Inmunología de leucocitos,

plaquetas y componentes
plasmáticos
Actualización en medicina
transfusional y el trasplante
de células hematopoyéticas
CONTENIDO
1. Objetivos

2. Introducción

3. Conceptos generales
Antígenos leucocitarios.
Antígenos y anticuerpos de neutrófilos.
Antígenos de plaquetas humanas.
4. Inmunología de los leucocitos
Tipificación de antígenos de leucocitos humanos.
Detección de anticuerpos contra moléculas
de antígeno leucocitario humano.
Aplicación clínica de los antígenos
y anticuerpos leucocitarios.
5. Inmunología de las plaquetas
y componentes plasmáticos
Antígenos plaquetarios.
Importancia clínica de los antígenos
y anticuerpos plaquetarios.
6. Inmunología de neutrófilos
Función de los antígenos HNA-1.
El antígeno HNA-2.
El sistema de antígeno HNA-3.
Significado clínico de los anticuerpos de neutrófilos.
Aloanticuerpos.
7. Conclusiones

8. Bibliografía
 Inmunología de leucocitos, plaquetas y componentes plasmáticos | 3

Objetivos Complejo del HLA

• Abordar los conceptos generales de inmunología. Brazo largo Brazo corto

• Profundizar en la inmunología de los leucocitos,
plaquetas y componentes plasmáticos.

Introducción Región del HLA

Clase II Clase I
Los antígenos leucocitarios humanos (HLA) son
glucoproteínas altamente polimórficas codificadas DP DQ DR B C A
por el complejo principal de histocompatibilidad en el
cromosoma 6. Su función biológica es la presentación
de péptidos antigénicos a los linfocitos T, y hay dos Figura 1. Antígenos leucocitarios humanos (HLA).
clases principales: de clase I (A, B y C) y de clase II (DR,
DQ y PD). Conceptos generales
Los antígenos de clase I están presentes en casi todas
las células nucleadas, mientras que los antígenos de Antígenos leucocitarios
clase II se expresan principalmente en las células B y
Los antígenos leucocitarios humanos (HLA) son
otras células que presentan antígenos, como las células
glucoproteínas altamente polimórficas codificadas
dendríticas, las células endoteliales y los monocitos1.
por una región de genes conocida como el complejo
Estos antígenos juegan un papel clave en la principal de histocompatibilidad (MHC) ubicado
aceptación/rechazo del trasplante de células en el cromosoma 6p21 y que cubre una región de
hematopoyéticas y en la sensibilización a las aproximadamente 7.6 Mbp2.
transfusiones de sangre no leucorreducidas que
Después de los antígenos ABO, los antígenos HLA son
conducen a la refractariedad de la transfusión de
la gran barrera para el trasplante. Su función biológica
plaquetas, con papeles menores pero distintos en el
es presentar péptidos antigénicos a los linfocitos T.
trasplante de órganos sólidos.
El MHC codifica varios grupos de antígenos. Los mejor
Otros antígenos de glóbulos blancos específicos del entendidos son los antígenos altamente polimórficos,
linaje clínicamente importante, incluyen los que se clásicos de clase I (HLA-A, HLA-B y HLA-C) y clase II
encuentran en los neutrófilos, que son mucho menos (HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP)2. (Tabla 1)
polimórficos y con menos frecuencia causan problemas
Los antígenos de clase I son ubicuos y están presentes
clínicos que el sistema HLA2. (Figura 1)
en la mayoría de las células somáticas nucleadas.
Los anticuerpos contra los antígenos neutrófilos Los antígenos de clase II exhiben más distribución
desempeñan un papel en la neutropenia autoinmune y en restringida, con niveles variables de expresión en células
reacciones como la lesión pulmonar aguda relacionada B, células dendríticas, monocitos, macrófagos y células
con la transfusión. endoteliales. Sin embargo, los antígenos de clase II
pueden inducirse en muchos tipos de células mediante
Las plaquetas también poseen un número relativamente la activación2.
limitado de antígenos polimórficos que están
involucrados en problemas clínicos como la púrpura
postransfusión y la refractariedad a la transfusión
Antígenos y anticuerpos
de plaquetas, y problemas neonatales como la de neutrófilos
trombocitopenia aloinmune2. Los aloantígenos clínicamente significativos expresados
solo o predominantemente por neutrófilos se conocen
como antígenos de neutrófilos humanos (HNA). En esta
nomenclatura, los sistemas de antígenos están indicados
por números enteros, y los antígenos específicos dentro
de cada sistema se designan alfabéticamente por fecha
de publicación2.

El sistema de antígeno HNA-1 específico de neutrófilos

está formado por los cuatro alelos de antígenos, HNA-1a,
-1b, -1c y -1d (Tabla 2). Los antígenos HNA-1 presentan
baja afinidad. Los receptores Fcγ IIIb (FcγRIIIb), CD16,
se expresan solo en neutrófilos2.
 Inmunología de leucocitos, plaquetas y componentes plasmáticos | 4

Number of known alleles for each human

HLA CLASS I.

Gene. A B C E F G

Alleles. 2884 3590 2375 15 22 50

HLA CLASS II.

Gene. DRA DRB DQA DQB DPA DPB

Alleles. 7 1642 52 664 38 422

NON- HLA.

Gene. MICA MICB TAP1 TAP2 - -

Alleles. 100 40 12 12 - -

HLA, human leukocyte antigen (HLA).

Data from Robinson J, Waller MJ, Parham P, et al: IMGT/HTLA and IMGT/MHC: Sequence databases for the study
of the major histocompatibility complex. Nucleic Acids Res 31(1): 311- 314, 2003.

Williams Hematology. 9th ed. USA: McGraw-Hill Education; 2016. 253-264.

Tabla 1. Number of known alleles for each human. Leukocyte antigen locus as of July 2014.

Human Neutrophil Antigen

System. Alleles. Location of Antigens. Genes.

FCGR3B*01,
HNA-1. HNA- 1a, -1b, -1c, and 1d. FcyRIIIb. FCGR3B*02,
and FCGR3B*03.

HNA-2. HNA-2. NB1 gp. CD177.

Choline transporter- like

HNA-3. HNA-3a. SLC44A2*01.
protein- 2 (CTL2).

HNA-4. HNA-4a. αM integrin, C3bi-receptor ITGAM*01.

(CR3) (CD11b).

HNA-5. HNA-5a. αL integrin, LFA-1 (CD11a). ITGAL*01.

Tabla 2. Human Neutrophil Antigens. Williams Hematology. 9th ed. USA: McGraw- Hill Education; 2016. 253-264.
 Inmunología de leucocitos, plaquetas y componentes plasmáticos | 5

Los antígenos FcγRIIIb y HNA-1 se expresan en todos los Detección de anticuerpos

neutrófilos segmentados, en aproximadamente la mitad
de los metamielocitos neutrófilos y en aproximadamente
contra moléculas de antígeno
el 10% de los mielocitos neutrófilos. FcγRIIIb soluble está
leucocitario humano
presente en el plasma y tiene los mismos polimorfismos Además de la tipificación de los antígenos HLA, la
de HNA-1 que se encuentran en los neutrófilos2. mayoría de los laboratorios también utilizan tecnología
para detectar anticuerpos contra los antígenos
HLA. Esto es muy importante para el trasplante de
Antígenos de plaquetas humanas órganos sólidos donde la presencia de anticuerpos
Las plaquetas expresan una variedad de marcadores anti-HLA puede causar un rechazo irreversible tras el
inmunogénicos en la superficie celular. Algunos de estos trasplante. Es menos preocupante para el trasplante de
antígenos se comparten con otros tipos de células como médula/células madre, donde los donantes y los receptores
en el caso de HLA o antígenos de grupo sanguíneo (ABO), generalmente coinciden con los antígenos HLA2.
mientras que otros son específicos a las plaquetas.
La prueba serológica de microcitotoxicidad todavía
Se pueden reconocer algunos de estos marcadores está en uso, pero los ensayos en fase sólida se han
específicos de plaquetas por auto anticuerpo o por convertido en una práctica estándar ya que son más
anticuerpos inducidos por ciertas drogas, y aún otros sensibles que el método CDC. Estos ensayos incluyen
por anticuerpos hechos por mujeres embarazadas o el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)
receptores de transfusiones de sangre. y los ensayos de flujo basados en microperlas, como los
ensayos FlowPRA y Luminex2.
Los aloantígenos plaquetarios están asociados con
polimorfismos de la superficie plaquetaria GPs y pueden Antes de la mayoría de los trasplantes de órganos
inducir la producción de aloanticuerpos cuando los sólidos, también se realiza una prueba cruzada
individuos que carecen de un polimorfismo particular específica del donante para garantizar que el receptor
están expuestos a través del embarazo o transfusión. no tenga anticuerpos anti-HLA contra los antígenos HLA
del donante.

Inmunología Las pruebas cruzadas se realizan por

microlinfocitotoxicidad (CDC), citometría de flujo y por
de los leucocitos ensayos de fase sólida (ELISA y microperla). Por su
parte, los laboratorios, ahora están adoptando la prueba
Tipificación de antígenos cruzada "virtual" utilizando datos de los ensayos de
de leucocitos humanos microperlas sensibles para predecir el resultado de la
prueba cruzada.
La tipificación de tejidos para antígenos HLA se puede
realizar mediante varios métodos utilizando tecnologías
serológicas, celulares y moleculares. Los procedimientos Aplicación clínica de los antígenos
más frecuentes utilizados en el entorno clínico son y anticuerpos leucocitarios
serológicos y moleculares. Los antígenos HLA codificados por el MHC juegan
un papel central en el trasplante, la regulación de las
Los ensayos celulares como la reacción mixta de
respuestas inmunes y la susceptibilidad a una variedad
linfocitos y la prueba de linfocitos cebados fueron
de enfermedades. La aplicación más común, sin
comunes antes de la adopción generalizada de los
embargo, es el campo del trasplante2.
métodos de ADN2.
En el trasplante renal y de células madre, los aloinjertos
La prueba de citotoxicidad dependiente del complemento
de donantes hermanos idénticos al HLA tienen injertos de
(CDC, por sus siglas en inglés) de microlinfocitotoxicidad
bronceado de supervivencia significativamente mayores
ha sido un procedimiento fundamental para definir los
de donantes familiares no relacionados o donantes no
antígenos HLA durante más de 30 años, aunque se ha
relacionados2.
suplantado mediante métodos de tipificación molecular.
Para el trasplante de órganos sólidos, un donante vivo
El desarrollo de la reacción en cadena de la polimerasa
no siempre está disponible o no es factible (por ejemplo,
(PCR), revolucionó el enfoque de la tipificación de HLA.
para el trasplante de corazón). La tipificación de HLA
Varios métodos basados en el ADN son comúnmente
para la correspondencia de riñones y páncreas se realiza
aceptados para la tipificación de HLA. Estos incluyen
en los loci HLA-A, HLA-B y HLA-DR a baja resolución
tipificación basada en secuencia, amplificación de
(nivel serológico o de antígeno por ADN)2.
cebador específico de secuencia (SSP) e hibridación de
sonda de oligonucleótido específico de secuencia (SSO)2.

La tipificación de HLA es principalmente de interés clínico

en el trasplante de médula/células madre sanguíneas.
 Inmunología de leucocitos, plaquetas y componentes plasmáticos | 6

Inmunología de las
plaquetas y componentes
plasmáticos
Antígenos plaquetarios
Class I Class II
Las plaquetas expresan una variedad de marcadores Peptide-binding
antigénicos en su superficie. Estas pueden clasificarse
groove
de la siguiente manera:

• Antígenos no específicos: son aquellos que α2 α1 α1 β1

se expresan en las plaquetas y en otras líneas
celulares.
• Antígenos ABO: las plaquetas tienen antígenos A
y B controlados por gen H, independientes de los β2m α2 β2
α3
genes secretores y Lewis. La expresión es variable
y en ocasiones muy débil. Su localización se
asigna a las GP IIa, IIIa y Ib. Este tiene importancia
transfusional variada3.
TM TM
• Antígenos Lewis, Ii y P: son adsorbidos TM
íntegramente del plasma. Están presentes solo
en pequeñas cantidades y no tienen significación Plasma
clínica transfusional3. membrane Cytoplasmic
Cytoplasmic
tail
Existen además antígenos HLA en plaquetas. Estas se tail
expresan HLA clase I, y a su vez, son la mayor fuente de
HLA clase I en sangre total. También expresan HLA A, H63D
HLA B y en menor cantidad HLA C. (Figura 2)

Cabe señalar que el desarrollo de aloanticuerpos anti α2 s s

HLA I en transfusión es de 80 a 100%. Los Ac aparecen α1
después de 10 días de la transfusión primaria y 4 días
después de la segunda transfusión. NH2
NH2
• Antígenos específicos: son aquellos que se
expresan únicamente en las plaquetas. Desde
s s
1990 se propuso una nomenclatura uniforme α3 β2M
s s
HPA (Human platelet antigen) para designar
a cada sistema. C282Y
Estos son sistemas bialélicos, y los antígenos son COOH
identificados con las letras a y b. Cada sistema
antigénico está asociado con glicoproteínas
(GPs) y tienen una distribución diferente según la plasma membrane
población3.

• Antígenos y anticuerpos ABO: los antígenos ABO

COOH
expresados en las plaquetas son una combinación
de material intrínseco, de la superficie de la Cystosol
membrana plaquetaria y de material extrínseco,
absorbida desde el plasma. La cantidad de antígeno Figura 2. Antígenos HLA en plaquetas. Tomado de: Castro calderón B.
Inmunohematología plaquetaria.
ABO presente en las plaquetas es algo variable de
un individuo a otro, desde el 5% al 10% en individuos
A, B o AB.

Cabe destacar que las plaquetas son a menudo

transfundidas sin considerar la compatibilidad ABO. Las
transfusiones de plaquetas ABO incompatibles en forma
habitual dan como resultado una recuperación menor en
el recuento plaquetario luego de la transfusión.
 Inmunología de leucocitos, plaquetas y componentes plasmáticos | 7

Importancia clínica de los El sistema de antígeno HNA-3

antígenos y anticuerpos El sistema de antígeno HNA-3 tiene un antígeno, HNA-
plaquetarios 3a, que anteriormente se conocía como 5b. HNA-3a se
Las respuestas inmunes a los aloantígenos plaquetarios expresa por neutrófilos, linfocitos, plaquetas, células
están involucradas en la patogénesis de varios síndromes endoteliales, riñón, bazo y células placentarias.
clínicos3:
El HNA-3a tiene una frecuencia de antígeno del 89 al
• La trombocitopenia fetal/neonatal aloinmune 92% y se encuentra en una glucoproteína neutrófila de
(TFNA): potencialmente grave de 1- 2 casos cada 70 a 95 kDa. Varios casos de lesión pulmonar aguda
1200- 2000 RN. El 10-30% de casos presenta relacionada con la transfusión (TRALI) se han asociado
hemorragia cerebral, el 20% secuelas neurológicas con la transfusión de plasma que contiene anti-HNA-3a4.
y el 10% fallece).
• La púrpura trombocitopénica postransfusional
(PTP): trombocitopenia aguda grave,
Significado clínico de los
aproximadamente una semana después de la anticuerpos de neutrófilos
transfusión de cualquier componente sanguíneo. Los anticuerpos de los neutrófilos pueden ser clasificados
• Las reacciones febriles no hemolíticas de acuerdo con el estímulo antigénico (por ejemplo: alo-,
postransfusionales. auto- y anticuerpos inducidos por fármacos).
• La refractariedad a la transfusión de plaquetas:
fallo en el incremento postransfusional esperado
después de dos transfusiones de plaquetas Aloanticuerpos
sucesivas ABO compatibles, de menos de 72 h de La aloinmunización frente a antígenos de neutrófilos es la
almacenamiento. mayoría de las veces consecuencia de una transfusión o
• La púrpura trombocitopénica autoinmune. embarazo. Los problemas clínicos asociados dependen
• La trombocitopenia inmunoalérgica por de la especificidad del anticuerpo, que determina la
medicamentos. célula diana implicada.

Los aloanticuerpos específicos de una célula se asocian

Inmunología de neutrófilos con condiciones clínicas bien definidas:

Función de los antígenos HNA-1 • Neutropenia aloinmune neonatal: durante el

embarazo, las madres pueden ser aloinmunizadas a
Los polimorfismos en FcγRIIIb tienen algún efecto los antígenos de neutrófilos fetales. La IgG materna
sobre la función de neutrófilos. Los neutrófilos que son dirigida a los neutrófilos puede atravesar la placenta
homocigotos para HNA-1b tienen una afinidad menor y destruir los neutrófilos del recién nacido.
por la inmunoglobulina (Ig) G3 que los homocigotos para La aloinmunización materna a los antígenos de
HNA-1a. neutrófilos puede afectar al primer hijo. La mayoría
Es de descarta que los neutrófilos de aquellos que de los recién nacidos experimentan neutropenia
son homocigotos para HNA-1b fagocitan eritrocitos aislada, pero las citopenias son autolimitadas y se
sensibilizados con anticuerpos IgG1 e IgG3 anti-Rh resuelven a medida que se elimina el anticuerpo.
monoclonales y bacterias opsonizadas con IgG1 a un Con mayor frecuencia, la neutropenia se detecta en
nivel más bajo que los neutrófilos homocigotos para la primera semana de vida cuando el recién nacido
HNA-1a4. se vuelve febril o desarrolla una infección y se
realiza un recuento de neutrófilos5.
El antígeno HNA-2
• Reacción febril postransfusional (también
HNA-2 es un isoantígeno sin variación alélica y se implicados anticuerpos HLA): los anticuerpos
expresa solo en neutrófilos, metamielocitos neutrófilos y contra los neutrófilos y los antígenos HLA en la
mielocitos. Es el único que se expresa en subpoblaciones sangre transfundida pueden causar reacciones no
de neutrófilos. hemolíticas febriles.
El tamaño medio de la subpoblación de neutrófilos Las reacciones de transfusión febril no hemolítica
positiva para HNA-2 es del 45 al 65% y depende del se producen a las pocas horas de una transfusión
género. El tamaño de la subpoblación positiva de y pueden asociarse con escalofríos y rigidez. Estas
HNA-2 de neutrófilos de mujeres es aproximadamente reacciones son el resultado de anticuerpos de
del 60%, en comparación con aproximadamente el 50% neutrófilos en el receptor de transfusión que se
de los hombres. une a los leucocitos en el componente sanguíneo
transfundido2.
Cabe decir que la expresión de neutrófilos de HNA-2
es mayor en mujeres embarazadas que en donantes
de sangre sanas4.
 Inmunología de leucocitos, plaquetas y componentes plasmáticos | 8

• Lesión pulmonar aguda relacionada con la De manera que, las respuestas inmunes a los
transfusión (TRALI) (transfusión de títulos elevados aloantígenos plaquetarios están involucradas en
de anticuerpo): TRALI a menudo es causado por la la patogénesis de varios síndromes clínicos como
transfusión de anticuerpos neutrófilos en la porción la púrpura postransfusión y la refractariedad a la
plasmática de un componente sanguíneo. transfusión de plaquetas, y problemas neonatales
Esto ocurre dentro de las 6 horas de una transfusión como la trombocitopenia aloinmune, mientras que la
cuando ocurre hipoxia y edema pulmonar no aloinmunización frente a antígenos de neutrófilos es la
cardiogénico. Los anticuerpos contra HNA-2 y -3a mayoría de las veces consecuencia de una transfusión
se han implicado con mayor frecuencia en lesiones o embarazo, que pueden estar asociadas a neutropenia
pulmonares. aloinmune neonatal, reacción febril postransfusional y
lesión pulmonar aguda relacionada con la transfusión
Los modelos animales también muestran que la entre otros.
transfusión de anti-HNA-2 y anti-HNA-3a puede
causar daño pulmonar agudo2.

• Por otro lado, está también la corta supervivencia y

Bibliografía
mala funcionalidad de los neutrófilos transfundidos 1. Trujillo Álvarez Y, Arce Bustabad S, Viguera R, Martínez
(también implicados anticuerpos HLA). Motas I, White Mediaceja V. El complejo mayor
• Neutropenia autoinmune; algunos anticuerpos de histocompatibilidad. Organización genética,
tienen aloespecificidad para antígenos del sistema estructura, localización y función. Panorama. Cuba
HNA: la neutropenia autoinmune está bien descrita y Salud 2018; 13(1): 53-57.
en niños. Típicamente, el inicio de la neutropenia 2. Coppage M, Stroncek D, McFarland J, Blumberg
autoinmune de los niños comienza a los 8 meses N. Human leukocyte and platelet antigens. In:
de edad, pero los niños entre 1 y 36 meses pueden Kaushansky K, Lichtman MA, Prchal JT, Levi M,
verse afectados. Press OW, Burns LJ, Caligiuri MA, editors. Williams
La mayoría de los estudios han encontrado Hematology. 9th edition. USA: McGraw-Hill
que los recuentos de neutrófilos se recuperan Education; 2016. 253-264.
espontáneamente a la edad de 5 años, con una 3. Castro Calderón B. Inmunohematología Plaquetaria.
duración media de neutropenia de 13 a 20 meses2. 4. Regan F. Antígenos y anticuerpos de las células
sanguíneas: eritrocitos, plaquetas y neutrófilos. En:
Bain BJ, Bates I, Laffan MA, editores. Dacie y Lewis:
Conclusiones Hematología práctica. 12. ª ed. España: Elsevier;
2018.439-469.
Los antígenos leucocitarios humanos (HLA) juegan un
papel clave en la aceptación/rechazo del trasplante 5. Pereira Saavedra A. Grupos sanguíneos e
de células hematopoyéticas y en la sensibilización a Inmunohematología. En: Rozman C, Cardellach F,
las transfusiones de sangre no leucorreducidas que editores. Farreras Rozman: Medicina Interna. 18va
conducen a la refractariedad de la transfusión de ed. España: Elsevier; 2016.1719-1725.
plaquetas, con papeles menores pero distintos en el
trasplante de órganos sólidos.