Sesion 07 Calibracion Con Adición de Patron

SESIÓN 07
Curva de calibración con adición

de estándar
Dra. Cecilia M. Mejía Dominguez
AGENDA
1. Exposición sobre el tema

2. Resolución de Ejercicios sobre
calibración con adición estándar
internos.
3. Preguntas
4. Práctica:
5. Resumen
6. Evaluación
7. Tarea
CAPACIDAD DE LA UNIDAD 2
SESIÓN 07
Ante la importancia de validar un
TEMA:
método instrumental, realiza la
Calibración de los
calibración de los métodos analíticos,
métodos
en base a la metodología establecida
instrumentales con
por la AOAC y la norma ISO 17025.
adición destándar
INDICADOR DE LOGRO
Elabora la curva de calibración de
los métodos instrumentales
mediante adición estándar.
Calibración de los métodos analíticos
Los métodos de calibración se pueden dividir

en tres tipos principales:
1) Los que 2) Los que 3) Los que

utilizan utilizan utilizan
estándar adición de estándares
externo estándar internos
CALIBRACIÓN POR ADICIÓN DE ESTÁNDAR
Consiste en añadir sobre la muestra problema cantidades

crecientes conocidas de analito. De esta manera, todas las
medidas se realizan sobre la misma matriz. Al representar
la señal experimental frente a la concentración de analito
añadida resulta una recta a partir de cuya pendiente y
ordenada en el origen se obtiene la concentración de la
muestra problema
Ventajas: Inconvenientes:
Se logra contrarrestar Es un proceso muy laborioso. Se
el efecto matriz necesita de un material diferente
para cada adición de patrón, y se
tiene que hacer una o diversas
adiciones a cada muestra .
SE UTILIZA CUANDO
Con el fin de minimizar efectos de
LAS MUESTRAS
TIENEN MATRICES matriz se aplica el método de
DIFICILES adiciones estándar.
Figura 1 : Esquema del procedimiento de calibración con adición

de estándar
MÉTODO MUY LABORIOSO,

YA QUE HAY QUE REALIZAR
UNA PREPARACIÓN POR
MUESTRA.
RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS
1) Se desea determinar la concentración de cafeína en muestra

de café, para lo cual se pipetea 5 ml de la solución problema en
varios matraces aforado de 50 ml. A cada uno se le agregaron
valores diferentes de una solución patrón de cafeína que s e
preparó de la manera siguiente: 250 mg cafeína, de 99% de
pureza y humedad 2% en un volumen de 200 ml. y de esta
solución patrón se prepararon una solución estándar en
volumen de 50 ml tomando, 0,2,4,6,8,10m y 12 ml (TABLA 1)
TABLA 1
Muestra V(ml) V(ml)
muestra Patrón Absorbancia
Blanco
1 5 0 0.0194
2 5 2 0.1153
3 5 4 0.2174
4 5 6 0.3114
5 5 8 0.4315
6 5 10 0.5153
7 5 12 0.6062
Muestra V(ml) V(ml) Cc = ? mg/ml Absorbancia
muestra Patrón (Solución
estándar)
Blanco
1 5 0 0.0194
2 5 2 0.0485 0.1153
3 5 4 0.2174
4 5 6 0.3114
5 5 8 0.4315
6 5 10 0.5153
7 5 12 0.6062
C (mg/l) = 250 mg CAFEINA x 1 x 99 x 98
0.2 L 100 100
C = 1212.75 mg/L
C (mg/ml) = 250 mg Cafeina x 1 x 99 x 98

200 ml 100 100
C= 1,213 mg/ml
La cc de la Solucion madre es 1,213 mg/ml

V1 x C1 = V2 x C2
2 ml x 1,213 mg/ml = C2
50 ml
C2= 0.04 mg/ml
1,213 mg/ml
A CADA FIOLA
1 SE LE AÑADE
5 ML DE
MUESTRA +
ML DE
SOLUCION
ESTANDAR Y
SE ENRASA A
50 ML
Ver Excel – Práctica 7
2) Se quiere determinar el contenido de Al en una muestra
de agua. Para ello se mide la fluorescencia del complejo
formado entre el Al y el rojo de alizarina R. A cuatro
alícuotas de 10,0 mL de una muestra de agua se
adicionaron 0,00, 1,00, 2,00 y 3,00 mL de una disolución
estándar de Al(NO3)3 que contenía 10,0 ppb (ng/mL) de Al
tal y como se muestra en el cuadro. Se adicionaron a cada
una 5,00 mL exactos de una disolución que contenía un
exceso del rojo de alizarina R, formándose un complejo
fuertemente fluorescente, y las disoluciones se diluyeron a
50,0 mL. La intensidad de fluorescencia de las cuatro
disoluciones y de un blanco fueron las siguientes: (Tabla 1)
mL de mL Al estándar Intensidad de
muestra (10,0 ppb de Al) fluorescencia
Blanco (0,00) 0,00 5,0
10,00 0,00 28,3
10,00 1,00 41,3
10,00 2,00 55,3
10,00 3,00 68,2
a) Representar los datos y obtener la ecuación de la recta por mínimos cuadrados

b) Calcular las ppb de Al en la muestra.
Cc= Intens. Fluoresc.
ng/ml) corregida
BLANCO 1
0 ml CÁLCULOS:
0 ml C1 x V1 = C2 x V2
2
C2= C1 x V1
0 ml 10 ml
V2
3 10 ml 3 C2= 10 ppb x 1 ml
1.0 ml
50 ml
10 ml C2= 0.2 ppb
Solución Muestra
estándar 4
10 ppb 2.0 ml
10 ml
5
3.0 ml
Volumen = 50 ml
Una vez hallada las concentraciones de los estándares colocamos en la tabla
Ahora corregimos la Intensidad de fluorescencia , debido a que el blanco emitió
una respuesta (Señal)
Inte. de fluoresc. corregida = Int. de fluorescencia emitida - fluorescencia del blanco

1. =5–5
= 0.0
2. = 28,3 – 5
= 23.3
3. = 41.3 - 5
= 36.3
Ahora graficamos la curva de calibración en excel
Calcularemos la cc de Al en la muestra a partir
de la ecuación de la curva
Y = 66.85 X + 23.22 La señal es =0
X = (Y-23.22)/66.85
Es valor absoluto de X
Luego calcular la concentración real de Al en

la muestra, considerando la dilución y la
alícuota
Cc Al = cc curva ng/ ml * V final

Alicuota muestra
RESUMEN
CALIBRACIÓN CON ESTÁNDAR EXTERNO
Este método de
análisis se aplica en
la determinación de
un analito, en el cual
los componentes de
la matriz de la
muestra como
también los
reactivos usados en
la preparación de la
misma no
interfieren en el
análisis, es decir no ESQUEMA DEL PROCEDIMEINTO DE UNA CALIBRACION CON
se tiene un efecto ESTÁNDAR EXTERNO
de la matriz en la
señal medida.
CALIBRACIÓN CON ESTÁNDAR INTERNO
Un estándar interno
es una sustancia
que se añade a
todas las muestras
en una cantidad
constante.
La calibración
supone representar
la razón entre la
señal del analito y la
del estándar interno
como una función Figura : Esquema del procedimiento de calibración con
de la concentración patrón interno
del analito.
SE UTILIZA CUANDO
Con el fin de minimizar efectos de
LAS MUESTRAS
TIENEN MATRICES matriz se aplica el método de
DIFICILES adiciones estándar.
Figura 1 : Esquema del procedimiento de calibración con adición

de estándar
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
Douglas A. Skoog, Stanley R. Crouch, F. J Holler (2008). Principios de

Análisis Instrumental. 6° Edición. Editor Cengage Learning
https://www.academia.edu/37326567/Principios_de_an%C3%A1lisis_instrum
ental_6ta_Edici%C3%B3n_Douglas_A._Skoog_LIBROSVIRTUAL
Fundación Cetabol
. Servicio de Laboratorio: https://www.cetabol.bo/sitio/index.php/laboratori
o/nutricion-animal/analisis-de-sales-minerales
Espejo, M. (2016). Importancia de la calibración en los Laboratorios de
Química Analítica. Facultad de Farmacia - Universidad de Sevilla
https://idus.us.es/bitstream/handle/11441/54518/IMPORTANCIA%20DE%20LA.
pdf?sequence=1&isAllowed=y
Zumbado, F. H (2004): Análisis Químico de los Alimentos – Métodos
Clásicos.
https://juliocruz82.files.wordpress.com/2011/08/analisis-quimico-de-los-alim
entos-mc3a9todos-clc3a1sicos.pdf
EVALUACIÓN
EVALUACIÓN ORAL A TRAVES DEL CHAT DEL

GOOGLE MEET
REFERENCIAS
Douglas A. Skoog, Stanley R. Crouch, F. J Holler (2008). Principios de

Análisis Instrumental. 6° Edición. Editor Cengage Learning
https://www.academia.edu/37326567/Principios_de_an%C3%A1lisis_instr
umental_6ta_Edici%C3%B3n_Douglas_A._Skoog_LIBROSVIRTUAL
Fundación Cetabol
. Servicio de Laboratorio: https://www.cetabol.bo/sitio/index.php/labora
torio/nutricion-animal/analisis-de-sales-minerales
Espejo, M. (2016). Importancia de la calibración en los Laboratorios de
Química Analítica. Facultad de Farmacia - Universidad de Sevilla
https://idus.us.es/bitstream/handle/11441/54518/IMPORTANCIA%20DE%
20LA.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Zumbado, F. H (2004): Análisis Químico de los Alimentos – Métodos
Clásicos.
https://juliocruz82.files.wordpress.com/2011/08/analisis-quimico-de-los-al
imentos-mc3a9todos-clc3a1sicos.pdf
DESARROLLO DE CÁLCULOS NUMÉRICOS PARA
ELABORAR CURVAS DE CALIBRACIÓN POR ADICIÓN
DE ESTÁNDARES
https://www.youtube.com/watch?v=aJMWkRQ8LZs
Métodos de cuantificación Adición estánda
https://www.youtube.com/watch?v=PqRPEZZqPB4
CURVAS DE CALIBRACIÓN POR ADICION

DE ESTANDAR

Sesion 07 Calibracion Con Adición de Patron

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Sesion 07 Calibracion Con Adición de Patron

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Sesion 07 Calibracion Con Adición de Patron

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

SESIÓN 07

Curva de calibración con adición

1. Exposición sobre el tema

Los métodos de calibración se pueden dividir

1) Los que 2) Los que 3) Los que

Consiste en añadir sobre la muestra problema cantidades

Figura 1 : Esquema del procedimiento de calibración con adición

MÉTODO MUY LABORIOSO,

1) Se desea determinar la concentración de cafeína en muestra

C (mg/ml) = 250 mg Cafeina x 1 x 99 x 98

La cc de la Solucion madre es 1,213 mg/ml

10,00 0,00 28,3

10,00 1,00 41,3

10,00 2,00 55,3

10,00 3,00 68,2

a) Representar los datos y obtener la ecuación de la recta por mínimos cuadrados

Inte. de fluoresc. corregida = Int. de fluorescencia emitida - fluorescencia del blanco

Y = 66.85 X + 23.22 La señal es =0

Luego calcular la concentración real de Al en

Cc Al = cc curva ng/ ml * V final

Figura 1 : Esquema del procedimiento de calibración con adición

Douglas A. Skoog, Stanley R. Crouch, F. J Holler (2008). Principios de

EVALUACIÓN ORAL A TRAVES DEL CHAT DEL

Douglas A. Skoog, Stanley R. Crouch, F. J Holler (2008). Principios de

CURVAS DE CALIBRACIÓN POR ADICION

También podría gustarte