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Agar Entérico Hektoen ISO Cat.

1030
Para el aislamiento y diferenciación de bacterias entéricas Gram negativas

Información práctica
Aplicaciones Categorias
Aislamiento selectivo Salmonella
Aislamiento selectivo Shigella
Diferenciación Enterobacterias

Industria: Clínica / Alimentación

Regulaciones: ISO 21567

Principios y usos
Agar Entérico Hektoen es un medio selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento y diferenciación de patógenos entéricos Salmonella y Shigella,
ambos causantes de una variedad de enfermedades gastrointestinales en humanos graves; y otras Enterobacteriaceae Gram-negativas.

Se usa particularmente en alimentos donde se siguen varios pasos para aislar los patógenos de la gastroenteritis. Los nutrientes para el crecimiento son
proporcionados por la peptona de carne y el extracto de levadura. El aumento de contenido en peptona y los tres hidratos de carbono fermentables
(lactosa, sacarosa, salicina) como fuentes de carbono y energía, reducen la acción inhibidora de las sales biliares en Salmonella y Shigella spp. La
concentración de lactosa en este medio es mayor que la de otros medios utilizados para la visualización de patógenos entéricos y minimiza el problema
de la fermentación retardada de lactosa. El azul de bromotimol y la fucsina ácida son indicadores de pH. El tiosulfato de azufre proporciona azufre y el
citrato de amonio férrico es el indicador de la producción de H2S. Las colonias positivas de H2S forman centros negros. El cloruro de sodio mantiene el
equilibrio osmótico.

La norma ISO 21567 recomienda el Agar Hektoen como un medio sólido selectivo para la enumeración de Shigella spp.

Aunque suprimidos, parcialmente inhibidos, E. coli y otros organismos que usan lactosa, sacarosa y / o salicina con la producción de ácido, dan colonias
de color salmón a amarillo naranja. La Salmonella y Shigella son verdes o verde azuladas. Proteus no se inhibe, pero produce una colonia
verde-amarilla cuando crece. Las colonias de Proteus y Salmonella pueden presentar un centro negro y bordes claros si forman sulfuro como resultado
de la producción de H2S.

Fórmula en g/L
Azul de bromotimol 0,065 Fucsina ácida 0,1
Agar bacteriológico 14 Sales biliares N° 3 9
Citrato de amonio férrico 1,5 Lactosa 12
Salicina 2 Cloruro sódico 5
Tiosulfato de sodio 5 Sacarosa 12
Extracto de levadura 3 Digerido enzimático de carne 12
Fórmula típica g / L * Ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.

Preparación
Suspender 75,6 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta
la disolución completa. EVITAR EL SOBRECALENTAMIENTO. NO AUTOCLAVAR. Enfriar a 47 ºC y dispensar en placas de Petri.

Instrucciones de uso
» Para diagnóstico clínico, el tipo de muestra es heces.

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- Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo. La inoculación también se puede hacer a partir de un cultivo de preenriquecimiento.
- Incubar a 35±2 ºC durante 18-24 horas.
- Lectura e interpretación de los resultados.

» Para otros usos no amparados por el marcado CE:

Recuento de Shigella spp. según la ISO 21567:


- Sembrar la muestra directamente sobre la superficie del medio, o previamente enriquecida en Caldo de Tetrationato (Cat 1114), Caldo de Selenita y
Cistina (Cat 1220),Caldo GN (Cat 1248), o caldo Shigella (Cat. 2078) para la detección de Shigella.
- Incubar a 37±1 °C durante 20-24 horas.
- Se recomienda sembrar la muestra en otro medio selectivo al mismo tiempo para Enterobacteriaceae, ya que se obtendrá un mayor número de
cultivos positivos. Estos medios pueden ser, por ejemplo, Agar Eosina y Azul de Metileno (Cat.1039), Agar MacConkey (Cat.1052), Agar SS (Cat.1064),
Agar Verde Brillante (Cat.1010), Agar Lactosa Desoxicolato (Cat.1025) ), o Agar XLD (Cat.1080).

Control de calidad
Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
Sin restos Polvo fino Beige Verde oscuro 7,5±0,2

Test microbiológico
Condiciones de incubación: (37±1 ºC / 20-24 h).
Condiciones inoculación: Productividad (10^3-10^4 CFU) / Selectividad (10^4-10^6 CFU).

Microrganismos Especificación Reacción característica


Enterococcus faecalis ATCC 11700 Inhibición total
Shigella flexneri ATCC 12022 Buen crecimiento Colonias azul verdosas
Klebsiella aerogenes ATCC 13048 Crecimiento moderado Colonias rojo salmón
Salmonella enteritidis ATCC 13076 Buen crecimiento Colonias azul verdosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Buen crecimiento Colonias azul verdosas con centro negro
Escherichia coli ATCC 25922 Crecimiento moderado Colonias rojo salmón

Almacenamiento
Temp. Min.:2 ºC
Temp. Max.:25 ºC

Bibliografía
ISO 21567:2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs -- Horizontal method for the detection of Shigella spp.
King, S. & Metzger Appl. Microbiol. 16:577. 1968. King, S. & Metzger Appl. Microbiol. 16:579, 1968.
Isenberg, Kominos & Siegel. Appl. Microbiol. 18:656. 1969. Hoben, Aston & Peterson Appl. Microbiol. 26:126. 1973.
Polloch & Dalhgren. Appl. Microbiol. 27:197. 1974. Peloxv, Lavirotte & Pons Microbia, Tomo I No. 1. 1975.
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