REPLICACIÓN DEL ADN

El dogma central de la biología molecular rige el flujo de información genética que ocurre en la célula desde el
ADN hasta el ARN.
El ADN contenido en el núcleo tiene la capacidad de auto duplicarse o autorreplicarse, o bien de generar un
ARN mensajero por el proceso conocido como transcripción.
A su vez ese ARN mensajero, desde el núcleo va a pasar al citoplasma, y en el citoplasma es capaz de
codificar en los ribosomas la síntesis de las proteínas en un proceso conocido como traducción.
Es interesante destacar que se ha descrito que algunos ARN virales poseen una enzima denominada
TRANSCRIPTASA REVERSA a partir de la cual,partiendo del ARN se puede sintetizar ADN.
Podemos decir que proteínas como los factores de transcripción modulan la expresión del ADN y a su
vez,priones pueden generar nuevas proteínas.

Un PRIÓN(proteína +infección) es considerado un agente infeccioso, está formado sólo por aminoácidos y su
forma intracelular puede no contener ácido nucleico.
En sí, es una proteína mal plegada capaz de transmitir su forma mal plegada a otras variedades de la misma
proteína.
Produce las llamadas ENCEFALOPATÍAS ESPONGIFORMES TRANSMISIBLES,enfermedades neurológicas
degenerativas, tales como la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob y la de encefalopatía espongiforme bovina.

ESTRUCTURA PRIMARIA DEL ADN

El ADN,al igual que las proteínas posee distintos niveles de organización estructural, un primer orden que
tiene que ver con la estructura primaria se refiere a la secuencia de nucleótidos.
.Estos nucleótidos están unidos entre sí por enlaces fosfodiéster.
.La cadena presenta dos extremos libres: el 5´ unido al grupo fosfato y el 3´ unido a un hidroxilo.
.Cada cadena se diferencia de otra por:
-Su tamaño.
-Su composición
-Su secuencia de bases
.La secuencia se nombra con la inicial de la base que contiene cada nucleótido.
.Tener en cuenta que la información genética está contenida en el orden de los nucleótidos.

ESTRUCTURA SECUNDARIA DEL ADN

La estructura secundaria del ADN consiste en una doble hélice polinucleotídica enrollada alrededor de un eje
imaginario.
En esta doble hélice polinucleotídica se encuentran los puentes de hidrógeno entre bases complementarias
C-G: se establecen 3 puentes
T-A: se establecen 2 puentes
PUENTES DE HIDRÓGENO

Los puentes de hidrógeno estabilizan la estructura secundaria del ADN, las bases de ambas cadenas se
mantienen unidas por medio de estos enlaces de hidrógeno.
El número de enlaces de los mismos depende de la complementariedad de las bases.

ESTRUCTURA TERCIARIA DEL ADN

Se refiere a la conformación helicoidal tridimensional que tiene la misma.

NIVELES SUPERIORES DE EMPAQUETAMIENTO DEL ADN

.El ADN se une a proteínas básicas llamadas histonas para compactar mucho.
.La unión con histonas genera estructuras denominadas nucleosomas.
.Cada nucleosoma está compuesto por un octámero de histonas.
.Cada tipo de histona se presenta en un número par.
El conjunto de la estructura así enrollada se denomina FIBRA DE CROMATINA de 100 amstrong, que tiene
un aspecto repetitivo en forma de COLLAR DE PERLAS,donde las perlas son los nucleosomas.
La fibra de cromatina de 100 armstrong se enrolla sobre sí misma y forma la fibra de cromatina de 300
armstrong o SOLENOIDES, que también se enrolla sobre sí misma y así sucesivamente hasta que cada
doble hélice de ADN forma un CROMOSOMA(este es el máximo empaquetamiento y se produce cuando la
célula se va a dividir).

AUTODUPLICACIÓN o REPLICACIÓN ADN

Es la síntesis de una molécula bicatenaria de ADN hija idéntica al ADN progenitor.
Cada hebra del ADN original actúa como patrón para la copia y origen de una nueva hebra hija, por ello se
dice que la replicación del ADN es semiconservativa.

La duplicación del ADN ocurre solamente en la fase S del ciclo celular

Características que posee la replicación del ADN:

REPLISOMA

En la duplicación del ADN intervienen los replisomas,que son el conjunto de proteínas comprometidas en la
replicación del ADN.

ETAPAS DE LA REPLICACIÓN:

1. RECONOCIMIENTO DEL ORIGEN

En una primera etapa se reconoce el punto de iniciación gracias a una enzima que es una ARN polimerasa
ADN dirigida.
Es importante destacar que en eucariontes existen proteínas asociadas a las histonas del nucleosoma que
sirven para fijar un punto determinado de la doble hélice a partir del cual las cadenas empiezan a
desenrollarse.
Este desenrollamiento se produce por fijación en sitios específicos de una serie de proteínas que se
denominan PRIMOSOMAS.

2. DESENROLLAMIENTO DE LA DOBLE HÉLICE

En segundo lugar se produce el desarrollamiento de la doble hélice gracias a la ruptura de los puentes de
hidrógeno que es catalizada por la enzima helicasa, con gasto de energía y a la intervención de las
PROTEÍNAS DESENRROLLANTES que mantienen las dos hebras de ADN separadas.

HELICASA: separa las dos hélices por ruptura de los puentes de hidrógeno que mantienen las bases
apareadas en los extremos de la horquilla de replicación. Requiere de la hidrólisis de ATP.
PROTEÍNA HÉLICE DESESTABILIZANTE: se unen en forma estequiométrica a restos de nucleótidos una
vez que la helicasa separa las cadenas complementarias del ADN patrón, evitando que vuelvan a aparearse.

Ya que el desenrollamiento crea tensiones por torsión en otros puntos de la molécula de ADN, las
TOPOISOMERASAS rompen las uniones fosfodiester de una de las cadenas permitiendo que gire libremente
y evitando esa tensión,una vez que las cadenas se desenrrollaron, se vuelven a sellar la mella sin gasto de
ATP.
.TOPOISOMERASA I: introduce la ruptura en una sola cadena del ADN lineal.
.TOPOISOMERASA II: introducen una ruptura en ambas cadenas y desenrolla el ADN circular mitocondrial.

3. SÍNTESIS DEL ARN PRIMER,CEBADOR o INICIADOR

La primasa, tomando como guía el ADN molde, introduce un ribonucleótido según las leyes de Watson y Crick

Así se va realizando en esta tercera etapa la síntesis de los ARN primers, mientras que las proteínas
desenrollantes siguen manteniendo separadas ambas cadenas polinucleotídicas para facilitar la replicación
del ADN.

4.SE FORMA ADN SOBRE LOS ARN´s CEBO POR LA ADN POLIMERASA

La cadena polinucleotídica que cursan sentido 3´→ 5 ́ va a ser leída en sentido 5´→ 3´ y que la
síntesis de la nueva cadena polinucleotídica se va a dar de manera continua.
En la hebra superior que se extiende en sentido 5´→ 3´, la síntesis se hace en sentido 5´→ 3
´pero en forma de pequeños fragmentos es decir en forma totalmente discontinua.

La hebra que se sintetiza de manera continua se le denomina HEBRA LÍDER y la hebra que se sintetiza de
manera discontinua HEBRA SEGUIDORA.
La cadena 5´→ 3´ no puede replicarse en forma continua, ya que el avance de la horquilla es en
dirección contraria al progreso de la ADN polimerasa Alfa, por lo tanto se hacen fragmentos
cortos denominados FRAGMENTOS DE OKAZAKI.
Este fenómeno se produce porque la síntesis o replicación va siempre en sentido 5´→ 3´ y la
cadena complementaria en neoformación es antiparalela.
En este caso, la replicación es más lenta y la cadena neoformada se llama HEBRA RETRASADA.

VARIEDADES DE ADN POLIMERASAS

REQUERIMIENTOS DE LAS ADN POLIMERASAS

ADN POLIMERASA ALFA

Está presente en el núcleo y es responsable de la replicación de los cromosomas.
La enzima cataliza la adición de desoxinucleótidos trifosfatadas de tal manera que la cadena de ADN hija va
creciendo de a una en una en las unidades de nucleótidos y se libera en la reacción pirofosfato, que es
hidrolizada por la pirofosfatasa

5. ENDONUCLEASAS PRODUCE LA ESCISIÓN DE LOS ARN´s CEBOS, CON FORMACIÓN DE LOS

FRAGMENTOS DE OKAZAKI, en la hebra discontinua.

6. SE PRODUCE EL RELLENADO DE LAS BRECHAS POR PARTE DE LA ADN POLIMERASA

7. LA ADN LIGASA UNE,MEDIANTE ENLACES FOSFODIÉSTER La ADN 3´→ 5´ LOS SEGMENTOS DE

ADN NEOFORMADOS

REPARACIÓN DEL ADN

El ADN tiene la capacidad de ser reparado por enzimas específicas.

1. Defecto producido por la luz ultravioleta ,genera dímeros de timina

La luz ultravioleta genera que dos nucleótidos de timina que se adosen entre sí formando una sustancia
carcinogénica, una vez reconocido esto, la célula se encarga de reparar el defecto.

2. INCISIÓN POR UNA ENDONUCLEASA

Una vez reconocido el dímero,las endonucleasas realizan la incisión para permitir su reparación.

3. REMIENDO POR LA ADN POLIMERASA BETA

Posteriormente la ADN polimerasa Beta se encargará de remendar la brecha ocasionada por las
endonucleasas.

4.HIDRÓLISIS DEL DÍMERO Y RELLENADO DE LA BRECHA

5. UNA ADN LIGASA CATALIZA LA FORMACIÓN DE LOS RESPECTIVOS PUENTES FOSFODIÉSTER
PARA CERRAR DEFINITIVAMENTE LA BRECHA

XERODERMIA PIGMENTOSA: una rara afección que se transmite de padres a hijos.La xerodermia
pigmentosa ocasiona que la piel y el tejido que cubre los ojos sean extremadamente sensibles a la luz
ultravioleta. Por incapacidad de reparación de los daños que se generan en el ADN, algunas personas
también presentan problemas en el sistema nervioso.

REPARACIÓN DEL ADN Y GENES INVOLUCRADOS:Existen dos genes involucrados en la reparación de

rupturas de ambas cadenas de ADN:
.BRCA1:presente en cromosoma 17
.BRCA 2:presente en cromosoma 13

Sí bien ambos participan en la reparación de la ruptura de ambas cadenas de ADN, el BRCA2 también es
necesario para la recombinación homóloga entre cromátidas hermanas durante la meiosis y la mitosis.
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SÍNTESIS DE ARN
Es conocida también con el nombre de transcripción

La síntesis del ARN a partir de un molde de ADN se llama transcripción, los genes se transcriben por enzimas
denominadas ARN POLIMERASAS que generan un ARN monocatenario idéntico en la secuencia con la
excepción de URACILO en lugar de TIMINA a una de las cadenas del ADN de doble cadena.
A su vez, la cadena de ADN que dirige la secuencia de nucleótidos en el ARN por apareamiento de las bases
complementarias, es la CADENA MOLDE.
La cadena de ARN que se genera de forma inicial es el denominado TRANSCRIPTO PRIMARIO.

TIPOS DE ARN
. ARN mensajero
. ARN transferencia
. ARN ribosomal
. ARN pequeños y estables(SNURPS)
. ARNnh(ARN nuclear heterogéneo),el ARNnh es precursor del ARN mensajero

UNIDAD TRANSCRIPCIONAL EUCARIONTE

El ARN se sintetiza en el núcleo como una larga cadena inmadura heterogénea que recibe el nombre de
ARN nuclear heterogéneo. A este ARNnuclear le ocurren una serie de modificaciones que implican en primer
lugar la adición de un extremo 5´ CAP y un extremo POLI A 3´.
También ocurre el proceso conocido como SPLICING, que consiste en la eliminación de regiones no
codificantes conocidas como INTRONES.
Este material codificante conocido como EXONES se condensa formando el ARN maduro con su extremo 5 ́
CAP y su COLA POLI A, y de esta manera,está capacitado para ir a citoplasma codificar la síntesis proteica.

ARN mensajero y ARN nuclear heterogéneo

Características generales:
. Heterogéneos pero estables
. Se sintetizan como largos precursores(ARN nh)
. Extremo 5´con TRIFOSFATO DE 7-METIL GUANOSINA(CAP)
. Extremo 3´ con POLI A.

Funciones de el extremo 5´con trifosfato de 7 metil guanosina(CAP):

. Reconocimiento del ARN mensajero por el ribosoma
. Estabilización del ARN mensajero
. Evitar el ataque por 5'- exonucleasa
Funciones del extremo 3´con poliadenilato(poli A):
. Estabilidad intracelular de la ARN mensajero
. Evitar el ataque de 3'-primas exonucleasa
. Permitir el pasaje de ARN mensajero al citoplasma.

ARN de transferencia
. Suelen estar formados por 75 nucleótidos
. Son moléculas adaptadoras: poseen un brazo anticodón que lee el codón que está presente en el ARN
mensajero y tienen un brazo aminoacídico el cual se unen mediante un enlace de tipo éster con el aminoácido
para iniciar la síntesis de una proteína
. Existen 20 tipos distintos de ARN de transferencia, uno para cada uno de los aminoácidos presentes en la
naturaleza
. Suelen tener cuatro brazos principales y uno adicional
. Gracias a su forma trebolada permite el apareamiento de las bases en los brazos
. En eucariontes tienen poca estabilidad
ARN ribosomal

Participan en el ensamblaje ribosómico y en la fijación ribosomal de la ARN mensajero, están situados tanto
en la subunidad mayor como en la subunidad menor de los ribosomas,aunque con distintas unidades de
flotación.

ARN estables y pequeños( Snurps):

. Son ribonucleoproteínas pequeñas
. Distribuidos en el núcleo o citoplasma, o ambos
. Participan en La regulación del Gen:
- remoción del intrón
- procesamiento del ARN mensajero precursor
- procesamiento del poli A

TRANSCRIPCIÓN DEL ARN

Es el proceso enzimático mediante el cual la información genética contenida en una hebra de ADN se utiliza
para sintetizar una secuencia de bases complementarias en una cadena de ARN.

Características generales:
. Es muy similar a la replicación del ADN en términos de mecanismo químico, dirección de síntesis y
utilización de un molde
. Tener en cuenta que el ADN permanece inalterado al final del proceso

La transcripción difiere de la replicación en el hecho de que no requiere un cebador y en que solo se

transcribe una hebra del ADN y a su vez, sólo se transcribe un fragmento de la hebra, no la hebra entera.
En los eucariontes la transcripción se realiza en el nucleoplasma,al existir una membrana nuclear este
proceso es previo a la traducción que se realizará en el citoplasma.
El ARN sintetizado no sirve para la traducción y debe sufrir un procesamiento postranscripcional para cumplir
con su función,todas estas medidas son tendientes a evitar que la síntesis proteica se realice en el núcleo.

En los procariontes,al no existir membranas internas que separen la maquinaria de síntesis proteica de la
síntesis de ARN,ambos procesos se realizan simultáneamente, a medida que la ARN mensajero es transcrito
va siendo traducido.

La secuencia de ribonucleótidos en una molécula de ARN es complementaria de la secuencia de

desoxirribonucleótidos en una tira de ADN bicatenario.

La hebra del ADN que se transcribe a ARN se llama TIRA CODIFICADORA mientras que la que no se
transcribe se denomina TIRA NO CODIFICADORA.
En el caso de una molécula de ADN bicatenario que contiene varios genes,la tira codificadora para un gen no
necesariamente es la misma que para otro.

ETAPAS DE LA TRANSCRIPCIÓN:

INICIACIÓN:
Depende de la unión de la ARN polimerasa con una región del ADN que determina la especificidad de la
transcripción de un gen particular(GEN PROMOTOR)

Existen 3 tipos de ARN polimerasas en eucariotas, que difieren en su secuencia de aminoácidos,en el tipo de
ARN que sintetiza y en la sensibilidad a la ALFA-AMANITINA,principio tóxico del hongo amanita phalloides.
Reacciones catalizadas por la ARN polimerasa

.A diferencia de las ADN polimerasas, no necesita cebador y no tiene actividad endo o exonucleasa
conocidas
.No tiene capacidad para corregir errores en el ARN como lo hace la ADN polimerasa.

Las ARN polimerasas no tienen función correctora: la transcripción si bien tiene un alto grado de fidelidad no
alcanza la extraordinaria fidelidad del proceso de replicación del ADN

Las ARN polimerasas de eucariontes requieren proteínas llamadas FACTORES GENERALES DE LA

TRANSCRIPCIÓN(TF) que se unen al ADN y a la polimerasa, todos poseen las siguientes funciones:
. Ubican a la enzima correctamente en el promotor
. Colaboran en la separación de las dos hebras de ADN
. Promueven la iniciación de la transcripción
En los procariontes la ARN polimerasa posee una subunidad SIGMA que tiene la capacidad de reconocer el
gen promotor, específicamente la subunidad Sigma suele unirse a la CAJA TATA o PRIBNOW que se localiza
alrededor de 10 pares de bases corriente abajo del sitio de iniciación de la transcripción.

La subunidad Sigma permite a la ARN polimerasa reconocer las regiones promotoras del ADN
La subunidad Sigma más la enzima central constituyen la HOLOENZIMA.

En los procariontes las secuencias de nucleótidos que reconocen la subunidad Sigma de la ARN polimerasa
incluyen:
.CAJA TATA o de PRIBNOW:
Es un segmento de 6 nucleótidos(5'-TATAAT-3') centrados 8 a 10 nucleótidos a la izquierda del sitio de inicio
de la transcripción.
Está secuencia codifica la base inicial de la ARN mensajero
. SECUENCIA 35(región promotora):
Una segunda secuencia de nucleótidos(5'-TTAGACA-3') se centra a unas 35 veces a la izquierda del sitio de
inicio de la transcripción.
Actúa en los procariontes como un gen promotor

Amba secuencias actúan como secuencias promotoras para la síntesis del ARN mensajero
El ARN polimerasa en estadio de holopolimerasa, es una enzima inactiva. Una vez que se produce la
liberación del factor Sigma es entonces que se produce la unión del mismo al de sitio de iniciación de la
síntesis de la transcripción( Gen promotor) y comienza la actividad enzimática para producir el ARN
mensajero.
En los procariotas la subunidad Sigma está unida de manera relativamente débil al complejo enzimático del
ARN polimerasa formando lo que se conoce con el nombre de HOLO POLIMERASA.
Es necesario para iniciar la transcripción la unidad Sigma y también es importante que se libere y se separe
de la holo polimerasa, de tal manera que el núcleo central de la ARN polimerasa continuará con la elongación
del ARN

Una vez que la holoenzima reconoce la región promotora, la ARN polimerasa empieza sintetizar un
transcripto de la secuencia de ADN
Por lo general, comienza con una purina y se libera la subunidad Sigma

Tener en cuenta que existe una cadena inactiva donde no se produce la transcripción y una cadena molde
donde sí se produce el proceso de transcripción.

La terminación de la síntesis de ARN está señalada por una secuencia repetida invertida que se encuentra
separada por un segmento de ADN espaciador que también es transcrito.
De esta manera se produce entonces la liberación del ARN transcrito,que en la próxima etapa sufrirá una
modificaciones postranscripcionales.

Esto permite un apareamiento intramolecular entre el ARN naciente, conformando una horquilla. Esta
secuencia es seguida por un tramo de bases T-A, que también es transcrito y que indica la terminación de la
síntesis.

En los procariontes un factor proteico Rho determina que la ARN polimerasa cese su acción y se separe de la
tira molde, liberando la copia primaria.

PROCESAMIENTO DE MADURACIÓN POSTRANSCRIPCIONAL DEL ARNnh

En primer lugar se produce la pérdida de las regiones no codificantes conocidas con el nombre de intrones.
El nuevo ARN, sin los intrones queda con los exones, que son las zonas codificantes, que en el extremo 5´va
adoptar la metil guanosina también llamado de extremo CAP, mientras que en el extremo 3´prima,la poli A.
Maduración postranscripcional del ARN ribosomal
El ARN ribosomal sufre todo un procesamiento en el nucleolo:
1. METILACIÓN:
Los genes transcriben un precursor único de 45S.Este se metila sobre restos de ribosa en el núcleo antes de
que se completen la transcripción.
El objetivo es marcar zona que no deben ser degradadas en el siguiente paso
2. CLIVAJE:
Se realiza en zonas no metiladas ricas en C-G

3.UNIÓN A PROTEÍNAS RIBOSOMALES: antes que se completen la síntesis del precursor 45S, en el
nucleolo, se reúnen proteínas ribosomales por autoensamblaje.
4. TRANSPORTE AL CITOPLASMA :
Las subunidades ribosomales están completas al salir del núcleo, pero en el citoplasma tienen lugar pasos de
maduración menores que sirven para asegurarse de que no comiencen la síntesis proteica dentro del núcleo.

¿Qué modificaciones ocurren en el núcleo?

1. Escisión del extremo 5´ y de una pequeña Cola en el extremo 3´. Estas secuencias funcionan como
señales para las modificaciones postranscripcionales.
2.Escisión de un intrón de 10 a 60 nucleótidos:
Está situado hacia el lado 3´ del Asa anticodón. Es escindido por una endonucleasa que no reconoce las
secuencias de nucleótidos sino la estructura tridimensional que estos adopta.Es un mecanismo para evitar
errores en la traducción.
3. Metilación e hidroxilaciones: ocurren tanto en el núcleo como en el citoplasma.
4. Agregado de la secuencia CAA(citosina-adenina-adenina) en el extremo 3´(ASA ACEPTORA). Es la región
que luego se unirá covalentemente al aminoácido y por lo tanto, permitirá que el ARNT sea funcionalmente
activo durante la síntesis proteica.
Este agregado se hacen el citoplasma para evitar que la traducción empiece en el núcleo
…………………………………………………………………………………………………………………………...RE
GULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA
Los organismos se adaptan a los cambios ambientales mediante las alteraciones de la expresión génica.
La expresión regulada de los genes se requiere para el desarrollo, diferenciación y adaptación celular.
Existen dos tipos de regulación genética:
. REGULACIÓN POSITIVA:
Ocurre cuando la expresión de la información genética se incrementa en forma cuantitativa por la presencia
de un elemento regulador específico, llamado ACTIVADOR o INDUCTOR.

El incremento de la cantidad de A induce el incremento en la cantidad de B y en la cantidad de C.

De alguna manera el elemento inductor A aumentó los niveles de B y los niveles de B aumentaron los niveles
de C.

. REGULACIÓN NEGATIVA:
Ocurre cuando la expresión de la regulación genética está disminuida por la presencia de un elemento
regulador específico, llamado REPRESOR.

Cuando A inhibe la síntesis de B, a su vez inhibe la síntesis de C.

De alguna manera,el elemento químico A actúa como regulador específico en este caso denominado
represor.
Habitualmente el gen represor sintetiza una PROTEÍNA REPRESORA que actuando sobre sitio promotor
inhibe a su vez al GEN ESTRUCTURAL con lo cual se inhibe o disminuye la producción de una determinada
enzima.
Un efector que inhibe la función de un regulador negativo conlleva una regulación positiva

Si la proteína represora,generada por el gen correspondiente, se encuentra con un inductor su efecto

inhibidor queda totalmente bloqueado de tal manera que el gen promotor y el gen estructural quedarán
totalmente desinhibidos estimulando la síntesis de la enzima.

Los sistemas biológicos muestran tres tipos de respuestas temporales a una señal reguladora
. RESPUESTA DE TIPO A:
La presencia de una señal estimulante provoca el aumento de una respuesta química en tanto y en cuanto
dicha señal o dicho estímulo estén presentes( el estímulo está indicado con la flecha y la respuesta con la
subida en el eje de las y).
A un efecto estimulante 1 respuesta, que se mantiene en tanto y en cuanto este efecto estimulante se
mantenga en el tiempo.

. RESPUESTA DE TIPO B:

La presencia de una señal o estímulo genera una rápida respuesta temporal tras lo cual sobreviene un
periodo de latencia, refractariedad o recuperación por más de que se mantenga la señal.
Pasado este periodo de recuperación la persistencia del estímulo o señal vuelve a desencadenar una nueva
respuesta que vuelve a agotarse en el tiempo hasta pasar el periodo de refractariedad.

.RESPUESTA DE TIPO C:

La presencia de señal o estímulo desencadena una respuesta única amesetada que se mantiene en el tiempo
independientemente de la persistencia de la señal.
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El proceso de alteración de la expresión génica implica la modulación de la transcripción, debido a cambios
en la interacción de las proteínas reguladoras de unión específica con varias regiones del ADN.
La regulación de la expresión génica puede realizarse respetando los parámetros establecidos por el dogma
de la biología molecular.
Se puede regular la transcripción, el splicing, el transporte o traducción.

La cromatina se puede dividir en dos clases según su patrón de tinción:

. EUCROMATINA:
Se tiñe suavemente,se corresponde con las regiones del genoma que están disponibles para la transcripción.
. HETEROCROMATINA: se tiñe intensamente y se corresponde con las regiones del genoma que están
densamente compactadas e inaccesibles para el aparato transcripcional.

La compactación de la cromatina afecta la capacidad de unión de las enzimas y factores transcripcionales de

genes específicos.
Hay proteínas que reconocen secuencias específicas del ADN y una vez unidas, transmiten las señales de
descondensación de cerca de 10,000 Pb correspondientes a un bucle de la cromatina.

Las ACETILACIONES y DESACETILACIONES de histonas, son modificaciones covalentes frecuentes en

estos fenómenos de descompactación cromatínica.
Un ejemplo típico, ocurre en la acetilación de CO-ACTIVADORES involucrados en la transcripciones
genéticas moduladas por las hormonas tiroideas.

La acetilaciones se producen en los RESIDUOS DE LISINA de los extremos amino terminales de las histonas,
reduciendo su carga positiva y por lo tanto su afinidad de unión al ADN cargado negativamente.
La desacetilación de las histonas, mediada por DESACETILASAS provoca el efecto contrario( re
compactación).

La metilación de restos de CITOSINA en el ADN, especialmente en los sitios promotores, dificulta la

transcripción.
Por ejemplo, los genes de globina están más metilados en las células no productoras de hemoglobina que en
los eritroblastos.

Las metilaciones del ADN se producen en secuencias específicamente reconocidas que generalmente se
agrupan en islotes ricos en CITOSINA-GUANINA(C-G), con frecuencia dentro o cerca de regiones
reguladoras de la transcripción.

MODIFICACIÓN DEL NÚMERO Y DE LA ESTRUCTURA DE LOS GENES:

. La eliminación total o parcial de genes impide la formación de ARN mensajero y de la proteína
correspondiente
Por ejemplo, en los glóbulos rojos una vez sintetizadas las proteínas estructurales y funcionales,la eliminación
del núcleo en la etapa de eritroblasto ortocromático produce una célula incapaz de sintetizar toda otra
proteína de novo presentando un 90% del contenido proteico total como hemoglobina.

Por otra parte, la presencia de genes en tándem, implica la presencia de múltiples copias que aumentan la
capacidad de producción de la proteína requerida en grandes cantidades.
Es el caso de los genes codificantes de histonas y ARN ribosomales 5S.

La regulación génica se puede controlar también en función de la disponibilidad de ADN incrementando el

número de copias de un gen accesible. Este mecanismo de regulación se conoce como AMPLIFICACIÓN
GÉNICA. Una forma de amplificación es la repetición sucesiva de la replicación de una secuencia específica
de ADN.

Las regulaciones pueden ser de tipo CIS o TRANS:

.Cuando el elemento regulador transcripcional es parte de la cadena polinucleotídica donde se localiza el gen
a regular se denomina REGULADOR CIS:
Se trata de secuencias especiales del ADN( promotores y enhancers)
En esta categoría están incluidos los promotores, la presencia de secuencias regulatorias
potenciadoras(enhancer) y la interacción entre múltiples proteínas activadoras o inhibidoras que actúan
mediante su unión a secuencias específicas de reconocimiento del ADN.
La diferencia clave entre potenciador y promotor es que el promotor debe ubicarse corriente arriba y cerca del
sitio de inicio de la transcripción, mientras que un potenciador puede ubicarse corriente arriba o corriente
abajo como en cualquier lugar del gen.
-PROMOTOR: es una secuencia que define el sitio de iniciación de la transcripción del ADN. Los promotores
más frecuentes son los de tipo CCAAT y TATA, denominados cajas por su alta conservación evolutiva.
La CAJA TATA está localizada 20-30 pares de bases corriente arriba( hacia el extremo 5´) desde el sitio de
inicio de la transcripción.
Numerosas proteínas identificadas como TF IIA,B,C( factores regulatorios de la ARN polimerasa 2)
interactúan con la caja tata.

Los grupos de bases nucleotídicas que se encuentran próximos al sitio inicio de la transcripción reciben el
nombre de cajas o regiones promotoras, por ejemplo en los procariontes se encuentra la denominada caja
tata o bien una secuencia 35.

El promotor CCAAT reside 50-130 pares de bases corriente arriba( hacia el extremo 5´) del sitio de inicio
transcripcional.
La proteína denominada C/EBP(CCAAT-BOX/ENHANCER/BINDING/PROTEIN) se une a esta secuencia.
Otra secuencia reguladora incluye a la caja CG.

Sí bien los promotores están preferentemente localizados corriente arriba del inicio transcripcional, algunos
pueden ubicarse corriente abajo( hacia el extremo 3´) o bien ser de tipo intragénicos.
El número y tipo de elementos regulatorios varían según cada ARN mensajero
Existen secuencias del ADN que pueden localizarse corriente arriba o abajo el gen a regular,situadas a miles
de pares de bases con respecto al promotor y ADN sobre las cuales se ejercen las acciones activadoras.
Se denominan secuencias potenciadoras o aumentadoras o enhancers.
En general una secuencia regulatoria potenciadora o enhancer regula la frecuencia con la que se realiza el
proceso transcripcional.

La molécula de ADN se dobla en asa para permitir la aproximación de estas zonas alejadas de la doble hélice
y ubica a la proteína activadora unida al enhancer

REGULACIÓN TRANS:
Cuando los elementos regulatorios son de naturaleza y origen diferente a la secuencia genética a controlar la
regulación es de tipo trans( aquí se incluyen a los factores de transcripción generales, y específicos y todas
las proteínas regulatorias con capacidad de unión al ADN)
Para un mismo Gen pueden existir varias secuencias regulatorias. También existen reguladores de ACCIÓN
OPUESTA (silenciadores o amortiguadores de la transcripción)

FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN: son proteínas que participan en la regulación de la transcripción del ADN,
pero que no forman parte del ARN polimerasa
Los factores de transcripción pueden actuar reconociendo y uniéndose a secuencias concretas de ADN o
uniéndose directamente a la ARN polimerasa
Pueden ser de dos tipos:
. BASALES
Son los componentes del complejo de transcripción basal y son necesarios para la transcripción de cualquier
ARN
. HISTOESPECIFICOS
Se unen a regiones específicas promotoras/reguladoras de los genes y regulan el grado de transcripción
desde el complejo transcripción basal.

Ambos tipos de proteínas se unen a secuencias en el surco mayor del ADN.

Se consideran tres modelos de interacción proteína ADN:

A.HÉLICE-GIRO-HÉLICE:
Esta clase de proteínas a menudo contiene una región rica en aminoácidos básicos localizada en el extremo
amino terminal que permite su unión a secuencias del ADN reconocidas específicamente.
B.DEDO DE GUANTE(ZINC-FINGER):
Su nombre deriva de la forma que adoptan segmentos de unos 30 aminoácidos de estas proteínas
reguladoras.

Un átomo de zinc enlaza las cadenas laterales de dos histidina y dos cisteínas,generalmente son varios
dedos de zinc los que se unen al sector correspondiente del ADN.
Ejemplos de este tipo de proteínas reguladoras son algunos receptores nucleares de hormonas esteroides.

C.CIERRE DE LEUCINA:
Es una proteína dimérica.

Cada mitad de la cremallera de leucina es una corta Alfa hélice con un residuo de leucina cada 7 posiciones,
que se encuentra en contacto con las leucinas de la otra hélice cada dos giros.
Otras dos Alfa hélice de cada cadena tienen cargas positivas e interaccionan con el ADN
Las interacciones entre las leucina son hidrofóbicas y se separan con facilidad

[La especificidad del control de la transcripción requiere que las proteínas reguladoras se unan con alta
afinidad, a la región correcta del ADN]

La regulación de la expresión genética se realiza por:

. MEMBRANA NUCLEAR:
En eucariotas, la membrana nuclear separa físicamente la transcripción génica de la traducción, ya que los
ribosomas sólo existen en el citoplasma. Si el ARN mensajero no sale al citoplasma no hay síntesis proteica
. PROCESAMIENTO DEL ARN MENSAJERO:
BIOQUIMICA DEL CANCER
La palabra cáncer se aplica a un grupo de enfermedades en la que las células crecen de manera anormal y
forman un tumor maligno.
Las células malignas que forman parte de este tumor,son capaces de invadir los tejidos circundantes y
metastatizar (viajar a otros lugares del organismo donde establecen zonas secundarias de crecimiento).

Este patrón de crecimiento aberrante es el resultado de mutaciones en genes que regulan la proliferación,
diferenciación y supervivencia de las células.
Debido a estos cambios genéticos, las células malignas ya no responden a las señales que regulan el
crecimiento de las células normales.

Las mutaciones que provocan cáncer se presentan en ciertas clases de genes, incluyendo:
A. los que regulan la proliferación y diferenciación celular
B. Aquellos que inhiben el crecimiento
C. Los que dirigen la célula hacia la apoptosis( muerte programada)
D. Aquellos que reparan el ADN dañado.

Las mutaciones que provocan cáncer pueden ser:

.MUTACIONES CON GANANCIA DE FUNCIÓN(como en los protooncogenes, que dan origen a los
oncogenes):
Ejemplos de protooncogenes son los relacionados con la transducción de señales y la progresión del ciclo
celular:
- factores de crecimiento y sus receptores
- ras( proteína de unión a GTP)
- factores de transcripción
- ciclinas y proteínas que las regulan
- microARN, que regulan a las proteínas que inhiben el crecimiento

.MUTACIONES CON PÉRDIDA DE LA ACTIVIDAD DE UNA PROTEÍNA(cómo sucede con los genes
supresores de tumores):
- p53: vigila el daño al ADN y detiene la progresión del ciclo celular hasta que el daño sea haya reparado
- proteínas del gen RETINOBLASTOMA(Rb), el cual regula el cambio de fase de G1 a S
- reguladores del Ras
- microARN, qué regula señales que promueven el crecimiento

ONCOGENESIS
Los genes que contribuyen a la oncogénesis pueden ser de dos tipos:
A.PROTOONCOGENES:
Es un gen celular que normalmente codifica una proteína reguladora y que por un simple cambio de
bases( mutación) puede convertirse en oncogen( es decir un gen capaz de provocar cáncer)
Normalmente los alelos de un protooncogen especifican la síntesis de constituyentes que a manera de
señales desde el exterior, activan genes relacionados con el crecimiento celular dentro del núcleo por ejemplo
una proteína transductora de señales unida a la membrana.
Las células normales humanas contienen secuencias de ADN semejantes a las de las oncogenes virales, lo
que sugiere que los virus incorporan genes celulares en su genoma durante su pasó a través de las células.
Un oncogén es un gen que produce cáncer y se refiere a cualquiera de varios genes mutantes que hacen que
una célula que hasta hace poco era normal, tenga una proliferación rápida e incontrolada.

Los protooncogenes se activan a oncogenes por diversos mecanismos:

. Inserción de un promotor
. Inserción de un amplificador
. Translocación cromosómica
. Mutación en un punto
. Amplificación génica

INSERCIÓN DE UN PROMOTOR

El promotor es una secuencia de nucleótidos que define el ciclo de iniciación de la transcripción, los
promotores se insertan corriente arriba del sitio de inicio de la transcripción hacia el extremo 5´.
Algunos retrovirus pueden insertar parte de su genoma viral en una célula huésped y una vez que se han
integrado los llamados RTL( repetición terminal larga), que son secuencias de nucleótidos características que
se encuentran en cada extremo de un elemento retroviral que ha sido integrado en el genoma hospedador,
pueden actuar como promotores de protooncogenes(por ej myc) el cual se transforma inmediatamente en un
oncogen.
El resultado es que estas secuencias RTL se transcriben parcialmente hasta transformar un ARN mensajero
igual por transcripción reversa formará el ADN complementario que finalmente dará origen a el ADN
bicatenario.

INSERCIÓN DE UN AMPLIFICADOR
La inserción de un amplificador puede ser corriente arriba o corriente abajo del sitio de inicio de la
transcripción del ADN.
Muchas veces algunos virus pueden insertarse actuando como amplificadores de tal manera que el
amplificador viral puede estimular la transcripción del oncogén a partir del promotor del mismo.

TRANSLOCACIÓN CROMOSÓMICA:
Es un tipo de anomalía cromosómica en la que un cromosoma se rompe y una parte de él vuelve a unirse a
un cromosoma diferente.
La ruptura cromosómica de los cromosomas 9 y 22 permite el intercambio de material genético en lo que se
conoce como una translocación. Como consecuencia de este intercambio genético se forma un cromosoma
22 mucho más corto que es el denominado cromosoma Filadelfia, el cual produce una proteína BCR-ABL que
favorece el crecimiento de alguna manera indiferenciado y anárquico de las células de la progenie leucocitaria
generando de esta manera la leucemia mieloide crónica

MUTACIONES Y AMPLIFICACIÓN GÉNICA:

Tanto la radiación como los carcinógenos químicos producen tres tipos de lesiones:
-PUNTUALES
-DELECIONES
-INSERCIONES
Una deleción es un tipo de mutación genética en la cual se pierde el material genético,desde un solo par de
nucleótidos de ADN hasta todo un fragmento de cromosoma.
Rearreglo genéticos ocasionados por transposición o translocación de un protooncogen llevan a la
amplificación de un protooncogén que permite la producción de mayor cantidad de proteínas.
En ambos casos la aparición de un cáncer puede estar determinada por la activación de protooncogenes o
bien por la disminución de la actividad de genes supresores de tumores o bien por ambas circunstancias.
En el primer caso se puede ver una mucosa colónica que frente a una disminución de la actividad de genes
supresores de tumores va sufriendo modificaciones que al comienzo son sutiles.
En el segundo caso la infección por hpv va realizando modificaciones la mucosa del cuello uterino
transformándola a la misma en lesiones escamosas intraepiteliales

B.GENES SUPRESORES DE TUMOR:

Modificación de celulares por cáncer
. NÚCLEO:
- modificación de proteínas asociadas al ADN
- modificación de ARN transferencia
- patrón enzimático diferenciado
.CITOPLASMA:
Se produce la síntesis y secreción de antígenos oncofetales y otros tipos de antígenos asociados al tumor,
isoenzimas etcétera.

Todas estas modificaciones traen como consecuencia:

Retrovirus del ADN se han asociado con el desarrollo de cáncer en los seres humanos

APOPTOSIS:
Es la muerte celular programada, que lleva la destrucción de células dañadas que no se pueden reparar
Consta de tres fases:
1. FASE DE INICIO( señales externas o liberación mitocondrial del citocromo C 1)
2. FASE DE INTEGRACIÓN DE LA SEÑAL
3. FASE EJECUCIÓN
La apoptosis está regulada por un grupo de proteínas de la familia BCL-2, la cual consta tanto de factores
PRO como ANTI apoptóticos.
Las células cancerosas han desarrollado mecanismos para evadir la apoptosis.

Las células tumorales pueden producir y liberar a la circulación sanguínea sustancias químicas características
denominadas MARCADORES TUMORALES que dependen de su fenotipo maligno.
Clasificación de los marcadores tumorales:
El marcador tumoral circulante ideal debería:
. Encontrarse en relación directa con la presencia del proceso maligno
. Correlacionarse con la masa tumoral.
. Permitir afirmar el tipo, la localización y el estadio del tumor
. Posibilitar un pronóstico.

ALGUNOS MARCADORES TUMORALES:

…………………………………………………………………………………………………………………………...
APLICACIÓN DE TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR AL LABORATORIO CLÍNICO
La manipulación de una secuencia de ADN y la construcción de moléculas quiméricas(por ingeniería
genética) brindan los medios adecuados para estudiar cómo funciona un segmento específico de ADN.

¿Cómo se estudia el ADN?

La tecnología del ADN recombinante comprende el aislamiento y manipulación del ADN para elaborar
moléculas químicas o híbridas.
Para aislar las secuencias específicas que uno quiere estudiar o reproducir es necesario realizar cortes en las
cadenas del ácido nucleico, para ello se utilizan las ENZIMAS DE RESTRICCIÓN que cortan las cadenas de
ADN en sitios específicos
Estás enzimas son endonucleasas que cortan el ADN en secuencias específicas dentro de la molécula, que
generalmente corresponden a SECUENCIAS PALINDRÓMICAS
Deben su nombre ya que en su presencia algunas, bacterias restringen el crecimiento de ciertos virus
bacterianos llamados bacteriófagos
Cada una de las enzimas corta una secuencia específica de doble cadena de ADN de 4 a 7 pares de bases.
Las enzimas de restricción cortan el ADN de cualquier fuente en piezas cortas y en secuencias específicas,
en contraste con muchos métodos que lo hacen al azar.

Reciben su nombre a partir de la bacteria de la cual se aísla

Los cortes que inducen estas enzimas pueden ser Romos( Bordes Romos) o cohesivos( bordes irregulares)

La endonucleasa de restricción introduce 2 cortes en el plásmido circular de ADN dejando los extremos
cohesivos. En la brecha restante se insertará la parte de ADN que se quiere replicar y que va a ser obtenida
del ADN humano.
El ADN humano que posee la secuencia específica de bases que se quieren cortar y pegar dentro del
plásmido bacteriano.Las endonucleasas de restricción cortarán el segmento que se quiere amplificar y
posteriormente ADN ligasas se encargarán del pegado y sellado de las nuevas bases incorporadas al
plásmido bacteriano.
El producto final es un híbrido que se conoce con el nombre de ADN recombinante( plásmido que ha recibido
material genético extra proveniente del ADN humano)

TRANSFERENCIA DE BANDAS
La visualización de un fragmento específico de ADN o de ARN entre muchos miles de moléculas
contaminantes requiere de la convergencia de varias técnicas, las cuales se conocen en su conjunto como
técnicas de transferencia de banda.
Estas técnicas son:
. SOUTHERN-BLOT(ADN)
.NORTHERN-BLOT(ARN)
.WESTERN-BLOT(PROTEÍNAS)

Estás técnicas son útiles en la determinación de cuántas copias de un gen se encuentran en un tejido
determinado o si existen grandes alteraciones un gen.
En una transferencia de bandas el ADN aislado de una línea celular o de un tejido es digerido con una o más
enzimas de restricción.
Está mezcla se coloca en un gel de agarosa o poliacrilamida y se expone a una corriente eléctrica directa. El
ADN, que tiene carga negativa, migra hacia el ánodo. Los fragmentos más pequeños se mueven más rápido.

Después de un tiempo apropiado, el ADN se desnaturaliza por la exposición a una solución alcalina ligera y
es transferido a un papel de nitrocelulosa y nylon en una réplica exacta del patrón sobre el gel por la técnica
de banda diseñada por SOUTHERN.

TRANSFERENCIA AL PAPEL
El ADN se une al papel por medio de calor y el papel después se expone a la sonda de ADN marcado, con lo
cual se hibridan los fragmentos complementarios sobre el papel filtro;
En el caso del Western,se adiciona un anticuerpo específico marcado.

Después del lavado,el papel se expone a una placa de rayos x la cual se procesa para revelar las bandas
específicas correspondientes a los fragmentos de ADN que reconocieron las secuencias en las sondas de
ADN

REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA(PCR)

Es un método enzimático para el copiado repetido y de esta manera, amplificado de las dos cadenas de ADN
que forman una secuencia genética particular.
La especificidad del método se basa en el uso de dos oligonucleótidos iniciadores que se hibridan con
secuencias complementarias en cadenas opuestas del ADN y flanquean la secuencia blanco.

El método permite que el ADN de una sola célula de un folículo piloso o de un esperma se amplifica y
analice,de allí su aplicación en la medicina forense.

TÉCNICA DE LA PCR:
La muestra de ADN se calienta para separar las dos cadenas, permitiendo que los iniciadores se unan al ADN
y cada una de las cadenas se copia mediante la ADN polimerasa comenzando en el sitio del iniciador.
Para el ciclo número 35 habrá 68 billones de copias

La tecnología del ADN recombinante se utiliza además en el análisis molecular de las enfermedades, esto
permite el estudio de:
. VARIACIONES GENÉTICAS NORMALES :
Las variaciones normales y heredables en la secuencia del ADN en regiones no codificantes se denominan
polimorfismos y solo ocurre aproximadamente en uno de cada 500 nucleótidos,su estudio tiene interés en
medicina forense o bien para el estudio de genes específicos.

. VARIACIONES QUÍMICAS QUE CAUSAN ENFERMEDADES:mutaciones puntuales que pueden generar

proteínas alteradas por ejemplo anemia de células falciformes donde:

Una sustitución de timina por adenina en el sexto codón del gen de la globina se traduce en el cambio de
adenina por uracilo en el ARN mensajero correspondiente, alterado específica valina por glutámico y esto
causan alteración estructural de la molécula.
La mutación génica genera una cadena Beta anómala en la cual vamos a encontrar reemplazada la valina
por glutámico, y en el momento de desoxigenarse la hemoglobina anómala, se forma un precipitado de
hemoglobina que tiende a acumularse en los vasos sanguíneos generando trombosis.

La supresión de un fragmento crítico de ADN, el rearreglo del ADN dentro de un gen o la inserción de un
fragmento de ADN en una región de codificación o reguladora pueden cambiar la expresión génica y producir
enfermedad, por ejemplo lo que ocurre con la Beta talasemia o anemia del Mediterráneo.
Donde existe una supresión de un fragmento crítico el cromosoma 11 que es el gen de la globina que codifica
la síntesis de las cadenas Beta de la hemoglobina. Consecuentemente se sintetizan que adolecen de la
cadena Beta.
. DIAGNÓSTICO PRENATAL:
Si se conoce la lesión genética y se dispone de una sonda específica,es posible el diagnóstico prenatal.
El ADN de células obtenidas 10 ML de líquido amniótico( o por biopsia de vellosidades coriónicas) puede
analizarse por southern Blot

. ANIMALES TRANSGÉNICOS:
Se basa en la introducción de un nuevo ADN en células germinales por su inyección en el núcleo del huevo.
Un porcentaje de genes inyectados en un óvulo fertilizado de ratón se incorpora al genoma y se encontrará
tanto en las células somáticas como germinales modificaciones pasarán a la descendencia.
.TERAPIA GÉNICA:
Las enfermedades causadas por la deficiencia de un producto génico están sujetos a una terapia de
reemplazo.
La estrategia es clonar un gen en un vector que sea fácilmente capturado e incorporado al genoma de una
célula huésped.

Las células precursoras de la médula ósea son ideales para este propósito ya que se supone que volverán a
establecerse en la médula y así se replicarán.

Variaciones químicas normales:

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BIOSÍNTESIS DE PROTEÍNAS O TRADUCCIÓN

El ARN mensajero lleva los codones, cada codón codifica un aminoácido salvo, los codones sin sentido. Sufre
un procesamiento post transcripcional por el cual se produce la eliminación de regiones no codificantes
denominadas intrones a través del proceso de splicing.
Cuando se dice que actúa como una MOLÉCULAS ADAPTADORAS se refiere a que por un lado habla el
código de bases y por el otro habla el código de aminoácidos.

RIBOSOMAS
Los ribosomas eucariotas están formados por dos subunidades, la SUBUNIDAD MAYOR que posee un
coeficiente de sedimentación de 60 y una SUBUNIDAD MENOR que posee un coeficiente de sedimentación
de 40.
Tenemos que tener en cuenta que el ribosoma eucariótico completo posee un coeficiente de sedimentación
de 80

ETAPAS DE LA TRADUCCIÓN
1. ACTIVACIÓN DEL AMINOÁCIDO:

Esta activación es catalizada por enzimas conocidas como AMINOACIL-ARNT SINTETASAS cuya reacción
general catalizada implica la unión del aminoácido al ARN de transferencia con gasto de energía y la
formación del complejo AMINOACIL-ARNT + AMP + PIROFOSFATO.
Posteriormente todo el equilibrio de la reacción estará desplazado hacia la formación de aminoacil-arnt ya que
el pirofosfato será degradado por la pirofosfatasa.
Dicha activación se realiza en dos etapas:
PRIMERA ETAPA:
Se produce la unión de la enzima al ATP y al aminoácido, formando el complejo (enzima-aminoácido-AMP)
+PPi.
SEGUNDA ETAPA:
El complejo ENZIMA-AMINOÁCIDO-AMP se une al ARN de transferencia y es entonces cuando se forma el
complejo ARNT-AMINOÁCIDO.

Estos dominios funcionales van en orden de su funcionamiento.

El aminoácido se une al extremo CCA del ARN de transferencia a través de un enlace de tipo éster. Este
enlace se establece entre el extremo carboxilo terminal del aminoácido y el oxidrilo de posición 3´de la
adenina del ARN de transferencia.

2.INICIACIÓN:
1°:DISOCIACIÓN DEL RIBOSOMA
El primer paso es la disociación del ribosoma donde la subunidad mayor (60s) se separa de la subunidad
menor de (40s) gracias a la presencia de un factor proteico denominado FACTOR DE INICIACIÓN 3 o
DISOCIASA.

2°: FORMACIÓN DEL COMPLEJO DE ENTRADA:

El GTP, el FACTOR DE INICIACIÓN 2 y la METIONINA forman lo que se llama el COMPLEJO TERNARIO.

Este complejo ternario irá a ingresar a la subunidad menor 40S del ribosoma para formar lo que se conoce
como COMPLEJO DE ENTRADA.
3°:FORMACIÓN DEL COMPLEJO DE INICIACIÓN 40S
Se produce la llegada del ARN mensajero con el codón de iniciación(AUG, que codifica el acoplamiento del
aminoácido METIONINA).
4°FORMACIÓN DEL COMPLEJO DE INICIACIÓN 80S:
Se produce el acoplamiento de la subunidad mayor(60s) para cerrar de esa manera el complejo de iniciación
80s que es el que comenzará la síntesis de la cadena polipeptídica.

3. ELONGACIÓN:

Para ello ingresa un nuevo AMINOACIL-ARNT que está codificado por el siguiente codón en el ARN
mensajero de la mano de un factor de elongación ALFA y de GTP, conformando lo que se conoce como
complejo ternario.
Posteriormente se produce la hidrólisis del GTP a GDP, y de esta manera el aminoacil-arnt queda inserto en
lo que va a ser el futuro SITIO PEPTÍDICO sobre la cadena de ARN mensajero.
En el proceso de elongación, el ribosoma se desplaza sobre el ARN mensajero en dirección 5´→3
´ y avanza un codón por ciclo.
La cadena polipeptídica en formación crece un aminoácido por vez desde el extremo amino terminal al
carboxilo terminal.

El aminoácido iniciador, metionina, se encuentra situado en el sitio P de la cadena de ARN mensajero. Por su
parte, el sitio aminoacídico está dispuesto para recibir un nuevo aminoácido el cual será codificado por el
cordón correspondiente( ejemplo aminoácido arginina). La enzima peptidil transferasa forma entonces el
enlace peptídico entre metionina y arginina de tal manera que el ribosoma queda listo para sufrir el proceso
de TRANSLOCACIÓN, de tal manera que arginina y metionina que estaban situados en el sitio aminoacídico,
al realizarse la translocación del ribosoma pasan a transformarse automáticamente en el sitio PEPTÍDICO. Un
nuevo aminoácido se incorporará según el triplete codificante del ARN mensajero y así sucesivamente la
cadena irá creciendo de aminoácido en aminoácido gracias a la acción de la ENZIMA PEPTIDIL
TRANSFERASA.
En una segunda etapa se produce la formación de la unión peptídica

Se produce gracias a la enzima peptidil transferasa

En el sitio peptídico se encuentra el aminoácido metionina y el sitio aminoacídico el aminoácido alanina, es
entonces que se forma el dipéptido gracias a la acción de la peptidil transferasa.
La peptidil transferasa, situada en la subunidad mayor, cataliza la formación del enlace peptídico entre el
grupo carboxilo de la metionina unida al ARNt y la función amina del aminoácido unido al ARN transferencia
en el sitio A.
Posteriormente se produce la translocación:
Es el desplazamiento del peptidil ARNt del sitio A al P, con requerimiento de GTP y de FACTOR DE
ELONGACIÓN 2(FE2).
El ribosoma se desplaza 3 nucleótidos en sentido 5´→ 3´.
Así el próximo codón se convertirá en sitio A,ya que el complejo que ahora tiene el dipéptido está en el sitio P.
El ARN de transferencia que trajo la metionina es descargado.
El FACTOR DE ELONGACIÓN 2 es esencial para traslocar el ribosoma a lo largo del ARNm. e hidroliza GTP.
El factor de elongación 2 es el sitio de acción de la toxina producida por el corynebacterium diphtheriae,el cual
produce una toxina letal. La toxina diftérica inserta ADP-RIBOSILO en el factor de elongación 2 y lo inactiva,
así se bloquea la síntesis proteica.
Luego, se producen nuevos ciclos de elongación

La peptidil transferasa cataliza la formación de un nuevo peptídico, la cadena polipeptídica será transferida al
sitio A y el ARNt del sitio P será descargado y liberado.

4. TERMINACIÓN:

La señal de terminación es la presencia de un codón de terminación en el ARN mensajero(UAA,UAG,UGA).

Al llegar el ribosoma a los codones sin sentido, estos son reconocidos por factores de liberación que catalizan
la hidrólisis de la unión entre la cadena peptídica y el ARN de transferencia.
El factor de liberación actúa en el sitio ribosomal A y requiere que el sitio P contenga el PEPTIDIL ARNt.
La cadena polipeptídica terminada es separada del ARNt y este es expulsado del ribosoma, el cual a su vez
se libera del ARN mensajero.
Si en el medio hay factor de iniciación 3, las subunidades se disocian y se utilizan para una nueva síntesis
proteica.
5. PROCESAMIENTO POSTRADUCCIONAL(MADURACIÓN):

La información que determina el destino postraduccional reside en la estructura primaria de las

proteínas(define:número,orden y clase de aminoácidos presentes).
. El plegamiento permite a las proteínas adquirir la conformación que determina su actividad biológica. El
sentido y variedad de este plegamiento está regido por la estructura primaria y es facilitado/guiado por
chaperonas.
Las CHAPERONAS son proteínas que dirigen el plegamiento de otras, estabilizan las conformaciones que el
péptido naciente adopta antes de llegar a su estado final para evitar formas anómalas.
En eucariontes el primer aminoácido, metionina, es eliminado por peptidasas;en proteínas que atraviesan
membranas se elimina del extremo amino terminal un péptido hidrofóbico denominado señal.
. La hidroxilación de prolina y lisina es necesaria para la maduración de las moléculas de colágeno recién
sintetizadas( puentes entrecruzados).
. La fosforilación es un tipo de modificación covalente que se realiza por quinasa que transfieren fosfato desde
ATP.
La carboxilación de restos glutamato permite la activación de proteínas como la trombina.
. Las glicoproteínas se sintetizan por adición de cadenas laterales de oligosacáridos a restos de asparagina,
serina y treonina.
. La formación de puentes disulfuro entre cisteínas permite estabilizar la estructura terciaria de la proteína.
. La adición de grupos prostéticos ocurre por ejemplo con el grupo hemo de las hemoproteínas después de la
síntesis proteica y su completa separación del ribosoma.
Una vez que se realizó la activación del aminoácido se produce la disociación de la subunidad mayor de la
subunidad menor para permitir el acoplamiento del a rn mensajero este a rn mensajero trae el primer codón
de iniciación(AUG) Qué permite la incorporación del aminoácido metionina Unido al ARN de transferencia.
Las dos subunidades disociadas se vuelven a unir Y entonces se forma el complejo funcional de iniciación
80s origen a la síntesis de la cadena polipeptídica coma el aminoácido metionina quedará en lo que se
conoce como sitio peptídico quedando un lugar libre( Qué es el siguiente codon) qué codificar a la llegada de
un nuevo aminoácido. Es entonces que la enzima peptidil transferasa se encargará de la formación del enlace
peptídico y del crecimiento de la cadena polipeptídica hasta llegar Entonces hasta los codones sin sentidos
qué determinarán la finalización del proceso de traducción proteica. En ese momento la cadena polipeptídica
será liberada Y entonces sufrirá una serie de modificaciones estructurales conocidas con el nombre de
maduración postraduccional.

Características generales de la traducción

El sentido de la Traducción es de 5 prima 3 prima
. Las proteínas son sintetizadas desde su extremo amino terminal hacia el carboxilo terminal
.

DESTINO DE LAS PROTEÍNAS SINTETIZADAS:

.Glicosilación proteica
Las glucoproteínas pertenecen al grupo de los heteroglicanos. Contienen cadenas de oligosacáridos
covalentemente unidos a su armazón de polipéptidos.
Cerca del 50% de las proteínas eucariotas tienen azúcares anexados.
C.. Glucosil fosfatidil inositol ancladas(GPI-ancladas)
A. Las que poseen enlaces N- glucosídico:
Las glocoproteinas se distinguen por la presencia de uniones Asn-Glu NAc( asparagina N-acetilglucosamina)
Constituyen la clase principal de glicoproteínas e incluyen tanto a proteínas circulantes como a las unidas a la
membrana.
Su biosíntesis implica la participación dolicol fosfato oligosacárido

El dolicol fosfato es necesario para la síntesis de las glucoproteínas, sobre todo aquellas que tienen enlaces
N-glucosídicos. Se destaca la naturaleza isoprenoides que posee este alcohol.
La N glicosilación: puede dividirse en dos etapas:
1- ensamblaje y transferencia del dolicol fosfato oligosacárido
En una primera etapa de la glicosilación proteica se produce el ensamblaje y la transferencia, dicho proceso
se lleva a cabo en el retículo endoplásmico donde una molécula de dolicol fosfato reacciona con una molécula
de UDP-GlcNAc para formar dolicol pirofosfato n-acetilglucosamina y UMP.
La enzima que cataliza está reacción es una transferasa, y existe un inhibidor in vitro que es la
TUNICAMICINA.

Se van agregando distintos glúcidos y de esa manera va creciendo la cadena formada fundamentalmente por
el oligosacárido n-acetilglucosamina y también manosa.

2- Procesamiento de la cadena de oligosacáridos:

Una vez formadas las cadenas oligosacáridos a nivel del retículo endoplásmico rugoso,por acción de
PROTEITRASNFERASAS,GLUCOSIDASAS y MANOSIDASAS, la cadena de oligosacárido irá adoptando su
configuración definitiva para pasar al aparato de Golgi donde las proteínas son almacenadas en vesículas.

La transferencia se realiza hacia residuos específicos de asparagina en la secuencia Asn-X-Ser/Tre,donde X

es cualquier residuo,excepto prolina,aspartato o glutamato.
La transferencia se realiza de modo contraduccional en el retículo endoplasmático.

El oligosacárido unido a la cadena polipeptídica(rojo), después de haber sido procesado parcialmente por la
glucosidasas y manosidasas, si no hay adición de nuevos azúcares termina resultando en una cadena con
alto contenido de manosa.

B.Las que poseen enlaces O- glucosídico:

Involucra la cadena lateral hidroxilo de serina o treonina y un azúcar como la n-acetilgalactosamina.(GalNAc-
Ser(Tr))
(PROTEÍNAS MITOCONDRIALES)
Las proteínas mitocondriales poseen un péptido señal en el extremo amino terminal rico en aminoácidos con
carga positiva.
Complejos proteicos actúan como canales para la translocación de estas proteínas (hay gasto de ATP)
Dentro de la mitocondria, una peptidasa hidroliza el péptido señal.
Un segmento interno hidrofóbico dirige la reinserción de la cadena en la membrana interna
Puede quedar como proteína integral o pasar al espacio intermembrana
En su destino final adquiere plegamiento con participación de las chaperonas la familia hsp70

PROTEÍNAS LISOSOMALES

PROTEÍNAS NUCLEARES:
POLISOMAS

La función de los polisomas es sintetizar proteínas citoplasmáticas, algunas proteínas mitocondriales y

algunas proteínas de membrana y liberarlas al citoplasma.

ANTIBIÓTICOS y SÍNTESIS PROTEICA(BACTERIANA):

-ESTREPTOMICINA(es un antibiótico mayor en el tratamiento de la tuberculosis pulmonar): actúa a nivel de

la subunidad 30 de los ribosomas bacterianos produciendo alteraciones en el mecanismo que permite el
encaje entre codón y anticodón
-TETRACICLINAS: se unen a la subunidad 30s inhibiendo el acceso del aminoacil-arnt al sitio aceptor del
ribosoma
-CLORANFENICOL:se une a la subunidad 50s e inhibe a la peptidil transferasa y aumenta la estabilidad de
los polisomas.
-ERITROMICINA: inhibe la síntesis proteica al unirse a la subunidad 50s del ribosoma bacteriano, bloqueando
el peptidil transferasa.