Tiempo de Protrombina

MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS PAG.
No:
SERVICIO DE LABORATORIO 65 DE 4
CODIGO
PROCEDIMIENTO: TIEMPO DE PROTROMBINA
15 TIEMPO DE PROTROMBINA
15.1 OBJETIVO
Por medio de la prueba de la protrombina medir la vía extrínseca de la coagulación.
15.2 ALCANCE
En muestras de sangre entera con anticoagulante de citrato de sodio 3.2 %, de pacientes que
requieren pruebas de TP.
15.3 RESPONSABILIDADES
Personal: Bioquímico.
15.4 CONDICIONES DE SEGURIDAD
 Protección del personal: vestuario adecuado (guardapolvos), uso de guantes, antiparras y

gorros y de más medios de protección e inmunización de Hepatitis B y Tétanos.
 Aplicar las precauciones estándar (incluyendo las universales y referentes a sangre y
líquidos corporales) para la manipulación de sangre y tejidos.
15.5 LOCALES
Ambiente con mesón de material apropiado para soportar y no corroerse por líquidos
desinfectantes como el Hipoclorito de Sodio al 5 %, debe contar con iluminación natural, la
iluminación artificial debe ser complementaria a la luz natural.
15.6 EQUIPOS
 Baño María a 37 C.
15.7 MATERIALES
 Tubos de ensayo de Plástico.

 Cronómetro.
 Micropipetas de 100 y 200 microlitros.
15.8 REACTIVOS
 Tromboplastina cálcica.
 Citrato de sodio al 3.2 %.
15.9 MUESTRA
Sangre total con citrato 3.2% de sodio como anticoagulante.

MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS PAG. No:
CODIGO
15.10 PRINCIPO DE PROCEDIMIENTO
La tromboplastina cuando se mezcla con Plasma citratado, el reactivo TP activa la

polimerización de la fibrina mediante la activación del factor VII plasmático. El calcio participa
en la formación de los complejos factor tisular-factor VIIa factor VIIIa-factor IXa y factor Va-
factor Xa. El coágulo se detecta en forma visual o mediante sensores ópticos o
electromecánicos.
Si bien el esquema de coagulación implica que el TP debe estar prolongado en deficiencias de

fibrinógeno, protrombina y factores V, VII, VIII, IX y X, el procedimiento es más sensible para las
deficiencias de factor VII, moderadamente sensible para las deficiencias del factor V y X,
sensible para deficiencias graves de fibrinógeno y protrombina, e insensible por completo para
las deficiencias de factores VIII y IX.
El TP está prolongado en deficiencias de varios factores, como los factores VII y X, y se lo

utiliza con mayor frecuencia para controlar los efectos del tratamiento con el anticoagulante
administrado por vía oral.
15.11 PROCEDIMIENTO
a) 0,2 ml del reactivo de tromboplastina se calienta a 37 °C por dos minutos.

b) 0.1ml de plasma citratado se transfiere al recipiente de la reacción que también se
mantiene a 37°C por 5 minutos.
c) Se pone en funcionamiento el cronómetro.
d) Tan rápido como se forma el coágulo, se detiene el cronómetro y se registra el tiempo
transcurrido.
e) Si el procedimiento se realiza por duplicado, su valor no debe tener una diferencia de
más del 10 % de su media en caso contrario debe repetirse la prueba.
f) Se deben seguir estrictamente las instrucciones del fabricante del reactivo de
tromboplastina.
15.12 RANGO DE REFERENCIA
12 Segundos.
15.13 CONTROL DE CALIDAD
En el laboratorio se prueban muestras PDP como controles normales y prolongados al

comienzo de cada jornada de trabajo. El control se prueba junto con las muestras del paciente
utilizando el protocolo para la prueba PDP del paciente.
El rango del control normal debe estar dentro del intervalo de referencia y el resultado del
control prolongado debe estar dentro de los límites terapéuticos para la cumadina
(TP). Si los resultados del control se corresponden con los límites establecidos, los resultados
de la prueba se consideran válidos. Si los resultados exceden los límites de control, se verifican
CODIGO
los reactivos, el control y el equipamiento; el problema se corrige y las muestras de control y de

paciente se vuelven a probar. El operador registra todo lo realizado. Se determinan los
resultados controles y se analizan después de intervalos regulares para establecer su validez
en el largo plazo.
15.14 CALCULO DE RESULTADOS
La lectura se hace en forma directa, a la décima de segundo más próxima junto con el intervalo
de referencia del TP. Si éste se realiza por duplicado, el resultado se informa como promedio de
ambas determinaciones.
15.15 INFORME
En vista de las variaciones inherentes a los reactivos de tromboplastina, la mayoría de los

laboratorios informa la" relación internacional normalizada" para pacientes con anticoagulación
continua, mediante la siguiente fórmula:
INR: (TP paciente / TP normal) ISI
Donde; TP paciente = TP del paciente en segundos, TP normal= TP de la medidageométrica

del intervalo de referencia ISI = índice de sensibilidad internacional. Los productores de
reactivos generan el ISI para su tromboplastina mediante el análisis de regresión ortogonal que
compara los resultados de su TP con los de la tromboplastina de referencia internacional
(tromboplastina de cerebro humano de la organización mundial de la salud).
15.16 CALCULO DE UN ISI LOCAL PARA COMPENSAR LAS VARIACIONES DEL TP

ENTRE LABORATORIOS
Se realiza el TP en por lo menos cinco plasmas de referencia (esto es, plasma con TP
asignados mediante el uso de una tromboplastina "bien definida"en un equipo "bien definido").
Luego se gráfica los TP de referencia como “y” , y los TP determinados localmente como “x” en
un gráfico doble logarítmico (log-log). Para determinar el ISI local, el operador calcula la
pendiente del grafico por regresión ortogonal y multiplica el ISI de referencia por la pendiente.
Una alternativa de la regresión ortogonal es utilizar la RIN de referencia para el plasma de

referencia, determinar la relación TP local y calcular el ISI local mediante la fórmula siguiente:
ISI local= relación log RIN/ log TP
15.17 ORIGEN DEL ERROR Y COMENTARIOS
 Volumen de recolección de la sangre < al mínimo especificado.

 Hematocrito > 55%.
 Coágulo en la muestra.
 Hemólisis visible.
 Ictericia o Lipemia.
CODIGO
 Tratamiento con heparina (Utilizar reactivo insensible a la heparina o uno que incluya un
neutralizador de heparina).
 Calibración incorrecta del equipo.
 Dilución incorrecta de reactivos, mala conservación.

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MANUAL DE NORMAS Y PROCEDIMIENTOS PAG.

Por medio de la prueba de la protrombina medir la vía extrínseca de la coagulación.

15.4 CONDICIONES DE SEGURIDAD

 Protección del personal: vestuario adecuado (guardapolvos), uso de guantes, antiparras y

 Tubos de ensayo de Plástico.

Sangre total con citrato 3.2% de sodio como anticoagulante.

15.10 PRINCIPO DE PROCEDIMIENTO

La tromboplastina cuando se mezcla con Plasma citratado, el reactivo TP activa la

Si bien el esquema de coagulación implica que el TP debe estar prolongado en deficiencias de

El TP está prolongado en deficiencias de varios factores, como los factores VII y X, y se lo

a) 0,2 ml del reactivo de tromboplastina se calienta a 37 °C por dos minutos.

15.12 RANGO DE REFERENCIA

15.13 CONTROL DE CALIDAD

En el laboratorio se prueban muestras PDP como controles normales y prolongados al

los reactivos, el control y el equipamiento; el problema se corrige y las muestras de control y de

15.14 CALCULO DE RESULTADOS

En vista de las variaciones inherentes a los reactivos de tromboplastina, la mayoría de los

INR: (TP paciente / TP normal) ISI

Donde; TP paciente = TP del paciente en segundos, TP normal= TP de la medidageométrica

15.16 CALCULO DE UN ISI LOCAL PARA COMPENSAR LAS VARIACIONES DEL TP

Una alternativa de la regresión ortogonal es utilizar la RIN de referencia para el plasma de

ISI local= relación log RIN/ log TP

15.17 ORIGEN DEL ERROR Y COMENTARIOS

 Volumen de recolección de la sangre < al mínimo especificado.

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