APTTest

ellágico
C Reactivos para la determinación del Tiempo de
Tromboplastina Parcial Activada

SIGNIFICACION CLINICA estasis o trauma) y colocar en un tubo con anticoagulante en

El tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT) es una proporción 9 + 1 exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml
prueba sensible a la deficiencia de factores procoagulantes de Anticoagulante TP de Wiener lab.). Mezclar suavemente.
del plasma así como a la presencia de ciertos inhibidores Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos. Es
de la coagulación. Sirve para detectar anormalidades en recomendable efectuar la extracción con jeringas plásticas.
la vía intrínseca de la coagulación, como son los factores b) Aditivos: para obtener el plasma debe emplearse Anti-
necesarios para la formación del activador intrínseco de coagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 130 mmol/l
la protrombina, o sea los factores VIII, IX, XI y XII. Tam- (3,8%) o 109 mmol/l (3,2%).
bién detecta deficiencias severas de los factores II, V, X y c) Sustancias interferentes conocidas:
fibrinógeno, no siendo así con los trastornos plaquetarios, - Las contaminaciones, visibles o no, son causa de tiempos
las deficiencias de los factores VII y XIII ni los problemas falsamente prolongados.
vasculares. La rapidez, sencillez y reproducibilidad de la - No debe emplearse EDTA o heparina para obtener plasma.
prueba la hacen muy adecuada para el control de la tera- - Hemólisis visibles dificultan la medición foto-óptica de los
péutica anticoagulante por heparina. También permite la resultados.
identificación rápida de hemofílicos en potencia, a fin de Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
poder someterlos a tratamientos preventivos prequirúrgicos drogas en el presente método.
y evitar problemas hemorrágicos. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
plasma debe mantenerse en refrigerador (2-10oC) hasta
FUNDAMENTOS DEL METODO el momento de efectuar la prueba. Este período no debe
El ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coa- prolongarse más de 4 horas. En caso de no poder proce-
gular un plasma descalcificado, colocado en un baño a 37oC sarse en este lapso, el plasma debe congelarse a -20oC.
y en presencia de un exceso de cefalina, activador y calcio. Este procedimiento, al igual que el descongelado, debe
realizarse con rapidez (sumergiendo en baño a 37oC) previo
REACTIVOS PROVISTOS a la determinación.
A. Reactivo A: viales conteniendo cefalina bovina con ácido La muestra debe conservarse hasta el momento de su
ellágico como activador soluble. análisis en tubos plásticos para minimizar los efectos de
B. Reactivo B: solución de cloruro de calcio estable 0,025 mol/l. activación por contacto que pueden ocurrir con los tubos
de vidrio.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivo A: listo para usar. Homogeneizar antes de usar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Reactivo B: listo para usar. - Tubos de hemólisis.
- Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados.
PRECAUCIONES - Baño de agua a 37oC.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Cronómetro.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Fuente luminosa, para la observación del coágulo.
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente. PROCEDIMIENTO
Precalentar el Reactivo B antes de realizar la prueba en
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE baño de agua a 37oC.
En un tubo de hemólisis colocar:
ALMACENAMIENTO
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- Muestra (plasma desconocido o control) 100 ul
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo A 100 ul
No congelar.
Mezclar e incubar 3 minutos a 37oC, luego agregar:
MUESTRA Reactivo B (a 37oC) 100 ul
Plasma
a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente (evitando Disparar simultáneamente un cronómetro. Agitar breve-

861230624 / 01 p. 1/9
 mente para homogeneizar el contenido, mantener en el trucciones de almacenamiento en MUESTRA.
baño unos 25 segundos. Luego sacar el tubo del baño, El mecanismo de la coagulación involucra una serie de
inclinar suavemente una vez por segundo y detener el reacciones enzimáticas que pueden ser influenciadas por
cronómetro en el momento de la formación del coágulo. toda condición que afecte a los sistemas enzimáticos en
Pueden emplearse para la lectura de los resultados general, razón por la cual se deben observar las mismas
aparatos automáticos o semiautomáticos que detecten precauciones metodológicas.
la formación de coágulos de fibrina, por métodos foto- Debe tenerse en cuenta que variaciones en la relación anti-
ópticos o mecánicos. coagulante/muestra o en la concentración de citrato utilizada
Tomar nota del tiempo de coagulación. afectan los tiempos de tromboplastina parcial activada, por
lo que se recomienda controlar la dosis de anticoagulante
empleada al tomar la muestra.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Los resultados pueden expresarse de distinta forma: PERFORMANCE
1) como tiempo de tromboplastina parcial activada en Reproducibilidad: los estudios de precisión se realizaron
segundos; siguiendo una modificación del protocolo EP5-A del NCCLS
2) como relación entre el tiempo obtenido con el desconocido (National Committee on Clinical Laboratory Standards). Se
y el de un plasma control. obtuvieron los siguientes resultados:
Precisión intraensayo
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Plasma Control normal - patológico de Wiener lab. Muestra Nivel D.S. C.V.
Plasma Control normal 34,1 seg ± 0,49 seg 1,44%
VALORES DE REFERENCIA
El intervalo de valores de referencia observados en indivi- Plasma Control patológico 87,9 seg ± 0,49 seg 0,56%
duos normales, empleando la técnica manual mencionada, Pool de plasmas normales 29,3 seg ± 0,35 seg 1,18%
oscila entre 24-35 segundos.
Se consideran fuera de lo normal valores que difieran en más Precisión total
de 6 segundos de un pool de plasmas normales.
Muestra Nivel D.S. C.V.
Es recomendable que cada laboratorio procese un pool de
plasmas normales con cada lote de reactivos empleado y Plasma Control normal 34,1 seg ± 1,00 seg 2,93%
que correlacione los valores obtenidos para los pacientes Plasma Control patológico 87,9 seg ± 3,66 seg 4,16%
con el de dicho plasma, haciendo constar estos resultados
en el informe. Pool de plasmas normales 29,3 seg ± 0,51 seg 1,75%
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de
referencia a partir de las técnicas e instrumental empleado, PRESENTACION
ya que los valores de APTT de individuos sanos varían en - 150 determinaciones (6 x 2,5 ml). (Cód 1705004).
función del laboratorio, dependiendo de la técnica empleada.
BIBLIOGRAFIA
CURVA DE CALIBRACION - Bell, W.N.; Alton, H.G. - Nature 174:880 (1954).
Este método es útil como control de la respuesta a la hepa- - Dacie, J.B.; Lewis, S.M. - Hematología Práctica - Ediciones
rina en pacientes tratados con este anticoagulante. Toray, 2a Edición (1970).
La técnica empleada es la siguiente: - Wintrobe, M.M. - Hematología Clínica, 3a. Edición Inter-
Preparar una Solución de Trabajo de heparina en solución médica (1969).
fisiológica cuya concentración sea 10 unidades/ml. Debe - Bragos, I.; Rodríguez Pécora, S.; Lorenzo, L.; Capriotti,
emplearse la misma heparina que se suministra al paciente. G. - 53° Triduo Bioquímico Científico Anual, Bahía Blanca.
Preparar diluciones de esta Solución de Trabajo utilizando (1988).
un pool de plasmas frescos normales o Plasma Control - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
normal como diluyente. Se deberán obtener diluciones de AACC Press, 4th ed., 2001.
0,8; 0,6; 0,4; 0,2 y 0,1 unidades/ml.
Determinar el tiempo de tromboplastina parcial para cada
una de estas soluciones así como para el pool de plasmas
y graficar en papel semilogarítmico APTT vs. concentración
de heparina.
El valor obtenido para el paciente debe correlacionarse con
los valores de la gráfica para obtener la concentración actual
de heparina circulante.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes conocidas y Estabilidad e ins-

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 APTTest
ellágico
C Reagente para a determinação do Tempo de
Tromboplastina Parcial Ativada

SIGNIFICADO CLÍNICO porção 9 + 1 exata (exemplo: 4,5 ml de sangue + 0,5 ml de

O tempo de tromboplastina parcial ativada (APTT) é uma Anticoagulante TP de Wiener lab.). Misturar suavemente.
prova sensível à deficiência de fatores pró-coagulantes do Centrifugar e separar o plasma antes de 30 minutos. É
plasma, assim como à presença de certos inibidores da recomendável proceder à extração com seringas plásticas.
coagulação. Serve para detectar anomalias na via intrín- b) Aditivos: para obter o plasma deve-se empregar o Anti-
seca da coagulação, como os fatores necessários para a coagulante TP de Wiener lab. ou citrato de sódio 130 mmol/l
formação do ativador intrínseco da protrombina, ou seja, (3,8%) ou 109 mmol/l (3,2%).
os fatores VIII, IX, XI e XII. Também detecta deficiências c) Substâncias interferentes conhecidas:
severas dos fatores II, V, X e fibrinogênio, não sendo assim - As contaminações, visíveis ou não, são causa de tempos
com os distúrbios plaquetários, deficiências dos fatores VII falsamente prolongados.
e XIII, nem problemas vasculares. - Não deve-se utilizar EDTA ou heparina para obter o plasma.
A rapidez, simplicidade e reprodutibilidade da prova a tornam - Hemólises visíveis dificultam a medição foto-óptica dos
muito adequada para o controle da terapêutica anticoagulan- resultados.
te por heparina. Também permite a identificação rápida de Referência bibliográfica de Young para efeitos de drogas
hemofílicos em potencial, a fim de submetê-los a tratamentos neste método.
preventivos pré-cirúrgicos e evitar problemas hemorrágicos. d) Estabilidade e instruções de armazenamento: o plas-
ma deve ser mantido sob refrigeração (2-10oC) até o momen-
FUNDAMENTOS DO MÉTODO to de efetuar a prova. Este período não deve prolongar-se
O ensaio se baseia na medida do tempo que um plasma mais que 4 horas. Caso de não poder processar-se neste
descalcificado demora para coagular, quando colocado lapso de tempo, o plasma deve ser congelado a -20oC.
em banho-maria a 37oC e na presença de um excesso de Este procedimento, assim como o descongelamento, deve
cefalina, ativador e cálcio. ser feito com rapidez (submersão em banho-maria a 37oC)
anteriormente à determinação.
REAGENTES FORNECIDOS A amostra deve ser conservada em tubos plásticos até o
A. Reagente A: frascos contendo cefalina com ácido ellágico momento de sua análise, para minimizar os efeitos de ativa-
como ativador particulado. ção por contato que podem ocorrer com os tubos de vidro.
B. Reagente B: solução de cloreto de cálcio estável 0,025 mol/l.
MATERIAL NECESSÁRIO (não fornecido)
INSTRUÇÕES DE USO - Tubos de hemólise.
Reagente A: pronto para uso. Homogeneizar antes de usar. - Pipetas e micropipetas para medir os volumes indicados.
Reagente B: pronto para uso. - Banho-maria a 37oC.
- Cronômetro.
PRECAUÇÕES - Fonte luminosa, para observação do coágulo.
Os reagentes são para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar os reagentes observando as precauções habituais
de trabalho no laboratório de análises clínicas. PROCEDIMENTO
Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas Pré-aquecer o Reagente B, antes de realizar a prova,
conforme à regulação local vigente. em banho-maria a 37oC.
Em um tubo de hemólise, colocar:
ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE
ARMAZENAMENTO Amostra (plasma desconhecido ou controle) 100 ul
Os Reagentes Fornecidos são estáveis sob refrigeração até Reagente A 100 ul
a data de vencimento indicada na embalagem. Não congelar.
Misturar e incubar 3 minutos a 37oC, logo adicionar:
AMOSTRA Reagente B (a 37oC) 100 ul
Plasma Disparar simultaneamente o cronômetro. Agitar breve-
a) Coleta: obter sangue cuidadosamente (evitando estase mente para homogeneizar o conteúdo, manter no banho
ou trauma), e colocar num tubo com anticoagulante na pro-

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 O mecanismo de coagulação envolve uma série de reações
por cerca de 25 segundos. Retirar o tubo do banho, enzimáticas que podem ser influenciadas por toda condição
inclinar suavemente uma vez por segundo e deter o que afete os sistemas enzimáticos em geral, razão pela qual
cronômetro no momento da formação do coágulo. devem-se observar as mesmas precauções metodológicas.
Podem ser utilizados para a leitura dos resultados apa- Deve-se ter em conta que variações na relação anticoagu-
relhos automáticos ou semi-automáticos que detectem a lante/amostra ou na concentração de citrato utilizada afetam
formação de coágulos de fibrina, por métodos foto-ópticos os tempos de tromboplastina parcial ativada, pelo que se
ou mecânicos. recomenda controlar a dose de anticoagulante empregada
Anotar o tempo de coagulação. ao tomar a amostra.

DESEMPENHO
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
a) Reprodutibilidade: os estudos de precisão foram reali-
Os resultados podem ser expressos de modos distintos:
zados através de uma modificação do protocolo EP5-A do
1) como tempo de tromboplastina parcial ativada em se-
NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory Stan-
gundos;
dards). Obtiveram-se os seguintes resultados:
2) como relação entre o tempo obtido com o desconhecido
e aquele referente a um plasma controle. Precisão intra-ensayo
Amostra Nível D.P. C.V.
MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE Plasma Control normal 34,1 seg ± 0,49 seg 1,44%
Plasma Control normal - patológico da Wiener lab. Plasma Control patológico 87,9 seg ± 0,49 seg 0,56%
Pool de plasmas normais 29,3 seg ± 0,35 seg 1,18%
VALORES DE REFERÊNCIA
O intervalo de valores de referência observados em indivídu- Precisão total
os normais, utilizando a técnica manual mencionada, oscila Amostra Nível D.P. C.V.
entre 24-35 segundos. Plasma Control normal 34,1 seg ± 1,00 seg 2,93%
Consideram-se fora do normal os valores que diferem mais Plasma Control patológico 87,9 seg ± 3,66 seg 4,16%
de 6 segundos de um pool de plasmas normais. Pool de plasmas normais 29,3 seg ± 0,51 seg 1,75%
É recomendável que cada laboratório processe um pool de
plasmas normais para cada lote de reagentes empregado, e APRESENTAÇÃO
que correlacione os valores obtidos para os pacientes com - 150 determinações (6 x 2,5 ml). (Cód. 1705004).
o do plasma controle, fazendo constar estes resultados no
informe. REFERÊNCIA
Cada laboratório deve estabelecer os seus próprios valores - Bell, W.N.; Alton, H.G. - Nature 174:880 (1954).
de referência a partir das técnicas e instrumental emprega- - Dacie, J.B.; Lewis, S.M. - Hematología Práctica - Ediciones
do, já que os valores de APTT de indivíduos sadios variam Toray, 2a Edição (1970).
segundo o laboratório e dependendo da técnica utilizada. - Wintrobe, M.M. - Hematología Clínica, 3a Edição Intermé-
dica (1969).
CURVA DE CALIBRAÇÃO - Bragos, I.; Rodriguez Pécora, S; Lorenzo, L; Capriotti,
Este método é útil como controle da resposta à heparina em G. - 53º Triduo Bioquímico Científico Anual, Bahía Blanca
pacientes tratados com aquele anticoagulante. (1988).
A técnica empregada é a seguinte: - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Preparar uma Solução de Trabalho de heparina em solu- AACC Press, 4th ed., 2001.
ção fisiológica, cuja concentração seja de 10 unidades/ml.
Deve-se empregar a mesma heparina que se administra
ao paciente.
Preparar diluições desta Solução de Trabalho utilizando-se
um pool de plasmas frescos normais o Plasma Control
normal como diluente. Devem-se obter diluições de 0,8;
0,6; 0,4; 0,2 e 0,1 unidades/ml.
Determinar o tempo de tromboplastina parcial para cada
uma destas soluções, assim como para o pool de plasmas
e plotar em papel semilogarítmico APTT x concentração de
heparina. O valor obtido para o paciente deve correlacionar-
se com os valores do gráfico, para obter a concentração atual
da heparina circulante.

LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Vide Substâncias interferentes conhecidas e Estabilidade e
instruções de armazenamento em AMOSTRA.

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 APTTest
ellágico
C Reagents for the determination of Activated Partial
Thromboplastin Time

SUMMARY the plasma before 30 minutes. It is recommended to use

The Activated Partial Thromboplastin Time (APTT) is a test plastic syringes for extraction.
sensitive to the deficiency of the plasma coagulation promot- b) Additives: use Wiener lab.'s Anticoagulante TP or 130 mmol/l
ing factors, as well as to the presence of certain coagulation (3,8%) or 109 mmol/l (3,2%) sodium citrate to obtain plasma.
inhibitors. c) Known interfering substances:
It detects disorders in the coagulation intrinsic pathway, such - Contaminations whether visible or not lead to falsely pro-
as the necessary factors for the formation of the intrinsic longed times.
prothrombin activator - i.e. factors VIII, IX, XI and XII. - Do not use EDTA or heparin to obtain plasma.
It also detects serious deficiencies in the factors II, V, X, and - Visible hemolysis makes difficult the photo-optic measure-
fibrinogen, but not the platelet disorders, the deficiencies in ment of the results.
the factors VII and XIII nor vascular problems. The test's See Young, D.S. in References for effect of drugs on the
speed, simplicity and reproducibility make it adequate for present method.
monitoring heparin anticoagulant therapy. It also allows the d) Stability and storage instructions: the plasma should be
quick identification of potential hemophiliacs so that they can kept in the refrigerator (2-10oC) until the test is performed. This
be subjected to pre-surgical preventive treatment to avoid period should not be extended for more than 4 hours. If the as-
bleeding problems. say cannot be performed within this period, freeze the plasma
at -20oC. It should be quickly frozen and thawed (immersing
PRINCIPLE the sample tube in a 37oC water bath) just before testing.
The assay is based on measuring the coagulation time of a Kept the sample in plastic tubes until assayed to minimize the
decalcified plasma placed on a water bath at 37oC and in the contact activation that may occur with glass tubes.
presence of an excess of cephalin, activator and calcium.
REQUIRED MATERIAL (non-provided)
PROVIDED REAGENTS - Hemolysis tubes
A. Reagent A: vials containing cephalin with ellagic acid as - Pipettes and micropipettes for measuring the stated vol-
a soluble activator. umes
B. Reagent B: 0.025 mol/l stable calcium chloride solution. - Water bath at 37oC
- Stopwatch
INSTRUCTIONS FOR USE - Light source, for clot observation
Reagent A: ready to use. Homogenize before use.
Reagent B: ready to use.
PROCEDURE
WARNINGS Warm the Reagent B in water bath at 37oC before perform-
Reagents are for “in vitro” diagnostic use. ing the test. In a hemolysis tube place:
Use the reagents according to the working procedures for
Sample (unknown plasma or control) 100 ul
clinical laboratories.
The reagents and samples should be discarded according Reagent A 100 ul
to the local regulations in force. Mix and incubate 3 minutes at 37 C. Then add:
o

STABILITY AND STORAGE INSTRUCTIONS Reagent B (at 37oC) 100 ul

Provided Reagents are stable in refrigerator (2-10oC) until the Start stopwatch simultaneously. Shake briefly to homog-
expiration date shown on the box. Do not freeze. enize content and keep in water bath for 25 seconds. Then
remove the tube from the water bath, tilt gently once every
SAMPLE second and stop the stopwatch when a clot is formed.
Plasma Automatic or semi-automatic instruments, capable of
a) Collection: obtain blood carefully (avoiding stasis or detecting fibrin clot formation by photo-optic or mechanic
trauma) and place into a tube with anticoagulant in an exact methods, can be used to read the results.
9+1 proportion (e.g.: 4.5 ml blood + 0.5 ml Wiener lab.'s Record the coagulation time.
Anticoagulante TP). Mix gently. Centrifuge and separate

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INTERPRETATION OF RESULTS Within Run
The results may be expressed as: Sample Mean S.D. C.V.
1) The Activated Partial Thromboplastin Time in seconds Plasma Control normal 34.1 sec ± 0.49 sec 1.44%
2) The ratio between the time obtained with the unknown Plasma Control patológico 87.9 sec ± 0.49 sec 0.56%
and the time obtained with a control plasma Normal plasma pool 29.3 sec ± 0.35 sec 1.18%

QUALITY CONTROL METHOD Total Run

Wiener lab.'s Plasma Control normal - patológico. Sample Mean S.D. C.V.
Plasma Control normal 34.1 sec ± 1.00 sec 2.93%
REFERENCE VALUES Plasma Control patológico 87.9 sec ± 3.66 sec 4.16%
The reference value range observed in normal individuals, Normal plasma pool 29.3 sec ± 0.51 sec 1.75%
with the mentioned manual technique, vary between 24-35
seconds. WIENER LAB PROVIDES
Values wich differ in more than 6 seconds with a normal - 150 tests (6 x 2.5 ml) (Cat. Nº 1705004).
control plasma are not considered within the normal range.
It is recommended that each laboratory processes a pool of REFERENCES
normal plasma with each lot of reagents used and to correlate - Bell, W.N.; Alton, H.G. - Nature 174:880 (1954).
the patients' values with that of the control plasma, recording - Dacie, J.B.; Lewis, S.M. - Hematología Práctica - Ediciones
the results in the report. Toray, 2° Edición (1970).
Each laboratory should establish its own reference values - Wintrobe, M.M. - Hematología Clínica, 3a. Edición Inter-
based on the techniques and devices used, as the APTT médica (1969).
values of healthy individuals vary with each laboratory de- - Bragos, I.; Rodríguez Pécora, S.; Lorenzo, L.; Capriotti,
pending on the technique used. G. - 53° Triduo Bioquímico Científico Anual, Bahía Blanca.
(1988).
CALIBRATION CURVE - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
This method is useful to control the patients’ response to AACC Press, 3rd ed., 1990.
heparin when treated with this anticoagulant.
The technique used is the following:
Prepare heparin Working Solution in saline solution with a
concentration of 10 units/ml. Use the same heparin adminis-
tered to the patient. Prepare dilutions of this Working Solution
using a pool of fresh normal plasmas or Wiener lab.'s Plasma
Control normal as diluent. Dilutions of 0.8; 0.6; 0.4; 0.2 and
0.1 units/ml, should be obtained.
Determine the partial thromboplastin time for each of
these solutions as well as for the plasma pool. Plot APTT
vs. Heparin concentration on semilog graph paper. The
value obtained for the patient should be correlated with
the values on the graph to obtain current concentration of
circulating heparin.

PROCEDURE LIMITATIONS
See Known interfering substances and Stability and storage
instructions under SAMPLE.
The coagulation process involves a series of enzymatic reac-
tions, which might be influenced by any condition affecting
enzymatic systems in general, that is why methodological
cautions should be taken.
Consider that variations in the ratio anticoagulant/sample
or in the citrate concentration used, affect activated partial
thromboplastin times, thus, it is recommended to check the
anticoagulant dose used for sample collection.

PERFORMANCE
Reproducibility: precision studies were performed following
a modification of the guidelines contained in NCCLS (National
Committee on Clinical Laboratory Standards) EP5-A docu-
ment. These results were obtained:

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 APTTest
C ellágico
Odczynniki do oznaczania czasu kaolinowo-kefalinowego
Nr kat. 1705004

WSTĘP wszelkich urazów) a następnie umieścić w probówce z an-

Czas kaolinowo-kefalinowy (Activated Partial Thromboplastin tykoagulantem dokładnie w proporcji 9 do 1 ( np. 4,5 ml krwi +
Time - APTT) jest czułym badaniem niedoborów osoczowych 0,5 ml Anticoagulante TP Wiener lab.). Łagodnie zamieszać.
czynników krzepnięcia, jak również obecności niektórych Odwirować i oddzielić osocze do 30 min. Zaleca się zasto-
inhibitorów krzepnięcia. sowanie plastykowych strzykawek do odciągnięcia.
Wykrywa zaburzenia w podstawowym procesie krzepnięcia b) Substancje dodatkowe: zastosuj Anticoagulante TP
tj. niezbędne czynniki do tworzenia się aktywatorów protrom- Wiener lab. lub 130 mmol/l (3,8%) lub 109 mmol/l (3,2%)
biny np. czynnika VIII, IX, XI oraz XII. cytrynianu sodu do otrzymania osocza.
Wykrywa również poważne zaburzenia w czynnikach II, c) Znane interakcje:
V, X, oraz I (fibrynogenie). Jednak nie obejmuje zaburzeń - Widoczne i niewidoczne zanieczyszczenia prowadzą do
czynników płytkowych, niedoborów czynnika VII oraz XIII a wydłużonych czasów.
także zaburzeń naczyniowych. - Nie stosować EDTA i heparyny do otrzymania osocza.
Szybkość testu, proste wykonanie i powtarzalność czynią go - Widoczna hemoliza utrudnia pomiar fotooptyczny.
odpowiednim dla monitorowania terapii przeciwkrzepliwej Sprawdź źródło: Young, D.S. w sprawie wpływu leków w
heparyną. Pozwala również na szybką identyfikację potenc- tej metodzie
jalnych hemofilików aby mogli zostać poddani leczeniu przed d) Trwałość i instrukcja przechowywania: osocze powinno
zabiegiem chirurgicznym w celu zapobiegnięcia krwotokom. być przechowywane w lodówce w temp. 2-10oC do chwili
wykonania testu.
ZASADA DZIAŁANIA Ten czas nie powinien przekraczać 4 godzin. Jeżeli badanie
Badanie jest oparte na pomiarze czasu krzepnięcia odwap- nie może być przeprowadzone w tym czasie należy zamrozić
nionego osocza umieszczonego w łaźni wodnej o temp. osocze w temp. -20oC. Powinno być szybko zamrożone i
37oC i w obecności nadmiaru kefaliny, aktywatora i wapnia. rozmrożone (poprzez zanurzenie w łaźni wodnej o temp.
37oC) tuż przed wykonaniem testu.
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI Trzymać próbkę w plastykowych probówkach aż do badania
A. Odczynnik A: fiolki zawierające kefalinę z kwasem ela- aby zminimalizować kontaktową aktywację, która może mieć
gowym jako rozpuszczalny aktywator. miejsce w probówkach szklanych.
B. Odczynnik B: 0,025 mol/l roztwór stabilnego chlorku
wapnia. WYMAGANE MATERIAŁY I SPRZĘT (niedostarczane)
- probówki do hemolizy,
INSTRUKCJA UŻYCIA - pipety i mikropipety do pomiaru objętości,
Odczynnik A: gotowy do użycia. Homogenizować przed użyciem. - łaźnia wodna o temp. 37oC,
Odczynnik B: gotowy do użycia. - stoper,
- źródło światła do obserwacji skrzepu.
OSTRZEŻENIA
Odczynniki wyłącznie do użycia in vitro.
Stosuj odczynniki zgodnie z procedurami dla laboratoriów PROCEDURA
klinicznych. Ogrzać Odczynnik B w łaźni wodnej o temp. 37 oC
Odczynniki i materiał badan powinni być odrzucone zgodnie przed wykonaniem badania. W probówce do hemolizy
z lokalnymi przepisami. umieścić:
Materiał (nieznana surowica lub kontrolka) 100 ul
TRWAŁOŚĆ I WARUNKI PRZECHOWYWANIA
Dostarczone odczynniki stabilne w lodówce w temp. 2-10oC Odczynnik A 100 ul
do końca daty ważności umieszczonej na opakowaniu. Nie Wymieszać i inkubować przez 3 min. przy temp. 37oC.
zamrażać. Następnie dodać:
Odczynnik B (o temp. 37oC) 100 ul
MATERIAŁ BADANY
Osocze Równocześnie włączyć stoper. Krótko wstrząsnąć celem
a) Pobranie: pobrać krew ostrożnie (unikając zastoju i

861230624 / 01 p. 7/9
 enzymatycznych mogą mieć szczególne znaczenie. Stąd
homogenizacji zawartości i pozostawić w łaźni wodnej na uważnie należy podejść do założeń metodologicznych testu.
25 sek. Następnie usunąć próbkę z łaźni wodnej, przechylić Zaleca się sprawdzenie dawki antykoagulantu zastosowane-
raz co sekundę i zatrzymać stoper gdy skrzep utworzy się. go do pobrania próbki ze względu na wpływ stosunku an-
Do odczytu można wykorzystać automaty lub półautomaty tykoagulantu lub stężenia cytrynianu do pobranego materiału
wykrywające wykrzepianie fibryny metodami fotooptycz- na APTT.
nymi lub mechanicznymi.
Zanotować czas krzepnięcia. CHARAKTERYSTYKA TESTU
Powtarzalność: badania nad dokładnością zostały wykonane
zgodnie z zaleceniami zawartymi w dokumencie EP5-A NC-
INTERPRETACJA WYNIKÓW CLS (National Committee on Clinical Laboratory Standards).
Wyniki mogą zostać wyrażone jako:
1) Czas kaolinowo-kefalinowy (Activated Partial Thrombo- Dokładność w trakcie badania
plastin Time - APTT) w sekundach. średnia S.D C.V.
2) Stosunek pomiędzy czasem otrzymanym w badaniu do Osoczowa kontrolka 34,1 sek. ± 0,49 sek. 1,44%
czasu krzepnięcia surowicy wzorcowej. prawidłowa
Osoczowa kontrolka 87,9 sek. ± 0,49 sek. 0,56%
METODA KONTROLI JAKOŚCI patologiczna
Wiener lab.’s Plasma Control normal - patológico - Osoczowa Bank osocza 29,3 sek. ± 0,35 sek. 1,18%
próba kontrolna prawidłowa - patologiczna. prawidłowego

WARTOŚCI REFERENCYJNE Dokładność całkowita

Zakres wartości referencyjnych został oparty o badania średnia S.D. C.V.
nad zdrową populacją, przy zastosowaniu techniki ręcznej i Osoczowa kontrolka 34,1 sek. ± 1,00 sek. 2,93%
wynosi między 24 a 35 sek. prawidłowa
Wartości, które różnią się więcej niż 6 sekund z osoczem Osoczowa kontrolka 87,9 sek. ± 3,66 sek. 4,16%
wzorcowym nie mogą zostać uznane za prawidłowe. patologiczna
Zaleca się aby każde laboratorium procesował własną pulę Bank osocza 29,3 sek. ± 0,51 sek. 1,75%
prawidłowego osocza z każdą używaną serią odczynników prawidłowego
aby następnie porównać wartości wyników badanych pac-
jentów z otrzymanym pulą i odnotować te wyniki w raporcie. WIENER LAB DOSTARCZA
Każde laboratorium powinno oznaczyć własne wartości re- Zestawy do 150 testów (6 x 2,5 ml) (Nr kat. 1705004).
ferencyjne oparte o techniki oraz zastosowane urządzenia i
odczynniki, ponieważ wartości APTT zdrowych osób różnią się ŹRÓDŁA
w każdym laboratorium w zależności od zastosowanych technik. - Bell, W.N.; Alton, H.G. - Nature 174:880 (1954).
- Dacie, J.B.; Lewis, S.M. - Hematología Práctica - Ediciones
KRZYWA KALIBRACJI Toray, 2° Edición (1970).
Ta metoda jest użyteczna dla kontroli odpowiedzi pacjentów - Wintrobe, M.M. - Hematología Clínica, 3a. Edición Inter-
na heparynę w trakcie leczenia tym antykoagulantem. médica (1969).
Wykonujemy ją w następujący sposób: - Bragos, I.; Rodríguez Pécora, S.; Lorenzo, L.; Capriotti,
Przygotować Roboczy Roztwór Heparyny w roztworze G. - 53° Triduo Bioquímico Científico Anual, Bahía Blanca.
soli fizjologicznej o stężeniu 10 j/ml. Zastosować ten sam (1988).
rodzaj heparyny jaka była podana pacjentowi. Przygotować - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
roztwory w/w Roboczego Roztworu Heparyny używając do AACC Press, 4th ed., 2001.
rozcieńczenia świeżego osocza z banku lub Wiener lab.’s
Plasma Control. Niezbędne rozcieńczenia to 0,8; 0,6; 0,4;
0,2 oraz 0,1 j./ml.
Określić czas tromboplastyny dla każdego z roztworów, jak
również dla osocza wzorcowego z banku osocza. Nanieść
na wykres wartości APTT względem Heparyny na papierze
logarytmicznym. Wartość otrzymana od pacjenta powinna
korelować z wartościami na wykresie aby otrzymać obecne
stężenie heparyny w krążeniu.

OGRANICZENIA PROCEDURY
Patrz znane interakcje z innymi substancjami w rozdziale
MATERIAŁ.
Proces krzepnięcia związany jest z licznymi procesami en-
zymatycznymi i wszelkie zmiany dotyczące ogólnie układów

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SÍMBOLOS // SÍMBOLOS // SYMBOLS // OZNACZENIA
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab. // Os seguintes símbolos
são utilizados nos kits de reagentes para diagnóstico da Wiener lab. // The following symbols are used in the packaging for
Wiener lab. diagnostic reagents kits. // Następujące symbole są zastosowane na opakowaniach zestawów odczynników
diagnostycznych.
Este producto cumple con los requerimientos previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios para el diagnóstico

C "in vitro"// Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europeia 98/79 CE para dispositivos médicos de diagnóstico "in vitro"//
This product fulfills the requirements of the European Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic medical devices// Ten produkt spełnia
wymagania Dyrektywy Europejskiej 98/79 EC dla wyrobów medycznych używanych do diagnozy "in vitro"
P Representante autorizado en la Comunidad Europea// Representante autorizado na Comunidade Europeia// Authorized representative
in the European Community// Autoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej
V Uso diagnóstico "in vitro"// Uso médico-diagnóstico "in vitro"// "In vitro" diagnostic medical device// Wyrób do diagnostyki "in vitro"
Contenido suficiente para <n> ensayos// Conteúdo suficiente para <n> testes// Contains sufficient for <n> tests// Zawartość wystar-
X czająca dla <n> badań

Fecha de caducidad// Data de validade// Use by// Użyć przed

H
Límite de temperatura (conservar a)// Limite de temperatura (conservar a)// Temperature limitation (store at)// Ograniczenie dopusz-
l czalnych temperatur

 No congelar// Não congelar// Do not freeze// Nie zamrażać

Riesgo biológico// Risco biológico// Biological risks// Ryzyko biologiczne

F
Volumen después de la reconstitución// Volume após a reconstituição// Volume after reconstitution// Objętość po rozpuszczeniu

Cont. Contenido// Conteúdo// Contents// Zawartość

g Número de lote// Número de lote// Batch code// numer serii

M Elaborado por:// Elaborado por:// Manufactured by:// Wytwórca

Nocivo// Nocivo// Harmful// Substancja szkodliwa

Corrosivo / Cáustico // Corrosivo / Caústico // Corrosive / Caustic// Substancja żrące

Irritante// Irritante// Irritant// Substancja drażniąca

i Consultar instrucciones de uso// Consultar as instruções de uso// Consult instructions for use// Przed użyciem zapoznać się z instrukcją

Calibr. Calibrador// Calibrador// Calibrator// Kalibrator

b Control// Controle// Control// Próba kontrolna

b Control Positivo// Controle Positivo// Positive Control// Próba kontrolna dodatnia

c Control Negativo// Controle Negativo// Negative Control// Próba kontrolna ujemna

h Número de catálogo// Número de catálogo// Catalog number// Numer katalogowy

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 1225/95 2000 Rosario - Argentina
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