Práctica Fotosíntesis

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

ESCUELA NACIONAL COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES


PLANTEL AZCAPOTZALCO

BIOLOGÍA III PRIMERA UNIDAD

PRÁCTICA OBSERVACIÓN DE CLOROPLASTOS, SEPARACIÓN DE PIGMENTOS


FOTOSÍNTETICOS Y OBSERVACIÓN DE PRODUCCIÓN DE OXÍGENO .

Prof. Abel Vicente Aldana Godínez.


INTRODUCCIÓN.

La fotosíntesis puede considerase como la fuente principal de casi toda la energía biológica, siendo
característico por la captura de la energía solar por los organismos fotosintéticos y su conversión en la energía
de la biomasa. Los organismos fotosintéticos (autótrofos) y los heterótrofos viven en un estado estacionario
equilibrado en nuestra biosfera.

En las células fotosintéticas eucarióticas, las reacciones luminosas y obscuras tienen lugar en los cloroplastos.
Los cloroplastos están formados por un sistema de membranas, una membrana externa y una membrana
interna, está última se repliega formando vesículas o sacos aplanados, llamados tilacoides que se hallan
ordenados en pilas, habitualmente llamados grana. Las membranas tilacoides contienen todos los pigmentos
fotosintéticos del cloroplasto y todas las enzimas que se necesitan para las
reacciones primarias dependientes de la luz.
Las clorofilas verdes, la clorofila a y la b, está presente en todas las células de las
plantas verdes superiores, aunque contienen unas dos veces más clorofila a que b.
Además de las clorofilas, los cloroplastos presentan pigmentos llamados accesorios,
los carotenoides que pueden ser amarillos, rojos o púrpuras, los más importantes son
los beta-carotenos y la xantofila (carotenoide amarillo). Los pigmentos carotenoides,
también absorben la luz a longitudes de onda diferente a las absorbidas por las
clorofilas.
La fotosíntesis está dividida en dos fases:
La fase luminosa ocurre en la membrana del tilacoide donde se da la fotólisis del
agua (H2O) para liberar O2 al ambiente y proporcionar Protones (H+) y electrones (e-)
para generar ATP y NADPH2.
La fase oscura, en donde el NADPH2 y el ATP producido en la fase luminosa se
utiliza en el ciclo de Calvin para unir varias moléculas de CO2 y con ellas producir
glucosa.

OBJETIVOS.

 Observar cloroplastos en células de Elodea.

 Detectar los pigmentos fotosintéticos en una muestra de espinacas, por cromatografía en papel.

 Observar la producción de oxígeno durante la fase luminosa.


Hipótesis:

MATERIALES Y SUSTANCIAS.

1 Microscopio óptico de campo claro. Aceite de inmersión


1 Soporte universal. Acohol etanol. *
2 Portaobjetos Elodea. *
2 cubreobjetos Espinacas. *
1 Mortero. Carbonato de calcio
1 Vaso de precipitado de 250 ml. Papel seda
1 Embudo Papel filtro .
1 Gotero Bicarbonato de sodio.
1 Embudo grande
1 Vaso de precipitado grande de 1000 ml.
1 Probeta de 10 ml.
1 balanza granataria.
1 Pinzas de 3 dedos

* Material que el alumno debe traer.

PROCEDIMIENTO.

Actividad experimental 1. Observar cloroplastos en células de Elodea.

1. MANEJO ADECUADO

El microscopio es un instrumento óptico de alta precisión debe cuidarse esmeradamente por su gran utilidad.
1) Para transportarse debe tomarse del brazo y con la otra mano sostenerlo de la base.
2) No se deje a la orilla de la mesa.
3) Durante la observación al microscopio, este no debe ser desplazado a ningún lado por correr el riesgo de
desenfocar la preparación.

2. LIMPIEZA.

1) Para la limpieza de sus partes metálicas debe usarse un paño o franela húmeda y posteriormente una
seca.
2) Las partes de cristal y lentes se limpian con vaho e isopos de algodón (se forman con palillos,
insertando el algodón y haciéndolos girar sobre la manga de la bata) impregnados de una solución jabonosa y
se utilizan posteriormente isopos de algodón secos, si es posible finalmente limpiar con papel seda.
Esto se hace antes y después de usar el instrumento, especialmente los objetivos y cuando se ha usado
aceite de inmersión.

Nota: Nunca utilices solventes (alcohol, acetona, etc.,) para limpiar el microscopio, ya que los lentes del ocular
o los objetivos se pueden despegar.
3. ELABORACIÓN DE PREPARACIONES.

¿Cómo puedes elaborar una preparación?


Existen diversos tipos de preparaciones: permanentes, temporales o frescas.
Una preparación temporal o fresca es aquella que emplea agua y cualquier material que después de ser
observado en el microscopio debe ser destruida.
Por ejemplo, para elaborar una preparación temporal (Fresca) de células de ELODEA.

1. Coloca una gota de agua en el centro del portaobjetos.


Portaobjetos.
Gota de
agua

2. Desprende una hoja de elodea y colócala sobre la gota de agua.


Portaobjetos.
Hoja de
Elodea

3. Coloca un cubreobjetos limpio, sobre la hoja de elodea y observa al microscopio.


Portaobjetos.

Cubreobjetos
4.- TÉCNICA DE ENFOQUE.

Coloca la preparación sobre la platina del microscopio.


Sujétala con las pinzas (colocarla centrada en la platina).

PARA ENFOCAR A 10 X

Coloca el objetivo con lo que se desea observar, generalmente se


empieza con el de 10 X, para lo cual hay que girar el revolver
colocando el objetivo de menor aumento sobre la preparación.
Con el tornillo macrométrico baja el revolver totalmente.
Observa la preparación a través del ocular manteniendo ambos ojos
abiertos (es dañino observar con un ojo y cerrar el otro).
Sube lentamente el revolver con ayuda del tornillo macrométrico hasta encontrar la imagen.
Ajusta con el tornillo micrométrico hasta que la imagen sea nítida.
Mueve la cremallera, si tienen las pinzas, sino con los dedos: índice y pulgar, recorrer hacía los lados o hacía
arriba y hacía abajo la preparación para encontrar el objeto que deseamos observar, para una buena
observación de la hoja de elodea, selecciona una orilla de la hoja donde el grosor de la misma es mínima y es
más fácil de observar.
Gradúa la entrada de luz del campo, con ayuda del diafragma.
Ajusta el condensador para tener una óptima imagen.
Toma una fotografía con tu celular y los dispositivos proporcionados por tu profesor para fijar tu celular al
microscopio.

PARA ENFOCAR A 40 X

La preparación que se observó a 10 X, se deja como está y sólo se hace girar el revolver para colocar el
objetivo de 40 X y se ajusta la imagen con el tornillo micrométrico hasta hacerla nítida. Al observar en 40 X y
100 X , podrás apreciar estructuras redondas y de color verde los cuáles son los cloroplastos.

PARA ENFOCAR A INMERSIÓN (100 X).

Se hace girar el revolver hacia un lado de manera que podamos aplicar sobre el cubreobjetos una gota de
aceite de inmersión, se termina de girar el revolver para colocar en posición el objetivo de inmersión.

Gota de aceite de inmersión.


Cubreobjetos
Muestra biológica.
Portaobjetos

El objetivo de 100 X debe bajarse cuidadosamente y debe estar en contacto con el aceite de inmersión. Si no
lo hace con cuidado puede romper el cubreobjetos.

Objetivo de 100 X

Gota de aceite de inmersión.


Cubreobjetos
Muestra biológica.
Portaobjetos

Se ajusta la imagen con el tornillo micrométrico y se regula la entrada de luz.


Se toman las fotografías correspondientes.
Para limpiar los objetivos, al final de la práctica utilice solo papel seda, con el cuál frote cuidadosamente los
lentes de los objetivos.
Actividad experimental 2. Detectar los pigmentos fotosintéticos en una muestra de espinacas, por
cromatografía en papel.
1. Lavar las hojas de espinacas, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el 30 ml de alcohol y
una pequeña cantidad de carbonato cálcico (que evita la degradación de los pigmentos fotosintéticos).
2. Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso.
3. Filtrar con un embudo y papel de filtro.
4. Colocar el filtrado en un vaso de precipitado o en un vaso desechable y sobre ella poner un rectángulo de
unos 15 centímetros de ancho por 10 centímetros de alto, luego es necesario doblarlo en V para que se
mantenga en pie sobre la placa el vaso.
5. Dejar así el montaje y esperar una hora mínimo, si es posible dejar el dispositivo hasta la siguiente clase.
6. Los pigmentos se irán separando según su adsorción.
7. Haga una investigación documental para identificar los pigmentos obtenidos en su muestra.

Actividad experimental 3. Producción de oxígeno por la planta acuática Elodea.

1. Antes de pesar la Elodea secar con servi toalla. Pesar la cantidad máxima de Elodea que cabe en el
embudo.
2. Preparar 1000 ml de agua al 10% de bicarbonato de sodio en el vaso de precipitado.
3. Poner el embudo junto con la planta en el vaso de precipitado.
4. Colocar agua carbonatada dentro y fuera del embudo.
5. Llenar de agua carbonatada la probeta de 10 ml., taparlo con los dedos evitando que se derrame agua y
voltear de forma invertida.
6. Colocar suavemente de forma invertida la probeta de 10 ml. en el cuello del embudo, evitando que se salga
el agua.
7. Desplazar el aire que está en el embudo hasta que se encuentre en la parte superior del cuello del
embudo.
8. Con un marcador indeleble, indicar el nivel del agua inicial en la probeta.
9. Ver Figura 1 y asegurarse de que se ha montado adecuadamente el dispositivo.
10. Colocar el dispositivo dentro de la caja de cartón (imagen 2).
11. Encender la luz, tomar fotografía y registrar las condiciones generales en que inicia el experimento.
12. Dejar pasar 60 minutos.

Figura 1. Embudo con Elodea

13. Pasado el tiempo (60 minutos), registrar resultados en cuanto a la producción de oxígeno en la tabla 3,
para ello, marcar con tinta indeleble el nivel final del agua en el tubo de ensayo. Tomar fotografía para
evidenciar los resultados obtenidos y comparar con el dato inicial.
14. Los datos de producción de oxígeno se reportan en mililitros.
Tener en cuenta que los resultados que cada equipo obtiene deben ser integrados por todos los equipos, de
tal forma que todos cuenten con la información completa.

RESULTADOS:
Incorpora las fotografías de todo el procedimiento y de cada una de tus observaciones, en el caso de la
observación al microscopio pon las fotos de lo observado en los objetivos de 10 X, 40 X y 100 X.

ANALISIS DE RESULTADOS.

1. ¿Qué forma y color tenían los organelos más notorios en las células de la elodea?
2. ¿Cuántas bandas de diferente color se observaron en la cromatografía en papel? ¿A qué pigmento
corresponde cada banda? Investiga.
3. ¿Cuánto oxígeno produjo la Elodea?
4. Haga un análisis en equipo de los resultados obtenidos y busque la explicación teórica de lo obtenido.

CONCLUSIONES.

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BIBLIOGRAFÍA.

o Barrera E., H y Cárdenas R., R. 1997. El microscopio. Ed. Plaza y Váldez; México D.F. , 101 p.

o Green-Brobowsky, 1985. Laboratorio de Biología. Investigaciones. Ed. Publicaciones Cultural. 8a


reimpresión, México. 246 p.

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