CURSO DE BIOLOGÍA 2022

GUÍA DE PRÁCTICA VIRTUAL N° 9

MITOSIS
GRUPO 2
Nombre y apellidos de integrantes:

1. Aguirre Garcia Cielo Isabel

2. Chumbiray Castro Antonio Aaron
3. Eca Castro Sebastián Justin
4. Encarnación Parra Angel Cristal
5. Martínez Noriega Douglas Brian
6. Moreno Perez Kennedy Diego
7. Vivanco Salcedo Alanis Maraya
8. Zuloeta Chirre Valeria Alexandra

I. INTRODUCCIÓN

a) Ciclo Celular El ciclo celular Se denomina a los eventos repetitivos que permite el crecimiento y
división celular. Consta de dos periodos: la interfase y la división celular (mitosis) que es con la que
termina el ciclo, generalmente complementa con la división citoplasmática o citocinesis.

b) Interfase: Periodo en el que las células realiza la mayor actividad metabólica antes de entrar en
división. La interfase consta de tres periodos:” G”1 o periodo pre-replicativo, “S” donde ocurre la
síntesis o replicación del DNA y” G” 2 o pos replicativo y luego se realiza la división celular.

Los periodos G1 y G2 están regulados por genes y enzimas (quinasas) dependientes de ciclina (Cdk)
y ciclina (cds).

c) Mitosis o cariocinesis consiste en el reparto equitativo del material nuclear entre dos células hijas;
se define como un proceso exacto para controlar la transmisión de los rasgos de la herencia de un
núcleo a otro durante la división celular. Es el mecanismo que genera nuevas células idénticas a la
célula madre y reemplaza las células dañadas en los organismos multicelulares.
 El término mitosis se refiere a la secuencia de cambios que ocurren en el núcleo antes de la división
citoplasmática y se divide en las siguientes fases: Profase, metafase, anafase y telofase, estas fases
pueden durar desde unos minutos hasta varios días.

Fases de Mitosis:

- Profase: Es la primera fase, la cromatina inicia su condensación observándose fibra engrosadas.

Al microscopio óptico, inicia la desaparición del nucléolo y la envoltura nuclear, se forma el huso
mitótico o acromático.
- Metafase: La cromatina llega a su máxima condensación, formándose los cromosomas. Los
centrosomas llegan a los polos y queda constituido el huso acromático (formado por
microtúbulos), mientras que los cromosomas se ubican en el plano ecuatorial.
- Anafase: Las fibras del huso acromático se acortan, los centrómeros se dividen, se separan las
cromátides y migran a los polos.
- Telofase: Los cromosomas se van descondensando al llegar a los polos, la envoltura nuclear se
reorganiza y se forman los nuevos núcleos.

II. COMPETENCIAS

- Determina el índice mitótico e interfásico.

- Identifica los procesos del ciclo celular Interfase y mitosis.
- Diferencia las fases de la mitosis vegetal y compara con las fases de las láminas fijas preparadas.
- Aplica la técnica de coloración.

III. FUNDAMENTO

Para la observar la interfase y las fases de la mitosis es necesario teñir los núcleos con un colorante
básico como la Orceína acética. Esta tinción se basa en la afinidad que tiene el colorante por la carga
negativa del grupo fosfato de la molécula del DNA, y al teñir la cromatina de color morado y es posible
hacer el seguimiento de los cambios fisiológicos de la cromatina de condensación y descondensación
hasta culminar el ciclo célula

IV. MATERIALES Y MÉTODOS

a) PREPARACIÓN PREVIA DE LOS BULBOS DE CEBOLLA: raicillas de Alium cepa (2n=16).

- Retirar las raíces y fibras secas de la base de un bulbo de cebolla fresca de 5 a 7 cm. de diámetro.
- Insertar tres palillos en el bulbo, de manera que se pueda suspender en un pequeño vaso o
recipiente con agua. La base del bulbo debe estar sumergida en la superficie del agua. Las raíces
empezarán a crecer en dos o tres días.
- Observar diariamente hasta que las puntas de las nuevas raíces crezcan unos dos centímetros
de largo. Escoger las puntas de las raíces que presenta la región embrionaria de crecimiento
rápido (meristemos).

b) TÉCNICAS DE LABORATORIO
- Corte 1cm de la punta de una raíz. Con una hoja de afeitar
- Coloque sobre una placa petri que contenga suficiente colorante de orceína.
 - Sujete el petri con una pinza de madera y caliente cuidadosamente el petri de 3 a 5 minutos,
evitando que hierva y evite inhalar los olores.
- Corte la punta de la raíz y coloque en un portaobjetos con una gota de orceína fría.
- Cubra la preparación con una laminilla y con la punta de un estilete presione en círculos
suavemente hasta que la muestra quede bien extendida.
- Con un papel absorbente con cuidado elimine el colorante en exceso.
- Selle la laminilla con esmalte transparente.
- Examine la preparación coloreada, con el objetivo de 10X.
- Localice las células que están sus estructuras teñidas.
- Cambie al objetivo al de 40X aumento, reconozca las fases y grafique.

c) ÍNDICES DE DIVISIÓN CELULAR

- Índice Interfásico: Se obtiene del cociente de células que se encuentran en interfase entre el
número de células que se encuentran en ciclo, expresado en porcentaje.

Índice Interfásico (II) = Número de células en interfase X 100

N° de células en Ciclo Celular

- Índice mitótico (IM): Se define como índice mitótico en los diferentes estados morfológicos de
la mitosis como la relación entre el número de células por unidad de espacio observado un
aumento 40X que están en mitosis durante un determinado periodo de tiempo. El cociente se
utiliza principalmente como estimación de la velocidad del crecimiento tisular. Se determina
sumando los diferentes estados de fase de mitosis multiplicados por 100 y divididos entre el
número total de células meristemáticas que se encuentran en Ciclo Celular. Se obtiene utilizando
la ecuación de (PIRES et al., 2001). El cociente se utiliza principalmente como estimación de la
velocidad del crecimiento, renovación tisular y determinación de algún efecto que cause
alteración en su normal crecimiento por ejemplo en estado cancerígeno, o algún efecto citotóxico.

Índice mitótico (IM) = Número de células en mitosis X 100

N° de células en Ciclo Celular

- Índice de Fase: Es el número de células que se encuentra en cada fase de la mitosis entre el
número total de células en mitosis.

Índice de Fase (IF) = Número de células en fase mitótica X 100

N° Total de célula en mitosis

V. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

OBSERVACIONES

1. Reconocimiento de cada fase mitótica en tejido radicular meristemático de Allium cepa

.(Coloración: Orceína acetoclohídrica al 2%)
 Figura N° 1. Mitosis en células meristemáticas de Allium cepa .(Coloración:
Orceína acetoclohídrica al 2%).

De acuerdo con las muestras de raíz de cebolla y las características de las fases mitóticas realice las
siguientes acciones:

a) Muestra 1: Identificar las fases señaladas a1, a2 y a3, y haga un recuento del número de células
por estadio observado en cada muestra.

La letra a representa la fase de PROFASE, y hay 6

células encontradas en esta fase, en esta imagen.

La letra b representa la fase de MITOSIS y hay

aprocimadamente 45 células en esta fase.

La letra c representa la fase de INTERFASE y hay

aproximadamente 55 células en esta fase, en esta
imagen.
 La letra a representa la etapa de METAFASE y hay 1
célula en esta fase, en esta imagen.

La letra a representa la etapa de ANAFASE Y hay 1

célula en esta fase en esta imagen.

La letra b representa la etapa de INTERFASE y hay

aproximadamente 65 células en esta fase en esta
imagen.

La letra c representa la fase de METAFASE y hay 1

célula en esta fase de esta imagen.

b) Muestra 2: Identificar las fases señaladas b1, b2 y b3, y haga un recuento del número de células
por estadio observado en cada muestra.

La letra A representa la etapa de INTERFASE y hay un

total de 85 células en esta fase.
La letra B representa la etapa de METAFASE Y hay un
total de 1 célula.
La letra C representa la etapa de PROFASE Y hay un
total de 8 células en esta fase.
Por último, la letra D representa la etapa de ANAFASE
y hay un total de 2 células en esta fase.
Hay un total de 130 células.
 La letra A representa la etapa de ANAFASE y hay 2
células en ese estadio.
La letra B representa la etapa de METAFASE, en esta
fase hay 3 células.
La letra c representa la etapa de PROFASE, y hay un
total de 4 células.
Por último, la letra D representa la etapa de ANAFASE
INICIAL, y hay un total de 3 células.
Hay un total de 168 células.

La letra A representa la etapa de INTERFASE y hay 44

células en ese estadio.
La letra B representa la etapa de PROFASE, en esta fase
hay 36 células.
La letra C representa la etapa de ANAFASE y hay un
total de 1 célula.
Por último, la letra D representa la etapa de
METAFASE, y hay un total de 1 célula.
Hay un total de 82 células.

c) Muestra 3: Teniendo en cuenta la muestra del ápice raíz de Allium cepa “cebolla” coloreadas con
Hematoxilina-Eosina (Fig. 2) viendo las características de las fases mitóticas (considerar lectura
orientadora. Latourge et al_1995_Indice Mitótico). Determine:
c1 Índice Interfásico (I.I.); c2 Índice Mitótico (I.M.) y c3 Índice de Fase (Í.F.) (METAFASE/ANAFASE)
23 pares de
cromosomas
Calcular los índices de división celular entre todas las muestras otorgadas, las cuales se pueden definir
en la fase que se encuentran:
Sin contar las células diferenciadas

Tomamos como referencia:

Interfase, el Profase Metafase Anafase
punto más
Datos obtenidos:
oscuro es el
nucleolo
Total de células en ciclo: 1616 aprox

Células en interfase: 1574

Total de células en mitosis: 42

Células en profase: 11

Células en metafase: 11

Células en anafase: 12

➔Hallando lo que nos piden

c1) Índice Interfásico (II) = Número de células en interfase X 100 = 1574 x 100 = 97.401
N° de células en Ciclo Celular 1616

c2) Índice mitótico (IM) = Número de células en mitosis X 100 = 42 x 100 = 2.599
N° de células en Ciclo Celular 1616

c3) Índice de Fase (IF) = Número de células en fase mitótica X 100

N° Total de célula en mitosis

En metafase= 11 x 100 = 0.6807 En anafase= 12 x 100 = 0.7426

1616 1616

d) Muestra 4: Empleando los cromosomas de la (Fig.3) Construir el cariotipo humano (.

Determinar: Sexo, indicar si es cariotipo normal o tiene alguna alteración cromosómica, y
fórmula cromosómica.
SEXO: varón
46xy
Cariotipo normal
Muestra de láminas mitóticas (a)
Muestra de láminas mitóticas (c)

Figura N° 2. Ápice radical de Allium cepa ”cebolla”. Coloreada con Hematoxilina-Eosina

http://bio.rutgers.edu/~gb101/lab2_mitosis/highmagroot1.html

CROMOSOMAS HUMANOS PARA CONSTRUIR UN CARIOTIPO

Recortar los cromosomas metafásicos, ordenarlos de acuerdo al tamaño y posición del

centrómero. Emparejar los pares homólogos Pegarlos en la hoja sobre la pequeña línea que
marcará la ubicación del centrómero correspondiente al número del par cromosómico.
Nota: Eliminar la recta y la letra que corresponde al grupo de cada tipo de pares
cromosómicos.
Al recorta los cromosomas dejar un pequeño borde alrededor del cromosoma para que no
pierda su forma.

Fig.3 Cromosomas humanos para construir el cariotipo.

 VI. RESULTADOS

● Ubique en un campo visual una población de células que se encuentren en ciclo.Fig.1y fotos de
su documento para informe.
● Contabilice las células que se encuentran en cada fase mitótica e interfásica y aplique las
ecuaciones determine el índice de fase (profase, metafase, anafase, telofase) e índice mitótico
según (López-Sáez, 1965), en la muestra del ápice de la raíz de Allium cepa. (Fig.2).
● Construir un cariotipo con los cromosomas humanos (Fig. 3)

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● IGANCI, J.R.V.; BOBROWSKI, V.L.; HEIDEN, G.; STEIN, V.C.; ROCHA, B.H.G. Efeito do extrato
aquoso de diferentes espécies de boldo sobre a germinação e indice mitótico de Allium cepa l.
Arq. Inst. Biol., São Paulo, v.73, n.1, p.79-82, jan./mar., 2006
● DUQUE C. Cromosomas politénicos: Una mirada al fenómeno de la endorreduplicación.
Universidad Nacional de Colombia, Medellín; 2016. Disponible en: edu.
● FAO/OIEA. 2018. Manual para diferenciar moscas de Anastrepha ludens (Loew) silvestres y
criadas de cepa normal (“bi-sexual”) y cepa sexada genéticamente (Tapachula-7), irradiadas y
sin irradiar. Guillen Aguilar J.C, López Muñoz L, López Villalobos E.F y Soto García D. N.
Organización de las Naciones Unidas para la alimentación y la Agricultura. Roma, Italia, 95 pp.
● LOPEZ- SAEZ, J. F., & E. FERNANDEZ-GO MEZ. I 965. Mitotic partial index and phase indices.
Experientia,21:591-592.
● ORRILLO M, MERIDETH B. «Biología reproductiva y citogenética de la papa. “Centro
Internacional de la Papa (CIP). Manual técnico. Disponible en: research.cip.cgiar.org/
● PIRES, N.M.; SOUZA, I.R.P.; PRATES, H.T.; FARIA, T.C.L.; FILHO, I.A.P.; MAGALHÃES, P.C.
Efeito do extrato aquoso de leucena sobre o desenvolvimento, índice mitótico e atividade da
peroxidase em plântulas de milho. Revista Brasileira de Fisiología Vegetal, v.13, n.1, p.55-65,
2001.
http://www.ornl.gov/sci/techresources/Human_Genome/posters/chromosome/chooser.shtml

VIII. VIDEOS

Atlas de histología vegetal y animal

Link: https://mmegias.webs.uvigo.es/inicio.html

Muestras de mitosis

Link: https://www.youtube.com/watch?v=vuZ_ozeagAM

Muestras de meiosis

Link: https://www.youtube.com/watch?v=cZVjhPj2his
IX. ANEXO: FASES DE MEIOSIS