TECNOLOGICO NACIONAL DE MEXICO.

INSTITUTO TECNOLOGICO DE MINATITLAN.

Proyecto:
Métodos espectrofotométricos.

Materia:
análisis instrumental.

Profesor:
Ing. Imelda Tenorio Prieto.

Alumnos:
 Jimenez Pavón Amparo Mariana
 Nolasco Pérez Alexis
 Guerra Regalado Williams Francisco
 Torres Otero Denisse

Carrera:
Ingeniería Química
 UNIDAD II

MÉTODOS ESPECTROFOTOMÉTRICOS
 Métodos Analíticos

Métodos químicos Métodos instrumentales

clásicos
Se obtiene una señal
S  Canalito

Gravimetría Análisis Electroquímicos Separación Ópticos

volumétrico

Cromatográfico
Precipitación Titulación Potenciométrico Emisión

Pesada Conductimétrico Absorción

2.1 Propiedades de la Radiación
electromagnética
 Radiación electromagnética

La radiación electromagnética (REM) es un

tipo de energía que toma varias formas, de las
cuales las más fácilmente reconocibles son la
luz y el calor radiante.
Sus manifestaciones más difícilmente
reconocibles incluyen los rayos gamma y los
rayos X, así como las radiaciones ultravioleta,
de microondas y de radiofrecuencia.
La REM presenta una naturaleza compleja:
depende de cómo la observemos se
manifestará como una ondao como una
partícula.
 Teoría corpuscular

Esta teoría estudia la REM asumiendo que es un

torrente de partículas sin carga y sin masa llamadas
fotones, capaces de portar todas las formas de energía.

Esta interpretación resurgió debido a que la REM, en sus

interacciones con la materia, intercambia energía sólo
en cantidades discretas denominadas cuantos.
 Teoría del modelo ondulatorio

Muchas de las propiedades de la REM se explican

adecuadamente con un modelo clásico de onda
sinusoidal, que utiliza parámetros como la longitud de
onda, la frecuencia, la velocidad y la amplitud.
La REM no necesita un medio de apoyo para
transmitirse y se propaga a través del vacío.
El modelo ondulatorio falla al intentar explicar
fenómenos asociados con la absorción o la emisión de
energía radiante.
 Teoría de la dualidad onda-corpúsculo

Por tanto, se recurre a un modelo corpuscular en el que

la REM se contempla como un flujo de partículas
discretas, paquetes ondulatorios de
o
denominados fotones,
energíaen los que la energía de un fotón
es proporcional a la frecuencia de la radiación.
Este teoría de la radiación como partícula y como onda
no es mutuamente excluyente, sino complementaria.
Propiedades ondulatorias de la radiación
electromagnética (REM)

La REM se representa como un campo

eléctrico y otro magnético, con oscilaciones
sinusoidales en ángulo recto de uno respecto
a otro y respecto a la dirección de
propagación.
Por simplicidad, para estudiar los métodos
espectrofotométricos, solo se considera la
componente eléctrica de la radiación, ya que
el campo eléctrico es el responsable de la
mayoría de los fenómenos que interesan
(transmisión, reflexión, refracción y absorción).
 La radiación electromagnética es
una onda de energía que esta
compuesta por un campo
magnético y un campo eléctrico.
El campo eléctrico y el campo
magnético son perpendiculares
entre ellos a la dirección de
propagación de la onda.

Representación de un haz de radiación monocromática

(campos eléctrico y magnético perpendiculares entre sí y
respecto de la dirección de propagación)
Representación bidimensional del vector eléctrico
 Parámetros ondulatorios

La longitud de onda (λ) es la distancia entre dos

crestas adyacentes (o dos valles).
El número de onda (  ) es el recíproco o inverso de
la longitud de onda, que es la cantidad de ondas en
la unidad de longitud.
La cantidad de ciclos completos u ondas que pasan
por un punto fijo en una unidad de tiempo es la
frecuencia ( , número de oscilaciones por unidad de
tiempo).
Amplitud A de una onda sinusoidal es la longitud del
vector eléctrico en el máximo de la onda.
El tiempo, en segundos, necesario para el paso de
sucesivos máximos o mínimos por un punto fijo en el
espacio se denomina periodo de la radiación.
El frente de la onda se mueve a cierta velocidad.
La multiplicación de la frecuencia en ciclos por
segundo (  ) por la longitud de onda en metros por
ciclo (λ) da la velocidad de propagación (νi) en
metros por segundo:

vi   i
La relación que existe entre longitud de
onda, frecuencia, número de onda es la siguiente:

1 
   c
donde λ es la longitud de onda,  es el número de
onda,  es la frecuencia y c es la velocidad de la
luz.

La velocidad de la luz (c) es de 3 x 1010

cm/s, aproximadamente.
 UNIDADES

PARÁMETRO UNIDADES
Longitud de Radiación visible y ultravioleta:
Unidad Angstrom ( ) = 10 -10
m, 10 -8
cm
0

onda (λ) A
Nanómetro (nm) = 10-9 m, 10-7 cm
0

1 nm = 10 A

Región infrarrojo:
Micrómetro (μm) = 10-6 m
-1
Número de onda cm
( )
Frecuencia (ν) Hertz = Hz = 1 s-1
 2.1.1 ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

 Se denomina espectro electromagnético a la distribución

energética del conjunto de las ondas electromagnéticas.
 Referido a un objeto se denomina espectro
electromagnético o simplemente espectro a la radiación
electromagnética que emite (espectro de emisión) o
absorbe (espectro de absorción) una sustancia. Dicha
radiación sirve para identificar la sustancia de manera
análoga a una huella dactilar.
 Los espectros se pueden observar mediante
espectroscopios que además permiten realizar medidas
sobre éste, como la longitud de onda, la frecuencia y la
intensidad de la radiación.
Espectro electromagnético
El espectro electromagnético abarca un intervalo
enorme de longitudes de onda y de frecuencias (así
como de energías). El intervalo es tan grande que se
necesita una escala logarítmica.
Los métodos espectroquímicos que utilizan la
radiación visible, la radiación ultravioleta y la
infrarroja se denominan métodos ópticos, a pesar de
que éstas últimas no son percibidas por el ojo
humano.
ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
Regiones del espectro electromagnético
 ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
TIPO DE RADIACIÓN  m  E J
+
TIPO DE TRANSICIÓN
CUANTICA
- Hz
RAYOS GAMMA 10-14 1022 10-11 NUCLEAR
RAYOS X 10-11 1018 10-15 ELECTRÓNICA (CAPA
INTERNA)
RADIACIÓN 10-9 1016 10-17 ELECTRÓNICA (CAPA
ULTRAVIOLET EXTERNA)
A
RADIACIÓN VISIBLE 10-9 1015 10-18 ELECTRÓNICA (CAPA
EXTERNA)
RADIACIÓN 10-6 1013 10-20 VIBRACIÓN Y ROTACIÓN
INFRARROJA MOLECULAR
MICROONDAS 10-2 109 10-24 ROTACIÓN MOLECULAR
RADIOFRECUENCIAS 101 106 10-27 ESTADO DE ESPÍN
INDUCIDO
- MAGNÉTICAMENT
+ E
 Tipo de Intervalo Intervalo Tipo de transición
espectroscopia habitual de habitual de cuántica
M longitud número de
B
de onda onda, cm-1
E
Emisión de rayos 0.005-1.4 °A - Nuclear
A
T gamma
S Absorción, emisión, 0.1-100 °A - Electrones internos
O
fluorescencia y
A difracción de rayos X
D
E D Absorción 10-180 nm 1 x 106 a 5 x Electrones de
O E ultravioleta de vacío 104 enlace
S
S
O Absorción, emisión y 180-780 nm 5 x 104 a 1.3 Electrones de
N x 104
P fluorescencia enlace
S
L ultravioleta visible
E A Absorción infrarroja 0.78-300 nm 1.3 x 104 a Rotación/vibración
C y dispersión Raman 3.3 x 101 de moléculas
R
Absorción de 0.75-3.75 nm 13-27 Rotación de
T microondas moléculas
E Resonancia de espín 3 cm 0.33 Espín de los
R
electrónico electrones en un
M
O campo magnético
Resonancia 0.6-10 m 1.7 x 10-2 a 1 Espín de los
S
magnética nuclear x 103 núcleos en un
C campo magnético
En cualquier medio material, la propagación de
la radiación disminuye a causa de
la campo
el interacción
electromagnético
entre de la radiación y los
electrones enlazantes de la materia.
La frecuencia del haz de radiación está determinada
por la fuente y permanece invariable.
La velocidad de radiación depende de la
composición del medio que atraviesa.
Por tanto, la longitud de onda la radiación
de
depende también del medio.
Efecto del cambio de medio en un haz de radiación monocromática
(la longitud de onda se acorta cerca de 200 nm, o más de un 30%; el
efecto opuesto ocurre cuando la radiación entra de nuevo en el
aire)
 Estados de energía de las especies químicas
(Teoría cuántica de Max Planck)

1. Los átomos, iones y moléculas solo pueden existir en

ciertos estados discretos, caracterizados por cantidades
definidas de energía. Cuando una especie cambia su
estado, absorbe o emite una cantidad de energía
exactamente igual a la diferencia de energía entre los
estados.
2. Cuando los átomos, iones o moléculas absorben o
emiten radiación al realizar la transición de un estado de
energía a otro, la frecuencia  o la longitud de onda λ de
la radiación se relaciona con la diferencia de energía
entre los estados energéticos en cuestión.
El estado de energía más bajo de un átomo
o molécula es su estado fundamental.
Los estados de energía superiores se denominan
estados excitados.
A temperatura ambiente, las especies químicas se
encuentran en su estado fundamental.
Para átomos o iones en estado elemental, la
energía en cualquier estado dado proviene del
movimiento de los electrones alrededor del núcleo
cargado positivamente. Los distintos estados de
energía se denominan estados electrónicos.
Las moléculas también tienen cuantizados los
estados vibracionales, asociados a la energía de
las vibraciones interatómicas y los estados
rotacionales, provenientes de la rotación de las
moléculas alrededor de sus centros de gravedad.
Relación entre energía radiante y frecuencia
La teoría según la cual un haz de luz es un flujo de
partículas de energía llamadas fotones, ayuda en la
interpretación de muchos fenómenos.
Cada uno de los fotones posee una energía
característica que está relacionada con la frecuencia
de la luz mediante la ecuación:

E  h

h = constante de Planck
E = energía radiante
ν = frecuencia
Relación entre energía radiante y frecuencia

La luz de una cierta frecuencia (o longitud de onda)

está asociada con los fotones, cada uno de los
cuales posee una cantidad definida de energía.
Es la cantidad de energía que posee un fotón la que
determina si una cierta especie molecular absorberá
o emitirá la luz de la longitud de onda
correspondiente.
Estados de energía de las especies químicas
(Teoría cuántica de Max Planck)

hc
E1  E0  h  

Donde:
E1 = la energía del estado superior
E0 = la energía del estado inferior
c = velocidad de la luz
h = constante de Planck
 Interacción de la radiación con la materia

Cuando un haz de radiación pasa del aire o el

vacío a una porción de materia, generalmente el
vector eléctrico de la radiación interactúa con los
átomos y moléculas del medio. El efecto de esta
interacción depende de:
a) Las propiedades de la materia
b) Las características de la radiación

Radiación MATERI
A
Dando lugar a fenómenos como:

 Dispersión
 Transmisión
 Polarización
 Absorción
 Refracción
 Difracción
 Reflexión
 Emisión
 Dispersión de radiación

Es la radiación proyectada en todos los ángulos

posibles a partir de la dirección original, provocada
por la presencia de partículas suspendidas en la
muestra.
 Transmisión de radiación
Es el paso de la radiación sin que se produzca una transferencia permanente de energía
(no hay cambio en la frecuencia), sólo momentánea, dando lugar a fenómenos como:
refracción y polarización.
La velocidad a la que se propaga la radiación a través de una sustancia transparente es
menor que su velocidad en el vacío y depende de los tipos y concentraciones de átomos,
iones o moléculas del medio.
Reflexión y transmisión de radiación
 Polarización

La interacción implicada en la transmisión puede atribuirse a la polarización

periódica de las especies atómicas y moleculares que constituyen el medio.

La polarización significa una deformación transitoria de las nubes de

electrones asociadas a los átomos o a las moléculas, causada por el campo
electromagnético alternante de la radiación.
 Absorción de la radiación

Es una transferencia de energía a los

átomos y moléculas que constituyen la
muestra, produciéndose transiciones cuya
magnitud depende del contenido
energético de la radiación

Atómica
Absorción Molecular
Magnétic
amente
inducida
ESPECTRO DE ABSORCIÓN:
Son gráficos que se obtienen
experimentalmente de la reducción de
potencia radiante (absorbancia) en
función de la longitud de onda


Pueden considerarse dos tipos de espectros:

a)Asociados con la absorción atómica:

Absorción de pocas frecuencias, debido a
que el número posible de estados
energéticos es pequeño (ESPECTRO DE
LÍNEAS)

b)Asociados con la absorción molecular:

Proceso más complejo debido al número de
estados energéticos, se presentan como
bandas de absorción (ESPECTRO DE
BANDAS)
 Aplicaciones de los espectros o curvas
de absorción:

1. Determinación de la longitud de onda

analítica, es decir la longitud de onda
adecuada a la que debe realizarse un
análisis

2. En algunos métodos, como la

espectrofotometría de absorción en el
infrarrojo, proporciona información útil en
el análisis cualitativo
 Making the light to work
Muestra

Fuente de luz

Detector
 Espectroscopia
La espectroscopia surgió con el estudio de la
interacción entre la radiación y la materia como
función de la longitud de onda (λ). En un principio
se refería al uso de la luz visible dispersada según
su longitud de onda, por ejemplo por un prisma.
 Espectroscopia
 Más tarde el concepto se amplió enormemente para
comprender cualquier medida en función de la longitud
de onda o de la frecuencia. Por tanto, la espectroscopia
puede referirse a interacciones con partículas de
radiación o a una respuesta a un campo alternante o
frecuencia variante (ν).

 Una extensión adicional del alcance de la definición

añadió la energía (E) como variable, al establecerse la
relación E=hν para los fotones. Un gráfico de la
respuesta como función de la longitud de onda (o más
comúnmente la frecuencia) se conoce como espectro.
 Espectroscopia
 La espectroscopia es el uso de la absorción, emisión
o dispersión de la radiación electromagnética por
átomos o moléculas (o iones) para estudiar procesos
físicos o para obtener información cualitativa o
cuantitativa de estas partículas.

 La interacción de la radiación con la materia puede

causar redireccionamiento de la radiación y/o
transiciones entre los niveles de energía de los átomos
o moléculas.
 La espectrometría
 Es la técnica espectroscópica para tasar la concentración o la
cantidad de especies determinadas. En estos casos, el
instrumento que realiza tales medidas es un espectrómetro o
espectrógrafo.

 La espectrometría a menudo se usa en física y química analítica

para la identificación de sustancias mediante el espectro emitido o
absorbido por las mismas.

 La espectrometría también se usa mucho en astronomía y

detección remota. La mayoría de los telescopios grandes tienen
espectrómetros, que son usados para medir la composición
química y propiedades físicas de los objetos astronómicos, o para
medir sus velocidades a partir de sus líneas espectrales.
 Espectrómetro
• Un espectrómetro (también llamado espectroscopio o
espectrógrafo) es un instrumento óptico que se usa para
medir las propiedades de la luz sobre una porción
específica del espectro electromagnético. También es
utilizado en los laboratorios de química para la
cuantificación de sustancias y microorganismos.
 Espectrofotómetro

 Hay varios tipos de espectrofotómetros, pueden ser de

absorción atómica o espectrofotómetro de masa.

 Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de

luz monocromática a través de una muestra y medir la
cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto
le permite al operador realizar dos funciones:

 1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia

en la muestra

 2. Indicar indirectamente qué cantidad de la sustancia

que nos interesa está presente en la muestra
Componentes de un
espectrofotómetro
Interacción de la radiación con un medio

Pérdidas por reflexión y dispersión

Absorción de la radiación

b
P0 P

P0 = Poder radiante incidente

P = Poder radiante transmitido
b = Camino óptico
 ¿De qué depende la
absorción?

LEY DE BOUGUER-
b
LAMBERT P0 P

La relación existente P0 = Poder radiante incidente

entre la absorción de P = Poder radiante transmitido
b = Camino óptico
radiación y la longitud
de la trayectoria (b) a
través del medio Representación
matemática
absorbente
fue formulada por  db  K
dP 1

Bouguer (1729) y P
P
también se le atribuye a log P0  K2 b
Lambert (1768)
LEY DE BEER
C
P0 P
En 1859 Beer formuló
la relación entre la Representación matemática
concentración de
especie absorbente l
el grado de absorción a  dC
dP
 3K
P
P0
log P  K4 C
y
En la actualidad se sabe que la absorción es
directamente proporcional al camino óptico b a
través del medio y a la concentración C de la
especie absorbente

bb
P0 C P

Expresada en la Ley de Lambert-

Beer, denominada simplemente LEY DE BEER
Para establecer la Ley de Beer es importante
hacer las siguientes consideraciones:

– La radiación incidente es monocromática

– Las especies absorbentes, átomos, iones y
moléculas, actúan de manera independiente
sin tomar en cuenta su número o tipo
– La absorción está limitada a un volumen de
corte seccional uniforme
 Formas más usuales de la Ley de Beer

Por definición:

P P0
T  P0  Transmitancia A   log T  log  Absorbancia
P
La absortividad a es una constante y es característica
para cada especie absorbente a una longitud de onda
determinada

 log P  log
P0
 abC
abC P
P0
A  abc
 log T 
 Transmitanci
a
La transmitancia T de la solución es la fracción
de radiación incidente transmitida por la solución:

P
T  P0

P
%T  P0 x
100
 Absorbancia

A   log10 T  log
P0 P

Para una radiación monocromática, la absorbancia A es

directamente proporcional a la longitud b de la trayectoria
a través de la solución, y a la concentración c de la
especie absorbente:

A  abc (Ley de Beer)

a es una constante de proporcionalidad

denominada
absortividad, L g-1 cm-1
 Absorbancia
Cuando la concentración de la ecuación anterior se
expresa en moles por litro, y la longitud de la cubeta en
centímetros, la absortividad se denomina absortividad
molar ().
Cuando b se da en centímetros y c en moles por litro:

A  bc
En la que  tiene unidades de L mol-1 cm-1.
La ley de Beer es la ley fundamental
en la que se basan los métodos
colorimétricos y
espectrofotométricos
 Limitantes y aplicaciones de la Ley de Beer

La restricción de que los centros de absorción

no interactúan entre sí o con otras especies, hace
que la Ley de Beer se aplique principalmente a
soluciones diluidas (concentraciones < 10-2 M).
Para sustancias que siguen la Ley de Beer, la
absortividad molar es independiente de la
concentración y longitud de la trayectoria óptica.
 Aplicaciones de la Ley de Beer

La Ley de Beer puede aplicarse a mezclas de

diferentes tipos de absorbentes, cada especie
tendrá una absorbancia molar o específica
diferente y éstas pueden sumarse:

P0
log P  At  1 bc1  2 bc2  ...  b i i i
c
El procedimiento para eliminar error por
reflexión es involucrar un testigo. Se usan celdas
idénticas para la muestra y el testigo.
2.2 Espectroscopía de absorción en
el visible y en el UV
Espectroscopía de absorción molecular UV-VIS

La espectroscopía de absorción molecular UV-

VIS comprende la absorción de la REM de la
región de longitudes de onda comprendidas
entre 160 y 780 nm.
Parte de los conceptos aplicados en la
espectroscopia de absorción molecular UV-VIS,
también son aplicables a la espectroscopia
infrarroja.
Las medidas de absorción de la radiación UV-
VIS se aplican en la determinación cuantitativa
de especies tanto inorgánicas como orgánicas.
2.2.1 Fundamento de la absorción de
radiación visible por una muestra
 Absorción

Cuando la radiación pasa a través de una capa de

un sólido, un líquido o un gas, ciertas frecuencias
pueden eliminarse selectivamente por absorción.
Absorción es un proceso en el que la energía
electromagnética se transfiere a los átomos, iones
o moléculas constitutivas de la muestra.
La absorción promueve a estas partículas desde
su estado normal a temperatura ambiente, o
estado fundamental, a uno o varios estados
excitados de energía más elevada.
 Absorción molecular

Los espectros de absorción de las moléculas

poliatómicas son más complejos que los espectros
atómicos, porque el número de estados de energía
de las moléculas es enorme si se compara con el
número de átomos aislados.
La energía interna E asociada a las bandas de una
molécula viene dada por tres componentes:

E = Eelectrónica + Evibracional + Erotacional

 Absorción molecular
Energíaelectrónica: energía electrónica de la molécula
que proviene de los estados energéticos de sus
distintos electrones enlazantes
Energíavibracional: energía total asociada al elevado
número de vibraciones interatómicas presente en las
especies moleculares (niveles cuantizados de energía
vibracional >>>> niveles electrónicos)
energía debida a los
Energíarotacional:
movimientos rotacionales dentro distintos de una
(número de estados rotaciones >>>> molécula
número de
estados
vibracionales)
E int  E elect  E vib  Erot
 Métodos cuantitativos basados en la
absorción
La espectroscopia de absorción molecular
se basa en la medida de la Transmitancia T o
de
Absorbancia
la A de disoluciones que
encuentran se en cubetas transparentes
tienen un camino
que óptico de b cm.
La concentración c de un analito absorbente
está relacionada linealmente con la absorbancia
como representa la ecuación
P0
A   log T  log  Ley de Beer
bc
P
 1.0 1.0

T A

Absorbancia A
Transmitancia T

0.5 0.5

0 0
Concentración

Absorbancia y transmitancia de una

solución como función de la concentración
 Términos y símbolos importantes utilizados en las
medidas de la absorción
Término y símbolo Definición Nombre y símbolo alternativo
Potencia radiante P, P0 Energía (en ergios) de la Intensidad de la radiación I, I0
radiación que incide en el
detector, por cm2 y por
seg
Absorbancia A log
P0 Densidad óptica D; extinción E
P
Transmitancia T P Transmisión T
P0
Camino óptico de la - l, d
radiación b (*)
Absortividad a (*) A Coeficiente de extinción k
bc
Absortividad molar  (**) A Coeficiente de extinción molar
bc

(*) c puede expresarse en g/L o en otras unidades de concentración; b puede

expresarse en cm o en otras unidades de longitud
(**) c se expresa en mol/L; b se expresa en cm
 Etapas en la absorción de radiación UV o
Visible por una especie absorbente M

1ª. Etapa: Excitación electrónica

M  h  M *

2° Etapa: Relajación
El tiempo de vida de la especie excitada (M*) es
breve (10-8 A 10-9 seg), su existencia se termina
por alguno de los procesos de relajación
M *  M  calor
 Etapas en la absorción de radiación UV o
Visible por una especie absorbente M (cont.).

La relajación puede ocurrir también por la

descomposición de M* para dar lugar a nuevas
especies (reacción fotoquímica).
Las medidas de absorción crean una mínima
perturbación sistema en estudio,
del cuando excepto lugardescomposición
la
tiene
fotoquímica.
 Tipos de transiciones moleculares

Las moléculas experimentan tres tipos de transiciones

cuantizadas cuando son excitadas al absorber radiación
UV, visible e infrarroja:
Transiciones electrónicas: debida a la
transferencia de electrones a niveles mayores de
energía
Transiciones vibracionales: ocurren como
consecuencia de los múltiples niveles de energía
asociados con enlaces intramoleculares
Transiciones rotacionales: asociadas al
movimiento rotacional de la molécula alrededor de su
centro de gravedad.
 Tipos de transiciones moleculares en la
absorción molecular UV-Visble

La absorción de radiación UV-Visible resulta,

generalmente, de la excitación de los electrones de
enlace, de tal manera que los picos de absorción
pueden correlacionarse con los tipos de enlaces de las
especies estudiadas.
La espectroscopia de absorción molecular UV y visible
es válida para:
1) Identificar grupos funcionales en una molécula.
2) Determinar cuantitativamente los compuestos que los
contienen.
 Electrones absorbentes en moléculas
orgánicas
Los electrones que contribuyen a la
absorción por una molécula orgánica son:
1)Aquellos que participan directamente en la
formación del enlace entre átomos y, por
tanto, se asocian con más de un átomo
2)Electrones no enlazantes o electrones que no
participan en ningún enlace que están en gran
parte localizados alrededor de átomos como
oxígeno, halógenos, azufre y nitrógeno.
 Especies absorbentes en UV-Visible

Los tipos de transiciones electrónicas que se

presentan en UV-Vis incluyen:
1. Electrones π,  y ‫ח‬.
2. Electrones d y f.
3. Electrones de transferencia de carga.
Especies absorbentes que contienen
electrones π,  y ‫ח‬

Incluyen iones y moléculas orgánicas, así

como algunos aniones inorgánicos.
La absorción de radiación Vis y UV de longitud
de onda larga está restringida a un número
limitado de grupos funcionales (cromóforos)
que contienen electrones de enlace con
energías de excitación relativamente bajas.
 Especies absorbentes que contienen
electrones π,  y ‫ח‬

La energía de excitación asociada con electrones

de enlaces sencillos en compuestos orgánicos
es tan alta que su absorción queda restringida a la
región de ultravioleta de vacío (λ<185 nm).
La mayoría de las investigaciones
espectrofotométricas de compuestos orgánicos se
han realizado a longitudes de onda mayores a 185
nm.
 Electrón σ

En un enlace covalente, las zonas no localizadas entre

los átomos, ocupadas por los electrones enlazantes se
llaman orbitales moleculares.
Cuando se combinan dos orbitales atómicos se origina un
orbital molecular enlazante de baja energía y un orbital
molecular antienlazante de alta energía. Los electrones
de la molécula en estado fundamental ocupan el primero.
Los orbitales moleculares asociados con los enlaces
sencillos, en las moléculas orgánicas, se designan
como orbitales sigma () y los electrones
correspondientes son electrones .
 Electrón π

El doble enlace en una molécula orgánica

contiene dos tipos de orbitales moleculares:
un orbital σ correspondiente a un par de
electrones enlazantes y un orbital molecular pi
(π) asociado con el otro par.
Los orbitales pi se forman por el solapamiento
paralelo de orbitales p atómicos.
Las distribuciones de densidad de carga de los
orbitales sigma y pi antienlazantes se designan
por σ* y π*.
Distribución electrónica de los orbitales moleculares
sigma y pi
 Electrón n

Además de los electrones σ y π, muchas

moléculas orgánicas contienen electrones no
enlazantes. Estos electrones, que no participan
en ningún enlace, se designan con el símbolo
n.
Tipos de orbitales moleculares en el formaldehído
Niveles de energía electrónicos de los orbitales
moleculares
 Transiciones electrónicas

Son posibles cuatro tipos de transiciones:

1)Transiciones σ→σ*
2)Transiciones n→ σ*
3)Transiciones n→π*
4)Transiciones π→π*
 Transiciones σ→σ*

Un electrón de un orbital σ enlazante de una molécula se

excita al correspondiente orbital antienlazante mediante
absorción de radiación (estado excitado σ,σ*).
La energía requerida para esta transición es grande
(frecuencia radiante de la región ultravioleta de vacío).
El metano, por ejemplo, solo contiene enlaces sencillos
C-H y solo puede sufrir transiciones σ→σ* presentando
un máximo de absorción a 125 nm.
Los máximos de absorción debidos a las transiciones
σ→σ* nunca se observan en la región UV comúnmente
accesible.
 Transiciones n→σ*
Las transiciones n→σ* se presentan en compuestos
saturados que contienen pares de electrones no
compartidos (electrones no enlazantes).
Requieren menos energía que las del tipo σ→σ* y se
pueden producir por radiación de la región comprendida
entre 150 y 250 nm.
Los máximos de absorción para las transiciones n→σ*
tienden a desplazarse hacia longitudes de onda más
cortas en presencia de disolventes como agua o etanol.
El número de grupos funcionales orgánicos con picos
n→σ* en la región UV de fácil detección es relativamente
pequeño.
 Algunos ejemplosa de absorción debidos a
transiciones n→σ*

Compuesto λmáx (nm) máx

H2 O 167 1.480
CH3OH 184 150
CH3Cl 173 200
CH3I 258 365
(CH3)2Sb 229 140
(CH3)2O 184 2.520
CH3NH2 215 600
(CH3)3N 227 900
a Muestras en estado vapor
b En etanol como disolvente
 Transiciones n→π* y π→π*

La mayoría de las aplicaciones de espectroscopia de

absorción en compuestos orgánicos se basan en
transiciones de los electrones n y π al estado excitado
π*.
La energía requerida para estos procesos produce picos
de absorción en la región espectral de 200 a 700 nm.
Ambas transiciones requieren la presencia de grupos
funcionales no saturados que aportan los electrones
π. A estos grupos absorbentes no saturados se les aplica
el término de cromóforos.
 Transiciones n→π* y π→π* (cont.).

Las absortividades molares para los picos asociados con

la excitación al estado n, π* son generalmente bajas y se
encuentran entre 10 y 100 L cm-1 mol-1.
Los valores para las transiciones π→π* oscilan entre
1,000 y 10,000 L cm-1 mol-1.
Otra diferencia de los dos tipos de absorción es el efecto
que ejerce el disolvente sobre la longitud de onda de los
picos.
 Efectos del disolvente en transiciones
n→π* y π→π*

Cuando aumenta la polaridad del disolvente, los picos

asociados con transiciones n→π* generalmente se
desplazan hacia longitudes de onda más
(desplazamiento
cortashipsocrómico o hacia el azul).
Normalmente, aunque no siempre, se observa
la tendencia opuesta en las transiciones π→π*
(desplazamiento batocrómico o hacia el rojo).
El efecto hipsocrómico surge de una mayor solvatación
del par de electrones no enlazantes que disminuye la
energía del orbital n (efectos más drásticos se observan
con disolventes próticos como agua o alcohol).
 Efectos del disolvente en transiciones
n→π* y π→π* (cont.).

Un segundo efecto del disolvente que influye en ambas

transiciones π→π* y n→π* lleva a un desplazamiento
batocrómico cuando aumenta la polaridad del disolvente.
En el caso de las transiciones n→π*, este efecto es
pequeño (normalmente menor de 5 nm) y está
completamente solapado por el efecto hipsocrómico
Con el efecto batocrómico las fuerzas de polarización
atractivas entre el disolvente y el absorbente tienden
a
disminuir los niveles de energía de ambos
estados, excitado u no excitado.
 Cromóforos orgánicos

Las posiciones de los máximos de

absorción de los cromóforos orgánicos se
ven afectadas por el disolvente y la
estructura de las moléculas del cromóforo.
Los picos son normalmente anchos debido
a los efectos vibracionales.
Espectros ultravioletas
de compuestos
orgánicos
representativos
Características de absorción de algunos cromóforos
comunes
 Espectros de
absorción UV para
la 1,2,4,5-
tetrazina
(a) vapor, (b)
disuelto en hexano
y (c) en disolución
acuosa
Absorción por sistemas aromáticos

Los espectros ultravioleta de los aromáticos se

caracterizan por tres grupos de bandas
(transiciones π→π*).
El benceno presenta un pico de absorción
intenso a 184 nm, una banda débil (E2) a 204 nm
y un pico aún más débil (B) a 256 nm.
Los disolventes tienden a reducir la estructura
fina de los espectros de los compuestos
aromáticos como lo hacen ciertos tipos de
sustitución.
Absorción por sistemas aromáticos (cont.).

Las tres bandas características del benceno se

ven muy afectadas por la sustitución del anillo,
ocasionando que los picos de absorción vayan a
longitudes de onda más largas (desplazamiento
batocrómico).
Estos grupos funcionales de sustitución se
denominan auxocromos.
 Auxocromos

Un auxocromo es un grupo funcional que no absorbe en

la región UV pero que tiene el efecto de desplazar los
picos del cromóforo hacia longitudes de onda más largas,
así como de incrementar sus intensidades.
Los sustituyentes auxocrómicos tienen, al menos, un par
de electrones n capaces de interaccionar con los
electrones π del anillo, estabilizando el estado π*, y
disminuyendo su energía (desplazamiento batocrómico).
Ejemplos: el OH- y NH2- tienen un efecto auxocrómico
sobre el cromóforo benceno (principalmente en banda B).
Características de absorción de los
compuestos aromáticos
EFECTOS DE LOS AUXOCROMOS SOBRE LA ABSORCIÓN

Hipercrómico

Hipsocrómico Batocrómico

Hipocrómico


Absorción por aniones inorgánicos
Existen algunos aniones inorgánicos que presentan
picos de absorción en la región ultravioleta o visible que
son consecuencia de n a *. Por ejemplo: iones nitrato
(313 nm), carbonato (217 nm), nitrito (360 y 280 nm),
entre otros.

Absorción que implica electrones d y f

La mayoría de los iones de los metales de transición
absorben en las regiones ultravioleta o visible.
Para los lantánidos y actínidos la absorción proviene de
transiciones electrónicas de electrones 4f y 5f.
En los metales de transición los responsablesson
los electrones 3d y 4d.
Absorción por transferencia de carga
Muchos complejos inorgánicos presentan absorción por
transferencia de carga, es necesario que uno de sus
componentes tenga características de dador de electrones
y el otro de aceptor.
Por ejemplo: en el complejo hierro (III)/Tiocianato, la
absorción de un fotón da lugar a la transferencia de un
electrón del tiocianato a un orbital asociado con el hierro
(III)
 APLICACIONES DE LAS MEDIDAS DE
ABSORCIÓN MOLECULAR EN EL UV Y VISIBLE

ANÁLISIS CUALITATIVO
La espectrofotometría ultravioleta y visible tiene
una aplicación algo limitada para el análisis
cualitativo, debido a que el número de máximos
y mínimos es relativamente pequeño.

Puede detectarse la de algunos

presencia grupos actúan como
funcionales
cromóforos. que
 Disolventes

Al elegir un disolvente no sólo se tiene que considerar

su transparencia, sino también sus posibles efectos
sobre el sistema absorbente.
Disolventes polares como el agua, alcoholes, ésteres y
cetonas tienden a borrar la estructura fina del espectro.
Las posiciones de los máximos se ven afectadas por la
naturaleza del disolvente.
Disolventes habituales en espectrofotometría UV: agua,
etanol al 95%, ciclohexano y 1,4-dioxano.
En la región visible: cualquier disolvente incoloro es útil.
Efecto del disolvente sobre el espectro
de absorción del acetaldehído
DISOLVENTES PARA LAS REGIONES UV Y
VISIBLE
 ANÁLISIS CUANTITATIVO

Es una de las herramientas más útiles y

ampliamente utilizada por el químico en el
análisis cuantitativo.
Abarca todos los campos en donde se
requiere información química cuantitativa.
Por ejemplo, en el campo de la sanidad, un
95% de las determinaciones cuantitativas se
llevan a cabo por espectrofotometría UV/Vis

 Aplicaciones a especies absorbentes

 Aplicación a especies no absorbentes
 Aplicaciones a especies absorbentes

La determinación espectrofotométrica de cualquier

compuesto orgánico que contiene uno o más de los
grupos cromóforos más comunes es potencialmente
posible.
También absorben numerosas especies
susceptibles de determinación inorgánicas directa
transición; iones nitrito, nitrato y cromato;
(metales tetróxidos
de
de osmio y rutenio; yodo molecular).
 Aplicaciones a especies no absorbentes

Numerosos reactivos reaccionan selectivamente con especies no

absorbentes y generan productos que absorben fuertemente en las
regiones UV y visible. Se requiere que la reacción de formación de
color sea completa.
Los reactivos que generan color también se utilizan para la
determinación de especies absorbentes, como los iones de metales
de transición.
Un gran número de agentes complejantes se aplican en la
determinación de especies inorgánicas: ion tiocianato para el hierro,
cobalto y molibdeno; ion yoduro para el bismuto, paladio y teluro.
Agentes quelantes orgánicos, que forman complejos coloreados
estables con cationes son importantes: o-fenantrolina para
determinación de hierro, dimetilglioxima para el níquel,
dietilditiocarbamato para el cobre.
2.2.2 Características generales de los
instrumentos utilizados para
espectroscopia de en el
absorción
visible en el laboratorio
 INSTRUMENTACIÓN

FUENTE DE SELECTOR
DE LONGITUD CELDA DETECTOR
RADIACIÓN DE ONDA

DISPOSITIVO
DE
LECTURA

DIAGRAMA A BLOQUES DE UN ESPECTROFOTOMETRO

DE ABSORCIÓN MOLECULAR
 FUENTES DE RADIACIÓN

Las características que deben reunir son:

Deben tener potencia suficiente.

Deben ser estables.

Deben tener un estabilizador para corregir las

variaciones de la radiación, o en el sistema de
doble haz, uno de ellos no pasa por la muestra y
corrige las fluctuaciones.
Existen dos tipos de fuentes: continuas y
de líneas

Fuentes continuas. Emiten radiación cuya intensidad

varía de forma gradual con la longitud de onda. Se
usan mucho en espectroscopía de absorción y de
fluorescencia molecular.
La ventaja que tienen es que permiten hacer un
barrido para elegir la longitud de onda.

Fuentes de líneas. Emiten un número limitado de

bandas de radiación abarcando un intervalo muy
reducido de longitudes de onda (casi
monocromática). Son mas específicas, y se usan
ampliamente en espectroscopía de absorción
atómica.
Fuentes usadas en la absorción de
radiación molecular:

Región Ultravioleta: Lámpara de deuterio o de

hidrógeno (fuentes continuas)

Región visible: Lámpara de filamento de

wolframio se utiliza universalmente. También se
utiliza la lámpara de Tungsteno (fuente
continua)
 SELECTORES DE LONGITUD DE ONDA
Existen dos clases: filtros y monocromadores.

Filtros de interferencia. Se fundamentan en las

interferencias ópticas para producir bandas estrechas de
radiación. Sufre procesos de reflexiones y trasmisiones.

Filtros de absorción. Más sencillos y más baratos.

Funcionan absorbiendo ciertas zonas del espectro.
Consisten en una disolución o filtro coloreado.

Monocromadores. Se puede ir variando la longitud de

onda para hacer barridos espectrales, lo que no se puede
hacer con los filtros. Generalmente se ubica entre la
fuente y la muestra o bien entre la muestra y el detector.
 SELECTORES DE LONGITUD DE ONDA

Para la mayoría de análisis espectroscópicos, se necesita

una radiación constituida por un grupo limitado, estrecho y
continuo de longitudes de onda denominado banda.
Un ancho de banda estrecho aumenta la sensibilidad de
las medidas de absorbancia y puede hacer más selectivos
los métodos de absorción.
La señal de salida de un selector de longitud de onda
correspondería, idealmente, a una radiación de una única
longitud de onda o frecuencia.
Realmente, lo que se obtiene es una distribución de
longitudes de onda o banda.
Señal de salida de un selector de longitud de
onda
Anchuras de banda efectiva para dos tipos de
filtros
Las características de funcionamiento de los filtros de
absorción son significativamente inferiores a las de los
filtros de interferencia.

No solo son mayores las anchuras de banda de los

filtros de absorción, sino que para anchuras de banda
estrechas, la fracción de luz transmitida también es
menor.

En los monocromadores es posible hacer barridos

espectrales (variación en forma continua y en un amplio
intervalo de la longitud de onda de radiación). Utilizan
rendijas, lentes, espejos, ventanas y redes o prismas.
 Componentes de un monocromador

1) Rendija de entrada que proporciona una imagen óptica

rectangular.

2) Lente colimadora o espejo que produce un haz paralelo de

radiación.

3) Prisma o red que dispersa la radiación en sus longitudes de

onda individuales.

4) Elemento focalizador que forma de nuevo la imagen de la

rendija de entrada y la enfoca en una superficie plana
denominada plano focal, y

5) Rendija de salida en el plano focal que aisla la banda espectral

deseada.
Monocromador de Prisma de Bunsen
MONOCROMADOR DE REJILLA
Monocromador de red de Czerney-Turner
 RECIPIENTE PARA LA MUESTRA
El material del recipiente ha de ser transparente a
la radiación que se hace incidir, dejándola pasar.

Rango de
Material Región del espectro
radiación
Por debajo de 350
Cuarzo o sílice fundida UV nm

Cuarzo o sílice fundida Vis e IF Hasta aprox. 3 m

Vidrio silicatado Vis e IF cercano 350-2000 nm

Plástico Vis 380-780 nm

Las mejores celdas tienen ventanas perfectamente perpendiculares a

la dirección del haz para minimizar las pérdidas por reflexión.
La longitud de las celdas más común para los estudios en UV-Vis es
de 1 cm.
Tipos generales de detectores de radiación

Existen dos tipos generales de detectores de radiación:

Detectores de fotones (o detectores fotoeléctricos o

cuánticos)

Detectores térmicos
 Detectores de fotones

Dentro de los detectores de fotones más importantes

usados en la absorción de UV-Vis se tienen:

Fototubos

Tubos fotomultiplicadores

Células fotovoltaicas

Detector de fotoconductividad

Fotodiodos
 FOTOTUBO

Son los detectores más utilizados. Constan de un cátodo

semicilíndrico y un ánodo de filamento. Se encuentran
dentro de un tubo transparente herméticamente cerrado.

Sobre la superficie del cátodo se encuentra depositada

una sustancia que es fotoemisiva como puede ser un
metal alcalino o un óxido de metal alcalino.

Esta sustancia fotoemisiva emite electrones cuando se

irradia. Si se aplica un potencial entre los dos electrodos,
los fotoelectrones emitidos se encaminarán hacia el
ánodo produciendo una corriente eléctrica que puede ser
fácilmente medida y amplificada.
ESQUEMA DE UN FOTOTUBO

FOTONES
e-
Fototubo y circuito auxiliar. La fotocorriente inducida por la
radiación origina una caída de potencial a través de R, que se
amplifica y envía a un medidor o registrador.
ESQUEMA DE UNA CELDA FOTOMULTIPLICADORA
ESPECTROFOTÓMETRO DE UN SOLO HAZ
ESPECTROFOTÓMETRO DE DOBLE HAZ
a). Espectrofotómetro de haz simple

b), Espectrofotómetro de doble haz