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6 Métodos para Identificar a las Bacterias

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MÉTODOS EMPLEADOS EN LA OBSERVACIÓN DE BACTERIAS.

TAMAÑO,
FORMA Y AGRUPACION:

Los métodos más utilizados para la identificación microbiana, los podemos


clasificar en:

• Métodos basados en criterios morfológicos:

Los rasgos morfológicos (estructurales) han ayudado a los taxonomistas por


muchos años a clasificar organismos. Los organismos superiores tienen rasgos
anatómicos tan diferentes que pueden ser fácilmente utilizados en su clasificación,
pero con respecto a los microorganismos, éstos lucen bajo el microcoscopio tan
similares que se dificulta su clasificación. Es decir, que estos microorganismos que
se ven tan parecidos bajo un microscopio, pueden diferir en propiedades
bioquímicas, fisiológicas y/o serológicas. Sin embargo, aun cuando la morfología
celular dice poco sobre las relaciones filogenéticas, sigue siendo útil para la
identificación bacteriana. Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localización
resulta de mucha utilidad en la identificación de bacilos esporulados.

• Métodos basados en tinción diferencial:

Es posible sacar conclusiones en relación con la morfología de una bacteria,


examinando una lámina que fue sometida a un proceso de tinción diferencial. Estos
criterios morfológicos encabezan las primeras etapas del proceso de identificación
bacteriana. La mayor parte de las bacterias, teñidas con Gram, las podemos
clasificar como gram positivas o gram negativas, otras tinciones diferenciales, como
la ácido resistente, se aplican a otro tipo de bacterias, como por ejemplo
micobacterias. Un examen microscópico de una lámina teñida por medio de gram o
de una tinción diferencial es útil para obtener una información rápida sobre la calidad
de un ambiente clínico. Por otro lado, un médico también puede obtener suficiente
información de un reporte técnico de laboratorio para comenzar el tratamiento
apropiado de un paciente.

• Métodos basados en pruebas bioquímicas:

Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar


bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo es
capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de
compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc. Aun bacterias
fuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base a
pruebas bioquímicas. Por ejemplo, las bacterias entéricas gram negativas, forman
un grupo muy grande y heterogéneo cuyo hábitat natural es el tracto gastrointestinal
de humanos y otros animales. Esta familia, Enterobacteriaceae, incluye a varios
patógenos que causan síndromes diarreicos. Un gran número de ensayos han sido
desarrollados de manera de identificar rápidamente al patógeno, para que
posteriormente el médico, con base al reporte, indique el tratamiento adecuado, o
para que los epidemiólogos puedan localizar la fuente de la infección.

• Métodos basados en tipificación con fagos:

La interacción entre un virus bacteriano (fago) y su célula bacteriana sensible es


sumamente específica, ya que el proceso de adsorción se encuentra mediado por
receptores específicos tanto en el virus como en la célula bacteriana. A una placa
con medio de cultivo sólido inoculado con un cultivo puro de una determinada
bacteria, se le añade una alícuota de un fago específico; éste puede ocasionar la
lisis de las bacterias, hecho que se evidencia en el cultivo como zonas claras
definidas, denominadas placas, que indican que hubo infección y lisis celular. El uso
de fagos específicos permite identificar y subclasificar bacterias dentro de una
misma especie.

• Métodos basados en pruebas serologicas:

Los métodos serológicos, implican la utilización de preparaciones de


inmunoglobulinas específicas provenientes del suero o de un reactivo, y que pueden
ser de gran utilidad en la identificación microbiana en muestras puras o en muestras
biológicas. Cada uno de los métodos tiene su fundamento particular, pero en líneas
generales, todos se basan en la reacción de un antígeno presente en el agente
microbiano con su anticuerpo correspondiente. La solución que contiene los
anticuerpos se denomina antisuero.

• Métodos basados en detección molecular:

Modernamente adquiere más importancia el uso de métodos basados en biología


molecular donde, a través de procedimientos y reactivos, se pueden detectar
determinadas secuencias de ADN que son propias de un determinado agente
microbiano. El método que se está utilizando ampliamente en los laboratorios de
diagnóstico es el PCR (Polymerase Chain Reaction), que se aplica generalmente
para la identificación de- microorganismos que no pueden ser cultivados por los
métodos convencionales. A través de este método, puede aumentarse la cantidad
de ADN hasta niveles detectables mediante electroforesis o mediante sondas de
ADN.

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