Universidad Tecnológica de Panamá

Facultad de Ingeniería Civil

Licenciatura en Ingeniería Ambiental
Laboratorio de Microbiología

PARA:
Profesor Cenobio Cardenas

DE:
Liz Guevara 8-988-2307
Anabella Rodríguez 8-982-650
Alejandra Reyes 8-990-823

Grupo 1IB131 (B)

Fecha de realización: miércoles 12 de abril, 2023
Sesión: miércoles – 1:40 p.m. a 3:15 p.m.

FECHA:
miércoles 19 de abril, 2023

ASUNTO:

Laboratorio n°1 – Introducción al Laboratorio de

Microbiología Ambiental
1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE PANAMÁ

FACULTAD DE INGENIERÍA CIVIL

Carrera: Lic. Ingeniería Ambiental / Lic. En Saneamiento y Ambiente

Fecha: I Semestre
Asig: Microbiología Ambiental Prof.: Cenobio E. Cárdenas

EXPERIENCIA DE LABORATORIO #1
INSTRUCCIONES GENERALES DEL LABORATORIO

Objetivo: Que el estudiante emplee las instrucciones para realizar trabajos en el

laboratorio de microbiología.

Resumen:
El estudiante que trabaje en el laboratorio de microbiología debe familiarizarse con
los métodos básicos usados en microbiología.
La observación directa y la experimentación son sin duda los métodos ideales que
debe poner en práctica sea cual fuere el campo de la ciencia a la que dedique su
actividad. La palabra laboratorio significa lugar de trabajo, y precisamente por
observación de los microorganismos, y por lectura de lo que otros han investigado
y aprendido, como puede el principiante llegar a aprender los misterios que encierra
el fascinante mundo de los microbios.
Tres características básicas de los microorganismos hacen necesario el empleo, de
técnicas especiales en la investigación microbiológica, a saber: 1) su tamaño
diminuto, 2) la aparente ausencia de diferencias, individuales y 3) su amplia
Distribución en la naturaleza.
Como los microorganismos pululan por doquiera en el medio ambiente existe
siempre el peligro de que el estudiarlos pueda diseminarse y contaminar el medio.
Con el fin de hacer frente a estos problemas se debe siempre usar técnicas
asépticas (ausencia de microorganismos).

Reglas en el Laboratorio:
Las siguientes técnicas deben observarse como medidas de seguridad para todos
los que laboran en el laboratorio.
1) Debe utilizarse bata de laboratorio, la cual debe retirarse al terminar la
experiencia. No usarla fuera del laboratorio.
2) Lápices, plumas o marcadores nunca deben introducirse a la boca.
3) Agujas de transferencia de cultivos y asas deben esterilizarse calentando
todo el alambre al rojo, antes y después de usarlo. En primera instancia, se
debe mantener la aguja arriba de la llama para evitar esparza el cultivo de
bacterias.
4) Si por accidente el cultivo se esparcen la mesa de trabajo u otro lugar, se
debe desinfectar el área con un agente desinfectante (ejem. Solución Lysol
al 5%) y notificar al instructor.
5) El medio inoculado debe ser debidamente identificado con nombre,
identificación de especie u otro.
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1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

6) El microscopio y sus partes se deben limpiar adecuadamente.

7) Todos los utensilios utilizados deben colocarse en el lugar destinado para tal
efecto, al finalizar el periodo de laboratorio.
8) El material desechable, papel algodón; etc., se eliminará en basureros
adecuados.
9) La mesa de trabajo debe limpiarse con un desinfectante (5% Lysol) al inicio
y al final del laboratorio.
10) Cualquier accidente personal debe comunicarse inmediatamente al profesor.
11) Al final de sus tareas, todos los estudiantes deben lavarse las manos con
jabón o un desinfectante, si lo amerita.

Algunos equipos de uso rutinario en el laboratorio donde se utilizan prácticas

Microbiológicas son:
o Placas petri
o Agujas de inoculación
o Pipetas serológicas
o Tubos de cultivo
o Portaobjetos
o Cubreobjetos

Procedimiento:
1. identifique e ilustre cada uno de los equipos y accesorios de mayor
uso en el laboratorio de microbiología.
2.

Preguntas:
1. Investigue la aplicación de cada uno de los equipos y accesorios utilizados en el
Laboratorio.

Bibliografía:
1. Microbiología, Genevieve Gray Jay
2. Microbiología. Pelzar/Reid/ Chan. Cuarta Edición, 1982.

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1 Índice
Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Introducción ............................................................................................................. 4
Objetivos ................................................................................................................. 4
Resumen ................................................................................................................. 5
Procedimientos........................................................................................................ 5
Preguntas .............................................................................................................. 10
Conclusiones ......................................................................................................... 13
Referencias ........................................................................................................... 13
Anexo .................................................................................................................... 16

Introducción
Los microorganismos son los seres más primitivos que existen en la Tierra, los
cuales tienen la capacidad de colonizar cualquier tipo de ambiente. Estos son clave
para el funcionamiento de los sistemas biológicos y el mantenimiento de la vida,
pues participan en diversos procesos metabólicos, ecológicos y biotecnológicos.
Para efectuar el estudio de estos organismos es necesario cultivarlo y
posteriormente separarlo de la población mixta en la que se encuentra. Para tal fin
se emplean técnicas de aislamiento que conducen a la obtención de un cultivo para
su posterior observación.
En el siguiente laboratorio se hará un rápido vistazo sobre cada uno de los
instrumentos y equipos necesarios para el estudio de estos organismos, al igual
que la función y utilidad de cada uno dentro del laboratorio.

Objetivos
• Que el estudiante emplee las instrucciones para realizar trabajos en el
laboratorio de microbiología.

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1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Resumen
En un laboratorio de microbiología, se utilizan diversos objetos y herramientas
para llevar a cabo experimentos y pruebas. Estos incluyen dispositivos que
permiten el crecimiento y la observación de microorganismos, como placas de
cultivo y microscopios, así como instrumentos para medir y transferir líquidos con
precisión, como pipetas y micropipetas. También se utilizan dispositivos para
esterilizar el equipo y suministros antes de su uso, como autoclaves, y
herramientas para separar diferentes componentes de una muestra, como
centrífugas. Además, se requiere equipo de protección personal, como batas,
guantes y gafas de seguridad, para garantizar la seguridad del personal del
laboratorio durante la manipulación de sustancias peligrosas. En resumen, la
variedad de objetos y herramientas utilizadas en un laboratorio de microbiología
permite la realización de experimentos precisos y confiables en un ambiente
seguro y controlado.

Procedimientos
Nombre Ilustración

Autoclave

Destilador

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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Baño María

Incubadora

Sellador
Quanty Tray

Microscopio

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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Cajas Petri

Medio de
cultivo

Balanza
analítica

Plancha de
calentamiento

7
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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Contador de
colonias

Asa
bacteriológica

Tintes

8
1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Rejilla

Aceite de
inmersión

Porta y cubre
objeto

Incinerador

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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

pH metro

Aparato de
filtración

Micropipeta

Preguntas
Investigue la aplicación de cada uno de los equipos y accesorios utilizados en el
laboratorio.
Autoclave: es un instrumento metálico de paredes gruesas con cierre hermético
que permite trabajar con vapor de agua a alta presión y temperatura que sirve
para esterilizar instrumental (material médico, de laboratorio, etc.) o alimentos.

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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Destilador: es un instrumento de laboratorio que se usa para purificar el agua

corriente, mediante procesos controlados de vaporización y enfriamiento. Al
aplicar energía térmica al agua en fase líquida, luego de un proceso de
calentamiento, se convierte en vapor de agua.
Baño Maria: El baño de maría se utiliza para incubar muestras en agua a una
temperatura constante durante un largo período de tiempo. Las aplicaciones
incluyen calentamiento de reactivos, fusión de sustratos o incubación de cultivos
celulares. También se utiliza para permitir que ciertas reacciones químicas se
produzcan a altas temperaturas.
Incubadora: es un dispositivo utilizado para cultivar y mantener cultivos
microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene una temperatura y
humedad optima garantizando también otras condiciones tales como el dióxido de
carbono (CO2) y contenido de oxígeno presente en la incubadora.
Sellador Quantry Tray: se utilizan para cuantificar coliformes, E.coli, enterococos,
Pseudomonas eruginosa y recuento de placas heterótrofas
Microscopio: permite observar elementos que no pueden observarse o son
invisibles a simple vista, a través de lentes, visores y rayos de luz, que acercan o
agrandan la imagen en escalas convenientes para su examinación y análisis.

Cajas Petri: Se utiliza en los laboratorios principalmente para el cultivo de bacterias,

mohos y otros microorganismos, soliéndose cubrir el fondo con distintos medios de
cultivo (por ejemplo agar) según él microorganismo que se quiera cultivar.
Medio de cultivo: son sustancias que se utilizan para cultivar y mantener
microorganismos en el laboratorio con el objetivo de hacer crecer microorganismo
como bacterias, virus y hongos, especialmente. En algunos también se utilizan para
tejidos o células, pero en menos casos. Los medios de cultivo proporcionan los
nutrientes necesarios para que los microorganismos se multipliquen y crezcan.
Estos nutrientes pueden incluir carbohidratos, proteínas, sales minerales y
vitaminas.
Balanza analítica: es un instrumento científico diseñado para medir la fuerza de la
gravedad sobre un objeto y luego convirtiéndola en peso o le conocemos como la
masa. También llamada balanza de precisión puede ser usada en el pesaje tanto
de sólidos, líquidos como materiales gaseosos.
Plancha de calentamiento/agitador: es un instrumento de laboratorio de
sobremesa y portátil que posee elementos de calefacción eléctrica resistentes a la
corrosión y a ataques químicos y mecánicos. Útil para calentar recipientes con
líquidos, materiales de vidrio, o el contenido dentro de ellos, de forma uniforme y
controlada.
Contador de colonia: Este aparato sirve para contar colonias de bacterias y
microorganismos que por lo general crecen en una placa de agar.
Las principales ventajas que ofrece este instrumento se encuentran en el conteo
fácil, rápido y seguro de las colonias bacteriológicas, así como su fácil manejo.

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1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Permite la visualización de colonias bacterianas en un fondo oscuro, ya sea con o

sin sistema de iluminación, uniforme y brillante.
Asa bacteriológica: es el instrumento utilizado en el cultivo de microorganismos
para transvasar un inóculo tomado de la solución madre a un nuevo medio de
cultivo. Para ello el asa se calienta al rojo vivo para esterilizarla y, cuando se ha
enfriado, se toma una muestra del cultivo bacteriano que se desea.
Tintes: son sustancias que tienen la capacidad de teñir células, estructuras o
tejidos; y de acuerdo con su origen, permiten hacer visibles los objetos
microscópicos y transparentes, conocer su forma y tamaño, así como sus
estructuras internas y externas.
Azul de metileno: se utiliza como indicador ácido-base, desnaturalizador de
alcohol, tinción biológica, tinte textil, y como indicador de sales de cobre.
Cristal violeta: se utiliza como indicador ácido-base, desnaturalizador de
alcohol, tinción biológica, tinte textil, y como indicador de sales de cobre.
Safranina: se usa para diferenciar una estructura celular previamente teñida
con otro colorante. Se utiliza en distintas técnicas histológicas que detectan
células entero-cromafines del tracto gastrointestinal, el protoplasma y núcleo
de microorganismos patógenos.
Rejilla: Se utiliza en el laboratorio de química para colocar los materiales que van
a ser calentados. La rejilla de asbesto es la encargada de repartir la temperatura de
manera uniforme cuando se calienta con un mechero. Para esto se usa un trípode
de laboratorio, ya que sostiene la rejilla mientras es calentada.
Aceite de inmersión: es muy utilizado en las observaciones microscópicas ya
que brinda la propiedad de concentrar la luz cuando esta pasa a través del objetivo
de 100X del microscopio, aumentando su poder de resolución.
Porta y cubre objetos: se utilizan para montar o colocar las muestras de una forma
que sea más fácil de manejar y que las proteja de la contaminación adyacente.
Incinerador: es un dispositivo empleado en los laboratorios de microbiología
para esterilizar instrumentos, que consiste en un tubo de cerámica rodeado de metal
y con una porción hueca en el centro. Este equipo está especialmente diseñado
para esterilizar asas y agujas de inoculación de metal sin emplear una llama abierta.
Potenciómetro o pH metro: es un instrumento científico que mide la actividad del
ion hidrógeno en soluciones acuosas, indicando su grado de acidez o alcalinidad
expresada como pH. El medidor de pH mide la diferencia de potencial eléctrico entre
un electrodo de pH y un electrodo de referencia.
Aparato de filtración por membrana: Es una tecnología que utiliza
una membrana porosa o filtro como barrera selectiva para filtrar partículas líquidas
o retener moléculas de tamaño y peso molecular mayores que el diámetro de los
poros.
Micropipeta: es un instrumento importante utilizado para medir pequeños
volúmenes de líquido con precisión.

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1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Conclusiones
En vistas de todo lo anterior, se pudo estudiar una serie de equipos e instrumentos
que se utilizarán a lo largo del semestre en los próximos laboratorios. Cada uno de
ellos tiene una función específica que ayuda al estudio de la morfología de
diferentes microorganismos. Se pudo observar cómo algunos instrumentos o
sustancias sirven únicamente para ciertos organismos, su uso es exclusivo,
mientras otros instrumentos se pueden usar en todos los organismos
microscópicos. Es importante que se tenga claro la finalidad de cada uno para
darles buen uso en las sesiones de laboratorio.

Referencias
Microbiología, Genevieve Gray Jay.
Microbiología, Pelzar/Reid/Chan. Cuarta edición, 1982.
Hector Mario Buritaca H., Michelle Mejía, María del Mar Álvarez. Vol. 6 (2017).
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1 Informe 1
Introducción al Laboratorio de
Microbiología

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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

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antificar%20Legionella%20pneumophila.

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Introducción al Laboratorio de
Microbiología

Anexo

Ilustración 1. Tipos de microorganismos. Fuente:

https://es.dreamstime.com/sistema-del-vector-
ejemplo-de-los-microorganismos-
image108044110#_

Ilustración 3. Tipos de bacterias según su forma.

Fuente:
https://www.udocz.com/apuntes/199462/tipos-de-
bacterias-segun-su-forma

Ilustración 2. Tipos de Bacterias según la

temperatura. Fuente:
https://twitter.com/gram_positivo/status/105701999
6767948800

Ilustración 4. Ejemplos de frotis. Fuente:

https://es.quora.com/Cu%C3%A1l-es-el-
prop%C3%B3sito-de-aplicar-un-tinte-a-un-frotis-
bacteriano

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