Instructivo de Prácticas de Control de Calidad 2021

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS

Y TECNOLÓGICOS 15
“Diódoro Antúnez Echegaray”
INSTRUCTIVO DE PRÁCTICAS DE
CONTROL DE CALIDAD
EN EL LABORATORIO CLÍNICO
ELABORADO POR: Q. B. P. Alberto León Hernández
AGOSTO 2021
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Y TECNOLÓGICOS 15
INSTRUCTIVO DE PRÁCTICAS DE
CONTROL DE CALIDAD
ALUMNO (A): _____________________________________________
GRUPO: _____________ EQUIPO: ____________
PROFESOR TITULAR: _____________________________________
PROFESORES DE LABORATORIO: __________________________
_________________ y _____________________________________
ELABORADO REVISADO APROBADO AUTORIZADO

POR: POR: POR: POR:
L. en Od. ANGÉLICA Q. B. P. Gil Moisés Dr. Rafael Alfonso

Q. B. P. Alberto León Hernández CADENA RIOS López Iñiguez Meza Villanueva
PRESIDENTE DE JEFE DE ÁREA SUBDIRECTOR
DOCENTE
ACADEMIA ACADÉMICA ACADÉMICO
AGOSTO 2021
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Y TECNOLÓGICOS 15
ACADEMIA DE TÉCNICO LABORATORISTA CLÍNICO
LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD
INDICE
PRÁCTICA NOMBRE Pág.
1 Organización del Laboratorio de Control de Calidad. 6
2 Ejercicio de Pipeteo. 9
3 Control de Limpieza y Secado del Material de Vidrio. 12
4 Aplicación de Estadística. 18
5 Curva de Distribución Normal (Campana de Gauss) 25
6 Grafica de Control de Levey y Jennings 32
7 Sumas Acumuladas (CUSUM). 36
8 Linealidad de un método en el laboratorio clínico. 40
9 Verificación de la Calibración de Material Volumétrico 49
10 Verificación de la Calibración del Espectrofotómetro 53
11 Preparación de Sueros Control 58
12 Control de Calidad en la Preparación de los Medios de 62
Cultivo.
ANEXOS
PRÁCTICA NOMBRE Pág.
AP1 Ajuste y calibración del microscopio óptico. 68
AP2 Calibración de asas bacteriológicas. 77
AP3 Verificación de la Calibración de micropipetas y pipetas 81
serológicas.
AP4 Verificación de la Calibración de pipetas semiautomáticas. 85
Calibración de centrifugas.
AP5 Tabla 1 Límites de tolerancia 89
AP6 Tabla 2 Densidad del agua 92
AP7 93
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Y TECNOLÓGICOS 15
FUNDAMENTACIÓN DE LA UNIDAD DE APRENDIZAJE

El propósito principal de la Unidad de Aprendizaje de Control de Calidad en el
Laboratorio Clínico es preparar al estudiante para que desarrolle competencias
genéricas y disciplinares que le permitan aplicar la terminología de Control de
Calidad en el análisis estadístico, así como en la representación gráfica de los
resultados obtenidos y evaluar los procesos ejecutados a fin de garantizar la
confiabilidad de los resultados.
OBJETIVO DEL INSTRUCTIVO

Proporcionar información teórica básica sobre el tema de cada práctica, así
como las técnicas y metodologías para el desarrollo de estas, haciendo
énfasis en la aplicación del control de calidad en las fases preanalítica,
analítica y posanalítica al procesar una muestra biológica.
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Y TECNOLÓGICOS 15
INTRODUCCIÓN
El presente instructivo, es un apoyo para los estudiantes durante su preparación y
formación como Técnico Laboratorista Clínico en la unidad de aprendizaje de
Control de Calidad en el Laboratorio Clínico, va a adquirir habilidades que le
permitan enfrentar los retos que encontrará en su vida profesional frente al
creciente número de técnicas manuales y automatizadas junto con los equipos y
reactivos que continuamente se están desarrollando en apoyo al diagnóstico a
través de los análisis de muestras biológicas y la aplicación de la calidad en todas
sus actividades.
La función de Control de Calidad en el Laboratorio Clínico, es realizar un estricto

seguimiento de todas y cada una de las actividades que se llevan a cabo, desde las
indicaciones que se le dan al paciente, la toma y recolección de muestras
biológicas, la preparación de reactivos, el ajuste y la verificación de la calibración de
equipos, la ejecución de métodos y técnicas de análisis de muestras, el empleo de
estándares y calibradores, el cálculo y la transcripción de resultados y la entrega de
los mismos al paciente, todo ello basado en las Normas Oficiales Mexicanas y las
Normas Internacionales de Calidad (ISO).
Las personas responsables de realizar los análisis clínicos deberán conocer

perfectamente los aspectos técnicos de todo lo que realicen y el principio del
método, para que los resultados obtenidos de dichas determinaciones sean
confiables y de utilidad a los médicos para el diagnóstico, tratamiento y seguimiento
de las enfermedades.
Todos los resultados generados van asociados a variaciones (el técnico, reactivos,
calibración de material y equipo, variables físicas) y son de utilidad para realizar un
análisis estadístico apoyado con la elaboración de gráficas de control de calidad,
como la curva de distribución normal, Gráfica de Control de Levey y Jennings y
CUSUM y tomar decisiones asertivas por parte del responsable sanitario como lo
estipula la NOM-007-SSA3- 2011.
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Y TECNOLÓGICOS 15
Clave: ICC-P1 Revisión: 09-agosto-21 Fecha de emisión: 02-agosto-21 Página: 6 de 93
PRÁCTICA No. 1
ORGANIZACIÓN DEL LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD
1.- COMPETENCIA
Participa de manera efectiva en equipos diversos, de manera que conozca la
organización y función del Laboratorio de Control de Calidad, adaptándose a las
características del laboratorio.
LINEAMIENTOS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD

1. Solamente podrán entrar al laboratorio y realizar las prácticas los alumnos que estén
inscritos oficialmente o previa autorización de la instancia académica o administrativa
competente.
2. La tolerancia es de diez minutos si coincide con el inicio de horario de clase y de 5

minutos en cualquier otra hora. Transcurrido este tiempo se permitirá la entrada a los
estudiantes, pero sin derecho a evaluación de la práctica realizada (cero en el trabajo
de laboratorio y en el reporte) salvo causa justificada por la instancia oficial
competente.
3. Dar lectura a la práctica de forma previa para su evaluación.
4. Ingresar al laboratorio con la bata puesta y debidamente abotonada, debe estar limpia
y planchada, retirarse la bata al salir del laboratorio.
5. Las uñas deben estar cortas, limpias y sin esmalte; cabello bien peinado y recogido,
evitar el uso de piercing(s) dentro del laboratorio.
6. Colocar todos los objetos personales en los anaqueles y dejar sobre la mesa solo lo
necesario para realizar el trabajo práctico.
7. Utilizar guantes, cofia, cubrebocas, gafas cuando sea necesario.
8. Mantener el orden, disciplina y respeto a sus compañeros y profesores; de no cumplir,

tendrán que abandonar el laboratorio anulándose la práctica.
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9. Trabajar en el equipo asignado al inicio del curso.
10. Queda estrictamente prohibido consumir alimentos y fumar dentro del laboratorio.
11. Limpiar la mesa de trabajo al inicio y al final de la práctica.
12. Solicitar mediante vale el material y revisar que se encuentre en buen estado.
13. El equipo que entregue en mal estado o incompleto el material con el que trabajó, lo
repondrá en un período máximo de 15 días. De lo contrario, los integrantes del
equipo no tendrán derecho a examen práctico, ni a evaluación de sus prácticas.
14. Desechar el material contaminado de acuerdo a las indicaciones de los profesores.
15. Si se abandona el laboratorio sin autorización del profesor, aunque la práctica haya
terminado, ésta se anulará.
16. Queda prohibido el uso de equipos electrónicos; alumno (a) que lo haga, se le pedirá
que abandone el laboratorio y por consiguiente tendrá la practica anulada.
17. Ante la inasistencia grupal injustificada la práctica se dará por vista y será tema de
cualquier examen.
18. Al término de la práctica colocar los bancos sobre la mesa.
19. Para tener derecho a presentar el examen ordinario “C” será requisito indispensable
tener mínimo el 80% de asistencias y prácticas realizadas, si se tienen del 70% al
80% deberá presentar un examen extraordinario de todo el curso, si se tiene del
50% al 70% no tendrá derecho a presentar el examen ordinario “C” y deberá
presentar ETS.
20. La evaluación de Laboratorio se efectuará de la siguiente forma:

Ordinario A y B Ordinario C
Examen práctico (en línea) 20% Examen práctico (en línea) 15%
Evaluación continua (exposiciones, 10% Evaluación continua (exposiciones,
tareas y trabajo en equipo) 10%
tareas y trabajo en equipo)
Reporte de prácticas 20% Reporte de prácticas 15%
Proyecto aula 10% Proyecto aula 20%
NOMBRE Y FIRMA DEL ESTUDIANTE NOMBRE Y FIRMA DEL TUTOR
______________________________ ___________________________
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TRABAJO A DESARROLLAR
1.- Presentación de profesores.
2.- Formar equipos de trabajo.
3.- Analizar cada punto de los Lineamientos de trabajo en el Laboratorio.
4.- Firma de Acta de Acuerdos por estudiantes, profesores y padre o tutor.
5.- Comentar las normas: NOM-007-SSA3-2011 y NOM-017-STPS-2008.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la importancia de trabajar bajo normatividad?
2. Escribe tres normas diferentes a las que se mencionaron y que se consideren

en el laboratorio clínico para que se tenga un buen control de calidad.
3. De manera general, escribe de qué trata el código de bioseguridad de la OMS.
4. Explica, por qué no deben consumirse alimentos dentro del laboratorio de

análisis clínicos.
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. NOM-007-SSA3-2011 NOM-017-STPS-2008.
2. NOM-017-STPS-2008.
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Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 2
EJERCICIO DE PIPETEO
1.- COMPETENCIA
Manipula correctamente las pipetas durante el análisis de muestras biológicas para
obtener resultados confiables, adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

En el análisis de laboratorio no es posible obtener siempre el valor exacto en todas las
determinaciones; sin embargo, puede reducirse considerablemente el grado de
incertidumbre con un buen programa de control de calidad.
Al contar con un buen programa de control de calidad en el laboratorio clínico, se

beneficia al personal de laboratorio, al paciente y a la profesión médica al obtener
resultados confiables.
Para realizar el análisis de las muestras biológicas se requiere de material, instrumentos,

equipos y reactivos, los cuales deben estar en perfectas condiciones de uso.
Es necesario que las pipetas sean muy exactas, ya que cualquier discrepancia en su
lectura puede afectar el resultado de los análisis de las muestras biológicas. Para
asegurar su exactitud, es necesario hacer una verificación de su calibración de forma
periódica y, en su defecto, una recalibración. La calibración del equipo es necesaria hasta
en los casos más sofisticados, ya que el uso continuo y otros factores pueden afectar sus
lecturas de medición. El proceso de calibración ayuda a determinar si el equipo y los
instrumentos hacen las lecturas correctas, para que pueda rectificarse a tiempo, y que se
pueda mantener la eficiencia de los procesos de análisis del laboratorio.
En esta práctica se considera a las pipetas, ya que es el material volumétrico que se

emplea con mayor frecuencia y por ello debe seleccionarse y utilizarse correctamente.
Es indispensable que los técnicos laboratoristas clínicos tengan la habilidad en el manejo

de las pipetas para que los errores en la determinación de los analitos sean los mínimos.
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3.- EQUIPO, MATERIALES Y REACTIVOS
1 Espectrofotómetro
1 gradilla.
11 tubos de ensayo de 13 x 100.
1 pipeta graduada de 5 mL
1 pipeta serológica de 1mL
11 celdas de plástico.
1 Propipeta.
Solución stock de sulfato de cobre al 5 %
Agua destilada.
4.- DESCRIPCIÓN DE EXPERIMENTOS
Realiza la técnica que a continuación se describe para desarrollar la primera y la segunda
parte.
1. Verificar que la pipeta esté limpia; libre de polvo, gotas de agua o de grasa, sin
grietas o ralladuras, que la punta no esté rota y que el tamaño sea el correcto de
acuerdo al volumen que se va a medir.
2. Se recomienda introducir la pipeta unos 5 milímetros en el líquido y se succiona
lentamente con la ayuda de la propipeta, sobrepasando el aforo. No debe
introducirse directamente en reactivos o sustancias patrones.
3. Sacar la pipeta del líquido y limpiar la parte externa con papel.
4. Aforar, manteniendo la pipeta en posición vertical, a la altura de los ojos.
5. Vaciar el contenido de la pipeta lentamente en el recipiente seleccionado.
6. Cuando el nivel del líquido alcanza el extremo inferior de la pipeta, se toca con la
punta de la pipeta la pared del recipiente receptor hasta que el flujo está finalizado.
No forzar a salir la pequeña cantidad que queda en la punta.
Primera parte
1. Siguiendo la técnica anterior, cada integrante del equipo diluye la solución stock de
sulfato de cobre 5 % 1:5 con un volumen máximo de 5 mL, obteniendo al final 5
diluciones por separado (diluciones independientes)
2. Utilizar solamente una pipeta graduada de 5 mL y una de 1 mL
3. Mezclar perfectamente los tubos y leer la absorbancia cada uno a 700 nm contra
blanco de agua.
4. Lavar el material de vidrio utilizado inmediatamente después de realizar las lecturas
y enjuagar las celdas.
Segunda parte
1. Siguiendo la técnica anterior, un solo integrante del equipo diluye la solución stock
de sulfato de cobre 5 % 1:5 con un volumen máximo de 5 mL, 5 veces en 5 tubos
de ensayo por separado (diluciones independientes)
2. Utilizar solamente una pipeta graduada de 5 mL y una de 1 mL
3. Mezclar perfectamente los tubos y leer la absorbancia cada uno a 700 nm contra
blanco de agua.
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4. Lavar el material de vidrio utilizado inmediatamente después de realizar las lecturas
y enjuagar las celdas.
5.- REGISTRO DE RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Colocar los resultados obtenidos en la siguiente tabla:
TUBO En equipo Individual
1
2
3
4
5
Realizar la gráfica en una hoja milimétrica completa, colocando en el eje de las abcisas
(X) el número del tubo y en las ordenadas (Y) la absorbancia obtenida para cada uno de
ellos y pégala en el siguiente espacio.
6.- ANÁLISIS DE RESULTADOS

Considera las variaciones de las lecturas de absorbancias en el caso de que lo haya
realizado una sola persona, comparándolo con el que realizaron varias personas y
menciona cuál es la importancia dentro del control de calidad interno.
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. Al momento de pipetear, ¿en qué posición y a qué altura debe estar la pipeta?
2. ¿Cuál es la forma correcta de vaciar el líquido de la pipeta y micropipeta?
3. Escribe 4 características que deben cumplir las pipetas para su uso.
4. Indica el momento en el que se debe limpiar la pipeta durante la técnica de pipeteo.
9.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. MURALI, Dharan, M. S. (1982). CONTROL DE CALIDAD EN LOS LABORATORIOS
CLÍNICOS, España ed. Reverté.
2. TORRES, Gamarra Giancarlo (2021). EL ABC DE LA CALIDAD, México, ed. PRADO.
3. BESTERFIELD, Dale H. (2009). CONTROL DE CALIDAD 8ª. edición, México, ed.
PEARSON.
4. HARRIS, Daniel C., (1992), Análisis químico cuantitativo, México, editorial Iberoamérica.
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Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 3
CONTROL DE CALIDAD EN LA LIMPIEZA DEL MATERIAL DE VIDRIO
1.- COMPETENCIA
Verifica la limpieza del material utilizado en el laboratorio de análisis clínicos
mediante pruebas visuales y químicas, garantizando la calidad de limpieza para su
utilización en las pruebas de rutina, adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO
Las buenas prácticas de laboratorio exigen que el material de vidrio volumétrico esté
totalmente limpio antes de su uso para análisis o calibración, considerando que de esta
parte del análisis depende la validez de los resultados, es importante que el material de
vidrio este perfectamente limpio para garantizar que las reacciones químicas sean
confiables cualquier residuo de grasa, detergente o hipoclorito pueden causar
interferencias, hemólisis y/o alteraciones en los procedimientos.
En todos los análisis, el material de vidrio debe estar física y químicamente limpio, y en
muchos casos, debe estar libre de la presencia de microorganismos es decir estéril. En
caso del material volumétrico debe estar suficientemente limpio para permitir que la
superficie se humedezca uniformemente.
Cuando está limpio, el agua o líquido vertido descenderá uniformemente y el mismo se

adhiere a la superficie del vidrio en una capa continua. Restos de grasa u otro
contaminante causan irregularidades en la capacidad por distorsión del menisco y
permitiendo superficies interiores no humedecidas, dando lugar a errores de drenaje de
las pipetas y buretas. La preparación de soluciones de concentración conocida requiere
de material de vidrio volumétrico y graduado que esté químicamente limpio y libre de
grasa. La medición precisa de un volumen es imposible si las graduaciones son
inexactas. La presencia de otras sustancias en la superficie del material de vidrio, altera
la pureza de la solución a preparar. La grasa deforma el menisco de la solución y
dificulta la lectura correcta del volumen.
Los diferentes métodos de análisis requieren de procedimientos específicos de lavado de

material y el laboratorio debe asegurar que se sigan los procedimientos de lavado
adecuados. En el caso de que los métodos no especifiquen un protocolo de lavado, el
material de vidrio se puede lavar en una disolución de detergente libre de fosfatos y
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enjuagarse después con abundante agua de la llave para terminar con un enjuague con
agua destilada. Este procedimiento es adecuado para los análisis más simples.
En el caso de artículos de vidrio que hayan estado en contacto con material biológico,
por ejemplo, el proveniente de laboratorios como bacteriología, hematología, química
clínica etc.
Después de desechar el material biológico, se procederá a su descontaminación. Los

elementos de vidrio deben ser sometidos a un lavado especial y control para su uso
posterior. Habrá que sumergirlos en una solución de hipoclorito de sodio al 1% durante 30
minutos. Los restos de sangre y otros materiales biológicos consumen cloro activo, por lo
que se debe constatar que transcurridos los 30 minutos haya todavía actividad de cloro
residual. Se efectuará su control por el método elegido por el laboratorio. Luego se lava
con detergente, se enjuga con agua corriente y posteriormente con agua destilada.
3.- EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS

• Horno
• 1 Vaso de precipitados
• Matraz erlenmeyer
• Matraz volumétrico
• Pipeta graduada
• Pipeta volumétrica
• Escobillón
• Etanol de 96º
• Detergente iónico de pH neutro Extran
• Cloro comercial
4.- DESCRIPCIÓN DE EXPERIMENTOS 1. Lavado de material en general

1.- Lavar en forma exhaustiva con Extran (solución detergente iónico de pH neutro) al
2% con ayuda de escobillón, limpiar la parte interna y luego la externa. Esto será
suficiente sí el material es de uso frecuente.
2.- Enjuagar con agua de la llave aproximadamente 11 veces y finalmente con agua
destilada.
3.- En caso de que lo anterior no sea suficiente se deja el material de 2 hasta 24
horas sumergido en Extran, dependiendo del grado de suciedad; posteriormente,
repetir los pasos 1 y 2.
4.- Secar de 60 a 70 oC, durante el tiempo necesario.
2. Realizar control de calidad de la limpieza

1.- Verificar la ausencia de grasa: una manera de examinar la limpieza es llenando el
material de vidrio con agua destilada y ver si el material está cubierto por una
capa continua de agua. Los materiales sucios generalmente tienen pequeñas
gotas de agua en la superficie interior, en vez de una capa continua. Una segunda
13
indicación de la suciedad del material de vidrio es la presencia de manchas de
agua fuera y dentro del material. Esto es motivo de rechazo y el material tendrá
que tratarse de acuerdo al paso 3.
2.- Comprobar la eliminación total de detergente: Los residuos de detergente pueden

interferir con algunas determinaciones de laboratorio, por consiguiente, es
recomendable analizar algunos materiales escogidos al azar; para ello, podemos
elegir una pipeta, vaso de precipitados, etc. y adicionarles dos o tres gotas de
indicador de fenolftaleína y mezclar. El material estará bien lavado, si no presenta
ningún cambio de color al agregarle el indicador, si presenta cambio de incoloro a
rosa fuerte, indica que el lavado es incorrecto. Así mismo, se les puede adicionar
dos o tres gotas del indicador de anaranjado de metilo y mezclar. El material
estará bien lavado, si no presenta cambio de color, si lo presenta de amarillo a
canela o naranja, también indica un mal lavado. Si el material mostrara residuos
de detergente se tienen que aumentar el número de enjuagues hasta que las
pruebas con los indicadores sean negativos.
3. Aplicación de soluciones químicas

Para la limpieza, muchas veces no es suficiente una disolución de un detergente
común. En ese caso, se pueden utilizar soluciones químicas, para lo cual se
procede a lavar minuciosamente el material de vidrio con agua corriente y jabón,
después se coloca el material en un recipiente de polipropileno y se cubre
perfectamente con la mezcla limpiadora; ya sea vertical u horizontalmente, dejar
actuar la mezcla limpiadora (por varias horas, si es necesario) y enjuagar el
material primero con agua corriente y después con agua destilada. Se deja secar
y listo para su uso.
Potasa alcohólica: esta mezcla se usa especialmente para eliminar restos de
grasa. Se usa para eliminar residuos de grasas entre ellas la grasa de silicón que
se emplea como un lubricante de llaves de bureta. El material se sumerge en la
potasa tibia de10 a 15 minutos, después se enjuaga con agua corriente y
destilada, por último, se seca. Tiene un poder oxidante mayor que el de la mezcla
crómica
Ácidos: habitualmente se utiliza una disolución de ácido nítrico al 10%. El

material se llena con esta disolución (o se sumerge en ella) durante el tiempo
necesario, y a continuación se enjuaga con agua desionizada.
Mezcla crómica: disolución de dicromato sódico o potásico en ácido sulfúrico

muy concentrado. Esta mezcla es especialmente adecuada para la limpieza y
desengrasado del material de vidrio. La disolución se vierte en el recipiente a
limpiar y se deja actuar durante la noche. Al día siguiente se vuelve a recoger la
mezcla en una botella de vidrio, que se debe mantener bien cerrada, donde se
14
conserva para nuevos usos. Esta disolución puede utilizarse repetidas veces
hasta el momento que adquiera un color verdoso, el cual indica que debe
desecharse. Esta disolución es muy efectiva, pero se adhiere fuertemente a las
superficies de vidrio y porcelana, por lo que es necesario realizar un enjuague
muy exhaustivo del material después de su limpieza con mezcla crómica para
separar las últimas trazas de dicromato que se hubieran adherido a las paredes
del recipiente. La mezcla crómica tiene los inconvenientes de ser potencialmente
peligrosa, y la toxicidad de las sales de cromo (VI).
4. Limpieza de material en el área de bacteriología

Se deberá esterilizar en autoclave a 121°C y 15 libras de presión durante 25
minutos, y posteriormente someterlo al mismo procedimiento de lavado del
material general.

1. Elabora un diagrama de flujo en el que se muestre el proceso de lavado y
acondicionamiento a seguir de un material proveniente del laboratorio de
bacteriología.
2. Esquematiza como se observa un material de vidrio con grasa y libre de grasa.
3. Esquematiza como se observa un material de vidrio con residuos de detergente y

libre de este, utilizando los diferentes indicadores de pH.
15
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. Explica la preparación y utilidad de las siguientes sustancias:
Sustancia Utilidad Preparación

Agua regia
Mezcla crómica
Sosa cáustica
Potasa alcohólica
Permanganato de
potasio
2. ¿Cuál es la importancia del control de limpieza y secado del material?
3. Anota dos contaminantes que puede contener el material de vidrio.
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4. Escribe dos alteraciones que provoca la presencia de grasa en el material de
vidrio.

1. Banco Central de Sangre del CMN S-XXI, 35 aniversario (1997). Lavado de
Material, México, Jornadas Científicas 1997.
2. GABB, M. H. & W. ELATCHMEN (1987). Soluciones de Laboratorio, Barcelona,

ed. Belisterra.
3. GONZÁLEZ DE BUITRAGO, J. M. (1985). Técnicas de laboratorio clínico,

Barcelona, ed. Alambra.
4. Mexicanos, C. P. (2014). Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Tomo I.

México: Sistema de Gestión editorial.
5. MURALI, Dharan, M. S. (1982). Control de Calidad en los Laboratorios Clínicos,

España, ed. Reverté.
6. TORRES, Gamarra Giancarlo (2021). EL ABC DE LA CALIDAD, México, ed.

PRADO.

PEARSON.
LAVADORA DE MATERIAL DE VIDRIO
17
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 4
APLICACIÓN DE ESTADÍSTICA
1.- COMPETENCIA
Determina el grado de precisión y exactitud de las determinaciones realizadas en un laboratorio
clínico a través del análisis estadístico para conocer la variación en el proceso, adaptándose a
las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

El Control de Calidad permite medir las características de la calidad de un producto,
compararlas con ciertos requisitos y tomar decisiones correctivas si hay diferencias entre el
funcionamiento real y el esperado.
La estadística es un conjunto de métodos que permiten recolectar, organizar, resumir,

presentar y analizar datos que pueden ayudar a tomar decisiones o inferir acerca de su
significado.
La Estadística puede dar respuesta a muchas de las necesidades que la sociedad actual nos
plantea. Su tarea fundamental es la reducción de datos, con el objetivo de representar la
realidad y transformarla, predecir su futuro o simplemente conocerla.
MEDIDAS ESTADÍSTICAS
MEDIDAS DE TENDENCIA CENTRAL.- Son medidas que describen el valor típico o
medio de un conjunto de datos.
• Media aritmética o Promedio.
• Mediana.
• Moda.
• Media Armónica.
• Media Geométrica.
• Comparación entre las M. T. C.
MEDIDAS DE DISPERSIÓN.- Son las medidas que indican que tan alejados están los
valores de la media.
• Varianza (Variancia).
• Desviación Estándar.
• Desviación Estándar (Inferencia Estadística).
OTRAS MEDIDAS DESCRIPTIVAS:

• Coeficiente de Variación.
18
• Sesgo.
• Tendencia.
• Curtosis.
MEDIA ARITMÉTICA O PROMEDIO ( ).- Es la suma de los datos que se quieren promediar, dividida
entre el número de datos y se representa por medio de una equis testada.
Ejemplo:
Calcula la media aritmética para el siguiente conjunto de datos.
5, 9, 12, 7, 15, 3.
Solución:
(5+9+12+7+15+3)/6 = 51/6 = 8.5
8.5 es la media aritmética para este conjunto de datos.
MEDIANA (m).- Es la observación que se encuentra en el centro cuando los datos están
ordenados, divide a los datos en dos partes iguales.
- Si n es impar:
La mediana es la observación que está en el lugar (n+1)/2, esto es
- Si n es par:
La mediana es el promedio de las observaciones n/2 y n/2+1, esto es
Ejemplo:
Encuentra la mediana para el siguiente conjunto de datos
9, 12, 5, 16, 8, 3, 11.
Solución:
Primero se ordenan los datos:
3, 5, 8, 9, 11, 12, 16.
Una vez ordenados, como el número de datos es impar (7), se busca el que tiene la
posición (n+1)2, o sea (7+1)2 = 4. Este número es el 9 y representa la mediana.
Ejemplo:
Calcula la mediana para el siguiente conjunto de datos
8.3, 5.7, 9.2, 3.9, 7.4, 11.8, 10.6, 4.3.
Solución:
Nuevamente se ordenan los datos:
3.9, 4.3, 5.7, 7.4, 8.3, 9.2, 10.6, 11.8.
Una vez ordenados, como el número de datos es par (8), se busca el número que tiene la
19
posición n/2 y el que tiene la posición n/2+1, o sea 8/2 = 4 y 8/2+1 = 5. Los números que
tienen la posición cuarta y quinta son 7.4 y 8.3. Estos números se promedian y el resultado
será la mediana.
(7.4+8.3)/2 = 7.85. Este resultado 7.85 representa la mediana para este conjunto de datos.
MODA (M): es la observación de mayor frecuencia. Es el valor que se repite más veces en una
serie de valores.
Nota: Si ninguna observación se repite, se dice que esos datos no tienen moda. Si todos los
datos se repiten el mismo número de veces, los datos serán multimodales.
Ejemplo:
Encuentra la moda de los siguientes datos
4, 9, 5, 6, 7.
Solución:
Como los datos sólo existen una vez, este conjunto de datos no tienen moda.
Ejemplo:
Encuentra la moda del siguiente conjunto de datos
9, 3, 6, 7, 9, 8, 5, 9, 7, 3.
Solución:
El 3 se repite dos veces, el 7 se repite también dos veces, pero como el 9 se repite tres
veces, este último número es la moda para este conjunto de datos.
Ejemplo:
Calcula la moda para los datos que se presentan a continuación
6, 7, 8, 6, 9, 7, 8, 5, 6, 8.
Solución:
El máximo número de veces que se repiten los datos son tres, y hay dos datos que se
repiten tres veces, el 6 y el 8. El conjunto de datos es bimodal y sus modas son el 6 y el 8.
Ejemplo:
Calcula la moda para estos datos
8, 6, 5, 5, 9, 6, 8, 6, 5, 9, 8, 9,
Solución:
En este conjunto de datos, todos se repiten tres veces. El 5, 6, 8 y el 9 son moda. No hay
ninguno que no lo sea, es un caso multimodal.
20
COMPARACIÓN ENTRE LAS MEDIDAS DE TENDENCIA CENTRAL (M. T. C.)
La media aritmética es mayor que la media geométrica y ésta es mayor que la media armónica.
Estas tres medidas son afectadas por los valores extremos (más alejados del conjunto de datos),
pero la más afectada es la media aritmética, le sigue la media geométrica y la menos afectada de
las tres, es la media armónica. A la mediana y a la moda no le afectan los valores extremos.
La media aritmética es la medida de tendencia central más utilizada. La mediana y la moda sólo
se usan cuando hay valores extremos muy alejados de resto de los datos. La media geométrica
se usa cuando los datos son razones, tasas o progresiones geométricas. La media armónica se
usa cuando los datos son tasas que pueden ser expresadas recíprocamente.
MEDIDAS DE DISPERSION.- Son medidas que indican qué tan alejados se encuentran los datos
con respecto a su media.
VARIANZA (V) o VARIANCIA (S2).- Es el promedio de las desviaciones al cuadrado entre los
datos y su media aritmética. Es la suma de los cuadrados de las diferencias de las medidas
individuales y la media aritmética, dividido por el número de observaciones menos una.
donde:
xi: es el i-ésimo dato
: es la media aritmética para datos no agrupados
n: son los GRADOS DE LIBERTAD:
n = Cuando son 10 o menos datos.
n – 1 = Cuando son más de 10 datos.
21
La primera fórmula es la definición de varianza y la segunda es resultado de desarrollar el binomio
al cuadrado de la primera fórmula y aplicarle las propiedades de la sumatoria.
Ejemplo:
Calcula la varianza para el siguiente conjunto de datos.
5, 9, 12, 7, 15, 3.
Solución:
Aplicando la definición (primera fórmula).
Primero hay que calcular la media:
= (5+9+12+7+15+3)/6 = 51/6 = 8.5,
S2 = [(5-8.5)2+(9-8.5)2+(12-8.5)2+(7-8.5)2+(15-8.5)2+(3-8.5)2]/6 = 99.5/6 = 16.58
La varianza para este conjunto de datos es 16.58.
Usando la segunda fórmula:
Sum (x2) = 52+92+122+72+152+32 = 533
Sum (x) = 5+9+12+7+15+3 = 51
S2 = [533-(51) 2 /6]/6 = 99.5/6 = 16.58 que es el mismo resultado que obtuvimos con
la definición.
DESVIACION ESTÁNDAR (S) o SD:
Es la raíz cuadrada de la varianza:
donde:
xi: es el i-ésimo dato
: es la media aritmética para datos no agrupados
n: es el número de datos
Ejemplo:
Calcula la desviación estándar para el siguiente conjunto de datos:
5, 9, 12, 7, 15, 3.
Solución:
Con el cálculo de la varianza previo S2 = 16.58
S =  16.58 = 4.07
La MEDIA ARITMÉTICA ( ) es un índice de exactitud de un método, mientras que la

DESVIACIÓN ESTÁNDAR (S) es un índice de precisión.
22
OTRAS MEDIDAS DESCRIPTIVAS
COEFICIENTE DE VARIACIÓN (CV).- Es un valor relativo de la desviación estándar con respecto a la

media aritmética y nos dice qué porcentaje de la media aritmética representa la desviación estándar.
Es la desviación estándar expresada en términos de porcentaje de la media. El coeficiente de

variación da una imagen real de la desviación sin referirse a la naturaleza de la medición ni a la
metodología.
Ejemplo:
Calcula el coeficiente de variación para el siguiente conjunto de datos.
5, 9, 12, 7, 15, 3.
Solución
Del ejemplo # 1 tomemos la media aritmética (8.5) y del ejemplo # 14 tomemos la
desviación estándar (4.07)
V = (4.07/8.5)*100 = 47.88%. La desviación estándar para este conjunto de datos
representa el 47.88% de su media aritmética.
• Calculadora
• Lápiz, goma, sacapuntas.
4.- DESCRIPCIÓN DE EXPERIMENTOS:
Con los siguientes datos correspondientes a la determinación de triglicéridos (mg/dL), calcula las
medidas de tendencia central (promedio, mediana y moda) y las medidas de dispersión (varianza,
desviación estándar y coeficiente de variación).
En la siguiente tabla registra los resultados que obtuviste al realizar los cálculos.
Medida Valor obtenido (mg/dL)

Media aritmética o promedio.
Mediana
Moda
Varianza
23
Desviación estándar
Coeficiente de variación

Con base a los resultados obtenidos, indica cómo es la exactitud y precisión para esa
determinación.
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la medida estadística que representa el índice de exactitud y la precisión?
2. ¿Para qué sirven las medidas de dispersión?
3. ¿Qué indica el coeficiente de variación?
4. Explica la utilidad de la estadística en el control de calidad del laboratorio clínico.

1. FERNÁNDEZ, Espina C. (2005), Gestión de la calidad en el laboratorio clínico, México, ed.
Panamericana.
2. HARRIS, Daniel C. (1992). Análisis químico cuantitativo, México, ed. Iberoamérica.
3. LINCH, Matheu, et al. (1977). Métodos de laboratorio, México, 2ª. ed., edit.
Interamericana.
4. MURALI, Dharan, M. S. (1982). Control de Calidad en los Laboratorios Clínicos, España,

ed. Reverté.
6. BESTERFIELD, Dale H. (2009). CONTROL DE CALIDAD 8ª. edición, México, ed. PEARSON.
24
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 5
CURVA DE DISTRIBUCIÓN NORMAL (Campana de Gauss)
1.- COMPETENCIA
Realiza los cálculos estadísticos correspondientes utilizando los valores del analito
determinado para la construcción de la Campana de Gauss o Curva de Distribución
Normal, adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

La distribución normal fue reconocida por primera vez por el francés Abraham de Moivre
(1667-1754). Posteriormente, Carl Friedrich Gauss (1777-1855), realizó estudios más
profundos y formuló la ecuación de la curva; de ahí que también se la conozca, más
comúnmente, como la "campana de Gauss".
La distribución normal es una distribución de probabilidad de variable continua que describe

los datos que se agrupan en torno a un valor central. Todo proceso en el que solo existan
causas aleatorias de variación, sigue una ley de distribución normal, condición que
aparece con frecuencia en fenómenos naturales (de ahí que se la denomine “normal”).
La gráfica de Campana de Gauss o Curva de Distribución Normal es la representación

gráfica de los valores obtenidos para un analito específico frente a la frecuencia con que se
han obtenido. Éstos se reparten en valores bajos, medios y altos, creando un gráfico de
forma acampanada y simétrica con respecto a un determinado parámetro. El punto máximo
de la curva corresponde a la media, y tiene dos puntos de inflexión a ambos lados.
Los DATOS deben seguir una DISTRIBUCIÓN NORMAL (casi igual número de datos a los
lados de la media).
• El 68.3% debe caer dentro de ± 1 SD.
• El 27.2 % entre ± 2 SD.
• El 4.2 % entre ± 3 SD
25
26
Una distribución normal se caracteriza por:
1. Los valores de las mediciones tienden a agruparse alrededor de un punto central, la
media.
2. La representación de los datos es simétrica a ambos lados de la media.
3. Las desviaciones estándares quedan situadas a igual distancia unas de otras.
4. La proporción de mediciones situada entre la media y las desviaciones es una constante
en la que:
• La ± 1 desviación estándar = cubre el 68.3% de los casos
Podemos analizar el comportamiento de los procesos gráficos y determinar su efectividad

tomando como base su grado de aproximación a la curva de distribución normal a partir de
los datos generados y la creación de histogramas que permitan la comparación con la curva
de distribución normal.
MEDIDAS DESCRIPTIVAS DE FORMA SESGO

El Sesgo de una distribución se define como el grado de asimetría o falta de simetría de la
distribución. El Sesgo es un cambio súbito y paralelo a la media de los valores. Es un factor
sistemático que condiciona inexactitud.
Tipos de Sesgo.
Si la distribución tiene una cola más larga a la derecha que a la izquierda del valor central
máximo, entonces se dice que la distribución tiene un sesgo positivo o que está sesgada a
la derecha. Caso contrario, se dice que tiene un sesgo negativo o que está sesgada a la
izquierda. En distribuciones simétricas, no existe sesgo.
27
TIPOS DE SIMETRIA EN LA DISTRIBUCIÓN
CURTOSIS
Mide la mayor o menor cantidad de datos que se agrupan en torno a la moda. Se definen
tres tipos de distribución según su grado de apuntamiento o curtosis. La curtosis de una
distribución es una medida del grado de apuntamiento, generalmente comparada con el
apuntamiento de la distribución normal.
• Distribución Leptocúrtica: Si la curva es más aguda de la normal.
• Distribución Mesocúrtica: Cuando el grado de apuntamiento de una distribución es
igual que el de la distribución normal.
• Distribución Platicúrtica: Si la curva es más achatada de lo normal.
28
• Espectrofotómetro • 5 celdas • Agua destilada
• Baño maría • Pipetas semiautomáticas • Kit de reactivos
• Puntas adecuadas para la para determinación
micropipeta a utilizar de glucosa
• 5 tubos de Khan
• Gradilla
• Papel absorbente
• Papel milimétrico
• Regla
• Calculadora

A. Determina la concentración de glucosa a las muestras de suero control
preparadas en la práctica anterior. Realizar mínimo 20 determinaciones.

A. Ordena los valores obtenidos y calcula la media aritmética, la mediana, la
moda, la varianza, la desviación estándar y el coeficiente de variación.
B. Calcula los valores correspondientes a ± 1 SD, ± 2 SD y ± 3 SD.
C. Construye la Campana de Gauss o Curva de Distribución Normal, colocando
en el eje de las X los valores correspondientes a la desviación estándar y en el
eje de las Y la frecuencia respectiva de los valores determinados.
D. Dibuja la media, utilizando una línea continua de color negro perpendicular al
eje de las X.
E. Dibuja una línea roja discontinua perpendicular al lado derecho de la media
que corresponderá a + 1 DS y otra línea similar al lado izquierdo de la
media que corresponderá a - 1 DS.
F. Dibuja una línea roja continua perpendicular al lado derecho de la media que
corresponderá a + 2 DS y otra línea similar al lado izquierdo de la media que
corresponderá a - 2 DS.
G. Dibujar una doble línea roja continua perpendicular al lado derecho de la media
que corresponderá a + 3 DS y otra línea similar al lado izquierdo de la media
que corresponderá a - 3 DS.
H. Anotar la frecuencia respectiva de los valores determinados en el eje de las Y.
I. Pega la gráfica de distribución normal, elaborada en una hoja completa de
papel milimétrico, con nombre y con los colores indicados en el procedimiento.
29
Anota la interpretación de los resultados de la gráfica obtenida, mencionando si todos
los valores obtenidos siguen una distribución normal o no, y por qué.
Analiza tu gráfica y anota la simetría (sesgo) que muestra y grado de apuntamiento
(curtosis).
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. ¿De qué parámetros depende la forma de la campana de Gauss?
2. ¿Por qué a la campana de Gauss se le denomina también de distribución

normal?
3. Parámetro que indica la posición de la campana, de modo que la gráfica es

desplazada a lo largo del eje horizontal.
30
4. La ___________________ determina el grado de apuntamiento de la curva.

1. CONTRERAS, Espinosa, R. (2010). Gestión y estadística de la calidad México,
Grupo editorial Éxodo.
2. FERNÁNDEZ, Espina C. (2005). Gestión de la calidad en el laboratorio clínico,

México, Panamericana.


PEARSON.
31
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 6
GRAFICA DE CONTROL de Levey y Jennings.
1.- COMPETENCIA
Analiza la gráfica de Levey y Jennings en la determinación del control de calidad interno
en el laboratorio clínico, adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

El laboratorio clínico debe contar con un control de calidad interno y para ello es
necesario el uso de un gráfico de control, que fundamentalmente consiste en graficar, en
una escala adecuada, los valores obtenidos para determinados analitos, trabajando sobre
una misma muestra a través del tiempo. Esta muestra, que debe ser la misma durante un
período razonable de tiempo, se denomina Muestra de Control.
El laboratorio clínico necesita documentar que los materiales de control de calidad son
analizados y que los resultados de control de calidad han sido inspeccionados para
asegurar la calidad de la corrida analítica. Esta documentación se logra manteniendo
una bitácora de Control de Calidad y usando la gráfica de Levey y Jennings en forma
regular. La bitácora de Control de Calidad se puede llevar en computadora o en papel.
La bitácora debe identificar el nombre del análisis, el instrumento, unidades, la fecha en
que se realiza el análisis, las iniciales del nombre de la persona que realiza el análisis y
los resultados para cada nivel analizado. Los elementos opcionales para la bitácora
incluyen: método y temperatura del análisis. Debe haber un espacio para escribir las
acciones tomadas para resolver cualquier situación que se identifique como “fuera de
control” o inaceptable, así como un lugar para documentar la revisión de supervisión.
La desviación estándar se usa comúnmente para preparar graficas de Levey y Jennings,

la cual se usa para verificar valores de control de calidad sucesivo. Se crea una gráfica
32
para cada prueba y nivel de control.
Para la construcción de la gráfica de Levey y Jennings se requiere del promedio y los

límites de control basados en 2 DS (95%) y 3 DS (99%) desviaciones estándar, con la
curva de distribución normal volteada a 90º de su posición habitual.
Una vez que se introducen los resultados de Control de Calidad en la bitácora de Control
de Calidad, se realizan los cálculos estadísticos necesarios para construir la gráfica de
Levey y Jennings y graficar los valores obtenidos, lo que va a permitir la visualización en
forma rápida del comportamiento del proceso analítico día a día y fijar límites de
variabilidad permisibles para determinar la exactitud y la precisión determinando la
calidad de la corrida.
En 1989 James Westgard publicó un artículo que establece las bases para evaluar la
calidad de corridas analíticas para laboratorios médicos, el cual se basa en los principios
de control del proceso estadístico y consta de 6 reglas básicas utilizadas de manera
individual o en combinación.
El técnico que lleva a cabo el análisis debe investigar errores sistemáticos y errores
aleatorios que están presentes en condiciones normales de trabajo y son factibles de
minimización, pero no de eliminación.
Esta gráfica principalmente permite detectar de manera inmediata cualquier variación

significativa, como es el caso de las tendencias y los desplazamientos.
Los desplazamientos se caracterizan por un salto repentino o un cambio en los valores

promedios a causa de una mala calibración, el deterioro de los reactivos, los cambios en
la temperatura y las pipetas descalibradas.
La tendencia es una desviación progresiva de los resultados hacia un mismo lado de la

media y puede deberse a cambios graduales en un instrumento o en los reactivos.

• Hojas de papel milimétrico.
• Regla.
• Calculadora.
• Lápices de colores.
33
A. Utiliza los datos y cálculos realizados en la práctica anterior (Campana de
Gauss), para la construcción de la gráfica de Levey y Jennings.
A. Con los datos estadísticos solicitados, construye la Gráfica de Control de Levey
y Jenings, colocando los días en el eje de las X y la concentración con las
unidades correspondientes en el eje de las Y. Utiliza una hoja de papel
milimétrico completa.
B. Dibuja la media, utilizando una línea continua de color negro paralela al eje de
las X.
C. Dibuja una línea roja discontinua paralela hacia arriba de la media que
corresponderá a + 1 DS y otra línea similar hacia abajo de la media que
D. Dibuja una línea roja continua paralela hacia arriba de la media que
E. Dibujar una doble línea roja continua paralela hacia arriba de la media que
F. Grafica cada una de las concentraciones conforme a los días o al número de
dato.
G. Pega la gráfica de Levey y Jennings en el siguiente espacio.
Anota la interpretación de los resultados de la gráfica obtenida según las reglas de
Westgard y con ello determina el control de calidad el laboratorio clínico.
7.- CONCLUSIONES
34
8.- CUESTIONARIO
1. Escribe las reglas de Westgard que permiten determinar el control de calidad en
un laboratorio clínico.
2. ¿Qué es el programa de control de calidad intralaboratorio?
3. ¿Cuáles son las acciones a tomar cuando un análisis cae fuera de control?
Menciona tres.
4. Esquematiza una gráfica de Levey Jennings en la que indiques un

desplazamiento y una tendencia.


PEARSON.
4. BERNARD, Henry John. (1993), Diagnóstico y Tratamiento Clínico por el

Laboratorio, 9ª., Barcelona, Ed. Masson-Salvat Medicina.
5. W. Gregory Cooper. Lecciones básicas de Control de Calidad en el Laboratorio.

Bio-Rad Laboratories, Inc. Clinical Diagnostics Group.
35
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 7
SUMAS ACUMULADAS (CUSUM).
1.- COMPETENCIA
Determina el control de calidad en el laboratorio clínico con base al grafico control
correspondiente a las sumas acumulativas, adaptándose a las características del
laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

CUSUM es un método gráfico que representa el grado de desviación respecto a la media
frente a la fecha, detecta más fácilmente los errores sistemáticos (técnico) y las
tendencias que otros gráficos como el de Levey y Jennings.
Consiste en el cálculo de la suma acumulativa de las diferencias de los valores medidos

en relación con los valores asignados, (el valor correcto calculado).
Es un procedimiento directo porque tan sólo se resta el valor asignado a los valores
observados diariamente y se anota la diferencia acumulada; enseguida se grafican los
valores observados y las sumas acumuladas diarias versus la muestra correspondiente,
esta gráfica posee la ventaja de que los cambios que no se manifiestan en otras gráficas
de control de calidad son aquí se evidencian.
Cuando la inclinación de la curva se desvía marcadamente de cero, es decir se dirige

hacia arriba o hacia abajo, se podría considerar que el valor asignado no es el correcto o
existe una desviación que indica inexactitud en las mediciones.
Se realiza de la siguiente manera:
S1 = X1 - K Donde:
S2 = S1 + (X2-K) X= valor o dato obtenido
S3 = S2 + (X3-K) K= media
S4 = S3 + (X4-K) S= día o número de muestra
S5 = S4 + (X5-K)
Sn = Sn – 1 + (Xn-K)
Ejemplo: Datos de glucosa: 99, 98, 104, 94, 102. Media (X)= 99.4 = 99
S1 = 99-99 = 0
S2 = 0 + (98-99) = -1
36
S3 = -1 + (104-99) = 4
S4 = 4 + (94-99) = -1
S5= -1 + (102-99) = 2
Ejemplo de gráficas de CUSUM
3. EQUIPO, MATERIALES Y REACTIVOS

Datos obtenidos en práctica
anterior. Lápiz, goma,
sacapuntas.
Hojas milimétricas.
Regla
37
Realiza la suma acumulativa con las concentraciones de glucosa obtenidas en la práctica
de Campana de Gauss.

En una hoja milimétrica completa, elabora la gráfica de sumas acumulativas con los
resultados que obtuviste y pégala en el siguiente espacio.

Compara la gráfica de Levey y Jennings con la de sumas acumulativas para que realices
el análisis de resultados.
7.- CONCLUSIONES
38
8.- CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es más específico el gráfico de sumas acumulativas que otros gráficos
control en el control de calidad intralaboratorio?
2. ¿Qué visualizas de manera inmediata en el gráfico de sumas acumulativas?
3. ¿Qué tipo de errores se detectan con las sumas acumulativas?
4. Anota los dos datos estadísticos de utilidad en la elaboración de la gráfica

CUSUM.


PEARSON.
39
Y TECNOLÓGICOS 15
Clave: ICC-P8 Revisión: 09-agosto-21 Fecha de emisión: 02 agosto-21 Página: 40 de 93
PRÁCTICA No. 8
LINEALIDAD DE UN MÉTODO DE LABORATORIO CLÍNICO.
1. COMPETENCIA
Evalúa la linealidad del método de glucosa, mediante la elaboración de una curva de
calibración para conocer el comportamiento del método de diagnóstico utilizado,
adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

El objetivo de un laboratorio clínico es suministrar datos que contribuyan al diagnóstico
de enfermedades, su prevención y terapéutica por parte del médico tratante, para ello es
necesario utilizar métodos analíticos confiables, precisos y adecuados. Por lo tanto, para
la determinación de un analito, cualquiera que sea la metodología a implementar, se
requiere la optimización de las condiciones experimentales que determinan la eficiencia
del ensayo, debido a que éstas presentan variaciones en función de las características
propias de cada equipo y de los requerimientos operacionales del laboratorio donde se
llevará a cabo la medición. A los efectos se han emitido una serie de guías, normas y
reglamentos que buscan imponer condiciones normalizadas para la ejecución de los
métodos analíticos y evitar así que diferentes laboratorios que trabajan con la misma
muestra, la misma metodología analítica y con personal capacitado, obtengan resultados
con una variabilidad muy amplia. Entre estas normas se encuentran las emitidas por la
Organización Internacional de Normalización (ISO) que a nivel específico del laboratorio
clínico comprenden la Guía ISO/IEC 17025:1999 “Requisitos generales relativos a la
competencia de los laboratorios de ensayo y calibración” y la norma ISO 15189-2003
“Laboratorios médicos: Requisitos particulares relativos a la calidad y competencia”.
Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis cuantitativo es el llamado de
40
calibración, que implica la construcción de una “curva de calibración”, que es la
representación gráfica de una señal que se mide en función de la concentración de un
analito. La calibración incluye la selección de un modelo para estimar los parámetros que
permitan determinar la linealidad de esa curva y, en consecuencia, la capacidad de un
método analítico para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la
concentración de un compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de
trabajo. En el procedimiento se compara una propiedad del analito con la de estándares
de concentración conocida del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy
similares a éste). Para realizar la comparación se requiere utilizar métodos y equipos
apropiados para la resolución del problema de acuerdo al analito que se desee
determinar.
La etapa de calibración analítica se realiza mediante un modelo de línea recta que

consiste en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie de “n” puntos
experimentales, donde cada punto se encuentra definido por una variable “x” (variable
independiente, generalmente concentración del analito de interés) y una variable “y”
(variable dependiente, generalmente respuesta instrumental). La recta de calibrado se
encuentra definida por una ordenada al origen (b) y una pendiente (m), mediante la
ecuación y = mx + b. A partir de la curva de calibración (conjunto de concentraciones que
describen el intervalo en el cual se deberá cuantificar el compuesto por analizar) y a fin
de asegurar que la recta encontrada con los puntos experimentales se ajuste
correctamente al modelo matemático de la ecuación se calculan los valores de la
ordenada al origen, la pendiente y el coeficiente de determinación (r 2).
En la práctica para construir la curva de calibración se utilizan disoluciones que
contienen concentraciones conocidas del analito, llamadas disoluciones estándar. Los
estándares para construir la recta de calibrado deben ser preparadas en forma
independiente, a partir de una o varias soluciones stock; el número de puntos a escoger
dependerá del uso que se dé a la recta de calibrado. Si bien con dos puntos se puede
construir una curva, estadísticamente se requieren por los menos tres para que la curva
sea confiable; este número se suele aplicar a métodos de rutina perfectamente
establecidos y validados (proceso por el cual se demuestra, por estudios de laboratorio,
que la capacidad del método satisface los requisitos para la aplicación analítica
41
deseada). Sin embargo, si el método está en una etapa de desarrollo, el número de
puntos mínimo será de cinco o seis para que la variabilidad sea mínima y el intervalo
lineal sea suficiente. Hay que considerar que un aumento en el número de puntos
experimentales implicara mayor fiabilidad en la recta de calibrado. La verificación del
comportamiento de un analito mediante una curva de calibración requiere un mínimo de
cinco puntos para un intervalo de confianza del 95 % y de ocho puntos para uno del 99
%.
Cabe mencionar que en la práctica es muy importante efectuar la medida del “blanco”.
Se llaman disoluciones blanco o simplemente blancos a las disoluciones que contienen
todos los reactivos y disolventes usados en el análisis, pero sin el analito. Los blancos
miden la respuesta del procedimiento analítico a las impurezas o especies
interferentes que existan en los reactivos o, simplemente, a las especiales
características del instrumento de medida. La medida de la señal del blanco puede
realizarse: a) registrando directamente la señal del blanco e incluir este punto
experimental en la recta de calibrado con x=0 como señal de blanco; o b) restar a la
señal medida con el analito, la señal media de varias lecturas del blanco (señal
observada – blanco).
Es importante señalar que los métodos analíticos son establecidos por instituciones
nacionales o internacionales que proporcionan procedimientos y características del
método y que concluyen con indicadores de calidad denominados características del
desempeño analítico que suelen incluir: exactitud, precisión, especificidad, además de
los parámetros que se determinan a partir de las curvas de calibración.
Independientemente de la técnica instrumental responsable de la señal, los parámetros
que se determinan a partir de las curvas de calibración obtenidas son:
• Exactitud
• Sesgo
• Precisión
• Linealidad
• Límite de detección y de cuantificación,
• Sensibilidad
Entre otros (CENAM-ema, 2008b).
42
Linealidad del sistema de medición
La linealidad de la curva de calibración (habilidad para asegurar que los resultados
obtenidos directamente o por medio de una transformación matemática definida) es un
requerimiento fundamental en la práctica del análisis químico cuando se realizan curvas
de calibración. En general la linealidad no se cuantifica, pero se observa por simple
inspección o mediante pruebas significativas de no linealidad. Como ya se mencionó
con anterioridad, para demostrar la linealidad se requieren cumplir ciertos criterios de
aceptación en la que estadísticamente se puede justificar esa linealidad; para ello es
necesario calcular:
• La pendiente (m)
• La ordenada al origen (b)
• El coeficiente de determinación (r2)
2. EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS

• Espectrofotómetro • 7 celdas • Agua destilada
• Balanza analítica • Pipetas semiautomáticas • Reactivo de glucosa
• Puntas adecuadas para la • Kit de reactivos para
micropipeta a utilizar determinación de
• 1 pipeta de 5 mL glucosa
• 1 pipeta de 10 mL
• Perilla de succión
• Matraz aforado de 100 mL
• Espátula
• 5 tubos de ensayo de 16X100
• 6 Tubos de Khan
• Gradilla
• Papel absorbente
• Papel milimétrico
• Regla

1. Preparar una solución stock de glucosa de 500 mg/dL
2. Realizar las diluciones correspondientes, de acuerdo con lo indicado en la tabla
siguiente:
No. De Sol. Stock de Agua destilada Dilución Concentración Lectura de
tubo glucosa mL (soluto) mL (solvente) mg/dL absorbancia
1 10.0 0.0
2 7.0 3.0
3 4.0 6.0
4 2.5 7.5
5 1.5 9.5
6 1.0 9.0
43
3. Lleva a cabo el procedimiento para la cuantificación de glucosa con base al
instructivo.
4. Toma las lecturas de absorbancia y registrar los resultados obtenidos en la tabla
anterior.
5. Utiliza una hoja de papel milimétrico y regla para construir el gráfico de calibración,
en el eje de las X anotar las concentraciones (mg/dL) y sobre el eje de las Y las
absorbancias registradas.

1. Pegar el gráfico elaborado
2. Estimar la linealidad del gráfico obtenido utilizando el método de regresión lineal.
3. Calcular la exactitud, sesgo, precisión y sensibilidad con los resultados obtenidos,
aplicando las fórmulas descritas a continuación.
Linealidad
La linealidad es la capacidad de un método de análisis, dentro de un determinado
intervalo, de dar una respuesta o resultados instrumentales que sean proporcionales a la
cantidad del analito que se habrá de determinar en la muestra de laboratorio.
Con el fin de determinar el rango lineal se puede realizar mediante un gráfico de
concentración versus respuesta, que se conoce como Función Respuesta (normalmente
llamada recta de calibrado). Ésta se establece con valores formados por, un blanco y los
patrones de trabajos de valor teórico conocido, que cubran el intervalo de trabajo (en
general, se utiliza un mínimo de 4 valores). Luego de realizar el grafico se puede observar
el comportamiento de la curva y establecer cualitativamente el rango lineal.
Exactitud (veracidad)
La exactitud o veracidad del método se puede estimar por medio del cálculo del
porcentaje de recuperación. El cálculo de porcentaje de recuperación se obtiene con la
siguiente ecuación:
% Recuperación = Concentración obtenida x 100

Concentración de referencia
En validación el porcentaje de recuperación aceptable esta entre el 85 y 115%

(IPAC, 2014; CENAM ema, 2008).
44
Sesgo
Mide el error sistemático o determinado de un método analítico, en contraste con el
error aleatorio. Elsesgo se define mediante la ecuación:
_
Sesgo= X - µ
_
Dónde: X= es el promedio de la concentración experimental
µ= es la concentración verdadera (CENAM ema, 2009).
Precisión
Indica el grado de concordancia entre los resultados obtenidos para réplicas de una
misma muestra, aplicando el mismo procedimiento experimental bajo condiciones
prefijadas. Usualmente se expresa en términos de la DESVIACIÓN ESTÁNDAR (S).
Otra forma de expresar la precisión es la Desviación Estándar Relativa o COEFICIENTE
DE VARIACIÓN (CV), que se calcula:
CV= S x 100
El criterio de aceptación para los métodos instrumentales es < 2 % de CV (Christian,

2009; Harvey 2002).
Sensibilidad
La sensibilidad de un método mide su capacidad para discriminar entre pequeñas
diferencias en la concentración del analito. Según la IUPAC (2014), la sensibilidad (m)
se define como el cociente entre la señal medida (absorbancia, s) y la concentración (c)
de analito:
m = s ⁄c
45
Cálculos
Parámetros analíticos de calidad para la
Validación del Método.
Exactitud
Sesgo
Precisión
Sensibilidad
46
6- ANÁLISIS DE RESULTADOS
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. Define los siguientes términos: Exactitud, sensibilidad, precisión, linealidad,
especificidad analítica, interferencia analítica, límite de detección, intervalo de
medición y error total.
2. Explica los términos de verificación y validación.
3. ¿Cuáles son las diferencias entre estándar de medición primario, secundario,

de referencia y de trabajo?
47
4. Norma mexicana que establece que el laboratorio debe demostrar que puede
realizar correctamente los métodos normalizados antes de aplicarlos

1. MURALI, Dharan, M. (2005). Control de calidad en los laboratorios clínicos.
España: Reverté.
PRADO.

PEARSON.
4. HARRIS, D. (2001). Análisis químico cuantitativo. España: Reverté.
5. Mexicanos, C. P. (2014). Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos.

Tomo I. México: Sistema de Gestión editorial.
48
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 9
VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DE MATERIAL VOLUMÉTRICO
1.- COMPETENCIA
Verifica la calibración del material volumétrico utilizado en el laboratorio clínico y,
mediante comparación de los resultados obtenidos con los límites de tolerancia
permitidos evalúa si dicho material es adecuado para su utilización en el trabajo de
laboratorio, adaptándose a las características del laboratorio.
2. MARCO TEÓRICO
La medición de volumen es una de las magnitudes importantes en el laboratorio, ya
que representa la base de prácticamente la mayor parte de las mediciones analíticas.
El volumen se mide utilizando material volumétrico como pipetas, matraces
volumétricos y buretas. El material volumétrico tiene por finalidad la medición exacta
de volúmenes y debe ser controlado antes de utilizarlo. Las lecturas que nos da el
material volumétrico se comprueban a través de la medición de masa, la cual se
determina mediante el uso de instrumentos para pesar (balanzas). Conociendo la
masa exacta, la temperatura del fluido pesado y su densidad podemos determinar el
volumen real medido.
Calibración
Para obtener el volumen calibrado a partir de la masa de agua es importante tener en
cuenta que:
• La densidad del agua varía con la temperatura.
• El volumen del recipiente de vidrio varía con la temperatura.
• El agua que llena el recipiente se pesa en aire.
En esta práctica se verificará la calibración de material volumétrico mediante pesada y

utilización de la densidad. Se va a determinar el volumen contenido en un recipiente
(referido a una temperatura de 20° C) a partir de la pesada del volumen de agua
destilada contenida en dicho recipiente. Es importante puntualizar que, aunque no se
va a utilizar ningún patrón de la magnitud que se desea medir (volumen), es trazable al
sistema internacional de unidades, ya que la medida de peso es la que nos servirá
para calcular la medida de volumen y, debe obtenerse con una balanza calibrada con
pesas certificadas. Este método se utiliza para verificar capacidades, por ejemplo,
cuando el material volumétrico es nuevo. La metodología es aplicable a todo material
49
volumétrico en general (pipetas y buretas, tanto manuales como semiautomáticas, y
matraces volumétricos).
Operaciones previas Antes de proceder a la verificación de la calibración del

material volumétrico:
Debemos asegurarnos de que esté completamente limpio y seco. El método de
limpieza tradicional consiste en utilizar primeramente agua y en seguida detergente, y
después se vuelve a lavar, primero con agua de la llave y a continuación con agua
destilada. Para eliminar el agua, se debe enjuagar el material volumétrico con alcohol
etílico puro y, para eliminar éste, se realiza un último enjuague con acetona pura.
Para la limpieza de los patrones de volumen, la norma ISO 4787:2016 recomienda el
uso de disolventes más potentes, aunque éstos pueden ser excesivos para el uso
normal del material volumétrico en el laboratorio de ensayo. El material volumétrico
no debe ser secado en estufa, ya que puede provocar distorsión del vidrio y causar
un cambio en el volumen.
Los dos principales objetivos de la limpieza son en primer lugar obtener una propiedad
reproducible de la superficie interior del material volumétrico, de tal manera que el agua
pueda ascender y descender en una película fina, regular y homogénea, y en segundo
lugar obtener condiciones de referencia en el cuello del recipiente, de tal forma que la
tensión superficial forme un menisco reproducible con un ángulo plano y una altura
unificada.

• Balanza analítica. • 1 Matraz aforado de 25 mL • Papel absorbente
• Termómetro. • 1 Matraz aforado de 50 mL • Extran neutro al 2%.
• 1 Pipeta graduada de 5 mL • Agua destilada.
• 1 Propipeta
• 1 Vaso de precipitados de 100 mL
• Escobillón.
4.- DESCRIPCIÓN DE EXPERIMENTOS.

Verificación de la calibración de una pipeta
1. Colocar un vaso de precipitados donde se verterá el agua contenida en la pipeta
que se desea calibrar, dentro de la balanza y oprimir el botón de tara.
2. Llenar la pipeta con agua destilada a temperatura ambiente, aspirando el agua (con
la propipeta) hasta que el menisco se encuentre por encima de la marca de
calibrado de fábrica.
3. Mantener con la propipeta el agua en su lugar; eliminar cuidadosamente las gotas
de agua que estén adheridas al exterior de la pipeta secándolas con un papel
suave.
4. Sostener verticalmente la pipeta sobre un recipiente y enrasar el nivel del menisco
presionando el botón de expulsar de la propipeta, bajando el líquido hasta que
50
coincida con la marca de calibrado (aforar).
5. Transferir el agua al vaso de precipitados 50 mL limpio y previamente colocado en
el interior de la balanza, la cual ahora registrará solamente la masa del agua
contenida en el material a calibrar, procurando que la punta de la pipeta esté
dentro del vaso de precipitados para evitar pérdidas por salpicaduras.
6. Dejar que el agua de la pipeta escurra libremente por 10 segundos. No debe
soplarse para que salga la pequeña porción de agua que queda en la punta de la
pipeta ya que ésta ha sido tomada en cuenta en el calibrado original de la misma.
7. Anotar la masa de agua del volumen real transferido.
8. Tarar nuevamente el matraz y repetir el procedimiento tres veces.
9. Una vez obtenida la masa de agua contenida en el material volumétrico que
queremos calibrar, utilizaremos el valor de la densidad (δ) para convertir un valor
de masa (m) en uno de volumen (V), a este valor lo denominaremos volumen
experimental; por lo tanto, V = m / δ. Recordemos que la densidad del agua varía
con la temperatura, entonces, para obtener el valor real de la densidad del agua
debemos medir la temperatura del agua vertida y comparar con el valor asignado
según el anexo 7.
10. Los valores del volumen experimental se suman, para obtener la media que
corresponde al valor de volumen real. Ahora, para obtener el límite de tolerancia
se resta el volumen de fábrica que está impreso en el material a calibrar (Vt)
menos el volumen real (Vr).
Límite de tolerancia= Vt –Vr
11. Para verificar la calidad del material, comparar el resultado con lo indicado en el
anexo 8 y con base en el resultado decidir si el material se aprueba o se rechaza.
NOTA: En lugar del vaso de precipitados, se puede usar un picnómetro de volumen

apropiado con termómetro acoplado y capilar lateral.
51
Verificación de la calibración de matraz volumétrico
Para la calibración del matraz volumétrico de 50 mL, se requiere conocer la masa del
agua contenida en el mismo (diferencia entre el matraz lleno y el vacío y seco). El
tratamiento de los volúmenes y masas medidas es igual al de la pipeta.

Volumen Masa de Volumen real Media del Límite de tolerancia
teórico agua (V = m / δ) volumen real (Diferencia entre el
(Pipeta) volumen teórico y el real)
Calidad del material

(aprobado/rechazado)
Volumen Masa de Volumen real Media del Límite de tolerancia

teórico agua (V = m / δ) volumen real (Diferencia entre el
(Matraz) volumen teórico y el real)
Calidad del material

(aprobado/rechazado)
7.- CONCLUSIONES
52
8.- CUESTIONARIO
1. Especifique ¿cuál es la calidad del agua que se utiliza para la calibración del
material volumétrico?
2. ¿Cuál es temperatura máxima de secado a la que se puede someter un material

volumétrico y por qué?
3. Esquematiza la información indicada en el bulbo de la pipeta volumétrica, su

significado e importancia.
4. ¿Qué es el tiempo de vertido de una pipeta y cuáles son los límites o de

tolerancia?

1. HARRIS, Daniel C. (1992), Análisis químico cuantitativo, México, editorial
Iberoamérica.
2. ISO 4787:2016 Laboratory glassware – Volumetric glassware – Methods for use

and testing of capacity’ en: https://www.iso.org/standard/41807.html
PRADO.

PEARSON.
6. http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/martinezma/archivos/Calibracion.
pdf.
53
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 10
VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DEL ESPECTROFOTÓMETRO.
1.- COMPETENCIA
Obtiene la longitud de onda de máxima absorción del cloruro de cobalto para la
verificación de la calibración de la longitud de onda y sensibilidad de un
espectrofotómetro, mediante su comparación con el valor teórico, adaptándose a las
2.- MARCO TEÓRICO

El principal objetivo de los laboratorios de análisis clínicos es obtener información
analítica significativa, es decir, resultados confiables a partir de las muestras
biológicas procesadas, que permita adoptar decisiones técnicamente correctas para la
resolución de problemas científicos o técnicos. La confiabilidad de las determinaciones
analíticas en química clínica depende, entre otros aspectos, tanto del uso adecuado
como del buen funcionamiento de los equipos fotométricos. La adecuada calibración
del instrumental es uno de los factores claves para lograr exactitud y precisión en los
resultados analíticos.
En esta práctica se evaluarán dos características que permiten verificar el correcto

funcionamiento de los espectrofotómetros: la calibración de la longitud de onda y la
sensibilidad, mediante la determinación de la absorbancia de una solución de cloruro
de cobalto al 2.2 % en HCl al 1 %.
Sí el equipo da una absorbancia menor a la esperada con la solución de cloruro de

cobalto al 2.2 % en HCl al 1 % no tiene la sensibilidad adecuada (le falta sensibilidad).
Si la longitud de onda (512 nm) en la que se obtiene la absorbancia máxima de la

misma solución de cobalto es diferente a la indicada, el equipo está descalibrado en la
longitud de onda.
Cada espectrofotómetro debe verificarse periódicamente para comprobar su correcto

funcionamiento. Esto es especialmente importante después de la sustitución de un filtro
roto, de una lámpara, de un fototubo, o simplemente para medir la vida media restante
de la lámpara. Debe verificarse tanto la calibración de la longitud de onda como la
absorbancia a diferentes longitudes de onda (SENSIBILIDAD).
54
Las mediciones de lectura del equipo están sujetas a fuentes de errores determinados,
hecho que, debe tenerse en cuenta no importando qué tan precisas y exactas sean las
mediciones, por lo tanto, es necesario utilizar procedimientos que reduzcan el error
instrumental a nivel que no sea significativo para la exactitud y la precisión del método
utilizado. Los errores instrumentales afectan a los sistemas químicos que obedecen a
la ley General de la fotometría (Ley de Lambert-Beer), ocasionando desviaciones
negativas a dicha ley, por lo que es importante realizar periódicamente la calibración
del instrumento.

• Espectrofotómetro • 5 mL de CoCl2 al 2.2% en HCl al 1%.
• Dos celdas de • Agua destilada.
plástico
• Un vaso de p.p. de 50 mL
• Papel absorbente.
• Papel milimétrico.
• Regla
4.- DESCRIPCIÓN DE EXPERIMENTOS:

1. Encender el espectrofotómetro 10 minutos antes de utilizarlo.
2. Adicionar HCl al 1% en una celda de lectura y ajustar el instrumento a cero de
absorbancia, a una longitud de onda de 450 nm.
3. Colocar la solución de cloruro de cobalto 2.2 % en HCl al 1 % hasta la marca
de la celda y registrar la absorbancia.
4. Registrar la absorbancia, variando la longitud de onda de 10 en 10 nanómetros
de 450 a 500 nm y a partir de aquí hasta 520 de 2 en 2, continuar de 520 hasta
550 de 10 en 10 nanómetros.
5. Utilizar el papel milimétrico para trazar una gráfica de longitud de onda (eje de
la x) contra absorbancia (eje de las y),
6. Observar la longitud de onda en la que se obtiene la máxima absorbancia,
comparar los resultados experimentales con los teóricos y evaluar la
calibración y la sensibilidad del instrumento.
55
5.-REGISTRO DE RESULTADOS Y OBSERVACIONES
CoCl2 al 2.2% en HCl al 1%
λ (nm) As ESPECTROFOTÓMETRO 1 As ESPECTROFOTÓMETRO 2 As ESPECTROFOTÓMETRO 3
450 As ESPECTROFOTÓMETRO 1
460
470
480
490
500
502
504
506
508
510
512
514
516
518
520
530
540
550

¿Cuál fue el valor de la longitud de onda máxima del CoCl 2 y cómo es este con
respecto al valor teórico?
Si encontraste alguna diferencia, ¿a qué crees que se deba?
¿Consideras que el espectrofotómetro tiene la sensibilidad y calibración ideal para ser

utilizado? Si, No, ¿por qué?
56
Finalmente, ¿crees que necesita calibrarse el espectrofotómetro que utilizaste?
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. Anota la definición de calibración y sensibilidad del espectrofotómetro.
2. ¿Qué es longitud de onda de máxima absorción?
3. Investiga la longitud de absorbancia máxima y el valor de absorbancia teórico

para el CoCl2 al 2.2 % disuelto en HCl al 1 %.
4. Anota 3 características físicas y 3 características químicas del CoCl2.


PEARSON.
4. PACAL (2005). Manual del curso de control de calidad en Química Clínica,

México.
57
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 11
PREPARACIÓN DE SUEROS CONTROL
1.- COMPETENCIA
Prepara sueros control para la verificación del control de calidad intralaboratorio,
2. MARCO TEÓRICO
El control de calidad interno (CCI) requiere el análisis de una o más muestras control
de valores conocidos, utilizadas al mismo tiempo y en paralelo con las muestras de
los pacientes.
El conocimiento del valor promedio, la desviación estándar y el coeficiente de

variación de las muestras control, permiten al responsable del aseguramiento y
control de calidad del laboratorio clínico, evaluar la precisión del sistema analítico
utilizado para las respectivas determinaciones.
Esta precisión es importante, porque con ella el laboratorio puede evaluar y demostrar
que su sistema analítico está en conformidad con los procedimientos e instrucciones
de trabajo implementados para sus determinaciones.
Como se supone que lo que ocurre a la muestra de control les ocurre a las muestras
de los pacientes, cuando no se observan anormalidades que atestigüen que el
procedimiento analítico tiene prestaciones que se apartan de los requisitos de calidad
elegidos, se concluye que las determinaciones de las muestras de los pacientes son
fiables y se pueden proceder al informe de los resultados.
La determinación del valor de la muestra de control interno de la calidad debe

realizarla el laboratorio clínico, utilizando su método, su equipamiento y ejecutada por
su propio personal porque la variabilidad encontrada, la desviación estándar, debe
incluir todas las posibilidades de no conformidad inherentes a los procedimientos
implantados y así determinar su propia variabilidad analítica.
Los materiales que se utilicen para el CCI deben cumplir con ciertos requisitos:
• Matriz humana.
• Baja turbidez
58
• Estabilidad de los componentes de por lo menos un año
• Que se pueden almacenar a -20oC o por liofilización.
• Que den negativo a VIH y Hepatitis.
• Que los valores asignados se encuentren cercanos a las decisiones clínicas.
• Los materiales de control no deben utilizarse como estándares o calibradores.
Cuando se preparan los sueros control en el laboratorio, se debe trabajar

limpiamente reduciendo al mínimo las posibilidades de contaminación bacteriana,
en lo posible evitar agregar cualquier tipo de sustancia, aunque normalmente es
necesario ajustar la concentración de glucosa. Es muy útil disponer de un material
de control de este tipo, preparado con los desechos de los sueros de los
pacientes.
• Refrigerador. • Gradillametálica. • Reactivo para tromboplastina.

• Centrifuga. • Tubos de ensayo. 13 x 100
• Baño maría. • Agitador de vidrio.
• Pipeta serológica de 1 mL
• Pipeta graduada de 5 mL
• Tubos de Khan

Prepara sueros control siguiendo la técnica que a continuación se describe:
A. Colocarse guantes y recoger diariamente el suero restante en un tubo de

ensayo, etiquétalo con la fecha y las iniciales del técnico, congelarlos a -20oC.
B. Cuando ya se tenga la cantidad deseada, descongelar los sueros a baño maría
a no más de 37oC.
C. Eliminar los sueros hemolizados, ictéricos, lipémicos y contaminados (HVB,
HVC, HIV).
D. Mezclar los sueros completamente con una varilla de vidrio agitándolo durante
15 minutos.
E. Depositar 4 mL de suero en cada tubo de ensayo.
F. Centrifugar a 3000 rpm durante 10 minutos.
G. Favorecer la precipitación de la fibrina en el suero agregando reactivo de
tromboplastina (TP) (0.1mL por cada mL de suero) e incubar 10 minutos a
37oC.
H. Centrifugar nuevamente a 3000 rpm por 10 minutos.
I. Verter alícuotas de 1.0 mL en tubos de ensayo y tapar herméticamente.
J. Etiquetar los tubos que contienen los sueros control, con la fecha de
preparación, iniciales del técnico y fecha de caducidad que es alrededor de 4
meses a partir de la fecha de preparación.
59
K. Almacenar alícuotas de suero control en posición vertical y congelar a -20oC.

Esquematizar los sueros que se eliminaron.
Esquematiza la preparación final de los sueros control.
7.- CONCLUSIONES
60
8.- CUESTIONARIO
1. Menciona los tipos de suero (matriz) con los que se pueden preparar los sueros control.
2. Menciona dos sueros control para propósitos especiales.
3. ¿Cómo prepararías un suero control anormal para glucosa?
4. Completa la siguiente tabla, anotando dos ventajas y dos desventajas de cada

tipo de suero.
Tipo de suero control Ventaja Desventaja
Intralaboratorio
Comercial

1. Confederación Latinoamericana de Bioquímica Clínica, (1995). Mejora continua
de la calidad, Guía para los laboratorios de América Latina, México, editorial
Panamericana.


PRADO.
4. BESTERFIELD, Dale H. (2009). CONTROL DE CALIDAD 8ª. edición, México,

ed. PEARSON.
61
Y TECNOLÓGICOS 15
PRÁCTICA No. 12
CONTROL DE CALIDAD EN LA PREPARACIÓN
DE MEDIOS DE CULTIVO.
1.- COMPETENCIA
Aplica los criterios de control de calidad en los medios de cultivo preparados en
bacteriología con base a la normatividad vigente, adaptándose a las características del
laboratorio.
3. MARCO TEÓRICO
Los sistemas de gestión de calidad de los laboratorios se establecen bajo los criterios
de la norma NMX-EC-17025-IMNC-2006. Requisitos generales. Los laboratorios de
ensayo y calibración deben de cumplir con una serie de requisitos administrativos y
técnicos que determinan la confiabilidad de los resultados. Entre los requisitos
administrativos la norma menciona que el laboratorio debe presentar una organización
definida, un manual de calidad, y procedimientos para el control de documentos,
compras, atención a clientes, subcontrataciones y quejas. Los requisitos técnicos son
que el laboratorio cuente con personal competente, condiciones ambientales
adecuadas, con equipos calibrados, y reactivos y materiales verificados. Por esa razón,
los laboratorios de ensayos microbiológicos acreditados deben de llevar a cabo el
control de la calidad de los reactivos utilizados, principalmente de los medios de cultivo.
Este es un proceso continuo y es uno de los puntos críticos de control en el análisis
microbiológico, del cual depende la confianza y competencia técnica de los resultados
que se emiten (NMX-EC- 17025-IMNC-2006).
Los medios de cultivo deben de cumplir con una serie de requisitos que marca la norma
ISO/TS 11133:2014 en la que se menciona que al adquirir un medio se debe solicitar
las especificaciones de calidad, el nombre del medio, la lista de componentes con las
cantidades, la fecha de caducidad, el número de lote y las condiciones de
almacenamiento. La calidad de los medios de cultivo preparados en el laboratorio
depende de su formulación correcta, de los procedimientos de preparación, de la
eliminación de os agentes microbianos contaminantes, y de las condiciones adecuadas
de envasado y almacenamiento (ISO/ TS 11133:2014).
Control de calidad en los medios deshidratados y de los aditivos comerciales

Recepción
La persona que recibe el producto, en la bitácora de recepción debe de:
62
• Anotar el nombre del medio de cultivo e identificarlo con una clave.
• Registrar la fecha de recepción, la de apertura y la de caducidad.
• Almacenar los envases en las condiciones especificadas por el fabricante.
• Verificar que los envases estén herméticamente cerrados, especialmente
cuando se trate de medio deshidratados pues no es recomendable utilizar
medios deshidratados que presenten apelmazamiento o un cambio de color.
Preparación de los medios de cultivo o aditivos

• Que el medio de cultivo esté conservado en el lugar adecuado de
acuerdo con las instrucciones del fabricante.
• Vigencia de la caducidad y fecha de apertura del envase.
• Que los recipientes estén perfectamente cerrados y por tanto no haya cambios
en la coloración y consistencia medio deshidratado
• Para la preparación de los medios de cultivo se siguen las indicaciones del
fabricante, sin embargo, en algunos casos los medios se preparan a partir de
cada uno de sus diferentes componentes.
• Se debe utilizar agua destilada que haya sido sometida a controles que
aseguren su calidad. Los principales análisis que se realizan al agua son:
conductividad, pH, determinación de mesofílicos aerobios y determinación de
metales pesados (Standard Methods for The Examination of Water and
Wastewater, 2005).
• Otro aspecto a tener en cuenta es el correcto lavado del material de vidrio. El
laboratorio debe contar con un procedimiento para esta actividad en el que se
especifica que el material contaminado debe esterilizarse y posteriormente
lavarse usando una solución de detergente neutro, el enjuague debe ser con
agua de la llave, posteriormente con agua destilada, y como paso final se realiza
la prueba con azul de bromotimol para determinar la eliminación de residuos
alcalinos o ácidos (Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, 2014).
Como normas generales hay que tener en cuenta que existen una serie de
factores que afectan
negativamente el buen funcionamiento de los medios:
• Sobrecalentamiento de los ingredientes basales.
• Adición de la sangre o de otros aditivos sensibles al calor por encima de 50°C.
• Envasar menor cantidad de medio que la recomendada
Identificación
Cada lote de medio o aditivo preparado se marcará en su envase (placa o tubo) de
forma inequívoca según se determine en el procedimiento de trabajo de cada
laboratorio. Esta marca debe permitir la identificación del tipo de medio de que se
trata, del lote y de la fecha de preparación.
63
Almacenamiento
Los medios se almacenarán en las condiciones adecuadas establecidas (T° ambiente,
o refrigeración 2- 8°C). Los medios en placa deben guardarse en bolsas de plástico
bien cerradas. Puede afectar negativamente:
• Almacenar a una T no adecuada
• Alternar la T de almacenamiento de T ambiente a 2-8°C.
• Almacenar las placas en bolsas abiertas o mal cerradas.
• Cerrar la bolsa contenedora de las placas antes de que estas se hayan enfriado
y gelificado apropiadamente.
Registro
De cada lote de medio de cultivo o de aditivo preparado se llevará un registro en la
bitácora de preparación:
• Nombre del medio de cultivo

• Lote de fabricante
• Lote interno del medio de cultivo
• Nombre del analista
• Cantidad de medio pesado
• Lote y volumen del agua destilada utilizado para la preparación del medio
• pH del medio antes de esterilizar
• No. de ciclo y condiciones de esterilización
Control de Calidad de los medios de cultivo

Sistemáticamente, de todos los medios preparados en el laboratorio antes de ponerlo
en uso, se controlará y se registrarán los resultados obtenidos de los siguientes
controles:
Se debe verificar que los medios de cultivo y diluyentes preparados por el laboratorio
tengan las características adecuadas con respecto a:
• Esterilidad
• Propiedades físicas: pH, color
• Productividad o promoción de crecimiento: Recuperación o supervivencia de los
microorganismos de interés.
• Selectividad: Inhibición de los microorganismos no deseados.
• Porcentaje de recuperación bacteriana. Es el rendimiento o recuperación de un
microorganismo que se espera que se desarrolle en el medio de cultivo.
Control de esterilidad de los medios de cultivo

Este procedimiento se lleva a cabo cada vez que se prepara un lote de medio de cultivo
o diluyente. Los medios de cultivo preparados se incuban en estufa a 35 °C durante
24h. Esta prueba se realiza sobre el 5% del lote preparado. El criterio de aceptación es
que no debe haber crecimiento, sí se presenta desarrollo se rechaza el lote.
64
Pruebas de funcionalidad de medios de cultivo
Para evaluar los medios de cultivo se usa una cepa de referencia apropiada para el
medio de acuerdo a la norma ISO 11133:2014 A partir de la cepa de trabajo, se
prepara un cultivo en fase estacionaria en un caldo no selectivo por ejemplo, caldo
nutritivo o caldo infusión cerebro corazón, con este cultivo se realizan las pruebas
correspondientes para cada medio de cultivo. Prueba de promoción de crecimiento
Para los medios de cultivo líquidos se realiza la prueba de promoción de crecimiento
para evaluar su productividad y selectividad.
Productividad en medios líquidos

Del cultivo en fase estacionaria se inoculan por separado 100, 10, 1, UFC/ mL en el
medio a probar, se incuba a la temperatura y tiempo correspondiente y se observa el
desarrollo en cada uno de los tubos inoculados con el microorganismo de prueba. Si el
medio de cultivo es conforme se espera que haya desarrollo en todos los tubos
inoculados y el lote de medio se acepta.
Selectividad
Para llevar a cabo la prueba de la selectividad se emplea un microorganismo que se
inhibido por el medio de cultivo selectivo por ejemplo para el caldo lauril sulfato se
evalúa el desarrollo del microorganismo que si crecen y otro que es inhibido por el
medio de cultivo. En este caso la cepa que sí crece en el medio de cultivo es
Escherichia coli ATCC 25922 y la cepa que se inhiben es Enterococcus faecalis ATCC
29212. El criterio de aceptación es observar crecimiento (turbidez) y producción de
gas en los tubos inoculados con E. coli e inhibición del desarrollo de E. faecalis (ISO
11133:2014).
Porcentaje de recuperación bacteriana

Es el rendimiento o recuperación de un microorganismo que se espera que se
desarrolle en el medio de cultivo. Este parámetro aplica únicamente para agares
empleados en la técnica de cuenta en placa por ejemplo en un medio de cultivo agar
cuenta estándar se evalúa el adecuado desarrollo de las cepas de prueba, empleando
agar soya tripticaseína como medio de cultivo de referencia. El porcentaje de
recuperación bacteriana (PR) es definido como sigue:
PR = (Ns /No) (100)
Donde:
Ns: es la cuenta total de colonias obtenida en el medio de cultivo a probar.
No: es la cuenta total de colonias obtenida en el medio de cultivo de referencia y debe
ser ≥ 100 UFC/mL. Si en cada lote de preparación el porcentaje de recuperación
bacteriana es ≥ 70 % se considera aceptable (Standard Methods for the Examinations
of Dairy Products, 2004).
65
Prueba de Selectividad en Agares selectivos
La prueba de selectividad se evalúa determinando la inhibición o crecimiento de los
microorganismos de prueba, así como la morfología colonial.
Almacenamiento de los medios de cultivo

Se debe determinar y verificar el período de validez de los medios preparados en las
condiciones de conservación especificadas. Se debe observar el cambio de color, la
evaporación, la deshidratación, y si ocurre crecimiento microbiano. En general los
medios preparados se guardan a 4° C, no más de tres meses (ISO/ TS 1113:2014).
Informe de Control de calidad

El informe como mínimo debe contener nombre del medio de cultivo evaluado, número
de lote de medio evaluado, fecha de realización del análisis, cepa usada (género y
especie del microorganismo, y clave), medio de referencia usado para evaluar la
productividad, los resultados de productividad, selectividad, promoción de crecimiento,
prueba ecométrica, porciento de recuperación bacteriana, prueba de esterilidad y pH.

Presentación en PWP, ISO 11133:2014, NMX-EC- 17025-IMNC-2006.
Fernández Espina C., (2005), Gestión de la calidad en el laboratorio clínico, México,
Panamericana.

En un pliego de papel bond blanco, en equipo elabora, el diagrama de flujo del control
de calidad de un medio de cultivo desde que es recibido en el laboratorio hasta que se
aprueba para su uso (sólido y líquido). Tómale una fotografía y pégala en los
resultados.
5.- REGISTRO DE RESULTADOS Y OBSERVACIONES Fotografía del diagrama de

flujo.
Realiza el llenado de la siguiente tabla, anotando 5 defectos de calidad en los medios
de cultivo al término de su preparación y la causa que lo originó.
DEFECTO DE CALIDAD CAUSA QUE ORIGINÓ EL DEFECTO
66
De lo anotado en los resultados, ¿cuáles serían las soluciones a las problemáticas
presentadas?
7.- CONCLUSIONES
En el siguiente espacio, realizar un ensayo, sin faltas de ortografía y letra legible,
sobre la importancia de la obtención de medios de cultivo aprobados para su uso en
el laboratorio de bacteriología clínica.
8.- CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es importante realizar un correcto ajuste (si es necesario) y
verificación del pH cuando se preparan medios de cultivo antes y después de la
esterilización?
2. ¿De qué manera afectaría en las determinaciones que se deseen realizar el
hecho de que un medio no sea estéril?
3. ¿Qué es una cepa de referencia y cuál es la diferencia con una cepa de
trabajo?
4. Si al realizar la prueba de promoción de crecimiento no se recuperan las cepas
mediante las cuales se realizó la resiembra, ¿cuál fue la causa y qué se
procede a realizar?

1. FERNÁNDEZ, Espina C., (2005), Gestión de la calidad en el laboratorio clínico, México,
Panamericana.
2. MURALI, Dharan, (2005). Control de calidad en los laboratorios clínicos. España:

Reverté.

PEARSON.
5. NMX-EC-17025-IMNC-2006 “Requisitos generales para la competencia de los

laboratorios de ensayo y de calibración”, IMNC, 2006.
6. Mexicanos, C. P. (2014). Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Tomo I.

México: Sistema de Gestión editorial.
67
Y TECNOLÓGICOS 15
CLÍN
Clave: ICC-AP1 Revisión: 09-agosto-21 Fecha de emisión: 02-agosto-21 Página: 68 de 93
O
ANEXO
PRÁCTICA No. 1
AJUSTE Y CALIBRACIÓN DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
1.- COMPETENCIA
Visualiza de manera clara y nítida las imágenes para su estudio, adaptándose a las
2.- MARCO TEÓRICO

El descubrimiento del microscopio hacia finales del siglo XVI, e inicios del XVII, señala
el inicio de la Biología Moderna. Los grandes microscopistas del siglo XVII:
Leeuwenhoek, Hooke y Swammerdan, impulsaron prodigiosamente nuestros
conocimientos, y revelaron a los ojos maravillados de sus contemporáneos el universo
de lo infinitamente pequeño. El descubrimiento de los animalículos y de las bacterias,
se debe sobre todo al genial Leeuwenhoek, quien abrió a las investigaciones un
campo de acción nueva e insospechada; hizo retroceder las fronteras del mundo
viviente hasta los límites extremos de la pequeñez y puso también de manifiesto el
infinito poder de expansión de la vida. Del conocimiento de los animalículos al de sus
estructuras, sólo había un paso, y éste se dio. El descubrimiento de la organización y
de la universalidad de la célula fueron sus consecuencias lógica y fecunda.
EL SISTEMA DE ILUMINACIÓN, COMPRENDE:

El espejo. Refleja los rayos del a fuente luminosa sobre el objeto. Por un lado, su
superficie es plana y cóncava por el otro. El lado cóncavo constituye un condensador
de escaso poder y no se debe usar si ya se cuenta con un condensador propiamente
dicho.
El condensador. Sirve para concentrar los rayos luminosos y dirigirlos hacia la
preparación a examinar. Se encuentra situado entre el espejo y la platina. Se puede
68
elevar (iluminación máxima) y bajar (iluminación mínima). Se debe centrar y ajustar
adecuadamente.
El diafragma. Se encuentra dentro del condensador, y se utiliza para reducir o ampliar
el ángulo, y, por lo tanto, también la cantidad de luz que entra en el condensador.
Cuanto más se abre el diafragma más se amplía el ángulo y en consecuencia
aumenta la A N y se pueden observar detalles más pequeños. Sin embargo, al mismo
tiempo se reduce el contraste.
Filtros. En algunos microscopios se utilizan filtros de colores (principalmente azules)
debajo del condensador. Se pueden dejar en su sitio o quitarlos, según el tipo de
preparación que se vaya a observar.
EL SISTEMA DE AJUSTE, COMPRENDE:

La cremallera de avance rápido (tornillo de enfoque rápido o macrométrico). Es el
tornillo más grande o mayor y se utiliza primero para lograr la aproximación del
enfoque.
Tornillo de avance lento (de enfoque fino o micrométrico). Hace que el objetivo se
desplace más lentamente. Se emplea para conseguir un enfoque perfecto del objeto.
Tornillo d ajuste del condensador. Se utiliza para elevar el condensador y aumentar la
iluminación o descenderlo y reducir la iluminación.
Tornillos para centrar el condensador. Puede haber tres tornillos colocados alrededor
del condensador: uno al frente, uno a la derecha y uno a la izquierda. Se usan para
centrar el condensador exactamente en relación con el objetivo.
Elevador del diafragma iris. Este es un pequeño elevador que se encuentra fijo al
condensador. Se puede mover para cerrar o abrir el diafragma, reduciendo o
aumentando así el ángulo y la intensidad de la luz.
Reguladores de la platina mecánica (tornillos de carro móvil). Sirven para desplazar la
laminilla (el portaobjetos) sobre la platina. Un tornillo para desplazar de adelante hacia
atrás y otro para desplazar de derecha a izquierda.
MANEJO DEL MICROSCOPIO

El esfuerzo excesivo y la fatiga deben evitarse en la observación microscópica: Esto
se consigue atendiendo a los siguientes hábitos:
69
1. El banco y la mesa deben estar a una altura que le permita al observador el
uso del microscopio en posición vertical, de manera confortable.
2. Encender la fuente de iluminación.
3. Montar la preparación que se va a observar.
4. Separar los binoculares adaptándolos a cada conformación.
5. Enfoque de imágenes. Para enfocar con cualquier objetivo, pero
especialmente con el seco fuerte (40x) y con el de inmersión (100x), deberá
acercarse el objetivo a la preparación observando de lado para controlar su
descenso hasta que la lente quede dentro de la distancia focal.
A. Objetivos de seco débil (aumento 5x, 10x). Descender el condensador al
fondo, bajar el objetivo hasta que quede sobre la preparación. Regresar el
objetivo con el tornillo macrométrico hasta que se vea la imagen clara en los
oculares. Reajustar un poco el condensador si la iluminación es insuficiente.
B. Objetivo de inmersión (100x). Se coloca la laminilla perfectamente seca,
agregar una pequeña gota de aceite de inmersión sobre la parte a examinar.
Regresar el condensador al fondo; bajar el objetivo 100x para que quede en
contacto con el aceite, lo más cerca posible. Aclarar la imagen con el tornillo
micrométrico.
6. Cambio de objetivos. Los microscopios modernos son fabricados de tal
manera que se puede pasar de un objetivo a otro para ver el mismo objeto.
7. Al terminar las observaciones, se deberán limpiar los objetivos y las
preparaciones.
CUIDADOS DEL MICROSCOPIO
Para observar una preparación al microscopio, deberán tenerse en cuenta las

siguientes indicaciones:
1. Asegurarse de las características de la preparación que se va a observar, es
decir, qué órgano o tejido se encuentra montado en la laminilla.
2. Limpiar la preparación con cuidado, no ejerciendo mucha fuerza sobre ella.
3. Antes de colocar la preparación sobre la platina del microscopio, véase
contra la luz a simple vista. Hay dos motivos para ello: Primeramente, el
70
cubreobjetos puede estar lleno de polvo, sucio o cubierto de aceite
endurecido, o bien que a medida que esto se hace, se podrá más fácilmente
deducir cuál es el origen de la preparación.
4. El ocular y la lente objetiva deben estar limpias, limpiándolos
preferentemente con papel manufacturado para éste propósito.
5. Seleccione un campo o campos apropiados y enfoque a 10x, posteriormente
a 40x y, finalmente a 100x colocando previamente una gota de aceite de
inmersión sobre la zona de la preparación que se va a observar.
FACTORES QUE DAÑAN AL MICROSCOPIO

Nunca se debe:
1. Lavar las lentes oculares y de los objetivos con alcohol.
2. Mojar los objetivos con xilol o alcohol.
3. Limpiar las lentes con papel ordinario.
4. Limpiar el soporte y la platina con xilol.
5. Limpiar las lentes interiores y objetivos con tela o papel, debe utilizarse un
pincel de pelo fino.
6. Dejar el microscopio sin sus oculares.
7. Guardar el microscopio con el aceite de inmersión en el objetivo.
8. Transportar el microscopio con una sola mano, se deben usar las dos, una bajo
el soporte o pie y la otra en el brazo.
ILUMINACIÓN DE KÖHLER
Sólo se puede hacer con microscopios que tengan diafragma de campo.
A. Poner una preparación en la platina.
B. Colocar el objetivo de 10x (seco débil) y enfocar.
C. Cerrar el diafragma de campo (sin filtro).
D. Cerrar el diafragma de contraste y abrirlo una cuarta parte.
E. Subir el condensador hasta el tope y bajarlo 1 o 2 mm.
F. Enfocar la muestra con los tornillos macro y micrométricos; si no se observan
los bordes del polígono, subir o bajar el condensador hasta enfocarlo. Si no se
logra, es porque el condensador está desajustado, y entonces se deja hasta el
tope.
71
G. Centrar el polígono con los tornillos del condensador.
H. Abrir el diafragma de campo para ver si el polígono está centrado (sólo hasta
llenar el campo, no más).
COEFICIENTES MICROMÉTRICOS
El micrómetro ocular es un disco de vidrio de 2 cm. de diámetro, en el cual puede
verse grabada una escala de 5 mm. dividida en 50 partes y generalmente numerada
de 10 en 10. Este disco se coloca sobre el diafragma de cualquier ocular,
transformándose así en ocular micrométrico. Cada división de esta escala mide 100
micras. El ocular micrométrico de fábrica es esencialmente lo mismo, pero su lente
ocular va montada sobre un corto tubo que puede acortarse o alargarse a voluntad
por deslizamiento en el tubo externo, permitiendo así enfocar con precisión la escala
micrométrica intercalada en él.
El micrómetro objetivo es un portaobjetos en cuyo centro se haya grabada una escala

de 1 o 2 mm. dividida en 100 o 200 partes; cada división mide, por tanto, 10 micras.
El coeficiente micrométrico es la cifra que expresa la equivalencia en micras de una
división de la escala del micrómetro ocular al emplear cada objetivo del microscopio,
suele denominarse “factor”, y a la operación para obtenerla “calibración del
microscopio”.
El coeficiente micrométrico es inversamente proporcional al poder de amplificación de

los objetivos. Usualmente se obtienen tres coeficientes micrométricos para cada
microscopio usando un solo ocular micrométrico (el 8x o el 10x, por ejemplo y los
objetivos 10x, 40x, o 45x y 90x o 100x), pero se puede determinar para cualquier otra
combinación de ocular y objetivo que se desee. También se hace lo mismo con lupas
y microscopios estereoscópicos.
OBTENCIÓN DEL COEFICIENTE MICROMÉTRICO

1. Coloque el micrómetro objetivo sobre la platina del microscopio como si fuera
una preparación cualquiera.
2. Centre y enfoque la escala, utilizando el objetivo que se vaya a “Calibrar”.
3. Sustituya el ocular normal por el ocular micrométrico o bien, se intercala en el
72
ocular normal, sobre el diafragma, el disco de vidrio que denominamos
micrómetro ocular. Para ello, basta con desenroscar la montura de la lente
ocular y, cuidadosamente, deje caer el disco sobre el diafragma interior, con la
escala grabada hacia abajo, ajuste enseguida, de nuevo en su tubo, la montura
quitada.
4. Se corrige el enfoque de ambas escalas (del objetivo y del ocular) procurando,
a la vez, colocarlas paralelas y muy próximas entre sí o superpuestas, cosa
que se logra fácilmente con los tornillos del carro móvil y el giro del ocular en el
tubo del estativo.
5. Ahora haga que una de las líneas de la escala del ocular micrométrico coincida
exactamente con una de las líneas d la escala del micrómetro objetivo.
6. Seleccione un segundo punto, lo más alejado posible del primero, donde
coincida exactamente otro par de líneas.
7. A partir de las líneas superpuestas o coincidentes, se cuentan la divisiones
(NO las líneas o rayas) del a escala del ocular y la del objetivo que median
entre ellas.
8. El número de divisiones anotado para el micrómetro objetivo se multiplica por
10 (que son las micras que mide exactamente cada una de éstas divisiones) y
el producto se divide entre el número de divisiones contadas en el ocular
micrométrico, obteniéndose así una cifra que representará el valor en micras
de cada división del micrómetro ocular, para toda observación que se lleve a
cabo con el objetivo utilizado, o sea su coeficiente micrométrico o “factor”, es
decir:
Número de divisiones del Micrómetro Objetivo x 10
Coeficiente Micrométrico =--------------------------------------------------
Número de divisiones del Ocular Micrométrico
= ---------------- = micras.
MEDICIÓN DE OBJETOS
Sustituyendo el micrómetro objetivo por la preparación que contiene el objeto a medir,
bastará cotejar sus diámetros, lados, etc., con la escala del micrómetro ocular para
ver cuántas divisiones de éste cubren exactamente las dimensiones del objeto. Al
multiplicar el número de divisiones que abarque cada medida por el coeficiente o
factor correspondiente, se obtendrá su dimensión en micras.
73
EQUIPO, MATERIALES Y REACTIVOS.
• Microscopio.
• Muestras fijas en portaobjetos.
• Aceite de inmersión.

1. Observa en 100 x dos muestras fijas que se te proporcionan.
2. Realiza las mediciones de dos objetos que observes.
3. Calcula los coeficientes micrométricos del microscopio que está en tu mesa de
trabajo, y anota los valores en el apartado de resultados y observaciones.

Mediciones.
Objeto 1: _________________________ .
Objeto 2: ________________________ .
Anota los coeficientes micrométricos determinados.

Microscopio: Marca ______________ No. de control _________
Ocular micrométrico: Marca ________Amplificación _________
MICRÓMETRO DIVISIONES DEL COEFICIENTE
OBJETIVOS OBJETIVO MICR. OCULAR MICROMÉTRICO
10 x (16 mm.) en _________________________ = __________
(SECO DÉBIL)
40 x (4 mm.) en __________________________ = __________
(SECO FUERTE)
100 x (1.6 mm.)________ en ____________ = _________
(INMERSIÓN EN ACEITE)
Haga esquemas de las observaciones realizadas.
74
6.- CONCLUSIONES
7.- CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la importancia de la manipulación correcta del microscopio en un
laboratorio clínico?
2. Menciona los 3 sistemas que constituyen el microscopio para su

funcionamiento.
75
3. Escribe tres cuidados que se deben dar al microscopio y 3 acciones que
deben evitarse para mantener en buenas condiciones el microscopio.
4. ¿Cómo se determina el coeficiente micrométrico?
8.-REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. OPPENHEIM, Irwin A. Manual para técnicos de laboratorio, México,
Panamericana.
2. FAULKNER, W. R. & Samuel Meites. Métodos selectos para el pequeño

laboratorio de química clínica, 1984, México, Asociación Mexicana de
Bioquímica Clínica.
3. Organización Panamericana de la Salud. Manual de procedimientos de

laboratorio.
4. CARRILLO, Farga Joaquín. MICROSCOPÍA DE LUZ I y II en LAB-acta,

Volumen 2, Números 2 y 3, 1990, México.
5. Práctica de Micrometría del Departamento de Parasitología de la Escuela

Nacional de Ciencias Biológicas del Instituto Politécnico Nacional.
PRADO.

PEARSON.
76
Y TECNOLÓGICOS 15

CLÍNICO.
ANEXO
PRÁCTICA No. 2a
CALIBRACIÓN DE ASAS BACTERIOLÓGICAS
1.- COMPETENCIA
Calibra las asas bacteriológicas de los diámetros más comúnmente utilizados (2, 3, 4, 5
y 6 mm.), adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

El empleo de asas bacteriológicas es de suma importancia en el Laboratorio de Análisis
Clínicos, sobre todo en la sección de Bacteriología y dentro de esta sección, en la
realización del urocultivo o cultivo de orina por el método de Hoeprich, el cual emplea
asa calibrada de volumen exactamente conocido, para la estandarización de un inóculo.

• Equipo calibrador pasa • Pinzas de disección de • Azul de
asas bacteriológicas punta fina. Evans
con moldes de 2, 3, 4, • Cinco asas • Agua destilada.
5 y 6 mm. bacteriológicas de
• Espectrofotómetro. diferente diámetro o
rectas y descalibradas.
• Matraz volumétrico de 5 mL.
• Matraz volumétrico de 10
mL.
• Pipetas graduadas de 1, 2,
5 y 10 mL.
• Espátula de acero
inoxidable o cucharilla de
porcelana.
77
4.- DESARROLLO DE EXPERIMENTOS
1. Preparar una solución acuosa concentrada de azul de Evans (750 µg/mL.). La solución se
conserva en un frasco de vidrio ámbar bien cerrado.
2. De esta solución se prepara una dilución 1:10 en agua (1 mL. de colorante +9 mL. de
agua). Con esta solución se corre una curva de calibración –por duplicado- con los
volúmenes de 25, 50, 100, 150, 200, 300, 350, 400 y 500 µL., llevando en cada caso a
volumen final de 5.0 mL. con agua destilada. Leer la extinción o absorbancia a 600 nm. de
cada uno de los volúmenes medidos, anotando los valores individuales en una tabla.
Graficar en papel milimétrico (Volumen de azul de Evans en µL., dil. 1:10 en las abcisas y
Absorbancias en las ordenadas), empleando como blanco agua destilada y celdas de 1 cm.
de paso de luz.
3. Realizar la calibración de cinco asas bacteriológicas (2, 3, 4, 5 y 6 mm.), siguiendo las
indicaciones de los profesores y utilizando el equipo calibrador de asas y/o pinzas de
disección de punta fina. Deberá realizar el aro de cada asa perfectamente circular y sin que
quede salida la punta del alambre. De ser necesario, volver a hacer el aro hasta que quede
perfectamente circular y sin defectos.
VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DE ASAS

1. Con las asas calibradas, por separado, se preparan diluciones en un matraz
volumétrico
de 5 mL. (o de 10 mL.), colocando un poco de agua destilada en el matraz, y
descargando 10 veces el asa (o 20 para el matraz de 10 mL.) de una solución
concentrada de azul de Evans (750 µg./mL.), escurriendo lo más posible. Entre
cada descarga, el asa deberá enjuagarse con agua destilada, secando muy bien
con papel filtro, o flameando y dejando enfriar el asa antes de volverla a cargar.
2. Aforar al volumen final y leer la absorbancia a 600 nm. Como se hizo para la
curva de calibración.
3. Obtener el volumen exacto directamente en la curva, interpolando el valor de la
absorbancia obtenida.
78
CÁLCULO DEL VOLUMEN DE LAS ASAS:
1 1
Vol. Asa = Vol. Leído x --------------- x -----------------------
n asadas dilución del St.
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. ¿Para qué se utilizan las asas bacteriológicas?
2. Menciona tres tipos de asas bacteriológicas.
3. Anota el diámetro y volumen correcto del asa bacteriológica calibrada.
79
4. ¿Por qué es importante que las asas bacteriológicas estén calibradas?

1. DELAAT, Adrian N. C. (1983) Microbiología, 2a. edición, México, Editorial
Interamericana.
2. MEDINA, Beatriz de Thiele. (1989). Curso de control de calidad en

microbiología, México, Merck.

PRADO.

PEARSON.
80
Y TECNOLÓGICOS 15
EN EL LABORATORIO CLÍNICO.
ANEXO
PRÁCTICA No. 3a
VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DE MICROPIPETAS
Y PIPETAS SEROLÓGICAS
1.- COMPETENCIA
Que el alumno aprenda a calibrar micropipetas y pipetas serológicas de diferente
capacidad a través del método del picnómetro para conocer su volumen exacto,
2.- MARCO TEÓRICO

El empleo de micropipetas y pipetas serológicas es de vital importancia en el
Laboratorio de Análisis Clínicos, ya que su utilización está ampliamente difundida en
todas las secciones del mismo.
La calibración de instrumentos es definida como la relación de los valores y sus

incertidumbres de medida que se obtienen de los patrones de medida. Prácticamente
podría decirse que en una calibración, los instrumentos de laboratorio son sometidos a
diferentes pruebas de comparación contra un patrón cuya exactitud es por lo menos 4
o 5 veces mejor que el instrumento que está en proceso calibración.
La calibración de algún instrumento de medida no es cosa fácil, se necesita un alto

rango de exactitud y condiciones ambientales óptimas para la calibración de
instrumentos.
81
• Picnómetro de 5 • Jeringa para insulina. • Mercurio líquido.

o 10 mL, de ser • Tubo de hule látex de 3 mm.
posible, con de diámetro.
termómetro • Boquilla de plástico.
integrado. • Soporte universal.
• Termómetro • Pinzas para micropipeta o
. pipeta.

1. Se lubrica el émbolo de una jeringa para insulina, y la punta de la misma se
fija por medio de un tubo de hule látex a la parte anterior (boca) de la pipeta
que va a ser calibrada.
2. La pipeta se fija verticalmente con ayuda de unas pinzas apropiadas
para un soporte.
3. Se saca el émbolo de la jeringa ligeramente, y la pipeta se sumerge en un
vaso que contiene mercurio a temperatura ambiente, y que se mantiene
debajo de la pipeta en un recipiente apropiado.
4. Se llena la pipeta con mercurio mediante aspiración con el émbolo de la
jeringa.
5. Cuando el mercurio llega a la marca de aforo de la pipeta, se retira el
recipiente con mercurio.
6. Bajo la punta de la pipeta se coloca un picnómetro, cuyo peso se ha
determinado previamente, y se deja que la cantidad medida de mercurio
caiga dentro de él, manipulando la jeringa.
7. Se determina el peso del picnómetro con mercurio, y se le resta el peso del
picnómetro vacío, para de esta forma tener únicamente el peso del mercurio.
Se anota la temperatura del ambiente.
8. Se calcula el volumen de la micropipeta en µL, dividiendo el peso del
mercurio (en mg. o en g) entre uno de los siguientes factores dependiendo de
la temperatura:
82
Temperatura (OC) Factor:
18 – 21 13.55
22 – 25 13.54
26 – 28 13.53
29 o más 13.52
NOTA. La calibración se debe hacer por duplicado para cada pipeta.
7.- CONCLUSIONES
8.- CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es importante la calibración de las micropipetas y las pipetas
serológicas?
83
2. ¿Por qué es importante realizar correctamente la técnica de manejo para el
pipeteo en la etapa analítica en el laboratorio clínico?
3. ¿Por qué es importante considerar las recomendaciones del fabricante?
4. Anota dos consecuencias de trabajas con pipetas que no están calibradas.
9.- BIBLIOGRAFÍA
1. LEWIS, B. Garantía de calidad en hematología, Organización Mundial de
la Salud.
2. TORRES, Gamarra Giancarlo (2021). EL ABC DE LA CALIDAD, México,

ed. PRADO.
3. BESTERFIELD, Dale H. (2009). CONTROL DE CALIDAD 8ª. edición,

México, ed. PEARSON.
84
Y TECNOLÓGICOS 15
ANEXO
PRÁCTICA No. 4a
VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DE PIPETAS
SEMIAUTOMÁTICAS
1.- COMPETENCIA
Calibra pipetas semiautomáticas de diferente capacidad a través de un método
espectrofotométrico para conocer su volumen exacto, adaptándose a las
2. MARCO TEÓRICO
El pipeteo por boca es peligroso ya que el material puede ser tóxico, radioactivo o
infectado, la pipeta puede estar contaminada por dedos sucios o por la mesa de
trabajo. Por tanto, deben usarse sistemas mecánicos de pipeteo: la precisión se
mejora sin sacrificio de la velocidad e pipeteo.
Curiosamente, el principal obstáculo al uso sistemático de pipeteo mecánico es la

propia actitud del operador particularmente en un periodo de transición de pipeteo
bucal a mecánico. En dichos periodos está en peligro de sufrir accidentes al revertir
inconscientemente al pipeteo bucal. El personal de laboratorio debe habituarse a un
buen sistema mecánico de pipeteo y nunca usar la boca: Debe resistir sus propios
argumentos para romper esta regla ya que siempre se aumentan los riesgos en el
pipeteo bucal.
El empleo de pipetas semiautomáticas, tanto de volumen fijo como de volumen

variable es de vital importancia en el Laboratorio de Análisis Clínicos, ya que su
utilización está ampliamente difundida en todas las secciones del mismo, además
de que constituye una de las recomendaciones de la Federación Internacional de
85
Química Clínica para trabajar en el laboratorio.

• Espectrofotómetro. • Pipetas • Azul de Evans
semiautomáticas de • Agua destilada.
volumen fijo y de
volumen variable.
• Matraz volumétrico de
5 mL.
• Matraz
volumétrico de 10
mL.
• Pipetas graduadas
de 1, 2, 5 y 10 mL.
• Espátula de acero
inoxidable o
cucharilla de
porcelana.

1. Preparar una solución acuosa concentrada de azul de Evans (750 µg/mL).
La solución se conserva en un frasco de vidrio ámbar bien cerrado.
2. De esta solución se prepara una dilución 1:10 en agua (1 mL de colorante +
9 mL de agua). Con esta solución se corre una curva de calibración –por
duplicado- con los volúmenes de 25, 50, 100, 150, 200, 300, 350, 400 y 500
µL., llevando en cada caso a volumen final de 5.0 mL con agua destilada.
Leer la extinción o absorbancia a 600 nm. de cada uno de los volúmenes
medidos, anotando los valores individuales en una tabla. Graficar en papel
milimétrico (Volumen de azul de Evans en µL, dil. 1:10 en las abcisas y
Absorbancias en las ordenadas), empleando como blanco agua destilada y
celdas de 1 cm. de paso de luz.
3. Con las pipetas semiautomáticas, por separado, se preparan diluciones en
un matraz volumétrico de 10 mL, colocando un poco de agua destilada en el
matraz, y descargando 10 veces la pipeta de una solución concentrada de
azul de Evans (750 µg./mL), escurriendo lo más posible. Entre cada
descarga, la punta de la pipeta deberá enjuagarse con agua destilada,
86
secando muy bien con papel filtro.
4. Aforar al volumen final y leer la absorbancia a 600 nm. Como se hizo para la
curva de calibración.
5. Obtener el volumen exacto directamente en la curva, interpolando el valor
de la absorbancia obtenida.
CÁLCULO DEL VOLUMEN DE LAS ASAS:

1 1
Vol. Pipeta = Vol. Leído x -------------- x ---------------------
n descargas dilución del St.
7.- CONCLUSIONES
87
8.- CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es importante la calibración de las pipetas semiautomáticas?
2. Escribe dos métodos para la verificación de las pipetas semiautomáticas.
3. ¿Por qué es importante considerar las recomendaciones del fabricante?
4. Anota dos consecuencias de la no calibración de las pipetas semiautomáticas.

1. LEWIS, B. Garantía de calidad en hematología, Organización Mundial de la
Salud.
2. MEDINA, Beatriz de Thiele. Curso de control de calidad en microbiología,

1989, México, Merck.

laboratorio de química clínica, 1984, México, Asociación Mexicana de
Bioquímica Clínica.

PRADO.

PEARSON.
88
Y TECNOLÓGICOS 15
ANEXO
PRÁCTICA No. 5a
CALIBRACIÓN DE CENTRÍFUGAS
1.- COMPETENCIA
Calibra las centrífugas clínicas y a transformar las revoluciones por minuto (r.p.m.) en
unidades de fuerza G, adaptándose a las características del laboratorio.
2.- MARCO TEÓRICO

Las centrífugas son muy utilizadas en los laboratorios clínicos para separar las
células de la sangre en la preparación del suero o plasma; para clarificar líquidos;
para separar partículas sólidas en suspensión: para concentrar y purificar varios
agentes biológicos o químicos, y para realizar ciertos análisis que involucran la
separación cuantitativa de sólidos de líquidos.
Un objeto girando a una velocidad alta en un círculo de un cierto radio, genera una
fuerza centrífuga que es proporcional tanto a la velocidad como al radio. La fuerza
centrífuga se expresa, por lo tanto, en términos de revoluciones por minuto (rpm) o
gravedad (valor G). Muchos procedimientos analíticos involucran centrifugación a una
velocidad dada. Para que la centrífuga funcione y reproduzca exactamente una
velocidad o una fuerza G, deben llevarse a cabo los siguientes procedimientos de
mantenimiento preventivo, con precisión y a intervalos regulares:
1. Limpie derramamientos grandes y tubos rotos inmediatamente.

2. Una vez al mes limpie el interior y exterior con un lienzo húmedo.
3. Lubrique los cojinetes cada tres meses, si la unidad no está
permanentemente lubricada y sellada, siga las indicaciones del fabricante.
4. Cada tres meses revise que la unidad esté bien amortiguada con el piso o
89
la mesa, que este balanceada y libre de vibraciones, y que los accesorios
estén bien balanceados.
5. Revise los cepillos y reemplácelos si están gastados al 5/16 de pulgada (8
mm.). Haga esto cada tres meses. Siga las recomendaciones del
fabricante.
6. Revise en nivel de aceite en el depósito cada seis meses.
7. Iguale los tubos cargadores (camisas) de la centrífuga con el mismo peso
“marcado” en posiciones opuestas.
8. Revise las revoluciones por minuto (r.p.m.) con un tacómetro calibrado y
certificado cada tres meses.

• Centrífuga • Lienzos
• Tubos de ensayo

Realiza los procedimientos de mantenimiento a la centrífuga.
Utilizando un tacómetro calibrado y certificado, poner a funcionar la centrífuga
clínica y comparar las revoluciones por minuto que esta última indica con las
revoluciones por minuto que marca el tacómetro calibrado, y realizar los ajustes
necesarios. Medir el radio de la centrífuga y realizar los cálculos matemáticos
especificados para convertir las revoluciones por minuto en unidades de fuerza G.
90
7.- CONCLUSIONES
8.-CUESTIONARIO
1. ¿Para qué sirve el tacómetro?
2. ¿Cuál es la característica de un tacómetro óptico?
3. ¿Cuál es la norma que estipula los lineamientos para la calibración de los

equipos?
4. ¿Por qué es necesario calibrar las centrífugas?

1. TENEZAR, F. J., and T. A. Kowlski. The centrifuge: maintenance and
calibration, American Society of Clinical Pathologists Technical Improvement
Service, Chicago, II 1973.

laboratorio de química clínica, 1984, México, Asociación Mexicana de Bioquímica
Clínica.

PRADO.

PEARSON.
91
Y TECNOLÓGICOS 15
ANEXO
PRÁCTICA 6
TABLA 1
Límites de tolerancia para el material de vidrio volumétrico clase A
como lo especifica la Nacional Bureau of Standards
Capacidad LIMITES DE TOLERANCIA (mL)

(mL) Pipetas Pipetas de Buretas Matraces Probetas
volumétricas medida volumétricos
0.5 0.006 _ _ _ _
1.0 0.006 0.01 _ 0.01 _
2.0 0.006 0.01 _ 0.015 _
3.0 0.01 _ _ 0.015 _
4.0 0.01 _ _ 0.02 _
5.0 0.01 0.02 0.01 0.02 0.05
10.0 0.02 0.03 0.02 0.02 0.08
15.0 0.03 _ _ _ _
20.0 0.03 _ _ _ _
25.0 0.03 0.05 0.03 0.03 0.14
50.0 0.05 _ 0.05 0.05 0.20
100.0 0.08 _ 0.10 0.08 0.35
200 0.10 _ _ 0.10 _
250 _ _ _ 0.12 0.65
500 _ _ _ 0.20 1.10
1000 _ _ _ 0.30 2.0
2000 _ _ _ 0.50 3.5
92
ANEXO
PRÁCTICA 7 TABLA 2
TABLA No. 2 DENSIDAD DEL AGUA LIBRE DE AIRE EN GRAMOS POR cm2 A VARIAS TEMPERATURAS
T 0.0°C 0.1°C 0.2°C 0.3°C 0.4°C 0.5°C 0.6°C 0.7°C 0.8°C 0.9°C
4.0 0.999972 0.999972 0.999972 0.999971 0.999971 0.999970 0.999969 0.999968 0.999967 0.999965
5.0 0.999964 0.999962 0.999960 0.999958 0.999956 0.999954 0.999951 0.999949 0.999946 0.999943
6.0 0.999940 0.999937 0.999933 0.999930 0.999926 0.999922 0.999918 0.999914 0.999910 0.999906
7.0 0.999901 0.999896 0.999892 0.999887 0.999881 0.999876 0.999871 0.999865 0.999860 0.999854
8.0 0.999848 0.999842 0.999835 0.999829 0.999822 0.999816 0.999809 0.999802 0.999795 0.999787
9.0 0.999780 0.999773 0.999765 0.999757 0.999749 0.999741 0.999733 0.999725 0.999716 0.999707
10.0 0.999699 0.999690 0.999681 0.999672 0.999662 0.999653 0.999643 0.999634 0.999624 0.999614
11.0 0.999604 0.999594 0.999583 0.999573 0.999562 0.999552 0.999541 0.999530 0.999519 0.999507
12.0 0.999496 0.999485 0.999473 0.999461 0.999449 0.999437 0.999425 0.999413 0.999401 0.999388
13.0 0.999376 0.999363 0.999350 0.999337 0.999324 0.999311 0.999297 0.999284 0.999270 0.999256
14.0 0.999243 0.999229 0.999215 0.999200 0.999186 0.999172 0.999157 0.999142 0.999128 0.999113
15.0 0.999098 0.999083 0.999067 0.999052 0.999036 0.999021 0.999005 0.998989 0.998973 0.998957
16.0 0.998941 0.998925 0.998908 0.998892 0.998875 0.998858 0.998841 0.998824 0.998807 0.998790
17.0 0.998773 0.998755 0.998738 0.998720 0.998702 0.998684 0.998666 0.998648 0.998630 0.998612
18.0 0.998593 0.998575 0.998558 0.998537 0.998519 0.998500 0.998480 0.998461 0.998442 0.998422
19.0 0.998403 0.998383 0.998364 0.998344 0.998324 0.998304 0.998284 0.998263 0.998243 0.998222
20.0 0.998202 0.998181 0.998160 0.998139 0.998118 0.998097 0.998076 0.998055 0.998033 0.998012
21.0 0.997990 0.997968 0.997947 0.997925 0.997903 0.997881 0.997858 0.997836 0.997814 0.997791
22.0 0.997768 0.997746 0.997723 0.997700 0.997677 0.997654 0.997630 0.997607 0.997584 0.997560
23.0 0.997536 0.997513 0.997489 0.997465 0.997441 0.997417 0.997392 0.997368 0.997344 0.997319
24.0 0.997294 0.997270 0.997245 0.997220 0.997195 0.997170 0.997145 0.997119 0.997094 0.997068
25.0 0.997043 0.997017 0.997991 0.997966 0.997940 0.997913 0.997887 0.997861 0.997835 0.998083
93
94

Instructivo de Prácticas de Control de Calidad 2021

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS

ELABORADO POR: Q. B. P. Alberto León Hernández

ELABORADO REVISADO APROBADO AUTORIZADO

L. en Od. ANGÉLICA Q. B. P. Gil Moisés Dr. Rafael Alfonso

FUNDAMENTACIÓN DE LA UNIDAD DE APRENDIZAJE

OBJETIVO DEL INSTRUCTIVO

La función de Control de Calidad en el Laboratorio Clínico, es realizar un estricto

Las personas responsables de realizar los análisis clínicos deberán conocer

Clave: ICC-P1 Revisión: 09-agosto-21 Fecha de emisión: 02-agosto-21 Página: 6 de 93

LINEAMIENTOS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD

2. La tolerancia es de diez minutos si coincide con el inicio de horario de clase y de 5

3. Dar lectura a la práctica de forma previa para su evaluación.

7. Utilizar guantes, cofia, cubrebocas, gafas cuando sea necesario.

8. Mantener el orden, disciplina y respeto a sus compañeros y profesores; de no cumplir,

11. Limpiar la mesa de trabajo al inicio y al final de la práctica.

14. Desechar el material contaminado de acuerdo a las indicaciones de los profesores.

18. Al término de la práctica colocar los bancos sobre la mesa.

20. La evaluación de Laboratorio se efectuará de la siguiente forma:

NOMBRE Y FIRMA DEL ESTUDIANTE NOMBRE Y FIRMA DEL TUTOR

2. Escribe tres normas diferentes a las que se mencionaron y que se consideren

3. De manera general, escribe de qué trata el código de bioseguridad de la OMS.

4. Explica, por qué no deben consumirse alimentos dentro del laboratorio de

2.- MARCO TEÓRICO

Al contar con un buen programa de control de calidad en el laboratorio clínico, se

Para realizar el análisis de las muestras biológicas se requiere de material, instrumentos,

En esta práctica se considera a las pipetas, ya que es el material volumétrico que se

Es indispensable que los técnicos laboratoristas clínicos tengan la habilidad en el manejo

6.- ANÁLISIS DE RESULTADOS

2. ¿Cuál es la forma correcta de vaciar el líquido de la pipeta y micropipeta?

3. Escribe 4 características que deben cumplir las pipetas para su uso.

4. Indica el momento en el que se debe limpiar la pipeta durante la técnica de pipeteo.

9.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Cuando está limpio, el agua o líquido vertido descenderá uniformemente y el mismo se

Los diferentes métodos de análisis requieren de procedimientos específicos de lavado de

Después de desechar el material biológico, se procederá a su descontaminación. Los

3.- EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS

4.- DESCRIPCIÓN DE EXPERIMENTOS 1. Lavado de material en general

2. Realizar control de calidad de la limpieza

2.- Comprobar la eliminación total de detergente: Los residuos de detergente pueden

3. Aplicación de soluciones químicas

Ácidos: habitualmente se utiliza una disolución de ácido nítrico al 10%. El

Mezcla crómica: disolución de dicromato sódico o potásico en ácido sulfúrico

4. Limpieza de material en el área de bacteriología

5.- REGISTRO DE RESULTADOS Y OBSERVACIONES

2. Esquematiza como se observa un material de vidrio con grasa y libre de grasa.

3. Esquematiza como se observa un material de vidrio con residuos de detergente y

Sustancia Utilidad Preparación

2. ¿Cuál es la importancia del control de limpieza y secado del material?

3. Anota dos contaminantes que puede contener el material de vidrio.

9.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

2. GABB, M. H. & W. ELATCHMEN (1987). Soluciones de Laboratorio, Barcelona,

3. GONZÁLEZ DE BUITRAGO, J. M. (1985). Técnicas de laboratorio clínico,

4. Mexicanos, C. P. (2014). Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. Tomo I.

5. MURALI, Dharan, M. S. (1982). Control de Calidad en los Laboratorios Clínicos,

6. TORRES, Gamarra Giancarlo (2021). EL ABC DE LA CALIDAD, México, ed.

7. BESTERFIELD, Dale H. (2009). CONTROL DE CALIDAD 8ª. edición, México, ed.

LAVADORA DE MATERIAL DE VIDRIO

2.- MARCO TEÓRICO