UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE

TECÁMAC

PRACTICA 7:
ESPECTROFOTOMETRÍA II

QUÍMICA ANALÍTICA

INTEGRANTES:
MACIEL PÉREZ ALBA YAZMIN
MEDINA GARCÍA GABRIELA
VALENCIA SÁNCHEZ VANESSA MONSERRAT

PROFESOR:
CARLOS ADULFO ESQUINCA
CANSECO

3QBT1

MARTES 21 DE MARZO ENE-ABR 2023

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 INDICE

INTRODUCCIÓN .............................................................................................................................3
OBJETIVOS .....................................................................................................................................4
MARCO TEORICO .........................................................................................................................5
MATERIALES Y REACTIVOS ......................................................................................................9
METODOLOGÍA ...........................................................................................................................11
RESULTADOS ..............................................................................................................................12
CUESTIONARIO ...........................................................................................................................15
REFERENCIAS .............................................................................................................................16

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 INTRODUCCIÓN

La Espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección

específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas
de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc.) y estado de agregación (sólido, líquido,
gas). Los fundamentos físico-químicos de la espectrofotometría son relativamente sencillos. Las
moléculas pueden absorber energía luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Esto
permite que se inicien ciclos vitales de muchos organismos, entre ellos el de la fotosíntesis en
plantas y bacterias. La Mecánica Cuántica nos dice que la luz está compuesta de fotones cada uno
de los cuáles tiene una energía: Efotón = h⋅ν = h⋅c/λ, donde c es la velocidad de la luz, ν es su
frecuencia, λ su longitud de onda y h= 6.6 10 -34 J⋅s es la constante de Planck. Cuando decimos que
una sustancia química absorbe luz de longitud de onda λ, esto significa que las moléculas de esa
sustancia absorben fotones de esa longitud de onda. (Anonimo)

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 OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:
 Determinar la concentración de una muestra problema con ayuda de las curvas en
el espectrofotómetro de soluciones de dicromato de potasio y sulfato de cobre.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:
 Reforzar el aprendizaje del uso del espectrofotómetro.
 Realizar espectro de absorción de sustancias puras.
 Realizar una curva de absorbancia.
 Conocer la concentración de las muestras presentadas.

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 MARCO TEORICO
¿Qué es la Espectroscopía?
Una buena definición del término espectroscopía puede ser “la disciplina de la ciencia que
estudia la interacción entre la radiación electromagnética y la materia”. La espectroscopía
estudia 6 fenómenos ópticos: Absorción, Fluorescencia, Fosforescencia, Emisión,
Dispersión, Quimioluminiscencia. En palabras más llanas es la rama de la ciencia que
analiza cual es el comportamiento de nuestras muestras en función de la luz que
interacciona con ellas. Esta definición deja fuera dos importantes áreas de la
espectroscopia en las que la materia interacciona con las ondas de sonido y con haces de
partículas (iones y electrones). (Espectroscopia)

FIGURA 1: Niveles de espectrometría

Ondas electromagnéticas:
La naturaleza ondulatoria de la radiación electromagnética se representa como campos
eléctricos (propagándose en el eje X) perpendicular a campos magnéticos (eje y), ambos
perpendiculares a la dirección de propagación. Para el estudio de la espectroscopia, el
campo eléctrico es responsable de la mayoría de los fenómenos de interés, incluyendo la
transmisión, reflexión, la refracción y la absorción. (Espectroscopia)
Instrumentos ópticos:
Hay seis tipos principales de métodos espectroscópicos: absorción, fluorescencia,
fosforescencia, dispersión, emisión y quimioluminiscencia. Los instrumentos de medida de
todos ellos difieren poco en cuanto a sus componentes; además, aunque muchos de estos
instrumentos utilizan regiones del espectro no perceptibles por el ojo humano, ultravioleta
(UV) e infrarrojo (IR), a todos ellos se les domina instrumentos ópticos. (Espectroscopia)

Este tipo de instrumentos tiene cinco partes fundamentales: (Espectroscopia)

1) Fuente de luz estable (de líneas, continua o láser)
2) Recipiente transparente para aloja la muestra
3) Sistema para aislar la región espectral de interés
4) Detector que transforma la luz en una corriente eléctrica

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5) Unidad de procesamiento y muestra de resultados.

FIGURA 2: Partes de un espectrofotómetro

En la espectroscopía de emisión y quimioluminiscencia la propia muestra es la fuente de

emisión. Además, en emisión, el contendor de la muestra es un plasma, una chispa o una
llama que produce la emisión característica de el/los elementos de la muestra.

Partes de un espectrofotómetro:
Un espectrofotómetro se encarga de recoger y analizar la luz tras interactuar con la muestra.
Su resultado final es un espectro que relaciona la intensidad a cada longitud de onda. Los
espectrofotómetros comparten una serie de componentes esenciales, 1) rendija de entrada,
2) espejo o lente para focalizar la radiación sobre el elemento dispersor, 3) prisma o red de
difracción, 4) elemento de enfoque, 5) detector. En los espectrómetros compactos, sin
partes móviles, la luz se dirige al espectrómetro a través de una fibra óptica, entra por una
rendija de tamaño variable (10- 500 micras), la radiación es focalizada sobre la red de
difracción con un espejo colimador, se dispersa en sus diferentes longitudes de onda y se
proyecta sobre un espejo que permite focalizar la radiación separada en sus diferentes
longitudes de onda sobre el detector. (Moncayo, S.)
Principales tipos de técnicas espectroscópicas que utilizan espectrofotómetros:
(Moncayo, S.)
1. Espectroscopia de emisión atómica:
A temperatura ambiente los electrones de los átomos que forman la materia se encuentran
en su estado electrónico fundamental. La excitación de uno de estos electrones a un estado
energético superior, por encontrarse sometido a una llama, un plasma (LIBS) o una chispa
eléctrica genera, un estado de inestabilidad de corta duración (denominado estado
excitado) que evoluciona produciendo la vuelta del electrón del estado excitado a su estado
fundamental y la emisión de un fotón a una longitud de onda característica de dicho átomo
(de igual energía que el transito electrónico). La medida de dicha emisión puede estudiarse
con el uso de un espectrómetro que trabaje en unas longitudes de onda en el UV, visible y
una pequeña parte del infrarrojo cercano. El espectro generado es un espectro de líneas.
(Moncayo, S.)

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2. Espectroscopía de absorción atómica:
Si conseguimos tener una muestra atomizada, es decir con sus átomos en estado gaseoso
y hacemos pasar una luz (en la región del UV), dicha luz va ser absorbida por los átomos
presentes en el estado gaseoso provocando una disminución de la intensidad para las
longitudes de onda características de dicho átomo. Esta técnica se utiliza principalmente
para el estudio de metales de forma cualitativa y cuantitativa. Es posible relacionar la
concentración del metal con la absorción a través de la ley de Lambert-Beer (A=α·l), cuanto
mayor sea la concentración del metal en estado gas mayor será la absorción en el espectro.
(Moncayo, S.)

3. Espectroscopía UV-VIS:
A diferencia de las técnicas espectroscópicas anteriores, esta técnica estudia la interacción
de la luz con moléculas que absorben dicha radiación. La relación entre la absorbancia y la
concentración del analíto viene determinada por la ley de Lambert-Beer. En general y
aunque pueden ocurrir otros fenómenos, la absorción de la radiación UV o visible ocurre
por parte de la excitación de los electrones de enlace, permitiendo conocer el tipo de enlace
químico correspondiente a cada banda de absorción electrónica. Este tipo de
espectroscopia se usa ampliamente para caracterizar grupos funcionales en moléculas y
sobre todo y más importante para la determinación cuantitativa de compuestos que contiene
grupos absorbentes y sus transiciones de los electrones n y π al estado excitado π*. El
espectro en este tipo de espectroscopia es de bandas. (Moncayo, S.)

4. Espectroscopia Infrarroja:
En esta entrada se comentará brevemente la espectroscopia de infrarrojo medio. En la
siguiente entrada se explica en detalle la espectroscopia NIR y sus principales aplicaciones.
Este tipo de espectroscopia utiliza radiación IR, longitudes de onda superiores a 780 nm.
La información obtenida es de tipo estructural ya que la frecuencia de vibraciones de los
enlaces de la muestra corresponde con la frecuencia de la radiación emitida. La radiación
infrarroja es muy amplia y generalmente se divide en tres regiones respecto a su longitud
de onda o más concretamente su número de onda (inverso de la frecuencia): Infrarrojo
cercano (NIR) va desde los 780 nm (12.800 cm-1) hasta los 2.500 nm (4.000 cm-1),
infrarrojo medio (MIR) desde los 2.500 hasta los 50.000 nm (200 cm-1) y el infrarrojo lejano
(FIR) de 50 μm a 1000 μm (10 cm-1). Sin embargo, no todos los enlaces son susceptibles
de absorber radiación IR, solo aquellos en los que se produce un cambio en el dipolo de la
molécula van a presentar bandas de absorción. (Moncayo, S.)

5. Espectroscopía Raman:
Al igual que la espectroscopia infrarroja, Raman también nos proporciona información
estructural de la muestra. En este caso cuando irradiamos la muestra con una fuente de luz
potente (láser) una pequeña parte fracción de dicha radiación es dispersada (0.001%) por

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ciertas moléculas a longitudes de onda diferentes a las de la radiación incidente. Los
espectros IR y Raman son similares, pero contienen diferente información, no compiten
entre sí, sino que son complementarios. La radiación Raman se puede observar en la región
del Visible y NIR para las cuales la tecnología proporciona detectores altamente sensibles.
A diferencia de la espectroscopía infrarroja, en los espectros Raman vemos enlaces donde
se produce un cambio de polarizabilidad. (Moncayo, S.)

FIGURA 3: Representación de la espectrofotometría

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 MATERIALES Y REACTIVO
Tabla 1: Equipo utilizado en laboratorio
EQUIPO FOTO ¿QUÉ ES?
Un espectrofotómetro mide la luz
reflejada o transmitida de una
muestra para capturar su huella
Espectrofotómetro digital y determinar la cantidad de luz
reflejada o transmitida desde los
rangos visibles de las diferentes
porciones del espectro visible
Tabla 2: Materiales de laboratorio

MATERIAL FOTO ¿QUÉ ES?

6 Vasos precipitados Es un recipiente cilíndrico de
vidrio boro silicato fino que se
utiliza muy comúnmente en el
laboratorio, sobre todo, para
preparar o calentar sustancias,
medir o traspasar líquidos.
5 Tubos de ensaye Es parte del material de vidrio de
un laboratorio de química.
Consiste en un pequeño
tubo cilíndrico de vidrio con un
extremo abierto y el otro cerrado y
redondeado, que se utiliza en los
laboratorios para contener
pequeñas muestras, líquidas o
sólidas.
10 Celdas para el Las Celdas o Cubetas para
espectrofotómetro Espectrofotómetro
son recipientes de plástico, vidrio
o cuarzo que se utiliza para
realizar lecturas
espectrofotométricas a líquidos.
1 pipeta Es un instrumento usado en los
laboratorios de ciencias químicas y
de ciencias de la vida y la salud
que permite medir la alícuota de un
líquido con mucha precisión.
1 Piceta de agua Frasco de plástico con una
destilada abertura parecida a la de una
pajita, se utiliza en el laboratorio
para contener algún solvente, por
lo general agua destilada.
Matraz aforado de 25 Consiste en un tipo de matraz que
ml se usa como material volumétrico.
Se emplea para medir un volumen
exacto de líquido

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Tabla 3: Soluciones con las que se trabajaron en la práctica

SOLUCIÓN FOTO ¿QUÉ ES?

Dicromato de potasio El dicromato de potasio es
una sal del hipotético ácido
dicrómico, H₂Cr₂O₇. Se trata
de una sustancia de color
intenso anaranjado. Es un
oxidante fuerte.
Sulfato de cobre También conocido como
sulfato cúprico, es un sólido
cristalino, un compuesto
inorgánico con la fórmula
química CuSO₄ₓ. El sulfato
de cobre(II) pentahidrato es
la forma más común,
triclínico y de color azul
brillante

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 METODOLOGÍA
Diagrama 1. Preparación de soluciones y espectrofotómetro

Inicio

Realizar los cálculos

correspondientes

Preparar
las Pesar la cantidad necesaria
soluciones de sulfato de cobre y diluir
en 20 ml de agua destilada
Figura 4. Sulfato de potasio

Pesar la cantidad necesaria

de sulfato de potasio y diluir
en 20 ml de agua destilada

Aforar a 25 ml para
obtener K₂SO₄ al 0.01M y
CUSO₄ al 0.1M

Figura 5. Sulfato de cobre

Realizar para cada reactivo
disoluciones 1:1, 1:10,
1:100, 1:1000, 1:10000

Colocar dichas En el
Utilizar el valor más Colocar cada una de las
disoluciones en celdas espectrofo celdas con las disoluciones,
alto de las S.P para la
para el espectrofotómetro -tómetro
lectura de las demás desde la más diluida a la
más concentrada

Realizar las
Colocar primero el lecturas
blanco y después las correspondientes
soluciones problema
(S.P)

Fin

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 RESULTADOS

 Cálculos para la preparación de las disoluciones

Sulfato de potasio:
Sustitución:
Datos: Formula:
m= 0.01mol/L (294.185g/mol * 0.025L)
V: 25ml 0.025L m: M (Pm * V)
m: 0.073 g
0.01M
Pm: 294.185g/mol

Sulfato de cobre:
Datos: Sustitución:
Formula:
V: 25ml  0.025L m: M (Pm * V)
m= 0.1mol/L (269.63g/mol * 0.025L)

0.1M m: 0.67 g

Pm: 269.63g/mol

 Resultados del espectofotometro:

Curva de calibracion del sulfato de cobre:
Tabla 4: Datos para la curva de calibración

Sulfato de cobre
mg/L AB
1:1 1.119
1:10 1.8
1:100 0.655
1:1000 0.327
1:10000 0.417
Figura 6. Figura 7.
Concentración 1:1 Concentración 1:10

Figura 9. Concentración Figura 10. Concentración

Figura 8. 1:1000 1:10000
Concentración 1:100

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∴ Con los resultados anteriores obtenemos lo siguiente:

Curva de calibración CuSO4

2 1.8
1.8
1.6 y = -0.2877x + 1.7267
R² = 0.5619
1.4
1.119
Absorbancia

1.2
1
0.8 0.655
0.6 0.417
0.327
0.4
0.2
0
0 1 2 3 4 5 6
Concentración

Diagrama 2. Curva de calibración sulfato de cobre

Curva de calibración del sulfato de potasio:

Tabla 5. Datos para la curva de calibración

Sulfato de potasio

mg/L AB
1:1 2.365
1:10 2.052
1:100 0.722
1:1000 0.057 Figura 11. Figura 12.
1:10000 0.218 Concentración 1:1 Concentración 1:10

Figura 13.
Figura 15. Concentración
Concentración 1:100
Figura 14. Concentración 1:10000
1:1000

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∴ Con los resultados anteriores obtenemos lo siguiente:

Curva de calibración K2SO4

2.365
2.5
2.052
2 y = -0.6289x + 2.9695
R² = 0.8763
1.5
Absorbancia

1 0.722

0.5 0.218
0.057
0
0 1 2 3 4 5 6
-0.5
Concentración

Diagrama 3.Curva de calibración del sulfato de potasio

 Conocer la concentración de las muestras problema

La concentración de una muestra se puede calcular a partir de su absorbancia mediante la ley de

Beer-Lambert, que se expresa como sigue:

A=E*b*C
Si despejamos la concentración nos queda la siguiente formula:

C= A / Eb

º Solución color azul:

Absorbancia: 0.621 De acuerdo a nuestra formula tenemos

E: 289 l/mol*cm
C= 0.621
B: 1 cm
(289)(0.01)
C= 0.2 mol/L (M)

º Solución amarilla:

Absorbancia: 1.763 C= 1.763

E= 294 L/mol*cm B= 1cm (294)(0.01)
C= 0.5 mol/L (M)
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 CUESTIONARIO

¿Qué es la espectrometría y para qué se utiliza?

La espectrometría UV-visible es una técnica analítica que se emplea en la medición de
diferentes especies químicas (cationes, aniones, compuestos) en solución. El límite de
detección corresponde a partes por billón o partes por millón según la técnica y el camino
óptico empleado. (Espectrometria.)
¿Cuáles son los tipos de espectros?

Una primera división de los espectros, por su estructura, así, en general, hay tres tipos de
espectros: continuo, línea, y banda. El sol y los sólidos calentados producen espectros
continuos en los que la radiación emitida contiene todas las frecuencias dentro de una
región del espectro electromagnético. (Espectrometria.)
¿Qué son los métodos de análisis espectroscópicos?
La espectroscopia es una técnica analítica experimental muy utilizada en química. Se
basa en detectar la absorción o emisión de radiación electromagnética por parte de una
sustancia que queremos estudiar. Para entender cualquier técnica espectroscópica
debemos pensar que siempre tenemos 3 elementos básicos: la fuente de luz, la muestra
que queremos estudiar y un detector. La fuente de luz irradia la muestra, interacciona con
las sustancias que la forman, estas modifican la luz incidente (porque la absorben
parcialmente o porque emiten una diferente) y con un detector registramos la luz
resultante de interaccionar con la muestra. Si sabemos interpretar las diferencias entre luz
incidente y luz resultante (grabadas en forma de lo que llamamos espectro), obtendremos
información sobre la muestra. (Unam.mx.)

¿Cómo se hace la espectrofotometría?

En la espectrofotometría se aprovecha la absorción de radiación electromagnética en la
zona del ultravioleta y visible del espectro. La muestra absorbe parte de la radiación
incidente en este espectro y promueve la transición del analito hacia un estado excitado,
transmitiendo un haz de menor energía radiante. (Unam.mx.)

¿Cuántos tipos de espectrofotómetros hay y cuáles son sus partes?

Un espectrofotómetro está conformado por las siguientes partes: Fuente de luz: Lámpara
que emite las longitudes de onda. Colimador: Lentes que enfocan la luz convirtiéndola en
un haz de rayos paralelos. Monocromador: Dispositivo que selecciona luz de una única
longitud de onda. (Unam.mx.)

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 REFERENCIAS

 Anonimo. (S, F). Espectrofotometría. Webdex. Recuperado de:

https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractica4.pdf
 Espectroscopia (s.f.). Iciq.es. Recuperado de
http://labvirtual.iciq.es/es/espectroscopia/
 Moncayo, S. (2020, 22 de abril). ¿Qué es la espectroscopia?: Instrumentación y
partes de un espectrómetro, tipos de técnicas
espectroscópicas. Antaresinstrumentacion.com. Recuperado
de: https://www.antaresinstrumentacion.com/que-es-espectroscopia-
instrumentacion-tecnicas/
 Espectrometria. (2019, 9 de octubre). Argentina.gob.ar. Recuperado
de: https://www.argentina.gob.ar/quimica/espectrometria
 (Unam.mx.) (S.F.) Recuperado de
http://www.paginaspersonales.unam.mx/app/webroot/files/3340/2020-09-03-
181728_Espectrofotometro.pdf

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