TFG 2022 Vilar Yebra Eva

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Influencia de la

suplementación con remolacha


en la recuperación de carreras
de ultrarresistencia

Memoria para optar al título de Graduada en Enfermería de la Universitat Jaume I presentada por
Eva Vilar Yebra en el curso académico 2021/2022.

Este trabajo ha sido realizado bajo la tutela del profesor Dr. Eladio Joaquín Collado Boira.

Fecha de depósito: 10 de mayo de 2022


Solicitud de la alumna para el depósito y defensa del TFG

Yo, Eva Vilar Yebra, con NIF 20972013S, alumna de cuarto curso del Grado de Enfermería de
la Universitat Jaume I, expongo que durante el curso académico 2021/2022:

• He superado al menos 168 créditos ETCS de la titulación.


• Cuento con la evaluación favorable del proceso de elaboración de mi TFG.

Por estos motivos, solicito poder depositar y defender mi TFG titulado “Influencia de la
suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia”, tutelado por
el profesor Dr. Eladio Joaquín Collado Boira, defendido en lengua castellana, en el periodo de
31 de mayo, 2022.

Firmado: Eva Vilar Yebra

Castellón de la Plana, 10 de mayo de 2022.

I
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Agradecimientos

II
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Índice

1. Introducción ....................................................................................................................................... 3

1.1 Estado actual .................................................................................................................... 3

1.2 Importancia de la investigación........................................................................................ 3

1.3 Fisiología y deporte .......................................................................................................... 3

1.4 Antioxidantes ................................................................................................................... 5

1.4.1 Remolacha ................................................................................................................. 6

1.5 Tema de estudio y justificación ........................................................................................ 6

2. Metodología........................................................................................................................................ 6

2.1 Objetivos .......................................................................................................................... 6

2.1.1 Principal .................................................................................................................... 6

2.1.2 Secundarios ............................................................................................................... 7

2.2 Hipótesis ........................................................................................................................... 7

2.3 Pregunta PIO .................................................................................................................... 7

2.4 Diseño............................................................................................................................... 8

2.5 Participantes ..................................................................................................................... 8

2.5.1 Criterios de inclusión ................................................................................................ 8

2.5.2 Criterios de exclusión ................................................................................................ 8

2.5.3 Tipo y técnica de muestreo........................................................................................ 9

2.6 Variables........................................................................................................................... 9

2.7 Procedimiento de recogida de datos ................................................................................. 9

2.8 Análisis de los datos ....................................................................................................... 10

2.8.1 Análisis de las muestras sanguíneas ........................................................................ 10

2.8.1.1 Estrés oxidativo ................................................................................................ 10

2.8.1.2 Daño muscular y respuesta inflamatoria .......................................................... 11

III
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

2.8.2 Análisis de los datos de la encuesta ........................................................................ 11

2.9 Análisis estadístico ........................................................................................................ 11

2.9.1 Paquete de análisis utilizado ................................................................................... 11

2.9.2 Análisis descriptivo ................................................................................................. 12

2.9.3 Contraste de hipótesis.............................................................................................. 12

2.10 Consideraciones éticas ................................................................................................. 12

3. Resultados ........................................................................................................................................ 13

3.1 Características de los participantes ................................................................................ 13

3.2 Relación entre el consumo de remolacha y los marcadores sanguíneos ........................ 14

3.2.1 Marcadores de estrés oxidativo ............................................................................... 14

3.2.2 Marcadores de daño muscular ................................................................................. 18

3.2.3 Variable de respuesta inflamatoria .......................................................................... 20

4. Discusión .......................................................................................................................................... 21

4.1 Limitaciones de este estudio .......................................................................................... 24

4.2 Líneas futuras de investigación ...................................................................................... 24

5. Conclusiones .................................................................................................................................... 24

Bibliografía .......................................................................................................................................... 26

Anexos .................................................................................................................................................. 34

IV
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Índice de tablas

Tabla 1. Componentes de la pregunta de investigación en base a la estructura PIO ............................... 7

Tabla 2. Características de los participantes.......................................................................................... 13

Tabla 3. Valores de los marcadores glutatión peroxidasa (GPx) y su variación relativa (Δ GPx). ....... 14

Tabla 4. Valores de los marcadores glutatión reductasa (GR) y su variación relativa (Δ GR). ............ 15

Tabla 5. Valores de los marcadores malondialdehído (MDA) y su variación relativa (Δ MDA). ........ 16

Tabla 6. Valores de los marcadores de grupos carbonilo (CG) y su variación relativa (Δ CG). ........... 17

Tabla 7. Valores de los marcadores de creatina quinasa (CK) y su variación relativa (Δ CK). ............ 18

Tabla 8. Valores de los marcadores de lactato deshidrogenasa (LDH)


y su variación relativa (Δ LDH). ................................................................................................. 19

Tabla 9. Valores de los marcadores de proteína C reactiva (PCR) y su variación relativa (Δ PCR). ... 20

V
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Índice de figuras
Figura 1. Actividad del marcador de estrés oxidativo glutatión peroxidasa (GPx). .............................. 14

Figura 2. Actividad de los marcadores glutatión reductasa (GR) y su variación relativa (Δ GR)......... 15

Figura 3. Actividad de los marcadores malondialdehído (MDA) y su variación relativa (Δ MDA). ... 16

Figura 4. Actividad de los marcadores grupos carbonilo (CG) y su variación relativa (Δ CG). ........... 17

Figura 5. Actividad de los marcadores creatina quinasa (CK) y su variación relativa (Δ CK). ............ 18

Figura 6. Actividad de los marcadores lactato deshidrogenasa (LDH)


y su variación relativa (Δ LDH). ................................................................................................. 19

Figura 7. Actividad de los marcadores proteína C reactiva (PCR) y su variación relativa (ΔPCR). .... 20

VI
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Índice de anexos
Anexo 1: Cuestionario personal para los corredores ............................................................................. 34

VII
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Glosario de acrónimos

BAP Potencial antioxidante biológico


BCAA Branched-Chain Amino Acids
CG Grupos carbonilo
CK Creatina quinasa
CSP Castellón-Peñagolosa
GPx Glutatión peroxidasa
GR Glutatión reductasa
GSH Glutatión
GSSG Glutatión disulfuro
LDH Lactato deshidrogenasa
MDA Malondialdehído
NADPH Nicotinamida
PCR Proteína C reactiva
ROS Especies reactivas de oxígeno
RL Radical libre

VIII
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Resumen

Introducción: El ejercicio de ultrarresistencia conlleva un gran impacto físico, incluyendo


daño muscular, respuesta inflamatoria y producción de radicales libres. La suplementación con
antioxidantes y en concreto con la remolacha, que contiene betalaína, ácido ascórbico y ácidos
fenólicos y flavonoides, puede mejorar la recuperación tras el ejercicio.

Objetivo: Estudiar la correlación entre la ingesta o no de suplementos con remolacha con los
datos recogidos de estrés oxidativo, daño muscular y respuesta inflamatoria durante la prueba
de ultrarresistencia IX Penyagolosa Trails CSP de 2019 para verificar que tomar remolacha
influye en la recuperación tras una carrera de este tipo.

Metodología: Se realiza un estudio observacional y longitudinal con una muestra de 47


personas, de las cuales 32 finalizaron la carrera IX Penyagolosa Trails CSP.

Resultados: Entre los que sí tomaron remolacha (n=6) y los que no, hubo diferencias
significativas (p<0,05) en el estrés oxidativo, concretamente en la enzima glutatión peroxidasa
(GPx) a las 24 y 48 horas. En las variables de daño muscular hubo diferencias en meta en
creatina quinasa (CK) y su variación relativa (Δ CK) y en lactato deshidrogenasa (LDH) y su
variación relativa (Δ LDH), también en meta.

Discusión: Varios artículos coinciden con los resultados de daño muscular obtenidos en este
estudio. En cambio, existe poca literatura que estudie los efectos sobre el estrés oxidativo. En
futuros estudios sería conveniente ampliar la muestra.

Conclusión: La ingesta de suplementos con remolacha influye positivamente en los marcadores


de estrés oxidativo y de daño muscular tras una carrera de ultrarresistencia.

Palabras clave: suplementación con remolacha, estrés oxidativo, daño muscular, respuesta
inflamatoria, recuperación.

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Eva Vilar Yebra
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Abstract

Introduction: Ultra-endurance exercise carries a high physical impact, including muscle


damage, inflammatory response, and free radical production. Supplementation with
antioxidants and specifically with beetroot, which contains betalain, ascorbic acid, phenolic
acids and flavonoids, may improve recovery after exercise.

Objective: To study the correlation between the intake or not of beetroot supplements with the
data collected on oxidative stress, muscle damage and inflammatory response during the
2019 IX Penyagolosa Trails CSP ultra-endurance race to verify that taking beet influences
recovery after a race of this type.

Methodology: An observational and longitudinal study was carried out with a sample of 47
people, 32 of whom finished the IX Penyagolosa Trails race.

Results: Between those who did eat beetroot (n=6) and those who did not, there were significant
differences (p<0.05) in oxidative stress, specifically in the enzyme glutathione peroxidase
(GPx) at 24 and 48 hours. In the muscle damage variables, there were differences in goal in
creatine kinase (CK) and its relative variation (Δ CK) and in lactate dehydrogenase (LDH) and
its relative variation (Δ LDH), also in goal.

Discussion: Several articles agree with the results of muscle damage obtained in this study. In
contrast, there is little literature studying the effects on oxidative stress. It would be necessary
to expand the sample in future studies.

Conclusion: Beetroot supplementation positively influences markers of oxidative stress and


muscle damage after ultra-endurance running.

Key words: beetroot supplementation, oxidative stress, muscle damage, inflammatory


response, recovery.

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Eva Vilar Yebra
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

1. Introducción

1.1 Estado actual

Las carreras de montaña y el ultrarunning son prácticas deportivas que en España han sido
motivo de estudio y análisis durante los últimos años. Dichos estudios justifican su interés por
el llamado boom del trail running, concepto que surgió en el año 2002 que actualmente sigue
utilizándose. Este concepto hace referencia al incremento de participantes y de organización de
eventos deportivos de dicha práctica. En relación a las carreras de ultrarunning según su
tipología destaca que la mayoría sean carreras a pie, actividad más vinculada a la competición
y el deporte federado; mientras que una menor parte son marchas o rutas, más vinculadas a la
actividad física y la salud.1

1.2 Importancia de la investigación

El aumento de popularidad y de interés también se ha podido observar en el ámbito científico,


tal y como lo demuestra el incremento del número de estudios y conferencias sobre ultrarruning
en todo el mundo2–8. Mientras que la actividad física moderada tiene efectos beneficiosos para
la salud, el ejercicio vigoroso de ultrarresistencia que conllevan estas carreras extremadamente
largas constituye un modelo destacado para el estudio por las consecuencias agudas que
provocan en la fisiología del cuerpo humano8.

1.3 Fisiología y deporte

Está bien documentado que los efectos de correr una ultramaratón son múltiples y diversos y
entre ellos se encuentran el daño celular a nivel muscular, así como la alteración de la respuesta
inflamatoria y de las defensas antioxidantes8,9, que son los objetos de nuestro estudio.

La distancia de la carrera también está directamente relacionada con los marcadores de daño
muscular y la respuesta inflamatoria9,10 . Estos marcadores son, por un lado, la creatina
quinasa (CK) y la lactato deshidrogenasa (LDH), que se liberan en el torrente sanguíneo por la
ruptura de las células musculares11 y, por otro lado, la proteína C reactiva (PCR), que se libera
ante un proceso de inflamación o de infección10. Los tres marcadores están relacionados entre
sí ya que el ejercicio de ultrarresistencia induce a una situación de estrés que provoca daño
muscular acompañado de la presencia de una respuesta inflamatoria sistémica para proteger al
cuerpo del atleta de un daño mayor, reparando los tejidos10,12.

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Eva Vilar Yebra
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

A su vez, la inflamación puede conducir a una mayor producción de prooxidantes por parte de
neutrófilos y macrófagos, lo que provoca estrés oxidativo12. Este se define como el
desequilibrio entre los oxidantes y antioxidantes del cuerpo a favor de los primeros y ha sido
estudiado en asociación con deportes de ultrarresistencia, demostrando el aumento de especies
reactivas de oxígeno (ROS) y de radicales libres cuando se realiza dicha actividad. Las ROS
surgen cuando no hay suficiente oxígeno para completar una reducción, dando como resultado
la creación de radicales libres (RL), que son especies químicas dañinas por su alta reactividad.
Durante el ejercicio, el aumento del consumo de oxígeno conduce a un aumento en la
producción de ROS, que contribuye a su vez al daño muscular anteriormente mencionado10,13.

Para el estudio del estrés oxidativo se utilizan marcadores de daño oxidativo de macromoléculas
y enzimas antioxidantes. Los marcadores de daño oxidativo de macromoléculas son el
malondialdehído (MDA), que es un producto de peroxidación de lípidos14 y los grupos
carbonilo (CG), que son un marcador del daño oxidativo de las proteínas15. Las enzimas
antioxidantes son la glutatión reductasa (GR) y glutatión peroxidasa (GPx), que pertenecen al
mecanismo de defensa contra la oxidación16.

No solo las carreras de ultramaratón son intensas por la distancia que conllevan; en el caso de
las carreras de montaña con grandes desniveles acumulados, se añaden dos características que
también influyen en el estrés oxidativo y muscular: el efecto del ejercicio en altura17 y el daño
miofibrilar provocado por correr cuesta abajo, que se caracteriza por una disminución de la
fuerza muscular, un aumento de la actividad creatina quinasa (CK) sérica y una respuesta
inflamatoria2.

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Eva Vilar Yebra
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

1.4 Antioxidantes

Los antioxidantes son compuestos que ayudan a proteger a los órganos celulares del daño
oxidativo ocasionado por los radicales libres al convertir estos últimos en no radicales. El
aumento de estas moléculas antioxidantes plasmáticas apoya la hipótesis de un mecanismo
compensatorio para contrarrestar el estrés oxidativo por aumento de las especies reactivas de
oxígeno (ROS). Las enzimas antioxidantes, junto con los antioxidantes no enzimáticos,
conforman el potencial antioxidante biológico (BAP). Cuando hay un equilibrio entre la
producción de ROS y el BAP, es posible la recuperación después del ejercicio12,18. En cambio,
cuando el sistema de antioxidantes endógeno no es capaz de neutralizar el aumento de ROS, se
produce daño celular oxidativo12.

Además de los sistemas de defensa endógenos, la ingesta de antioxidantes en la dieta es crucial


para evitar los efectos adversos del estrés oxidativo19. Mientras que los antioxidantes endógenos
son la primera línea de defensa contra los radicales libres, los antioxidantes exógenos aportados
en la dieta actúan como una segunda línea de defensa y ofrecen mayor protección20. La ingesta
de antioxidantes en la dieta puede proporcionar un equilibrio entre las especies reactivas de
oxígeno (ROS) y los antioxidantes en los atletas de resistencia, mejorando positivamente tanto
el rendimiento del ejercicio, como la recuperación posterior8. Además, algunas investigaciones
sugieren que la suplementación con antioxidantes también puede influir positivamente en la
respuesta inflamatoria y en el daño muscular, y con ello en la fatiga muscular21–23. Por esta
razón, gran parte de la investigación en los últimos años se ha centrado en el efecto de los
suplementos antioxidantes8.

Los principales antioxidantes exógenos que desempeñan un papel en la protección contra los
radicales libres incluyen la remolacha, las vitaminas como la E y la C, aminoácidos como los
BCAA (leucina, isoleucina y valina), la carnitina, la glutamina y la taurina y minerales como el
selenio y el zinc20,24–27.

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Eva Vilar Yebra
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

1.4.1 Remolacha

Inicialmente en este estudio se propuso investigar los suplementos por agrupaciones de


vitaminas, minerales, aminoácidos y otros, pero después de realizar los análisis exploratorios,
se decidió estudiar específicamente la remolacha por los resultados obtenidos. Este alimento,
concretamente la remolacha roja, contiene niveles elevados de nitrato y fitoquímicos, incluidos
la betalaína, ácido ascórbico, carotenoides, ácidos fenólicos y flavonoides28.

1.5 Tema de estudio y justificación

En el presente estudio se ha investigado el impacto del ejercicio de resistencia de ultramaratón


analizando marcadores de estrés oxidativo plasmático, de daño muscular y de inflamación
sistémica. Se han contrastado estos marcadores con la suplementación o no de antioxidantes
por parte de los participantes en la IX Penyagolosa Trails CSP en 201929. Dicha carrera es una
ultratrail de 107,4 km con un desnivel de subida de 5600m y de bajada de 4400m. La salida se
realiza a 40m de altitud y la meta se encuentra a 1280m sobre el nivel del mar. Para hacer este
estudio se han utilizado los datos obtenidos dentro del marco del proyecto “PTS Women”
vinculado al grupo de investigación Cuidados y Salud.

El motivo por el que se ha seleccionado la suplementación en el deporte de resistencia es que


es un tema de creciente interés, tanto para los deportistas profesionales como para los cada vez
más numerosos aficionados y los entrenadores. Además, la población es cada vez más
consciente de la importancia de la nutrición para la preparación y la recuperación de las carreras.
Por otro lado, existe también un interés personal ya que soy deportista de élite; una nadadora
de larga distancia que se ha interesado siempre por la suplementación.

2. Metodología

2.1 Objetivos

2.1.1 Principal

• Estudiar la correlación entre la ingesta o no de suplementos con remolacha con los datos
recogidos de estrés oxidativo, daño muscular y respuesta inflamatoria durante la prueba
de ultrarresistencia IX Penyagolosa Trails CSP para verificar la hipótesis planteada.

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Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

2.1.2 Secundarios

• Analizar cuatro marcadores de estrés oxidativo en plasma (MDA, GPx, GR, CG) de
corredores aficionados de larga distancia al empezar la carrera, al terminarla y 24 y
48 horas después.
• Analizar dos marcadores de daño muscular (LDH, CK) al empezar la carrera, al
terminarla y 24 y 48 horas después.
• Analizar un marcador de respuesta inflamatoria (PCR) al empezar la carrera, al
terminarla y 24 y 48 horas después.

2.2 Hipótesis

La ingesta de suplementos que contienen remolacha aumenta la capacidad antioxidante exógena


del cuerpo. De esta forma se consigue una mayor protección frente al estrés oxidativo y una
mejoría en la respuesta inflamatoria y en la recuperación del daño muscular tras una carrera de
ultrarresistencia.

2.3 Pregunta PIO

Para definir la hipótesis se realizó una pregunta con estructura PIO30: Población (P),
Intervención (I) y Resultados (O). El estudio planteado pretende responder a la pregunta:
“¿cómo influye la ingesta de suplementos con remolacha en el estrés oxidativo, daño muscular,
y respuesta inflamatoria?”. Los componentes de esta pregunta se observan en la Tabla 1.

Tabla 1. Componentes de la pregunta de investigación en base a la estructura PIO


Corredores voluntarios que participan en la
P
carrera IX Penyagolosa Trails CSP®
(población/paciente)
[Castelló-Penyagolosa]
I
Ingesta de suplementos con remolacha
(intervención)
Protección frente al estrés oxidativo
O Mejoría en la recuperación del daño muscular
(resultado)
Mejoría en la respuesta inflamatoria

Fuente: elaboración propia.

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Eva Vilar Yebra
Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

2.4 Diseño

Dadas las características de este trabajo y a partir de los objetivos planteados, esta investigación
consiste en un estudio observacional y longitudinal. Se llevó a cabo mediante encuestas y toma
de muestras sanguíneas recogidas en el estudio “Proyecto Penyagolosa Trail Saludable”31 a 32
corredores durante la carrera IX Penyagolosa Trails CSP® [Castelló-Penyagolosa] y los dos días
posteriores.

El estudio fue organizado por la Universitat Jaume I, concretamente por la Facultad de Ciencias
de la Salud (grupo de investigación Cuidados y Salud) y por el Servei d’Esports con la
financiación del grupo Hospitales Vithas y la organización de Penyagolosa Trails y Cátedra
Endavant Villareal CF de l’Esport.

2.5 Participantes

La selección de participantes se basó en los criterios de inclusión y exclusión 31 expuestos a


continuación.

2.5.1 Criterios de inclusión

• Estar inscrito en la carrera.


• Solicitar voluntariamente querer participar en el estudio y firmar la autorización, junto
con el consentimiento informado.
• Demostrar haber acabado más de una carrera con una distancia superior a 60km.
• Finalizar la carrera.

2.5.2 Criterios de exclusión

• Ser menor de 18 años o mayor de 65 años.


• Tener antecedentes médicos que contraindiquen la participación en una carrera de
ultrarresistencia.

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Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

2.5.3 Tipo y técnica de muestreo

Se reclutaron 47 atletas recreativos de ultrarresistencia (29 hombres y 18 mujeres) en la carrera


IX Penyagolosa Trails CSP en 2019 y con los 32 que llegaron a meta se analizó la influencia
de la suplementación o no con remolacha. La organización seleccionó a los participantes en
base a los criterios de inclusión, así como por muestras representativas de edades, sexo y
tiempos de la prueba. A los mismos se les mandó toda la información relacionada con el estudio
vía email.

2.6 Variables

Como variables independientes/secundarias se consideró la suplementación o no con


remolacha.

Como variables dependientes/principales se definieron los valores de GR (UI/ml),


GPx (μmol/L × min), CG (nmol/mL), MDA (μM), LDH (UI/l), CK (UI/l), PCR (mg/dl) antes
de la carrera, en la meta y a las 24 y 48 h. Además, se definieron las puntuaciones relativas al
nivel individual previo a la carrera (Δ). Estas variables se definieron en tres puntos: la meta, las
24 h y las 48 h. Para una variable X en un punto P, se define el valor de Δ X en P como:

Valor X en P − Valor X en salida


ΔX=
Valor X en salida

2.7 Procedimiento de recogida de datos

En este estudio se midieron características de los corredores a partir de encuestas y analíticas


de sangre.

Por un lado, se utilizó un cuestionario para recoger información demográfica, el historial de


entrenamiento y competición y el consumo de suplementos antioxidantes en la preparación de
la carrera y en el desarrollo de la misma (Anexo 1). Este cuestionario fue repartido por el equipo
multidisciplinar que conformaba la organización a los corredores, que contestaron antes de la
salida.

Por otro lado, los investigadores del proyecto, junto con la ayuda de estudiantes de enfermería
voluntarios recogieron muestras de sangre en cuatro tubos: coagulación, hemograma y dos de

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Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

bioquímica, uno de ellos destinado a la determinación del metabolismo oxidativo. Las


extracciones se realizaron mediante venopunción en vena antecubital en el momento de la
recogida del dorsal, que fue de 6 a 8 h antes de la salida, después de cruzar la línea de llegada
y 24 y 48 h después de la carrera. Se usaron tubos BD Vacutainer PST II. Las muestras se
centrifugaron a 3500 rpm durante diez minutos y se mantuvieron a 4º C durante el transporte al
Hospital Vithas Rey Don Jaime (Castellón), donde se procesaron utilizando la plataforma
modular Roche/Hitachi analizador de química clínica Cobas c311 (Roche Diagnostics,
Penzberg, Alemania)32,33. Al tubo de heparina de litio destinado al estudio del metabolismo
oxidativo, en cambio, tras la centrifugación, se le separó el suero en alícuotas en eppendorf de
0,5ml y se ultracongeló a -80º C.

2.8 Análisis de los datos

2.8.1 Análisis de las muestras sanguíneas

Para el estudio del estrés oxidativo se utilizaron los marcadores de daño oxidativo de
macromoléculas malondialdehído (MDA) y grupos carbonilo (CG) y las enzimas antioxidantes
glutatión reductasa (GR) y glutatión peroxidasa (GPx).

En cuanto al análisis del daño muscular se escogieron dos enzimas que se liberan en el torrente
sanguíneo por la ruptura de las células musculares tras el ejercicio: creatina quinasa (CK) y
lactato deshidrogenasa (LDH)34.

Por último, la medición de la respuesta inflamatoria se realizó mediante la


proteína C reactiva (PCR), que se libera ante un proceso de inflamación10.

2.8.1.1 Estrés oxidativo

El análisis de las moléculas de estrés oxidativo se realizó de la siguiente manera:

La actividad GPx, que cataliza la oxidación por H2O2 de glutatión (GSH) a su disulfuro (GSSG),
se analizó espectrofotométricamente siguiendo la publicación por Lawrence et al.35 frente a
peróxido de hidrógeno. Se observó con una longitud de onda de 340nm la oxidación del fosfato
de dinucleótido de nicotinamida (NADPH) y con esta molécula se midió la actividad
enzimática.

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La actividad GR se determinó también espectrofotométricamente utilizando el método


propuesto por Smith36 .

La concentración de MDA se analizó por cromatografía líquida, de acuerdo con una


modificación del método de Richard y colaboradores37,38 .

La determinación de CG se analizó utilizando el método informado por Levine et al.39 con


algunas modificaciones introducidas por Tiana et al.40. El contenido de carbonilo se calculó a
partir del pico de absorción (373nm) y se expresó como nmol/mg de proteína.

Los resultados bioquímicos obtenidos inmediatamente después de la carrera se ajustaron


empleando el método de Dill y Costill41.

2.8.1.2 Daño muscular y respuesta inflamatoria

Los parámetros de daño muscular y respuesta inflamatoria (CK, LDH y PCR) fueron analizados
mediante análisis bioquímico convencional por parte del Hospital Vithas Rey Don Jaime.

2.8.2 Análisis de los datos de la encuesta

Se realizó una búsqueda de los ingredientes de los suplementos que indicaron los atletas en las
encuestas. Entre ellos solo había dos marcas que contenían remolacha: la bebida isotónica
Longovit 360 y el recuperador Ettix.

Se dividieron los participantes en dos grupos: los que habían consumido suplementos con
remolacha y los que no. No se tuvo en cuenta el momento de la ingesta debido a que en ese
caso, los grupos resultantes eran muy reducidos.

2.9 Análisis estadístico

2.9.1 Paquete de análisis utilizado

Los análisis estadísticos se llevaron a cabo utilizando el software “Statistical Package for the
Social Sciences” (IBM SPSS Statistics para Windows, versión 27.0.1, IBM Corp.,
Armonk, NY).

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2.9.2 Análisis descriptivo

Se realizó un análisis descriptivo univariado donde se utilizaron las dos pruebas que permiten
describir las propiedades de las distribuciones: Frecuencias y Descriptivos.

En la variable categórica, que corresponde a la ingesta de remolacha, se estudiaron las


frecuencias relativas. Las variables continuas, que corresponden a los marcadores sanguíneos
de estrés oxidativo, de respuesta inflamatoria y de daño muscular, se estudiaron a través de la
media (con su error típico) y la desviación estándar.

Posteriormente se realizó un análisis bivariado que estableció diferencias entre grupos de sexo
(hombres y mujeres), de edad (menos de 39 años y más de 40 años) y de tiempo (menos de
1282 minutos y más de 1283 minutos) para poder clasificar los sujetos bajo estos criterios.

Los intervalos de confianza de la media para el estudio de la correlación entre la ingesta de


remolacha y los valores de estrés oxidativo, daño muscular y respuesta inflamatoria se
obtuvieron mediante la prueba t-Student.

La distribución normal de las variables se verificó mediante la prueba de Shapiro-Wilk


(p > 0,05)42.

2.9.3 Contraste de hipótesis

Las variables de estrés oxidativo, de daño muscular y de respuesta inflamatoria se compararon


mediante el método U Mann Whitney y t-Student en cada uno de los puntos donde se tomaron
las medidas (pre carrera, meta, 24 y 48 horas después de la carrera) al existir dos categorías: sí
suplementación con remolacha y no suplementación con remolacha.

En todos los casos se exigió una significancia estadística del 5% (p < 0,05).

2.10 Consideraciones éticas

La investigación se llevó a cabo de acuerdo con la Declaración de Helsinki y se obtuvo la


aprobación del proyecto por parte del Comité de Ética de Investigación de la Universidad
Jaume I de Castellón (Número de Expediente CD/007/2019). Este estudio está inscrito en la
base de datos ClinicalTrials.gov, con el número de código NCT0399025943 .

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Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

3. Resultados

3.1 Características de los participantes

Treinta y dos atletas de los participantes en este estudio llegaron a meta, de ellos trece eran
mujeres y diecinueve, hombres. El tiempo más rápido fue de 14h 15min, el más lento de 27h y
el tiempo medio correspondió a 21h 21min. La edad media de los participantes fue de
aproximadamente 41, con una edad mínima de 31 y una máxima de 53. Los sujetos eran
corredores amateurs y en las características del entrenamiento no hubo diferencias significativas
entre mujeres y hombres. Por otro lado, los hombres sí que mostraron valores previos a la
carrera significativamente más altos en peso, IMC y masa muscular, en comparación con las
mujeres. En relación a la suplementación con remolacha, un total de 6 participantes consumió
dicho alimento antes, durante o después de la carrera. Los datos descritos se representan en la
Tabla 2:

Tabla 2. Características de los participantes.


Total (n=32) Mujeres (n=13) Hombres (n=19)
Tiempo medio 21h 38min 21h 39min 21h 36min
Tiempo máximo 27h 26h 48min 27h
Tiempo mínimo 14h 15min 17h 27min 14h 15min
Edad media 40,94 42,15 40,11
Edad máxima 53 53 52
Edad mínima 31 31 33
Número de años corriendo 8,0 8,0 8,1
Horas de entrenamiento semanales 9,6 10 9
Peso precarrera (kg) 66 55,7 73,2
IMC 22,9 21,7 23,8
% de masa muscular antes de la carrera 84,1 79,1 87,6
Consumieron remolacha 6 3 3

Fuente: elaboración propia.

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3.2 Relación entre el consumo de remolacha y los marcadores sanguíneos

3.2.1 Marcadores de estrés oxidativo

Entre los biomarcadores de estrés oxidativo, únicamente hubo diferencias significativas entre
los que tomaron o no remolacha, en la actividad de la GPx. Esta enzima mostró niveles más
elevados a las 24 y 48 horas, aportando así una mayor protección antioxidante. Dichos
resultados pueden observarse en la Figura 1 y en la Tabla 3. La diferencia en la actividad de los
demás marcadores de estrés oxidativo no fue significativa con la suplementación con
remolacha. La Figura 2 y la Tabla 4 muestran la actividad de los marcadores de GR, la Figura 3
y la Tabla 5 muestran la actividad de MDA y por último, la Figura 4 y la Tabla 6, la de CG.

Figura 1. Actividad del marcador de estrés oxidativo glutatión peroxidasa (GPx).

* *

* p<0,05
Fuente: elaboración propia.

Tabla 3. Valores de los marcadores glutatión peroxidasa (GPx) y su variación relativa (Δ GPx).

GPx Δ GPx

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)

Pre carrera 88,46 ± 14,63 86,51 ± 8,35 0,556 —— —— —

Meta 87,41 ± 8,82 99,55 ± 6,25 0,285 0,08 ± 0,15 0,26 ± 0,09 0,621

Post 24h 125,30 ± 17,48 91,79 ± 4,97 0,016* 0,54 ± 0,30 0,22 ± 0,09 0,588

Post 48h 109,01 ± 11,85 93,17 ± 1,59 0,043 0,28 ± 0,08 0,23 ± 0,07 0,760

* t-Student
Fuente: elaboración propia.

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Figura 2. Actividad de los marcadores glutatión reductasa (GR) y su variación relativa (Δ GR).

Fuente: elaboración propia.

Tabla 4. Valores de los marcadores glutatión reductasa (GR) y su variación relativa (Δ GR).

GR Δ GR

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)

Pre carrera 2,78 ± 0,36 2,52 ± 0,14 0,464 —— —— —

Meta 3,25 ± 0,34 3,31 ± 0,21 0,906 0,27 ± 0,22 0,42 ± 0,13 0,832

Post 24h 6,57 ± 0,61 7,48 ± 0,54 0,331 1,63 ± 0,53 2,13 ± 0,24 0,285

Post 48h 2,99 ± 0,24 2,48 ± 0,12 0,097 0,21 ± 0,24 0,04 ± 0,06 0,760

Fuente: elaboración propia.

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Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Figura 3. Actividad de los marcadores malondialdehído (MDA) y su variación relativa (Δ MDA).

Fuente: elaboración propia.

Tabla 5. Valores de los marcadores malondialdehído (MDA) y su variación relativa (Δ MDA).

MDA Δ MDA

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)

Pre carrera 1,16 ± 0,56 0,65 ± 0,11 0,436 —— —— —

Meta 1,04 ± 0,22 1,35 ± 0,15 0,588 1,30 ± 0,76 2,59 ± 0,76 0,436

Post 24h 0,80 ± 0,14 0,85 ± 0,10 0,981 0,49 ± 0,50 1,63 ± 0,68 0,436

Post 48h 1,24 ± 0,18 1,39 ± 0,12 0,869 1,67 ± 0,82 2,43 ± 0,45 0,381

Fuente: elaboración propia.

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Figura 4. Actividad de los marcadores grupos carbonilo (CG) y su variación relativa (Δ CG).

Fuente: elaboración propia.

Tabla 6. Valores de los marcadores de grupos carbonilo (CG) y su variación relativa (Δ CG).

CG Δ CG

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)
Pre carrera 1,26 ± 0,09 1,44 ± 0,10 0,448 —— —— —

Meta 2,72 ± 1,10 2,06 ± 0,21 0,815 1,17 ± 0,93 0,59 ± 0,23 0,815

Post 24h 1,69 ± 0,26 1,98 ± 0,19 0,600 0,34 ± 0,18 0,60 ± 0,21 0,641

Post 48h 1,75 ± 0,42 2,18 ± 0,33 0,758 0,37 ± 0,32 0,63 ± 0,25 1,000

Fuente: elaboración propia.

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3.2.2 Marcadores de daño muscular

Respecto a los marcadores de daño muscular, se observa en la Figura 5, junto a la Tabla 7, que
los niveles de CK y Δ CK fueron más altos en meta en las personas que no habían consumido
remolacha en comparación con las que sí lo habían hecho. Lo mismo ocurre en LDH y Δ LDH:
tal y como muestra la Figura 6 y la Tabla 8, los valores de estas variables fueron menores en
meta en los sujetos que tomaron remolacha.

Figura 5. Actividad de los marcadores creatina quinasa (CK) y su variación relativa (Δ CK).

*
*

* p<0,05
Fuente: elaboración propia.

Tabla 7. Valores de los marcadores de creatina quinasa (CK) y su variación relativa (Δ CK).

CK Δ CK

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)
Pre carrera 159,50 ± 33,52 213,85 ± 47,35 0,944 —— —— —

Meta 2071,72 ± 406,71 5616,01 ± 816,15 0,012 14,53 ± 3,82 36,56 ± 6,29 0,006*

Post 24h 1758,50 ± 663,66 2901,62 ± 503,42 0,264 8,97 ± 2,05 16,16 ± 2,46 0,285

Post 48h 1076,17 ± 588,48 1521,58 ± 338,33 0,356 4,31 ± 1,59 7,34 ± 1,24 0,264

* t-Student
Fuente: elaboración propia.

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Figura 6. Actividad de los marcadores lactato deshidrogenasa (LDH) y su variación relativa (Δ LDH).

*
*

* p<0,05
Fuente: elaboración propia.

Tabla 8. Valores de los marcadores de lactato deshidrogenasa (LDH) y su variación relativa (Δ LDH).

LDH Δ LDH

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)

Pre carrera 185,17 ± 15,20 190,42 ± 5,97 0,356 —— —— —


390,56 ±
Meta 299,44 ± 20,72 0,008* 0,64 ± 0,13 1,05 ± 0,10 0,043
22,44
332,50 ±
Post 24h 277,00 ± 32,39 0,356 0,49 ± 0,11 0,73 ± 0,09 0,158
23,23
318,92 ±
Post 48h 282,83 ± 43,28 0,494 0,50 ± 0,13 0,65 ± 0,10 0,621
25,61

* t-Student
Fuente: elaboración propia.

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3.2.3 Variable de respuesta inflamatoria

No existieron diferencias en la PCR entre los que sí que tomaron remolacha y los que no lo
hicieron en ninguno de los momentos. Los resultados se ven a continuación, en la Figura 7 y la
Tabla 9.

Figura 7. Actividad de los marcadores proteína C reactiva (PCR) y su variación relativa (ΔPCR).

Fuente: elaboración propia.

Tabla 9. Valores de los marcadores de proteína C reactiva (PCR) y su variación relativa (Δ PCR).

PCR Δ PCR

Remolacha No remolacha Remolacha No remolacha


p p
(n=6) (n=26) (n=6) (n=26)
Pre carrera 0,11 ± 0,05 0,18 ± 0,09 0,436 —— —— —
1,87 ± 0,47 2,04 ± 0,25 0,906
Meta 29,64 ± 6,21 28,58 ± 3,95 0,655
4,50 ± 1,06 3,63 ± 0,49 0,331
Post 24h 111,86 ± 44,34 55,51 ± 9,30 0,207
2,17 ± 0,45 1,85 ± 0,25 0,494
Post 48h 53,21 ± 19,97 27,52 ± 4,63 0,244

Fuente: elaboración propia.

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4. Discusión

El presente estudio ha encontrado diferencias significativas en las variables de estrés oxidativo


y de daño muscular. La glutatión peroxidasa (GPx), correspondiente al estrés oxidativo, ha
presentado diferencias a las 24 y 48 horas, mientras que la creatina quinasa (CK) y lactato
deshidrogenasa (LDH) han presentado diferencias en meta y en su variación relativa, también
en meta. Por su parte, la respuesta inflamatoria medida con la proteína C reactiva (PCR) no ha
mostrado ninguna diferencia estadísticamente significativa.

La remolacha roja es un alimento funcional que contiene niveles elevados de nitrato y


fitoquímicos, incluidos la betalaína, ácido ascórbico, carotenoides, ácidos fenólicos y
flavonoides. El nitrato contribuye a un aumento de la biodisponibilidad del óxido nítrico,
mejorando posteriormente la función vascular, la homeostasis de la glucosa y la contractibilidad
muscular, incrementando así el rendimiento del ejercicio28. Además, el nitrato inhibe la
formación de radicales libres y la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS)44. Los
polifenoles también contribuyen a estas dos acciones28. Por otro lado, la betalaína, que
corresponde a la molécula antioxidante más potente de la remolacha, atenúa la eliminación de
ROS y regula las enzimas antioxidantes endógenas28. Por tanto, los resultados obtenidos en el
estudio que muestran que la remolacha sí que influye en los valores de estrés oxidativo,
concretamente en GPx, pueden deberse a la betalaína, al nitrato y a los polifenoles. El hecho de
que la remolacha contribuya a reducir la producción de ROS acelera también la recuperación
de daño muscular28. La declaración del consenso del Comité Olímpico Internacional (COI)
sobre suplementos dietéticos y atletas de alto rendimiento45 enumera diversos suplementos,
entre los que se encuentra la remolacha, para mejorar la recuperación muscular y el daño
muscular. Está bien respaldado que la remolacha actúa mejorando la respuesta muscular y
nuestro estudio coincide con dicho hallazgo, ya que muestra diferencias significativas tanto en
LDH como en CK. Si bien la descomposición de las fibras musculares altera la respuesta
inflamatoria para una mayor protección de los tejidos, mejorando el daño muscular, la respuesta
inflamatoria debería mejorar también.

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Influencia de la suplementación con remolacha en la recuperación de carreras de ultrarresistencia

Existe poca literatura actual que estudie la influencia de la remolacha en ejercicios de


ultrarresistencia. Es difícil encontrar investigaciones que hayan estudiado un deporte de unas
características tan concretas como son las carreras de montaña. En un estudio doble ciego
controlado con placebo realizado por Tom Clifford et al.46 se analizó la influencia de la
suplementación con remolacha en 20 participantes que asistieron 6 veces al laboratorio durante
un periodo de 2 semanas. Las pruebas que realizaron no fueron carreras de ultrarresistencia,
sino de sprint. En dicha investigación no se encontraron diferencias significativas en el estrés
oxidativo entre los que recibieron remolacha o placebo. Otro estudio con diseño cruzado
aleatorizado doble ciego escrito por Mohamed Amine Bouzid, et al.47 analizó si había
diferencias significativas entre los que consumieron remolacha y los que no en una muestra de
13 jugadores semiprofesionales tras realizar un partido de fútbol. Se hizo un seguimiento
durante 7 días, donde los participantes ingerían 150ml de remolacha o placebo. Tampoco
evidenció diferencias significativas en los niveles de estrés oxidativo. Algunos artículos que
pueden ajustarse un poco más a la presente investigación son un estudio realizado por
Eduardo F. Menezes, et al.48 y otro realizado con Colin R. Carriker, et al.49, ya que ambos
buscaban hallazgos en ejercicios aeróbicos. El estudio realizado por
Eduardo F. Menezes, et al.48 evaluó los efectos de la suplementación con nitrato de sodio sobre
los marcadores de estrés oxidativo y las respuestas de la presión arterial después de realizar
ejercicio aeróbico en hombres físicamente activos, pero no deportistas. La muestra fue de 14
sujetos, que se sometieron a 4 pruebas de ejercicio en un intervalo de 5 días donde se les
suplementó a algunos con nitrato y a otros con placebo. Se concluyó que el suplemento con
nitrato redujo la presión arterial sistólica y actuó indirectamente aumentando la función
antioxidante. Colin R. Carriker, et al.49 también realizaron un estudio con nueve deportistas
entrenados que visitaron el laboratorio en 3 ocasiones separadas por semanas. Se consumió una
dosis placebo y otra de bebida rica en nitrato 2 horas y media antes de realizar las actividades,
que consistían en pruebas aeróbicas de ciclismo y se concluyó que suplementarse con nitrato
no produjo cambios beneficiosos en el estrés oxidativo.

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Varios estudios han demostrado una alta eficacia en la recuperación del daño muscular tras la
suplementación con remolacha, coincidiendo con nuestros resultados. La revisión bibliográfica
“Dietary Supplementation for Attenuating Exercise-Induced Muscle Damage and Delayed-
Onset Muscle Soreness in Humans”28 resumió las estrategias de suplementación usadas para
prevenir o atenuar el daño muscular y comparó la efectividad del nitrato de sodio frente al jugo
de remolacha, resultando esta última más efectiva. En otro estudio realizado por Justin S. Van
Hoorebeke, et al.50 se estudió a 13 corredores masculinos competitivos que se sometieron a dos
ensayos aleatorios cruzados, doble ciego. Concluyeron que la remolacha fue responsable de una
mejoría en el rendimiento de una carrera de 5km y una disminución de un 14% de concentración
de LDH en sangre durante el ejercicio. En cambio, la investigación realizada por Mohamed
Amine Bouzid, et al.47 mencionada anteriormente tampoco mostró diferencias significativas en
los marcadores de daño muscular comparando a un grupo placebo y otro que se suplementó con
remolacha antes de un partido de fútbol, con una muestra de 13 jugadores. En este mismo
estudio también probaron que no había diferencias en la respuesta inflamatoria. Estos últimos
resultados relacionados con la respuesta inflamatoria, además de coincidir con los nuestros,
coinciden con la revisión sistemática realizada por Louise Jones, et al.44 que concluyó que no
había diferencias significativas y que incluso los nitratos de la remolacha pudieron aumentar
esta respuesta inflamatoria, aunque advierten que estos resultados no son del todo seguros
porque el número de artículos era reducido.

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4.1 Limitaciones de este estudio

El presente estudio cuenta con la dificultad de reunir a suficientes atletas que se enfrenten a una
carrera de ultratrail y a suficientes recursos, tanto humanos como financieros, que permitan
realizar la recogida de datos. La inscripción inicial al proyecto contaba con 47 corredores, pero
la muestra se redujo a 32, que corresponde a la cifra de aquellos atletas que llegaron a meta. De
esos 32, solo se habían suplementado con remolacha 6 participantes. Realizando el estudio se
planteó la problemática de que la muestra disminuía demasiado si esta se dividía entre los que
consumieron la remolacha antes, durante o después de la carrera. Lo mismo ocurría si se hacia
distinción por grupos de edad, sexo y tiempo.

Además de mejorar la muestra, en investigaciones futuras sería conveniente especificar la


cantidad en gramos de cada suplemento que ingirieron los atletas.

4.2 Líneas futuras de investigación

Diversas investigaciones proponen también a la remolacha, más concretamente a la betalaína y


los fenoles, como analgésico, ya que esta reduce la actividad de la mieloperoxidasa, un
componente clave en los procesos inflamatorios28,51. Además, la influencia estudiada en el daño
muscular sugiere que la remolacha también podría influir en los síntomas de pérdida de función
muscular y dolor muscular de aparición tardía28, factores que influyen en el rendimiento
deportivo. Por tanto, la disminución de dolor muscular de aparición tardía y el efecto
antiinflamatorio también constituiría una línea futura de estudio en corredores de
ultrarresistencia.

5. Conclusiones

Tras realizar los análisis de los datos y contrastar los resultados de los mismos con literatura
actual, se concluye lo siguiente:

Se han cubierto los objetivos secundarios completamente, ya que se han realizado los análisis
correspondientes de marcadores de estrés oxidativo, de daño muscular y de respuesta
inflamatoria para así poder estudiar su relación con la ingesta de remolacha.

A partir de estos estudios se ha cubierto el objetivo principal y se ha llegado a la conclusión de


que se apoya parcialmente la hipótesis de partida. Las variables de estrés oxidativo y daño

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muscular sí que se ven influidas por la ingesta de suplementos con remolacha, en cambio, no
se ha encontrado ninguna diferencia significativa en la respuesta inflamatoria.

En lo que respecta al estrés oxidativo, la variable que presenta diferencias significativas es la


glutatión peroxidasa (GPx) a las 24 y 48 horas de la carrera. Según la literatura, esto podría
estar causado por el contenido de betalaína, nitrato y polifenoles de la remolacha.

La mayor influencia de los suplementos con remolacha se ha observado en los marcadores de


daño muscular, siendo los valores en meta de creatina quinasa (CK) y su variación relativa
(Δ CK), así como los valores en meta de lactato deshidrogenasa (LDH) y también su variación
relativa, significativamente diferentes. Esto coincide con la declaración del consenso del
Comité Olímpico Internacional (COI) sobre suplementos dietéticos y atletas de alto
rendimiento.

Como conclusión final de este trabajo y respondiendo a la pregunta de investigación, la ingesta


de suplementos con remolacha influye positivamente en los marcadores de estrés oxidativo y
de daño muscular tras una carrera de ultrarresistencia.

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Anexos

Anexo 1: Cuestionario personal para los corredores

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