Este documento describe los procedimientos para detectar aerobios, coliformes y Staphylococcus aureus en alimentos mediante técnicas microbiológicas. Incluye preparación de diluciones decimales, siembra en placas de agar y caldos, e interpretación de resultados.
0 calificaciones0% encontró este documento útil (0 votos)
21 vistas4 páginas
Este documento describe los procedimientos para detectar aerobios, coliformes y Staphylococcus aureus en alimentos mediante técnicas microbiológicas. Incluye preparación de diluciones decimales, siembra en placas de agar y caldos, e interpretación de resultados.
Este documento describe los procedimientos para detectar aerobios, coliformes y Staphylococcus aureus en alimentos mediante técnicas microbiológicas. Incluye preparación de diluciones decimales, siembra en placas de agar y caldos, e interpretación de resultados.
Este documento describe los procedimientos para detectar aerobios, coliformes y Staphylococcus aureus en alimentos mediante técnicas microbiológicas. Incluye preparación de diluciones decimales, siembra en placas de agar y caldos, e interpretación de resultados.
Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
Descargar como pdf o txt
Está en la página 1/ 4
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
MÉTODOS DE DETECCIÓN DE AEROBIOS, COLIFORMES Y St. aureus
Laboratorio 3 de Microbiología (SL11LA27) FCB -DAMyP-SL11LA27-PT-
Versión: 2.0 007- pág. 1-4 007-V2- 2024 UNAP Iniciado por: Blga. María Elena Bendayán Acosta, Dra. Aprobado por: Blgo. Freddy O, Espinoza Campos, Dr.
PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO (POE)
CODIGO: FCB-DAMyP-SL11LA27-PT-007-V2- 2024-UNAP
NOMBRE DE LA ASIGNATURA Microbiología General
PLAN DE CÓDIGO DE LA POE-T DURACIÓN ESTUDIOS ASIGNATURA 007 2015 FIA 10027 2 horas Versión Nro. Fecha de Revisión Descripción Modificación Aprobado por: Blgo. Freddy O. REVISIÓN Versión2.0 8-abril-2024 Espinoza Campos, Dr HISTÓRICA
1 ANTECEDENTES
Este (POE) describe como llevar a cabo el reconocimiento de bacterias indicadoras de calidad en un alimento, aplicando las normas de bioseguridad en el trabajo de laboratorio; como el correcto lavado de las manos, así como el uso de materiales de protección personal: guantes, mascarillas gorro y bata.
2 COMPETENCIAS ➢ Conoce los métodos más importantes de aislamiento de bacterias indicadoras de calidad en los alimentos. 3 AMBITO DE APLICACIÓN ➢ Este POE es aplicable al laboratorio SL11LA27 4 RESPONSABILIDADES Es responsabilidad del docente de la asignatura asegurarse que el estudiante tenga conocimiento sobre las normas de bioseguridad y hacer cumplir las buenas prácticas de laboratorio. El estudiante es responsable de aplicar las buenas prácticas y las normas de bioseguridad durante el trabajo en el laboratorio.
5 FUNDAMENTO TEÓRICO
Se considera que todo los microorganismos implicados en enfermedades de origen alimetario son patógenos entéricos, con excepción de Staphylococcus aureus, clostridium botulinum(excepto en caso de botulismo infantil), Clostridium perfringens y mohos toxigénicos. Esto significa que pueden sobrevivir, multiplicarse o establecerse en el tracto gastrointestinal de seres humanos, así como de animales y aves (algunos de los cuales aprovechan para su alimentación). Un producto contaminado de manera directa o indirecta con materiales fecales de cualesquiera de estas fuentes, en teoría UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS MÉTODOS DE DETECCIÓN DE AEROBIOS, COLIFORMES Y St. aureus
Laboratorio 3 de Microbiología (SL11LA27) FCB -DAMyP-SL11LA27-PT-
Versión: 2.0 007- pág. 1-4 007-V2- 2024 UNAP Iniciado por: Blga. María Elena Bendayán Acosta, Dra. Aprobado por: Blgo. Freddy O, Espinoza Campos, Dr.
contiene uno o más de estos patógenos y por lo tanto pueden ser potencialmente peligroso para quienes lo consuman. Por lo que se hace necesario Saber con certeza si los alimentos se hallan libres de algunos de algunos patógenos entéricos como Salmonella, Escherichia coli, Yersinia enterocolitica, Vibrio parahaemolyticua, para así implantar y llevar a cabo normas regulatorias que protejan a los consumidores. Los procedimientos que se usan para aislar y confirmar la presencia de un patógeno en un alimento, comprende varios pasos, cuya ejecución toma relativamente mucho tiempo y son costosos. Algunas de las nuevas pruebas de detección, que comprenden técnicas moleculares, requieren de una inversión alta de inicio y habilidades técnicas altamente especializadas. Se han sugerido numerosos criterios para seleccionar un grupo o especie de bacterias como indicador de la presencia de patógenos causante de enfermedades entéricas de origen alimentario. Es evidente que ningún grupo o especie de bacteria puede satisfacer todos los criterios de lo que debe ser un indicador ideal. 6 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL a. Materiales Reactivos Equipos Material de apoyo ➢ Tubos de Ensayo con ➢ NO APLICA ➢ Autoclave. ➢ Muestras de agua peptonada al 0.1% ➢ Horno. alimentos ➢ Matraces Erlenmeyer
con 90 ml. de agua
peptonada al 0.1% ➢ Placas de Petri con agar
Baird Parker ➢ . Tubos con caldo Lauril
Sulfato. ➢ Mecheros de alcohol.
➢ Encendedor.
➢ Pipetas ➢ Bolsas de polietileno
➢ Placas de Petri.
➢ Erlenmeyer con agar
Plate Count.
b. Desarrollo del procedimiento
➢ PREPARACIÓN DE LAS DILUCIONES DECIMALES
➢ Pesar asepticamente10g de muestra (sólido) ó 10 ml de muestra (líquido) del alimento. ➢ Adicionar lo pesado a 90 ml. del diluyente, agua peptonada al 0.1 %., así se obtiene la primera dilución de la serie 1:10 (10-1). UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS MÉTODOS DE DETECCIÓN DE AEROBIOS, COLIFORMES Y St. aureus
Laboratorio 3 de Microbiología (SL11LA27) FCB -DAMyP-SL11LA27-PT-
Versión: 2.0 007- pág. 1-4 007-V2- 2024 UNAP Iniciado por: Blga. María Elena Bendayán Acosta, Dra. Aprobado por: Blgo. Freddy O, Espinoza Campos, Dr.
➢ Homogenizar 10 veces con una pipeta estéril la dilución 10-1 y transferir 1 ml de
la dilución a un tubo que contiene 9 ml de diluyente obteniendo la dilución 1:100 (10-2) desechar la pipeta usada. ➢ Repetir este proceso hasta completar las diluciones deseadas.
BACTERIAS AEROBIAS MESOFILAS
➢ Pipetear por duplicado a placas de Petri estériles alícuotas de 1 ml partir de diluciones 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, por cada dilución. Se sugiere esta serie de diluciones cuando no se conoce el rango aproximado de número de bacterias. ➢ Agregar rápidamente a las placas de petri 15 ml de agar licuado y temperado. ➢ Mezclar inmediatamente las alícuotas con el agar mediante una serie de movimientos. Una secuencia satisfactoria de pasos es la siguiente: a) mover la placa de arriba a abajo 5 veces en una dirección, b) rotar 5 veces la placa en el sentido de las agujas del reloj, c) mover la placa 5 veces en la dirección que haga ángulo recto al usado en el primer tiempo, d) rotar 5 veces la placa en sentido inverso al de las agujas del reloj.
➢ Una vez solidificado el agar, invertir las placas e incubarlas a 37 ºC durante 48
horas.
COLIFORMES ➢ Pipetear 1ml de cada una de las diluciones, en tubos con caldo lauril sulfato. ➢ Incubar los tubos a 37 ºC por 24 a 48 hr.
Staphylococcus aureus ➢ Pipetear 0.1 ml de cada dilución y depositar por duplicado en placas que contienen agar Baird Parker con la superficie previamente secadas, dispersar cada inóculo con un extensor de vidrio por toda la superficie del medio aparezca seca. ➢ Incubar las placas en posición invertida a 37 ± 1ºC durante 48 horas.
c. Cálculos y Resultados NO APLICA d Limitación del procedimiento NO APLICA 7 INTERPRETACIÓN Y CONCLUSIONES BACTERIAS AEROBIAS MESOFILAS
➢ Crecimiento de colonias en toda la placa.
COLIFORMES ➢ Verificar si hay presencia de gas en las campanas de durhan UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS MÉTODOS DE DETECCIÓN DE AEROBIOS, COLIFORMES Y St. aureus
Laboratorio 3 de Microbiología (SL11LA27) FCB -DAMyP-SL11LA27-PT-
Versión: 2.0 007- pág. 1-4 007-V2- 2024 UNAP Iniciado por: Blga. María Elena Bendayán Acosta, Dra. Aprobado por: Blgo. Freddy O, Espinoza Campos, Dr.
Staphylococcus aureus ➢ Colonias de color negro con halo de precipitado y halo claro.
8 ANEXOS FLUJOGRAMA
NO APLICA
9 MECANISMOS DE EVALUACIÓN Cuestionario 8% 10 MEDIDAS DE SEGURIDAD
Se aplica todo lo contemplado en el POE 001-V1-2018-UNAP de medidas de bioseguridad de
los laboratorios de la FCB. 11 DISPOSICIÓN DE DESECHOS BIOLOGICOS Y QUIMICOS
Se aplica todo lo contemplado en el POE 002-V1-2018-UNAP de manejo de residuos biológicos
y químicos en los laboratorios de la FCB. 12 REFERENCIAS
1. BOTERO, O. J.M.; TORO, C.D.C.; CASTAÑO, Z. J. 2011. Manual Práctico de
Microbiología General. 1era. Edic. Edit. Universidad de Calda. Colombia. 2. WORLD HEALTH ORGANIZATION.2008. Good Laboratory Practice . (GLP).Trainer Manual. 2da. Edic. Edit. WHO.
