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LUPAKCT

Reactivo  de  tiempo  de  coagulación  de  caolín  para  la  detección  de  anticoagulantes  lúpicos.

RESUMEN

Las  pruebas  de  detección  de  anticoagulantes  lúpicos  (LA)  se  investigan  con  frecuencia  en  pacientes  trombofílicas  o  mujeres  con  pérdida  fetal.  Los  
anticuerpos  LA  reconocen  el  complejo  protrombina­fosfolípido  (humano),  inhibiendo  así  las  reacciones  de  coagulación  dependientes  de  fosfolípidos.  El  
tiempo  de  coagulación  del  caolín  (KCT)  se  ha  considerado  a  menudo  como  la  prueba  más  sensible  para  la  detección  de  anticoagulantes  circulantes.  El  
KCT  detecta  todo  tipo  de  inhibidores,  incluidos  los  dirigidos  contra  el  factor  VIII  y  la  activación  por  contacto,  así  como  la  heparina.  Para  superar  este  
problema,  se  han  desarrollado  pruebas  más  específicas,  como  la  prueba  diluida  del  veneno  de  víbora  de  Russell  (DRVVT),  disponible  como  LADS  (Ref:  
10671010)  de  Tulip,  que  evita  la  mayoría  de  las  etapas  superiores  del  mecanismo  de  coagulación.  Sin  embargo,  en  muchas  situaciones  clínicas,  como  la  
detección  de  LA  durante  el  embarazo,  suele  ser  deseable  utilizar  un  método  de  detección  amplio,  como  el  reactivo  Lupakct  (tiempo  de  coagulación  del  
caolín).

PRESENTACIÓN

ÁRBITRO 10672050  10672020

R1 5ml 2ml

R2 5ml 2ml

prospecto 1 1

REACTIVOS

1.  Reactivo  de  tiempo  de  coagulación  de  caolín  Lupakct  (R1):  contiene  suspensión  de  caolín  estabilizada  en  tampones  y  conservantes.
2.  Cloruro  de  calcio  (R2):  solución  de  cloruro  de  calcio  0,025  M

ALMACENAMIENTO  Y  ESTABILIDAD  DE  REACTIVOS

Almacenar  el  reactivo  a  2­8°C.  NO  CONGELAR.
La  vida  útil  del  reactivo  es  según  la  fecha  de  caducidad  mencionada  en  las  etiquetas  de  los  viales  del  reactivo.  El  reactivo  no  contaminado  es  estable  
durante  1  año  a  2­8°C.

PRINCIPIO

El  tiempo  de  coagulación  del  caolín  es  esencialmente  una  prueba  del  tiempo  de  tromboplastina  parcial  activada  sin  fosfolípidos  añadidos.  Se  cree  que  
este  último  es  el  objetivo  principal  de  los  anticuerpos  antifosfolípidos  que  a  menudo  se  asocian  con  los  anticoagulantes  lúpicos  y  que,  por  tanto,  prolongan  
la  prueba.  Si  la  prueba  se  realiza  en  una  variedad  de  mezclas  de  plasma  normal  y  del  paciente,  se  obtienen  diferentes  patrones  de  respuesta  que  indican  
la  presencia  de  anticoagulantes  lúpicos,  deficiencias  de  uno  o  más  de  los  factores  de  coagulación  o  el  efecto  cofactor  del  lupus.

NOTA
1. Reactivo  de  diagnóstico  in  vitro  para  uso  profesional  y  de  laboratorio  únicamente.  No  para  uso  medicinal.
2.  El  reactivo  de  tiempo  de  coagulación  del  caolín  no  es  de  origen  humano,  por  lo  que  la  contaminación  por  HBsAg,  VHC  y  VIH  es  prácticamente
excluido.

3.  El  reactivo  contiene  0,01  %  de  timerosal  como  conservante.
4.  Es  muy  importante  utilizar  puntas  de  micropipeta  limpias  y  secas  para  dispensar  el  reactivo.
5.  Evite  la  exposición  del  reactivo  a  temperaturas  elevadas  y  contaminación.  Vuelva  a  colocar  la  tapa  inmediatamente  después  de  su  uso  y  guárdela  
únicamente  a  las  temperaturas  recomendadas.
6.  No  utilice  reactivos  dañados  o  con  fugas.

TOMA  Y  PREPARACIÓN  DE  MUESTRAS

No  se  requiere  ninguna  preparación  especial  del  paciente  antes  de  la  recogida  de  muestras  mediante  técnicas  aprobadas.  Extraer  sangre  sin  estasis  
venosa  indebida  y  sin  espumar  con  una  jeringa  de  plástico  provista  de  una  aguja  corta  de  19  a  20  SWG.  La  punción  venosa  debe  ser  "limpia"  y,  si  hay  
alguna  dificultad,  coger  una  jeringa  y  una  aguja  nuevas  y  probar  con  otra  vena.  Transfiera  la  sangre  a  tubos,  después  de  retirar  la  aguja  de  la  jeringa.

Mezclar  exactamente  nueve  partes  de  sangre  recién  extraída  con  una  parte  de  citrato  trisódico  (0,11  mol/l,  3,2%).  Centrifugar  inmediatamente  durante  20  
minutos  a  3000  rpm  (aproximadamente  2000  g)  y  transferir  el  plasma  a  un  tubo  de  ensayo  limpio.  El  plasma  debe  analizarse  dentro  de  las  tres  horas  
posteriores  a  la  extracción  de  sangre.

MATERIAL  ADICIONAL  REQUERIDO
Tubos  de  ensayo  de  12  x  75  mm  (se  prefieren  los  tubos  de  plástico),  pipetas,  cronómetro,  baño  María  o  bloque  calefactor  a  37°C,  plasma  normal  fresco.
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PROCEDIMIENTO  DE  PRUEBA

Método  manual

1.  Deje  que  los  reactivos  alcancen  la  temperatura  ambiente.  Antes  de  su  uso,  el  reactivo  debe  mezclarse  bien  agitándolo  suavemente.  No  sacudir.
2.  Aspire  del  vial  de  reactivo  suficiente  reactivo  para  los  requisitos  de  prueba  inmediatos  en  un  tubo  de  ensayo  completamente  limpio  y  seco.  Los  tubos  de  ensayo  separados  
que  contienen  el  reactivo  de  tiempo  de  coagulación  de  caolín  Lupakct  y  la  solución  de  cloruro  de  calcio  Lupakct  deben  llevarse  a  37  °C.  (Dependiendo  del  volumen  se  
requieren  aproximadamente  de  5  a  10  minutos).  No  incube  el  plasma  de  prueba.
3.  En  un  tubo  de  ensayo  de  12  x  75  mm,  agregue  100  µl  de  plasma  de  prueba  y  100  µl  de  reactivo  de  tiempo  de  coagulación  de  caolín  Lupakct.  Agite  el  tubo  brevemente  para  
mezclar  el  reactivo  y  el  plasma  y  coloque  el  tubo  a  37°C  durante  3  a  5  minutos.
4.  Después  del  período  de  incubación,  agregue  a  la  fuerza  100  µl  de  cloruro  de  calcio  precalentado  al  plasma  y  al  caolín  Lupakct.
mezcla  de  reactivos  de  tiempo  de  coagulación,  simultáneamente  inicie  un  cronómetro.
5.  Incline  suavemente  el  tubo  hacia  adelante  y  hacia  atrás  y  detenga  el  cronómetro  tan  pronto  como  la  primera  hebra  de  fibrina  sea  visible  y  el  gel/coágulo
comienza  la  formación.  Registre  el  tiempo  en  'segundos'.
6.  Repita  los  pasos  3  a  5  para  realizar  una  prueba  duplicada  en  la  misma  muestra.

7.  Encuentre  el  promedio  de  los  valores  de  prueba  duplicados.  Éste  es  el  tiempo  de  coagulación  del  caolín  del  plasma  del  paciente.
8.  De  manera  similar,  repita  los  pasos  3  a  5  dos  veces  y  registre  los  valores  duplicados  usando  plasma  normal  en  lugar  de  plasma  de  prueba  y  encuentre  el
promedio  de  valores  duplicados.  Este  es  el  KCT  del  plasma  normal.

Estudios  de  mezcla
Como  el  KCT  es  sensible  a  muchos  tipos  de  anomalías  de  la  coagulación  para  hacerlo  más  específico  para  los  inhibidores  circulantes,  el  KCT  debe  realizarse  con  mezclas  de  
plasma  normal  y  del  paciente.
1.  Mezcle  500  µl  de  plasma  del  paciente  con  500  µl  de  plasma  normal  para  obtener  una  mezcla  50:50  en  un  tubo  de  ensayo.
2.  Mezcle  200  µl  de  plasma  del  paciente  con  800  µl  de  plasma  normal  para  obtener  una  mezcla  20:80  en  otro  tubo  de  ensayo.
3.  Repita  los  pasos  3  a  7  y  obtenga  el  tiempo  KCT  para  cada  una  de  las  mezclas  50:50  y  20:80.

Si  se  utiliza  un  instrumento  de  coagulación  para  realizar  las  pruebas,  se  deben  seguir  estrictamente  las  instrucciones  del  fabricante  del  instrumento.  Se  puede  utilizar  cualquier  
protocolo  de  instrumento  para  realizar  una  prueba  APTT  para  determinar  el  KCT  con  Lupakct  simplemente  sustituyendo  el  reactivo  APTT  con  el  reactivo  de  tiempo  de  
coagulación  de  caolín  Lupakct.

INTERPRETACIÓN  DE  RESULTADOS

Los  resultados  de  KCT  se  pueden  expresar  
como:  1.  KCT  en  segundos

2.  Relación  KCT  (KCT)  utilizando  una  mezcla  20:80  de  paciente:  plasma  normal

KCT  =  [KCT  (mezcla  20:80)  ­  KCT  (Normal)]

KCT  (normal)

3.  Índice  de  Rosner  (RI)  utilizando  una  mezcla  50:50  de  paciente:  plasma  normal
RI  =  KCT  (mezcla  50:50)  ­  KCT  (normal)
KCT  (Paciente)

Se  puede  sospechar  una  anomalía  cuando  la  prueba  KCT  supera  el  rango  normal  (60  ­  120  segundos).  Es  más  probable  que  esta  anomalía  sea  anticoagulante  lúpico  si:

1.  KCT  es  más  de  130  segundos  2.  KCT  >  0,10

3.  IR  >  0,15

Como  el  tiempo  de  coagulación  obtenido  entre  instrumentos  con  diferentes  principios  de  medición  y  también  entre  diferentes  poblaciones  puede  variar,  cada  laboratorio  debe  
establecer  su  propio  rango  normal.

OBSERVACIONES

1.  Un  KCT  de  control  de  <60  segundos  puede  indicar  contaminación  del  plasma  normal  (control)  con  fosfolípidos.
2.  Lupakct  no  se  recomienda  para  pacientes  sometidos  a  tratamiento  anticoagulante  con  heparina.
3.  El  rendimiento  de  Lupakct  debe  validarse  utilizando  plasmas  positivos  para  LA  normales  y  conocidos.
4.  La  homogeneización  de  la  suspensión  del  reactivo  de  tiempo  de  coagulación  Lupakct  Kaolin  es  importante  para  lograr  resultados  precisos  y  consistentes.
resultados.
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CARACTERÍSTICAS  DE  PRESENTACIÓN
Los  estudios  de  precisión  se  realizaron  utilizando  una  muestra  de  plasma  normal,  control  alto  de  LA  (n=15)  en  un  coagulómetro  Hemostar  XF.
Precisión  inter/intraensayo

Muestras Significar Dakota  del  Sur

CV  (%)

Control  plasmático  normal 74,9 3.4 4.5

LA  alto  control 271 10.1 3.7

ESPECIFICIDAD
Se  realizaron  estudios  de  especificidad  en  LA  conocida  como  control  alto  y  bajo  control,  50  muestras  de  plasma  normal  y  plasmas  deficientes  en  
factor.

GARANTÍA
El  producto  está  diseñado  para  funcionar  como  se  describe  en  la  etiqueta  y  el  prospecto.  El  fabricante  renuncia  a  cualquier  garantía  implícita  de  uso  
y  venta  para  cualquier  otro  fin.

BIBILIOGRAFÍA
1.  Dacie  y  Lewis,  Hematología  práctica,  novena  edición.
2.  J.  Gibson,  Elizabeth  Starling,  Leonie  Date,  KA  Rickard,  H  Kronenberg,  Métodos  técnicos,  cribado  simplificado
Procedimiento  para  detectar  el  inhibidor  del  lupus,  J.  Clin.  Patol.  1988;  41:226­231.
3.  Anticoagulante  lúpico,  anticuerpos  anticardiolipina,  pérdida  fetal  y  LES,  Blood,  vol.  80  (15  de  agosto  de  1992:  págs.  859­862).
4.  John  T.  Brandt,  Douglas  A.  Triplett,  Barbara  Alving,  Inge  Scharrer,  Criterios  para  el  diagnóstico  de  anticoagulantes  lúpicos:  una
Actualizar;  Trombosis  y  hemostasia,  74  (4)  1185­90  (1995).
5.  T.  Exner,  KA  Rickard  y  H.  Kronenberg.  Una  prueba  sensible  que  demuestra  el  antiocoagulante  lúpico  y  sus  patrones  de  comportamiento,  British  
Journal  of  Haematology,  1978,  40,  143­151.
6.  Datos  archivados:  Tulip  Diagnostics  (P)  Ltd.,  India.
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TECLAS  DE  SÍMBOLOS

Temperatura Contiene  suficiente Producción

Fabricante PD
limitación para  <n>  pruebas Sitio

Consultar
Usar  por Instrucciones   R1 Reactivo  de  tiempo  de  coagulación  de  caolín
de  uso

Fecha  de
Catálogo  REF R2 Cloruro  de  calcio
Fabricar Número

in  vitro
Número  de  lote  del  lote DIV REACTIVO Descripción  del  reactivo
Dispositivo  de  diagnóstico

Autorizado
Representante Reactivo  KCT  para  la  detección  de
Por  este  camino REPRESENTANTE  DE  LA  CE KCT Anticoagulantes  lúpicos
en  el  europeo
Comunidad

TULIP  DIAGNOSTICS  (P)  LTD.

PD

GITANJALI,  BLOQUE  DE  TULIPÁN,  DR.  ANTONIO  DO  REGO   PARCELA  NOS.  92/96,  FASE  II  C,  VERNA  IND.  EST.,  
BAGH,  ALTO  SANTACRUZ,  COMPLEJO  BAMBOLIM  PO,  GOA­403   VERNA,  GOA­403  722,  INDIA.
202,  INDIA.  Sitio  web:  www.tulipgroup.com

REPRESENTANTE  DE  LA  CE

CMC  Medical  Devices  &  Drugs  SL,  C/  Horacio  Lengo  nº  18,  CP  29006,  Málaga,  España
10/­7R1E1V
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