Fiche TD 3 Chroma

Université des Sciences et de la Technologie d’Oran «
MB »
Faculté de Chimie Module : MPCA
L3 GP 2015-2016
Fiche TD 3
Exercice 1:
Une chromatographie a donné le résultat suivant :
1- Pourquoi peut-on affirmer que le produit N est un mélange de
plusieurs composants ?
2- Combien de constituants composent ce produit N ?
3- Quels sont, parmi les constituants V et Vi, ceux qui entrent dans
la composition du produit N ? Justifiez votre réponse.
Exercice 2 :
On réalise sur une plaque CCM de 4 cm sur 9 cm le
chromatogramme de trois solutions. Sur la ligne de dépôt, située à 1 cm du bas on pose une micro-
goutte du colorant (E122), une autre du colorant (E124) et la dernière d’un sirop de fraise à base de ces
deux colorants. On arrête l’élution lorsque le front de l’éluant arrive à 1 cm du bord supérieur de la
phase fixe. Avec l’éluant donné, on détermine les rapports frontaux de ces deux colorants :
Rf(E124) = 0,57 ; Rf(E122) = 0,70.
1- Calculer les hauteurs atteintes par les taches.
2- Dessiner le chromatogramme obtenu en grandeur nature.
3- En changeant la nature d’éluant les valeurs R f ont légèrement augmentées ; de quoi est due cette
variation ?
Exercice 3 :
On a réalisé une analyse qualitative d’un médicament par
chromatographie sur couche mince.
Le chromatogramme obtenu est représenté dans le schéma
suivant :
1. Que peut-on dire de la composition de ce médicament ?
2. Déterminer alors le rapport frontal des constituants mis en
évidence dans ce médicament.
3. Un autre médicament contient de l’acide salicylique, du
paracétamol et de la caféine.
Pour un déplacement d’éluant, depuis la ligne de dépôt, égal à 5 cm, représenter le chromatogramme
obtenu avec le même éluant et une plaque identique.
Exercice 4 :
On détermine les temps de rétention (tr) au cours d'une chromatographie sur Sephadex, des protéines
suivantes dont on connaît la masse moléculaire (MM) (Le débit de la colonne est de 5 ml / min) :
MM tr (min)
Aldolase 145000 10,4
Lactate déshydrogénase 135000 11,4
Phosphatase alcaline 80000 18,4
Ovalbumine 45000 26,2
1
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L3 GP 2015-2016
Lactoglobuline 37100 28,6
1 - Calculer les volumes d'élution (Ve) correspondants. Porter le log de MM en fonction de Ve - Que
remarquez-vous ?
2 - Pour la glucokinase, tr = 21 min. Déterminer sa masse moléculaire à l'aide du graphique précédent.
Exercice 5 :
Le Dosage de la caféine contenue dans différents échantillons de

Coca-Cola, par CPG, a donné des chromatogrammes avec des
airs de pics proportionnels à la concentration.
Dosage par courbe d’étalonnage
A l’aide d’une solution de caféine de référence : 1,021 g.l -1 dans
l’éluant, sont préparées une série de cinq solutions diluées dans cinq fioles jaugées de
20,0 mL. Ces solutions sont injectées dans la boucle avec un débit de 0,4 ml/min.
Numéro de la fiole 1 2 3 4 5
C (caféine) en mg/l 0,510 1,021 1,531 2,042 2,552
Air du pic de la caféine 0,124 0,232 0,331 0,447 0,548
1. Tracer la courbe d’étalonnage de la caféine Air pic (caféine) = f(C (caféine)).

2. Déterminer avec précision la concentration de la caféine dans le coca colla si l’aire du
pic de la caféine extraite est de 0,4963.
3. Si le volume de caféine prélevé de la solution de référence est 30 µl, donner par calcul
la concentration après dilution dans une fiole de 20 ml.
Exercice pour étudiant
a- Pour un soluté donné, montrer que le temps d’analyse (t R) dépend de la longueur de la colonne
L, de la vitesse linéaire µ et le rapport des deux volumes Vs et Vm.
b- L’analyse d’un produit organique par chromathographie en phase gazeuse (CPG) a donné des
chromatogrammes avec des airs de pics proportionnels à la concentration. Les résultats sont
présentés sur le tableau suivant :
C en mg/l 0 1,00 2,00 3,00 4,00 Inconnue
Air du pic 0 0,183 0,364 0,546 0,727 0,269
- Tracer la courbe d’étalonnage Air du pic = f (C).

- Donner la concentration inconnue.
- Comment peut-on améliorer la qualité d’un chromatogramme (CPG).
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Lactoglobuline 37100 28,6

2 - Pour la glucokinase, tr = 21 min. Déterminer sa masse moléculaire à l'aide du graphique précédent.

Le Dosage de la caféine contenue dans différents échantillons de

C (caféine) en mg/l 0,510 1,021 1,531 2,042 2,552

Air du pic de la caféine 0,124 0,232 0,331 0,447 0,548

1. Tracer la courbe d’étalonnage de la caféine Air pic (caféine) = f(C (caféine)).

Exercice pour étudiant

C en mg/l 0 1,00 2,00 3,00 4,00 Inconnue

Air du pic 0 0,183 0,364 0,546 0,727 0,269

- Tracer la courbe d’étalonnage Air du pic = f (C).

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