APROXIMACIÓN DE BACTERIAS PRESENTES EN INDIVIDUOS SOSPECHOSOS

DE MASTITIS SUBCLÍNICA EN EL HATO LECHERO BOVINO DE LA ESCUELA

NACIONAL CENTRAL DE AGRICULTURA -ENCA-

Cely Eunice Reyes Cuellar

RESUMEN

Objetivo. Detectar y analizar la frecuencia de los géneros bacterianos asociados a posibles

infecciones en la glándula mamaria de vacas pertenecientes al lote lechero de la Escuela
Nacional Central de Agricultura. Materiales y métodos. Se realizó la prueba de CMT a las
36 vacas en producción, como una herramienta de tamizaje, posteriormente se realizaron
cultivos de las muestras para identificar los géneros bacterianos presentes y los datos
obtenidos fueron sometidos a un análisis de frecuencia para categorizar la presencia de
bacterias. Resultados. La categoría A representa el género bacteriano Klebsiella el cual tuvo
una frecuencia absoluta (fa) de 3 y una frecuencia relativa (fr) de 0.08 lo que sugiere que esta
bacteria representa el 8% de las bacterias identificadas en la muestra. La categoría B: género de
Streptococcus tuvo una fa de 4 y una fr de 0.11 indicando que representa un 11%. La categoría
C: cultivos en los que no hubo crecimiento bacteriano; tuvo una fa de 2 y una fr de 0.05
representando un 5%. Y finalmente la categoría C que representaba el grupo de los individuos
aparentemente sanos según la prueba de CMT tuvo una fa de 27 y una frecuencia relativa del
0.75. Conclusión. Se detectó la presencia de los géneros bacterianos Klebsiella y Streptococcus
en las muestras analizadas, lo que sugiere que estos géneros bacterianos podrían estar asociados a
posibles infecciones en la glándula mamaria de las vacas del lote lechero estudiado y la
frecuencia de vacas aparentemente constituyen la categoría preponderante en el hato
lechero

Palabras Clave: Aves, Newcastle, anticuerpos, zoológico.

INTRODUCCION
OBJETIVOS
1. General
 Detectar y analizar la frecuencia de los géneros bacterianos asociados a posibles
infecciones en la glándula mamaria de vacas pertenecientes al lote lechero de la
Escuela Nacional Central de Agricultura.

2. Específicos
 Detectar a las vacas sospechosas a mastitis subclínica por medio de la prueba de
CMT misma que será empleada como un medio de tamizaje para la realización de
cultivos bacteriológicos a fin de conocer los géneros bacterianos presentes en estas.

 Someter los géneros bacterianos encontrados en los cultivos a un análisis de

frecuencia.
1. REVISION DE LITERAURA

1.1. Mastitis
Mastitis se define como la inflamación del parénquima de la glándula mamaria causada por
una infección bacteriana, un trauma o una lesión en la ubre. Se considera la enfermedad
más común y más costosa que afecta al ganado lechero en todo el mundo.

La mastitis causa una variedad de cambios físicos y químicos en la leche y cambios

patológicos en el tejido glandular. Los cambios más importantes en la leche incluyen
cambios de color, la presencia de coágulos y la presencia de grandes cantidades de
leucocitos. Al realizar el examen clínico en la glándula mamaria se observa hinchazón,
calor, dolor y edema en la mayoría de los casos.

Sin embargo, un gran porcentaje de casos de mastitis no son fácilmente detectables por
palpación manual o por examen visual de la leche; estos cuartos de la ubre representan
infecciones subclínicas. Debido al gran número de casos subclínicos, el diagnóstico de
mastitis depende en gran medida de las pruebas indirectas, que a su vez dependen de la
concentración de células somáticas o de la concentración de electrolitos (sodio o cloruro) de
la leche.

Las células somáticas en la leche comprenden células de defensa clasificados como

glóbulos blancos de la sangre y células epiteliales desprendidas del tejido de la ubre. La
función básica de estas células en la glándula mamaria es la defensa contra la invasión
bacteriana.

En los cuartos no infectados de bovinos el número total de células somáticas es <100,000/

ml de muestra de leche. De los cuales hasta el 40% –50% pueden ser células epiteliales y el
resto son glóbulos blancos, incluidos macrófagos 15%, 10% de linfocitos y 25% de
leucocitos polimorfonucleares. En otros animales como cabras u ovejas, el número de
células somáticas es mucho más alto en un rango de 150,000 a 300,000/ml de leche.

El NMC (Consejo Nacional de Mastitis) estima que la mastitis le cuesta a los productores
de lácteos en los Estados Unidos más de $ 2 mil millones anuales. En consecuencia, la
mastitis sigue siendo uno de los factores limitantes más importantes (si no el ás) para una
producción láctea rentable.

1.2 Etiología

Los microorganismos causantes de la mastitis bovina se clasifican como infecciosos o

ambientales. Los primeros colonizan y se multiplican en la glándula mamaria de la vaca y
se propagan de vaca a vaca principalmente durante el ordeño.

Los microorganismos ambientales consisten en un grupo heterogéneo de géneros y especies

bacterianos. La fuente de estos patógenos es el ambiente en donde se encuentran las vacas.
La forma de transmisión se debe a un inadecuado manejo de la vaca, como por ejemplo
mantener recintos húmedos, áreas de ordeño sucias, no secar las ubres después del ordeño y
un control ineficiente de insectos como las moscas.

Tabla 1: Géneros y especies bacterianos causantes de Mastitis

Agentes patógenos Oportunistas de la Agentes ambientales Otros patógenos
piel
Staphylococcus Staphylococcus Streptococcus uberis Nocardia spp.,
aureus, Streptococcus coagulasa negativos Streptococcus Pasteurella spp.,
agalactiae, dysgalactiae, Mycobacterium
Corynebacterium Streptococcus bovis, Bacillus
bovis, Mycoplasma equinus Coliformes cereus,
ambientales Pseudomonas spp.,
Escherichia coli, Serratia marcescens,
Klebsiella spp., Citrobacter spp.,
Enterobacter spp., bacterias anaerobias
Trueperella
Arcanobacterium,
Actinomyces,
Corynebacterium
pyogenes

1.3 Diagnostico

1.3.1 Prueba de California para mastitis (CMT)

La prueba consiste en la adición de un detergente a la leche (Alquilauril sulfonato de sodio)

que causa la liberación del ADN de los leucocitos presentes en la ubre, convirtiéndose en una
combinación con agentes proteicos de la leche en una gelatina. A mayor presencia de células,
mayor formación de gelatina. Ésta prueba posee una sensibilidad del 97% y una especificidad
del 93% y tiene la ventaja de que es una prueba muy sensible y se puede utilizar directamente
en el ordeño, o de una muestra del tanque enfriador. El resultado de esta prueba se califica
cuantitativamente en cinco clases desde un resultado negativo en el que la leche y el reactivo
permanecen acuosos, a un resultado donde la mezcla de leche y reactivo casi se solidificó.

1.3.2 Prueba de Wisconsin para mastitis (WMT)

La prueba de Wisconsin se diseñó para realizarla en el laboratorio. Se basa en el conteo de

células somáticas en muestras de leche fresca mezclada o leche de tanques de enfriamiento, al
igual que para muestreo de vacas individuales. A diferencia de la prueba de CMT, el resultado
de ésta prueba se mide cuantitativamente dependiendo de la viscocidad que la muestra
adquiere posterior a la adición del reactivo
2. MATERIALES Y METODOS

2.1. Recursos humanos

 Estudiante Eps
 Médico Veterinario de la Escuela Nacional Central de Agricultura
 Operarios de la sala de ordeño

2.2. Recursos Biológicos

1 lote de 36 vacas en ordeño

2.3. Metodología
La investigación se realizó en la Escuela Nacional Central de Agricultura -ENCA-,
ubicada el Km 17.5 carretera a Bárcena, Villa Nueva, Guatemala

Para la realización del estudio se tomó en cuenta número total de vacas en

producción el cual era de 36 animales. Se realizó la prueba de California Mastitis
Test (CMT) 1 vez a la semana durante el mes de diciembre para diagnosticar a las
vacas sugerentes a mastitis subclínica. La prueba fue realizada durante los ordeños
de la tarde en un horario de 3.:300 mm a 5:30 pm.

En la tercera semana de diciembre se corrieron las pruebas CMT como un medio

tamizaje puesto que de cada una de las vacas que arrojó resultados positivos a la
prueba de CMT se enviaron muestras al laboratorio BIOLAB para realizar un cultivo
bacteriológico y así determinar el género bacteriano que podría estar causando el
problema.

Procedimiento para la toma de muestras para laboratorio:

 Limpieza de los pezones. Se realizó un lavado vigoroso con agua para eliminar
cualquier suciedad que pudieran tener los pezones al momento de realizar el
ordeño.
 Secado. Se utilizó toallas desechables para secar cada uno de los pezones para
minimizar el riesgo de contagiar cuartos sanos con alguna toalla contaminada por
un cuarto infectado.
 Desinfección con alcohol.
 Realización de la prueba de CMT
 Extracción de la muestra de leche de las vacas positivas a la prueba de CMT.
Previo a la extracción de la muestra se realizó un lavado de manos para evitar que
la suciedad que pudiera estar en éstas cayera dentro del frasco estéril pudiendo
alterar el resultado del cultivo bacteriológico.
 Se extrajo una muestra de 10 ml que se colocó en un frasco estéril, el cual se
identificó con el número de arete de la vaca y número de cuarto afectado.

 Luego de extraer la muestra se colocó en una hielera con refrigerante para su

transporte. Posteriormente se refrigeró a una temperatura de 4 grados centígrados
 para colocarlos nuevamente 14 horas después en una hielera con refrigerante para
transportarlas al laboratorio de BIOLAB para su análisis, y los resultados fueron
enviados por correo electrónico.

3. Resultados.

Tabla No.2 Resultados obtenidos de las pruebas de CMT durante el mes de

diciembre

ID Resultados semanales ID Resultados semanales

Bovino 5/12 12/12 19/12 26/12 Bovino 5/12 12/12 19/12 26/12

755 823
+ - + - - - + +

766 841
- - - - - + - -

767 845
+ - + - - - - -

768 852
- + - - - + - -

773 859
- + - + - + - -

790 868
- - + - - - - +

806 873
+ + - - + - + -

809 876
+ - + - - - - -

818 877
- - - - - - + -

880 954
+ - + - - - - +

896 963
+ - - - - - - -

901 964
- - - - - - - -

914 972
- - - - - - - -

921 973
- - - - - - - +
 933 974
+ - + - + - - -

939 977
- - - - + - - -

940 979
+ - + - - - - -

946 982
+ - - - + - - -

Total, de

animales
9 3 7 1 2 3 2 5
positivos

Tabla No.3 Animales con resultados positivos a la prueba de CMT durante el mes de
diciembre
Sema Animales positivos a CMT
1 11
2 6
3 9
4 6
Total

Tabla No.4 Resultados del cultivo bacteriológico

ID
ID Bovino Resultado Resultado
Bovino

755 Streptococcus sp 877 Streptococcus sp

767 Streptococcus sp 880 Streptococcus sp

790 No hubo crecimiento bacteriano 933 klebsiella ozaenae

809 No hubo crecimiento bacteriano 940 klebsiella ozaenae

873 klebsiella ozaenae -

Los datos fueron analizados mediante un análisis de frecuencia, en el que el grupo A representa a los
individuos en cuyas muestras hubo crecimiento de la bacteria klebsiella ozaenae, el grupo B
crecimiento de Streptococcus sp, C para aquellas que no presentaron crecimiento
bacteriano y D a los animales aparentemente sanos según las pruebas de CMT.

Tabla No.4 Análisis de Frecuencia

Xi f F fr Fr
A 3 3 0.08 0.08
B 4 7 0.11 0.19
C 2 9 0.05 0.24
D 27 36 0.75 0.99
TOTAL 36
4. DISCUSION
La mastitis subclínica representa un desafío significativo en la producción lechera, afectando
tanto la salud de las vacas como la calidad de la leche. En este contexto, la presente
investigación se enfocó en la detección y análisis de la frecuencia de géneros bacterianos
asociados a posibles infecciones en la glándula mamaria de las vacas pertenecientes al lote
lechero de la Escuela Nacional Central de Agricultura.
La elección de este escenario específico responde a la necesidad de comprender la presencia
de bacterias causantes de mastitis subclínica en un entorno particular, con el fin de desarrollar
estrategias de manejo y tratamiento adaptadas a las condiciones locales. La implementación
del California Mastitis Test (CMT) como herramienta de tamizaje, seguido de análisis de
cultivos bacterianos, proporcionó una visión un poco más detallada de la salud intramamaria
en este hato lechero.

De las 36 vacas a las que se les realizó la prueba de California para mastitis 9 de ellas
arrojaron resultados positivos, por lo que de éstas se realizaron cultivos bacterianos y los
resultados fueron sometidos a un análisis de frecuencia.

De acuerdo a los resultados arrojados por dicho análisis para la categoría A que representa
el género bacteriano Klebsiella tuvo una frecuencia absoluta de 3 y una frecuencia relativa
de 0.08 lo que sugiere que esta bacteria representa el 8% de las bacterias identificadas en la
muestra. La categoría B: género de Streptococcus tuvo una frecuencia absoluta de 4 y
una frecuencia relativa de 0.11 indicando que representa un 11%. La categoría C:
cultivos que no presentaron crecimiento bacteriano tuvo una frecuencia absoluta de
2 y una frecuencia relativa de 0.05 representando un 5%. Y finalmente la categoría C
que es el grupo de los individuos aparentemente sanos según la prueba de CMT tuvo una
frecuencia absoluta de 27 y una frecuencia relativa del 0.75.

El análisis de frecuencia reveló una tendencia significativa en la población estudiada,

sugiriendo que la mayoría de los animales presentan aparente salud mamaria. Los resultados
indican que las vacas aparentemente sanas constituyen la categoría preponderante en el hato
lechero de la Escuela Nacional Central de Agricultura. Con una relativa del 75%, este grupo
supera a otras categorías, sugiriendo que, a simple vista, la mayoría de los animales podrían
considerarse libres de mastitis subclínica. Esto y la presencia de muestras sin crecimiento
bacteriano resalta la complejidad de la microbiota mamaria, sugiriendo la necesidad de
emplear diferentes métodos de diagnósticos y no conformarse solamente a una prueba de
CMT puesto que ésta puede carecer de la sensibilidad necesaria para detectar el estado real
de la glándula mamaria, además se necesitan técnicas más avanzadas para la identificación
precisa de bacterias u otros agentes causales de la mastitis subclínica que un cultivo
bacteriológico no es capaz de demostrar.

5. CONCLUSIONES
Se evidenció la presencia de los géneros Klebsiella y Streptococcus en las muestras
analizadas, lo que sugiere que estos géneros bacterianos podrían estar asociados a posibles
infecciones en la glándula mamaria de las vacas del lote lechero estudiado.
La detección de muestras sin crecimiento bacteriano resalta la complejidad de la microbiota
mamaria y subraya la necesidad de técnicas más avanzadas para una identificación precisa,
así como la posibilidad de la presencia de otras bacterias no analizadas en este estudio
La frecuencia considerable de vacas aparentemente sanas con casos de mastitis subclínica
destaca la importancia de un monitoreo constante, ya que la apariencia externa no garantiza
la ausencia de posibles infecciones en la glándula mamaria.
 6. RECOMENDACIONES

 Dada la alta frecuencia de vacas aparentemente sanas con casos de mastitis subclínica, se
sugiere implementar un programa de monitoreo continuo que incluya pruebas de diagnóstico
más sensibles y regulares en este grupo. Esto ayudará a identificar de manera temprana
posibles infecciones subyacentes, contribuyendo a la aplicación oportuna de medidas
preventivas y terapéuticas
 Se recomienda realizar un análisis detallado de factores de riesgo y prácticas de manejo en el
hato lechero. Esto puede incluir investigar aspectos como la higiene del entorno, el manejo de
la alimentación, y la frecuencia de ordeño, con el objetivo de identificar posibles
correlaciones con la presencia de bacterias causantes de mastitis subclínica. Los resultados de
este análisis podrían guiar la implementación de medidas preventivas específicas y mejoras en
las prácticas de manejo.