procedimiento, la inmovilización tiene lugar durante el ensayo en la 8. Cronometro 4.

Agitar suavemente la microplaca durante 20-30 segundos para

superficie de los pocillos de la microplaca a través de la interacción de 9. Materiales para control de calidad mezclar y cubrir.
streptadivina que recubre el pozo y el anticuerpo anti-GH monoclonal 5. Incubar durante 45 minutos a temperatura ambiente.
marcado con biotina agregado en forma exogéna. 5.0 PRECAUCIONES 6. Eliminar el contenido de la microplaca mediante decantación o
aspiración. Si decanta, secar la placa con papel absorbente.
Al mezclar el anticuerpo marcado con biotina monoclonal, el anticuerpo Para el uso Diagnóstico in Vitro 7. Adicionar 0.350ml (350μl) de solución de lavado (ver Sección
marcado con enzima y el suero que contiene el antígeno nativo, da No para el Uso Interno ni Externo en Humanos o Animales reparación de Reactivos), decantar, secar o aspirar. Repetir cuatro
lugar a una reacción entre el antígeno nativo y los anticuerpos, sin (4) veces más para obtener un total de cinco (5) lavados. Se puede
competencia u impedimentos estéricos, para formar un complejo Todos los productos que contienen suero humano se encontraron no utilizar un lavador automático o manual de placas. Seguir las
soluble tipo sándwich. La interacción se ilustra mediante la siguiente reactivos para el Antígeno de Superficie de la Hepatitis B, VIH 1 y 2 y instrucciones del fabricante para asegurar el uso apropiado. Si
ecuación: anticuerpos para VHC por los reactivos licenciados por la FDA. Incluso se utiliza un frasco de lavado, llenar cada pozo oprimiendo el
Ka no se ha conocido prueba que pueda ofrecer seguridad a pesar que los recipiente (evitar las burbujas de aire) para distribuir el lavado.
Enz agentes infecciosos estén ausentes, todos los productos séricos de Decantar el lavado y repetir cuatro (4) veces adicionales.
Ac(x-GH) + AgGH.+ Btn Ac(m) ENZ
Ac(x-GH)–AgGH - BtnAc(m)
humanos serán manejados como potencialmente peligrosos y capaces 8. Adicionar 0.100 ml (100μl) de la solución de trabajo – reactivo de
K-a de transmitir enfermedades. Los procedimientos de laboratorio señal a todas los pozos (Consultar la sección sobre Preparación de
Btn
Ac(m) = Anticuerpo monoclonal Marcado con biotina (cantidad en excelentes para el manejo de productos sanguíneos pueden ser Reactivo). Siempre adicione reactivos en el mismo orden para
exceso) encontrados en el Centro de Control de Enfermedades/ Instituto minimizar las diferencias del tiempo de reacción entre los
AgGH = Antígeno nativo (cantidad variable) Nacional de Salud, “Bioseguridad en Laboratorios Microbiológicos y pozos.
ENZ
Ac(p)= Anticuerpo marcado con Enzima (Cantidad en exceso) Biomédicos”, 2da Edición, 1988, HHS Publicación Nº (CDC) 88-8395. NO AGITAR LA PLACA DESPUÉS DE LA ADICIÓN DE SOLUCIÓN
Enz
Ac(x-GH) - AgGH. - Btn Ac(m)= Complejo en sándwich 9. Incubar a temperatura ambiente durante cinco (5) minutos en la
Ka = Tasa Constante de Asociación La Eliminación Segura de los componentes del kit deber realizarse oscuridad.
k-a = Tasa Constante de Disociación de acuerdo a la regulación local y a los requerimientos 10. Leer las unidades relativas de luz (RLUs) en cada pozo, por un
Sistema de Prueba Hormona de estatutarios. mínimo de 0.5-1.0 segundos, utilizando un luminómetro de
Simultáneamente el complejo se deposita en el pozo a través de la microplacas. Los resultados deben leerse dentro de los 30 minutos
crecimiento (hGH) reacción de alta finidad de la estreptavidina y el anticuerpo marcado 6.0 RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS a partir de la adición de la solución de trabajo
con biotina. Esta interacción se ilustra a continuación.
Código de producto: 1775-300 Enz
Ac(x-GH) - AgGH.- Btn Ac(m)+ Estrept.CW ⇒ Complejo inmovilizado. Las muestras deben ser sangre, suero y se deben emplear las 10.0 CÁLCULO DE RESULTADOS
Estrept.CW. = estreptavidina inmovilizada en el pozo. precauciones en la recolección de muestras por punción venosa para
1.0 INTRODUCCIÓN Complejo inmovilizado = Complejo en sándwich ligado al pozo. las muestras de suero o sangre. Para lograr una comparación precisa a Se utiliza una curva dosis respuesta para evaluar la concentración de
Uso Previsto: Determinación cuantitativa de la concentración de valores normales establecidos, se debe tomar una muestra de suero en la Hormona de crecimiento (hGH) en muestras desconocidas.
Después de lograr el equilibrio, la fracción anticuerpo unido se separa ayunas. La sangre debe ser recolecta en tubo para punción venosa de 1. Registrar las RLUs obtenidas de la impresión del luminómetro de
Hormona del Crecimiento humano mediante ensayo de del antígeno no ligado mediante decantación o aspiración. La actividad
quimioluminiscencia por microplacas. tapa roja sin aditivos o anti-coagulantes. Dejar que la sangre se coagule microplacas como se muestra en el ejemplo 1.
enzimática en la fracción de anticuerpo unido será directamente y centrifugar la muestra para separar el suero de las células. 2. Graficar las RLUs para cada calibrador en duplicado vs. la
proporcional a la concentración del antígeno nativo. Al utilizar varias concentración correspondiente hGH en ng/ml en papel lineal de
2.0 RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO referencias de sueros de valores conocidos de antígenos, se genera Las muestras se pueden refrigerar a 2-8ºC por un tiempo máximo de 5 gráficos (no promediar los duplicados de los calibradores antes de
una curva de dosis respuesta a partir de la cual se evalúa la Días. Si la muestra(s) no pueden ser procesadas durante este tiempo, graficar).
La Hormona del Crecimiento (hGH, somatotropina), secretada por la concentración de antígeno de una muestra desconocida. deberan almacenarse a temperatura de –20ºC hasta por 30 días. Evitar
pituitaria anterior, es un polipéptido con dos puentes disulfuro de 3. Trazar la mejor curva posible a través de los puntos graficados.
la congelación y descongelación repetidas. Cuando la prueba se realiza 4. Para determinar la concentración de hGH para una muestra
cadena interna, la cual circula libre o enlazada a una serie de proteínas 4.0 REACTIVOS por duplicado, se requieren 0.100ml (100µl) de la muestra.
unidas a GH. Se han identificado varias formas de la hormona del desconocida, localizar las RLUs promedio de esta sobre eje vertical
crecimiento.1 Siendo la mayor la de un peso molécular de 22.000 del grafico, encontrar el punto de intersección sobre la curva y lea
Materiales suministrados: 7.0 CONTROL DE CALIDAD la concentración (en µIU/ml) a partir del eje horizontal del grafico
daltons que contiene 191 residuos de aminoácidos. Una variante de A. Calibradores de la hormona de crecimiento – 1 ml/vial- Iconos
20.000 daltones, que posee todas las funciones biológicas conocidas (los duplicados de la muestra desconocida son promediados como
A-F Cada laboratorio deberá ensayar controles a los niveles de rango bajo, se indica). En el siguiente ejemplo, el promedio de las RLUs (20937)
de la GH, se ha reconocido también como una variante importante. Las 6 viales de referencia para el antígeno hGH en suero humano a normal y elevados para monitorear desempeño del ensayo. Estos intercepta con la curva dosis respuesta en 27.5 µIU/ml en
acciones biológicas primarias de la hormona se encuentran en niveles de 0 (A), 2 (B), 10 (C), 25 (D), 50 (E) y 150 (F) µIU/ml. controles serán tratados como valores desconocidos y los valores concentración hGH (ver figura 1).
promoción directamente relacionadas con el crecimiento. La hormona Almacenar de 2-8ºC. Un preservante ha sido adicionado. (Calibrado determinados en cada procedimiento de prueba realizada. Se
GH ejerce su efecto directamente sobre órganos blancos tales como de acuerdo con la normatividad internacional WHO 2do IS # mantendrán gráficos de control de calidad para efectuar un seguimiento Nota 1: El software de reducción de datos diseñado para análisis CLIA
huesos y músculos e indirectamente a través de la liberación de 98/574). del desempeño de los reactivos suministrados. Se deberán utilizar puede ser usado para la reducción de datos. Si se utiliza un software, la
somatomedinas, una familia de hormonas de crecimiento similares a la
E métodos estadísticos pertinentes para evaluar las tendencias. Las validación del software debe ser realizada
insulina (IGF), producidas en el hígado.2 En particular la somatotropina B. Reactivo trazador hGH – 13 ml/vial – icono desviaciones significativas con respecto del desempeño establecido
C (IGF-1) es esencial para el desarrollo óseo durante la infancia. Un (1) vial que contiene peroxidaza de rábano (HRP), marcado con EJEMPLO 1
indicaran un cambio no detectado en condiciones experimentales o
un anticuerpo monoclonal de ratón con biotina IgG en una solución degradación de los reactivos del kit. Se deben utilizar reactivos frescos
La utilidad clínica de la medición de la hormona de crecimiento (GH) en amortiguadora, colorante y preservante. Almacenaje de 2-8ºC.

Muestra

De pozo
Numero

RLU (A)

RLU (B)
Media

(µUI/ml)
Valor
niños, es útil para evaluar el desarrollo lineal de los huesos a lo largo para determinar el motivo de la variación.
C. Pozos para reacción de luz – 96 pozos – icono ⇓

I.D.
de la placa epífea. Los niveles anormalmente elevados conducen al Una microplaca de 96 pozos recubierta con estreptavidina
gigantismo mientras que la ausencia total disminuye la taza de 8.0 PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
empacado dentro de una bolsa de aluminio con un agente
crecimiento desde una tercera parte hasta la mitad de lo normal. En desecante. Almacenar de 2-8ºC.
adultos, se han fusionado las placas del crecimiento epífiseo; así el 1. Buffer de Lavado
A1 10
exceso de GH produce gradualmente acromegalia, un engrosamiento D. Concentrado solución de lavado – 20 ml/vial – Icono Diluir los contenidos del Concentrado de Lavado a 1000 ml con Cal A 10 0
agua destilada o desionizada en un contenedor de almacenaje B1 9
de los huesos del cráneo, manos y pies. Un (1) vial que contiene un surfactante en solución salina
adecuado. Almacenar a temperatura ambiente de 2-30ºC hasta por C1 274
amortiguada. Un preservante ha sido adicionado. Almacenar de 2- Cal B 274 2.0
En este método, el calibrador GH, la muestra del paciente o control se 60 días D1 274
8ºC.
adicionan inicialmente a un pozo recubierto de streptadivina. Los A 2. Solución de trabajo reactivo de señal - almacenar a 2-8°C E1 5146
E. Reactivo de Señal A – 7 ml/vial – Icono C Cal C 5215 10.0
anticuerpos monoclonales marcado con biotina y los marcados con Determinar la cantidad de reactivo necesario y preparar mezclando F1 5284
Un (1) vial que contiene luminol en solución tamponada. Almacenar
enzimas (dirigidos contra epítopes claramente diferenciados del GH) porciones iguales del reactivo de señal A y reactivo de señal B en G1 18854
de 2-8ºC. Cal D 19228 25.0
son adicionados. La reacción entre los distintos anticuerpos GH y GH B un recipiente limpio. Por ejemplo, adicionar 1ml de A y 1ml de B por H1 19602
F. Reactivo de Señal B – 7 ml/vial – Icono C
nativo formara un complejo en sándwich que se enlaza con la cada 2 tiras de 8 pozos (se prepara pequeño exceso de solución). A2 35865
Un (1) frasco que contiene Peroxido de Hidrógeno (H2O2) en Eliminar la porción no utilizada, en caso de no emplearse Cal E 36073 50.0
streptadivina que recubre el pozo. solución tamponada. Almacenar de 2-8ºC. B2 36282
dentro de las 36 horas a partir de mezclado. Si se piensa utilizar C2 101083 10000
G. instrucciones del producto Cal F 150.0
Después de terminar el periodo requerido de incubación, el conjugado totalmente los reactivos, dentro del límite de tiempo antes señalado, 0
D2 98917
de enlace de anticuerpo de la enzima – hormona del crecimiento, es verter el contenido del reactivo de señal B dentro del reactivo de
Nota 1: No usar reactivos más allá de la fecha de expiración E2 5782
separado del conjugado no enlazado mediante aspiración o señal A y etiquetar según corresponda. Ctrl. 1 5706 10.5
Nota 2: Evite la exposición prolongada al calor y a la luz. Los reactivos F2 5630
decantación. La actividad de la enzima presente en la superficie del abiertos son estables por 60 días cuando son almacenados a 2-
pozo se cuantifica por reacción utilizando un sustrato adecuado para Nota: No use reactivos que estén contaminadas o que tengan G2 46478
8ºC. La estabilidad del kit y sus componentes están Ctrl. 2 46981 62.9
producir color. crecimiento bacteriano. H2 47484
identificados en la etiqueta. A3 20812
Nota 3: Ver el final de este inserto para varias configuraciones de Paciente 20937 27.5
El uso de varias referencias de suero de niveles conocidos de la 9.0 PROCEDIMIENTO DE PRUEBA B3 21062
reactivos por tamaño del kit. Vea el fin Todos los reactivos vienen
hormona del crecimiento permite la construcción de una curva dosis
para una microplaca de 96 pozos.
respuesta en cuanto a actividad y concentración. A partir de la Antes de proceder con el análisis lleve todos los reactivos, las Los datos presentados en el Ejemplo 1 y Figura 1 son ilustrativos
comparación con la curva de dosis respuesta se puede correlacionar la referencias séricas y los controles a temperatura ambiente (20-27ºC). únicamente y no deben ser usados en lugar de una curva de dosis
4.1 Requeridos Pero No Suministrados:
actividad de una muestra desconocida con la concentración de la **El procedimiento de la prueba deben ser desarrollado por respuesta procesada para cada ensayo. Adicionalmente los RLU de los
1. Pipeta para dispensar volúmenes de 0.050ml (50µl) con una
hormona del crecimiento. personas expertas o profesionales entrenados** calibradores han sido normalizados a 100.000 RLU para el calibrador F
precisión superior a 1.5%.
1. Marcar los pozos de la microplaca para cada calibrador, control y (mayor producción de luz). Esta conversión minimiza las diferencias
2. Dispensadores para distribuciones repetitivas de 0.100ml y 0.350ml
3.0 PRINCIPIO muestra de paciente para ser procesados por duplicado. Colocar causadas por las eficiencias de los diversos instrumentos que pueden
(100 y 350µl) volúmenes a una precisión de 1.5%.
las tiras no utilizadas de micro pozos nuevamente dentro de la ser utilizados para medir la luz.
3. Lavador de microplacas o frasco lavador (opcional)
Inmunoensayo enzimométrico (TIPO 3) 4. Luminómetro de microplacas bolsa de aluminio, sellar y almacenar a 2-8ºC.
Los reactivos esenciales requeridos para un inmunoensayo 5. Papel absorbente para secar los pozos de microplacas. 2. Pipetear 0.050 ml (50μl) de calibrador apropiado, control o muestra
enzimométrico incluyen anticuerpos altamente afines y específicos 6. Envoltura plástica o cubiertas de microplacas para los procesos de dentro del pozo asignado.
(enzima e inmovilizados), con reconocimiento de epítopes claramente incubación 3. Adicionar 0.100ml (100μl) de solución de reactivo trazador de hGH
diferenciados, en exceso, con antígenos nativos. De acuerdo con este 7. Aspiradora al vacío (opcional) para los procedimientos de lavado. a todos los pozos.
 ‘Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays’ Clin. los analistas que utilicen el método, con una población local propia del 8. Winer LM, Shaw MA, Baumann G. “Basal plasma growth hormone
Chem. 1988:3427-33). Para fines de diagnóstico, los resultados de área en la cual se encuentre ubicado el laboratorio. levels in man: new evidence for rhythmicity of growth hormone
Figura 1 este ensayo deben utilizarse en combinación con el examen clínico, secretion”, J Clin Endocrinol Metab 70, 1678-1686 (1990).
la historia del paciente, y todos los otros hallazgos clínicos. 14.0 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO 9. Van der Berg G, Veldhuis JD, Frölich M, Roelfsema F, “An
4. Para resultados de pruebas válidas, los controles adecuados y otros amplitude-specific divergence in the pulsatile mode of growth
100,000 parámetros deben estar dentro de los rangos listados y hormone (GH) secretion underlies the gender difference in mean GH
14.1 Precisión
90,000 requerimientos del ensayo. La precisión de inter e intra ensayo del sistema de prueba hGH concentrations in men and premenopausal women”, J Clin
80,000 5. Si los kits de prueba están alterados, ya sea por mezcla de partes AccuBind® ELISA se determino mediante análisis de 3 niveles diversos Endocrinol Metab 81, 2460-2467 (1996).
70,000 de diferente kits, lo cual puede producir resultados de prueba falsos de suero control. En las tablas 2 y 3 se encuentra el número (N), valor 10. Albertsson-Wikland K, Rosberg S, Karlberg J, Groth T. “Analysis of
60,000
o si los resultados son interpretados incorrectamente, Monobind no medio (X), desviación estándar (σ) y el coeficiente de variación (C.V) 24-hour growth hormone profiles in healthy boys and girls of normal
tendrá responsabilidad. stature: relation to puberty”, J Clin Endocrinol Metab, 78, 1195-1201
(RLU's)

para cada uno de estos sueros control.

50,000
6. Si se utiliza el sistema de reducción de datos controlados por (1994).
40,000 Computador para interpretar los resultados del ensayo, es necesario TABLA 2
30,000 que los valores de predicción para los calibradores se ubiquen Precisión Intraensayo (Valores en µIU/ml) Revisión: 3 Fecha: 032012 DCO 0641
20,000 dentro del 10% de las concentraciones asignadas. Muestra N X σ C.V. Código de producto: 1775-300
Patient 7. La secreción de la hormona del crecimiento sigue un ritmo
10,000 Nivel 1 24 12.57 0.30 2.4%
circadiano caracterizado por descargas pulsátiles y discontinuas Nivel 2 24 28.73 0.78 2.7% Tamaño 96(A) 192(B)
0
11.0 PARÁMETROS DE C.C. con periodos de intervención durante el día cuando los niveles de Nivel 3 24 62.79 1.55 2.5% A) 1 ml set 1 ml set
GH son indetectables. Los niveles mas elevados, en las dos B) 1 (13 ml) 2 (13 ml)

Reactivos
(llenos)
Con el fin de que se consideren validos los resultados del ensayo, mayores descargas, usualmente suceden dentro de una o dos C) 1 placa 2 placas
TABLA 3
se deberá cumplir con los siguientes criterios: horas después de la aparición del sueño. Otros estímulos D) 1 (20 ml) 1 (20 ml)
Precisión interensayo* (Valores en µIU/ml)
1. La curva dosis - respuesta debe ubicarse dentro de los parámetros fisiológicos de la hormona del crecimiento son el estrés, ejercicio,
comidas de altas en proteínas e hiploglicemia. Muestra N X σ C.V. E) 1 (7 ml) 2 (7 ml)
establecidos. F) 1 (7 ml) 2 (7 ml)
2. Cuatro de 6 pools de control de calidad deben ubicarse dentro de 8. La hiperglicemia inhibe la secreción de la hormona del crecimiento. Nivel 1 14 10.54 1.11 10.5%
los rangos establecidos. La edad es un factor importante en las concentraciones de la Nivel 2 14 23.99 1.20 5.0%
Nivel 3 14 55.04 3.23 5.9% Para Órdenes y Consultas, por favor contáctese
hormona del crecimiento. En el momento del nacimiento, la GH es
12.0 ANÁLISIS DE RIESGOS alta y por lo general desciende con la edad con excepción de un * Medición realizada en varios experimentos por duplicado.
incremento en la producción durante la fase de crecimiento en la
Las fichas de seguridad (MSDS) y el Análisis de Riesgos de este adolescencia. Las mujeres usualmente tienen un 50% de nivel mas 14.2. Sensibilidad
producto están disponibles por requerimiento a Monobind Inc. elevado que los hombres a edades similares. El sistema de prueba hGH AccuBind® ELISA posee una sensibilidad de
12.1 Desempeño del ensayo 9. Debido a que la concentración de la hormona del crecimiento es 0.006 µIU/pozo. Este valor es equivalente a una muestra que contenga
1. Es importante que el tiempo de reacción en cada pozo sea pulsátil y esporádica durante el curso del día (en concordancia con 0.118 µIU/ml concentración de hGH. La sensibilidad analítica (limite de
sostenido en forma constante para resultados reproducibles. su corta vida media), los niveles de la hormona en el suero tomados detección) fue establecido por determinación de la variabilidad del
de forma aleatoria, no arrojan información clínicamente útil. Para calibrador “0 mUI/ml” y usando estadística 2σ (95% de confianza) para Por favor visite nuestra página web para conocer más
2. El pipeteo de las muestras no se extenderá más de 10 minutos para
evitar derivaciones. evitar este inconveniente, se utilizan ensayos decisivos que utilizan calcular la dosis mínima. acerca de nuestros interesantes productos y servicios
3. No se deben emplear muestras altamente lipémicas, hemolizadas o estímulos fisiológicos o farmacológicos para inducir la secreción o
inhibición del GH. Por estas razones, la determinación de la 14.3 Exactitud
contaminadas
hormona del crecimiento por si sola no es suficiente para evaluar la Este sistema de prueba hGH AccuBind® ELISA se comparo con un
4. Si más de 1 placa es usada, se recomienda repetir la curva dosis
condición clínica del paciente. ensayo inmuno de referencia. Las muestras biológicas tomadas de
respuesta.
muestras normales y elevadas fueron probadas. El número total de
5. La adición de la solución de trabajo – reactivo de señal inicia una
13.0 RANGOS Y VALORES ESPERADOS estas muestras fue de 80. La ecuación de regresión de mínimos
reacción cinética. Por tanto, la adición de la solución será
cuadrados y el coeficiente de correlación se calcularon para GH IEMA
adicionada en la misma secuencia para eliminar cualquier
Debido a la naturaleza pulsátil y esporádica de la secreción de la en comparación con el método de referencia. Los datos obtenidos se
desviación durante la reacción.
hormona del crecimiento, los intervalos de referencia para valores observan en la tabla 4.
6. La falla en remover la solución adherente adecuadamente en los
pasos de aspiración o lavado por decantación puede resultar en una básales carecen de significación. Sin embargo, los niveles normales
TABLA 4
pobre replicación y resultados falsos. raras veces han sido reportados por enzima de 150 µIU/ml. Los
pacientes en adecuadas condiciones de reposo y en ayunas (12 horas) Método Media Análisis de La Coeficiente
7. Usar componentes del mismo lote. No mezclar los reactivos de
deberán tener valores de hGH de 60 µIU/ml o menos. (X) ultima Regresión de
diferentes lotes.
Cuadrática Correlación
8. Este inmunoensayo ha sido diseñado de tal forma que el
denominado “Efecto gancho” de dosis elevada no sea un problema Teniendo en cuenta esta condición, se estudiaron 75 adultos Este método 14.5 y=1.03 + 0.121(x) 0.975
para el caso de muestras altas. Las muestras con concentraciones aparentemente saludables para determinar sus condiciones de Referencia 14.1
mayores 150 µIU/ml deberán ser diluidas y reprocesadas. inmunoensayo de la hGH. Los resultados se en encuentran en la Tabla
9. Los pacientes sometidos a tratamiento con hGH pueden desarrollar 1. Existen un sesgo ligero entre el sistema de prueba hGH AccuBind®
anticuerpos para el hGH los cuales pueden interferir en el ensayo ELISA y el de referencia de acuerdo a los valores de medios obtenidos.
causando valores bajos falsos. Las variantes genéticas o los TABLA I La ecuación de regresión de mínimos cuadrados y el coeficiente de
productos de degradación pueden alterar las características de Valores Esperados para hGH AccuBind® ELISA (en µIU/ml) correlación indica que existe una perfecta concordancia entre los
anticuerpos enlazados y afectar los resultados finales. Estas N Media Rango métodos.
muestras pueden mostrar resultados no concordantes en diferentes Muestras 75 9.1 0-55
ensayos que utilicen anticuerpos, los cuales reconocen diversos 14.4. Especificidad
epítopes. Las pruebas inducidas para la respuesta de la hormona de crecimiento La reactividad cruzada del sistema de prueba hGH AccuBind® ELISA
10. Es esencial un pipeteo preciso y exacto así como seguir el tiempo hGH se utilizan normalmente para tener acceso al funcionamiento de la con respecto de las sustancias seleccionadas se evalúo mediante la
exacto y la temperatura requerida. Cualquier desviación de las pituitaria anterior. Los procedimientos estimulatorios miden la capacidad adición de la sustancia de interferencia a una matriz de suero a
instrucciones de uso puede arrojar resultados inexactos. de secreción de la pituitaria anterior en la liberación del hGH. Los niños diversas concentraciones. Se calculo la reactividad cruzada de acuerdo
11. Se deben seguir las buenas prácticas de laboratorio todos los de los cuales se sospecha retardo en el crecimiento son pacientes al radio entre la dosis de la sustancia interferente con la dosis de
estándares nacionales aplicables, regulaciones y leyes de manera comunes para someterlos a las pruebas estimulatorias. Se dispone de hormona de crecimiento necesaria para producir la misma absorbancia.
estricta para asegurar el cumplimiento y uso adecuado del varios ensayos dinámicos para inducir la liberación de hGH: ejercicio,3
dispositivo. administración de L-dopa,4 prueba de tolerancia a la insulina,5 e y Sustancia Reacción cruzada
12. Es importante calibrar todos los equipos, por ejemplo: pipetas, administración de arginina.6 Cada laboratorio deberá evaluar la Hormona del crecimiento (GH) 1.0000
lectores, lavadores y/o instrumentos automatizados con este respuesta normal, sin embargo una liberación pico hGH por enzima de Hormona Luteinizante (LH) < 0.0001
reactivo y realizar un mantenimiento preventivo rutinario 24µIU/ml es probablemente normal para todos los casos. Hormona folículo estimulante (FSH) < 0.0001
13. El análisis de riesgo – como lo requiere la directiva IVD 98/79/EC de
Gonadotropina Coriónica(CG) < 0.0001
la marca CE- para estos y otros dispositivos elaborados por Las pruebas inhibitorias miden la supresión de la liberación hGH a partir Hormona Estimulante de la Tiroides (TSH) < 0.0001
Monobind, pueden ser solicitados vía e-mail: de la pituitaria anterior. Las pruebas inhibitorias son útiles para
Monobind@monobind.com Hormona Prolactina (PRL) < 0.0001
determinar el exceso de hormona de crecimiento y condiciones
resultantes de gigantismo y acromegalia. El ensayo de tolerancia a la
12.2 Interpretación glucosa es una prueba dinámica para medir el exceso de hormona de 15.0 REFERENCIAS
1. Las mediciones y la interpretación de los resultados deben crecimiento. La falla que presentan los niveles de hGH inferiores a
ser desarrollado por personas expertas o profesionales 1µIU/ml dentro de los 60-120 minutos sugiere un exceso de secreción 1. Lewis, UJ, et al, Acta Paediatr, 125, 399 (1994).
entrenados de hGH. 2. Henry, JD, Clinical Diagnosis and Management of Laboratory
2. Los resultados de laboratorio por si solos son únicamente un Methods, WB Saunders Company, 324 (1996).
aspecto para determinar el cuidado del paciente y no deben ser la Es importante tener en cuenta que el establecimiento de un rango de 3. Frasier, SD, Pediatrics, 53, 929 (1978).
única base para una terapia, particularmente si los resultados están valores que puedan esperarse mediante la aplicación de un método 4. Chevenne, D, et al, Horm Res, 40, 168 (1993).
en conflicto con otros determinantes. dado para una población de personas “normales” dependerá de una 5. Dattani, MT, et al, J Endocrinol, 133, 447 (1992).
3. Los reactivos de este Sistema de prueba han sido formulados para serie de factores, entre los cuales están: especificidad del método, 6. Merimee, TJ, et al, N Eng J Med, 276, 434 (1967).
eliminar al máximo las interferencias; sin embargo, el potencial de población estudiada y precisión del método que maneje el analista. Por 7. Kraemer RR, Blair MS, McCaferty R, Castracane VD, “Running-
interacción entre las muestras raras de suero y reactivos de prueba estas razones cada laboratorio deberá utilizar el rango de valores induced alterations in Growth hormone, Prolactin, Triiodothyronine,
pueden provocar resultados erróneos. Anticuerpos heterófilos esperados establecido previamente por el fabricante únicamente hasta and Thyroxine concentrations in trained and untrained men and
pueden causar este tipo de interacciones y suelen causar cuando se puedan determinar rangos dentro del laboratorio por parte de women”, Res Q Exerc Sport, 64, 69-74 (1993).
problemas en los inmunoensayos (Boscato LM Stuart MC.