“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERÍA PESQUERA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA PESQUERA

TEMA:

ESPECTROSCOPIA

CURSO:

QUÍMICA ANALÍTICA

DOCENTE:

GUILLERMO ENRIQUE RODRÍGUEZ SISNIEGAS

ESTUDIANTE:

BENITES GALLEGO EDWARD

COELLO AGUILAR RUTH VALERIA

JULCA MARQUEZ RODRIGO ARTURO

CHORREZ ARICA ANTHONY

NUREÑA TEMOCHE MATHIAS

MARTINEZ PIRIZACA GERMAN

CICLO:

III

FECHA: 15/08/2023
ÍNDICE
II. OBJETIVOS: ............................................................................................................................. 4
III. FUNDAMENTO TEÓRICO .................................................................................................. 4
3.1. ¿QUÉ ES LA ESPECTROSCOPIA? ................................................................................. 4
3.2. FUNDAMENTOS DE LA ESPECTROSCOPIA .............................................................. 5
V. ESPECTROFOTÓMETRO ....................................................................................................... 7
5.1. ¿QUÉ MIDE? ......................................................................................................................... 7
5.2. FUNCIONES ......................................................................................................................... 7
5.3. COMPONENTES ................................................................................................................... 8
VI. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA ESPECTROSCÓPICAS ........................................... 8
6.1. MUESTRAS SOLIDAS ......................................................................................................... 8
6.1.1. Pastilla: ............................................................................................................................ 8
6.1.2. Película: ........................................................................................................................... 9
6.1.2. Polvos: ............................................................................................................................. 9
6.1.2. Disolución: ....................................................................................................................... 9
t= espesor de la celda en mm. N= la cantidad de ondas completas .................................................. 9
6.2. ESPECTROSCOPIA INFRARROJA DE REFLEXIÓN INTERNA .................................. 10
VII. CONCLUSIONES ................................................................................................................ 11
VIII. REFERENCIAS ................................................................................................................... 11
I. INTRODUCCIÓN
Este presente informe trata de la espectroscopia que se encarga de estudiar la interacción de la
radiación electromagnética con la materia.
La espectroscopia es la rama de la ciencia que estudia la interacción de la radiación
electromagnética con la materia. Si bien tradicionalmente, los métodos espectroscópicos han
usado medias de absorción, emisión o dispersión de la radiación UV, Vis o IR con fines
cualitativos y cuantitativos, en la actualidad estos métodos se han ampliado para incluir otras
formas de radiación electromagnética (microondas, rayos X, ondas de radio, etc.), así como
otros tipos de radiaciones de naturaleza no electromagnética (ondas acústicas, electrones e
iones). A día de hoy, los métodos espectroscópicos constituyen una de las herramientas más
potentes para la dilucidación estructural y análisis cualitativo y cuantitativo de compuestos
orgánicos e inorgánicos.

Los aspectos que va abarcar dicho trabajo serán los siguientes:

 La introducción
 ¿Qué es la espectroscopia?
 Fundamentos de la espectroscopia
 Conceptos básicos de las subdivisiones trasmitancia – absorbancia – estándar
 Preparación de la muestra espectroscópica
 Espectroscopia en la vida cotidiana

El interés de nuestro trabajo es poder realizar análisis cualitativos y cuantitativos

Figura 1. Diagrama de niveles de energía en una

molécula. La absorción de energía luminosa hace que la
molécula pase desde un estado fundamental (E1) a otro
excitado (E2). Posteriormente la molécula relaja su
energía mediante distintos mecanismos (vibración,
rotación, etc.)
II. OBJETIVOS:
- Requerir la utilización de técnicas analíticas que permitan su determinación cualitativa y
cuantitativa, así como su caracterización físico-química y biológica.
- Identificar y cuantificar biomoléculas en solución y en muestras biológicas, con el empleo
1 de reactivos específicos que reaccionan con el compuesto a analizar y forman un producto
coloreado que permite detectarlo en muestras complejas.

III. FUNDAMENTO TEÓRICO

3.1.¿QUÉ ES LA ESPECTROSCOPIA?

La espectroscopia es una técnica analítica experimental muy utilizada en química. Se basa en

detectar la absorción o emisión de radiación electromagnética por parte de una sustancia que
queremos estudiar.
La espectroscopia estudia la cantidad de luz que absorbe, dispersa (refleja) o despide un objeto.
Es decir, descompone la luz y mide las diferentes longitudes de onda de luz visible y no visible.

Por ejemplo, en el campo de la medicina, se utilizan distintos tipos de espectroscopia para

estudiar los tejidos y ayudar en el diagnóstico. No obstante, también se puede estudiar en
astrofísica para determinar la naturaleza y propiedades físicas de los astros. Y, a su vez, también
se puede aplicar en física, química y biología, entre otras disciplinas científicas.
La espectroscopia estudia concretamente 6 fenómenos ópticos:

 Absorción
 Fluorescencia
 Fosforescencia
 Emisión

El análisis espectral se encarga de detectar la absorción o emisión de radiación electromagnética

a ciertas longitudes de onda. Y tiene en cuenta los niveles de energía implicados en una transición
cuántica.
3.2. FUNDAMENTOS DE LA ESPECTROSCOPIA
Es el estudio de las interacciones entre la materia y la radiación electromagnética.
Históricamente se originó a través del estudio de la luz visible dispersada por un prisma en
función de su longitud de onda.
La espectroscopia es una técnica científica que se utiliza para analizar y estudiar las
interacciones entre la radiación electromagnética y la materia. Se basa en el principio de que
diferentes tipos de átomos y moléculas interactúan de manera única con la radiación
electromagnética, lo que da lugar a la observación de espectros característicos.
Estos espectros pueden proporcionar información valiosa sobre la composición química, la
estructura molecular, la temperatura y otras propiedades de la materia.

Aquí hay algunos fundamentos clave de la espectroscopia:

 Radiación electromagnética: La radiación electromagnética es una forma de energía que se
propaga en ondas y abarca todo el espectro electromagnético, que incluye desde ondas de
radio y microondas hasta rayos gamma. Cada parte del espectro tiene diferentes longitudes
de onda y energías asociadas.

 Espectro electromagnético: El espectro electromagnético se divide en regiones basadas en

las longitudes de onda, desde las más largas (como las ondas de radio) hasta las más cortas
(como los rayos gamma). Cada región está asociada con una parte específica de la radiación
electromagnética.

 Absorción y emisión: Cuando la radiación electromagnética interactúa con la materia,

pueden ocurrir dos procesos principales: absorción y emisión. En la absorción, los átomos
o moléculas absorben energía de la radiación y pueden elevarse a niveles de energía
superiores. En la emisión, los átomos o moléculas que han absorbido energía previamente
pueden liberarla en forma de radiación.

 Espectro de absorción: Cuando una muestra de materia interactúa con radiación

electromagnética y absorbe ciertas longitudes de onda, se produce un espectro de
absorción. Este espectro muestra las longitudes de onda en las que ocurre la absorción y
proporciona información sobre las transiciones de energía dentro de la materia.

 Espectro de emisión: Si los átomos o moléculas previamente excitados emiten energía en

forma de radiación al volver a estados de menor energía, se genera un espectro de emisión.
Este espectro muestra las longitudes de onda de la radiación emitida y también puede
proporcionar información sobre la composición y estructura de la materia.
 Espectroscopia de absorción atómica: Esta técnica se centra en la absorción de radiación
por átomos en estado gaseoso. Se utiliza para analizar la concentración de elementos
individuales en muestras líquidas o gaseosas.
 Espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN): Esta técnica se basa en las
propiedades magnéticas de los núcleos atómicos. Es muy útil para determinar la estructura
y la conectividad de átomos en moléculas.
 Espectroscopia infrarroja (IR): La espectroscopia IR analiza las vibraciones moleculares
que ocurren debido a los enlaces químicos. Puede proporcionar información sobre la
identificación de compuestos y su estructura.
 Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis): Esta técnica mide la absorción o emisión de
radiación en el rango ultravioleta y visible. Se utiliza para determinar la concentración de
especies en solución y para estudiar compuestos orgánicos e inorgánicos.
 Espectroscopia de resonancia paramagnética electrónica (EPR o ESR): Esta técnica se
utiliza para estudiar muestras con electrones desapareados en campos magnéticos. Puede
proporcionar información sobre la estructura y el entorno electrónico de moléculas.

Estos son solo algunos conceptos básicos de la espectroscopia. La técnica es ampliamente

utilizada en diversos campos científicos, como la química, la física, la biología y la astronomía,
para obtener información detallada sobre la composición y las propiedades de la materia.
V. ESPECTROFOTÓMETRO

Es un instrumento utilizado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud
de onda, donde la muestra absorbe la luz y la intensidad de la absorción, muy usado en el
análisis químico. Así mismo en los laboratorios químicos para cuantificación de sustancias.

 Absorción atómica:

Es un método instrumental de la química analítica que

permite medir las concentraciones específicas de un
material en una mezcla y determinar una gran variedad de
elementos.

 Espectrofotómetro de masa:

Es un dispositivo que permite analizar con gran precisión

la composición de diferentes elementos químicos e
isótopos atómicos

5.1. ¿QUÉ MIDE?

Un espectrofotómetro es un instrumento que mide el color haciendo brillar un haz de luz y
capturando la cantidad de luz que refleja o transmite para cuantificar el color.
¿Cómo mide el color un espectrofotómetro?
Usando una fuente de luz, un espectrofotómetro puede detectar con precisión la reflectancia del
color o la transmisión de luz para el análisis cuantitativo.
Cada muestra física tiene su propia reflectancia (la cantidad de luz que refleja) y transmitancia
(absorción de luz). Un espectrofotómetro mide la luz reflejada o transmitida de una muestra
para capturar su huella digital y determinar la cantidad de luz reflejada o transmitida desde los
rangos visibles de las diferentes porciones del espectro visible.

5.2. FUNCIONES
El espectrofotómetro realiza dos funciones principales:
 Ofrece información de una muestra sobre la naturaleza de la sustancia que contiene.
 Señala indirectamente la cantidad de la sustancia al investigar que se encuentra presente en
la muestra.
5.3. COMPONENTES

 Fuente de luz
 Colimador (lente) Monocromador
(prisma)
 Comportamiento de muestra
 Detector
 Registrador
 Protodectores

Proyecta un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de la luz
y que es dividida por dicha muestra.

VI. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA ESPECTROSCÓPICAS

La espectroscopia es actualmente una de las técnicas más utilizadas en todo el mundo, por
analistas, científicos y estudiantes, todo ello en un amplio campo de aplicaciones, por ejemplo,
en la medicina, alimentos, ambiental, ciencia de los materiales, biotecnología, ciencias
forenses, etc.

6.1. MUESTRAS SOLIDAS

Pueden prepararse de la siguiente forma:

 Pastilla (NaCl, KBr o CsI)
 Película
 Suspensión
 Disolución
6.1.1. Pastilla:
Para la preparación de una pastilla se debe tener la muestra seca, se coloca en un mortero de
ágata de 2 a 3mg, se muele perfectamente hasta que quede adherida a las paredes del mortero,
después se agrega el haluro que puede ser polvo de NaCl o KBr o CsI secos (30 mg
aproximadamente) y se procede nuevamente a pulverizar hasta que quede perfectamente
homogenizado. Esta mezcla se comprime en una pastilladora a suficiente presión, para
obtener una pastilla transparente. El NaCl, KBr y CsI son haluros alcalinos que a altas
presiones forman una pastilla transparente, el NaCl absorbe a partir de 600 cm-1, el KBr
absorbe a partir de 400 cm-1 y el CsI es transparente de 4000 a 200 cm-1. La técnica de pastilla
ofrece ciertas ventajas sobre otras técnicas, pero también algunos inconvenientes que se
deben considerar, los haluros que se usan deben ser de alta trasmitancia para la totalidad del
intervalo espectral, una baja presión de sinterización, una fácil disponibilidad en estado puro,
una estabilidad química y un índice de refracción muy próximo al de la mayoría de los
compuestos a estudiar.
6.1.2. Película:
Si la muestra a examinar es un sólido de bajo punto de fusión, es posible calentar (no más
de 100°C) con cuidado sobre papel aluminio la muestra entre dos ventanas (NaCl, KBr o
CsI) en una estufa o parrilla, hacer presión entre ambas para que quede una película delgada.

6.1.2. Polvos:
Polvos o sólidos reducidos a partículas pequeñas pueden estudiarse como una pasta delgada.
Una pequeña cantidad de muestra seca (aproximadamente 5 mg) es pulverizada en un
mortero de ágata en un polvo muy fino, hasta que este bien adherido a las paredes del
mortero. Se añaden unas gotas de Fluorolube o Nujol para formara la suspensión y se
homogeniza hasta que se obtiene una pasta uniforme. Con una espátula se toma un poco de
la pasta y se coloca en una ventana de NaCl, KBr o CsI. Con otra ventana se comprime para
obtener una película muy delgada, se colocan en un soporte de celda apropiado y se procede
al registro del espectro. Los compuestos que se usan para preparar la suspensión son: aceite
mineral (Nujol), perfluorokeroseno, clorofluorocarbono (Fluorolube) y el
hexaclorobutadieno. Esta técnica requiere que el tamaño de partícula del sólido suspendido
sea menor que la longitud de onda del haz de infrarrojo, si no se cumple esta condición, se
pierde una parte de la radiación por dispersión.

6.1.2. Disolución:

Esta técnica permite eliminar las interacciones intermoleculares que pueden tener la
preparación de la muestra por pastilla o suspensión. Se utilizan celdas selladas con ventanas
de diversos materiales NaCl, KBr. CsI para disolventes no-polares, AgCl, Irtran, BaF2 para
disolventes polares etc., la muestra se disuelve en un disolvente polar o no-polar
dependiendo de la solubilidad del compuesto por analizar y de la celda que se tenga, ya que
no puedo utilizar etanol si la celda es de NaCl; se introduce con una pequeña jeringa de
vidrio o con una pipeta Pasteur de abajo hacia arriba para evitar que se formen burbujas ya
que es indispensable que este perfectamente llena con la disolución que se va analizar,
existen diferentes espesores (0.01mm, 0.015mm. 0.035mm, 0.1mm, etc.) por lo que se
recomienda utilizar los más pequeños para tener más cantidad de muestra que de disolvente.

t= espesor de la celda en mm. N= la cantidad de ondas completas

6.2. ESPECTROSCOPIA INFRARROJA DE REFLEXIÓN INTERNA

La espectroscopia infrarroja de reflexión interna es una técnica que permite la obtención de

espectros de infrarrojo de muestras que presentan alguna dificultad, como son los sólidos de
limitada solubilidad, fibras, pastas, adhesivos, polvos, etc., éstos se pueden utilizar tanto para
el análisis cualitativo como cuantitativo.
La reflexión de la radiación es de cuatros tipos: reflexión especular, reflexión difusa,
reflexión interna y reflexión total atenuada (ATR). La reflexión especular se observa cuando
el medio reflectante es una superficie uniformemente pulida. En este caso el ángulo de
reflexión es idéntico al ángulo de incidencia de la radiación. Si la superficie contiene una
sustancia capaz de absorber radiación del infrarrojo., la intensidad relativa de la reflexión es
menor en las longitudes de onda donde la superficie absorbe que en las longitudes de onda
en las que no hay absorción.
En la reflexión difusa es un proceso complejo que tiene lugar cuando el haz de radiación
choca con la superficie de un polvo finamente molido. En este tipo de muestras tiene lugar
una reflexión especular en cada superficie plana. Sin embargo, como hay muchas superficies
de éstas y se encuentran aleatoriamente orientadas, la radiación se refleja en todas
direcciones. Es característico que la intensidad de la radiación reflejada sea más o menos
independiente del ángulo de visión.
Cuando un haz de radiación pasa de un medio más denso a otro menos denso, se produce la
reflexión. La fracción del haz incidente que se refleja es mayor a medida que aumenta el
ángulo de incidencia, más allá de cierto ángulo crítico, la reflexión es completa. Teórica y
experimentalmente se ha demostrado que durante el proceso de reflexión el haz se comporta
como si penetrara en el medio menos denso antes de reflejarse. La profundidad de
penetración, que puede ser desde una fracción de longitud de onda a varias longitudes de
onda, depende de la longitud de onda, del índice de refracción de los dos materiales, y del
ángulo del haz con respecto a la interfase. La radiación que penetra se denomina onda
evanescente. Si el medio menos denso absorbe la radiación evanescente, se produce una
atenuación del haz a las longitudes de onda de las bandas de absorción. Este fenómeno se
conoce como reflectancia total atenuada (ATR)
VII. CONCLUSIONES

- Se ha llegado a la conclusión de que la espectrofotometría es un método analítico indirecto

porque se basa en la medición de la absorbancia o transmitancia de las radiaciones; es de
gran utilidad en la actualidad para la identificación de un analito en una muestra problema.
- La espectrofotometría es el método más usado, debido a que es sencillo, específico y
sensible.
- La espectroscopia es una herramienta fundamental en la investigación científica y la
industria, que abarca una amplia gama de disciplinas y tiene aplicaciones en campos tan
diversos como la química, la física, la biología, la astronomía, la medicina y la ingeniería
de materiales.

VIII. REFERENCIAS

- Díaz, N. A., Antonio Bárcena Ruiz, J., Reyes, E. F., Cejudo, A. G., Novo, J. J., Peinado,

J. P., Meléndez-Valdés, F. T., & Fiñana, I. T. (s/f). 8. Espectrofometría: Espectros de

absorción y cuantificación colorimétrica de biomoléculas. Uco.es. Recuperado el 15

de agosto de 2023, de https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-

mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETRIA.pdf

- ¿Qué mide un espectrofotómetro? (s/f). X-Rite. Recuperado el 15 de agosto de 2023,

de https://www.xrite.com/es/blog/what-does-a-spectrophotometer-measure

- Componentes del espectrofotómetro - Labster Theory. (s/f). Labster.com.

Recuperado el 15 de agosto de 2023, de https://theory.labster.com/spec-

components-es/