Capítulo 3

Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla UPAEP
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Micología Médica Ilustrada, 6e
CAPÍTULO 34: Medios de cultivo
INTRODUCCIÓN
Puntos claves
El diagnóstico micológico casi siempre requiere del cultivo para identificar al agente etiológico, en el cual, los medios proveen nutrientes a los
hongos, como glucosa, nitrógeno orgánico, agua y peptona, necesarios para su desarrollo.
Existen medios rutinarios (o estándar) como el agar de Sabouraud, en los que la mayoría de los agentes fúngicos puede sembrarse. Sin
embargo, hay medios especializados para lograr la expresión de características morfológicas o fructificación que ayuden al reconocimiento de
estos organismos.
Los medios de cultivo pueden prepararse disolviendo los ingredientes por separado, calentarlos, filtrarlos, mezclarlos y esterilizarlos. Sin
embargo, en la actualidad, la gran mayoría se encuentra disponible en polvo, al que hay que añadir la cantidad correcta de agua, mezclar y
esterilizar.
CLÁSICOS
Pueden ser de tres tipos: naturales, semisintéticos y sintéticos. Los naturales están elaborados con leche, huevo, granos de cereales, levadura de
cerveza, frutas y otros compuestos. Los semisintéticos, como el Sabouraud, aportan una fuente de carbono y nitrógeno. Los sintéticos se usan en
investigación; no son de uso sistemático.
Los medios de cultivo clásicos se preparan con facilidad; en general, los ingredientes se disuelven por separado en agua y se mezclan en un matraz de
Erlenmeyer; se calientan 15 minutos a baño María y 5 a 6 minutos en el mechero; la solución se coloca en tubos y se procesa en autoclave a 110°C,
durante 15 a 20 minutos; al sacarlos, se colocan en posición inclinada para aumentar la superficie de cultivo. Cuando sea necesario el ajuste de pH, se
emplearán ácido clorhídrico (HCl) o hidróxido de sodio (NaOH). Se pueden utilizar cajas de Petri, que deben llenarse después de esterilizar el medio.
Si se emplea tapón de rosca, no se debe tapar herméticamente para facilitar la llegada de oxígeno; pueden usarse tapones de algodón.
Todas las manipulaciones han de realizarse en el área de esterilidad de la llama de un mechero de Bunsen o en campana de flujo laminar.
Medio glucosado de Sabouraud
Es el medio clásico de aislamiento; en ocasiones no es el idóneo, pero se emplea de manera sistemática para la identificación de los hongos.
Fórmula original:
Glucosa cruda 4 g
Peptona granulada (chapoteaut) 1 g
Agar agar 2 g
Agua destilada 100 ml
Fórmula modificada:
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Glucosa
CAPÍTULO20 g34: Medios de cultivo, Page 1 / 20
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Peptona 10 g
Agar agar 2 g Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla UPAEP
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Fórmula modificada:
Glucosa 20 g
Peptona 10 g
Agar agar 20 g
Agua destilada 1 000 ml
Medio de Sabouraud con antibióticos
Se añaden, disueltos en 10 ml de acetona; cloranfenicol 0.05 g, o cicloheximida (Actidione) 0.5 g, o ambos (existen en el comercio medios ya mezclados
para preparar Agar de Sabouraud y medios con antibióticos, como Mycoselagar, Micobioticagar, Dermasecagar), que evitan el crecimiento de
bacterias y hongos saprofitos.
Para cualquier aislamiento, se recomienda el medio simple de Sabouraud y el adicionado con antibióticos, pero debe evitarse el cloranfenicol, si existe
sospecha de actinomicetos; o la cicloheximida (Actidione), si se sospecha de enfermedad por agentes oportunistas.
OTROS MEDIOS DE CULTIVO

Medio líquido de Sabouraud
Es como el medio simple de Sabouraud, pero sin agar; puede emplearse para rehidratar cultivos desecados.
Fórmula:
Peptona 30 g
Glucosa 20 g
Medio de conservación
No tiene azúcares; se emplea para evitar pleomorfismos. Se recomienda sobre todo para dermatofitos.
Fórmula:
Peptona granulada 30 a 40 g
Agar agar 20 g
Medio papa (patata)zanahoria
Estimula la producción de clamidosporas en Candida albicans y de peritecios en Neotestudina rosatii y Allescheria boydii.
Fórmula:
Pulpa de zanahoria 20 g
Pulpa de papa 20 g
Gelosa 20 g

Se pesan y pelan
CAPÍTULO las papas
34: Medios de ycultivo,
las zanahorias; se sumergen en agua durante una hora; se machacan en un mortero; la mezcla se calienta por Page
5 minutos
2 / 20y
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el agua; • Accessibility
se esteriliza durante 10 minutos a 120°C.
Medio papazanahoriabilis de buey

Pulpa de zanahoria 20 g
Pulpa de papa 20 g Access Provided by:
Gelosa 20 g
Se pesan y pelan las papas y las zanahorias; se sumergen en agua durante una hora; se machacan en un mortero; la mezcla se calienta por 5 minutos y
se filtra a través de una gasa; se añade el agar y se afora a 1 000 ml con el agua; se esteriliza durante 10 minutos a 120°C.
Medio papazanahoriabilis de buey
Al medio anterior se agrega 15% de bilis de buey. Estimula la clamidosporulación en C. albicans.
Medio de cereal
Estimula la clamidosporulación en C. albicans.
Fórmula:
®
Cerelac * 14 g
Agar 10 g
*Producto comercial que contiene harina de trigo, maíz, arroz, cebada, avena y extracto de malta.
Medio agarharina de maíz (corn meal)
Fórmula:
Harina de maíz 62.5 g
Agar 19 g
Se colocan la harina de maíz y el agua destilada a 60°C durante 1 hora; se filtra y luego se agrega el agua.
Agar para clamidosporas
Fórmula:
Sulfato de amonio 1 g
Fosfato monopotásico 1 g
Azul de tripano 0.1 g
Polisacárido purificado 20 g
Agar 15 g
Biotina 5 g
Se suspenden 37 g del polvo de la fórmula en el agua destilada y se deja remojar durante 15 minutos; se hierve durante un minuto agitando con
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frecuencia; se202451
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a 121°C durante 20 minutos.
CAPÍTULO 34: Medios de cultivo, Page 3 / 20
Medio de arroz
Favorece la fructificación y evita el pleomorfismo en dermatofitos.

Agar 15 g
Biotina 5 g Access Provided by:
Se suspenden 37 g del polvo de la fórmula en el agua destilada y se deja remojar durante 15 minutos; se hierve durante un minuto agitando con
frecuencia; se distribuye en los tubos y se esteriliza a 121°C durante 20 minutos.
Medio de arroz
Favorece la fructificación y evita el pleomorfismo en dermatofitos.
Fórmula:
Gelosa 20 g
Arroz con cáscara 20 g
Peptona 2 g (optativa)
Medio de plátano o banana (BM80, Ditrani)
Se emplea para dermatofitos, Candida y otros hongos.
Fórmula:
Pulpa de plátano 60 g
Ácido tartárico al 1% 100 ml
Agar GC 32.5 g
Agua bidestilada 400 ml
Se tritura la pulpa de plátano en un mortero, se mezcla con ácido tartárico y 300 ml de agua bidestilada y en punto de ebullición. Debe regularse el pH a
5 con ácido tartárico. Se filtra en gasa. Se añade el agar previamente disuelto en los 100 ml de agua bidestilada restantes. Debe calentarse hasta la
ebullición y completarse la homogeneización. El pH debe ajustarse de 6 a 6.5. Se distribuye dentro de tubos y se esteriliza en autoclave a 121°C por 15
minutos.
Medio de Czapek (CzapekDox)
Sirve para estudiar Aspergillus y Penicillium.
Fórmula:
Nitrato de sodio 3 g
Sacarosa 30 g
Fosfato dipotásico 1 g
Cloruro de potasio 0.5 g
Sulfato de magnesio 0.5 g
Sulfato de hierro 0.01 g
Agar 15 g
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Medio de Sabouraud P Your IP is 200.33.10.61
aceite de oliva
Se utiliza para el cultivo de Malassezia. Al medio de Sabouraud con antibióticos se añade aceite de oliva al 10%. El aceite es esterilizado por separado y
agregado el medio cuando esté a 50°C y vertido en los tubos o las cajas de Petri.
Sulfato de hierro 0.01 g
Agar 15 g Access Provided by:
Medio de Sabouraud con aceite de oliva
Se utiliza para el cultivo de Malassezia. Al medio de Sabouraud con antibióticos se añade aceite de oliva al 10%. El aceite es esterilizado por separado y
agregado el medio cuando esté a 50°C y vertido en los tubos o las cajas de Petri.
Medio Malassezia sp. con bilis de buey (Dixon modificado)
Fórmula:
Agar extracto de malta 50 a 60 g
Bilis de buey 20 g
Tween 40: 10 ml
Glicerina 2.5 ml
Todos los componentes son mezclados y disueltos a baño María; vertidos en tubos y esterilizados 20 minutos a 120°C. Se pueden añadir antibióticos
antibacterianos.
Medio con ácido oleico y vitamina A
Se usa para Malassezia sp.
Fórmula:
Sabouraud simple 6.5 g
Tween 80: 1 ml
Ácido oleico 10 g
Vitamina A 10 gotas
Cloranfenicol 0.5 g
Medio para dermatofitos (DTM, dermatophyte test medium)
Es un medio con antibióticos que contiene además rojo fenol como indicador, mismo que cambia de amarillo a rojo en presencia de dermatofitos. Sin
embargo, llegan a presentarse falsos positivos si no se examina en etapas tempranas o las concentraciones de antibióticos son insuficientes; aquí la
morfología no es tan característica ni el medio es óptimo para la observación microscópica.
Fórmula:
Fitona o peptona de soya (soja) 10 g
Dextrosa 10 g
Agar 20 g
Rojo fenol (fenolsulfonftaleína) 40 ml
Ácido clorhídrico (HCl) 0.8 N 6 ml

Agua destilada
CAPÍTULO 34:hasta 1 000
Medios deml
cultivo, Page 5 / 20
Se agregan los antibióticos disueltos en acetona como para el medio de Sabouraud; se esteriliza a temperatura de 115°C durante 10 minutos.
La solución de rojo fenol se prepara con 0.5 g de este último en 15 ml de hidróxido de sodio (NaOH) 0.1 N más 85 ml de agua.
Agar 20 g Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla UPAEP
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Rojo fenol (fenolsulfonftaleína) 40 ml
Ácido clorhídrico (HCl) 0.8 N 6 ml
Agua destilada hasta 1 000 ml
Se agregan los antibióticos disueltos en acetona como para el medio de Sabouraud; se esteriliza a temperatura de 115°C durante 10 minutos.
La solución de rojo fenol se prepara con 0.5 g de este último en 15 ml de hidróxido de sodio (NaOH) 0.1 N más 85 ml de agua.
Medio para dermatofitos (DBM, dermatophyte blue medium)
No disponible en el comercio. Se emplea azul de bromotimol como marcador colorimétrico; más específico y fácil de valorar que el rojo fenol; cambia
de color más rápido con la alcalinización del pH. Los mohos no dermatofitos no producen un cambio importante de color hasta que las colonias están
bien desarrolladas, lo que disminuye la frecuencia de resultados falsos positivos.
Fórmula:
Peptona de soya al 0.5%
Dextrosa al 0.5%
Azul de bromotimol al 0.05%
Cloranfenicol al 0.0125%
Cicloheximida (Actidione) al 0.05%
Se ajusta a pH de 5.5 (±0.1)
Extracto de malta o de cerveza
Estimula la fructificación en los hongos.
Fórmula:
Harina de malta 200 g
Se coloca a 45°C; luego se intenta aumentar 1°C por minuto hasta 70°C, en 10–25 minutos. Debe verificarse mediante coloración con yodo si ha
desaparecido todo el almidón. Es necesario mantener a 70°C hasta que desaparezca todo el almidón. A continuación, se filtra la mezcla y se añade
clara de huevo (una clara por cada 2 000 ml). Debe esterilizarse a 125°C durante 45 minutos. Se afora a 1 000 ml y se esteriliza a 110°C.
Gelosa de malta (agar extracto de malta)
Se obtiene al agregar gelosa al 2% al extracto de malta líquido.
Extracto de levadura (agar extracto de levadura)
Fórmula:
Extracto de levadura 15 g
Agar bacteriológico 20 g
El pH debe ser de 6
La solución madre se prepara al diluir el extracto de levadura en 100 ml de agua y esterilizar por filtración. Debe disolverse el agar en el resto del agua,
esterilizarse en autoclave durante 15 minutos a 121°C, se añade a esta mezcla 6 ml de la solución madre y se deja enfriar a 45°C.
Medio de infusión de cerebrocorazón (BHI, brain heart infusion)
Agua destilada 1 100 ml Access Provided by:
El pH debe ser de 6
La solución madre se prepara al diluir el extracto de levadura en 100 ml de agua y esterilizar por filtración. Debe disolverse el agar en el resto del agua,
esterilizarse en autoclave durante 15 minutos a 121°C, se añade a esta mezcla 6 ml de la solución madre y se deja enfriar a 45°C.
Medio de infusión de cerebrocorazón (BHI, brain heart infusion)
Sirve para cultivar actinomicetos y obtener la fase levaduriforme de hongos dimorfos.
Fórmula:
Infusión de cerebro de becerro 200 g
Infusión de corazón de buey 250 g
Peptona 10 g
Glucosa 2 g
NaCl 5 g
Na2HPO4 2 g
Agua potable hasta 1 000 ml
Se ajusta a pH de 7
Este medio puede quedar gelosado si se agregan 18 g de gelosa/L.
Medio Lactrimel o Lactrimel de Borelli
Tiene pocos nutrimentos; estimula la producción de pigmentos y la fructificación de muchos hongos, por lo regular dermatofitos, así como de
clamidosporas en C. albicans.
Fórmula:
Harina de trigo 14 g
Miel 7 g
Leche de vaca 14 g
Agar 14 g
Cloranfenicol 0.25 g
Agua 1 000 ml
Medio para penetración de pelos in vitro
Para observar órganos perforadores, presentes en Trichophyton mentagrophytes, mas no en T. rubrum.
Fórmula:
Extracto de levadura al 10% 2 a 3 ml
Fragmentos de 1 cm de cabellos de niño rubio o de caballo
En una caja de202451

Downloaded Petri se colocan
8:17 P pelos de is
Your IP 1 cm de longitud, esterilizados; se añade la solución preparada, se inoculan las colonias por estudiar y se
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CAPÍTULO 34: Medios de cultivo,
dejan transcurrir 3 a 4 semanas. En medicina veterinaria se usan pelos de caballo, con resultados igualmente buenos. Page 7 / 20
Medio de agar Biggy (bismuthglucoseglycineyeast agar )
Extracto de levadura al 10% 2 a 3 ml Access Provided by:
Fragmentos de 1 cm de cabellos de niño rubio o de caballo
En una caja de Petri se colocan pelos de 1 cm de longitud, esterilizados; se añade la solución preparada, se inoculan las colonias por estudiar y se
dejan transcurrir 3 a 4 semanas. En medicina veterinaria se usan pelos de caballo, con resultados igualmente buenos.
Medio de agar Biggy (bismuthglucoseglycineyeast agar )
Biggy es un acrónimo de bismutoglucosaglicinaagar de levadura (bismuthglucoseglycineyeast agar). Fue descrito por W. Nickerson en 1947 y se
basa en la propiedad de algunas levaduras para reducir las sales inorgánicas.
Fórmula:
Glucosa 10 g
Glicina 10 g
Citrato de bismuto amónico 5 g
Sulfito de sodio 3 g
Cloranfenicol 5 g
Agar 20 g
Con este medio se forma sulfuro de bismuto, y las colonias de Candida adoptan una coloración que varía de café a negro. Asimismo, los compuestos
de bismuto y azufre inhiben las bacterias. No deben incubarse durante más de cinco días, porque puede haber resultados positivos falsos. Existen
preparados comerciales, los cuales contienen una fórmula prácticamente igual (con la salvedad del cloranfenicol) y con pH ajustado a 6.8 ±0.2; sin
embargo, no es fidedigno en la diferenciación de especies.
Medio de agardextrosaurea
Se emplea para observar la producción de ureasa, por ejemplo en T. mentagrophytes y Cryptococcus neoformans.
Fórmula:
Dextrosa 1 g
Peptona 1 g
Urea 20 g
Rojo fenol 0.012 g
Los ingredientes deben ser disueltos, filtrados y esterilizados; se disuelven por separado 15 g de agar en 900 ml de agua destilada y se esterilizan.
Después de enfriar se añade la solución de urea.
Medio de Staib
Sirve para identificar C. neoformans, puesto que adquiere color café oscuro en este medio.
Fórmula:
Guizotia
CAPÍTULO abyssinica (alpiste
34: Medios negro o ácido cafeico) 50 g
de cultivo, Page 8 / 20
Glucosa 1 g
Creatinina 1 g
Medio de Staib Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla UPAEP
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Sirve para identificar C. neoformans, puesto que adquiere color café oscuro en este medio.
Fórmula:
Guizotia abyssinica (alpiste negro o ácido cafeico) 50 g
Glucosa 1 g
Creatinina 1 g
Fosfato monopotásico (KH2PO4) 1 g
Agar 15 g
El polvo de las semillas de Guizotia abyssinica se hierve en 1 000 ml de agua destilada durante 30 minutos; se filtra y se repone el volumen hasta 1 000
ml con agua destilada. Entonces se añaden los otros componentes; se esteriliza a 120°C durante 20 minutos. El pH final debe ser de 5.5.
Agar alpiste negro
Fórmula:
Semilla de niger o alpiste negro (Guizotia abyssinica) pulverizado, 70 g.
Cloranfenicol 50 mg
Debe remojarse el alpiste negro en 1 000 ml de agua, hervir por 30 minutos y luego filtrarlo en gasa y papel filtro. Se repone el volumen a 1 000 ml de
agua y se esteriliza a 120°C, durante 20 minutos. Cryptococcus (neoformans) adquiere un color café oscuro. Se emplea para su identificación y
aislamiento de sustratos muy contaminados. Para su aislamiento, se procesan las muestras a partir de una suspensión de 0.05 g de polvo en 15 ml de
solución salina fisiológica estéril con 0.3 g/L de cloranfenicol. Se siembran con un escobillón en placas de Petri.
Medio de canavaninaglicinaazul de bromotimol
Para diferenciar C. neoformans. La lcanavanina inhibe el crecimiento de C. neoformans var. neoformans. De las cepas serotipo A, 60% es resistente a
lcanavanina, pero no asimilan la glicina presente en el medio.
Fórmula:
Solución A
Glicina 10 g
Fosfato monopotásico (KH2PO4) 1 g
Sulfato de magnesio (MgSO4) 1 g
TiaminaHCl 1 mg
Sulfato de lcanavanina 30 mg
Se disuelven los ingredientes y se esterilizan por filtración (0.45 µm), a un pH de 5 a 6.
Solución B
Azul de bromotimol 0.4 g

Hidróxido de34:
CAPÍTULO sodio (NaOH)
Medios de al 0.01N 64 ml
cultivo, Page 9 / 20
Se disuelven los ingredientes y se esterilizan por filtración (0.45 µm), a un pH de 5 a 6. Access Provided by:
Solución B
Azul de bromotimol 0.4 g
Hidróxido de sodio (NaOH) al 0.01N 64 ml
Se prepara de la siguiente manera:
Solución B 20 ml
Agar 20 g
Se mezclan y se esterilizan a 121° C por 15 minutos. Entonces se enfría a 50°C y se agregan 100 ml de la solución A, previamente esterilizada. Debe
mezclarse bien y se vierte.
La lectura se realiza a las 72 horas; C. neoformans var. neoformans no desarrolla colonia ni cambia el color del medio (amarillo dorado); C.
neoformans variedad gattii crece y cambia de color el medio a azul cobalto por modificaciones en el pH.
Medio de Gorodkowa
Para el desarrollo de ascas de S. cerevisiae y S. bayanus.
Fórmula:
Glucosa 0.63 g
Cloruro de sodio (NaCl) 1.30 g
Extracto de carne 2.50 g
Se mezclan y hierven los ingredientes por 5 minutos; más tarde se esterilizan durante 15 minutos a 121°C.
Medio mínimo de esporulación
Se emplea para estimular la conidiación en mohos y aislar hongos del suelo.
Fórmula:
Acetato de potasio 10 g
Extracto de levadura 2.5 g
Dextrosa 1 g
Se hierven todos los ingredientes por 10 a 15 minutos y se esterilizan en autoclave por 15 minutos a 121°C.
Agar extracto de suelo
Recomendado para mantener la fase micelial de H. capsulatum y B. dermatitidis; favorece la producción de cleistotecios en Ajellomyces dermatitidis.
Fórmula:
Tierra
©2024de jardín 500
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Agua de la llave 1 200 ml

Se hierven todos los ingredientes por 10 a 15 minutos y se esterilizan en autoclave por 15 minutos a 121°C.
Agar extracto de suelo Access Provided by:
Recomendado para mantener la fase micelial de H. capsulatum y B. dermatitidis; favorece la producción de cleistotecios en Ajellomyces dermatitidis.
Fórmula:
Tierra de jardín 500 g
Agua de la llave 1 200 ml
Glucosa 2 g
Fosfato monopotásico (KH2PO4) 0.5 g
Agar 15 g
Debe mezclarse el agua con la tierra y esterilizar durante 3 horas a 121°C; después se pasa por papel filtro mientras está caliente; es preciso reponer el
volumen con agua hasta 1 000 ml y añadir el resto de los ingredientes; se ajusta el pH a 7 y se esteriliza de nuevo a 121°C, durante 20 minutos.
Medio de transporte para hongos (medio de Stuarts)
Fórmula:
Tioglicolato de sodio 1 g
Glicerofosfato de sodio 10 g
Cloruro de calcio (CaCl2) 100 mg
Azul de metileno 0.002 mg
El pH debe ser de 7.3
Medio de Bennett
Se usa para actinomicetos.
Fórmula:
Extracto de carne 18 g
NZ amida A 2 g
Caseína para digestión 1 g
Glucosa 10 g
Gelosa 15 g
Medio de LöwensteinJensen
Se emplea para actinomicetos, micobacterias y Actinomadura spp.
Fórmula:
CAPÍTULO 34: Medios2.4
Fosfato monopotásico degcultivo, Page 11 / 20
Medio de LöwensteinJensen Access Provided by:
Se emplea para actinomicetos, micobacterias y Actinomadura spp.
Fórmula:
Fosfato monopotásico 2.4 g
Citrato de magnesio 0.6 g
Asparagina 3.6 g
Glicerina 12 ml
Fécula de papa (patata) 30 g
Huevos frescos 1 000 ml
Solución de verde de malaquita al 2% 20 ml
Las sales se disuelven por calentamiento y la solución se coloca en frascos que son esterilizados por 30 minutos a 110°C.
Deben colocarse los 30 g de fécula de papa –la cual previamente ha sido esterilizada durante 30 minutos a 120°C– en un recipiente de 3 000 ml con
perlas de vidrio y la solución ya preparada. Enseguida se coloca el recipiente a baño María a 100°C y se agita de manera continua hasta que el líquido se
torna translúcido (alrededor de 15 a 20 minutos). La mezcla se deja 1 hora a 56°C. Los huevos se sumergen durante 1 hora en alcohol de 90 grados; a
continuación, se rompen uno tras otro en un vaso de precipitado y son vertidos en una probeta de 1 000 ml; se homogeneizan con una varita de vidrio
o un agitador mecánico y filtran a través de una gasa. Un litro de ese preparado se mezcla con un frasco de fécula y se le agregan 20 ml de verde de
malaquita; la solución se deja en reposo 1 hora antes de distribuirse en los tubos o en las cajas de Legroux. El medio se coagula con un solo
calentamiento a 85°C durante 40 minutos.
Medio para hidrólisis de la caseína
Es útil para tipificar Nocardia spp.
Fórmula 1:
Leche entera en polvo 4 cucharadas
Sig.: A
Agar 20 g
Sig.: B
Deben esterilizarse ambas preparaciones. En una caja de Petri se mezclan dos tubos de agar con uno de leche, la mezcla se deja solidificar y se siembra
la colonia problema.
Fórmula 2:
Dextrosa 1 g
Agar bacteriológico 1.5 g
CAPÍTULO
Sig.: A 34: Medios de cultivo, Page 12 / 20
Leche descremada (skim milk) 1.5 g
Fórmula 2:
Dextrosa 1 g Access Provided by:
Agar bacteriológico 1.5 g
Sig.: A
Leche descremada (skim milk) 1.5 g
Sig.: B
Deben esterilizarse por separado A y B a 10 lb de presión durante 10 minutos; se dejan enfriar a 45°C; son vaciadas en cajas de Petri y mezcladas.
Medio para hidrólisis de tirosina, xantina o hipoxantina
Sirve para tipificar Nocardia spp.
Fórmula:
Peptona 5 g
Agar 15 g
ltirosina 5 g (o xantina o hipoxantina) 4 g
El pH debe ser de 7
La tirosina, xantina o hipoxantina debe distribuirse de manera uniforme en todo el medio y luego se esteriliza durante 15 minutos a 110°C.
Medio para hidrólisis de la gelatina diluida
Sirve para estudiar actinomicetos.
Fórmula:
Gelatina 4 g
Es preciso envasarla en tubos y esterilizarla durante 15 minutos a 110°C. Deben emplearse tubos para hemólisis con 4 ml de gelatina al 0.4%; en la
superficie del medio, se depositan pequeños fragmentos de la colonia por estudiar. Se incuba a 37°C, durante 7 a 14 días. Debe agregarse 1 ml de
nilhidrina al 0.24% en butanol y sustituir el tapón de algodón por una canica como condensador. Entonces debe calentarse a baño María durante 5
minutos, agitarla de manera vigorosa y dejarla reposar. La hidrólisis se manifiesta por la formación de un anillo de color púrpura o violeta.
Agar tirosina
Es útil para diferenciar especies de actinomicetos.
Fórmula:
Agar nutritivo 23 g
Tirosina 5 g

El agar se disuelve
CAPÍTULO por calentamiento
34: Medios de cultivo, en 900 ml de agua; después se deja enfriar a 55°C. Page 13 / 20
La tirosina se disuelve aparte, en 100 ml de agua a temperatura ambiente, y entonces se mezclan ambas soluciones; debe tenerse cuidado de que los
cristales de tirosina se distribuyan de manera homogénea. Se esteriliza la mezcla durante 15 minutos a 121°C.
Fórmula:
Agar nutritivo 23 g Access Provided by:
Tirosina 5 g
El agar se disuelve por calentamiento en 900 ml de agua; después se deja enfriar a 55°C.
La tirosina se disuelve aparte, en 100 ml de agua a temperatura ambiente, y entonces se mezclan ambas soluciones; debe tenerse cuidado de que los
cristales de tirosina se distribuyan de manera homogénea. Se esteriliza la mezcla durante 15 minutos a 121°C.
Medio para zimograma
Fórmula:
Peptona 10 g
Cloruro de sodio (NaCl) 5 g
Hidróxido de sodio (NaOH) 1N 1 ml
Carbohidrato (glucosa, maltosa, lactosa, sacarosa, galactosa, rafinosa, trehalosa, etc.) 20 g
Se esterilizan los ingredientes mezclados a 10 lb de presión durante 15 minutos.
Medio de coco
Se emplea para el aislamiento de hongos levaduriformes y para estimular el crecimiento y la formación de pigmento de Actinomadura pelletieri y
Trichophyton violaceum.
Fórmula:
Agua de coco filtrada 100 ml
Peptona 1 g
pH ajustado a 5
Deben mezclarse los ingredientes y se esterilizan en autoclave, durante 15 minutos a 121°C.
Medio de Garrod
Para aislar actinomicetos y conservarlos.
Fórmula:
Cloruro de sodio 5 g
Peptona 10 g
Almidón soluble 1 g
Agar 20 g
Deben disolverse
Downloaded los ingredientes
202451 en el
8:17 P Your IPagua. Se esteriliza a 120°C durante 15 minutos y se envasa.
is 200.33.10.61
Caldo de tioglicolato
©2024 McGraw con
Hill. All Rights soya (soja)
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Se usa para actinomicetos anaerobios.

Almidón soluble 1 g
Agar 20 g Access Provided by:
Deben disolverse los ingredientes en el agua. Se esteriliza a 120°C durante 15 minutos y se envasa.
Caldo de tioglicolato con soya (soja) tripticasa
Se usa para actinomicetos anaerobios.
Fórmula:
Caldo de tioglicolato 29.50 g
Caldo de soya tripticasa 1.50 g
Caldo de triptosa 1.25 g
Medio para corinebacterias
Para aislamiento de especies del género Corynebacterium.
Fórmula:
Suero fetal bovino 20 ml
Agar 199 (preparado comercial) 78 ml
Deben mezclarse los componentes y envasarse. Se esterilizan a 121° C durante 20 minutos.
Medios para F. pedrosoi
Medio de cultivo con quelante de calcio (EGTA), 2 mmol/L–1; induce el desarrollo de colonias en 21 días.
Medios de árboles frutales nativos de América (figura 34–1): Theobroma grandiflorum (árbol pariente del Theobroma cacao, conocido como Copoazú,
en la región del Amazonas); contienen en el mesocarpo del fruto:
Figura 34–1.
Frutos de árboles del género Theobroma: Theobroma grandiflorum (Copoazú) y Theobroma cacao.

Potasio 34.3 mg/100
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Fósforo 15.7 mg/100 g

en la región del Amazonas); contienen en el mesocarpo del fruto:
Figura 34–1.
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Frutos de árboles del género Theobroma: Theobroma grandiflorum (Copoazú) y Theobroma cacao.
Potasio 34.3 mg/100 g
Fósforo 15.7 mg/100 g
Magnesio 13.0 mg/100 g
Bactris gasipaes (palma de durazno) contiene en el mesocarpo de sus frutos:
Potasio 289.3 mg/100 g
Calcio 24.7 mg/100 g
Magnesio 17.6 mg/100 g; además de ser rico en ácidos grasos
Previo lavado, el mesocarpo de los frutos de estos árboles debe ser separado de las semillas, diluido a una proporción de 1:3 en agua desionizada
destilada; entonces, se mezcla para homogeneizar y se centrifuga a 4 mil revoluciones por minuto durante 5 minutos. El sobrenadante se recolecta y
filtra en papel filtro, el pH se regula a 2.7 con HCl y se esteriliza en autoclave.
Se consigue inducción de esclerotes en 48 horas.
Medio para células fumagoides
Se emplea para obtener células fumagoides in vitro, a partir de hongos causales de cromoblastomicosis.
Fórmula:
Dextrosa 2 g
Peptona 1 mg
Agua destilada estéril 100 ml
Los ingredientes deben ser mezclados y homogeneizados, más tarde se ajusta el pH a 2.5 y se esteriliza a 121° C durante 15 minutos.
Una vez que se llevan a cabo las siembras en este medio, las cepas deben incubarse a 37°C.
Medio de Kurung
Es útil para conservar hongos patógenos en su forma parasitaria.
Downloaded
Fórmula: 202451 8:17 P Your IP is 200.33.10.61

Una vez que se llevan a cabo las siembras en este medio, las cepas deben incubarse a 37°C.
Access Provided by:
Medio de Kurung
Es útil para conservar hongos patógenos en su forma parasitaria.
Fórmula:
Mezcla de huevo 150 ml
El agua con la fécula de papa se calienta en mechero de Bunsen hasta gelificar, entonces se esteriliza a 115°C durante 15 minutos.
Se agita la mezcla de huevo (100 ml de yema y 40 ml de huevo entero) en presencia de perlas de vidrio, y se añade con técnica estéril a la fécula de
papa. El medio debe repartirse en tubos y dejarse coagular inclinado a 90°C durante 1 hora.
Medio de gis (tiza)
Se usa para obtener la fase sexuada de Saccharomyces cerevisiae, a fin de distinguirlo de otras levaduras que no producen ascosporas.
Fórmula:
Un fragmento de gis
Agua destilada estéril 3 ml
En un tubo de ensayo de 15 x 150, se coloca el fragmento de gis entero cortado longitudinalmente y en forma diagonal; se esteriliza a 121° C durante 15
minutos, y entonces se agregan 3 ml del agua destilada. Después es inoculada la colonia por estudiar en el centro de la parte aplanada y se deja a
temperatura ambiente durante 5 a 8 días.
Medio de amaranto (agar harina de Amaranthus sp.)
Este medio resulta de utilidad para favorecer la esporulación de dermatofitos, Sporothrix y hongos mitospóricos.
Fórmula:
Harina de amaranto 25 g
Dextrosa 10 g
Agar 16 g
Se disuelven la harina y la dextrosa en 800 ml del agua, calentándola durante 30 minutos hasta la ebullición, después se retira del fuego y se deja
sedimentar durante tres horas. Debe recuperarse el sobrenadante por decantación y ajustar el pH a 6.7; se agrega el agar, se homogeneiza y se afora a
1 000 ml con el resto del agua. Se distribuye en tubos o cajas de Petri y se esteriliza a 121°C durante 15 minutos.
Medio de Converse
Tiene utilidad para obtener la forma parasitaria (esférulas) de especies de Coccidioides.
Fórmula:
Glucosa 1M 22 ml
Acetato de amonio 16 ml
Fosfato monopotásico 3.75 ml
Fosfato dipotásico
Downloaded 3 ml 8:17 P Your IP is 200.33.10.61
202451
Sulfato McGraw
©2024 de magnesio
Hill. 1.6 ml
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Sulfato de cinc 0.01M 1.24 ml

Glucosa 1M 22 ml
Acetato de amonio 16 ml Access Provided by:
Fosfato monopotásico 3.75 ml
Fosfato dipotásico 3 ml
Sulfato de magnesio 1.6 ml
Sulfato de cinc 0.01M 1.24 ml
Cloruro de sodio (NaCl) 0.01M 24 ml
Bicarbonato de sodio 0.01M 14 ml
Cloruro de calcio 0.01M 2 ml
Deben mezclarse todos los ingredientes, se aforan con agua a 1 000 ml y se calienta la mezcla para disolverlos.
Enseguida se llenan los tubos, cada uno con 10 ml del medio, se dejan enfriar ajustando el pH a 6.5 y después se esteriliza la mezcla a 121°C durante 15
minutos.
Medio de rosa de Bengala
Fórmula:
Oxitona 5 g
Dextrosa 10 g
Agar 20 g
Rosa de Bengala 0.035 g
Se disuelve por calentamiento y se esteriliza 15 minutos a 110°C. Si es necesario debe inhibirse la contaminación bacteriana y agregar 1 ml de sulfato
de estreptomicina que contenga 1 mg/ml por cada 20 ml de medio.
Medio de urea de Christensen
Permite comprobar la presencia de ureasa; cuando es positiva, el color del medio vira de rosado a rojo (por ejemplo, Cryptococcus).
Fórmula:
Peptona 0.1 g
Glucosa 0.5 g
NaCl 0.5 g
KH2PO4 0.2 g
Agar 1.5 g
Rojo fenol 0.012

Downloaded g
202451 8:17 P Your IP is 200.33.10.61
CASOS PARA DESTACAR
KH2PO4 0.2 g
Agar 1.5 g Access Provided by:
Rojo fenol 0.012 g
CASOS PARA DESTACAR
Algunos cultivos que parecen ya no ser viables, a veces se reactivan al añadir una nueva capa de agar al medio.
En condiciones asépticas, con una pipeta Pasteur se depositan 2 a 3 ml de agar dextrosa Sabouraud a 50°C, sobre la colonia aparentemente no
viable; se incuba el cultivo a 30°C. Se revisa de manera periódica para observar algún crecimiento que surja a través de la capa fina de agar.
Una vez que se ha logrado un desarrollo sobre esta capa, se transfiere el nuevo crecimiento a un tubo con agar papadextrosa (APD) y con extracto
de levadura al 1%.
Si no llegara a presentarse ningún desarrollo de nuevas colonias al cabo de 3 o 4 semanas, se desecha el tubo.
Deben disolverse los componentes y ajustar el pH a 6.8; luego debe esterilizarse el medio, enfriarse y añadir urea al 20%, 0.5 ml por cada 4.5 ml de
medio. La urea se esteriliza previamente para filtración. Esta prueba se ha simplificado empleando Bactourea R Broth (Difco Lab®, Detroit).
Agar V8®
También es útil para favorecer la producción de ascosporas por parte de Saccharomyces.
Fórmula:
Filtrado de jugo de ocho verduras V8®** 500 ml
Deben mezclarse los ingredientes hasta disolverlos y entonces ser esterilizados en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Hoy día se ha simplificado la preparación de muchos medios de cultivo al emplear medios deshidratados a los que solo hay que añadir la cantidad
correcta de agua y esterilizar.
**Producto comercial enlatado que contiene jugo de tomate, zanahoria, lechuga, apio, espinacas, perejil, betabel y berros.
BIBLIOGRAFÍA
AlbaFlores J, GarzaGarza D, Martínez E, et al. Manual de micología médica . 3a ed. México: Instituto Politécnico Nacional; 1982.
Batista da Silva M, Pereira da Silva J, Pereira Yamano S, et al. Development of natural culture media for rapid induction of Fonsecaea pedrosoi
sclerotic cells in vitro . J Clin Microbiol . 2008;46(11):3839–3841. [PubMed: 18799695]
Bonifaz A. Micología médica básica . 4a ed. México: McGrawHill; 2012.
Emmons CW, Binford CH, Utz JP, KwonChung KJ. Medical mycology . 3a ed. Filadelfia: Lea & Febiger; 1977.
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LópezMartínez R, MéndezTovar LJ, HernándezHernández F, CastañónOlivares LR. Micología médica: Procedimientos para el diagnóstico de
laboratorio . 3a ed. México: Trillas; 2012.
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LópezMartínez R, MéndezTovar LJ, HernándezHernández F, CastañónOlivares LR. Micología médica: Procedimientos para el diagnóstico de
laboratorio . 3a ed. México: Trillas; 2012.


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Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla UPAEP

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Micología Médica Ilustrada, 6e

CAPÍTULO 34: Medios de cultivo

Medio glucosado de Sabouraud

Peptona granulada (chapoteaut) 1 g

Agua destilada 100 ml

Agua destilada 1 000 ml

Medio de Sabouraud con antibióticos

OTROS MEDIOS DE CULTIVO

Agua destilada 1 000 ml

Agua destilada 1 000 ml

Medio papa (patata)­zanahoria

Agua destilada 1 000 ml

Medio papa­zanahoria­bilis de buey

Agua destilada 1 000 ml

Medio papa­zanahoria­bilis de buey

Al medio anterior se agrega 15% de bilis de buey. Estimula la clamidosporulación en C. albicans.

Estimula la clamidosporulación en C. albicans.

Agua destilada 1 000 ml

Medio agar­harina de maíz (corn meal)

Estimula la clamidosporulación en C. albicans.

Harina de maíz 62.5 g

Agua destilada 1 500 ml

Agar para clamidosporas

Estimula la clamidosporulación en C. albicans.

Azul de tripano 0.1 g

Agua destilada 1 000 ml

Favorece la fructificación y evita el pleomorfismo en dermatofitos.

Agua destilada 1 000 ml

Favorece la fructificación y evita el pleomorfismo en dermatofitos.

Arroz con cáscara 20 g

Agua destilada 1 000 ml

Medio de plátano o banana (B­M­80, Ditrani)

Se emplea para dermatofitos, Candida y otros hongos.

Ácido tartárico al 1% 100 ml

Agua bidestilada 400 ml

Medio de Czapek (Czapek­Dox)

Sirve para estudiar Aspergillus y Penicillium.

Cloruro de potasio 0.5 g

Sulfato de magnesio 0.5 g

Sulfato de hierro 0.01 g

Agua destilada 1 000 ml

Downloaded 2024­5­1 8:17con

Agua destilada 1 000 ml

Medio de Sabouraud con aceite de oliva

Medio Malassezia sp. con bilis de buey (Dixon modificado)

Agar extracto de malta 50 a 60 g

Agua destilada 1 000 ml

Medio con ácido oleico y vitamina A

Se usa para Malassezia sp.

Sabouraud simple 6.5 g

Agua destilada 100 ml

Medio para dermatofitos (DTM, dermatophyte test medium)

Fitona o peptona de soya (soja) 10 g

Rojo fenol (fenolsulfonftaleína) 40 ml

Ácido clorhídrico (HCl) 0.8 N 6 ml

Ácido clorhídrico (HCl) 0.8 N 6 ml

Medio papa (patata)zanahoria

Medio papazanahoriabilis de buey

Medio papazanahoriabilis de buey

Medio agarharina de maíz (corn meal)

Medio de plátano o banana (BM80, Ditrani)

Medio de Czapek (CzapekDox)

Downloaded 202451 8:17con

Medio de infusión de cerebrocorazón (BHI, brain heart infusion)

En una caja de202451

Medio de agar Biggy (bismuthglucoseglycineyeast agar )

Medio de canavaninaglicinaazul de bromotimol