Manuel Prelevement

SYSTEME QUALITE « IPM » Code : CBM-MAP-001
Version n° : 01
CBM
MANUEL DE PRELEVEMENT Date d’application : 13-03-2018
INSTITUT PASTEUR DU MAROC

CENTRE DE BIOLOGIE MEDICALE
Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01

HISTORIQUE DES MODIFICATIONS
Version Nature de la modification Pages Date
1 Edition initiale ----- 2018
APPROBATION DU DOCUMENT
Nom £ Prénom Fonction / Entité Date Visa
Responsable du laboratoire
Original
Dr. M. EL AZHARI de Microbiologie 04-01-2018
signé
Médicale
Rédigé par : Responsable du laboratoire Original

Dr. H. MOHAMMADI 04-01-2018
de Biochimie signé
Service Qualité, Hygiène Original

Mme O. OUARDY 04-01-2018
et Sécurité (QHS) signé
Responsable du laboratoire Original

Dr. S. NASSEREDDINE 12-02-2018
de Cytogénétique signé

Dr. S. BENNANI 12-02-2018
d’Histocompatibilité signé
Responsable du Centre de Original
Dr. W. OUDAINA 12-02-2018
Biologie de Tanger signé
Vérifié par :
Original
Dr. F. BENYAHYA Service QHS, Tanger 12-02-2018
signé
Dr. J. NOURLIL 12-02-2018
de Virologie Médicale signé
Service de Virologie Original

Mr. A. FAOUZI 12-02-2018
Médicale signé
Responsable du service
Original
Dr. A. SABRI Qualité, Hygiène 05-03-2018
signé
et Sécurité
Responsable du
Original
Validé par : Dr. S. BENJELLOUN Département de Biologie 05-03-2018
signé
Médicale
Responsable de la salle
Original
Dr. N. DERSI d’accueil et 05-03-2018
signé
prélèvements
Directrice de l’Institut Original
Approuvé par : Pr. N. ELMDAGHRI 12-03-2018
Pasteur du Maroc signé

SOMMAIRE
I. Introduction…………………………………….………………….…………... 1
II. Informations et contacts utiles…………………...….………..……………. 3
III. Matériel et exigences………………………………………………………… 5

1. Matériel de prélèvement……………………………….……………………. 5
2. Exigences relatives aux demandes d’examen………………………..……… 9
- Feuille de prescription (ordonnance)..………………………………..……. 9
- Fiche de consentement …………………………………………….……… 9
- Feuille de prélèvement, dispatching, facture et reçu pour retrait des
résultats ……………………………………………………………….…….. 10
- Etiquetage des spécimens ……………………………………………...….. 10
IV. Etapes du prélèvement sanguin……………………………….…..……….. 11

1. Préparation pour le prélèvement………………………………….…………. 11
2. Déroulement du prélèvement……………………………………………….. 12
- Port de gant et mise en place du garrot …………………………………… 12
- Choix du site et du matériel de prélèvement …………………………..….. 12
- Désinfection du site de ponction, décapuchonnage de l’aiguille …………. 14
- Ordre des tubes ……………………………………………………………. 15
- Réalisation de la ponction veineuse, introduction des tubes ……………… 15
- Retrait du garrot, retrait de l’aiguille et compression avec un coton propre,
élimination de matériel utilisé, pose d’un pansement……………………..… 16
3. Sous-traitance des échantillons……………………………………………… 16
V. Préconisations des prélèvements de spécimens……………..………..…. 16

1. Préconisations pour les prélèvements de sang………………..….….………. 16
- Le jeûne ………………………….…………………………………..……. 17
- L’heure du prélèvement (rythme circadien) ……………………...…..…… 17
- Prélèvement sanguin pour le dosage de la Cryoglobuline………………… 18
2. Préconisations pour le recueil d’urine et de sperme………………...….…… 18
3. Préconisations pour les examens d’histocompatibilité……………………… 19
4. Préconisations pour le diagnostic moléculaire des Virus respiratoires et de
la Rage …………….……………………………………………..…………. 19
5. Préconisations pour les examens de Cytogénétique………………….…… 20
6. Préconisations pour les prélèvements microbiologiques (Bactériologie,
Mycobactéries, Parasitologie et Mycologie)…………………………..……. 21
- Recommandations générales …………………………………….………... 21
- Recommandations pour le test Quantiféron®-TB ………………….…….. 22
7. Préconisations pour les examens d’Anatomopathologie……………………. 23
- Examens histopathologiques ………………………………..……..…….. 23
- Cytologie gynécologique ………………………………..…….………….. 24
- Cytologie non gynécologique ………………… 24
VI Transport des échantillons au laboratoire………………...………...…….. 24

1. Prélèvement urgent ………...……………….……………..…..……….…… 24
2. Prélèvement non urgent …………………………………………………….. 24
3. Tri et répartition des échantillons…………………………………………… 25
4. Température de stockage et transport ………………………………………. 25
5. Délai de transport au laboratoire destinataire……………………………..… 25
6. Prélèvement externe………………..……………………………………….. 26
VII. Critères d’acceptation et de refus des prélèvements au cours de la

phase pré-analytique ………………………………………………… 27
1. Non conformités relatives à l’Accueil…………………………………… 27
2. Non conformités relatives au Tri et Dispatching………………………… 28
3. Non conformités relatives à l’Acheminement…………………………… 29
4. Non conformités relatives à la Qualité de l’échantillon…………………. 30
5. Non conformités relatives à l’Identification des échantillons (Identito-
Vigilance)………………………………………………………………... 31
VIII Transmission des comptes rendus d’examens……………………… 31
1. Délai de rendu des résultats…………………………………..…………….. 32
2. Modalités de transmission et confidentialité…………...…………………… 32
3. Prestations de conseil………………………………………………………... 32
IX Gestion des réclamations et suggestions clients…………..………..…… 32
X Règles d’hygiène et de sécurité……………………….…………………….. 33
1. Elimination des déchets potentiellement contaminés……..………………… 33

2. Conduite à tenir en cas d’accident avec exposition au sang ou à des produits
biologiques……………………………………………………………………… 34
XI Annexes……………………………………………………...……..…………. 35
Annexe N°1 : Exigences en Cytogénétique......………………………………………… 35
Diagnostic anténatal chromosomique : renseignements cliniques………………………. 35
Consentement de la femme enceinte……………………………………………………. 36
Consentement pour la réalisation d’examens de caractéristiques génétiques d’une
personne………………………………………………………………………………… 37
Annexe N°2 : Exigences en Histocompatibilité ……………………………………….. 38
Exigences relatives aux demandes d’examens…………………………………………. 38
Exigences relatives aux échantillons primaires………………………………………… 38
Modalités de Prescriptions d’Examens Complémentaires……………………………… 39
Annexe N°3 : Exigences en Virologie Médicale……………………………………….. 40
Réalisation d’un prélèvement externe naso-pharyngé pour diagnostic moléculaire des
Virus Respiratoires……………………………………………………………………… 41
Fiche Clinique Syndromes Grippaux……………………………………………………. 43
Annexe N°4 : Préconisations des laboratoires de Bactériologie, Parasitologie,
Mycologie et Mycobactériologie………………………………………………………… 44
Annexe N°5 : Préconisations pour les prélèvements anatomopathologiques…………… 53

I. INTRODUCTION
Ce manuel s’inscrit dans la démarche qualité du Centre de Biologie Médicale (CBM)
qui vise la satisfaction de ses patients et clients via :
L’engagement à « Assurer des bonnes pratiques professionnelles, à des examens adaptés à
l’utilisation prévue à satisfaire aux exigences de la norme ISO 15189 et à améliorer en
permanence la qualité des prestations des laboratoires ; satisfaire les clients et les parties
intéressées en réalisant des prestations exclusivement avec les règles de l’art ; satisfaire les
besoins des prescripteurs ; assurer aux clients la confiance dans la fiabilité, la traçabilité et
la rapidité des prestations ; assurer l’impartialité des laboratoires et que la direction et le
personnel sont libres de toutes pressions indues, commerciales, financières et autres,
susceptibles d’avoir une répercussion sur leur jugement technique ; respecter la
confidentialité en protégeant par le secret professionnel toutes les informations relatives aux
clients. » (Extrait de l’engagement de la direction, code IPM-SE-POL-013, date
d’application le 06-03-2017).
L’objectif de ce manuel de prélèvement, qui comporte l’ensemble des analyses réalisables
dans nos laboratoires ou sous traitées, est de fournir le plus simplement et exhaustivement
possible les différentes informations nécessaires à la phase pré-analytique selon les exigences
réglementaires et notamment celles de la norme ISO 15189.
Les conditions de réalisation et de transmission des prélèvements biologiques constituent une
étape importante impliquant une étroite collaboration entre les préleveurs et le laboratoire. Le
respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d’analyses fiables.
Ce manuel s’adresse au personnel du centre d’accueil et prélèvements rattaché au centre de
biologie médicale de l’institut Pasteur du Maroc (IPM) et qui est habilité pour réaliser les
prélèvements. Il s’adresse aussi aux personnes extérieures au laboratoire susceptibles de
réaliser des prélèvements.
Il apporte la preuve que le laboratoire met à disposition aux professionnels de santé toutes les
procédures et instructions liées à la phase pré-analytique. Cependant, il est possible de
contacter les laboratoires pour toutes informations complémentaires. Les laboratoires du CBM
restent attentifs à toutes remarques ou suggestions qui aideraient à l’amélioration de ce
document.
Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 1 sur 56

II. INFORMATIONS ET CONTACTS UTILES
________________________________________________________________
Direction
Professeur Naima Elmdaghri
Directrice de l’Institut Pasteur du Maroc
naima.elmdaghri@pasteur.ma
Secrétariat général
Mohammed Cherqaoui
Secrétaire Général de l’IPM
mohammed.cherqaoui@pasteur.ma
Site de Casablanca (biologie@pasteur.ma) Site de Tanger
Responsable du CBM Responsable

Dr. Soumaya Benjelloun Dr. Othmane Mourtada
soumaya.benjelloun@pasteur.ma othmane.mourtada@pasteur.ma
06 66172664 06 61 71 38 12
Médecin biologiste Pharmacienne biologiste

Dr. Abderrahmane Bellik Dr. Widad Oudaina
abderrahman.bellik@pasteur.ma widad.oudaina@pasteur.ma
06 62 13 37 68 06 68 89 57 20
Responsable du Centre d’Accueil et Cellule Qualité, Hygiène et

de Prélèvements Sécurité
Dr. Noureddine Dersi Dr. Fatiha Benyahya
noureddine.dersi@pasteur.ma fatiha.benyahya@pasteur.ma
06 62 08 43 82
Secrétariat du CBM Secrétariat du site

Mlle Zhor Warid 05 39 93 11 11
zhor.warid@pasteur.ma
05 22 43 44 71/72
Cellule sous-traitance à l’IPM

Mme Saadia Chabbi /
Mme Malika Karrouti
labo@pasteur.ma
05 22 22 78 15
Service Qualité, Hygiène et

Sécurité
Dr. Abdelouhab Sabri
abdelouhab.sabri@pasteur.ma
06 62 04 63 24

________________________________________________________________
 Responsables des laboratoires du Centre de Biologie Médicale
Laboratoire Responsable E-mail Téléphone
Dr. Hakima Benomar
Anatomo-pathologie (Médecin hakima.benomar@pasteur.ma 06 62 33 99 13
Anatomopathologiste)
Cytogénétique et conseil Dr. Sanaa Nassereddine

sanaa.nassereddine@pasteur.ma 06 61 38 84 93
génétique-Hématologie (Médecin Cytogénéticienne)
Dr. Abdellatif Bouayad

Immunologie-Sérologie abdellatif.bouayad@pasteur.ma 06 62 07 50 98
(Médecin Immunologiste)
Dr. Jalal Nourlil

Virologie Médicale jalal.nourlil@pasteur.ma 0661 823754
(Médecin Virologue)
Dr. Mly Driss El Messoudi

Mycobactéries &Tuberculose (Médecin mydriss.elmessaoudi@pasteur.ma 06 62 03 89 73
Mycobactériologiste)
Dr. Sayeh Ezzikouri

HépatitesVirales sayeh.ezzikouri@pasteur.ma 06 66 29 70 98
(PhD)
Dr. Hicham Mohammadi

Biochime-Immunochimie hicham.mohammadi@pasteur.ma 06 64 47 06 18
(PhD)
Hormonologie-Marqueurs Dr. Abdelhakim Ainahi

abdelhakim.ainahi@pasteur.ma 06 67 52 33 11
tumoraux (PhD)
Dr. Abdelouaheb Benani

Biologie Moléculaire abdelouaheb.bennani@pasteur.ma 06 61 29 11 62
(PhD)
Dr. Siham Bennani

Immuno-histocompatibilité siham.bennani@pasteur.ma 06 61 31 50 57
(PhD)
Dr. Mohamed El Azhari

Microbiologie Médicale mohamed.elazhari@pasteur.ma 06 61 67 61 96
(PhD)
Dr. Widad Oudaina

Biologie Médicale (Tanger) widad.oudaina@pasteur.ma 06 68 89 57 20
(Pharmacienne biologiste)
 Les horaires de travail

Les deux centres de prélèvements (Casablanca et Tanger) sont ouverts au public :
Jours Site de Casablanca Site de Tanger

Du lundi au vendredi 7h30 à 16h30 8h30 à 16h30
Fermé samedis, dimanches et jours fériés

 Modalités de diffusion du manuel de prélèvement
Le manuel de prélèvement est consultable en ligne par tout demandeur de prestation et par
tout le personnel de l’IPM à l'adresse suivante : https://www.pasteur.ma
La version papier de ce manuel est consultable à l’accueil et à la demande du demandeur de

prestation.
En cas de nouvelle version de ce manuel, les demandeurs de prestation sont informés des
mises à jour.
 Le catalogue des analyses

Le catalogue des analyses assurées par le CBM présente l’ensemble des analyses réalisées au
sein de ses laboratoires avec le délai de rendu des résultats, la cotation, le type de tube à
utiliser, les consignes de transport ou de prélèvement et les précautions à respecter. La
nouvelle version de ce document sera disponible au niveau de la salle d’accueil des deux sites
et sur le site internet : https://www.pasteur.ma
Ce catalogue donne aussi des instructions pratiques pour:
- Nature du spécimen, volume minimum et délai de rendu des résultats ;
- Instructions pré-analytiques à destination des patients et des médecins ;
- Informations techniques à destination des utilisateurs des prestations du laboratoire.
Les éléments de cette liste sont utilisés comme critères d’acceptation par le personnel du
laboratoire lors du contrôle des prélèvements reçus.
III. MATERIEL ET EXIGENCES

1. Matériel de prélèvement
Le CBM utilise et met à disposition des préleveurs un matériel de prélèvement marqué CE
adapté en fonction du type d’analyse prescrite.
Ci-après quelques modèles du matériel utilisé :

Matériel pour ponctions veineuses
Tube citrate de sodium 9NC. Anticoagulant réversible (chélateur de
Ca++), il entraîne une décalcification du plasma (la recalcification est
effectuée au moment des analyses).
 Ce tube est le seul milieu utilisable pour les bilans d’hémostase

(=coagulation).
Remarque : La quantité de citrate liquide présent dans le tube
Capuchon
entraîne une dilution de l’échantillon au 9/10 qui doit être
BLEU
constante. Pour être conforme, le tube doit être rempli au moins
jusqu’au trait de remplissage minimum, avec un volume d’air
résiduel <ou = à 20% (Recommandations GEHT 2015)
 Ce tube est INADAPTE à la plupart des autre dosages.
Tube sec sans additif ou avec activateur de coagulation. Il permet

l’obtention du sérum après coagulation.
 Ce tube permet la réalisation des quelques analyses de Chimie et

d’Immuno-analyses qui ne sont pas réalisables sur tube héparine.
Exemples : Auto-immunité, Electrophorèse des Protéines,
sérologies...
 Attention : L’Ionogramme ou la Glycémie peuvent être légèrement
Capuchon faussés ou se modifier dans le temps(respect des délais de transport
ROUGE des échantillons).
 Ce tube est interdit pour :

- tout examen d’hémostase (TP, TCA …), parce que tous les
facteurs de la coagulation ont été consommés par la formation du
caillot ;
- la cytologie hématologique (NF).
Tube héparine de lithium : Anticoagulant puissant (anti-thrombine).

Il empêche la transformation du fibrinogène en fibrine.
 Il est essentiel pour l’ionogramme et la réserve alcaline

(bicarbonates) ;
 Il permet également la réalisation de la majorité des analyses de
Capuchon chimie et cytogénétique.
VERT
 Ce tube est interdit pour :
- les Tests de Coagulation (TP, TCA …) ;
- la cytologie hématologique (NF) ;
- l’Electrophorèse des Protéines (présence du fibrinogène).

Tube EDTA K2 = Complexon. Anticoagulant irréversible – K2
(chélateur du Ca++).
 Il permet la meilleure conservation des éléments figurés du sang

(NF, Plaquettes, Réticulocytes) ;
 Il est utilisé également pour :
- HbA1c, Groupe sanguin, Coombs, Groupe HLA et toutes les
Capuchon analyses de biologie moléculaire ;
VIOLET - Amonémie ;
- Immunophénotypage.
Remarque : Sa forme micronisée n’entraîne pas de phénomène de dilution

et donc le niveau de remplissage n’est pas essentiel. Cependant, à respecter
les conditions d’homogénéisation et le taux de remplissage.
CITRATE DE SODIUM 4NC* : anticoagulant réversible (chélateur de

Ca++) (Dilution finale de l’échantillon au 1/4).
 Ce tube est utilisé UNIQUEMENT POUR VS. (Il permet la
Capuchon réalisation de la VS directement sur le tube selon la méthode

NOIR référence de Westergreen).
* Si ce tube n’est pas fourni, prélever sur tube EDTA.

Autres matériels pour ponctions veineuses
Aiguilles Epicrâniennes Corps Garrot
Matériel pour prélèvements microbiologiques et autres
Flacon pour Flacon stérile, bouché, Flacon stérile, Flacon propre à col
Hémoculture pour recueil d’urine bouché, pour large pour urines
pour ECBU, crachat, recueil de selles (3h et 24h)
sperme…
Ecouvillons pour Spéculum Ecouvillons pour prélèvements

prélèvements vaginaux… urétraux…
Matériel pour prélèvements mycologiques des phanères

Conditions de stockage et modalités d’approvisionnement
 Tout le matériel de prélèvement est stocké à température ambiante, à l’abri de la
chaleur, et de la lumière directe.
 Le responsable de la salle de prélèvement gère ce matériel et veille :
- au maintien permanent d’un stock en adéquation avec l’activité,
- à la conformité du matériel en terme de dates de péremption, d’alertes de
matériovigilance.
2. Exigences relatives aux demandes d’examen

 Feuille de prescription (ordonnance)
 Tout acte réalisé au niveau de la salle de prélèvement doit répondre à la prescription
d’un médecin ;
 La feuille de prescription est un élément fondamental de la phase pré-analytique. Il
s’agit de l’ordonnance du prescripteur ou du demandeur de prestation ;
 Tout prélèvement (ou échantillon) externe doit être accompagné de son ordonnance.
L’ordonnance doit fournir les éléments suivants :
 L’identification complète du prescripteur (spécialité médicale souhaitable) : nom,
adresse, numéro de téléphone et / ou de fax, date de la prescription ;
 L’identification complète du patient : nom, prénom, sexe, date de naissance/ âge ;
 Les analyses demandées clairement formulées ;
 Les renseignements cliniques nécessaires à la bonne interprétation des résultats. Ces
informations sont enregistrées lors de la saisie informatique du dossier patient ;
 Signature et cachet du prescripteur ;
 La date et l’heure du prélèvement, nature du prélèvement, sa provenance ainsi que
l’identité du préleveur doivent être renseignées, pour tout prélèvement externe.
Ces éléments sont saisis sur le logiciel HEXALIS pour traçabilité et vérification. Ils sont
contrôlés et font l’objet de refus total ou partiel en cas de non-conformité.
 Fiche de consentement (Annexe N°1)

Certaines analyses (notamment les analyses génétiques et d’histocompatibilité) ne peuvent
être réalisées qu'avec un consentement écrit du patient sur un formulaire normalisé, c’est le
cas de :
 Cytogénétique ;

 dépistage du risque de Trisomie 21 ;
 Génétique moléculaire ;
 HLA
 Feuille de prélèvement, dispatching, facture et reçu pour retrait des résultats

Après la vérification de l’identité du client (carte nationale pour les adultes et celle des parents
pour les mineurs), l’opératrice d’accueil enregistre le dossier de ce dernier (nom, prénom, âge,
sexe, nom du prescripteur, renseignements cliniques (si nécessaire), analyses demandées etc.)
sur le système d’information et lui remet une feuille de « prélèvement, dispatching, facture et
reçu pour retrait des résultats » jointe d’une ou plusieurs étiquettes code à barres. Les deux
documents sont datés, référencés et portent les informations suivantes :
 Facture avec :
- identité du patient et prescripteur ;
- code du caissier ;
- analyses demandées et prix ;
- adresse mail pour réclamations ou suggestions.
 Reçu pour retrait des résultats avec :
- identité du patient ;
- code caissier ;
- analyses demandées et prix ;
- date de retrait des résultats.
 Fiche de prélèvement et dispatching avec :
- identité du patient ;
- code caissier et préleveur ;
- nature des tubes pour prélèvements.
 Etiquetage des spécimens

Avant tout acte de prélèvement, une confirmation de l’identité du patient est recommandée.
Cette confirmation permet de s’assurer d’une identification certaine du patient à prélever et
de maitriser le risque d’homonymie.
Points de non conformités : toute ambiguïté dans l’identification des

échantillons primaires entraîne une non conformité qui peut aboutir à la
non réalisation des analyses.

Tous les échantillons, quelle que soit l’analyse, doivent donc être identifiés avec:
 le nom (nom de jeune fille pour les femmes mariées) ;
 le prénom ;
 la date de naissance ;
 le genre ;
 la date et heure du prélèvement (relevé manuellement par le préleveur) ;
 la référence ;
 la nature du contenant et code d’examen demandé ;
 le nom / initiales du préleveur.
Le collage de l’étiquette, après prélèvement, doit être particulièrement soigneux :
 le côté gauche de l’étiquette vers le haut du tube ;
 l’étiquette doit être parfaitement verticale ;
 ne pas masquer le niveau de remplissage; le laborantin a besoin de visualiser l’état de
l’échantillon (centrifugé ou non, hémolysé, laqué, etc.).
N.B : Les échantillons primaires qui ne sont pas identifiés correctement ne

doivent ni être acceptés, ni être traités par le laboratoire (extrait de la norme
ISO 15189)
Une vérification de conformité des informations portées sur l’étiquette code à barre et celles
portées sur la fiche de prélèvement est effectuée au niveau du dispatching.
Dans le cas des prélèvements externes effectués par un professionnel de santé, ces indications
doivent être mentionnées, au moment du prélèvement, directement sur le contenant avec à
minima le nom et prénom, les autres indications devant obligatoirement figurer sur
l’ordonnance.
IV. ETAPES DU DEROULEMENT DU PRELEVEMENT SANGUIN

1. Préparation pour le prélèvement
Le préleveur doit s'assurer de la conformité ou de l'optimisation des conditions de
prélèvement. La liste des analyses figurant sur le catalogue (voir catalogue des analyses
biomédicales du CBM) définit les conditions à respecter en termes de :
 Nécessité d’être à jeun (heure du dernier repas doit être de 10 à 12h avant
prélèvement) ;

 Régime alimentaire particulier si nécessaire;
 Délai et conditions d’acheminement ;
 Procédures particulières de prélèvement ;
2. Déroulement du prélèvement
La discrétion et la confidentialité sont nécessaires.
Se bien laver et désinfecter les mains
 Port de gants et mise en place du garrot

Le garrot mis en place ne doit être ni trop lâché, ni trop serré ; il doit être situé à 10 cm
approximativement au dessus du site de ponction, en veillant à ne pas pincer la peau et en
recommandant au patient de serrer le poing, puis de rester parfaitement immobile. Il ne doit
pas être mis trop longtemps (< 1 minute).
 Choix du site et du matériel de ponction

Le prélèvement d’un échantillon de sang peut s’effectuer à partir de toutes les veines
superficielles du pli du coude, de l’avant-bras et du dos de la main.
La recherche d’une veine pour effectuer la ponction veineuse s’effectue de la manière
suivante : le patient serre son poignet et son bras, tendu, et incliné vers le bas. Un examen
visuel et une palpation des veines permettront de noter les caractéristiques suivantes :
 la situation des veines ;
 le parcours des veines ;
 la constitution de la veine (souplesse, taille,...).
Une veine normale est une veine facilement palpable, compacte, souple et élastique.
Attention !!!!! L’artère est un vaisseau palpable mais pulsatile.

Recommandations : En cas de veines ni visibles, ni palpables, il est recommandé de procéder
de la façon suivante :
 poser le garrot ;
 incliner le bras vers le bas ;
 masser le bras du patient depuis le poignet vers le pli du coude ;
 tapoter légèrement le site de ponction avec l’index et le majeur.
Choisir le matériel : tubes et matériel de ponction

 Tubes : sélectionner les tubes de prélèvement à utiliser selon la fiche de prélèvement
et en s’aidant du catalogue des actes biologiques ;
 Matériel de ponction : en fonction de la qualité de la veine et de l’âge du patient,
choisir :
- soit l’une des aiguilles disponibles dans le cas d’un prélèvement sur veine normale ;
- soit l’une des unités de prélèvement (épicrânienne), dans le cas d’un prélèvement sur
un capital veineux affaibli.

 Désinfection du site de ponction, décapuchonnage de l'aiguille
Désinfection du site de ponction
- Imbiber en quantité suffisante 3 tampons de compresses stériles ou de coton hydrophile
stérile avec de l'alcool à 70° ;
- Appliquer l'antiseptique avec le tampon à partir du centre du site de ponction avec un
mouvement circulaire vers l'extérieur sur une surface de 2 cm et laisser sécher 30s ;
 NE PAS TOUCHER le site désinfecté, s’il a été touché, le désinfecter

une nouvelle fois (le site de ponction ne doit pas être palpé après
désinfection).
 Ne JAMAIS utiliser d’alcool ou d’antiseptique à base d’alcool si une
alcoolémie est demandée.
Décapuchonnage de l'aiguille
- Tenir l’aiguille par l’étui protecteur de - Visser l’aiguille sur le corps de

couleur d’une main et dévisser la protection prélèvement.
blanche de l’aiguille de tube avec l’autre main. - Ne pas ôter le capuchon protecteur de
- Ne pas ôter l’étui protecteur de la canule. l’aiguille de veine.
Celui-ci sera retiré juste avant d’effectuer la - Le système est maintenant prêt à être
ponction veineuse. utilisé.

 Ordre des tubes
Chronologie à respecter :
Flacons Tube citrate de Tube sec avec Tube héparine Tube EDTA Tube citrate
d’hémocultures sodium 9NC activateur de de lithium K2 de sodium 4NC pour
coagulation mesure de la VS
L’ordre de remplissage des tubes lors du prélèvement est établi pour :

 Réduire les interférences liées à la ponction veineuse elle-même ;
 Éviter une contamination d’un tube à l’autre du fait des additifs.
 Réalisation de la ponction veineuse, introduction des tubes

 Une ponction difficile risque d’engendrer une hémolyse ou des micros caillots rendant
impossible certaines analyses (K+, LDH, AST, etc.) ;
 Lors du prélèvement, les tubes sont positionnés en dessous du point de ponction avec
l’étiquette originale orientée vers le bas pour pouvoir visualiser l’arrivée du sang dans
le tube ;
 Pousser délicatement, sans vibration, pour percer le bouchon du tube en préservant le
confort du patient. Respecter l’ordre de remplissage des tubes (voir ci-dessus) ;
 Veiller au remplissage des tubes (ils doivent impérativement être bien rempli pour
respecter le rapport sang/additif) ;
 Agiter par retournement lent (4à 10) chaque
tube dès son retrait du corps de pompe pour
mélanger l’additif avec le sang ;
 Retirer toujours le dernier tube du corps de
pompe avant de retirer l’aiguille de la veine
(sinon risque de fuite).

 Retrait du garrot, retrait de l’aiguille, et compression avec un coton propre,
élimination du matériel utilisé et pose d'un pansement
La durée de pause du garrot doit être inférieure à 1 mn, desserrer au 1er tube.
 Compresser à l’aide d’un coton propre ;
 Conseiller au patient le maintien de son bras en position allongée et la compression
ferme du coton sur le site de ponction ;
 Eliminer immédiatement l’aiguille dans un container pour déchets piquants et
tranchant près du préleveur ;
 Ne pas tasser le collecteur ;
 Attention : Ne jamais recapuchonner les aiguilles (geste interdit) ;
 Le coton est éliminé dans un container spécial « déchets d’activité de soins à risque
infectieux DASRI » ;
Retirer les gants uniquement après identification des tubes en collant les étiquettes codes à
barres correspondantes.
3. Sous-traitance des échantillons

Certaines analyses ne sont pas réalisées au CBM et sont sous-traitées à d’autres laboratoires
d’analyses. Les conditions pré analytiques de prélèvement, choix des contenants, conditions
de conservation et de transport des échantillons sous traités sont décrits dans le catalogue des
analyses biomédicales.
V. PRECONISATIONS DES PRELEVEMENTS DE SPECIMENS
La qualité des résultats dépend en grande partie du respect des

préconisations pré-analytiques.
1. Préconisations pour les prélèvements de sang

Certains examens de biologie médicale nécessitent un jeûne strict, d’autres un régime
alimentaire particulier ou un horaire particulier de prélèvement ou des conditions pré-
analytiques spéciales (Cryoglobuline). En règle générale, il faut éviter de prendre un repas
riche en sucres et en graisses juste avant une prise de sang, même si le jeûne n’est pas
demandé pour les examens prescrits (pour plus d’informations, consulter le catalogue des
analyses biomédicales).

 Le jeûne :
Pour la plupart des analyses, les valeurs de référence ont été définies à jeun et au lever :
- le résultat de certains dosages varie après le repas ;
- après le repas, la qualité du sérum ou du plasma est modifiée.
L’état de jeûne strict est défini par un délai de 12h entre le dernier repas et l’heure de
prélèvement (il est possible de boire un verre d’eau).
Les analyses exigeants l’état de jeûne :
Analyses Préconisations
Prélèvement impératif après 8h de jeûne, doit être
Glycémie acheminé au laboratoire dans un délai inférieur à 1h
après le prélèvement.
Glycémie post-prandiale Prélèvement 2h après le repas.
Bilan lipidique
Prélèvement impératif après 12h de jeûne.
(Cholestérol , HDL , LDL, TG)
Souhaitable après 8h de jeûne ;
NFS,TP,TP/INR, TCA, VS Le tube doit être acheminé au laboratoire dans un
délai inférieur à 1h après le prélèvement.
Pour les autres dosages, une période de jeûne de 4 heures est recommandée mais non
obligatoire. A défaut, un repas léger, pauvre en matières grasses est à prévoir.
 L’heure du prélèvement (cycle circadien) :

La concentration de certaines molécules varie au cours de journée selon un rythme
« circadien » : concentration maximale le matin dans la majorité des cas.
Analyses Prélèvement
Cycle circadien : à prélever de 8h à 9h et/ou de 16h
Cortisol sanguin
à 17h (selon indications de la prescription)
Prolactine Prélèvement entre 8h et11h après un repos de 20 mn
TSH, T4 libre, T3 libre Prélèvement de préférence le matin à partir de 8h

Bilan de fertilité chez la femme
A prélever le matin entre J2 et J5 selon les
(FSH, LH, Inhibine B, AMH,
prescriptions (J1 étant le premier jour des règles)
Oetsradiol)

 Prélèvement sanguin pour le dosage de la cryoglobuline
Un prélèvement d’environ 5 ml de sang sans anticoagulant doit être effectué à l’aide de
matériel préchauffé à 37 °C (aiguille, tube) ; transporté, laissé coagulé (≥ 1 heure) et
centrifugé à 37 °C.
2. Préconisations pour le recueil d’urine et de sperme

 Recueil d’urines pour compte d’Addis ou HLM (Hématies Leucocytes/Minute)
Se réveiller trois heures avant l’heure normale du lever.
- Vider totalement la vessie et jeter les urines ;
- Boire un verre d’eau (environ 250 ml) et se recoucher ;
- Exactement trois heures après, recueillir la totalité des urines dans un flacon à HLM ;
- Identifier le flacon avec la référence, le nom, prénom et date de naissance (étiquette
d’identification) ;
- Adresser l’échantillon au laboratoire dans les plus brefs délais.
 Recueil des urines de 24 heures
Intérêt :
Ce recueil permet l'analyse de certains paramètres de biochimie urinaire
Préconisations pour le prélèvement :
 Au lever :
* Vider la totalité de la vessie dans les toilettes ;
* Coller sur le flacon l’étiquette code à barre portant : Nom, Prénom ... ;
* Noter date et heure du début de recueil.
 Pendant 24 heures :
* Recueillir la totalité des urines dans le flacon pendant toute la journée et la
nuit jusqu’à la même heure, que celle indiquée au départ ;
Exemple : 8h le premier matin jusqu’à 8h le lendemain matin
 Identifier tous les flacons s’il y en a plusieurs ;
 Noter date et heure de la fin de recueil ;
 La totalité des urines de 24 heures doit être acheminée au laboratoire dans
les plus brefs délais (maximum 2 heures après la fin du recueil).

 Recueil de sperme pour spermogramme
Préparation du patient (instruction)
- Un délai d’abstinence sexuelle de 2 à 5 jours est impératif ;
- Boire 2 litres d’eau par jour les deux jours précédant le recueil et 1 litre d’eau le matin
du recueil ;
- Se présenter au laboratoire à l’heure convenue avec l’ordonnance et la pièce d’identité.
Mode opératoire du prélèvement
- Le prélèvement est réalisé au niveau de la salle de prélèvements (Box
spermogramme) ;
Les instructions pour le recueil sont données sur place.
 Recueil d’urines pour une recherche de mycobactéries
- Recueillir la totalité des urines de la nuit, 3 jours distincts (1 flacon par jour) ;
- Transmettre au laboratoire flacon par flacon.
3. Préconisations pour les examens d’histocompatibilité

Les exigences recommandées par le laboratoire d’Histocompatibilité concernent les
échantillons primaires et leurs documents associés quand ils sont transmis par les
Etablissements de Santé ou par les Laboratoires de Biologie Médicale ou prélevés à
l'Institut Pasteur du Maroc (consulter l’annexe N° 2).
Le respect de ces exigences conditionne l’obtention d’un résultat analytique fiable, les
prestations de conseil et la garantie du lien patient-échantillon primaire indispensable à la
sécurité et aux soins prodigués au patient et à l’assurance qualité des résultats d’examens.
Ce document dans sa version la plus récente est systématiquement diffusé aux clients
réguliers du laboratoire et à tout client potentiel en faisant la demande.
Les prestations du laboratoire HLA sont assurées 24/24H.
4. Préconisations pour le diagnostic moléculaire des Virus respiratoires et de la rage
Les recommandations pour les prélèvements de virologie sont détaillées sur le catalogue
des (nature de l’échantillon, technique utilisée, délai maximum de rendu des résultats …).
Des recommandations supplémentaires et spécifiques sont décrites dans l’annexe N° 3 :
 Type et nombre de matériel de prélèvement en fonction de l’examen demandé

(Sérologies, Biologie Moléculaire …) ;

 Réalisation d’un prélèvement Nasopharyngé pour le diagnostic des Infections
respiratoires ;
 Réalisation des prélèvements (salivaire et biopsie cutanée pour le diagnostic en
intra-vitam par PCR du virus de la Rage).
5. Préconisations pour les examens Cytogénétiques

Le laboratoire de cytogénétique de l'IPM est le 1er laboratoire au Maroc à réaliser les
caryotypes humains, en effet il a ouvert ses portes en 1991.
Son activité est centrée sur l’étude cytogénétique (étude de matériel chromosomique) au
niveau de plusieurs tissus.
Nous mettons à la disposition de nos partenaires (cliniciens et biologistes) notre catalogue de
prélèvement selon l’analyse demandée car les prélèvements ne se réalisent pas tous au sein
de notre centre d’accueil et de prélèvement.
 les analyses proposées en post natal :

 caryotype constitutionnel sur biopsie cutanée ;
 caryotype constitutionnel postnatal sur sang fœtal ;
 caryotype constitutionnel postnatal sur sang périphérique ;
 caryotype médullaire.
Toute demande d’analyse doit être accompagnée : d’une ordonnance ou d’une fiche de
prescription remplie et signée en précisant :
 l’identité du patient ;
 l’identité du prescripteur et sa signature (de façon identifiable/lisible) ;
 les analyses à réaliser ;
 l’indication des analyses.
Les spécificités de chaque type d’analyse (prélèvement, tube, milieu de transport, conditions
particulières) sont notées dans le catalogue des analyses du CBM.
 Les analyses proposées en prénatal :

 Caryotype constitutionnel prénatal sur produit de fausse couche ;
 Caryotype constitutionnel prénatal sur liquide amniotique ;

Le prélèvement doit être accompagné :
 du consentement de la femme enceinte à la réalisation du prélèvement et d’une ou de
plusieurs analyses en vue d’un diagnostic prénatal in utero rempli et signé par la patiente
(le cas échéant son représentant légal) (consulter l’annexe N° 1) ;
 d’une fiche de prescription remplie et signée (au bas du formulaire de consentement,
consulter l’annexe N° 1) ;
 de la fiche de prélèvement de diagnostic prénatal précisant :
- L’identité de la patiente et éventuellement de son conjoint et leurs coordonnées ;
- Les analyses à réaliser ;
- L’indication des analyses ;
- Les renseignements médicaux (antécédents personnels et familiaux des deux membres
du couple, date de début de grossesse, parité) ;
- L’identité du préleveur (de façon identifiable/lisible), la date, l’heure et la nature, la
quantité et l’aspect du prélèvement et les remarques éventuelles concernant les
conditions de prélèvement.
Les spécificités de chaque type d’analyse (prélèvement, tube, milieu de transport, conditions
particulières) sont décrites au catalogue des analyses du CBM.
6. Préconisations pour les prélèvements microbiologiques (Bactériologie, Parasitologie,

Mycologie et Mycobactéries)
 Recommandations générales
Les prélèvements doivent être de préférence réalisés en dehors d’une antibiothérapie.
 Le non-respect des préconisations peut entraîner une contamination des prélèvements
par la flore habituelle de la peau ou des muqueuses ou encore détruire les germes
pathogènes ;
 La croissance bactérienne est directement dépendante de la température. Elle ne doit
pas être favorisée ni défavorisée pour conserver la flore prélevée en l’état. Si le
prélèvement n’est pas traité immédiatement, il est nécessaire de veiller au respect des
consignes concernant les conditions de stockage ;
 Toutes les recommandations microbiologiques sont décrites en détail (annexe N° 4) ;
 Un antibiogramme n’est pas systématiquement effectué sur les bactéries isolées : la
réalisation de l’antibiogramme est à l’appréciation du biologiste sauf demande
explicite du prescripteur. Un antibiogramme réalisé alors qu’il n’est pas nécessaire

peut entraîner un traitement inadapté voire entraîner l’apparition de résistance
bactérienne ;
 Les délais de rendu de résultats sont souvent longs pour les analyses de bactériologie.
Les échantillons analysés peuvent être polymicrobiens. Il est donc nécessaire de
réaliser des opérations d’isolement qui diffèrent le rendu des résultats. D’autre part, la
réalisation de l’antibiogramme est effectuée dans un second temps, une fois la bactérie
isolée et identifiée. Enfin, certains germes sont de culture difficile.
La qualité du résultat dépond de la qualité

du prélèvement !!!
 Recommandations pour le test Quantiféron®-TB :

Les principales indications de ce test :
 Pour le diagnostic de l’infection tuberculeuse latente ;
 Patients mis sous traitement par anti-TNF ;
 Patients infectés par le VIH lors du bilan initial ;
 Enquête autour d'un cas pour les sujets contacts (adultes et enfants> 5 ans) ;
 Professionnels de santé à l'embauche si l'IDR est > 5 mm.
Pour le diagnostic de la tuberculose maladie :
 L’utilisation du test Quantiféron® n’est pas recommandée chez l’adulte ;
 Chez l’enfant, il peut constituer une aide au diagnostic des formes paucibacillaires.
Type d’échantillons : Sang.
Matériels : Tubes spéciaux (fournis par le laboratoire, à contacter au préalable).
Prélèvement, conservation, Transport et traitement :
 Utiliser les 4 tubes fournis (vert et jaune = TB Antigen, Mauve = Mitogen et Gris =
Nil) ;
 Remplir les 4 tubes jusqu’au trait noir indiqué sur chaque tube: ni plus haut, ni plus
bas ;
 Mélanger les 4 tubes par retournement (pas vigoureusement) 10 fois ;
 Envoyer au laboratoire à température ambiante dans les 16 heures ;
 Au laboratoire, incuber les 4 tubes en position verticale après avoir agité les tubes 10
fois par retournement (pas vigoureusement) dans une étuve à 37°c pendant 16 à 24
heures ;

 Sortir les tubes de l’étuve et les faire parvenir à température ambiante dans les 2 jours
au laboratoire des Mycobactéries & Tuberculose ;
 Pour les laboratoires sous-traitants, ils peuvent envoyer les tubes soit déjà incubés à
37°c soit non incubés mais à condition qu’ils parviennent dans les 16 heures après le
prélèvement. Veuillez préciser lors de l’envoi si l’incubation à 37°C a déjà été réalisée
ou non.
7. Préconisations pour les examens d’Anatomopathologie

 Examen Histotopathologique : consignes et conditions générales du prélèvement.
Demande d’examen :
Cette demande doit contenir :
 les informations permettant une identification univoque du patient et du médecin
prescripteur ;
 les informations cliniques utiles à l'analyse et à l'interprétation des résultats.
Toute demande, pour être acceptée par le service, doit être soigneusement identifiée avec au
minimum les informations suivantes :
 Identifiant du patient : Nom & Prénom, Sexe, Date de naissance, Numéro du
dossier, Anamnèse, Mutuelle.
 Identifiant du médecin prescripteur : Le service d’où vient le prélèvement, le nom
& prénom du médecin, le numéro téléphone, la date de prescription, le destinataire
des résultats avec l'adresse exacte et actualisée du lieu où il pratique.
 Pour l'échantillon: Les informations indiquées sur le(s) prélèvement(s) et la demande
doivent être en concordance parfaite pour que la demande puisse être définie comme
conforme.
 La date et l'heure du prélèvement, ainsi que le site anatomique d'origine et l'objectif du
prélèvement doivent être précisés.
Données cliniques :
Le médecin prescripteur ou préleveur doit préciser le but de l'analyse, Il faut :
 indiquer les antécédents médicaux quand ils sont connus ;
 signaler si le même test a déjà été réalisé (dans un autre laboratoire, suivi médical
effectué, etc.) et en donner le résultat ;
 signaler les traitements intercurrents s'ils peuvent interférer avec les résultats de
l'analyse demandée ;

 les diagnostics connus, soupçonnés ou à écarter doivent être mentionnés ;le but de
l’examen (spécialement dans le cas des examens extemporanés).
Pour plus d’informations, consulter l’annexe N° 5.
 Cytologie Gynécologique (consulter l’annexe N° 5)

Il s'agit d'un prélèvement au niveau du col utérin et de la partie profonde du vagin (FCV),
afin de dépister précocement toute anomalie cellulaire pouvant évoquer la présence d'une
lésion précancéreuse ou d'un cancer du col utérin.
Actuellement le frottis n'est effectué qu'au niveau du col utérin (au niveau de l'exocol et de
l'endocol) d'où la terminologie récente: Frottis Cervico-Utérin (FCU).
 Cytologie non gynécologique (consulter l’annexe N° 5)
VI. TRANSPORT DES ECHANTILLONS AU LABORAOIRE

1. Prélèvement urgent
Un échantillon signalé « urgent » sera traité prioritairement au laboratoire.
La notion d’urgence doit être signalée sur l’ordonnance.
 A l’accueil, un ticket d’urgence est délivré au patient pour que sa demande soit traitée
en priorité ;
 L’état d’urgence est précisé sur le dossier du patient dans le SIL ;
 Après le prélèvement du patient, les échantillons correspondants sont mis dans un
sachet individuel en plastique dédié avec la fiche de prélèvement. Ils sont
immédiatement récupérés et vérifiés par le personnel du dispatching qui édite la
feuille de paillasse.
 Informer le(s) laboratoire(s) concerné(s).
2. Prélèvement non urgent

 Conditionnement
Le préleveur place les échantillons du même patient dans un sachet individuel en plastique
dédié, accompagné de la fiche de prélèvement.
Les tubes en sachet individuel sont déposés dans des paniers en position verticale, tandis que
les prélèvements d’urines, selles et crachats sont mis dans un grand bac dans la salle du
prélèvement, en attendant que le responsable du dispatching récupère les prélèvements (action
réalisée toutes les 15 à 30 min).

Il est recommandé de ne pas mettre des échantillons provenant de patients différents dans le
même sachet.
 Vérification des prélèvements

Le personnel responsable du dispatching vérifie :
 La présence de la fiche pour prélèvement dispatching accompagnant le prélèvement ;
 La concordance entre l’identité portée sur l’échantillon (étiquette code à barre émise
par le SIL) et celle figurant sur la fiche pour prélèvement dispatching ;
 L’adéquation des tubes et contenants par rapport aux analyses demandées ;
 La conformité des tubes et contenants.
3. Tri et répartition des échantillons

Après vérification, le responsable du dispatching :
 Edite les feuilles de paillasses (par service ou plateau technique) ;
 Trie les prélèvements par service ou plateau selon les laboratoires destinataires ;
 Dépose les échantillons de sang dans des zones clairement indiquées correspondants
aux différents postes techniques.
Les flacons et autres contenants sont placés dans des bacs dédiés.
En cas de manque d’un tube (difficulté de prélèvement, etc.), le responsable du dispatching
demande le partage du prélèvement existant au service qui a la priorité de passer les analyses.
4. Température de stockage et de transport

La plage standard de température de stockage des échantillons acceptable par le CBM pour la
plupart des analyses, correspondant à une température réfrigérée 5±3°C pour quelques
analyses ou à une température ambiante pour le reste.
N.B : Certaines analyses sous-traitées exigent une conservation à température -20°C
(catalogue des analyses du CBM).
5. Délais de transport au laboratoire destinataire

Par défaut, le délai standard maximum autorisé avant l’arrivée au laboratoire (délai à
surveiller particulièrement en cas de température extérieure élevée et en l’absence de glacière)
est d’environ 2 heures, sauf pour la glycémie prélevé sur tube sec (30 mn).
Le personnel chargé de la récupération des prélèvements de la salle du dispatching est amené
à les transporter dans des sachets en plastique Kangourous, en position verticale dans des
paniers accompagnés des feuilles de paillasses qui contiennent les informations sur le patient

et les analyses à réaliser.
Il est strictement interdit de transporter les prélèvements autres que dans les conditions
recommandées.
6. Prélèvements externes
De nombreux facteurs pré-analytiques peuvent altérer l’intégrité des échantillons biologiques.
En conséquence, ces derniers doivent être acheminés dans les conditions requises par le
laboratoire.
Pour tout prélèvement externe, la mention « prélèvement externe » est saisie dans le dossier
patient par la caissière, et est ensuite mentionnée sur la fiche de prélèvement et de
dispatching.
Tout transport dans l'espace public d'échantillons est réglementé, qu’il soit réalisé par le
prélevé (patient lui-même) ou toute autre personne.
Selon l’ADR (Accord européen relatif au transport des marchandises Dangereuses par Route),
Selon la réglementation du transport des produits biologiques sur route (ADR), le prélèvement
doit être conditionné dans :
 Un emballage primaire (tube ou flacon) ;
 Un emballage secondaire étanche (coffret de prélèvement ou sachet hermétique +
absorbant) ;
 Un emballage tertiaire (mallette de transport par exemple, boîte) ;
La rigidité doit être suffisante pour résister à l’écrasement.
Les matières infectieuses sont les matières dont on sait ou dont on a des raisons de penser
qu’elles contiennent des agents pathogènes. Les agents pathogènes sont définis comme des
micro-organismes (y compris les bactéries, les virus, …) ou comme des micro-organismes
recombinés (hybrides ou mutants), dont on sait ou dont on a des raisons de penser qu’ils
provoquent des maladies infectieuses chez l’animal ou chez l’homme (chapitre 2.2.62.1.1 de
l’ADR).
L'expéditeur de l'échantillon à analyser est responsable du respect des réglementations
relatives à l'emballage, voire au transport proprement dit.

VII. CRITERES D’ACCEPTATION ET DE REFUS DES
PRELEVEMENTS AU COURS DE LA PHASE PRE-ANALYTIQUE
 Les demandes d’examens sont horodatées à leur arrivée dans les différentes entités du
CBM ;
 Un contrôle de l’identification des échantillons et leur conformité est effectué à leur
arrivée au niveau de chaque laboratoire du CBM ;
 Toute anomalie à la réception est tracée sur une fiche de non-conformité et sur le
logiciel Hexalis Qualité et impose une information du demandeur de prestation ;
 Non conformités relatives à l’Accueil :

Non-conformité Action recommandée
REFUS de l’examen biologique ;
Absence de l’ordonnance Certains examens peuvent être formulés par
un médecin de l’IPM (Gly, …), demander
l’avis du biologiste.
Absence des coordonnées du prescripteur Demande d’information au patient.
Absence de la date de prescription ou Demande d’information au patient /

antérieure Prescripteur.
REFUS de l’examen (demander l’avis du

Absence de la signature du prescripteur
biologiste).
REFUS de l’examen (demander l’avis du

Prescription illisible
biologiste).
Absence du nom du patient REFUS de l’examen, nouvelle demande ;

ou nom erroné sur la prescription A VERIFIER avec document d’identité.
Demande d’information au patient ;

Absence de renseignements cliniques
Demande d’information au prescripteur.

 Non conformités relatives au Tri et Dispatching :
Pour l’identification, il faut au minimum le nom du patient, le numéro du code à barres collé
sur les échantillons et la référence.

REFUS de l’examen, nouvelle demande ;
Si échantillon précieux: identification
Identification de l’échantillon ou de la
possible par l’infirmière sous sa
feuille de paillasse absentes
responsabilité.
Prévenir le biologiste.
Non concordance entre l’identification de

la feuille de paillasse et celle de REFUS de l’examen.
l’échantillon
Demander un complément d’information ou

Identification incomplète ou inexacte
une correction à la caissière.
Erreur d’identification signalée par rapport

REFUS de l’examen, nouvelle demande.
à la fiche de prélèvement
Deux demandes simultanées avec la même Demander confirmation et complément

identité d’information à l’infirmière.

 Non conformités relatives à l’Acheminement :

Absence date/heure du prélèvement Demande d’information au préleveur.
Evaluer si les conditions pré-analytiques
(qualité de l’échantillon et conditions de
transport) de l’échantillon restent
Délai d’acheminement dépassé acceptables (demander avis du biologiste) :
- Si échantillon acceptable, traiter la demande,
et formuler une remarque au niveau du compte
rendu (CR);
- Si échantillon non acceptable, REFUS de
l’examen ;
Demander un nouvel échantillon.
Information du préleveur ;
Absence de l’échantillon Information du dispatching ;
Demande d’un nouvel échantillon.
Evaluer si les conditions pré-analytiques

restent acceptables :
- Si échantillon acceptable, traiter la demande,
Non-respect de la procédure
et formuler une remarque au niveau du CRE ;
d’urgence
- Si échantillon non acceptable, REFUS de
l’examen
Demander un nouvel échantillon
REFUS de l’échantillon ;
Tube cassé, contenant détérioré Informer le préleveur, le dispatching ;
Vérifier si les conditions pré-analytiques restent

acceptables :
Non-respect des conditions de
- Si conditions acceptables, traiter la demande,
transport des échantillons (emballage,
formuler une remarque au niveau du CRE ;
température, mode de transport)
- Si conditions non acceptables, REFUS de
la demande,
Informer le dispatching (distributeur) ;

Evaluer si le délai d’acheminement reste
Erreur d’acheminement acceptable :
- Si délai acceptable, traiter la demande et
signaler la non-conformité.

 Non conformités relatives à la Qualité de l’échantillon
Demander l’avis du biologiste ;

Autre demande: voir selon le critère de
Taux de remplissage du tube
préciosité ;
Formuler une remarque au niveau du CR.
Demande éventuelle d’un nouvel échantillon

en fonction de l’importance d’hémolyse
Echantillon hémolysé (++++). Si échantillon précieux (prise
difficile), dérogation selon l’avis du biologiste
avec remarque sur le CR.
Avis du biologiste selon les analyses à

Echantillon ictérique
effectuer (affecte ou non le résultat)
REFUS d’examen ;
Echantillon coagulé
Nouveau prélèvement.
Information du préleveur ;
Récipient non étanche
Demande d’un nouvel échantillon si nécessaire
Possibilité de remédiation (enlever la

fibrine) ;
Présence de Fibrine Re-centrifugation ;
effectuer (affecte ou non le résultat).
Présence de caillots
effectuer (affecte ou non le résultat).
REFUS d’examen ;
Contenant inadéquat
Nouveau prélèvement sur contenant adéquat
Demande d’un nouvel échantillon ;
Contenant périmé Demande d’information auprès du préleveur
Retrait des périmés.
Demande d’information au préleveur et/ou
Nature de l’échantillon non déterminée
prescripteur.
Volume insuffisant Information du préleveur (avis du Biologiste).
Autres Demander avis du biologiste.
N.B : En cas d’échantillon précieux, toujours voir ce qui peut être fait en formulant une remarque
ou réserve au niveau du compte rendu d’examen (CRE). Prévenir le biologiste.

 Non conformités relatives à l’Identification des échantillons (Identito-Vigilance) :
Etiquette code à barre (ECAB) absente ou REFUS de l’échantillon ;
illisible Refaire un nouveau prélèvement.
Non concordance d’ECAB avec fiche de REFUS de l’échantillon ;
prélèvement Vérifier les autres échantillons de la journée
Vérifier au niveau de prélèvement ou salle de
dispatching et de tri ;
Echantillon absent Demande d’information au niveau de la salle
de prélèvement ;
Demande d’information au niveau de la
Absence de l’identité du préleveur
salle de prélèvement.
Tube supplémentaire au regard de la
Demande d’information auprès du préleveur.
prescription
Demande d’information au dispatching ;
Demande d’information au préleveur
Nombre des tubes insuffisants pour les
(prescription) ;
tests demandés
Demande du prélèvement d’un autre service,
s’il existe.
Information du préleveur et/ou du
Echantillon en double
prescripteur.
Information du préleveur et/ou du
Echantillon identique reçu en même temps
prescripteur.
Tube manquant au regard de la
Demande d’un nouvel échantillon.
prescription
VIII. TRANSMISSION DES COMPTES RENDUS D’EXAMENS

Le laboratoire a mis en place une procédure pour le rendu des résultats permettant de garantir
la confidentialité des données patients.
Seul le biologiste est habilité à commenter les résultats. Les secrétaires et les autres
collaborateurs ne font aucun commentaire sur les résultats.
Le prescripteur est le seul interlocuteur pour les interpréter en fonction de la clinique et de la
thérapeutique éventuelle.

1. Délais de rendu des résultats
Les délais de rendu des résultats sont indiqués au patient au moment du prélèvement sur la
fiche de rendu des résultats délivrée à l’issue des prélèvements effectués.
2. Modalités de transmission et confidentialité

Toute l’activité du CBM est régie par le secret médical. Le personnel est tenu d’assurer la
confidentialité des informations qu’il détient de part son activité au sein du CBM.
Cet engagement est mentionné dans la fiche d’engagement de confidentialité, étique, intégrité
et impartialité.
L’accès aux données informatiques est contrôlé par un code et un mot de passe, tous deux
personnalisés.
Les serveurs sont basés dans le local informatique sécurisé avec accès contrôlé.
Pour assurer le respect total de la confidentialité et le secret médical des résultats, les comptes
rendus d’analyses peuvent être remis personnellement au patient ou à un tiers mandaté par lui
même, sur présentation de la carte d’identité.
Les résultats sont remis après vérification de l’identité du patient.
A la demande, les comptes rendus des résultats peuvent être communiqués au médecin
prescripteur ou au patient par les moyens de transmission assurant la confidentialité (Fax,…).
3. Prestations de conseil
Les médecins et les responsables des laboratoires du CBM sont amenés à réaliser et à tracer
les prestations de conseil :
 pour les prescripteurs : conseils et /ou orientation sur le choix des analyses à prescrire
et sur l’interprétation éventuelle de certains résultats.
 pour les patients : renseignements et interprétation de leurs résultats.
IX. GESTION DES RECLAMATIONS ET SUGGESTIONS CLIENTS

Chaque client du CBM peut faire une réclamation s’il estime que le service rendu n’est pas
conforme à ses attentes par téléphone, courrier, email, fax ou bien en utilisant la boite à
suggestion disponible au niveau de la salle de prélèvement.
Les réclamations ou suggestions peuvent être formulées en remplissant le formulaire de
contact disponible à l’accueil au sein du centre de prélèvement ou en contactant le service
Qualité, Hygiène et Sécurité : qhs@pasteur.ma

Les responsables du CBM et du centre de prélèvement s’engagent à les traiter dans les
meilleurs délais.
Les coordonnées des responsables d’activités sont disponibles au chapitre
"Coordonnées/contact".
X. REGLES D’HYGIENE ET DE SECURITE
Les règles de base d’hygiène du préleveur consistent à l’utilisation de solution hydro-

alcoolique ou un lavage fréquent des mains à l’eau et au savon, au contrôle de l’étanchéité
absolue de tous les flaconnages contenant des produits biologiques et l’utilisation de matériel
stérile à usage unique.
Les règles de base de sécurité consistent à programmer et organiser l’élimination des

déchets de soins, en particulier des aiguilles et à bien connaître les procédures de sécurité en
cas d’accident lié au prélèvement lui-même ou au transport.
1. Elimination des déchets potentiellement contaminés

L’élimination des déchets doit être conforme à la législation en vigueur :
 loi n 28-00 relative à la gestion des déchets solides et à leur élimination, en juillet
2006 ;
 décret d’application n 2- 07-253 du 18 juillet 2008, portant classification des déchets
et fixant la liste des déchets dangereux ;
 décret de loi n 2-9-139 relatif à la gestion des déchets médicaux et pharmaceutiques,
en juin 2009.
En fonction de leur nature, les déchets suivent plusieurs filières de traitement différentes :
 DAOM : Déchet Assimilé aux Ordures Ménagères (déchets non contaminés) : papiers,
emballages, coton non souillé. Ces déchets sont à éliminer dans les poubelles à papier.
 DASRI : Déchets d’Activité de Soin à Risque Infectieux, l’élimination de ces DASRI
suit une filière d’élimination spécifique qui est de la responsabilité du préleveur
conformément à la réglementation en vigueur :
- Les déchets coupants et tranchants (aiguilles, tubulures) sont obligatoirement recueillis
dans les récipients jaunes spécifiques = Collecteurs spécifiques pour les objets
coupants, piquants ou tranchants (OPCT) ;

- Les déchets contaminés non coupants (coton souillé, gants etc.) sont recueillis dans
des poubelles munies des sacs rouges. Il est interdit de jeter toute aiguille, lame ou
autre objet piquant coupant tranchant dans ces poubelles.
2. Conduite à tenir en cas d’accident avec exposition au sang (AES) ou à des produits
biologiques
Un accident avec exposition au sang ou à des produits biologiques peut être :
 Une piqure d’aiguille ;
 Une coupure avec un objet tranchant ;
 Un contact ou une projection de sang ou de produits biologiques au niveau d’une plaie,
d’une lésion cutanée ou d’une muqueuse.
Les consignes à respecter lors d’un AES ou à des produits biologiques sont :
Immédiatement:
 Stopper l’activité en cours ;
 En cas de plaie ou piqure :
- Ne pas faire saigner ;
- Nettoyage immédiat de la zone cutanée lésée à l’eau et au savon, puis rinçage
abondant à l’eau du robinet.
- Désinfection : 5minutes avec « dérivés chlorés » (dakin pur, ou à défaut alcool à 70°) ;
 En cas de projection sur les yeux ou sur une muqueuse :
- Pour les yeux: rincer avec de l’eau du robinet ou du sérum physiologique pendant 10
minutes au minimum.
- Garder les yeux ouvertes dans le liquide, faire monter et descendre le regard, réaliser
des mouvements de rotation de l’œil afin de bien rincer le pourtour du globe oculaire
et les paupières.
Déclaration d’AES
 Prévenir immédiatement le chef de service.
 Les démarches à suivre pour la déclaration et le suivi d’AES sont détaillées dans des
documents spécifiques pour le CBM.

Annexe N°1
DIAGNOSTIC ANTENATAL CHROMOSOMIQUE
RENSEIGNEMENTS CLINIQUES
Date :
MADAME:
Nom:..................................................................................................................................................
Prénom:..............................................................................................................................................
Date de naissance :.............................................................................................................................
Antécédents :
.......................................................................................................................................................................
.............................................................................................................................
Tel: ......................................................................................................................................................
GROSSESSE ACTUELLE :  Mono fœtale  Gémellaire

DDR :...................................................................................................................................................
Age précis de la grossesse (en SA): …...............................................................................................
Mesure de la clarté nucale :.................................................................................................................
Nature du prélèvement:
 Liquide amniotique. Préciser son aspect :..................................................Quantité (ml):................
 Villosités choriales  Produit de fausse couche  Sang fœtal
INDICATION :
 Age maternel (≥ 36 ans à la date du prélèvement)

 Signe d’appel biologique : triple test augmenté. Préciser sa valeur: …........................................
 Clarté nucale augmentée
 Signe d’appel échographique (autre que clarté nucale). Préciser :................................................
 ATCD pour le couple de grossesse avec caryotype anormal
 Anomalie chromosomique parentale.
 Autres : Préciser: …........................................................................................................................
MEDECIN TRAITANT:
Nom: ....................................................................................................................................................
Adresse:................................................................................................................................................
Tel:........................................................................................................................................................

CONSENTEMEMENT DE LA FEMME ENCEINTE
Après la consultation médicale, je soussignée,

Mme ……………………………..……………….., déclare avoir reçu les informations
suivantes :
- L’analyse qui m’est proposée en vue d’établir un diagnostic prénatal rend nécessaire un
prélèvement de liquide amniotique, de sang fœtal ou de villosités choriales dont le risque m’a
été expliqué.
- La technique utilisée pour le diagnostic anténatal chromosomique nécessite une mise en

culture de cellules fœtales. Un échec de cette technique est possible, rendant nécessaire le
recours à un deuxième prélèvement.
- L'analyse peut révéler d'autres affections que celle recherchée dans mon cas.
Je consens au prélèvement ainsi qu’à l’analyse de cytogénétique pour laquelle, il est effectué.
Signature de la femme enceinte :

le :
Signature du médecin traitant:

le:

CONSENTEMENT POUR LA REALISATION D’EXAMENS DES
CARACTERISTIQUES GENETIQUUES D’UNE PERSONNE
Je soussigné (e) : …………………………………… né (e) le : …………………………….

Demeurant à :……………………………………………………………………………………
 Reconnais avoir reçu par le Dr…………………………………..les informations sur les examens
des caractéristiques génétique qui seront réalisés afin :
de confirmer ou d’infirmer le diagnostic d’une maladie génétique ;
de confirmer ou d’infirmer le diagnostic pré-symptomatique d’une maladie génétique ;
d’identifier un statut de porteur sain (recherche d’hétérozygote ou d’un remaniement
chromosomique) ;
d’évaluer ma susceptibilité génétique à une maladie ou à un traitement médicamenteux.
 Pour cela, je consens :
au prélèvement qui sera effectué chez moi.
au prélèvement qui sera effectué chez mon enfants mineur ou une personne majeur sous
tutelle
 Je suis informé (e) que les résultats de l’examen des caractéristiques génétiques me seront
transmis par Si une partie du prélèvement reste inutilisée après examen,
Je consens à ce qu’il puisse être intégré, le cas échéant, à des fins de recherche scientifique. Dans
de cas, l’ensemble des données médicales me concernant seront protégées grâce à une
anonymisation totale. En conséquence, je suis conscient (e) que ces études scientifiques effectuées
ne seront sans aucun bénéfice ni préjudice pour moi.
Fait à…………………………….. Signature du patient adulte ou du représentant légal de

Le :………………………………. l’enfant mineur ou du tuteur légal de l’adulte sous
tutelle :

Annexe N° 2
EXIGENCES EN HISTOCOMPATIBILITE
I/ Exigences relatives aux demandes d’examens:
Chaque prélèvement doit être accompagné d’une demande d’examens (contacter le
service) et/ou une ordonnance.
Cas particuliers :
1) Donneur non apparenté de cellules souches hématopoïétiques ou d’un donneur
d’organe en état de mort encéphalique: l’identité est remplacée par un numéro
d’identifiant unique.
2) Les prélèvements des donneurs d’organes (ganglions et/ou rate) sont conditionnés
dans un pot identifié par un code du centre transmetteur, selon les recommandations
de l’Agence de la biomédecine. Ils sont adressés au laboratoire, accompagnés du
compte rendu du résultat HLA et du prélèvement d’organe.
Les données d’identification du patient portées sur les échantillons doivent être strictement
identiques à celles de la demande d’examens.
Les renseignements cliniques minimum exigés pour les examens d’histocompatibilité :

Toute information pertinente pouvant influer sur les résultats et leur interprétation doit être
communiqué par le client :
 Transplantation d’organes :
 Tout événement immunisant ou traitement ayant un impact sur les résultats
(Transfusion, rejet aigu ou chronique, transplantectomie, infection, vaccination,
traitement par sérum anti lymphocytaire).
 Association HLA maladies :
 Diagnostic clinique ;
 Antigène ou allèle recherché.
Le consentement éclairé du patient (contacter le service) pour les examens de caractéristiques
génétiques doit être associé à la prescription en cas de demande d’examen d’une association
polymorphisme HLA et maladies.
II/ Exigences relatives aux échantillons primaires :

 Facteurs ayant une influence sur la qualité du prélèvement et/ou des
résultats d’examens.
 Contexte de pathologie hématologique (anomalie cytogénétique) avec risque de rendu
d’un typage HLA erroné ;
 Aplasie avec risque de quantité insuffisante de cellules ou d’ADN pour la réalisation
des examens ;
 Délai de transport des échantillons supérieur à 24 heures avec risque de dégradation
cellulaire pour les analyses de sérologie et risque de résultat erroné pour les recherches
d’anticorps anti-HLA ;
 Anticoagulant inadéquat (ex. présence d’inhibiteur de PCR dans les tubes héparinés
risquant d’invalider les examens de biologie moléculaire) ;
 Traitement par Rituximab ou SAL (sérum anti-lymphocytaire) pour les recherches
d’anticorps anti-HLA et les cross-match (noterla date de début du traitement).
Les examens réalisés par le laboratoire ne nécessitent pas de préparation particulière du
patient (ex : être à jeun).
Les examens sont réalisés sur des prélèvements reçus conjointement à la prescription, ou sur
des prélèvements réalisés à l' IPM.

III/ Modalités de Prescriptions d’Examens Complémentaires
Le laboratoire d'Histocompatibilité suit les prescriptions d'examens qui lui sont
adressées.
En cas de demande d'examens redondants le laboratoire peut être amené à
supprimer des examens. Dans ce cas, la demande d'examens donne lieu à un
enregistrement informatique et un compte rendu indiquant le motif de non
réalisation des examens prescrits et adressé au prescripteur.
Par ailleurs, le laboratoire peut être amené à réaliser des examens complémentaires à
l'initiative du biologiste, en cas de besoin pour le suivi du patient en attente de greffe
ou greffé.
 Recherche des anticorps anti-HLA : Un dépistage positif peut être complété par
une identification y compris par des techniques sur antigène isolé (single
antigen) en vue d'identifier un anticorps anti donneur spécifique ;
 Complément de typage HLA du donneur et ou du Receveur en cas de mise en
évidence chez le receveur d'une immunisation potentielle dirigée contre le
donneur ;
 Mortalité cellulaire élevée rendant ininterprétable un typage HLA en
lymphocytotoxicité et nécessitant un typage en biologie moléculaire ;
 En cas de demande de recherche d’anticorps anti-HLA renouvelée à moins de trois
mois d’intervalle, le laboratoire peut être amené à ne pas analyser le 2éme échantillon,
et à le mettre en conservation après enregistrement informatique ;
 Toute autre analyse non prescrite mais jugée utile pour le suivi des patients sera
réalisée ;
 Le délai de réalisation d’examens complémentaires sera fonction des résultats de la
validation de chaque examen.
Le compte-rendu précise, le cas échéant, les modifications de la prescription médicale.

L’accusé de réception de ce manuel de prélèvement fait office auprès des prescripteurs
d’accord pour ces modifications.
Examens Supplémentaires
 L’Examen supplémentaire peut être réalisé à la demande du clinicien ou du biologiste

afin de compléter l’interprétation biologique du résultat ou suite à une défaillance
analytique d’une première technique, sous réserve de disposer du tube adéquat et
après vérification des conditions de conservation pré analytique.
 Les échantillons primaires sont conservés 7 jours au laboratoire.
 Dans le cadre de la greffe, des examens supplémentaires peuvent être réalisés à l’aide
des échantillons conservés en biothèque (ADN, Sérum ...) au sein du laboratoire sous
réserve de matériel suffisant.

Annexe N°3
EXIGENCES EN VIROLOGIE MEDICALE
Tube sec rouge

1 tube sec
Sérologie : HSV1/2, CMV, VZV,
2 tubes secs si plus de 3
EBV, HTLV, HHV-6, HHV-8,
analyses
Parvo B19, Ac Anti-rabiques,
Fièvre jaune.
Tube EDTA Violet
2 tubes EDTA PCR en temps réel : CMV, EBV,

Parvo B19, Polyama JC/BK,
HHV-6, HHV-8.
Kit de prélèvement Naso-pharyngé

Ecouvillon + Milieu de transport
Viral (MTV)
1 tube avec MTV
PCR en temps réel : Grippe,
Rhinovirus, Coronavirus,
Coqueluche …
Tube stérile
1 tube PCR en temps réel : HSV1/2,

Enterovirus, sur liquide
céphalorachidien.

REALISATION D’UN
PRELEVEMENT EXTERNE NASO-PHARYNGE
POUR DIAGNOSTIC MOLECULAIRE DES VIRUS RESPIRATOIRES
Matériel de prélèvement
Pour la réalisation des prélèvements naso-pharyngés, le laboratoire de Virologie Médicale de
l’IPM s’engage à fournir au préleveur le consommable ci-après :
- Ecouvillon en nylon floqué avec tige en plastique (les écouvillons en alginate de calcium
avec tiges en bois peuvent inhiber les analyses moléculaires)
- Milieu de conservation et de transport universel (UTM pour Universal Transport
Medium) pour les virus (dans lequel l’écouvillon sera introduit) ; conservé jusqu’à
utilisation entre +4° et +24°C.
- Sachet plastique (rouge) à fermeture à zip avec pochette Kangourou
- Fiche de renseignements
Le consommable ci-après sont à la charge du préleveur :
- Equipement de protection individuelle (EPI), Blouse, gants, masque et lunettes de
protection ;
- Solution ou gel hydro-alcoolique ;
- Mouchoir jetable ;
- Marqueur indélébile ;
- Sachet en plastique pour déchets infectieux.
Le préleveur s’engage à prendre connaissance du mode opératoire ci-après et à en suivre les
instructions.
Mode Opératoire
- Se laver soigneusement les mains avec de l’eau et du savon ou utiliser une solution
hydro-alcoolique ;
- Porter les EPI lors de la collecte de l’échantillon (blouse, masque, gants, lunettes) ;
- Retirer le flacon avec milieu de transport de son emballage ;
- Notez le nom du patient, la date et l’heure du prélèvement sur le tube ;
- Demandez au patient d’utiliser un mouchoir (en papier à usage unique) pour se moucher
et jeter le mouchoir dans le sachet pour matières infectieuses ;
- Si le patient est assis, maintenir la tête du patient légèrement inclinée en arrière pour que
le passage entre la partie avant du nez et le naso-pharynx soit en ligne droite. Les
nourrissons doivent être mis en décubitus dorsal ;
- Insérer l’écouvillon dans la narine, le pousser délicatement le plus loin possible en
suivant le plancher de la fosse nasale, parallèlement au palais ; jusqu’à ce qu’une résistance
soit rencontrée indiquant le contact avec le naso-pharynx ;

- Réaliser des mouvements rotatifs en grattant les parois du naso-pharynx pendant quelques
secondes. Laisser l’écouvillon en place pendant 5 à 10 secondes pour absorber les
sécrétions avant de le retirer ;
- Retirez lentement l’écouvillon (le coton de l’écouvillon doit être recouvert de mucus) et
placez-le immédiatement dans le tube de collecte (contenant le milieu de transport pour
virus), casser la tige qui dépasse, de manière aseptique, et refermer le tube ;
- Placer le tube dans le sachet plastique (rouge) à fermeture à zip avec pochette
Kangourou ;
- Jeter le masque, les gants et tout matériel contaminé dans le sachet à déchets infectieux ;
- Se laver les mains soigneusement à l’eau et au savon ou utiliser un gel hydro-alcoolique ;
- Remplir la fiche de renseignements, la plier et la placer dans la pochette kangourou ;
- Transmettre le plus rapidement possible au laboratoire (maximum 2 heures si
conservation à température ambiante, 22 heures si conservation à + 4°C).

Fiche Clinique Syndromes Grippaux
Information préalable du patient : En vertu des Lois de « protection des données
personnelles », chaque patient doit être informé de l’utilisation possible, par le laboratoire, à
des fins de recherche, et dans le respect de la confidentialité, de son ou ses échantillon(s)
biologique(s) ainsi que des données qui y sont associées.
Le laboratoire pourrait conduire certains travaux de recherche en vue d’améliorer le
diagnostic et les connaissances générales sur les virus respiratoires. Toute recherche en
matière de génétique humaine est exclue de cette démarche.
Chaque patient peut, s’il le souhaite, refuser l’utilisation de ses prélèvements et/ou données
personnelles à des fins de recherche.
Suite à cette information, le patient (ou pour les mineurs, le(s) titulaire(s) de l’autorité
parentale / pour les majeurs sous tutelle, le tuteur),
☐ s’oppose
☐ ne s’oppose pas à l’utilisation secondaire de son (ses) prélèvement(s) et données associées.
Identification du Médecin
Cachet & Signature du médecin
 Privé………………………….……….….
 Hôpital : ……………………..………….
 Clinique : ……………………………..…
 Centre de Santé : …………..……….…..
Téléphone/GSM : …………………….……
Identification du malade
Nom : ……………………….………… Prénom : …………………………………………..
Sexe : M  FDate de naissance (ou âge) : …………………..………………………….
Ville - Quartier : ……………………….………… Profession : …………..…………………
Données cliniques
Date des premiers signes cliniques (< 10 jours) : /……. /……./……./
Fièvre …… °C ; Toux ; Dyspnée ; Asthénie ; Myalgies ; Expectorations ;
Rhinite ; Bronchite ; Autres symptômes ………………………….………………..
Facteurs de risque : Grossesse  ; Maladie respiratoire chronique  : …………..……..….
Diabète  ; Maladie cardiovasculaire : ……………. ; Obésité  ; Hospitalisation  ;
Insuffisance rénale chronique  ; Autre  : ……………………………….………………..
Données Epidémiologiques
Contexte : Isolé  ; Familial ………………….. ; Travail  ; Voisins  ; Ecole 
Vaccination antigrippale :  Oui date……………… Nom du Vaccin ………………..…..
Voyage à l’étranger < 15 jours avant le début des symptômes :
Non  ; Oui pays : ……….……
Prélèvements
Date du prélèvement :………………. Type : Naso-pharyngé ; autre …………………
Date et heure de réception au labo : ………………………………………………….…..…..
Résultats : RT-PCR M :  Positif  Négatif ; RT-PCR : Grippe A :  Positif  Négatif /

Grippe B :  Positif  Négatif / Sous-typage Grippe A:  H3N2  H1N1pdm09  Non typable /
Autres Virus respiratoires : VRSRhinovirusMERS-CoV/ Autres : ……….......………………

Annexe N° 4
PRECONISATIONS DES LABORATOIRES DE BACTERIOLOGIE,
PARASITOLOGIE, MYCOLOGIE ET MYCOBACTERIOLOGIE
1. Bonnes pratiques de l’ECBU

Mesures d’hygiène et de sécurité
- Se laver les mains avant et après le recueil des urines.
- Utiliser des gants stériles pour la pose des poches pédiatriques.
Patient non sondé avec miction volontaire prélevé au laboratoire
Le patient à miction volontaire réalise lui-même le prélèvement après avoir reçu par les
infirmières les informations indispensables et matériels présentés (flacon d’ECBU sur lequel
est collée l’étiquette code à barre d’identification).
Prélever si possible soit les urines du matin ou ayant séjourné au moins 4 heures dans la
vessie.
Le recueil s’effectuera de la manière suivante :
Chez la femme :
- Désinfecter l’orifice urinaire et la vulve avec des lingettes désinfectantes ou savon
doux ou une solution antiseptique puis essuyer avec une compresse stérile ;
- Ces opérations se font toujours d’avant en arrière ;
- Uriner en position naturelle en maintenant les grandes lèvres écartées ;
- Rejeter les premiers millilitres (10-50 ml) de la miction ;
- Recueillir les 20 à 30 ml suivants dans un flacon stérile ;
- Fermer hermétiquement le flacon, et le remettre à l’infirmière ;
- L’infirmière identifie le prélèvement lorsque le patient lui remet le flacon et renseigne
sur le pot l’heure du recueil.
Chez l’homme :
- Désinfecter le gland et l’orifice urinaire (avec la lingette désinfectante), puis bien
rincer à l’eau ;
- Rejeter les premiers millilitres (10-50 ml) de la miction ;
- Recueillir les 20 à 30 ml suivants dans un flacon stérile en prenant soin de ne pas
toucher le bord supérieur du récipient ;
- Fermer hermétiquement le flacon, et le remettre à l’infirmière ;
- L’infirmière identifie le prélèvement lorsque le patient lui remet le flacon étiqueté
(étiquette d’identification) et renseigne sur le pot l’heure du recueil.
Patient sondé à demeure
Si possible réaliser le prélèvement lors du changement de la sonde.

Recueillir l’urine à partir de la nouvelle sonde après désinfection soigneuse du bout distal
pour avoir un prélèvement plus représentatif des micro-organismes réellement présents dans
la vessie.
Si cette dernière n’est pas possible :
- Ne pas prélever dans le sac collecteur ;
- Ne pas déconnecter la sonde du sac collecteur pour prélever les urines ;
- Clamper le tuyau d’excrétion pendant 15 à 20 min pour que l’urine s’accumule en
amont ;

- Le recueil se fera par ponction avec aiguille stérile montée sur une seringue stérile sur
le site spécifique (bout proximal plutôt du côté urétral) du dispositif de sonde après
une désinfection minutieuse de cette dernière ;
- Transvaser l’urine recueillie dans un flacon stérile ;
- Identifier le flacon d’urine (étiquette d’identification) et l’heure de l’acte.
Nourrisson et jeune enfant
Chez les enfants qui ont une miction volontaire

- La méthode de choix est la collecte d’urine en milieu de jet.
Prélèvement utilisant un collecteur d’urine pédiatrique
- Le collecteur d’urine est posé au niveau du box pédiatrique.
- L’infirmière montre à l’accompagnateur la méthode de nettoyage avec du savon doux
de la région vulvaire ou le méat urinaire de l’enfant suivi d’un rinçage à l’eau en
terminant par une désinfection avec une lingette antiseptique
- Mettre l’enfant sur le dos les jambes écartées ;
- Nettoyer soigneusement la peau avec une lingette imprégnée d’un antiseptique ou
utiliser la solution de Dakin ;
- Détacher et jeter la découpe centrale ;
- Retirer doucement et complètement le revêtement qui protège l’adhésif,
Appliquer en massant pour garantir une bonne adhérence ;
- Attendre que l’enfant urine ;
- Si l’enfant n’a pas uriné 1 heure après la pose du dispositif, il doit impérativement être
éliminé et remplacé par un collecteur neuf. L’accompagnateur contacte l’infirmière
pour avoir les matériels nécessaires et se chargera de remplacer la poche ;
- Pour enlever la poche, soulever un coin et détacher doucement ;
- Dès la miction terminée, l’accompagnateur remet la poche à l’infirmière ;
- L’infirmière dépose la poche dans un pot et colle l’étiquette d’identification du
prélèvement en notant l’heure.
Circonstances particulières
Recueil des urines de premier jet

Le recueil du premier jet d’urine après un éventuel massage prostatique est indiqué
notamment encas de :
- Suspicion d’infection urétrale ou prostatique ;
- Recherche de Chlamydia trachomatis chez l’homme.
Recherche de mycobactéries
Il s’agit d’un examen de seconde intention devant faire l’objet d’une prescription spécifique
ultérieure au vu des premiers résultats de la recherche de bactéries banales.
- Récupérer la totalité des premières urines émises le matin, après restriction hydrique
depuis la veille au soir et ce, 3 jours consécutifs.
Transfert des prélèvements au laboratoire
Transférer le prélèvement sans délai au laboratoire.
Conservation et transport des urines prélevées à l’extérieur
- Le prélèvement est idéalement réalisé au laboratoire mais peut être effectué à
l’extérieur du laboratoire en respectant les conditions de recueil, d’acheminements et
de conservation de l’échantillon d’urines ;
- Les urines recueillies dans un récipient stérile doivent être acheminées rapidement au
laboratoire ;
- Les urines ne doivent jamais être conservées plus de 2 heures à température ambiante ;

- A défaut, les urines peuvent être conservées à +4°C pour une durée maximale de 24h ;
- L’utilisation de milieux de conservation (tampon borate par exemple, non disponible
au laboratoire) permet de conserver les urines à température ambiante pendant au
moins 48h.
2. Prélèvement ano-génital (bactériologie)
Les prélèvements doivent permettre l’examen direct et l’ensemencement (deux écouvillons)

Urétrites Un prélèvement endo urétral à l’écouvillon.
Ulcération Le recueil de la sérosité se fera au niveau de la base ou des bords de l’ulcère
anogénitale avec un vaccinostyle, une öse, une curette ou un écouvillon.
Pustules Le recueil du contenu à la seringue (prélèvement réalisé par le praticien

traitant) ou à l’écouvillon.
Prélèvements du tractus génital chez la femme : Les prélèvements génitaux se font sous
spéculum avec un éclairage adapté.
Vulvo- Ecouvillonnage des sécrétions de l’orifice vaginal et de la voûte vaginale
vaginites postérieure.
Bartholinites Aspiration à la seringue du canal (prélèvement réalisé par le praticien
traitant) ou prélèvement à l’écouvillon.
Cervicite Ecouvillonnage de l’endocol.
Endométrite Prélèvement d’endocol et éventuellement à l’aspiration transcervicale par
cathéter qui sont du domaine du spécialiste (prélèvement réalisé par le
praticien traitant).
Annexite Le liquide d’abcès se prélève à la seringue et les cellules tubo-péritonéales
par brossage au cours de l’acte chirurgical (prélèvement réalisé par le
praticien traitant).
Matériel L’examen bactériologique se fait sur le matériel et sur l’éventuel
intra-utérin pus(prélèvement réalisé par le praticien traitant).
Prélèvements génitaux masculins (deux écouvillons fins)

Epididymites Ecouvillonnage urétral ou prélèvement de sperme, ou recueil du premier jet
et prostatites urinaire dans un flacon stérile.
Le prélèvement de sperme peut être réalisé sans période d’abstinence, mais
après une miction suivie d’une désinfection soignée du gland à l’aide d’un
antiseptique et rinçage
Orchites Prélèvement d’abcès à la seringue (prélèvement réalisé par le praticien
traitant).
Sperme Réaliser le prélèvement après une abstinence de 2 à 8 jours, après une
miction et une désinfection du gland.
Le prélèvement du sperme est réalisé au laboratoire ou à domicile, maintenu
à température ambiante et acheminé au laboratoire en moins d’une heure

3. Prélèvement ORL
Prélèvement de gorge
- Il doit être réalisé avant toute antibiothérapie locale ou générale ;
- On procède à l'écouvillonnage des amygdales (ou de l'amygdale atteinte en cas
d'amygdalite unilatérale) ou, des piliers du voile du palais ;
- On réalise deux écouvillons ;
Quelques points particuliers, fonction du contexte, sont à signaler :
- en présence d'une ulcération ou d'un exsudat, le prélèvement doit s'effectuer à leur
niveau ;
- lors d'une suspicion de diphtérie, le prélèvement doit porter sur la périphérie des
fausses membranes ;
- pour la recherche de N. gonorrhoeae, si la mise en culture ne peut être immédiate,
l'utilisation d'un milieu de transport de type Stuart ou Amies est indispensable (non
fourni par le laboratoire).
Prélèvement auriculaire
Pus de Réaliser le prélèvement à l'aide d'un cathlon monté sur seringue
paracentèse (prélèvement réalisé par le praticien traitant) puis verser le pus dans un pot
stérile ou à l’aide de deux écouvillons fins (alginate ou dacron) montés sur
tige métallique.
Otites Le prélèvement est en général effectué à l'aide de 2 écouvillons fins.
chroniques
Otites On élimine les débris et croûtes présents dans le conduit auditif à l'aide
externes d'un premier écouvillon en coton humide, puis deux écouvillonnages
successifs sont réalisés.
Prélèvements oculaires : Ils concernent essentiellement les prélèvements conjonctivaux :

Conjonctivite le prélèvement est effectué :
- avant toute toilette faciale ;
- au niveau de l’angle interne de l’œil ;
- avec deux écouvillons.
Blépharite on prélèvera alors les croûtes palpébrales et un ou deux cils à la pince à
épiler stérile (prélèvement réalisé par le praticien traitant).
Orgelet L’orgelet est ouvert avec un vaccinostyle stérile pour prélever le pus (à la
pipette ou à l’écouvillon) (prélèvement réalisé par le praticien traitant).
Dacryocystite recueil du pus au niveau des points lacrymaux palpébraux après pression
sur les sacs lacrymaux (prélèvement réalisé par le praticien traitant)
Ulcère de le prélèvement est effectué avec un coton monté après anesthésie locale
Cornée (prélèvement réalisé par le praticien traitant).
4. Prélèvement de sécrétions broncho-pulmonaires
Expectorations
Il doit se faire le matin, au réveil, après rinçage bucco-dentaire à l’eau distillée stérile et lors
d’un effort de toux. L’examen bactériologique doit être effectué sans délai.

Crachats recherche de BK
Les crachats seront prélevés le matin (de préférence à jeûne), chez un sujet qui se sera
préalablement rincé la bouche à l'eau, à la suite d'un effort de toux, qui ramène les sécrétions
bronchiques accumulées pendant la nuit.
Un volume de 5 ml représente une quantité convenable, le minimum exigible est de 2 ml
Le prélèvement est rapidement acheminé vers le laboratoire, sinon il sera conservé à + 4°C au
réfrigérateur.
Brossage bronchique protégé (prélèvement réalisé par le praticien traitant)

- Glisser la brosse télescopique au travers du fibroscope et dirigée sous contrôle de la
vue dans une petite bronche de 4e ordre drainant le territoire pulmonaire
.radiologiquement suspect ;
- Réaliser le prélèvement bactériologique. Replacer la brosse dans la gaine et sortir le
guide du fibroscope ;
- Sortir la brosse de la gaine et la couper avec des ciseaux stériles pour qu’elle tombe
dans 1 ml de liquide (eau physiologique tamponnée stérile ou liquide de Ringer) que
l’on agite doucement 2 minutes sur place au lit du malade.
- Apporter le prélèvement sans délai au laboratoire.
Lavage broncho-alvéolaire (prélèvement réalisé par le praticien traitant)

- Instiller après blocage du bronchofibroscope dans une bronche segmentaire ou sous-
segmentaire des échantillons de 50 ml de sérum physiologique (à 37°C) 4 à 6 fois et
on ramène entre 20 et 60 % de la quantité injectée.
- Envoyer rapidement le pot d’aspiration du dispositif LBA rapidement au laboratoire
Tubage gastrique : recherche de BK (prélèvement réalisé par le praticien traitant)

Il consiste à prélever directement dans l'estomac, les sécrétions bronchiques qui ont été
dégluties inconsciemment pendant le sommeil.
Cette épreuve sera réalisée chez un sujet :
- maintenu à jeun ;
- alité depuis la veille au soir ;
- le plus tôt possible après le réveil.
Utiliser une sonde à usage unique, présentant, à son extrémité distale, des perforations
nécessaires au passage du liquide et, à son extrémité proximale, un embout auquel s'adapte la
seringue nécessaire à l'aspiration.
Sur ces sondes, des repères indiquent, par rapport aux arcades dentaires, les distances
correspondant au cardia et au pylore. Quand la sonde est dans l'estomac, monter une seringue
et aspirer le liquide gastrique. Mettre le prélèvement dans un pot stérile.
5. Prélèvements superficiels
Plaie superficielle, brûlure, abcès ouvert, ulcération, escarre, lésions cutanées

nécrotiques, Inflammation cutanée, érysipèle, hypodermite.
- Nettoyer la plaie, éliminer les exsudats, débrider les tissus nécrosés si nécessaire.
- Rincer à l'eau physiologique stérile ;
- Faire une Biopsie (non fait au laboratoire) de la lésion ou cureter le bord actif de la
lésion ;
- Eventuellement aspirer à l'aiguille fine le liquide inflammatoire produit par la lésion
(très peu de matériel est suffisant). Si nécessaire, aspirer ensuite 1 ml d'eau
physiologique stérile pour éviter que le prélèvement ne se dessèche dans la seringue ;

- Ecouvillonnage peu fiable.
Prélèvements réalisés au cours d'opération sur matériel implanté ou sur lésion osseuse
(prélèvement réalisé par le praticien traitant)
- Effectuer au minimum 3 prélèvements (écouvillonnages ou biopsies)en des sites
anatomiques différents (régions osseuses diverses, matériel implanté, ciment…) et
bien les identifier sur la demande d'examen ;
- Pré découper les prélèvements de manière stérile.
Fistule, aspiration à l’aiguille fine d’une lésion profonde (prélèvement réalisé par le
praticien traitant)
- Désinfecter la partie cutanée ou la partie superficielle. Laisser sécher ;
- Aspirer à l'aiguille la partie la plus profonde de la lésion et aspirer ensuite si nécessaire
1 ml d'eau physiologique stérile pour éviter que le prélèvement ne se dessèche dans la
seringue ;
- Réaliser également un prélèvement biopsique de la paroi du trajet fistuleux.
Morsures
- Aspirer le pus de la blessure dans une seringue (non fait au laboratoire); aspirer ensuite 1
ml d'eau physiologique stérile ;
- A défaut : 2 écouvillonnages profonds.
6. Prélèvements profonds
Biopsie (prélèvement réalisé par le praticien traitant)

- Placer la biopsie au fond d'un tube stérile ;
- Ajouter 3 ou 4 gouttes d'eau physiologique stérile (jamais dans un fixateur) pour les
petits échantillons.
Les prélèvements effectués aux blocs opératoires doivent être rapidement acheminés au
laboratoire et accompagnés de renseignements cliniques ainsi que la localisation précise de
l’endroit où ils ont été effectués.
Les prélèvements de liquides péritonéaux, de pus d’abcès et de sérosités sont recueillis à
l’aide d’une seringue qui sera rebouchée hermétiquement et stérilement ou déposées dans un
pot stérile.
Les recherches de Chlamydia et de Mycoplasma sont effectuées à partir des biopsies des
trompes ou d’adhérences du péritoine, le produit de brossage tubaire, le liquide de Douglas.
Les biopsies chirurgicales sont déposées dans un pot stérile.
Ponction (prélèvement réalisé par le praticien traitant)

Ils sont indiqués pour les suppurations d'une séreuse, d'un organe creux, d'un tissu ou d'une
cavité abcédée. Ces prélèvements peuvent être complétés par des hémocultures.
Après désinfection, les prélèvements de liquides, de pus d’abcès et de sérosités sont recueillis
à l’aide d’une seringue qui sera rebouchée hermétiquement et stérilement oule prélèvement
peut être déposé dans un pot stérile.
Il faut obtenir une quantité de liquide suffisamment importante pour réaliser les analyses
bactériologiques, parasitologiques et mycologiques.

LCR (prélèvement réalisé par le praticien traitant)
Dans le diagnostic d’une méningite aiguë l’examen cytochimique du LCR permet de
reconnaître ou de suspecter une étiologie bactérienne justifiant un traitement antibiotique
immédiat.
Le prélèvement s’effectue chez un patient en milieu hospitalier par ponction lombaire entre 2
vertèbres (L4 et L5), le patient est assis penché en avant ou couché sur le côté. La ponction est
faite par une aiguille pour ponction lombaire après asepsie rigoureuse.
Recueillir 3 ml de LCR dans 3 tubes stériles en verre pour les examens biochimique,
microbiologique et cytologique.
L’acheminement du LCR vers le laboratoire doit se faire sans délai et à l’abri du froid.
7. Coproculture et parasitologie des selles (KOP)

- Cet examen est à effectuer, si possible, lors des épisodes diarrhéiques. Il est
souhaitable de faire cet examen à distance de tout traitement ;
- Recueillir les selles dans le flacon stérile ;
- Identifier le flacon avec votre nom et prénom si cela n’a pas été fait par le laboratoire.
Noter la date et l’heure du recueil ;
- Acheminement dans les plus brefs délais si possible ;
- Le flacon peut être conservé au maximum 24h au réfrigérateur et 2h à
température ambiante.
8. Examen parasitologique du sang (recherche de paludisme dans le sang)

Le médecin doit fournir au laboratoire les renseignements cliniques relatifs au patient. Le
moment le plus favorable pour effectuer le prélèvement varie selon l'espèce parasitaire
recherchée. De manière générale, il devra être pratiqué avant la mise en œuvre d'un traitement
spécifique. Pour la recherche du Plasmodium/ on prélèvera au moment des pics fébriles.
Concernant les microfilaires, il faut tenir compte de leur périodicité diurne (Loa loa) ou
nocturne (Wuchereria bancrofti).
- A l’aide d’un vaccinostyle, prélever une grosse goutte de sang capillaire en la
déposant directement à l’extrémité d’une lame porte objet ;
- A l’aide du coin d’une deuxième lame, étaler la goutte sur 1 cm de diamètre en
tournant pendant quelques secondes ;
- Laisser sécher avec soin, ne jamais fixer (cela altère la coloration) ;
- Réaliser aussi une ponction veineuse sur tube EDTA.
9. Hémocultures
- Prélever de préférence lors d’un pic fébrile ;
- Prélever avant les autres prélèvements sanguins ;
- Avant le prélèvement : vérifier la date de péremption des 2 flacons ;
- Repérer et indiquer avec un marqueur, le niveau du bouillon dans chacun des deux
flacons ;
- Retirer la capsule en plastique des flacons ;
- Désinfecter les bouchons avec une compresse imbibée d’alcool à 70° ou d’une
solution iodée ;
- Laisser la compresse jusqu’au prélèvement ;
- Désinfection large de la zone de prélèvement du centre vers la périphérie avec une
solution iodée ou alcoolique à 70°C ;
- Prélever de préférence avec une aiguille à ailettes montée sur un adaptateur (corps de
pompe) ou avec une seringue de 20 ml ;
- Prélèvement avec aiguille à ailettes : prélever dans l’ordre le flacon aérobie puis le
flacon anaérobie. Engager à fond le flacon dans le corps de pompe pour perforer le

bouchon. Prélever environ 8 à 10 ml de sang par flacon (si besoin, s’aider des
graduations sur le côté du flacon et du niveau repéré au marqueur) ;
- Prélèvement avec seringue : distribuer 10 ml dans chaque flacon : prélever dans
l’ordre le flacon anaérobie puis le flacon aérobie. En cas de difficulté (ex. prélèvement
pédiatrique) : privilégier le flacon aérobie (4 ml minimum) ;
- Agiter immédiatement après le prélèvement les flacons (par 2 - 3 retournements
successifs) et les identifier : nom, prénom, date, heure de prélèvement et si possible
température du patient ;
- Transmettre au laboratoire, dans les plus brefs délais, à température ambiante.
10. Prélèvement cutané : Mycologie

Avant le prélèvement
- Faire un interrogatoire détaillé : notion de voyage récent en zone tropicale, métier
exercé, animaux de compagnie, loisirs (piscine, cheval) ;
- S’assurer que le malade n’est pas sous traitement antifongique local ou général. Le
prélèvement doit être réalisé avant la mise en route de tout traitement antifongique ou
bien après une fenêtre thérapeutique de 4 semaines.
Lésions de la peau glabre

Lésions squameuses :
- Racler les squames à la périphérie des lésions à l’aide d’une lame de bistouri stérile,
d’un grattoir de Vidal ou, à défaut, d’un vaccinostyle stérile. Puis frotter avec une
compresse stérile ;
- Recueillir les échantillons dans une boîte de Petri ou un pot stérile ;
- Réaliser un prélèvement à la cellophane adhésive («scotch-test ») pour le diagnostic
rapide du Pityriasis versicolor. Cette technique n’est réalisable ni sur les régions
pileuses ni sur les lésions inflammatoires ou suintantes. Dans ces cas, des squames
sont prélevées à l’aide d’une curette mousse.
Plaies cutanées :
- Ecouvillonner (2 écouvillons stériles) les lésions concernées après les avoir nettoyées
à l’alcool à 70° pour éviter le développement de la flore bactérienne contaminante en
culture.
Lésions des plis

Lésions non inflammatoires :
Nettoyer à l’alcool à 70° pour éviter le développement de la flore bactérienne contaminante en
culture.
Selon l’aspect des lésions :
- Lésion sèche et squameuse :
o gratter à la curette les squames en bordure de la lésion ; frotter avec compresse stérile
(pour recherche de dermatophytes).
- Lésion macérée et suintante :
o frotter les sérosités successivement à l’aide de 2 ou 3 écouvillons.
- Lésion vésiculeuse :
o percer les vésicules puis prélever la sérosité à l’écouvillon;
- Lésions unguéales
o Couper toute la partie de l’ongle atteint avec des ciseaux, jusqu’à la limite des tissus
sains. Il est aussi possible de prélever des poussières d’ongles en raclant la tablette interne
de l’ongle, ou les îlots blanchâtres de la surface de l’ongle, au vaccinostyle ou à la lame
de bistouri stérile ;

o Prélever le pus de périonyxis éventuel (écouvillon).
- Lésions du cuir chevelu et des zones pileuses
o Examiner les cheveux sous une lampe de Wood ;
o Arracher avec une pince à épiler les cheveux fluorescents (cas des teignes
microsporique et favique) ;
o Sinon, prélever les cheveux cassés à la loupe à proximité du bulbe. Prélever les
squames et les croûtes éventuelles en raclant à la curette ;
o En cas de lésions inflammatoires suppurées, prélever les suppurations avec un
écouvillon. La technique dite du «carré de moquette» doit être utilisée ;
Prélèvement des ongles (périonyxis)

- Prélever les squames au niveau de la jonction partie saine – partie malade ;
- Prélever le pus en cas de périonyxis à l’aide de l’öse stérile ou un écouvillon ;
- Le prélèvement des grains se fait à l’aide d’une lame de Bistouri au niveau des
nodules (cas des mycétomes).
Autres
Lésions nodulaires, papuleuses, verruqueuses…..
- Le prélèvement de ce type de lésion s’effectue par écouvillonnage (ou ponction avec
une aiguille stérile : prélèvement réalisé par le praticien traitant) ;
- Une biopsie peut également être réalisée après désinfection de la surface par un
antiseptique (prélèvement réalisé par le praticien traitant).

Annexe N° 5
PRECONISATIONS DES PRELEVEMENTS
ANATOMOPATHOLOGIQUES
1. Examen Histotopathologique : consignes et conditions générales du prélèvement
i- Demande d’examen
Cette demande doit contenir :
- les informations permettant une identification univoque du patient et du médecin
prescripteur ;
- les informations cliniques utiles à l'analyse et à l'interprétation des résultats.
Toute demande, pour être acceptée par le service, doit être soigneusement identifiée avec au
minimum les informations suivantes :
 Identifiant du patient : Nom & Prénom, Sexe, Date de naissance, Numéro du
dossier ,Anamnèse, Mutuelle.
 Identifiant du médecin prescripteur : Le service d’où vient le prélèvement, le nom
& prénom du médecin, le numéro téléphone, la date de prescription, le destinataire
des résultats avec l'adresse exacte et actualisée du lieu où il pratique.
 Pour l'échantillon : Les informations indiquées sur le(s) prélèvement(s) et la
demande doivent être en concordance parfaite pour que la demande puisse être définie
comme conforme.
La date et l'heure du prélèvement, ainsi que le site anatomique d'origine et l'objectif du
prélèvement doivent être précisés.
ii- Données cliniques
Le médecin prescripteur ou préleveur doit préciser le but de l'analyse, Il faut :
 indiquer les antécédents médicaux quand ils sont connus ;
 signaler si le même test a déjà été réalisé (dans un autre laboratoire, suivi médicale
effectuée, etc.) et en donner le résultat ;
 signaler les traitements intercurrents s'ils peuvent interférer avec les résultats de
l'analyse demandée ;
 les diagnostics connus, soupçonnés ou à écarter doivent être mentionnés ;
 le but de l’examen (spécialement dans le cas des examens extemporanés).
iii-Prélèvement
Tout incident survenant au cours du prélèvement et qui pourrait avoir un impact sur la qualité
du tissu prélevé, doit être signalé sur la demande.
Pour chaque pièce opératoire orientée par des fils ou autre, il faut préciser clairement dans la
demande l’identification de ces fils ou autre.
Tous les échantillons destinés en Anatomopathologie (excepté les extemporanées) sont,
fixés immédiatement par une solution à base de formol tamponné à 10%, aucun autre type
de fixateur n’est accepté : c’est une exigence technique pour assurer la qualité des analyses
spéciales éventuelles (immunohistologie, biologie moléculaire).
 La fixation doit se faire rapidement, dans l’heure qui suit le prélèvement ;
 La quantité de formol utilisée doit être suffisante pour recouvrir l'échantillon dans son
 Entièreté (10 fois le volume de la biopsie et au moins 2 fois le volume de la pièce) ;
 L’heure de la fixation de l'échantillon doit être mentionnée sur la demande ;
 La durée de fixation recommandée varie entre 6 et 48 heures pour les biopsies et 24
à 72h pour les pièces opératoires. Ce délai est une donnée à remplir sur le
formulaire ;
 La fixation se réalise à la température ambiante ; ne pas chauffer, ne pas congeler ;

 Le préleveur veillera scrupuleusement à l’étanchéité des flacons, les pots mal fermés
constituent une grande part de non-conformité et nuisent à la qualité du prélèvement :
- mauvaise fixation due à la perte du niveau suffisant de formol ;
- perte possible de l’échantillon (pot vide !) ;
- danger chimique pour les utilisateurs.
Le médecin demandeur devra vérifier la fixation adéquate du prélèvement et émettra une

réserve dans le cas contraire.
Tous les tissus biologiques doivent être considérés comme potentiellement infectieux et donc
les mesures préventives de base doivent être appliquées aux règles ou mesures de précaution
universelles.
Pour tout prélèvement urgent, autre que les prélèvements extemporanés, une procédure
d’acheminement d’urgence est possible, pour ce appeler le laboratoire d'anatomopathologie.
iv- Examen extemporané
Il s’agit d’examen histologique réalisé en urgence. Le but de cet examen est d’adapter la
procédure chirurgicale aux caractéristiques de la pathologie mise en évidence durant
l’intervention.
Les techniques histologiques de cet examen se basent sur la technique de coupes à

congélation. Les coupes sont réalisées au cryostat et colorées selon la technique HE-
extemporanée.
L’avantage de cette technique est sa rapidité (5 minutes/lame).
Le diagnostic posé extemporanément doit être validé par l’analyse du prélèvement congelé,
après fixation et coloration classique.
Renseignements pratiques:
 La technique se pratique uniquement à partir de matériel frais, ne pas mettre de
sérum physiologique ni de fixateur ;
 Pour l'examen extemporané, il se fait sur RDV, le prélèvement à l'état frais doit arriver
dans le plus bref délai au laboratoire d'Anatomopathologie (délai d’acheminement
inférieur à 30 minutes) ;
 Le laboratoire doit être joignable via le téléphone ;
 Le résultat est transmis dans les 45 minutes maximum ;
 Le protocole extemporané est transmis par téléphone. Il est intégré au protocole final
associé à la validation définitive.
Fiche de non conformité

Une gestion de la conformité des prélèvements doit assurer une prise en charge optimale pour
assurer la qualité des examens anatomopathologiques demandés. Toute personne, à tout
niveau, doit relever le non conformité, qu’elle constate.
Récapitulatif et Liste des non-conformités des examens anatomoapthologiques
Nature de la non-conformité Niveau

Utilisation d’un mauvais fixateur (autre que le formol tamponné 10%)
Prélèvement non identifié (absence nom/prénom sur le flacon transmis) Bloquant
Inversion d’identité (permutation des prélèvements)

Absence de prélèvement dans le flacon transmis (flacon vide :
prélèvement perdu, prélèvement non réalisé)
Lames de cytologie reçues brisées

Délai avant fixation supérieur à 1 heure ou non mentionné
Temps de fixation non renseigné
Prélèvement coloré à l’éosine
Absence de renseignements sur la nature et le siège du prélèvement
Discordance entre le nom du patient sur le prélèvement / sur la
demande Non Bloquant
Discordance nombre de prélèvements reçu/nombre sur la demande
Flacon inadapté au prélèvement
Erreur sur l’identité (erreur de prénom)
Tissu frais pour extemporané reçu tardivement (plus de 30 min)
Etalements cytologiques non identifiés
Etendue des non conformités bloquantes

Dans la mesure du possible et au bénéfice du patient, aucune analyse n’est jamais «bloquée
définitivement» mais seulement « temporairement » jusqu'à résolution du problème rencontré
et elle est réalisée dans les meilleurs délais, avec retard éventuel du résultat.
En effet, Dans le cas d'un échantillon primaire irremplaçable ou critique, l'analyse pourra
être réalisée dans les meilleurs délais, mais le résultat ne sera délivré qu'après obtention d'une
confirmation écrite ou téléphonique prouvant que la personne responsable du prélèvement en
assume la pleine responsabilité et qu'elle fournisse les informations nécessaires. Dans ce cas-
là, il convient que la signature de la personne attestant l'identification soit enregistrée avec la
demande ou qu'elle puisse y être rattachée. Si, pour une raison quelconque, cette exigence
n'est pas respectée, il convient que le nom de la personne responsable soit reporté dans le
compte rendu du résultat.
2. Examen Cytopathologique : conditions générales du prélèvement

Cytologie Gynécologique « Frottis Cervico-Vaginal (FCV) / Frottis Cervico-Utérin
(FCU) »
 Intérêts
Il s'agit d'un prélèvement au niveau du col utérin et de la partie profonde du vagin (FCV),
afin de dépister précocement toute anomalie cellulaire pouvant évoquer la présence d'une
lésion précancéreuse ou d'un cancer du col utérin.
Actuellement le frottis n'est effectué qu'au niveau du col utérin (au niveau de l'exocol et de
l'endocol) d'où la terminologie récente: Frottis Cervico-Utérin (FCU).
 Rythme et conditions de réalisation
- Ils sont effectués une fois tous les 3 ans (quand le frottis est considéré tout à fait
normal) et cela jusqu'à l'âge de 65 ans ;
- Le frottis doit être réalisé chez toutes les femmes en période d'activité génitale :
o Il est réalisé en dehors des règles et de tout saignement ;

o Il doit être réalisé 48 h après un rapport sexuel ;
o Il ne faut pas qu'il soit réalisé après une toilette vaginale, ni après la
mise en place d'ovules ou de crème vaginale (48 heures au moins), ni
en cas d'infection cervico-vaginale (un mois après le traitement de
l'infection).
- Le frottis cervico-utérin (FCU) est fait après installation en position gynécologique et

après la mise en place d'un speculum sans lubrifiant.
- Le frottis cervico-utérin (FCU) peut être effectué :

o Soit par la technique classique, c'est-à-dire sur lames (une lame pour le frottis de
l'exocol et la jonction endo-exocervicale, puis une deuxième lame pour le frottis de
l'endocol).
 Le prélèvement se fait par raclage à l'aide:
 d'une petite spatule d'ayre (à extrémité simple et extrémité bifide) afin
de réaliser les prélèvements au niveau de la muqueuse tapissant la
portion vaginale du col utérin; ce prélèvement doit être
obligatoirement réalisé au niveau de la jonction entre la muqueuse de
l'exocol et la muqueuse de l'endocol ;
 d'une petite brosse pour faire le prélèvement de la muqueuse tapissant
l'endocol (le canal cervical).
o Soit par la technique monocouche, dans un milieu liquide: le frottis est effectué à
l'aide d'une brosse spéciale permettant d'effectuer simultanément un prélèvement au
niveau de l'exocol, de la ligne de jonction endo-exocervicale et de l'endocol; cette
brosse est introduite dans le flacon de recueil qui contient le liquide de conservation.
3. Cytologie non gynécologique

Recommandations générales du prélèvement
o Les urines sont prélevées et conservées dans des pots en plastique de 100 à 200 ml
contenant du fixateur (formol 4%, pH neutre) :
 Le volume de fixateur doit représenter au minimum 25% du volume total du
prélèvement ;
 Les urines fixées doivent être acheminées au laboratoire d'anatomopathologie dans les
24 heures maximum.
o Les liquides céphalo-rachidiens (LCR), les liquides d’ascite, les liquides

péritonéaux, les liquides pleuraux, les liquides péricardiques, les liquides
articulaires etc... sont acheminés frais au laboratoire :
 Le transfert doit être rapide (< 30 minutes) ;
 Si le prélèvement ne peut être acheminé endéans les 30 minutes, il doit être fixé au
formol (4%, pH neutre).
o Les liquides de lavage broncho-alvéolaire (LBA), les aspirations bronchiques, les

brossages d’origine bronchique etc... sont acheminés au laboratoire
d'anatomopathlogie fixés au formol (4%, pH neutre).

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INSTITUT PASTEUR DU MAROC

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01

Rédigé par : Responsable du laboratoire Original

Service Qualité, Hygiène Original

Responsable du laboratoire Original

Responsable du laboratoire Original

Service de Virologie Original

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01

II. Informations et contacts utiles…………………...….………..……………. 3

III. Matériel et exigences………………………………………………………… 5

IV. Etapes du prélèvement sanguin……………………………….…..……….. 11

V. Préconisations des prélèvements de spécimens……………..………..…. 16

VI Transport des échantillons au laboratoire………………...………...…….. 24

VII. Critères d’acceptation et de refus des prélèvements au cours de la

1. Elimination des déchets potentiellement contaminés……..………………… 33

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 1 sur 56

Site de Casablanca (biologie@pasteur.ma) Site de Tanger

Responsable du CBM Responsable

Médecin biologiste Pharmacienne biologiste

Responsable du Centre d’Accueil et Cellule Qualité, Hygiène et

Secrétariat du CBM Secrétariat du site

Cellule sous-traitance à l’IPM

Service Qualité, Hygiène et

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 3 sur 56

Cytogénétique et conseil Dr. Sanaa Nassereddine

Dr. Abdellatif Bouayad

Dr. Jalal Nourlil

Dr. Mly Driss El Messoudi

Dr. Sayeh Ezzikouri

Dr. Hicham Mohammadi

Hormonologie-Marqueurs Dr. Abdelhakim Ainahi

Dr. Abdelouaheb Benani

Dr. Siham Bennani

Dr. Mohamed El Azhari

Dr. Widad Oudaina

 Les horaires de travail

Jours Site de Casablanca Site de Tanger

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 4 sur 56

La version papier de ce manuel est consultable à l’accueil et à la demande du demandeur de

 Le catalogue des analyses

III. MATERIEL ET EXIGENCES

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 5 sur 56

 Ce tube est le seul milieu utilisable pour les bilans d’hémostase

 Ce tube est INADAPTE à la plupart des autre dosages.

Tube sec sans additif ou avec activateur de coagulation. Il permet

 Ce tube permet la réalisation des quelques analyses de Chimie et

 Ce tube est interdit pour :

Tube héparine de lithium : Anticoagulant puissant (anti-thrombine).

 Il est essentiel pour l’ionogramme et la réserve alcaline

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 6 sur 56

 Il permet la meilleure conservation des éléments figurés du sang

Remarque : Sa forme micronisée n’entraîne pas de phénomène de dilution

CITRATE DE SODIUM 4NC* : anticoagulant réversible (chélateur de

Capuchon réalisation de la VS directement sur le tube selon la méthode

* Si ce tube n’est pas fourni, prélever sur tube EDTA.

Institut Pasteur du Maroc - CBM - Manuel de prélèvement - V 01 Page 7 sur 56