TP 4 Laboratio, Enzimas

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TP 4: “Observación de la actividad

enzimática”

Docente: NADIA ZALAZAR

Alumnos: Maximiliano Aued


Omar Irala
Ludmila Soto
Lujan Lopez
Franco Moreno
Axel Espindola
Marcela Acuña

Comisiòn: A 5

Fecha de realización: 29-09-22


1) Si una reacción química es favorable, pero muy lenta, ¿Cómo podría
acelerarse?

Usando un catalizador, un acelerador

2) Las enzimas son proteínas, ¿Qué factores de su entorno afectan su


actividad?
El calor, el ph, la concentración y los inhibidores.
3) ¿Conoce alguna patología que se explique por la falta o exceso de una o
varias enzimas?

La intolerancia a la lactosa de la leche es por la falta de una enzima, la lactasa


en algunas personas

4) ¿Cuál es el valor diagnóstico de las enzimas en la práctica clínica?


La enzimología clínica es la aplicación del conocimiento de las enzimas
en el diagnóstico, tratamiento y pronóstico de la enfermedad. Las
pruebas de enzimas que realizamos en Diagnóstico Laboratorio son por
ejemplo las siguientes: T.G.O. T.G.P. y Fosfatasa Alcalina para evaluar
la salud del hígado por ejemplo.

Introducciòn:
Una enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos es la
catalasa, necesaria para descomponer el peróxido de hidrógeno, un
compuesto tóxico, que se produce durante el metabolismo celular y es
nocivo para las células. La catalasa descompone el peróxido de
hidrógeno (H2O2) en agua (H2O) y oxígeno (O2).
La reacción catalizada es:
2 H2O2 —> O2 + H2O

Tiempo de cocción Presencia de Oservaciones


minutos actividad enzimatica

0 +++++ Comenzò a los 5 seg


0,5 ++++ Comenzó a los 35 seg

1 +++ Comenzó a los 37 seg

2 ++ Comenzò al 1, 30 min

5 + Comenzò al 1,48 min

Control negativo - No hubo

Gràfico de Actvidad enzimática

ACTIVIDAD ENZIMATICA SEGUN EL


TIEMPO DE COCCION
12

10
ACTIVIDAD ENZIMATICA

Conclusiòn:
Con el aumento de temperatura la actividad enzimática baja. Ya que la
catalasa químicamente es una proteina, podemos desnaturalizarla al
someterla a altas temperaturas. Al perder la estructura terciaria, perderá
también la función y como consecuencia su función catalítica, por lo que
no podrá descomponer el agua oxigenada y no se observará ningún tipo
de reacción. La actividad de CAT es alta en un intervalo de temperaturas
entre 37 a 40 °C con un máximo en 37 °C
Si la temperatura corporal pasa de los 40º C las proteínas pierden su
estructura y se pueden producirse daños irreversibles. A los 42 ºC el
paciente cae en coma y a los 43 ºC muere.
Guia de estudio
1 Se debe a la liberación de Oxigeno.

2 "La sangre contiene una enzima que actúa como un catalizador,


acelerando la reacción de descomposición del agua oxigenada. Como
muchas de las bacterias patógenas son anaerobias (no pueden vivir con
oxígeno), mueren en la espuma blanca rica en oxígeno".

En el capítulo anterior se vio como el pH y la temperatura del medio afectan la


estructura terciaria de una proteína produciendo su desnaturalización.

Para observar en el laboratorio el efecto que produce un cambio de pH sobre la


actividad de una enzima, se puede disponer una serie de tubos en los que se
mantienen constantes los siguientes parámetros: temperatura, [E], [S], y el
tiempo en el que se lleva a cabo la reacción (tiempo de incubación); lo que
varía en cada tubo es el pH. Al haber detenido la reacción después de un
tiempo determinado, se mide la cantidad de producto obtenido con lo que se
puede obtener la velocidad de reacción de cada tubo. Con este experimento se
tienen parejas de puntos de pH y velocidad: (pH, v 0), los cuales si se grafican
producen una gráfica como la que aparece en la Figura 6.13:
Figura 6.13 Efecto del pH sobre la actividad de las enzimas. (Figura elaborada
por el autor).

En la gráfica de la Figura 6.13 se aprecia como hay un valor de pH, arriba o


abajo del cual, la enzima disminuye rápidamente su actividad. Al pH en donde
la enzima presenta máxima actividad se le conoce con el nombre de pH
óptimo. Estos resultados se pueden interpretar pensando que en el pH óptimo
la enzima tiene la conformación tridimensional que le permite la mayor
actividad catalítica. Si se modifica este pH, la conformación nativa se pierde y
la enzima ya no puede catalizar adecuadamente. Figura 6.14.

Como se aprecia en la Tabla 6.1, el pH óptimo es muy variable entre una


enzima y otra, pero la mayoría de ellas tiene un pH cercano a 7, aunque por
ejemplo la pepsina, que se encuentra en el estómago en donde hay ácido
clorhídrico, tiene un pH óptimo igual a 1.5.

Si se realiza un experimento como el que se acaba de describir, pero ahora el


pH se deja constante, junto con los otros factores mencionados y lo que varía
es la temperatura, y se grafican los puntos obtenidos (t, v 0), se obtiene también
una temperatura en la que la enzima presenta una máxima actividad, es decir,
una temperatura óptima, arriba o debajo de la cual la eficiencia de la enzima
para catalizar disminuye rápidamente. También la temperatura óptima es muy
variable de enzima a enzima. Hay bacterias que viven en aguas termales que
están cercanas al punto de ebullición y sus enzimas se han adaptado para
funcionar en ese ambiente tan caliente, cosa que no ocurriría con ninguna
enzima de humano.

Tabla 6.1: pH óptimo de algunas enzimas.

4 Valores normales:

-Unidades internacionales por litro (UI/L)


-Nanogramos por ml (ng/ml)
-Unidades por litro (U/L)

Enzimas hepàticas
-Fosfatasa alcalina: los valores normales se sitúan en el intervalo de 44
a 147 UI/l, aunque varía en función de la edad y el sexo.
-Transaminasa alcalina (ALT): los valores normales son de 5-60 UI/l.
Aspartato de amnitransferasa (AST): el rango normal es de 10 a 34 UI/l.

Enzimas cardíacas del paciente


-CK: 26-140 U/L
-CK mb: 0-25 U/L
-Troponina: <0,05 ng/ml.

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