GUIApractica 5

GUÍA DE PRÁCTICA N° 5
PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS
(Extracción y separación)
COMPETENCIAS
 Extrae pigmentos fotosintéticos de plantas.

 Aplica la técnica de cromatografía en papel para separar pigmentos
fotosintéticos.
 Diferencia los pigmentos fotosintéticos de una planta.
I. INTRODUCCIÓN
Los cloroplastos, organelas de las plantas y de los protistas semejantes a plantas,

donde se lleva a cabo la fotosíntesis, contienen varios tipos de moléculas de
pigmento que absorben diferentes longitudes de onda de luz. La clorofila a, la
molécula del pigmento clave captadora de luz en los cloroplastos, absorbe
fuertemente las luces violeta, azul y roja, pero refleja la verde, dando así el color
verde a las hojas. Los cloroplastos también contienen otras moléculas,
denominadas colectivamente pigmentos accesorios, que absorben longitudes de
onda adicionales de energía luminosa y la transfieren a la clorofila a. Los pigmentos
accesorios incluyen clorofila b, una forma ligeramente diferente de la clorofila a que
refleja la luz de color verde-amarillo y absorbe algunas de las longitudes de onda de
las luces azul y rojo-naranja que la clorofila a omite. Los carotenoides son pigmentos
accesorios que se encuentran en todos los cloroplastos; absorben las luces verde y
azul y, por lo tanto, aparecen principalmente en colores amarillo o anaranjado.
La cromatografía en papel una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo

que permite analizar muestras en pequeñas cantidades, principalmente en la
separación e identificación de compuestos polares, como azúcares, antibióticos
solubles en agua, aminoácidos, pigmentos e iones metálicos. Los pigmentos
fotosintéticos son insolubles en el agua, pero sí lo son en solventes orgánicos como
el alcohol etílico y acetona. La separación mediante cromatografía sobre papel
transcurre a través de un mecanismo de adsorción, donde se establecen una serie
de equilibrios de adsorción-desorción que dependen de la polaridad de cada
pigmento y del tipo de fuerzas intermoleculares que puedan establecer con la
estructura del papel y la del disolvente.
II. MATERIALES
 10 a 15 hojas verde oscuro y que se puedan triturar fácilmente
(espinacas).
 10 a 15 hojas rojas y que se puedan triturar fácilmente,
 10 a 15 hojas amarillas o diferentes al verde y rojo.
 Alcohol etanol 96°
 Mortero o lo que haga sus veces.
 3 vasos de vidrio
 Embudo
 Lápiz
 Cinta scoch
 3 jeringas de 20ml
 Papel filtro (una hoja)
(en caso no consigan papel filtro sustituir por papel bond o papel toalla
grueso),
III. PROCEDIMIENTO
Experimento 1: Extracción de pigmentos fotosintéticos
● Fragmentar las hojas de espinaca, procurando separar las nervaduras de las

hojas a trabajar y depositarlos en envases diferentes.
● Depositar de a pocos los pedazos de hojas en el mortero y empezar a triturar.
● Una vez reducido el volumen de las hojas verter poco a poco el alcohol y
continuar triturando.
● Filtrar el extracto con un embudo y papel filtro (o gasa) en un vaso.
● Repetir estas acciones con el resto de las hojas y el alcohol.
● Al final medir el volumen del extracto obtenido, con la ayuda de una jeringa.
● Registrar los resultados.
● Reservar los extractos.
Experimento 2: Separación de pigmentos fotosintéticos (Técnica de

cromatografía en papel)
 En cada vaso conteniendo los extractos coloque un pedazo de papel filtro, de

unos 10 x 4 cm (o de la misma longitud que el vaso), sujetando un extremo
del papel a un lápiz, mientras que el otro extremo debe estar en contacto con
la solución.
 Espere hasta que el solvente haya viajado hasta el extremo superior del papel
antes de retirar el cromatograma del vaso. (observe los resultados).
RESULTADOS
a) Registre el tiempo de avance de cada banda de los resultados, mediante

dibujo o fotografía cuántas bandas o zonas de distintos colores se pueden
distinguir en las hojas empleadas.
b) Forma de presentar los resultados (indicar nombre científico de la planta,
nombre común, medidas de las bandas en cm y min
c) Interpretar los resultados comparando con el patrón
DISCUSIÓN
a) Señale qué pigmento representa cada color.

b) Explique las razones de los colores para cada pigmento.
c) Tomando los resultados de las hojas no verdes, discuta las razones de las
diferencias encontradas.
d) Utilice bibliografía para realizar la discusión.

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 Extrae pigmentos fotosintéticos de plantas.

Los cloroplastos, organelas de las plantas y de los protistas semejantes a plantas,

La cromatografía en papel una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo

Experimento 1: Extracción de pigmentos fotosintéticos

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a) Señale qué pigmento representa cada color.

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