Este documento presenta información sobre la identificación y cuantificación de proteínas. Explica que las proteínas se componen de aminoácidos unidos por enlaces amida, y que existen métodos como la reacción xantoproteica y la prueba de Biuret para identificar proteínas mediante la detección de grupos funcionales como anillos aromáticos. También cubre métodos para cuantificar proteínas totales, como absorción de luz y métodos colorimétricos y fluorimétricos.
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Este documento presenta información sobre la identificación y cuantificación de proteínas. Explica que las proteínas se componen de aminoácidos unidos por enlaces amida, y que existen métodos como la reacción xantoproteica y la prueba de Biuret para identificar proteínas mediante la detección de grupos funcionales como anillos aromáticos. También cubre métodos para cuantificar proteínas totales, como absorción de luz y métodos colorimétricos y fluorimétricos.
Este documento presenta información sobre la identificación y cuantificación de proteínas. Explica que las proteínas se componen de aminoácidos unidos por enlaces amida, y que existen métodos como la reacción xantoproteica y la prueba de Biuret para identificar proteínas mediante la detección de grupos funcionales como anillos aromáticos. También cubre métodos para cuantificar proteínas totales, como absorción de luz y métodos colorimétricos y fluorimétricos.
Este documento presenta información sobre la identificación y cuantificación de proteínas. Explica que las proteínas se componen de aminoácidos unidos por enlaces amida, y que existen métodos como la reacción xantoproteica y la prueba de Biuret para identificar proteínas mediante la detección de grupos funcionales como anillos aromáticos. También cubre métodos para cuantificar proteínas totales, como absorción de luz y métodos colorimétricos y fluorimétricos.
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LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I Dra. Alejandra I. Martínez Glez.
4. Identificación y cuantificación de proteínas Fecha de entrega: 17/03/2023
Nombre del equipo: Equipo NOVA Nombre: Mariana Torresdey Nevárez Matrícula: 208603 Nombre: Miriam Ortiz Lozano Matrícula: 208644 Nombre: Oscar Ramon Ferrer Vega Matrícula: 213269 Nombre: Alexis Betancourt Cruz Matrícula: 213276 Introducción Las proteínas se componen por los veinte aminoácidos comunes y estos forman parte de todas las células, los aminoácidos tienen como componentes principales un grupo amino, un grupo carboxilo y una cadena lateral que es única para cada aminoácido (figura 1). Las proteínas se forman a partir de la condensación del grupo amino y el grupo carboxilato, generando un enlace amida (figura 2). Una proteína funcional puede ser un solo polipéptido o estar compuesta por diferentes cadenas de polipéptidos unidas fuertemente para formar una estructura mas compleja, y los polipéptidos son la unión de un extremo a otro de muchos aminoácidos, este puede contener cientos de residuos de aminoácido (Horton et al., 2008).
Figura 1. Estructura de los aminoácidos.
Figura 2. Formación de proteína por medio de aminoácidos.
La reacción xantoproteica se usa para la identificación de un anillo aromático en diferentes
proteínas, con el propósito de determinar si contienen fenilamina o tirosina. Se obtiene calentando la materia albuminoidea en disolución con ácido nítrico, el resultado es la coloración amarilla, se puede ver en la solución o en grumos que se pueden llegar a formar de la albumina. Estas coloraciones se explican por la acción de reactivos sobre los diversos grupos atómicos contenidos en la molécula proteica, en este caso, ocurre por la nitración de los anillos aromáticos (Gálvez, s/f). Otra prueba que se utiliza en la detección de un compuesto de origen proteico es la prueba o reacción de Biuret, se utiliza para detectar proteínas, péptidos y otros compuestos con dos o más enlaces. En este método se utilizan el reactivo de Biuret que contiene iones cúpricos que provoca la formación de un complejo de composición desconocida entre el ion cúprico y los grupos carboxilo y amino, cuando mayor es la cantidad de proteína presente es más susceptible a reaccionar debido a los enlaces peptídicos, esta es la razón causante de un color violeta, ya que reaccionan con las sales cúpricas en medio alcalino (Fernández, 2021). Un aspecto importante es la cuantificación de las proteínas, que es la medición de la concentración de proteína total en una muestra, se puede llevar a cabo directamente mediante absorbancia o indirectamente por medio de métodos colorímetros como el de la reacción de Biuret mencionada anteriormente, además, se puede utilizar un método fluorimetrico que tiene una mayor ventaja debido a que tiene una mayor sensibilidad (Molecular Devices, 2022). Referencias Fernández, A. (2021). Test colorimétrico de Biuret. Revista médica https://revistamedica.com/test-colorimetrico-biuret/ Gálvez, I. & Garate, O. (s/f). Las reacciones de Becher y de Andrewes en cirugía urinaria. Revista Argentina. https://revistasau.org/index.php/revista/article/viewFile/202/152 Horton, H., Moran, A., Scrimgeour, K., Mark, D. & Rawn, J. (2008). Principios de bioquímica. (4a ed.) México: Pearson Educación. Molecular Devices. (2022). Detección, cuantificación y análisis de proteínas. https://es.moleculardevices.com/applications/protein-detection-quantitation-and-analysis