La Chromatographie

SPECIALITE TS ( CHIMIE) : FICHE COURS 2 1/3 IDENTIFIER
Ce qu'il faut retenir

Un procédé d’identification: la chromatographie
1. Qu’est-ce que la chromatographie ?

La chromatographie est un procédé de séparation et d’identification d’espèces chimiques présentes dans un
mélange par différence d’affinité à l’égard de deux phases:
• l’une fixe appelée phase stationnaire,
• l’autre mobile appelée phase mobile ou éluant.
Pourquoi y a-t-il séparation ?
Au cours d’une chromatographie, les espèces chimiques d’un échantillon de mélange sont à la fois :
• retenues par la phase stationnaire,
• et entraînées par la phase mobile.
Chacune des espèces chimiques interagissant différemment avec la phase fixe et la phase mobile, leurs vitesses de
migration sont différentes : il en résulte une séparation des espèces chimiques d’un mélange.
Comment identifier une espèce chimique dans un mélange ?
Pour une phase fixe et une phase mobile donnée, deux espèces chimiques identiques ont la même vitesse de
migration car elles interagissent de la même façon avec la phase fixe et la phase mobile :elles ont alors à tout
instant le même niveau de migration.
D’où la méthode d’indentification
On identifie une espèce chimique dans un mélange par comparaison de son niveau de migration avec celui
d’une espèce chimique connue ou espèce de référence : en cas de niveaux de migration identiques, le mélange
contient l’espèce chimique de référence en question.
2. Exemples de chromatographies
• Chromatographie sur couche mince ( C.C.M) : la phase fixe est solide ( gel de silice ou alumine ) , l’éluant est
liquide.
• Chromatographie sur papier: la phase fixe est constituée par du papier poreux ( papier filtre par exemple ) et
l’éluant est liquide.
Pour les deux types précédents de chromatographie, le phénomène responsable de la migration de l’éluant est le
phénomène de capillarité.
• Chromatographie sur colonne: la phase fixe est un solide disposé dans une colonne ( par exemple du gel de
silice ) et l’éluant migre par gravité ( vers le bas ).
3. Aspect microscopique de la chromatographie

La chromatographie fait intervenir la solubilité d’espèces chimiques souvent organiques ( soluté ) dans un solvant
( phase mobile ou phase fixe ).
La solubilité d’un soluté dans un solvant est liée aux structures des entités chimiques qui les constituent. Ces
entités chimiques sont de deux types :
• des ions ;
• des molécules qui peuvent être polaires ( exemple : eau, éthanol ) ou apolaires ( exemple cyclohexane ).
La séparation des constituants d’un mélange par chromatographie dépendra donc des divers types d’interaction.
Le tableau ci-après précise qualitativement la force des interactions entre soluté et solvant suivant leur nature.
Solvant polaire apolaire
Soluté
ionique forte faible
polaire forte faible
apolaire faible forte
Exemple d’application : dans les cas ci-après dire si l’espèce chimique déposée sur une couche mince migre peu ou
beaucoup.
Eluant polaire polaire apolaire
Phase fixe apolaire apolaire polaire
Espèce chimique déposée polaire apolaire ionique
migration
4. Les étapes du protocole d’une chromatographie

♦ Première étape :
Dépôt d’échantillons ( espèces chimiques pures ou mélange d’espèces chimiques en solution dans un solvant
approprié ) sur une ligne de dépôts tracée la phase fixe qui peut être du papier absorbant ( chromatographie sur
papier) ou une couche mince de gel de silice ou d’alumine ( chromatographie sur couche mince ou C.C.M ).
♦ Deuxième étape
Immersion du support ( ou plaque de chromatographie ) dans une cuve à élution., contenant un fond d’éluant,
fermée par un couvercle de façon à ce que l’atmosphère de la cuve soit saturée en vapeurs d’éluant : les dépôts
d’échantillons doivent être au-deusus du niveau de l’éluant
♦ Troisième étape
L’élution, c’est à dire la migration de l’éluant sur le support, entraînant les espèces chimiques présentes dans les
dépôts et provoquant une séparation de ces espèces; l’élution est arrêtée lorsque le front de l’éluant est non loin
du bord supérieur de la plaque; on le repère alors d’un trait de crayon.
♦ Quatrième étape
Séchage qui consiste à provoquer une évaporation rapide de l’éluant.
♦ Cinquième étape
Cette étape est réalisée seulement dans le cas où les échantillons sont incolores ; c’est la révélation
Elle consiste à faire apparaître les positions des taches sur le support en utilisant diverses techniques, telles que
l’utilisation d’une lampe à U.V, l’immersion de la plaque dans une atmosphère de vapeurs de diiode, ou dans une
solution de permanganate de potassium, ….
Dans le cas d’une chromatographie de colorants, l’étape de révélation est inutile, les positions finales des taches étant
visibles.
couvercle
front
de l’éluant
phase fixe
cuve
migration
ligne
de dépôts 1 2 3 1 2 3
1 2 3
éluant
dépôts d’échantillons immersion dans la cuve séchage et révélation
et élution
5. Interprétation d’un chromatogramme

Exemple
Sur la figure ci-après est schématisé le chromatogramme obtenu en déposant deux échantillons de corps purs
connus 1 et 2, qui sont les espèces chimiques de référence et un échantillon inconnu 3.
Interpréter le chromatogramme.
L’interprétation du chromatogramme consiste à déterminer :

¾ si l’échantillon 3 est pur ou bien si c’est un mélange ;
¾ à identifier dans le cas d’un mélange, ses constituants.
Raisonnement
Une lecture verticale :
♦ confirme la pureté des échantillons de référence 1 et 2 ( présence d’une seule tache sur les
lignes verticales de ces échantillons);
♦ nous informe que 3 est un mélange d’au moins deux espèces chimiques ( une troisième espèce
chimique pourrait éventuellement être présente mais non révélée ).
Une lecture horizontale :
♦ montre qu’une tache de la ligne verticale 3 est au même niveau que la tache unique de
l’échantillon 1 : on identifie ainsi la présence du corps pur 1 dans l’échantillon 3.
♦ montre qu’une tache de la ligne verticale 3 est au même niveau que la tache unique de
l’échantillon 2 : on identifie ainsi la présence du corps pur 2 dans l’échantillon 3. 1 2 3
En conclusion :
L’échantillon 3 contient au moins les corps purs 1 et 2.
6. Notion de rapport frontal :

Le niveau de migration d’une espèce chimique A mise en
jeu dans un chromatogramme, est défini par son rapport front
frontal, noté Rf (A) défini par la relation : de l’éluant
h( A ) A
R ( A) =
f
H H
h(A)
où :
♦ h(A) est la distance entre la ligne de dépôt et le
milieu de la tache;
♦ H est la distance entre la ligne de dépôt et le front ligne de dépôt
de l’éluant.
Un rapport frontal n’a pas d’unité; il est, par définition, inférieur ou égal à 1.
La valeur de Rf n’est pas caractéristique de l’espèce chimique correspondante : elle dépend,entre autres, de la
nature de l’éluant, de la phase fixe, de la hauteur H correspondant au front de l’éluant.
Rf ne permet d’identifier une espèce chimique que pour une chromatographie donnée.

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3. Aspect microscopique de la chromatographie

4. Les étapes du protocole d’une chromatographie

5. Interprétation d’un chromatogramme

L’interprétation du chromatogramme consiste à déterminer :

6. Notion de rapport frontal :

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