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    Laboratorio Carbohidratos y Glucidos Procedimiento

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    Marielit Sharid Arredondo Quiroz
    Este documento describe protocolos para realizar pruebas de carbohidratos, incluidas las pruebas de Molish, Fehling, hidrólisis de sacarosa y almidón. La prueba de Molish identifica carbohidratos solubles mediante la formación de un anillo púrpura. La prueba de Fehling determina el poder reductor mediante la formación de un precipitado rojizo al calentar. La hidrólisis de sacarosa y almidón con ácido convierte estos carbohidratos en glucosa, detectable por la prueba de

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    Este documento describe protocolos para realizar pruebas de carbohidratos, incluidas las pruebas de Molish, Fehling, hidrólisis de sacarosa y almidón. La prueba de Molish identifica carbohidratos solubles mediante la formación de un anillo púrpura. La prueba de Fehling determina el poder reductor mediante la formación de un precipitado rojizo al calentar. La hidrólisis de sacarosa y almidón con ácido convierte estos carbohidratos en glucosa, detectable por la prueba de

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    Laboratorio Carbohidratos y glucidos procedimiento

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    Carbohidratos

    PARTE EXPERIMENTAL

    Laboratorio de Química Orgánica


    Universidad Nacional Agraria La Molina
    Ensayo de Molish: Reconocimiento de Glúcidos

     Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de glucosa al 2% (o cualquier


    otro glúcido) y añada 2 gotas de solución de α-naftol. Agregar
    cuidadosamente 1 mL de H2SO4 concentrado de tal manera que
    resbale lentamente por la pared interna del tubo de ensayo
    (adición “en zona”). La formación de un anillo de color púrpura
    en la interfase indica reacción positiva.
     Repita el procedimiento anterior con la sacarosa, solución de
    almidón y muestra problema. Este ensayo es positivo con
    todos los carbohidratos solubles.
    Ensayo de Fehling: Determinación del Poder
    Reductor

     Muestras: Soluciones acuosas al 2 % de :


    glucosa, fructosa, sacarosa y almidón.
     En cada uno de los cinco tubos de ensayo
    mezcle 1 mL de solución de Fehling A con 1 mL
    de solución de Fehling B. Adicione 1 mL de
    solución de los azúcares indicados y la muestra
    problema. Agite para homogenizar. Introduzca
    los tubos en un baño previamente calentado y
    continue el calentamiento por 5 minutos.
    Observe que si hay cambio de color y formación
    de precipitado rojizo.
    Hidrólisis de Sacarosa

    Colocar en 2 tubos de ensayo 2 mL de sacarosa al


    2%. A uno de ellos agregar 3 gotas de HCl
    concentrado y caliente ambos tubos en baño maría
    por 5 minutos. Enfríe y agregue al tubo con ácido 3
    gotas de una solución saturada de NaOH hasta
    neutralizar.
    Realizar la prueba de Fehling en los 2 tubos de
    ensayo. Anote y explique el resultado.
    Hidrólisis de Almidón

     Agite 1 g de almidón en unos 10 mL de agua fría y vierta


    esta suspensión lechosa en 150 mL de agua a ebullición.
    Se formará una solución coloidal. (almidón preparado por
    el técnico de laboratorio).
     Retire 1 mL de esta solución de almidón, enfríela y
    adicione 2 gotas de Lugol, observar la coloración
    intensamente azul oscuro, característico del almidón con
    este reactivo (guarde el tubo en su gradilla).
    Hidrólisis del almidón

     Al resto de la solución de almidón (10 mL), se


    adiciona 3 mL de ácido clorhídrico concentrado y
    manténgala a ebullición con llama baja. Cada 5
    minutos tome 2 muestras de (1 mL cada una) de la
    solución en tubos de prueba: Con uno de ellos realice
    el ensayo de Fehling y al otro tubo enfriarlo y
    agregarle 1 gota de Lugol. Coloque los 2 tubos en su
    gradilla, observe y anote la coloración con Lugol y si
    hay precipitado rojo en el ensayo de Fehling.

    Estos ensayos deben realizarse hasta que las pruebas con el Lugol y el ensayo de Fehling nos
    indiquen que todo el almidón se ha transformado en glucosa.

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