El documento describe diversos métodos para la observación e identificación de bacterias, clasificándolos en criterios morfológicos, tinciones diferenciales, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, pruebas serológicas y detección molecular. Cada método tiene su propio enfoque y utilidad, desde la observación de características morfológicas hasta la identificación molecular mediante PCR. Estos métodos son esenciales para el diagnóstico y tratamiento de infecciones bacterianas.
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El documento describe diversos métodos para la observación e identificación de bacterias, clasificándolos en criterios morfológicos, tinciones diferenciales, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, pruebas serológicas y detección molecular. Cada método tiene su propio enfoque y utilidad, desde la observación de características morfológicas hasta la identificación molecular mediante PCR. Estos métodos son esenciales para el diagnóstico y tratamiento de infecciones bacterianas.
El documento describe diversos métodos para la observación e identificación de bacterias, clasificándolos en criterios morfológicos, tinciones diferenciales, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, pruebas serológicas y detección molecular. Cada método tiene su propio enfoque y utilidad, desde la observación de características morfológicas hasta la identificación molecular mediante PCR. Estos métodos son esenciales para el diagnóstico y tratamiento de infecciones bacterianas.
El documento describe diversos métodos para la observación e identificación de bacterias, clasificándolos en criterios morfológicos, tinciones diferenciales, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, pruebas serológicas y detección molecular. Cada método tiene su propio enfoque y utilidad, desde la observación de características morfológicas hasta la identificación molecular mediante PCR. Estos métodos son esenciales para el diagnóstico y tratamiento de infecciones bacterianas.
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MÉTODOS EMPLEADOS EN LA OBSERVACIÓN DE BACTERIAS.
TAMAÑO, FORMA Y AGRUPACION:
Los métodos más utilizados para la identificación microbiana, los podemos
clasificar en:
• Métodos basados en criterios morfológicos:
Los rasgos morfológicos (estructurales) han ayudado a los taxonomistas por
muchos años a clasificar organismos. Los organismos superiores tienen rasgos anatómicos tan diferentes que pueden ser fácilmente utilizados en su clasificación, pero con respecto a los microorganismos, éstos lucen bajo el microcoscopio tan similares que se dificulta su clasificación. Es decir, que estos microorganismos que se ven tan parecidos bajo un microscopio, pueden diferir en propiedades bioquímicas, fisiológicas y/o serológicas. Sin embargo, aun cuando la morfología celular dice poco sobre las relaciones filogenéticas, sigue siendo útil para la identificación bacteriana. Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localización resulta de mucha utilidad en la identificación de bacilos esporulados.
• Métodos basados en tinción diferencial:
Es posible sacar conclusiones en relación con la morfología de una bacteria,
examinando una lámina que fue sometida a un proceso de tinción diferencial. Estos criterios morfológicos encabezan las primeras etapas del proceso de identificación bacteriana. La mayor parte de las bacterias, teñidas con Gram, las podemos clasificar como gram positivas o gram negativas, otras tinciones diferenciales, como la ácido resistente, se aplican a otro tipo de bacterias, como por ejemplo micobacterias. Un examen microscópico de una lámina teñida por medio de gram o de una tinción diferencial es útil para obtener una información rápida sobre la calidad de un ambiente clínico. Por otro lado, un médico también puede obtener suficiente información de un reporte técnico de laboratorio para comenzar el tratamiento apropiado de un paciente.
• Métodos basados en pruebas bioquímicas:
Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar
bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc. Aun bacterias fuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base a pruebas bioquímicas. Por ejemplo, las bacterias entéricas gram negativas, forman un grupo muy grande y heterogéneo cuyo hábitat natural es el tracto gastrointestinal de humanos y otros animales. Esta familia, Enterobacteriaceae, incluye a varios patógenos que causan síndromes diarreicos. Un gran número de ensayos han sido desarrollados de manera de identificar rápidamente al patógeno, para que posteriormente el médico, con base al reporte, indique el tratamiento adecuado, o para que los epidemiólogos puedan localizar la fuente de la infección.
• Métodos basados en tipificación con fagos:
La interacción entre un virus bacteriano (fago) y su célula bacteriana sensible es
sumamente específica, ya que el proceso de adsorción se encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la célula bacteriana. A una placa con medio de cultivo sólido inoculado con un cultivo puro de una determinada bacteria, se le añade una alícuota de un fago específico; éste puede ocasionar la lisis de las bacterias, hecho que se evidencia en el cultivo como zonas claras definidas, denominadas placas, que indican que hubo infección y lisis celular. El uso de fagos específicos permite identificar y subclasificar bacterias dentro de una misma especie.
• Métodos basados en pruebas serologicas:
Los métodos serológicos, implican la utilización de preparaciones de
inmunoglobulinas específicas provenientes del suero o de un reactivo, y que pueden ser de gran utilidad en la identificación microbiana en muestras puras o en muestras biológicas. Cada uno de los métodos tiene su fundamento particular, pero en líneas generales, todos se basan en la reacción de un antígeno presente en el agente microbiano con su anticuerpo correspondiente. La solución que contiene los anticuerpos se denomina antisuero.
• Métodos basados en detección molecular:
Modernamente adquiere más importancia el uso de métodos basados en biología
molecular donde, a través de procedimientos y reactivos, se pueden detectar determinadas secuencias de ADN que son propias de un determinado agente microbiano. El método que se está utilizando ampliamente en los laboratorios de diagnóstico es el PCR (Polymerase Chain Reaction), que se aplica generalmente para la identificación de- microorganismos que no pueden ser cultivados por los métodos convencionales. A través de este método, puede aumentarse la cantidad de ADN hasta niveles detectables mediante electroforesis o mediante sondas de ADN.