidos tiene una influencia determinante en la racemización. Así, cadenas bencílicas.
como la de la fenilalanina, contribuyen a la estabilización del carbanión de azalactona y. por ello, los aminoáci
dos que los contienen se racemizan más fácilmente. Lo mismo sucede con las cadenas laterales ramificadas de
valina e isoleucina que, por ser donantes de electrones y producir impedimento estérico. dificultan la formación
del enlace peptídico y favorecen las reacciones secundarias, como la racemización.
Todos estos inconvenientes han limitado el uso de la activación del grupo carboxílico a través de los
cloruros de ácido. Otros carboxilos activados son las acilazidas, obtenidas a partir de cloruros de ácidos o és
teres (Fig. 23.9a), o directamente a partir de ácidos carboxílicos por tratamiento con difenilfosforilazida (Fi
gura 23.9b).
La formación del enlace peptídico por medio de anhídridos mixtos (Fig. 23.9c) se realiza a través de la re
acción entre el aminoácido N-protegido y un cloruro de ácido, como el cloroformiato de etilo, para evitar el po
sible ataque nucleófilo al carbonilo introducido (al ser este grupo menos electrófilo que el correspondiente al
aminoácido protegido).
R—CH—COCI + NaN, R—CH—CON,

I
NH NH
I I
GP GP
GP = grupo protector
HNO?
R—CH—CO,CH3 + H,N—NHj R—CH—CONH—NH, ----------
NH NH
GP
GP
NH
GP
NH NH
GP GP
Figura 23.9. Activación de grupos carboxilo como acil-azidas o anhídridos mixtos de aminoácidos /V-protegidos.
Los ésteres son poco reactivos, pero si se introduce en el carbono directamente enlazado al oxígeno, un gru
po fuertemente atrayente de electrones, como cloro, ciano, o- o p-nitrofenilo o el grupo enlazado es W-succinimida
o 1-benzotriazolilo (Fig. 23,10), los ésteres originados son muy reactivos porque poseen un buen grupo saliente y
son buenos agentes acilantes.
Figura 23.10. Activación de grupos carboxilo como ésteres.
Figura 23.11. a) Utilización de la diciclohexilcarbodiimida como reactivo de acoplamiento, b) Reacciones secundarias.

3.2. Síntesis con reactivos de acoplamiento
Es clásico el uso de carbodiimidas, en las que el átomo de carbono central puede sufrir el ataque nucleófilo de
un aminoácido protegido en su gmpo amino para dar un intermedio de O-acilisourea. que no es más que un car-
boxilo activado que puede reaccionar con otro aminoácido con el grupo carboxilo protegido, separándose NJV'-
dialquilurea. La más utilizada es la diciclohexilcarbodiimida (Fig. 23.1 la), aunque puede haber racemización y
formación de A'-acil-.V.W'-dicicIohexilurca inactiva (Fig. 23.1 Ib).
OH
Figura 23.12. Utilización de BOPcomo reactivo de acoplamiento en la activación del grupo carboxilo.
También se conocen reactivos de acoplamiento derivados del fósforo para la activación del grupo carbo
xilo, de los que el BOP (hexafluorofosfato de benzotriazolil-/V-oxi-tris-(dimetilamino)fosfonio, Fig. 23.12) es el
más representativo.
3.3. Grupos protectores de la función amino más utilizados en la síntesis de péptidos

3
/V-acetilación o A/-benzoilación no son aplicables en la síntesis de péptidos. ya que la desprotección del gru-
amino requiere unas condiciones de hidrólisis que afectarían a la integridad del enlace peptídico. En la terbu-
g.
0
o 11
CO10 (CH,),C—O—C—Cl CO,H ,¡,
R-CH Z ------------------------------------► R -C< B0C H
NH, N-protección NH C-O-C(CH.).

II
O______________
CH,
- -H
* ,CH -rX
desprotección qq H ® ’ XCH,
"*■ R-CH
XNH-C-C H + C(CHa)s
0 COOH
--------- ► R—OT
~XNH, + CO,
Figura 23.13. ^protección y desprotección con BOC.

SÍNTESIS DE PÉPT1D0S 705
toxicarbonilación, sin embargo, el grupo protector BOC es resistente a las condiciones usadas para eliminar
otros grupos protectores, como sodio en amoníaco líquido, hidrogenolisis y medios alcalinos, pero se elimina
fácilmente en medios ácidos o por termolisis para dar isobutileno y dióxido de carbono (Fig. 23.13).
El cloruro de ter-BOC tiene el inconveniente de su fácil descomposición (Fig. 23.14a), que impide su al
macenamiento. Por ello puede utilizarse un derivado menos reactivo, como la BOC-azida. que se prepara por
reacción del carbonato de fenilo y terbutilo con hidrazina, seguida de nitrosación (Fig. 23.14b). Más corrientes
son el denominado BOC-ON (2-terbutoxicarboniloximino-2-fenilacetonitrilo) y el dicarbonato de terbutilo, o
anhídrido terbutilcarbónico, que originan ter-BOC-aminoácidos con elevados rendimientos.
BOC-aminoácido
Figura 23.14. Protección del grupo amino de un aminoácido por terbutoxicarbonilación.
La benzoxicarbonilación consiste en la protección de grupos amino por acilación con cloruro de bcncilo-
xicarbonilo. preparado por reacción del alcohol bencílico con fosgeno. El grupo protector se abrevia como Cbz
(carbobenzoxi) o Z (Fig. 23.15). Esta protección es más resistente a los ácidos y bases que el ter-BOC. elimi
nándose por hidrogenación catalítica (hidrogenolisis) con platino o paladio. generalmente, en especial Pd/C.
Excepcionalmente, puede reemplazarse el hidrógeno gaseoso por agentes reductores, como la hidrazina o el áci
do fórmico, o el sodio en amoníaco líquido, pero en este último caso se produce la desmetilación de los restos
de metionina que puedan estar presentes. En condiciones ácidas. especialmente con ácido bromhídrico. se pro
duce la ruptura heterolítica del enlace C-O. para dar el catión bencilo, pero el bromuro de bencilo así generado,
además de ser lacrimógeno, puede alquilar otros restos de aminoácidos. Puede también efectuarse la desprotec
ción con otros ácidos, aunque generalmente se requieren temperaturas elevadas.
La ftaloilación con anhídrido ftálico en caliente puede afectar a los péptidos sensibles al calor y produ-
cir raccmizaciones. por lo que aquélla se realiza por transamidación. utilizando N-etoxicarbonilftalimida (Fi
gura 23.16). Su ruptura se produce con hidrazina en medios polares, o con fenilhidrazina en disolventes orgá
nicos.
Figura 23.15. Protección de grupos amino por benzoxicarbonilación.
Protección
+ NHj—CH-CO?
R
/V-etoxicarbonilftalimida Ó
NHj-NH-R NH,-CH-CO?
R'=H. Ph
R
Desprotección
| /V-ftaloilación |
Figura 23.16. Protección de grupos amino por ftaioilación.
La tosilación. o p-toluenosulfonación, se realiza con cloruro de tosilo. Este grupo resiste la hidrogenación
catalítica y la mayoría de las condiciones ácidas y básicas. Se elimina por disolución del aminoácido o péptido
tosilado en amoníaco líquido y posterior adición lenta de sodio (Fig. 23.17).
La formilación se realiza con ácido fórmico en anhídrido acético, no siendo sensible el grupo ÍV-formilo a
la hidrogenación catalítica ni al sodio en amoníaco líquido. Se elimina fácilmente con hidrazina o con clorhídri
co en metano! (Fig. 23.18).
+ HjN-CH-CO20 Protección
NH, liq. H2N-CH-CO?

SO2HN-CH-CO2H Ña *
R R
Desprotección
I jV-tosilación |
Figura 23.17. /V-Tosilación y desprotección.
O
h2n-ch-co? HCO;H/AC;O. h'^'nh-ch-co.h HCI/Me0H , H,N-CH-CO:H Cl®
¿ Protección r Desprotección r
,0
H-c'
'OCH,
Figura 23.18. /V-Formilación.
La tritilación (trifenilmetilación) de esteres de aminoácidos, practicada a través de una reacción SN1 con
cloruro de tritilo en disolventes orgánicos y en presencia de una base, da lugar a un grupo protector alquilo en
lugar de acilo como los anteriores. La protección del grupo amino como nucleófilo se basa, en este caso, en el
impedimento estérico de los tres grupos fenflicos. La hidrólisis del éster se realiza en medio alcalino o por hi-
drogenación catalítica (Fig. 23.19). La desprotección se efectúa con acético al 80 %, condiciones que no afectan
a otros grupos protectores como Cbz o BOC.
(C6H5)jC-CI + H2N-CH-CO2R' Et3N (C6H5)jC-NH-CH-CO2R'

Protección 0 ¿
R
H,O/OH
o
HVPd-C
O HOAc, 80 %
(C6Hs)3C + H2N-CH-CO2H (C6Hs),C-NH-CH-CO 2H
Desprotección
|h2O ¿ R
Aminoácido
A/-tritilado
(C6H5),C-OH
Figura 23.19. Protección de grupos amino de aminoácidos y péptidos por tritilación.
Otros métodos de JV-protección son la trifluoroacetilación, la o-nitrofenilsulfenilación (Nps) o la 9-fluore-

nilmetoxicarbonilación (Fmoc) (Fig. 23.20). Esta última se utiliza con mucha frecuencia en la síntesis en fase
sólida de péptidos (véase más adelante).
Figura 23.20. a) o-Nitrofenilsulfenilación. b) Fmoc.
Con sensibilidad a reactivos específicos, destacaremos cl grupo 2-trimetilsililetoxicarbonilo. que se elimi

na selectivamente con fluoruros de tetraalquilamonio (Fig. 23.21), o el o-nitrobencilo, que puede ser también
grupo protector de carboxilos, y que se elimina por radiación con luz de longitud de onda > 320 nm.
CH3
H,C—Si^CHÍ—CH,-4>Vo CH—CO2H Desprotección
H,N—CH—CO,H + (CH,)3SiF + H2C = CH2
CH^ f R I
R
Grupo protector
Figura 23.21. 2-Trimetilsililetoxicarbonilación.
3.4. Grupos protectores de la función carboxilo más utilizados en la síntesis de péptidos
El método más general es su transformación a ásteres metílicos o etílicos, por reacción del aminoácido con me-
tanol o etanol y cloruro de hidrógeno gaseoso; sin embargo, las condiciones alcalinas que se requieren para su
posterior desprotección limitan su uso, ya que pueden afectar a grupos de carboxamida del péptido (glutamina y
asparragina) y producir racemizaciones, que se inician por la abstracción de un protón. Los ásteres bencílicos,
obtenidos con alcohol bencílico en presencia de ácido o cloruro de tionilo, o por reacción de la sal de cesio del
aminoácido con bromuro de bencilo. son más convenientes, ya que se eliminan por hidrogenación catalítica.
Los ásteres terbutílicos se preparan por razones estéricas, a partir de isobutileno en vez de alcohol terbutílico, o
por transesterificación con acetato de terbutilo. Condicionan la desprotección en medio ácido. Los ásteres fení-
licos se eliminan fácilmente con peróxido de hidrógeno en medio alcalino, y los 2-trimetilsililetílicos. obtenidos
por reacción del 2-trimetilsililetanol con el aminoácido y DCC como agente deshidratante, por tratamiento con
fluoruros en condiciones neutras (Fig. 23.22).
a)
RCO?H + C6H5CH2OH > R—C
Preparación XO—CH2C6H5 + H,0
de ésteres
bencílicos
R—COjH + CH,—C6H5
b)
H+
R—CO,H + CH,—C=CH, ------- > RCO,—C(CH,),
Preparación I ~
de esteres CH,
terbutílicos
R—CO2H + (CH,),C—O—COCH, R—CO,C(CH,), + H,CCO,H
H+ I Desprotección
CH3
R—CO,H + CH,=C
CH3
HO2$
Desprotección de
ésteres fenílicos
O
f© © ii
(CH,),Si—CH2CH2—O—C—R ------------------------------- ► aO-C—R + (CH,),SiF + H,C=CH,
Desprotección de
trimetilsilil-etil-éstcres
R = residuo de aminoácido o péptido
Figura 23.22. Grupos protectores de la función carboxilo de aminoácidos utilizados en la síntesis de péptidos.
3.5. Grupos protectores de otras funciones
El hidroxilo secundario presente en la treonina. al ser menos nucleófilo y sufrir el impedimento estérico del me
tilo vecino, no compite con el grupo amino en la formación del enlace peptídico, por lo que no es estrictamente
necesario su bloqueo. Sin embargo, el hidroxilo de serina puede ser fácilmente acilado, al igual que el hidroxilo
fenólico de la tirosina si se encuentra en medio alcalino como fenóxido (más nucleófilo). Su protección se reali
za generalmente por bencilación, eliminándose el grupo bencilo por reducción catalítica o acidolisis. aunque es
te último método puede dar lugar a reacciones secundarias indeseables. El grupo terbutilo es otra alternativa en
la protección de hidroxilos de serina, treonina y tirosina.
Debido al pronunciado carácter nucleófilo del grupo sulfhidrilo, se hace necesaria su protección por S-
bencilación de la sal sódica con bromuro de bencilo (Fig. 23.23). Puede eliminarse el grupo bencilo, posterior
mente, por hidrogenación catalítica, ya que es muy resistente a los ácidos. Los S-tritil-derivados de cisteína se
rompen con iodo en metano!, originando los disulfuros péptidos de doble peso molecular, que pueden utilizarse
como tales rompiendo finalmente el enlace disulfuro por reducción con Na/NH,.
H/cat.
R—S" Na
* + Br—CH2—C6H5 R—S—CH2C6H, R—SH + H,C—C6H5
Desprotección
Protección por
R = resto de cisteína S-bencilación
NH
»2
S—C(C6H<), NH—CH—CO—|
H3COH
CH,
5-tritiI derivado I *
S
I + 2 (C6HS),C—OCH,
s
I
2 NH—CH—CO—| Na/NH, CH, + 2CH,I + H,0
NH—CH—CO-4
S'Na
*
Figura 23.23. Grupos protectores de SH.
La función amino extra de los aminoácidos omitina y lisina debe protegerse de forma diferente a la fun
ción amino en a, para que permanezca protegida en las condiciones en que se desprotege esta última para reali
zar el enlace peptídico. Una posible combinación es el uso del BOC. para los grupos amino de cadena lateral, y
del Cbz, para los grupos amino en a. Éstos se eliminan, como ya hemos dicho, por hidrogenación catalítica, pa
ra formar en su momento el enlace peptídico. mientras que el amino de la cadena lateral se desprotege, una vez
concluida la secuencia de síntesis del péptido, con ácido trifluoroacético. Si se usa el Cbz para proteger el ami
no lateral y el BOC para proteger el amino en a. como ambos grupos pueden romperse en condiciones ácidas
más o menos drásticas, se utilizan derivados de Cbz que contengan sustituyentes atrayentes de electrones, que
a) Grupos Cbz empleados para proteger el grupo amino de la cadena y hacerlo más resistente
a la ruptura por ácidos:
X = H;Y = NO2, CI
X=Y = C1
H,N—(CH2)
b) Quelación
2(H,N(CHj)0— CH-CO2H) + Cu(II)

NH2
n = 3; omitina
n = 4; lisina
(CH2)„- nh2
Figura 23.24. Protección de la función amino en a y en la cadena lateral.

SÍNTESIS DE PÉPTIDOS 71 1
desestabilizan al catión bencílico correspondiente, resultando grupos protectores estables en dichos medios áci
dos (Fig. 23.24a). En la quelación con iones metálicos, sólo está implicado el grupo amino en a (Fig. 23.24b).
Los grupos amino de la cadena lateral quedan libres para ser acilados, y la función amino en a puede desprote
gerse por tratamiento con sulfuro de hidrógeno.
La función tioéter de la metionina es prácticamente inerte en las condiciones en que se practica la síntesis
de péptidos, aunque puede sufrir alquilaciones con grupos bencilo o terbutilo procedentes de la ruptura ácida de
grupos protectores como Cbz y BOC.
Uno de los métodos para su protección es su conversión a sulfóxido con ácido peracético, agua oxigena
da. etc. La desprotección por reducción se realiza, por ejemplo, con ácido tioglicólico.
Otro método es el tratamiento con tosilato de metilo y la posterior desprotección por tiolisis con un tiol
(Fig. 23.25).
—NH-CH-CO —
CHj
l
ch2
©s-o®
CH,
—NH-CH-CO —
cn2
en,
s
CH3
Figura 23.25. Protección de grupos tioéter.
El resto guanidina de la cadena lateral de la arginina es una base muy fuerte, debido a que su forma proto
nada está estabilizada por resonancia.
En forma de sal. clorhidrato o picrato, es inerte a los agentes acilantes. Otro agente bloqueante es el grupo
nitro, que se introduce con ácido nítrico fumante y ácido sulfúrico.
Puede eliminarse por reducción con cinc en ácido acético o con ciertas sales de metales.
También puede crearse la función guanidina. a partir de restos de omitina, en la última fase de la secuen
cia de síntesis, por tratamiento del péptido con agentes guanilantes como el l-guanidino-3,5-dimetilpirazol
(Fig. 23.26).
La protección del grupo NH del imidazol presente en la histidina no puede practicarse por acilación, ya
que los N-acilimidazoles son muy reactivos.
Es útil, en cambio, la bencilación, previo tratamiento con sodio en amoníaco líquido.
La desprotección se efectúa por hidrogenación catalítica (Fig. 23.27a).
El grupo NH del indol presente en el triptófano se protege por formilación, y se elimina dicho grupo con
bases débiles.
También puede protegerse con Cbz y eliminarse con ácido trifluoroacético o hidrogenación catalítica
(Fig. 23.27b).
8NH-GP NH,
<¿H2)j Desprotección
(CH,)3
CO-CH-NH—| CO-CH-NH—|
CH,
I -guanidino-3.5-
dimctilpirazol
znh2
NH-c'
(CH,), NH
CO-CH-NH—|
Figura 23.26. Utilización de omitina 8-bloqueada en lugar de arginina en la síntesis del péptido.
3.6. Síntesis de péptidos en fase sólida
Fue desarrollada por R. B. Merrifield en 1963, y ha simplificado en gran medida la metodología de trabajo de la
síntesis de péptidos en solución, que es la que se ha comentado hasta ahora. Esta simplificación se basa en que
no es necesario obtener un producto puro y cristalino en cada paso de la secuencia de reacciones, sino que los
productos se purifican por una adecuada filtración y lavado.
La fase sólida está constituida por una matriz insoluble de poliestireno que se funcionaliza por clorometi-
lación (Fig. 23.28). Los restos de cloruro de bencilo así originados dan reacciones de desplazamiento SN2 con
grupos carboxilato de un aminoácido A-protegido con Fmoc. El grupo protector de la función amino se elimina
por tratamiento con piperidina, y el grupo amino libre puede reaccionar con otro aminoácido Fmoc protegido en
presencia de DCC como agente condensarte, para formar el enlace peptídico. Este proceso puede repetirse has
ta que se haya formado el péptido deseado. En cada secuencia, se filtra y lava para separar el producto unido al
polímero de los distintos reactivos y de los productos secundarios que hayan podido formarse. Al final, se sepa
ra el péptido de la resina por tratamiento con ácido trifluoroacético. También pueden usarse aminoácidos TV-Boc
protegidos.
Los principales inconvenientes que presenta este método, cuando se realizan secuencias sintéticas largas,
es que la fase sólida puede ofrecer un impedimento esférico para que se produzca el enlace peptídico con un de
terminado aminoácido y que la desprotección del grupo amino puede que no sea completa. En este caso, la ca
dena no desprotegida unida a la resina no puede ser acilada, obteniéndose, al final, ai menos dos péptidos dife
rentes. Por ello, a veces se sintetizan en fase sólida cadenas peptídicas pequeñas, que se hacen reaccionar entre
sí en solución para obtener el péptido deseado, una vez aisladas aquéllas de la resina. Es también necesaria la
pureza de los disolventes empleados, ya que. por ejemplo, la contaminación con formaldehído del cloruro de
metileno puede dar lugar a reacciones secundarias por bloqueo del grupo amino terminal y detención de la sín
tesis del péptido.
Como ejemplo, se representa, en la Figura 23.29, la síntesis en fase sólida de la dermorfina (heptapéptido
aislado de anfibios) utilizando, en este caso, aminoácidos A-Boc protegidos. Los grupos carboxilo se activan en
forma de ésteres de l-hidroxi-l,2,3-benzotriaz.ol (HOBT. Figs. 23.10 y 23.29) utilizando hexafluorofosfato de
I) Na/NH,
—NH—CH—CO—
2) C\H.CH,CI
Protección
QH.-HiC-N -N
Desprotección H;. cat.
QH-CH. +
b)
'oh
Protección
HO2C-CF3
o H2, cat.
Desprotección
O''C 'O-CHjCaH,
Figura 23.27. Protección de grupos NH de imidazol e indol.
O-benzotriazol-l-il-/VJV./V'7V'-ietrametiluronio (HBTU) en vez de BOP (Fig. 23.12) y diisopropiletilamina

(DIEA) en dimetilformamida (DMF).
En la actualidad, se dispone de los denominados sintetizadores de péptidos, aparatos capaces de reprodu
cir una determinada secuencia peptídica. Utilizan soportes polares de geles de poliamida, en lugar de los sopor
tes clásicos de poliestireno. La DMF (dimetilformamida) suele ser el disolvente más común en estas condicio
nes. Los aminoácidos se utilizan como fluorenilmetoxicarbonil-derivados (Fmoc), mucho más lábiles a la
hidrólisis básica que los BOC-derivados. El método de la poliamida permite utilizar un sistema de flujo conti
nuo, donde se monitoriza de manera automática la corriente eluida por espectroscopia ultravioleta-visible y con
un mecanismo de autocontrol por retroacción (feed-back) en cada ciclo de síntesis.
I) Pipcridina (Desprotección y ruptura del

2) FiC-CO2H enlace éster bencílico con el polímero)
HO2C-CH -NH -CO -CH -NH;

R R'
(Dipeptido; el proceso podría haberse
repetido en el paso anterior)
Figura 23.28. Síntesis de péptidos en fase sólida (método de Merrifield).
4. SÍNTESIS DE PÉPTIDOS POR MÉTODOS BIOLÓGICOS
Las enzimas catalizan tanto la ruptura como la formación de un enlace peptídico. Por ello, el descubrimiento,
por Sealock y Lakowsky en 1969 de que el equilibrio hidrólisis/síntesis puede manipularse por el efecto de
los disolventes orgánicos miscibles con el agua, determinó un avance muy notable en la utilización de aqué
llas para sintetizar péptidos (el equilibrio se desplaza hacia la síntesis en presencia de dimetilformamida, por
ejemplo).
T^r - D - Ala - Phe - Gly-iyr - Pro -Ser-NH2 Boc - Tyr - D - Ala - Phe - Gly-Tyr - Pro - Ser
OBn OBn OBn
Dermorfina
Figura 23.29. Síntesis en fase sólida de dermorfina.
La formación del enlace peptídico puede ser catalizada de forma específica por una amplia variedad de
enzimas proteolíticas, manipulando las condiciones para inducir un desplazamiento del proceso de equilibrio
hidrólisis-síntesis, hacia la formación del enlace peptídico. Hay dos estrategias para conseguirlo. La primera es
la denominada síntesis termodinámicamente controlada, en la que el ácido carboxílico reacciona directamente
con la amina, lo que se puede lograr con el empleo de grupos protectores que aseguren la precipitación del pép-
tido una vez formado, desplazando de este modo el equilibrio hacia la derecha [ 1 ].
R'-COOH + H2N-R2 _. R'-CONHR2 + H2O
La segunda estrategia se basa en la denominada síntesis cinéticamente controlada, en la que el ácido car
boxílico se emplea como éster activado y el componente amino como competidor nucleófilo frente al agua [2].
R'CO-X + H-Enz --------►
Las condiciones suaves del proceso de reacción, así como la ausencia de racemizaciones y de protec
ciones de la cadena lateral, son las principales ventajas de la síntesis enzimática frente a la síntesis química.
Asimismo, la posibilidad de la utilización de enzimas inmovilizadas que permiten la recuperación del catali
zador y su aplicación a escala industrial, hacen prever un futuro en expansión para estos procedimientos. Su
utilización en la transformación industrial de la insulina de cerdo en insulina humana (Fig. 23.30) tuvo gran
.Cadena A
Gly — Asn Gly
S S Carboxipcptidasa
S S
Phc ----- L Lys-r-Ala
Insulina aislada Desalanil-insulina de cerdo
Cadena B de páncreas de cerdo
HO2C—CH—NH-
CH—O—C(CH3)3
ch3
+ tripsina (catálisis
enzimática)
Lys—Thr Lys-Thr-O'Bu
| Insulina humana [
Figura 23.30. Transformación enzimática de la insulina de cerdo en insulina humana.

SINTESIS DE PÉPTIDOS 717
repercusión en terapéutica. En ella, la ruptura del resto C-terminal de alanina de la cadena B por la enzima
carboxipeptidasa. origina la desalanil-insulina de cerdo. Seguidamente se introduce I.-treonina. en forma de
éter terbutílico, por medio de la tripsina. Se elimina posteriormente el terbutilo por acidolisis y se purifica la
insulina humana por cromatografía.
El edulcorante aspartamo, por citar un ejemplo, se produce industrialmentc utilizando termolisina como
catalizador para formar el enlace entre Cbz-aspártico y cl éster metílico de la fenilalanina (Fig. 23.31).
O
I) termolisina II
Cbz-NH-CH-CO.H + H,N-CH-CO,Me H2N-CH-C-NH-CH-CO2Mc
I I 2) H2. C-Pd
ch2 ch2 ch2 ch2
I I
co2h Ph CO2H Ph
Aspartamo
Figura 23.31. Obtención industrial de aspartamo.
La ingeniería genética es otra herramienta de trabajo que puede resolver muchos problemas en un futuro
próximo. Así, recombinantes de E. coli son capaces de producir las cadenas A y B de la insulina humana. Tras
su aislamiento, se forman los puentes disulfuro de forma selectiva, y se obtiene insulina humana apta para su
aplicación terapéutica tras una simple cromatografía, sin que intervenga ningún material pancreático proceden
te de animales.
a) Unión de fragmentos:
Asp-Arg-Val-Tyr-Ilc-His-Pro-Phe
Angiotensina
4
Asp-Arg-Val-T^r + lle-His-Pro-Phe
a a
Ile-His + Pro-Phe
Asp-Arg + Val-Tyr
a „ a „ a „ a
| Asp + Arg] | Val + Tyr] |lle + His[|Pro + Phe|
b) Construcción a partir del aminoácido C-terminal:

Angiotensina => Asp + Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe
K
Arg + Val-Tyr-lle-His-Pro-Phe
a
a,—
Pro J Phc i
c) Construcción a partir del aminoácido N-teminal:

Angiotensina => Asp-Arg-Val-Ttyr-Ile-His-Pro + Phe
a
Asp-Arg-Val-Tyr-lle-His + Pro
a
।i—
Asp J
14-Arg
Figura 23.32. Estrategias para ia síntesis de angiotensina.

5. ESTRATEGIAS UTILIZABLES EN EL DISEÑO DE UNA SÍNTESIS

DE PÉPTIDOS. EJEMPLOS
Cada péptido requiere un planteamiento acerca de cuál sería la mejor estrategia para su síntesis. El análisis re-
trosintético del octapéptido angiotensina, un potente hipertensor, permite tres estrategias sintéticas: unión de los
fragmentos del péptido. a partir del aminoácido C-terminal o del N-terminal (Fig. 23.32). La primera permite re
solver los problemas de la síntesis de cada fragmento por separado y, si se realiza por varios equipos de trabajo,
puede ser más rápida su ejecución, siendo el método más utilizado.
Para la síntesis de un péptido cíclico se requiere la participación de dos grupos reactivos en la misma ca
dena pcptídica a través de una reacción intramolecular.
A fin de evitar las posibles reacciones intermoleculares, que conducirían a su dimcrización o polimeriza
ción y no a su ciclación. suele aplicarse el principio de máxima dilución, utilizando concentraciones menores de
10' M (los procesos bimoleculares se reducen y apenas se afectan los unimoleculares).
Para la ciclación en los péptidos homodéticos (péptidos cíclicos con la participación exclusiva de enlaces
peptídicos). suelen elegirse como aminoácidos C-terminales, siempre que sea posible, la glicina o la prolina, y a
evitarse la alanina o la leucina, dada la mayor tendencia a la racemización que presentan estos últimos.
La síntesis de péptidos heterodéticos. que contienen en su ciclo, además de enlaces peptídicos. uniones de
tipo éster (lactona), tioéter o disulfuro, entre otras, requiere aplicar la metodología adecuada para ellas.
Enalapril
Figura 23.33. Síntesis de enalapril.

Esta idea es aplicable a la síntesis de peptidomiméticos en las que uno o más enlaces peptídicos se han
sustituido por otros grupos (véase el Capítulo 4).
Como ejemplo de síntesis de un péptido en solución, comentaremos la obtención del fármaco antihiper-
tensivo enalapril, que se realiza por condensación directa de la (V-terbutoxicarbonilalanina y el éster bencílico
de la prolina, en presencia de DCC.
El tratamiento sucesivo del dipéptido protegido con ácido trifluoroacético y ácido bromhídrico desprote
ge el grupo amino de la alanina y el carboxilo de la prolina.
Posteriormente, el grupo amino libre reacciona con 2-oxo-4-fenilbutanoato de etilo, en un proceso de
aminación reductora (condensación a imina y reducción de ésta) (Fig. 23.33).
Los principales problemas que pueden aparecer cuando se realiza una síntesis en fase sólida son conse
cuencia de: a) un acoplamiento incompleto; b) pérdidas de las protecciones de cadena lateral; c) ruptura de la
unión de la cadena con la resina, y d) reacciones secundarias determinadas por el ácido fluorhídrico. Sin embar
go, la síntesis de Merrifield sigue siendo la estrategia sintética de elección para grandes péptidos.
Como ejemplo de síntesis de péptidos por esta técnica en fase sólida, comentaremos la obtención del
tetrapéptido Leu-Ala-Gly-Val (Fig. 23.34).
La secuencia sintética se inicia con la reacción entre la W-tcrbutoxicarbonilvalina y la resina funciona-
lizada (soporte sólido), en presencia de trietilamina como base para fijar el ácido clorhídrico formado.
La (V-desprotección posterior del aminoácido unido a la resina por tratamiento ácido, y lavado con trie
tilamina para eliminar los restos de ácido, deja libre el grupo amino para reaccionar en presencia de DCC.
con W-terbutoxicarbonilglicina.
El grupo amino libre de glicil-valil-resina reacciona ahora con W-terbutoxicarbonilalanina en presencia
de DCC, repitiéndose el proceso de desprotección del grupo amino terminal y su posterior reacción con N-
terbutoxicarbonilleucina y DCC.
BOC-Gly. DCC
CH2-O-CO-CH-NH2 ----------------------- » CH,— O-CO-CH-NH-CO-CH,
BOCZ
I)
2) NEtj BOC-Ala. DCC ¡) r
CH:—O-CO-CH—NH—CO—CH-NH-CO
2) NEt,
CH
HiC ’
5 NH2
BOC —Leu, DCC r HBr/FACCO2H
Figura 23.34. Síntesis en fase sólida del péptido Leu-Ala-Gly-Val.

'Bu
H -Ser -Ser-Cys - Phe-Gly - Gly - Arg - He-Asp -Arg - lie - Gly - Ala -Gln - Ser -Giy- Leu -Gly-Cys
Atriopeptina III
Figura 23.35. Síntesis de atriopeptina III por modificación del método de Merrifield.
El tetrapéptido unido covalentemente a la resina y protegido en su grupo amino terminal se libera como
hidrobromuro, por tratamiento con los ácidos bromhídrico y trifluoroacético. Su neutralización se realiza por
cromatografía utilizando una resina de intercambio iónico.
Por último, comentaremos la síntesis de atriopeptina III (Fig. 23.35), un péptido cíclico con actividad diu-
rética-antihipertensiva.
En ella, se utiliza una resina de poliacrilamida en lugar del soporte clásico de poliestireno que, al ser apo
lar, hace a veces imposible conseguir la polaridad necesaria en el medio de reacción.
Además se utiliza como grupo protector, el 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc).
El aminoácido inicial que se une al soporte polimérico es la O-terbutil-Fmoc-tirosina, repitiéndose hasta
23 secuencias de desprotección del grupo Fmoc, por tratamiento con una solución al 20 % de piperidina en
DMF, seguido de la formación de un nuevo enlace peptídico por reacción del grupo amino libre terminal con el
grupo carboxilo del nuevo aminoácido, que se incorpora como éster preactivado con 1-hidroxibenzotriazol y
protegido con Fmoc.
En la Figura 23.35, se indica la estructura de otros grupos protectores utilizados en este ejemplo y la me
todología para la desprotección final (20 % piperidina/DMF, seguido de TFA/fenoI/HS-CHy-CHj-SH), forma
ción del enlace disulfuro por oxidación de los dos grupos mercapio de los residuos de cisteína (Ij/AcOH/HyO) y
purificación final del péptido cíclico por cromatografía de alta resolución.
En los últimos años, dado que la síntesis de péptidos en fase sólida fue el comienzo de las estrategias de
síntesis combinatoria (véase el Capítulo 2), las técnicas que utilizan soportes sólidos se han desarrollado enor
memente para la síntesis de otras estructuras, ya que son muy adecuadas para aplicarlas de forma combinatoria.
Existen numerosos textos a los que se puede remitir el lector.
BIBLIOGRAFÍA
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de revistas publicadas desde 1970, periodicidad anual.
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Uso de productos naturales. Obtención
de fármacos por semisíntesis (I).
Síntesis de antibióticos
[3-lactámicos y otros
M. SOllhuber
1. INTRODUCCIÓN
Los constantes avances que se realizan en diferentes frentes de la química orgánica permiten la síntesis de mo
léculas cada vez más complejas.
Sin embargo, debido a que en ciertos casos se requiere un número de pasos elevado para controlar la re-
gioselectividad y la estereoselectividad, la síntesis de muchos análogos de productos naturales, cuya actividad
biológica hace aconsejable su desarrollo como posibles fármacos, es muy costosa.
Por ello, es recomendable, a nivel industrial, utilizar sustancias naturales que contengan parte de la es
tructura de aquellos como materias primas, especialmente si éstas son fáciles de conseguir a un precio asequi
ble. Dichas materias se obtienen fundamentalmente de microorganismos, a través de procesos de fermentación
o por métodos biotecnológicos. entre ellos la ingeniería genética. También se obtienen a partir de organismos
vegetales y animales.
Son pocos los productos naturales que se emplean directamente en terapéutica, encontrándose entre éstos
ciertos antibióticos (tetraciclina), alcaloides (reserpina y morfina), enzimas (hialuronidasa y fibrinógeno) y hor
monas (glucagón e insulina).
La mayor parte se transforman químicamente a través de procesos de derivación o de semisíntesis.
Los procesos de derivación suponen variaciones de ciertos agrupamientos funcionales manteniendo el es
queleto del compuesto natural. Pueden mencionarse, como ejemplos, la síntesis de bromocriptina. por broma-
ción de la ergocriptina, o la de codeína, por 0-metilación de la morfina.
En los procesos de semisíntesis, las variaciones suelen ser más profundas, como ocurre por ejemplo en la
obtención de progesterona a partir de diosgenina (Fig. 24.1).
2. SÍNTESIS DE ANTIBIÓTICOS p-LACTÁMICOS
Las penicilinas de uso terapéutico se preparan fundamentalmente utilizando como materia prima el ácido 6-
aminopenicilánico (6-APA). Éste contiene tres centros estereogénicos (35, 5/? y 6/?). lo que justifica su apli
cación como materia prima de la que se derivan las penicilinas por reacciones de /V-acilación (Fig. 24.2).
a) Variación de agolpamientos:
Figura 24.1. Ejemplos de variación de agrupamientos funcionales en productos naturales (a, b) y de semisíntesis (c).
H H
7-ACA
Acilación Acilación
Penicilinas
Cefalosporinas
Figura 24.2. Uso de 6-APA y 7-ACA como materias primas en la semisíntesis de penicilinas y cefalosporinas.
USO DE PRODUCTOS NATURALES. OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS III 725
Se obtiene, a partir de penicilinas naturales, por hidrólisis enzimática selectiva de la función amida,
respetando el anillo 0-lactámico.
Algunas penicilinas se obtienen directamente por fermentación, adicionando al caldo de cultivo un ex
ceso del ácido adecuado, y ciertos antibióticos [3-lactámicos más sencillos se obtienen por síntesis total.
Por otra parte, el ácido 7-aminocefalosporánico (7-ACA), que contiene los centros estereogénicos 6R y
IR de las cefalosporinas. resulta de la hidrólisis de la cefalosporina C (natural).
Todavía no se ha encontrado un sistema enzimático que permita dicha hidrólisis, por lo que se obtiene por
medios químicos, como se verá más adelante.
En el Capítulo 10, hemos visto que el anillo P-lactámico de las penicilinas es sensible a los ácidos, y que
se hidroliza en medio básico en un proceso análogo al producido por las p-lactamasas. I.a ruptura del anillo
P-lactámico de las cefalosporinas por nucleófilos es algo más compleja que en las penicilinas, ya que supone la
reestructuración del anillo de dihidrotiazina con salida del anión acetato, según se refleja en la Figura 24.3.
H H H H
Ñu
Figura 24.3. Transformación de las cefalosporinas en presencia de nucleófilos.
El sustituyeme acetoximetilo en la posición C-3 de las cefalosporinas se metaboliza fácilmente en el orga

nismo, por la acción de las esterasas. para dar un hidroxiderivado con menor actividad antibacteriana que. a su
vez, origina una lactona prácticamente inactiva (Fig. 24.4).
Figura 24.4. Inactivación de las cefalosporinas catalizadas por esterasas.
La reactividad química de esta cadena lateral permite su manipulación para obtener análogos estables a
las esterasas. Los más comunes se obtienen por reducción catalítica, para dar metilderivados. o por sustitu
ción nucleófila con mercaptidas o aniones azida. En este último caso, la reducción de las azidas origina ami
nas. que son susceptibles de nuevas reacciones de derivación. Las reacciones de sustitución mencionadas
suelen transcurrir por mecanismos SN1, debido a que el catión intermedio puede estabilizarse por resonancia
(Fig. 24.5).
El doble enlace en C-3 puede isomerizarse en medio básico, para dar derivados insaturados en C-2 que
carecen de actividad antibacteriana (Fig. 24.6). Esta reacción debe tenerse muy en cuenta en los procesos de se-
misíntcsis de cefalosporinas. ya que las reacciones de acilación del agolpamiento amino en posición 7 del
7-ACA requieren con frecuencia la presencia de una amina terciaria. Afortunadamente, existe la posibilidad de
transformar estos derivados inactivos en sus isómeros activos, a través de su oxidación con perácidos a sulfóxi-
dos (con desplazamiento simultáneo del doble enlace a la posición C-3) y reducción posterior por tratamiento
con tribromuro de fósforo.
H H
CO2H CO2H
Figura 24.5. Manipulaciones de la cadena en C-3 de las cefalosporinas para aumentar su semivida.
co2h
Inactivo
Figura 24.6. Isomerización del doble enlace en las cefalosporinas.
2.1. Obtención industrial de 6-APA y 7-ACA
Una vez comentadas las precauciones que deben tenerse en cuenta en la manipulación de estos antibióticos, nos
referiremos con más detalle a la obtención industrial de los ácidos 6-aminopeniciiánico y 7-aminocefalosporá-
USO DE PRODUCTOS NATURALES. OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS (I) 727
nico. El primero se obtuvo hacia I960 por hidrólisis quimioselectiva del resto acilamino de penicilina G o
bencilpenicilina (una penicilina natural obtenida por fermentación) catalizada por penicilamidasas. Estas enzi
mas son diferentes a las 0-lactamasas (que catalizan la hidrólisis del anillo 0-lactámico). Éste sigue siendo el
método utilizado actualmente, pero para hacerlo más rentable, las enzimas se manejan inmovilizadas en vez. de
en solución.
Ya se ha comentado que la hidrólisis enzimática no ha podido aplicarse a la cefalosporina C (debido a
la naturaleza del resto acilo de ésta), practicándose la hidrólisis química selectiva a escala industrial por di
versos métodos (algunos también podrían aplicarse a las penicilinas). Uno de ellos emplea cloruro de nitrosi-
lo, para diazotar el agrupamiento amino libre de la cadena lateral a-aminoadipoilo (Fig. 24.7).
La sustitución del catión diazonio así formado por la forma enólica del grupo amida de la cadena late
ral origina un iminoéter cíclico (más lábil que el anillo 0-lactámico), que se hidroliza fácilmente con ácidos
diluidos, para dar 7-ACA.
Minoéter cíclico
Figura 24.7. Obtención de 7-ACA a partir de cefalosporina C por reacción con cloruro de nitrosilo.
Otra estrategia para lograr la hidrólisis quimioselectiva tiene una aplicación más general y produce mayo
res rendimientos.
En este caso (Fig. 24.8), las funciones carboxílicas se protegen por trimetilsililación (empleando hexame-
tiIdisilazida. por ejemplo). Por acción posterior del pentacloruro de fósforo, se consigue la transformación de la
función amida a un iminocloruro, que se transforma en iminoéter en presencia de alcoholes primarios. Esta
reacción supone la desprotección simultánea del grupo ácido.
Finalmente, se realiza la hidrólisis ácida en condiciones suaves de este iminoéter. como en el caso
del 7-ACA.
La producción de cefalosporina C es más costosa que la de penicilinas, lo que ha motivado el desarrollo
de una serie de métodos industriales que permiten obtener derivados de 7-ACA a partir de penicilinas.
En su mayor parte, se basan en la transformación que experimentan los sulfóxidos de las penicilinas, ob
tenidos por la acción de perácidos como el m-cloroperbenzoico (AMCPB), en presencia de cantidades catalíti
cas de ácidos (como cl ácido p-toluenosulfónico). Esta transformación es una trasposición de Pummerer modifi
cada (llamada trasposición de Morin), que comienza con la protonación del sulfóxido y continúa con la apertura
(CHi)3Si-NH-Si(CH,)3
medio anhidro
COOH
Penicilina G
Figura 24.8. Hidrólisis quimioselcctiva de penicilinas para la obtención de 6-APA (aplicable a 7-ACA si se parte
de cefalosporinas).
del anillo de tiazolidina (o formación de un tercer ciclo) y pérdida de agua, seguida de una reorganización que
supone la expansión a un anillo de dihidrotiazina (Fig. 24.9).
O
p-Tos OH
(calor)
Penicilina
Sulfóxido de
penicilina
Figura 24.9. Transformación de penicilinas en cefalosporinas.

2.2. Empleo de agolpamientos protectores y activantes en la semisíntesis

de antibióticos (3-lactámicos
La acilación del grupo amino libre de 6-APA o 7-ACA (ambos con estmctura de aminoácidos) implica el em
pleo de grupos protectores del grupo carboxilo, así como la activación del resto acilo a introducir, de forma bas
tante semejante a la que hemos visto para la síntesis de péptidos (véase el Capítulo 23). Sin embargo, los agol
pamientos protectores son aquí más restringidos, ya que. dada la inestabilidad del anillo p-Iactámico y de
algunos agolpamientos en las cefalosporinas, sólo pueden utilizarse los que pueden eliminarse por reducción
química o en condiciones ácidas muy suaves.
2.2.1. Métodos de protección del grupo carboxilo en C-3 o C-4 de 6-APA o 7-ACA
En la Figura 24.10, se indica uno de los agolpamientos protectores más comunes de la función carboxílica en C-
3 ó C-4 de 6-APA o 7-ACA, el método de sililación. ya que la desprotección puede realizarse de forma quimio-
selectiva por el tratamiento con aniones fluoruro.
,0 ® o ZO
CH.Ch, 30 "C, 2 h Bu4N F
(CH,),SiCl R-c' R-CZ + FSiMe3
piridina Desprotección XO A
OSiMe, ° ®
N Bu4
a) Sustituible por:
H3C«c'
XNSi(CHj)?
och3
H,C-CH=C
OSí(CHj)3
(H,C)3Si-NH-Si(CH3),
hexameíildisilazano
Figura 24.10. Protección de la función carboxílica por sililación.
También pueden transformarse en ésteres de difenilmetilo. fácilmente hidrolizables con ácido trifluoroa-
cético (TFA) debido a la estabilidad del catión difenilmetilo (Fig. 24.11).
Acetona TFA
Desprotección
n2
Figura 24.11. Protección de la función carboxílica por transformación en ésteres de difenilmetilo.
Por otro lado, pueden protegerse como ésteres de p-nitrobencilo, ya que éstos se desprotegen fácilmente
con sulfuro sódico (Fig. 24.12). Esta desprotección tiene lugar por sustitución nucleófila sobre el metí leño ben
cílico activado por el sustituyeme nitro (atrayente de electrones) en la posición para.
,0
R-c' *
OH
Figura 24.12. Protección de la función carboxílica por transformación en esteres de p-nitrobencilo.
Otros ésteres que pueden utilizarse para proteger este grupo carboxílico son: los ésteres terbutílicos, que
se hidrolizan en condiciones ácidas suaves por la estabilidad del catión terbutilo (Fig. 24.13a); los ésteres de
2,2,2-tricloroetiIo (TCE). que se desprotegen en condiciones reductoras según se indica en la Figura 24.13b; o
los ésteres de metoximetilo (MOM), que no requieren catálisis acida para su desprotección, siempre que esté
presente un nucleófilo como bromuro, cloruro o ioduro (Fig. 24.13c).
O
H2SO4 CH FjCCOiH, CH2CI2
R—C \ I 3 25 °C. Ih
Protección XOH
O—C—CH3 Desprotección
Catión terbutilo
CH,
.0
DCC/piridina Zn/AcOH. O °C, 2,5h
Protección Desprotección R tO—CH
TCE
CI
H2C=C
CI
Figura 24.13. Protección de la función carboxílica por transformación en ésteres de terbutilo (a), tricloroetilo
(b) o metoximetilo (c).
2.2.2. Activación de la función carboxílica en los reactivos acilantes
Para la acilación del grupo amino de 6-APA o 7-ACA, pueden utilizarse haluros de ácido, azidas, anhídridos
mixtos o ésteres activados, o puede activarse in situ el grupo carboxilo utilizando carbodiimidas. Los haluros de
ácido suelen obtenerse por tratamiento de los ácidos con cloruro de tionilo, las azidas por tratamiento de los és
teres con hidrazina seguida de reacción con ácido nitroso, y los anhídridos mixtos por reacción de un cloruro de
ácido (con frecuencia, clorofonniato de alquilo) con una sal de otro ácido (Fig. 24.14).
Figura 24.14. Derivados activados de ácidos carboxílicos para la /V-acilación de 6-APA o 7-APA.
También pueden utilizarse ésteres activados, como los de />-nitrofenilo, en los que la gran estabilidad por
resonancia del anión fenóxido (y, por tanto, su carácter de buen saliente) les convierte en buenos reactivos aci-
lantes (Fig. 24.15). Por la misma razón, pueden usarse ésteres de W-hidroxisuccinimida, W-hidroxibenzotriazol
o derivados de iV-mctilpiridinio, dada la estabilidad de los grupos salientes en los dos primeros casos y a la for
mación de l-metil-2-piridona en el tercero.
?O
R-c' +
OH
O
R-C-Nu
O
____ > n
R-C-Nu
H,C OH,
Figura 24.15. Ésteres activados de ácidos carboxílicos para la /V-acilación de 6-APA o 7-APA.
Finalmente, puede realizarse la activación del ácido en presencia de diciclohexilcarbodiimida (DCC), de

forma análoga a como se ha visto en la síntesis de péptidos (Fig. 24.16).
R' = ciclohexilo
Figura 24.16. Uso de DCC en la acilación de 6-APA o 7-ACA.
2.2.3. Protección de otros grupos funcionales
En determinados casos, se requiere la protección de ciertos agolpamientos del reactivo acilante. de formar aná
loga a lo que ocurre en la síntesis de péptidos.
Destaca en este sentido la función amino de la cadena lateral de la ampicilina y la amoxicilina. Ésta pue
de protegerse, como en el caso de los péptidos. mediante grupos BOC (terbutiloxicarbonilo) o Cbz (benciloxi-
carbonilo). pero también suele usarse el método de Dane.
En éste, la condensación del grupo amino con un reactivo P-dicarbonílico forma una imina (base de
Schiff), que se tautomeriza a una enamina estabilizada por enlace de hidrógeno intramolecular, la cual puede
desprotegerse en condiciones ácidas suaves.
(Método de Dane)
Amoxicilina
Figura 24.17. Semisíntesis de amoxicilina.

2.3. Ejemplos de rutas semisintéticas para obtener penicilinas y cefalosporinas
Las dos penicilinas de mayor aplicación terapéutica a nivel mundial (con una producción anual de toneladas)
son la ampicilina y la amoxicilina.
Su síntesis puede abordarse por varias rutas, siendo una de ellas la descrita en la Figura 24.17, para la
amoxicilina.
Comienza con la trimetilsililación de los grupos carboxilo y amino de 6-APA, lo que supone la protección
del primero (véase el Apartado 2.2.1) y la activación del grupo amino como nucleófilo.
Tras la reacción de acilación con el anhídrido mixto correspondiente (en el que el grupo amino está prote
gido por reacción con acetilacetato de etilo), se procede a la desprotección de la amina y del ácido carboxílico
en C-3 con ácido, en condiciones que no afectan al anillo p-lactámico.
Se ha utilizado una alternativa a dicho método para la ampicilina. Se diferencia en el agente acilante, que
en este caso es el hidrocloruro del cloruro de ácido derivado de la fenilglicina (Fig. 24.18).
H H H
Ampicilina
Figura 24.18. Síntesis de ampicilina.
El método de Dane para proteger el grupo amino de la cadena lateral se utiliza también en la síntesis de
profármacos de la ampicilina (como la pivampicilina). y en la de algunas cefalosporinas que contienen fenilgli
cina o p-hidroxifenilglicina como restos acilo en el grupo amino de la posición C-7.
I) CICH;OCOC(CH,),
VH2h * h
(desprotección del grupo amino) A
o-ôo
Ac,ch,
H3C CHj
Pivampicilina
Figura 24.19. Síntesis de pivampicilina (aplicable a la cefalexina y el cefadroxilo. partiendo de 7-ACA).
La acilación del agolpamiento amino libre de estos antibióticos ha dado lugar a derivados, como la azlo-
cilina. la mezlocilina y la pipcracilina. que poseen actividad frente a Pseudomonas aeruginosa. Su síntesis se
realiza a partir del clorocarbamato correspondiente, que reacciona con dicho grupo amino en presencia de trie-
tilamina (véase la síntesis de mezlocilina en la Fig. 24.20).
H,C-SO2-N
A
N-C
P
,EtjN
Ampicilina \t Cl
O
u
R = —CO—N NH Azlocilina
Mczlocilina
R= —CO—N N—El Pipcracilina
o o
Figura 24.20. Síntesis de mezlocilina y análogos.
Penicilina G (bencilpenicilina)
TCE
1) PCIs/piridina
,CH, Ac,O. DMF. 120X7 2) CH,OH
"CH, (Transposición CH,3’ H=°
"COOCH - CCI3 dc Morin)
COOCHjCCI (Hidrólisis
selectiva)
Su I fox ido
Activado
Protegido
2) Zn. HCOOH 90 %
COOCH.CCI, COOH
Cefalcxina
Figura 24.21. Síntesis de cefalexina.

USO DE PRODUCTOS NATURALES. OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEM1SÍNTESIS (I) 735
En la Figura 24.21, se esquematiza la síntesis de cefalexina a partir de bencilpenicilina (penicilina G). Co
mienza con la protección, como áster de tricloroetilo (TCE), del carboxilo en C-3. seguido de oxidación al co
rrespondiente sulfóxido con perácidos y la transposición de Morin (en este caso, catalizada con anhídrido acéti
co como electrófilo, en lugar de con protones, como se vio en la Figura 24.9).
La hidrólisis quimioselectiva del grupo acilamino, origina un análogo de 7-ACA carente de la cadena
conflictiva en C-3 y con el grupo carboxilo en C-4 protegido.
La A-acilación de éste con un anhídrido mixto de fenilglicina, cuyo grupo amino está protegido en for
ma de tricloroetoxicarbonil derivado (Troc). seguido de la eliminación de ambos grupos protectores, da cefa
lexina.
Otro ejemplo de síntesis de cefalosporinas lo encontramos en el nafato de cefamandol, un profármaco de
cefamandol que se aplica por vía parenteral y que posee buena actividad frente a bacterias Gram-negativas.
Los dos reactivos necesarios, 5-mercapto-l-metil-l//-tetrazol y cloruro de 2-formiloxi-2-fenilacetilo. se
obtienen por separado.
Para obtener el primero, se parte de isotiocianato de metilo y azida sódica en etanol; para el segundo, se
parte de ácido mandélico, por formilación con ácido fórmico en anhídrido acético, seguido de tratamiento con
cloruro de tionilo.
La reacción entre ambos se realiza por las rutas convencionales comentadas anteriormente (Fig. 24.22).
Nafato de cefamandol
Figura 24.22. Síntesis de nafato de cefamandol.
2.4. Ejemplos de semisíntesis de antibióticos p-lactámicos que no poseen

una función amida en la cadena lateral
La primera penicilina de este tipo que se comercializó fue el mecilinam, muy activo frente a bacterias Gram-
negativas. Su síntesis también se realiza a partir de 6-APA convenientemente protegido, por condensación
con el dietilaceial de /V-formilperhidroazepina, que se obtiene por transformación del formil derivado en imi-
noéter, utilizando tetrafluoroborato de trietiloxonio (sal de Meerwein), y posterior adición de etóxido sódico
(Fig. 24.23).
Et,OeBF4e H,C—CH,ONa
,CH.
"CH,
"COOSitCH,),
Mccilinam
Figura 24.23. Síntesis de mecilinamo.
Figura 24.24. Síntesis de cefoxitina a partir de cefamicina C.

USO DE PRODUCTOS NATURALES. OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS 111 737
2.5. Semisíntesis de cefamicinas
El impedimento estérico del agolpamiento metoxilo en la posición 7a confiere a estos antibióticos gran estabi
lidad frente a las p-lactamasas. El representante natural de este grupo es la cefamicina C. que ha servido de ma
terial de partida para la síntesis de cefoxitina (Fig. 24.24). En la cefamicina C no es posible realizar la desaci-
lación de la cadena lateral por los métodos usuales descritos hasta ahora, siendo necesario realizar en este caso
una reacción de transacilación. Para ello, se protege inicialmente el agolpamiento amino libre de la cadena late
ral como Troc-derivado (tricloroetoxicarbonil) y los dos grupos carboxilo como ásteres de difenilmetilo. Reali
zada la /V-acilación del grupo amido en C-7 con cloruro de 2-(2-tienil)acetilo, la desprotección reductora del
grupo tricloroetiloxicarbonilo (para liberar el grupo amino) favorece la eliminación de la cadena aminodicarbo-
xílica inicial, para formar un derivado de piperidona. La desprotección final con ácido trifluoroacético (TFA)
del grupo éster en C-4. da cefoxitina.
Existen otras rutas de síntesis de 7a-metoxi derivados de 7-ACA. como la que se indica en la Figura
24.25. Se parte aquí de 7-ACA protegido como éster difenilmetílico. el cual se convierte en una base de Schiff
que, por oxidación con óxido de plomo, se transforma en una quinonimina. La adición de metanol al grupo imi
no de este compuesto es estereoselectiva. produciéndose por la cara inferior (menos impedida), para dar el 7a-
metoxi derivado. La función amina se desprotege por transiminación empleando cloruro de 2-hidrazino-ÁWAÍ-
trimetil-2-oxoetilamonio (reactivo de Girard T). Este procedimiento también permite la adición al grupo imino
de otros nucleófilos (como los agolpamientos metiltio, ciano, metilo, etc.) en posición 7a.
Quinomimicina
Figura 24.25. Síntesis de cefamicinas a partir de 7-ACA.
3. SÍNTESIS DE TETRACICLINAS
Las tetraciclinas son antibióticos de amplio espectro activos por vía oral que se aíslan de mulantes de Strep-
tomyces aureofaciens y Streptomyces rimosus. Las naturales, como la clorotetraciclina. la oxitetraciclina, la de-
meclociclina y la tetraciclina, se obtienen por fermentación (Fig. 24.26).
Figura 24.26. Tetraciclinas naturales y su deshidratación.
Todas ellas pueden sufrir reacciones de deshidratación y epimerización durante su aislamiento y formula
ción galénica, originando productos biológicamente inactivos. Los procesos semisintéticos tratan de variar la
estructura para reducir al mínimo estos procesos de desactivación.
La reacción de deshidratación de los productos naturales para dar anhidrotetraciclinas, está favorecida por
la presencia de un hidroxilo terciario en una posición bencílica (C-6). La enolización del sistema dicarbonílico
en C-l 1 y C-12 favorece la deshidratación de este alcohol, al aromatizarse el anillo C.
La hidrogenación catalítica de la demeclociclina produce la pérdida del cloro en C-7 y del hidroxilo en
C-6, para dar 6-desmetil-6-desoxitetraciclina (Fig. 24.27). Ésta es la estructura más sencilla que posee actividad
antibacteriana, y resulta un intermedio útil para la obtención de minociclina por nitración. separación del 7-nitro
derivado y alquilación reductora de éste.
Demeclociclina
CH, ^CH, CH, jCH,
N N
Minociclina
Figura 24.27. Síntesis de minociclina.
La oxitetraciclina sirve como materia prima para obtener otras tres tetraciclinas semisintéticas: la mctaci-
clina, la meclociclina y la doxiciclina.
Ya se ha comentado que interesa la eliminación del hidroxilo en C-6. y para ello se realiza una halogena-
ción en C-l 1 en C-l la con /V-clorosuccinimida (NCS), a fin de impedir la aromatización del anillo C.
Si el reactivo de halogenación se utiliza en exceso, se obtiene el 7,1 la-dicloro derivado. Cuando ambos
productos halogenados se someten a la deshidratación con ácido fluorhídrico seco, se origina un doble enlace
exocíclico (en lugar de endocíclico, ya que está impedida la aromatización del anillo C).
La reducción química de ambos compuestos con ditionito sódico origina metaciclina y meclociclina res
pectivamente.
La adición conjugada de tiofenol a la metaciclina es diastereoselectiva (por la cara a), y la posterior hi
drogenación catalítica en presencia de Niquel-Raney de este aducto, origina doxiciclina (Fig. 24.28).
R = H,CI
Na.S.O. PhSH
(R = H)
Metaciclina, R = H
Meclociclina, R = Cl
Doxiciclina
Figura 24.28. Síntesis de metaciclina. meclociclina y doxiciclina.
La escasa hidrosolubilidad de las tctraciclinas hace interesante la síntesis de profármacos que permitan su
aplicación por vía parenteral. Algunos se han obtenido por reacción de Mannich con formaldehído y aminas se
cundarias, como la pirrolidina (el pKa de la función carboxamida es próximo a 3). En la Figura 24.29, se repre
senta la obtención de rolitetraciclina.
+ CH,0
Rolitetraciclina
Figura 24.29. Obtención del profármaco rolitetraciclina.

4. ANTIBIÓTICOS AMINOGLUCÓSIDOS
La mayor parte de los antibióticos aminoglucósidos se obtiene por fermentación de diferentes especies de Strep-
tomyces y Micromonospora. pero, al contrario de lo que ocurre en otros antibióticos (y a pesar de que se han
realizado diversas variaciones estructurales), existen en el mercado muy pocos derivados semisintéticos. La
dihidroestreptomicina, por ejemplo, se obtiene por hidrogenación catalítica de la estreptomicina, que rompe el
hemiaminal formado entre un grupo formilo y otro de metilamina presente en su estructura (Fig. 24.30). Tam
bién se logra esta reducción por la acción de microorganismos, como Streptomyces humidus.
Figura 24.30. Obtención de dihidroestreptomicina.
Mayor interés presenta la amikacina. Para su síntesis, se parte del antibiótico natural kanamicina A, se
protege su agolpamiento amino menos impedido estéricamente como Cbz derivado y. a continuación, se acila el
agolpamiento amino en C-l del resto de desoxiestreptamina con un éster activado del ácido 2.S'-hidroxi-4-ami-
nobutírico. Finalmente, se efectúa la desprotección por hidrogenación catalítica (Fig. 24.31).
Figura 24.31. Síntesis de amikacina.

USO DE PRODUCTOS NATURALES. OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTES1S (I) 741
5. ANSAMICINAS
En este grupo, destacan las rifamicinas, que se utilizan como fármacos antimicrobianos. La rifampicina. por
ejemplo, es un antituberculoso activo por vía oral, que se obtiene por semisíntesis a partir de la rifamicina B. El
agolpamiento cromóforo aromático de ésta se oxida primero a un derivado quinónico, en el que uno de los car-
bonilos está enmascarado como un 2-espiro-4-oxo-1,3-dioxolano. La hidrólisis de este anillo libera la quinona.
que se reduce a hidroquinona, y después se trata con formaldehído y una amina secundaria, para dar el corres
pondiente dialquilaminometil derivado (reacción de Mannich). La oxidación de éste con tetraacetato de plomo
origina una formilquinona que. por reducción a hidroquinona con ácido ascórbico y condensación posterior con
/V-amino-V-metilpiperazina, da rifampicina (Fig. 24.32).
Figura 24.32. Síntesis de rifampicina.

6. SÍNTESIS DE PACLITAXEL Y ANÁLOGOS
El paclitaxel (taxol) es un diterpeno que se encuentra en la corteza, las ramas, las hojas y los frutos de Taxus
brevifolia u otras especies de Taxus, y adquirió relevancia en 1960 como consecuencia del descubrimiento de su
actividad antilumoral, en particular frente al melanoma (Fig. 24.33). Desgraciadamente, era necesario el sacrifi
cio de un árbol de cien años para disponer de unos 300 mg de taxol (una dosis para un paciente con cáncer). En
1971, se determinó su estructura por cristalografía de rayos X, y en 1982 se demostró que su acción antilumoral
se debe a su interacción con la tubulina, una proteína implicada en la mitosis, de forma que los microtúbulos
que se producen en su presencia son resistentes a la despolimerización.
Paclitaxel (Taxol): R = C<,HS. R’ = COCH,

Docetaxel. R ~ (CH3)(C. R' = H
Figura 24.33. Estructura del paclitaxel (taxol) y docetaxel.
Su estructura es muy compleja, ya que contiene un esqueleto tricíclico de 6-8-6 eslabones (anillos A, B y
C) formado por catorce átomos de carbono, de los que nueve son centros estereogénicos, conteniendo además
un anillo de oxetano. Aunque se conocen varias estrategias de síntesis total para el paclitaxel y otros análogos
que han demostrado poseer la misma o superior actividad antilumoral. sólo ha podido utilizarse en terapéutica
10-Desacetilbacatina III
Figura 24.34. Semisíntesis de paclitaxel a partir de 10-desacetilbacatina III.

USO DE PRODUCTOS NATURALES. OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS <11 743
cuando se descubrió un procedimiento de semisíntesis rentable. El uso de paclitaxel para el tratamiento del cán
cer de ovario o de mama fue aprobado por la FDA en 1992 y 1994, respectivamente. Su análogo semisintético.
el docetaxel, fue igualmente aprobado para el cáncer de mama en 1996.
En la semisíntesis de estos antitumorales, se utiliza un alcohol que contiene los cuatro ciclos del taxol y
que se aísla en grandes cantidades de las hojas de Taxus barata: la 10-desacetilbacatina III. Las hojas de ese ár
bol se regeneran rápidamente, y pueden cosecharse en grandes cantidades sin afectar a la plantación. La produc
ción del taxol a partir de esta materia prima es sencilla, y consiste básicamente en proteger selectivamente los
grupos hidroxilo en C-7 y C-10 de aquélla, realizando a continuación la acilación forzada del alcohol en C-13.
muy poco reactivo, con la cadena lateral de JV-benzoilfenilisoserina convenientemente protegida (Fig. 24.34).
Por otro lado, el grupo alcohólico en C-13 se oxida a cetona, y el gntpo hidroxilo en 7 se protege como trietil-
sililderivado para realizar otras operaciones de manipulación molecular. Este procedimiento y otros semejantes
han permitido la semisíntesis a gran escala de paclitaxel y de sus análogos.
BIBLIOGRAFÍA
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Obtención de fármacos por semisíntesis

(II). Síntesis de esferoides
E. Raviña
1. INTRODUCCIÓN
Si se examina un análogo de colesterol completamente saturado, se aprecia que existen en el núcleo de cuatro
ciclos fusionados ocho átomos de carbono estereogénicos (3,5,8,9, 10, 13, 14 y 17). Por lo tanto, son posibles
2s = 256 estereoisómeros. Si se incluye, además, el carbono estereogénico en C-20 de la cadena lateral, el nú
mero de isómeros asciende a 512.
Sin embargo, en la naturaleza (si se exceptúan los glucósidos cardiotónicos. en los que la fusión C/D es
cis), sólo se han encontrado compuestos con estereoquímica trans para la fusión de los anillos B/C y C/D. po
diendo ser cis o trans la unión de los anillos A/B. También puede variar la configuración de ciertos sustituyen-
tes, en especial de los unidos a los carbonos C-3 y C-17.
Si la unión de los anillos A/B es trans, la molécula adopta una configuración extendida, en la que los ani
llos de ciclohexano (A-C) se encuentran en conformación de silla (con mínima tensión) y los grupos metilo an
gulares en C-10 y C-13, así como la cadena lateral en C-17. están situados por encima del plano medio de la
molécula (en configuración 0). Según sea el sustituyeme R en C-17, se distinguen, entre otras, las estructuras
fundamentales que se recogen en la Figura 25.1 (véase también el Capítulo 1).
Las distintas hormonas esteroideas se descubrieron durante las investigaciones encaminadas a estudiar el
sistema endocrino de los mamíferos. La tarea fue ingente, dada la pequeñísima concentración en que se encuen
tran. Así, A. Butenandt fue capaz de obtener 15 mg de estrona cristalizada a partir de 15000 litros de orina.
El aislamiento, la caracterización y la semisíntesis de las hormonas sexuales y corticales se efectuó en la
década de 1930-1940. Sin embargo, su utilización terapéutica se retrasó hasta después de 1950, a consecuencia
de sus precios prohibitivos. Las materias primas naturales más asequibles en aquella época eran el colesterol y
el ácido cólico. La obtención de progesterona a partir del ácido cólico, por ejemplo, requería un proceso de 27
pasos, algunos de los cuales transcurren con bajo rendimiento.
Sin embargo, el hecho de que los esteroides de los mamíferos sean rara vez aplicables como tales, y que
las compañías farmacéuticas hayan tenido gran interés en conseguir productos patentables, ha conducido a que
la síntesis de análogos de esteroides se haya desarrollado enormemente.
R Serie 5a Serie 5p
H 5a-androsiano 5P-androstano
CHj-CH, 5a-pregnano 5|3-pregnano
CHMe(CH2)2Me 5a-colano 5P-colano
CHMe(CH2)»CHMe2 5a-colestano 5P-colcsiano
CHMe(CH2)2CHMe-CHMe2 5a-ergostano 5P*crgostano
Figura 25.1. Estereoquímica de algunos esqueletos esteroideos fundamentales.
2. ESTRATEGIAS PARA LA PREPARACIÓN COMERCIAL DE ESTRÓGENOS,

ANDRÓGENOS Y PROGESTINAS (PROGESTÁGENOS)
Aunque prácticamente todos los esteroides naturales se han obtenido por síntesis total, casi todos los fármacos es
teroideos se preparan por semisíntesis a partir de materias primas naturales que ya contienen el núcleo esteroide
preformado, como son las Dioscoreas mejicanas y la soja. De hecho, su producción comercial fue posible a pre
cios asequibles gracias a los trabajos del químico norteamericano R. E. Marker sobre sapogeninas esteroideas
[véase P. Lehman. J. Chem. Ed.. 50. 195 (1973)]. Marker observó que la diosgenina. una sapogenina espiránica
abundante en los rizomas de Dioscorea composita y D. macrotachys. podía ser una materia prima adecuada para
la preparación de pregnenolona. que a su vez es la llave para la preparación de progesterona, cortisona y otras
hormonas. Como no llegó a interesar a la industria norteamericana, Marker fundó en Méjico la compañía Syntex
para la producción industrial de progesterona, que fue la proveedora de este producto y de sus derivados hasta
bien entrada la década de los setenta.
El proceso se basa en el tratamiento de la diosgenina con anhídrido acético a 200 °C en el autoclave, lo
que origina el diacetato que se indica en la Figura 25.2. La oxidación crómica ataca quimioselectivamente al do
ble enlace de la cadena lateral, y produce un cetoéster que, por tratamiento con ácido acético, origina el acetato
de 16-deshidropregnenolona. Su reducción catalítica quimioselectiva conduce al acetato de pregnenolona. que
se transforma en progesterona por hidrólisis alcalina y posterior oxidación de Oppenauer. Ésta es una reacción
reversible en la que un alcohol secundario, por tratamiento con alcóxido de aluminio (en general, isopropóxido)
y un exceso de cetona que hace de aceptor del hidrógeno procedente del alcohol (generalmente, ciclohexanona
o acetona), se oxida a cetona. Se utiliza mucho en la oxidación de alcoholes esteroídicos. Cuando se oxida un
esterol en C-3, y como consecuencia del medio básico de esta reacción, se produce simultáneamente la isomeri-
zación del doble enlace en 5.6 (si lo hay) a la posición conjugada 4,5.
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEM1SÍNTESIS (II). SÍNTESIS DE ESTEROIDES 747
Diosgenina 5,20(22)furostadicn-3p.26-diol
I) H,.Pd
AcOH 2) HCP
(Hidrogcnación
quimioselectiva del
doble enlace conjugado
y saponificación)
Al(O'Pr),, acciona
(Oxidación de
Oppenauer)
Progesterona
Figura 25.2. Transformación química de diosgenina en pregnenolona y progesterona.
La 16-deshidropregnenolona es también precursora de ia deshidroepiandrosterona (DHE), una molécula

clave en la preparación de testosterona, los andrógenos y anabolizantes que de ella derivan, y los estrógenos es
trena y estradiol.
Estos estrógenos, a través de una reducción de Birch, conducen a los 19-noresteroides anovulatorios.
Por otra parte, la progesterona puede transformarse en cortisona y otros corticoides, en procesos que se
comentarán más adelante.
La transformación de 16-deshidropregnenolona en DHE transcurre previa transposición de Beckmann de su
oxima. para dar la /V-acetilenamina correspondiente.
La hidrólisis de ésta proporciona el acetato de DHE, y la hidrólisis posterior del resto acetato, seguida de
oxidación de Oppenauer, da finalmente androstenodiona (Fig. 25.3).
La explotación irracional de las Dioscoreas mejicanas, las mejores fuentes de diosgenina, obligaron a la
industria farmacéutica a buscar otras fuentes de esteroides susceptibles de ser transformados en productos úti
les. Un procedimiento industrial que permite la obtención de progesterona con rendimientos globales del 69 %
es el conocido como proceso Upjohn, que utiliza el estigmasterol (un esterol abundante en el insaponificable del
aceite de soja) como materia prima. Mediante un procedimiento de lixiviación, es posible separar el estigmaste
rol de otros esteróles existentes en este material.
Figura 25.3. Transformación de 16-deshidropregnenolona en acetato de deshidroepiandrosterona

y androstenodiona.
La oxidación de Oppenauer va seguida, en este caso, de la degradación de la cadena en C-17 hasta con
vertirla en la cadena de la progestcrona. Esto se consigue por ozonólisis reductora para dar el 20-formil deriva
do, que se convierte entonces en una enamina en C-22, que se oxida en diversas condiciones (ozonización y fo-
tooxigcnación, por ejemplo), para dar progesterona (Fig. 25.4).
Figura 25.4. Transformación de estigmasterol en progesterona.

OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS (111. SÍNTESIS DE ESTEROIDES 749
3. SÍNTESIS DE ESTEROIDES CON EL ANILLO A AROMÁTICO
Los esteroides estructuralmente más simples son los estrógenos, cuyo anillo A es aromático. Son difícilmente
asequibles por semisíntesis. porque en las plantas que pudieran contener esteroides disponibles en cantidades
explotables no existen estructuras con anillo A aromático. Por ello, se obtienen por semisíntesis partiendo de
otros esteroides y, como paso previo a la aromatización del anillo A, hay que eliminar el grupo metilo angular
en C-10, que es el C-19. En una de las estrategias de síntesis más antiguas, la androstenodiona se reduce a an-
drosterona (Fig. 25.5), que, por tratamiento con bromo en ácido acético o con NBS, da cl correspondiente deri
vado dibromado. Éste elimina hidrácido con colidina (trimetilpiridina), y produce la correspondiente 1,4-dieno-
na. La pirólisis de ésta en aceite mineral a 600 °C origina estrona con rendimientos modestos (no superiores al
30 %). En una modificación más reciente, el carbonilo en C-17 de la dienona se protege como propilencetal, y
el anillo A se aromatiza por reducción con litio-bifénilo. El tratamiento del producto en medio ácido hidroliza
simultáneamente el cetal. consiguiéndose la estrona con rendimiento del 60 %. Finalmente, la reducción de la
estrona con hidruros metálicos conduce al estradiol. Obsérvese que, en las reacciones de los esteroides. es fre
cuente el ataque estereoselectivo por la cara a de la molécula (menos impedida que la p, por la presencia de los
metilos angulares y la cadena en C-17 si existe).
El etinilestradiol y su éter metílico (mestranol), que constituyen el componente estrogénico de los anti
conceptivos orales, se preparan por etinilación de la estrona o de su éter metílico con acetiluro potásico en amo
níaco líquido. Tal como señalábamos anteriormente, los únicos productos de estas reacciones son los que resul
tan del ataque del reactivo por la cara a, que es la menos impedida (Fig. 25.6).
4. SEMISÍNTESIS DE 19-NORESTEROIDES
La progesterona (la hormona natural progestágena), y los progestágenos en general, intervienen decisivamente
en los complejos fenómenos que conducen a la anidación del óvulo fecundado en la matriz y evitan la ovulación
(véase el Capítulo I7).
Figura 25.5. Transformación de androstenodiona en estrona.

KC=CH
NH, liq.
(adición por la cara
a menos impedida)
R = H, Estrena
R = H. Etinilcstradiol
R = CH,, Mestranol
Figura 25.6. Síntesis de derivados de estrona activos por vía oral. Etinilestradiol y mestranol.
Sin embargo, la progesterona es inactiva por vía oral a causa de la ruptura metabólica de la cadena lateral,
lo que motivó la búsqueda de análogos semisintéticos, búsqueda que no resultó fácil dada la notable especifici
dad de acción de esta hormona.
Entre ellos destacan las 19-norprogestinas, progestágenos orales muy activos.
El éter metílico del estradiol es materia prima para la obtención de 19-noresteroides, empezando por una
reducción de Worster-Birch, como etapa clave del proceso, para dar 1,4-dihidroderivados.
Figura 25.7. Síntesis de 19-norprogestinas orales a partir del 3-0-metilestradiol.

OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISINTESIS (II). SÍNTESIS DE ESTEROIDES 751
El enoléter originado (Fig. 25.7) se hidroliza. en medio ácido débil (ácido oxálico), a la cetona no conju
gada (170-hidroxi-5( 10)-estren-3-ona), aunque si la hidrólisis es más enérgica (con ácidos minerales), se consi
gue la cetona conjugada nandrolona (19-nortestosterona).
La oxidación de Oppenauer del alcohol en C-17 del 1,4-dihidroderivado da la cetona correspondiente, cu
ya etinilación e hidrólisis posterior del éter enólico. con ácidos débiles o minerales, conduce al noretinodrel o a
la noretindrona. respectivamente.
La reducción de esta última con un agente reductor transferente de hidruro voluminoso conduce, casi ex
clusivamente, al 30,170-diol, que se acetila para dar el diacetato de etinodiol. una de las progestinas orales más
activas.
En los años 1955-1957. Pincus (de la Worcester Foundation for Experimental Biology de Nueva York).
Rock (Boston) y García (Puerto Rico) observaron que el noretinodrel y la noretindrona son muy eficaces como
inhibidores de la ovulación. Como consecuencia de estos estudios, se encontró un estrógeno contaminante muy
activo como anovulatorio, el 17a-etinilcstradiol metiléter (mestranol). Desde entonces, las formulaciones anti
conceptivas incorporan progestina y estrógeno (véase el Capítulo 17). El mestranol era un compuesto minorita
rio, que se había producido en el proceso de síntesis anteriormente comentado, a partir del éter metílico del es
tradiol que queda sin reducir en la reducción de Birch. Éste se oxida, en la oxidación de Oppenauer, a la cetona
en C-17, que finalmente adiciona acetiluro sódico para dar mestranol (Fig. 25.8). Tras una fuerte polémica en
EEUU, la compañía farmacéutica Searle comercializó en 1960 el «Enovid» * (noretinodrel + mestranol), ini
ciándose así la era de los anovulatorios.
Figura 25.8. Síntesis de mestranol a partir del 3-O-metileslradiol.
En la década de los sesenta, se desarrollaron procedimientos de síntesis mejorados para la preparación

industrial de 19-noresteroides. Uno de ellos es el de Wettstein (también llamado proceso Uberwasser). que
permite también la obtención de estrena y sus derivados. Está basado en la funcionalización del metilo en C-
19 a través de la clorhidrina de la DHE (obtenida por adición de cloro en agua). La oxidación de aquélla con
tetraacetato de plomo e iodo forma un radical alcoxilo que ataca al metilo en C-19 (no activado), eliminándo
se un átomo de hidrógeno c formando un anillo de tetrahidrofurano (1. Fig. 25.9). Tras realizar la deshidroha-
logenación catalizada por bases y la hidrólisis del acetato, el alcohol en C-3 se oxida, y finalmente se reduce
la función éter con cinc en ácido acético, para daré! 19-hidroxiderivado 2. La oxidación de este alcohol en C-
19 a ácido carboxílico y su dcscarboxilaeión en medio básico dan la 5( IO)estren-3,17-diona (3). El carbonilo
en C-3 de este derivado se protege selectivamente, y el cetal resultante se somete a la etinilación. Finalmente,
según el agente hidrolítico empleado, se obtiene noretinodrel (hidrólisis suave) o noretindrona (hidrólisis
enérgica).
Sih y colaboradores, de la Facultad de Farmacia de la Universidad de Wisconsin, descubrieron en 1965
que un microorganismo del suelo, Nocardia stríctus, es capaz de transformar el 19-hidroxiderivado 2 en estrena
(Fig. 25.9b).
5. SÍNTESIS TOTAL DE 19-NORESTEROIDES
Aquellos esteroides que no pueden prepararse por semisíntesis. como los que llevan sustituyentes no usuales
(un etilo angular, por ejemplo), tienen que prepararse por síntesis total. Uno de los procedimientos más emplea
dos es el de Torgov-Smith-Annachenko. cuyo principal inconveniente es que los productos finales son racémi-
Pb(AcO)4,1,
I) Na® ®C=CH
2) H,Oe
Norelindrona Noretinodrel
Figura 25.9. Síntesis de noretinodrel y norelindrona por el proceso Uberwasser.
Nocardia strictus
Figura 25.9b. Aromatización biológica del intermedio 2.
eos. Se parte de l-etenil-6-metoxi-1.2,3,4-tetrahidronaftalen-l-ol (que contiene los anillos A/B), al que se adi
ciona en medio ácido 2-alquilciclopentano-1,3-diona (su forma enólica se representa en la Fig. 25.10).
La reacción puede interpretarse por un ataque del enol de la diona al alcohol alílico protonado, con pérdi
da de agua para dar 4. La condensación posterior, en medio ácido, produce cl enlace C(8)-C( 14) de un 19-no-
resteroide.
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTES1S (II). SÍNTESIS DE ESTEROIDES 753
R = CH3; (±) Estrona metiléter

R = CH3; (±) (3-cstradiol metiléter
R = CH2CH3; (±) homólogo en C-18
del 0-estradiol metiléter
Figura 25.10. Procedimiento de Torgov-Smith-Annachenko para la síntesis total de 19-noresteroides.
La reducción catalítica quimioselectiva del doble enlace en C-14 tiene lugar anti respecto al sustituyente
alquilo en C-13. creándose la unión C/D trans. Posteriormente, se reduce el carbonilo en C-17 con borohidruro
sódico, dando casi exclusivamente el alcohol [i (como es habitual en este tipo de reducciones).
La reducción del doble enlace en C-8 establece la unión B/C. Se llega así al 18-etil homólogo del metil
éter del estradiol (R = Et), o al éter metílico del estradiol (R = Me), ambos en forma racémica. La oxidación de
Oppenauer de este último conduce al éter metílico de la estrona. también racémico.
En 1965-1968, un grupo de investigación de Schering observó que es posible la reducción enantioselecti-
va de la diona 4 empleando cultivos de la levadura Saccharomyces uvarum, que origina el cetol 5 en forma
enantioméricamente pura y con la misma configuración que los esteroides naturales (Fig. 25.11).
6. SÍNTESIS DE ANDRÓGENOS
Los andrógenos son esteroides en C-19 carentes, como los estrógenos, de cadena lateral en C-17. La testostero
na (que es la hormona androgénica natural) se reduce metabólicamente al andrógeno activo, la 4,5a-dihidrotes-
tosterona.
Como ya se ha visto en el Capítulo 17. ciertos derivados carentes del metilo en C-19 (19-noresteroides)
son anabolizantes.
ISA INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
(varias etapas)
(+)-|J-Estradiol metí! éter (R = Me)
| Ox. Oppenaucr
(+)-Estrona metil éter (R = Me)
Figura 25.11. Procedimiento enantioselectivo de Torgov-Smith modificado con microorganismos.
Figura 25.12. Síntesis de 19-noresteroides anabolizantes.

OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS (Il>. SINTESIS DE ESTEROIDES 755
6.1. Síntesis de 19-noresteroides anabolizantes

Se realiza a partir del éter metílico de la estrona, por tratamiento con ioduro de metilmagncsio, seguido de re
ducción de Birch e hidrólisis del enoléter intermedio, hasta normetandrolona.
De forma análoga (partiendo del mestranol), por reducción del triple enlace, se consigue la noretandrolo-
na (Fig. 25.12). Estos derivados tienen apenas un 10 % de la actividad androgénica de la testosterona y retienen
un 70 % de la anabólica.
6.2. Síntesis de otros esteroides relacionados con la testosterona
La 17ot-metiltestosterona, que se obtiene fácilmente a partir de DHE, por adición de reactivos de Grignard y
posterior oxidación de Oppenauer del producto resultante, es activa por vía oral. Alternativamente, por etinila-
ción y posterior oxidación de Oppenauer, se obtiene etisterona, que prácticamente carece de efectos andrógcnos
y es un progestágeno oral eficaz (Fig. 25.13).
Figura 25.13. Síntesis de otros análogos de la testosterona.
La deshidrogenación con clorando (2,3,5.6-tetraclorobenzoquinona) de la I7a-metiltestosterona produce

la deshidrogenación en C-6 (conjugada). Este compuesto sufre la adición conjugada de ioduro de metilmagne-
sio, en presencia de clontro cuproso. para dar la bolasterona (Fig. 25.14). Por otra parte, la deshidrogenación de
la 17a-metiltestosterona con dióxido de selenio se produce en C-1, para dar metandrostenolona. Ambos son im
portantes anabolizantes.
Figura 25.14. Síntesis de bolasterona y metandrostenolona.
La reducción catalítica de DHE da 3P-hidroxi-5a-androstan-17-ona, que conduce a la androstanolona en

la reacción con bromuro de metilmagnesio (en exceso) y posterior oxidación del intermedio alcohólico origina
do. La androstanolona se formila con formiato de etilo en medio básico para dar oximetolona, que se condensa
con hidrazina para dar el esteroide pirazólico estanozoiol. con una actividad anabolizante muy superior a la an
drogénica (Fig. 25.15).
Figura 25.15. Síntesis de otros anabolizantcs derivados de andrógenos. Estanozolol.
Figura 25.16. Síntesis de fluoximesterona.

OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS (III. SÍNTESIS DE ESFEROIDES 757
La fluoximesterona (Fig. 25.16) es otro agente anabolizante que fue desarrollado en paralelo con los
corticosteroides. En su preparación, la 1 la-hidroxi-4-androsten-3,l7-diona. obtenida por oxidación microbio-
lógica de la androstenodiona en un proceso comparable a la oxidación en I la de la progesterona (véase más
adelante), se oxida con trióxido de cromo para dar adrenosterona. El tratamiento de ésta con una cantidad li
mitada de pirrolidina, en condiciones cuidadosamente controladas, conduce a la formación quimioselectiva de
la enamina en C-3 (la menos impedida). La adición posterior a la cetona en C-17 de bromuro de metilmagne-
sio, seguida de hidrólisis, da el I7a-metil-17p-hidroxiderivado (obsérvese de nuevo la resistencia de la ceto
na en C-11 a las reacciones de adición).
A continuación, se protege la cetona en C-3 como enamina, lo que permite la reducción de la cetona en
C-l 1 con hidruro de litio y aluminio.
Finalmente, se separa el resto enamina por hidrólisis, con lo que se obtiene la 11P, I7p-dihidroxi-17a-
metil-4-androsten-3-ona.
La introducción de un átomo de flúor en 9a se realiza siguiendo el procedimiento que Fried y Sabo de
sarrollaron para la serie cortisónica: esterificación selectiva del hidroxilo en C-l I con ácidop-toluenosulfóni-
co y eliminación de tosilato en medio básico para dar la olefina en 9( 11), que. con ácido hipobromoso (N-bro-
moacetamida en agua), origina el 9a-bromo-11 P-hidroxiderivado. El tratamiento de éste con una base
produce el desplazamiento del bromo por alcóxido y forma el consiguiente epóxido en 9( 11). Por otro lado,
este epóxido puede obtenerse directamente tratando la olefina con un pcrácido, pero entonces se obtiene con
la estereoquímica a. Finalmente, la apertura del anillo de epóxido (oxirano) primeramente mencionado con
ácido fluorhídrico, da la fluoximesterona.
H2O2 HBr
17a- Acetoxiprogesterona
Figura 25.17. Síntesis de I7a-acetoxiprogeslerona a partir de 16,17-deshidropregnenolona.
7. SÍNTESIS DE ESTEROIDES RELACIONADOS CON LA PROGESTERONA
Además del desarrollo de 19-norprogestinas, se intentó la búsqueda de análogos de la progesterona estudiando

la influencia de los distintos sustituyentes en C-17 del pregnano. Una investigación sistemática reveló que. aun
que el 17a-hidroxiderivado de progesterona es débilmente activo, el 17a-acetoxiderivado es un potente proges-

tágeno por vía oral. Su síntesis (Fig. 25.17) se realiza por epoxidación del doble enlace de la 16,17-deshidro-
pregnenolona con peróxido de hidrógeno en medio alcalino. La apertura del oxirano así originado, con ácido
bromhídrico, conduce regio y estereoselectivamente a la bromhidrina indicada, cuya reducción catalítica en pre
sencia de acetato amónico elimina el átomo de halógeno, no viéndose afectada la insaturación en 5,6. El hidro
xilo en C-3 de este derivado se esterifica con ácido fórmico, y posteriormente se acetila el hidroxilo en C-17. Fi
nalmente, en la oxidación de Oppenauer se desprotege el hidroxilo en C-3 y se obtiene directamente la
I7a-acetoxiprogesterona. Esta síntesis, descrita inicialmente por Julian, fue mejorada posteriormente por un
grupo de trabajo de Syntex. dirigido por Rosenkranz.
La introducción de sustituyentes en C-6 del pregnano aumenta la potencia de los progestágenos. Es el
caso de la medroxiprogesterona, del megestrol y de la clormadinona, obtenida en los años 55-65 a través de
distintas patentes de las compañías farmacéuticas Syntex y Upjohn (Fig. 25.18). La protección de los grupos
cetónicos de la 17a-hidroxiprogesterona (obtenida por oxidación de Oppenauer de I7a-hidroxipregnenolo-
na). con un exceso de etilenglicol, conduce al correspondiente bis-cetal con isomerización simultánea del
doble enlace 4.5 a 5,6. El doble enlace 5,6 da una mezcla de epóxidos a y p con ácido peracético, en la que
predomina el primero. Éste, una vez separado, sufre la apertura esteroespecífica al 5a-hidroxi-6P-metil deri
vado cuando se trata con ioduro de metilmagnesio. La descetalización y posterior deshidratación en C-5 pro
duce 6a-metil-l7a-hidroxi-4-pregnen-3,20-diona (en la que se regenera el sistema 3-oxo-4-eno). Este com
puesto se equilibra en medio ácido para dar el derivado termodinámicamente más estable, con el grupo metilo
en la posición 6 ecuatorial. Finalmente, la acetilación en condiciones enérgicas, conduce al acetato de medro
xiprogesterona (6a-metil-17a-acetoxiprogesterona), que en la dcshidrogenación con clorando lleva al acetato
de megestrol. Ambos compuestos son potentes progestágenos.
Figura 25.18. Síntesis de 6-alquilderivados progestágenos. Medroxiprogesterona y megestrol.

OBTENCIÓN DE FÁRMACOS TOR SEMISÍNTESIS (Il>. SÍNTESIS DE ESTEROIDES 759
A partir de la 17a-hidroxiprogesterona, se prepara también el acetato de clormadinona, un potente anovu-

latorio activo en dosis muy bajas, que se conoce como «minipíldora» (Fig. 25.19). La epoxidación con un pere
cido voluminoso (como el ácido monoperftálico) del dieno, obtenido en la deshidrogenación de la 17a-hidroxi-
progesterona con clorando, da el 6,7-epóxido. Su apertura con ácido clorhídrico en dioxano acuoso produce la
clorhidrina intermedia, que no llega a aislarse, ya que en las condiciones de reacción se deshidrata a clormadi
nona (6,7-deshidro-6-cloro-17ot-hidroxiprogesterona). Finalmente, la acctilación con anhídrido acético en pre
sencia de ácido p-toluenosulfónico conduce al acetato de clormadinona.
Figura 25.19. Síntesis de acetato de clormadinona.
8. SÍNTESIS DE CORTICOSTEROIDES
La cortisona fue aislada en 1935-1945 por Kendall, en EEUU, y Reichstein. en Suiza, junto con otras veinte
sustancias relacionadas, de la zona cortical de las cápsulas suprarrenales. Kendall y Hench. de la clínica Mayo,
dieron a conocer en 1949 los enormes efectos de la cortisona en el alivio de los síntomas que produce la artritis
reumatoide. El éxito de estos estudios produjo un aumento de su demanda e hizo necesario el desarrollo de un
procedimiento sintético capaz de obtenerla a precios asequibles.
Figura 25.20. Materias primas utilizadas en la síntesis de corticosteroides.

La mayor dificultad que presentaba su síntesis a partir de las materias primas habituales radicaba en la in
troducción de una función oxigenada en C-l 1. para la que no existe un método químico fácil. Si se emplean áci
dos biliares (como el ácido cólico o el desoxicólico, que poseen un hidroxilo en C-12. Fig. 25.20), su traslado a
la posición C-11 es muy delicado y costoso. La primera síntesis histórica de la cortisona utilizaba ácido desoxi-
cólico (asequible en grandes cantidades a partir de bilis de buey). Era un proceso de 37 pasos, extremadamente
laborioso y con rendimientos globales muy bajos. Un grupo de investigación de la compañía farmacéutica
Merck. Sharp & Dhome, dirigido por Sarett, mejoró el procedimiento y permitió reducir el precio de cortisona
de 200 dólares/g. en 1949, a 10 dólares/g. en 1951. Sin embargo, a pesar de la mejora, el método seguía siendo
muy laborioso, con más de veinte pasos.
En 1950. se identificó el único esteroide natural, a excepción de los corticales, con una función oxigenada
en C-11, la sarmenlogenina, que se había aislado de las semillas de la planta africana Strophantus sarmentosas.
La síntesis de cortisona a partir de este producto nunca llegó a ser practicable. La hecogenina es otra genina es-
teroidea que posee un carbonilo C-12 y se encuentra como glucósido en las hojas del sisal o henequen, planta
cultivada intensamente en África (de ella se extrae al exprimir las hojas para la producción industrial de fibra y.
por lo tanto, es barata). Científicos de Glaxo pusieron a punto un método para su extracción, purificación y con
versión en cortisona, en un proceso que requiere 18 pasos.
El problema de la síntesis de esta hormona se resolvió definitivamente en 1952 por métodos quimico-
biológicos, como se indica en la Figura 25.22. Era un proceso de 11 pasos que permitió que el precio de la
cortisona pasara de 10 a 3,5 dólares/g. Un grupo de investigación de la compañía Upjohn, dirigido por Peter
son y Murray, observó, de un modo totalmente fortuito, que el hongo Rhizopus arrhizus, aislado al exponer
una placa de agar en una ventana en Kalamazoo (Michigan), donde radicaba la sede de la compañía, transfor
maba la progesterona en 1 la-hidroxiprogesterona con buenos rendimientos (posteriormente, se descubrió
que la hidroxilación microbiológica era posible en casi todas las posiciones y en casi todas las orientaciones
del núcleo de los esteroides). La oxidación crómica de la 11 a-hidroxiprogesterona así obtenida lleva a la co
rrespondiente triona. En la primera etapa que se utiliza para transformar la cadena en C-17 de la progesterona
en la de cortisona, esta triona se condensa selectivamente en C-21 con oxalato de dietilo (ya que existe gran
impedimento en el enolato en C-12 y el C-2 es menos reactivo al estar deslocalizada la carga por conjuga
ción). La posición C-21 se encuentra ahora activada, y el enolato indicado reacciona con dos equivalentes de
bromo para dar una dibromocetona que sufre la transposición de Favorskii en el tratamiento con metóxido
sódico, a la vez que experimenta la deshidrohalogenación (si se calienta con álcalis una a-halocetona, se
transpone dando un ácido carboxílico con el mismo número de átomos de carbono, Fig. 25.21).
Figura 25.21. Transposición de Favorskii.
Se obtiene así un áster metílico a,p-insaturado en C-17 que, una vez protegido el carbonilo en C-3, por
posterior reducción con hidruro de litio y aluminio, produce la reducción del éster a alcohol y de la cetona en
C-11 al 11 [J-hidroxi derivado. La acetilación del hidroxilo en C-21 (el C-11 no se acetila por impedimento es
tético), seguida de la eliminación del grupo protector, da un acetato de un alcohol alílico que. con tetraóxido
de osmio-peróxido de hidrógeno, produce directamente el acetato de hidrocortisona. Éste puede después oxi
darse e hidrolizarse a cortisona. El rendimiento global del proceso, a contar desde la 1 la-hidroxiprogestero
na, es del 25 %.
8.1. Síntesis de derivados de cortisona. Introducción de un flúor en 9a
La incorporación en la hidrocortisona de un átomo de flúor en 9a aumenta I0 veces su actividad antiinflamato

ria. La fludrocortisona fue preparada por Fried y Sabo en la compañía farmacéutica Squibb, siguiendo el proce-
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS 111 >. SÍNTESIS DE ESTEROIDES 761
dimienlo indicado en la Figura 25.23. El acétalo de hidrocortisona con oxicloruro de fósforo cn piridina da la
correspondiente olef'ina (como consecuencia de la sustitución del hidroxilo en C-l I por cloro, seguida de deshi-
drohalogenación). Cuando se trata este compuesto con perácidos da un expóxido, el cual reacciona con ácido
flurohídrico dando un producto en el que el átomo de flúor y el hidroxilo se encuentran en posiciones y orienta
ciones inversas a las que se requieren para que los derivados posean la actividad biológica deseada. Por ello, se
adiciona ácido hipobromoso (Ñ-bromoacetamida en agua o NBS acuosa) a la olefina anteriormente citada, y la
bromhidrina resultante se trata con álcalis. Se origina así un epóxido epímero del anterior, que se abre con ácido
fluorhídrico para dar la fludrocortisona.
8.2. Introducción de un doble enlace en 1,2
Un grupo de investigación de la compañía farmacéutica Schering, dirigido por Herzog, observó que los 1,2-des-
hidroderivados de cortisona (prednisona) e hidrocortisona (prednisolona) son aniiinflamatorios 4-6 veces más
activos que la cortisona y la hidrocortisona. La prednisona y la prednisolona se preparan por deshidrogenación
Figura 25.23. Síntesis de fludrocortisona.
microbiológica (con cultivos de Corynebacteríum simplex) o química (con óxido de selenio) de cortisona e hi-
drocortisona, respectivamente. A partir de la prednisolona, puede introducirse el flúor como se ha comentado
anteriormente para dar la fluoroprednisolona. un potente antiinflamatorio y antialérgico (Fig. 25.24a). También,
a partir de un 3-cetoesteroide. pueden introducirse los dos dobles enlaces en el anillo A por bromación con NBS
y posterior deshidrobromación con colidina (Fig. 25.24b y 25.5).
Colidina
(-2HBr)
Figura 25.24. Introducción de un doble enlace en 1,2 en derivados de cortisona o hidrocortisona. Prednisona
y prednisolona.
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTl-SIS (III. SÍNTESIS DE ESTEROIDES 763
8.3. Introducción de un metilo en 6a
Al igual que en los progestágenos, la incorporación de un metilo en 6a incrementa la actividad de los corticos-
teroides. Es el caso de la 6a-metilprednisolona (Urbason®), un corticoide ampliamente utilizado en los estados
de shock anafiláctico. Para su síntesis (Fig. 25.25), se condensa la cortisona con formaldehído. en medio ácido,
y se transforma el fragmento de dihidroxicetona presente en C-17 en un gmpo bis-metilendioxi.
6a-Metilprednisolona
Figura 25.25. Síntesis de 6a-metilprednisolona.
A continuación, se protege el carbonilo en C-3 con etilenglicol, lo que produce simultáneamente la iso-
merización del doble enlace a la posición 5(1).
Cuando este derivado doblemente protegido se trata con perácidos, origina una mezcla de los dos epóxi-
dos posibles, que se transpone a la cetona por tratamiento con ácido fórmico. Dicha cetona, con ioduro de me-
tilmagnesio, da el alcohol en C-6 (2) (la cetona en C-ll está impedida y no sufre la adición de Grignard). La
deshidratación de dicho alcohol da el alqueno 3, y la reducción con hidruro de aluminio y litio origina el alcohol
en C-11. La descetalización lleva a una cetona conjugada con un grupo metilo en la posición 6. Finalmente, se
consigue la 6a-metilprednisolona por introducción de un doble enlace en C-1 mediante la deshidrogenación con
dióxido de selenio.
8.4. Introducción de un hidroxilo en 16a
Como ejemplo de la introducción de un hidroxilo en 16a, que también aumenta la actividad anti inflamatoria,
comentaremos la síntesis de triamcinolona, cuyo acetónido se emplea mucho como antiinflamatorio de uso tó
pico. Ésta se realiza por el procedimiento de Bernstein (American Cyanamid Co), utilizando como materia pri
ma el acetato de 21 -hidroxi-4,9( 11), 16-pregnatrien-3,20-diona, obtenido a su vez en la doble deshidratación del
acetato de hidrocortisona (Fig. 25.26). El tetraóxido de osmio en acetona, ataca de forma quimioselectiva y es-
tereoselectiva al doble enlace C( I6>C( 17) por la cara a. De este modo, en una sola etapa, se introduce un hi
droxilo en 16a y se restablece el que había en 17. Después se introduce el sistema 9a-fluoro-11 p-hidroxi y el
doble enlace en C( 1) = C(2) por los procedimientos habituales ya comentados anteriormente, y después se for
ma el cetal con acetona en medio ácido.
Figura 25.26. Introducción de un hidroxilo en 16a. Síntesis de triamcinolona.
8.5. Introducción de un grupo metilo en 16a.

Síntesis de dexametasona.
La introducción de un metilo en 16a se realiza por adición conjugada del correspondiente reactivo de Grignard
a una cetona a,p-insaturada (Fig. 25.27).
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS (II). SÍNTESIS DE ESTEROIDES 765
*
I) Br,. H
O G
2) K AcO
3) H,O*
Figura 25.27. Introducción de un grupo metilo en 16a. Síntesis de dexametasona.
Para la síntesis de dexametasona, una cetona insaturada en C-16 adiciona ioduro de metilmagnesio para
dar el 16a-metil derivado, sobre el que se construye la cadena lateral de la cortisona siguiendo el procedimien
to Gallagher: la cetona en C-20 se convierte en el enolacetato, por tratamiento con anhídrido acético, la epoxi-
dación del enolacetato da un oxirano, y la hidrólisis de éste en medio ácido conduce al derivado con el grupo ce-
tónico en C-20 y un hidroxilo en C-17a.
El grupo alcohólico en C-21 se origina por bromación, desplazamiento con acetato potásico e hidrólisis
del acetato así formado. Finalmente, el sistema 9a-fluoro-11 P-hidroxi- y el doble enlace 1.2 se introducen como
es habitual.
8.6. Introducción de un grupo metilo en 16p. Síntesis de betametasona
Esta transformación puede realizarse por reacción de cicloadición 1,3-dipolar con diazometano sobre un deri
vado que posea un doble enlace C( 16)=C( 17). En la síntesis de betametasona (Fig. 25.28). la pirazolina que se
forma se descompone por pirólisis, y la olefina así formada se hidrogena catalíticamente, de forma controlada,
hasta dar la cetona saturada. La cadena lateral de la cortisona se crea por el procedimiento Gallagher anterior
mente comentado, y el sistema 9a-fluoro-11 p-hidroxi-, así como el doble enlace en C-1, se introducen del mo
do habitual.
9. SÍNTESIS DE MINERALOCORTICOIDES
9.1. Síntesis de acetato de desoxicorticosterona
El acetato de desoxicorticosterona es un potente agonista mineraloconicoide que puede utilizarse en determina

das ocasiones.
766 INTRODUCCIÓN A l.A QUÍMICA FARMACÉUTICA
Calor
(cicloadición -N,
1,3-dipolar)
Betamctasona
Figura 25.28. Introducción de un grupo metilo en 16p. Síntesis de betamctasona.
Su síntesis se realiza a partir de la pregnenolona (Fig. 15.29), por activación de la posición 21 previa con
densación con oxalato de dictilo. iodación de la misma y separación del grupo activante en medio alcalino (re-
trorreacción de Claisen).
La sustitución nucleófila del 21-iododerivado con acetato potásico origina el 21-acetoxiderivado. que fi
nalmente se oxida utilizando la reacción de Oppenauer.
Pregnenolona
Acetato de desoxicorticostcrona
Figura 25.29. Síntesis de acetato de desoxicorticosterona.
9.2. Síntesis de esplronolactona
La espironolactona es un antagonista de la aldosterona activo por vía oral. Para su obtención, se parte de la
DHE, que se etinila a etisterona (Fig. 25.30).
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTES1S (II). SÍNTESIS DE ESTEROIDES 767
I) XMgR
(exceso)
2) CO,
Na/NH, 3) H,OP
HC=CH
DHE Etistcrona
Oxidación de Clorando
Oppenauer
CHt-COSH
(adición conjugada)
Figura 25.30. Síntesis de espironolactona.
El anión acetiluro formado posteriormente con un exceso de un magnesiano reacciona con CO2. para dar
un ácido carboxílico.
A continuación se hidrogena el triple enlace, y el hidroxiácido resultante se cicla a espirolactona.
La oxidación de Oppenauer. seguida del tratamiento con clorando, conduce a la 4.6-dideshidro-3-cetona.
Finalmente, la adición conjugada del ácido tioacético (adición f/wts-diaxial) completa la síntesis de la espirono
lactona.
10. SÍNTESIS DE VITAMINA D3 Y 1tx,25(OH)2D3
Las sustancias que por irradiación dan compuestos con propiedades de vitaminas D se denominan provitaminas
D (o previtaminas D).
Son esteroides que poseen un hidroxilo en 3(i. dos dobles enlaces conjugados en el anillo B (en 5,6 y 7,8)
y una cadena lateral en 17p.
La irradiación del colesterol da vitamina D« (colecalciferol) y la del ergosterol da la vitamina Dj (ergocal
ciferol) (véase el Capítulo 17).
10.1. Síntesis de vitamina D3
La síntesis comercial de la vitamina D3 utiliza colesterol como materia prima, el cual, previa protección del hi
droxilo en C-3 como éster benzoico, se broma en posición alílica con NBS y peróxido de benzoilo. y se genera
el doble enlace en 7 por ebullición del derivado bromado con colidina (Fig. 25.31).
76X INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
hv
(fotólisis)
(apertura
electrocíclica)
Precalciferol
Calor (isomcrización)
(transposición
sigmatrópica 1.7)
Figura 25.31. Síntesis de vitamina D3.
Después de hidrolizar el éster benzoico, el 7-deshidrocolesterol resultante se irradia con luz ultravioleta,
con lo que tiene lugar la ruptura del enlace 9,10 del anillo B a través de una reacción electrocíclica (que trans
forma un ciclo con dos enlaces n y uno o en una estructura abierta con tres enlaces n). A continuación, un hi
drógeno en C-19 se traslada a la posición C-9 por una transposición sigmatrópica 1,7 y, finalmente, el enlace
C(6)-C(7) pasa de una configuración s-cis a otra s-trans.
10.2. Síntesis de 1 a,25(OH)2D3
Este derivado es el metabolito activo de la vitamina Di, al que se denomina también calcitriol. Vamos a comen
tar una estrategia sintética, cuya etapa clave es la reacción de acoplamiento catalizada por paladio entre un tri-
flato de vinilo y un enino.
El triflato de vinilo procede del llamado diol de Inhoffen-Lythgoe. que se obtiene en la ozonolisis y poste
rior reducción con NaBH.» del ergocalciferol (vitamina DJ.
El enino se obtiene de la J-carvona. a través de un laborioso proceso de doce etapas con un rendimiento
global del 16 % (Fig. 25.32).
OBTENCIÓN DE FÁRMACOS POR SEMISÍNTESIS (II). SÍNTESIS DE ESTEROIDES 769
Figura 25.32. Síntesis de !a,25(OH)>D.i.
El triple enlace del dienino, resultante de la reacción de acoplamiento, se hidrogena cuidadosamente a al-
queno con el catalizador de Lindlar, y la hidrólisis del cctal y de los agrupamientos éster en medio ácido origina,
al mismo tiempo, la isomerización de tres dobles enlaces conjugados.
La previtamina resultante se trata con metillitio en éter para dar la,25 (OH)2Dj, con un rendimiento glo
bal del 28 %.
BIBLIOGRAFÍA
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Síntesis de fármacos quirales
J. C. Menéndez
1. CONCEPTOS FUNDAMENTALES Y TÉRMINOS ESTEREOQUÍMICOS
Se dice que dos compuestos son estereoisómeros cuando tienen la misma fórmula molecular y presentan la mis
ma conectividad entre sus átomos, pero se diferencian en la forma en que sus grupos se disponen en cl espacio.
Dos estereoisómeros para los que todas las distancias interatómicas coinciden, pero cuyos grupos están coloca
dos en una secuencia diferente respecto a un elemento central, se denominan enantiómeros (Fig. 26.1). Dos
enantiómeros se comportan como un objeto y su imagen en el espejo y, por tanto, no pueden superponerse. La
propiedad de un objeto de ser diferente (no superponible) a su imagen en el espejo se denomina quiralidad. En la
práctica, la causa más frecuente de quiralidad es la existencia en la molécula de centros estereogénicos
.
* es de
cir. átomos enlazados a grupos diferentes entre sí. El átomo estereogénico más frecuente es el «carbono asimétri
co», unido a cuatro grupos diferentes. Otra posible causa de quiralidad son los ejes estereogénicos (Fig. 26.1).
Figura 26.1. Ejemplos de enantiómeros.
* La quiralidad es una propiedad de la molécula y no de uno de sus átomos. Por ello, es preferible no utilizar el término «centro
quiral» y reemplazarlo por «centro de quiralidad», «centro esterogénico» o «estereocentro».
Los diastereoisómeros pueden distinguirse entre sí por presentar distancias diferentes entre algunos de
sus átomos o grupos de átomos (Fig. 26.2). En la práctica, son diastereoisómeros los compuestos llamados tra
dicionalmente «isómeros geométricos» o «isómeros cis-trans». términos que se aplican a ciertos alquenos y
compuestos cíclicos, así como los compuestos con más de un centro estereogénico de los que alguno o algunos
presentan la misma configuración y otro u otros la opuesta. Los diastereoisómeros con varios centros estereogé-
nicos que difieren únicamente en la configuración de uno de ellos se llaman epímeros. Por lo tanto, ningún
compuesto incluido en un grupo de diastereoisómeros es la imagen especular de otro de dicho grupo o. en otras
palabras, todos los estereoisómeros que no pueden calificarse de enantiómeros son diastereoisómeros.
Figura 26.2. Ejemplos de diastereoisómeros.
La configuración absoluta se relaciona con la disposición de los grupos alrededor de un centro estereo
génico u otro elemento de quiralidad. Se designa con los términos R o S, siguiendo las normas de Cahn, Ingold
y Prelog para clasificar la prioridad de los grupos unidos al centro esterogénico. La configuración absoluta pue
de determinarse por técnicas espectropolarimétricas, aunque el único método totalmente fiable es una técnica
especial de difracción de rayos X debida a Bijvoet. También es posible utilizar métodos de correlación química,
transformando un compuesto de configuración desconocida en otro de configuración conocida, a través de reac
ciones cuyo curso estereoquímico sea también conocido y no afecten a los centros esterogénicos, o lo hagan de
una forma predecible (véase el Capítulo 30).
En el caso de los diastereoisómeros, se habla de configuración relativa para referirse a la disposición de
dos elementos estructurales de la molécula. Así, por ejemplo, se distingue la configuración Z de la E en los al
quenos (Fig. 26.3a) o la cis de la trans en los ciclos (Fig. 26.3b). En el caso de compuestos de cadena abierta
con dos estereocentros. la nomenclatura tradicional para expresar la configuración relativa se basa en la compa
ración de las posiciones de dos grupos situados en los laterales de la proyección de Fischer, llamándose eritro
(de eritrosa) al compuesto que los tiene del mismo lado y neo (de treosa) al que los tiene de lados distintos. De
bido a que esta nomenclatura plantea a veces problemas a la hora de elegir la cadena principal, se ha propuesto
la llamada «notación aldol», en la que esta misma definición se aplica a la molécula dibujada con la cadena
principal en zig-zag. El problema es que ambas notaciones conducen a nomenclaturas opuestas (Fig. 26.3c), por
lo que los términos eritro y tren pueden considerarse ambiguos. Por este motivo, se han introducido otras nota
ciones, como la que utiliza los prefijos .sin y anti para designar la disposición relativa de los sustituyentes res
pecto a una cadena en zig-zag (Fig. 26.3d). aunque tiene el inconveniente de que la 1UPAC aconseja utilizar sin
y anti para indicar el modo de aproximarse las moléculas que intervienen en reacciones de adición. En molécu
las con varios estereocentros, se utiliza como referencia el estereocentro de numeración más baja, y los demás
se describen como sin o anti dependiendo, respectivamente, de que su sustituyeme esté del mismo lado o del
lado contrario que el del estereocentro de referencia.
SÍNTESIS DE FÁRMACOS QUIRALES 773
Ninguno de los términos utilizados para indicar la configuración relativa designa de forma inequívoca a
un solo compuesto, ya que pueden aplicarse al compuesto representado en cada caso, pero también a su cnan-
tiómero; por ejemplo, el compuesto (2R, 3R) de 26.3c es entro, pero también lo es su enantiómero, el compues
to (2S. 35).
(E)-2-Bulcno cír-l.2-Dimetilciclopropano trans-1,2-Dimctilciclopropano

(Z)-2-Buteno
c)
CO,H
H——Br
H—I—OH
CH, CH,
eritro (notación clásica) treo (notación «aldol») treo (notación clásica)
sin
Figura 26.3. Algunas designaciones de la configuración relativa.
La forma más sistemática de designar la configuración relativa se basa en el empleo de los prefijos I (de
like) y u (de unlike). El primero de ellos significa que dos estercocentros tienen la misma configuración según
las reglas de Cahn-Ingold-Prelog, y el segundo que la tienen contraria (Fig. 26.4). Otra manera de indicarla con
siste en escribir la configuración de cada uno de los centros estereogénicos de la molécula. Para indicar que se
está especificando una configuración relativa, se añade un asterisco a cada una de las designaciones RoS; pues
to que una pareja de enantiómeros (por ejemplo, 2R.3R y 2S.3S) tiene la misma configuración relativa, se acep
ta el convenio de escribir únicamente el enantiómero cuyo estereocentro de localizador más bajo sea R (en el
ejemplo anterior, se escribiría * 3R
,2R y no *
)25
.
.35
(2R. 3R) (2R. 3S) I

*.
/; (2R *)
3R ,3S
u; *)(2R
(25. 3R)(
(23.35)
(IR. 2S.4S.6R) I
(IS, 2R.4R,65)| u.I.k *.(\R
W)
2S
4S
Figura 26.4. Algunas designaciones sistemáticas de la configuración relativa.
Los diastcreoisómeros tienen propiedades fisicoquímicas diferentes (punto de fusión, momento dipolar,
espectro de resonancia magnética, comportamiento cromatográfico y de cristalización), y también tienen dife
rente reactividad química. En cambio, los enantiómeros son idénticos, y sólo pueden diferenciarse por su in
teracción con otras entidades quirales. Por ejemplo, dos enantiómeros son idénticos en su comportamiento cro
matográfico, y no pueden separarse salvo que el eluyente o la fase estacionaria sean quirales. En este caso, la
interacción de cada uno de los enantiómeros con el agente quiral origina una pareja de diastereoisómeros. que
ya son separables (Fig. 26.5).
Figura 26.5. Representación esquemática de la interacción entre una pareja de enantiómeros y una fase estacionaria
quiral en cromatografía.
La luz polarizada puede considerarse un agente quiral y. por lo tanto, la polarimetría puede emplearse
para diferenciar dos enantiómeros entre sí. En condiciones iguales, dos enantiómeros producen desviaciones
iguales en cuanto a magnitud, pero de signo opuesto, del plano de polarización de la luz (rotación óptica). El
signo de la rotación se describe mediante los términos dextorrotatorio (d, +) y levorrotatorio (/, -), según que
la desviación se produzca en sentido horario o antihorario, respectivamente. No existe relación entre el signo de
la rotación y la secuencia de los sustituyentes. y de hecho existen compuestos (/?. +) y (R. -), (S. +) y (S, -).
La propiedad de un compuesto de desviar el plano de polarización de la luz se llama actividad óptica.
Se denomina racémico la mezcla de dos enantiómeros en proporciones equimoleculares y, por tanto, es
ópticamente inactivo. Se designa normalmente por el símbolo (+), o bien di. La separación de los dos enantió
meros que constituyen un racémico se denomina resolución. Las principales técnicas de resolución de racémi-
cos se comentarán en el Capítulo 30.
Una mezcla de dos enantiómeros, A y B, en la que predomina uno de ellos (A) se caracteriza por el lla
mado exceso enantiomérico (e.e.). definido como se indica en la ecuación (I ]. Si una muestra tiene un e.e.
del 100 %, se dice que es enantioméricamente pura u homoquiral.
cantidad de A - cantidad de B
% e.e. = % isómero A - % isómero B = -------------------------------------------- x 100 [ 11
cantidad de A + cantidad de B
Así. una mezcla para la cual la relación A/B es 85:15 tendrá un exceso enantiomérico del 70 %.
Si se conoce el exceso enantiomérico y se desea calcular el porcentaje de los dos isómeros, puede hacerse
fácilmente utilizando la expresión [2], donde A es el isómero mayoritario:
% isómero A - % isómero B = % e.e. .

% isómero A + % isómero B = 100 - A isómero A - % e.e. + 100 =^>
Del mismo modo, puede caracterizarse una mezcla de dos diastereoisómeros por su exceso diastereoiso-
tnérico (e.d.):
% e.d. = % diastereoisómero A - % diasteroisómero B

En una molécula aquiral. puede suceder que el entorno de uno de sus grupos sea la imagen especular del
de otro grupo; esos grupos se denominan enantiotópicos. Por ejemplo, el bromoclorometano (Fig. 26.6a) no es
quiral. pero sus hidrógenos son enantiotópicos. En la práctica, la forma más sencilla de decidir si dos átomos o
grupos son enantiotópicos (Fig. 26.6b), es: a) sustituir uno de ellos por un grupo cualquiera (R); b) hacer lo mis
mo con el otro, y c) si se obtiene una pareja de enantiómeros, los dos átomos son enantiotópicos. De igual
modo, si al reemplazar un sustituyente «a» por R se obtiene un compuesto que es diastereoisómero del resul
tante de reemplazar «b» por R. se dice que «a» y «b» son diastereotópicos (Fig. 26.6c).
Figura 26.6. Átomos y grupos enantiotópicos y diastereotópicos.
Los grupos diastereotópicos no son equivalentes y. por tanto, deben diferenciarse en cuanto a su reactivi
dad y su comportamiento en la resonancia magnética. Los grupos enantiotópicos, en cambio, son equivalentes,
excepto cuando interactúan con un agente quiral (Fig. 26.7).
Figura 26.7. Diferente interacción de una molécula aquiral con dos grupos enantiotópicos (a y b) y una entidad quiral.
Dicha interacción se producirá a través de dos o más puntos de la molécula, por lo que será más o menos
completa según participe uno u otro de los grupos enantiotópicos. Esta diferenciación de dos grupos enantiotó-
picos por un entorno quiral constituye la base de la síntesis asimétrica.
Se dice que un átomo de carbono sobre el que existen dos sustituyentes enantiotópicos es proquiral; es
tos dos grupos suelen designarse como «pro /?» y «pro S». Para establecer esta nomenclatura, se asigna arbitra
riamente prioridad al sustituyeme considerado sobre el otro grupo igual a él, y después se opera según las reglas
de Cahn-lngold-Prelog. Por ejemplo, en el iodoclorometano, H * es pro S y Hb es pro R.
pro/?
*
proS => H
Los conceptos de topicidad y proquiralidad pueden extenderse también a dos caras de una molécula. Así,
muchos derivados carbonílicos, como el acetaldehído (Fig. 26.8a) presentan dos caras enantiotópicas, ya que
la adición de un nucleófilo a cada una de ellas origina dos estructuras enantiómeras. Se denomina cara re (del
latín rectus) la que cumple que, si se mira hacia ella perpendicularmente, el observador ve a los tres sustituyen-
tes, una vez determinada su prioridad según las reglas de prioridad de Cahn-lngold-Prelog, en una secuencia en
sentido horario. Si encuentra el orden inverso, la cara se denomina si (del latín sinister; Fig. 26.8b). La adición
a la cara re no origina necesariamente un producto R. Por ejemplo, si el I -etil-1 -feniletileno adiciona HCI por
la cara re, se obtiene (S)-2-cloro-2-fcnilbutano. Sin embargo, la adición de FL por la misma cara proporciona
(/?)- 2-fenilbutano (Fig. 26.8c).
La nomenclatura de los grupos y caras diastereotópicas sigue los mismos principios (Fig. 26.9).
Adición por la
cara superior
Enantiómeros
DNu
u
2) H*
Caras enantiotópicas
Adición por la
cara inferior
Cara inferior, si
Cl
H,C—Z..,CH _CH)
H |CH2-CH3 CtH,
tQH, H
si HjC—¿...CH _CH)
Hi/cat.
(cara re) QH5
Figura 26.8. La nomenclatura re-si.

re si
M VBr
Figura 26.9. Ejemplos de nomenclatura de grupos y caras diastcreotópicos.
2. ESTRATEGIAS GENERALES PARA LA OBTENCIÓN DE COMPUESTOS

ENANTIOMÉRICAMENTE PUROS
La preparación de compuestos enantioméricamente puros ocupa uno de los lugares primordiales de la investigación
en Síntesis Orgánica. Esto se debe, entre otros factores, al reconocimiento por parte de la comunidad científica
de la enantioselectividad de las interacciones entre los compuestos orgánicos y las biomoléculas; como conse
cuencia, tanto la acción farmacológica principal como las propiedades farmacocinéticas (transporte, fijación a
proteínas plasmáticas, almacenamiento o metabolismo) son a menudo diferentes, o incluso opuestas, para dos
enantiómeros.
El procedimiento para la obtención de moléculas enantioméricamente puras se ha basado tradicionalmen
te en el empleo de rutas sintéticas convencionales, seguido de la resolución de los racémicos así obtenidos. Ac
tualmente, se dispone de un número cada vez. mayor de reacciones que proporcionan exclusivamente uno de los
estereoisómeros de una estructura (síntesis asimétrica).
Figura 26.10. Reacción catalizada por bases entre la ciclohexanona y el ioduro de metilo.
El principio básico de la síntesis asimétrica puede resumirse así: dos reacciones competitivas cuyos es
tados de transición sean enantiómeros proceden a igual velocidad; sólo habrá diferencia de reactividad si los
estados de transición son diastereoisómeros. En la práctica, dos estados de transición son enantiómeros si
proceden del ataque a dos caras enantiotópicas del sustrato.
Por ejemplo, en la Figura 26.10, se ha representado el resultado de la reacción entre el ioduro de metilo
y el anión enolato derivado de la ciclohexanona. Puesto que las dos caras de dicho anión son enantiotópicas
y. por lamo, los estados de transición son enantiómeros, las energías de activación de las reacciones que lle
van al producto R y al S son iguales, obteniéndose un racémico.
La forma de lograr que los dos estados de transición sean diastereoisómeros es que exista alguna interacción
entre ellos y alguna otra estructura quiral. es decir, que haya una influencia quiral sobre el transcurso de la reac
ción. De acuerdo con este principio, es frecuente clasificar los métodos de síntesis asimétrica en cuatro categorías:
I. Métodos controlados por el sustrato, o de primera generación. En ellos, un grupo de la molécula sus
trato de la reacción *
)
(S-G es quiral, e induce la transformación estereoselcctiva de la otra parte de la
molécula:
R
S-G
* ------ ► -G
*P
2. Métodos controlados por un grupo auxiliar quiral, o de segunda generación. Se basan en la incorpo
ración temporal al sustrato de un fragmento quiral (auxiliar quiral). que es eliminado después de llevar
a cabo la transformación deseada. La incorporación del auxiliar quiral hace que dos grupos o caras ini
cialmente enantiotópicos se conviertan en diastereotópicos y, por tanto, se hagan diferenciables. Ideal
mente, el auxiliar quiral puede recuperarse al final del proceso, bien directamente, bien tras una trans
formación química sencilla:
3. Métodos controlados por un reactivo quiral, o de tercera generación. La inducción asimétrica procede
de uno de los reactivos utilizados:
4. Métodos controlados por un catalizador quiral. o de cuarta generación. En este caso, la influencia
quiral en el curso de la reacción se debe a un catalizador. Encontrar un catalizador de este tipo consti
tuye el objetivo ideal de la síntesis asimétrica, puesto que. al permitir preparar grandes cantidades de
un compuesto quiral a partir de una pequeña cantidad de catalizador, supone un «ahorro de quiralidad»
y. por tanto, de esfuerzo y dinero. Durante mucho tiempo, las únicas reacciones asimétricas catalíticas
viables han sido las enzimáticas. Sin embargo, en la actualidad se empieza a disponer de catalizadores
asimétricos no enzimáticos.
S —iL» p*
*
Cat.
SINTESIS DE FÁRMACOS QUIRALES 779
3. REACCIONES ESTEREOSELECTIVAS
3.1. Selectividad y especificidad en las reacciones químicas
Si una reacción se produce selectivamente con un grupo funcional en presencia de otro semejante, se describe
como quimioselectiva. Por ejemplo, la metilhidrazina se condensa quimioselectivamente con el grupo aldehido
del aldehido pirúvico. sin que se afecte al grupo cetona (Fig. 26.1 la). Del mismo modo, si una reacción propor
ciona fundamentalmente un isómero de posición entre dos posibles, se dice que es regioselectiva. como sucede
en las adiciones de reactivos polares asimétricos a alquenos, que cumplen la llamada «regla de Markovnikov»
(Fig. 26.1 Ib).
H2N-N(CH,)2
Figura 26.11. Ejemplos de reacciones quimioselectivas y regioselectivas.
De mayor significación en la síntesis asimétrica son los términos estereoselectividad y estereoespeci-

ficidad. Se entiende por reacción estereoselectiva la que produce un estereoisómero con preferencia sobre
otro posible. Por ejemplo, la adición de un magnesiano a un compuesto carbonílico quiral produce pre
ferentemente uno de los diastereoisómeros posibles (véase el Apartado 3.3.1 y la Fig. 26.12a). Una reacción
estereoespecífica es aquella cuyo mecanismo exige una determinada estereoquímica en el producto final:
por tanto, hay un solo producto posible y no se puede hablar propiamente de «selección» .
* Un ejemplo de
reacción estereoespecífica es cualquier proceso SN2, cuyo mecanismo obliga a que transcurra con inversión
de la configuración del átomo sobre el que tiene lugar la reacción (Fig. 26.12b). Una característica de las re
acciones estereoespecíficas es que productos de partida estereoquímicamente diferentes conducen a produc
tos finales estereoquímicamente diferentes. Así, la dihidroxilación de alquenos con tetraóxido de osmio, se
guida de oxidación, conduce a una mezcla racémica, formada por los diastereoisómeros u (R *
, ). si se parte
*
S
del alqueno Z, y en cambio proporciona una mezlca de los diastereoisómeros / (R ,
* ),
*
/? si se parte del alque-
no E (Fig. 26.12c).
El término estereoselectividad engloba los términos enantioselectividad y diastereoselectividad. Si una
reacción permite obtener un enantiómero en exceso sobre el otro posible, se dice que es enantioselectiva. De
igual modo, una reacción es diastereoselectiva si produce un diastereoisómero en exceso sobre otro. Los grados
de enantioselección y diastereoselección se miden, respectivamente, por el exceso enantiomérico y el exceso
diaslereomérico del producto final.
La nomenclatura like-unlike puede extenderse a la descripción de la topicidad de las reacciones diastereo-
selectivas. Para ello, es necesario comparar las designaciones R-S o re-si de los estereocentros y caras implica
das en la reacción, asignándose la denominación Ik (de like) a las combinaciones (R. re) (S. si), (re, re) y (si, si),
y la denominación uk (de unlike) a (R. si), (S. re), (re. si) y (si. re). La topicidad de la reacción (Ik. uk) no guar
da relación directa con la configuración relativa del compuesto obtenido (I, u), como demuestra el ejemplo de la
Figura 26.13.
No obstante, algunos textos definen una reacción estereoespecífica como aquella que transcurre con un 100 % de cstcrcoselec-
tividad.
Figura 26.12. Ejemplos de reacciones estereosclcctivas y estercoespecíficas.
Ataque por
la cara re Ataque ul
(combinación S-re)
Configuración relativa /
Ataque por HO
la cara si
írn „ Alaque «
n / CU2H (combinación S-si)
H3C p
nh2
Configuración relativa u
Figura 26.13. La nomenclatura Ik-ul.
3.2. Principales reacciones estereoselectivas de los alquenos
3.2.1. Oxidación estereoselectiva de los alquenos
Una de las transformaciones más estudiadas es la epoxidación asimétrica, ya que ios epóxidos son intermedios
sintéticos muy útiles que pueden transformarse posteriormente en un gran número de derivados. Los reactivos
más comunes de epoxidación de alquenos son los perácidos, como el ácido m-cloroperbenzoico (MCPBA).
También se utilizan a menudo los hidroperóxidos. como el hidroperóxido de rmbutilo (TBHP), en presencia de
determinados catalizadores de molibdeno, vanadio o titanio (Fig. 26.14a).
La epoxidación de alquenos quirales es frecuentemente diastereoselectiva. Normalmente, la epoxidación
se produce por la cara menos impedida (Fig. 26.14b). pero la presencia de un grupo hidroxilo dirige la reacción
hacia la misma cara donde se encuentre dicho grupo. La razón es la formación de un enlace de hidrógeno entre
el hidroxilo y el reactivo de epoxidación (Fig. 26.14c).
a)
MCPBA
Epoxidación por la cara menos impedida Epoxidación dirigida por un grupo hidroxilo
Figura 26.14. Algunos reactivos de epoxidación. Epoxidaciones diastereoselectivas.
Existen también reacciones de epoxidación enantioselectiva. La más utilizada es la conocida como epoxi
dación asimétrica de alcoholes alílicos de Sharpless. Esta reacción utiliza, como agente oxidante, el hidrope
róxido de rercbutilo y, como catalizador, una especie compleja que se prepara in situ a partir de isopropóxido de
titanio (IV) y diversos ésteres quirales del ácido tartárico, como el tartrato de dietilo (DET) o el de isopropilo
(DIPT), que son la fuente de la quiralidad. El resultado estereoquímico de esta reacción es totalmente predeci
ble. y depende únicamente de la configuración del tartrato de dialquilo empleado (Fig. 26.15). En la versión ini
cial de la reacción, era necesario el empleo de una cantidad equimolecular de tartrato y de isopropóxido de tita
nio. Posteriormente, se ha comprobado que esto se debía a que la presencia de trazas de agua en el medio
HoJI c/00^
D(-)DET
EtO:C
„ OH C0,El
L (+) DET
ElO.C
Figura 26.15. La epoxidación asimétrica de alcoholes alílicos de Sharpless.

destruye el catalizador, y que la adición al medio de tamiz molecular de 4 Á (un agente desecante) hace que la
epoxidación pueda realizarse con cantidades realmente catalíticas (5-10 %) de ambos compuestos.
La especie catalítica parece ser un complejo formado por dos átomos de titanio, dos tartratos y cuatro res
tos de isopropóxido. La reacción transcurre a través del intercambio de dos de los ligandos del titanio por una
molécula del alcohol alílico y una del hidroperóxido. Este intercambio se produce de tal forma que el oxígeno
se transfiere a una cara u otra del alqueno. en función de la estereoquómica del tartrato empleado:
X = CO.Et
La epoxidación de Sharpless se ha aplicado con éxito a la síntesis asimétrica de numerosos fármacos.

Como ejemplo, se representa a continuación una síntesis del isómero activo del cloranfenicol, basada en la epo
xidación de Sharpless del alcohol alílico I, seguida de apertura del epóxido por ataque de azida sódica a la posi
ción menos impedida para dar III. Este compuesto se transforma en el cloranfenicol por reducción selectiva del
grupo azida con trifenilfosfina (otros reductores más convencionales ocasionarían también la reducción del gru
po nitro), seguida de acilación (Fig. 26.16).
CI-CO-CHCI2
Cloranfenicol
Figura 26.16. Síntesis asimétrica del elorenfenicol basada en la epoxidación de Sharpless.

Una aplicación interesante de la epoxidación de Sharpless consiste en la resolución cinética de mezclas

racémicas de alcoholes alílicos quirales cuyo centro estereogénico esté en la posición alílica. El proceso se basa
en que uno de los dos enantiómeros tiene un sustituyeme bloqueando la cara del doble enlace por la que debe
producirse la oxidación, por lo que ésta es más lenta que en el otro enantiómero. Si se adicionan tan sólo 0,5
equivalentes del hidroperóxido de rerc butilo, suele ser posible lograr que sólo se epoxide uno de los dos enan
tiómeros, quedando el otro sin alterar (Fig. 26.17). Al obtenerse dos compuestos químicamente distintos, la se
paración posterior del alcohol deseado es sencilla.
(+)-DIPT.
Ti(O-iPr).,
0,5 Eq. de rBuOOH,
(+) - DIPT
Reacción lenta
(4-) - DIPT
Reacción rápida
Figura 26.17. Resolución cinética basada en la epoxidación de Sharpless.
La epoxidación de Sharpless no tiene lugar en alquenos que no presenten la estructura de alcohol alílico.
Por tanto, se ha desarrollado una intensa investigación orientada a la búsqueda de métodos más generales de
epoxidación asimétrica.
El método más prometedor se basa en el uso de un catalizador desarrollado por Jacobsen (compuesto 1,
Fig. 26.18a), que permite la epoxidación enantioselectiva de alquenos cis utilizando hipoclorito sódico como
oxidante.
La configuración absoluta del producto obtenido puede predecirse de manera muy sencilla, como se in
dica en la Figura 26.18b, siendo G el grupo de mayor tamaño de los dos unidos al doble enlace y P el más pe
queño.
(S,S)-1, NaOCI
Figura 26.18. La epoxidación de Jacobsen de ds-alquenos.

Finalmente, mencionaremos la existencia de una variante asimétrica (también desarrollada por Sharpless)
de la reacción de dihidroxilación de alquenos por adición de tetraóxido de osmio seguida de oxidación (p. ej.,
con el /V-óxido de la A'-metilmorfolina, NMO).
Se ha comprobado que la adición al medio de reacción de determinados compuestos quirales hace que
transcurra de forma enantioselectiva.
Los ligandos quirales más utilizados se muestran en la Figura 26.19 y son derivados de la dihidroquinidi-
na (DHQD) o de su enantiómero. la dihidroquinina (DHQ), que contienen un anillo de ftalazina (PHAL).
(DHQD),-PHAL (DHQ)rPHAL
Figura 26.19. Principales ligandos quirales ulilizados en la dihidroxilación asimétrica de Sharpless.
Aunque no se conoce totalmente la estructura del centro catalítico, suele aceptarse el modelo representa
do en la Figura 26.20, cuya aplicación permite predecir en muchos casos el resultado estereoquímico de la reacción.
G representa el grupo más voluminoso de los que están unidos al doble enlace carbono-carbono.
Figura 26.20. Predicción de la estereoquímica de la dihidroxilación asimétrica de Sharpless.
Se representa a continuación la aplicación de este modelo a la predicción del resultado de la dihidroxila

ción asimétrica de algunos alquenos (Fig. 26.21).
Como ejemplo de aplicación en el campo de la síntesis de fármacos, se resume, en la Figura 26.22, una
síntesis asimétrica del antagonista de calcio diltiazem, que comienza con la preparación del diol quiral I. por
aplicación de la dihidroxilación asimétrica de Sharpless. El compuesto I es transformado en el heterociclo II
por reacción con ortoacetato de trietilo. Cuando se trata II con cloruro de trimetilsililo, se obtiene el cloruro IV
de forma regio y estereoselectiva, ya que la reacción se produce selectivamente sobre el oxígeno vecino al ani
llo aromático, menos impedido, resultando el intermedio III. que reacciona con el anión cloruro a través de un
mecanismo SN2, con inversión del estereocentro. El tratamiento de IV con la sal potásica del o-aminobenceno-
tiol transcurre con una nueva inversión de tipo Sn2, volviendo el estereocentro a su configuración inicial. Resul
ta así el compuesto V, que se transforma en el diltiazem por delación, a través del ataque intramolecular del
grupo amino sobre el éster, seguida de alquilación para introducir la cadena de dimetilaminoetilo en el nitróge
no amídico. En el Apartado 5.3 del Capítulo 22. se comenta otra estrategia de síntesis del diltiazem. que requie
re la resolución de un intermedio racémico.
Figura 26.21. Ejemplos de dihidroxilaciones asimétricas de Sharpless.
3.2.2. Reducción asimétrica de alquenos
El desarrollo de hidrogenaciones catalíticas enantioselectivas se ha orientado hacia el uso de catalizadores ho

mogéneos. La primera especie soluble capaz de catalizar eficazmente una hidrogcnación fue el complejo cloro-
tris(trifenilfosfina)rodio («catalizador de Wilkinson») (Fig. 26.23a). Tras su descubrimiento, se han desarrolla
do numerosos análogos quinales, según varias estrategias. Una posibilidad consiste en el empleo, como ligandos
del rodio, de fosftnas cuyo átomo de fósforo es un centro estereogénico, como el DIPAMP. En otros casos, la
quiralidad reside en la cadena carbonada de uno de los sustituyentes del átomo de fósforo, como se observa en
el quirafos. Un ejemplo de aplicación industrial de este tipo de hidrogenación puede encontrarse en la síntesis
enantioselectiva de l-DOPA, que se representa en la Figura 26.23b.
Más recientemente, Noyori ha desarrollado una serie de fosfinas basadas en la quiralidad del binaftilo,
como el BINAR Sus complejos de rutenio permiten la hidrogenación catalítica totalmente enantioselectiva de
dobles enlaces carbono-carbono (y carbono-oxígeno). En la Figura 26.23c se presenta una síntesis asimétrica
del enantiómero activo del naproxeno basada en el empleo de este tipo de catalizadores.
3.2.3. Hidroboración asimétrica
La hidroboración asimétrica de alquenos es una reacción especialmente importante porque podría servir de base
para la preparación asimétrica de numerosas estructuras con diferentes grupos funcionales, teniendo en cuenta
la gan variedad de compuestos orgánicos que pueden obtenerse a partir de los boranos.
Figura 26.22. Síntesis asimétrica del diltiazcm.
Figura 26.23. Hidrogenación asimétrica de alquenos.

Se han desarrollado numerosos reactivos quirales de hidroboración a partir de alquenos naturales. Por
ejemplo, la reacción del borano con a-pineno (Fig. 26.24a) conduce, dependiendo de las proporciones molares
de los reactivos, al isopinocanfenilborano (relación 1:1) o al diisopinocanfenilborano (relación 2:1) (recorde
mos que, en la hidroboración de alquenos, el boro se une al carbono menos sustituido del doble enlace). Ambas
reacciones son ejemplos de hidroboración asimétrica controlada por la estereoquímica del compuesto de parti
da. Estos boranos, a su vez, permiten la hidroboración asimétrica de otros alquenos.
(+)-<x-Pincno Isopinocanfenilborano Diisopinocanfenilborano

IpcBH, (Ipc).BH
h2o,.oh-
>99%ee
Figura 26.24. Hidroboración asimétrica de alquenos.
Por ejemplo, la reacción entre el isopinocanfenilborano y el fenilciclopentcno (Fig. 26.24b) proporciona

el borano I de forma enantioméricamente pura, adicionándose el boro al carbono menos sustituido del doble en
lace. Aprovechando la reactividad típica de los organoboranos, este compuesto puede transformarse fácilmente
en un ciclopcntanol enantioméricamente puro por oxidación con peróxido de hidrógeno en medio básico: en
este último paso, se respeta la estereoquímica establecida durante la hidroboración, ya que el mecanismo de la
etapa de oxidación no involucra a los centros estereogénicos.
En la Figura 26.25, se resume un ejemplo de aplicación de la hidroboración asimétrica a la síntesis de un
fármaco. El tratamiento del derivado del ciclopentadieno I con diisopinocanfenilborano, seguido de oxidación,
proporciona cl alcohol quiral II en forma enantioméricamente pura. La epoxidación del doble enlace de II tiene
lugar por la misma cara en la que se encuentra el grupo hidroxilo, según se expuso en el Apartado 3.2.1, y condu
ce a III. Tras la protección del grupo hidroxilo (compuesto IV), se hace reaccionar el grupo epóxido con uracilo,
en presencia de hidruro sódico en exceso. Aunque el nitrógeno 3 del uracilo es más ácido que el nitrógeno 1. en
estas condiciones se genera el dianión de uracilo. que tiende a reaccionar por el nitrógeno menos impedido (N-1),
obteniéndose V. Los pasos finales consisten en la eliminación del grupo hidroxilo utilizando una reacción radica
laria que no comentaremos, la desprotección de los otros dos hidroxilos por hidrogenación catalítica y, finalmen
te. la iodación de la posición 5 del sistema de uracilo. Se obtiene así un análogo del antiviral idoxuridina. en el
que se ha llevado a cabo la sustitución isostérica del oxígeno heterocíclico de la ribosa por un grupo metileno.
3.3. Reacciones de compuestos carbonílicos
3.3.1. Adición de nucleófilos a compuestos carbonílicos quirales
Si un compuesto carbonílico es quiral, las dos caras del grupo carbonilo son diastereotópicas. Por tanto, cabe
esperar que la adición de un nucleófilo transcurra con una cierta diastereoselectividad, especialmente si exis
te un centro estereogénico vecino al grupo carbonilo (véase, p. ej., la Fig. 26.12a). Se han propuesto varios
modelos que permiten predecir el producto mayoritario de una reacción de este tipo, de los cuales comentare
mos a continuación el llamado modelo de Felkin-Ahn. Si se clasifican los tres sustituyentes del carbono ve
cino al carbonilo. de acuerdo con su volumen, como «grande» (G), «mediano» (M) y «pequeño» (P), se asu-
7XX INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
Ph ~\
Análogo carbocíclico
de la idoxuridina
Figura 26.25. Síntesis asimétrica de un análogo carbocíclico de la idoxuridina.
Mayoritario
Minoritario
Figura 26.26. Adiciones diastereoselectivas a un grupo carbonita. Regla de Felkin-Ahn.

SÍNTESIS DE FÁRMACOS QUIRA1.ES 789
me que la situación más favorable corresponde al nucleófilo atacando al carbonilo en disposición anliperiplanar
respecto al grupo G*
. Esto permite los dos modos de ataque que se representan en la Figura 26.26. de los cuales
es preferente el que hace que el sustituyente R del carbonilo quede eclipsado con el grupo P. y no con el M.
Como se indica en la Figura 26.27, si en el carbono vecino al carbonilo existe un heteroátomo X con pa
res no enlazantes (p. ej„ OH, OR, NHR. etc.), el sentido de la diastereoselección cambia si se utilizan nucleófi-
los que posean contraiones metálicos (M).
Estos cationes serían quelados por el grupo X y el oxígeno carbonílico previamente al ataque nucleófilo,
fijando la conformación del compuesto. El nucleófilo tiende a atacar el carbonilo por la cara correspondiente al
sustituyente pequeño (P).
Figura 26.27. Adición nucleófila a un carbonilo controlada por efectos de quelación.
3.3.2. Alquilación estereoselectiva de derivados carbonílicos
Se han desarrollado numerosos grupos auxiliares quirales que permiten lograr la alquilación asimétrica de deri
vados carbonílicos a través de la formación de aniones cnolato quirales. Entre los más utilizados, pueden citarse
la (S)-l-amino-2-(metoximetil)pirrolidina (SAMP) y su enantiómero de configuración R (RAMP), desarrolla
dos por Enders:
NH, OCH,
SAMP RAMP
La hidrazona formada por reacción entre una cetona y el SAMP puede desprotonarse por acción de una
base fuerte como el diisopropilamiduro de litio (LDA). Resulta un anión quiral, con dos caras diastereotópicas,
que es atacado por haluros de alquilo por la cara re (es decir, en el sentido «/), debido a que la coordinación del
* Como se observa en la Figura 26.26. el ángulo de ataque más favorable es de 109.5”. según demuestran consideraciones estereo-
electrónicas en las que no entraremos.
790 INTRODUCCIÓN A LA QUÍ MICA FARMACÉUTICA
litio por el oxígeno del grupo metoxi y el nitrógeno del enolato hace que la cara si esté bloqueada
* (este resulta
do estereoquímico se ha explicado también a través de modelos diferentes al aquí expuesto). Posteriormente, la
ozonólisis del grupo de hidrazona conduce a la cetona a-alquilada y a un derivado nitrosado, a partir del cual es
fácil regenerar el SAMP por reducción. En la Figura 26.28, se muestra la aplicación de esta técnica a la síntesis
de la (S)-4-metil-3-heptanona, una feromona de alarma de las hormigas
**
.
Figura 26.28. Alquilación estereoselectiva de la 3-pentanona utilizando SAMP como auxiliar quiral.
Un segundo grupo auxiliar quiral de interés son las oxazolinas quirales de Meyers. El carbono 2 de un
sistema de 2-oxazolina es similar al de un grupo carbonilo, por lo que los hidrógenos de un metilo unido a él son
ácidos y pueden alquilarse en presencia de bases (Fig. 26.29).
LDA R-X
- LiX
Figura 26.29. Alquilación de derivados de 2-metil-2-oxazolina.
Si el sistema de oxazolina es quiral, esta alquilación puede transcurrir con una elevada diastereoselecti-
vidad. Un tipo de oxazolinas quirales de gran interés son los compuestos III. preparados por reacción entre
los imidatos I y el aminoalcohol quiral II, procedente de un subproducto de la producción microbiológica del
cloranfenicol.
* En este caso, re y si se refieren al átomo de carbono que actúa como nucleófilo. Las dos caras del carbono vecino al nitrógeno
tienen las denominaciones contrarias.
** Las feromonas son sustancias químicas que sirven para la comunicación entre miembros de la misma especie. Las de los in
sectos son especialmente importantes, por su interés en la lucha contra las plagas. Por ejemplo, se pueden utilizar feromonas sexuales para
desorientar a los insectos macho acerca de la localización de las hembras, impidiendo la reproducción, o bien para atraerlos a trampas que
contengan un insecticida, sin necesidad de esparcir éste sobre los cultivos.
La desprotonación de III con LDA seguida de la adición de un haluro de alquilo R!-X conduce a V de
forma diastcreoselectiva; esta transformación se interpreta en términos de la formación de un anión enamidu-
ro de configuración Z, que es alquilado por su cara re porque el derivado halogenado está inmovilizado en
esa cara debido a su coordinación con el litio, cuya posición está a su vez fijada por coordinación al nitróge
no y al grupo metoxilo (Fig. 26.30).
Finalmente, la hidrólisis de V permite recuperar el auxiliar quiral II y proporciona ácidos carboxílicos
quirales (compuestos VI), que pueden transformarse fácilmente en otros derivados, como ésteres, amidas, et
cétera.
Teniendo en cuenta que el imidato inicial procede del nitrilo R'-CHj-CN. la transformación en su con
junto equivale a la alquilación asimétrica de éste en la posición vecina al grupo nitrilo.
EtOH, HCI
80 - 90 % ee
Figura 26.30. Síntesis asimétrica de ácidos carboxílicos quirales utilizando la oxazolina de Meyers.
El grupo de auxiliares quirales derivados de la oxazolina sirve también para dirigir la estereoquímica de
adiciones de Michael. Se sabe que la posición 4 de la piridina equivale al extremo de un sistema de imina a. (J-
insaturada, por lo que puede ser atacada por nucleófilos; este proceso puede favorecerse por la alquilación o la
acilación del nitrógeno de piridina, debido a que se genera sobre él una carga positiva. Así, a partir del nitrilo I
puede obtenerse fácilmente el derivado quiral II. utilizando el método explicado en el Esquema 26.30. Cuando
se trata el compuesto II con fenillitio seguido de cloroformiato de etilo, se produce una coordinación del reacti
vo de litio al átomo de nitrógeno y al oxígeno del grupo metoximetilo del auxiliar quiral (intermedio III).
Esta coordinación fija el compuesto litiado en la cara opuesta a la que ocupa el metoximetilo, y condicio
na la estereoquímica de la adición posterior sobre la posición 4 del sistema de piridina. favorecida por la aci
lación del nitrógeno por el cloroformiato de etilo. Se dispone así de una síntesis asimétrica de derivados de 4-
aril-1,4- dihidropiridina IV. que posteriormente pueden transformarse cn diversos compuestos de tipo V por
hidrólisis del grupo auxiliar quiral y manipulación de grupos funcionales (Fig. 26.31). El interés de los deriva
dos de 1,4-dihidropiridina como bloqueantes de los canales del calcio es sobradamente conocido.
En algunas ocasiones, el auxiliar quiral desempeña a la vez el papel de grupo protector. Esta situación se
produce en la síntesis asimétrica de a-aminoácidos resumida en la Figura 26.32 (método de Schóllkopf). El
objetivo es alquilar, de forma enantioselectiva, el carbono proquiral de la glicina de modo que se obtengan ami
noácidos de configuración R. opuesta a la de los naturales. La alquilación en medio básico de la posición a de la
glicina podría llevarse a cabo fácilmente, siempre que se emplearan los grupos protectores adecuados, pero no
existiría enantioselectividad. Por el contrario, la unión de la glicina a la (S)-valina o a la (S)-leucina mediante las
técnicas habituales de la síntesis de péptidos, para originar el derivado de 3-alquil-2,5-piperazinadiona I, permi-
Figura 26.31. Síntesis de 4-aril-1.4-dihidropiridinas quirales.
CO,H
(S)-Lcucina
Figura 26.32. Síntesis asimétrica de (R) a-aminoácidos por el método de Schdllkopf.

SÍNTESIS DE FÁRMACOS QU1RALES 793
te lograr simultáneamente la protección de los grupos amino y carboxilo y la inducción asimétrica buscada. En
efecto, la O-metilación de I con la llamada «sal de Meerwein» conduce a II. estructura en la que los únicos hi
drógenos atacables por una base son los que inicialmente correspondían al carbono a de la glicina (el hidrógeno
correspondiente de la leucina está más impedido). El anión III así originado se alquila por la cara opuesta a
donde está situado el voluminoso grupo isobutilo de la leucina. dando IV como resultado. Puesto que este com
puesto contiene en su estructura dos unidades de iminoéter (imidato), señaladas en la figura, puede ser hidroli-
zado en condiciones suaves, proporcionando el áster metílico del aminoácido deseado y el aminoácido utilizado
como auxiliar quiral, en forma de éster.
3.3.3. Reducción estereoselectiva de compuestos carbonílicos
Una técnica relativamente frecuente en síntesis asimétrica consiste en reemplazar uno de los grupos de un agen
te convencional por una estructura quiral, a menudo derivada de un producto natural. Por ejemplo, se ha descri
to la preparación de algunos boranos quinales reductores, entre los que destaca el llamado borano «Alpine». Es
te compuesto se obtiene por reacción entre el a-pineno y el 9-BBN, un borano secundario muy impedido que se
incorpora al doble enlace del pineno por la cara opuesta al puente que contiene los dos metilos (Fig. 26.33a). El
borano «Alpine» reduce las cetonas a alcoholes secundarios quirales con excesos enantioméricos aceptables,
siempre que los dos grupos unidos al carbonilo sean de tamaños claramente distintos, y funciona especialmente
bien en el caso de las cetonas acetilénicas. La reducción del grupo carbonilo se debe a la transferencia de un hi
drógeno en p respecto al boro, a través de un estado de transición hexagonal en el que la cetona se orienta de
modo que su grupo menos voluminosos (el grupo etinilo) se coloca vecino al metilo de la molécula del a-pine
no (Fig. 26.33b).
Figura 26.33. Reducción enantioselectiva de cetonas acetilénicas por un borano quiral derivado del a-pineno.
También se han desarrollado reductores quirales equivalentes al hidruro de litio y aluminio (Fig. 26.34).
Mencionaremos el BINAL-H, que cede su hidruro al grupo carbonilo a través del estado de transición hexago
nal representado en la Figura 26.24, donde el sustituyeme más voluminoso de los unidos al carbonilo adopta
una disposición ecuatorial.
Este reactivo proporciona una excelente estereoselectividad en el caso de cetonas a.[i-insaturadas. inclu
yendo las aril cetonas.
(S)-BINAL-H
Figura 26.34. Ejemplo de un reductor quiral análogo al hidruro de litio y aluminio.
Finalmente, mencionaremos la existencia de catalizadores quirales que permiten la reducción enantiose-

lectiva de cetonas proquirales. Destacan los compuestos I y II, llamados «catalizadores CBS» (Corey-Bakshi-
Shibata), representados en la Figura 26.35a. Se utilizan en conjunción con el borano o el borohidruro sódico,
que son los agentes reductores (Fig. 26.35b), y su modo de acción se basa en que permiten la coordinación si
multánea del agente reductor y el compuesto carbonílico por la cara menos impedida del catalizador, según el
modelo representado en la Figura 26.3.5c.
OH
1(10%).
BH,
Figura 26.35. Reducción asimétrica de cetonas con los catalizadores de Corey-Bakshi-Shibata.

3.4. Enzimas en síntesis asimétrica
Existen dos modalidades principales del empleo de enzimas en síntesis asimétrica:
a) Empleo de enzimas aisladas, bien como tales, bien inmovilizadas sobre diversos soportes, lo que per
mite emplear medios no acuosos, haciéndose así posible cl uso de una mayor variedad de sustratos.
Para que las reacciones sean económicamente viables, es conveniente que sea posible reciclar la enzi
ma y sus cofactores.
b) Empleo de células enteras: es frecuente, por ejemplo, cl uso de levadura de panadería, una fuente ex
traordinariamente económica de enzimas. Si se usa este método, se dispone de la ventaja adicional de
que los cofactores son reciclados por cl propio sistema celular. La principal limitación de este tipo de
reacciones reside en la necesidad de que el sustrato sea soluble en los medios acuosos de cultivo y sea
captado al interior de las células.
Las enzimas se han utilizado con frecuencia en procesos de resolución cinética, en los cuales la enzima
actúa sobre una mezcla racémica y cataliza más eficazmente la reacción de uno de los dos enantiómeros, trans
formándolo y permitiendo su separación del enantiómero que no ha participado en la reacción. La resolución de
racémicos se comentará con más amplitud en el Capítulo 30.
Otro tipo de procesos en los que las enzimas son de gran utilidad son los denominados procesos de asi-
metrización, que permiten transformar un compuesto meso en un producto quiral.
Normalmente, el compuesto meso de partida tiene dos grupos éster enantiotópicos, que la enzima utiliza
da es capaz de discriminar, hidrolizando sólo uno de ellos. El resultado es un producto quiral. ya que desapare
ce el plano de simetría de la molécula (Fig. 26.36a).
Del mismo modo, se pueden lograr procesos de asimetrización basados en reacciones de esterificación.
como se observa en la etapa clave de una síntesis de la aristeromicina. un antibiótico con estructura de nucleósi-
do carbocíclico (Fig. 26.36b).
a)
Esterasa hepática
porcina
Plano de simetría
Compuesto meso
CH,-CO-O-CH=CH,
Lipasa de
Pseudomonas fluorescens
> 99 % ee
Aristeromicina
Figura 26.36. Ejemplos de asimetrización de compuestos meso.
Además de las reacciones de hidrólisis y esterificación. existen otras reacciones de interés en la síntesis de
fármacos que se llevan a cabo con enzimas aisladas o células enteras.
En la Figura 26.37, se han seleccionado algunas de estas reacciones: puede encontrarse otro ejemplo en el
Apartado 4.2.
Figura 26.37. Algunas reacciones cnzimáticas de oxidación y reducción de interés en la síntesis de fármacos.
4. UTILIZACIÓN DE SUSTRATOS QUIRALES
La mayor parte de los productos naturales quirales se aíslan en forma enantioméricamente pura.
El aprovechamiento de estos centros estereogénicos ya construidos constituye el método más sencillo,
desde el punto de vista conceptual, para la preparación de compuestos enantioméricamente puros.
Dentro de este objetivo, pueden concebirse dos tipos de situaciones:
a) Si se pretende preparar análogos o derivados de un determinado producto natural, es posible que los
centros estereogénicos ya presentes en el sustrato induzcan diaslereoselectividad en las reacciones que
se lleven a cabo sobre éste.
b) A menudo, es factible la manipulación de la estructura de un producto natural para transformarlo en
otra molécula de interés, sin inducir nuevos estereocentros.
4.1. Estereoselectividad en las reacciones de productos naturales
Un claro ejemplo de diastereoselección debida a efectos esféricos se encuentra en el campo de la química de los
esteroides. en los que la llamada «cara p» experimenta un impedimento muy superior al de la «cara a», por lo
que las reacciones, como la epoxidación representada en la Figura 26.38a, tienen lugar preferentemente desde
ésta.
Como ejemplo de estereoselección debida a efectos de quelación en el campo de la química de productos
naturales, se ha representado, en la Figura 26.38b, el resultado de la hidroboración del isopulegol. que se produ
ce desde la cara inferior de la molécula porque el borano se coordina previamente con el oxígeno carbonílico
próximo al doble enlace.
Una limitación, a veces muy difícil de superar, de las reacciones estereoselcctivas llevadas a cabo sobre
sustratos quirales se produce cuando la orientación debida al sustrato es opuesta a la debida al reactivo. Por
ejemplo, en la Figura 26.39. se ha representado el curso estereoquímico de la reducción de un intermedio de la
síntesis de prostaglandinas (I) por el BIN’AL-H. La existencia de un elevado impedimento en la cara inferior del
producto de partida hace que exista una considerable diaslereoselectividad en la reducción por hidruros aquira-
les, estando favorecida la formación del alcohol S. Este efecto se suma a la selectividad propia del (S) BINAL-
Figura 2638. Ejemplos de diasleroseleclividad en reacciones de productos naturales.
H. por lo que la reducción con este agente conduce a un producto II con un 99 % de exceso enantiomérico. Por
el contrario, si se desea obtener el alcohol R. el resultado obtenido es inaceptable (36 % de e.e. para III), porque
ambos efectos actúan en sentido opuesto.
Situaciones como la anterior sólo se resuelven satisfactorimente si se dispone de un reactivo capaz de in
ducir una estereoselectividad superior a la debida a cualquier sustrato: por ejemplo, la epoxidación de Sharpless
es excelente en este sentido. Si tal reactivo no existe, puede resolverse el problema mediante el uso de reaccio
nes que permitan la inversión controlada de un centro estereogénico. Así, el compuesto II de la Figura 26.39
puede obtenerse en forma enantioméricamente pura a partir de I mediante la esterificación de Mitsunobu, por
Reductor aquiral 85 |5
(S) B1NAL-H 99.5 0.5
(R) B1NAL-H 32 68
Figura 2639. Resultado estcreoquímico de algunas reducciones de precursores de prostaglandinas.

EtO2C-N=N-CO,Et
(DEAD)
RCO,H. PPh-
EtO2C-NH-NH-CO2Et
Figura 26.40. La reacción de Mitsunobu como técnica para invertir la configuración de un centro cstereogénico portador
de un grupo hidroxilo.
reacción del alcohol I con un ácido carboxílico en presencia de azodicarboxilato de dietilo y trifenilfosfina (Fi
gura 26.40a). En el mecanismo de esta reacción (Fig. 26.40b) hay una etapa Sn2 sobre el centro estereogénico
que contiene el hidroxilo, por lo que éste se invierte. La hidrólisis posterior del éster origina el alcohol deseado,
invertido respecto al inicial.
Figura 26.41. Síntesis de vitamina C a partir de l.-glitcosa.

4.2. Transformación de productos naturales en compuestos de interés
Como ejemplo de la utilización de esta estrategia, se ha resumido en la Figura 26.41 una de las rutas sintéti
cas que permiten transformar la D-glucosa en ácido ascórbico (vitamina C). En esta ruta, los centros estereo-
génicos C-2 y C-3 de la glucosa pasan a ser los carbonos C-4 y C-5 del ácido ascórbico, por lo que ninguna
reacción necesita ser cstereoselectiva.
El único problema importante a resolver consiste en la oxidación selectiva de uno de los hidroxilos pri
marios y uno de los secundarios del D-sorbitol. La secuencia se inicia con una oxidación enzimática, llevada
a cabo por Acetohacter suboxydans, en la que se resuelve el segundo de los problemas con una eficacia difí
cil de alcanzar por los métodos químicos tradicionales, ya que se evita el uso de grupos protectores.
El resto de la ruta es más convencional, y se basa en el tratamiento de la L-sorbosa con acetona en me
dio ácido, en el que se protegen las dos estructuras de c/.v-diol en forma de acetal, quedando libre únicamente
el hidroxilo primario que se desea oxidar. Dos etapas finales de desprotección y ciclación en medio ácido
conducen, finalmente, al ácido L-ascórbico (y-lactona de la forma enólica del ácido 2-oxo-L-gulónico).
Erwinia herhicola recombinante

que contiene el gen que codifica
la 5-oxorreductasa de Corynebacterium
CO,H
H—|— OH
HO------H Erwinia herbicolaHO—|_ H Corynebacterium HO—I— H H+
* H—|— OH
H------ OH H OH
H------ OH 0=0 HO------- H
ch2oh
CH2OH — CH2OH CH2OH Ácido L-ascórbico
D-Glucosa Ácido 2.5-dioxo-L-gulónico Ácido 2-oxo-L-gulónico
Figura 26.42. Síntesis de vitamina C por métodos totalmente cnzimáticos.
Se han desarrollado también rutas totalmente enzimáticas para obtener la vitamina C (Fig. 26.42). En una
de ellas, la D-glucosa se transforma en el ácido 2-oxo-L-gulónico a través de una oxidación inicial por Erwinia
herbicola de las posiciones 1, 2 y 5, que origina el ácido 2.5-dioxo-L-gulónico, que es reducido posteriormente
por un Corynebacterium. También se han puesto a punto las técnicas de ingeniería genética necesarias para in
corporar en el ADN de una cepa de Erwinia herbicola la secuencia de bases que codifica la biosíntesis de la en
zima de Corynebacterium que realiza la reducción final, resultando así un nuevo organismo capaz de transfor
mar en un solo paso D-glucosa en ácido 2-oxo-L-gulónico.
BIBLIOGRAFÍA
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Brown, C. (ed.): Chirality in Drug Design and Synthesis. Academic Press, 1990.
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Ward, R. S.: Selectivity in Organic Synthesis. John Wiley and Sons, 1999.
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Introducción al análisis
farmacéutico
C. Avendaño
1. ANÁLISIS, DESARROLLO Y COMERCIALIZACIÓN DE FÁRMACOS
El uso de técnicas analíticas muy sensibles es imprescindible para el control de calidad que determina la efica
cia y seguridad de los medicamentos, de tal forma que el desarrollo de un fármaco incluye necesariamente la
puesta a punto de ensayos analíticos para su cuantificación, así como la de los productos de su posible degrada
ción física, química o metabólica. Por otra parte, el análisis de los metabolitos es un aspecto fundamental en los
estudios farmacocinéticos que determinan la biodisponibilidad y la duración de la respuesta terapéutica.
Los ensayos analíticos se hacen necesarios antes de los ensayos clínicos, cuando se realizan los estu
dios de toxicidad en animales que son responsables en gran medida del elevado coste de los fármacos. En
ellos, es fundamental asegurarse del empleo de fármacos de elevada pureza para poder atribuir a éstos, y no
a los contaminantes, cualquier efecto tóxico observado. El protocolo del registro de un nuevo fármaco o me
dicamento para su posible comercialización, una vez establecidas su inocuidad y su eficacia (índice terapéu
tico). ha de incluir los ensayos de identidad y pureza que controlen su fabricación de forma sistemática y
uniforme. En la fabricación ha de controlarse igualmente la calidad de los productos terminados, de las ma
terias primas y de los productos intermedios, y aunque muchos procesos están automatizados, a fin de aho
rrar tiempo y dinero, es necesario que el profesional comprenda los principios básicos en que se basan estos
métodos y, en su caso, esté capacitado para la puesta a punto y selección de los más adecuados a un nuevo
producto. Para proponer un nuevo método de análisis o seleccionar para su aplicación uno conocido, es ne
cesario conocer las propiedades físicas y químicas asociadas con la estructura y composición del producto
en cuestión.
Cuando se pone a punto cualquier método de análisis se requiere su validación. El método descrito debe
incluir los principios en los que se basa y las referencias bibliográficas correspondientes, las especificaciones de
los instrumentos y del equipo, los requisitos del material a analizar, incluidas las condiciones de almacenamien
to, los diferentes reactivos, su procedencia comercial y el grado de pureza, su preparación y sus concentraciones
expresadas en las unidades adecuadas, la descripción detallada de todos los pasos (especialmente de los críti
cos). cualquier precaución acerca de la seguridad en la manipulación de las muestras, la eliminación de los resi
duos. el procedimiento de calibración de los instrumentos, el cálculo de los resultados, las descripciones de los
compuestos de referencia (estándar) y el intervalo analítico (intervalo de concentraciones de los compuestos en
la muestra para el que puede aplicarse el método sin modificación).
Básicamente, existen dos tipos de procedimientos analíticos. Los adecuados al control de su fabricación
han de ajustarse a las «buenas prácticas de laboratorio» (BPL o GLP. del inglés good laboratory practices') y
suelen ser confidenciales entre el laboratorio y el organismo oficial competente. Otros procedimientos se incor
poran a los códigos oficiales, farmacopeas o formularios, que son compendios en los que se reconocen oficial
mente y se recogen las normas que debe satisfacer cualquier sustancia de origen natural o de síntesis, para ser
utilizada en Farmacia y Medicina como droga, fármaco o medicamento. También describen e informan acerca
de un fármaco, además de determinar los límites de pureza y las condiciones de almacenamiento. En los países
más desarrollados suelen aparecer, cada cierto intervalo de tiempo, nuevas ediciones que incorporan los nuevos
ensayos.
La descripción completa de un fármaco comprende generalmente: el nombre, la fórmula y el peso mole
cular; el aspecto (color y olor) y las propiedades físicas (espectroscopia infrarroja, de resonancia magnética, es
pectrometría de masas, ultravioleta, fluorescencia, rotación óptica, punto de fusión, calorimetría diferencial,
análisis termogravimétrico, pKa, solubilidad, propiedades cristalinas y polimorfismo). El fenómeno del po
limorfismo es muy común dentro de ciertos grupos de fármacos (barbitúricos, esteroides, sulfamidas), y afecta
notablemente a sus propiedades farmacocinéticas y a su estabilidad. Un polimorfo es un compuesto sólido, ca
paz de presentarse en dos o más disposiciones, que dan lugar a especies cristalinas diferentes.
Son pruebas típicas para la identificación de un compuesto: el punto de fusión, la espectroscopia UV e IR.
la cromatografía y las reacciones específicas de coloración. Un gran número de productos farmacéuticos se va
loran. además, por procedimientos gravimétricos y volumétricos. Los métodos puramente físicos utilizan desde
el microscopio, el polarímetro o el refractómetro, a las modernas técnicas espectroscópicas. El control de la pu
reza enantiomérica en el caso de sustancias quirales, así como los ensayos límite del agua y de impurezas como
sulfatos, haluros, metales pesados, etc., también es habitual.
Los métodos químicos clásicos de identificación consisten en el desarrollo de reacciones que producen
color, un precipitado, o un gas que se desprende. Por otro lado, las valoraciones cuantitativas pueden realizarse
a través de reacciones de neutralización (valoraciones volumétricas de ácidos o bases en medios acuosos o no
acuosos) o por precipitación (basada en la combinación de dos especies iónicas que forman una sal insoluble).
La complexometría es otro método analítico volumétrico que determina iones metálicos a través de sus reaccio
nes con reactivos que forman complejos o quelatos. Finalmente, los métodos de óxidorreducción valoran la
transferencia de electrones entre un agente reductor y otro oxidante.
Los ensayos de pureza fijan el límite de impurezas aceptables (ensayos límite), y pueden ser sencillos
(como determinar la pérdida de peso por desecación) o más complejos, en cuyo caso requieren el uso combina
do de cromatografía de gases o líquida y espectrometría de masas. Si los ensayos tienen que determinar especí
ficamente la cantidad de principio activo (o principios activos) en un medicamento o formulación, éste ha de se
pararse previamente de otras sustancias acompañantes aplicando técnicas de separación que van desde la
extracción hasta las distintas cromatografías.
Además de los ensayos físicos y químicos, existen los ensayos biológicos, entre los que se encuentra el
clásico y obligado control de esterilidad o pirogenicidad. Se denominan bioensayos a aquellos que sirven para
cuantificar un principio activo en función de una respuesta biológica. En la actualidad, pueden utilizarse en
ciertos casos como métodos analíticos superiores en especificidad y sensibilidad a otros métodos. El ejemplo
más clásico es el de la valoración de antibióticos o antibacterianos mediante la utilización de un modelo mi-
crobiológico. Si se incuba un fármaco a diferentes diluciones con el microorganismo apropiado y se encuentra
cuál es la dilución a la que se produce la inhibición de su crecimiento, dado que se conoce ésta para la sustan
cia pura (CMI=concentración mínima inhibitoria), puede determinarse la concentración inicial por una simple
proporción.
La determinación de un fármaco (o la de sus metabolitos) en medios biológicos (generalmente, orina o
plasma) puede requerir el uso de compuestos marcados con isótopos estables, y muchos estudios relacionados
con el mareaje de receptores requieren también compuestos marcados con isótopos radioactivos.
Las modernas técnicas de cribado de compuestos, que determinan si éstos interactúan con receptores uti
lizando volúmenes de picolitros en equipos robotizados. han requerido el desarrollo de tecnologías analíticas
miniaturizadas.
Por todo ello, los métodos de análisis son tan variados y sofisticados que. obviamente, se escapan del al
cance de este texto. No obstante, comentaremos en éste y posteriores capítulos algunos aspectos.
INTRODUCCIÓN AL ANÁLISIS FARMACÉUTICO 803
2. ELECCIÓN DE MÉTODOS DE ANÁLISIS Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS
La elección de un método de análisis depende del propósito de la valoración, según sea cualitativa, cuantitativa
o semicuantitativa, así como de la complejidad de la muestra. La cantidad y la pureza de ésta, junto con las dis
ponibilidades económicas y de técnicas instrumentales, son los parámetros más determinantes. El mejor método
de análisis será el más sencillo de los que posean la sensibilidad que se precise. Un método puede ser muy sen
sible para una sustancia pura pero inaplicable a una mezcla compleja, por lo que, frecuentemente, es necesaria
la preparación previa de la muestra a fin de separar sus constituyentes.
La determinación de un fármaco en una forma farmacéutica (un comprimido, por ejemplo) es relativa
mente sencilla. Basta coger una muestra, triturarla y practicar el análisis concreto en una fracción del polvo. La
identificación de impurezas y de productos de degradación requiere varias separaciones químicas y, después, el
análisis de los productos aislados. Para separar trazas, se utilizan frecuentemente la cromatografía de gases o la
líquida de alta resolución, pero técnicas más antiguas, como la cromatografía en capa fina, la cristalización o la
destilación fraccionadas, así como la extracción con disolventes, son todavía muy utilizadas. Los métodos clási
cos de identificación mediante la preparación de derivados se utilizan en las farmacopeas junto con los métodos
espectroscópicos. Para la identificación de productos desconocidos, se utilizan casi exclusivamente el análisis
elemental, la resonancia magnética nuclear, la espectroscopia infrarroja, la espectrometría de masas, y, especial
mente, la cromatografía de gases o la cromatografía líquida combinadas con espectrometría de masas (CG/EM
o CL/EM).
Los estudios de estabilidad requieren detectar pequeños cambios que pueden ser significativos a lo largo
del tiempo de almacenamiento. La CG y la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), los métodos es-
pectrométricos, las valoraciones gravimétricas. volumétricas y electroquímicas, son capaces de tal precisión.
El control de calidad del producto final (para su comercialización) requiere la especificación muy estre
cha de los límites de pureza y concentración, para lo que se usan la HPLC o la CG, por su sencillez, velocidad,
buena especificidad y excelente precisión. Cuando no se dispone de estos métodos, hay que combinar un ensa
yo cuantitativo preciso, aunque no específico, frecuentemente volumétrico o espectrofotométrico, con una cro
matografía cualitativa (capa fina) para demostrar la ausencia de impurezas. Los ensayos de control de calidad
de un producto farmacéutico comprenden:
1) La identificación, para confirmar la identidad del componente principal (ensayos de color, punto de
fusión del fármaco o de un derivado, espectro infrarrojo (IR), de resonancia magnética nuclear (RMN)
o de masas (EM). difractograma de rayos X de polvo. Rt o tiempo de retención en cromatografía, rota
ción óptica. índice de refracción o densidad).
2) El análisis cuantitativo de dicha sustancia, a fin de determinar el porcentaje de pureza o el contenido
de los ingredientes activos en una formulación. Los métodos de análisis cuantitativos pueden ser abso
lutos, es decir, que no requieren un estándar de la misma sustancia. Entre ellos, se encuentran los pro
cedimientos de volumetría y de gravimetría (incluyendo el análisis elemental), la RMN, la culombi-
metría y la termogravimetría. También pueden ser relativos, es decir, que requieren un estándar de
referencia de pureza definida o un patrón interno, como la CG, la HPLC, UV-Vis, IR, fluorescencia o
polarografía. Algunos ensayos cualitativos también son relativos, como la identificación por el tiempo
de retención, el volumen de retención o el R(.
3) Los ensayos de impurezas específicas, como agua, disolventes, metales y trazas de otros compuestos
orgánicos, que utilizan algunos de los métodos de análisis cuantitativos absolutos o relativos ya men
cionados, además de la absorción atómica, la emisión atómica o los ensayos que utilizan el tamaño re
lativo de las manchas en los cromatogramas de capa fina, o la comparación visual del color en los en
sayos colorimétricos.
4) El examen de otras impurezas, mediante distintas cromatografías o clectroforesis.
5) La forma cristalina, incluyendo la posible existencia de polimorfos (rayos X o IR), la esterilidad, los
pirógenos, el tamaño de partícula, la densidad, el color, el olor. etc.
Por otro lado, la determinación de fármacos en medios biológicos como la orina y el plasma, en los que se
encuentran en concentraciones muy bajas, requiere una preparación de muestra más laboriosa mediante una ex
tracción previa líquido-líquido (de una fase acuosa, como las citadas, a un disolvente orgánico) o líquido-sólido.
804 INTRODUCCIÓN A l,A QUÍMICA FARMACÉUTICA
en cuyo caso un sólido retiene al compuesto en cuestión y deja pasar al resto, eluyéndose aquél posteriormente
con el disolvente adecuado.
3. TÉCNICAS DE SEPARACIÓN
Cuando un compuesto se agita con dos disolventes no miscibles, generalmente agua y una fase orgánica, se re
parte entre ambos según su solubilidad. La relación de concentraciones es el coeficiente de reparto (véase el Ca
pítulo 5).
Para planificar una extracción líquido-líquido ha de elegirse cuidadosamente la polaridad y el pH de los

disolventes. Si sólo hay que separar y cuantificar un fármaco conocido, debe elegirse el disolvente menos polar
que lo extraiga eficazmente de una fase acuosa. Sin embargo, si hay que separar varios compuestos, debe usarse
un disolvente relativamente polar, como el éter etílico o el diclorometano, para asegurar que se han extraído to
dos ellos.
El uso de disolventes orgánicos sólo permite la separación de sustancias con coeficiente de reparto muy
diferente, aunque si se realiza la extracción a distintos valores de pH, se logra además una separación de sustan
cias ácidas, básicas y neutras. La adición de un ácido inorgánico fuerte al medio acuoso reduce el grado de di
sociación de los ácidos orgánicos que pueden estar disueltos. Se obtiene, de este modo, una mayor concentra
ción de la forma no disociada más lipófila, que pasará al disolvente orgánico. Las bases, en cambio, sufrirán una
protonación, con el consiguiente aumento de su hidrofilia, y permanecerán en el medio acuoso. De la fase orgá
nica, podrán separarse los ácidos de las sustancias neutras que pueden haberse extraído conjuntamente por una
segunda extracción de la misma con una solución acuosa alcalina, que disolverá los ácidos en su forma ioniza
da. quedando las sustancias neutras retenidas en la fase orgánica. Por otro lado, de la solución acuosa ácida, se
liberan las bases fuertes después de alcalinizar, y pueden extraerse posteriormente con un disolvente orgánico.
Para el aislamiento de los compuestos anfóteros, debe alcanzarse su punto isoeléctrico. En la Figura 27.1, se re
coge un esquema de separación de fármacos según el método de Stas-Otto.
Figura 27.1. Esquema de separación de fármacos según el método de Stas-Otto.

A veces, se aparea un fármaco ionizado con un conlraión de carga opuesta, para dar un par iónico con car
ga cero, que suele extraerse eficazmente con diclorometano o cloroformo. Para las bases ionizadas, es muy fre
cuente utilizar como contraión el perclorato; para los ácidos, el tetrabutil- o tetrapentilamonio.
En la extracción líquido-sólido, se utiliza una gran variedad de materiales, como carbón activo, sílice, alú
mina y resinas de cambio iónico. Se aplica la muestra, por ejemplo, orina, y se lava posteriormente con agua.
Después se eluye con el disolvente o mezclas de disolventes adecuados, se evaporan éstos y se analiza el re
siduo.
4. TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS
Actualmente es inconcebible un laboratorio de análisis que carezca de técnicas cromatográficas. Éstas permiten
separar mezclas de compuestos en función de su diferente distribución entre dos fases, una estacionaria y otra
móvil. Las más utilizadas son las de adsorción o de partición, según que la fase estacionaria sea sólida o líquida.
Entre las cromatografías de adsorción, se encuentran la cromatografía en columna, que se utiliza para purificar
compuestos a escala preparativa, y la de capa fina (TLC, del inglés thin layer chromatography), que puede uti
lizarse con fines analíticos (la mayor parte de las veces) o preparativos. Cuando, en esta última, la fase estacio
naria tiene un tamaño de panícula más pequeño y una capa más fina, se denomina cromatografía de capa fina de
alta resolución (HPTLC. del inglés high performance thin layer chromatography).
Las placas que se utilizan en cromatografía de capa fina pueden poseer un indicador de fluorescencia. De
esta forma, los compuestos que absorben en el ultravioleta pueden visualizarse muy fácilmente exponiéndolos a
dicha radiación. También pueden rociarse las placas con diferentes reactivos para lograr visualizar las manchas
de cada componente mediante reacciones de coloración (véase el Capítulo 28).
Las cromatografías de partición son más versátiles y son las que más se utilizan en análisis. En ellas, la
fase estacionaria suele empaquetarse en una columna. En la cromatografía gas-líquido (CGL), la fase móvil es
un gas, mientras que en la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), la fase móvil es un líquido. La
CGL se utiliza para moléculas no polares relativamente pequeñas, térmicamente estables. Si carecen de estas
propiedades, los compuestos pueden derivarse químicamente antes de su separación. La técnica HPLC com
plementa la CGL, ya que resulta adecuada para moléculas grandes, polares, y térmicamente inestables. Ambas
se basan en el reparto de cualquier compuesto que se introduzca en la fase móvil con la fase estacionaria, de
pendiendo de su solubilidad en ambas. Por ejemplo, si en la CGL la fase estacionaria es polar, los compuestos
no polares de una mezcla serán muy poco solubles en ella y se eluirán de la columna por la fase gaseosa móvil
rápidamente. Por lo tanto, no se separarán bien, siendo crucial en cualquier cromatografía la elección de la co
lumna adecuada.
El tiempo que tarda un compuesto en atravesar la columna se llama tiempo de retención (TR). y es cons
tante para unas condiciones experimentales determinadas: temperatura, composición y velocidad de flujo de la
fase móvil, tipo y dimensiones de la columna, etc. Si el compuesto se aplica disuelto en un disolvente volátil.
Figura 27.2. Número de platos teóricos de una columna.

como ocurre en la CGL. no suele medirse el tiempo absoluto de elución, sino el relativo al disolvente. En la
HPLC, se utilizan los volúmenes de retención (VR), y en la TLC y la HPTLC, el factor de retención (R(), que
es la distancia que recorre el compuesto en relación con la que corre la fase móvil (frente del disolvente).
Por asociación con la eficacia de una columna de destilación, la eficacia de una columna de cromatografía
se mide por el número de platos teóricos (N), que varía según la muestra que se cromatografía. Éste es propor
cional al cuadrado de la distancia entre la inyección y el pico (máximo) cromatográfico e inversamente pro
porcional al cuadrado de la anchura de este pico (Fig. 27.2).
Si se divide la longitud de la columna por el número de platos teóricos, se tiene el equivalente de altura de
cada plato teórico (HETP. del inglés height equivalent of a theoretical plate). Otros parámetros importantes son
la resolución de la columna para dos compuestos (/?). la eficacia del disolvente (a) y el factor de separación
(FS, Fig. 27.3).
x = volúmenes de retención no corregidos

.r'= volúmenes de retención ajustados
Figura 27.3. Algunos parámetros cromatográficos: resolución, eficacia del disolvente y factor de separación.
Es importante obtener los picos más estrechos posibles y la mejor separación. En la CGL. la muestra se
disuelve en un disolvente orgánico volátil y se introduce en la columna mediante diferentes sistemas de in
yección.
Se utilizan sobre todo columnas capilares, en las que la fase estacionaria utiliza un soporte previamente
unido a sus paredes.
Su elección se basa en el conocido principio de «lo semejante disuelve a lo semejante». Así, para la cro
matografía de compuestos no polares se utilizan fases estacionarias no polares, muchas de las cuales son polí
meros de polisiloxano (-Si(RR')-O-Si(RR')-O-Si(RR')-O-)„, cuya polaridad varía según los sustituyentes R y R'.
Existen multitud de sistemas de detección.
Cuando un fármaco es demasiado polar, y por tanto poco volátil para ser detenninado por GLC, puede ha
cerse reaccionar químicamente para producir derivados menos polares y. en consecuencia, más volátiles.
La derivación puede también utilizarse para obtener un compuesto menos volátil a fin de separarlo de otro
compuesto de polaridad muy semejante que, de otra forma, interferiría la resolución.
Las reacciones de derivación más utilizadas son las de sililación de grupos funcionales como CO>H.
OH, NHR y compuestos carbonílicos enolizablcs (Fig. 27.4), existiendo una amplísima bibliografía al res
pecto.
Donador de
trimetilsililo
N—Si(CH3
Figura 27.4. Ejemplos de reacciones de derivación utilizadas en la CGL.
Las reacciones de sililación se llevan a cabo en pequeños viales cerrados, utilizando disolventes polares
apróticos (DMSO. DMF, piridina. CH3CN o THF). Existen numerosos reactivos sililantes, como el cloruro de
trimetilsililo o trimetilclorosilano (TMCS), el 1.1,3.3-teirameiildisilazano (TMDS). la trimetilsilildimetilamina
(TMS-DMA) o el /V-trimctilsililimidazol (TMSI), entre otros muchos (Fig. 27.5).
Algunos reactivos de sililación Nombre
(CH3)3SiCl TMCS
H(CH3)2SiNHSi(CH3),H TMDS
(CH3)3SiN(CH3)2 TMS-DMA
(CH,)3Sí—N TMSI
Figura 27.5. Algunos reactivos de sililación.
También son frecuentes para este propósito las reacciones de acilación de aminas, alcoholes y lióles. El
reactivo acilante, que se utiliza en exceso, suele ser un anhídrido en un disolvente como piridina (o mejor 4-di-
metilaminopiridina), para que neutralice el ácido que se libera. Otros reactivos utilizados son los haluros de áci
do y los acilimidazoles (Fig. 27.6).
R-XH + (CHjCOfeO
O ° R-X-CO-CH,
(ch,)2n—c 'n
Figura 27.6. Derivación por acilación.
Entre otros derivados, destaca la transformación de aminoácidos en compuestos volátiles capaces de de
tectarse con CG-EM a través de su reacción con dialquilacetales de A'./V-dimetilformamida (como DMF-DMA,
Fig. 27.7). La reacción transcurre a través del ion carboxilato del aminoácido y un ion metoximetileniminio.
HOCH,
®
R—CH—CO,H + <H,C),N—CH ' 3 J * R—CH—CO2+ (H,C),N = CH—OCH,+ H,COH
I ‘ OCH, I
NH, NH,
No volátil
R—CH—CO® + H,C—O—CH= NCr,,, --------- ►
R—CH—CO,CH, + O = CH—N(CH,),
' o CH,
NH, NH,
HOCH,
R—CH—CO,CH, —R—CH—CO,CH,
I I
HNyCH—N(CH,)2 N = CH—N(CH,)j
¿OCH, Derivado volátil
Figura 27.7. Derivación de aminoácidos por reacción con DMF-DMA.
Las aminas suelen derivarse también a compuestos menos polares en forma de carbamalos por reacción
con cloroformiato de etilo. Por otra parte, muchos compuestos orgánicos que contienen dos o más grupos fun
cionales polares adyacentes (dioles, hidroxiácidos e hidroxiaminas, por ejemplo) pueden derivarse a alquilboro-
natos con ácido alquil borónico (Fig. 27.8). Si R = Me (o n-Bu). estos derivados son muy volátiles.
I
R = Me. n-Bu
Boronato muy volátil
Figura 27.8. Derivación a alquilboronatos.
La técnica HPLC se utiliza de forma sistemática con una preparación de muestra muy sencilla en el análi
sis de fármacos en líquidos biológicos y en el análisis de formulaciones farmacéuticas. Existen dos modalida
des: de partición en fase normal o en fase inversa (que se aplican según convenga). Si el fármaco no es hidroso-
luble, se utiliza la cromatografía de partición en fase inversa con una fase móvil polar (metanol. acetonitrilo o
mezclas acuosas); si es polar, se utiliza la cromatografía de partición en fase normal, con una fase móvil relati
vamente no polar. La fase inversa permite variar más parámetros. Si el fármaco es iónico (y, por tanto, hidroso-
luble), se utiliza la cromatografía de cambio iónico con fase móvil polar, y si tiene un peso molecular superior
a 2000, se utiliza la cromatografía de exclusión molecular (permeabilidad de geles) y una fase móvil polar.
Los sistemas de inyección son variados y pueden ser automáticos. En cuanto a los detectores más po
pulares, aparte del de índice de refracción, que es poco sensible, se encuentran los de absorción UV (los más
adecuados para fármacos o sus derivados que poseen grupos cromóforos con gran absorción), que pueden ser
de longitud de onda fija (más sensibles y estables) o variable. Los detectores de fluorescencia permiten deter
minar menores concentraciones, pero requieren que los fármacos posean fluorescencia natural o se deriven
con los reactivos adecuados. Por último, los detectores electroquímicos, cuando pueden aplicarse, son muy
sensibles.
En la HPLC, se pueden utilizar las reacciones de derivación antes o después de la separación (aunque es
mejor antes); además de utilizarse para variar la polaridad, pueden emplearse para aumentar la respuesta de un
detector a un determinado compuesto, Las reacciones de derivación más utilizadas en la HPLC se dirigen a la
obtención de derivados fluorescentes, siendo de menor importancia las que pretenden producir cromóforos de-
tcctables al UV. También pueden derivarse dos enantiómeros para formar diastereoisómeros que pueden sepa
rarse en columnas convencionales no quítales (véase el Capítulo 30).
Entre los reactivos utilizados para la detección en el UV/Vis para incorporar al fármaco grupos cromó-
foros están el p-nitroacetato de /V-succinimidilo, el cloruro de 3.5-dinitrobenzoilo (para alcoholes o aminas) y el
hidrocloruro de O-p-nitrobencilhidroxilamina (para compuestos carbonílicos. Fig. 27.9).
Figura 27.9. Reacciones de derivación utilizadas en HPLC para la detección UV/Vis (alcoholes, aminas y compuestos
carbonílicos).
Para los ácidos carboxílicos, se utilizan la O-(p-nitrobencil)-/VA'-diisopropilurca o el bromuro de p-bro-

mofenacilo (Fig. 27.10).
N-CH(CHak NHCH(CH02
O,N CH2-O-C + RCO2H © o=c
NHCH(CHa)2 NHCH(CH02
Figura 27.10. Reacciones de derivación utilizadas en HPLC para la detección UV/Vis (ácidos carboxílicos).
Las reacciones de derivación se comentarán más ampliamente en el Capítulo 28.
5. OTRAS TÉCNICAS ANALÍTICAS NO ESPECTROSCÓPICAS
Entre los ensayos límite para determinar impurezas en fármacos, la humedad que puede absorberse durante el
almacenamiento se determina por la pérdida de peso experimentada después del secado o por el método de Karl
Fischer. Los equipos automatizados para este propósito suelen utilizar una valoración electroquímica.
Los materiales no volátiles inorgánicos se determinan por calcinación y análisis de las cenizas. Respecto a
las impurezas metálicas, las farmacopeas hacen especial hincapié en el control de elementos tóxicos (arsénico y
antimonio) y de metales pesados (plomo, cadmio y mercurio). El contenido de éstos se controla generalmente
mediante análisis gravimétricos, haciendo uso de reactivos precipitantes (como el tratamiento con bisulfuros o
sulfuras alcalinos en el caso del Pb). El bario (que también es tóxico) se investiga por adición de ácido sulfú
rico, mientras que el calcio, el magnesio y el estroncio se investigan por precipitación o por espectrofotometría
de absorción atómica. Los metales alcalinos se cuantifican por espectrofotometría de emisión atómica. El alu
minio, añadiendo 8-hidroxiquinolina y midiendo la fluorescencia del complejo originado. Por último, entre las
varias formas de determinar el arsénico, se encuentra su transformación a arsina (AsFL) por reducción con Zn
y HCI.
En cuanto a los aniones, los ensayos límite de iones cloruro se basan en su precipitación con nitrato de
plata, en presencia de ácido nítrico diluido, comparando la opalescencia con la de soluciones patrón que contie
nen cantidades conocidas de este ion. La contaminación con ioduros se determina a través de su oxidación a
iodo y extracción de éste en cloroformo; los sulfatos por precipitación con cloruro bárico; el cianuro se valora
con nitrato de plata, etc. El boro, que es tóxico, se detecta a través de su conversión a borato.
El control de las impurezas orgánicas, dado que pueden ser extraordinariamente variadas, requiere, en al
gunos casos, su separación previa por métodos físicos (como las cromatografías), y la conjunción de técnicas
espectroscópicas y ensayos químicos específicos diseñados para determinar impurezas orgánicas. Entre éstos se
encuentran las valoraciones volumétricas, que utilizan un reactivo en un disolvente apropiado con una concen
tración determinada al que se añade la disolución de la sustancia a determinar, en presencia de un indicador. El
volumen de reactivo consumido al producirse el cambio del indicador (generalmente, un cambio de color) sirve
para calcular la cantidad de sustancia presente. Cuando se realiza una valoración en un medio no acuoso, pue
den utilizarse técnicas muy diversas para detectar el punto final.
b)
R^Ñ—CHj—R ■ ► '/bi—CH,—R —R N=CH—R ~ »
R Catión radical R Radical
R’x ® N® R'x
^N = CH—R » ^N—CH—R
R" R" ¿u
c) CH,—CH=CH, + CH,CH,CH,
2 CH,—CH—CH, Desproporción
Radical ^CHj CHj
/CH—CH
CH/ XCH,
Figura 27.11. Algunas transformaciones de intermedios producidos en la reducción u oxidación electroquímica

de compuestos orgánicos.
Otros métodos de detección y cuantiftcación son los polarográftcos, un conjunto de técnicas voltamétricas
que, en esencia, utilizan un potenciómetro unido a dos electrodos. Se aplican a metales y varios compuestos or
gánicos. En las especies inorgánicas, suele haber un cambio en el estado de oxidación de un metal, mientras que
en los compuestos orgánicos la oxidación o reducción electroquímica supone con frecuencia la interconversión
de grupos funcionales, reacciones de sustitución, adición, eliminación, acoplamiento o ruptura. Una de las ven
tajas de las técnicas electroquímicas, en comparación con otras técnicas, es su reproducibilidad. Por ello, han
encontrado muchas aplicaciones para la cuantiftcación de un fármaco en una forma farmacéutica y en muestras
biológicas, así como para la de sus impurezas y productos de degradación.
Es importante señalar aquí que la transferencia de electrones a estructuras orgánicas supone, en general, la
destrucción de la muestra, ya que los iones radicales o los radicales neutros suelen ser inestables. Aunque cier
tos radicales pueden ser bastante estables para obtener espectros, casi nunca son estables indefinidamente, sien
do productos intermedios de diferentes transformaciones químicas. Así, la adición de un electrón a una quinona
origina un anión radical (primer paso de una reacción de reducción) que puede seguir adicionando otro electrón,
para dar un dianión, en una transferencia electrónica generalmente más difícil que la primera, o puede adicionar
rápidamente protones u otros electrófilos (Fig. 27. lia). Ciertos cationes radicales, por pérdida de un protón y un
electrón, se convierten en especies electrófilas que adicionan agua u otros nucleófilos (Fig. 27.1 Ib). Por otra
parte, las especies radicálicas pueden desproporcionarse o dimerizarse (Fig. 27.11c).
6. ENZIMAS EN EL ANÁLISIS FARMACÉUTICO
Las enzimas y sus cofactores se valoran normalmente en el plasma mediante análisis clínicos, a fin de determi
nar la desviación del estado normal del individuo. Pero, además, dado que por su especificidad y sensibilidad
pueden detectar concentraciones de sustrato del orden de 10 M, pueden utilizarse para la detección de sus sus
tratos. Así, por ejemplo, las penicilinas pueden determinarse cuantitativamente utilizando p-lactamasas. Tenien
do en cuenta el precio de las enzimas como reactivos analíticos, se suelen utilizar inmovilizadas. También pue
den acoplarse a un electrodo adecuado.
7. UTILIZACIÓN DE ISÓTOPOS
Tanto los isótopos estables como los radiactivos se utilizan en muchos estudios relacionados con la farmacoci-
nética, mareaje de receptores, etc. Sin ellos, careceríamos de muchos de nuestros actuales conocimientos sobre
la acción de los fármacos.
Los isótopos estables se utilizan para la detección e identificación de metabolitos y en el estudio de los
mecanismos de las reacciones metabólicas. Todos los elementos que se encuentran en los compuestos orgáni
cos. fundamentalmente C, H, O y N, se encuentran en la naturaleza como mezclas que contienen, en pequeñísi
ma proporción, uno o varios de sus isótopos más pesados (Tabla 27.1).
Tabla 27.1. Algunos isótopos estables
Abundancia
Elemento Isótopo natural
Hidrógeno 'H 99,985

H (deuterio) 0,015
Carbono I.’C 98.893
”c 1,107
Nitrógeno UN 99,634
,lN 0.366
Oxígeno "O 99.63
"O 0,037
'"0 0,204
Por ello, es posible preparar compuestos enriquecidos en un determinado isótopo que. a excepción de al
gunos compuestos deuterados, poseen propiedades fisicoquímicas y biológicas casi iguales a las de los com
puestos no enriquecidos. En el caso del deutcrio. el gran aumento de masa atómica respecto al hidrógeno au
menta la energía necesaria para romper el enlace C-'H. por lo que si la actividad farmacológica o la toxicidad de
un fármaco dependen de la ruptura de uno de estos enlaces, su comportamiento será diferente.
Existe en el mercado una gran variedad de precursores marcados. Pueden adquirirse, por ejemplo, carbo
nates y cianuros marcados con BC. agua deuterada e hidruros metálicos marcados con ’H, agua y oxígeno mar
cados con '"O y, con ellos, puede realizarse la síntesis de fármacos marcados. La pureza isotópica de los com
puestos así obtenidos se determina por espectrometría de masas, ya que cada pico del espectro del compuesto
mostrará el pico isotópico correspondiente al cambio de masa, mientras que la localización del isótopo en la
molécula puede comprobarse por resonancia magnética.
Cuando se estudia el metabolismo de los fármacos mediante espectrometría de masas después de su sepa
ración por CGL o HPLC, o por introducción directa de la muestra volatilizada tras su destilación fraccionada,
puede ser difícil reconocer cuál de los espectros registrados corresponde a un metabolito, salvo que el fármaco o
sus metabolites originen fragmentos iónicos característicos. Esto ocurre cuando contienen átomos que poseen
uno o más isótopos con relativa abundancia. Por ejemplo, el bromo está constituido por los isótopos ”Br y "'Br
en proporción 1 /I. Por lo tanto. la detección de los picos correspondientes a fragmentos que contienen bromo es
muy fácil, ya que se observan como dobletes separados por dos unidades de masa atómica. Según esto, pueden
prepararse mezclas artificiales de fármacos marcados con algún isótopo estable y de fármacos no marcados, que
originarán señales desdobladas en los picos correspondientes a los fragmentos en los que esté incorporado el
isótopo. Los isótopos más utilizados en este sentido son el ”C y el deuterio.
En cuanto a los isótopos radiactivos que son emisores de radiaciones (electrones de gran velocidad, ra
diaciones electromagnéticas de longitud de onda corta, o una combinación de ambas), en la Tabla 27.2 se reco
gen los que se utilizan en estudios bioquímicos. Las energías duras (o altas), como la del ’’P, pueden medirse
muy bien, mientras que las bajas, como la del tritio (3H), requieren técnicas de amplificación. Cuando se pre
paran compuestos marcados con radioisótopos, la riqueza isotópica se mide en milicurios/milimol o microcu-
rios/mg (mCi/mmol o pCi/mg). Los procedimientos para prepararlos son los mismos que para una síntesis
normal, pero se eligen procesos de pocos pasos y de alto rendimiento partiendo de precursores marcados ya
comercializados. Así. el reactivo Li AIjH4 se utiliza para introducir tritio en una reducción, el agua tritiada, el
ácido acético tritiado (CHjCOr’H), y el metano! tritiado (CH<O’H), se utilizan para el intercambio de protones
«ácidos», etc. La identificación y la determinación de la pureza radioquímica de los compuestos así marcados
se realizan por técnicas cromatográficas usuales utilizando un detector de radiactividad.
A pesar de su alto precio, los isótopos radiactivos resultan ventajosos para muchas medidas que requeri
rían, de otro modo, experimentos difíciles y tediosos, por lo que muchos se han aplicado en medidas de la ab
sorción, distribución, metabolismo y excreción de fármacos. Los estudios metabólicos suelen realizarse in vitro
en tejidos aislados, células o fracciones subcelulares. Entre los isótopos radiactivos de vida media larga, el que
más se utiliza como trazador es el l4C. El ’H y el OII se utilizan más en medidas de afinidad («binding») con re
ceptores.
Por ejemplo, si el diazepam radiomarcado se une específicamente a una determinada fracción de un de
terminado tejido, dicha fracción será un receptor de benzodiazepinas. La capacidad de otras benzodiazepinas
Tabla 27.2. Algunos isótopos radiactivos utilizados para marcar moléculas en estudios
bioquímicos.
Período de semi- Radiación

Isótopa desintegración
* principal
l4C 5760 años p
'H 12 años p
J5S 87 días p
'2p 14 días p
“ci 3 x 105 años p
”'l 8 días
para desplazar al diazepam marcado de su receptor se correlacionará con la afinidad (y. por tanto, la poten
cia) de éstas.
También se utilizan fármacos marcados con radioisótopos para diagnósticos clínicos.
BIBLIOGRAFÍA
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Watson. D. G.: Pharmaceutical Analysis. Churchill Livingstone. Edimburgo. 1999.
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Análisis de fármacos basado

en la reactividad de grupos
funcionales
M. Espada y J. C. Menéndez
1. INTRODUCCIÓN
1.1. Conceptos previos
Un grupo funcional puede definirse como un conjunto de átomos que muestra una reactividad química caracte
rística. La determinación de compuestos orgánicos a través de las reacciones de sus grupos funcionales es uno
de los métodos analíticos más antiguos, y todavía resulta de gran utilidad. En su aplicación a problemas farma
céuticos, el análisis funcional suele aplicarse a productos puros (materias primas, componentes activos o exci
pientes). aunque también puede ser útil su empleo sobre mezclas, si el objetivo es la detección de una impureza
no deseada.
El análisis basado en reacciones de grupos funcionales consta normalmente de dos etapas: la reacción
analítica en sí y la detección del derivado formado. Si el objetivo que se persigue es la identificación cualitativa,
normalmente se buscarán reacciones que permitan una detección visual directa, lo que implica la formación de
un derivado coloreado. Estas reacciones se emplean en conjunción con ciertos datos físicos (punto de fusión,
poder rotatorio, etc.) y espectroscópicos (fundamentalmente, absorción en el infrarrojo), y se incluyen muy fre
cuentemente como parte de las monografías contenidas en las farmacopeas. El análisis cuantitativo de fárma
cos, por su parte, exige con frecuencia la formación de derivados, con objeto de lograr su detección y cuantifi-
cación mediante espectrofotometría ultravioleta-visible o espectrofluorimetría, o bien de mejorar sus
propiedades con vistas a la separación cromatográfica.
1.2. Relación entre estructura y absorción en el ultravioleta-visible
La radiación electromagnética ultravioleta-visible tiene una energía que se corresponde con la necesaria para lo
grar tránsitos entre niveles electrónicos moleculares. Puesto que es menos energética, la radiación visible per
mite únicamente la excitación de electrones débilmente unidos a sus átomos, como los electrones n deslocaliza
dos. Por tanto, puede concluirse que el color suele estar asociado a sistemas n deslocalizados extensos.
Se llama cromóforo a un grupo de átomos responsable de la absorción de energía luminosa en la región
ultravioleta-visible. Debido a la mayor excitabilidad de los electrones n. éstos se comportan como cromóforos
en el ultravioleta próximo (X = 200 a 400 nm) y en el visible (X = 400 a 800 nm). La conjugación tiende a es
tabilizar el estado excitado más que el fundamental; por ello, cuanto más extensa es, menor es la diferencia en
tre ellos, y la molécula considerada absorbe a mayor longitud de onda, es decir, más cerca del visible (efecto
batocrómico). Los electrones a sólo son cromóforos respecto al ultravioleta lejano (X = 10 a 200 nm). más
energético.
Cuando en la misma molécula coexisten dos cromóforos, el comportamiento observado depende de la
forma en la que se unen ambos. La unión directa da lugar a un nuevo cromóforo, con propiedades distintas
(p. ej.. C=C y C=C=C, Tabla 28.1). Los cromóforos conjugados dan lugar a un efecto batocrómico, mientras
que los aislados (separados por más de un enlace o) se comportan independientemente.
Tabla 28.1. Absorción en el UV-visible de algunos alquenos y polienos
Grupo Xltíx ("<") £
C=C 170 10.000
c=c=c 225 500
c=c-c=c 220 21.000
c=c-c=c-c=c 260 35.000
Un auxocromo es un grupo que, unido a un cromóforo, provoca un desplazamiento batocrómico y. gene

ralmente, un incremento en absorbancia. Los más comunes son los grupos nitro, hidroxilo, amino, mercapto y
algunos halógenos. Los auxocromos desempeñan un papel esencial en la aparición de color, puesto que. en su
ausencia, se necesitarían sistemas rt conjugados enormemente extendidos para que se observase absorción en la
región visible. Dos o más auxocromos juntos producen un efecto superior a la suma de los que causarían indivi
dualmente, especialmente si uno de ellos es un grupo intensamente donador y el otro es aceptor, como en el ca
so del anión del p-nitrofenol (Fig. 28.1). Esta es la razón por la que un gran número de colorantes presenta es
tructuras conjugadas con grupos donadores y aceptores, con frecuencia cargados. En la Figura 28.2 se resumen
algunas de las principales estructuras responsables de la generación de color en reacciones de identificación de
fármacos.
\náx = 204 nm
£ = 7400
Figura 28.1. Ejemplos de grupos auxocromos.

ANÁLISIS DE FÁRMACOS BASADO EN LA REACTIVIDAD DE GRUPOS FUNCIONALES 817
Figura 28.2. Algunas estructuras responsables de la aparición de color en reacciones analíticas.
1.3. Relación entre estructura y fluorescencia
Como consecuencia del mecanismo indicado en el Apartado 29.4. deben cumplirse algunas condiciones para
que se puedan producir procesos de luminiscencia (nombre conjunto que se da a los procesos de fluorescen
cia y fosforescencia).
La primera es, obviamente, que la molécula considerada absorba en el ultravioleta-visible, lo que limita
el campo de aplicación de las técnicas luminiscentes a compuestos con dobles enlaces conjugados (p. ej„ los
sistemas aromáticos policíclicos suelen mostrar una considerable fluorescencia natural). Existe una clara re
lación entre la densidad electrónica y la fluorescencia, ya que los grupos donadores tt (NH2. OH, etc.) incre
mentan ésta, mientras que los aceptores (CO2H, NO>, etc.) la disminuyen.
Por la misma razón, el pH puede hacer variar considerablemente la fluorescencia; por ejemplo, la anili
na es fluorescente en medio neutro o básico, pero no lo es en medio ácido, debido a que la protonación del
grupo amino transforma éste en aceptor (NH3‘).
Otro factor que influye notablemente en la fluorescencia es la rigidez conformacional de las moléculas.
Una elevada rigidez implica una disminución de las posibilidades de vibración y, por tanto, una disminución del
cruce entre sistemas de singlete a (ripíete y de la desactivación por colisiones; todo ello conduce a un aumento
de fluorescencia. El aumento de la rigidez molecular explica también por qué la formación de quelatos suele ir
acompañada de un incremento de fluorescencia (Fig. 28.3).
Fcnolftalcína
(no fluorescente)
Figura 28.3. Ejemplos de incremento de la emisión fluorescente por aumento de la rigidez molecular.
1.4. Reactividad de grupos funcionales en el análisis cromatográfico
La aplicación de reacciones químicas como una etapa del análisis cromatográfico puede proporcionar las si
guientes ventajas (véase el Capítulo 27):
a) Mejora de la estabilidad del analito.

b) Mejora de determinadas propiedades físicas imporlantes para el análisis (solubilidad, volatilidad).
c) Mejora de la separación cromatográfica a través de la alteración de la estructura de una de las sustan
cias a separar.
d) Mejora de la sensibilidad de la detección.
Así, en cromatografía en capa fina, es muy común el empleo de reacciones de formación de color para
el revelado de los cromatogramas, como método que complementa el uso de placas con indicador fluorescente
que se «leen» directamente en una lámpara ultravioleta.
En cromatografía de gases, la mayor parte de las reacciones de formación de derivados se orientan a in
crementar la estabilidad térmica y la volatilidad de los analitos, ya que muchos problemas biológicos y farma
céuticos requieren la determinación de compuestos polares (aminoácidos, glúcidos. etc.).
Para el análisis de estas muestras, es necesario bloquear los grupos amino, hidroxilo y carboxilo mediante
la formación de derivados, con objeto de suprimir asociaciones intermoleculares dipolo-dipolo y por puente de
hidrógeno, y conseguir así una adecuada volatilidad.
El método más empleado con este fin es la reacción con cloruro de trimetilsililo o algún otro de los nume
rosos reactivos de sililación existentes (Fig. 28.4).
Por último, la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), técnica esencial en el análisis farma
céutico. hace también uso de reacciones de formación de derivados, que se denominan «reacciones preco-
R-XH + R'3Si-Z R-X-SiR', + HZ
Analito Reactivo de Analito

sililación sililado
0
Ejemplos: Ejemplo:
R-OH Alcoholes
R-SH Violes (H,C)3Si-CI
R-NH, Aminas Cloruro de trimetilsililo
R-CO2H Ácidos carboxílicos
(H3G)3Sí-N(CHj)2
TrimetiIsilil dimctilamina
Figura 28.4. Sililación de grupos funcionales polares.
lumna» o «postcolumna», según tengan lugar antes o después de la separación. El objetivo que suele perseguir
se es la mejora de la sensibilidad en la detección, a través de la formación de derivados capaces de absorber más
eficazmente la radiación ultravioleta-visible o emitir fluorescencia.
2. REACCIONES DEL GRUPO AMINO
El grupo amino es el de mayor significación en el análisis funcional de fármacos, por su amplia distribución en
todo tipo de estructuras con actividad farmacológica y por sus especiales características de reactividad. Las
aminas alifáticas pueden considerarse como derivados sustituidos del amoníaco y. como tales, conservan una
hibridación sp’ en el nitrógeno, permaneciendo uno de sus orbitales híbridos ocupado por un par no enlazante.
Este confiere a las aminas sus propiedades químicas características, ente ellas su basicidad, su nucleofilia y su
capacidad para formar complejos de coordinación. Las aminas aromáticas presentan las mismas propiedades,
pero en menor grado, ya que el par no enlazante está conjugado con la nube ir de la estructura aromática y, por
tanto, la densidad electrónica es menor.
Se presentan a continuación algunas de las principales reacciones analíticas del grupo amino, clasificadas
según la estructura del agente de derivación empleado.
2.1. Reacciones con derivados halogenados
2.1.1. Haluros de afilo
El grupo amino puede desplazar aniones haluro de haloderivados aromáticos en los que el anillo sea deficitario
electrónicamente, a través del mecanismo de adición-eliminación. Uno de los reactivos más importantes de es
te tipo es el I -fluoro-2,4-dinitrobenceno, empleado como agente auxiliar en la separación y cuantificación de
aminas por cromatografía de gases (Fig. 28.5). El carácter intensamente aceptor de electrones del grupo 2.4-
dinitrofenilo hace que disminuya considerablemente la densidad electrónica del par no enlazante del nitrógeno
amínico, por lo que se dificulta su participación en enlaces por puentes de hidrógeno y aumenta la volatilidad
de la amina. Además, la presencia de grupos nitro incrementa la sensibilidad de la detección por captura elec
trónica.
Figura 28.5. Arilación de aminas como técnica auxiliar en su determinación por cromatografía de gases.
El I -fluoro-2,4-dinitrobcnceno es también muy útil para la caracterización del aminoácido /V-terminal du
rante la secuenciación de péptidos por el método de Sanger. En presencia de suficiente exceso del reactivo, to
dos los grupos amino del péptido (aminoácido /V-terminal y grupos e-amino de la lisina), así como los anillos de
imidazol de la histidina. el oxígeno fenólico de la tirosina y el grupo mercapto de la cisterna, reaccionan con el
l-fluoro-2,4-dinitrobenceno. Cuando termina el proceso, el péptido debe hidrolizarse completamente en medio
ácido, del que puede extraerse selectivamente el aminoácido /V-temiinal gracias a que, una vez arilado e hidroli-
zado el péptido. es el único que no posee un grupo amino primario alit'ático (Fig. 28.6). El producto dinitrofeni-
lado absorbe en la región visible del espectro electromagnético, lo que puede aprovecharse para su caracteriza
ción espectrofolométrica.
Figura 28.6. Determinación del aminoácido /V-terminal de un péptido por el método de Sanger.
Existen también reactivos de W-arilación orientados a mejorar la detección fluorimétrica de aminas. El

más extendido es el 4-cloro (fluoro)-7-nitrobenzofurazano
* (Fig. 28.7a). Aunque este agente reacciona también
con fenoles, los productos obtenidos en dicha reacción no son fluorescentes, por lo que no causan interferencia.
El uso de la 9-cloroacridina (Fig. 28.7b) para cl análisis de aminas aromáticas, aunque aparentemente similar, se
basa en un principio diferente, ya que dicho reactivo es fluorescente, pero sus arilaminoderivados no lo son. Por
lo tanto, la determinación se basa en la amortiguación de la fluorescencia producida al adicionar la amina aro
mática problema sobre una solución del reactivo.
zR'
+ HN —
XR2
Amina primaria
o secundaria
4-cloro(fluoro)-7-nitrobenzofurazano
Cl
ArNH2
9-cloroacridina
Figura 28.7. Análisis fluorimétrico de aminas a través de reacciones de arilación.
2.1.2. Cloruros de acilo
La principal aplicación analítica de este tipo de reacción se basa en su empleo para la formación de derivados
fluorescentes de las aminas. Los cloruros de ácido más empleados con este fin son los de arenosulfonilo. entre
los que destaca el cloruro de dansilo (DNS-CI, Fig. 28.8). La elevada fluorescencia de los derivados resultan
tes se debe al sistema naftalénico y al fuerte carácter donador de electrones del grupo dimetilamino situado so
bre éste. El cloruro de dansilo es un excelente agente para la determinación fluorimétrica de aminas primarias y
secundarias, y se ha aplicado con frecuencia al estudio de líquidos biológicos.
Figura 28.8. El cloruro de dansilo como reactivo fluorogénico de aminas.
* Furazano = L2.5-oxadia7.ol.
2.2. Reacciones de condensación con grupos carbonilo y procesos relacionados
La formación de iminas (bases de Schiff) entre la amina problema y un aldehido, generalmente aromático, es
una de las reacciones clásicas para la determinación del grupo amino. Esta reacción no implica generalmente un
cambio de color, por lo que la detección del derivado formado debe basarse en otros procedimientos. Así, se
pueden emplear ciertos aldehidos derivados de sistemas aromáticos policíclicos (fluoreno-2-carbaldehído. pire-
no- 1 -carbaldehído) como marcadores fluorescentes (Fig. 28.9). También pueden determinarse las iminas me
diante espectrofotometría, aprovechando la facilidad con que forman complejos coloreados con el cobre.
R-NH2 + R-CHO -------- ► R-HN=CH-R’
CHO
Fluorcno-2-carbaldehído
Pirene-1 -carbaldehído
Figura 28.9. Aldehidos empicados como reactivos fluorogénicos de aminas.
Una reacción analítica relacionada es la que se basa en el tratamiento de aminas primarias con aldehido
succínico, generado in situ por hidrólisis ácida del 2.5-dimetoxitetrahidrofurano. que puede considerarse como
su acetal cíclico. Esta reacción proporciona derivados de pirrol (síntesis de Paal-Knorr), cuya reacción posterior
con el p-dimetilaminobenzaldehído en medio ácido (reactivo de Ehrlich) permite la obtención de derivados
coloreados. Como ejemplo, se representa, en la Figura 28.10. la aplicación de este método al análisis de la anfe-
tamina.
Colorante de cianina
Figura 28.10. Determinación de la anfetamina a través de un proceso de tipo Paal-Knorr/Ehrlich.

La reacción de Paal-Knorr sirve también de base a la determinación fluorimétrica de aminas por reacción
con el o-ftalaldehído (OPA) y 2-mercaptoetanol, cuya adición es indispensable para que el producto de reac
ción sea estable (Fig. 28.11).
CHO
a CHO
+ R-NH,
2-Mercaptoctanol
o-Ftalaldchído (OPA)
En ausencia de
2-mercaptoetanol
(poco estable)
Figura 28.11. Análisis fluorimétrico de aminas primarias por reacción con OPA.
Una de las principales reacciones de identificación y cuanlificación de los a-aminoácidos se basa en su

desaminación oxidativa por reacción con la ninhidrina. seguida de formación de una base de Schiff coloreada
de color azul-violeta, que permite la detección visual de concentraciones muy bajas de aminoácido (hasta 0.1
pM). y también puede aprovecharse para la determinación cuantitativa espectrofotométrica.
Compuesto coloreado
Figura 28.12. Reacción de a-aminoácidos con la ninhidrina.

El mecanismo de esta reacción (Fig. 28.12) es complejo, y se basa en la formación de una imina por con
densación del aminoácido con la 1,2,3-indanotriona, que existe en equilibrio con la ninhidrina. Dicha imina
puede descarboxilarse, gracias a la estabilidad del anión generado en dicho proceso. Tras la tautomerización e
hidrólisis de la imina, la condensación entre la amina resultante y otra molécula de ninhidrina conduce al com
puesto coloreado final.
2.3. Reacciones de adición de Michael
La fluorescaniina reacciona con las aminas primarias de forma casi instantánea a temperatura ambiente, en
un proceso de adición de Michael que origina una aminoenona I, seguido de ciclación de ésta a una 2-pirro-
lin-4-ona muy fluorescente.
Las aminas secundarias pueden reaccionar también con la fluorescamina. originando aminoenonas
/V./V-disustituidas no fluorescentes.
Sin embargo, estos derivados pueden producir una segunda reacción con una amina primaria que se
adicione al medio de reacción, transformándose en productos intermedios capaces de ciclar al mismo deriva
do fluorescente observado cuando el analito es una amina primaria (Fig. 28.13).
A minas primarias
Figura 28.13. Reacción de la fluorescamina con aminas primarias y secundarias.
Los a-aminoácidos experimentan una reacción similar a la de las aminas primarias, pero, debido a la pre-
senda del grupo carboxilo en el analito, el derivado de hidroxipirrolinona no se aísla como tal, sino ciclado a la
correspondiente lactona, que es fluorescente (Fig. 28.14).
Figura 28.14. Reacción de la fluorescamina con a-aminoácidos.
Un segundo tipo de reacción analílica que aprovecha la adición de Michael sobre sistemas carbonílicos a, P-
insaturados es la detección selectiva de aminas primarias o secundarias por reacción con la p-benzoquinona. Como
se muestra en la Figura 28.15. para la reacción con el antidepresivo desipramina, la adición conjugada inicial con
duce a un derivado de hidroquinona I, de acuerdo con el comportamiento habitual en las quinonas. Este derivado,
por contener un grupo donador de electrones, es más fácil de oxidar que la propia hidroquinona, por lo que un ex
ceso de benzoquinona conduce a la oxidación de I a la forma quinónica II, de color rojo intenso. Dependiendo de
las condiciones de reacción, este proceso puede repetirse, resultando entonces el derivado de doble adición III.
Esta reacción, además de ser útil para la detección y cuantificación de aminas primarias y secundarias,
permite una sencilla detección de éstas cuando se encuentran como impurezas de fármacos con estructuras de
amina terciaria, ya que éstas no reaccionan con las quinonas.
Figura 28.15. Determinación de aminas secundarias por reacción con benzoquinona.
2.4. Reacción con isotiocianatos
El método de Sanger, estudiado en el apartado anterior, permite la identificación del aminoácido /V-terminal de
un péptido, pero presenta el inconveniente de que precisa la hidrólisis de éste como paso previo a la identifica
ción, con lo que se hace imposible obtener información adicional sobre el péptido. Sena mucho más útil un
reactivo que permitiera la eliminación e identificación del aminoácido /V-terminal y dejase intacto el resto del
péptido. ya que la aplicación reiterada de este método permitiría la identificación de varios aminoácidos conse
cutivos.
La reacción entre un péptido y el isotiocianato de fenilo tiene lugar por adición del grupo amino sobre la
estructura de isotiocianato para dar un derivado de tiourea. Por hidrólisis ácida suave, en condiciones que no
afectan al enlace peptídico. dicho compuesto extruye el aminoácido N-tenninal en forma de un derivado de fe-
niltiohidantoína, fácilmente identificable por métodos espectrofotométricos (Fig. 28.16a). La razón de la selec
tividad de la hidrólisis debe buscarse en el debilitamiento del enlace peptídico M-terminal. como consecuencia
de un ataque nucleófilo intramolecular previo por parte de la subestructura de tiourea (Fig. 28.16b). Este méto
do. conocido como degradación secuencia! de Edman, ha sido automatizado y permite la secuenciación com
pleta de péptidos.
Péptido |—
H,O/H° (hidrólisis suave)
| Péptido [—NH-C-CH-NH,
O R
Feniltiohidantoína
.ctH,'e//s
i-NH ,nhj(
< X NH
Figura 28.16. El método de Edman para la degradación secuencia! de péptidos.
2.5. Reacción de diazotación y diazocopulación
Una propiedad que diferencia a las aminas primarias aromáticas de las alifáticas es la capacidad de formación
de sales de diazonio relativamente estables por nitrosación, generalmente con nitrito sódico en ácido clorhí
drico acuoso. Esta reacción se ha aprovechado para la valoración volumétrica de aminas aromáticas de inte
rés farmacéutico, fundamentalmente derivados de 4-aminobencenosulfonamida (sulfamidas). El proceso
consiste en la «neutralización» de una solución ácida de la sustancia problema, que contiene una cantidad
desconocida de una amina aromática, con una solución de nitrito sódico de concentración conocida. El punto
final se detecta con un indicador de ioduro potásico-engrudo de almidón, o bien por potenciometría. Por otra
parte, las sales de diazonio formadas en procesos de este tipo, son electrófilos adecuados para reacciones de
sustitución aromática sobre determinados derivados bencénicos con grupos fuertemente donadores, funda
mentalmente fenoles y aminas aromáticas (reacciones de diazocopulación). Los productos obtenidos poseen
extensos sistemas n deslocalizados y suelen ser coloreados (colorantes azoicos). Por lo tanto, su formación
proporciona la posibilidad de identificar fármacos con estructura de amina aromática; esta identificación, sin
embargo, es inespecífica, puesto que no permite distinguir unas aminas aromáticas de otras. La reacción pue
de también adaptarse a la valoración cuantitativa, midiendo la intensidad del color obtenido por espectrofoto-
metría ultravioleta-visible.
Como ejemplo de uso del proceso de diazotación-diazocopulación en el análisis de un fármaco, se repre
senta, en la Figura 28.17, la reacción entre la sal de diazonio derivada del anéstesico local procaína y la N-( I-
naftiljetilenodiamina (reactivo de Bratton-Marshall), que es, junto con el p-naftol. el sustrato más utilizado
para reacciones de diazocopulación en este tipo de análisis.
COj-CH.-CH.-NEt,
NaNO2. HCI
NH,
Procaína
Colorante azoico
Figura 28.17. Determinación de procaína a través de la formación de un colorante azoico.
2.6. Reacciones ácido-base
Las aminas son básicas debido a la presencia de un par de electrones no enlazante sobre el átomo de nitrógeno.
Si este carácter básico es lo bastante elevado (pKa > 9), puede aprovecharse para una valoración acidimétrica
*
convencional en medio acuoso, siempre que la solubilidad de la amina lo permita; en caso contrario, pueden
emplearse cosolventes miscibles con el agua (metano!, etanol. dioxano, acetonitrilo). Además de la solubilidad,
un problema que surge en la determinación de aminas por este método es la dificultad en la determinación del
punto final con los indicadores ácido-base habituales.
Estas limitaciones pueden superarse fácilmente empleando medios no acuosos, especialmente el ácido
acético glacial. Este compuesto, además de disolver adecuadamente la mayor parte de las aminas, presenta la
propiedad de diferenciar la acidez de los distintos ácidos minerales, que en agua parecen ser todos igual de
* La basicidad de las aminas suele caracterizarse mediante el pKa de sus ácidos conjugados.
fuertes, porque en todos los casos la especie ácida es el catión hidronio que resulta de su reacción con el
*
.
agua En solución acética, el ácido más fuerte y, por tanto, el más adecuado para la valoración de aminas, es
el ácido perclórico.
Muchas aminas se formulan como sales (sulfatos, clorhidratos, fosfatos, maléalos, etc.), en cuyo caso
debe liberarse la base, por reacción con acetato de mercurio (II). previamente a la valoración:
R-NH, cr + Hg(OCOCH<), ------ * H8CI? + 2 CH,CO2H + 2 R-NH,
2.7. Formación de pares iónicos
Un método empleado con frecuencia para el análisis de aminas se basa en la formación de una especie lipófila
(«par iónico») por combinación entre el catión resultante de la protonación de la amina y un anión adicionado
externamente, entre los que deben mencionarse, entre otros, los aniones procedentes del azul de bromotimol,
naranja de metilo, ácido pícrico, ácido antraceno-2-sulfónico y púrpura de bromocresol (Fig. 28.18).
Compuesto
Figura 28.18. Algunos reactivos empleados en la formación de pares iónicos.
La forma de operar consiste en adicionar una sal del anión deseado al medio acuoso donde, por norma ge
neral, se encuentra inicialmente la amina.
El par iónico formado se extrae con algún disolvente lipófilo (diclorometano. cloroformo) y se cuantifica
directamente la solución así obtenida aprovechando la absorción ultravioleta-visible o la fluorescencia del
anión.
Por ejemplo, en la Figura 28.19a, se ha representado el par iónico que forman el antidepresivo amitripti-
lina y el ácido antraceno-2-sulfónico.
Dado el fundamento del método, la extracción de pares iónicos puede también realizarse sobre fármacos
que contengan subestructuras de catión amonio. Por ejemplo, se ha descrito la determinación del anticolinérgi-
co bromuro de propantelinio por formación de un par iónico con el anaranjado de metilo (Fig. 28.19b).
* HA + H¡0 -» A + H,O*
a)
Ácido antraceno-2-sulfónico
Amitrípiilina
Anaranjado de metilo
Propantelinio
Figura 28.19. Algunos ejemplos de pares iónicos.
3. REACCIONES DEL GRUPO HIDROXILO
3.1. Reacciones de acilación
Una de las reacciones más utilizadas en la caracterización de alcoholes es la formación de ásteres con derivados
activados de ácidos carboxílicos. Esta reacción puede utilizarse también como prueba cuantitativa, para lo cual
se valora el exceso de reactivo con una base patrón y se calcula, por diferencia, la cantidad de derivado de ácido
que ha reaccionado con el alcohol. Los alcoholes primarios y secundarios suelen reaccionar de forma cuantitati
va, mientras que los terciarios dan peores resultados. Asimismo, los fenoles no reaccionan o, si lo hacen, el mo-
noéster formado se rompe inmediatamente. Sin embargo, la reacción se produce inmediatamente, incluso en fe
noles impedidos estéticamente, cuando es catalizada con ácido perclórico en acetato de etilo.
El cloruro de 3,5-dinitrobenzoílo, reacciona con alcoholes primarios y secundarios en presencia de una
amina, para formar un derivado que absorbe intensamente la luz visible. Este tipo de reacción es utilizada como
método de derivación para el análisis de alcoholes por HPLC (Fig. 28.20a). También el etanol. el 2-propanol, el
manitol y la dextrosa pueden ser analizados cuantitativamente, hidrolizando el exceso de reactivo a ácido 3.5-
dinitrobenzoico y valorando dicho exceso con una base, utilizando la detección potenciométrica.
COOR
R-OH
b>
N-NH-C„H, N —NH—C6H5
H,C-C-COC1 + ROH H,C-C-COOR
Figura 28.20. Derivación de alcoholes por acilación.

El análisis espectrofotométrico también se ha utilizado en la valoración de ésteres. usando como reactivo

acilante de alcoholes el cloruro de la fenilhidrazona del ácido pirúvico. Los ésteres formados absorben a 400 nm
(Fig. 28.20b).
Las reacciones de acilación también se utilizan para el análisis de alcoholes por métodos cinéticos, ya que
los alcoholes primarios y secundarios reaccionan con diferente velocidad frente a los cloruros (la concentración
de ambos alcoholes puede determinarse matemáticamente a partir de los datos cinéticos obtenidos). En este
caso, la reacción de esterificación se realiza con anhídrido acético y piridina. o bien 4-dimetilaminopiridina, la
cual, por ser más nucleófila, es mucho más eficaz. El papel del derivado de piridina es la formación de un catión
acilpiridinio, muy activo como agente acilante (Fig. 28.21).
+ R-CO-X R-O-CO-R
R-COX R-O-CO-R
Figura 28.21. Acilación de alcoholes a través de la formación de cationes acilpiridinio.
3.2. Otras reacciones de alcoholes
Además de estas reacciones generales que hemos visto, se han utilizado otras más específicas. Por ejemplo, los
alcoholes terciarios reaccionan con el ácido iodhídrico para formar ioduros de alquilo terciario que, después de
ser extraídos, son medidos a 268 nm.
Los alcoholes secundarios se oxidan a cetonas con dicromato potásico, eliminándose el exceso de dicro
mato con ácido hipofosforoso. y determinándose la cetona gracias a su reacción con 2,4-dinitrofenilhidrazina.
Esta última reacción se usa también para la determinación de los compuestos carbonílicos que se forman en la
reacción de los glicoles con ácido periódico.
3.3. Reacciones específicas de los fenoles
3.3.1. Diazocopulación
La reacción de diazotación de anilinas puede utilizarse para el análisis de fenoles a través de la copulación de
éstos con la sal de diazonio resultante. Así. el etinilestradiol reacciona con la sal de diazonio de la 5-cloro-2,4-
dinitroanilina, en medio alcalino, para formar un producto que absorbe a 450 nm (Fig. 28.22).
Etinilestradiol
Figura 28.22. Diazotación-diazocopulación del etinilestradiol.
3.3.2. Reacciones de oxidación
Diversas reacciones oxidativas de fenoles se utilizan también como base para su análisis espectrofotométrico.
Por ejemplo, la reacción de la fenilefrina con un agente oxidante como el ferricianuro potásico, en presencia
de aminoantipirina. conduce a una quinonimina que absorbe en la región visible del espectro electromag
nético (Fig. 28.23).
OH O O
Fenilefrina
Figura 28.23. Valoración de fenoles en condiciones oxidantes.
3.3.3. Reacciones de sustitución aromática electrófila
La halogenación y la nitrosación de fenoles son métodos muy utilizados en la valoración de estos compuestos.
En el caso de la halogenación (generalmente bromación. Fig. 28.24). el bromo que no reacciona se trata con un
exceso de ioduro potásico y se valora el iodo liberado con tiosulfato. Así, se pueden determinar cuantitativa
mente la fenilefrina, el hexilrcsorcinol y el resorcinol.
OH
Br^Á.Br
jó + 3Bri
--------- ► jj J + 3HBr
Br
Resorcinol
Figura 28.24. Determinación de fenoles por bromación.

En la nitrosación, el fenol reacciona con ácido nitroso para formar nitrosofenol. que absorbe a 400-500 nm
en medio alcalino. El paracetamol (acetaminofeno) forma un nitroso derivado que absorbe a 430 nm. En ocasio
nes, es posible facilitar la determinación del o-nitrosofenol a través de la formación de un complejo con el co
balto (III), como sucede, por ejemplo, en la determinación del p-cresol (Fig. 28.25).
Figura 28.25. Determinación de fenoles por nitrosación.
3.3.4. Formación de complejos
Un método de identificación de fenoles, que se encuentra en todas las farmacopeas, se basa en la coloración vio
leta que toman los fenoles cuando se adiciona cloruro férrico. La reacción coloreada es más fuerte y persistente
si se forma un complejo posterior con grupos funcionales en posición o-, tales como -OH. -CHO,-CO>H y
-SOjH.
Asimismo, los compuestos que presentan el esqueleto de 8-hidroxiquinolina también forman quelatos con
iones metálicos (Fig. 28.26).
Figura 28.26. Formación de complejos de fenoles.
Los alcoholes, debido al carácter donador de electrones de los grupos alquilo, tienen un carácter ácido débil y
por tanto no pueden ser valorados como tales. Sin embargo, la acidez de los enoles y fenoles permite su valora
ción como ácidos, generalmente en sistemas no acuosos con bases fuertes, tales como el metóxido sódico o el
hidróxido de tetrabutilamonio. Así, la morfina es valorada por su grupo fenólico con metóxido sódico y la fen-
procumona por su grupo enol, con hidróxido sódico en una mezcla etanol/agua. El grupo alcohólico de la ben-
zodiazepina oxazepam tiene su acidez incrementada por el carácter aceptor de electrones de los dos agolpa
mientos que se encuentran en sus posiciones vecinas, lo que le permite ser valorado con hidróxido de tetrabuti-
lamonio en dimetilformamida (Fig. 28.27).
OH C,H,
Fenprocumona
Figura 28.27. Algunos derivados hidroxilados que se valoran mediante reacciones ácido-base.
4. REACCIONES DEL GRUPO MERCAPTO
Los lióles son semejantes en estructura y propiedades químicas a los alcoholes, aunque son más ácidos, y tam
bién más nucleófilos, que ellos. Las reacciones analíticas que suelen emplearse aprovechan su nucleofilia. o
bien su facilidad para oxidarse a disulfuros.
4.1. Reacciones nucleófilas
El grupo mercapto, al igual que el grupo hidroxilo y el amino, puede, en principio, caracterizarse a través de
reacciones de acilación. Sin embargo, la escasa estabilidad de los tioésteres en medio básico limita la utilidad
de la reacción como método analítico. Un procedimiento más extendido se basa en el empleo de reacciones de
adición de Michael, en las que cl tiol problema se adiciona a un sistema a, [J-insaturado. entre los que el más
utilizado es la maleimida. Por ejemplo, la ÍV-etilmaleimida pierde su sistema ir conjugado y, por tanto, su color,
por adición de un tiol (Fig. 28.28a). La pérdida de absorbancia observada es proporcional a la concentración de
éste, por lo que la reacción tiene aplicaciones cuantitativas. Una reacción similar puede servir para la obtención
de derivados fluorescentes, siempre que la maleimida utilizada esté unida a una estructura dotada de fluores
cencia nativa, como en el ejemplo de la Figura 28.28b.
Figura 28.28. Adiciones de Michael de fióles como reacciones analíticas.
La formación de derivados fluorescentes a partir de los tioles puede lograrse también a través de reaccio
nes de desplazamiento nucleófilo sobre sustratos dotados de fluorescencia natural. Los más importantes son los
haluros derivados de los biciclos llamados «bimanos», que corresponden al sistema de l,5-diazabiciclo
[3.3.0]octa-3,6-dieno-2,8-diona (Fig. 28.29a). Otro tipo de desplazamiento nucleófilo empleado en reacciones
analíticas de tioles es el que tiene como sustrato un disulfuro. Así, el ácido 5.5'-ditiobis (2-nitrobenzoico) per
mite la determinación espectrofotométrica de lióles porque, tras su reacción con ellos en medio básico, origina
un anión coloreado (Fig. 28.29b).
+ HBr
Br —CH2 CH3 R-S—CH2 CH3
R—SH. OH
(pH = 8)
= 412 nm
(amarillo)
Figura 28.29. Otras reacciones nucleófilas de lióles útiles en su determinación.
4.2. Reacciones de oxidación
Los tioles pueden ser oxidados por numerosos agentes. El empleo de iodo, un oxidante suave, conduce a disul-
furos, y la reacción puede servir como método analítico. Normalmente, la técnica empleada consiste en oxidar
el tiol con un exceso de iodo, y determinar con tiosulfato sódico el halógeno que no reacciona (Fig. 28.30a).
Otra variante, que permite el uso de métodos espectrofotométricos. consiste en el empleo de la iminoquinona I
(Fig. 28.30b) como indicador, basado en su reducción desde una forma coloreada a otra incolora II, como con
secuencia de la oxidación simultánea del tiol problema a disulfuro.
a)
2R-SH + I2 --------- * R-S—S-R + 2HI
I, (exceso) + 2S,O® ----------► S„O® + 21®
Figura 28.30. Reacciones de oxidación de lióles utilizadas en su caracterización.

5. REACCIONES DEL GRUPO CARBONILO DE ALDEHIDOS Y CETONAS
La principal característica química del grupo carbonilo es la electrofilia de su átomo de carbono, debida a su di
ferencia de electronegatividad respecto al oxígeno y a la elevada movilidad de los electrones K. Los nucleófilos
reaccionan con facilidad con este centro electrófilo y, en el caso de los aldehidos y las cetonas. esta adición sue
le ir acompañada de eliminación de agua y formación de un doble enlace entre el nucleófilo y el carbono carbo-
nílico. Una propiedad que permite distinguir cetonas de aldehidos es el carácter reductor de éstos, que se debe a
la facilidad con que se oxidan a ácidos carboxílicos.
5.1. Condensación con N-nucleófilos
Una de las reacciones analíticas más comunes de los aldehidos y cetonas es su condensación con especies de es
tructura Z-NH2, resultando los derivados cuyas estructuras quedan recogidas en la Figura 28.31. Muchos de
estos derivados se han utilizado tradicionalmente para la identificación, por punto de fusión, de aldehidos y ce-
tonas líquidos.
R\
\ =O + H,N—Z ------- ► >=N—Z + H,0
r/ - R'Z 2
z z—nh2 Derivado
—nh2 Hidrazina Hidrazonas

-NH—C6H5 Fcnilhidrazina Fcnilhidrazonas
—OH Hidroxilamina Oximas
—R, —Ar Aminas Iminas (bases de Schiff)
ZO
_NH—Cz Semicarbazida Scm icarbazonas
SNH,
ZS '
—NH—Cz Tiosemicarbazida Tiosemicarbazonas
sNH2
Figura 2831. Principales derivados obtenidos por reacción entre /V-nucieófilos y aldehidos o cetonas.
Muchas determinaciones cuantitativas de aldehidos y cotonas se basan en la formación de oximas, hidrazonas

o ¡minas coloreadas, como consecuencia de la presencia de grupos nitro o sistemas n deslocalizados extensos en el
agente de derivación. También se conocen reactivos fluorogénicos basados en este tipo de reacciones (Fig. 28.32).
CH2—O —NH2
O-(p-nitrobencil) -
hidroxilamina
nh-nh2
2,4-Dinitrofenilhidrazina
Figura 2832. Algunos reactivos de derivación del grupo carbonilo.

5.2. Condensaciones con C-nucleófilos
El aldehido malónico produce fácilmente reacciones de condensación con compuestos con metilenos acti
vos. Por ejemplo, su reacción con el ácido tiobarbitúrico origina un compuesto muy conjugado, conocido
como «rojo de polimetenilo». El aldehido malónico se obtiene como producto de la degradación oxidativa
de estructuras conjugadas de 1,3-butadieno; la combinación de ambas reacciones, por tanto, permite la ca
racterización de dichos sistemas conjugados. En la Figura 28.33, se representa el proceso para el caso del
ácido sórbico.
Rojo de polimetenilo
Figura 28.33. Oxidación del ácido sórbico y condensación con ácido tiobarbitúrico.
5.3. Reacciones de oxidación de aldehidos
La facilidad con que los aldehidos se oxidan a ácidos carboxílicos sirve de fundamento a algunas reacciones de
identificación de este grupo funcional.
Por ejemplo, los aldehidos pueden reducir el catión Cu2* a Cu *, que forma, en medio alcalino, un precipi
tado de óxido cuproso de color rojo-ladrillo característico (reacción de Fehling, Fig. 28.34a); la intensidad de
la coloración roja puede servir de base a una determinación cuantitativa.
En la práctica, la reacción se lleva a cabo utilizando dos reactivos diferentes: el llamado «Fehling A», que
es una solución acuosa de sulfato de cobre (II), y el «Fehling B», que contiene hidróxido sódico y tartrato sódi-
co-potásico, cuya función es formar un quelato con el Cu2* y evitar que este ion sea precipitado por los iones hi
dróxido.
Si la reacción se realiza sobre glúcidos, las cadenas polihidroxílicas cumplen el papel de agentes quejan
tes, y no es necesario el tartrato. Todas las aldosas. así como los disacáridos o polisacáridos en los que. al me
nos, una unidad de aldosa tenga libre su oxígeno anomérico, dan la reacción de Fehling.
El ensayo de Tollens (Fig. 28.34b) consiste en la aparición de un precipitado de plata elemental («espejo
de plata») por tratamiento de una solución que contenga un aldehido con otra de iones Ag * (generalmente, nitra
to de plata amoniacal).
a) Reacción de Fehling b) Reacción de Tollcns
R—CHO R—CO2H
OH
--------- ► Cu,O |
Rojo ladrillo Espejo
Figura 28.34. Caracterización de aldehidos a través de reacciones de oxidación.
5.4. Otras reacciones
Las reacciones fluorogénicas del grupo carbonilo basadas en el uso de derivados fluorescentes de hidrazina o
hidroxilamina (Apartado 5.1) pueden plantear problemas de interferencia entre el reactivo y el producto final.
Esta limitación se supera mediante el empleo de reactivos fluorogénicos que carezcan de fluorescencia natural,
como el cloruro de 3-carbamoil-l-metilpiridinio. Su tratamiento con cetonas o aldehidos en medio básico con
duce, a través del mecanismo indicado en la Figura 28.35 al sistema de pirido[4,3-/>]piridina I, que es oxidado
por una segunda molécula de la sal de piridinio a la especie intensamente fluorescente II.
Figura 28.35. Valoración de cetonas por reacción con sales de piridinio.
Una reacción semejante permite la determinación fluorimétrica de epóxidos, ya que éstos pueden ser
abiertos por el nitrógeno piridínico de la nicotinamida. para originar una sal de piridinio intermedia a partir de la
cual puede reproducirse la reacción anterior, utilizando una solución patrón de un compuesto carbonflico cono
cido para completar la formación del sistema fluorescente (Fig. 28.36).
OH
Figura 28.36. Valoración de epóxidos por reacción con derivados de piridina y cetonas.
6. REACCIONES DEL GRUPO CARBOXILO
La disociación de un protón de un ácido carboxílico está facilitada por el efecto -I del grupo acilo. estando el
anión estabilizado por resonancia. La fuerza de los ácidos carboxílicos depende esencialmente del carácter do
nador o accptor del radical R (por ejemplo, el pKa del ácido acético es 4,76, y el del ácido fórmico es 3,77).
La valoración de los ácidos carboxílicos con una base (hidróxidos y metóxidos alcalinos) es un método
frecuentemente utilizado en su análisis. Para determinar el punto final de la valoración, se puede utilizar la po-
lenciometría o los indicadores visuales. En algunos casos, la valoración no puede hacerse directamente y es ne
cesario añadir una cantidad conocida de base fuerte, valorándose el exceso de base con un ácido fuerte. Así se
valoran los ácidos láctico, acético, benzoico, salicílico y cítrico, así como el clorambucilo, la furosemida y el
probenecid. De igual modo, las imidas derivadas de ácidos carboxílicos son lo suficientemente ácidas como
para ser valoradas con bases fuertes. El fluorouracilo y el pentobarbital se valoran con hidróxido de tetrabutila-
monio, mientras que la idoxuridina y el secobarbital se valoran con metóxido sódico (Fig. 28.37).
CH, CH.COOH
OH
CHOH CHjCOOH HO-C-COOH
COOH Ácido acético CHjCOOH
COOH
Ácido benzoico
Ácido láctico Ácido cítrico
Ácido salicílico
COOH
NH-CH (CICH2CH,)2N CH2CH2CH2CO2H
h2no2s
Clorambucilo
O
Furosemida Fluorouracilo
(CH,CH2CH2)2NSO2
h,c-ch2—ch2-ch
CH, 0
Probenecid
R = Et, Pentobarbital
R = CH-r-CH = CHj, Secobarbital
Idoxuridina
Figura 2837. Algunos compuestos que se valoran frente a bases.

6.2. Reacciones con nucleófilos
La formación de ácidos hidroxámicos a partir de ácidos carboxílicos desempeña un importante papel analítico
gracias a su capacidad para formar complejos coloreados con iones hierro (III). Una posible ruta en la forma
ción de dichos complejos se indica en la Figura 28.38.
,0 H,N—OH
+ S0C1,
'OH
Figura 28.38. Ácidos hidroxámicos y formación de complejos.
La nitrofenilhidrazina también se ha utilizado como nucleófilo en lugar de la hidroxilamina en reacciones

análogas con los ácidos carboxílicos en presencia de diciclohexilcarbodiimida. La hidrazida resultante da un in
tenso color azul en medio básico.
6.3. Reacciones con electrófilos
Los ácidos carboxílicos pueden actuar como nucleófilos en reacciones de desplazamiento nucleófilo frente a ha
luros de fenacilo y diazometano (Fig. 28.39). Estas reacciones permiten la formación de ésteres e incrementan
de esta forma la volatilidad para el análisis por cromatografía de gases. La primera reacción se utiliza también
para el análisis por HPLC.
SCH2—N=N
Figura 28.39. Reacciones de desplazamiento nucleófilo de ácidos carboxílicos frente a haluros de fenacilo y diazometa
no, útiles en cromatografía.
Los ácidos carboxílicos aromáticos que. como el salicílico, tienen en posición o- un grupo hidroxilo pue
den formar, con el cloruro de hierro (III), un complejo de intenso y persistente color violeta (Fig. 28.40a). Asi
mismo, la nitración de ácido salicílico con ácido nítrico fumante produce ácido 3.5-dinitrosalicílico, que se des-
carboxila fácilmente para convertirse, por posterior nitración, en ácido pícrico, que forma complejos o
coloreados con bases (sales de Meisenheimer) (Fig. 28.40b).
FeCl,
HNO,
-CO,
Figura 28.40. Algunas reacciones de identificación del ácido salicílíco.
La caracterización del ácido acetilsalicílico se puede realizar, bien por hidrólisis alcalina seguida de acidi
ficación para dar ácido acético y ácido salicílíco, que se caracteriza posteriormente, o bien por calentamiento
con hidróxido calcico. El acetato cálcico producido se descompone térmicamente en carbonato cálcico y aceto
na. Los vapores de ésta se pasan por un papel de filtro impregnado con 2-nitrobenzaldehído, dando una colora
ción verde azulada que se vuelve azul cuando el papel se trata con ácido clorhídrico.
En la síntesis o en el procesamiento galénico del ácido acetilsalicílico se forman pequeñas cantidades de
productos de condensación, tales como anhídrido acetilsalicílico, ácidos acetilsalicilsalicílico, saliciloilsalicílico
y disalicilida (Fig. 28.41). La determinación de estas impurezas tiene gran importancia, puesto que se ha com
probado que pueden ser las responsables de algunas reacciones alérgicas.
CO,H
Anhídrido acetilsalicílico
Ácido acetilsalicilsalicílico
Ácido saliciloilsalicílico
Figura 28.41. Algunos productos de degradación del ácido salicílíco y del ácido acetilsalicílico
Para el más importante de estos contaminantes, el ácido acetilsalicilsalicílico, existe una determinación
espectrofotométrica basada en la amonólisis del compuesto. La salicilamida formada en la reacción puede reac
cionar con 4-aminoantipirina en condiciones oxidativas (véase el Apartado 3.3.2). para dar un compuesto colo
reado (Fig. 28.42).
Ácido acetilsalicilsalicílico
Compuesto coloreado
Figura 28.42. Identificación de impurezas del ácido acetilsalicílico.
7. REACCIONES DE DERIVADOS DE ÁCIDO
7.1. Ésteres
Al igual que los ácidos carboxílicos, los ésteres pueden determinarse a través de la formación del correspon
diente ácido hidroxámico y la formación de un complejo de este último con iones Fe (III).
La intensidad y la estabilidad del complejo ácido hidroxámico/Fe (III) depende del pH y de la temperatu
ra del medio.
RCOOR'+ HjN-OH ------> RCONHOH + R'OH
Algunos alcaloides de gran importancia farmacológica son ésteres formados por un componente de natu
raleza de aminoalcohol bicíclico sustituido y ácido benzoico o un ácido arilalquil sustituido (Fig. 28.43).
Así, alcaloides como la atropina, la escopolamina, la butilescopolamina, la homatropina, la cocaína, la
hiosciamina, etc., pertenecen a esta clase de ésteres.
CHa
H H OH
Pseudotropina Ecgonina Escopina
HO XO HOS „O
Cx C'
HO-C-H H-C-OH
Ácido L-trópico
CHjOH
Ácido D-trópico Ó
Ácido L-mandélico Ácido D-mandélico
Ácido benzoico
Figura 28.43. Ácidos y aminoalcoholes componentes de alcaloides con estructura de éster.
El método de identificación más importante de la atropina y otros ésteres trópicos es la reacción de Vitali
Morin, que consiste en el tratamiento del producto calentado a sequedad con ácido nítrico fumante, siendo el re
siduo tratado con acetona e hidróxido potásico metanólico para dar un anión coloreado. Como se puede deducir
del mecanismo propuesto (Fig. 28.44). son necesarios un anillo aromático nitrable y un grupo metileno o meti-
no activados.
Figura 28.44. Reacción de Vitali-Morin aplicada a la identificación de la atropina.
7.2. Amidas e imidas
Muchas de las reacciones de identificación de los fármacos que tienen un agrupamiento amida o imida en su
molécula se basan en la caracterización de los productos de su hidrólisis. Así, la hidrólisis ácida de las 1,4-ben-
zodiozepinas conduce a los correspondientes derivados de 2-aminobenzofenona. que se detectan por diazota-
ción y acoplamiento con el reactivo de Bratton-Marshall (naftiletilenodiamina) para dar un colorante azoico de
color violeta (Fig. 28.45).
Figura 28.45. Identificación de benzodiazepinas con el reactivo de Bratton-Marshall.
Los derivados de la succinimida. como la etosuximida. forman, por reacción con ácido sulfúrico y resor
cinol, un derivado de xanteno de estructura plana que es fluorescente, especialmente si se alcaliniza el medio de
reacción (Fig. 28.46).
Figura 28.46. Determinación fluorimétrica de la etosuximida.
7.3. Hidrazidas
La presencia de un átomo de nitrógeno no conjugado con el grupo carbonilo permite que las hidrazidas den
reacciones de caracterización propias del grupo amino, como su arilación con el cloro-2.4-dinitrobenceno. o la
formación de iminas con aldehidos aromáticos, como la vainillina. En la Figura 28.47, se formulan estas reac
ciones para el caso del agente antituberculoso isoniazida. Reacciones más específicas se basan en la posibilidad
de formación de complejos con intervención del oxígeno y del nitrógeno terminal de la función hidrazida. Por
ejemplo, la isoniazida forma quelatos con el catión Ag’ en solución neutra; por calentamiento en medio acuoso,
dicho quelato libera ácido isonicotínico y un espejo de plata metálica. De igual modo, el tratamiento con citrato
de cobre (II) origina un complejo verde (Fig. 28.47).
Un aspecto interesante de la analítica de las hidrazidas es el estudio de la presencia de hidrazina formada
en su degradación hidrolítica. Su detección puede lograrse mediante la formación de un catión deslocalizado de
color rojo, por condensación con dos equivalentes de p-dimetilaminobenzaldehído en medio ácido. Este ensayo
es importante a causa de la elevada toxicidad de la hidrazina.
Figura 28.47. Identificación de la isoniazida.
7.4. Lactatnas
Aunque el grupo lactama se encuentra en un número importante de fármacos, quizás los ejemplos más repre
sentativos de este grupo sean los antibióticos |3-lactámicos. Para su identificación, la Farmacopea Europea
propone la espectroscopia infrarroja, así como la incubación del compuesto con solución de penicilinasa y la
posterior adición de una solución de iodo. El espectro infrarrojo de la penicilina en estado sólido muestra una
banda a 1770-1790 cm1. debida a la absorción del grupo carbonílico de lactama. La no coplanaridad del par
de electrones libre del átomo de nitrógeno con el grupo carbonilo explica su absorción a altas frecuencias.
Cambios en esta región indican la apertura del anillo lactámico. desplazándose las bandas hacia un número
de onda más bajo.
También se han aprovechado los grupos funcionales amida y ácido carboxílico para diseñar diversas reac
ciones analíticas. Así, el grupo amida se puede transformar en un ácido hidroxámico. que da una coloración ca
racterística con cloruro de hierro (III) en solución ácida. Por otra parte, la reacción del grupo carboxílico con
bromuro de p-nitrofenacilo permite obtener ésteres. que son determinados por cromatografía en capa fina y es-
pectrofotometría UV-visible (método de Kallmayer, Fig. 28.48).
Figura 28.48. Método de Kallmayer para la determinación de antibióticos p-laclámicos.
8. DERIVADOS DEL ÁCIDO CARBÓNICO
8.1. Uretanos (carbamatos)
Aunque el ácido carbámico se descompone espontáneamente a dióxido de carbono y amoníaco, sus ésteres. los
uretanos, son estables, presentándose como sólidos bien cristalizados debido a la asociación intermolecular del
grupo carbamoilo.
Una de las reacciones de caracterización más empleadas para este tipo de derivados es la formación de
complejos entre el ion cianato formado por calentamiento con hidróxido potásico etanólico y sales de Co2’. El
complejo azul de tetracianatocobalto formado puede ser aplicado tanto a la identificación como a la determina
ción espectrofotométrica cuantitativa (Fig. 28.49).
R—O—C^° + HO" R—O—C—NH, ~°olc£K' —► O=C=N ©]

[CotOCNIJ2-
NH, I —HOR L J
OH Cianato Isocianato
Figura 28.49. Descomposición alcalina de uretanos (carbamatos) y formación de complejos de cobalto.
Los uretanos con grupos carbamoilo primarios se pueden derivar por reacción con xantidrol o anhídrido
acético. Los derivados así formados se identifican por su punto de fusión. Por ejemplo, el meprobamato (dicar-
bamato de 2-metil-2-propiltrimetileno) forma un bisacetil derivado (p.f. 124-128 °C).
8.2. Urea y ureidos
La urea tiene unas propiedades fisicoquímicas que permiten su inmediata identificación. La reacción más carac
terística de la urea es la llamada «reacción del biuret», cuyo nombre se debe al del producto que se forma, junto
con amoníaco y ácido cianúrico, en el calentamiento seco de la urea (Fig. 28.50a). En medio básico, el biuret
forma tres diferentes complejos coloreados con Cu2* (Fig. 28.50b).
a)
I) OH'
2) Cu2*
NH, +
Ácido cianúrico
Biuret /Cu2* /OH' = 2:2:6

(violeta)
Figura 28.50. a) Descomposición térmica de la urea, b) Algunos complejos del biuret con Cu24.
Además de la urea, la reacción del biuret es positiva para los compuestos que presentan las subestructuras
que se indican en la Figura 28.51a. Es especialmente importante la determinación de péptidos y proteínas por
este método (Fig. 28.51b).
Figura 28.51. a) Algunos fragmentos estructurales que dan la reacción del biuret, b) La reacción del biuret aplicada
a un péptido.
El término ureido suele aplicarse a los acilderivados de la urea de cadena abierta. También existen acil-
ureas cíclicas, como las hidantoínas y los ácidos barbitúricos, que se estudiarán como grupo aparte.
Los ureidos con grupo NH2 libre condensan con xantidrol
*
. en medio ácido, a través de un intermedio ca
nónico, cuya formación espontánea se debe a la estabilización por resonancia de la estructura plana «cuasi-aro-
mática» que se forma (Fig. 28.52).
Xantidrol
NHCONHR
Figura 28.52. Determinación de ureidos por reacción con el xantidrol.
Cuando el ureido presenta un átomo de bromo en su molécula, como es el caso del bromisoval (2-bromo-
3-metilbutirilurea) y el carbromal (2-bromo-2-etilbutirilurea), la identificación del compuesto se puede hacer
aprovechando la reactividad del halógeno.
Así, para la detección de ambos por cromatografía de capa fina se pulveriza la placa con solución de NJ>J-
dimetilfenilenodiamina y se irradia con luz UV. En estas condiciones, se descompone el ureido con desprendi
miento de bromo, que causa la oxidación del grupo cromógcno del reactivo, originando un catión radical que se
denomina «rojo de Wurster» (Fig. 28.53).
R1 = H, R2 = CH(CH3)2 Bromisoval
R‘=R2 = C2H5 Carbromal
Figura 28.53. Formación del rojo de Wurster.
Estos compuestos también pueden ser determinados por reacción con iodo en medio básico, en condicio
nes similares a las de la clásica reacción del iodoformo para la identificación de metilcetonas (Fig. 28.54).
4 El xantidrol no es un reactivo específico de los derivados de la urea. También reacciona con amidas, semicarbazidas, hidrazinas,
sulfonamidas, aminas, mcrcaptanos y compuestos con grupos mctilcno activados.
Figura 28.54. Determinación del carbromal por reacción con iodo en medio básico.
8.3. Ureidos cíclicos
8.3.1. Hidantoínas
Las hidantoínas son derivados cíclicos de la urea. Son ácidos débiles, por lo que es muy frecuente su empleo en
forma de sales (Fig. 28.55). Los elevados puntos de fusión y su escasa hidrosolubilidad pueden explicarse a tra
vés de su alto grado de asociación intermolecular por enlace de puente de hidrógeno.
c‘h’^n.q
c6h,-<
Figura 28.55. Disociación de la fenitoína (difenilhidantoína).
Entre las reacciones analíticas más importantes que caracterizan a las hidantoínas podemos destacar la
reacción de Zwikker, que es también característica de otras estructuras lactámicas, tales como los ácidos bar-
bitúricos, algunos derivados de purina, piridina y piperidina, así como algunas sulfonamidas.
Consiste en el tratamiento del ureido cíclico 5,5-disustituido con sales de Co(H) en medio alcalino,
dando lugar a un complejo coloreado que puede ser estabilizado por adición de una amina, como la piperidi
na (Fig. 28.56a).
La reacción con óxido de mercurio (II) en ácido clorhídrico produce un precipitado blanco soluble en
amoníaco (Fig. 28.56b). También puede tener lugar una reacción coloreada usando piridina y solución de sul
fato de cobre (Fig. 28.56c).
X = OH, Cl
Figura 28,56. Algunos complejos de las hidantoínas útiles en su identificación.
Un método de derivación consiste en el tratamiento de la hidantoína con cloruro de 4-nitrobencilo en so

lución de carbonato alcalino. El precipitado blanco obtenido se debe al producto de alquilación sobre el hetero-
átomo más ácido, en este caso el nitrógeno en posición 3 (Fig. 28.57).
La reacción del xantidrol de los ureidos abiertos, comentada en el Apartado 8.2 se puede aplicar también
a la identificación de estas estructuras.
Figura 28.57. Alquilación de hidantoínas en N-3 en medio básico.
8.3.2. Ácidos barbitúricos
La analogía estructural de estos ureidos cíclicos con las hidantoínas se refleja en la similitud de las reacciones
analíticas que les caracterizan: la reacción de Zwikker, la formación de sales de plata insolubles, la reacción con
cloruro de mercurio, la liberación de amoníaco por hidrólisis, la formación de complejos coloreados de cobre, la
alquilación con cloruro de p-nitrobencilo y la reacción con el xantidrol, siendo los productos de dichas reaccio
nes análogos a los descritos para las hidantoínas.
8.4. Derivados de guanidina
La reacción de Sakaguchi (tratamiento con hipobromito y 1-naftol) permite identificar la presencia del grupo
guanidino por la formación de un precipitado coloreado, cuya estructura ha sido muy discutida y varía de unos
compuestos a otros.
Por ejemplo, en el caso del aminoácido arginina. se ha identificado, ente otros productos, la quinonimina
I. procedente de la oxidación a quinona del a-naftol, seguida de condensación con el grupo guanidino y adición
de ácido hipobromoso (Fig. 28.58).
Figura 28.58. Reacción <ic Sakaguchi de la arginina.
9. REACCIONES DE SISTEMAS POLICARBOCÍCLICOS
9.1 Esteroides
Los esteroides tienen como esqueleto común el núcleo del gonano. que está formado por cuatro anillos conden-
sados de 5 6 6 eslabones (A-D) (Fig. 28.59) sobre los que se asientan las funciones que permiten su caracteriza
ción. Las hormonas esteroídicas se han clasificado tradicionalmente en tres grupos, de acuerdo con su espectro
UV. Así, los estrógenos, que tienen el anillo A con estructura fenólica. presentan una A,,», a 281 nm; los 3-ceto-
esteroides a. p-insaturados absorben en un intervalo de 239-244 nm, y los de estructura de dienona tienen un
máximo a 238 nm.
12 n
Figura 28.59. Estructura del anillo A de las hormonas esteroideas.
Los esteroides fenólicos, como el estradiol, pueden identificarse a través de una reacción coloreada de co
pulación con diversas sales de diazonio (Fig. 28.22), y las cetonas a. P-no saturadas pueden condensar con la
hidrazida del ácido isonicotínico, para dar hidrazonas coloreadas que presentan máximos de absorción caracte
rísticos a 380-405 nm (Fig. 28.60).
Figura 28.60. Caracterización de 3-cetoesteroides.
Otros esteroides con función hidroxilo libre o en forma de glucósido, en presencia de ácido sulfúrico y an
hídrido acético, se deshidratan a especies I, las cuales sufren dimerización con la formación de un sistema te-
traénico II que se oxida al hexaeno III. cuyo catión IV es responsable de la coloración que adquiere la mezcla.
Este proceso se conoce como reacción de Liebermann-Burchard (Fig. 28.61). El agente oxidante presente en
el medio de reacción es el trióxido de azufre, que se genera a partir del ácido sulfúrico y el anhídrido acético:
Figura 28.61. La reacción de Liebermann-Burchard.
10. REACCIONES DE SISTEMAS HETEROCÍCLICOS
Se recogen en este apartado ejemplos que ilustran reacciones de interés analítico de los sistemas heterocíclicos
más ampliamente representados entre las estructuras con actividad farmacológica. Muchos hetcrociclos de inte
rés farmacéutico (succinimidas, hidantoínas, barbitúricos, etc.) han sido ya estudiados en otros apartados.
10.1. Heterociclos pentagonales con un heteroátomo
Los sistemas derivados de pirrol presentan una elevada reactividad frente a los electrófilos, lo que permite lle
var a cabo reacciones de sustitución aromática utilizando electrófilos poco habituales en sistemas bencénicos,
como, por ejemplo, los aldehidos. El empleo de p-dimetilaminobenzaldehído en medio ácido (reactivo de Ehr
lich) conduce a un producto muy conjugado, coloreado, que permite la identificación y determinación espectro-
fotométrica de sistemas pirrólicos (Fig. 28.62).
OH
Figura 28.62. Determinación de derivados pirrólicos empleando el reactivo de Ehrlich.
Los derivados de indol conducen a resultados análogos (reacción de van Urk). El producto formado de
pende de las condiciones de reacción (Fig. 28.63), predominando en medios débilmente ácidos los productos I,
incoloros, resultantes de la condensación entre una molécula de aldehido y dos de indol. La oxidación de I por
acción del aire conduce a los derivados azules II. En ácidos concentrados, se obtienen los derivados amarillos
III, que se transforman en IV por dilución. Entre otras aplicaciones, la detección del triptófano (ácido a-ami-
noindol-3-propiónico) utilizando el reactivo de Ehrlich se ha empleado como criterio taxonómico en Microbio
logía.
Figura 28.63. Reacciones de derivados de indol con el reactivo de Ehrlich.

ANÁLISIS DE FÁRMACOS BASADO EN LA REACriVIDAD DE GRUPOS FUNCIONALES 853
Figura 28.64. Mecanismo de las transformaciones resumidas en la Figura 28.63.
10.2. Heterociclos pentagonales con dos heteroátomos
Existen dos estructuras derivadas de pirazol de considerable interés en el análisis farmacéutico: el siste
ma de 3-pirazolin-5-ona y el de 3,5-pirazolidinadiona (Fig. 28.65a). Ambas estructuras se encuentran presentes
en compuestos con actividad analgésica, antipirética y antiinflamatoria.
3-Pirazolin-
-5-ona
Figura 28.65. Algunas familias de fármacos derivados del pirazol y formación de complejos con Fe (Ill).
El sistema de 3-pirazolin-5-ona puede describirse mediante dos estructuras de Lewis resonantes, una neu
tra y la otra dipolar (betaína), que contribuye a la estructura real en aproximadamente un 30%. Gracias a ello,
las 3-pirazolin-5-onas, como por ejemplo el analgésico-antipirético fenazona. forman complejos coloreados se
mejantes a los que originan los fenoles con el ion Fe (ID) (Fig. 28.65b), lo que se utiliza como criterio de identi
ficación en la Farmacopea Europea.
Las 3-pirazolin-5-onas y las 3,5-pirazolidinadionas presentan algunos rasgos estructurales comunes, que
permiten el uso de reacciones analíticas análogas. Por ejemplo, la hidrólisis ácida de ambos tipos de sistemas
conduce a derivados de hidrazina. cuya identificación sirve de base a la del heterociclo de partida. Así. la hidró
lisis ácida de la fenazona origina W-metil-N'-fenilhidrazina, que puede oxidarse con óxido de setenio a una sal
de diazonio, identificable mediante un proceso de diazocopulación con a-naftilamina (Fig. 28.66).
Figura 28.66. Identificación de 3-pirazolin-5-onas.
Del mismo modo, la hidrólisis ácida del antiinflamatorio fenilbutazona proporciona hidrazobenceno
que, en el medio ácido de reacción, experimenta una transposición bencidínica a 4,4'-diaminobifenilo (benci-
dina). Gracias a su carácter de amina aromática, ésta se puede identificar por diazotación y diazocopulación
(Fig. 28.67).
Figura 28.67. Identificación de 3,5-pirazolidinadionas: Fenilbutazona.

Como ejemplo de un derivado de tiazol, mencionaremos el caso de la tiamina (vitamina B,). que se iden
tifica mediante su transformación en medio básico en un derivado muy fluorescente, llamado tiocromo. La tia
mina en disolución se encuentra en equilibrio con las especies I y II representadas en la Figura 28.68, especial
mente en medio básico. La oxidación de I por el oxígeno del aire conduce al tiocromo.
Figura 28.68. Identificación de la tiamina por transformación en tiocromo.
10.3. Heterociclos hexagonales
Las reacciones de identificación de los derivados de piridina suelen basarse en su transformación en sistemas
de piridinio por alquilación, acilación, arilación u oxidación del átomo de nitrógeno. Por ejemplo, la reacción de
la piridina o sus derivados con el l-cloro-2,4-dinitrobcnceno produce una sal de piridinio (I. Fig. 28.69) que,
debido al carácter intensamente aceptor de su nitrógeno, puede ser fácilmente atacada por nucleófilos, como el
anión hidróxido. El derivado de 2-hidroxi-l,2-dihidropiridina II así obtenido puede considerarse como un he-
miaminal cíclico, y por ello es inestable y se abre para dar III (reacción de Zinke-Konig). A partir de este pun
to, la reacción de identificación puede tomar dos caminos. En medio básico, III origina un anión de color rojo
(IV), debido a la alta deslocalización de la carga negativa (Fig. 28.69).
NO2
Figura 28.69. La degradación de Zinke-Konig de anillos de piridina.
En medio ácido, otro camino de hidrólisis del enlace imino en el tautómero de III conduce a la formación
de 2-pentenodial («glutaconodialdehído»), que se identifica fácilmente gracias a que, en medio básico, origina
un anión muy coloreado tras su reacción con el ácido barbitúrico (Fig. 28.70), Obsérvese la analogía entre esta
reacción y la de la murexida. descrita en el apartado siguiente.
Figura 28.70. Identificación de derivados de piridina.
10.4. Heterociclos condensarlos superiores
Algunas de las reacciones analíticas del sistema de purina pueden estudiarse empleando las bases xánticas
como compuestos de referencia. La llamada «reacción de la murexida» es una de las más empleadas en la deter
minación de xantinas, aunque no es totalmente específica. Consiste en la evaporación a sequedad de una solu
ción en ácido nítrico del derivado de purina. seguida de adición de amoníaco acuoso para originar un colorante
púrpura. El mecanismo propuesto para esta reacción se representa en la Figura 28.71, tomando como sustrato el
ácido úrico. La fragmentación hidrolítica-oxidativa de éste conduce a las estructuras I y II.
II
Figura 28.71. Diversos modos de fragmentación de la molécula de ácido úrico en presencia de ácido nítrico.
Por otra parte, la hidrólisis de otra molécula de ácido úrico seguida de descarboxilación en el anillo de
imidazol conduce a la estructura III (Fig. 28.72a). En el compuesto I, existe un grupo carbonilo cetónico, que
puede condensarse con el grupo amino de III. La imina resultante de esta reacción, por adición de amoníaco,
origina un anión muy deslocalizado, responsable del color final (Fig. 28.72b).
Figura 28.72. Etapas finales de la reacción de la murexida.
La hidrólisis básica del anillo pirimidínico de! sistema de xantina sirve de fundamento a reacciones espe
cíficas para la identificación de teofilina y cafeína (la teobromina no se hidroliza en las condiciones empleadas).
La apertura del anillo seguida de descarboxilación del ácido carbámico formado inicialmente, conduce a los co
rrespondientes derivados de imidazol. llamados teofilidina y cafeidina (Fig. 28.73).
CH,
R = CH, Cafeína R = CH, Cafeidina

R=H Teofilina R -H Teofilidina
Figura 28.73. Hidrólisis básica de xantinas.
La teofilidina. por presentar un grupo NH libre, forma un anión en medio básico, que se identifica gracias
a su reactividad frente a las sales de diazonio (Fig. 28.74a). La cafeidina, en cambio, no es ácida. por lo que no
interfiere en la determinación anterior. Sin embargo, puede detectarse con facilidad por reacción con acetilace-
tona y p-dimetilaminobenzaldehído en medio ácido, en la que se origina un colorante polimetínico a través de
un mecanismo complejo (Fig. 28.74b).
Figura 28.74. Reacciones de identificación de la teofilina y la cafeína.
Los alcaloides suelen ser sistemas heterocíclicos complejos. Aunque un estudio detallado de sus reaccio
nes analíticas escapa al objetivo de este capítulo, se ofrece a continuación un breve resumen de las principales
reacciones empleadas en la caracterización de un grupo de alcaloides de especial relevancia terapéutica: la mor
fina y estructuras relacionadas. Los alcaloides tropánicos han sido estudiados en el Apartado 7.1.
La mayor parte de las reacciones analíticas de la morfina se basan en su tratamiento con agentes oxidan
tes (molibdato amónico, vanadato amónico, ácido nítrico, iodo) en ácido sulfúrico concentrado. En estas condi
ciones. se observa una transposición del esqueleto de morfinano a una estructura conocida como apomorfina
*
,
que es un derivado de catecol y se oxida fácilmente a una o-quinona coloreada (Fig. 28.75).
* La apomorfina tiene interés terapéutico como agente emético; se prepara por tratamiento de la morfina con ácido clorhídrico
concentrado, de acuerdo con el mecanismo indicado en la Figura 28.75. Su interacción con receptores de dopamina se ha descrito en el
Capítulo 13.
Quinona coloreada
Figura 28.75. Identificación de alcaloides morfínicos con oxígeno fenólico libre.
El tratamiento de la morfina y alcaloides relacionados, como la codeína. con formaldehído en ácido sulfú
rico produce un color púrpura, que evoluciona a violeta (reacción de Marquis).
Un estudio mecanístico ha demostrado que la reacción se inicia con la formación del aducto I. que en me
dio ácido se transforma en la estructura catiónica estabilizada por resonancia II muy coloreada (Fig. 28.76). En
la reacción de Marquis no se observa transposición al esqueleto de apomorfma. lo que se atribuye a la elevada
reactividad del formaldehído.
Finalmente, la morfina y todos los alcaloides relacionados que presentan un hidroxilo fenólico. pueden
determinarse por tratamiento de sus soluciones con iodato potásico y ácido clorhídrico. En estas condiciones,
la morfina sufre una reacción de acoplamiento oxidativo fenólico. a través de un producto intermedio con
Figura 28.76. Identificación de alcaloides morfínicos a través de la reacción de Marquis.
Pseudomorfina
F ¡gura 28.77. Acoplamiento oxídativo de dos moléculas de morfina.

estructura de radical libre, que la transforma en un dímero conocido como pseudomorfina (Fig. 28.77)
*
. Este
proceso es oxidativo y causa la reducción del iodato a iodo elemental, que se detecta por los métodos habi
tuales.
BIBLIOGRAFÍA
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Smith R. M.: Gas and Liquid Chromatography in Analytical Chemistry, Capítulo 7. John Wiley and Sons, 1988.
♦ La fonnación de pseudomorfina por efecto del oxígeno atmosférico es cl principal mecanismo de degradación in vitrv de las so
luciones de morfina.
---------------------------------------------------------29-------------------------------------------------------------
Los métodos espectroscopios

en el análisis de fármacos
1. INTRODUCCIÓN
Entre los métodos de análisis, tienen especial relevancia los métodos ópticos, que pueden dividirse en métodos
no espectroscópicos y espectroscópicos. Los primeros se basan en la interacción entre las radiaciones electro
magnéticas y la materia, que producen como resultado un cambio en la dirección o en las propiedades físicas de
una determinada radiación (refracción, reflexión, dispersión, difracción o polarización). Por el contrario, los
métodos espectroscópicos se basan en las transiciones que se producen entre diferentes estados energéticos de
los átomos o moléculas como consecuencia de la interacción con una radiación de una energía determinada. Es
tas transiciones, a excepción de la espectroscopia Raman (que se basa en un tipo especial de interacción de dis
persión) y la espectropolarimetría (que mide la polarización en función de la longitud de onda), dan lugar a los
distintos tipos de espectros, que son característicos de cada molécula.
Aunque para determinar o confirmar la estructura de los compuestos orgánicos pueden practicarse ensa
yos químicos (véase el Capítulo 28), o realizarse su síntesis a través de estrategias alternativas que conducen a
una misma organización estructural, los métodos espectroscópicos son los más utilizados en el análisis cualita
tivo. La aplicación de técnicas espectroscópicas para la determinación de la estructura de compuestos aislados
de fuentes naturales o de aquellos que son productos de síntesis ocupa a un buen número de químicos orgánicos,
resultando imprescindibles en la síntesis orgánica para controlar la formación y pureza de los productos inter
medios o finales. Su aplicación al análisis de fármacos es bastante diferente, ya que éste es, además de cualitati
vo, cuantitativo. Hay que añadir que la espectrometría de masas es otra técnica muy utilizada en el análisis cua
litativo de fármacos y compuestos orgánicos, si bien no es propiamente un método espectroscópico porque en
ella no está implicada ninguna radiación electromagnética.
Las regiones del espectro electromagnético se muestran en la Figura 29.1. Recordemos que la longitud de
onda (X) es la distancia entre dos partes consecutivas de la onda cuyas vibraciones están en fase. Se expresa en
Á (1010 m) o en nm (109 m), para los espectros visible y ultravioleta (UV-Vis), y en pm (106 m) para el infra
rrojo (IR). El número de onda, que es la inversa de la longitud de onda (l/A), se expresa en cm'1, y la frecuencia
(v). que es el número de ciclos por segundos, en segundos 1 o en Hertzios (Hz). La energía de la radiación es
directamente proporcional a la frecuencia e inversamente proporcional a la longitud de onda (Ecuación (IJ,
donde h es la constante de Planck y c la velocidad de la luz en el vacío).
A = 6,62 x 10'54 J ■ s; c = 3xl08m/s
Figura 29.1. Regiones del espectro electromagnético.
La absorción de la radiación electromagnética por las moléculas o átomos, que es el fundamento de todos
los métodos espectroscópicos, es un fenómeno reversible que puede representarse según se indica en las Ecua
ciones (21 y [31. donde X y X
* representan la partícula o molécula en estado fundamental y excitado, respectiva
mente. El período de semidesintegración en el estado excitado es breve, produciéndose la relajación al estado
fundamental a través de varios procesos de los que el más común es la liberación de calor.
X + Av -» X
* (absorción de energía)
X
* X + calor (dispersión de energía por colisiones moleculares en forma de calor)
La energía absorbida (Av) está cuantificada y viene dada por la Ecuación [4j. en la que E, y £, son las
energías del estado superior (excitado) e inferior (fundamental).
Av = E,-E,
La magnitud de la radiación incidente (/„) que es absorbida al pasar por la materia depende del espesor de
la misma (ley de Lambert) y de su concentración (ley de Beer). Esta dependencia es fundamental en el análisis
cuantitativo, ya que permite calcular la concentración de una sustancia a partir de la medición de la radiación
absorbida (seleccionando la longitud de onda óptima en la que el soluto absorbe fuertemente) por una disolu
ción de la misma (Ecuación [5]).
I.
log — = a be = A [5]
/
A = absorbancia
a = absortividad en g 1 x L x cm'1 (la absortividad molar o coeficiente de extinción molar (e) se expresa
en mol'1 Lcm').
b = longitud de la cubeta en cm
c = concentración en g/L o en moles/L
= intensidad de la radiación incidente
/ = intensidad de la radiación transmitida
LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS EN EL ANÁLISIS DE FÁRMACOS 865
La relación ///„ se denomina transmitancia (T), que a veces se utiliza como tanto por ciento de transmitan-
cia (% T, Ecuaciones [6] y [7]). La relación entre % T y la absorbancia se muestra en la Ecuación [8J.
log-j- = - log T= a h c [6]
%T=y-xlOO [7]
A = log l„\l = 2 - log % T [8]
Una molécula o átomo puede absorber radiación electromagnética de una longitud de onda adecuada para
promocionar sus electrones a estados energéticos superiores. Esto es lo que ocurre en la espectroscopia UV-Vis
cuando se irradia con una longitud de onda apropiada (por eso, los espectros UV-Vis se denominan espectros
electrónicos). La energía total de una molécula es la suma de las energías electrónica, de vibración y de rota
ción, por lo que el incremento de energía de una determinada transición en el UV-Vis produce también transi
ciones de los estados de vibración y rotación, según se expresa en la Ecuación [9],
AE = (E electrónica + £ de vibración + £ de rotación)s - (£ electrónica + £ de vibración + £ de rotación^ [9]
Los espectros de emisión se deben a un proceso inverso al de la absorción, de modo que la sustancia pasa
de un estado excitado X* (de elevada energía) a uno de menor energía, emitiendo radiación (Ecuación [3]). Des
pués de la absorción de radiación electromagnética, algunas sustancias, en lugar de emitir calor, pueden desacti
varse por otros mecanismos de emisión, como la fluorescencia o la fosforescencia. La espectroscopia de emi
sión se utiliza casi exclusivamente para el análisis de metales, cuyos electrones de valencia se excitan y, al
regresar a su estado fundamental, emiten radiación en la región UV, Vis o IR próximo del espectro. La identifi
cación de la longitud de onda de estas radiaciones permite el análisis cualitativo de los elementos presentes (es
característica, por ejemplo, la radiación amarilla que emite el sodio), mientras que la medida de su intensidad
permite el análisis cuantitativo.
Las medidas de concentración por ambas técnicas se realizan por calibración directa comparando con di
soluciones de referencia que contienen una concentración conocida del elemento, o adicionando volúmenes cre
cientes de una disolución patrón de dicho elemento, calculando por el método de mínimos cuadrados la ecua
ción de regresión lineal y. a partir de ésta, la concentración de la disolución problema.
2. ESPECTROSCOPIA UV-VIS
La espectroscopia UV-Vis fue uno de los primeros métodos físicos que se aplicó al análisis cuantitativo y a la
elucidación estructural. Aunque las espectroscopias IR y RMN son las técnicas más idóneas para el análisis cua
litativo y estructural, la espectrofotometría UV-Vis supera al resto de los métodos ópticos de análisis en lo que
respecta al análisis cuantitativo, siendo también auxiliar para la determinación estructural. Para esta última se
utilizan una serie de reglas empíricas que pueden predecir las bandas de absorción.
Según la Ecuación [5], la absortividad molar (e) de una sustancia en disolución a una longitud de onda es
pecífica (X,,lit) es la absorbancia a aquella longitud de onda de una disolución molar en una cubeta de 1 cm. Las
sustancias que tienen valores de e menores de 100 absorben débilmente (son el resultado de transiciones poco
probables), mientras que las que poseen valores mayores de 10.000 absorben muy intensamente (son el resulta
do de transiciones muy probables). La absorbancia calculada con mayor frecuencia es el valor A (1%, 1 cm),
que expresa la absorbancia de una disolución de lg/100 mL (1% peso/volumen) en una cubeta de I cm. La in
terconversión de valores e y A (1 %. I cm) es muy sencilla y se indica en la Ecuación [ 10].
1%
A,1 cm x Pm
[10]
10
Pm = peso molecular
Cuando una sustancia tiene bandas de absorción anchas, que no se afectan con la variación de los paráme
tros instrumentales, basta preparar una disolución de la misma (cuya concentración quiere determinarse) en un
disolvente transparente a la radiación UV-Vis, medir su absorbancia a la longitud de onda en la que se produce
el máximo de absorción (Xn
*,) y comparar con el valor de absortividad estándar A (1 %, I cm). Por ejemplo, su
pongamos que tenemos una disolución de 17a-metiltestosterona en etanol en una cubeta de I cm que, a una X™ *,
= 241 nm, produce una absorción de 0,930. Acudiendo a las farmacopeas, encontraríamos un valor A (1%,
1 cm) a dicha longitud de onda de 540. Por tanto, la concentración de la disolución problema se calcula:
1%
A =A •h■c 0,930 = 540- 1 c c = 0,00172 g/lOOmL
I cm
Para construir la recta de calibrado que relacione la concentración con la absorbancia, es preciso utilizar
varias disoluciones patrón de la sustancia estándar en concentraciones aproximadas a la de la muestra, o realizar
un tratamiento estadístico de los datos. Aplicando este último método, la absorbancia (y) y la concentración (x)
deben estar relacionadas linealmente: y - a + Px. La pendiente de la recta (p) y la ordenada en el origen (a) se
determinan por el método de mínimos cuadrados, a partir de los valores x e y de las distintas disoluciones patrón
y de un blanco, aplicando las Ecuaciones 111 ] y [12], en las que N representa el número de pares de valores x e
y (6 en nuestro ejemplo) (véase la Tabla 29.1).
_ (Zy) (Zx2) - (Zv) (Zry)

(111
N Zx2 - (Zx)2
N Zxy - (Zx) (Zy)

112]
/VZr2-(Zr)2
Tabla 29.1. Valores de absorbancia a 250 nm (Aj») y concentración.
Solución x (Concentración en nxIniL) yMz»)
Blanco 0 0,002
Patrón 10 0,168
Patrón 20 0,329
Patrón 30 0,508
Patrón 40 0,660
Patrón 50 0,846
Muestra ? 0,559
De la ecuación de la recta que resulta aplicando los valores de concentración y absorbancia a 250 nm del
ejemplo de la Tabla 29.1, se deduce la concentración de la muestra:
y = -0,0008 + 0,01679 x; 0,559 = - 0,0008 + 0,01679 x; x = 33,34 pg/mL

Dos o más compuestos diferentes pueden absorber en la misma región del espectro UV-Vis. por lo que se
deberán realizar otros análisis, a fin de tener una identificación correcta (IR. RMN, EM, etc.). Si los grupos cro-
móforos (grupos insaturados responsables de la absorción) se encuentran conjugados, se produce un desplaza
miento batocrómico de la absorción (> X) y, a menudo, se produce también un efecto hipercrómico (> e). Cuan
do el cromóforo está unido a un grupo auxocromo. como NH.. puede producirse un efecto hipsocrómico e
hipocrómico (inversos a los anteriores) por cambios de pH (véase la Tabla 29.2).
Tabla 29.2. Valores y de grupos cromóforos (insaturados) y auxocromos (saturados)
Cromóforo-auxocromo *™ir <mi) ^■mát
\ /
c=c 185 (3-octeno) 8.000
/ \
\ /
c=c-c=c 217 (butadieno) 21.000
/ 1 1 \
\
c=o 188 (acetona) 900
/
\
c=c-c=o 217 (crotonaldehído) 16.000
/ 1
®HNSO2—NH; 16.300
251 (anión de sult'anilamida)
Z X ®
h2nso2—r y—nh5 218 (catión de su lían i lamida) 12.700
En los espectros UV-Vis. pueden observarse desviaciones de la ley de Lambert-Beer si la radiación inciden
te no es suficientemente monocromática o si la muestra se ha concentrado. En este caso, pueden producirse cam
bios químicos, como la disociación, la formación de complejos o la polimerización. Por ejemplo, una disolución
acuosa concentrada de ácido benzoico tiene <pH y concentración de forma no ionizada que otra disolución poco
concentrada.
Forma no
Forma
ionizada ionizada
(Xwa = 273 nm. r27J = 970) = 268 nm. e26, = 560)
Así, la mayor concentración de ácido benzoico no ionizado produce en aquélla una desviación positiva de
la ley de Lambert-Beer a X 273 nm y una desviación negativa a X 268 nm. En estos casos, deberá escogerse una
relación adecuada entre la concentración, la absorbancia y la longitud de onda de la luz incidente.
El método para calcular la concentración de la sustancia absorbente (c„) en la mayoría de las farmacopeas
consiste en medir las absorbancias de las disoluciones de la muestra (A,) y de la muestra patrón (Ap), a una con
centración (cp) próxima a la de la sustancia problema en las mismas condiciones.
Para calcular la cantidad en peso (Px), se multiplica el valor c„ (pg/mL o mg/mL) por el volumen V, utili
zado en la dilución de la muestra para su ensayo:
p, = v. •
A-
En algunos casos, es preciso preparar dos disoluciones patrón a concentraciones superiores (cpl) e inferio
res (cp!) a la de la muestra, y calcular sus absorbancias (Ap, y Ap2):
(Ax - Api) (Cp| - cp2) + cpi (Ap, - Ap2)

cK = -----------------------------------------------
Api - Ap2
Hay que tener en cuenta que los ensayos espectrofotométricos de fármacos suelen realizarse con mezclas
de varios componentes cuya absorbancia puede interferir con la de la sustancia que se valora. Si no se conoce la
identidad y la concentración de estos acompañantes, hay que eliminar dicha interferencia por diferentes proce
dimientos, basándose en que, para cualquier longitud de onda, la absorbancia de una disolución es la suma de
las absorbancias de sus componentes individuales y que la medida de la absorbancia es la diferencia entre la ab
sorbancia total de la disolución en la cubeta de la muestra y la de la disolución en la cubeta de referencia. Si se
conoce la identidad, la concentración y la absortividad de la sustancia interferente, la concentración del compo
nente principal se calcula a partir de la absorbancia corregida.
Si se utiliza el procedimiento de espectrofotometría de diferencia, es preciso que puedan encontrarse dos
formas químicas del analito que muestren espectros diferentes (generalmente, variando el pH). También es ne
cesario que las sustancias acompañantes no se alteren con esta reacción o cambio químico. Por ejemplo, si se
registran los espectros de absorción UV-Vis de concentraciones equimoleculares (50 pg/mL) de fenilefrina a
pH 13 y a pH 1, se obtienen las curvas correspondientes a la forma aniónica (1) y catiónica (2) (Fig. 29.2). En
l:Xm4,293nm;A = 0.73 2: 271 nm: A = 0.46
Figura 29.2. Espectros de absorción UV-Vis de disoluciones equimoleculares de fenilefrina a diferentes valores de pH.
la primera, la resonancia del anión fenóxido con el sistema ir aromático produce un desplazamiento batocró-
mico desde un valor de X = 271 nm (en solución ácida) a X = 293 nm, así como un incremento en la absor-
bancia a esta X,„iK (efecto hipercrómico). Ambas curvas se cruzan en los puntos isosbésticos (AA = 0) a 257 y
278 nm.
Si se utiliza un espectrofotómetro de doble haz y una de las soluciones (a pH 1) se coloca en la cubeta de
referencia y la otra (a pH 13) en la cubeta de la muestra, se registra el espectro de diferencia en el que cada pun
to indica la diferencia de la absorbancia (AA) de la disolución alcalina y de la disolución ácida a la misma lon
gitud de onda (Fig. 29.3). En él, la absorbancia debida a las sustancias que absorben a la longitud de onda utili
zada, pero no se alteran con el cambio de pH, (AJ se anula, como se deduce de la Ecuación [13],
AA । — (Aa¡cniino *t A,) - (A^ni., + A,) — AaiCÚ|in„ - A^hj,, — An • b • c [13]
A,kai««> = absorbancia a X, en la disolución 0.1 M de NaOH

*,Aki = absorbancia a X, en la disolución 0,1 M de HC1
AA । = diferencia de absorbancia a Xt medida desde la línea base.
1%
tul - diferencia de absortividad (AA o At’) de la sustancia en la X de medida.
I cm
Figura 29.3. Espectro diferencia de la disolución alcalina frente a la disolución ácida correspondiente a la Figura 29.2.
La medida de una concentración desconocida de fenilefrina se realiza del mismo modo que el ya descri
to para la cuantificación de un único componente, utilizando los valores de absorbancia de este espectro dife
rencia (AA, o AA2, AAj = diferencia de absorbancia a y aZ¡ medida entre un máximo y un mínimo)
(Fig. 29.3).
La absorción de compuestos interferentes sensibles a cambios de pH en la muestra puede eliminarse tam
bién si sus valores de pKa se diferencian en cuatro unidades con el pKa del analito, eligiendo disoluciones lam
pón con valores de pH dos unidades por encima y por debajo respecto de éste. Por ejemplo, el clordiazepóxido
(pKa 4,6) puede estar contaminado con los productos de su degradación hidrolítica demoxepam (pKa = 10,5) y
2-amino-5-clorobenzofenona (pKa = 1). Para su análisis, se ha determinado el valor AA;w, comparando disolu
ciones equimoleculares de la muestra a pH 8 y pH 3, y el valor AA>,,< comparando disoluciones equimoleculares
de la muestra a pH 13 y pH 8.
H,0
Clordiazepóxido
Demoxepam
Otro procedimiento para eliminar las interferencias de componentes distintos al analito que absorben en la re
gión UV-Vis es la espectrofotometría derivada. Ésta se basa en el hecho de que. a partir de una banda de un espectro
nonnal (denominado fundamental, de orden 0 ó espectro D°. Fig. 29.4a), se registran otros espectros derivados (D")
en los que se reflejan los cambios de cfAldk" en el eje de ordenadas frente a X en el de abcisas (Figs. 29.4b y 29.4c).
Obsérvese que. para la segunda derivada, el valor de (X3 en la Fig. 29.4) corresponde a un mínimo, y que las
curvas derivadas de orden par son mucho más estrechas que la fundamental, permitiendo una mayor resolución y
discriminación de los componentes, así como una correcta determinación del valor X,n<a en las bandas individuales.
Figura 29.4. Espectrofotometría derivada.
La Figura 29.5a muestra la curva de un espectro de orden cero, en la que se superponen las absorciones de
dos componentes (A y B), mientras que en el espectro de la segunda derivada (Fig. 29.5b). se observan dos ban
das perfectamente separadas en las que B presenta una banda más estrecha que A.
¡fAIdl.2
Figura 29.5. Espectros de orden cero (a) y segunda derivada (b) de una mezcla de dos componentes Ay B.
Si se cumple la ley de Lambert-Beer en el espectro fundamental, la amplitud o distancia entre un máximo

y un mínimo adyacentes de un espectro derivado también es proporcional a la concentración del analito. En un
análisis cuantitativo, se mide la amplitud mayor (Dfl en nuestro ejemplo).
Una sustancia que absorba débilmente en el ultravioleta, puede transformarse químicamente en otra que
posea un grupo cromóforo para poder cuantificarse por espectroscopia UV-Vis indirecta. Por ejemplo, para de
terminar la fenitoína en sangre, se transforma previamente en benzofenona (por hidrólisis y oxidación). Ésta
muestra gran absorción a X = 257 nm (Fig. 29.6).
NaOH, KMnO.
Figura 29.6. Transformación química de fenitoína (sal sódica) para su determinación por espectrofotometría UV.
Este procedimiento también puede aplicarse para determinar una sustancia que esté acompañada por otras
que interfieren su absorción UV. En este caso, se suele transformar en un derivado coloreado que absorba en el
espectro visible, en el que ya no se produzcan las interferencias mencionadas. Algunas de las reacciones más
utilizadas son la diazotación de aminas aromáticas, seguida de acoplamiento con un fenol o una amina aromáti
ca. para formar azoderivados coloreados cuyos valores y dependen de la naturaleza de los grupos Ar y
Ar1. Como ejemplo se indica, en la Figura 29.7, el derivado azoico de la sulfadiazina y el reactivo de Bratton-
Marshall, que absorbe en el espectro visible (alrededor de 545 nm) por estar muy conjugado.
Derivado coloreado
Figura 29.7. Derivación química a colorantes azoicos aplicada al UV-Vis. Sulfadiazina.
Otros muchos procedimientos colorimétricos están basados en reacciones de condensación de aminas y

compuestos carbonílicos (entre ellos, muchos cetoesteroides). Entre estos derivados (Fig. 29.8). destacan las ba
ses de Schiff (R5 = alquilo o arilo), las hidrazonas (RJ = NHR o NHCOR), las semicarbazonas (R5 = NHCONH¡)
y las oximas (R3 = OH). Por ejemplo, la hidrazida del ácido isonicotínico reacciona con esteroides de estructura
4-en-3-ona o l,4-dien-3-ona en medio ácido, para dar derivados amarillos (X>u< alrededor de 400 nm). Otros
reactivos son la 2,4-dinitrofenilhidrazina y el reactivo de Girard (HOjCCH.NHN’fCHOiCr).
R1
y=o + h2nr’
R-
CONH-NH,
Figura 29.8. Derivación química a iminas aplicada al UV-Vis. 3-Cetoesteroides a.p-insaturados.

Por el contrario, las aminas pueden condensarse para su valoración espectrofotométrica con compuestos
carbonílicos. Así, el reactivo de Ehrlich (4-dimetilaminobenzaldehído) se utiliza para la determinación del hi-
drocloruro de procaína a través de la formación de una imina coloreada (Fig. 29.9).
R. Ehrlich
CO,CH,CH,NEt, (CH,),N CH=N
Figura 29.9. Derivación química a iminas aplicada al UV-Vis. Procaína.
Determinadas sales de trifeniltetrazolio se reducen con a-cetoles (como los 2l-hidroxi-20-cetoesteroides)

para dar formazano, que es coloreado (Fig. 29.10). En esta reacción redox, el grupo hidroxilo primario pierde
dos protones y dos electrones, transformándose en aldehido, y el anillo de tetrazolio se reduce, originando un
compuesto coloreado por adición de un protón y dos electrones.
2Ich,oh CHO
2 l-Hidroxi-20-cetoesteroide
Sal de 2,3,5-trifeniltetrazolio Formazano (coloreado)
Figura 29.10. Derivación química a través de un proceso redox aplicada al UV-Vis. 2l-Hidroxi-20-cetoesteroides.
La oxidación de la cadena lateral de la efedrina a benzaldehído es otro procedimiento para originar deri
vados que absorben en UV-Vis (Fig. 29.11).
CHOH-CH —NHCH,
¡o®
CH,
Efedrina Benzaldehído
(absorción intensa a 240 nm)
Figura 29.11. Derivación química a través de un proceso de oxidación aplicada al UV-Vis. Efedrina.
Algunas formulaciones que contienen sales de amonio cuaternario o aminas pueden ensayarse por el
«método del colorante ácido», que consiste en la adición de un colorante ácido como el indicador naranja de
metilo. Éste forma un par iónico que puede extraerse con un disolvente orgánico (como el cloroformo o el di-
clorometano), midiéndose después su absorbancia. La elección del pH permite determinar selectivamente una
mezcla de amina y sal de amonio cuaternario.
Los quelatos de metales con ligandos multidentados (con dos o más grupos donadores) son frecuentemen
te coloreados. Por lo tanto, la concentración de aquéllos puede medirse adicionando un exceso de ligando (tam
bién puede medirse la concentración del ligando adicionando un exceso de metal). Por ejemplo, la adrenalina
forma, en una disolución amortiguada de sulfato ferroso, un complejo púrpura con = 540 nm, que tiene una
intensidad máxima a pH 8-8,5 y puede servir para su análisis. Por otra parte, una de las primeras sustancias
utilizadas para el ensayo espectrofotométrico de metales pesados (como el Cd, Hg, Cu, Pb y Zn) fue la ditizo
na (1,5-difeniltiocarbazona). El complejo formado por ditizona y plomo es soluble en disolventes orgánicos.
Tiene un color rojo carmín y su gran coeficiente de extinción (éj» = 7 x 104) permite la detección de pg de
metal (Fig. 29.12).
LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓP1COS EN EL ANÁLISIS DE FÁRMACOS 873
Complejo de ditizona y plomo

Complejo de adrenalina
y sulfato ferroso
Figura 29.12. Derivación química a través de la formación de complejos aplicada al UV-Vis. Determinación
de adrenalina y de plomo.
3. ESPECTROMETRÍA DE EMISIÓN Y ABSORCIÓN ATÓMICA
Estas técnicas se aplican fundamentalmente al análisis cualitativo de metales y ciertos elementos no metálicos
como el silicio. Se utilizan también en los ensayos límite de impurezas dentro del control analítico de fármacos.
Por ejemplo, el plomo que puede acompañar como impureza al carbonato cálcico tiene un valor límite de 10
ppm, determinándose por absorción atómica.
En la espectrometría de emisión de llama (fotometría de llama) se mide la intensidad de la luz emitida a
una determinada longitud de onda por átomos excitados térmicamente en una llama (método más reproducible y
controlable que la descarga eléctrica). Como la sensibilidad depende de que el AE entre los estados excitado y
fundamental sea pequeño (porque habrá mayor número de átomos excitados), sólo los metales alcalinos y alca-
linotérreos con AE < 3 eV (Na, K, Li, Ca y Ba) se cuantifican por este procedimiento. Así se determinan, por
ejemplo, el sodio y el potasio de determinados líquidos biológicos, o el calcio que acompaña a las disoluciones
de cloruro magnésico.
En la espectrofotometría de absorción atómica se determina, por el contrario. la radiación absorbida por el
vapor del elemento que se cuantifica a la X. de una de las líneas de absorción de éste. Se utiliza, por ejemplo, pa
ra la determinación de cinc total y cinc en solución de una suspensión de insulina-Zn (una suspensión de insuli
na en forma de complejo con cloruro de cinc).
4. ESPECTROFLUORIMETRÍA Y ESPECTROFOSFORIMETRÍA
En la espectrofluorimetría, se mide la intensidad de la fluorescencia emitida por una sustancia en relación con la
emitida por un patrón determinado. Tras disolver el fármaco fluorescente en el disolvente adecuado, se ilumina
la cubeta con radiaciones monocromáticas de una determinada y se mide la intensidad de la luz emitida
(Xtim>re,OTre)- En el análisis cuantitativo, se calcula la concentración de la solución (c,):
I c ¡x'. intensidad de luz emitida por el analito

f,. = — — lf. intensidad de luz emitida por la disolución de referencia
!r cf. concentración de la disolución de referencia
Cuando /. no es proporcional a la concentración, se puede llevar a cabo la medida utilizando una curva de
calibración.
Esta técnica permite determinar concentraciones 10'7 a 10'8 M en sustancias que poseen una fluorescencia
razonable (estas concentraciones son 1000 veces menores que las que se determinan por espectrofotometría
UV-Vis). Por ello, aunque proporciona información acerca de la estructura molecular, se utiliza fundamen
talmente con fines cuantitativos en el análisis de muestras biológicas que contienen bajas concentraciones de
fármacos y de sus productos de degradación metabólica, así como de formulaciones que contienen concentra
ciones menores de 1 mg. Si la sustancia se encuentra en concentración suficiente, la espectrofotometría UV-Vis
suele ser más precisa. Los instrumentos que miden la intensidad de la fluorescencia se llaman fluorímetros,
mientras que los que miden dicha intensidad a longitudes de onda de excitación y emisión variables se denomi
nan espectrofluorímetros.
Normalmente, las especies fluorescentes suelen medirse a diferentes longitudes de onda de excitación
máxima o de emisión máxima, que pueden seleccionarse para reducir las interferencias que pudieran producir
otras especies fluorescentes de la muestra. También se aplican las técnicas de separación, los cambios de pH, et
cétera (como en la espectroscopia UV-Vis).
La intensidad de fluorescencia de una sustancia (F) es proporcional a su concentración sólo si la absor-
bancia en una cubeta de 1 cm es inferior a 0.02 porque, de otro modo, existe un error significativo que puede
llevar a que la fluorescencia sea independiente de la concentración y sólo sea proporcional a la intensidad de la
radiación incidente /„ (de hecho, puede descender cuando aumenta la concentración). Por otra parte, si los es
pectros de excitación y emisión se solapan, se produce la reabsorción de la fluorescencia. El método es tan sen
sible que hay que tomar otras precauciones: hay que evitar el oxígeno (que puede oxidar la sustancia a produc
tos no fluorescentes o puede atrapar fluorescencia), hay que controlar el pH si las formas ionizadas tienen
diferente espectro de absorción, hay que evitar también la fotodescomposición (ya que esta técnica requiere una
gran intensidad luminosa que puede descomponer fotoquímicamente el analito), y hay que fijar la temperatura y
la viscosidad (porque si aumenta aquélla o disminuye ésta, suele disminuir la fluorescencia por las colisiones
que desactivan las moléculas excitadas). Es decir, se necesita mucha más experimentación previa para poder
utilizar la espectrofluorimetría en el análisis cuantitativo que en la espectrofotometría UV-Vis.
Los compuestos que no son fluorescentes pueden derivarse químicamente para poder ser valorados por
espectrofluorimetría. Muchos constituyentes inorgánicos, como el setenio, pueden determinarse también por es
pectrofluorimetría porque forman complejos fluorescentes con reactivos orgánicos, como el 2.4-diaminonafta-
leno; varios compuestos orgánicos presentes en formulaciones galénicas se derivan también, como es el caso
del hidrocloruro de tiamina (vitamina B ।). Éste se determina por oxidación a tiocromo, que es un derivado azul
muy fluorescente que se extrae con 2-metil-1-propanol y se valora como tal (Fig. 29.13).
K,Fe(CN)6
NaOH
Hidrocloruro de tiamina
Figura 29.13. Derivación química de tiamina para el análisis espectrofluorimétrico.
La espectrofosforimetría es algo más complicada, pero da mejores resultados en muestras complejas y

con posibles interferencias, ya que posee un parámetro más de diferenciación: el tiempo de relajación (cuando
se deja de irradiar la muestra, la fosforescencia va disminuyendo exponencialmente respecto al tiempo). Si exis
ten diferencias en los tiempos de relajación de dos especies, puede medirse la radiación de la especie con menor
tiempo de relajación reduciendo la velocidad del obturador (fosforoscopio). y después puede medirse la emisión
de la segunda especie aumentando la velocidad de aquél. La sensibilidad de la espectrofosforimetría es mayor
que la de la cspectrofluorimetría, y también puede aplicarse al estudio de trazas de fármacos como el ácido ace
tilsalicílico, la fenacetina. la cafeína, la procaína. la cocaína y el fenobarbital, en el suero sanguíneo, y de cocaí
na y atropina, en la orina.
5. ESPECTROFOTOMETRÍA INFRARROJA
La espectrofotometría IR se considera generalmente un método satisfactorio por sí solo para la comprobación de la

identidad de las sustancias orgánicas por comparación con los espectros de referencia. La región infrarroja del es
pectro electromagnético abarca desde 800 nm (0.8 pm) a 106 nm (1000 pm). Se divide en IR cercano (0.8-2 pm).
medio, que es la región fundamental (entre 2-15 pm, que se corresponden con números de onda de 4000-670 cm
o incluso hasta 50 pm, que se corresponden con 200 cm1) y lejano (50-1000 pm). Esta radiación produce transi
ciones desde el nivel de vibración 0 al I (absorción fundamental), y sobretonos o armónicos como consecuencia de
las transiciones a niveles superiores (la intensidad de absorción, en este caso, es mucho menor).
Para que una molécula absorba energía radiante, además de coincidir con la frecuencia de vibración, debe
producir un cambio en su momento dipolar. Por ello, ciertas vibraciones (como la vibración de tensión del doble
enlace C=C en una olefina simétrica) son inactivas en el IR. Las vibraciones pueden ser de tensión, o estira
miento. y de flexión, o deformación. En estos espectros, se mide la absorción de la luz IR que se produce cuan
do se varía la longitud de onda, que se expresa normalmente como números de onda en cm 1 (1 cm ' = I O'íK en
pm). Las bandas de absorción IR están invertidas respecto a las de los espectros UV-Vis, ya que se mide el tan
to por ciento de transmitancia.
En el análisis cualitativo, el número, la posición y la intensidad relativa de las bandas de absorción son ca
racterísticas de un compuesto. Por tanto, si dos espectros son exactamente iguales, puede decirse que se trata del
mismo compuesto. Para este análisis de identificación, los fármacos deben recristalizarse en el disolvente apro
piado, ya que diferentes formas cristalinas de un mismo compuesto pueden originar espectros diferentes, debido
al fenómeno de polimorfismo (véase el Capítulo 27). Además de comparar el registro en estado sólido con un
espectro patrón publicado en las farmacopeas, debe medirse la absorción del analito disuelto, utilizando el di
solvente como blanco y comparando con la sustancia patrón en las mismas condiciones.
La interpretación de un espectro IR es relativamente sencilla con ayuda de tablas y catálogos. Aunque no
pueden asignarse todas las bandas, porque muchas de ellas son vibraciones de esqueleto, son típicas las frecuen
cias que caracterizan a los grupos funcionales NH. OH, C=O, etc., así como determinadas regiones del espectro
(la situada entre 850-700 cm1. por ejemplo, indica el tipo de sustitución en sistemas aromáticos).
El análisis cuantitativo por espectroscopia IR consiste en la determinación de la concentración con ayuda
de la absorbancia, seleccionando una banda de absorción característica del fármaco:
A = log —
Esta medida presenta normalmente algunas dificultades, aunque tiene la ventaja, respecto a la espectrofo
tometría UV-Vis, de que el mayor número de bandas del espectro IR permite elegir una que sea suficientemente
intensa para cada componente de una mezcla, sin interferencia entre ellos, y determinar la composición relativa
midiendo el área o (si son agudas) la altura de dichas bandas. La desventaja de la espectroscopia IR frente a la
UV-Vis es que requiere concentraciones altas de la muestra (alrededor del 10 %) y que las desviaciones de la ley
de Beer debidas a efectos químicos son relativamente frecuentes. Por ejemplo, las vibraciones de tensión y de
flexión del agolpamiento hidroxilo de alcoholes y fenoles varían por los enlaces de hidrógeno intermoleculares
e intramoleculares. Por ello, la absorbancia del grupo OH libre disminuye al aumentar la concentración de la di
solución, ya que se producen más asociaciones intermoleculares que originan una banda de absorción del grupo
OH enlazado a distinto número de onda. Las desviaciones a la ley de Beer también se deben, en general, a que
las absorciones suelen ser agudas, mientras que la anchura de rendija con la que se trabaja (debido a la baja
energía del IR) es relativamente grande.
La determinación cuantitativa de una muestra por IR está prácticamente condicionada a una curva empíri
ca de calibración, que se realiza preparando disoluciones de diferente concentración. Para una determinación
exacta de la absorbancia. se suele emplear el método de la línea base, que es una línea tangente a la curva de ab
sorción. El valor /„ (100 % T). se aproxima a /'<, dibujando una línea entre los puntos de mínima absorción (a
cada lado del máximo de absorción, según se indica en la Fig. 29.14).
Figura 29.14. Método de la línea base para el cálculo de T (transmitancia) en cl análisis cuantitativo
por espectroscopia IR.
En la espectroscopia IR, sólo pueden detectarse las impurezas a altas concentraciones, pero si se dispone
del compuesto puro, puede usarse el método de diferencia colocando en el haz de referencia dicho compuesto y
en el haz de muestra la muestra impura. Cuando interfieren varias bandas, es necesario el uso de ordenadores.
6. ESPECTROSCOPIA RAMAN
La espectroscopia Raman es un proceso de reflexión óptica en el que una luz monocromática (luz láser, con va
lores de X. en el visible) se dispersa, analizándose el desplazamiento de las frecuencias. La información molecu
lar que proporciona esta técnica es básicamente del mismo tipo que la obtenida por espectroscopia IR, de la que
es complementaria.
Para que pueda registrarse un espectro Raman o. lo que es lo mismo, para que un compuesto sea activo al
Raman, es preciso que durante la vibración haya un cambio de polarizabilidad de la molécula (a), es decir, de su
capacidad para ser polarizada bajo la acción de un campo eléctrico (£), que puede definirse en términos del mo
mento dipolar (p) generado por dicho campo: p = aE. Para moléculas con un centro de simetría, las transiciones
permitidas en IR son prohibidas en Raman, y recíprocamente. Por ejemplo, la vibración de tensión del grupo
funcional C=C en alquenos no aparece, o es muy débil, en el espectro IR, mientras que es muy intensa en Ra
man. Para moléculas sin centro de simetría, todas las transiciones permitidas en IR son también activas en
Raman. Por ejemplo, las vibraciones de tensión y de flexión de enlaces C-H de alquenos se observan alrededor
de 3000 y 1400 cm ' en ambos espectros.
El procedimiento seguido para el análisis cualitativo por espectroscopia Raman es básicamente el mismo
que en IR y, al igual que en aquél, el espectro Raman de un compuesto es único y el de una mezcla de sustancias
que no reaccionan es la suma de los espectros Raman de sus componentes por separado. Por ello, cuando se dis
pone de espectros Raman de los posibles componentes de una mezcla no muy compleja, pueden identificarse
aquéllos por comparación.
Respecto al análisis cuantitativo, la espectroscopia Raman presenta la ventaja sobre la IR de que la altura
de los picos Raman (intensidad de emisión) es una función lineal de la concentración (T = Kc), mientras que en
IR (como en todas las espectroscopias de absorción), la relación entre la concentración y la luz transmitida es
logarítmica (ley de Beer). Es decir, la exactitud de la espectroscopia Raman es mayor, ya que, para un mismo
error fotométrico (dTIT), el error relativo en la concentración (dele) es menor. La otra ventaja radica en la sim
plicidad de los espectros, que permite (si la mezcla no es muy compleja) encontrar una banda de un determina
do componente que esté libre de interferencias espectrales. Para determinar la proporcionalidad entre la altura
de dicho pico y la concentración, debe usarse una muestra patrón para cada componente. También existen méto
dos por los que pueden resolverse los espectros cuando hay solapamiento de bandas.
Las dos principales limitaciones de la espectroscopia Raman son que la concentración mínima detectable
es bastante grande (10'1 y 10'2M) y que las impurezas a veces emiten fluorescencia e interfieren con la detección
de la señal.
7. ESPECTROSCOPIAS DE RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR

Y DE RESONANCIA DE ESPÍN ELECTRÓNICO
Son técnicas de absorción que requieren que la muestra se coloque en un campo magnético intenso antes de que
la radiación sea absorbida por los núcleos (resonancia magnética nuclear o RMN) o por los electrones (resonan
cia de espín electrónico o REE). Si no existe un campo magnético, los estados de espín de los núcleos y de los
electrones son degenerados (poseen igual energía), y no son posibles las transiciones entre los distintos niveles
energéticos. La RMN utiliza la radiación de menor energía del espectro electromagnético (las radiofrecuencias
de 5 a 300 MHz o más), que varía en función de los núcleos a estudiar. La REE utiliza longitudes de onda de
mucha mayor energía, que corresponden a la región de microondas (3 cm), y tiene lugar exclusivamente si hay
electrones desapareados. Por tanto, tiene menor interés en el análisis de fármacos, siendo en cambio útil en el
estudio de moléculas paramagnéticas (aunque tengan un número par de electrones) y en el seguimiento de las
reacciones fotoquímicas.
Los datos de la RMN se utilizan en el análisis cualitativo y cuantitativo, así como en la elucidación es
tructural, combinados con otras técnicas, como las espectroscopias IR y UV y la espectrometría de masas.
Dado que se mide un sólo tipo de isótopo (el más común es el protón en la denominada RMN de 1H), se loca
lizan y asignan todas las bandas. Para ello, se manejan principalmente tres tipos de información: los valores
de los desplazamientos químicos (8), que proporcionan información acerca del entorno molecular del protón;
la intensidad de la señal, que en este caso es proporcional al número de protones que contribuyen a la apari
ción de la señal; y la estructura fina de ésta o modo de desdoblamiento, que surge del acoplamiento espín-es-
pín o constante de acoplamiento (/), y proporciona información acerca de la clase y el número de los núcleos
vecinos.
De los isótopos que pueden absorber energía en la región de radiofrecuencias del espectro electromagné
tico cuando se colocan en un campo magnético, los isótopos 'H y nC, junto con l9F, ,SN, 'H y 31P (todos con nú
mero cuántico de espín / semientero), son los más importantes. Los núcleos de dichos átomos pueden orientarse
de dos formas, que corresponden a los valores / = -1/2 y +1/2, alineándose a favor o en contra, respectivamente,
del campo magnético exterior aplicado (Fig. 29.15). La diferencia energética entre ambos viene dada por la
Ecuación [14], donde yes la razón magnetogírica del átomo (que es constante para cada tipo de isótopo, según
la Ecuación [15]) y Ho es el campo magnético aplicado. Al irradiar, el núcleo se comporta como un imán y ex
perimenta un movimiento de precesión cuya frecuencia, que viene dada por la Ecuación de Larmor [16], au
menta con la fuerza del campo magnético aplicado Ho.
/ = +1/2 (estado excitado)
I = —1/2 (estado fundamental)
Aplicación de un campo magnético externo
Figura 29.15. Estados energéticos posibles para un núcleo con número cuántico de espín 1/2 cuando se somete a un cam
po magnético externo.
[14]
2k
AE = ñv„ [15]
[16]
2n
Si se multiplica por la constante de Plank (/i). se tiene la Ecuación [17], que expresa que cuando un núcleo
se irradia con una radiofrecuencia que corresponda a AE. puede absorber energía e iniciar la resonancia, produ
ciéndose su paso al nivel de mayor contenido energético. Es decir, cuando la radiofrecuencia aplicada en un ba
rrido de radiofrecuencias se aproxima a la de precesión de un núcleo, la iguala y la supera, se produce la reso
nancia de ese núcleo y se observa una señal en el espectro. En la práctica, la señal se produce manteniendo
constante la radiofrecuencia y variando el campo magnético.
1.71
zrt
Sólo en el cero absoluto de temperatura los núcleos adoptan la orientación de menor energía. Cuanto ma
yores son las temperaturas, un pequeño exceso están en dicho nivel y son responsables del espectro RMN al ab
sorber energía. Al relajarse estos núcleos, se mantiene de nuevo la distribución inicial (denominada de Boltz
mann). mientras que en la saturación (que se produce cuando se irradia con una radiofrecuencia potente), el
número de núcleos en cada uno de los estados energéticos es el mismo. Existen varios mecanismos por los que
se produce la relajación al estado fundamental que gobiernan la anchura de la señal (si los núcleos no se relaja
ran. se produciría la saturación, se igualarían las poblaciones de ambos niveles y no habría absorción de ener
gía). Estos mecanismos son fundamentalmente dos: la relajación espín-red y la relajación espín-espín. La pri
mera. o relajación longitudinal, es el proceso por el que la energía del núcleo excitado se transfiere a la red
molecular, es decir, a la estructura molecular en la que está situado dicho núcleo. Su eficacia se expresa como
7j. Si 7j es corto, la relajación es eficaz y las bandas de resonancia son anchas.
La relajación espín-espín, o relajación transversal, es el intercambio de espines entre un núcleo excitado y
un vecino. Su eficacia se mide por el tiempo de relajación T2. Cuanto menor es éste, mayores son las fluctuacio
nes del campo local que sufre cada núcleo (alterado por los pequeños campos magnéticos que generan sus veci
nos) y, por tanto, mayor será el intervalo de frecuencia en el que absorbe energía, dando una mayor anchura de
banda. Por el contrario, valores grandes de T2 darán bandas estrechas.
Normalmente, los espectros de líquidos o sólidos se registran disueltos en CCIt, CDCh, D,O, CD>OD.
(CDjjjSO. CDíCOjD y CFjCOjH. La sensibilidad, es decir, la relación señal/ruido, aumenta con la raíz cuadra
da del número de barridos (después de cada barrido, se almacenan las señales de resonancia). Este proceso re
quiere un tiempo, que se acorta enormemente utilizando la transformada de Fourier. Esta modificación se reali
za de forma que. en lugar de efectuar un barrido de frecuencia o de campo magnético, se excitan todos los
núcleos a la vez, se acumulan los datos adquiridos en cada pulso y se aplica la operación matemática denomina
da transformada de Fourier. De esta forma, pueden registrarse señales de resonancia de núcleos que estarían ve
dados para esta técnica, dada su escasa abundancia en la naturaleza, como ocurre con el isótopo de carbono ac
tivo en resonancia (”C).
Los diferentes isótopos requieren energías diferentes para provocar las transiciones a niveles energéticos
superiores y. por tanto, absorben a radiofrecuencias diferentes. Afortunadamente, la frecuencia a la que absorbe
energía un núcleo depende de su entomo, ya que los electrones que lo rodean (influenciados por el campo mag
nético extemo) circulan creando un campo magnético local que se opone a Ho- Este efecto se denomina «apan-
taliamiento diamagnético». Cada protón de un compuesto absorbe en una posición determinada del espectro
respecto a un compuesto de referencia (generalmente tetrametilsilano, TMS) que se llama desplazamiento quí
LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS EN EI . ANÁL1SIS DE FÁRMACOS 879
mico (8). Los valores 8 carecen de dimensiones y se expresan en partes por millón (ppm). Un protón H-C-X re
suena a campo más bajo (>8, >desapantallamiento) conforme X es más electronegativo. También está más «de
sapantallado» conforme se pasa de una hibridación sp1 a una sp2 en el átomo vecino. Son excepción los protones
H-C= de los alquinos (que resuenan a campo más alto que los de los alquenos) y los protones ciclopropánicos
que, aunque poseen cierto carácter sp2, son unos de los más «apantallados» debido a otros efectos.
El acoplamiento espín-espín es el responsable de la estructura fina de los espectros H RMN. En éstos, se
encuentran señales dobletes, tripletes. cuadrupletes, etc., denominándose constante de acoplamiento (./) a la se
paración entre líneas. Estas constantes se miden en Hertzios y su magnitud es independiente de la fuerza del
campo (para comprender la importancia de las constantes de acoplamiento, se recomienda al lector acudir a un
texto especializado). Cuando un espectro es muy complicado y difícil de interpretar por el acoplamiento espín-
espín. puede simplificarse utilizando un instrumento más potente o pueden aplicarse técnicas de desacopla
miento homonuclcar ('H['H)). En éstas, se irradia un núcleo con su radiofrecuencia a fin de identificar qué pro
tones interactuaban con él en el espectro acoplado. Determinadas técnicas bidimensionales proporcionan el
mismo tipo de información.
También se utilizan en RMN otras muchas experiencias, como los experimentos nOe (del inglés), nuclear
Overhauser effect), que consisten en saturar una señal y observar las intensidades de las otras señales. Las que
aumentan en intensidad se deben a protones situados próximos en el espacio al protón saturado, ya que la con
tribución de un núcleo a la relajación de un segundo está relacionada con la distancia intemuclear. Existen otras
muchas técnicas de correlación heteronuclear.
Aunque una consideración detallada de la utilización de la RMN en el análisis cualitativo y en la eluci
dación estructural está más allá del objetivo de este libro, hemos de comentar que esta técnica puede utilizar
se también para determinar la pureza enantiomérica (como se verá en el Capítulo 30) y para dar información
acerca de los procesos moleculares dinámicos entre los fármacos y sus receptores biológicos. En éstos, la for
mación de complejos intermoleculares fármaco-receptor supone que el fármaco pasa a formar parte de una
red más rígida. En estas circunstancias, se producen cambios en los tiempos de relajación espín-espín de los
protones, que se reflejan en la anchura de las señales (véase la Tabla 29.3). También se producirán cambios
en los desplazamientos químicos, puesto que el entorno magnético del fármaco enlazado es diferente al del
fármaco libre.
Tabla 293. Tiempos de relajación espín-espín (T;) y formación de complejos

fármaco-receptor (F-R).
Fármaco Receptor o enzima Complejo F-R

Gran Tj Pequeño 7j El sustrato enlazado tiene
Señal estrecha Señal ancha < T¡ que el libre y la señal
es más ancha
En el análisis cuantitativo, la integración automática de las señales de un espectro 'H RMN proporciona
un medio fácil y rápido para determinar la relación cuantitativa de los componentes de una mezcla, siempre que
al menos una señal de cada constituyente no esté superpuesta con otra. Para la cuantificación de un compuesto,
o bien se utiliza una señal de un segundo compuesto o de una interferencia que tampoco se superponga y se mi
de la intensidad relativa de ambas señales, o bien se adiciona un compuesto de referencia que se ha añadido
exactamente pesado y se comparan las áreas de los picos. En el primer método, se calcula la proporción relativa
utilizando la siguiente fórmula, siendo 1 y 2 los compuestos que se comparan.
Intégrala (mm)
n.» de protones
% molar de 1 = x 100
Integralj (mm) Intégrala (mm)
n.» de protones n.» de protones
Por ejemplo, para determinar el % de ácido acetilsalicílico. fenacetina y cafeína en una especialidad far
macéutica, se pueden integrar los picos correspondientes a tres tipos de hidrógenos que resuenan a 2,3,2.1 y 3,4
ppm, respectivamente (Fig. 29.16). Si se obtienen las siguientes alturas para estos picos: 113, 192 y 36 mm. res
pectivamente, puede calcularse la proporción relativa de los tres fármacos.
3,4 ppm
COyH
OCOCH,
t
2,3 ppm
Ácido acetilsalicílico CH, •<— 3.6 ppm
Fenacetina Cafeína
% Ácido acetilsalicílico = ------------ --------- x 100 = 33 %

113+192 + 36
% Fenacetina = --------- —--------- x 100 56%

113+ 192 + 36
% Cafeína = -------- --------- — x 100 11 %

113+ 192 + 36
Figura 29.16. Determinación de ácido acetilsalicílico. fenacetina y cafeína por 'H RMN.
Si se utiliza el segundo método de valoración adicionando un patrón interno, puede calcularse la concen
tración problema comparando el área de una señal de este patrón con el área de otra señal del analito. siempre
que ambas sustancias se hayan pesado con precisión. Por ejemplo, el peso de un corticosteroide con estructura
1,4-dien-3-ona (como prednisona, prednisolona y triamcinolona) de una especialidad farmacéutica se puede de
terminar pesando exactamente una cantidad de ésta, disolviéndola en DMSO-dft. y añadiendo otra cantidad
exactamente pesada de ácido fumárico como referencia estándar estable. La integración de las señales de los
protones que se indican en la Figura 29.17 permite calcular la cantidad de este tipo de esteroide.
Cantidad del Pm del esteroide/n.° de H de la señal escogida Integral (mm) del esteroide
-------------------------------------- Peso del patron
esteroide (mg) patrón/n.° de H de la señal escogida Integral (mm) del patrón
8 (ppm)
Ha COjH H-l 7,9
H-2 6.4
HOjC Ha
H-4 6.3
H
Ácido fumárico Ha 7.1
Corticosteroide con
estructura 1,4-dien-3-ona Señales que se comparan
Figura 29.17. Análisis cuantitativo de esteroides con estructura l,4-dicn-3-ona por *H RMN. utilizando ácido fumárico
como patrón interno.
La escasa abundancia del isótopo ,3C en la naturaleza contribuye a que la RMN de 1 ’C sea menos sensible
que la RMN de ‘H. Sin embargo, y precisamente por ello, la probabilidad de que el isótopo ,3C se sitúe adya
cente a otro en una molécula es mínima y, por tanto, los acoplamientos ,3C-,3C son despreciables. La menor sen
sibilidad se debe también a que la relación magnetogírica de este núcleo (y) es aproximadamente 1/4 de la del
protón.
La espectroscopia RMN de l3C se aplica básicamente a la elucidación estructural como complemento de

la protónica. También se utiliza en el estudio de procesos biosinléticos (fundamentalmente, de los producidos
por microorganismos), para lo que se añaden precursores que están enriquecidos con l5C a los caldos de cultivo
y se identifican por esta técnica los lugares marcados en los metabolitos.
En un espectro RMN de 3C, se observan los acoplamientos entre los núcleos ”C y 'H, lo que los hace
muy complejos. Para evitar dicha complejidad y disponer de espectros más sencillos, se utiliza el método de
desacoplamiento protón-ruido, en el que todos los protones se desacoplan simultáneamente (en estos espectros
desacoplados, cada señal es un singlete). Dado que el espectro se deriva por transformada de Fourier, la intensi
dad de la señal no sólo depende del número de núcleos responsables de la misma, sino que, por la variación en
los tiempos de relajación que produce el desacoplamiento de protones (efecto Overhauser), no existe correla
ción entre el área de los picos y el número de núcleos. Por lo tanto, la medida de la intensidad de aquéllos no se
puede utilizaren análisis cuantitativos.
8. ESPECTROMETRÍA DE MASAS
La espectrometría de masas (EM) por impacto electrónico (IE) es el método de análisis molecular más sensible.
Ya se ha comentado que en él no está implicada la radiación electromagnética, sino que se registra una distribu
ción de masas de iones positivos, que es la huella dactilar de un compuesto puro. Cuando una molécula orgáni
ca se bombardea con electrones de suficiente energía (con una energía > 10 eV, que es superior al potencial de
ionización), puede perder un electrón y dar un catión radical (M
* ‘). denominado ion molecular. Éste, por su ex
ceso de energía, es muchas veces inestable y se fragmenta en el espectrómetro de una manera determinada, dan
do lugar a iones positivos o a cationes-radicales (F
* oF * ’). así como a fragmentos neutros. Debido a que los di
ferentes enlaces necesitan diferentes cantidades de energía para romperse, cada molécula tiene un patrón de
fragmentación único, de forma que la racionalización de los patrones de fragmentación se utiliza para determi
nar la estructura de compuestos desconocidos. Si existen impurezas, aunque estén en pocas partes por millón, se
detectan por la aparición de picos adicionales.
Los fragmentos cargados positivamente se separan por un campo magnético (//) y se registran de
acuerdo con su relación masa/carga (miz). El término miz se hace igual a m porque la carga suele ser la uni
dad. La intensidad de los picos es proporcional al número de iones de igual masa, denominándose pico base
al pico de mayor intensidad.
*'
M * = catión; N = fragmento neutro; R‘ = radical
= pico músico; F" = catión radical; F
Normalmente, el pico de mayor masa en un espectro corresponde al ion molecular, pudiendo determinar
se la masa molecular con una precisión de seis cifras decimales. Para determinar la composición elemental de
una molécula o un fragmento, se puede acudir a las tablas de abundancia isotópica, ya que el número de cada
tipo de núcleos presentes gobierna las intensidades de los posibles picos M+l y M+2. Por ejemplo, una molécu
la que tenga un átomo de carbono tendría un ion molecular (M) y un pico correspondiente al isótopo ' lC (M+1)
en proporción relativa 99:1. Por otra parte, si un ion molecular tiene masa par, la molécula poseerá un número
par de nitrógenos, mientras que si el ion molecular es impar, tendrá un número impar de nitrógenos. Para con
firmar el patrón de fragmentación, es muy útil el estudio de los llamados iones metaestables.
La espectrometría de masas se utiliza mucho en el análisis cuantitativo de mezclas de compuestos, siem
pre que se disponga de muestras puras de cada componente y se conozcan los factores de calibración. Por ejem
plo. para calcular la composición porcentual (% molar) de una mezcla de dos fármacos A y B con los datos de la
Tabla 29.4, se han escogido los picos miz que muestran gran intensidad para cada uno de los dos componentes
(el pico miz 338, para A. y el pico miz 137, para B). Las intensidades de los picos principales se indican como
porcentaje de su pico base.
Tabla 29.4. Intensidades de picos característicos de los compuestos A y B y de

una mezcla A + B*
miz A B A + fi
81 0.3 49.0 48.9

95 0.2 43.0 43,0
137 0.1 100.0 100,0
14 100,0 0.1 9,3
338 48.0 0.0 44
348 0.9 8.4 8.4
* Los factores de calibración son 0,797 (A) y 0.910 (fi).
De las ecuaciones que se establecen con estos datos, pueden calcularse las concentraciones relativas (XA y
X«), y de ellas las presiones parciales de ambos compuestos (PÁ y Ph), dividiendo por el factor de calibración.
La composición porcentual de la mezcla se obtiene multiplicando la presión parcial de cada componente por
cien y dividiendo por la suma de las presiones parciales (£/’,):
100 = 0.1 -X.+ 100 X«

4,4 = 48 • X. + 0,0 ■ Xs
Por tanto:
Xa = 0,08 y X„ = 0,92
Las presiones parciales serán:
-2^—=0,10 />„ = X<l = 1.01

0,797 0,910
1P, = PA + P„= 1.11
0.1 ■ 100
= 9 mol % de A
1.11
1,01 • 100
= 91 mol % de /i
1,11I
La muestra debe estar en estado de vapor cuando se bombardea con electrones, por lo que los gases y lí
quidos volátiles se introducen en el depósito de reserva, mientras que las muestras sólidas o los líquidos poco
volátiles se introducen directamente en la fuente de iones. Las técnicas combinadas de EM con cromatografía
de gases o cromatografía líquida de alta resolución (CG/EM o HPLC/EM) son particularmente eficaces en el
análisis de mezclas.
Los isótopos, al ser diferentes en su masa, pueden reconocerse en la EM, de forma que utilizando com
puestos enriquecidos con un determinado isótopo puede practicarse un seguimiento analítico cualitativo y cuan
titativo. También se utiliza la espectrometría de masas de ionización química, en la que un reactivo gaseoso en
gran exceso se bombardea con electrones junto con la muestra. Debido a la baja concentración de ésta, casi toda
la ionización primaria se produce en el gas reactivo, y los iones así formados producen reacciones rápidas con
las moléculas de la muestra. Otra técnica es la denominada FAB (del inglés, Fast Atom Bombardement). que fa
cilita el examen de compuestos tennolábiles o de escasa volatilidad mediante un bombardeo con átomos neutros
rápidos.
LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS EN EL ANÁL ISIS DE FÁRMACOS 883
9. EJEMPLOS DE UTILIZACIÓN DE MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS

EN EL ANÁLISIS DE FÁRMACOS
Se comentan a continuación algunos ejemplos de fármacos en los que se han aplicado métodos espectroscópi-
cos de análisis para su identificación o valoración.
9.1. Salicilamida
Entre los métodos espectrofotométricos descritos para el análisis de este analgésico, de fórmula C7H7NO2 y Pm
= I37. soluble en etanol (1 g en 15 mL), señalaremos los siguientes:
9.1.1. UV-ViS
Mediante esta técnica, se ha determinado la cantidad de salicilamida presente en comprimidos analgésicos que
contienen paracetamol, fenobarbital. cafeína, fosfato de codcína. ácido ascórbico, fosfato de cloramina y pred-
nisona, sin separación previa, midiendo la absorbancia a 308 nm de una disolución etanólica. El espectro de sa
licilamida que se muestra en la Figura 29.18a, presenta máximos a 235 nm (4 I %, 1 cm. 543) y 302 nm (A 1 %.
I cm. 295), y corresponde al auxocromo OH (hidroxilo fenólico). A pH alcalino, el auxocromo es cl anión fenó-
xido (Fig. 29.18b), lo que supone un desplazamiento batocrómico y un efecto hipercrómico, mostrando el es
pectro dos máximos a 242 nm (A I %, I cm, 536) y 328 nm (A I %. 1 cm, 435). La absorción UV de los restan
tes fármacos no se altera con este cambio de pH o no interfieren las nuevas bandas con las mencionadas para la
salicilamida.
a)
100-
90-
80-
70-
•§ 60-
•e 50-
| 40-
30"
20-
10-
190
A. (nm)
Figura 29.18. a) Espectro UV de salicilamida en etanol. b) Espectro UV de salicilamida en NaOH 0.1 N.
9.1.2. Colorimetría
La salicilamida puede determinarse en preparaciones farmacéuticas en las que se encuentra mezclada con ácido
salicílico valorando por colorimetría los complejos coloreados que forma cuando se trata con nitrato férrico en
disolución etanólica. El complejo azul de salicilamida se extrae con éter, mientras que el ácido salicílico no for-
ma complejos, por encontrarse su grupo hidroxilo fenólico enmascarado por un enlace de hidrógeno intramole
cular muy estable, y no se extrae (Fig. 29.19).
Fe(III)
Fe(III)
-A
Figura 29.19. Valoración de complejos con Fe(Ill) de salicilamida en mezclas con ácido salicílico.
En otro procedimiento analítico, la salicilamida se oxida con ferricianuro potásico a pH 8, para dar un de
rivado hidroxilado en para respecto al hidroxilo fenólico, que posteriormente origina una quinona. Ésta se con
densa con 4-aminofenazona, para dar finalmente una quinonimina. que es un vinílogo de amida con estructura
de merocianina (por estar muy conjugada con la participación de un nitrógeno del anillo de pirazolona) y puede
determinarse mediante colorimetría a una longitud de onda de 500 nm (Fig. 29.20). El ácido salicílico no se oxi
da en estas condiciones.
K,Fe(CN)6
-2c, - 2H
*
-H.O
4-Aminofenazona O
(merocianina) X analítica: 500 nm
Figura 29.20. Reacción de desarrollo de color específica de la salicilamida en presencia de ácido salicílico.
9.1.3. Espectrofluorimetria
La fluorescencia de la salicilamida a pH 11 se mide directamente con máximos de activación y emisión de 340

nm y 430 nm, respectivamente (el ácido salicílico se mide a 310 nm y 435 nm, respectivamente). También se ha
determinado a través de la formación de un quelato de boro, por reacción con ácido borónico, anhídrido acético
y H2SO4. Este quelato presenta longitudes de onda de excitación y de emisión de 328 nm y 388 nm, respectiva
mente (Fig. 29.21).
CONH2
B(OH), + (CH,CO)2O + H2SO4
Figura 29.21. Derivación de la salicilamida para su valoración por espectrofluorimetria.

9.1.4. Infrarrojo
El espectro IR de la salicilamida en un comprimido de KBr se puede observar en la Figura 29.22, y sus bandas
características en la Tabla 29.5. Otras bandas características de la zona denominada «huella dactilar» son 1500,
1450, 1430, 1360, 1310 y 1250 cm1.
Figura 29.22. Espectro IR de salicilamida en comprimido de KBr.
Tabla 29.5. Frecuencias características en el IR de salicilamida.
Frecuencia (cní') Asignación
3400 Tensión OH
3220 Tensión NH
1680 Tensiones CO (amida)
1630
1590 Tensión C = C aromáticos
i 240 Flexión asimétrica C-0
760 Flexión C-H fuera del plano
750 Deformación aromática
La salicilamida se ha determinado cuantitativamente en formas farmacéuticas, midiendo la absorción IR

correspondiente a la tensión NH o a la tensión C=O del agolpamiento CONHj.
9.1.5. RMN
En la Figura 29.23. se reproduce el espectro RMN de 'H a 60 MHz de salicilamida en DMSO-d„ y TMS como
referencia interna.
En él pueden verse las señales de baja intensidad a 2,6 y 3,6 ppm, que corresponden a la pequeña cantidad
de moléculas de disolvente sin deuterar y al agua que lo acompaña (el DMSO es higroscópico). Tras la deutera-
ción por adición de D;O, el espectro se simplifica, desapareciendo las señales correspondientes a los protones
OH y NIL («ácidos») que se han intercambiado por deuterio.
La asignación de las señales se recoge en la Tabla 29.6.
b) ■ , . | ■ . . ■ | i . ■ ■ | . . . . | . . ■ ■ | ■ . . . [ ■ . . , | ■ ■ ■ , | ■ rrry
500 400 300 200 100 0
ppm (8)
Figura 29.23. a) Espectro RMN de 'H de salicilamida en DMSO-d,. b) Espectro anterior después de adicionar D;O.
Tabla 29.6. Asignación de señales del espectro RMN de 'H de salicilamida en

DMSO-d,
Desplazamiento químico (ppm) Asignación

Multiplete centrado a 6,83 Protones aromáticos H-5 y H-3
Multiplete centrado a 7.36 Protón aromático H-4
Multiplete centrado a 7,90 Protón aromático H-6
Singletc ancho a 8,33 NH2 (Intercambiable con D2O)
Singlete a 13,00 OH fenólico (intercambiable con D3O)
El espectro desacoplado l3C RMN en el mismo disolvente, mostró siete singletes. El espectro l3C RMN
«off resonance» (parcialmente acoplado), así como la asignación de las señales, se muestran en la
Figura 29.24.
Figura 29.24. Espectro RMN deBC «off resonance-’ de salicilamida en DMSO-d„.
9.1.6. Espectro de masas
En el espectro de masas de la salicilamida se observan, entre otros, el pico molecular de miz 137, el pico base de
m/z 120 (que corresponde al fragmento más abundante cuya estructura se indica en la figura) y el pico de miz 92
(Fig. 29.25).
Figura 29.25. Espectro de masas de salicilamida utilizando impacto electrónico como fuente de iones.
* ) tiene masa impar, como corresponde a una estructura con número impar de átomos
El ion molecular (M
de nitrógeno. A partir de él, se forma el ion correspondiente al pico base por un reacomodo de McLafferty a tra
vés de un estado de transición de seis centros con eliminación de un fragmento neutro (NH,). Éste forma el ion
de miz 92 por eliminación de CO (Fig. 29.26).
M" (ion molecular) m/z 120

(pico base)
m/z 137
Figura 29.26. Algunas fragmentaciones del ion molecular en el EM por IE de salicilamida.
9.2. Probenecid
El uricosúrico probenecid, de fórmula empírica Cl iHIyNOiS y Pm = 285,36, es prácticamente insoluble en agua

y tiene un pf = 198-200 “C (recristalizado en alcohol-agua). Se puede identificar y cuantificar por varios méto
dos espectroscópicos, entre los que comentaremos los siguientes:
9.2.1. UV-VÍS
El espectro UV de probenecid se utiliza en las farmacopeas con fines de identificación. Las soluciones neutras o
con ácido clorhídrico en metanol muestran dos máximos de absorción, a 224 y 246 nm, y dos mínimos, a 214 y
233 nm. En NaOH 0,1 N se observa un desplazamiento batocrómico de los máximos a 238 y 290 nm. Se ha des
crito un método para la valoración de comprimidos de probenecid basado en su extracción con etanol acidifica
do. El espectro de esta solución etanólica presenta dos máximos de absorción a 325 nm y 248 nm. Se mide la
absorbancia de este último, sabiendo que posee un valor A (1%, 1 cm) de 330. Otros métodos han utilizado el
cloroformo como disolvente para la extracción, habiéndose medido la absorbancia a A,™, 257 nm con un blanco
de cloroformo. De forma bastante semejante se ha determinado también probenecid en plasma y orina.
9.2.2. Colorimetría
Uno de los muchos procedimientos descritos para la determinación colorimétrica de probenecid en líquidos bio
lógicos, tras la extracción con cloroformo del líquido acidificado, consiste en el tratamiento de una parte alícuo
ta de la solución clorofórmica con una solución acuosa de azul de metileno (cloruro de 3,7-bis(dimetilamino)fe-
notiazin-5-inio). El par iónico coloreado que se forma (soluble en cloroformo) se determina colorimétricamente
a 635 nm (Fig. 29.27).
Pr2NO2S
Figura 29.27. Determinación colorimétrica de probenecid por formación de un par iónico con azul de metileno.
LOS MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS EN EL ANÁLISIS DE FÁRMACOS X89
9.2.3. RMN
El espectro RMN de 'H de probenecid disuelto en acetona deuterada, usando TMS (tetrametilsilano) como re
ferencia interna, se muestra en la Figura 29.28, con las asignaciones que se recogen en la Tabla 29.7.
Figura 29.28. Espectro RMN de H de probenecid en acetona deuterada.
Tabla 29.7. Asignación de señales del espectro representado

en la Figura 29.27
Desplazamiento químico (valores 8 en ppm) Asignación
7,9-8.2 (das dobletes) aromáticos

3.17 (triplete) -OlrCH (H
1,62 (multiplete) -CHrCHrCHj
0,87 (triplete) -CHj-CHrQJj
La deteminación cuantitativa de probenecid en comprimidos por espectroscopia RMN de 'H se ha descri

to registrando el espectro en acetona-dé y utilizando ácido maleico como patrón interno.
De los dos dobletes (sistema AB) correspondientes a los protones aromáticos de probenecid, el de campo
más alto [protones H-2'(6')J y el singlete de los protones HC= del ácido maleico a 6,42 ppm. se han selecciona
do para este análisis (Fig. 29.29).
6,42 ppm
Figura 29.29. Señales RMN de ‘H seleccionadas para el análisis cuantitativo de probenecid utilizando ácido maleico
como patrón intemo.
El espectro desacoplado RMN de ,5C en el mismo disolvente y referencia intema, así como su asignación,
pueden verse en la Figura 29.30.
Figura 29.30. Espectro desacoplado de RMN de IJC en acetona-d» y TMS como referencia interna de probenecid.
9.2.4. Espectrometría de masas
El espectro de masas de probenecid de la Figura 29.31 muestra el ion molecular (M

* ‘) de miz 285 (intensidad re
lativa 4.1 %) y el pico base de miz 256.
240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420
Figura 29.31. Espectro de masas de probenecid.

El patrón de fragmentación del pico másico se racionaliza en la Figura 29.32.
Figura 29.32. Patrón de fragmentación del pico másico en probenecid.
9.3. Noscapina
La noscapina. o a-narcotina, es un alcaloide del opio utilizado como antitusivo. Se han descrito numerosos mé
todos de análisis por métodos espectroscópicos, de los que comentaremos:
9.3.1. UV
El espectro UV de noscapina base, aislada de su hidrocloruro en metanol, muestra dos máximos a 291 y
310 nm.
Por otra parte, una mezcla de hidroclomros de morfina, noscapina. codeína y papaverina (Fig. 29.33), co
nocida como «tetrapón», se analizó por UV teniendo en cuenta que la morfina posee un hidroxilo fenólico y un
grupo amina terciaria, por lo que es anfótera y se disuelve en ácidos y álcalis, mientras que los otros tres alca
loides no tienen hidroxilos fenólicos.
S92 INTRODUCCIÓN A LA QUÍMICA FARMACÉUTICA
Figura 29.33. Estructura de la noscapina. la morfina, la codeína y la papaverina.
Por esta razón, éstos pueden separarse por extracción con cloroformo de una disolución fuertemente alca
lina de la mezcla, quedando disuelta la morfina en forma de anión fenóxido. Los otros tres alcaloides se separa
ron por cromatografía en capa fina, utilizando etanol/benceno 1:4 como disolvente y visualizándose las man
chas del cromatograma por radiación UV. Una vez separados los tres componentes, se disolvieron en metanol, y
se determinaron cuantitativamente utilizando las bandas de absorción UV a longitudes de onda de 215 nm (para
valorar la codeína), 279 nm (papaverina) y de 312 nm (noscapina). La morfina se valoró espectrofotométrica-
mentc a 440 nm después de hacerla reaccionar con ácido nítrico concentrado (en esta reacción, se produce un
quelato de color rojo anaranjado porque se forma 2-nitromorfina con un enlace de hidrógeno intramolecular;
Fig. 29.34). Por otro lado, la morfina reacciona con ácido nitroso para dar un orro-nitrosofenol, que en medio
alcalino es coloreado por la conjugación del anión fenóxido.
UNO; Morfina HNO,conc.

(b) (a)
Color rojo
Anión de jV-hidroxiquinonimina
Figura 29.34. Valoración colorimétrica de la morfina por tratamiento con ácido nítrico concentrado (a)
o ácido nitroso (b).
LOS MÉTOlXtS F.SPECTROSCÓPICOS EN El. ANÁLISIS DE FÁRMACOS 893
9.3.2. Infrarrojo
La noscapina se ha valorado por espectroscopia IR, después de su extracción, registrando la región del espectro
entre 1100 y 1900 cm 1 en CLC y comparando la absorbancia de la banda situada a 1767 cm 1 con la absorban
cia de soluciones de concentración conocida.
9.3.3. Espectrofluorimetría
La noscapina se ha determinado a partir de una mezcla de alcaloides del opio y en líquidos biológicos (plasma y
orina) después del tratamiento adecuado de la muestra, midiendo la fluorescencia natural a 375 nm (tras una ex
citación a 315 nm) con una solución patrón de 2-aminopiridina en ácido sulfúrico 0,1 N.
9.3.4. RMN
En un método de valoración por RMN de 'H de noscapina, se utiliza el alcohol terbutílico [(CHOjCOH) como
patrón interno, y se compara la integración de las señales a 3,84,4,02 y 4.08 ppm (correspondientes a los proto
nes de los tres grupos metoxilo de noscapina) con la de la señal a 1,30 ppm (correspondiente a los grupos meti
lo del alcohol terbutílico) (Fig. 29.35).
1.30 ppm
(H,C),COH
Patrón interno
Figura 29.3S. Señales de resonancia RMN de 'H que se han utilizado para el análisis cuantitativo de noscapina utilizando
alcohol terbutílico como patrón intemo.
9.3.5. Espectrometría de masas
El espectro de masas de la noscapina, obtenido por impacto electrónico, muestra un pico músico de muy baja in
tensidad con miz 413 y un pico base con miz 220, cuya formación y estructura se indican en la Figura 29.36.
M+'. m/z413 (2.8 %)

Ion molecular
Figura 29.36. Formación y estructura asignada al pico base en el EM por impacto electrónico de noscapina.
9.4. Mestranol
El anticonceptivo oral mestranol (Fig. 29.37) se ha valorado por diversos métodos espectroscópicos.
Figura 2937. Estructura del mestranol.
9.4.1. UV
El espectro UV del mestranol en metanol tiene dos máximos de absorción a 279 nm (A 1% 1 cm. 82.0) y 287.5
nm (/I 1% 1 cm, 14,4) y dos mínimos a 246 y 284 nm. Los máximos de absorción se han utilizado para su valo
ración cuantitativa, pero antes se ha eliminado la absorción de contaminantes con un grupo cetónico en C-17
por reducción con borohidruro sódico, como se indica en la Figura 29.38 (recuérdese que los derivados de tipo
17-etinil-3.17-estradiol se obtienen por adición de acetiluro sódico a derivados de la estrena, capítulo 25).
Mestranol (con trazas de cetona en

C-17 que no ha reaccionado)
(Eliminada la absorción de la cetona en C-17 contaminante)
Figura 29.38. Valoración UV de mestranol.
También se han empleado otras reacciones que degradan I7a-etinilesteroides a derivados de estrena, que
luego se valoran por espectroscopia UV-Vis.
9.4.2. Colorimetria
Un método colorimétrico, utilizado en comprimidos de mestranol. consiste en la extracción de éste a una fase
orgánica, evaporación del disolvente y tratamiento con ácido sulfúrico en metanol. La reacción implicada es re
lativamente específica de esteroides fenólicos, y supone la reacomodación por transposición de Wagner-
Meerwein de un carbocatión en C-17, seguida de deshidrogenación y desetinilación (Fig. 29.39). El carbocation
se forma por deshidratación en el medio ácido del 17-hidroxiderivado. El compuesto que se forma es coloreado,
midiéndose su absorción a 545 nm.
Figura 29.39. Reacciones de derivación para la valoración colorí métrica de mestranol.
Otro método consiste en el tratamiento de una solución etanólica de la muestra que contiene mestranol
con NH iOH y AgNOi en exceso. Después de eliminar el precipitado de acetiluro de plata que se forma (el pKa
de estos grupos es aproximadamente 25), el exceso de iones Ag
* se determina espectrofotométricamcnte por el
método de la ditizona anteriormente comentado, y la cantidad de esteroide se calcula a partir de los iones Ag
*
consumidos (Fig. 29.40).
7 AgNO„ H,O
6AgNO,
Figura 29.40. Valoración colorimétrica de mestranol basada en su reacción con iones Ag’.
9.4.3. Infrarrojo
El mestranol puede identificarse por IR registrando el espectro en cloroformo, siendo características las vibra
ciones de tensión C-H del grupo etinilo a 3308 cm 1 y una de las bandas de tensión C=C del anillo aromático a
1502 cm'1.
9.4.4. RMN
El espectro RMN de 'H del mestranol disuelto en piridina deuterada se ha utilizado para su determinación cuan
titativa añadiendo ácido difenilacético como patrón interno. La cantidad de mestranol se ha calculado compa
rando las integrales de las señales a 3,73 ppm (que corresponde a los protones de su grupo metoxilo) y a 2,60
(correspondiente al protón del grupo etinilo) con las del ácido patrón.
9.4.5. Espectrofluorimetría
La fluorescencia propia del mestranol puede utilizarse para su determinación. Así, agitando el polvo de un com
primido con etanol anhidro, centrifugando, tomando una parte alícuota del sobrenadante, diluyéndola con eta
nol y midiendo después la fluorescencia a 327 nm (tras una excitación a 284 nm), ésta se compara con la de una
disol ución patrón, utilizando como blanco etanol anhidro.
BIBLIOGRAFÍA
Beckett, A. H„ y Stenlake, J. B.: Practical Pharmaceutical Chemistry. 4." ed., parte 2. The Alhlone Press, 1988.
Field, L. D.; Sternhell, S.. y Kalman, J. R.: Organic Structures from Spectra. Wiley. 1995.
Florey. K. (ed.): Analytical Profiles of Drug Substances. Academic Press, 1972.
Lambert, J. B.: Shurvell, H. F.; Lighner, D., y Cooks, R. G.: Introduction to Organic Spectroscopy. Macmillan. 1987.
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Pasto. D. J.. y Johnson. C. R.: Organic Structure Determination. Prentice-Hall, Inc.. 1969.
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Watson, D. G.: Pharmaceutical Analysis. Churchill Livingstone, 1999.
----------- 30--------------
Métodos de separación y de análisis
cuantitativo de enantiómeros.
Determinación de la configuración
absoluta
R. M. Claramunt y C. Avendaño
1. INTRODUCCIÓN
La importancia de los aspectos estereoquímicos en las interacciones entre los fármacos y sus dianas farmaco
lógicas se indicó someramente en el Capítulo 3 y se ha puesto de manifiesto a lo largo del texto. Si se consi
dera que, en general, la actividad biológica es el resultado de la unión selectiva del fármaco a un receptor o
centro activo de una enzima, y que éstos son quirales, no es sorprendente que los dos enantiómeros de un ra-
cemato muestren propiedades biológicas diferentes, ya que forman complejos FR o FE que son entre sí dias
tereoisómeros.
En el Capítulo 26, se han contemplado algunas de las estrategias que se utilizan en síntesis para disponer
de productos enantioméricamente puros, cuestión de gran trascendencia en la industria farmacéutica ya que más
de la mitad de los fármacos que actualmente se utilizan son quirales. Cuando se realiza una reacción diastereo-
selectiva o enantioselectiva, se pretende producir dos diastereoisómeros o dos enantiómeros en distinta propor
ción, y para valorarla se requiere analizar la mezcla que se ha originado. Si se trata de una mezcla de diastereoi
sómeros, el análisis es sencillo, teniendo en cuenta las distintas propiedades físicas que poseen. El problema
reside en el análisis y la separación de mezclas de enantiómeros. ya que su gran semejanza estructural se tradu
ce en una casi total identidad en sus propiedades. Este capítulo tiene por objeto estudiar cómo puede resolverse
y analizarse cuantitativamente una mezcla de dos enantiómeros.
Cuando, en 1848, Pasteur separó manualmente dos diferentes formas cristalinas de una mezcla racémica
de tartrato sódico amónico, y observó que, al disolverlas por separado, tenían actividad óptica opuesta (desvia
ban el plano de luz polarizada en una misma magnitud, pero en sentido contrario), quedó definitivamente unido
el concepto de pureza enantiomérica al de pureza óptica, y la determinación de la pureza óptica con el polarí-
metro se utilizó desde entonces para valorar el resultado de una reacción enantioselectiva. Con el tiempo, se han
observado las limitaciones de este método de análisis y se han desarrollado otros más rigurosos y fiables.
La polarimetría es un método simple, pero el poder rotatorio específico de un enantiómero determinado
puede variar, e incluso cambiar de signo, con la longitud de onda de la fuente, el disolvente, la concentración, la
temperatura, etc. Además, algunos compuestos tienen rotaciones tan pequeñas que no pueden medirse en la ma
yoría de los polarímetros. Por ello, debe hablarse de pureza enantiomérica más que de pureza óptica, valorándo
se aquélla por el exceso enantiomérico (ce), definido por la diferencia en el porcentaje entre el enantiómero ma-
yoritario y el minoritario (véase el Capítulo 26).
Los métodos principales que existen actualmente para determinar la pureza óptica o enantiomérica se cla
sifican en dos grupos, según requieran la separación previa de los enantiómeros o no. Entre los primeros, se en
cuentran las técnicas cromatográficas (cromatografía gaseosa o líquida) con fase estacionaria quiral. Entre los
segundos, además de la polarimetría, se encuentra el análisis por RMN de muestras que se han derivado con la
ayuda de reactivos de desplazamiento o de solvatación quirales. Como todos los métodos tienen ventajas y des
ventajas, lo mejor es emplear más de una técnica cuando se está desarrollando un nuevo método sintético. La
mayor parte de los métodos para determinar la pureza enantiomérica están relacionados con medidas de un
efecto neto y. por lo tanto, se precisan los datos de un enantiómero puro para su comparación.
2. PROPIEDADES DE LAS MOLÉCULAS QUIRALES
Los enantiómeros tienen las propiedades físicas idénticas; sin embargo, la existencia de interacciones diaste-
reoisómeras explica que existan algunas diferencias, como las que se producen con la luz polarizada (una ra
diación que puede considerarse quiral) o en los diagramas de fusión de algunos cristales (como se verá más
adelante).
2.1. Puntos de fusión
La evaporación progresiva del disolvente de una solución de un racémico puede originar tres tipos de cristales:
1) Conglomerados, si están constituidos por una mezcla equimolecular de dos enantiómeros cristalinos
que pueden ser separados mecánicamente (empaquetamiento homoquiral). Sólo alrededor de un 10 %
de los compuestos quirales sólidos cristaliza de esta forma. El tartrato sódico-amónico anteriormente
mencionado es un ejemplo (podríamos decir que Pasteur fue un científico con suerte).
2) Compuestos racémicos, que se caracterizan por una cristalización ordenada en la que la celdilla crista
lina unidad está constituida por ambos enantiómeros (empaquetamiento heteroquiral). El 90 % de los
compuestos quirales sólidos cristalizan de esta forma.
3) Compuestos pseudorracémicos, cuando ambos enantiómeros cristalizan en la misma proporción, pero de
forma desordenada (como una disolución sólida). Muy pocos compuestos muestran este comportamiento.
A cada uno de estos tres tipos le corresponde un diagrama binario de fases, que pone de manifiesto la re
lación entre la temperatura de fusión (T -C) y la composición enantiomérica. por lo que pueden utilizarse para
determinar la pureza enantiomérica. En el caso de los conglomerados, el mínimo de la curva corresponde al
punto de fusión del racemato (mezcla eutéctica, Fig. 30.1a).
Figura 30.1. Diagramas binarios de fases que muestran la relación entre los puntos de fusión y la composición enantio
mérica de una mezcla, a) Conglomerado, b) Compuesto racémico. c) Compuesto pseudorracémico.
MÉTODOS DE SEPARACIÓN Y DE ANÁLISIS CUANTITATIVO DE ENANTIÓMEROS 899
En los llamados compuestos racémicos, hay una sola especie cristalina, y el punto de fusión de la mezcla
racémiea puede ser mayor o menor que el de sus constituyentes, presentando dos puntos eutécticos que no coin
ciden con el racemato (Fig. 30.1b). En los pseudorracematos, puede suceder, como ocurre con el alcanfor, que
ambos enantiómeros cristalicen como una disolución ideal con una temperatura de fusión constante en todo el
intervalo de concentraciones (Fig. 30.1c), mientras que otros compuestos existen como disoluciones sólidas no
ideales y originan diagramas con un máximo (como la carvoxina) o un mínimo (como el carbamato de 2-penti-
lo). que se corresponden con el punto de fusión del pseudorracemato.
Estos diagramas permiten a veces establecer la configuración absoluta de un determinado enantiómero
(véase también el Apartado 5). Por ejemplo, supongamos que disponemos de uno de los dos posibles enantió
meros de un conglomerado al estado puro y sabemos que tiene la configuración R. Si al añadir cantidades pro
gresivas de una muestra (A) al enantiómero puro se produce un descenso en el punto de fusión de la mezcla, A
tiene que poseer la configuración S. porque si fuese R. no variaría el punto de fusión.
2.2. Actividad óptica. Polarimetría
La luz es una radiación electromagnética que puede describirse como un vector que oscila en todas las direccio
nes que son perpendiculares al eje de propagación. Si se selecciona una oscilación en una de dichas direcciones,
pasando una radiación luminosa monocromática isótropa a través de un prisma de Nicol, se tiene la luz polari
zada o anisótropa. En una luz polarizada, los vectores de campo eléctrico (E) y magnético (H) se propagan en
fase, y son perpendiculares entre sí. Para simplificar, se puede considerar sólo el campo eléctrico, y representar
se como una vibración sinusoidal que se propaga en el plano de polarización (P). que es el resultante de dos vi
braciones helicoidales imagen una de otra, una hacia la derecha (ED) y otra hacia la izquierda (E>).
En un medio aquiral, las dos vibraciones se propagan a velocidades idénticas, y la resultante permanece
en el mismo plano de polarización. Sin embargo, si atraviesa un medio quiral enantioméricamente puro, las ve
locidades de propagación de ambas vibraciones (vD y v() son diferentes, debido a que los índices de refracción.
n0 y n,. también lo son, y la resultante de ambos vectores formará un ángulo (a) respecto a la posición inicial del
plano de polarización mayor o menor que 0 (Biot fue el primero en demostrar, en 1838, que determinados com
puestos orgánicos existentes en la naturaleza poseían esta característica). La sustancia será dextrógira en el pri
mer caso y levógira en el segundo (Fig. 30.2). Conviene recordar que no existe relación directa entre el sentido
de la rotación y la configuración absoluta de las moléculas.
Figura 30.2. En un medio quiral. el plano de luz polarizada se desvía respecto al plano de polarización inicial. En este ca
so. la sustancia es dextrógira.
La magnitud de la rotación es proporcional a la cantidad de materia que encuentra la luz en su trayecto

(<•./). El valor [a]T>., denominado rotación específica, varía según la temperatura y la longitud de onda X (gene
ralmente corresponde a la línea D del Na, esto es, 589,3 nm). Si se expresa la concentración en g/100 mL de di
solvente y la longitud de la cubeta (1) en dm (porque se necesitan cubetas grandes para obtener medidas exac
tas), se obtiene la rotación específica [ 1). Si se conoce el peso molecular, puede usarse en lugar de [a] el valor
de la rotación molecular [<I>|. que expresa la concentración en mol/mL y es el que se utiliza en la dispersión óp
tica rotatoria (DOR).
, ,T 100a
[al * =---------------------
lc(g/100mL)
La forma de expresar la rotación específica para un compuesto determinado (dextrógiro) indica las varia
bles utilizadas (temperatura, longitud de onda, concentración y disolvente):
[a]25D+ 103 (c= 1.5, MeOH)
Para los líquidos puros, no disueltos, se utiliza la expresión [2], en la que p es la densidad expresada en g/mL.
[a)\ = —[2]
1 p
La rotación específica [a]Ti para una temperatura, una longitud de onda, un disolvente y una concentra
ción determinados es una constante física semejante al punto de fusión o de ebullición, a la solubilidad o a cual
quier otra propiedad física y, puesto que las moléculas de una misma configuración inducen una rotación óptica
a y las de configuración opuesta -a, la rotación óptica de un racémico es nula por compensación (la contribu
ción de una molécula de uno de los enantiómeros se anula con una molécula del otro). Si la luz polarizada atra
viesa un medio enriquecido en un enantiómero, la actividad óptica es proporcional al exceso enantiomérico (ee)
[3] y podría utilizarse para determinar la pureza enantiomérica. No obstante conviene diferenciar el ee de la pu
reza óptica (PO) [4].
ee = % enantiómero mayoritario - % enantiómero minoritario = ím'n l |(X) [3]

[may.] + [mm.J
[a] de la muestra • 100

P.O. =--------------------------------------
[aj de un enantiómero puro [4]
Por ejemplo, si tenemos una mezcla 3:1 de dos enantiómeros en la que uno de ellos posee un valor [ao] +
104, dicha mezcla deberá mostrar un valor [a] + 52, siendo su pureza óptica del 50 %. De cuatro partes de la mez
cla, la rotación de dos de ellas (una del enantiómero minoritario y otra del mayoritario) se opone y anula, quedan
do por tanto dos partes «activas», es decir, que la rotación observada debe ser la mitad de la que tiene el enantió
mero puro. Esta rotación corresponde al exceso enantiomérico. que es también del 50 % [(3-1) 100/(3+1)].
Sin embargo, para que los valores ee y PO sean iguales, es necesario que el compuesto no forme agrega
dos. ya que es posible que los dímeros homoquirales o hetcroquirales refracten la luz polarizada de forma algo
diferente a los monómeros. con lo que la PO se desvía de la linearidad («efecto Horeau», Fig. 30.3). Los com
puestos polares (alcoholes o ácidos, fundamentalmente) presentan a veces este comportamiento, debido a que
suelen formar dímeros u oligómeros a través de enlaces de hidrógeno.
0 ee 100
Figura 30.3. Desviaciones de la rotación óptica respecto al ee en algunos compuestos.

La muestra a valorar por polarimctría no puede tener impurezas quítales, pero tampoco aquirales, ya
que éstas pueden también producir interacciones. Podemos concluir que la polarimetría, cuando se practi
ca muy cuidadosamente, es un método sencillo, barato y eficaz, pero en caso contrario, es una fuente de
errores.
2.3. Dispersión óptica rotatoria (DOR) y dicroísmo circular (DC)
Si se representan las variaciones respecto a A. de la rotación específica [a]1* de dos enantiómeros (A y B)

en un mismo disolvente, concentración y temperatura, se tienen curvas como las representadas en la Figu
ra 30.4.
Una curva que, como en el caso A. es positiva a X corta y negativa a mayor X. se dice que tiene un efec
to Cotton negativo, y positivo en el caso contrario (enantiómero B). Existe un valor (A<>) en que la rotación
específica es nula.
Figura 30.4. Curvas DOR de dos enantiómeros con efecto Cotton negativo (A) y positivo (B).
Por otra parte, los enantiómeros de un compuesto quiral pueden poseer un grupo cromóforo capaz de ab
sorber la luz polarizada, y dadas las interacciones diastereoisómeras de cada enantiómero con los dos compo
nentes de ésta, uno de dichos componentes es más absorbido que el otro. Es decir, los coeficientes de extinción
molar son diferentes: eD * e,. Esto produce una elipticidad en la luz polarizada y, en consecuencia, el vector E no
se propaga en el plano de polarización, sino en un cilindro elíptico. En un momento dado, el resultante E pre
senta un valor máximo a = ED + E, (ángulo entre los dos componentes X = 0”) y un mínimo b = Ed - E, (ángu
lo X = 90°).
La elipticidad se mide por la tangente del ángulo H* (tg'P = b/a. siendo b y a los ejes pequeño y grande de
la elipse).
Por definición, ¥ es positivo si eD > eb definiéndose además la elipticidad específica [‘P)\ y la elipticidad
molar [6]Tx de forma semejante a como se hace en la rotación específica.
[Y]\ =-------L2----- [0]\ =------- ------------

l e (g/mL) I • c (mol/mL)
En la Figura 30.5a, se representa la situación en que a = 0 (porque X = Xo, mientras que en la Figura 30.5b
se ha representado para un valor a negativo.
Figura 303. Elipticidad.
La variación de ['F]\ o [0]\ respecto a X origina las curvas de dicroísmo circular (DC) (Fig. 30.6). A Xo
(que corresponde a un ángulo de rotación a nulo), ocurre un máximo o un mínimo. La curva DC obtenida con
moléculas C idénticas a la curva DOR de B (Fig. 30.4) presentan un efecto Cotton positivo, mientras que la de
moléculas tipo D, análogas a las A en las curvas DOR, lo presentan negativo.
Figura 30.6. Curvas de dicroísmo circular y efecto Cotton positivo (C) o negativo (D).
Las curvas de DC se registran siempre en regiones de longitudes de onda correspondientes a bandas de

absorción, ya que la condición necesaria para que exista dicroísmo circular es que la sustancia absorba. Sin em
bargo, mientras que el ángulo de rotación (a) puede medirse directamente con un polarímetro, el ángulo de elip
ticidad 'P se determina indirectamente, midiendo la absorción con luz polarizada circularmente hacia la derecha
primero y hacia la izquierda después, y calculando su diferencia. La mayoría de los instrumentos de DC usan
una fuente de tensión alterna, que transforma la luz polarizada en un plano en luz polarizada circularmente a la
derecha, durante medio ciclo, y a la izquierda, durante el otro medio; un sistema electrónico detecta la diferen
cia de absorción durante los dos medios ciclos, y registra una señal que es una medida directa de DC.
El análisis de los espectros ultravioleta y las curvas de DOR o DC de un compuesto modelo apropiado, y
su comparación con los obtenidos a partir de una sustancia desconocida que posea una estructura relacionada,
permite conocer la configuración absoluta de esta última (véase el Apartado 5.5). Por tanto, el dicroísmo circu
lar es un método eficaz que permite, una vez separados los enantiómeros, la asignación cualitativa de un enan
tiómero si se dispone de un compuesto modelo. Sin embargo, no permite determinar la pureza óptica o enantio-
mérica.
3. RESOLUCIÓN (SEPARACIÓN) DE ENANTIÓMEROS
Separar dos moléculas que son entre sí como un objeto y su imagen especular y. por tanto, son semejantes prác
ticamente en todas sus propiedades, es un problema que puede resolverse utilizando distintos planteamientos,
según el caso concreto.
3.1. Cristalización en conglomerados
En el Apartado 2.1, hemos visto que, cuando un racémico cristaliza en forma de conglomerado, sus cristales
presentan estructuras objeto-imagen y pueden separarse manualmente con la ayuda de un microscopio. Obvia
mente, esta técnica no es aplicable a gran escala, pero si a una solución saturada del racémico se añade un cris
tal de uno de los enantiómeros, éste hace de «cebo» y se produce preferentemente la cristalización de dicho
enantiómero. Desgraciadamente, sólo = 10 % de los compuestos quirales cristalizan de esta forma. En algunos
casos, sin embargo, pueden formarse derivados que posean esta característica. Así ocurre con las sales derivadas
de los aminoácidos alanina, leucina o a-metil-(L)-DOPAcon el ácido bencenosulfónico (Fig. 30.7).
Sal racémica que cristaliza

como conglomerado
Figura 30.7. Separación de enantiómeros en aminoácidos que forman sales que cristalizan como conglomerados.
3.2. Transformación de una mezcla de enantiómeros en una de diastereoisómeros
3.2.1. Cristalización
Si un racémico (R.S) reacciona con una sustancia enantioméricamente pura (X), se convierte en una mezcla de
los diastereoisómeros XR y XS, que poseen distintas propiedades físicas. Eligiendo cuidadosamente X. puede
encontrarse un disolvente, o mezcla de disolventes, en el que ambos diastereoisómeros se disuelvan de forma
muy diferente, lo que permitirá separarlos por recristalización para liberarlos después. Este método se emplea
todavía en la industria farmacéutica. Las reacciones más comunes son las de formación de sales, ésteres o ami
das. Así, para separar ácidos quirales en sus enantiómeros. se pueden formar sales utilizando compuestos natu
rales de naturaleza básica enantioméricamente puros, como los indicados en la Figura 30.8.
(lrt.25)(-)-Efcdrina
Quinina. R = OMe Quinidina, R = OMe

Cinconidina, R = H Cinconina. R = H
Figura 30.8. Algunos productos naturales de naturaleza básica utilizados para resolver ácidos quirales a través de la for
mación de sales.
Si, por el contrario, se quiere resolver una base racémica por este método, se suelen utilizar ácidos natura
les enantioméricamente puros (algunos de los más utilizados se indican en la Fig. 30.9).
COjH
CO,H
Ácido (15) (+)-IO-canfosulfónico Ácido (2R. 3/?) (+)-tartárico
C6H5^CO2H
HO 'H
Ácido (5) (-)málico Ácido (5) (+)-mandclico
Figura 30.9. Algunos productos naturales de naturaleza ácida utilizados para resolver bases quirales a través de la forma
ción de sales.
Es obvio que la eficacia del método reside en la pureza enantiomérica de X. puesto que no puede lograrse
una pureza enantiomérica superior a la del agente de separación.
3.2.2. Métodos cromatográficos
La cromatografía se basa en la distribución de un compuesto entre dos fases, una móvil y otra estacionaria. Si la
fase móvil es un gas, tenemos la cromatografía gaseosa (CG), y si es un líquido, la cromatografía líquida (CL)
(véase el Capítulo 27). Un compuesto (2) que interactúe más intensamente con la fase estacionaria que otro
compuesto (1) tardará más en eluir, y tendrá un tiempo de retención (tri) mayor que el del compuesto que in
teractúen menos (trj) (Fig. 30.10). En cromatografía, se establece un equilibrio de cada soluto entre la fase esta-
cionaria y la móvil, cuya constante (K') puede expresarse en función del tiempo de retención de ese soluto y del
frente de disolvente (U). Para que se produzca la separación, es necesario que K'\ # K'2. La separación entre los
picos (a), su anchura (w) y la resolución (Rs) miden la eficacia del sistema.
2(^-1.,)
w,+
Figura 30.10. Parámetros cromatográficos.
Hasta hace pocos años, la mayor parte de las fases estacionarias utilizadas en cromatografía gaseosa (CG)
o líquida (CL) eran aquirales, lo que significaba que la separación de enantiómeros no podía hacerse directa
mente por cromatografía, sino que previamente había que formar diastereómeros por reacción con un agente
enantioméricamente puro. Una vez transformada una mezcla de enantiómeros en una de diastereoisómeros (es
teres o amidas fundamentalmente), utilizando un reactivo enantioméricamente puro, ésta puede separarse por
cromatografía, y después proceder a la hidrólisis para obtener los enantiómeros puros. La CG se utiliza para los
derivados suficientemente volátiles, mientras que la CL de alta resolución permite analizar los derivados que
tienen puntos de ebullición elevados.
En la CL, la fase móvil líquida puede ser más o menos polar. Si la fase estacionaria es más polar que la
fase móvil, se denomina de fase normal, mientras que si la polaridad de la fase estacionaria es menor que la de
la fase móvil, se denomina de fase inversa. Para la separación de enantiómeros, generalmente se usan condicio
nes de fase inversa, ya que este último procedimiento tiene la ventaja respecto a la fase normal de que se puede
modificar el pH o adicionar determinadas sustancias con objeto de cambiar los tiempos de retención de los
enantiómeros. El compresor puede manipularse para aumentar o disminuir el flujo de la fase móvil, variable que
también influye en el valor de la enantioselectividad. Otro elemento del sistema es la columna donde se deposi
ta la fase estacionaria y, por último, el sistema de detección, que es donde se detectan las especies eluidas de
aquélla. Existe una gran variedad de detectores: de índice de refracción (poco sensibles); de absorción ultravio
leta (que es el detector universal); de fluorescencia (muy sensibles); y electroquímicos (muy sensibles y basados
en reacciones redox; sólo son válidos para determinaciones analíticas, ya que se trata de un proceso destructi
vo). Además del detector normal, la muestra eluida de la columna pasa por un polarímetro, que indica el signo
de la rotación de los enantiómeros eluidos.
Por otro lado, se puede cromatografiar la mezcla de enantiómeros inicial utilizando columnas quirales
enantioméricamente puras. La historia de la cromatografía con fase estacionaria quiral data de principios del si
glo xx, cuando se observó que ciertos colorantes se absorbían de forma enantioselectiva en ciertos biopolíme-
ros, como la lana, pero no se popularizó hasta mucho más tarde. Las interacciones entre una fase estacionaria
quiral y dos enantiómeros son de tipo diastereoisómero, por lo que ambos poseen una velocidad de elución dis
tinta con determinados disolventes. Dicho de otra forma, si una mezcla de enantiómeros A(/f) y A(S) se encuen
tra con una fase estacionaria quiral que contiene, por ejemplo, un polímero formado por centros estereogénicos
de configuración S, se establecerán complejos reversibles diastereoisómeros entre cada enantiómero y las fun
ciones quirales de la fase estacionaria. Estos complejos tienen una estabilidad (o semivida) diferente, lo que se
refleja en que el avance de ambos enantiómeros de A a través de la columna se realiza a distinta velocidad (Fi
gura 30.11). Este método se utiliza sobre todo con fines analíticos (véase el Apartado 4.2), aunque pueden ha
cerse preparativos si se realiza el escalado del proceso.
Las interacciones son

diferentes. A(S) cluyc
primero
Fase estacionaria
quiral
Figura 30.11. Representación esquemática de las interacciones entre enantiómeros y una fase estacionaria quiral.
Si se conoce el orden de elución de los enantiómeros, además de la separación puede realizarse su identi-
ficación, es decir, conocer su configuración absoluta. Si, por el contrario, el comportamiento cromatográfico del
compuesto se desconoce, el racémico ha de analizarse primero y establecerse después el orden de elución, por
correlación con compuestos de configuración conocida.
3.2.3. Resolución cinética
Supongamos una reacción de transesterificación entre un éster enantioméricamente puro (/?)-! y un alcohol ra
cémico (±)-2 en la que se forman dos ésteres: (R.R)-3 y (R.S)-3 (Fig. 30.12).
(/?)■! (±)-2 (R.R)-3 (R,S)-3
Prioridad: CO:Me > R1 > R:

O > R3 > R4
Tiempo % (/?)-! % (/?)-2 % (S)-2 % (RR)-3 % (RS)-3
0 50 25 25 0 0
t 40 16 24 9 I
ee=20 % «/=80 %
Figura 30.12. Resolución cinética de un alcohol racémico (2) por transesterifícación con un éster enantioméricamente
puro.
Tanto estos ésteres como los estados de transición que les preceden son diastereoisómeros, por lo que las cons
tantes de velocidad de formación kKs y kKfi serán distintas. En el caso de que una de ellas sea mucho mayor que
la otra (supongamos que k„K » kgs), puede suceder que el alcohol (/?)-2 haya reaccionado completamente cuan
do sólo lo haya hecho una cantidad mínima del alcohol (S)-2. Por ejemplo, si cortamos esta reacción cuando ha
reaccionado un 10 % del éster de parlida con un 10 % del alcohol racémico, el éster que obtendremos estará for
mado por una mezcla enriquecida en el diastereoisómero R.R. mientras que el alcohol de partida estará enrique
cido en el enantiómero S. En el ejemplo que se propone, el exceso diaslereoisomérico del éster (ed) es del 80 %
[(9-1) x 100/(9 + I)], y el exceso enantiomérico (ee) del alcohol es del 20 % [(24-16) x 100/(24 + 16».
La resolución cinética puede llevarse a cabo también con enzimas, ya que la mayor parte de las reacciones
catalizadas por éstas son muy estereoselectivas y. en ocasiones, discriminan completamente entre un par de
enantiómeros. Entre las más utilizadas, se encuentran algunas lipasas. que son enzimas que catalizan la hidróli
sis de triglicéridos pero que. en medios orgánicos, conservan su actividad catalítica y son capaces de catalizar
reacciones de transesterificación (como la que se representa en la Fig. 30.13).
G>hh /’ G)HH r4
hô¥r> + CH3CHO
H3c'Xx-O^ff'R4
I ipasa lipasa
Prioridad: O > R3 > R4
* (Las lipasas son macromoléculas quirales. Estados de transición diastereoisómeros

Muchas poseen en su centro activo una que se forman a distinta velocidad
«tríada catalítica» formada por Asp. His y Ser;
OH representa cl grupo alcohol de la serina)
O h R4
Á
'ôVr* H,C O'V'r'
Acetato mayoritario Acetato minoritario
Figura 30.13. Resolución cinética de un alcohol racémico utilizando lipasas como catalizadores.
Obsérvese que se usa el acetato de vinilo como sustrato, a fin de que la reacción de transesterificación sea
irreversible y se forme alcohol vindico que, por tautomería, se transforma en acetaldehído. Este caso podría
abordarse de dos maneras: o bien recoger la mezcla de ésteres enriquecida en uno de los enantiómeros. para ob
tener por hidrólisis el alcohol mayoritario (/?), o bien recoger el alcohol que no haya reaccionado, que estará en
riquecido en el enantiómero S.
Para que una resolución cinética tenga interés práctico, se han de producir altos excesos enantioméricos
con altos porcentajes de conversión. No es útil que se obtenga, por ejemplo, un ee = 98 % cuando hay un por
centaje de conversión del racémico del 10 %, ya que el 90 % del producto que se quiere separar no ha reaccio
nado (si se aumenta el tiempo de reacción para aumentar cl porcentaje de conversión, disminuye el ee, porque
empieza a reaccionar el otro enantiómero). Cuando se pretende utilizar una resolución cinética, se requiere estu
diar previamente el proceso, especialmente si la reacción a utilizar es reversible o irreversible. Ya hemos co
mentado que la transesterificación entre el acetato de vinilo y un alcohol racémico es irreversible porque no se
obtiene un alcohol que pueda volver a transesterificarse, sino acetaldehído. Del mismo modo, la hidrólisis enzi-
mática de un éster racémico (que es también una resolución cinética, dada la relación diastereoisomérica entre
los estados de transición), en presencia de un gran exceso de agua, puede considerarse una reacción irreversible.
Para determinar la eficacia (£) de una resolución cinética catalizada enzimáticamente en un proceso irre
versible, puede realizarse un tratamiento matemático. También pueden hacerse análisis semejantes para resolu
ciones cinéticas que utilizan catalizadores quirales de síntesis, aunque éstos suelen ser menos eficaces que las
enzimas. Si el proceso de resolución cinética se basa en una reacción reversible puede hacerse un tratamiento
análogo, aunque más complicado, ya que en este caso el exceso enantiomérico del sustrato pasa por un máximo
y luego disminuye, debido a que cuando la concentración de los productos de reacción es significativa, comien
za a producirse la reacción inversa. Aceptando el principio de microrreversibilidad, el enantiómero del sustrato
que reacciona más deprisa es también el que se transforma más rápidamente en la reacción inversa, lo que origi
na un descenso del valor ee.
Las transformaciones enzimáticas pueden utilizarse para determinar la pureza enantiomérica (véase el
Apartado 4) y detectar hasta el 0,1 % de uno de los enantiómeros. En la muestra a analizar, el sistema enzimáti-
co se elige de modo que el enantiómero que reaccione sea el minoritario, siendo los tipos de reacción más utili
zados para este propósito las oxidaciones y descarboxilaciones catalizadas por aminoácido oxidasas y aminoá
cido dcscarboxilasas, respectivamente. Pueden encontrarse en el mercado aminoácido oxidasas que catalizan
reacciones con sustratos L o con sustratos d. mientras que sólo se comercializan las aminoácido descarboxilasas
que descarboxilan aminoácidos L. El análisis se efectúa, en el primer caso, midiendo el oxígeno absorbido, y en
el segundo, midiendo el dióxido de carbono que se desprende (Fig. 30.14).
Oxidación
1/2 0,
H,N-CHR-COOH ---------------------------------- ► R-CO-COOH + NH,
A A-oxidas a
Descarboxilación
1/2 0,
H,N-CHR-COOH -------------------- ------------- ► R-CH,-NH, + CO2
AA-descarboxilasa
Figura 30.14. Ejemplos de reacciones enzimáticas utilizadas para el análisis de racémicos.
4. MÉTODOS ANALÍTICOS CUALITATIVOS Y CUANTITATIVOS PARA DETERMINAR

LA PUREZA ENANTIOMÉRICA
4.1. Resonancia magnética nuclear
La RMN no distingue ente enantiómeros. pero sí entre diastereoisómeros, por lo que para determinar la pureza
enantiómerica habrá que formar especies diastereoisómeras entre los enantiómeros de la muestra a analizar y un
auxiliar quiral enantioméricamente puro. Los auxiliares quirales pueden dividirse en tres grupos: agentes quira
les de derivación, reactivos lantánidos quirales de desplazamiento y agentes quirales de solvatación.
Con los espectrómetros de alto campo (>400 MHz) pueden medirse varios núcleos ('H, l3C, ”F o 5IP)
utilizando cantidades de muestra relativamente pequeñas. Es el método más empleado para determinar rápi
damente los excesos enantioméricos. pero como su precisión es < I %, es necesario acudir a métodos más
sensibles, como son los cromatográficos, para determinar excesos enantioméricos superiores al 98 % (véase
el Apartado 4.2).
4.1.1. Derivación de enantiómeros a diastereoisómeros. Utilización de agentes

quirales de derivación
La utilización de agentes quirales de derivación requiere una reacción química previa entre el agente de deriva
ción homoquiral y la mezcla enantiomérica a analizar. Las reacciones más frecuentes son la esterificación. la
amidificación, la transesterificación o la transamidificación. También se utilizan para determinar la configura
ción absoluta (véase el Apartado 5.4).
Uno de los agentes quirales de derivación más conocidos es el cloruro del ácido de Mosher (ácido 2-fenil-
2-trifluorometil-2-metoxiacético o «MTPA»), que puede adquirirse en su configuración R o S. Éste reacciona
con alcoholes primarios y secundarios o con aminas, para formar ésteres o amidas diastereoisómeras. cuyo ex
ceso diastereoisomérico (erf), definido por la diferencia en el porcentaje entre el diastereoisómero mayoritario y
el minoritario, se analiza por RMN de H o ’’F. Este valor debe corresponderse con el ee del alcohol o la amina
de partida. La ausencia en estos agentes de átomos de hidrógeno en a evita la posibilidad de que se racemicen
en el proceso de derivación. En la pareja de los dos ésteres diaslereoisómeros derivados de una mezcla de dos
enantiómeros de un alcohol o una amina (Fig. 30.15). se podrían integrar las señales del grupo metoxilo que en
su origen pertenece al agente de derivación. Éstas se observarían como uno o dos singlóles situados aproxima
damente a 3,5 ppm. Si sólo se observara una señal se podría asegurar un ee > 98 %, mientras que si se observa
ran dos. la relación de sus intensidades determinaría la relación entre los dos diaslereoisómeros y, por analogía,
la de los enanliómeros que se analizan.
R — NH,
(K)-MTPA
ho-r’
Figura 30.15. Determinación del ce por !H RMN. Derivación de mezclas de enantiómeros de alcoholes y aminas con el
cloruro del ácido de Mosher.
Se conocen oíros muchos agentes quirales de derivación, algunos de los cuales se representan en la Figu
ra 30.16.
Boc, H
N
M / CO,H
Ph
(/?) N-Boc-fenilglicina
Ácido (2/?) 2-
pentafluorofenilpropiónico
HjCOx^cOjH AcO'^|i-«CO,H
(/?) I-Feniletilamina Ácido (R) O-metilmandélico Ácido (/?) O-acetilmandélico
Figura 30.16. Otros agentes quirales de derivación utilizados en el análisis de la pureza enantiomérica por RMN.
4.1.2. Utilización de agentes que forman complejos. Agentes de solvatación

y reactivos de desplazamiento quirales
Si se añade un agente quiral de solvatación j(S)-B] a una disolución en un disolvente no polar, como cloroformo
deuterado, de la mezcla de enantiómeros que se analiza (A(/?) + A(S)j, se pueden establecer interacciones a tra
vés de enlaces de hidrógeno, la formación de pares iónicos, interacciones tt-rt o de van der Waals, fundamen
talmente, para formar las especies diastereoisómeras [A(/?) B(S)1 y IA(S) B(S)| que, cn general, presentan seña
les diferentes en RMN. El estudio se hace utilizando cantidades crecientes de estos agentes de solvatación.
A(/?> + B(S) 7—► A(R).B(S)

Mezcla de Complejos de
enantiómeros Kx Solvatación
A(S) + B(S) «r- '» A(S).B(S) di as te reoisómeros
t
Agente de solvatación quiral
La formación de estos complejos de solvatación diastereoisómeros suele ser reversible y rápida, observán
dose los desplazamientos químicos de una media ponderada de las resonancias propias de cada una de las espe
cies que interactúan. Sin embargo, como las constantes de equilibrio Kff y Ks son diferentes (por ser los comple
jos de solvatación diastereoisómeros), podemos relacionar los desplazamientos observados (5sexp y 3sexp) con
los desplazamientos de los complejos (6» y 8Ss) y el desplazamiento de la mezcla de enantiómeros (8„„), las frac
ciones molares de los complejos [Ae-Bs] y [As-Bs], y las de los enantiómeros no solvatados [A#] y [As] (Ecuacio
nes [5] y [6]).
8«exp = (As • Bs] 8ss + [As] 6,„ 15]
8sexp = [As ■ Bs] 8SS + [As] 8„lr
Dado que las fracciones molares de los complejos solvatados pueden representarse como [ l-[As]) y [ 1-
[As]), las ecuaciones anteriores se convertirían en las Ecuaciones [7] y [8]:
Ssexp = | l-[As ] | 8ss + [As] 8,„
8sexp = | l-[As ] | 8.ss + [A,] 8„„
Introduciendo las constantes de equilibrio en las ecuaciones anteriores, quedan dos expresiones de cuya
resta surge la Ecuación [9], que relaciona la diferencia de desplazamiento químico (A8cxp) con las constantes
de equilibrio Kk y Ks.
1 - [As] I - [As]
Ks =
[As][Bs] [AJIBsl
Ssexp — Ks [As]|B.s] 8ss + [As] 8riw.
6, exp = Ks IAsKBs] 8« + [As] 3,„
A 8 exp = 8s exp - 8, exp = [As] 8„„ + Ks[Bs]8ss - [As] 8,„ + Ks[Bs]8ss [9]
La integración de las dos señales obtenidas por este desdoblamiento permite calcular la proporción de
enantiómeros en la mezcla. Debido a los cambios rápidos entre los complejos de solvatación y las moléculas no
asociadas, la intensidad relativa de estas señales no varía con la pureza enantiomérica del agente de solvatación
quiral, pero sí varía su separación (A 8 exp). Si B es racémico, A 8 exp = 0. Por ello, debe usarse aquél con una
gran pureza enantiomérica. En la Figura 30.17, se representa el espectro RMN de ' H de una disolución formada
por una mezcla de ésteres metílicos de alanina enantiómeros a la que se ha adicionado (/?)2,2,2-trifluoro-1 -fenil-
etanol como reactivo de solvatación quiral. Pueden verse las señales duplicadas correspondientes a los dos gru
pos metilo del analito (OCH< y CCH.) y al grupo CH. La separación de las señales del grupo C-CH> (dos doble
tes) es suficientemente grande y permite que. por su integración, se pueda calcular la proporción de enantió
meros.
Figura 30.17. Análisis de mezclas de enantiómeros por RMN de 'H utilizando agentes de solvatación quirales.
Los agentes de solvatación quirales más utilizados, por su eficacia y su asequibilidad. son los ariltrifluo-
rometilcarbinoles y las l-ariletilaminas, que fueron desarrollados por Pirkle y sus colaboradores, o el 2,2'-dihi-
droxi-LI'-binaftilo, desarrollado por Toda y colaboradores (Fig. 30.18).
De ellos, tiene especial interés el denominado alcohol de Pirkle (TFAE). que puede usarse también com
pletamente deuterado (en este caso, cuando se adiciona a una mezcla de enantiómeros, sólo se observan en el
espectro 'H RMN las señales desdobladas de los protones de la muestra).
También se pueden utilizar la quinina, el ácido de Mosher o el ácido mandélico.
La capacidad para formar enlaces de hidrógeno entre el soluto y los agentes de solvatación mencionados
hasta el momento no es requisito indispensable para actuar como agentes de solvatación. Así, por ejemplo, los
derivados de fluoreno o de hexaheliceno, indicados en la figura, actúan solvatando al soluto por interacciones
de transferencia de carga, mientras que la ciclodextrina o los éteres corona quirales actúan por inclusión del so
luto en sus cavidades (permiten trabajar en agua).
(S) (+J-TFPE (S) (+J-TFNE (S) (+)-TFAE

2.2,2-Trifluoro-1 -feniletanol 2.2.2-Tri fluoro-1 -naftiletanol 2,2,2-Trifluoro-1 -antriletanol
Ácido mandé I ico Ácido de Mosher Quinina 2,2'-Dihidroxi-

I J'-binaftilo
Derivado de íluoreno Derivado de hexahel iceno Éteres corona
Figura 30.18. Agentes de solvatación quiralcs utilizados en el análisis de mezclas de enantiómeros.
Con más frecuencia, se utilizan los llamados reactivos de desplazamiento. Son compuestos qu¡rales for
mados por un lantánido hexacoordinado que tiene, como ligandos, derivados de alcanfor (generalmente a-acil-
derivados polifluorados). Son quelalos de europio (III), praseodimio (III) o yterbio (III), que forman complejos
por equilibración (intercambio de ligando) con los enantiómeros de soluto de tipo alcohol, cetona, amina o és-
tcr, entre otros. Las asociaciones de tipo quelato así formadas se traducen en variaciones importantes en las re
sonancias de los sustratos, sobre todo en los núcleos que se encuentran próximos al lugar de la formación de
complejos (la diferencia de desplazamiento químico. A3, que inducen estos compuestos se debe a las propieda
des paramagnéticas de los cationes de los lantánidos trivalentes). En la Figura 30.19. se representan dos de estos
quelatos (Euíthc), y Eu(hfc)}] y se esquematiza el proceso de la interacción de los enantiómeros As y A.s con un
quelato quiral de configuración R |EuL(/?),].
Ks-r.u
Enantiómeros —► Aw + EuL (R)3 A«--EuL(S),
KSEu (»l Kj-Eutín * K«-Eu(«>

As + EuL («), As —EuL W,
Quelato quiral Complejos

de Eu (111) con un diastereoisómeros
ligando de configuración R con diferentes resonancias
Eutthc),; R = CF,[lris-(rinuoromelilhidroximetilen-(IR)-canforato de europio (III)

Eu(hfc)3: R = CFjCFjCFj [tris-heptafluoropropilmetilhidroximetilen-( IRI-canforato de europio (III)
Figura 30.19. Uso de quelatos de Eu(IH) quirales utilizados para separar las resonancias de dos enantiómeros.
Un racémico con un quelato de Eu(lll) quiral debe originar señales desdobladas (correspondientes a los
complejos diastereoisómeros). En las mismas circunstancias, un enantiómero puro sólo debe originar señales
únicas.
4.2. Métodos cromatográficos
La sensibilidad de los métodos cromatográficos es mayor que la de la polarimetría o la RMN, ya que los detec
tores utilizados en CG o GL permiten analizar cantidades de muy pocos microgramos. En ciertos casos, para au
mentar la detección o mejorar la separación, es necesario o conveniente preparar un derivado del compuesto
problema que posea mejores características cromatográficas.
La determinación del valor ee de una muestra de enantiómeros por estos métodos, al igual que lo que se
ha comentado para la resolución de un racémico, puede realizarse convirtiéndola previamente en una mezcla de
diastereoisómeros. utilizando una fase estacionaria quiral (frecuente) o utilizando una fase móvil quiral (poco
frecuente). Comentaremos los dos primeros métodos.
4.2.1. Por derivación a diastereoisómeros
Si se practica este método para analizar la pureza enantiomérica. es necesario asegurarse de que la conversión
de la mezcla racémica en la mezcla de diastereoisómeros es del 100 % y de que no se produce racemización ni
enriquecimiento enantiomérico (véase el Apartado 3.2.3).
4.2.2. Utilizando fases estacionarias o fases móviles quirales
En los métodos cromatográficos directos, los enantiómeros se separan por cromatografía utilizando una fase es
tacionaria quiral, que origina una diferencia en el tiempo de retención entre los enantiómeros. Ya se ha comen
tado. en el Apartado 3.2.2, que, en el caso de la CL. los enantiómeros pueden ser separados así o, más rara vez,
mediante una fase móvil quiral y una fase estacionaria aquiral. Por otro lado, un método analítico rápido y efi
caz para saber si se dispone de un producto en una forma enantioméricamente pura consiste en utilizar la cro
matografía en capa fina con placas cromatográficas comerciales que poseen una fase estacionaria quiral.
Las fases estacionarias quirales se basan en las interacciones de puente de hidrógeno, dipolo-dipolo, o de
apilamiento tt. así como en fenómenos de inclusión. Entre ellas, se encuentran derivados de celulosa, ciclodexlri-
nas (polímeros cíclicos que contienen de 6 a 12 unidades de D-(+)-glucosa, unidas por las posiciones 1,4, véase
la Fig. 30.18). éteres corona, complejos de metales de transición y proteínas inmovilizadas, etc. Muchas moléculas
orgánicas neutras se separan utilizando fases estacionarias quirales con grupos donadores o aceptores de electro
nes rt. En la Figura 30.20, se representa la estructura de algunas fases estacionarias quirales utilizadas en HPLC.
desarrolladas por Pirkle, entre las que se encuentran derivados de /V-3,5-dinitrobenzoil-4-amino-1.2,3,4-tetrahi-
drofenantreno. Contienen una porción quiral sobre un soporte sólido de sílice (SiO>). que puede interactuar con
los enantiómeros que se quieren analizar o separar como rt-aceptores o tt-donadores, así como por interacciones
de transferencia de carga o por enlaces de hidrógeno. Estas fases requieren el uso de condiciones de cromatogra
fía de fase normal, es decir disolventes poco polares, a fin de evitar la competencia de las interacciones fase mó
vil-soluto con las de la fase estacionaria quiral-soluto. que son las que intervienen en la discriminación.
Fase estacionaria de Pirkle Fase estacionaria de Pirkle

n-donadora y quiral rt-aceptora y quiral
Fase estacionaria n-aceptora y quiral
Figura 30.20. Ejemplos de fases estacionarias de Pirkle útiles en HPLC quiral.
La capacidad de una fase estacionaria quiral para retener dos enantiómeros de forma diferente (enantiose-
lectiva) parece depender de la existencia de tres interacciones simultáneas. Esta suposición se basa en la teoría
de los tres puntos, que también explica el diferente reconocimiento de dos fármacos enantiómeros por su diana
farmacológica. Las tres interacciones no tienen por qué ser todas atrayentes, sino que en muchos casos están im
plicadas interacciones estéticas de repulsión. También existen fases estacionarias quirales. derivadas de ciclo-
dextrinas y algunos poliéteres macrocíclicos, que actúan por un mecanismo de inclusión (Fig. 30.21). También
existen fases supramoleculares derivadas de otros polisacáridos. como la triacctilcclulosa (que da buenos resul
tados con un gran número de racematos aromáticos y alifáticos), la amilosa, los glucanos. etc. Estas fases pue
den usarse sin soporte aquiral o depositadas sobre SiOj, teniendo que utilizar disolventes polares (etanol o me
tano!, por ejemplo) como fases móviles (el cloroformo o el diclorometano no pueden usarse porque disuelven la
fase estacionaria).
Poliéter macrociclico
soportado
Figura 30.21. Fases estacionarias quirales que actúan por un mecanismo de inclusión.
Las fases derivadas de proteínas poseen un gran número de centros de discriminación, por lo que tienen
valores de enantioselectividad elevados, aunque son poco reproducibles. Cuando se utilizan, hay que tener cier
tas precauciones con la fase móvil, el pH y la temperatura, con el fin de mantener la estructura de la proteína.
También se han desarrollado polímeros sintéticos enlazados a sílice (poliacrilamidas o polimetacrilamidas), que
poseen sustituyentes quirales. Más recientemente, se ha desarrollado el proceso de «filtración enantioselectiva».
que utiliza macromoléculas rígidas con cavidades, que poseen una forma y unas dimensiones en las que se ajus
ta uno de los enantiómeros.
El uso de fases móviles polares en HPLC permite utilizar un gran número de aditivos quirales (fases mó
viles quirales), que forman especies diastereoméricas con los enantiómeros a analizar, que se encuentran adsor
bidos en la fase estacionaria. La ventaja que presenta este procedimiento, frente al uso de fases estacionarias
quirales. es la flexibilidad para poder elegir el agente de resolución; el inconveniente es que se necesitan gran
des cantidades de aditivo, que a veces puede interferir en la detección y dificultar las determinaciones cuanti
tativas del exceso enantiomcrico.
4.3. Electroforesis capilar
La electroforesis es una técnica muy sensible que permite la detección de concentraciones fentomolares (10 ''
M) y la separación de moléculas iónicas (cargadas), como consecuencia de la diferente velocidad de migración
en un gel que produce la aplicación de un campo eléctrico intenso. Las moléculas cargadas, como los aminoáci
dos. los péptidos o las proteínas, poseen puntos isoeléctricos característicos y. bajo la influencia de un campo
eléctrico, se desplazan a velocidad variable. Las moléculas no cargadas pueden también migrar a distinta velo
cidad en un tubo capilar por electroósmosis. dependiendo de las interacciones con otras especies situadas sobre
la sílice que constituye el tubo capilar. Si estas especies son aquirales. dos enantiómeros se desplazarán a la mis
ma velocidad, pero si son quirales (como las 0-ciclodextrinas o los éteres corona anteriormente mencionados),
las interacciones son diastereoisómeras y podrán separarse dos enantiómeros.
4.4. Dilución isotópica
Este método requiere la determinación de dos variables: la rotación específica y el contenido isotópico. La pri
mera se determina por polarimetría, y la segunda puede obtenerse por espectrometría de masas o mediante un
contador de centelleo líquido para radioisótopos emisores de radiaciones 0. El principio general consiste en
mezclar la muestra de pureza enantiómerica desconocida con un racemato del mismo compuesto isotópicamen
te marcado.
5. DETERMINACIÓN DE CONFIGURACIONES ABSOLUTAS
Hasta el momento, hemos comentado procedimientos para determinar las configuraciones relativas, es decir,
podemos decir que dos centros estereogénicos tienen la misma o distinta configuración. Pero, ¿cuál es ésta en
cada uno de ellos?
Hasta que, en 1951, Bijvoet y colaboradores determinaron, por difracción de rayos X emitidos por zirco-
nio. que los dos carbonos estereogénicos de una sal de rubidio y sodio del ácido (+)-tartárico tenían la configu
ración R. la configuración de los compuestos orgánicos se relacionaba con la del (+)-gliceraldehído, al que
E. Fischer había atribuido arbitrariamente la configuración R. El descubrimiento de Bijvoet demostró que, afor
tunadamente. Fischer había acertado en su propuesta.
5.1. Por difracción de rayos X
Esta técnica permite conocer las distancias y los ángulos entre átomos a partir de diagramas de interferencia ob
tenidos por difracción de rayos X, que reflejan el camino recorrido por estos rayos antes de llegar a una placa
fotográfica; sin embargo, estos diagramas son independientes de la configuración. Afortunadamente, cuando la
frecuencia de los rayos X se aproxima a la frecuencia de absorción de uno de los átomos, los rayos difractados
por este átomo se retrasan, estableciéndose diferencias en los diagramas de difracción de dos enantiómeros que
permiten atribuí r a cada uno de ellos su configuración absoluta. Este comportamiento permitió a Bijvoet esta
blecer la primera asignación inequívoca de la configuración absoluta.
5.2. Correlaciones químicas
Sin necesidad de utilizar estas técnicas de difracción de rayos X, pueden establecerse correlaciones químicas de
las que puede deducirse la configuración absoluta de un determinado compuesto, utilizando reacciones que no
alteren la quiralidad o que la inviertan completamente.
Como ejemplo de este método, supongamos que desconocemos la configuración absoluta del azúcar
(+)-xilosa (OCH-CHOH-CHOH-CHOH-CH-OH), pero sabemos que, por oxidación suave, da un ácido dicar-
boxílico ópticamente inactivo. Según esto, podría tratarse de uno de los estereoisómeros 1-4 (Fig. 30.22). ya
que cualquiera de ellos daría un ácido dicarboxílico con un plano de simetría (forma meso).
Por otra parte, sabemos que la (+)-xilosa se degrada (según la degradación de Wohl) a una tetrosa que,
por oxidación, origina ácido tartárico levógiro. Dado que la configuración absoluta de este ácido se conoce
(es el enantiómero del ácido tartárico dextrógiro y. por tanto sus dos centros estereogénicos tienen la configu
ración S). ésta será la configuración de los carbonos C-3 y C-4 de la xilosa y, en consecuencia, su estructura
corresponde a la del compuesto 2.
Estructuras posibles para la (+) -xilosa (8 estereoisómeros):
CHO CHO CHO CHO
H--------- OH H OH HO--------- H HO--------- H
OH HO--------- H H--------- OH HO--------- H
H--------- OH H--------- OH OH OH
CH,OH CH,OH CH,OH CH-.OH
CHO CHO CHO CHO
HO-------- H HO H--------- OH H OH
HO--------- H H-------- OH HO--------- 11 H--------- OH
HO--------- H IIO— H HO--------- H HO--------- H
ch2oh ch2oh CH2OH ch2oh
|O| 10]
Ácido dicarboxílico meso Ácido dicarboxílico

Opticamente activo
CHO CHO CHO

HO—k-H HO—I—H
H--------- OH Degradación
de Wdhl -12U H—OH
HO--------- H H—+—OH
H--------- OH CH2OH COOH
ch2oh
(+)-xilosa Tetrosa Ácido (-)-tartárico
Figura 30.22. Determinación de la configuración absoluta de la (+)-xilosa por correlaciones químicas.
5.3. Síntesis estereoselectivas o estereoespecíficas
También puede conocerse la configuración absoluta creando elementos nuevos de quiralidad en síntesis estereo
selectivas o estereoespecíficas que transcurran con retención o con inversión total de la configuración de un
centro estereogénico (véase el Capítulo 26).
Por ejemplo, la degradación de Hofmann de amidas para dar aminas o la oxidación de cctonas a ésteres
utilizando perácidos (reacción de Baeyer-Villiger). transcurren sin afectar al centro estereogénico (R *). mien
tras que la transformación de alcoholes en haluros de alquilo, utilizando haluros de fósforo (PCI j o PBrj), o las
reacciones de sustitución SN2, tienen lugar con inversión total del centro estereogénico. Así. para determinar la
configuración absoluta de un etanol deuterado en la posición C-l (i-H-etanol), que era levógiro y se había ob
tenido por reducción enzimática de [ 1 -2H]-acetaldehído, se partió de una cetona deuterada de configuración co
nocida (S) y se transformó en el correspondiente éster a través de una oxidación de Baeyer-Villiger (que trans
curre con retención de la configuración. Fig. 30.23). La hidrólisis de este éster no afecta al centro estereogénico.
dado que en esta reacción se originó un alcohol con la misma rotación específica que el alcohol obtenido enzi-
máticamente. puede deducirse que el centro estereogénico de éste posee la misma configuración que el de la ce-
tona (S).
El conocimiento de la estructura de los diastereoisómeros que se forman fundamentalmente en ciertas
reacciones estereoselectivas ha permitido, también, establecer ciertas reglas, con las que se puede determinar la
OH
O I H
Reducción
H.C—C
XD enzimática
D
[1-2H]-Acetaldehído (-Hl-2H]-Etanoi (¿KóS?)
O—COCH, OH
F3C—CO,H D-|— H KOH D—H
(Ox. de Baeyer CHj
(Hidrólisis? ch
Villiger)
CH, Éster (retención (-)-[ 1-2H)-Etanol
de configuración) t
(3S) (3-2H]-2-Butanona levógiro como el
obtenido enzimáticamente
Figura 30.23. Correlaciones químicas utilizando la reacción de Baeyer-Villiger (que mantiene la configuración del centro
cstereogénico).
configuración absoluta de los dos enantiómeros que se utilicen como punto de partida de estas reacciones. Una
de estas reglas es la de Cram, que se aplica a la adición de nucleófilos a aldehidos y cetonas, aunque a lo largo
del tiempo ha sufrido diversas modificaciones. Actualmente, se utiliza el modelo de Felkin-Anh, que establece
que la adición de nucleófilos a compuestos carbonílicos que posean un centro estereogénico en a y no originen
un quelato en el estado de transición, se produce en una conformación en la que el sustituyeme de mayor tama
ño de este carbono (G) se sitúa perpendicular al enlace C=O, y el más pequeño (P) se sitúa próximo a R (y no al
carbonilo), ya que las interacciones estéricas «gauche» R/P son menores que R/M. En esta conformación, la tra
yectoria de ataque del nucleófilo (Nu) se produce según se indica en la Figura 30.24 (véase también el Capítulo
26). Habría que añadir que la teoría de los orbitales frontera indica que el sustituyeme que se sitúa perpendicu
lar no es necesariamente el de mayor tamaño, sino el que posee un orbital antienlazante (a*
) de menor energía.
Esta conformación sitúa

al Ph ortogonal, pero es
menos estable que la
anterior por la interacción
estérica Me-CMc3
Relación S,S / RS = 50:1
Figura 30.24. Aplicación del modelo de Felkin-Anh a la adición de hidruro a una cetona con un centro estereogénico en a.
5.4. Resonancia magnética nuclear
La utilización de ciertos reactivos quirales permite derivar enantiómeros a diastereoisómeros y establecer co
rrelaciones ente los desplazamientos químicos observados y las configuraciones absolutas de los centros es
tereogénicos (véase el Apartado 4.1.1). Por ejemplo, utilizando el reactivo de Mosher [(/?) (-t-)-MTPA-CI] con
un alcohol o una amina cuya configuración absoluta quiere determinarse, se obtendrá un diastereoisómero
del éster o amida, que tendrá la configuración (R.S) si el alcohol o la amina tenían la configuración S, o la
configuración (RR) si su configuración era R. Se ha demostrado experimentalmente que, en estos derivados,
el sustituyente de mayor prioridad en la amina o el alcohol (R en la Figura 30.24) resuena a un campo más
alto en los diastereoisómeros (R.R) que en los (R.S). debido a que en su conformación mayoritaria se sitúa
«paralelo» al grupo fenilo del ácido de Mosher, y sufre el efecto de anisotropía diamagnética causado por los
electrones deslocalizados del anillo aromático. Por la misma razón, serán los protones del sustituyente de
prioridad 2 (R' en la Figura 30.25) los que se verán apantallados (a campo más alto) en el diastereoisómero
(R.S). Es evidente que necesitamos disponer de ambos enantiómeros si se trata de un producto desconocido.
También resulta obvio que si utilizáramos el reactivo enantiómero [(5) (-)-MTPA-CI], la situación sería in
versa a la indicada.
HjC-O Alcohol o amina (5)

Éster o amida (R.S)
/
F,C O
(+)-(/? I-MTPA-CI
Alcohol o amina (R) Éster o amida (RR)
Desplazado a campo bajo
Desplazado a
campo alto
(apantallado
por el fenilo)
Éster o amida (R.R)
Figura 30.25. Determinación de la configuración absoluta en RMN empleando reactivos de Mosher (R es prioritario
respecto a R').
La utilización de los derivados del ácido O-metil- y O-acetilmandélico y de Boc-fcnilglicina, como agen
tes de derivación quiral, puede dar mejores resultados que la utilización de MTPA en la determinación de la
configuración absoluta de aminas primarias, y es más barata.
5.5. Dicroísmo circular y dispersión óptica rotatoria
En el Apartado 2.3, se ha observado que las moléculas enantiómeras originan espectros DOR de signo opuesto
(efecto Cotton positivo o negativo) y que. cuando poseen un grupo cromóforo, se obtienen curvas DC con efec
to Cotton positivo o negativo, según el enantiómero. No existe ninguna regla que prediga el signo del efecto
Cotton (como tampoco puede predecirse el signo de la rotación específica o cl punto de fusión), pero si el grupo
cromóforo se encuentra próximo a un carbono estereogénico, éste ejerce una influencia sobre el comportamien
to del cromóforo a la luz polarizada, de tal forma que, si se estudian varios compuestos análogos de configura
ción R o S conocida, puede encontrarse una correspondencia entre el signo del efecto Cotton y la configuración
absoluta. Este método se ha aplicado en la determinación de la configuración de cetonas cíclicas quirales y de
varios esteroides.
Si el elemento que origina la quiralidad es al mismo tiempo el cromóforo. puede asignarse directamente la
configuración tras observar el signo del efecto Cotton.
BIBLIOGRAFÍA
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SCHIRMER. R. E.: Modern Methods of Pharmaceutical Analysis. CRC Press. 1990.
Indice
ABC (Abacabir). 241 desox icol ico. 760 parabánico. 856

Abccamilo. 429 difcnésico, 626 pipemídico, 106,240
Absorbancia. 869 dihidrofólico, 226 piromídico. 240
Absorlividad molar. 869 dihidroorótico, 222 quiscuálico, 437
Acadesina. 485 dihidroptcroico. 225 salicílico. 315, 388.632. 840
ACBD, 437 domoico. 438 siálico, 246
Acebutolol. 382 enalapril ico. 290 sulfanílico, 140
Acetazolamida, 2, 34. 308,662 etacrínico, 34. 348.632 tartárico, 904
Acetilcolina, 165. 277.405 fenofíbrico, 531 tetrahidrofólico, 229, 232
Acctilcolincstcrasa, 275 llufenámico. 634 tiobarbitúrico, 836
Acctiltiocolina. 414 fólico. 225 trópico, 842
Acctohexamida. 343 folínico. 227 úrico, 210, 856
Acctorfano, 442 fumárico, 880 uridílico, 221
17cc-Acetoxiprogcsierona. 757 glutámico. 435 domoico. 438
Aciclovir, 237 iboténico. 438 Ácidos, arilalcanoicos. 624
Ácido, l-aminoetilfosfónico, 255 inosínico, 232 barbitúricos. 849
5-aminosalicílico. 196,596 kaínico. 438 hidroxámicos, 841
5-etinilorótico, 222 L-aspártko, 221.440.698 mercaptúricos. 171
6-aminopenicilánico. 726, 730, 734 lísérgico, 378 nucleicos, 533
7-aminocefalosporánico, 726,729, 734 málico, 904 Acilación de alcoholes. 830
acctilsalicílico. 30. 147,633.881. 840 mandélico. 842,904 Acilcoenzima A, 171
acromélico. 438 mcclofenámico, 634 ACPD. 435.436
adenílico. 22 mefcnámico, 316, 637 Acrivastina, 472
araquidónico. 313,513 mcvalónico, 304 Actinomicina D. 564
ascórbico (vitamina C). 214. 592, 799 micofenólico. 519 Actividad, intrínseca. 46
benzoico. 841 nalidíxico, 106, 240,681 óptica. 899
canfosulfónico. 904 nicotínico, 184 Adenil ciclasa. 55, 281
cianúrico. 845 nipecótico, 357 Adcnina, 22
cítrico. 838 olivánico, 271 Adenosina. 22.220.484
clavulánico. 259 orático. 222 Adenosina desaminasa. 220
clofíbrico. 530 orotidílico. 222 Adifenina. 416
cólico. 760 oxolínico, 106. 240 ADN, 535
de Mosher. 911,919 pantotcnico. 214 Adozelesina. xxx
922 ÍNDICE ANALÍTICO
Adrenalina. 10. 31. 177. 191. 374. 618. Amrinona, 283 Ascomicina, 516.517
619.873 Amsacrina. 563 Asimadolina. 452
Adrenérgicos . 368, 369, 373 Análisis, conformacional. 123 Asimctrización. 794
Adriamicina Véase Doxorrubicina, cromatográfico. 806. 847,905 Asparagina. 696
Afinidad. 45 cuantitativo de enantiómeros. 901 Aspartamo. 717
Aflatoxina B,. 544 farmacéutico, 803, 818 Aspartato aminotransferasa. 298
Agentes, antisentido. 572 Anaranjado de metilo. 828 Asparla!» transcarbamoilasa, 221
quelantes, 583 Anastrozol. 301 Asperlicina. 78.455
quirales de derivación, 908 Andrógcnos, 509, 753 Aspirina 30.67. 315. Véase Ácido.
quirales de solvatación. 908 Androstano, 17 acctilsalicílico.
Agmatina. 376 Androstanolona, 755 Astcmizol. 472
Agonista. 44 Androstenodiona. 749.756 Atenolol. 382
Agonistas y antagonistas H». 483 Anestésicos locales, 327 Atorvastina. 304
Ala-P, 255 Anfctaminas. 30.355. 372.402.617 ATP.49I
Alafosfina, 255 Anfotericina B. 265 ATPasa Na'/K'. 350
D-Alanina. 255 Angiotensina. 288.515. 717 Atracurio. 204
L-Alanma. 696 Angiotensina II (receptores). 453 Atriopeptina III, 720
Alcohol deshidrogenasa, 162 Anhidrasa carbónica, 306 Atropina, 15, 28.415
Aldehidos, reacciones analíticas, 836 Anhidrotctracidina. 738 Auxiliar quiral, 778, 790. 791
Aldosterona, 499,514 Aniracctam, 437 Auxocromos. 816, 867
Alfadolona. 349,432 Ansamicinas, 741 Avcrmectinas. 346
Alfaxalona. 349,432 Antagonista, competitivo y no Avidina. 195
Alfentanilo, 450 competitivo. 41 Azalactona. 703
Alfuzosina, 377 H,,469 Azatadina. 471
Almitrina, 668 Hj, 473 Azatioprina. 234.515
Almotriptán, 397 Antiarrítmicos. 329 Azeiastina. 471
Alopurinol. 15. 186.210 Antibióticos, aminoglucósidos. 740 Azidodantroleno. 341
Aloxantina, 210 ^-lactámicos, 257.723 Azinomicina B. 545
Alpidem, 430 Anticolinérgicos. 205 Azintamida, 663
Alprazolam. 426 Antidcprcsivos tricíclicos. 640 Aziridinas. 544
Alprostadilo, 318 Antidiabélicos orales. 226. 343 Azlocilina. 734
Alquilación biorrcductora. 197 Antifúngicos, 248 AZT (zidovudina). 200. 236. 241
Alzheimer. 275 Antihistamínicos. 616 Aztreonam. 261. 271
AMAA, 436 Antiinflamatorios, 209 Azumoleno, 341
Amantadina. 245 Antioxidantes. 584
Ambroxol, 151 fenólicos de origen natural. 593 Bacampicilina, 191, 256. 266
Amedalina, 671 Antipalúdicos. 608 Bacitracina, 256
Ameltolida. 333 Antiparkinsonianos. 384 Baclofeno. 358,423
Amctantrona. 563 Antipirina. 657 BAL. 362
Amidas, reacciones analíticas. 842 Antiprogestinas, 508 Barbital, 434
Amidinomicina, 11 Antipsicóticos, 686 Barbitúricos, 433
Amikacina, 740 Antivirales, 233, Bemidona, 449
Amilorida. 347 Antraciclinas, 557.600 Bencilpenicilina, 146, 734
Aminacrina. 563 Antramicina. 548 benzatina. 192. 265
Aminas (análisis funcional), 819 AP4.435,438 procaína. 265
Aminoácidos, excitadores, 435 Apadolina, 453 Benorilato. 67
receptores de, 421 Apomorfina. 384. 858 Benoxaprofeno. 678
Aminoantipirina, 155 Aprobarbital. 664 Benperidol. 389
Aminodantrolcno. 341 Ara-A (vidarabina), 237 Benserazida, 384
Aminofcnazona, 28. 76.888 Ara-C (citarabina), 237 Benziamida. 674
Aminoglutelimida. 301 Arecolina. 411.413 Bcnzmidazol. 606
Aminopirina. 76. 155 Arecolona (motil ioduro), 414 Benzocaína, 185,328.633
Aminopterina, 227 Argatrobán (argipidina). 288 Benzodiazepinas. 426
Amiodarona. 330 L-Arginina. 161.696, 849 Benzomorfano. 21
Amitriptilina, 356. 392.641.690. 828 Ariletanolaminas, 403 Benzoquinona. 829
Amobarbital. 434 Arimidex, 302 Benzoxicarbonilación. 706
Amodiaquina. 365 Aristeromicina. 795 Bcstatina, 442
Amoxicilina. 19,264, 733 Aromatasa, 300 Betametasona, 513. 766
AMP cíclico. 281 Artcflcno. 609 Betanecol. 412
AMPA. 435.440 fJ-Artemeter, 609 Betanidina. 355
Ampicilina, 177. 191.263. 264. 735 Artemisina. 365.609 Bezafíbrato. 530
ÍNDICE ANALÍTICO 923
Bicalutamida, 510 Carbocuona. 542 Cipamfilina. 282

Biciclomicina. 272 Carbodina. 238 Ciprofloxacino. 240
B¡manos. 833 Carboplatino, 545 Ciproheptadina, 392.471.641
B1NAL-H, 796.797 Carbromal, 848 Ciprotcrona, 506, 510
BINAP. 785 Cardanolida. 17 Cisaprida. 391
Binding. 42 Carebastina. 472 Cisplatino. 545.546
Bioisosterismo. 73.76. 108 Carfentanilo. 450 Cisteína. 696
Biotina. 195 Carindacilina, 266 Citalopram. 395
Bioxalomicinas. 562 Cariporida. 348 Citarabina. Véase Ara-C.
Bis-amonio cuaternario, sales de. 69 Carmustina. 539 Citidina. 221
Bisamidinobencimidazoles. 567 Camidazol. 606 Citidina desaminasa. 221
Bisantrcno, 564 Carteolol. 382 Citocromos P-450. 117. 133. 137, 151.
Biuret. 845 Carzinofilina, 544 300
Bleomicinas, 603 Cassaína. 351 Cilosina. 22
BOC. 707 Catálisis, covalente o nucleófila, 217 Claritromicina, 572
Bolasterona, 509, 755 electrostática. 217 Cleboprida. 12. 391
BOP, 706 Catalizadores de Corcy-Bakshi-Shibata Clemastina, 628
Borano «Alpine». 793 (CBS), 795 Clemizol. 265.470,675
Braton-Marshall. reactivo de. 842 Catccol O-metil transfe rasa (CO.MT). 312 Clidinio. bromuro de. 417
Bremazocina, 449 Catecoiaminas. 374 Clindamicina. 187
Bretazcnil. 429 Cefalexina. 269. 734 Clobazam. 428
Bretilio tosilato. 330, 355 Cefaloridina, 268 Clomesona. 542
Brimakalim. 404 Cefalosporinas, 724 Clomifeno. 502
Brimonidina. 376 C. 32.267,727 Clonazepam. 427
Bromación de fenoles, 831 Ccfalotina. 267 Clonidina, 375.659
Bromazepam, 427 Cefamandol. 268. 735 Clonitazeno. 676
Bromfeniramina. 471 Cefamicinas. 737 Clopidogrel. 491
Bromhexina, 152 C.270. 736 Clopirac. 649
Bromisoval, 847 Ccfamo. 19 Clorambucilo. 535.635. 838
Bromocriptina. 385.724 Ccfotaxima, 270 Cloranfenicol. 6. 11. 187, 572, 782
Bromoprida, 634 Cefoxitina, 261,737 Clordiazepóxido. 166, 870
Brucina. 904 Ceftazidina. 261 Clorfenamina, 471.652
Bufanolida, 17 Cefuroxima, 20.270 Clorfenoxamina. 628
Bumetanida, 348 Celikalim. 344 Clorgilina, 310
Bupivacaína, 329.637 Celiprolol, 382 Clorhcxadol. 10
Buprenorfina, 446 Ccrivastatina. 304 Clorhcxolona, 674
Burinamida, 477 3-Celocsteroides a.JJ-insaturados. 871 Clorimipramina. 356,392
Buspirona, 397,667 Cetonas. reacciones analíticas. 838 Clormadinona, 506. 759
Busulfano, 542 Cetrizina. 472 2-Cloroetilnitrosoureas. 539
Butirofcnonas, 389 Cianinas, 817 Cloroguanida, 177.636
Butorfanol. 446 Cianopramina, 356. 392 Cloropirilcno. 470
BVDU. 236 Ciclaradina, 238 Cloroquina. 366, 566
Ciclindol. 670 Clorotetraciclina, 570. 738
Cafeidina. 858 Ciclizina. 628 Clorotiazida, 16. 34
Cafeína. 28. 116. 687. 858. 880 Ciclobarbital. 434 Clorotrianiseno, 502
Calcincurina, 417 Ciclodextrina, 915 Clorpromazina, 69, 386,688
Calcitriol, 521 Ciclofosfamida, 550 Clorpropramida, 343
Caliquemicinas, 604 Cicloguanilo. 177, 192 Ciorprotixeno, 386
Camptotecina. 65. 565 Ciclooxigcnasa (COX), 314 Cloruro de dansilo. 825
Canales, de calcio. 236 Ciclooxigenasas, inhibidores de. 597 Clotiapina, 388
iónicos, 321 Ciclopentobarbital, 434 Clotiazepam. 427
Candcsartán. 556 Cicloserina, 255.656 Cloxacilina. 264
Candesartanciclohexilo. 455 Ciclosporina A, 515 Clozapina. 388
Captadores de radicales. 588 Ciclotiazida. 348 Cocaína. 29. 328. 357.400
Captopril, 70,83. 290.649 Cidofovir. 237 Codeína. 154.447, 724.892
Carbacol. 411.412 Cimetidina, 473, 658 Coeficiente, de distribución. 89
Carbamazepina, 331.392 Cinarizina. 337.628 de extinción molar, 864
Carbazcrán. 683 Cinconidina. 904 de reparto, 86
Carbenicilina. 265 Cinconina. 904 Coenzimas. 211
Carbidopa. 299. 385 Cincpiritiona. 655 A, 214
Carbimazol. 359 Cinitaprida. 391 Cofactores de enzimas. 213
Coformicina, 220 Desferroxiamina B. 362 Dimeval, 363

Colano, 17 7-Deshidrocolesterol. 521 Dinámica molecular. 125
Colchicina, 568 Desipramina, 356, 392 Dinitrofcnilhidrazina. 835
Colecalciferol (vitamina DO. 18. 215. 4a-Desmetilasa, 248 Dinomicina A. 604
518,768 Desoxiadenosina. 22 Dinoprost (PGF;J, 318.
Colecistocinina, 455 Desoxicorticosterona, 515, 766 Dinoprostona (PGEj), 187. 318
Colestano. 17 I5-Desoxiespcrgualina. 518 Dinorfina, 442
Colestcrol, 520 Devazepida. 78. 455 Diosgenina, 724, 747, 759
Colina acetillransfcrasa. 407 Dexametasona, 513.765 DIPAMP, 785
Compactina. 305 Dexfenfluramina. 402 Dipiridamol. 359, 686
Complejos con fenoles, 832 Dexrazosano. 583, 601 Dipirona, 316
COMT. Véase Catecol O-mct i I transferasa. Dextromoramida. 451.626 Dipivefrina, 177
Configuración, absoluta, 897, 917 Dextropropoxifeno, 451 Diritromicina. 572
absoluta y relativa, 772 Diacilglicerol, 56 Disopiramida. 330,621
Conformación, 61. 119 Diamorfina. 447 Dispersión óptica rotatoria. 901.920
Conglomerados, 903 Dianisidina, 835 Distamicina A, 567
Coordenadas moleculares. 118 Diastereoisómeros, 60, 772 Distómero, 59
Corticosterona, 499 Diaslereotópicos (grupos y caras). 775 Ditizona. 873
Cortisol, 499.512 Diazepam, 16,78. 185. 691 Diuréticos, 346
Cortisona. 198.513. 761 Diazicuona. 542 Dizolcipina, 327,437
CPP. 437 Diazotación-diazocopulación. 830 Docetaxel, 568.742
Craig, diagrama de. 110 Diazóxido. 344 Donepezilo, 280
Cristalización, separación de racémicos Dicetopiperazinas (pipe razio adion as). Donctidina, 482
por. 903 700 DOPA (levodopa), 35, 189. 299. 384
Cromatografía quiral, 905 Diciclohexilcarbodiimida (DCC). 704 DOPA-descarboxilasa. 384
Cromóforos, grupos, 816, 867 Diclofenamida, 637 Dopamina. 35.71.84. 189. 199. 299.
Cromoglicato, 342 Diclorvós, 280 383.384.620
Cromokalim, 344 Dicroísmo circular, 902 Dopamina (3-hidroxilasa. 370
Dicumarol, 215 Dopaminérgicos. receptores. 383
Dacarbazina, 553 Didanosina. Véase DDL Dorzolamida, 36, 308
Danazol. 507, 509 Dicpoxibutano. 544 Dosis, eficaz 50, 43
Dansilhidrazina, 835 Dictazina, 69 letal 50.43
Dantrolcno, 341.648 Dictilcstilbestrol, 60.72,630 Doxazosina, 378
Dapsona. 226,640 Difcnhidramina. 417,470. 628 Doxepina, 356,690
Daunomicina. Véase Daunorrubicina. Difenidol, 629 Doxiciclina, 570,739
Daunorrubicina (daunomicina). 558. 564. Difenilpiralina. 628 Doxorrubicina (adriamicina). 559, 564.
600 Difenoxilato. 449 600
DDC (zalcitabina), 241 Difepanol. 629 Dramamina. 470
DDI (didanosina). 241 Diflós, 278 «Droga del amor». 373
DDT. 165 Diflunisal, 316 Droloxifcno. 502
Debrisoquina, 355 Difluorometil DOPA, 299 Dropcridol, 390
Decametonio, 29,204,419 Digitoxina. 350 D4T (estavudina). 241
Deferiprona, 362 Digoxina, 30, 350 DTPA. 363
Deflazacort, 513 Dihidroestreptomicina. 740
Delavirdina, 242 Dihidrofolato rcductasa. 120,227 Ebastina, 472
Demeclociclina, 570, 738 Dihidromuscimol. 424 ECA (enzima convcrsora de
Demegestona. 506 1.4-Dihidropiridinas, 338 angiotensina). 288
Dcmoxepam. 870 Dihidropteroato sinlasa, 224 Ecgonina, 846
Dcnbufilina. 282 Dihidroquinidina (ligandos quirales), 784 Econazol. 249
Deprendo. 310, 385 Dihidroquinina ( ligandos quirales). 784 Ecotiopaio. 278
Deriglidol, 344 Dihidrolestostcrona, 509 Ecteinascidina 743,563
Derivación, reacciones de. 809 Dihidroxilación asimétrica de alquenos. Edman, degradación secuencial de, 826
Dermorfina, 715 784 EDTA, 362, 583
Desacetilbacatina III. 742 Diisopinocanfcnilborano, 787 Efaroxano, 344
Desazaneplamocina A. 238 Dilazep, 359 Efavircnz, 242
Descarboxilasa de aminoácidos Diltiazem, 337,692, 786 Efecto Cotton. 902
aromáticos, 298 (+)-Diltiazem (síntesis), 786 Efedrina. 30. 356. 372. 872.904
Descriptores, electrónicos. 87.97 Dilución isotópica. 916 Ehrlich, reactivo de. 852
esféricos, 87, 102 Dimaprit. 16 Elastasas. 284
moleculares. 86 Dimercaprol, 363 Electroforesis capilar. 915
Dcsferritiocina. 362 Dimctisterona. 507 Electroquímica. 810
Elipticidad, 902 Estigmastcrol. 748 Fenindiona, 215

Elipticina. 565 Estradiol, 499. 501.749,753 Fenitoína, 185, 200, 332,660. 848. 871
Emetina, 28 Estramustina, 194 Fenmctrazina. 372.667
Enadolina, 452 Estrano, 17 Fenobarbital. 12,665
Enalapril, 290, 718 Estreptomicina. 569. 740 Fenofibrato. 530
Enantiómeros, 60.272 Estreptonigrina. 65 Fenoldopam. 384
Enantiotópicos (grupos y caras). 775 Estricnina. 28.435 Fenoles antioxidantes. 587
Encefalinas. 441 -444 Estrógcnos. 499 Fenolftaleína. 818
Encefalinasa, 291 -442 Estrena. 500, 749. 750. 754 Fenoprofeno. 625
Endopcróxidos antipalúdicos. 608 Eladolaco. 500 Fenoterol. 380
Endorfinas, 441 Etambutol. 361 Fenotiazinas. y dopamina. 84
Endotelinas. 458 Éteres corona. 912 Fcnoxiacetamidina. 271
Enfluorano, 349 Etidio, 566 Fcnoxibcnzamina, 377.631.699
Enodiinos antitumorales. 603 Etidocaína. 329 Fcnozan-50F. 609
Enprofílina, 282 Etiladrianol. 375 Fenprocumona. 833
Entacapona, 313, 385 Etileniminas antitumorales, 542 Fenquinona. 685
Enzimas, dianas farmacológicas. 211 Etinilestradiol, 750 Fentanilo, 124.450
antioxidantcs. 584 Etinilcstradiol 3-ciclopentilélcr Fentolamina, 377
cn síntesis y análisis, 794. 811 (quincstrol), 500 Feromonas, 790
Epitelraciclina, 571 Etinilcstradiol 3-mctilétcr. Véase Fexofenadina, 472
Epoxidación, de Jacobsen. 783 Mestranol. F1AC, 936
de Sharpless. 783 Etinodiol, 507 Fibonacci, números de. Ill
Epóxidos antitumorales. 542 Etionamida, 652 Fibrinógeno. antagonistas de. 460
Eprosartán. 454 Etisterona, 507, 755 Finastcrida, 306
Ergocalciferol (vitamina D_>), 519 Etmozina, 689 Fisostigmina, 277
Ergocomina, 379 Etoheptazina. 68 Flavina deshidrogenasas. 156
Ergocriptina, 724 Etomidato, 173 Flavina monooxigenasas. 158
Ergocristina. 29, 379 Etopósido. 566 Fluanisona, 389
Ergolina. 378 Etorfinas. 66,445 Flubendazol, 676
Ergometrina, 29 Etosuximida. 332.650, 843 Flucindol, 671
Ergostano. 17 Etotoína. 659 Fluconazol, 249
Ergosterol, 520 Etozolina. 661 Flucoxacilina, 264
Ergotamina. 379 Eu(thch (canforato de europio III), 913 Fludrocortisona, 513, 762
Eritromicina A, 272 Eucaína. 29 Flufenazina. 192, 386
Escopina, 842 Eutómero, 59 Flumazenil. 428.430,431
Escopolamina, 415 Exceso, diastereoisomérico, 774 Flunarizina, 337
Escualeno epoxidasa, 248 enantiomérico. 774 Fluocortina. 206
Espectrofluorimetría. 873 «Éxtasis», 373 Fluocortolona. 206
Espectrofosforimetría, 873 Fluorescamina. 824
Espectrometría de masas. 881 Faclofeno. 423 Fluorcsceína. 818
Espectroscopia, de emisión y absorción Famotidina. 482 Fluorescencia. 817
atómica, 873 Farmacocinctica. 143 Fluorometil-DOPA. 299
derivada. 874 Farmacóforo. 64 Fluorotraceno, 643
infrarroja. 875 Fármacos, blandos. 204 Fluorouracilo, 838
Espcramicinas, 605 duros, 203 Fluoxetina. 357, 395,402
Espipcrona. 84 Fases estacionarias de Pirklc. 914 Fluoximesterona, 756
Espiradolina. 452 Fehling, reacción de. 836 Flupentixol, 386
Espirileno. 14 Felbamato. 333 Flurazepam. 427
Espironolactona, 516, 767 Felkin-Anh. modelo de. 788.918 Flurbiprofeno. 316. 625
Espiroperidol. 389 Fenacetina. 154, 880 P-Fluoromelilcn-w-tirosina, 311
Espirostano, 17 Fenampromida, 452 y-Fluoromctil GABA. 297
Espirotiobarbital, 14 Fenazona, 853 a-Fluoromctilhistidina, 464
Estanozolol, 509. 756 Fenbenzamina, 470.617 5-Fluorouracilo. 35. 77. 230, 233
Estatina, 80. 293 Fenciclidina, 13,327,436 Flutamida, 510
Estavudina. Véase D4T. Fenetilaminas, 618.620 Fluvoxamina, 357
Estercoespecíficas. reacciones. 780 Fenfluramina, 356. 372 Fluximesterona. 509
Estcrcogénicos. centros y ejes. 771 Fcnilalanina, 696 Fmoc. 708
Estereoquímica y actividad farmacoló Fenilbutazona. 28. 205. 316.658. 854 Folcodina, 447
gica, 59 Fcnilcfrina, 375.831, 868 Formazano. 872
Esferoides, 431,497,850 5-Fcniihidanioína, 166 Formctcrol. 380
Estigmastano. 17 Feniltoloxamina, 632 Formilación (reacciones). 707
Fosfatidiiinositol, 56 Heroína. 447 Insulina. 54.716

Fosfodiesterasas, 55. 281 Heterociclos, análisis. 857 Interacciones fármaco-receptor, 58
Fosfolipasa A2.513 Heterocodeína. 447 ligando-receptor, simulación, 139
Fosfolípidos, 578 Hexaheliceno. 912 Intercalantes. 564
Fosfonomicina, 254 Hexahidrosiladifenol. 408 Intolpicina, 565
Fosforilasas, 55 Hexametilmelamina. 552 lonóforos. 360
Fostcdil. 337 Hexestrol, 501,630 Ionotrópicos, receptores. 421
Fradazol. 302 Hexetidina. 666 Ipratropio bromuro. 418
Fragmento, valores, 93 Hexilresorcinol, 2 Iproniazida. 310
Ftalampicilina. 191.266 Hexobarbital. 434.665 Ipsapirona. 397
Ftalilsulfatiazol, 193 Hidantoínas. 76. 332.699, 849 Irbesartán. 454
Ftaloilación. 706 Hidralazina, 683 Irinotecan. 565
Florafur. 233.663 Hidrazidas. 843 Isoarccolona. metilioduro, 414
Función de onda molecular, 127 Hidroboración asimétrica de alquenos. Isocarboxazida. 655
Furazano, 821 786 Isoconazol. 249
Furosemida, 348, 838 Hidroclorotiazida. 34. 308, 348 Isocnzimas. 213
Furostano, 17 Hidrocloroliazina. 685 Isogramina, 32
Hidrocortisona. 513. 762 Isoguvacina. 423.424
GABA, receptores. 358,423 Hidroflumetiazida. 348 Isometadona. 451
GABA transaminasa (GABA-T). 296 Hidrogenación asimétrica de alquenos. Isoniazida. 73. 361.844
Gabaculina, 298 786 Isopinocanfenilborano. 787
Galantamina, 280 Hidromorfona, 447 Isoprenalina (isoproterenol). 31. 60. 374.
Ganciclovir. 237 Hidrosolubilidad (aumento). 183 380
Gcmeprost. 318 Hidroxicina, 472 Isosorbitol, dinitrato, 492
Gentamicinas. 569 Hidroximetilglutaril-coenzima A rcducta- mononitrato, 492
Gestrinona. 507 sa, 303 Isósteros del enlace peptídico. 79
Glibenclamida. 343 Hidroxiurea. 241 Isotiocianatos, en análisis. 825
Glicazida, 343 Hipoxantina, 76, 210 Isótopos, en análisis. 811
Glicina. 434 Histamina, 133,464 Itraconazol, 249
Glipizida. 343 Histapirrodina, 617 Ivermectina, 346
Globomicina, 272 Homatropina, 28.415
Glucagón.55 Hormonas csteroideas , 497, 511 Jaqueca (migraña), 398
Glucocorticoides. 512 Huperzina A. 280
D-Glucosa, en síntesis. 799 Kairolina-/\, 28
Glucurónidos. 167 1AA (ácido 4-(5-imidazolil)acético). 423 Ketalorfano, 292,442
Glutamina. 696 Ibufcnaco. 625 Ketamina. 349.436
Glutatión peroxidasa. 586 Ibuprofcno. 174. 316,625 Ketanscrina, 390
GMP cíclico, 281 Idazoxano, 4. 376 Ketazolam. 428
Gramicidinas, 364,695 Idoxifcno. 502 Kctoconazol. 249
A. 364 Idoxudirina, 235, 788 Kctotifcno. 392,471
Granisetrón. 400 lloprost, 318 Kier, índice de conectividad de. 104
Grepafloxacino, 240 Imazolilo. 249
Grupo, funcional (en análisis). 815 Imidas, análisis funcional. 842 Labctalo!. 83.620
activantes (en síntesis de péptidos). Imidazolina. receptores. 376 Lachesina, 629
704 Imipramina, 689 Lactamas. análisis funcional. 844
protectores (en síntesis de péptidos). Impromidina. 468 P-Lactamas. Véase Antibióticos P-lactá-
704,709 Indacrinona, 348 micos.
solubiiizantes, 185 índice, eudísmico, 59 Lamivudina. Véase 3-TC.
Guanadrcl. 355 terapéutico. 175 Lamotrigina, 333
Guanetidina. 355 Indinavir, 244 Lanitidina, 482
Guanidina, 849 Indoles, análisis. 669, 852 Lanosterol. 248
Guanilato ciclasa. 161 Indometacina, 13,316 Lansoprazol, 354
Guanilhistamina. 474,475 Indoprofeno. 673 Latanaprost, 318
Guanina, 21 Inhibición, enzimática. 209, 218 Lazaroides, 595
Guvacina, 358 suicida. 223 Letrozol, 302
Inhibidores, competitivos. 218 L-Leucina. 696
Haloperidol. 390.622,654 no competitivos. 219 Leu-encefalina. 201,203.444. 698
Halotano, 2. 349 Inmunofilinas (PPlasas). 517 Leucotrienos, 317, 471.513
Hansch-Fujita. método de. 85 Inmunosuprcsorcs. 515 Levalorfano. 448
Hccogcnina, 759 Inosina, 220 Lcvofenacilmorfano, 448
Hemaglutinina, 244 Inositol, trifosfato. 56 Lcvofloxacino, 240
Lcvomctadona, 621 Mestranol. 500. 751. 754. 894 Morfina. 21. 27. 154. 543. 445. 724. 833.
Lcvorfanol. 66 Mesuximida. 332 859. 860. 891
Levormeloxifeno. 503 Met-cncefalina. 441 Morfinanos. 21.445.448
Lidocaína. 32. 328.637 Metabolismo. 143 Mostaza(s). de fosforamida, 535
Liebermann-Buchard, reacción de. 851 Mctabotrópico, receptor. 435 nitrogenadas, 194, 195,535
Ligandos. receptores. 41 Mctaciclina. 266.570. 739 de uracilo. 194, 535
Lipasas, 280 Mctadona. 9.66,445.451 Moxonidina, 376
Lipofilia. 86 Mctamizol. 316.657 Murexida, reacción. 857
i.-Lisina, 696 Metandrostenolona, 509,755 Muscarina, 407.411
Lisinopril. 290 Metanfetamina. 372 Muscarona. 414
Lisurida. 385 Metapirileno, 470 Muscimol. 424
Lomcfloxacino. 240 Metaraminol. 375.619
Lomust i na, 200. 540 Metazolamida. 308 Nadolol. 382
Lopcramida. 449 Metdilazina. 71 NADPHy NADP’, 150.213
Loratadina. 471 Metformina. 530 Nafazolina, 12,376
Lorazepam. 427 Metiamida. 478 Nafoxidina. 503
Lormetazepam. 427 a-Metil-DOPA, 35 Naftifina, 249
Losartán. 38.454 I7a-Metil- 19-nortestosterona. 509 Nalbufina, 447
Loxapina. 388 6a-Mctilprcdnisolona. 513. 763 Nalorfina, 446
LSD. 379 2-Mctiltestostcrona. 509 Naloxona. 444
Lubeluzol, 334 17a-Mctiltestostcrona, 509, 755 Naltrexona. 203.444
Lucantona. 566 Mclionina. 696 Nandroiona, 509, 750
Lumisterol. 520 Metisazona, 361 Naproxeno. 316.624.889
Lupitidina. 482 Mctocarbamol. 632 Nelfinavir. 243
Metoclopramida. 391.634 Neocarcinostatina (zinostatina). 604
Metohcxilal. 434 Neostigmina. 278
Macromoléculas. transporte de fármacos. Metoprolol. 382 Neplanocina A. 238
194 Metoirexato, 120. 227 Netropsina. 566
Malatión, 279 Metrifonato. 280 Neuraminidasa. 244
MAO. Véase Monoamino oxidasa. Metronidazol, 606 Neurolépticos. 385
Maprotilina. 393. 643 Mevinolina, 305 Neuroprotectores. 333
Marquis, reacción de. 860 Mezlocilina. 734 Nevirapina. 241
Mazindol. 402 Mianserina, 71. 393 Nicardipino. 338
MDR (resistencia a múltiples fármacos). Michaelis-Menten, cinética de. 217 Nicergolina. 379
359 Micofenolato de mofetilo. 517 Nicorandil. 344
Mcbhidrolina. 470 Microtúbulos, 567 Nicotina. 160.407.414
Mecánica molecular. 125 Midaglizol. 344 Nicotínico. receptor. 52,407
Mccilinam. 261,271,736 Midaxifilina, 490 Nifcdipino, 83. 337.652
Mcclociclina. 739 Midazolam. 426 Nikkomicina. 273
Mcclorctamina. 535 Mifepristona, 508 Nilutamida, 510
Mcclozina, 470 Milrinona, 283 Nimodipino. 338. 652
Mcdrox ¡progesterona, 506. 758 Mineralocorticoides. 514 Ninhidrina, 823
Mcfitoína. 659 Minaxolona, 532 Niridazol. 13
Mcgestrol, 506, 758 Minociclina. 5. 20. 570. 738 Nisoldipino. 338
Meisenheimer, sales. 839 Minoxidil. 83. 344. 666 Nitracrina. 564
Melatonina. 401 Misonidazol. 556.606 Nitracuazona, 283
Melfalán. 194.535 Mitomicina C. 559 Nitrato, de glicerilo. 492
Membranas, estabilización. 594 Mitonafida, 565 de pentaeritrilo. 492
Menadiona. 185 Mitoxantrona, 65. 563 Nitrendipino, 338
Meperidina. (petidina). 66. 68. 77. 312. Mitozolamida, 541 Nitritos, metabolismo. 166
445 Mitsunobu, reacción de. 798 Nitro derivados, metabolismo. 164
Mepiramina (pirilamina). 470.617 Mizoribina, 517 Nitrofurantoína. 606. 648
Mepivacaína. 329 Moclobemida. 311 Nitrohctcrociclos, antiparasitarios, 605
Meptazinol. 449 Modelos moleculares. 115 radiosensibilizantes, 605
Mequitazina. 472 Molsidomina. 492 Nitroprusiato sódico, 492
Merbafcno. 34 Monoamino oxidasa (MAO) A y B, 308, Nitrosación de fenoles. 832
6-Mcrcaptopurina. 76. 234 309, 385 Nitrosaminas, 159
Merocianinas. 817 Monocrotalina. 553 Nitrosoureas. 539
Merrifield, síntesis de. 714 Montclukast. 318 Nizatidina. 481
McrSáliló, 34 Morfano, 21 Nomegestrol, 505
Mcsna. 593 Morficcptina. 442 Nomifensina, 356
Noradrenalina. 374 Paal Knorr, reacción, 823 Piridoxol, 651

Noresteroides. 508, 751 Paclitaxel. 568 Pirilamina. Véase Mcpiramina.
Noretandrolona, 509, 754 Paclitaxel (taxol). 742 Pirimetamina. 228, 663
Noretindrona (noretisterona). 507, 750, PAF (factor agregante plaquetario), 471 Pirindol, 629
752 PALA. 221 Piritinol, 651
Norctinodrel. 752 Pamaquina, 680 Piritrcxcno. 228
Noretisterona. Véase Noretindrona. Panadiplón. 429 Pirobenzano. 677
Norfloxacino, 36, 107, 240,681 Pancuronio. 418 Piroxicam. 316. 688
Norgestrel. 507 Pantoprazol, 353 Pirrolizidinas antitumorales. 554
Norgestrienona, 507 Papaverina. 27. 282. 359.447. 681, 891 Pivampicilina. 191,266, 733
Normatadona, 451 Paracetamol. 67, 170 Pizotifeno. 392
Normetandrolona. 509, 754 Parámetro, Jt de Hansch. 85 Plomestano, 302
Nortriptilina, 356.641 o de Hammett, 97 Podofilotoxina. 566. 568
Noscapina. 891 Paratión, 278 Polarimetría. 899
Novocaína. 108 Pares iónicos, 828 Policnos antioxidantcs. 593
Noxiptilina, 744 Paroxetina. 356, 395 Polimcrasas, de ADN (inhibidores), 233
Nuclcósidos antivirales, 236 PDj. 44 de nucleótidos, 231
Pellagri. reacción de. 859 Polimixina B, 365
Obesidad. 402 Pcmolina. 656 Polioxina, 273
Octopamina, 355 Pcnamo. 19 Potencial, electrostático molecular, 130
Olanzapina. 388 Penciclovir, 237 de interacción molecular. 134
Olsalazina, 196 Penicilamina. 583.593 Practolol. 631
Omeprazol, 353 Penicilinas. 258,734 Prazosina. 378.684
Onapristona. 508 G. Véase Bcncilpenicilina. Prednisolona, 513. 762
Ondansetrón. 400 Pentamidina. 567 Prednisona, 513.762
Opio, 441 Pentatetrazol. 662 Pregnano, 17
Opioides, receptores. 441 Pentazocina, 21.247, 449 Pregnenolona, 747
Opipramol, 392 Pentobarbital. 152. 349. 838 Prenilamina. 337. 621
Optimización geométrica, 122 Pentostatina. 220 Pridinol. 417
Orciprcnalina. 380 Pentoxifilina, 282 Prilocaína, 329
Oripavina. 446 Pentoxiverina, 626 Primaquina, 680
Orlistat. 280 Pepstatina. 293 Primocarcina. 9
Omidazol. 606 Peptidoglicano. 251, 259 Probcnccida, 146. 154, 348.838. 888
Orotidilato descarboxilasa. 222 Pcptidomiméticos. 78 Protocol. 597
Ortopramidas. 84. 390 Péptidos. análisis. 846 Procaína. 5, 10, 29. 73,76. 165. 328.634.
Osaterona, 510 profármacos. 180 872
Oseltamivir, 246 receptores. 421.441 Procainamida, 76, 328
Osteocalcina. 523 síntesis en fase sólida. 712 Procarbazina. 550
Ouabaína. 350 Pergolida, 385 Prociclidina. 417
Oxaburinamida. 478 Perhexilina. 337 Proclorperazina. 386
Oxaciiina, 264 Peroxidación de fosfolípidos. 579 Profármacos, definición, 176
Oxandrolona, 509 Petidina. Véase Mepcridina. Proflavina. 564
Oxarbazol. 670 Pilocarpina. 411 Progabida, 425
Oxatomida. 470 Pimozida, 84, 389 Progestágenos. Véase Progestinas.
Oxazepam, 427, 833 Pinacidil, 344 Progesterona, receptores. 432. 499, 505.
Oxazolam. 428 Pindolol. 382,673 724,749.750
Oxazolidinadionas, 76 Pioglitazona, 530 Progestinas, 505. 746
Oxazolinas quirales de Meyers. 791 P1OL. 426 L-Prolina. 696
Oxcarbazcpina. 331 Piperacilina, 734 Promegestona, 505
Óxido nítrico. 160.491, 6(X) Piperazinadionas. Véase Dicetopipera- Promctazina. 203,470
Oxifenbutazona. 205, 316 zinas. Pronetalol, 381
Oxifenonio bromuro. 416 Piperidolato, 653 Prontosil rubrum, 164, 224
Oxígeno, estructura electrónica, 577 Piperoxano, 377.470,682 Propafenona, 330
Oxilorfano, 448 Pirazinamida. 667 Propantclina. 70,417
Oximetazolina, 376 Pirazol, análisis, 853 Propantelinio, 829
Oximetolona, 755 Pirazolidina-3.5-dionas, 657, 853 Propifenazona. 76
Oxina, 361 Pirenzepina, 408 Propofol. 349
Oxitetraciclina, 570. 739 Piretanida, 348 Propoxicaína, 633
Oxmctidina, 473,480 Piridinas, análisis. 855 Propox i feno. 60.622
Qxolamina, 662 Piridinio, sales de, 837 Propranolol. 330.382
Oxprenolol. 382 Piridoxal (vitamina B6), 214 Proquiralidad. 776
Prosimpal, 377. 381 Riboflavina (vitamina B:). 213 Succinilsulfatiazol, 193

Prostaciclina, 19 Ribonucleótido reductasa. 231. 240 Succinimidas, 332
Prostaglandina sintetasa, 210. 314 Rifamicinas. 602, 741 Sufentanilo, 450
Prostaglandinas. 18.513 B.247 Sulbactama, 259
E2. 187 Rifampicina. 247,741 Sulfacitina, II
El 796 Riluzol. 334 Sulfadiazina, 148, 638.871
Proteasa VIH. 242 Rimantadina. 245 Sulfamerazina, 148
Proteasas de aspártico, 243 Ripazepam. 692 Sulfametoxazol. 198
Proteína cinasa. 55 Risperidona, 390 Sulfametoxipiridazina. 638
Proteínas, predicción de estructura. 137 Ritonavir. 244 Sulfamidas. 147
Protriptilina. 642 Rivastigmina. 280 Sulfamoxol, 656
Prucralopida. 396 Rojo de polimetenilo. 836 Sulfanilamida. 867
Pseudoefedrinas. 372 Rolipram. 283 Sulfasalazina, 196
Pseudorracémicos, 898 Rolitetraciclina, 570. 739 Sulfatiazol. 2.458,638
Pseudotropina. 842 Ronidazol. 557. 606 Sulfato «activo», 168
Psoralenos. 548 Ropinirol. 385 Sulfazamet, 638
Purina. 856 Rosiglitazona. 530 Sulfinpirazona, 148.658
Roxatadina. 482 Sulfisoxazol, 148.458
QSAR. 85. 108. 135 Roxitromicina. 572 Sulfonamidas. síntesis. 638
Quimiosclcctiva. reacción. 779 Rufinamida. 333 Sulfonilureas, 326
Quimostatina. 285 Sulindaco. 316
Quimotripsina. 219 Saclofeno, 423 Sulmazol, 676
Quinacrina. 565 Saframicina, 562 Suipirida. 84. 391
Quinestrol. 500 Sakaguchi, reacción de, 849 Sulprostona, 318
Quinidina, 330.904 Salbutamol. 380 Sultiamo. 308
Quinina. 28.904.912 Salicilamida. 633. 841.883 Sultoprida, 391
Quinonas antitumorales. 600 Salicina. 30 Sumatriptán. 399
Quirafos. 786 Salmeterol. 380 Supcróxido dismutasa (SOD). 585
Quiralidad, 771 SAMP. 789 Sustratos quirales. 796
Sanger, método de. 820 Suxetonio (succinilcolina). 204.419
Racémicos. 898 Sapromidina. 468
Racemorfano. 448 Saquinavir. 243 Tacrina, 280
Radical(es). hidroxilo. 597 Sarin. 278 Tamoxifeno. 502. 503.630
libres. 575 Sarmcntogcnina. 759 Taquisterol. 519
Radioscnsibilizadores. 605 Schóllkopf. método de. 792 Tartrazina. 164
Raloxifeno. 503 Secnidazol, 606 Taxol. Véase Paclitaxel.
Ramachandran, gráficos de, 139.698 Selegilina, 385 Tazobactama. 259
RAMP, 789 Sematilida. 330 3-TC (lamivudina). 241
Ranitidina. 482 Semisíntesis, 724 TCDD. Véase Tctraclorodibenzodioxano.
Rapamicina. 516 Semotiadil. 337 Tebaína, 447
Reacciones ácido-base. 827 Scnecifilina, 553 Temelastina, 473
Reactivos, de acoplamiento. 704 Scnecionina. 553 Tenipósido. 566
quirales, 796 Scrazida. 299 Teofilidina. 857
Reboxctina, 356 L-Serina, 696 Tcofilina. 282.686, 857
Receptores. 41 Serotonina, receptores de. 117, 394 Terazosina. 378.648
Hj. 133 Sertralina, 357, 396 Tcrbinafina. 249
metabotrópicos. 54 Sibonicina, 548 Tcrbutalina, 380
PPAR, 530 Sibutramina, 402 Terfenadina. 472
Regioselectiva (reacción). 779 Sildenafilo. 283 Testolactona, 509
Remifentanilo, 450 Sililación. 807, 819 Testosterona, 499. 509
Renina. 288, 292 SIMPLEX (optimización). 112 Tetracaína. 328
Renzaprida. 396 Sinefrina, 618 Tetraciclinas, 20. 569. 738
Reserpina. 30. 355 Síntesis asimétrica, 777 Tctraclorodibenzodioxano, 154
Resolución, cinética. 795. 9<MS Sinvastatina, 305 Tetramisol. 15
de racémicos. 774, 908 Solvatación, 139 Tetrazepam. 427
Resonancia, de espín electrónico, 877 Sorbinilo, 14 Tctrodotoxina, 334
magnética nuclear. 877.908 L-Sorbosa, 798 THIP. 423
Resorcinol. 831 Soterenol. 380 THPO.413
Rctinoides, 527 Sias-Otto, método de separación, 804 Tiabendazol. 12,675
Retinol (vitamina A), 215.528 STERIMOL, parámetros. 103 Tiaburmamida, 478
Ribavirina (Virazol). 238 Succinilcolina. Véase Suxetonio. Tiacetazona, 361
Tiagabina. 358 Tosilación. 707 Valsarían. 454

Tiamina (vitamina B,). 192. 214. 662. Tramado!. 451 van Urk. reacción de. 852
874 Tranilcipromina. 310.624 Vancomicina. 257
Tiazinamio. 193 Transcriptasa inversa. 242 Vasopresina. 695
Tibolona. 502 Transmitancia. 876 Vecuronio. 419
Ticlopidina. 491 Transpeptidasas de peptidoglicano. 258. Velnacrina. 280
Tiemonio. ioduro. 650 259 Venlafaxina. 395
Ticnamicina. 271 Transporte activo y pasivo. 145. 188 Vcrapamilo. 27. 330. 337, 621
Tictilpcrazina. 386 L-Treonina. 696 Verofilina. 689
Tifluadom. 453 Triamcinolona, 16. 513, 764 Vidarabina. Véase Ara-A.
Tilidina, 451 Triamterene, 348.686 Vigabatrina, 297
Timidilato sintasa. 224, 229 Triazenos. 541 Viloxazina, 395
Timidina fosforilasas, 235 Triazolam. 427 Vinblastina. 568
Timidina y timidilato cina.sas, 235 Trienbolona. 509 Vincristina, 568
Tintina, 22 Trictilenomclamina, 542 Vinilogía. 72
Timolol, 382,661 Triflupromazina, 386 Virazol. Véase Ribavirina.
Tmidazol, 606 Trifluridina. 224.233 Virazol. Véase Ribavirina.
Tioamilal. 434 Trigoneiina, 200 Vitamina(s), A. Véase Retinol.
Tiocromo. 855, 874 Trimelamol. 552 B|. VéaseTiamina.
Tíoguanina, 234 Trimeprazina, 70 Bj. Véase Riboflavina.
Tiohidantoína. 699 Trimctadiona. 332 *. Véase Piridoxal.
B
Tioles. análisis funcional. 833 Trimctilsililetoxicarbonilación. 708 C. Véase Ácido ascórbico.
antioxidantes. 593 Tnmctopnma. 228 Di. Véase Colecalcifcrol.
Tiomuscimol. 424 Trimetrexato. 228 E. Véase a-Tocoferol.
Tiopcntal. 161.349.434 Trioxifeno. 504 K„215
Tiopcramida. 484 Tripelenamina, 470,617 Vorozol. 302
Tiopcridona, 684 Tripolidina, 471
Tiorfano, 292 Tripsina. 219
Tiorídazina, 386.654 Triptanes. 398 Warfarina. 164.215
Tiotixeno. 84 i.-Triptófano. 696 Wilkinson, catalizador. 786
Tiotropio bromuro. 418 Triptófano descarboxilasa. 393
Tiramina. 356 Triptófano hidroxilasa, 393
Tirilazad. 594 Tritilación. 707 Xantidrol, 847
Tiroides, hormonas. 524 Troglitazona, 530 Xantinas, análisis. 857
Tirosina. 696 Trolox. 590 Xantinas, 210.489
Tirosina cinasa, receptores con dicha acti Trombina, 388 Xilometazolina. 376
vidad. 53 Tromboxanos, 513
Tirosina hidroxilasa, 370 Tropina, 842
Tiroxina, 31.527 Tropisetrón. 400 Zacoprida. 391
Tobramicina. 569 Tropocaína. 415 Zaleplon. 429
a-Tocoferol (vitamina E). 215,590 Tubocurarina. 29.419 Zalzitabina. 241
Tolbutamida. 151.343.639 Tubulina. 567 Zanamivir. 246
Tolcapona. 313, 385 Zidovudina. 23. 236. 241
Tollens. reacción de. 837 UDP-A'-acetilmuramoilpenlapéptido. 252 Zidovudina. Véase fiCCV.
Tolterodina. 417 Ultravioleta visible, 815.865 Zinke-Ktínig, degradación de. 855
Tomaimicina. 548 Uracil mostaza. Véase Mostaza de uracilo. Zinostatina. Véase Neocarcinostalina.
Tonzilamina, 617 Uracilo. 22,35,77, 186 Zolamina. 617
Topicidad. 779 Uretanos. análisis funcional. 845 Zolantidina. 482
Topirainato. 333 Uridina. 221 Zolmitriptán. 398
Topliss. árbol de decisión de. 110 Zometapina. 691
Topoisomerasas I y II. 533 L-Valina, 696 Zonisamida. 333
Toremifcno. 501 Valinomicina. 363 Zopiclona, 429

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Introducción a la

a® MADRID • BUENOS AIRES • CARACAS • GUATEMALA • LISBOA • MÉXICO

DERECHOS RESERVADOS © 2001, respecto a la segunda edición en español, por

Primera edición: 1993

Preimpresión: FER Fotocomposición. S.A. Bocángcl, 45. 28028 Madrid

IMPRESO EN ESPAÑA - PRINTED IN SPAIN

Carmen Avendaño López. Catedrática de Química Orgánica. Departamento de Química Orgánica y

foque obliga definilivamente a asumir la interdisciplinariedad de la química farmacéutica, fundamentalmente en

Madrid, diciembre de 1992

Carmen Avendaño López

Madrid, junio de 2001

Carmen Avendaño López

5. Optimización de un prototipo. Correlaciones estructura química-actividad biológica cuanti­

3. Principios fundamentales de la catálisis enzimática ................................................................... 215

11. Inhibidores enzimáticos farmacodinámicos. M. Espada y C. Avendaño .................... 275

5. Antagonistas muscarínicos ......................................................................................................... 414

19. Diseño de fármacos basado en la química de radicales libres. J. C. Menéndez.......................... 575

20. Síntesis de fármacos. Derivados aromáticos. C. Pedregal y C. Avendaño .................................. 611

1. Introducción ...................... 815

Msc. María Eugenia Macas

1. CONCEPTOS BÁSICOS EN QUÍMICA FARMACÉUTICA

Ejemplos de anestésicos generales:

Ejemplos de antibacterianos «estructuralmente inespecíficos»:

Figura 1.1. Algunos ejemplos de fármacos «estructuralmente inespecíficos».

Figura 1.2. Ejemplos de sulfonamidas con actividad antibacteriana y diurética.

La clasificación tradicional de tipo farmacológico, empleada en los textos de farmacología y de química

Figura 1.3. Algunos subgrupos de antibióticos según una clasificación estructural.

Figura 1.4. Tipos de receptores.

2. NOMENCLATURA DE LOS FÁRMACOS

2.1. Códigos de fabricante

2.2. Nombres comerciales

2.3. Denominaciones comunes

Tabla 1.1. Denominaciones comunes de algunos países

España DOE Denominación Oficial Española

Tabla 1.2. Partículas utilizadas en la construcción de denominaciones comunes

Partícula Grupo de fármacos

Tabla 1.2. (continuación)

Partícula Grupo defármacos

-quina Derivados de la quinolina

Tabla 1.3. Formas abreviadas para la designación de aniones en la construcción

Contracción Nombre químico sistemático

En un intento de desarrollar un método universal para la designación de los fármacos, se ha propuesto un

Tabla 1.4. Sistema ATC de nomenclatura de los fármacos.

A Tracto digestivo y metabolismo

Tabla 1.5. Sistema ATC de nomenclatura de fármacos. Grupos terapéuticos

Grupo Descripción Subgrupo Descripción

NOI Anestésicos A Anestésicos generales

N02 Analgésicos A Analgésicos narcóticos

N03 Antiepilépticos A Antiepilépticos

N04 Antiparkinsonianos A Antiparkinsonianos

N05 Psicolépticos A Antipsicóticos

N06 Psicoanalépticos A Antidepresivos

N Sistema nervioso central (grupo anatómico)

2.4. Nombres químicos sistemáticos

2.4.1. Compuestos aciclicos polifuncionales

CH,—CC\ • Función principal

. S-"t ■ ■ ■ Cadena principal

Primocarcina (antineoplásico y antimicrobiano)

2.4.2. Compuestos monocíclicos

Procaína (anestésico local)

5. Optimización de un prototipo. Correlaciones estructura química-actividad biológica cuanti

En el nombre del antihelmíntico tetramisol se observan algunas particularidades interesantes. El nitróge

La nomenclatura sistemática es la correspondiente a un sistema condensado, pero puede simplificarse te

Producción (análisis de impurezas, control microbiológico. estudios de estabilidad y estu