UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA

UNAN-LEÓN
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
DEPARTAMENTO DE FARMACIA INDUSTRIAL
FARMACIA

TESIS PARA OPTAR AL TÍTULO DE:

LICENCIADO QUÍMICO FARMACÉUTICO

TEMA:
Valoración de la respuesta hemática en Hámster Sirio Dorado (Mesocricetus auratus), tras la
administración de extracto de Handroanthus serratifolius. Junio 2020- Marzo 2021.

AUTORES:
 Kimberly Paola Orozco Moreno
 Yuberling Vaneza Palma Montalván
 Raquel Mercedes Peña Morán

Tutor: Lic. Kelvin José Núñez Martínez

León del 2020

“A LA LIBERTAD POR LA UNIVERSIDAD”

DEDICATORIA
 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA UNAN- León

A DIOS TODOPODEROSO, por darme la vida, la fortaleza para seguir adelante y sobre todo la
sabiduría.

A mi mamá, Maricela por su apoyo y sacrificio durante todo este transcurso de mi vida, por luchar
conmigo para que pudiera culminar mi carrera.

A mis hermanas Isabella y Mayri, a mis abuelitos María y Hernán quienes son una bendición y parte
significativa en mi vida, a mi familia que de una u otra manera me ayudaron para poder lograr esta
meta.

A mi novio Cristóbal Rivera que ha estado desde los inicios de mi carrera apoyándome, confiando en
mí y llenándome de aliento para que nunca me diera por vencida.

A mis amigas Yuberling, Meyling, Raquel por siempre estar de mi lado y a pesar de muchas diferencias
conservar nuestra amistad.

Kimberly Paola Orozco Moreno

DEDICATORIA
 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA UNAN- León

A Dios, por permitirme llegar a este momento tan especial, dándome las fuerzas necesarias para
superar los obstáculos y dificultades a lo largo de toda mi vida.

A mi madre, Heyda por ser la persona que me ha acompañado durante todo mi trayecto estudiantil
y mi vida, que con su demostración ejemplar me ha enseñado a no desfallecer ni rendirme ante nada,
brindándome amor, hábitos y valores que me han ayudado a Salir siempre adelante.

A mis hermanos, Lidia y Johandri que siempre han estado junto a mí, brindándome su apoyo cada
día.

A mi familia en general, que me han brindado su apoyo incondicional por compartir conmigo buenos
y malos momentos.

A mis amigas, Kimberly, Meyling, Etheel y por el apoyo que siempre me brindaron en mi carrera
universitaria, en cada momento sin importa la situación y gracias al equipo que formamos logramos
llegar al final de esta etapa.

Yuberling Vaneza Palma Montalvan

DEDICATORIA
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A Dios por haberme dado la vida y permitirme llegar a este momento tan especial en mi formación
profesional, por darme las fuerzas para superar obstáculos y dificultados a lo largo de mi vida.

A mi madre, María Mercedes por ser la persona que me ha acompañado durante todo mi trayecto
estudiantil y de vida, por apoyarme en todo momento para poder culminar mi carrera, por sus
consejos y sus valores que me ha permitido ser una persona de bien, pero más que nada por su amor.

A mis hermanos Manuel, Carlos, María Luisa y Juanita por brindarme su cariño y su apoyo
incondicional.

A mi maestro Lic. Kelvin Núñez por su gran apoyo y motivación para la culminación de esta tesis.

Raquel Mercedes Peña Morán

AGRADECIMIENTO

A Dios:
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Por guiarnos y darnos la fortaleza necesaria en el camino de nuestras vidas, metas y sueños.

A nuestros Padres:

por ser el pilar más importante de nuestras vidas, por su apoyo incondicional en el transcurso de
nuestros estudios y por no perder la Fe en nosotros en esta ultimo etapa para culminar nuestros
estudios universitarios.

A nuestro tutor:

Lic. Kelvin José Núñez Martínez por habernos brindado la oportunidad de recurrir a su capacidad y
conocimiento científico, por su apoyo, el tiempo y el interés incondicional para la elaboración de esta
monografía.

A nuestra Alma Mater:

Universidad UNAN-León por habernos aceptado ser parte de esta gran casa de estudio y poder
abrirnos las puertas de su seno científico para poder estudiar nuestra carrera. Así como también a
los diferentes docentes que nos brindaron sus conocimientos con profesionalismo y enseñanzas que
contribuyeron a nuestra formación profesional.

Al Bioterío de la facultad de Medicina Veterinaria por proporcionarnos toda la información y ayuda

necesaria para culminar con nuestro experimento en especial a Lic. Violeta Bravo, por su cooperación
en la correcta manipulación, administración de los extractos y toma de muestra de los hámster de
laboratorio.

A todas las personas que directa o indirectamente colaboraron con nosotros para la realización de
nuestra tesis.
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INDICE

I. INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................. 1

II. ANTECEDENTES ................................................................................................................................ 3

III. JUSTIFICACIÓN ................................................................................................................................ 5

IV. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................................................... 6

V. OBJETIVOS........................................................................................................................................ 7

Objetivo General .................................................................................................................................. 7

Objetivos Específicos ............................................................................................................................ 7

VI.HIPOTESIS ........................................................................................................................................ 8

VII.MARCO TEÓRICO ............................................................................................................................ 9

1. Palo de arco (Handroanthus serratifolius) .................................................................................... 9

1.1 Denominación ................................................................................................................................ 9

1.2 Clasificación de taxonomía ............................................................................................................. 9

1.3 Descripción Botánica ...................................................................................................................... 9

1.4 Hábitat ......................................................................................................................................... 10

1.5 Propiedades medicinales .............................................................................................................. 10

1.7 Usos ............................................................................................................................................. 11

2. VIUSID ........................................................................................................................................ 12

2.1Definición ...................................................................................................................................... 12

2.2 Composición................................................................................................................................. 12

2.3 Uso de VIUSID .............................................................................................................................. 12

3. Animales de experimentación .................................................................................................... 12

3.1 Características del Hámster Sirio Dorado...................................................................................... 13

3.2 Ventajas del uso de Hámster ........................................................................................................ 14

3.3 Desventajas del uso de Hámster................................................................................................... 14

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3.4 Modelos de evaluación usados en los Hámster Sirio Dorado ........................................................ 14

3.5 Características de los Hámster a utilizar en el estudio .................................................................. 14

3.6 Separación del Hámster en grupos ............................................................................................... 14

3.7 Sacrificio de los animales de experimentación utilizados .............................................................. 15

3.8 Procesamiento de la información y Plan de análisis...................................................................... 15

3.9 Diagrama de caja y bigotes ........................................................................................................... 16

4. Extracción....................................................................................................................................... 17

3.1 Factores que afectan el proceso de extracción ............................................................................. 17

4.2. Tipos de extracción...................................................................................................................... 18

XIII. MATERIAL Y MÉTODO.................................................................................................................. 20

Tabla No 1. OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES ............................................................................. 21

7. PROCEDIMIENTO ............................................................................................................................ 22

Tabla No 3. Características de los diferentes grupos administración/dosis de solución de referencia y

extracto Handroanthus serratifolius. .................................................................................................. 25

Tabla No 4: Estado Físico de los Hámster (Mesocricetus auratus) ...................................................... 26

IX.RESULTADOS .................................................................................................................................. 29

Tabla No 6. Promedio valores obtenidos en la medición To, día 8....................................................... 34

Tabla No 7. Promedio valores obtenidos en la medición To, día 15 ..................................................... 35

X.CONCLUSION................................................................................................................................... 37

XI.RECOMENDACIONES ...................................................................................................................... 39

XII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ..................................................................................................... 40

XIII.ANEXOS ........................................................................................................................................ 43

1. CRONOGRAMA........................................................................................................................... 64
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I. INTRODUCCIÓN

La medicina natural ha sido utilizada para el tratamiento de numerosas enfermedades en el

transcurso de toda la historia humana. En la actualidad la medicina tradicional es una realidad
presente a nivel mundial según la organización mundial de la salud (OMS), el uso de las plantas
medicinales se atribuye a su accesibilidad y asequibilidad, siendo muchas veces la única fuente para
la atención sanitaria de los pacientes de menores recursos resultando así más barato que comprar la
medicina de patente; sin embargo el uso de las plantas debe ser acompañado de estudios de
validación de la información etnomédica o tradicional de su uso, lo cual garantice la inocuidad,
calidad y eficacia para el tratamiento y prevención de las afecciones que aquejan al ser humano, tal
es el caso de la especie en estudio Handroanthus serratifolius considerado por sus efectos
beneficiosos sobre el sistema inmunológico. (OMS Gerene, 2006)

Ante la presente crisis que estamos viviendo a nivel mundial, la nueva enfermedad por el coronavirus
19 (Covid-19), caracterizado como pandemia ha afectado a un gran número de personas, donde se
ha incorporado el uso de la medicina alternativa, la cual contribuye muchos beneficios a la salud
tendiendo propiedades curativas y paliativas en cuanto a la prevención de enfermedades virales
fortaleciendo el sistema inmunológico.

La presente investigación se refiere a la evaluación de los valores hemáticos en Hámster Sirio Dorado
(Mesocricetus auratus), con énfasis en glóbulos blancos tras la administración de extractos obtenidos
de la especie vegetal Handroanthus serratifolius considerado en el estudio para comprobar si la
especie estimula el sistema inmunológico en animales de experimentación.

Para analizar la efectividad del extracto en estudio se realizó el experimento en Hámster Sirio Dorado
teniendo como peso inicial de 116.2 g, se procesaron 45 ejemplares que fueron subdivididos en 3
grupos y uno de los cuales fue denominado control positivo y otro grupo al cual se le administro
placebo, los animales se mantuvieron en el Bioterio de la Facultad de Medicina Veterinaria a una
temperatura controlada de 20°C a 25°C, los cuales se ubicaron en cajas plásticas de polipropileno en
un periodo de adaptación de siete días alimentados en hora de la mañana de 3-6g y agua potable
durante la fase experimental. Los animales experimentales recibieron diariamente dosis de cada
extracto dentro de los valores permisibles de su DL50, mientras que al grupo control negativo no se
les administro ningún extracto para poder ser utilizado como grupo de referencia al final de la
investigación.

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Se obtuvo como resultado que la mejor relación droga concentración es 1:5 al 50% de extracto
Handroanthus serratifolius para la preparación del extracto utilizados en los animales de
experimentación se obtuvieron resultados positivos en las pruebas realizadas a los grupos que se les
administró la especie vegetal.

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II. ANTECEDENTES

En 1966, Gonçalves de b Lima et al. obtuvo la xiloidona de lapachol en presencia de pirimidina. Es

desde 1952 que el Dr. Osvaldo Gonçalves de Lima y sus colaboradores han estudiado el efecto
antitumoral de Lapachol al demostrar una actividad significativa contra los tumores cancerosos en
ratas y pacientes humanos. En 1980 se demostró su capacidad para encoger los tumores y reducir el
dolor causado por los tumores en pacientes afectados por varios tipos de cánceres (hígado, riñón,
mama, próstata y cuello uterino), y logró remisiones completas en tres de los pacientes demostrando
la capacidad de inhibición tumoral por el factor de transcripción B -lapachoneactivado por el factor
nuclear-, la proteína activadora-1 y las quinasas N-terminales c-jun, y por lo tanto promueve la
apoptosis de las células tumorales; debido a su actividad antitumoral, es un candidato ideal para la
modificación sistemática para desarrollar una comprensión de su relación estructura-actividad.
(Rodriguez, 2020)

En el año 2013 la Federación Latinoamericana de Sociedades Científicas de Estudiantes de Medicina

Lima, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Perú y colaboradores, evaluaron el efecto
preventivo de la tabebuia serratifolia (palo de arco) en un modelo murino de colitis aguda inducida
con ácido acético en ratones balb-c machos, Se administró extracto hidroalcohólico de Tabebuia
serratifolia vía orogástrica por 4 días a 48 ratones distribuidos aleatoriamente en 6 grupos, la
inducción se realizó con 15 ml de ácido acético (5% v/v, pH 2,.5) vía rectal en única dosis, dándose un
efecto protectores. (Nivin-Huerta, Carbajal-Urteaga, Aceituno-Llana, & Moras-Rosado, 2020)

En los últimos 14 años la búsqueda de drogas anticancerígenas ha adquirido una gran importancia,
utilizando como fuente natural las plantas y según publicaciones ha sido considerablemente exitosa,
tal como lo exponen los botánico Perdue y Hartwell en una publicación: "Varias quinonas han
demostrado su actividad contra el cáncer, la más notable de ellas es el LAPACOL, actualmente en
proceso clínico, el Lapachol fue aislado en pequeña cantidad como un constituyente activo de unas
raíces de la India (Stereospermun Suaveolens DC); pero revisando la bibliografía se encontró que la
mejor fuente por contenerlo en gran abundancia, es la madera del Lapacho (Tabebuia) de la América
Tropical (América Central y del Sur). (Dominguez, 2020)

El Centro de Ciencias Biológicas, Departamento de Antibióticos, Universidad Federal de Pernambuco,

(UFPE), Recife, Pernambuco Brasil, realizaron una investigación del Lapachol cuyo aislamiento y
estudio a finales de siglo por Parternó, es uno de los capítulos más brillantes de la Fitoquímica,

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especialmente en conjunción con el trabajo de Max Siewert una comunicación sobre la madera del
árbol argentino Lapachol (Bignoniaceae) de Max Siewert, presentado junto con Ricardo Napp en Exp.
NAC. Filadelfia en 1876. El Lapachol tiene su origen en la Tabebuia avellanedae Lorentz que en Brasil
se conoce como Pau DArc, es un árbol de enorme tamaño utilizado en la medicina tradicional para
casos de estomatitis, procesos inflamatorios en general y contra el cáncer. Lapachone es una o-
naftoquinona de Lapachol utilizada contra, Trypanosome cruzi, cáncer, virus, bacterias, y
actualmente se evalúa la leishmania; esta planta también se puede encontrar en otras familias de
plantas como, Verbenaceae Leguminosae, Sapotaceae, Scrophulariaceae, Malvaceae y Proteaceae.
(Rodriguez, 2020)

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III. JUSTIFICACIÓN

Se justifica el presente estudio, siendo que en Nicaragua personas de escasos recursos económicos
requieren alternativas medicinales para las diferentes enfermedades, los usos de especies
medicinales tradicionales son bien conocidas brindando la posibilidad de tener una curación por lo
que también el empleo de estos medicamentos naturales debe hacerse bajo un control de expertos
sanitarios.

Nuestra especie en estudio Handroanthus serratifolius posee grandes beneficios a la salud teniendo
propiedades curativas en cuanto a la prevención de enfermedades virales, ante la presente pandemia
es necesario fortalecer el sistema inmunológico.

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IV. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿La respuesta inmunológica en Hámster Sirio Dorado (Mesocricetus auratus), tras la administración
del extracto fluido de la especie vegetal Handroanthus serratifolius, No evidencia resultados
satisfactorios en la medición de leucocitos?

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V. OBJETIVOS

Objetivo General
 Valorar la respuesta hemática en Hámster Sirio Dorado (Mesocricetus auratus), tras la
administración de extracto de Handroanthus Serratifolius

Objetivos Específicos
 Realizar un análisis hematocrito con énfasis en glóbulos blancos en Hámster Sirio Dorado
 Realizar la evaluación de DL 50 en los Hámster Sirio Dorado para observar si el extracto es
seguro.
 Identificar características visuales en los Hámster Sirio Dorado in vivo

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VI.HIPOTESIS

Ho (Hipótesis nula) σ 𝝈2 = 𝝈2

La especie Handroanthus serratifolius, No disminuye significativamente (α ≤0.5) los valores de

linfocitos en Hámster Sirio dorado (Mesocricetus auratus) y no podría ser utilizada para el tratamiento
del sistema inmunológico.

H1 (Hipótesis alternativa) σ 𝝈𝟏 𝟐 ≠ 𝝈𝟏2

La especie Handroanthus serratifolius, disminuye significativamente (α ≥0.5) los valores de linfocitos

en Hámster Sirio dorado (Mesocricetus auratus) y podría ser utilizada para el tratamiento del sistema
inmunológico.

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VII.MARCO TEÓRICO

1. Palo de arco (Handroanthus serratifolius)

1.1 Denominación
Nombre científico: Handroanthus Serratifolius

Sinonimias: Handroanthus araliaceus

Nombres comunes: Pony de las Antillas, guayacán, guayacán

polvillo, curaire o palo de arco. Fig.:1 Hojas de Handroanthus
serratifolius

1.2 Clasificación de taxonomía

Reino: Plantae

División: Magnoliophyta

Clase: Magnoliopsida

Orden: Lamiales

Familia: Bignoniaceae

Subfamilia: Digitifolieae
Fig.:2 Planta Handroanthus
Tribu: Tecomeae serratifolius

Género: Handroanthus

Especie: Handroanthus serratifolius

1.3 Descripción Botánica

Árbol de tronco delgado y flexible de entre 4 y 5 m de altura, con corteza rugosa que se desprende
en placas. Produce una inflorescencia globosa con estambres excertos de color blanco. Su fruto es
una vaina muy delgada y fácil de remover de color marrón oscuro. Las vainas tienen una longitud de
entre 5 y 10 cm y un ancho de alrededor de 2 cm. Su tronco puede alcanzar los 80 cm de diámetro y
se caracteriza por presentar una corteza de color castaño oscuro, agrietada y dura. El follaje, caduco,
presenta hojas digitadas y opuestas. Sus grandes flores hermafroditas y tubulosas miden alrededor

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de 4 cm de longitud. Son de color rosado, violáceo o purpúreo y están reunidas en panículas

terminales. Aparecen durante la primavera (agosto-septiembre) antes que lo hagan las hojas. (M.,
1976. )

1.4 Hábitat
Procede de las zonas tropicales de América y comprende más de 100 especies, es un árbol nativo de
América del Sur y de la zona del Caribe que puede alcanzar los 45 metros de alto y dos metros de
diámetro con hábitats pluviosidad elevada y contante pero también en zonas con una estación seca
marcada. (Carrizo J, 1991.)

1.5 Propiedades medicinales

Es tan grande el abanico de enfermedades que esta planta puede prevenir y atenuar. Por las
propiedades medicinales que se le atribuye al palo de arco se la puede utilizar como: abortifaciente,
antianémico, antioxidante, antirreumático, antitumoral, antiinflamatorio, antidiabético, antifungal,
antileucémico, antitusivo, para promover la cicatrización de las heridas, contra la malaria y diversos
otros parásitos (incluyendo Leishmania, Schistosoma, Trypanosoma y Toxocara), como antipirético
(para bajar la fiebre), para el tratamiento de úlceras gástricas, mordedura de serpientes, paludismo,
artritis, impétigo, para regularizar la menstruación y contra la diarrea. Un té hecho con las hojas ayuda
a aliviar la flatulencia o gases. También inhibe la formación de radicales libres por lo que se usa en la
formulación de algunas cremas cosméticas para combatir las arrugas. (OG, 1962)

1.6 Fitoquímica de Handroanthus serratifolius

Se trata de un árbol originario de la selva amazónica y otros países de Sudamérica del que se
aprovecha sobre todo su corteza interna para la elaboración de diferentes remedios a base de
hierbas, aunque ahora también es posible encontrarlo en complementos alimenticios. Cuenta con
actividad biológica frente a los organismos nocivos gracias a los flavonoides, benzenoides y quinoides
encontrados en su composición.

El grupo de quinonas es un importante grupo de compuestos en el mundo de las plantas y de los

animales. Dos miembros de esta familia son, la vitamina K, y co-enzima Q10.

Mientras tanto, más de 20 conexiones de quinonas se encuentran en la corteza del árbol Pau d’arco,
junto con el beta-lapachol (otro importante ingrediente del Pau d’Arco) forman parte del grupo de
las naftoquinonas. Las Naftoquinonas es un grupo relativamente raro de quinonas. Las Quinonas

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están involucradas en el transporte biológico de hidrógeno y electrones en la respiración celular.

(Lima, 2004)

1.7 Usos
Usado como planta curativa por los incas, externamente para enfermedades de la piel como eczema,
p-soriasis e infecciones de hongo. Una razón importante de esto es la presencia de una gran cantidad
de quinonas.

Antibiótico: Hay un gran grupo de bacterias patógenas contra las que es eficaz. Estas bacterias son
Staphylococcus aureus, Helicobacter pylori, y Brucella.

Antiviral: Uno de los efectos más importantes, es contra los virus. Lapachol inhibe el crecimiento de
varios virus, incluyendo diversos virus del Herpes, algunos virus de la Influenza, virus de la Polio, y el
virus de Epstein-Barr. Este efecto se explica por la inhibición de enzimas que les permiten adherirse
a los virus, por lo que al entrar al organismo no tienen donde adherirse y son expulsados.

Antiinflamatorio: Los extractos de corteza de Pau d’Arco han mostrado una actividad antiinflamatoria
activa.

Antifúngico: Las naftoquinonas en el Pau d’Arco parecen tener una alta eficacia contra la Candida
albicans y al menos otros once hongos y levaduras. Lapachol y beta-lapachol tienen actividad
antifúngicas que son comparables, o más fuertes que el ketoconazol, un agente anti-fúngico
ampliamente utilizado.

Antiparasitario: También eficaz contra diversos parásitos (como la Malaria, Schistosoma y

Trypanosoma) y se ha demostrado científicamente.

Antioxidante: Estudios in vitro muestran una inhibición clara y potente de los radicales libres y
sustancias inflamatorias (por ejemplo, leucotrienos) por las sustancias del Pau d’Arco. Puede incluirse
entre los antioxidantes más fuertes.

Antihistamínico: También contiene quercetina y otros flavonoides xyloïdon. Como con muchos otros
flavonoides quercetina es útil en el fortalecimiento de los capilares. El efecto antihistamínico lo hace
adecuado para las personas con condiciones alérgicas como fiebre del heno y dermatitis.

Estimulación del sistema inmune: Los efectos estimulantes inmunes del Pau d’Arco se deben en parte
a los fuertes efectos antimicrobianos. (Sester E, 1997)

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2. VIUSID

2.1Definición
Viusid es un suplemento dietario compuesto por antioxidantes, vitaminas, oligoelementos y un
componente que se extrae de la raíz del regaliz (ácido glicirricínico) con
propiedades antivirales.

2.2 Composición
- Aminoácidos: glucosamina, arginina, glicina
- Antioxidantes: ácido ascórbico (vitamina C), ácido málico, y el sulfato de zinc
- Vitaminas del grupo B: B5, B12, B9, B6.
- Ácido glicirricinico
-Cianocobalamina (vitamina B12), ácido ascórbico (vitamina C), piridoxina
Fig.:3 VIUSID
(vitamina B6), ácido fólico (vitamina B9), calcio (A) y zinc. (Doctoralia., 2020)

2.3 Uso de VIUSID

Esta especialmente diseñado para el aumento de las defensas inmunológicas. Ideal por tanto en
todos aquellos procesos que causan inmunodeficiencia. Es fundamental para garantizar el correcto
funcionamiento del sistema inmunológico. Los componentes de VIUSID incrementa en gran medida
el poder de las funciones biológicas de ellos, como lo son el poder antiviral y antioxidante, sin
modificación o cambio en la estructura molecular y garantizando un aumento muy significativo de la
defensa. Tipo Suplemento dietario con una potente acción antioxidante estimulante del sistema
inmune. (Nutrición, 2020)

3. Animales de experimentación

Hámster Sirio Dorado (Mesocrisetus auratus)

Familia: Cricetidae

Subfamilia: Cricetinae

Género: Mesocricetus

Especie: M. auratus Waterhouse, 1839 (F.A.Q., 2020)

Imagen1: Hámster de
Experimentación

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3.1 Características del Hámster Sirio Dorado

 Se adapta a una gran variedad de condiciones ambientales, desde zonas

muy frías hasta regiones tropicales.
 Es un mamífero de sangre caliente, de hábitos nocturnos y su
comportamiento está influenciado por feromonas. Posee un agudo
sentido de la audición, por lo que se alteran rápidamente con los ruidos,
es por ello que hay que tener cuidado con los equipos que se utilizan.
 Su sentido del olfato está muy desarrollado, no sólo para detectar Imagen2: Talla de Hámster
comida y depredadores, sino también para percibir un orden social. de Experimentación

 Su visión es muy pobre y no pueden percibir los colores.

 Poseen glándula de Harder, cuando el hámster está en estrés, excreta en
la zona periocular una sustancia de color marrón llamada porfirina.
 El sistema social depende de la densidad de población, viven en grandes
colonias y el rango social está bien desarrollado. Generalmente, son muy
dóciles a excepción de algunas cepas exocriadas que mantienen su
agresividad, al igual que sus antecesores salvajes
 Por su pequeño tamaño son muy susceptibles a cambios ambientales,
puesto que una variación de la temperatura entre 2 a 3°C, puede Imagen3: Pesada de Hámster
afectar su temperatura corporal y modificar su fisiología. de experimentación

 El tamaño del hámster adulto varia entré 12 a 13 cm desde la punta de la nariz a la punta de la
cola; el largo es de 1 1,2 cm y con un peso aproximado de120 g. Las crías
al nacer tienen un peso aproximado de 1 a 2 g y gana rápidamente peso
durante la lactancia. Tienen una vida útil de 10 a 12 meses y se obtiene
de ocho a diez camadas.
 Los machos de algunas cepas comienzan a mostrar su agresividad entre
la séptima y décima semana de edad, aun cuando estos grupos se hayan
establecido al destete. En el grupo de machos existe uno dominante que
puede ser muy agresivo. Las hembras generalmente no pelean, incluso
cuando se hayan agrupado siendo ya adultas. (The Laboratory Rabbit, Imagen 4: Recolección
material biológica.
Guinea Pig, Hamster, and Other Rodents A volume in American College
of Laboratory Animal Medicine Book. , 2012)

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3.2 Ventajas del uso de Hámster

 Eficiencia reproductiva.
 Por su vida relativamente corta es excelente para su uso en ensayos
crónicos de toxicología, microbiología, virología, farmacología, etc.
 Corto tiempo de generación.
 De fácil cuidado y mantenimiento, por su pequeño tamaño.
 Bajos costo de manutención.
 Cepa definida. Imagen 5: Cambio de grosa,
 Diversidad de características específicas que sirven como modelo. comida y agua de los Hámster.

3.3 Desventajas del uso de Hámster

• Dificultad en la recolección de material biológico.
• Dificultad la administración de drogas.
• Dificultad en las técnicas quirúrgicas. (Alfredo., 2005)

3.4 Modelos de evaluación usados en los Hámster Sirio Dorado

Valores diferenciales de linfocitos 50-95%

3.5 Características de los Hámster a utilizar en el estudio

Imagen 6: Admón. de
Hámster Sirio Dorado del Bioterio de Escuela de Ciencias Agrarias y
extracto H. serratifolius
Veterinarias UNAN-León. Se utilizaron un total de 45 hámsteres, divididos
en cajas de 6 hámsteres por caja. La grosa de las cajas se cambia dos veces
a la semana, la comida (concentrado de engorde) y el agua el cambio es
diario. Se mantienen en ambientes controlados, los cuales están cerrados
con la luz apagada y temperatura controlada para evitar situaciones de
estrés. En el Bioterio los hámsteres son divididos por sexo, edad, camadas
o hembras con crías.

3.6 Separación del Hámster en grupos

Los Hámster se dividieron en 7 subgrupos de estudio
Imagen7: Eutanasia del
1. Conformado por 6 Hámster, administrándole solución de Hámster
referencia (Viusid) en concentración de 0.33μg/μl

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2. Conformado por 6 Hámster, administrándole solución de referencia (Viusid) en

concentración de 0.4μg/μl
3. Conformado por 6 Hámster, administrándole solución de referencia
(Viusid) en concentración 1.1μg/μl
4. Conformado por 6 Hámster, administrándole de solución del
Extracto (Handroanthus serratifolius) en concentración 0.33μg/μl
5. Conformado por 6 Hámster, administrándole de solución del
Extracto (Handroanthus serratifolius) en concentración 0.4μg/μl
6. Conformado por 6 Hámster, administrándole de solución del
Extracto (Handroanthus serratifolius) en concentración 1.1μg/μl
Imagen 8: Punción
7. Conformado por 6 Hámster, administrándole placebo (concentrado
Cardiaca
y agua).

3.7 Sacrificio de los animales de experimentación utilizados

La eutanasia de los hámsteres fue por dislocación cervical, las responsables del Bioterio fueron las
encargadas de este proceso para realizarlo de forma rápida, segura evitándoles el mayor dolor
posible a los hámster.

La aplicación correcta del método produce una lesión irreversible del tallo cerebral e inconsciencia
inmediata. La muerte se confirmará posteriormente por exanguinación o lesión grave e irreversible
en el corazón o cerebro.

3.8 Procesamiento de la información y Plan de análisis

Para el procesamiento de la información se tabularon los datos en el paquete de Microsoft Excel 2010
versión 15.0.4128.1014, la cual permitió la creación de la base de datos digitalizada para su posterior
utilización, la presentación de los resultados detallando los valores hemáticos en cada una de las dosis
administradas para cada grupo de Hámster de experimentación, por medio del grafico diagrama y
bigotes en donde se evidencia los resultados satisfactorios de leucocitos tras las administración del
extracto Handroanthus serratifolius.

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3.9 Diagrama de caja y bigotes

Los diagramas de Caja-Bigotes (boxplots o box and whiskers) son una
presentación visual que describe varias características importantes, al mismo
tiempo, tales como la dispersión y simetría.

Para su realización se representan los tres cuartiles y los valores mínimo y

máximo de los datos, sobre un rectángulo, alineado horizontal o
verticalmente.

3.9.1 Descripción Fig. 4: Anatomía gráfico de Caja

y bigotes
Las líneas que se extienden paralelas a las cajas se conocen como
«bigotes», y se usan para indicar variabilidad fuera de los cuartiles superior e inferior. Los valores
atípicos se representan a veces como puntos individuales que están en línea con los bigotes. Los
diagramas de cajas y bigotes se pueden dibujar vertical u horizontalmente.

Normalmente utilizado en estadísticas descriptivas, los gráficos de cajas y bigotes son una excelente
forma de examinar rápidamente uno o más conjuntos de datos gráficamente. Aunque parezcan
primitivos en comparación con un Histograma o un Gráfico de Densidad, tienen la ventaja de ocupar
menos espacio, lo cual es útil cuando se comparan distribuciones entre muchos grupos o conjuntos
de tipos de observaciones que uno puede hacer al ver un diagrama de cajas y bigotes. (Catálogo de
visualización de datos Diagrama de caja y bigotes. , 2021)

3.9.2 Construcción

Se ordenan los datos de distribución de menor a mayor.

Calcular los cuartiles Q1, Q2, y Q3.

Q1, el cuartil Primero es el valor mayor que el 25% de los valores de la distribución. Se obtiene a
través de N/4; el primer cuartil es la media aritmética de dicho valor y el siguiente.

Q2, el Segundo Cuartil es, evidentemente, la mediana de la distribución, es el valor de la variable que
ocupa el lugar central en un conjunto de datos ordenados. Se obtiene a través de N/2 = la mediana
es la media aritmética de dicho valor y el siguiente.

Q3, el Tercer Cuartil, es el valor que sobrepasa al 75% de los valores de la distribución. Se obtiene a
través del cálculo de 3N / 4.

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3.9.3 Interpretación

Se puede hacer estas observaciones:

• Cuáles son los valores clave, tales como: el promedio, el percentil 25 medio, etc.
• Si hay valores atípicos y cuáles son sus valores.
• Si los datos son simétricos.
• Cuán estrechamente se agrupan los datos.

• Si los datos están sesgados y si es así, en qué dirección

4. Extracción
Existen 2 técnicas diferentes:

Extracción con disolventes orgánicos: Los disolventes orgánicos utilizados en extracción deben tener
baja solubilidad en agua, alta capacidad de solvatación hacia la sustancia que se va a extraer y bajo
punto de ebullición para facilitar su eliminación posterior.

Extracción con disolventes activos: La extracción con disolventes activos (selectiva) se emplea para
separar mezclas de compuestos orgánicos en función de la acidez, de la basicidad o de la neutralidad
de éstos. (Técnicas de extracción. , 2011)

3.1 Factores que afectan el proceso de extracción

Los dos procesos de extracción están influenciados por una amplia gama de factores. Sin embargo,
en general, hay solamente cinco factores que tienen un significado real. (Gustav Heess)

4.1.1Contenido de agua de la hoja

Por ser una sustancia polar, el agua interfiere remojando la superficie de la hoja y penetrando
solvente en la hoja. Además, reduce la difusión. Lo que es necesario, sin embargo, es cierto grado de
humedad residual para mantener la elasticidad de la hoja y para prevenir que se desmenuce, lo que
haría difícil que el solvente penetrara en la hoja.

4.1.2 Tamaño y forma de la partícula

La forma de las partículas en el material de extracción debe ser suficiente para permitir que el
solvente fluya libremente, sin ninguna gran resistencia, además el tamaño de la partícula debe
permitir la mejor extracción posible de cada partícula individual, reduciendo al mínimo la difusión.

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4.1.3 Cantidad de solvente

El cociente cuantitativo del solvente al material de extracción dependerá de la composición de la

hoja. Generalmente, la cantidad del solvente de extracción aumenta proporcionalmente con el
contenido de fibra cruda en la hoja. Como norma general, cuanto más grande es la concentración de
éste, menos energía se necesita para eliminar el solvente al final del proceso.

4.1.4 Temperatura de extracción

Las altas temperaturas reducen la viscosidad solvente y aumentan la solubilidad del extracto en el
solvente. La viscosidad reducida del solvente y la función realzada del solvente en temperaturas
elevadas provocan que la extracción mejore. Mientras que no hay grandes diferencias, es mejor usar
los agentes calentados de extracción. El aumento en la producción de aceite compensa el coste de
calentar el solvente.

4.1.5 Tiempo de extracción

El tiempo de extracción depende del nivel de extracción y del tipo de naturaleza y estructura del
material de extracción

4.2. Tipos de extracción

4.2.1 Destilación: es, sin duda, el proceso de extracción más fácil y barata, utilizado por las más
prestigiosas marcas de perfume y de extracción de aceites esenciales. Convierte los aceites esenciales
en vapor y después vuelve a condensarlos. Con un alambique o una alquitara podrá producir sus
aceites esenciales preferidos, que impregnarán su mente y su cuerpo de aromas y energía positiva.17

4.2.2 Extracción en frío: se trata de un método muy utilizado para la extracción de cítricos como el
limón, la naranja, la bergamota, la mandarina o la lima. Este método de extracción presenta la ventaja
de no someter los aceites esenciales a temperaturas elevadas. Sin embargo, éstos entran en contacto
con el agua, por lo que se dispersan importantes componentes hidrosolubles.

4.2.3 Extracción con solventes orgánicos: en este método se utilizan solventes para extraer aceites
esenciales, especialmente en materias orgánicas. La extracción con solventes comprende los
siguientes métodos: (Stills.)

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4.2.4 Maceración: La maceración es un proceso de extracción sólido-líquido. El producto sólido

(materia prima) posee una serie de compuestos solubles en el líquido extractante que son los que se
pretende extraer.

4.2.5 Maceración con calor: El proceso a ejecutar en este tipo de maceración es el mismo que en la
maceración en frío, sólo que en este caso puede variar el medio por el cual se logra la maceración. El
tiempo que se desea macerar varía mucho de la maceración en frío ya que al utilizar calor se acelera
el proceso tomando como referencia que 3 meses de maceración en frío, es igual a 2 semanas en
maceración con calor, esto es en el caso de las plantas y hierbas medicinales.

4.2.6 Maceración en frío: Consiste en sumergir el producto a macerar en un líquido y dejarlo una
determinada cantidad de tiempo, para transmitir al líquido características del producto macerado. La
ventaja de la maceración en frío consiste en que al ser sólo con agua se logran extraer todas las
propiedades de lo que se macera, es decir, toda su esencia sin alterarla en lo más mínimo.
(Maceración. , 2011)

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XIII. MATERIAL Y MÉTODO

1. Tipo de Estudio:
Cuasi experimental descriptivo

2. Área de Estudio:
Laboratorios de Farmacognosia, Departamento de Farmacia Industrial, Carrera de Farmacia Facultad
de Ciencias Químicas. Bioterio y Laboratorio de Patología Facultad de Agroveterinaria.

3. Universo:
Diez especies vegetales reportadas con actividad estimulante del sistema inmunológico: Albahaca
(Ocimun basilicum), Ajo (Allium sativum), Eucalipto (Eucalyptus), Jengibre (Zingiber officinale),
Ginseng (Panax ginseng), Manzanilla (Chamaemelum nobile), Palo de Arco (Handroanthus
serratifolius), Perejil (Petroselium crispum), Rábano (Raphanus sativus), Sauco (Sambucus Canadensis
L).
4. Muestra:
Una especie vegetal Palo de arco (Handroanthus serratifolius)

5. Criterios:
5.1 Criterios de inclusión para selección de especie:
 Especie vegetal de poca divulgación etnomédica
 Especie con potencial para fortalecer el sistema inmunológico
 Especie vegetal científicamente validada

5.2 Criterios de exclusión:

 Especie vegetal de divulgación etnomédica conocida
 Especie sin potencial para fortalecer el sistema inmunológico
 Especie vegetal científicamente no validada

5.3 Criterios de inclusión para material vegetal

 Hojas secas no ennegrecida, no mohosas
 Hojas secas libres de insectos
 Hojas secas libre de daño por insectos

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5.4 Criterios de exclusión

 Hojas mohosas
 Hojas con insectos
 Hojas dañadas por insectos

6. Variable de estudio
 Recuento de linfocitos en sangre
 Evaluación de pelaje
 Evaluación de fondo de ojos

Tabla No 1. OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES

Variable Definición conceptual Dimensiones Indicadores Valor de medición

Linfocitos Es un tipo de glóbulos Millones por campo BHC %

blancos

Pelaje Es la piel de los Milímetro cuadrado Color, brillo, Visual

animales mamíferos a caída de
excepción del ser cabello, corto y
humano sedoso
Fondo de ojos Consiste en la Millones de unidades Ancho del ojo Dm
visualización a través decilitro Retina del
de la pupila y de los animal
medios transparente
de globo ocular

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7. PROCEDIMIENTO

7.1 Preparación de extractos

Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:5 para 50 ml al 35%
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:5 para 50ml al 50%
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:5 para 50ml al 70%
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:10 para 50 ml al 35%
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:10 para 50ml al 50%
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:10 para 50 ml al 70%
Imagen 9: Solución
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:5 para 50 ml en H2O hidroalcohólica H.
Se toma una cantidad de polvo equivalente a relación 1:10 para 50ml en H2O serratifolius.

7.2 Preparación Solución de Referencia (Viusid)

Se toma una cantidad de polvo equivalente a concentración 66μg/0.2ml para
dosis 1
Se toma una cantidad de polvo equivalente a concentración 80μg/0.2ml para
dosis 2
Se toma una cantidad de polvo equivalente a concentración 220μg/0.2ml para
dosis 3
Imagen 10: Solución de
7.3 Preparación Solución de Extracto Handroanthus serratifolius Referencia

Se toma una cantidad de extracto equivalente a concentración 48.8μg/02.ml para dosis 1

Se toma una cantidad de extracto equivalente a concentración 97.6 μg/02.ml
para dosis 2
Se toma una cantidad de extracto equivalente a concentración 195.3 μg/02.ml
para dosis 3

Imagen 11: Solución

Extracto H. serratifolius

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7.4 Animales de experimentación

 Reactivo biológico: CHCL3
 Especies: Handroanthus serratifolius
 Edad: 3 meses
 Sexo: Masculino
 Peso: 116.2 g
 Raza: Hámster Sirio Dorado
 Lugar: Bioterio de Facultad de Medicina Veterinaria UNAN-León
 Fecha de incisión: 10 /11/2020
 Condiciones:
Los animales se acondicionan individualmente en caja plásticas de polipropileno conservados en un
macro y microambiente controlado (temperatura de 20-25C, humedad relativa 40-70% fotoperiodo
de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad), por un periodo de adaptación de 7 días, alimentados en
hora de la mañana 3-6g y agua potable diariamente.

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Tabla No 2. Propiedades fisicoquímicas de las Tinturas 1:5, 1:10, H2O de Handroanthus serratifolius

Handroanthus serratifolius 1:5 1:10 1:5 1:10

Análisis Tinturas de Tintura de Tintura de Tintura de Tintura de Tintura de H2O H2O
35% 50% 70% 35% 50% 70%
Organolépticos Liquido Liquido Liquido Liquido Liquido Liquido Liquido Liquido
Café oscuro Café oscuro Café oscuro Café oscuro Café oscuro Café oscuro Café Café
Característico Característico Característico Característico Característico Característico oscuro oscuro

Aspecto, color
y olor

Físico Químico

Solidos totales 1.42 4.41 1.46 0.28 0.22 0.11 0.68 0.13
(g)

pH 5.6 5.7 5.5 5.9 5.9 5.7 5.8 5.9

Constante 60 51.42 40 60 51.42 40 80 80

dieléctrica

La tabla No 2, se pueden observar los resultados obtenidos para los extractos preparados en relación 1:5 y 1:10 en grado alcohólico de 35%, 50% y
70%, para lo cual no se muestran variaciones significativas para los cambios de pH. En el caso del valor de solidos totales la relación más efectiva es
1:5 al 50%, obteniendo 4.41 g de solidos totales, resultando esta ser la mejor relación.

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Tabla No 3. Características de los diferentes grupos administración/dosis de solución de referencia y

extracto Handroanthus serratifolius.

Muestra Dosis Observaciones

VIUSID 0.2 cc cada 12 horas vía oral Somnolencia

Disminución brillo de su Pelaje
normal
Apetito normal
Aumento de peso

Handroanthus Serratifolius 0.2 cc cada 12 horas vía oral Hiperactividad

Sed excesiva
Aumento de Peso
Apetito normal
Pelaje brillante

Control Negativo 3-6g

Sin Cambio

La tabla No. 3. Refleja las características que presentaron los diferentes grupos de Hámsteres después
de administrarles las dosis de la solución de referencia (Viusid) y el extracto Handroanthus
serratifolius, observando que el grupo del extracto presento características satisfactorias para
nuestra especie en estudio, en donde físicamente se comprueba que es seguro y efectivo durante el
estudio.

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Tabla No 4: Estado Físico de los Hámster (Mesocricetus auratus)

Grupo inicial de hámster Grupo de estudio To, 8 días valoración T1 15 días valoración
Grupo A Peso promedio de 9 hámster Peso promedio de 9 hámster
Peso de 3 hámster Extracto de Handroanthus D1 Peso: 118.7g D1 Peso: 132.36g
Peso: 110g serratifolius D2 Peso: 115.6g D2 Peso 121.33g
Peso:101g D3 Peso :120.7g D3 Peso 136.83g
Peso: 105g Talla promedio de 9 hámster Talla promedio de 9 hámster
D1 Talla: 12.3cm D1 Talla: 14.6cm
Talla de 3 hámster D2 Talla: 12cm D2 Talla: 13.6cm
Talla: 11cm D3 Talla:12.1cm D3 Talla: 12.8cm
Talla: 11.5cm
Talla: 12cm Grupo B Peso promedio de 9 hámster Peso promedio de 9 hámster
Solución Referencia Viusid D1 Peso: 113.9g D1 Peso: 117.13g
D2 Peso: 125.8g D2 Peso 128.06g
D3 Peso :113g D3 Peso 113.4g
Talla promedio de 9 hámster Talla promedio de 9 hámster
D1 Talla: 12.3cm D1 Talla: 13.3cm
D2 Talla: 13cm D2 Talla :13.5cm
D3 Talla :13cm D3 Talla: 14cm

Grupo C Placebo Peso de 3 hámster Peso de 3 hámster

Peso: 112.1g Peso: 106.3g
Peso :108.6g Peso 113.3g
Peso: 117.6g Peso 123.4g
Talla de 3 hámster Talla de 3 hámster
Talla: 12.3cm Talla: 13 cm
Talla: 12.8cm Talla: 13.2cm
Talla: 11cm Talla : 12cm

La tabla No. 4, refleja que no hubo variación significativa en peso y talla en el To de la valoración y T1
de la valoración de la administración de Solución de Referencia (Viusid) y extracto Handroanthus
serratifolius, ya que eran Hámster adultos y su periodo de crecimiento ya había transcurrido.

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1
Tabla No 5. Valores Hemáticos de Hámster Sirio Dorado (Mesocricetus auratus)
Dieta de Dieta Hto Prot Lto Eto Linf Neu Eos Mto Plq
muestreo (%) (g/dl) (log) (log) (log) (%) (%) (%) (%)
Inicio C-1 35 6.5 5.70 6.77 42.1 29.1 0.4 16 9
C-2 34 5.5 6.68 7.0 44 30.9 1 37.2 5
C-3 36 6 5.91 6.90 39.8 28.5 2.5 22.5 7

D1E1 48 5.5 6.68 6.82 21 28 1 37 2

D1E2 47 5.4 6.50 6.80 20 27 1 35 2
D1E3 46 5.2 6.65 6.79 22 26 1 38 2
D2E1 34 5.5 6.76 6.69 11 7 1 16 9
D2E2 35 5.1 6.72 6.67 10 6 1 16 9
D2E3 33 5.6 6.78 6.60 11 6 1 15 9
D3E1 38 6 6.64 6.85 44 13 0.7 24 9
D3E2 37 5 6.60 6.84 45 12 0.9 23 9
D3E3 37 5 6.69 6.85 47 11 1 22 8

D1R1 51 6.5 6.77 6.90 14 11 4 51 9

D1R2 52 6.5 6.76 6.89 13 10 0 50 9
8 días
D1R3 54 6.4 6.69 6.78 14 12 4 51 8
D2R1 30 6.3 6.83 6.69 33 7 0 30 5
D2R2 31 6.5 6.80 6.67 32 8 1 31 6
D2R3 34 6.6 6.79 6.59 34 7 1 30.5 5
D3R1 56 6.5 6.68 6.88 18.8 30.9 4.2 46.1 1
D3R2 55 6.4 6.66 6.80 19 29 4 46 1
D3R3 56 6.4 6.64 6.84 18.5 31.5 4.1 46.5 1

C-1 52 6.5 7.03 6.99 54.2 12.2 1 32.7 12

C-2 51 6.5 7.0 6.89 53 12 1 32 11
C-3 50 6.4 6.69 6.79 54.1 12.1 1 31.5 12

D1E1 46 5.5 7.09 6.86 16.1 42.7 4.8 36.2 7

D1E2 45 6 6.99 6.87 16.6 56.3 4.7 22.5 8
D1E3 44 5.9 6.69 6.88 16 55.2 4.6 27.2 8
D2E1 45 6.5 6.81 6.92 18.3 30.1 0.7 50.7 5
15 días
D2E2 45 6.7 6.84 7.09 16.3 37.4 1.7 44.4 5
D2E3 45 6.7 6.79 7.89 16.1 37.2 1.5 48.6 5
D3E1 43 5.6 6.63 7.01 5.5 58.8 3.3 32.2 5
D3E2 44 6 7.8 7.17 14.2 43.6 3.3 42 12

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D3E3 42 6 7.68 7.13 14 57.7 3.3 37.4 7

D1R1 22 6 7.46 6.58 24.3 37.3 0.8 37.3 15
D1R2 45 6 6.81 7.13 30.5 40.6 0.8 27.9 6
D1R3 34 6 6.80 7.05 28.2 39.2 0.8 34.2 9
D2R1 42 6 6.93 7.13 30.9 44.5 1.8 22.7 3
D2R2 45 6.5 6.84 7.08 16.9 40.5 2.8 39.6 15
D2R3 43 5.5 6.86 7.09 22.2 43.2 2.5 32.9 12
D3R1 34 7 6.83 7.03 5.7 77.1 0.9 16.1 7
D3R2 44 6 7.08 7.17 14.2 43.6 2.3 42 12
D3R3 48 5 7.12 7.10 10.5 50.9 3.3 38 9

C-1 45 6.6 7.06 11.6 39.2 0 48.8 0 12

C-2 44 6.5 7.09 11.2 39.5 1 47.9 0.59 11
C-3 45 6.4 7.05 11.5 39.4 0 48.5 1 12

En la tabla No 5, se muestran los valores hemáticos de los hámster al inicio, día 8 y día 15 del estudio,
los cuales fueron estos resultados de estudio hematológicos, obtenidos de exámenes de BHC
realizados en el laboratorio de patología veterinaria del centro veterinario de diagnóstico e
investigación CEVEDI.2

Hto: hematocrito, Prot: Proteínas, Lto: leucocitos, Eto: Eritrocitos, Linf: Linfocitos, Neu: neutrófilos, Eos:
Eosianofilos, Mto: Monocitos, Plq: plaquetas.
D: Dosis, E: extracto, R: referencia, C-: Control negativo

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IX.RESULTADOS

Grafica No 1. Valores hemáticos de la administración de VIUSID al iniciar el estudio.

6.5 30.9

1.0 56.0
R3

6.9
6.5 30.0

0.0 33.0
R2

6.8
6.8 14.0
4.0 51.0
R1

8.0
0 10 20 30 40 50 60

La gráfica No. 1, afirma la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de
concentración y dosis administradas para la solución de referencia Viusid en el tiempo inicial (To, día
8), teniendo una variación en los valores donde se observa que la dosis mínima R1 (Conc. 66 µg/0.2ml)
los datos están más concentrados y hay menos variabilidad en los valores, en las dosis máxima R3 y
media R2 se observa que los datos están menos concentrados y por lo tanto hay más variabilidad en
los valores hemáticos.3

3
R1 Solución de referencia (Viusid) concentración 66μg/0.2ml
R2 Solución de referencia (Viusid) concentración 80μg/0.2ml
R3 Solución de referencia (Viusid) concentración 220μg/0.2ml

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Grafica No 2. Valores hemáticos de la administración de VIUSID al finalizar el estudio.

6.9 32.7
0.0 77.1

R3

7.0
6.2 37.4

1.8 45.0
R2

11.1
6.1 29.9
0.8 45.0
R1

11.2
0 20 40 60 80 100

La gráfica No 2. afirma la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de

concentración y dosis administradas para la solución de referencia Viusid en el tiempo final (T1, día
15), teniendo una variación en los valores donde se observa que la dosis mínima R1 (66 µg/0.2ml),
los datos están más concentrados. Para ambas mediciones (To, día 8 y T1, día 15) se obtuvieron
mejores resultados en la dosis mínima, por lo tanto esta dosis, (66 µg/0.2ml) puede ser utilizada
para mejorar la respuesta inmunológica en Hámster Sirio Dorado evidenciando resultados
satisfactorios en la medición de leucocitos.4

Grafica No 3 Valores hemáticos de la administración de Handroanthus serratifolius al iniciar el estudio

4
R1 Solución de referencia (Viusid) concentración 66μg/0.2ml
R2 Solución de referencia (Viusid) concentración 80μg/0.2ml
R3 Solución de referencia (Viusid) concentración 220μg/0.2ml

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6.0 24.0
1.0 44.0

E3
6.9
5.5 11.0

1.0 34.0

E2
6.8
5.5 28.0
1.0 48.0
E1

6.8
0 10 20 30 40 50 60

La gráfica No 3 afirma la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de

concentración y dosis administradas del extracto Handroanthus serratifolius en el tiempo inicial (To,
día 8), teniendo una variación en los valores donde se observa que la dosis media E2 (Conc.
97.6µg/0.2ml) los datos están más concentrados y hay menos variabilidad de los valores; en la dosis
mínima E1 y máxima E3 los datos están más dispersos y por lo tanto hay más variabilidad en los
valores hemáticos.5

5
E1 Solución de extracto H. serratifolius a concentración 48.8μl/0.2ml
E2 Solución de extracto H. serratifolius a concentración 97.6μl/0.2ml
E3 Solución de extracto H. serratifolius a concentración 195.3μl/0.2ml

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Grafica No 4. Valores hemáticos de la administración de Handroanthus serratifolius al finalizar el

estudio

5.7 39.6
3.3 58.8

E3
7.1
6.6 28.1

0.7 56.3
E2

7.5
6.7 37.1
1.7 46.0
E1

7.1
0 10 20 30 40 50 60 70

La gráfica No 4. afirma la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de

concentración y dosis administradas del extracto Handroanthus serratifolius en el tiempo final (T1,
día 15), teniendo una variación en los valores donde se observa que la dosis media E2 (Conc.
97.6µg/0.2ml) los datos están más concentrados y hay menos variabilidad de los valores para ambas
mediciones (To, día 8 y T1, día 15) se obtuvieron mejores resultados en la dosis media, por los tanto
esta dosis ,(97.6 µg/0.2ml) puede ser utilizada para mejorar la respuesta inmunológica en Hámster
Sirio Dorado evidenciando resultados satisfactorios en la medición de leucocitos.6

6
E1 Solución de extracto H. serratifolius a concentración 48.8μl/0.2ml
E2 Solución de extracto H. serratifolius a concentración 97.6μl/0.2ml
E3 Solución de extracto H. serratifolius a concentración 195.3μl/0.2ml

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Grafica No 5. Valores hemáticos control negativo (Alimentación Normal)

6.9 33.0
0.5 48.5

12.0
6.7 39.2

0.0 48.8

11.8
6.9 32.7
1.0 54.2

12.0
0 10 20 30 40 50 60

La gráfica No 5 afirma la distribución de los valores hemáticos para este grupo de control en el tiempo
inicial (To, día 8) y tiempo final (T1, día 15), se observa que los datos están menos concentrados y hay
menor variabilidad en los valores, este grupo de control no presentó cambios y se utilizó como grupo
de referencia para comprar los valores de la administración del extracto y Viusid.

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Tabla No 6. Promedio valores obtenidos en la medición To, día 8

Medición inicial (TO, día 8)

Grupos Media estadística Valor de referencia
V1 Administración de Viusid 66 µg/ 0.2 ml 17.68

V2 Administración de Viusid 80 µg/ 0.2 ml 13.89

V3 Administración de Viusid 220 µg/ 0.2 ml 19.67

H1 Administración de Handroanthus 17.33
serratifolius 48.8 µg/ 0.2 ml 14.49-21.42
H2 Administración de Handroanthus 9.99
serratifolius 97.6 µg/ 0.2 ml
H3 Administración de Handroanthus 15.83
serratifolius 195.3 µg/ ml
C- Control negativo (Alimentación normal) 20.50

La tabla No 6 evidencia los valores promedios obtenidos en la medición de los valores hemáticos en
el tiempo inicial de la valoración (To, día 8) para los diferentes grupos de estudio. Encontrándose que
los valores de V2 (13.89) y H2 (9.99) no se encuentran dentro del rango de valores referenciales, y
siendo C- el valor más sobresaliente, por lo que se procedió a realizar otro sacrificio a los 15 días para
tener más exactitud en la medición de los datos.7

7
(V1) Viusid dosis 1, (V2) Viusid dosis 2, (V3) Viusid dosis 3.
(H1) H. serratifolius dosis 1, (H2) H. serratifolius dosis 2, (H3) H. serratifolius dosis 3.
(C-) Control negativo. Placebo

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Tabla No 7. Promedio valores obtenidos en la medición To, día 15

Medición inicial (T1, día 15)

Grupos Media estadística Valor de referencia
V1 Administración de Viusid 66 µg/ 0.2 ml 18.19

V2 Administración de Viusid 80 µg/ 0.2 ml 19.12

V3 Administración de Viusid 220 µg/ 0.2 ml 18.15

H1 Administración de Handroanthus 19.04
serratifolius 48.8 µg/ 0.2 ml 14.49-21.42
H2 Administración de Handroanthus 19.03
serratifolius 97.6 µg/ 0.2 ml
H3 Administración de Handroanthus 19.26
serratifolius 195.3 µg/ ml
C- Control negativo (Alimentación normal) 19.88

La tabla No 7, evidencia los valores promedios obtenidos en la medición de los valores hemáticos en
el tiempo final de la valoración (T1, día 15) para los diferentes grupos de estudio. Encontrándose que
todos los grupos se encuentran dentro del rango de los valores referenciales. El análisis hematocrito
se realizó con precisión y exactitud para evitar errores en los resultados finales y demostrar que el
estudio es eficaz y efectivo.

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Grafica No 6. Valores de Referencia VS Extracto

1
D1 D3
D2
0

La grafica No 6, afirma la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de

concentración y dosis administradas, en el tiempo inicial (To, día 8) y tiempo final (T1, día 15) de la
valoración teniendo variación en los valores, donde se observa que la dosis mínima para ambos
grupos de estudio Solución de Referencia (Viusid) y extracto Handroanthus serratifolius los datos
están más concentrados y hay menos variabilidad, por lo que se demuestra que la dosis 1 de los dos
grupos es la que mejor proporciona los valores hemáticos encontrando resultados satisfactorios en
la medición de leucocitos.

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X.CONCLUSION
Luego de haber analizado los resultados obtenidos a través de la investigación se llegó a la siguiente
conclusión:

Evaluando los valores hemáticos de la administración de Viusid al iniciar el estudio afirma que la
distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de concentración y dosis administradas
en el tiempo inicial (To, día 8), en la dosis mínima R1 (Conc. 66 µg/0.2ml) los datos están más
concentrados y hay menos variabilidad en los valores; así mismo en la distribución de los valores
hemáticos en el tiempo final (T1, día 15), se observa que la dosis mínima R1 (66 µg/0.2ml), los datos
están más concentrados. Para ambas mediciones (To, día 8 y T1, día 15) se obtuvieron mejores
resultados por lo tanto R1 puede ser utilizada para mejorar la respuesta inmunológica en Hámster
Sirio Dorado evidenciando resultados satisfactorios en la medición de leucocitos.

En cambio, en la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de concentración y

dosis administradas del extracto Handroanthus serratifolius en el tiempo inicial (To, día 8), se observa
que la dosis media E2 (Conc. 97.6µg/0.2ml) los datos están más concentrados y hay menos
variabilidad de los valores. Así mismo en la distribución de los valores hemáticos en el tiempo final
(T1, día 15), tiene una variación en los valores donde se observa que la dosis media E2 (Conc.
97.6µg/0.2ml) los datos están más concentrados y hay menos variabilidad de los valores para ambas
mediciones (To, día 8 y T1, día 15) se obtuvieron mejores resultados en la dosis media, por los tanto,
E2 puede ser utilizada para mejorar la respuesta inmunológica en Hámster Sirio Dorado evidenciando
resultados satisfactorios en la medición de leucocitos.

Por ende, en la distribución de los valores hemáticos para el grupo de control negativo(placebo) en
el tiempo inicial (To, día 8) y tiempo final (T1, día 15), se observa que los datos están menos
concentrados y hay menor variabilidad en los valores, este grupo de control no presentó cambios y
se utilizó como grupo de referencia para comprar los valores de la administración del extracto y
Viusid.

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Para finalizar con la distribución de los valores hemáticos en los distintos niveles de concentración y
dosis administradas, en el tiempo inicial (To, día 8) y tiempo final (T1, día 15) de la valoración teniendo
variación en los valores, donde se observa que ambos grupos de estudio Solución de Referencia
(Viusid) y extracto Handroanthus serratifolius los datos están más concentrados y hay menos
variabilidad, por lo que se demuestra que la dosis 1 de los dos grupos es la que mejor proporciona
los valores hemáticos encontrando resultados satisfactorios en la medición de leucocitos, , teniendo
una misma respuesta farmacológica proporcionando un resultado efectivo para la especie
Handroanthus serratifolius como para el Viusid, concluyendo que el extracto en estudio funciona
como producto farmacéutico.

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XI.RECOMENDACIONES

 Utilizar otras partes de la especie Handroanthus serratifolius para encontrar otras propiedades
medicinales.
 Seguir realizando estudios relacionados con la planta y el uso farmacológico de la misma.
 Realizar con precisión y exactitud técnica de extracción de la sangre y así evitar errores en los
resultados.
 Realizar una correcta manipulación para evitar estrés en los animales y así garantizar la
efectividad del estudio.
 Realizar estudios clínicos de la especie Handroanthus serratifolius.
 Elaborar forma farmacéutica a base de la especie Handroanthus serratifolius
 Continuar investigaciones de especie vegetales en animales de experimentación encaminados a
validar científicamente su uso.

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XII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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hamster (Mesocricetus auratus) experimentally infected with Leishmania infantum through
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7. Carrizo J, G. S. (1991.). Guía de Arboles de Jardín Botánico Miguel Lilo. Serie Monográfica y
Didáctica n° 13. Obtenido de Instituto Miguel Lilo y Facultad de Ciencias Naturales. Univ.
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8. Catálogo de visualización de datos Diagrama de caja y bigotes. . (22 de febrero de 2021).

Obtenido de https://datavizcatalogue.com/ES/metodos/diagrama_cajas_y_bigotes.html.

9. Doctoralia. (03 de Diciembre de 2020). VIUSID. . Obtenido de

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preventivo de la tabebuia serratifolia (palo de arco) en un modelo murino de colitis aguda
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XIII.ANEXOS

Exámenes de biometría hemática completa en Hámster de experimentación

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1. CRONOGRAMA
Periodo
No Actividad Responsable
Jun Jul Agst Sept Oct Nov Dic Ene Feb Mar
1 Documentación de H. Serratifolius y sus x Lic. Kelvin Núñez
propiedades.
2 Elaboración de protocolo de trabajo. Tema, x Lic. Kelvin Núñez
planteamiento del problema, objetivos e
hipótesis.
3 Extracción por Maceración acelerada, extracto x Lic. Kelvin Núñez
hidroalcohólico 35%, 50% y 70%.
5 Prueba de solidos totales x Lic. Kelvin Núñez
6 Preparación extracto hidroalcohólico 50% x Lic. Kelvin Núñez
7 Preparación de soluciones de Extracto y Viusid x Lic. Kelvin Núñez
8 Administración del extracto x Lic. Kelvin Núñez
9 Marco Teórico x x x x Lic. Kelvin Núñez
10 Diseño Metodológico x Lic. Kelvin Núñez
11 Resultados y análisis de Resultados x x Lic. Kelvin Núñez
12 Conclusiones x Lic. Kelvin Núñez
13 Recomendaciones x Lic. Kelvin Núñez
14 Anexos x Lic. Kelvin Núñez
15 Revisión del informe final Lic. Kelvin Núñez

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2. Esquema de separación de animales de Experimentación

Grupos de Animales de Experimentación

Grupo A Grupo B Control C-

Handroanthus Viusid Placebo

serratifolius

18 Hámster
18 Hámster 9 Hámster

Dosis 1 Dosis 2 Dosis 1 Dosis 2

48.8 µg/ 0.2 97.6 µg/ 0.2 ml 66 µg/ 0.2 ml 80 µg/ 0.2 ml
ml

Dosis 3 Dosis 3

195.3 µg/ 0.2 220 µg/ ml

ml

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Anexo 4:

Imagen 9: Cristalería Imagen 10: pesado de

Handroanthus serratifolius

Imagen 11: Maceración del extracto Imagen 12: Filtración del extracto

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Imagen 13: Pesada del Viusid Imagen 14: Toma Alícuotas

Imagen 17: Hámster de Imagen 18: Peso y talla de los

experimentación hámster

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Imagen 19: Admón. del extracto Imagen 20: Hámster durante el estudio

Imagen 21: Limpieza de hámster Imagen 22: Sacrificio de hámster

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Imagen 23: Anatomía de Hámster Imagen 24: Punción cardiaca

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