PARÁMETROS Y CONDICIONES DE CULTIVO

TERCERO BACHILLERATO ACUACULTURA

Ing. Jorge Medina Noblecilla

1. Identificar y utilizar los equipos propios para determinación de volúmenes.

a) Características del material volumétrico: tipos, características, aplicaciones y
utilización.

En el laboratorio se puede encontrar material muy diverso y es importante conocer su

función puesto que de su correcto uso depende la calidad de los resultados obtenidos.

El material habitualmente utilizado en el laboratorio analítico se puede clasificar en:

1. Material para la medida de volúmenes aproximados

2. Material volumétrico, para la medida de volúmenes con gran precisión.
3. Otro material de uso frecuente

Material para la medida de volúmenes aproximados

La medida de un volumen de forma aproximada se puede realizar mediante vasos de
precipitados, Probetas y matraces Erlenméyer.

VASOS DE PRECIPITADOS

Es un material de laboratorio que se utiliza para contener líquidos o sustancias, para así
poder disolverlas, calentarlas, enfriarlas, etc.

Se pueden encontrar vasos precipitados de diferentes volúmenes (desde 1ml hasta varios
litros), el vaso de precipitado suele usarse en operaciones de laboratorio donde no se
necesite la medida exacta del volumen del líquido.

Características del vaso de precipitado

 El vaso de precipitado tiene forma cilíndrica y posee un fondo plano, se encuentran en

varias capacidades.
 Se encuentran graduados, pero no calibrados, esto provoca que la graduación sea
inexacta
 Son de vidrio y de plástico (posee un vidrio mucho más resistente denominado Pyrex)
 Posee componentes de Teflón y otros materiales resistentes a la corrosión.
 Su capacidad varía desde el mililitro hasta el litro, o más...

Usos del vaso de precipitado

 Su objetivo principal es contener líquidos o sustancias químicas diversas de distinto tipo.
 Como su nombre lo dice permite obtener precipitados a partir de la reacción de otras
sustancias.
 Normalmente es utilizado para trasportar líquidos a otros recipientes.
 También se puede utilizar para calentar, disolver, o preparar reacciones químicas.

La precisión que se alcanza con ellos es bastante baja y se emplean para contener líquidos,
realizar tratamiento de muestra y precipitaciones.

Los hay de distintos tamaños (50, 100, 250 y 1000 ml) y pueden ser de vidrio o de plástico.

Vasos de precipitados de plástico Vasos de precipitados de vidrio

PROBETAS

La probeta es un instrumento volumétrico que consiste en un cilíndro graduado de vidrio que

permite contener líquidos y sirve para medir volúmenes de forma aproximada.

Está formado por un tubo generalmente transparente de unos centímetros de diámetro y

tiene una graduación desde 5 ml hasta el máximo de la probeta, indicando distintos
volúmenes. En la parte inferior está cerrado y posee una base que sirve de apoyo, mientras
que la superior está abierta (permite introducir el líquido a medir) y suele tener un pico
(permite verter el líquido medido).

Puede estar constituido de vidrio (lo más común), o de plástico. En este último caso puede
ser menos preciso; pero posee ciertas ventajas, por ejemplo, es más difícil romperla, y no es
atacada por el ácido fluorhídrico (ácido que no se puede poner en contacto con el vidrio ya
que se corroe, en cuyo caso la probeta sí lo soporta). Esta adicionalmente se utiliza para las
mediciones del agua y otros líquidos.

Las probetas suelen ser graduadas, es decir, llevan grabada una escala por la parte exterior
que permite medir un determinado volumen, aunque sin mucha exactitud.
Permiten medir volúmenes de forma aproximada, o transvasar y recoger líquidos. Se
fabrican de distintos tamaños y materiales (vidrio y plástico), siendo las capacidades más
frecuentes son 5, 10, 25, 50, 100, 250, 500 y 1000 ml.

Probetas de diferentes tamaños

Buen uso de la probeta

Para una buena medición y uso de la probeta debemos considerar los siguientes factores

 La probeta debe estar limpia antes de usarse.

 Se introduce el líquido a medir hasta la graduación que queramos.
 Si se pasó en el volumen que necesite, ayúdese de una pipeta para lograr su volumen
requerido.

MATRACES ERLENMEYER

Es un frasco transparente de forma cónica con una abertura en el extremo angosto,

generalmente prolongado con un cuello cilíndrico, suele incluir algunas marcas.

Por su forma es útil para realizar mezclas por agitación y para la evaporación controlada de
líquidos; además, su abertura estrecha permite la utilización de tapones. El matraz de
Erlenmeyer no se suele utilizar para la medición de líquidos ya que sus medidas son
imprecisas.

Este tipo de matraces se emplean principalmente en las valoraciones.

 Matraces erlenméyer de 100 y 250 mL

Técnicas en las que se emplea

Es empleado en lugar del clásico vaso de precipitados cuando contienen un medio líquido
que debe ser agitado constantemente (como en el caso de las titulaciones) sin riesgo de que
se derrame su contenido, o cuando se debe trabajar con reacciones químicas violentas.

Suele utilizarse para calentar sustancias a temperaturas altas aunque no vigorosamente; la

segunda tarea suele dejársele al balón de destilación.

El matraz de Erlenmeyer no se suele utilizar para la medición de líquidos, ya que sus medidas
son imprecisas.

En Microbiología se emplea para la preparación de caldos de cultivo debido a que, entre

otros motivos, puede taparse fácilmente con un tapón de algodón hidrófobo.

Metodología de uso: técnicas de laboratorio

Como todo material de vidrio tiene un método específico para utilizarlo correctamente. Para
anclarlo, se puede colocar un peso de plomo o metal sobre el exterior.

Al calentarlo, suele colocarse sobre de alguna de las siguientes formas. Cuando se arma el
aparato de estas maneras, suele colocarse una tela metálica entre el matraz y el aro o el
trípode.

 Sobre un trípode.
 En un anillo o aro de metal que, a su vez, está aferrado a un soporte universal por medio
de una doble nuez o algún asa similar. El aro lo mantiene sobre un mechero Bunsen para
que la llama del mechero lo caliente.
 Puede aferrarse el matraz directamente al soporte universal sosteniéndolo con una
agarradera para tubos de ensayo en el cuello del matraz.

Material volumétrico

Este tipo de material permite la medida precisa de volúmenes. En este grupo se incluyen
buretas, pipetas graduadas, pipetas aforadas, micropipetas y matraces aforados. En función
de su calidad, existen pipetas, matraces aforados y buretas de clase A y de clase B. La clase A
es de mayor calidad y es la que debe usarse en Química Analítica.

BURETAS

Son tubos gruesos, cortos, graduados, de diámetro interno uniforme, dependiendo del
volumen, de décimas de mililitro o menos. Su uso principal se da en volumetrías, debido a la
necesidad de medir con precisión volúmenes de líquido variables.

Los dos tipos principales de buretas son:

 Buretas de Geissler, la llave es de vidrio esmerilado; se debe evitar que el líquido esté
mucho tiempo en contacto con la bureta, pues determinados líquidos llegan a obstruir, e
incluso inmovilizar, este tipo de llaves.

 Bureta de Mohr, la llave ha sido sustituida por un tubo de goma con una bola de vidrio en
su interior, que actúa como una válvula.

El uso de las buretas es en trabajos volumétricos, los cuales se realizan para valorar
disoluciones de carácter ácido o básico.

La bureta permite saber con gran exactitud, la cantidad de base que se ha necesitado para
neutralizar un ácido, lo que permite calcular la concentración del mismo. La operación
contraria, neutralizar y valorar una base con un ácido, también es posible.

El tamaño común es de 25 y 50 ml, graduados cada 0,1 ml.

 bureta de 25 ml

Procedimiento de uso de las buretas:

1. Colocar la bureta en el soporte y sujetar con la pinza

2. Llenar la bureta con la disolución valorante (la que nos servirá para neutralizar y valorar
nuestra disolución problema)

3. En la base del soporte, poner papel filtro.

4. Colocar debajo de la bureta, y encima del soporte con el papel filtro, el Erlenmeyer o vaso
de precipitado con la disolución problema o líquido a valorar que contendrá el indicador.

5. Con la mano derecha (para los diestros), abrir la llave de paso suavemente hasta que
empiece a descender el líquido que contiene la bureta.

6. Con la mano izquierda, se utiliza para mover el recipiente que contiene la sustancia a
valorar mediante gestos suaves, con el fin de homogeneizar su contenido y poder detectar
el momento en el que se produce un cambio de color, el cual nos indicara que la reacción
a finalizado.

7. Después, realizar los cálculos y obtener el resultado, interpretándolo e informándolo del

mismo.

PIPETA GRADUADA

Se utiliza para medir o transvasar con exactitud pequeñas cantidades de líquido.

La pipeta graduada (o volumétrica) es un tubo de vidrio abierto por ambos extremos y más
ancho en su parte central. Su extremo inferior, terminado en punta, se introduce en el
líquido; al succionar por su extremo superior, el líquido asciende por la pipeta. Los dos tipos
de pipeta que se utilizan en los laboratorios con más frecuencia son la pipeta de Mohr o
graduada y la pipeta de vertido.

Se emplean para la medida de un volumen variable de líquido que se vierte.

Proporcionan una exactitud inferior a la de las pipetas aforadas salvo en el caso de las de 1 y
2 ml.

Pipetas graduadas de varios tamaños

Manejo de la pipeta

 El líquido se aspira mediante un ligero vacío usando bulbo de succión o propipeta, nunca
la boca.
 Asegurarse que no haya burbujas ni espuma en el líquido.
 Limpiar la punta de la pipeta antes de trasladar líquido
 Llenar la pipeta sobre la marca de graduación y trasladar el volumen deseado. El borde
del menisco debe quedar sobre la marca de graduación.

PIPETA AFORADA

La pipeta aforada consiste en un tubo de vidrio que presenta un abultamiento en su parte

central y un estrechamiento en su extremo inferior. Si tiene una marca o aforo, por encima
del ensanchamiento, nos indica el nivel que debe alcanzar el líquido para que al vaciarla,
vierta el volumen que indica su capacidad. Si la pipeta presenta dos aforos, por encima y
debajo del abultamiento, nos indica que el volumen de líquido contenido entre ellos se
corresponde a la capacidad que indica la pipeta. Son de uso menos frecuente que las
anteriores.
TUBO DE ENSAYO GRADUADO.

El tubo de ensayo es uno de los principales instrumentos de laboratorio ya que este se usa
en cualquier procedimiento, como la preparación de soluciones o la toma de muestras que
luego serán depositadas en este.

Formas y Características

 Es un pequeño tubo cilíndrico de vidrio con una punta abierta (que puede poseer una
tapa) y la otra cerrada y redondeada, que se utiliza en los laboratorios para contener
pequeñas muestras líquidas.
 Está hecho de un Vidrio Especial (Pyrex) que resiste las temperaturas muy altas, sin
embargo los cambios de temperatura muy bruscos pueden provocar el rompimiento de
tubo.

Usos

 En los laboratorios se utiliza para contener pequeñas muestras líquidas, y preparar

soluciones.

Forma de Uso

 El calentamiento del tubo conlleva utilizar pinzas de madera si se expone a altas

temperaturas durante un largo tiempo. De lo contrario pueden usarse las manos para
sostenerlo, en casos los cuales no exista peligro alguno.
 No direccionar el tubo hacia nuestro rostro o cuerpo cuando se lleven a cabo reacciones
químicas o preparaciones.
 Su almacenamiento se deposita en gradillas, las cuales funcionan como sostén.

PARTE EXPERIMENTAL:

1. Colocar en un tubo de ensayo dos gramos de CuSO4.5H2O y calentar hasta que pierda su
coloración azul. Una vez se enfríe el tubo adicionar 2 o 3 gotas de Etanol, observar y describir
los resultados.

2. En un tubo de ensayo colocar 5 ml de agua destilada y luego añadir en su orden 6 gotas

de una solución de FeCl3 y 2 gotas de una solución de Ferrocianuro de Potasio, observar e
interpretar los resultados.

3. Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de una solución de AgNO3 y adicionar luego 5 gotas de

una solución de Cromato de Potasio. Observar la reacción que sucede.

4. Introducir 3 trocitos de Zinc en un tubo de ensayo, luego agregar 2 ml de agua 1 ml de HCL

concentrado, observar el desprendimiento de un gas. ¿Que será este gas? Una vez
culminada la reacción anterior decante el líquido y adicione 2 ml de una solución CuSO4,
observe e interprete los resultados.

5. Colocar 3 clavos de hierro en un tubo de ensayo y luego adicionar 5 ml de una solución de

CuSO4 y calentar suavemente, observar el depósito de un sólido de color rojizo en el fondo
del tubo. ¿Que es este sólido?
6. Medir con una pipeta graduada de 3 ml de una solución de CuSO4 y colocarla en un tubo
de ensayo. Luego adicionar 3 ml de una solución de Na2S. Observar.

7. Coloque en un tubo de ensayo un gramo de HgO y caliente el tubo en posición inclinada

hasta completa disposición del Oxido de Mercurio, observar la formación y el depósito de
mercurio metálico en las paredes del tubo

2. Identificar y utilizar los equipos propios para la observación microscópica de muestras.

Características del material de microscopía: tipos, aplicaciones y técnicas de utilización.

La información que se obtiene del análisis microscópico de una muestra de un material es

muy variada. Aparentemente se trata de información muy cualitativa y por tanto pudiera
parecer de ‘segunda clase’. Sin embargo, las conclusiones que podamos obtener de un
estudio completo y cuantitativo sobre un material deben de estar de acuerdo con su forma
externa o morfología.

La microscopía es un área de trabajo multidisciplinar y por tanto aplicable a muchos tipos de

muestras y procesos. Aunque su desarrollo principal e histórico fue motivado por su
aplicación a la biología, hoy día se puede utilizar en infinidad de áreas, y particularmente
para el estudio de materiales y capas delgadas. La información que se obtiene es muy
variada.

Nos permite, por ejemplo, relacionar la forma de un material u objeto con sus propiedades y
estructura interna, así como deducir procesos de formación y crecimiento, o inferir
información sobre la homogeneidad de la muestra en estudio

La etimología de la palabra microscopía indica ‘reproducción de micras’, y así fue en sus

orígenes. Actualmente la resolución es mucho mayor y podríamos, por tanto, hablar de
‘Ångstroncopios’ o ‘nanoscopios’ si nos refiriésemos a los microscopios con mayor poder
resolutivo que existen actualmente. Con todo, es importante reseñar que la microscopía
ofrece una información local. Un buen análisis microscópico debe preocuparse de la
representatividad de los resultados, y por tanto acompañarse de una descripción estadística
de formas y tamaños.

Así, en un estudio, se deberían repetir las imágenes en varias zonas o puntos de la muestra
para extraer una información verdaderamente representativa.

Un microscopio se puede considerar como un aparato que amplifica las dimensiones de un

objeto. Todo microscopio se puede descomponer en tres partes principales: sonda,
interacción sonda-objeto y detección del producto de la interacción. La sonda es la partícula
o radiación que enviamos contra el objeto que queremos ampliar, por ejemplo, electrones en
el caso del microscopio electrónico; la interacción es el proceso de ‘difusión’ entre la sonda
incidente y la muestra que queremos ver. Durante esta interacción, el objeto le transmite
información a la sonda, que es por último detectada mediante un sistema óptico adecuado
para ello. Las combinaciones de estos tres elementos dan lugar a todos los tipos de
microscopios existentes. Teniendo en cuenta la sonda utilizada, los tipos principales de
microscopios son: el óptico, el microscopio electrónico y los llamados microscopios de campo
cercano.

EL MICROSCOPIO ÓPTICO

Los microscopios de tipo óptico se basan en la ampliación de la imagen de un objeto

mediante el uso de lentes convergentes. Este es el tipo de microscopio más antiguo y más
utilizado.

Microscopio monocular Microscopio binocular

La sonda en estos microscopios es la radiación visible que ilumina la muestra que queremos
estudiar. Poseen una óptica doble (objetivo y ocular), a diferencia de las lupas, que
presentan una sola lente.

El microscopio óptico fue inventado a finales del siglo XVI por el holandés Zacharías Janssen,
quien construyó un tubo con lentes en los extremos que le permitía obtener imágenes
borrosas debido a la mala calidad de las lentes que empleaba. Posteriormente, en el siglo
XVII, Van Leuwenhoek utilizó una versión diferente de este microscopio para descubrir la
célula como constituyente de los seres vivos. La mayor parte de las células no son visibles
para el ojo humano, pero sí con un microscopio de pocos aumentos.

Van Leuwenhoek observó células de musgo, espermatozoides, huevos y hasta alguna

bacteria. Estos estudios fueron la base de la teoría celular moderna. La resolución máxima
de este tipo de microscopios viene dada por fenómenos de difracción en el borde del
objetivo. Es decir, si suponemos que las lentes son perfectas, sin ningún tipo de aberración ni
defectos de construcción, siempre tendríamos difracción en el borde de la lente.

MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS

Los microscopios ópticos presentan una gran sencillez y versatilidad, sin embargo, muchas
estructuras, principalmente en el área de materiales presentan dimensiones inferiores a la
micra y por tanto para su caracterización morfológica es necesario utilizar microscopios con
mayor poder resolutivo que los ópticos. La resolución máxima en el microscopio óptico
depende del ‘tamaño’ de la sonda. Al ser esta radiación electromagnética, la resolución es
aproximadamente la mitad de la longitud de onda con la que se ilumine el objeto. En los
microscopios electrónicos la sonda que interacciona con la muestra es un haz de electrones
de dimensiones nanométricas.

Microscopio electrónico de barrido

La idea básica consiste en acelerar a altas energías un haz de electrones y focalizarlo de

manera a irradiar la muestra en un punto de unos 10 nm. Durante la interacción de este haz
con la muestra se producen una infinidad de procesos: generación de electrones secundarios,
electrones elásticos, rayos X, etc. El microscopio detecta y ‘cuenta’ el número de partículas
de un determinado tipo emitidas en cada uno de los puntos irradiados. El concepto y primer
diseño de los microscopios electrónicos de barrido vienen de Knoll en 1935, aunque su
desarrollo y fabricación hasta alcanzar resoluciones de 100 nm comenzó sobre los años 40.

TÉCNICAS PARA UTILIZAR EL MICROSCOPIO

Con frecuencia la Ciencia y la Técnica van de la mano, casi todos los avances científicos han
sido el resultado de nuevos avances técnicos, esto es particularmente ilustrativo en lo
referente al uso del microscopio. Al descubrimiento de la célula se llegó gracias a una serie
de descubrimientos científicos que estuvieron ligados a la mejora de la calidad de los
microscopios. Uno de los pioneros en la construcción de estos aparatos fue Anton van
Leeuwenhoek.

¿Cómo es un microscopio?

El microscopio es un aparato que aumenta la imagen de los objetos y nos permite observar
aquello que, en un principio, es invisible para el ojo humano. Fue utilizado por primera vez,
como tal, por el holandés Anton van Leeuwenhoek el año 1675. Tiene dos partes: una óptica,
para observar, y otra mecánica, que sostiene a la primera.

La parte óptica consta de:

• Ocular, lente situada cerca del ojo del observador.

• Objetivo, lente situada cerca del objeto que se quiere observar.

• Diafragma, dispositivo para graduar la entrada de luz.

• Condensador, dispositivo para concentrar la luz sobre el objeto.

• Foco de luz o espejo, para iluminar el objeto.

La parte mecánica del microscopio consta de:

• Columna, parte que sostiene el tubo óptico.

• Tubo óptico, donde se encuentra ubicado el ocular.

• Revólver, parte móvil que sostiene los objetivos.

• Platina, que soporta el portaobjetos.

• Pie, sostiene todo el microscopio.

• Tornillo macrométrico, que permite desplazamientos rápidos de las lentes.

• Tornillo micrométrico, que permite desplazamientos suaves de las lentes.

¿Cómo se utiliza el microscopio?

El objeto que queremos observar se coloca en un vidrio transparente que llamamos

portaobjetos, y lo cubrimos con otro vidrio más fino que llamamos cubreobjetos.

Una vez conocido el funcionamiento de las partes del microscopio debes saber que el
aumento que nos ofrece un microscopio se obtiene con la combinación del objetivo y del
ocular. Por ejemplo, si tenemos un ocular de 15x y un objetivo de 40, el aumento obtenido es
de:

40 x 15 = 600 aumentos.

El enfoque del objeto se realiza con el tornillo macrométrico, y después se afina con el
tornillo micrométrico, hasta conseguir una visión perfecta. Una vez enfocado el objeto, se
pasa al objetivo inmediatamente superior, hasta obtener el aumento deseado. Cada vez que
cambies de objetivo cuida de no tocar la preparación, el vidrio se puede romper.

La luminosidad para observar la muestra la puedes regular moviendo el diafragma hasta

conseguir la más adecuada para cada caso.

Como unidad de medida, en microscopia se utiliza la micra (µ). Su equivalencia es:

1µ = 1/1000 mm ; por tanto, 1 mm = 1000 µ

¿Cómo se prepara una observación microscópica?

Para observar perfectamente un objeto es necesario someterla a un proceso de preparación
que destaque aquellas partes que nos interesen. También, que conserve la muestra para
observaciones posteriores. Dos fases de este proceso son: la fijación y la tinción.

Con la fijación se consigue que la muestra que queremos observar no se mueva. Se suele
utilizar diferentes líquidos: alcohol etílico 70%, ácido acético...; también se utilizan altas
temperaturas que ayudan a deshidratar la muestra. El objeto, una vez fijado, debe lavarse
en un medio apropiado como alcohol o agua.

La tinción consiste en colorar la muestra que queremos observar para, así, destacar aquellas
partes que nos interesen observar. La gama de colorantes es muy variada, y cada uno
resalta una parte diferente del objeto. Los colorantes siguientes suelen utilizarse para
resaltar las partes de la célula:

- La estructura celular: azul de metileno, orceína acética.

- El citoplasma celular: eosina, fucsina ácida, verde luz.

- El núcleo celular: fucsina básica, verde metilo.

3. Identificar y utilizar los equipos propios para la disección de ejemplares de cultivo.

El material de disección es el conjunto de herramientas empleadas para realizar estudios de

anatomía y morfología internas sobre animales y plantas muertos.

Un Estuche de disecciones está compuesto por:

• Mango de Bisturí o escalpelo

En la cabeza posee una ranura, donde la hoja de bisturí se desliza.

• Hojas de bisturí

Son de acero inoxidable o de acero al carbono, y se dan en varios tamaños y formas según el
mango que se utilice y el uso a que se destinen.
Función: se utiliza para el corte de piel.

• Pinzas de Kelly rectas y curvas (Pinzas hemostáticas)

Función: Son instrumentos de aplastamiento empleados para clampar (comprimir o pinzar)

vasos sanguíneos. Están disponibles con puntas rectas o curvas.

• Separadores de farabeurt

Función: separación de tejidos superficiales

• Pinzas de con dientes y sin dientes (Pinza de disección y pinza diente de ratón)

Función: Se utiliza para sujetar los tejidos mientras estos son sometidos a exposición, corte o
suturas.

• Tijeras de mayo recta y curva

Función: Son grandes y tienen las hojas más anchas. Se usan para cortar grandes grosores o
cantidades de tejidos. También se usan para cortar estructuras fuertes como tendones o
fascias y suturas.

• Porta agujas de Hegar

Función: Son instrumentos diseñados para la sujeción de las agujas de sutura, así como para
pasar los hilos de sutura y realizar los nudos.

• Estilete abotonado

Función: instrumento metálico, puntiagudo o abotonado, que sirve para ver la profundidad y
dirección de una herida.

• Sonda acanalada

Función: sirve para evidenciar el trazado de las fístulas y realizar el drenaje de las heridas y
abscesos.

• Agujas curvas: La selección de la aguja dependerá del tipo de tejido a ser suturado
(penetrabilidad, densidad, elasticidad y espesor); topografía de la herida (profunda o
estrecha) y características de la propia aguja (tipo de ojo, largo y diámetro). Por otro lado la
ductilidad, resistencia y agudeza de la aguja son factores importantes que determinan sus
características manipulatorias y de empleo. ...

PRACTICA
 DETERMINACIÓN DE SEXO Y DIMORFISMO SEXUAL EN PECES

Objetivo. - Conocer las principales diferencias que presentan los peces para poder
determinar su sexo

Introducción.

Los peces constituyen una superclase zoológica de vertebrados acuáticos de sangre fría
que tienen, en general, forma aerodinámica y fusiforme adecuada para moverse en el
medio acuático con el menor gasto posible de energía. Existen dos clases vivientes del gran
grupo de peces: la de los peces cartilaginosos (Condrictios) y la más amplia de peces óseos
(osteíctios). Generalmente los peces tienen los sexos separados y muchas especies presentan
un evidente dimorfismo sexual, los machos son diferentes en forma y color de las hembras
(Buxade, 1997).

Distinguir el sexo de un pez no siempre es una tarea fácil, los órganos sexuales o gónadas se
localizan dentro de su cuerpo por lo que, a simple vista, será complicado afirmar quien es
macho y quien es hembra. Hay ocasiones en que los órganos sexuales son visibles porque
algunos peces han mutado una aleta en un órgano copulador (gonopodio). De esta forma el
macho puede fecundar los huevos localizados en la hembra de forma interna; este es el caso
de los Poecílidos. Sin embargo, en otras especies no se observan diferencias en los órganos
sexuales, es por esto que tendrá que recurrirse a datos de otro tipo para que nos ayuden a
determinar el sexo de los peces. Estos rasgos de carácter secundario pueden ser el color, el
tamaño del cuerpo y la forma y tamaño de las aletas. En muchas ocasiones, este tipo de
rasgos no serán definitorios y habrá que fijarse en aspectos como el comportamiento.

Es importante señalar que existen especies que suelen presentar cierto tipo de
hermafroditismo, por lo que en alguna etapa de su vida se comportan como especímenes de
un sexo y después se presenta un cambio de sexo (salmónidos, centropomidos, etc.)

El dimorfismo sexual se puede definir como la diferencia física entre machos y hembras de
una misma especie. Los sexos se diferencian por la forma de sus genitales, a esto se llama
dimorfismo sexual primario por oposición al secundario que agrupa las diferencias que no
son físicamente necesarias para el transporte de los gametos.

Materiales, reactivos y equipos

 2 ejemplares de peces
 Charola de disección
 Solución de cloro al 30%
 Estuche de disección
 Guantes de látex
 Lupas
 Bolsa de plástico
 Ictiómetro
 Balanza
 Alcohol al 90%

Procedimiento.

a) Coloque en la charola los dos ejemplares de peces y observe las características externas
de cada uno (tamaño, color, cabeza, dientes, poros urogenitales, aletas, ojos, etc.). haga
una ficha que incluya la información básica de cada especie (nombre común, nombre
científico, medidas, etc)

b) Tome cada ejemplar y determine los parámetros de medición básicos (longitud patrón,
longitud total, altura, grosor, longitud y altura de las aletas y peso)

c) Anote sus observaciones que hasta este momento ha realizado

d) Con el estuche de disección realice un corte en la cavidad abdominal y retire

cuidadosamente las gónadas

e) Observe las gónadas para determinar el sexo de cada ejemplar y anote sus observaciones

f) Pese las gónadas de cada ejemplar

g) Ponga las gónadas en el alcohol para su conservación

h) Con la solución de cloro limpie cuidadosamente el área de trabajo

HECHOS Y CONCEPTOS ASOCIADOS CON LA OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS

OBSERVACIÓN IN SITU

La observación minuciosa del comportamiento de los animales enfermos podría darnos

pistas de la enfermedad que lo aqueja, para el efecto, se procede a la observación de la
conducta del pez en los estanques, dicho procedimiento se efectúa toda vez que la
transparencia del recinto acuático lo permita o pueden ser trasladados en contenedores con
agua limpia para un examen más de cercano.

En el momento de la observación se debe tener el máximo cuidado en no producir

perturbaciones que puedan generar percepciones distintas a la conducta que está
demostrando el pez. En el análisis visual se deben considerar los siguientes aspectos:

a. Forma de natación (se observa poca reacción de fuga con movimiento insensible).
b. Comportamiento en cardumen (dependiendo de la especie podría visualizarse
aislamiento de los peces del grupo cuando se trata de individuos de comportamiento
gregario) u otras conductas anormales (saltos, boqueo, hacinamientos y otros),
incluyendo nado anormal, puede ser nado en espiral, lateral, movimientos
espasmódicos.
c. Aspecto externo del pez (cambios en la coloración normal de los mismos, como
decoloraciones, oscurecimiento).
d. Aspecto corporal (secreciones excesivas de mucus y lesiones en la piel).
e. Respuestas a la alimentación ofrecida (disminución en el consumo).

OBTENCIÓN Y ENVÍO DE MUESTRA AL LABORATORIO

1. Muestras de peces

El éxito de un examen clínico, dependerá exclusivamente de la selección apropiada del

material enviado, como así también del correcto procedimiento durante la toma de
muestra y la adecuada conservación del espécimen hasta llegar al laboratorio
ictiopatológico.

El envío de muestras frescas de peces al laboratorio de ictiopatología, se realiza de la

siguiente forma:

2. Aspectos a considerar para la toma de muestra

a. Elegir peces que manifiestan la enfermedad y que aun estén vivos (moribundos).
b. Enviar cuatro a seis peces representativos del problema evidenciado.
c. En caso de no conseguir animales vivos que desarrollen la enfermedad, enviar
muestras de peces, con muerte lo más recientemente posible.
d. Remitir el material lo más rápidamente posible.
e. La muestra debe ir acompañada de los datos del establecimiento y las
informaciones recopiladas en el historial clínico y la evaluación in situ.
 f. Colocar las muestras frescas en bolsas plásticas limpias (no usadas para el mismo
propósito anteriormente) y en un recipiente con hielo, evitando el contacto directo
de unas bolsas con otras.

g. En lo posible realizar disecciones para obtener muestra de órganos internos

especialmente hígado, bazo, riñón, intestinos y músculos.

3. Envío de muestras
a. Seleccionar animales vivos con síntomas de enfermedad.
b. Enviar sólo animales frescos conservados en hielo (sacrificados para el envío).
c. Muestras de partes del animal como branquias, corazón, hígado, páncreas, tracto
gastrointestinal, riñón y bazo, deberán colocarse en bolsas separadas y etiquetadas
con información básica (ejemplo: hígado, pez adulto, macho, estanque No.--;
colectado por ---; fecha de colecta).
d. De acuerdo con la solicitud del laboratorio, pueden enviarse muestras específicas,
como de piel, branquias u otros órganos internos, muestras de sangre. Deberán
obtenerse indicaciones específicas por parte del laboratorio.

Envío

Los tubos con las muestras se colocarán en recipientes aislados (por ejemplo caja de
polietileno de paredes gruesas) con una cantidad suficiente de hielo o de bloques de
enfriamiento para garantizar la refrigeración de las muestras durante su traslado al
laboratorio. Se evitará la congelación. La temperatura de las muestras durante el transporte
nunca deberá exceder de 10ºC y en el momento de la recepción todavía deberá haber hielo
en el recipiente de transporte, o, alternativamente, uno o más bloques de enfriamiento
deberán estar aún helados parcial o totalmente.
Las muestras deberán estar en el laboratorio lo antes posible y nunca después de que hayan
transcurrido 48 horas desde la recogida de las muestras. Solo en casos excepcionales
(cuando las muestras se recojan en zonas muy remotas) se podrá iniciar el examen virológico
en un plazo de 72 horas desde la recogida del material, siempre que éste quede protegido
con medio de transporte y se cumplan los requisitos de temperatura durante el transporte.

Identificación

Las muestras irán convenientemente identificadas y acompañadas de un informe en el que

se registrarán:

 Nombre de la instalación
 Dirección de la instalación
 Propietario o Persona responsable
 Tipo de explotación: de agua continental, marina,
 Especie(s): Trucha arcoiris, trucha común, etc.
 Naturaleza de la muestra: vísceras, fluido ovárico, alevines, etc.
 Causa de la investigación: programa de vigilancia, diagnóstico, etc.
 Síntomas clínicos
 Análisis solicitados

4. Fijadores utilizados para la conservación de muestra

Los conservantes más frecuentemente utilizados son: hielo, formol, alcohol, etanol y
alcohol glicerina. Dichos productos son utilizados para la fijación de la muestra según el
tipo de examen esperado, cabe mencionar que para los exámenes histopatológicos se
utiliza formol al 10 %, mientras que, para los exámenes parasitarios se emplea alcohol al
70 % o alcohol glicerina.
 5. Procedimiento para la toma de muestra de órganos internos

El productor puede realizar procedimientos sencillos para obtener y enviar órganos

internos al laboratorio. Para el efecto debe realizar un corte al costado del vientre del
pez y extraer algunos órganos fácilmente reconocibles como el hígado, el intestino y el
estómago. Posteriormente debe ubicarlos en recipientes limpios de cristal o plástico y
agregarles los fijadores.

REACTIVOS QUÍMICOS: TIPOS Y PREPARACIÓN

Reactivos Químicos

Son productos químicos que se utilizan con fines analíticos o de investigación, poseen un
boletín de garantía que permite obtener resultados confiables en el análisis de control de
calidad de materias primas, productos intermedios y productos terminados.

Un reactivo es, en química, toda sustancia que interactuando con otra (también reactivo) en
una reacción química da lugar a otras sustancias de propiedades, características y
conformación distinta, denominadas productos de reacción o simplemente productos.

Por tratarse de compuestos químicos, los reactivos se pueden clasificar según muchas
variables: propiedades físico-químicas, reactividad en reacciones químicas, características
del uso del reactivo.

Así los reactivos se pueden clasificar en:

PB: Destinado a bioquímica.
PA: Destinados a aplicaciones analíticas
QP: Químicamente puro, destinado a uso general en laboratorio.
DC: Destinados a las aplicaciones del análisis clínico.

En todos los laboratorios existen los tres ácidos principales, que son el clorhídrico, el sulfúrico
y el nítrico. También hay bases o alkalis como el hidróxido de sodio y el de potasio, el agua
destilada y otros solventes. Estos son los que SIEMPRE van a existir en un laboratorio.

REACTIVOS SOLIDOS REACTIVOSLÍQUIDOS DISOLUCIONES PREPARADAS

Clasificación

En el laboratorio de análisis se utilizan reactivos de calidad analítica que se producen

comercialmente con un alto grado de pureza. En las etiquetas de los frascos se relacionan los
límites máximos de impurezas permitidas por las especificaciones para la calidad del reactivo
o los resultados del análisis para las distintas impurezas. Dentro de los reactivos analíticos
pueden distinguirse tres calidades distintas:

• Reactivos para análisis (PA): Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el
número mínimo de sustancias determinables por el método que se utilice.

• Reactivos purísimos: Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos “para
análisis”.

• Reactivos especiales: Son reactivos con calidades específicas para algunas técnicas
analíticas, como cromatografía líquida (HPLC), espectrofotometría (UV)…

Hay reactivos que tienen características y usos específicos como los reactivos calidad patrón
primario, que se emplean en las técnicas volumétricas, o los patrones de referencia.

Etiquetado de los reactivos

Todo envase de reactivos debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una
etiqueta bien visible que contenga las distintas indicaciones que se muestran en las
siguientes figuras:

Etiqueta para un reactivo sólido

Etiqueta para un reactivo líquido

Los pictogramas, las frases R de RIESGO y las frases S de SEGURIDAD aparecen en las
etiquetas del producto informando sobre la peligrosidad del mismo.

PICTOGRAMAS DE PELIGROSIDAD

Frases R. Riesgos específicos atribuidos a las sustancias peligrosas

R1. Explosivo en estado seco
R10. Inflamable
R23. Tóxico por inhalación
R38. Irrita la piel….

Frases S. Consejos de prudencia relativos a las sustancias peligrosas

S3. Consérvese en lugar fresco
S22. No respirar el polvo
S29. No tirar los residuos por el desagüe
S50. No mezclar con (espec
ificar producto)

Manejo de reactivos

Al trabajar con cualquier reactivo se deben tomar todas las precauciones necesarias para
evitar la contaminación accidental del mismo. Para ello han de seguirse las siguientes reglas:

 Escoger el grado del reactivo apropiado para el trabajo a realizar, y siempre que sea
posible, utilizar el frasco de menor tamaño.

 Tapar inmediatamente el frasco una vez extraído el reactivo, para evitar posibles
confusiones con otros frascos.

 Sujetar el tapón del frasco con los dedos; el tapón nunca debe dejarse sobre el puesto
de trabajo.

 Evitar colocar los frascos destapados en lugares en que puedan ser salpicados por
agua u otros líquidos.

 Nunca devolver al frasco original cualquier exceso de reactivo o de disolución.

 Mantener limpios y ordenados los estantes de reactivos y las balanzas. Limpiar

inmediatamente cualquier salpicadura.

 Rotular cualquier disolución o frasco de reactivo cuya etiqueta original se haya

deteriorado.

REACCIONES Y CAMBIOS EN LAS MUESTRAS

LOS CAMBIOS EN LA MATERIA

La materia puede sufrir cambios mediante diversos procesos. No obstante, todos esos
cambios se pueden agrupar en dos tipos: cambios físicos y cambios químicos.

CAMBIOS FÍSICOS

En estos cambios no se producen modificaciones en la naturaleza de la sustancia o

sustancias que intervienen. Ejemplos de este tipo de cambios son:

 Cambios de estado.

 Mezclas.

 Disoluciones.

 Separación de sustancias en mezclas o disoluciones.

CAMBIOS QUÍMICOS

En este caso, los cambios si alteran la naturaleza de las sustancias: desaparecen unas y
aparecen otras con propiedades muy distintas. No es posible volver atrás por un
procedimiento físico (como calentamiento o enfriamiento, filtrado, evaporación, etc.)

Una reacción química es un proceso por el cual una o más sustancias, llamadas reactivos, se
transforman en otra u otras sustancias con propiedades diferentes, llamadas productos.

En una reacción química, los enlaces entre los átomos que forman los reactivos se rompen.
Entonces, los átomos se reorganizan de otro modo, formando nuevos enlaces y dando lugar
a una o más sustancias diferentes a las iniciales.

CARACTERÍSTICAS DE LAS REACCIONES QUÍMICAS

La o las sustancias nuevas que se forman suelen presentar un aspecto totalmente diferente
del que tenían las sustancias de partida.

Durante la reacción se desprende o se absorbe energía:

Reacción exotérmica: se desprende energía en el curso de la reacción.

Reacción endotérmica: se absorbe energía durante el curso de la reacción.

Se cumple la ley de conservación de la masa: la suma de las masas de los reactivos es igual a
la suma de las masas de los productos. Esto es así porque durante la reacción los átomos ni
aparecen ni desaparecen, sólo se reordenan en una disposición distinta.

Una reacción química o cambio químico es todo proceso químico en el cual dos o más
sustancias, llamadas reactivos, por efecto de un factor energético, se transforman en otras
sustancias llamadas productos. Esas sustancias pueden ser elementos o compuestos. A la
representación simbólica de las reacciones se les llama ecuaciones químicas.

Los productos obtenidos a partir de ciertos tipos de reactivos dependen de las condiciones
bajo las que se da la reacción química. No obstante, tras un estudio cuidadoso se comprueba
que, aunque los productos pueden variar según cambien las condiciones, determinadas
cantidades permanecen constantes en cualquier reacción química. Estas cantidades
constantes, las magnitudes conservadas, incluyen el número de cada tipo de átomo
presente, la carga eléctrica y la masa total.

1. PRUEBA DE BENEDICT.

¿Qué es Benedict? En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares

reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la
maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a
Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El reactivo de
Benedict consta de:
  Sulfato cúprico

 Citrato de sodio

 Carbonato anhidro de sodio.

Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio. Coloque en un tubo de ensayo, 3ml. de
solución glucosa, agregue unas 5-7 gotas de reactivo Benedict, tome el tubo de ensayo con
una pinza y proceda a calentar hasta hervir, sin calentar el fondo del tubo. Debe tener
precaución de no colocarse frente a la boca del tubo. Observe lo que ocurre, que cambios
han ocurrido, anote, explique lo sucedido.

Al realizar la práctica, notamos que la solución glucosa era de color transparente, y el

reactivo Benedict era de un color Celeste. Al mesclar ambas sustancias obtuvimos una
sustancia de color Celeste Claro.

Posterior mente procedimos a calentar la mezcla y notamos que en menos de 1 minuto la

sustancia química cambiaba de color y paso de Celeste Claro a un color Naranja indicando
así la presencia de Glúcidos, en este caso, la presencia de Glucosa

2. PRUEBA DE LUGOL

¿Qué es Lugol? El Lugol es una sustancia (compuesta principalmente por yodo) que se utiliza
para detectar la presencia de almidón en alguna solución, alimento o donde sea. También
se utiliza como colorante para preparar muestras y verlas en el microscopio (básicamente las
tiñe por así decirlo). Coloque en un tubo de ensayo 3 ml. de solución de almidón agregue 5-7
gotas de Lugol, sin someter la muestra al calor. ¿Qué ha ocurrido? ¿Hubo cambios? ¿Por
qué? Anote lo observado.

La solución de almidón es de un color Blanco y el lugol es Violeta Oscuro al mezclar las 2

soluciones, obtuvimos una sustancia color Negro Ámbar. Este cambio nos muestra la
presencia de almidón en la fórmula.

TERCER PARCIAL

LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN DE LAS INSTALACIONES DE CULTIVO

Esta operación debe estar bien definida en un manual de procedimientos operacionales de

saneamiento (POES) y debe ser de conocimiento y práctica de todo el personal de la granja.
La limpieza y saneamiento conlleva la eliminación total de todos los camarones vivos o
refrigerados y luego la desinfección total de toda la instalación. Antes de proceder a la
desinfección total de las instalaciones, se deben tomar en cuenta lo siguientes aspectos:

a. Coordinación del plan de desinfección total de las instalaciones

Una vez que se ha tomado la decisión de realizar una desinfección total, los gerentes deben
asegurarse de que esta se realice de manera completa, ya que las desinfecciones parciales
son de poco beneficio. Si no se logra la eliminación total del agente patógeno causante de la
enfermedad, posiblemente este volverá a reaparecer para causar nuevos contagios. Hay que
tener presente que cantidades significativas de agua pueden contener patógenos por lo que
el equipo, los vehículos e incluso la ropa pueden ser vectores mecánicos de enfermedades.

Para que una operación de desinfección total en una granja sea eficaz, debe haber un alto

grado de compromiso de todo el personal, el cual debe entender claramente el objetivo de

la misma y para lo cual es necesario implementar actividades de capacitación permanente.

b. Optimizar la fecha de cosecha

Se debe planificar un programa de cosechas que permita que los camarones en cultivo
alcancen una talla comercial razonable y definir un período prudencial hasta las nuevas
siembras de postlarvas. Este lapso de tiempo entre cosecha y siembra, permitirá
implementar un vacío sanitario en el estanque para realizar los procesos de limpieza y
desinfección.

c. Manejo apropiado de los camarones a desechar

Los camarones vivos que quedan enterrados o en charcos en los estanques de cultivo
después de las cosechas, pueden ser destinados para consumo humano local, siempre y
cuando se les dé un lavado apropiado y un manejo en frío adecuado. Los camarones que
han quedado muertos tras las cosechas, deben ser recogidos en su totalidad y enterrados
aplicando capas de hidróxido de calcio (“cal apagada”) u óxido de calcio (“cal viva”).

d. Desinfección de instalaciones y equipos

La desinfección es una herramienta necesaria para el manejo de enfermedades en las

granjas camaroneras. Puede usarse como práctica rutinaria en programas de bioseguridad
diseñados para excluir enfermedades específicas, o como una medida sanitaria de rigor para
reducir la incidencia de patógenos en los estanques. También puede ser parte de programas
enfocados a la erradicación de enfermedades. La razón específica por la cual se realice la
desinfección, será determinante en la estrategia a utilizarse y en la forma en que se aplique.

El uso de productos químicos para la desinfección, obliga a implementar medidas para

proteger al personal y a los camarones en cultivo, así como a mitigar los efectos sobre el
ambiente. En primer lugar, es necesario proteger la piel y los ojos del contacto con
sustancias peligrosas utilizando vestimenta impermeable, botas, protección ocular y un

sombrero. El aparato respiratorio debe protegerse con una máscara y el operador no debe
tocar alimento alguno sin haberse lavado a conciencia las manos (Figura 66). Finalmente, los
productos deben almacenarse de forma que no represente ningún peligro directo o
indirecto para la vida de los camarones, para la vida humana o para el medioambiente.

Una vez que todos los camarones han sido eliminados de las unidades de cultivo, se debe
proceder a la desinfección de toda la instalación. Durante esta fase, todo objeto que se
sospeche sea portador de agentes patógenos, debe ser removido de las instalaciones o
totalmente desinfectado. Todas las áreas que han sido expuestas a los camarones deben ser
limpiadas y desinfectadas. En general, se debe asumir que toda la granja está contaminada.
Los siguientes desinfectantes son de uso común en la limpieza de las instalaciones de cultivo
de camarones:

 Cloro (como hipoclorito de calcio o como hipoclorito de sodio). Este compuesto es

altamente tóxico para organismos acuática; su concentración letal media (LC50) a 96
 horas varía según la especie entre 0.04 y 0.5 mg/L La liberación de cloro al ambiente sin
la previa neutralización con tiosulfato de sodio, puede afectar la vida acuática.
 Yodo usado en su forma estable para desinfectar equipo
 Cal (como óxido de calcio o hidróxido de calcio)
 Luz UV (ultravioleta)
 Desecación (luz solar)
 Detergentes
 Compuestos orgánicos

El cloro y el yodo son muy tóxicos para los animales acuáticos y, a fin de evitar accidentes
graves debido a una manipulación errónea, se recomienda neutralizar estos productos con
tiosulfato de sodio (cinco moles de tiosulfato neutralizan cuatro moles de cloro). Las
proporciones moleculares son las mismas para el yodo. Por lo tanto, para inactivar el cloro,
la cantidad de tiosulfato usada debe ser 2.85 veces la cantidad de cloro (expresada en
gramos):

Número de gramos de tiosulfato = 2.85 × número de gramos de cloro

Para el yodo, la cantidad de tiosulfato debe ser 0.78 veces la cantidad de yodo expresada en
gramos:

Número de gramos de tiosulfato = 0.78 × número de gramos de yodo

También es posible preparar una solución de tiosulfato al 1% por peso, en cuyo caso los
volúmenes son los siguientes (en ml):

1. Para el cloro:

28.5 × [número de litros de la solución desinfectante × concentración de mg/litro] / 100

2. Para el yodo:

Hay que multiplicar por 7.8 en vez de por 28.5.

Cada sección de la granja debe ser desinfectada de acuerdo a un orden lógico para así evitar
la re-infección de áreas previamente desinfectadas. Las secciones de la granja que están
más alejadas del centro de la instalación deben de ser desinfectadas de primero y las áreas
de mayor actividad deben de desinfectarse de último

TRABAJO DE INVESTIGACIÓN: Consultar:

a. Desinfección de estanques de tierra

b. Desinfección de tanques
c. Desinfección de equipos
d. Desinfección de oficinas