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D. Decanine, Rev. Bras. Delito. 5(2), 18-27, 2016

v. 5, núm. 2, pág. 18-27,


2016 ISSN 2237-9223

DUELE:http://dx.doi.org/10.15260/rbc.v5i2.123

El papel de los marcadores moleculares en la genética forense.

D. decanina*

Universidad Católica Dom Bosco (UCDB), Campo Grande (MS), Brasil

* Dirección de correo electrónico para correspondencia:decanine@hotmail.com . Tel.: +55-67-8119-9923.

Recibido el 16/03/2016; Revisado el 13/04/2016; Aceptado el 04/05/2016

Resumen

El objetivo de este trabajo fue presentar una revisión bibliográfica sobre las tecnologías utilizadas en Genética Forense, haciendo énfasis
en el uso de marcadores moleculares para la identificación humana. Aquí presento algunos ejemplos del potencial de la Biología
Molecular para ayudar en la investigación criminal, así como en la definición de parentesco (maternidad y paternidad). El uso de estos
marcadores es actualmente la piedra angular de las pruebas forenses de ADN. Estos sistemas se basan, en su mayor parte, en el análisis
de paneles de secuencias de microsatélites (STR) específicas. Se pudo discutir el uso forense del ADN, la presencia de regiones
hipervariables en el material genético, el papel de los marcadores moleculares, así como abordar las técnicas de análisis de ADN y sus
aplicaciones. La búsqueda de nuevas metodologías es importante para reducir costes e impulsar una nueva cultura genética en Ciencias
Forenses, que repercutirá en el futuro del ADN forense con la expansión de la Biología Molecular.

Palabras clave: ADN forense; ROS; perfil de ADN; Investigaciones criminales.

Abstracto

Este trabajo tuvo como objetivo presentar una revisión sobre las tecnologías utilizadas en Genética Forense, destacando los marcadores moleculares
utilizados para la identificación humana. Este trabajo presenta algunos ejemplos del potencial de la Biología Molecular para ayudar en la investigación
criminal como en la definición de paternidad (maternidad y paternidad). El uso de estos marcadores es actualmente fundamental para las pruebas forenses
de ADN. Estos sistemas se basan en el análisis de secuencias (microsatélites) (STR) de repetición en tándem corta (STR). Se pudo discutir el uso forense del
ADN, sobre las regiones hipervariables, el papel de los marcadores moleculares así como el análisis del ADN y sus aplicaciones. La búsqueda de nuevas
metodologías es importante para reducir costes e impulsar una nueva cultura genética en Ciencias Forenses que repercutirá en el futuro en la ciencia forense
del ADN con la expansión de la Biología Molecular.

Palabras clave: ADN forense; FUE; perfil de ADN; Investigaciones criminales.

1. INTRODUCCIÓN muy actual y ambivalente. Por un lado, los científicos


nunca han estado en mejores condiciones que ahora
Actualmente existe una gran preocupación cuando para analizar material biológico de diversas naturalezas,
pensamos en la evolución científica, especialmente en el incluso en cantidades limitadas y degradadas. Por otro
tema de Biología Molecular, ya que la ciencia no es lado, la creciente cantidad de datos científicos generados
estática y la experiencia debe acompañar este proceso. a través de procesos analíticos modernos no implica
En este contexto, la Genética Forense (o ADN Forense) se necesariamente dar respuestas completamente
ocupa del uso de conocimientos y técnicas de la Genética satisfactorias [1].
y la Biología Molecular para ayudar a la justicia en Las aplicaciones de la Biología Molecular a la
términos de identificación de cadáveres y sospechosos y investigación de delitos han evolucionado durante los
la definición de paternidad (o maternidad). El ADN últimos 25 años, basándose en investigaciones académicas
utilizado en estos procesos se obtiene generalmente de sobre la estructura y función del ADN, en particular el de
huesos o dientes, cabello, sangre, tejidos, semen, saliva y secuencias no codificantes.2.3]. La aplicación predominante
orina. Y por lo tanto, el uso de los resultados de los de la Biología Molecular Forense ha sido la de comprobar la
análisis de material genético en el proceso legal es identidad humana, utilizando marcadores

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nucleótidos simples no fenotípicos. La elección de estos restos humanos en accidentes aéreos y campos de batalla,
determinar la paternidad con una fiabilidad prácticamente
marcadores para el análisis forense se debió principalmente
absoluta, dilucidar intercambios de bebés en guarderías y
a su diversidad polimórfica, junto con el hecho de que detectar sustituciones y errores de etiquetado en laboratorios de
garantizan el anonimato civil de los individuos analizados, patología clínica [10].

imposibilitando la determinación de enfermedades,


comportamiento, “raza” y características físicas. Es evidente La evidencia física se ha vuelto cada vez más importante
que la prueba biológica, especialmente la genética, ha en las investigaciones criminales, refutando a menudo
ganado protagonismo en los tribunales penales y de familia, relatos de testigos presenciales que no son confiables o
pasando de ser un medio de prueba complementario a susceptibles a sesgos metodológicos e inducibles. La
convertirse en la base de las decisiones del poder judicial.4.5 evidencia física puede establecer de manera independiente
]. y objetiva el vínculo causal entre un sospechoso/víctima y la
De acuerdo con lacomunicación cortaescrito por escena del crimen, refutar una coartada o dirigir otra línea
Bearmann, Vuille y Taroni [6], el interés forense en el de investigación. Sin embargo, las fases iniciales de la
ADN va mucho más allá del estándar, y a menudo investigación forense, así como el análisis de la ubicación y
plantea preguntas sobre cómo se deben manejar las la adecuada recolección de rastros, pueden ser
nuevas formas de datos, avanzando hacia una fundamentales para la resolución exitosa de las
perspectiva operativa. Existen numerosos obstáculos en investigaciones criminales. Los métodos utilizados para
la práctica forense actual, incluida la presión ejercida por reconocer, recopilar y preservar pruebas físicas, como el
el poder judicial para obtener respuestas más eficientes. ADN, han sido examinados rigurosamente y cuestionados
Desde el punto de vista social, el uso de marcadores de en los tribunales [11].
ADN es una de las herramientas más revolucionarias Según Campos y colaboradores [12] El ADN está
para analizar la individualidad humana, que comenzó presente en todas las células nucleadas de los
con la tipificación del grupo sanguíneo, la tipificación eucariotas, dispuestas en forma de cromosomas, y
HLA (antígenos leucocitarios humanos) para luego pasar también en el interior de las mitocondrias. El ADN es la
a los mini-STR y llegar a los microsatélites. (STR), que son principal unidad biológica que compone a los seres
ideales para pequeños fragmentos de ADN, como en el vivos. Está ubicado en el núcleo de todas las células del
análisis de huesos y material degradado [7]. cuerpo humano y nunca es el mismo de una persona a
El análisis de estos marcadores se ha vuelto otra, excepto en gemelos idénticos que son
fundamental para las pruebas forenses de ADN, dado su genéticamente idénticos, llamados clones naturales, y en
poder discriminatorio y los numerosos sistemas de ADN individuos biológicamente relacionados que tienen
producidos comercialmente y validados para uso similitudes genéticas típicas. Esto se debe a que siempre
forense. Todos estos sistemas se basan en el análisis de la mitad del ADN de un individuo se hereda de su padre
paneles de secuencias de microsatélites específicas de biológico y la otra mitad es de su madre biológica como
sitio conocidas como STR mediante PCR múltiple, sello distintivo de la herencia genética de las personas.13
seguida de electroforesis capilar.8]. ]. En los estudios de identificación humana se utiliza
principalmente el ADN nuclear, siendo el diagnóstico y el
2. USO FORENSE DEL ADN mapeo genético técnicas fundamentales utilizadas en la
identificación del ADN con fines forenses.14].
Durante mucho tiempo, las proteínas sanguíneas Sin embargo, existen algunos factores que pueden
fueron las más utilizadas en la identificación humana, influir en la calidad de la muestra, como la cantidad
quizás porque es posible encontrarlas tanto en la propia reducida de muestra, la degradación de la muestra, la
sangre como en otros fluidos corporales, como el semen. exposición prolongada del material al medio ambiente,
Sin embargo, estas proteínas son productos de la la contaminación bacteriana y la falta de pureza de la
expresión génica y, aunque son sistemas polimórficos y muestra, en lo que respecta a polimorfismos genéticos y
tienen herencia mendeliana polialélica, su variabilidad es moleculares. marcadores comunes entre la población [11
limitada. Así, durante décadas su uso se basó en la ]. Por lo tanto, la secuenciación del ADN mitocondrial ha
exclusión de personas y no en la identificación misma. ido llenando estos vacíos y superando algunas de estas
Con el avance de la ciencia y la tecnología, a mediados de limitaciones. Si antes sólo se utilizaban huellas dactilares
la década de 1980, el foco pasó a ser no el producto de la y otras pistas para resolver crímenes, hoy en día existen
transcripción genética, sino la estructura del ADN innumerables posibilidades para extraer material
mismo.9]. genético, ya que cualquier tejido o fluido biológico se
vuelve útil como fuente de ADN. Se puede encontrar en
La determinación de la identidad genética a través del ADN la orina de las células de la vejiga, de la mucosa del pene
puede utilizarse para demostrar la culpabilidad de los
y de los glóbulos blancos, del mismo modo que podemos
delincuentes, exonerar a los inocentes, identificar cadáveres y
extraerlo de

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células presentes en la saliva, lágrimas, sudor y otros Por otro lado, las STR, aunque son muy similares a las
materiales orgánicos [15]. VNTR, son las secuencias más cortas (de 1 a 5 pares de
bases de longitud) y están presentes en pequeños
Estas técnicas se conocen como huellas genéticas ( grupos de aproximadamente 50 a 100 pares de bases de
huellas genéticas), aunque el término más preciso
longitud. Los microsatélites están repartidos de forma
utilizado para designarlos es perfil de ADN. El perfilado
de ADN se basa en que los gemelos idénticos son los bastante homogénea por el ADN, en al menos 30.000 loci
únicos individuos que tienen copias idénticas del diferentes del genoma humano. Las enzimas de la
genoma humano, pero este, en individuos diferentes, maquinaria de replicación del ADN son incapaces de
contiene muchos polimorfismos, que son posiciones
copiar las regiones del genoma que contienen estas
donde la secuencia de nucleótidos difiere en cada
miembro de la población. Para ser considerado un secuencias repetitivas, lo que provoca que tengan una
polimorfismo, el alelo raro de un locus determinado tasa de mutación extremadamente alta. Estos loci son
debe estar presente en más del 1% de los individuos de muy abundantes en el genoma humano [18], y cada uno
la población. Así, con esta gran variación en el número y
de ellos tiene una gran cantidad de alelos diferentes,
tipo de variaciones, es posible identificar a una persona
en función de su patrón de polimorfismos [dieciséis]. incluso mayores que los que se encuentran en los VNTR,
lo que los hace aún más útiles para la identificación
3. REGIONES HIPERVARIABLES DEL ADN humana.
En promedio, en el genoma humano se produce 01 STR
En el genoma humano existen determinadas cada 6 o 10 kb (kilobase).20] y, por ello, actualmente se han
regiones polimórficas de un locus (lugar fijo donde se utilizado ampliamente las investigaciones genéticas en
localiza un determinado gen o marcador genético) en poblaciones utilizando perfiles de locus STR, que permiten el
el que dos o más alelos tienen frecuencias genéticas uso de muestras que contienen pequeñas cantidades y/o
superiores a 0,01 en una población. Cuando no se ADN degradado. Sin embargo, cuando se analizan
cumple este criterio, el locus es monomórfico [17]. individualmente no presentan un poder de discriminación
Estas regiones se utilizan en pruebas de paternidad y comparable a los VNTR y, por lo tanto, es necesario un
otros vínculos genéticos y pueden constituir análisis conjunto de varios loci STR para garantizar
repeticiones consecutivas de números variables o resultados satisfactorios [21]. Los marcadores STR son
minisatélites (VNTR, en inglés,Número variable de suficientemente polimórficos y capaces de multiplexarse
repeticiones en tándem); o repeticiones consecutivas para permitir una identificación inequívoca
cortas o microsatélites (STR). Son regiones altamente de un individuo, y así puede colocar el ADN de ese individuo

polimórficas, es decir, presentan variedad de persona en la escena de un crimen con un alto grado
tamaños en la población y, así, el análisis permite de certeza. Sin embargo, los ROS no transmiten al
discriminar entre personas o linajes de personas en investigador ninguna información sobre cuándo o
base a ADN intacto y en grandes cantidades.12]. cómo se depositó el material, cuál fue la fuente del
Las secuencias de VNTR varían de 12 a 100 pares de material recolectado (células/fluido/tejido) ni ninguna
bases de longitud y se encuentran en conjuntos que descripción fenotípica de otra persona anónima que
contienen aproximadamente 3000 repeticiones. Por dejó el material en el lugar. que no sea tu género [21].
tanto, estas secuencias ocupan segmentos del genoma
considerablemente más cortos que las secuencias Articulaciones en estos conceptos, tú productos

satélite. Por una razón desconocida, los minisatélites Actualmente comercializados para paternidad e
tienden a ser inestables y el número de copias de una identificación de sospechosos, casi en su totalidad,
secuencia particular a menudo aumenta o disminuye de amplifican hasta 16 loci en una sola reacción PCR (Reacción
una generación a la siguiente. Como resultado, la en Cadena de la Polimerasa). Análisis del producto
longitud de un locus de minisatélite particular es muy amplificado por PCR en secuenciadores de ADN y escaleras
variable en la población, incluso entre miembros de la alélicas (escaleras) permite la identificación de alelos
misma familia. Una región VNTR típica consta de 500 a existentes en los loci analizados [7]. En la mayoría de las
1000 pb y comprende principalmente unidades de pruebas de paternidad STR, la información genética se
secuencia repetida, cada una de aproximadamente 15 a obtiene de los resultados de quince loci,
35 pb de longitud. Los VNTR se utilizan particularmente Se puede realizar utilizando kits comerciales.
como marcadores moleculares para la identificación disponibles, estos números se pueden aumentar para
humana en casos penales o de paternidad, ya que son lograr una mayor confiabilidad en los resultados [22.23].
bastante variables (polimórficos) y contienen una gran SegundoIdentidad genética[24], son necesarios 16 loci
cantidad de alelos diferentes.14,18,19]. (15 STR y Amelogenin, para la determinación de género)
para obtener un análisis preciso y fiable, satisfaciendo
así las necesidades de las principales organizaciones
globales.

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Cuando el análisis de STRs se vuelve difícil o que en realidad aumentó el poder de eliminación durante la
imposible debido a la cantidad o calidad del ADN prueba (poder de discriminación). Posteriormente, elKit
recuperado, existe la opción, como se mencionó AmpliFLP D1S80de amplificación por PCR, más conocido
anteriormente, de realizar el análisis utilizando ADN como D1S80. Esto se utilizó para la detección de variaciones
mitocondrial (ADNmt). Aunque está lejos de ser tan genéticas en el locus polimórfico VNTR, D1S80. La secuencia
informativo como los análisis de ROS, el ADNmt puede de repetición de bases en
proporcionar información útil tanto en términos de el locus D1S80 tenía 16 pb con el número de repeticiones
investigación como para confirmar la identidad. oscilando entre 14 y 41 (350-1000 pb). Sin embargo,
Generalmente está formado por didesoxinucleótidos (" debido al hecho de que este sistema se desarrolló
sanger") y secuenciación de la región de control analizando solo un locus genético, el poder de
hipervariable del genoma mitocondrial y fue revisada exclusión no fue grande. Sin embargo, en
para su uso en Biología Forense por Holland y combinación con otros sistemas (multiplex) resultó
colaboradores en 2013 [25]. bastante útil [30].
Recientemente, el estudio de la identificación Al igual que en el sistema RFLP, las primeras
humana también se ha centrado en el uso de SNPs pruebas para análisis de ADN en Medicina Forense se
(polimorfismos de un solo nucleótido) que, al ser basaron en la variabilidad de secuencias de ADN
marcadores de inserción/deleción (indeles) pueden (polimorfismo secuencial). La clase de loci
actuar como coadyuvantes para proporcionar polimórficos con bloques cortos repetitivos (2-9
información genética decisiva a favor, a favor o en contra nucleótidos repetidos) se llama STR o microsatélite y
de la relación asumida y, también, porque permiten la contrasta con los sistemas D1S80 (minisatélites). Estos
identificación de pruebas degradadas, comunes en marcadores moleculares ya han sido discutidos y se
Criminalística [26]. Tanto los SNP comoindelesAhora se ha mencionado que una de sus principales ventajas
puede obtener más fácilmente utilizando multiplexes de es la posibilidad de procesamiento relativamente
hasta 50 loci según la longitud del fragmento, lo que simple, rápido y simultáneo de más de 10 loci STR.
permite ampliar la gama de marcadores utilizados hasta Casi todos los sistemas utilizados en pruebas forenses
la fecha (STR).27]. tienen repeticiones de 4 pb (tetranucleótido) o 5 pb
(pentanucleótido) que ocurren aproximadamente 50
4. MARCADORES MOLECULARES: SISTEMAS STR veces, dependiendo del locus del gen.31.32]. Este tipo
MULTIPLEX de marcadores moleculares son muy cortos (100-400
pb) y se utilizan ampliamente en ADN degradado. El
Según Ferreira y Grattaplaglia [28] un marcador producto de la reacción de amplificación de los STR se
molecular es cualquier fenotipo molecular que se detecta según sus respectivos tamaños (peso
origina a partir de un gen expresado o de un molecular) después de la migración en un gel de
segmento específico de ADN. Lo fundamental es electroforesis capilar de alta resolución, similar al
precisamente la diversidad en estas regiones observado en la secuenciación automática. Cuando
genéticas, que culminan en un número de hay STR del mismo tamaño, es posible diferenciarlos
repeticiones que varían de un individuo a otro, y mediante marcas fluorescentes [19].
también porque pueden estudiarse con sondas de Perfiles de ADN forense ellos son en este momento

ADN y amplificación por PCR.29]. Como ya se caracterizado utilizando un panel de alelos


mencionó, existe una constante evolución de las multimarcadores STR que son estructuralmente
prácticas en Biología Molecular que conducen a una análogos a los minisatélites originales, pero con
mejor clarificación de la identificación humana y vale intervalos de repetición mucho más cortos y, por lo
la pena recordar que el primer sistema de PCR tanto, más fáciles de amplificar con PCR múltiple. La
utilizado en Genética Forense se ocupaba de analizar primera ventaja, ya mencionada, es que se pueden
el locus HLA-DQA1, que forma parte de el complejo amplificar más loci simultáneamente (multiplex).
mayor de histocompatibilidad humano en los Otras características importantes en el desarrollo
leucocitos. Este sistema fue llamado Amplitipo DQA1e incluyen: alelos discretos y distinguibles,
inicialmente contenía 6 alelos. Cuando se probó en amplificación del locus que tiende a ser grande, alto
evidencia, aproximadamente en el 16% de los casos poder discriminatorio, ausencia de vínculo genético
dos personas tenían el mismo genotipo, por lo que con otros loci que se analizan y bajos niveles de
fue necesario agregar otros sistemas de PCR para contaminación durante la amplificación.33].
identificar a los individuos.30]. Varios kits comerciales validados, proporcionados por varias
El sistema se desarrolló más tarde, utilizando empresas, permiten la amplificación de múltiples loci y
principios similares de análisis deTransferencia de constituyen un avance considerable en la resolución de
puntos, fue el Amplitipo Polymaker. Su mayor aporte fue conocimientos en el ámbito de la Genética y la Biología Forense.

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[34]. Los sistemas STR más comunes utilizados en el condenado por delitos sexuales y otros delitos violentos [29
trabajo forense de rutina están disponibles ]. A febrero de 2016, CODIS contaba con 684.519 perfiles
comercialmente, y cada kit de PCR multiplex utiliza forenses y 14.464.461 perfiles criminales, lo que la convierte
tinciones específicas y amplifica varios STR. Por ejemplo, en la base de datos de ADN más grande del mundo. Superó
kits comerciales.PerfiladorPlus™ analiza la base de datos NDNAD del Reino Unido, estimada en
simultáneamente 10 marcadores, el kitPowerPlex™ para alrededor de 5.950.612 perfiles en marzo de 2012 [38].
16 STR, y el Identificador™ para 16 marcadores [19],
entre otros comoAmpFLSTR®Identificador™PCR La Unidad CODIS gestiona el Sistema de Índice
AmplificaciónKit para 15 STR,PowerPlex® sistemas ESX Combinado de ADN (CODIS) y el Sistema Nacional de
(16 STR) y ESI (los mismos 16 STR con la adición de SE33), Índice de ADN (NDIS) [39]. El Programa CODIS está
AmpFlSTR®NGM™Amplificación por PCRKit (10 loci diseñado para laboratorios criminalísticos federales,
incluidos en el kit SGM plus con la adición de 7 loci ESS estatales y locales en los Estados Unidos e
junto con 5 loci adicionales),Kit de investigador ESSplex internacionalmente, y también para laboratorios
Plus(15 STR y amelogenina),Kit IDplex Plux(13 STR, más criminalísticos con aplicaciones para fomentar el
D2S1338, D19S433 y amelogenina) [29]. intercambio y la comparación de evidencia forense de
Debido a que estos alelos se transmiten por herencia ADN de investigaciones de delitos violentos. Esta
mendeliana, es posible establecer vínculos genéticos unidad también brinda gestión administrativa y
como paternidad, maternidad y hermandad, así como apoyo al FBI para varias juntas asesoras, programas
utilizarlos para tipificación individual y comparación con de subvenciones del Departamento de Justicia (DOJ) y
muestras cuestionadas obtenidas en la escena del legislación sobre ADN [38].
crimen y para víctimas de delitos sexuales. Para ello, se Según el sitio web oficial del FBI [38], el Índice
utilizan cálculos poblacionales de frecuencias alélicas Nacional de ADN (NDIS) contiene actualmente más de
obtenidas previamente en la población, lo que implica 12.205.768 perfiles criminales, 2.258.693 perfiles de
resultados estadísticamente significativos y válidos [26]. detenidos y 684.519 perfiles forenses. En definitiva, el
Básicamente, existen dos conjuntos de marcadores STR éxito del programa CODIS está asegurado por los delitos
que cumplen con los estándares solicitados por las bases que ayuda a resolver, considerando que en febrero de
de datos criminales de todo el mundo: el conjunto 2016, CODIS tuvo más de 322.011 visitas en más de
estándar europeo de 12 marcadores STR [35] y el 309.614 investigaciones.
estándar estadounidense, llamado CODIS (Sistema de Se adoptan 13 loci STR para la base de datos nacional de
índice de ADN combinado) con 13 marcadores STR [36]. sospechosos, que inicialmente se limitaba a violadores y
asesinos convictos [40]. La base de CODIS es la comparación
de perfiles genéticos obtenidos a partir de rastros biológicos
5. BASE DE DATOS PENALES en la escena del crimen con registros en la base de datos de
identificación de otros delitos (bases de datos de perfiles de
La primera base de datos de perfiles genéticos de ADN criminales), por lo tanto, todo el material biológico
delincuentes se creó en Inglaterra, la base de datos nacional recolectado en la escena del crimen proporciona perfiles
de ADN del Reino Unido (NDNAD), creada en 1995. A finales genéticos para el Índice forense. En términos de
de 2005, contenía los perfiles de alrededor de 3,1 millones aplicaciones forenses específicas, el objetivo de la base de
de personas. En marzo de 2012, la base de datos contenía datos es ayudar a probar la inocencia o culpabilidad de los
un número estimado de 5.950.612 personas. La base de sospechosos, identificar restos humanos y muestras
datos, que crece con 30.000 muestras cada mes, se alimenta biológicas, culminando en acelerar las investigaciones
de muestras recuperadas de las escenas del crimen y penales, resolver delitos antiguos y producir información
tomadas de sospechosos de la policía y, en Inglaterra y para investigaciones criminales.40].
Gales, de cualquier persona arrestada y detenida en una
comisaría de policía.37]. Sin embargo, el sistema de Índice Los marcadores moleculares CODIS se seleccionaron
Combinado de ADN (CODIS) creado por el FBI, que comenzó para que coincidieran con otros loci elegidos por el
como un proyecto piloto en 1990 y cobró impulso en 1994, le Servicios de ciencia forenseen Gran Bretaña por su base
dio al FBI la autoridad para establecer una base de datos a de datos nacional y organizaciones como INTERPOL. Dos
nivel nacional con fines de investigación criminal.29]. factores importantes están relacionados con CODIS, es
decir, ninguno de los marcadores está vinculado dentro
Existen dos ficheros de perfiles genéticos diferentes con de los exones, y no están asociados con fenotipos
objetivos complementarios. El “Índice Forense” (“Índice conocidos, son CSF1PO, D3S1358, D5S818, D7S820,
forense”) que contiene perfiles genéticos obtenidos de las D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, FGA,
escenas del crimen y el “Índice Criminal” (“Índice de THO1, TPOX, VWA y Amelogenina para la identificación
delincuentes”) con perfiles genéticos de delincuentes del sexo [41].

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Desde el punto de vista jurídico, se discuten las Los avances en biología molecular ya han demostrado
posibilidades jurídicas y éticas de construir bases de un gran potencial en la identificación de tipos de tejidos,
datos con información genética de delincuentes, con el así como en la detección de diversas características de
fin de coadyuvar en las investigaciones en la búsqueda comportamiento.44].
de presuntos delincuentes, especialmente con base en Dentro del contexto epigenético podemos observar
evidencia de delitos sexuales. Además de la necesidad de cinco cambios importantes, como la metilación del ADN
tomar las precauciones necesarias para que el control de (metilación en regiones promotoras de genes – CpG) que
la información genética no implique una nueva visión promueve el silenciamiento de la expresión génica; hacia
biológica (genética) del delito. En Brasil, la introducción modificaciones postraduccional en histonas; El
de bases de datos de perfiles genéticos se basa en remodelación de la cromatina (un factor dependiente
algunas resoluciones importantes, como la Ley nº 12.654, de ATP); histonas variantes, que pueden aumentar la
publicada el 28 de mayo de 2012, que modifica estabilidad o disminuir la estabilidad, modificar
disposiciones de la ley de ejecución penal, permitiendo la aminoácidos, entre otros; y finalmente, elno
recopilación y el almacenamiento en bases de datos, codificante ARN, incluidos microARN (miARN)
entre otras, como los destacados en los artículos 5, 7-A y (importantes en el silenciamiento génico
B y el artículo 3. la ley nooh7.210, de 11 de julio de 1984 - postranscripcional) [45].
Ley de Ejecución Penal más Art. 9º-A [42]. Secuencias específicas de ADN se metilan durante el
Art.5º-A Los datos relacionados con la recolección del perfil curso del desarrollo de un organismo. La metilación en el
genético deberán ser almacenados en una base de datos de perfil
contexto de la epigenética es muy adecuada para la
genético, administrada por una unidad oficial de criminalística
forense; (§ 1 La información genética contenida en las bases de
detección e identificación de fluidos corporales,
datos de perfiles genéticos no puede revelar rasgos somáticos o explotando la metilación diferencial de sitios
de comportamiento de las personas, excepto la determinación cromosómicos específicos entre tejidos.46] y entre
genética del género, de conformidad con las normas
individuos, incluidos incluso gemelos idénticos [47]. De
constitucionales e internacionales sobre derechos humanos,
genoma humano y datos genéticos. § 2 Los datos contenidos en
manera similar, la expresión tisular de miARN se puede
las bases de datos de perfiles genéticos Las bases de datos de utilizar para la identificación de fluidos corporales en un
perfiles tendrán carácter confidencial, imputándose entorno forense.48,49].
responsabilidad civil, penal y administrativa a quien permita o
Los microARN (miARN) son moléculas no
promueva su utilización para fines distintos de los previstos en
esta Ley o en decisión judicial § 3. Información obtenida de la
codificantes con importantes funciones reguladoras;
coincidencia de perfiles genéticos deberá constar en un informe muchos tienen patrones de expresión específicos. Su
pericial firmado por perito oficial debidamente cualificado). tamaño muy pequeño, en principio, los hace menos
propensos a procesos de degradación, a diferencia
Art. 7 - La exclusión de perfiles genéticos de las bases de
datos se producirá al finalizar el plazo establecido por la ley
del ARN mensajero (ARNm), que antes se
para la prescripción del delito. 7º-B. La identificación del propuesto como herramientas molecular para
perfil genético se almacenará en una base de datos identificación forense de fluidos corporales [48].
confidencial, de acuerdo con las normas que dicte el Poder
La gran mayoría de los avances en análisis forense se
Ejecutivo.
Artículo 9oh-A. Los condenados por delito cometido
basan en la innovación metodológica con diferentes
dolosamente, con violencia grave contra una persona, o por marcadores con el fin de aumentar la viabilidad y amplitud
cualquiera de los delitos previstos en el art. 1ohde la Ley de la identificación y, muchas veces, en el deseo de reducir
núm.oh8.072, de 25 de julio de 1990, se someterá
costes. Por tanto, para que un diagnóstico se considere
obligatoriamente a la identificación del perfil genético,
mediante extracción de ADN - ácido desoxirribonucleico,
concluyente tras la detección de una posible deleción o
mediante técnica adecuada e indolora [43]. mutación, es necesario utilizar más marcadores para
conseguir un índice de similitudes acumuladas que permita
6. ANÁLISIS FORENSE DE ADN: AVANCES liberar o confirmar los resultados. El análisis del cromosoma
RECIENTES Y, por ejemplo, es muy útil en los casos en los que hay un
exceso de ADN de una víctima femenina y pequeñas
Los avances en varias áreas de la biología molecular cantidades de ADN masculino. Por ejemplo, en casos que
han impulsado nuevos conocimientos sobre los ácidos incluyen agresión sexual sin eyaculación, agresión sexual
nucleicos, que van mucho más allá de la estructura y por parte de un hombre vasectomizado, ADN masculino
secuencia del propio ADN. A menudo se agrupan debajo de las uñas
numerosas variantes como "epigenéticas". Patrones de de una víctima, ADN masculino en la piel (al tacto),
metilación específicos también están asociados con y ropa o pertenencias de una víctima femenina [50
características fenotípicas y pueden detectarse mediante ].
nuevas tecnologías de secuenciación de ADN, no muy El uso de marcadores forenses y del cromosoma Y
diferentes de las propuestas inicialmente. En un contexto (Y-STR) ha aumentado considerablemente en los
forense, estos últimos años. Kits desarrollados y comercializados.

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El STR-multiplex disponible contiene un número cada El ADN nuclear confiable, mientras que el ADNmt se
vez mayor de marcadores Y-STR, como 12 para el conserva mejor en la dentina, especialmente dentro de la
Sistema YPowerPlex1(PPY, 2003), 17 núm.AmpFlSTR1 raíz, lo que hace que las raíces de los dientes sean más
Yfiler1, (Yfiler, 2004), 23 enSistema PowerPlex Y23 valiosas que los tejidos coronales. Y el mapeo genómico del
(PPY23, 2012) y 27 en el KitAmpFlSTR1 Yfiler1(2014). ADNmt (mtGenoma), como se presenta en la revisión de
Los Y-STR, además de ser muy importantes en Just, Irwin y Parson [56].
violencia sexual, también pueden ser muy útiles en el Otra perspectiva futura en el análisis forense de ADN
análisis de parentesco, debido al estricto patrón de es la secuenciación de próxima generación (NGS), con
herencia paterna [51]. Sin embargo, como la tasa de sus capacidades de alto rendimiento y bajo costo. Esta
mutación de los Y-STR utilizados es relativamente tecnología se puede aplicar para analizar
muy baja, es difícil, si no imposible, diferenciar entre simultáneamente múltiples loci de interés forense en
machos genéticamente relacionados. diferentes contextos genéticos, como los autosomas
En un esfuerzo de colaboración mundial, se mitocondriales y los cromosomas sexuales. Además, la
analizaron 19.630 cromosomas Y de 129 poblaciones tecnología NGS también puede tener aplicaciones
diferentes en 51 países utilizando el sistema PPY23 potenciales en muchos otros aspectos de la
(DYS19, DYS389I, DYS389II, DYS390, DYS391, DYS392, investigación, que incluyen la construcción de bases de
DYS393, DYS385AB, DYS437, DYS438, DYS439, datos de ADN, ascendencia e inferencia fenotípica,
DYS448, DYS456, DYS4 58 , DYS635, GATAH4, DYS481, estudios de gemelos monocigóticos, identificación de
DYS533, DYS549, DYS570, DYS576 y DYS643. Luego se fluidos corporales y especies animales, microbiología
verificó que este sistema demostró ser más fuerte vegetal y forense.57].
que otros kits disponibles, pero al mismo tiempo Desde 2005, las tecnologías NGS han evolucionado
reveló los mismos patrones generales de estructura significativamente hasta la actualidad, con tecnología que
poblacional [52]. En Brasil, se realizó un estudio no sólo permite la detección de moléculas individuales, sino
similar en el Estado de Goiás, en el que se analizó a que también permite la secuenciación en tiempo real. El
un total de 353 hombres para 12 Y-STR. Los líder actual en este campo es el sistema.RS PacBio. Con esto,
resultados fueron consistentes con la historia de puede alcanzar una longitud de lectura promedio de
mestizaje de la población del Centro de Brasil y 55.008.500 pb y también puede detectar directamente
permitieron establecer haplotipos que sirven de modificaciones epigenéticas. Teniendo en cuenta la
referencia en el esclarecimiento de casos penales y compatibilidad y el costo, así como las limitaciones de la
pruebas de paternidad [53]. secuenciación de primera generación, la tecnología NGS
A partir de la búsqueda de nuevos marcadores, no probablemente pronto debería reemplazar a los STR
sólo se ha utilizado cada vez más el cromosoma Y, sino convencionales para estudios forenses.57].
también el ADN mitocondrial (ADNmt), haplogrupos Los científicos forenses han estado investigando
valiosos para investigaciones en Ciencias Forenses, cómo pasar de la electroforesis capilar (CE) a
Antropología Molecular y Genética Humana. Mitchell y secuenciación paralelo masivo (MPS) para
colaboradores [54] desarrolló un panel personalizado de mejorar los análisis de perfiles de ADN. MPS ofrece
61 marcadores de ADNmt para una clasificación de alto varias ventajas sobre CE, como STR multiplex con un
rendimiento de individuos europeos, africanos y nativos número ilimitado de loci genéticos y polimorfismo de un
americanos/asiáticos. Las distribuciones de haplogrupos solo nucleótido (SNP), pequeños fragmentos
mitocondriales clasificados fueron altamente amplificados, sin restricciones de separación de tamaño
concordantes con la raza/etnicidad autoidentificada y mayor poder de discriminación.
(SIRE) en blancos no hispanos (94,8%), pero fueron Van Neste y colaboradores [58] presentó un marco
considerablemente más bajas en poblaciones de razas bioinformático My-Forensic-Loci-queries (MyFLq) para
mixtas, incluidos negros no hispanos (88,3%) y analizar MPS en datos forenses y un método para
mexicoamericanos (81,8%). %), y otros hispanos (61,6%). evaluar el rendimiento general y la utilidad de un locus
Mostrando, sin embargo, que es importante considerar en relación con MPS. También se puede utilizar para
las inconsistencias entre SIRE y la ascendencia genética estimar si un alelo desconocido, cuya secuencia no está
al realizar estudios de asociación genética. presente en la base de datos MySQL, es en realidad un
Además de estos 61 marcadores ya descritos, otros alelo nuevo o un error de secuenciación. Los resultados
grupos están trabajando en otras perspectivas utilizando el muestran, técnicamente, que el MPS forense es muy
ADNmt, como el análisis genético de huesos en la búsqueda prometedor para su aplicación en genómica forense de
de ADN fiable para la identificación humana, demostrado rutina, debido tanto al hecho ya descrito anteriormente
por Higgins y colaboradores [55], quien observó que tomar como también porque es aplicable a la autopsia
muestras de cemento de dientes enterrados hasta por 16 molecular en medicina forense y la investigación del
meses puede proporcionar una fuente ADNmt.

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forense.Frente. Gineta.5, 136, 2014.
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duda la admisibilidad de los datos cuando se recogen [8] CR Hill; DL Duewer; MC Kline; CJ Sprecher; RS
y analizan adecuadamente. Por otro lado, McLaren; DR Rabbach, BE Krenke; MG Ensenberger;
PM Fulmer; DR Storts; JM Mayordomo. Estudios de
actualmente la Genética Forense también se puede
concordancia y población junto con análisis de
aplicar a la identificación o individualización de tartamudeo y relación de altura máxima para los
animales, plantas y microorganismos presentes en sistemas PowerPlex (R) ESX 17 y ESI 17.Ciencias
residuos, pruebas o incluso en el cuerpo de un Forenses Int. Genet.5(4), 269-75, 2011.
cadáver, siempre en busca de un resultado que no [9] M. Benecke. Tipificación de ADN en medicina forense
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sustituirá pronto a los métodos basados en el Evidencias Biológicas.Croata. Med.J.42(3), 225-228,
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análisis de la longitud de los fragmentos, debido a
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que puede ampliarse y analizarse de forma rápida y Rodrigues; JS Oliveira; AR Marcelo; AF Neves. Pruebas
rentable. La inclusión de un conjunto más completo de paternidad de ADN: una metodología para la
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