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MATERIA:

Biología Celular

PRÁCTICA #2:
Preparación de Soluciones y Diluciones

ALUMNAS:
Acuña Hernandez Itzel Melissa
Durazo Gámez Mya Daniela
García Mendoza Kiara Yamilet
Hernandez Ortiz Perla Jazmín

MAESTRA:
María Lucila Rascón Durán

FECHA DE ENTREGA:

Miércoles 7 de septiembre 2022


INTRODUCCIÓN
Una dilución es un procedimiento, cuya finalidad es disminuir la cantidad de soluto por
unidad de volumen de dilución. Este procedimiento se logra mediante la adición de una
cantidad específica de diluyente en una cantidad determinada de soluto para generar
una mezcla homogénea entre dos o más sustancias.
Usualmente, la sustancia con la cantidad más alta generalmente es el solvente, y la
sustancia con la cantidad más pequeña se llama soluto.
El factor de dilución (FD) es el número de veces que debe diluirse una solución para
obtener una de menor concentración. Este factor permite determinar qué tan diluido se
encuentra el último volumen con respecto al primero.
Tipos de disoluciones:
1. Dilución simple:
Son diluciones que se componen de soluto y solvente para obtener un volumen
total; Es aquella en la cual una cantidad específica de soluto, se combina con
una cantidad apropiada de un solvente líquido para alcanzar la concentración
deseada. Por ejemplo, tenemos la dilución de 1 a 10 explicada a continuación:
Dilución de 1 a 10
La dilución 1 a 10 se genera cuando se mezclan 1 ml de un soluto con 9 ml de
solvente, haciendo el volumen total de 10 ml. Para obtener una solución con la
concentración deseada, se debe diluir la solución madre las veces que indica el
denominador de la fracción nombrada.
2. Diluciones seriadas
Una dilución seriada es una secuencia de diluciones simples en la que se reduce
la concentración progresivamente. Para crear una dilución seriada se parte de
una solución concentrada y se preparan diluciones al décimos (1/10) o al medio
(1/2), obteniendo concentraciones relacionadas entre sí pero con rangos más
específicos.
Diluciones seriadas a 1/10
La serie de diluciones sería: Diluciones 1/10, significan que, si la cantidad de
(ml) de volúmen total de un tubo es de 10 ml = 9 ml agua destilada + 1 ml
solución madre; mientras que, el factor de dilución es de 10, permitiendo que la
serie de diluciones sea de: 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, etc.

OBJETIVOS
1. El alumno reforzará conocimientos teóricos en
planteamientos matemáticos para la preparación de
soluciones y la realización de diluciones.
2. Obtendrá experiencia práctica para la preparación de soluciones y diluciones
utilizando diferentes formas de expresión de unidades de concentración.
3. Realizará una curva de calibración y cuantificará la concentración de proteínas
totales en una muestra problema utilizando el micro-método de Bradford

DIAGRAMA DE FLUJO

EQUIPO Y MATERIALES
Lector de microplacas
Placa de agitación
Potenciómetro
Charolas para pesar
1 matráz volumétrico de 100 mL
1 pizeta con agua destilada
1 vaso de precipitados de 250 mL
1 agitador magnético
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Microplacas de 96 pozos

CALCULOS PREVIOS
Prepara 100 mL de solución reguladora de fosfatos salino (PBS) conteniendo NaCl
145.4 mM, NaH2PO4 1.4 mM y Na2HPO4 8.4 mM; pH 7.2
Realiza los cálculos matemáticos necesarios para preparar 100 mL de solución y
completa la siguiente tabla.

Reactivo Gramos

NaCl 0.085

NaH2PO4 0.0168

Na2HPO4 0.0596

CONCLUSIONES
En esta práctica de laboratorio aprendimos a cómo usar correctamente las
herramientas y equipo de laboratorio (placa de agitación, potenciómetro), así como
reforzamos el tema de las soluciones y diluciones realizando una curva de calibración y
cuantificaciones de la concentración de proteínas totales en la muestra problema
utilizando el micro-método de Bradford; cumpliendo así los objetivos anteriormente
mencionados.

ACTIVIDADES
Realiza los cálculos para la preparación de las siguientes soluciones:

1. 800 uL de una solución con concentración de 5 ug/mL de anticuerpos IgG-FITC


a partir de una solución stock de 1 mg/mL.

2. Cuántos mg de MTT (reactivo ampliamente utilizado para ensayos de


proliferación celular) requiere para preparar 10 mL de una solución de 5 mg/mL.
3. Cuántos mL de formaldehido al 37 % se requieren para preparar 100 mL de
solución al 2 % (solución utilizada para fijar células). Indica los pasos a seguir
para preparar dicho reactivo.

5
4. Cómo preparar 1 mL de una suspensión celular que contenga 5 X10 células/
6
100 uL a partir de una suspensión que contiene 9.5 X10 células/mL.

5. A partir de una solución de proteínas de 2.45 mg/mL. Indica cómo preparar 2


mL de solución que contenga 2 ug/100 L.

6. Indica cómo preparar 100 mL de solución de NaCl 125 mM.


7. Indica cómo preparar 50 mL de solución de HCl 1N a partir de HCl concentrado.

8. Indica cómo preparar 200 mL de NaOH 6M.


9. Indica cómo preparar 10 mL de solución de ácido acético al 2 % a partir de una
solución concentrada al 10 %.

10. Cuántos mL de etanol 96% requiere para preparar 100 mL de etanol al 70%
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

https://cuadernolab.web.uah.es/web/tecnicas/diluciones-seriadas/

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